猴脉络膜视网膜内皮细胞

遗传性视网膜营养不良（Inherited retinal dystrophies, IRDs）是可导致进行性视网膜退化的遗传缺陷性罕见疾病，常见的IRD相关基因缺陷超过200种。近几年，眼科领域的基因治疗临床试验项目数量激增，包括基因替换、基因编辑和基因沉默多个技术方面。2017年美国FDA首次批准了视网膜Voretigene Neparvovec基因疗法（Luxturna, Spark Therapeutics），用于治疗RPE65.1双等位基因突变引起的罕见眼科疾病，称为Leber先天性黑蒙。这个里程碑意义的决定为眼科疾病基因疗法打开了大门。目前大部分临床研究疗法目标是通过导入正常功能基因，从而恢复缺陷基因编码蛋白质的正常表达。在非临床研究和临床研究中，检测转基因目的蛋白表达是基因疗法开发的一个关键方面。 目前，有多种技术可实现目的蛋白表达定量检测包括配体结合法(Ligand binding assay，LBA)如酶联免疫吸附方法（ELISA）、液相色谱-质谱（LC-MS）、流式细胞术、蛋白质免疫印迹（Western Blot）和组织染色技术。每种技术都有各自优势和局限，如目的蛋白为分泌性表达，可采用ELISA方法检测细胞培养上清液或体液系统中目标蛋白含量；如目的蛋白不能分泌表达，可采用Western Blot或质谱方法；如需要检测细胞膜蛋白，可采用流式细胞术；如要确定蛋白质在细胞和组织内分布，可采用免疫荧光检测。 在体内和体外模型中研究基因治疗产物与治疗靶点的相关作用机制和效应，选择生物相关性模型来检测目的基因表达和生物学活性非常重要。对于眼部疾病可探索选择临床前研究模型如细胞系模型、人诱导多能干细胞（hiPSC）衍生的视网膜类器官疾病模型、啮齿动物和非人灵长类动物等，根据生物学相关性和测定时间可在不同阶段综合选择特异性评估模型。眼部疾病细胞模型案例1：iPSC衍生视网膜色素上皮细胞（RPE）中低丰度大分子量蛋白质表达检测 从三名Stargardt病人皮肤活检样本产生多个iPS细胞系，这些患者都携带一个致病性ABCA4基因变异。采用RNA-Sep和Digital WB分析正常对照和患者细胞衍生的RPE。这个细胞模型与活检组织相比，可用于评估难以检测的非表达变异体，患者来源的细胞可能更密切地反映患者体内发生的剪接和编辑事件，可用于病人药物敏感性研究，指导临床试验。采用全自动Digital WB技术分析pABCA4蛋白质表达，制备了20 μg 总蛋白 dRPE 细胞匀浆，阳性和阴性对照分别是20 μg野生型和 ABCA4 敲除小鼠视网膜匀浆。参考下图，小鼠视网膜（Mouse ret）在野生型(WT)中pABCA4表达丰度很高，敲除（KO）小鼠没有表达。人类对照（NHDF）具有比WT小鼠视网膜更高表观分子量，同时有更高的表达丰度。与对照相比，所有患者细胞系（H、J和S）中均可检测到pABCA4 ，但这些低丰度pABCA4蛋白可能被降解，作为截短蛋白或降解产品形式存在（除S2外）。与mRNA表达谱结果一致，S2细胞系具有相对正常的pABCA4表达水平和修饰后成熟膜蛋白的分子量。本研究利用了Digital WB对低丰度和大分子量蛋白质分析检测能力。案例2：眼角膜内皮细胞信号通路中多重蛋白质表达检测 本研究采用人源和鼠源细胞，分别是敲低了SLC4A11表达水平的原代人角膜内皮细胞（primary human corneal endothelial cells, pHCEnC），即SLC4A11 (SLC4A11 KD pHCEnC)；还有Slc4a11+/+和Slc4a11-/-鼠角膜内皮细胞系（murine corneal endothelial cells, MCEnC），即 Slc4a11-/- MCEnC和Slc4a11+/+ MCEnC。比较转录组学分析揭示了SLC4A11 KD pHCEnC和Slc4a11-/- MCEnC中细胞代谢和离子转运功能抑制以及线粒体功能障碍，导致ATP生产减少。AMPK-p53/ULK1通路激活也表明线粒体功能障碍和线粒体自噬。稳态 ATP 水平降低和随后 AMPK-p53 通路激活提供了代谢功能缺陷和转录组改变之间的联系，以及 ATP 不足以维持 Na+/K+-ATPase角膜内皮泵的证据，这是 SLC4A11 相关角膜内皮营养不良特征性水肿的原因。所以SLC4A11缺陷角膜内皮中分子作用导致内皮功能障碍，是先天性遗传性角膜内皮营养不良 (congenital hereditary endothelial dystrophy, CHED) 和Fuchs 角膜内皮营养不良的主要特征。 下图结果表明SLC4A11缺陷角膜内皮中AMPK-p53 通路激活，采用Digital WB检测信号通路中各蛋白质表达水平。图B说明与 scRNA pHCEnC 对照相比，SLC4A11 KD pHCEnC 中 p53 Ser15 磷酸化水平增加，表明p53转录翻译后激活。图C在Slc4a11-/- MCEnC晚期传代中观察到相似结果（p53 Ser18磷酸化增加，对应于人p53 Ser15）。图C和D结果表明在Slc4a11-/- MCEnC 早期和晚期传代中总 p53 水平增加，代表p53转录激活。进一步研究磷酸化和p53转录激活的激酶，根据报道AMPK介导 Ser15（小鼠中Ser18）磷酸化和p53转录激活，图B和C实验结果也说明AMPKα的Thr172磷酸化增加，AMPKβ1的Ser182磷酸化没有变化。图E和F，与 scRNA pHCEnC 相比，AMPK 另一种下游底物 Unc-51 样自噬激活激酶 1 (ULK1) 在SLC4A11 KD pHCEnC中磷酸化水平(Ser555)增加。综合这些结果表明，ATP水平下降导致AMPK及其下游底物p53 和 ULK1 激活，分别导致转录组改变和线粒体自噬增加。同样，鉴于 SLC4A11 在预防氧化损伤中的作用，SLC4A11 缺失导致线粒体 ROS 产生增加，随后线粒体功能障碍和线粒体自噬增加。此发病机制支持使用Slc4a11-/-小鼠作为SLC4A11相关角膜内皮营养不良的模型，评估各种治疗方法的转化潜力。 基于Digital WB技术的全自动蛋白质表达分析系统Jess可实现化学发光和荧光两种检测模式，是多重蛋白质表达分析有力工具。2022年，ProteinSimple发布了Stellar全自动双色荧光蛋白质表达检测方案，特别适合同步分析细胞信号通路磷酸化蛋白和总蛋白表达，将细胞信号通路研究工具带到一个新高度。iPSC衍生视网膜类器官模型案例1：Digital WB检测iPSC衍生的视网膜类器官中视紫红质表达含量 美国NIH研究人员利用成纤维细胞重编程获得诱导多能干细胞（iPSC），再分化产生视网膜类器官。通过转录组学分析，确定了视网膜类器官发育过程中调节信号，在体外生成了更成熟视网膜，可促进疾病建模和基因治疗研究。本研究采用Digital WB技术揭示了不同培养条件下类器官培养物种视紫红质（Rhodopsin）表达差异。下图结果表明，DHA处理的类器官在32天时视紫红质表达增加了30%，而亚油酸（LA）处理类器官视紫红质表达降低，这表明DHA处理的类器官中视紫红质表达增加不是脂肪酸添加带来的。案例2：AAV基因治疗的RetGC-GUCY2D视网膜类器官疾病模型 Leber先天性黑蒙可由多种不同突变基因导致包括RPE65、CEP29、GUCY2D和CRX等。其中Leber先天性黑蒙1型由GUCY2D基因突变导致，可导致严重视力损害或失明。GUCY2D基因正常拷贝编码了一种鸟苷酸环化酶（RetGC），其是感光器生理学中关键酶之一，视网膜中光敏杆状细胞和视锥细胞使用该酶将光转换为电化学信号。 英国MeiraGTx公司研究人员利用CRISPR/CAS9 技术生成 RetGC 敲除 (RetGC KO) 视网膜类器官，iPSC衍生视网膜类器官分化后，将RetGC KO 视网膜类器官与同一细胞系的野生型类器官进行对比研究。总共设计了四种 AAV 载体来测试RetGC 蛋白在光感受器中的恢复情况，所有载体采用AAV7递送。CMV 和视紫红质激酶 (RK) 两个启动子，并评估了WoodChuck肝炎病毒翻译后调控元件 (WPRE) 影响。采用Digital WB检测6组类器官中RetGC蛋白表达水平。实验结果揭示，与非转导样本组比，所有载体设计均以不同效率产生RetGC蛋白。加入WPRE似乎显示出效力降低趋势，通过其他量化指标验证了这个趋势。 Digital WB相比传统Western blot，只需要几十分之一样本量就可实现类器官等珍贵样本中蛋白质定量检测，而且重复性更高和速度更快，非常适合眼部疾病类器官模型的转基因目的蛋白及相关通路蛋白表达分析。“全自动Digital WB技术是眼部疾病蛋白质表达定量的重要工具 Jess全自动数字化蛋白质表达定量分析系统 (Digital WB) 是Bio-Techne集团旗下蛋白质分析品牌ProteinSimple所有。系统利用毛细管电泳免疫学分析技术，可从微量样品中自动吸取、分离、捕获蛋白质，并通过化学发光或荧光检测目的蛋白含量。针对眼部疾病基因治疗应用技术优势Digital WB技术适合眼科基因治疗体外和体内各种模型中转基因目的蛋白表达定量分析，用于视网膜细胞系、iPSC衍生视网膜色素上皮细胞（RPE）和类器官、小鼠动物模型和非人灵长类动物模型的关键蛋白质分析。适合于基因治疗研发的不同阶段对转基因目的蛋白及相关信号通路蛋白检测需求。满足类器官和视网膜微量样本蛋白质分析需求，Digital WB技术样本量需求是传统Western Blot几十分之一，只需要3 μL样本量就可实现多重蛋白质表达检测，特别适合眼部疾病微量珍贵样本蛋白质分析。Digital WB精准定量检测，传统Western Blot只能满足样本半定量需求，重复性比较差。基因治疗某些目的蛋白表达与临床治疗效果相关联，可作为替代生物标志物，建立量效关系。要求目的蛋白分析检测标准需要提高，要求技术需要经过严格验证，Digital WB可满足这些需求。符合基因治疗产业对自动化标准化和效率的需求，面对行业激烈竞争，需要提升研发效率。Digital WB实现了全自动化和标准化，软件符合FDA 21 CFR Part 11合规性需求。系统3个小时完成一批次蛋白质分析，比传统Western Blot快4倍，大大提高了实验效率，同时减少人力成本。 Digital WB自动化程度高、重复性好、灵敏度高和具有较宽动态检测范围，这些特点满足眼部疾病基因治疗项目不同阶段的目的蛋白定量需求。Digital WB已被国内外知名基因治疗机构采用如Biogen, Sarepta Therapeutics, MeiraGTx，ATGC, Spark Therapeutics，Regenxbio，CRISPR Therapeutics, Editas Medicine, Bluebird bio，杭州嘉因生物、中国食品药品检定研究院等，必将在基因治疗研发阶段、非临床研究和临床研究阶段发挥更大的作用。扫描下方二维码，获取更多关于Digital WB资料参考文献： Gordon, Kathleen Del Medico, Amy Sander, Ian Kumar, Arvind Hamad, Bashar (2019). Gene therapies in ophthalmic disease. Nature Reviews Drug Discovery.MacLaren, R.E. A 2020 vision of ocular gene therapy. Gene Ther 28, 217–219 (2021).基因治疗产品非临床研究与评价技术指导原则（试行）Thilo M. Buck and Jan Wijnholds. Recombinant Adeno-Associated Viral Vectors (rAAV)-Vector Elements in Ocular Gene Therapy Clinical Trials and Transgene Expression and Bioactivity Assays. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 4197.Annemieke Aartsma-Rus, Jennifer Morgan, et at. Report of a TREAT-NMD/World Duchenne Organisation Meeting on Dystrophin Quantification Methodology. Journal of Neuromuscular Diseases. 6 (2019) 147–159Beekman C, Janson AA, Baghat A, van Deutekom JC, Datson NA (2018) Use of capillary Western immunoassay (Wes) for quantification of dystrophin levels in skeletal muscle of healthy controls and individuals with Becker and Duchenne muscular dystrophy. PLoS ONE 13(4): e0195850.Matynia A, Wang J, Kim S, Li Y, Dimashkie A, Jiang Z, Hu J, Strom SP, Radu RA, Chen R, Gorin MB. Assessing variant causality and severity using retinal pigment epithelial cells derived from Stargardt disease patients. Transl Vis Sci Technol. 2022 11(3):33Zhang W, Frausto R, Chung DD, et al. Energy shortage in human and mouse models of SLC4A11-Associated corneal endothelial dystrophies. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2020 61(8):39Brooks et al., Improved Retinal Organoid Differentiation by Modulating Signaling Pathways Revealed by Comparative Transcriptome Analyses with Development In Vivo, Stem Cell Reports (2019)Arifa Naeem, etc. RetGC-GUCY2D retinal organoid disease model for AAV gene therapy development. MeiraGTx LTd

眼部疾病基因治疗仍面临很多挑战，评估疗法的安全性风险，验证有效性，更好地支持临床试验研究开展，需要开展系统性地非临床研究。在药理学、药代动力学和毒理学等非临床研究中，选择合适的动物模型来检测目的基因表达和相关的生物学活性非常重要。本文介绍了转基因目的蛋白表达检测技术，详细说明了新技术Digital WB在不同临床前动物模型上应用进展。 近几年，眼科领域的基因治疗临床试验项目数量激增，包括基因替换、基因编辑和基因沉默多个技术方面。眼睛作为免疫豁免器官，视网膜感光细胞和视网膜色素上皮细胞是几种遗传性视网膜疾病基因疗法的重要靶细胞。遗传性视网膜营养不良（Inherited retinal dystrophies, IRDs）是可导致进行性视网膜退化的遗传缺陷性罕见疾病，常见的IRD相关基因缺陷超过200种。作为基因治疗的理想候选者，2017年美国FDA首次批准了视网膜Voretigene Neparvovec基因疗法（Luxturna, Spark Therapeutics），用于治疗RPE65.1双等位基因突变引起的罕见眼科疾病，称为Leber先天性黑蒙。这个里程碑意义的决定为眼科疾病基因疗法打开了大门。目前大部分临床研究疗法目标是通过导入正常功能基因，从而恢复缺陷基因编码蛋白质的正常表达。如治疗色盲的CNGA/CNGB，治疗无脉络膜症的CHM/REP1，治疗Leber 先天性黑蒙的RPE65，治疗X连锁视网膜色素变性（x-linked retinitis pigmentosa）的RPGR。 尽管眼睛对其他器官有相对优势，但眼部疾病基因治疗仍然具有挑战性如基因疗法生产、临床试验设计和长期安全性方面。需系统地开展非临床研究来评估安全性风险，验证有效性机制，以支持临床试验研究。在体内和体外模型中研究产品与治疗靶点的相关作用机制和效应，选择生物相关性模型来检测目的基因表达和生物学活性非常重要。对于眼部疾病可探索选择临床前研究模型如细胞系模型、人诱导多能干细胞（hiPSC）衍生的视网膜类器官疾病模型、啮齿动物和非人灵长类动物等，根据生物学相关性和测定时间可在不同阶段综合选择特异性评估模型。小鼠动物模型案例1：Digital WB检测小鼠眼角膜内转基因蛋白和相关蛋白表达水平 先天性遗传性角膜内皮营养不良 (congenital hereditary endothelial dystrophy, CHED)是一种罕见的原发于角膜内皮的常染色体隐性遗传病，临床特征为出生时或生命早期出现双侧弥漫性角膜水肿和混浊。由于膜转运蛋白 SLC4A11功能丧失而导致内皮细胞凋亡。本研究采用124只小鼠，53只Slc4a11+/+作为对照，71只眼前房注射AAV9- Slc4a11和空AAV载体。 为了测定病毒转导效率，即AAV9-HA-Slc4a11 转导至 Slc4a11-/- (KO) 动物的角膜内皮细胞效率，AAV9-Slc4a11具有血凝素（Hemagglutinin，HA）标签，通过Digital WB检测HA标签表达水平来反应转导水平。结果显示年轻和年老动物组都实现了AAV载体转导的蛋白质表达，而且水平相当。 Slc4a11-/- (KO)小鼠眼角膜乳酸流出减少，导致乳酸在基质中累积，随着年龄增长而进展。乳酸转运蛋白MCT1、2和4在角膜内皮细胞中具有活性。采用Digital WB（WES Immunoassay）检测小鼠眼角膜内皮层细胞蛋白质表达，在年轻动物中，观察到MCT1和2蛋白质表达水平轻微上调，而MCT4表达显著增加。在年长动物中，乳酸转运蛋白表达升高，但水平改变不显著。 综合多角度研究，揭示了在年轻动物组，AAV9- Slc4a11将CHED表型如角膜水肿、内皮细胞丢失、线粒体氧化应激、乳酸转运蛋白表达和角膜乳酸浓度逆转恢复到正常野生型动物水平。年长动物没有逆转表型，但是仍能阻止疾病进展。这些都表明了采用基因治疗可能对CHED表型进行功能性挽救，更重要的进行早期干预治疗。 本研究充分证明了，在AAV基因治疗小鼠眼角膜样本中，Digital WB可利用微量眼角膜样本准确定量角膜内皮细胞中蛋白质表达水平变化。案例2：Digital WB用于AMD小鼠模型RPE和视网膜中小分子量蛋白质表达分析 自噬（Autophagy）在年龄相关性黄斑变性（AMD）疾病进展中起着重要作用。靶向自噬在具有早期AMD特征的小鼠模型中可减缓功能障碍。研究表明，针对增强自噬途径具有治疗早期 AMD 潜力。采用野生型小鼠（WT）和缺乏APEO（载脂蛋白E）小鼠进行对比研究，APOE对照小鼠的视网膜功能降低，与早期AMD表型一致，可作为AMD研究模型。实验设计是5个月时，在饮用水中加入二甲双胍（0.4 g/kg/天）或海藻糖（3 g/kg/天）给WT 和 APOE 小鼠，而对照组只接受饮用水。13 个月时，对 (A-B) RPE 和 (C-D) 视网膜样本，采用Digital WB分析LC3B 表达水平，GAPDH作为上样对照。作为溶酶体自噬过程中标志物，LC3-II:LC3-I 比率动态变化可反应自噬过程中生成和降解的动态过程。结果揭示了APOE 小鼠的 LC3-II:LC3-I 比率较高，表明自噬减慢。但用海藻糖或二甲双胍治疗的 APOE 动物中，LC3-II:LC3-I 比例恢复到 WT 水平，增强了自噬作用。参考下图： 免疫组织化学实验结果也显示光感受器和视网膜色素上皮 (RPE) 中 MAP1LC3B/LC3（微管相关蛋白1轻链-3β）和 LAMP1（溶酶体相关膜蛋白 1）标记减少，这与增加的LC3-II:LC3-I 比率和多个自噬途径中蛋白质表达改变相关，表明自噬减慢。用二甲双胍或海藻糖处理 APOE 小鼠可改善视网膜功能丧失，增强眼组织中 LC3 和 LAMP1 表达，并将 LC3-II:LC3-I 比率恢复到 WT 水平。 通过Digital WB检测小鼠RPE和视网膜中LC3-II和LC3-I蛋白表达水平变化。LC3-II和LC3-I是小分子蛋白质，由于带电基团修饰，分子量大的LC3-II在电泳分离时，会留在更小分子量处。由于两个蛋白分子量差异仅有2kD，传统WB分析有技术难点，采用Digital WB可分析微量样本和小分子量蛋白质的优势，满足视网膜样本中小分子量膜蛋白质分析需求。非人灵长类动物模型案例1：美国AGTC公司利用Digital WB检测NHP体内转基因目的蛋白表达水平 干性年龄相关性黄斑变性（Dry age-related macular degeneration, dAMD）约占AMD病例的80%~90%，主要有玻璃体疣和视网膜色素上皮异常改变，疾病进展相对缓慢。dAMD致病机制尚未明确，可能与炎症、细胞退化与萎缩、氧化应激、脂质代谢障碍等多种因素相关，其治疗方案极其有限。目前临床阶段研发药物主要以靶向补体系统、氧化应激和炎症反应相关机制为主。近年研究发现，编码关键补体调节因子CFH（The Complement factor H）和CFI (The Complement factor I）的基因遗传突变与干性AMD的发生和发展密切相关，这些蛋白质天然调节补体系统以维持平衡。CFH编码蛋白质H因子是补体旁路激活途径中起重要作用的负调控因子，可调控降低炎症反应减缓dAMD发展。 美国AGTC公司采用新颖设计，将编码CFH的20个短重复序列缩减为18个，这个新型CFH变异体称为tCFH，已在小鼠模型上完成概念验证，并在体外实验中证明了其具有与野生型CFH相同生物活性。在非人类灵长类动物（NHP）上进一步研究体内活性，采用Digital WB检测NHP模型上RPE和视网膜的CFH和tCFH表达水平，采用AAV载体携带变异体基因可在体内实验中实现缩短补体因子表达，本项目已在准备IND申报中。 美国Spark therapeutics公司发表了AAV载体基因治疗庞贝病（PD）临床前小鼠和非人灵长类动物（NHP）最新研究成果(Nature Communication, 2021），采用Digital WB检测血浆中hGAA转基因蛋白表达。Digital WB技术可用于非人灵长类动物模型中样本检测，评估眼科疾病基因治疗项目中转基因目的蛋白质表达水平，评估疗效。“全自动Digital WB技术是眼部疾病蛋白质表达定量的重要工具 Jess全自动数字化蛋白质表达定量分析系统 (Digital WB) 是Bio-Techne集团旗下蛋白质分析品牌ProteinSimple所有。系统利用毛细管电泳免疫学分析技术，可从微量样品中自动吸取、分离、捕获蛋白质，并通过化学发光或荧光检测目的蛋白含量。针对眼部疾病基因治疗应用技术优势Digital WB技术适合眼科基因治疗体外和体内各种模型中转基因目的蛋白表达定量分析，用于视网膜细胞系、iPSC衍生视网膜色素上皮细胞（RPE）和类器官、小鼠动物模型和非人灵长类动物模型的关键蛋白质分析。适合于基因治疗研发的不同阶段对转基因目的蛋白及相关信号通路蛋白检测需求。满足类器官和视网膜微量样本蛋白质分析需求，Digital WB技术样本量需求是传统Western Blot几十分之一，只需要3 μL样本量就可实现多重蛋白质表达检测，特别适合眼部疾病微量珍贵样本蛋白质分析。Digital WB精准定量检测，传统Western Blot只能满足样本半定量需求，重复性比较差。基因治疗某些目的蛋白表达与临床治疗效果相关联，可作为替代生物标志物，建立量效关系。要求目的蛋白分析检测标准需要提高，要求技术需要经过严格验证，Digital WB可满足这些需求。符合基因治疗产业对自动化标准化和效率的需求，面对行业激烈竞争，需要提升研发效率。Digital WB实现了全自动化和标准化，软件符合FDA 21 CFR Part 11合规性需求。系统3个小时完成一批次蛋白质分析，比传统Western Blot快4倍，大大提高了实验效率，同时减少人力成本。 Digital WB自动化程度高、重复性好、灵敏度高和具有较宽动态检测范围，这些特点满足眼部疾病基因治疗项目不同阶段的目的蛋白定量需求。Digital WB已被国内外知名基因治疗机构采用如Biogen, Sarepta Therapeutics, MeiraGTx，ATGC, Spark Therapeutics，Regenxbio，CRISPR Therapeutics, Editas Medicine, Bluebird bio，杭州嘉因生物、中国食品药品检定研究院等，必将在基因治疗研发阶段、非临床研究和临床研究阶段发挥更大的作用。扫描下方二维码，获取更多关于Digital WB资料参考文献： Gordon, Kathleen Del Medico, Amy Sander, Ian Kumar, Arvind Hamad, Bashar (2019). Gene therapies in ophthalmic disease. Nature Reviews Drug Discovery.MacLaren, R.E. A 2020 vision of ocular gene therapy. Gene Ther 28, 217–219 (2021).基因治疗产品非临床研究与评价技术指导原则（试行）Thilo M. Buck and Jan Wijnholds. Recombinant Adeno-Associated Viral Vectors (rAAV)-Vector Elements in Ocular Gene Therapy Clinical Trials and Transgene Expression and Bioactivity Assays. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 4197.Annemieke Aartsma-Rus, Jennifer Morgan, et at. Report of a TREAT-NMD/World Duchenne Organisation Meeting on Dystrophin Quantification Methodology. Journal of Neuromuscular Diseases. 6 (2019) 147–159Beekman C, Janson AA, Baghat A, van Deutekom JC, Datson NA (2018) Use of capillary Western immunoassay (Wes) for quantification of dystrophin levels in skeletal muscle of healthy controls and individuals with Becker and Duchenne muscular dystrophy. PLoS ONE 13(4): e0195850.Matynia A, Wang J, Kim S, Li Y, Dimashkie A, Jiang Z, Hu J, Strom SP, Radu RA, Chen R, Gorin MB. Assessing variant causality and severity using retinal pigment epithelial cells derived from Stargardt disease patients. Transl Vis Sci Technol. 2022 11(3):33Zhang W, Frausto R, Chung DD, et al. Energy shortage in human and mouse models of SLC4A11-Associated corneal endothelial dystrophies. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2020 61(8):39Brooks et al., Improved Retinal Organoid Differentiation by Modulating Signaling Pathways Revealed by Comparative Transcriptome Analyses with Development In Vivo, Stem Cell Reports (2019)Arifa Naeem, etc. RetGC-GUCY2D retinal organoid disease model for AAV gene therapy development. MeiraGTx LTd

高分辨率成像质谱应用于大鼠视网膜中氯喹的分布分析 在药物研发过程中，候选化合物的体内药代动力学分析是非常关键的步骤。该分析不仅可以掌握其药效药理，还可以得到和毒性评价有关的信息。通常，使用放射性自显影技术(Autoradiography: ARG)和荧光色素标记细胞的方法进行分析。但是，使用ARG的方法成本高，而且一方面这些方法无法区别原药和代谢物，另一方面标记物质的行为可能与未标记物存在差异。 因此，最近成像质谱分析法，即不进行标记即可对候选化合物进行检测的方法备受瞩目。质谱成像法除了能够在无标记的情况下对各种物质的分布进行分析，还能够使用同一切片同时分析原药及其代谢物，有望在今后的药物研发领域得到应用，取得新的突破。本文为您介绍使用成像质谱显微镜iMScope TRIO对氯喹给药后大鼠视网膜进行检测的示例。 1.大鼠视网膜中氯喹的高空间分辨率成像在本次分析中，对给予抗疟剂药物氯喹的大鼠视网膜进行分析。图1为氯喹的结构式。使用氯喹标准品进行分析，对基质及测定模式进行优化，表1为组织切片的分析条件。图1 氯喹的结构式 表1 分析条件 使用成像质谱显微镜iMScope TRIO进行高空间分辨率成像，发现在约10μm厚的视网膜色素上皮周围有氯喹的分布(图2和图3)。 图2 组织切片上的MS/MS质谱图图3 光学图像和MS/MS质谱图像 在测定氯喹时，如果使用成像质谱分析法常用的MS模式，因受到生物体衍生杂质带来的离子抑制、干扰的影响，无法得到清晰的MS图像(此处数据省略)。在本次分析中，通过iMScope TRIO的MS/MS模式进行测定，提高灵敏度，能够获得10μm的高空间分辨率下的MS/MS图像。 2.大鼠眼球中氯喹的高速成像在药代动力学研究过程中，为了阐明药物分子在细胞及器官水平的特征分布区域，分别需要在高空间分辨率及中等空间分辨率获得药物分子的分布信息。本实验使用MS/MS模式测定在中等分辨率(50μm)下测定大鼠眼球整体的氯喹分布情况，分析条件如表2所示。 表2 分析条件图4 组织切片上氯喹的MS/MS产物离子质谱图，激光直径50μm 虽然使用了更大的激光直径，有可能带来存在噪音高、离子抑制等问题，iMScope TRIO依然能够检测得到具有较高信噪比的氯喹特征碎片，并获得清晰的质谱图像。成像质谱实验的采集速度取决于目标检测区域中所包含的点数。iMScope TRIO能够独立更改激光直径及采集间隔等参数，从而能够轻松控制采集速度及图像尺寸，并且不会影响数据质量。 3.基质涂敷方式的比较在氯喹成像质谱分析中，比较了2种不同的MALDI基质涂敷方式。图5显示了有升华法获得的成像结果(基质升华方式的示意图如图6所示)。基质升华有iMLayer升华仪自动完成，而喷雾方式由手动完成。喷雾方式获得成像结果如图7所示。对比两种方式的检测结果，升华法获得了更加清晰尖锐的氯喹分布图像，而喷雾的结果则看起来会有一些扩散，如图7所示。前处理方式的优化依然取决于组织切片的特性以及所使用的基质类型。如示例中的结果，前处理步骤对最终成像结果的图像质量有显著的影响，不仅仅是切片制备的条件同时基质涂敷的过程也很重要。图5 升华法获得的氯喹分布质谱图像图7 喷雾法获得的氯喹分布质谱图像图6 基质升华方式示意图 4.在相同切片上进行MS和MS/MS成像分析成像质谱分析中，在同样位置只能采集一次数据。但是，使用iMScope TRIO可以调整激光直径及采集间隔，因此可以在采集点之间留下未采集区域，从而实现更多次的成像分析。图8显示了使用激光直径为5μm，采集间隔为10μm时，在同一采集区域内进行4次成像分析的方式。 图8 在同一测定区域进行1次MS分析及3次MS/MS分析的数据采集设置方式示例 文献题目《High spatial Resolution Imaging by iMScope TRIO -Imaging of Chloroquine Distribution in Rat Retina-》使用仪器岛津iMScope TRIO 声明1、本文不提供文献原文。2、所引用文献仅供读者研究和学习参考，不得用于其他营利性活动。

p style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "在药物研发过程中，候选化合物的体内药代动力学分析是非常关键的步骤。该分析不仅可以掌握其药效药理，还可以得到和毒性评价有关的信息。通常，使用放射性自显影技术(Autoradiography: ARG)和荧光色素标记细胞的方法进行分析。但是，使用ARG的方法成本高，而且一方面这些方法无法区别原药和代谢物，另一方面标记物质的行为可能与未标记物存在差异。因此，最近成像质谱分析法，不进行标记即可对候选化合物进行检测的方法备受瞩目。质谱成像法除了能够在无标记的情况下对各种物质的分布进行分析，还能够使用同一切片同时分析原药及其代谢物，有望在今后的药物研发领域得到应用，取得新的突破。本文介绍使用成像质谱显微镜iMScope iTRIO/i对氯喹给药后大鼠视网膜进行检测的示例。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/c4265e4a-c078-4017-93d2-68a9d4eafbd5.jpg" title="1.png" alt="1.png"//pp style="text-align: center "图1 氯喹的结构式/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "strong大鼠视网膜中氯喹的高空间分辨率成像/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "在本次分析中，对给予抗疟剂药物氯喹的大鼠视网膜进行分析。图1为氯喹的结构式。使用氯喹标准品进行分析，对基质及测定模式进行优化，表1为组织切片的分析条件。使用成像质谱显微镜iMScope iTRIO/i进行高空间分辨率成像，发现在约10 μm厚的视网膜色素上皮周围有氯喹的分布(图2和图3)。在测定氯喹时，如果使用成像质谱分析法常用的MS模式，因受到生物体衍生杂质带来的离子抑制、干扰的影响，无法得到清晰的MS图像(此处数据省略)。在本次分析中，通过iMScopei TRIO/i的MS/MS模式进行测定，提高灵敏度，能够获得10 μm的高空间分辨率下的MS/MS图像。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/b1a9ec68-3837-45b5-a422-9f98ed4422b0.jpg" title="4.png" alt="4.png"//pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/8fad9a5c-304b-4f86-b070-8ec12bb1a38d.jpg" title="2.png" alt="2.png"//pp style="text-align: center "图2 组织切片上的MS/MS质谱图/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/4ba84009-2ef8-4ef5-92af-f47ac86ebdb9.jpg" title="3.png" alt="3.png"//pp style="text-align: center "图3 光学图像和MS/MS质谱图像/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "strong大鼠眼球中氯喹的高速成像/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "在药代动力学研究过程中，为了阐明药物分子在细胞及器官水平的特征分布区域，分别需要在高空间分辨率及中等空间分辨率获得药物分子的分布信息。本实验使用MS/MSspan style="text-indent: 2em "模式测定在中等分辨率(50 μm)下测定大鼠眼球整体的氯喹分布情况，分析条件如表2 所示。虽然使用了更大的激光直径，有可能带来存在噪音高、离子抑制等问题，iMScope /spani style="text-indent: 2em "TRIO /ispan style="text-indent: 2em "依然能够检测得到具有较高信噪比的氯喹特征碎片，并获得清晰的质谱图像。成像质谱实验的采集/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "速度取决于目标检测区域中所包含的点数。iMScope iTRIO/i能够独立更改激光直径及采集间隔等参数，从而能够轻松控制采集速度及图像尺寸，并且不会影响数据质量。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/12e37b19-cce0-4e12-a91f-8af4b67f0802.jpg" title="5.png" alt="5.png"//pp style="text-indent: 2em "strongspan style="text-align: justify text-indent: 2em "基质涂敷方式的比较/span/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "在氯喹成像质谱分析中，比较了2 种不同的MALDI 基质涂敷方式。 图5 显示了由升华法获得的成像结果(基质升华方式的示意图如图6 所示)。基质升华由iMLayer 升华仪自动完成，而喷雾方式由手动完成。喷雾方式获得成像结果如图7 所示。对比两种方式的检测结果，升华法获得了更加清晰尖锐的氯喹分布图像，而喷雾的结果则看起来会有一些扩散，如图7 所示。前处理方式的优化依然取决于组织切片的特性以及所使用的基质类型。如示例中的结果，前处理步骤对最终成像结果的图像质量有显著的影响，不仅仅是切片制备的条件，基质涂敷的过程也很重要。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/3e80c956-c24a-4b4f-b277-ff7fa0b9a5ad.jpg" title="6.png" alt="6.png"//pp style="text-align: center "图6 基质升华方式示意图/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "strong在相同切片上进行MS 和MS/MS 成像分析/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "成像质谱分析中，在同样位置只能采集一次数据。但是，使用iMScope iTRIO/i 可以调整激光直径及采集间隔，因此可以在采集点之间留下未采集区域，从而实现更多次的成像分析。图8显示了使用激光直径为5μm，采集间隔为10μm时，在同一采集区域内进行4次成像分析的方式。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/7029ec9e-44bf-483d-a071-a1651cfc8ffb.jpg" title="7.png" alt="7.png"//pp style="text-align: center "图4 组织切片上氯喹的MS/MS产物离子质谱图，激光直径50μm/pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/b8099d01-93e1-49aa-9926-907aeab7a6d9.jpg" title="8.png"//pp style="text-align: center "图5 升华法获得的氯喹分布质谱图像/pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/c8b163cf-961b-4c26-8d20-902c68beed0f.jpg" title="9.png"//pp style="text-align: center "图7 喷雾法获得的氯喹分布质谱图像/pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/d51c038b-8e0c-4efa-8ecf-87c964a43b83.jpg" title="10.png"//pp style="text-align: center "图8 在同一测定区域进行1次MS分析及3次MS/MS分析的数据采集设置方式示例/ppbr//p

p style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员许国旺团队与上海交通大学附属第六人民医院贾伟平团队、中科院上海生命科学研究院研究员吴家睿团队合作，在糖尿病视网膜病变的早期发现方面取得新进展，发现了12-羟基花生四烯酸（12-HETE）和2-哌啶酮（2-piperidone）适用于糖尿病视网膜病变的诊断，尤其适合早期筛查。相关研究近日发表于Advanced Science。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202010/uepic/b2ace437-6b49-465c-af3b-35195092e4ec.jpg" title="11111.jpg" alt="11111.jpg"//pp style="text-align: center "糖尿病视网膜病变可通过血液代谢标志物的检测/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "糖尿病在世界各地的发病率不断上升，造成社会、财政和医疗系统负担不断加重。国际糖尿病联合会预计，到2045年全球糖尿病患病人数将高达7亿人。中国糖尿病的患病人数已高居全球首位。糖尿病视网膜病变是糖尿病最常见、最严重的微血管并发症之一，也是成年人视力降低和致盲的主要原因，严重影响着全球成千上万人的生活质量。糖尿病视网膜病变的筛查和早期诊断对该病的预防和治疗尤为重要。目前的筛查和诊断仍依赖于视网膜成像，该方法人力、物力、财力消耗大，且依赖专业眼科医生的操作及对视网膜图像的判读，不利于大规模的快速筛查。因此，探索一种快速、高效、简便的体外诊断技术对糖尿病视网膜病变的早期发现和诊断有重要价值。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em "本项研究共纳入905名受试者的血清样本，基于多平台代谢组学数据，全面揭示了糖尿病视网膜病变发生发展过程中异常的代谢特征和紊乱的代谢通路。通过多变量/单变量统计分析，研究人员发现并验证了一个新型组合标志物（12-HETE和2-piperidone），实现了糖尿病视网膜病变的快速、精准的体外诊断，其灵敏度高达80.5%~89.4%、特异性高达91.9%~93.3%，受试者工作曲线下面积AUC=0.928-0.946。该组合标志物在疾病的早期诊断中也表现出明显优势，其灵敏度高达81.6%~92.9%、特异性高达90.1%~93.3%、AUC=0.925-0.958，使糖尿病视网膜病变只需要进行血液检测就可快速及早发现病变原因，为糖尿病视网膜病变血液检测提供了可靠、高效、便捷的新方法。/pp style="text-indent: 2em "点击链接了解原文：a href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202001714" target="_blank"https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202001714/a/p

长达9年的科研攻关，一朝透出曙光　　7月2日，由中国海洋大学角膜组织工程实验室研制的组织工程人角膜内皮(简称人工角膜内皮)，已经成功完成兔、猫和猴的角膜移植实验，这在国际上尚属首次，表明角膜中的重要部分之一——角膜内皮已经可以人工“制造”，有望年底或明年初进入临床实验。此外，该实验室已初步获得了人工角膜上皮，下一步计划制造出完整人工角膜。　　移膜兔猫猴状态都很好　　昨日下午，记者来到位于中国海洋大学的角膜组织工程实验室，据海洋生命学院副院长、实验室主任樊廷俊教授介绍，由该实验室研制的人工角膜内皮，继去年在新西兰兔角膜内皮移植成功后，今年又在家猫和猕猴角膜内皮移植中获得成功。截至昨日，所移植的人工角膜内皮已使新西兰兔角膜维持透明385天、家猫角膜维持透明203天、猕猴已维持角膜透明113天，这在国际上尚属首次!　　“这些兔子、猫和猴子，都分别在实验动物中心里面饲养，现在状态都很好。 ”樊廷俊说，实验动物眼睛角膜的内皮层被撕除，然后移植入角膜组织工程实验室自己制造出来的人工角膜内皮，在百天以后，兔、猫和猴的角膜仍然保持透明，攻克了移植人工角膜内皮无法使角膜长期保持透明的国际性难题。记者看到，一只“移膜猫”的眼睛清澈透明，一点儿看不出移膜来。　　计划造出完整人工角膜　　据介绍，目前，该实验室已与青岛一家生物技术有限公司合作完成了第III类医疗器械的生产车间的建设，并获得了第III类植入材料及人工器官的生产许可证，为组织工程人角膜内皮的产业化生产做好了准备。　　记者了解到，在造出人工角膜内皮后，樊廷俊和他的研究团队又将目光瞄向了完整人工角膜，他们的研究是在国家科技部“十五”863课题、“十一五”863重大课题和企业委托开发课题的资助下完成的。目前，他们与青岛中皓生物工程有限公司合作，开始了完整人工角膜的制造技术研究，已成功造出人工角膜上皮，计划于3-5年内造出完整人工角膜并完成其动物移植实验。　　相关链接：角膜移植僧多粥少 一朝成功善莫大焉　　“据世界卫生组织统计，现在全世界有白内障患者近3000万人，我国白内障患者500余万人 全世界有角膜盲患者6000余万人，我国患者500余万人，仅我国每年就有新增盲人约45万人。在角膜盲患者中，青壮年约占70%、儿童约占15%，他们长期蒙受失明的痛苦折磨，无法正常生活、学习和劳动，还给家人和社会带来了巨大的精神和经济负担。 ”樊廷俊教授表示，角膜移植手术可以帮助角膜盲患者重见光明，但由于捐献角膜的数量有限，因此角膜移植一直是僧多粥少，多数患者因得不到移植角膜而无法复明。据介绍，“人工角膜内皮作为人角膜内皮的等效替代物，不仅可以用于我国100余万、全世界1200余万角膜内皮盲患者的临床治疗，而且还可以用于白内障患者术后角膜内皮细胞失代偿的临床治疗。 ”　　新闻揭秘：制造出人工角膜内皮克服了两个技术难题　　樊廷俊介绍说，海大科研人员从2002年开始课题研究，到2009年科研成果通过教育部组织的鉴定，获得“国际首创，达到了国际领先水平”的鉴定结论，再到今年完成动物实验阶段，即将进入临床实验。然而，想要制造出人工角膜内皮，需要找到合适的“种子”和“运载工具”，这可不是容易事。寻找适宜的“种子细胞”和“运载工具”是摆在研发人员面前的两个技术难题。　　在“十五”期间，海大科研人员通过改变培养条件、培养方法和培养液的配方，首次建立了非转染、无致瘤性的人角膜内皮细胞系，成功解决了“种子细胞”的来源问题。经过反复实验后，海大科研人员采用“去上皮层修饰羊膜”作为载体支架，在解决“运载工具”的问题。　　相关知识 看到五彩世界靠着透明角膜　　角膜是位于眼球最前面的半球形、表面光滑的透明组织，主要由角膜上皮层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮层组成。健康的角膜完全透明且具有一定的曲率半径和屈折力，加上晶状体的屈光力就可以使光线准确聚焦在眼底的视网膜上，使我们看到五彩缤纷的世界。

1月3日，国际学术期刊PNAS发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌组和复旦大学附属中山医院王立新教授合作的研究成果“Genetic dissection of intercellular interactions in vivo by membrane-permeable protein”。该研究利用表达膜透过性荧光蛋白的遗传工具小鼠，建立了体内邻近细胞标记技术，并利用该技术揭示了肝脏不同区域中内皮细胞的异质性。细胞之间的相互作用对于多细胞生物体生长发育、稳态维持以及损伤修复等过程至关重要，但是监测体内细胞互作的遗传学技术鲜有报道。当前的遗传学手段基本上是针对特定细胞自身进行操作，无法深入研究细胞之间的互作。因此，建立新型邻近细胞标记技术对了解生物体内细胞间互作及其功能具有重要意义。sLP-mCh是脂溶性标签连接mCherry的融合荧光蛋白(Ombrato et al., Nature 2019)。sLP-mCh在供体细胞中表达后，会从供体细胞中释放出去，并进入邻近细胞，将邻近细胞标记为mCherry+。基于sLP-mCh蛋白的特性，为了实现体内邻近细胞标记，研究人员构建了基因敲入小鼠：R26-sLP-mCh-GFP和R26-sLP-mCh。首先以小鼠肝细胞作为供体细胞，表达sLP-mCh和GFP，检测肝细胞周围的其他类型细胞标记情况。研究人员在R26-sLP-mCh-GFP小鼠体内注射特异靶向肝细胞的病毒AAV2/8-TBG-Cre，当病毒进入肝细胞后，Cre重组酶表达并发生Cre-LoxP重组，移除R26-sLP-mCh-GFP位点中间的终止序列，肝细胞启动表达sLP-mCh和GFP荧光蛋白，成为sLP-mCh的供体细胞。研究人员发现肝细胞为GFP+mCherry+，同时也能检测到GFP–mCherry+的非实质细胞，其中肝脏中80%内皮细胞、76%免疫细胞以及54%成纤维细胞被标记。研究人员将这种由Cre诱导的细胞间蛋白标记技术称作CILP。肝脏的基本单位是肝小叶，肝小叶可以分为三个区域(zone)，各区域的肝细胞具有不同特性以及分子标记。一区的肝细胞围绕着肝脏门静脉，高表达钙粘蛋白E（E-Cad）；三区的肝细胞围绕着肝脏中央静脉，高表达谷氨酰氨合成酶（GS）；肝小叶二区位于一区和三区之间，由E-Cad–GS–的肝细胞构成。肝脏中的毛细血管是一类特化的血管网络，称作肝血窦内皮细胞，肝血窦内皮细胞和肝细胞发生着紧密的相互作用，肝脏不同区域的肝细胞可能会受到内皮细胞不同程度的影响。研究人员然后以Mfsd2a+肝细胞为例阐明肝细胞及其邻近内皮细胞之间的互作。当用他莫昔芬诱导双基因型成体小鼠Mfsd2a-CreER R26-sLP-mCh后，Mfsd2a+肝细胞启动sLP-mCh的表达，成为供体细胞。研究人员发现在门静脉周围出现聚集的mCherry信号，且存在mCherry+CDH5+细胞，表明Mfsd2a+肝细胞作为供体细胞表达sLP-mCh后，周围的内皮细胞也被标记为mCherry+。研究人员发现这部分内皮细胞主要分布在门静脉周围，在肝小叶一区中超过90%的内皮细胞为mCherry+，在二区中大约30%的内皮细胞为mCherry+，在三区中几乎检测不到mCherry+的内皮细胞。从以上可知，研究人员通过CILP技术，并结合Mfsd2a-CreER小鼠，实现了肝小叶内皮细胞的区域性标记，高效地标记了肝门静脉周围内皮细胞。为了进一步分析肝脏中不同区域内皮细胞的差异，研究人员利用FACS将mCherry阳性和阴性内皮细胞分选并进行转录组测序。通过主成分分析显示，这两群内皮细胞分别成群，互相具有较大差异。门静脉周内皮细胞的特征基因Dll4、Lama4、Msr1和Ltbp47在mCherry+内皮细胞中显著上调，中央静脉周内皮细胞特征基因Rspo3、Wnt9b、Cdh13和Thbd7在mCherry–内皮细胞中显著上调。对差异基因进行热图分析显示，与血管新生、调节细胞黏附和生长因子应激相关基因的表达在mCherry+内皮细胞中显著上调，而与胞外基质组成、化学趋化和组织形态发生相关基因的表达在mCherry+内皮细胞中显著下调。综上，研究人员开发了一种体内邻近细胞标记新技术CILP。CILP利用了一种细胞膜透过性的荧光蛋白，当这种荧光蛋白在供体细胞中表达后，可以释放到细胞外，并进入邻近细胞，从而实现对邻近细胞的标记。研究人员利用CILP技术成功标记了小鼠肝脏中肝细胞的邻近细胞，并利用Mfsd2a+肝细胞作为供体细胞，标记并分析了肝脏门静脉周内皮细胞的特征。分子细胞卓越中心博士后张少华为该论文的第一作者，分子细胞卓越中心周斌研究员和复旦大学附属中山医院王立新教授为该论文共同通讯作者。该工作得到了香港中文大学吕爱兰教授和西湖大学何灵娟研究员的大力支持。感谢分子细胞卓越中心动物平台和细胞分析技术平台对本研究的大力支持，感谢中科院、基金委、科技部以及上海市科委等部门的经费支持。图：（A）sLP-mCh荧光蛋白从供体细胞进入受体细胞。（B和C）遗传工具小鼠构建以及实验策略。（D–F）以肝细胞作为供体细胞表达sLP-mCh，肝脏中非实质细胞被标记为mCherry+。（G和H）sLP-mCh被用于在胰腺和心脏中标记邻近细胞。

捷报：7月26日，中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室与北京朝阳医院、澳大利亚昆士兰大学合作，利用全自动毛细管Western技术，研究调节性T细胞外泌体智能递送VEGF抗体用于眼底新生血管性疾病联合治疗发表在Nature Biomedical Engineering（IF：18.952）。研究背景年龄相关性黄斑变性和糖尿病性视网膜病变诱发的新生血管的形成是导致失明的两个主要原因，通常的治疗方案是使用靶向血管内皮生长因子(VEGF)的抗体（anti-VEGF antibodies (aV)）进行治疗。尽管治疗的早期阶段aV具有更高的有效性，但仍有50%–67.4%的aV治疗的老年性黄斑变性患者，在治疗2年后有视力恢复不佳等情况发生。在糖尿病视网膜病变中的患者中，对aV治疗的抵抗率（持续性黄斑增厚）也约为40%。这意味着aV在眼部新生血管病变中的药效不是很理想，或者还有其它致病因素如炎症等因素需要考量。有研究报道，与接受白内障手术的没有其它眼部病变的患者相比，脉络膜新生血管(CNV)或视网膜新生血管（RNV）的患者的房水中炎性细胞因子水平升高，且这些炎症标志物与眼部新生血管疾病中VEGF产生的增加呈正相关。因而，炎症不一定是新血管形成的结果，也有可能是驱动眼部新生血管形成的主要致病因素之一。而原有使用激素疗法来抗炎的案例又有不良反应发生，因此急需一种新型的联合给药方式（抗VEGF+抗炎）出现。研究内容中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室与北京朝阳医院等地的科学家，基于VEGF和炎症的协同活性促进眼部新生血管形成的机制，开发了一种针对抗VEGF和抗炎症的联合疗法。利用体内具有天然抗炎活性的Treg来源的外泌体（rEXS）为载体，通过基质金属蛋白酶（MMP）敏感肽段（cL）连接VEGF抗体（aV），创建了rEXS-cL-aV体系。当玻璃体腔注射后，利用rEXS向炎症部位的趋化性，携带aV富集于眼底新生血管病灶，随后利用病灶部位高表达的MMP酶解敏感肽段cL并释放aV。在上述时空耦合递送的基础上，分别利用rEXS的抑制炎症作用和aV的抑制血管生成作用实现协同增效。全自动毛细管Western技术鉴定调节性T细胞外泌体VEGF抗体递送系统（rEXS-cL-aV）CD9, CD47, ALIX, TSG101: 外泌体marker（鉴定外泌体）CCR6：趋化因子受体（通过炎症趋化因子的梯度增强纳米药物在新生血管病变中的积累）IL-10，CTLA-4：Treg免疫抑制蛋白（鉴定此外泌体是Treg来源）aV：VEGF（鉴定递送药物VEGF抗体）β-Tubulin：内参（蛋白定量归一化）此研究中鉴定调节性T细胞外泌体VEGF抗体递送系统（rEXS-cL-aV），利用了全自动毛细管Western技术。因常规制备方法获取外泌体样本效率不高，因此用传统Western技术会常常面临样本量不足，无蛋白表达的困境。全自动毛细管Western技术，只需3μL样本，不到3小时直接获得24个样本定量结果。且此过程除手动加样+试剂后，无需任何手动操作，数据稳定重现性佳，是微量或珍稀样本蛋白定量的不二之选。

“世界心脏日今天9月29日是世界心脏日(World Heart Day)，是由世界心脏联盟确定，旨在世界范围内宣传有关心脏健康的知识，并让公众认识到生命需要健康的心脏。在全世界范围内，心血管疾病是威胁人类健康的高危病种，其危害无年龄、身份、地域之分。在中国，每年大约有260万人死于心脑血管疾病，死亡人数位列世界第二。《中国心血管健康与疾病报告2021》指出，每5例死亡中就有2例死于心血管病。急性心肌梗死(MI)是一种常见的由突发冠状动脉血栓形成和闭塞引起的心脏急症。急性心肌梗死期间持续的缺血组织损伤导致疤痕形成，进而可能心力衰竭。心肌梗死后形成的新血管可减轻疤痕和心功能恶化。然而心肌梗塞后形成血管生成和功能适应的细胞间的相互作用仍不完全清楚。下面跟随小编来看一下德国汉诺威医学院的研究人员今年发表在《Science》上的“心脏知识”。德国汉诺威医学院Kai C. Wollert研究团队发表题为Meteorin-like promotes heart repair through endothelial KIT receptor tyrosine kinase的研究。通过对急性心肌梗死的小鼠进行生物信息学分泌组分析，发现细胞因子METRNL(Meteorin-like) 在梗死边界区内皮细胞高度表达，促进心肌梗死后的血管生成、组织修复和功能适应。使用化学交联质谱法发现，KIT（受体酪氨酸激酶）是内皮细胞中METRNL细胞表面受体。为了评估METRNL是否与KIT的细胞外结构域结合，通过微量热泳动（MST）技术，检测到KIT-ECD-Fc可结合METRNL和SCF（KIT已知配体），并且亲和力很高（Kd分别是87nM和175nM）,而不与血管内皮生长因子A(VEGFA)结合。Pull Down实验获得相同的结果。图注：MST技术和Pull Down检测KIT的胞外结构域与METRNL，SCF和VEGFA结合随后，作者检测时发现METRNL的治疗会增强心肌梗死区域边缘的毛细血管化，限制瘢痕的形成并对心脏功能具有持续有益的影响。研究结果: 作者定义了一种基于METRNL的髓系细胞和内皮细胞之间的交叉信号，METRNL通过KIT依赖的信号通路介导内皮细胞的血管生成作用促进心肌梗死后组织修复，为急性心肌梗死的治疗提供了新的药物靶点。心脏是人体最重要的器官之一，无论工作或者科研再忙碌，一定要注意休息。马上就要国庆节了，让我们一起为劳苦功高的心脏放个假吧！文献参考：Reboll, Marc R., et al. "Meteorin-like promotes heart repair through endothelial KIT receptor tyrosine kinase." Science 376.6599 (2022): 1343-1347.*文内部分图片来源自百度，侵则删。

近日，艾伯维和REGENXBIO公司宣布，将共同合作开发和商业化RGX-314。RGX-314是一种潜在的一次性基因疗法，用于治疗湿性年龄相关性黄斑变性 (wAMD)、糖尿病性视网膜病变 (DR) 和其他慢性视网膜疾病。　　根据协议条款，艾伯维将向REGENXBIO支付 3.7 亿美元的预付款，REGENXBIO有可能获得高达13.8 亿美元的额外开发、监管和商业里程碑。REGENXBIO和艾伯维将平均分享 RGX-314 在美国的净销售额的利润， AbbVie 将就 RGX-314 在美国以外的净销售额向 REGENXBIO 支付分层特许权使用费。该交易预计将于 2021 年底完成，但须满足惯例成交条件，包括适用的监管批准。　　RGX-314由 NAV AAV8 载体组成，该载体编码旨在抑制血管内皮生长因子 (VEGF) 的抗体片段。RGX-314 被认为可抑制VEGF通路，通过该通路，新的渗漏血管生长并导致视网膜的液体积聚。VEGF是一种刺激血管生长的蛋白，而wAMD的病理表现为新生和异常的血管在黄斑下不受控制地生长，导致肿胀、出血和/或纤维化，造成快速和严重的视力丧失，因此眼部注射anti-VEGF药物也是临床上治疗wAMD的主要手段。而RGX-314作为一款基因疗法，将编码anti-VEGF抗体片段的基因送入细胞，提供了只需一次性注射即可治疗wAMD的可能。　　目前，REGENXBIO正在推进RGX-314两种不同的眼部给药途径研究，通过标准化的视网膜下输送程序以及输送到脉络膜上腔，同时，也正在一项利用视网膜下给药的关键试验中对wAMD 患者进行评估。　　此次达成合作的基因疗法所针对的视力疾病正在成为导致人们失明的重要原因。其中，湿性年龄相关性黄斑变性的特征是由于视网膜中形成新的渗漏血管而导致视力丧失。在美国、欧洲和日本，wAMD是视力丧失的重要原因之一，仅在这些地区就有多达 200 万人患有wAMD。目前的抗 VEGF 疗法已经显着改变了湿性 AMD 的治疗前景，由于它们能够防止大多数患者视力丧失的进展，因此成为了治疗护理标准。然而，这些疗法需要终生反复眼内注射，以保持疗效，由于治疗的负担，随着时间的推移，患者的视力通常会随着治疗频率的降低而下降。　　糖尿病视网膜病变 (DR) 是糖尿病的严重并发症之一，也是全球24至75岁成年人视力丧失的主要原因。仅在美国， DR就影响了大约 800 万人，而根据相关数据显示，全球这一疾病的患者人数已超1亿，在糖尿病患者中的发病率能够达到40%以上。这一疾病的严重程度范围会随着非增殖性糖尿病视网膜病变 (NPDR) 变为增殖性糖尿病视网膜病变 (PDR)，随着病情的发展，很大一部分患者会出现威胁视力的并发症，包括糖尿病性黄斑水肿 (DME) 和新血管形成所导致的失明，目前对DR患者的治疗选择包括“观察等待”、抗VEGF治疗、视网膜激光或手术治疗。　　此次艾伯维与REGENXBIO的合作，将帮助更多患者扫除视力障碍以及毁灭性的视力减退。

高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)是最常见的卵巢癌病理亚型，75%以上的患者首诊时已是晚期，常伴有广泛的网膜转移和腹水产生。此外，免疫检查点阻断等免疫治疗手段仅在10%左右的卵巢癌病人中起效。研究表明，卵巢癌腹水中的成纤维细胞亚群可以通过激活肿瘤细胞中的JAK/STAT通路以影响患者的预后及其对免疫治疗的响应。然而，卵巢癌腹水环境中的其它细胞类群对其肿瘤微环境的影响方式和途径仍不明确。7月24日，北大张泽民教授课题组与上交大附属新华医院汪希鹏课题组、上海免疫学研究所李子逸博士以“Single-cell analyses implicate ascites in remodeling the ecosystems of primary and metastatic tumors in ovarian cancer”为题在Nature Cancer杂志联合发表了研究论文，揭示了卵巢癌腹水对肿瘤原发和转移病灶微环境的重塑作用。研究人员对5个肿瘤相关部位，包括原发性卵巢肿瘤（Pri.OT）、网膜转移瘤（Met.Ome）、腹水、盆腔淋巴结（PLN）和外周血（PB），进行了单细胞转录组测序和T细胞受体(TCR)测序，共将223,363个高质量单细胞编入五个主要细胞谱系，并通过规范标记表达进行注释，从而描画出了 OC TME 的综合图谱。B细胞和CD4 T细胞在PLN中占主导地位；而淋巴细胞和单核细胞构成了PB样本的主要细胞成分；在Pri.OT和Met.Ome中鉴定出了五种主要细胞系，而且大多数细胞类型的富集模式在这两个部位之间没有明显差异，这表明原发性和转移性肿瘤细胞的发展都需要类似复杂的TME。腹水经常出现在晚期卵巢癌患者中，与化疗反应有关，腹水中含有大量免疫细胞和基质细胞，其中，CD8 T 细胞、巨噬细胞和树突状细胞（DCs）是腹水的主要成分，表明腹水中存在炎性微环境。5个部位的单细胞测序描画了晚期卵巢癌图谱与非恶性细胞不同，由推断拷贝数变异（inferCNV）定义的肿瘤细胞表现出很强的患者间异质性。值得注意的是，所有腹水样本中都发现了肿瘤细胞，平均比例为 2.7%（53499 个样本中的 1444 个），这与 OC 肿瘤细胞更倾向于 "播种"到腹腔而不是通过血管扩散的观点一致，凸显了腹水与 OC腹腔内扩散之间的紧密联系。此外，推断CNV分析表明，在Met.Ome中发现的肿瘤细胞亚克隆也可在Pri.OT中检测到，表明这些亚克隆是腹膜转移的致瘤群体。通过对单细胞转录组和 T 细胞受体（TCR）的系谱追踪和轨迹推断，研究人员鉴定了多个具有不同分布模式的T细胞群，并揭示了OC中T细胞从腹水到肿瘤组织的潜在动态特征。他们发现腹水富集的记忆T细胞（CD8 GZMK T++EM和 CD4 T+CM）可能是TIL的潜在重要补充库，包括CD8 T+EX和 CD4 T+H1样细胞，特别是对于Met.Ome。这些结果暗示了腹水在T细胞浸润期间塑造OC的TME的潜在作用。此外，作者描述了腹水和肿瘤组织中巨噬细胞的功能状态和本体，肿瘤富集的巨噬细胞偏向于单核细胞来源的本体，而腹水中的巨噬细胞更多来源于组织驻留巨噬细胞（RTM）。HGSOC 中肿瘤富集巨噬细胞和腹水富集巨噬细胞的两种不同功能状态此外，研究人员还鉴定了恶性腹水中的 MAIT细胞和树突状细胞，以及原发性肿瘤中的两个内皮亚群，通过比较不同化疗响应情况的患者治疗前样本中细胞亚群的分布情况，发现肿瘤原位灶中VCAM+内皮细胞占比较高的HGSOC患者对化疗敏感，而IL13RA1+内皮细胞的占比高则提示患者对化疗耐药，这可能是治疗效果的一个重要评价指标。总之，该研究提供了女性恶性腹水生态系统的全貌，为其与肿瘤组织的联系提供了有价值的见解，并为OC疗效评估和治疗耐药性的潜在标志物的开发提供了重要参考。卵巢癌（OC）是一种异质性疾病，由具有不同组织学亚型、分子生物学和微环境特征的恶性肿瘤组成，是致死率最高的妇科恶性肿瘤，占女性癌症死亡人数的 5%。在所有 OC 类型中，高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）是最常见的组织学亚型，占 OC 患者的 70%以上。一旦确诊，超过 75% 的 HGSOC 患者病情已到晚期，并伴有广泛转移和腹水。据报道，由于网膜的脂肪结构和腹膜循环，OC 患者通常会向网膜转移。虽然化疗加贝伐单抗的治疗可延长患者的 5 年生存期，但总体疗效仍然有限。此外，免疫检查点抑制剂等免疫疗法在临床试验中的客观反应率仅为 10%，而由于肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）的比例和质量不同，OC 亚型往往对免疫疗法表现出不同的反应。因此，描述 OC 的肿瘤微环境（TME）特征至关重要，因为肿瘤微环境中的多种细胞成分在疾病进展和治疗反应中发挥着重要作用。

约30%的炎性肠病的患者会出现肠道以外的症状。Inflammatory bowl disease (IBD) 除了引起严重的机体症状外，活动性IBD患者中40%的患者会出现焦虑、抑郁和认知功能降低症状。DSS诱导的小鼠IBD模型中焦虑和抑郁样行为增加，边缘系统发生改变。多个研究表明IBD患者循环中的炎性介质会导致多种中枢神经系统疾病进展。这些神经系统疾病是IDB后遗症还是前兆或者二者的结合目前尚不清楚。来自意大利米兰Humanitas大学的Maria Rescigno团队证明了肠道血管屏障（gut vascular barrier GVB）的存在，将肠道和肝脏直接联系在一起，该屏障类似于血脑屏障。GVB损伤导致肝肠轴连接受损与多种疾病相关，如转移性结直肠癌、非酒精性脂肪肝等。肠道内皮细胞被认为是肠道炎症的关键参与者，但是其在肠道外症状产生中的作用尚未确定。中枢神经系统具有复杂的脉管系统，包括血脑屏障BBB和血脑脊液屏障BCSFB。BCSFB由脉络丛（choroid plexus CP）可渗透性毛细血管组成，而CP结构中的上皮细胞组成的内衬则不具有通透性，细胞之间通过紧密连接组成屏障。而脉管系统的失调是否与IBD中出现的精神障碍有关尚不清楚。近日，Maria Rescigno团队在Science上发表题为Identification of a choroid plexus vascular barrier closing during intestinal inflammation的文章。该研究发现了大脑中存在脉络丛血管屏障，在炎性肠病早期通透性明显下降，对大脑起保护作用，但会导致行为和认知改变。作者首先检测了溃疡性结肠炎患者的GVB情况。分析发现溃疡部位的PV1表达增加，这表明UC患者中GVB受损。而患者血清中LPS结合蛋白浓度升高，表明GVB受损促进细菌易位。DSS诱导的小鼠模型发现CD34+内皮细胞中PV1随时间表达不断增加，而ZO1表明无明显变化，表明GVB存在特异性跨细胞通透性重塑。接下来作者检测了DSS模型中各个时间点中各器官的变化情况。作者发现肠道上皮细胞是损伤后首先开始恢复的细胞，但是在模型后期，肝脏和大脑中的固有免疫细胞数量开始增加。在大脑中增加的细胞主要为巨噬细胞和小胶质细胞。作者检测了DSS模型小鼠海马CA1区域中小胶质细胞的形态以评估小胶质细胞激活状态。分析发现小胶质细胞具有更多的分支和连接点，表明其具有清除活性。随后出现变形虫样形态，分支和连接减少，小胶质细胞处于激活状态。分析小胶质细胞表面标志物发现MHCII和CD86表达在模型后期明显增加。这些结果表明炎性肠病会迅速波及肠道外器官，导致小胶质细胞激活。利用70kDa葡聚糖检测大脑的通透性发现DSS诱导模型时大脑的渗透性明显降低。分析稳态时大脑中允许70kDa分子通过的部位时作者发现脑室周围的脉络丛和脑膜中葡聚糖得到累积。这表明在炎症发生时脉络丛的通透性发生了改变。这说明在大脑中存在另一个血脑屏障，作者命名为脉络丛血管屏障（CP vascular barrier PVB），在炎症状态下控制分子通透性。检测发现在PVB关闭状态时，炎性细胞的进入大脑的过程得到抑制。分析脉络丛转录组发现DSS处理时对细菌LPS作出反应的相关基因得到激活，于是作者接下来检测了LPS对于PVB通透性的调控。作者发现LPS可以推动PVB通透性上升，但是长时程刺激通透性会下降。作者又使用单细胞转录组分析技术对多种类型的细胞对于PVB通透性作用进行检测，发现血管细胞中的周细胞和血管内皮细胞对PVB通透性的变化至关重要。最后作者用Cadherin-5+内皮细胞特异性表达b-catenin小鼠检测PVB通透性对小胶质细胞功能的影响。先前此课题组发现该小鼠的肠道血管通透性不会发生改变，而脉络丛血管通透性会降低，这样就切断了GVB-PVB轴之间的联动。在DSS模型中，作者发现该小鼠的小胶质细胞未被激活，但焦虑样行为和情景记忆损害水平高于对照组。本研究表明在炎性肠病中行为和认知改变不是由于炎症水平增加引起的，而是来自于大脑免受损伤的防御策略，而调控GVB-PVB轴相互作用可能是一种潜在的治疗措施。原文链接：https://www.science.org/doi/10.1126/science.abc6108

在哺乳动物的大脑中，许多不同类型细胞形成复杂的相互作用网络，从而实现广泛的功能。由于细胞的多样性和复杂的组织，人们对大脑功能的分子和细胞基础的理解受到了阻碍。单细胞RNA测序（scRNA-seq）和单细胞表观基因组分析的发展使发现大脑中许多分子上不同的细胞类型成为可能[1，2]。然而，这些研究中有限的样本量可能导致对大脑细胞多样性的低估。此外，了解大脑功能背后的分子和细胞机制不仅需要对细胞及其分子特征进行全面的分类，还需要详细描述分子定义的细胞类型的空间组织和相互作用。在更精细的尺度上，细胞之间的空间关系是通过相邻分泌和旁分泌信号传递的细胞间相互作用和通信的主要决定因素。虽然突触通信可以发生在细胞体相距较远的神经元之间，但神经元和非神经元细胞之间的相互作用以及非神经元细胞之间的相互作用通常借助直接的体细胞接触或旁分泌信号，因此需要细胞之间的空间接近。而且涉及局部中间神经元的相互作用也倾向于发生在空间近端神经元之间。因此，一个高空间分辨率的全脑细胞图谱对于理解大脑的功能极其重要。来自美国哈佛大学的庄小威教授课题组使用多重误差鲁棒荧光原位杂交（MERFISH）技术对整个成年小鼠大脑中大约1000万个细胞中的1100多个基因进行了成像，并通过整合MERFISH和scRNA-seq数据，在全转录组尺度上进行了空间分辨的单细胞表达谱分析。研究人员在整个小鼠大脑中生成了5000多个转录不同的细胞簇（属于300多种主要细胞类型）的综合细胞图谱，将该图谱与小鼠大脑共同坐标框架进行定位，可以系统量化单个大脑区域的细胞类型组成和组织，并进一步确定了具有不同细胞类型组成特征的空间模块和以细胞渐变为特征的空间梯度。这种高分辨率的细胞空间图—每个细胞都具有转录组表达谱，有助于推断数百种细胞类型对之间的细胞类型特异性相互作用和预测这些细胞-细胞相互作用的分子（配体-受体）基础和功能。总之，此研究不仅为大脑的分子和细胞结构提供了丰富的见解，而且为其在健康和疾病中的神经回路和功能障碍奠定了基础。该结果于近日发表在Nature上，题为“Molecularly defined and spatially resolved cell atlas of the whole mouse brain”。研究小组通过MERFISH技术对横跨4只成年小鼠（1雌3雄）大脑整个半球的245个冠状面和矢状面切片上进行成像，根据DAPI和总RNA信号，单个RNA分子被识别并被分配到细胞，进而得到单个细胞的表达谱。总之，该研究对成年小鼠大脑中大约1000万个细胞进行成像和分割，包括11个主要的大脑区域：嗅觉区、等皮层（CTX）、海马形成、皮质底板（CS）、纹状体（ST）、苍白球、丘脑、下丘脑（HT）、中脑、后脑和小脑。基于典型相关性分析整合MERFISH数据和scRNA-seq数据，采用K最近邻(k-NearestNeighbor,KNN)分类算法对MERFISH细胞进行分类。为了对不同大脑区域的细胞类型组成和组织进行系统定量，他们将MERFISH生成的细胞图谱注册到艾伦脑科学研究所发布的小鼠脑三维图谱第三版（Allen Mouse Brain Common Coordinate Framework，CCFv3）[3]，可将每个单独的MERFISH成像细胞及其细胞类型身份标签放入3D CCF空间（图1）。图1 对整个小鼠大脑的分子定义和空间分辨的细胞图谱（图源：Zhang, M., et al.. Nature, 2023）据统计，整个小鼠大脑由46%的神经元和54%的非神经元细胞组成，神经元细胞与非神经元细胞的比例在后脑中最低、在小脑中最高。神经元细胞包括315个亚类和超过5000个集群，其类型也表现出很强的区域特异性，大多数神经元亚类仅在11个主要区域中的一个区域富集。这11个主要区域包含了不同数量的细胞类型，尤其是后脑、中脑和下丘脑所包含的神经元细胞类型的数量以及局部复杂性远远高于其它大脑区域。基于神经递质转运体和参与神经递质生物合成相关基因的表达，他们将成熟的神经元分为8个部分重叠的组别。其中，谷氨酸能神经元和γ-氨基丁酸（GABA）能神经元分别约占神经元总数的63%和36%，谷氨酸能与GABA能神经元的比例在不同的大脑区域中差异很大，而5-羟色胺（5-HT）能、多巴胺能、类胆碱能、甘氨酸能、去甲肾上腺素能和组胺能神经元仅占神经元总数的2%（图2c）。谷氨酸能神经元和GABA能神经元广泛分布于全脑，可分为具有不同空间分布的不同细胞类型；在谷氨酸能神经元中，Slc17a7（Vglut1）、Slc17a6（Vglut2）和Slc17a8（Vglut3）在不同的脑区分布存在差异，Slc17a7主要位于嗅觉区、CTX、海马形成、CS和小脑皮层，而Slc17a6主要位于HT、中脑和后脑（图2d，e）。他们还观察到两个未成熟神经元（IMNs）亚类：一种是抑制性的，一种是兴奋性。抑制性IMNs由30个簇组成，沿脑室下区（SVZ）分布，通过前连合处延伸至嗅球；兴奋性IMNs由七个簇组成：簇516主要位于嗅觉区域，而其它簇沿海马体形成的齿状回分布（图2f），这与之前关于海马形成中成人神经发生的发现一致[4]。图2 神经元细胞的类型和空间分布（图源：Zhang, M., et al.. Nature, 2023）非神经元细胞包括23个亚类和117个簇。通过量化，研究小组发现在整个大脑中，非神经元细胞由30%少突胶质细胞、6%少突胶质细胞前体细胞（OPCs）、28%血管细胞、23%星形胶质细胞、8%免疫细胞和5%其它类型细胞组成。一些非神经元细胞类型，特别是星形胶质细胞和心室系统中的细胞也表现出很强的区域特异性。星形胶质细胞包括36个细胞簇，最大的两个集群Astro 5225和Astro 5214，分别占星形胶质细胞总数的48%和33%。基本上每个Astro星团都显示出独特的空间分布，Astro 5225只位于端脑区，Astro 5214只位于非端脑区，Astro 5215位于丘脑，Astro 5216位于后脑，Astro5231-5236位于嗅球，Astro 5207位于小脑，Astro 5222位于齿状回，Astro 5208富集于靠近软脑膜表面的髓质，Astro 5228、5229和5230位于SVZ沿线，延伸至嗅球，并与抑制性IMNs广泛共定位（图3d）。少突胶质细胞在纤维束中富集，在整个脑干中十分丰富，而OPCs则均匀分布地整个大脑；在集群水平上，一些少突胶质细胞和OPCs也表现出区域特异性，如Oligo 5277在皮层中富集，而Oligo 5286在后脑中富集（图3e）。与心室系统相关的细胞也呈现区域特异性分布，在第三脑室，下丘脑室管膜—胶质细胞位于腹侧区域，而ependymal细胞占据背侧区域，Hypendymal细胞位于第三脑室背侧的下联合器，心室内的主要细胞是脉络膜丛细胞和血管软脑膜细胞（VLMCs）。除了VLMC 5301和VLMC 5302，大多数VLMC集群被限制在软脑膜（图3f）。图3 非神经元细胞的类型和空间分布（图源：Zhang, M., et al.. Nature, 2023）接下来，研究团队为每个细胞定义了一个局部细胞类型的组分矢量，并使用这些矢量聚类细胞，从而得到了包含相似邻域细胞类型组成的细胞的“空间模块”（图4a）。他们确定了16个一级空间模块和130个二级空间模块，一级空间模块将大脑分割成与CCF中定义的主要大脑区域基本相吻合的区域，一个显著的差异是中脑和后脑之间的边界（图4b，c）。许多2级空间的模块与CCF中定义的子区域一致，但观察到更多的差异（图4d）。此研究中的空间模块描述是基于单个细胞的转录组范围内的表达谱所定义的细胞类型，因此比CCF中脑区描述的信息具有更高的分子分辨率，空间梯度代表了对该区域的分子轮廓的更精确的描述。图4 空间模块：分子定义的大脑区域（图源：Zhang, M., et al.. Nature, 2023）考虑到在某些情况下，细胞的基因表达谱可能会表现出渐进或连续的变化，他们因此检查了所有的细胞亚类，结果发现细胞的空间梯度广泛分布在大脑的许多区域。例如，颅内（IT）神经元在整个CTX上形成了一个连续的梯度，在这个区域，基因表达沿皮层深度方向逐渐变化，但第2/3层IT神经元的分离更为明显（图5a）。在纹状体中，D1和D2中棘神经元均沿背外侧-腹内侧轴形成空间梯度（图5b，c）。在外侧间隔复合体（LSX）中，几个GABA能亚类沿着背腹轴形成了一个梯度（图5d）。在海马体的CA1、CA3和齿状回区域和中脑的下丘中也观察到空间梯度。他们也观察到了一些非神经元细胞之间的空间梯度，如下丘脑室管膜—胶质细胞，沿着第三脑室的背腹轴形成了一个连续的梯度（图5e）。通过基于UMAP（一致的多方面逼近和投影以进行降维）的基因表达可视化分析，他们发现一个大规模的跨越HT、中脑和后脑区域的空间梯度（图5f）。图5 分子定义的细胞类型的空间梯度（图源：Zhang, M., et al.. Nature, 2023）最后，他们分析了亚类水平上的细胞类型，并推断单个大脑区域中细胞类型特异性的细胞-细胞相互作用（包括非神经元细胞间，非神经元细胞和神经元之间以及神经元间）。几百对细胞亚类被确定，统计学结果显示有显著的相互作用。预测的大多数具有相互作用的细胞类型对包含多个配体-受体对，与同一细胞类型对中的非近端细胞对相比，近端细胞对的表达显著上调，为这些细胞间相互作用的分子基础提供了见解。在非神经元细胞之间，发现内皮细胞和周细胞均与大脑中的边缘相关巨噬细胞（BAMs）、巨噬细胞有显著的相互作用。在这两种情况下，与非近端细胞对相比，来自层粘连蛋白信号通路的配体-受体对在近端细胞对中均明显上调，一些细胞因子（内皮细胞中的Cytl1和周细胞中的Ccl19）在BAMs近端血管细胞中表达上调，这说明大脑中的血管细胞可能利用这些细胞因子来招募巨噬细胞（图6d，e）。小胶质细胞也被发现与内皮细胞、周细胞之间的显著相互作用；与内皮细胞相比，周细胞与小胶质细胞相互作用的可能性更高，而与BAMs相互作用的趋势则相反（图6f，g）。他们还观察到神经元和非神经元细胞之间的显著相互作用，例如星形胶质细胞和抑制性IMNs在嗅球中、星形胶质细胞和兴奋性IMNs在海马形成中表现出显著的相互作用。此分析也预测了一些神经元亚类之间的相互作用，例如，海马形成过程中Pvalb枝形吊灯状GABA神经元和CA3谷氨酸能神经元之间、IPN Otp Crisp1 GABA神经元和中脑的DTN-LDT-IPN Otp Pax3 GABA神经元之间的相互作用。图6 细胞间的相互作用和通信（图源：Zhang, M., et al.. Nature, 2023）文章结论与讨论，启发与展望通过MERFISH技术成像约1000万个细胞，并将MERFISH数据与全脑scRNA-seq数据集整合，该研究生成了一个具有高分子和空间分辨率的、横跨整个小鼠大脑的分子定义的细胞图谱。进一步将该图谱注册到了艾伦脑科学研究所发布的CCF中，提供了一个可被科学界广泛使用的参考细胞图谱，使科研人员能够确定每个大脑区域不同转录细胞类型的组成、空间组织和潜在的相互作用。一方面，非神经元细胞与神经元细胞或非神经元细胞之间的相互作用，以及配体-受体对、基因的相关上调，为测试不同非神经元细胞类型的功能作用提供了切入点。另一方面，将转录组成像与不同行为范式下的神经元活动成像相结合可以揭示神经元的功能角色[5]。未来的研究将结合空间分辨的转录组学分析和各种其它特性的测量（如表观基因组谱、形态学、细胞的连通性和功能、系统的基因扰动方法），将有助于大家阐述大脑的分子和细胞结构的功能和功能障碍在健康和疾病中的作用。MERFISH（Multiplexed Error-Robust Fluorescence In Situ Hybridization），一种空间分辨的单细胞转录组学方法，经过近年的发展已成为生命科学领域中最具有前景的单细胞测序技术之一。该技术独特的原理和方法,可实现对单细胞进行多重靶向探测,从而深入研究细胞的生物学特性,对于疾病诊治及药物研发等方面也有着广泛的应用价值。

我国国家政策对于本土仪器企业的支持，一方面体现在政策中鼓励优先采购本国货物，鼓励向创新企业和中小企业倾斜；另一方面，进口产品采购需要进行论证备案，部分省份甚至经过专家论证形成了政府采购进口产品清单“非必要不进口”，进而限制进口仪器的采购，非进口产品清单上的仪器设备要求采购国产。本文特将14省2021年新发布的国产仪器支持政策加以整理。《中华人民共和国政府采购法》规定，政府采购应当采购本国货物、工程和服务。(本国货物，是指在中国境内生产，且国内生产成本超过一定比例的最终产品。国内生产成本比例=(产品出厂价格-进口价格)/产品出厂价格。)但有下列情形之一的除外：(一)需要采购的货物、工程或者服务在中国境内无法获取或者无法以合理的商业条件获取的 (二)为在中国境外使用而进行采购的 (三)其他法律、行政法规另有规定的。 前款所称本国货物、工程和服务的界定，依照国务院有关规定执行。11省政府采购集中采购目录及标准政策支持国产优先北京市根据《北京市2020-2022年政府采购集中采购目录及标准的通知》政府采购政策功能的有关规定要求，政府采购应严格执行《中华人民共和国政府采购法》及有关法规、制度规定，在政府采购活动中扶持贫困地区、监狱企业、中小企业和残疾人福利性单位发展，支持节能减排、环境保护。我市各预算单位应统筹确定本单位（含所属各单位）面向中小企业采购的项目。在满足机构自身运转和提供公共服务基本需求的前提下，应当预留本单位年度政府采购项目预算总额的30%以上，专门面向中小企业采购，其中，预留给小型和微型企业的比例不低于60%。江苏省根据《江苏省2021年政府集中采购目录及标准》要求:浙江省根据《浙江省2021—2022年度政府集中采购目录及标准》，各级采购单位或者其委托的采购代理机构在组织实施政府采购活动时，应当执行财政部门为实现节约能源、保护环境、科技创新、高质量发展，扶持不发达地区和少数民族地区，促进中小企业、监狱企业、残疾人福利性单位发展等目标制定的政府采购政策。山东省根据《山东省政府集中采购目录及标准的通知》要求，》 湖北省根据《湖北省政府集中采购目录及标准（2021年版）》有关要求，采购人应按照国家有关规定，认真执行支持本国产品、促进中小企业发展、支持脱贫攻坚、节约能源、保护环境、支持监狱企业发展、促进残疾人就业等政府采购政策。各部门在满足基本需求的前提下，应当预留本部门年度政府采购项目预算总额的30%以上，专门面向中小企业采购，其中预留给小型和微型企业的比例不低于60%。海南省根据《海南省省级2020-2022年政府集中采购目录及标准的通知》加大采购政策落实相关要求，政府采购应有助于实现国家的经济和社会发展政策目标，包括支持本国产品采购、促进中小企业发展、执行绿色产品政府采购制度、扶持监狱企业和残疾人福利性单位等，属于政府采购政策支持范围内的企业、产品和服务，采购人应通过采购需求标准、预留采购份额、价格评审优惠、优先采购和强制采购等措施，加大政策落实力度，确保政策执行效果。贵州省根据《贵州省政府集中采购目录及限额标准(2021年版)》实施要求，各采购单位或其委托政府采购代理机构开展政府采购活动时，应认真执行节能环保、扶持不发达地区和少数民族地区、促进中小企业(包括监狱企业、残疾人福利性单位)发展等政府采购政策。甘肃省根据《甘肃省2020-2022年政府集中采购目录和采购限额标准》的通知，青海省根据《青海省2021—2022年度政府集中采购目录及限额标准》，采购人在采购活动中要严格落实节约能源、保护环境、促进中小企业发展、支持监狱企业和残疾人就业企业等政策。采购人应当采购预装正版操作系统软件的计算机、服务器等办公网络设备。新疆维吾尔自治区根据《新疆维吾尔自治区2021-2022年度政府采购集中采购目录及标准》 及其最新修订中的有关工作要求提到，政府采购活动应当严格落实政府采购支持创新、绿色、中小企业发展、脱贫攻坚、军民融合等政策目标；政府采购应该采购本国货物、工程和服务，确需采购进口产品的，采购人应当根据国家和自治区相关规定办理进口产品采购核准手续；政府采购预算要科学合理确定采购需求，严格执行经费预算和资产配置标准；同时，注重发挥政府采购政策引导作用，体现优先采购本国产品、节能产品、环保产品，以及支持自主创新、中小企业发展等政策。西藏自治区根据《西藏自治区2021—2022年度政府集中采购目录及采购限额标准》的通知中的有关说明及要求，政府采购应当采购本国货物、工程和服务，并执行节能产品、环境标志产品、循环、低碳、再生、有机产品、中小企业、福利企业、创新产品等政府采购政策。如需采购进口产品，应按照《西藏自治区财政厅关于进一步加强政府采购进口产品管理有关事宜的通知》(藏财采办〔2019〕22号)的规定执行。采购人应严格执行《政府采购促进中小企业发展管理办法》(财库〔2020〕46号)规定，采购限额标准以上，200万元以下的货物和服务采购项目、400万元以下的工程采购项目，适宜由中小企业提供的，采购人应当专门面向中小企业采购；超过200万元的货物和服务采购项目、超过400万元的工程采购项目中适宜由中小企业提供的，预留该部分采购项目预算总额的30%以上专门面向中小企业采购，其中预留给小微企业的比例不低于60%。5省加强政府采购进口产品管理陕西省根据陕西省卫生健康委发布的《预算单位政府采购进口产品管理办法》的通知，各单位政府采购进口产品实行单位申报、专家论证、网上公示、部门集中论证、财政审批执行五个环节。参与论证的专家必须有5人以上熟悉拟采购进口产品的非本单位专家进行论证，其中还应包括1名法律专家。法律专家应判定拟采购产品是否属于国家限制进口产品，技术专家应重点论证采购需求，进口产品与同类国内产品的技术指标和性能及其优劣对比，提出合理的采购建议。采购进口产品应当符合以下条件之一:1、中国境内无法获取；2、中国境内无法以合理的商业条件获取；3、法律法规另有规定确需采购进口产品；4、国内设备技术性能指标不能满足需求。各单位在政府采购进口产品过程中有下列情形之一的，将责令限期改正，并对直接负责的主管人员和直接责任人员予以通报：1、未获得采购进口设备批复，擅自采购批复表外进口设备的；2、出具不实申报材料的；3、违反国家相关规定的其他情形。浙江省根据《浙江省财政厅关于进一步加强政府采购进口产品管理的通知》（浙财采监〔2010〕51号）有关规定，由省卫生健康委会同省财政厅提出的2021—2022年度全省政府采购进口产品统一论证清单（医疗设备类），有效期一年。 2021—2022年度全省政府采购进口产品统一论证清单（医疗设备类）序号设备名称功能1 小动物荧光显微成像系统追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应。2 HIV定量检测艾滋病病原体检。3 离心机各种样本分离制备。4 低速精密切割机用于切割牙条，实验室使用居多。5 电转仪适用于细胞的高效转染（尤其是原代细胞、免疫细胞、血清细胞、干细胞等），体内基因转染，体外基因转染以及贴壁细胞基因转染。6 分光光度计在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对物质进行分析。7 化学发光仪用于化学发光、紫外及比色等核酸、蛋白、印迹膜等的数字图像。8 染色机主要用于组织学、病理学、生物学等领域对贴附于载玻片上的石蜡切片、冰冻切片及细胞等检体进行自动染色。9 流式细胞仪干细胞分化体系构建，对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。10 全自动免疫组化仪用于完成免疫组化染色前切片的全自动脱蜡及抗原修复，在肿瘤分类、诊断、预后判断方面广泛应用。11 非接触超声波样品处理系统实验室难容药物的微粉化，辅助进行药物的溶解。12 全自动革兰染色仪检验科细菌涂片镜检前染色。13 全自动血沉仪用于测定红细胞沉降率。14 实时无标记细胞分析仪用于记录细胞的实时生长状态，如细胞增殖、存活、凋亡、形态变化等细胞生物学变化。15 全自动快速微生物质谱检测系统用于快速微生物鉴定和对药物敏感性测试。16 生化免疫流水线临床各参数检验。17 全自动血细胞分析仪测量血细胞分类。18 超低温冰箱低温冷藏,保存生物样本。19 全自动血凝仪用于对血栓和止血进行实验室检查。20 蛋白纯化系统实验、检验设备。21 全能型化学成像仪用于检测、分析生命化学物质的仪器。22 全自动组织芯片仪实验、检验用设备。23 荧光定量PCR仪器实验、检验用设备。24 低温冷冻设备用于冷冻存储。25 红外微定量分析仪基于红外原理的生物分子微定量分析系统，实现复杂混合物各种组分浓度的准确分析。26 基因测序仪通过对血液或唾液的分析进行基因全序列的测定，用于预测罹患疾病的种类及可能性、解释个体行为特征及行为合理性以及其他研究，筛选出个人病变基因以提前预防和治疗。27 酶标仪用于标本分析。28 全自动尿液分析系统用于尿液成分分析。29 全自动生化分析仪测量体液中某种特定化学成分。30 染色封片机病理检查前处理。31 生物显微镜用于生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究，同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体，可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。32 组织脱水机病理组织脱水器械。33 放射性粒子源植入治疗计划系统（TPS）是通过超声、CT等影像引导技术将具有放射性的颗粒源直接植入肿瘤体靶向内或肿瘤周围，通过放射性核素持续释放射线对肿瘤细胞进行杀伤。34 Micro CT用于小动物活体成像研究，采用锥形X线束（Cone Beam）。采用锥形束不仅能够获得真正各向同性的容积图像，提高空间分辨率，提高射线利用率，而且在采集相同3D图像时速度远远快于扇形束CT。35 MRI（不含1.5T及以下）磁共振成像仪，对检测脑内血肿、脑外血肿、脑肿瘤、颅内动脉瘤、动静脉血管畸形、脑缺血、椎管内肿瘤、脊髓空洞症和脊髓积水等颅脑常见疾病非常有效，同时对腰椎椎间盘后突、原发性肝癌等疾病的诊断也很有效。36 儿童X线头影测量分析软件用于儿童口腔治疗。37 口腔全景X射线拍片机用于口腔拍片。38 牙片机用于口腔小牙片的拍摄,用于影像诊断。39 CT（不含16排及以下CT）即电子计算机断层扫描，它是利用精确准直的X线束与灵敏度极高的探测器一同围绕人体某一部位作一个接一个的断面扫描，具有扫描时间快，图像清晰等特点，可用于多种疾病的检查。40 DR在计算机控制下直接进行数字化X线摄影的一种新技术，即用平板探测器把穿透人体的X线信息转化为数字信号，并由计算机重建图像及进行一系列的图像后处理。41 C臂机用于各种手术中的X线影像设备。42 口腔CBCT（口腔锥形束CT）用于口腔造影。43 SPECT/CT用于影像诊断、新药研发以及细胞和分子的生物学活动研究等。44 数字减影血管造影X线机（DSA)用于血管造影成像，微创、患者痛苦少，通过放射诊疗能够精确地进行实时疗效评估，副作用小、用药量少且不存在耐药性问题，可以精确定位，且病人康复快。45 数字胃肠机数字胃肠造影检查、DR摄影、断层融合扫描、全景摄影、数字减影血管造影等。46 双能X线骨密度仪用于骨密度测试。47 彩色多普勒超声仪超声检查使用。48 肝功能剪切波量化超声诊断仪用于无创性肝纤维化监测，提高慢性肝病、代谢综合征诊疗的精准度和降低疾病管理的成本。49 血管内超声系统用于血管内超声检查。50 人工心肺机（体外循环设备）手术过程中病人体外循环用。51 超声吸引系统用于神经外科等手术。52 LED无影灯用于手术照明。53 电动综合手术动力系统神经外科、骨科等科室开展精细微创手术工作需要。54 激光治疗仪激光治疗，主要应用在治疗脑部疾病、心血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤、白血病、精神科疾病、银屑病、鼻炎等症。55 麻醉深度监测仪应用于全身麻醉病人的麻醉深度监测。56 凝胶成像仪凝胶成像主要用于蛋白、核酸凝胶成像及分析，系统提供白光和紫外光两种光源进行拍摄凝胶，由系统自带的图像捕捉软件捕捉拍摄图像，然后由系统自带的图像分析软件对拍摄的图像进行分析。57 头灯照亮手术部位，提供更好的术野暴露。58 血氧饱和度及血球压积监测系统为体外循环及ECMO术中必备。59 宫腔镜组织切除系统妇科手术用。60 医用内窥镜一个具有图像传感器、光学镜头、光源照明、机械装置等组成，可用于疾病诊断及治疗。61 专科手术器械手术必备器械。62 转运床手术转运设备。63 手术床用于手术，是医生在手术过程中必要的工具，是安置病人让医生更方便提供手术环境最重要的工具。64 高频呼吸机重症监护呼吸支持用。65 脊柱打磨系统神经外科、骨科手术用。66 自体血回收仪术中回收自身血液。67 水刀系统用于消化道标记、黏膜隆起、黏膜切割/剥离、止血等。68 等离子体手术系统用于外科手术的软组织解剖、切除、消融、止血和干燥。69 外科手术机器人外科手术系统是一种高级机器人平台，其设计的理念是通过使用微创的方法，实施复杂的外科手术。达芬奇机器人由三部分组成：外科医生控制台、床旁机械臂系统、成像系统。70 内窥镜手术导航系统将内窥镜获得的影像学资料经过计算机数据处理后形成三维可视图像，引导手术，提高术中精准度。71 头戴式放大镜用于口腔治疗时的观察，更清晰的了解患者的病情，放大病灶，有利于发现问题。72 电外科手术治疗系统将电外科单极/双极切割、凝血和血管闭合、组织闭合功能集于一身的仪器，减少焦痂、热损伤和电炎花，更容易穿过组织，无需对组织束内的血管进行仔细分离，大大缩短手术时间，减少手术出血，减轻手术创伤，减少并发症。73 手术显微镜主要适用于教学实验中的动物解剖，微细血管和神经的缝合，以及其它需要借助于显微镜进行的精细手术或检查。74 混合动力碎石清石系统用于碎石清石手术。75 激光治疗仪用于血管外科手术激光治疗。76 数字一体化手术系统一体化手术室系统是以创造手术室的高效率、高安全性、以及提升手术室对外交流平台为目的的多个系统（如医学、工控、通讯、数码等）的综合运用。77 麻醉工作站用于手术中对病人进行吸入麻醉。78 激光定位手术导航系统术中导航，病变部位导航。79 立体定向仪用于手术定位。80 射频消融仪用于快速心律失常的射频消融治疗。81 氩气刀手术切割、止血。82 术中电生理监护系统用于术中电生理监护。83 体外膜式氧和系统重症监护抢救病人用。84 头架脑外科手术用，用于病人定位。85 头脉冲试验仪一种无创、安全、无永久副作用、可调节性的，用于中枢神经系统和外周神经系统的科研、检测、诊断、治疗设备。86 麻醉机用于为术中病人提供连续流动循环的氧气和麻醉气体，在维持麻醉水平的同时辅助病人呼吸。87 高频电刀用于外科手术，通过有效电极尖端产生的高频高压电流与肌体接触时对组织进行加热，实现对肌体组织的分离和凝固，从而起到切割和止血的目的。88 半导体激光治疗仪通过低强度激光照射血液引发人体一系列的生化反应，具有活血和静血两方面作用，能够改善和恢复血液的生理功能，在术后消炎止痛、活血化瘀、防止手术并发症方面具有显著效果。89 超声刀系统利用超声热能聚焦的原理通过点阵的集束热传递方式绕开表皮，向皮下发出高强度聚焦超声波来损伤靶点细胞，从而使得肿瘤组织凝固性坏死，而不伤害周围正常组织。主要适应腹部、盆腔和体表各种肿瘤，包括胰腺癌、肝癌、肾及肾上腺良恶性肿瘤、胃癌、直肠癌、结肠癌、前列腺癌、前列腺增生、膀胱癌、子宫癌、子宫肌瘤、卵巢癌、各种腹部及盆腔转移癌等；也可用于肥胖人士减肥。90 等离子电切镜常用于前列腺和膀胱肿瘤电切手术。91 无创呼吸机用于无创呼吸治疗，适用于治疗睡眠呼吸暂停综合症及相关疾病，避免这些疾病所引起的血氧饱和度下降、交感神经张力增高、副交感神经张力下降、血液二氧化碳浓度升高、pH值降低以及胸内负压增高等影响。92 多参数监护仪用于监护人体心电图形、呼吸、体温、血压（分无创和有创）、血氧饱和度、脉率等动态生理参数。93 血流动力学监测仪用于心率、呼吸、脉搏、血压、氧饱和度、心电图、动静脉压、房室压、心排血量等血流动力学相关参数的检测。94 中央监护系统用于患者监护。95 超声骨刀利用高强度聚焦超声技术，通过换能器，将电能转化为机械能，经高频超声震荡，使所接触的组织细胞内水汽化，蛋白氢键断裂，从而将手术中需要切割的骨组织彻底破坏。由于该高强度聚焦超声波只对特定硬度的骨组织具有破坏作用，不仅不会破坏到血管和神经组织，还能对手术伤口处起到止血作用，进一步缩小微创手术的创口，极大地提高了手术的精确性、可靠性和安全性，常用于口腔手术中。96 低温冷冻手术系统用于患者实体肿瘤的微创超低温冷冻消融治疗，可用于肿瘤科、普通外科、胸外科、皮肤科、耳鼻喉科、妇产科、肛肠科、泌尿科、神经科（包括神经止痛）等科室的低温冷冻手术治疗。97 钬激光治疗机可用于泌尿外科、五官科、皮肤科、妇科等相关疾病的激光治疗，减少了对周围组织的损伤，安全性高。98 呼吸机人工替代自主通气功能的有效手段，已普遍用于各种原因所致的呼吸衰竭、大手术期间的麻醉呼吸管理、呼吸支持治疗和急救复苏中，可预防和治疗呼吸衰竭，减少并发症，挽救及延长病人生命。99 超声内窥镜系统胃肠镜、支气管镜下的检查和治疗。100 环氧乙烷灭菌器供应室灭菌用。101 手机清洗机用于口腔医用手机的清洗，极大的提高清洗效率，缩短了工作时间。102 高温高压蒸汽灭菌器利用压力和蒸汽对物品进行迅速而可靠的消毒灭菌。103 全自动清洗机灭菌消毒。104 低温灭菌器低温下消毒灭菌。105 低温等离子灭菌器过氧化氢蒸汽通过与等离子体结合，可对医用器械和材料安全、迅速灭菌，不留任何毒性残余。灭菌过程的各阶段都是在干燥的低温环境下运行，因此不会损坏对热或水汽敏感的器械，对金属和非金属器械都适用，并能对诸如止血钳铰链等难以到达（不易扩散）的器械部位进行灭菌。106 共焦激光扫描检眼镜对患者眼底进行扫描拍摄。107 角膜板层刀切割角膜瓣。108 飞秒屈光治疗仪用于屈光手术,主要包括辅助制瓣LASIK手术和切割前囊膜与晶体核这两类。109 超乳/玻切机用于白内障超声乳化仪手术和玻璃体切割手术。110 共焦激光断层扫描仪针对视盘及周边区域进行扫描，并对扫描区域进行三维立体重建，进而获得关于视盘和视神经纤维层的多种参数，辅助进行青光眼的评价和诊断。111 眼底激光治疗仪能够精确的改变眼底组织结构，达到治疗目的。主要应用于眼底疾病的光凝治疗如适用于青光眼、糖尿病视网膜病变、眼底血性病变、黄斑病变、视网膜变性区及视网膜裂孔、视网膜脉络膜血管瘤、脉络膜黑色素瘤等。眼底激光治疗仪所释放的能量小，不伤害相邻组织，在最大程度上保证了激光治疗的安全性和准确性，能够轻松完成后囊膜混浊的切开，虹膜激光打孔以及玻璃体机化条索松解等操作。112 眼底激光成像仪可用于视网膜、脉络膜及血管的形态观察，实现眼底疾病病变部位（周边视网膜）的精准成像。113 眼科多波长激光治疗仪用于治疗视网膜脱落的预防性光凝、黄斑部病疾病的光凝、视网膜血管性疾病的激光治疗以及DR的激光治疗等眼科疾病。由于眼内不同组织对不同波长激光反应不同，在治疗眼底疾病时就需要用到不同波长的激光。114 Nd：YAG眼科激光治疗仪眼科发性白内障、闭角型青光眼、飞蚊症。115 倍频Nd：YV04眼科激光治疗仪眼科视网膜激光光凝术。116 房角镜该产品用于前房检查诊断及眼内异常治疗检查，与眼睛接触使用。117 非接触裂隙灯前置镜该产品配合非接触裂隙灯显微镜使用或单独使用对眼底进行辅助观察诊断，非接触使用。118 激光光纤照明仪用于青光眼的非侵入式治疗，无痛无创，速度快、操作简单、全程自动化。119 青光眼小梁消融系统用于治疗开角型青光眼的内路小梁切除术中，具有手术创伤小，术后恢复快的优点，为患者提供更安全、更有效的治疗方式。120 眼内窥镜成像系统可用于眼前节病变影响后节观察（角膜浑浊、瞳孔难以散大、晶状体异常）时对视网膜周边部、睫状体平台部、睫状突及虹膜后面进行观察或激光治疗，简化手术操作，在玻切术中瞳孔缩小时进行观察，在手术显微镜使用受限时进行辅助和补充（如手术中荧光素造影）。121 视觉功能分析波面像差仪可用于术前眼屈光测量及眼相差诊断等视觉功能分析。122 眼前节分析系统眼前节测量分析。123 电脑验光仪用于测量患者球镜度、柱镜度和柱镜轴位。124 光学相干成像（OCT）系统三维层析成像技术。125 角膜地形图测量角膜相关结构及光学功能。126 视力表投影仪视力检查。127 视野计用于眼部检查中测量可视范围。128 眼电生理仪通过人眼视觉系统的生物电活动来检查视网膜、视神经及视觉传导过程中的病变。129 准分子屈光治疗仪用于屈光手术和治疗性角膜手术（PTK）中切削角膜组织。130 角膜内皮细胞计检查角膜内皮细胞。131 综合验光仪通过各种镜片的单独或组合使用，测量眼的屈光状态。132 干眼分析仪干眼分析。133 眼底照相机图象处理系统眼科检查。134 非接触眼压计用于非接触式测量眼压，无需接触眼球或进行表面麻醉，患者无痛苦，且操作简便、测量迅速。135 主动脉内囊反搏泵（IABP泵）将一定容积的球囊放置于主动脉部位,球囊导管与体外压力泵相连,内部填充氦气,使球囊充盈与排空限定在特定的时限。136 肺功能仪肺功能常规通气检查、支气管舒张检查等。137 多功能运动心肺评估系统用于功能性运动容量的评价、疾病的诊断及判断治疗。138 新生儿红外线辐射抢救床作为新生儿开放性抢救治疗平台，具备直接观察的优势，同时也作为新生儿高胆红素血症患儿的治疗平台。139 诱发电位仪神经内科检查设备。140 光纤膀胱测压系统泌尿外科治疗用。141 血液灌流机血液透析用。142 3D打印机系统用于打印各种口腔模型、基台等。143 CADCAM系统主要包括牙齿整体扫描，牙齿方案设计，义齿研磨等功能。144 超声波牙科治疗仪用于超声波治疗，主要适用于根管治疗、口腔诊断检查等。145 纯水机用于产生纯水，一种采用多级滤芯进行水质净化处理的净水设备，处理多使用不添加化学物质的过滤、吸附、反渗透等物理方法。146 根管长度测量仪用于根管治疗，用来测量根管工作长度的一种精密电子仪器。通过根测仪的指引，相比较传统的根管长度X光照测量方法可以使精准度更高 ，使医生对根管长度有精准的把握，以做到完美的充填。147 口腔激光治疗仪主要用于口腔治疗，广泛用于牙体牙髓治疗，外科软硬组织切割，牙周炎治疗等。148 牙片宝快速扫描和专业的感控技术使得拍小牙片时,患者定位更简单,获取影像更快捷,避免交叉感染。149 牙周治疗仪用于牙周病治疗，种植体周围维护，清除种植体周粘结剂及菌斑，种植手术前牙周洁治或牙周治疗。150 肌电图仪通过肌电图、神经传导等检测人体的神经、肌肉功能。151 脑部电阻抗断层成像仪神经外科颅内组织电阻抗的动态监测。152 吊塔用于手术室。153 调Q激光治疗仪治疗色素性皮肤疾病。154 心输出量测量仪心输出量检测。155 血液透析机用于血液透析治疗。156 除颤仪使用电能来治疗快速异位心律失常，使之转复为窦性心律。157 表面肌电测定治疗仪用于表面肌电信号的检测诊断。158 电生理刺激仪用于电生理手术。159 多导生理记录仪用于记录人体各项生理指标。160 康复训练系统用于康复训练治疗。161 脑部与区域血氧检测系统用于检测脑部血氧含量。162 脑功能监测仪病人脑功能持续监测用。163 视频脑电图机用于脑电监测。164 左室气流辅助装置用于部分或全部代替心室做功。165 经颅磁刺激仪用于治疗头痛、失眠、抑郁、焦虑、精神分裂症。166 血细胞分离机进行干细胞采集、治疗性红细胞去除、治疗性白细胞去除、治疗性血小板去除、血浆置换等，是造血干细胞移植中必不可少的仪器。167 CRRT用于病人床旁持续血液过滤系统。168 大脑皮层刺激器利用脉冲磁场产生的电流刺激大脑皮层，修复大脑皮层的神经功能。169 癫痫定位系统用于实时监测脑电系统。170 点阵CO2激光治疗仪用于切割、烧灼、凝固手术，用于人体组织的汽化、碳化、凝固和照射。171 动脉硬化检测仪用于体检病人动脉硬化诊断。172 监护床用于重症加强护理病房中使用的护理床。173 经皮氧分压二氧化碳分压监测用于动态进行动脉血气分析来评价无创通气的效果。174 气道清理系统用于气道清理。175 声阻抗仪用于鉴别传导性听力损失和混合听力损失。176 人体成分分析仪准确评估肿瘤、慢性代谢性疾病患者的营养状况。177 多导睡眠监测仪诊断睡眠障碍疾病，监测呼吸暂停。178 多普勒血流探测仪用于血管探测。179 表面肌电诊疗仪用于表面肌电信号的检测诊断及生物反馈治疗。180 高流量气道湿化治疗仪用于高通量的气道湿化治疗，可以防止气道变干和支气管收缩、维持鼻部气道通畅、减少鼻部症状、改善血氧饱和度、清理淤积痰液，以改善病人的舒适度和顺应性。181 口腔综合治疗台用于口腔手术及口腔疾病的检查、诊断和治疗，包括用于口内照相的内窥镜系统，以清晰显示口腔内各个部位（包括牙齿）的正常结构及异常病变，还包括光固化机及洁牙机，方便医生进行治疗。182 临时起搏器通过发放一定形式的电脉冲刺激心脏，使之激动和收缩，以模拟正常心脏的冲动形成和传到，用于治疗由于某些心率失常所致的心脏功能障碍如急性心肌梗死、急性心肌炎、房室传导阻滞、严重窦性心动过缓等。183 脑电图机脑电检测、监测。184 脑氧饱和度检测仪脑部血氧饱和度仪检查。185 生物刺激反馈仪可进行表面肌电分析、神经肌肉电刺激、肌电触发电刺激、生物反馈、失禁治疗等，主要应用于康复医学科、神经内科、骨科、老年医学科、儿科、神经外科、肛肠科、妇产科、泌尿科。186 生物反馈治疗仪用于大脑和神经系统的多种疾病治疗。187 酸性氧化电位水生成系统用于自动、连续地生成酸性氧化电位水消毒液，可通过氧化还原电位、次氯酸、pH、活性氧以及臭氧等的共同作用，进行内窥镜、各种妇科炎症、皮肤/黏膜/创伤感染、口腔和咽部、复用透析器、医护人员手部、敷料与被服以及室内空气等的消毒。188 听力计用于听力检查诊断。189 听力筛查仪用于听力检查诊断。190 医用控温仪用于控制病人体温，对高热病人可以进行降温治疗以预防继发性脑损伤，对术中病人可以辅助其维持正常体温以降低伤口感染率并缩短住院时间，对术后病人可协助恢复病人体温并降低病人代谢速率、耗氧量和心肌负担以缩短复苏时间。191 心肺复苏仪增加心脏骤停患者心脏和脑的灌注血流量，避免心脏和脑进入不可逆转的死亡状态，并逐步修复心脏和脑脏器官工作机能，为后续的除颤、静脉用药、血管重建等气道桥梁承接作用。192 医用电子直线加速器利用微波电场对电子进行加速，产生高能射线，用于人类医学实践中的远距离外照射放射治疗活动，广泛应用于各种肿瘤的治疗，特别是对深部肿瘤的治疗。193 冰冻切片机术中新鲜组织作病理快速诊断。194 耳声发射分析仪听力检查诊断。195 脑干诱发电位分析仪听力检查诊断。同时，浙江省财政部发布《关于印发〈政府采购进口产品管理办法〉的通知》提出如下要求:1.采购单位拟采购的产品如属于国家规定鼓励进口的，或国家虽规定为限制进口但属用于医疗卫生、教育科研和质量检验检测等目的的，采购人根据实际工作需要，可以申请采购一定数量的进口产品；国家虽未限制进口但属于一般办公类设备用品及电梯、空调和交通工具等专用设备的，除符合《政府采购法》第十条规定情形外，原则上不得采购进口产品。各级财政部门应当按规定从严审核。对非政府采购项目，暂不实行进口产品审核管理。2.对政府采购频率较高的医疗卫生、教育科研和质量检测等进口产品，实行全省统一论证。具体由省级主管部门根据实际工作需要，会同省财政厅提出本年度允许采购进口产品的品目清单，自行或委托省政府采购中心统一组织专家论证，并将产品品目清单和专家论证意见在政府采购指定媒体公示（时间不少于10个工作日）；经公示后无异议的，该产品品目清单由省财政厅通过指定媒体正式向全省公布，有效期为一年。采购单位在有效期内，申请采购该清单列举的进口产品时，无需再提供专家论证意见。对未纳入全省统一组织专家论证范围的进口产品，单位因工作需要确需采购的，由采购单位自行组织专家论证，经行业或行政主管部门审查后报同级财政部门审核批复。采购单位报财政部门审核时，应当填写《政府采购进口产品申请核准表》（见附件，以下简称“申请核准表”）；财政部门审核批复前，应当将专家论证意见予以公示（时间不少于3个工作日），公示无异议的，可予以审核批准。审核批准后一年内，如其他采购单位因工作需要拟采购同类产品的，可不再组织专家论证和主管部门审查，直接报财政部门审核。3.进口产品论证的专家组一般应由5名以上（需单数）非本单位并熟悉该产品的专家组成。如个别项目因客观原因确实达不到规定人数的，经同级财政部门同意，专家组人数可降至3人。采购人代表不得作为专家组成员参与论证。4.政府采购进口产品原则上应当采用最低评标价法或者性价比法，并不得限制潜在国产的同类产品参与投标。同时，为提高效率，如采用非公开招标方式的，可由同一专家组将采购进口产品的论证与采购需求或采购方式等的论证一并进行，合并出具论证意见。5.采购单位书面委托采购代理机构采购进口产品时，应提供财政部门出具的《政府采购进口产品申请核准表》。未经财政部门核准，任何单位和机构不得组织采购进口产品。6. 集成项目中部分设备拟采购进口产品的，若进口设备为该集成项目的关键核心部分，或进口设备的采购金额达到政府采购限额标准或占集成项目总金额50%以上的，该部分设备应履行政府采购进口产品审核手续。杭州市根据浙江杭州市财政局发布的《关于规范政府采购进口产品管理的通知》，为加快构建以国内大循环为主体、国内国际双循环相互促进的新发展格局，根据《浙江省委办公厅 浙江省人民政府办公厅关于进一步厉行节约坚持过紧日子的通知》及财政部、省财政厅进口产品管理有关文件精神，规范市级各单位进口产品采购，发挥政府采购政策功能，鼓励支持自主创新。采购人应鼓励和支持国产自主创新，加快推动进口产品国产化替代。拟采购的产品有国产同类替代产品的或已采购同类进口产品数量满足相应需求的，原则上不得采购进口产品。除满足特殊需求外，政府采购进口产品总额自2021年起三年内，年均下降10%以上。鼓励和支持采购人优先采购被认定为首台套产品和“制造精品”的自主创新产品。采购人在不超过技术服务总分的前提下，可对自主创新产品给予适当评审加分。强化采购需求管理。采购人应当做好市场调查和价格测算，压减非刚性、非急需、非重点的进口产品采购，不得以纳入全省统一论证产品清单为由，限制国产同类产品参与竞争。采购人应当根据实际需求和市场供给情况实施采购，面向社会提供服务的采购人应当分级分类采购与提供服务相关的产品，满足社会不同层次需求。按照“谁采购，谁负责”原则，采购人应当全面落实主体责任，健全内控管理制度，严格执行政府采购进口产品相关规定。政府采购进口产品须经本单位集体决策，并提交《杭州市政府采购进口产品申请核准表》。采购人自行组织专家论证的，专家组应当由五人以上（单数）非本单位专家组成，其中应当包含一名法律专家。采购人应当加强进口产品的绩效管理和履约验收。通知指出，将规范主管审查机制。对非全省统一论证的进口产品，需经主管预算单位审查，审查内容应包括申请理由、内控记录、同类产品已采购情况、《杭州市政府采购进口产品专家论证意见表》等主要信息。主管预算单位应确保审查内容完整性、准确性，在《杭州市政府采购进口产品申请核准表》中作出明确的审查意见并签章。采购人应当加强对政府采购频率较高的进口产品预警管理。主管预算单位重点监控非全省统一论证的进口产品，包括但不限于进口产品申请理由、采购价格以及采购需求的合法性、合规性。财政部门加强对政府采购进口产品审批，对单位内控手续不全、专家论证意见不明确、提供资料不完整、主管预算单位审查意见不明确等情形的进口产品采购申请及时予以退回。财政部门定期组织开展进口产品采购情况核查，对核查发现的问题应督促采购人进行整改，核查情况通过适当形式予以通报。广东省根据广东省《2021年省级卫生健康机构进口产品目录清单》共列出了46种医疗设备，相比于《关于 2019 年省级卫生健康机构进口产品清单》发布的132种，可采购的进口产品数量骤减。四川省根据四川省发布的《省级2021-2022年政府采购进口产品清单论证意见公示（医疗卫生设备类）》，明确只有59种医疗设备，可直接采购进口产品。除59种医疗设备外，国产优先！部分仪器1.断层DR摄影系统 用于透视造影、DR摄影、长骨拼接、血管介入等检查 国产与进口产品区别:国内DR类产品均为普通拍片功能，无断层功能。 选择进口产品的理由:DR系统在一次扫描下获得连续多层面的高清晰断层图像，应用于骨科解决普通平片检查所难以显示的复杂结构，明确诊断。对于有外固定和金属植入物的部位，可避免伪影，显示细微结构。2.加速器质控设备对直线加速器设备进行准确度控制和校准，是保障加速器安全有效运行的必备设备 国产与进口产品区别:进口产品在测量时稳定性强，不会出现国产产品常出现的读数跳动的问题，可以更为准确的得到检测所需要的数据。而且进口产品的年平均数值的稳定性强，且不会随着年份的推移发生改变，国产产品随着年份的增加稳定性会进一步变得更差。同时，进口产品早操作方便性、安全性、故障率、使用寿命等方面均远优于国产设备。 选择进口产品的理由:进口产品准确度高，运行稳定，为保障放射卫生技术服务检测工作的顺利开展，以及患者检测的成功率、准确性和时效性，建议允许购买进口产品3.全自动核酸检测分析仪 围绕核酸快速自动化检测、基因突变和SNP分析的需求，构建集核酸提取、扩增以及实时荧光检测一体化的新型自动化核酸分析系统，建立一种操作简单、分析速度快、样本使用量低的核酸分析平台，满足生命科学研究、检验检疫和临床检测的需求。 国产与进口产品区别:1)进口设备全自动一体化，对PCR实验室要求低；FFPE切片或血浆可直接上样，不需要提取和扩增，不要额外试剂和耗材，不需要专业的PCR操作人员进行操作，也不存在污染问题。国内同类产品由于涉及实验步骤繁琐，故对PCR实验室条件要求严格，很多医院病理科，分子科或者检验科不具备开展肿瘤分子检测的条件；国产产品需要专业的PCR操作人员，分步进行核酸提取和扩增后再上样进行检测，人力成本较高，试剂耗材较多。 2)进口设备整体检测时间2h左右，检测快速，很短的报告周期能够满足临床紧急的用药需求。国产设备目前检测时间较长（5个工作日），而且存在污染等问题。 3)进口设备只需要常温运输和常温保存，给检测科室代来极大的便利性。国产产品检测试剂大多需要冷链运输，且低温保存，存在需要占地较大的冰箱，物流需要冷链等问题。选择进口产品的理由:进口产品对实验室、操作人员要求较低，且使用成本、检测速度、检测试剂明显优于国产设备 4.基因测序仪 用于测定DNA片段的碱基顺序、种类和定量的仪器。主要应用在人类基因组测序、人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断、法医的亲子鉴定和个体识别、生物工程药物的筛选、动植物杂交育种等方面。 国产与进口产品区别:进口产品在测量速度、稳定性、便利性、准确度等方面明显优于国产设备 选择进口产品的理由:基因测序要求精确度及稳定性较高，国产产品相比于进口产品还有一定差距5.手术动力系统 用于术中需要切割/切开、削磨、钻孔、锯开骨质和其他组织的外科手术 国产与进口产品区别:国产产品的稳定性及持久性相比进口产品差距较大 选择进口产品的理由:手术用器具要求稳定性、持久性高，进口产品更能保障患者安全6.自动化多通道移液工作站 用于从不同来源（EP管、储液槽、孔板及多层板等）到不同目标（6-386孔板、1.5及2 mL EP管、离心管等）的移液操作，移液间距可变，并搭载液面探测，可自动、高效完成样本移液操作，并具备单道移液功能，配置了离心管架和分液器，能够完成样品前处理、液体分装、浓度均一化等工作。 国产与进口产品区别:国产的移液站不可变间距，只能整板加样。而进口产品移液器各通道间距可在一定范围内任意设置，可根据吸液、移液对象自动变换。方便地进行离心管、样本管、深孔板、PCR板、96孔细胞板等实验容器之间的液体转移。而且可适配4、6、8、12、16通道道电动移液器移液，能实现从不同来源（EP管、储液槽、孔板及多层板等）到不同目标（6-386孔板、1.5及2 mL EP管、离心管等）的移液操作,多达10种移液头选项可轻松切换，以满足各种应用对通道数和量程范围的不同需求。 选择进口产品的理由:进口产品还具有加样精度高 、稳定性强、密封性高、扩展性强、紧凑小巧移动方便等优点，能够有效消除操作员之间的变异性和人为错误，增强实验过程的可控性，提高实验准确度。7.全自动动物血常规分析仪 用于动物血液与体液分析检测，包括但不限于大鼠、小鼠、兔、猴等动物。 国产与进口产品区别:1)进口检测速度可达200测试/小时以上，国产设备只能达到60测试/小时； 2)进口产品有相匹配的溯源质控品和校准品，国产仪器暂时不能满足需求； 3)由硬件故障导致结果异常、初检可信度低等情况，进口产品仪器能自动重新检测。而国产动物血常规分析仪暂时不能满足需求。选择进口产品的理由:进口产品能更好的应对大样本数据的快速处理，且能很好的对使用的校准项目进行精准溯源，保证实验数据的溯源性和准确性。 8.全自动凝血分析仪（动物） 用于实验动物凝血检测及分析。 国产与进口产品区别:1)国产产品检测参数不急进口产品广泛，如SD大鼠等实验动物PT、APTT、FIB、D-Dimer、VWF等参数不能全覆盖，不能满足实验室对所有项目的检测需求。 2)国产的凝血分析仪检测通道仅能支持4或者6通道，进口的可以满足16通道。 3)因标本保存有时效性，需大样本量检测，要求处理能力大于200样本/小时，进口仪器可达到≥400测试/小时，而国产用于动物凝血参数检测仪器一般只能达到200测试/小时。4)因实验室结果需要进行组间比较，故需要无中断的连续装载、卸载样本和试剂，保证实验分析的连续性和及时性，国产设备多为半自动，无法满足需求。选择进口产品的理由:进口凝血分析可保证全参数检测项目的进行和快速处理测试样本的能力，可有效提高实验效率及准确性。 9.吹扫捕集装置吹扫捕集是用于从液体或固体样品中分离低沸点的挥发性或半挥发性有机物，具有富集功能，是痕量有机检测的重要前处理方式。国产与进口产品区别:1)捕集管是吹扫捕集装置的重要核心部件，其吸附剂的质量是影响回收率、灵敏度和可捕集物种类的重要因素。国产设备的性能尚存在差距。2)待测物在捕集管的解吸不充分及管路的残留是引起交叉污染的重要原因之一。国产设备在某些化合物的交叉污染控制上尚不能完全满足要求。3)部分样品在吹扫时可能发生起泡现象。高效除泡设备，能够解决样品大量起泡的问题。国产设备尚不能完全满足要求。 选择进口产品的理由:公共卫生实验室利用吹扫捕集装置检测的痕量有机物种类多、含量低、样品基体复杂、数据要求高。因国产设备尚不能完全满足要求，故选择进口产品。 10.热脱附仪 　热脱附仪是用加热和惰性气体吹扫将挥发物从采样管中解吸出来,并在捕集管中富集的一种脱附方法，是痕量有机检测的重要前处理方式。国产与进口产品区别: 1）捕集管是热脱附仪的重要核心部件，其吸附能力是影响回收率、灵敏度和重复性的重要因素。国产设备的性能尚存在差距。2）待测物在捕集管的解吸不充分及管路的残留是引起交叉污染的重要原因之一。国产设备在某些化合物的交叉污染控制上尚不能完全满足要求。3）解吸效率是热脱附仪的重要性能指标，直接影响待测物的回收率。国产设备对部分化合物特别是高沸点化合物的解吸效率尚不能完全满足要求。 选择进口产品的理由:公共卫生实验室利用热脱附仪检测的痕量有机物种类多、含量低、数据要求高。因国产设备尚不能完全满足要求，故选择进口产品。 11.气相色谱多功能进样器 在集成化平台上整合多种进样方式，用于挥发性有机物定性定量分析。国产与进口产品区别: 1）气相色谱多功能进样器可整合液体进样、在线衍生、固相微萃取、液液萃取、顶空进样等多种前处理和进样方式。国产设备在整合功能上不能完全满足要求。 2）气相色谱多功能进样器要求X,Y,Z三轴步进式马达控制精准，不掉瓶、不撞针、重复性好、可靠度高，适合持续性大量样品自动前处理及自动进样分析。国产设备尚不能完全满足要求。 选择进口产品的理由:公共卫生实验室的气相色谱检测方法中涉及多种进样方式，多功能进样平台具有集成优势，大大提升检测便捷性和效率。因国产设备尚不能完全满足要求，故选择进口产品。 12.苏玛罐系统用于采集存储VOCs气体（挥发性有机化合物）的一种空气采样罐及其附属装置，是突发事件应急检测的重要装备。国产与进口产品区别: 1）苏玛罐在采集平均时段样品时，需控制气样进入采样罐的流速，使气体在整个采样期间以等流量进入罐中，对流量均匀性控制要求较高。国产设备尚不能完全满足要求。2）苏玛罐内部的惰性涂层质量对多种VOCs样品空白值、回收率、留样稳定性、控制交叉污染都有重要影响。国产设备成熟度尚不够。 选择进口产品的理由:公共卫生实验室承担有突发事件应急职责。因国产设备尚不能完全满足要求，故选择进口产品。 13.微波消解装置 消解各类样品，是重金属分析的重要前处理手段。国产与进口产品区别: 进口微波消解装置主要具有国内产品尚难以满足的特点：1）可消解大质量样品。 2）可同时消解多种不同性质的样品。 3）可大通量消解。 选择进口产品的理由:公共卫生实验室需要检测食品、化妆品、土壤、生物样品等多种复杂基质中的重金属。因国产设备尚不能完全满足要求，故选择进口产品。 14.顶空进样装置 　通过加热升温使挥发性组分从样品基体中挥发出来，在气液（或气固）两相中达到平衡，直接抽取顶部气体进行色谱分析，是痕量有机检测的重要前处理方式。国产与进口产品区别: 1）控温精度是顶空进样装置的重要性能指标，其对重复性有重要影响。国产设备的性能尚存在差距。 2）待测物在管路的残留是引起交叉污染的重要原因之一。国产设备在某些化合物的交叉污染控制上尚不能完全满足要求。选择进口产品的理由:公共卫生实验室需要检测水、化妆品、土壤、生物样品等多种复杂基质中的挥发性物质。因国产设备尚不能完全满足要求，故选择进口产品。 15.氢气发生器 为气相色谱的火焰离子化检测器（FID）提供氢气。国产与进口产品区别: 进口氢气发生器主要具有国内产品尚难以满足的特点： 1）氢气纯度大于99.999%。 2）气体产气量可大于200mL/min。 3）压力及流量稳定性好。 4）无故障工作时间长。 选择进口产品的理由:因国产设备尚不能完全满足实验要求，故选择进口产品。16.氮气发生器为液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）提供氮气。国产与进口产品区别: 进口氮气发生器主要具有国内产品尚难以满足的特点 1）氮气纯度大于99.5%。 2）气体流量大于30L/min。 3）压力及流量稳定性好。 4）无故障工作时间长。 选择进口产品的理由:因国产设备尚不能完全满足实验要求，故选择进口产品。17.毛细管电泳仪用于微生物实验室PCR核酸产物的分析 国产与进口产品区别:进口产品通量高、检测速度快、检测精度高。 选择进口产品的理由:微生物实验室在分子分型和溯源上对DNA/RNA片段分析有较高精度要求。同时由于分析量大，应急样本及时性要求高，需采用全自动进样系统以减少检验时间，以完成大量样本的分析工作。18.全自动酶免分析系用于献血者标本酶免项目（包括乙肝表面抗原、抗丙肝抗体、抗艾滋抗体、抗梅毒螺旋体抗体）的检测国产与进口产品区别: 1）进口产品即使有当相同模块出现故障时，可以用替代的模块继续进行工作，最大程度保障系统不停机；国产设备的功能模块无法替换，一旦某个功能出现故障会导致整个实验停摆，影响工作效率；2）进口设备孵育系统、试剂耗材成本、洗板、读数分辨率等关键性能指标上具有明显优势。 选择进口产品的理由:目前国内同类产品在技术指标上存在差距，不能满足工作需要。19.大容量冷冻离心机 主要用于制备各类成分血国产与进口产品区别: 国产设备最大容量为6*400ml；设备不具备人机功效，不能自动关门；不平衡容忍度不超过50g。而国外同类产品设备容量大，最大甚至可达16*500ml，极大的提高了成分血制备的效率，避免造成血液浪费；且进口设备具备人机功效，能自动开、关门，可有效降低工作人员，尤其是女性工作人员的劳动强度；进口设备的不平衡耐受度更高，可达125g，可以更有效的保护离心机在不平衡状态下不损害驱动轴；此外，进口设备在腔门开启时压缩机能自动关闭，达到节能降耗。 选择进口产品的理由:目前国内同类产品在技术指标上存在差距，在工作效率、自动化、安全和节能方面较落后，不能满足工作需要。20.釆血秤 用于采集血液时称量、匀浆、终止、报警、记录等国产与进口产品区别: 进口设备具备缓冲防震技术、多重供电保障、采集预设量在小区范围内进行调整和自动标签核对功能等国产设备不具备的功能 选择进口产品的理由:采血称是血液采集的主要精密设备，是血液工作的最前沿，做为血液制备的源头，血液采集质量也直接影响成分血的质量。目前国内产品无法保证在釆血车等移动工作场所长期稳定运行。21.血细胞分离机 将全血进行不同血液成分的分离，以便于根据需要采集其中部分血液成分 国产与进口产品区别:在采集过程中献血者离体血量、抗凝剂管理、献血不良反应、白细胞混入量等方面，进口设备更优于国产设备；进口设备有红细胞预警监测机制，可有效防止红细胞混入现象，更能达到《全血与成分血质量要求（2012版）》。 选择进口产品的理由:进口设备更符合本单位日常机采工作的要求，保证血液质量，确保献血者安全。22.全自动化学发光免疫分析仪 用于血液标本中的传染性指标的抗原、抗体进行定性或定量检测。 国产与进口产品区别:国产设备尚未成熟，进口产品全自动程度和抗原、抗体检测种类及准确度远高度国产设备 选择进口产品的理由:能够提高实验工作效率和准确性。23.细胞计数仪 用于细胞、细菌、藻类、微泡等颗粒的粒度和数目检测，作为生命科学研究的必备仪器，广泛应用于制药、肿瘤研究、细胞生物学、蛋白质组学、疫苗等研究领域。 国产与进口产品区别:进口产品采用的库尔特计数原理在测试过程中不受待测样品颜色、形状、成份和折光率的影响，可准确获得实时的细胞大小、数目、浓度等分布，能更为准确的进行样品数据分析，国产设备目前在功能、性能上无法达到。 选择进口产品的理由:能够提高实验工作效率和准确性。云南省昆明市云南省昆明市财政局印发《关于规范政府采购进口产品核准工作有关事宜的通知》(以下简称《通知》)从五个方面规范政府采购进口产品核准工作：一、明确政府采购进口产品的适用范围。采购人需要采购的产品在中国境内无法获取或者无法以合理的商业条件获取，以及法律法规另有规定确需采购进口产品的，应当在获得财政部门核准后，依法开展政府采购活动。采购单位及其委托的采购代理机构不得歧视国产产品。二、规范采购人采购需求提出及前期市场调研。采购单位对采购需求管理负有主体责任，应对采购需求确定的合法性、合规性、合理性负责，应结合本单位工作实际制定采购需求。采购单位在确定采购需求前应通过咨询、论证等方式开展市场调研，对比市场上具有代表性的三个以上同类产品的性能差异，并形成市场调研报告。三、规范专家组论证活动。通知对如何认定专家组的资格条件、如何组织专家论证、专家组应出具论证意见和论证报告的要求进行了规范。论证专家出具不实论证意见的，将按照有关法律规定追究法律责任。四、规范进口产品核准公示及异议处理。进一步规范进口产品公示媒体及期限、公示的主要内容、异议的处理程序。五、规范核准进口产品需提供的资料。进一步规范昆明市各级采购单位提交进口产品核准申请资料的内容和格式。

“ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”入围具有国际威望的2016德国工业行业奖专业研发活细胞分析产品的德国ibidi公司凭借为细胞迁移和运输研究设计发明的独特的“ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”于2016年4月20日在德国慕尼黑再次入围2016年德国工业行业奖（生物技术领域）。德国工业行业奖是由享有盛誉的“德国工程师协会”赞助下设立的，由“胡贝尔出版社新媒体有限公司”颁发。至今已经连续11年颁发了针对特殊商业、社会、科技、生态效益等领域的工业奖项。这是ibidi公司继 2012年第二次获得这个荣誉。今年，ibidi公司从500名申请者中脱颖而出，入围生物技术领域的前三甲。科研人员可以用高分辨率显微镜直接观察“ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”中培养的单种或多种细胞。其多孔玻璃膜独特的透光性是现今市面上常用的不透明的多聚膜插件不可比拟的。 “ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”具有两个交叉的通道结构，透明的多孔玻璃膜就在这个交叉的位置。细胞可以培养在玻璃膜的两侧。然后用相差或者荧光显微镜就能直接观察。独特的通道设计能够对比在流动剪切力条件下培养的细胞与静置培养的细胞形态，生理状态的差别。“ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”可以在平滑肌细胞与剪切力条件培养的内皮细胞的共培养，动态剪切应力情况下的白细胞的迁徙和癌细胞侵袭等特殊试验中应用。优点总结：（与传统transwell做细胞侵袭实验对比）（1）这个载玻片做细胞侵袭，可以实时观察细胞侵袭的情况，transwell做侵袭的话，只能中断侵袭才能观察了；（2）用这个载玻片还可以选择让细胞从下往上侵袭，平常的transwell实验，细胞都是从上往下的，有可能是重力也造成影响了；（3）这个载玻片还能配合流体环境做侵袭实验，更真实地模拟体内血管或淋巴管的细胞侵袭，transwell是做不到的；（4）还能直接在这些通道里做细胞免疫荧光实验，更方便实验观察。 ibidi公司董事长Dr.Roman Zantl形容ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片是“可以能够直接研究肿瘤细胞是如何进入血液中的。这对于研究如何防止癌症转移有着非比寻常的意义。”他还高兴的表示“ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”入围德国工业行业奖说明了ibidi产品在医学和生物技术领域获得了广泛的认可。Ibidi公司CEO Dr.Valentin Kahl表示“ibidi细胞侵袭带膜通道载玻片”是由BMBF (Bundesministerium für Bildung und Forschung)资助的，是KMU创新计划中“生物光电技术”研究项目的一部分。能够获得如此殊荣，是与合作伙伴密不可分的。关于ibidi公司德国ibidi公司位于德国慕尼黑附近马丁斯雷德，是一个研发专注于细胞功能检测的显微镜相关耗材产品的公司。产品包括经典细胞培养实验耗材和细胞功能性研究（例如，血管生成，趋化，和伤口愈合等）的实验耗材。主要客户是医学、生物学及生物技术、药理学等科研机构，产品销往世界各地的客户。

Nat. Commun.| 胡家志课题组与合作者利用Cas9TX在年龄性黄斑病变小鼠模型中成功实现高效安全的基因编辑CRISPR-Cas9是目前领域内最为常用的基因编辑工具，在基础科研领域以及临床应用上都有着广阔的使用前景。然而Cas9在完成靶向位点突变的同时，还会在脱靶位点进行切割，并会造成染色体易位和染色体大片段缺失等染色体结构异常副产物。除此之外，在以腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）为递送载体的体内基因编辑治疗中，存在着AAV片段高频插入的现象。这些基因编辑中的副产物严重威胁了基因组的稳定性，可能会导致细胞的癌化，为基因编辑的治疗结果带来不确定性。通过抑制Cas9反复切割靶向位点的完美修复产物，胡家志课题组近期发表的Cas9TX可以在CAR- T的改造过程中大幅度降低染色体易位的发生频率（胡家志课题组开发目前最安全的Cas9基因编辑工具变体Cas9TX），但在与临床应用更为密切相关的体内基因编辑场景中，Cas9TX能否有效降低这些副产物的产生仍需要进一步印证。2022年12月22日，北京大学、北大-清华生命科学联合中心胡家志课题组与上海中科院神经所杨辉课题组在Nature Communications上共同发表了题目为Safeguarding genome integrity during gene-editing therapy in a mouse model of age-related macular degeneration的研究论文。在年龄相关性黄斑病变（age-related macular degeneration, AMD)的体内基因编辑治疗模型中，该工作首次定量揭示了CRISPR-Cas9在体内基因编辑过程中染色体易位和腺相关病毒片段插入的发生模式与发生频率，并通过利用该课题组之前开发的Cas9TX变体大幅度减少了这些副产物在体内基因编辑过程中的产生，为CRISPR-Cas9的临床应用提供了重要的指导意义。年龄性黄斑病变是世界范围内导致老年人失明的主要原因之一。其中湿性黄斑病变主要是视网膜后的异常血管增生所导致的。目前以注射拮抗调控血管生成的VEGFA蛋白的小分子或抗体为治疗该疾病的主流手段，但反复注射不但不能保证治疗效率也会对眼部造成局部并发症。近期以CRISPR-Cas9为主的基因编辑技术为治疗该疾病带来了曙光，通过激光照射小鼠眼部造成新生血管入侵视网膜来模拟黄斑病变，研究者们进一步通过Cas9靶向Vegfa，从而一劳永逸地消除新生血管的产生，为治疗该疾病提供了临床的可操作性。利用该课题组开发的全面评估基因编辑工具安全性的高通量测序方法PEM-seq，该工作首先在以双AAV载体包装系统为递送载体的小鼠眼部脉络膜增生编辑模型中（靶向Vegfa位点），发现了体内基因编辑过程中靶向位点和脱靶位点之间，靶向位点和基因组自发产生的DNA双链断裂之间仍然会形成染色体易位（频率接近1%）（图一a）。与此同时，该研究也发现靶向位点上存在着频率高至40%的AAV片段整合（图一b）。更为重要的是，这些副产物在基因编辑后可以在体内稳定存在12周之久，引发了研究者对于这些副产物的担忧（Nucleic Acids Research | 胡家志课题组与合作者追问在体基因编辑的安全性）。随后该工作利用双AAV载体递送Cas9TX靶向小鼠眼部的Vegfa，结果表明Cas9TX不仅能够提高靶向位点的编辑效率，完成对小鼠脉络膜增生模型的治疗，而且还能大幅度消除靶向位点上所产生的染色体易位（图一c），值得一提的是Cas9TX并没有在脱靶位点造成更高的编辑效率。更为重要的是，该工作发现了Cas9TX也可以有效降低AAV片段在靶向位点的整合（图一d），据悉这是领域内首个可以减少AAV片段在基因编辑过程中插入的基因编辑工具，对临床上的应用具有重要的意义。总体而言，该工作不仅表明了Cas9TX可以成功兼容双AAV递送系统用于体内基因编辑，大幅低降低基因编辑过程中的副产物，也说明了DNA损伤修复在体外与体内的相对保守性，以此为出发点进行基因编辑安全性优化的可行性。图一. a. PEM-seq检测在小鼠眼部Vegfa位点Cas9编辑后染色体易位的发生频率。b. PEM-seq检测在小鼠眼部Vegfa位点Cas9编辑后AAV片段插入的频率。c. Cas9TX大幅度降低染色体易位产生的比例。d. Cas9TX大幅度降低AAV片段插入的比例。北京大学、北大-清华生命科学联合中心胡家志研究员和上海中科院神经所杨辉研究员为该论文的共同通讯作者。上海复旦大学附属眼耳鼻喉科医院干眼中心主任洪佳旭医生也为本论文做出了指导。北京大学前沿交叉学院2022届博士研究生尹健行，上海中科院神经所博士后方凯伦，博士后高艳霞为该文章的共同第一作者。北京大学生命科学学院本科生元绍鹏，博士研究生欧丽琼，辛昌昌以及上海辉大公司高级经理吴炜炜与吴伟威研究员对此工作亦有重要贡献。PI简历胡家志北京大学生命科学学院研究员北大-清华生命科学联合中心PI邮箱：hujz(at)pku.edu.cn “ 实验室主页：https://hulab.pku.edu.cn/实验室长期招收对生物信息学和免疫基因组学和感兴趣的研究生和博士后。研究领域：有颌脊椎动物的免疫系统可以有效地抵御病原体的入侵并清除自身的异常细胞，包括癌细胞。其中，适应性免疫系统的淋巴细胞可以产生多样性的抗原受体而特异性识别病原体和异常细胞。淋巴细胞受体包括B细胞受体和T细胞受体，前者的分泌形式即抗体。淋巴细胞介导的获得性免疫在疾病治疗方面具有巨大的应用价值，如单克隆抗体相关药物在肿瘤治疗方面取得了显著成效。本课题组的研究方向集中在免疫基因组学与人类疾病。我们开发了一系列基因组学测序方法用于免疫学方向的研究，可以用于基因编辑工具（以基于细菌免疫系统的CRISPR/Cas为主）的评估、基因组稳定性的检测以及抗体和T细胞受体的测序。我们的研究方向主要集中在：1. 基因编辑工具的安全性评估及改进2. 淋巴细胞的复制与转录及其基因组稳定性维持机制3. 抗体的发育成果过程的系统研究和工程化改造。

高仿生人体器官模型的迫切性长久以来，人们对人体器官在复杂环境中如何形成和发育以及疾病发作后的影响一直充满好奇。然而，目前我们对这些问题的理解主要依赖于传统的细胞培养和动物模型，受到物种差异以及器官结构和功能差异的限制。因此，迫切需要建立高度仿生的人体器官模型，以广泛应用于生物研究、疾病建模、药物筛选和个性化医学等领域。 南通大学的李栋教授团队2024年1月1日在《Theranostics》（影响因子：12.4）杂志上发表了题为“Human organoids-on-chips for biomedical research and applications”的综述。向读者介绍了如何将各种学科与OrgOCs结合，加速转化应用，以及在生物医学研究和应用中OrgOCs所面临的挑战和机遇。 人类器官芯片/人类器官技术/器官芯片的区别人类器官芯片（OOCs）是体外构建的人类微生理系统，通过微流控灌注培养装置（如原代细胞、细胞系和干细胞）复制活体器官的结构和功能单位。OOCs可独立控制或高度耦合多种微环境因素，如动态流体、机械刺激、3D拓扑结构、氧梯度和分隔空间，以模拟人体本地器官的生态位。这些特点可引导细胞形态发生和功能器官的形成。 人类器官技术（HOs）是源自人类多能干细胞（PSCs）或成体干细胞（AdSCs）的3D多细胞组织结构，通过自组装可以重现人体器官的生理结构和功能。PSCs衍生的HOs需要按照干细胞的顺序分化设计原则进行构建，而AdSCs衍生的HOs形成相对简单，无需引导通过胚层。 器官芯片（OrgOCs）是结合HOs和OOCs两项前沿技术的高度仿生体外模型，广泛应用于药物开发、疾病建模和精准医学。 OrgOCs在生物医学应用中的进展 器官发育OrgOCs平台用于人体器官发育的生物学研究。（A）人脑器官芯片揭示了脑部发育过程中的物理机制和内在细胞行为。（B）具有代表性体内样曲线形态和蠕动特征的人结肠肿瘤器官芯片系统。（C）具有类似隐窝的微通道芯片，诱导肠道类器官的形态发生，包括可灌注的迷你肠道管，近似生理空间排列的肠腔，类似隐窝的区域和类似绒毛的结构。该研究证明了器官发育中空间限制的重要性。（D）基于微流体的3D载体在更生理的微环境中促进了胰岛类器官的分化和成熟。（E）在OrgOCs反应器中，流体能够促进脑类器官中的细胞增殖并减少细胞凋亡。 血管化用于生物学研究中血管化的 OrgOCs 平台。（A）血管化胎盘样类器官的形成类似于微流控芯片平台中孕早期人类胎盘发育。（B）间质流动可以扩大内皮祖细胞的内源性库，并增强hiPSCs来源的肾脏类器官的血管形成和成熟。（C） 将功能性神经血管大脑类器官植入芯片上，通过共培养吸附性内皮细胞诱导血管生成。（D） 具有灌注微血管系统的类器官使用可定制的 IFlowPlates 重建了单核细胞浸润到循环系统中结肠类器官的过程。 免疫应答 细胞间通讯OrgOCs平台，用于探索生物学研究中的器官间通讯。（A）结肠活检衍生的肠道类器官芯片显示母乳低聚糖在调节免疫功能和肠道屏障方面的潜在能力。（B） 多类器官芯片平台在循环灌注系统中概括了人肝-胰岛轴。（C） 应用高通量微流控装置中的串联伤口肝脏、胃和肠道类器官模型来评估药物代谢和胆汁酸诱导的调节。 器官芯片的应用 疾病模型1、内源性成分原因2、无机污染物暴露3、病毒感染用于疾病建模的 OrgOCs 平台。（A） 患者来源的胰腺导管类器官芯片可以概括囊性纤维化相关疾病，并检查胰腺导管上皮细胞和胰岛之间的细胞间功能相关性。（B）与游离脂肪酸相比，hiPSCs的肝脏类器官表现出与脂肪性肝炎相关的典型病理特征。（C） 重金属镉暴露可能导致早熟、持久的神经分化和大脑类器官发育中的长期神经毒性。 精准医疗1、药代动力学研究2、药物安全性评价OrgOCs平台，用于评估精准医疗中的药物代谢和安全性。（A）抗癌药物与肠道类器官芯片首过代谢的概括。（B） 允许使用肝-心类器官芯片来探索氯米帕明的肝脏代谢依赖性心脏毒性。 药物筛选用于精准医疗药物筛选的 OrgOCs 平台。（A） 通过与微阵列芯片设备偶联，在传代 0 处生成了数百个由临床标本产生的肺癌类器官。（B）巢式阵列芯片平台培养患者来源的结直肠癌类器官，用于高通量药物筛选。（C）一种用于药敏试验的一站式微流控肺癌类器官培养装置。（D） 一种类器官芯片系统，该系统具有自动化控制器，通过流体连接的面包板与模块化多传感器（例如，物理、生化和光学传感器）单元相结合，用于自动评估类器官在长时间内对药物的治疗反应。（E） 采用基于人类 hiPSC 的视网膜类器官芯片模型在制药环境中测试不同类型 AAV 载体基因治疗的转导效果。 目前，大多数人体器官已经在微流控芯片上重新创建，包括肠、脑、肾、肝和胰岛，具有接近体内器官的生理特性。为了实现多器官的系统相互作用、长期稳定的共培养，将可编程动态流量应用于连接多器官模块的微流控系统，以精确模拟体内血液循环。 OrgOC模型还可以高通量、高仿生性状的方式应用于药物筛选和药敏检测，这在传统的细胞和动物模型中是无法实现的。患者来源的个性化类器官芯片可以模拟患者的合并症并给出特定的药物选择，包括优化的药效、最小的毒性，甚至是最佳的给药途径，以及用于靶向I期临床试验的最佳给药方案。此外，细胞治疗和基因治疗也体现了OrgOC平台的实际应用价值，可以加速疾病治疗的进展。

德国ibidi的ibiPore可以实时观察流动、剪切情况下的细胞侵袭、迁移、细胞相互作用等实验。对实验结果进行观察统计时，不需要将膜取下，也不需要将另一边的细胞擦掉（经常将膜擦破，导致实验失败），可直接将μ-Slide放于显微镜下观察统计。细胞可以通过两种方式，选择贴壁于氮化硅膜的上下两侧。可以把细胞种植在膜下边，避免自由落体的说法，大大提高了实验的准确性。21世纪注定是一个生命科学的世纪，科研工作者们如果想在这个世纪去决胜，能做到一点，不仅要好的idea，领先的技术，更需要得心应手的好工具。所谓工欲善其事必先利其器，今天为大家介绍德国ibidi的μ-Slide ibipore SiN (图1), 一款具有多孔氮化硅膜的μ-Slide载玻片，可用于实时观察流动、剪切力条件下的细胞侵袭、迁移以及细胞相互作用的可视化的“ transwell ”，更多应用请参阅文中（Intended Use的相关内容）。图1. ibipore及ibipore SiN氮化硅膜培养细胞的染色结果。图片背景为在ibipore氮化硅膜上培养细胞的荧光染色结果，规则排布的白色圆点为氮化硅膜的孔隙ibipore有上下两个独立的通道（见图2），两个通道 overlap 的区域由一个孔径大小均一的氮化硅膜隔离开（见图3）。两个通道可以分别培养细胞，通过两种方式，细胞可以贴壁于氮化硅膜的上下两侧。在细胞侵袭实验中，普通的transwell只能将细胞培养在上侧，这样所得到的实验结果并不能明确的说明是由于重力作用还是侵袭能力本身造成的。而ibipore考虑到这一因素，建议实验者在氮化硅膜的下侧进行细胞培养，检测细胞向上侧通道进行迁移的能力，进而巧妙的排除了重力作用对侵袭实验的影响。配合ibidi流体剪切力系统以及加热孵育系统，可以在流动、剪切力条件下实时的观察细胞的侵袭以及迁移等实验。德国ibidi公司为满足不同实验的需求设计了不同孔径的氮化硅膜（见图4）。ibipore与传统的transwell实验最大区别有三点：①. ibipore可以在上下两个通道中培养细胞，这样可以观察细胞向上的侵袭情况，排除以往实验中重力作用的影响；②. ibipore中间的氮化硅膜具有良好的光学特性，可以实时成像观察侵袭情况，也可以进行免疫荧光染色实验；③. ibipore可以配合ibidi流体剪切力系统，观察淋巴细胞等在流动状态下的侵袭情况。ibipore产品介绍ibipore产品特点：* 透过薄而多孔的薄膜获得卓越的光学性能* 有着广泛的应用，细胞可完全粘附到顶部-基底* 对于不同细胞类型有多种孔径大小可以选择应用：1.流动状态下跨内皮细胞迁移2.2D或3D凝胶内细胞层的共培养和传输分析3.顶部-基底细胞极性分析4.顶部-基底梯度的细胞屏障模型分析5.细胞迁移分析（例如，用于研究肿瘤侵袭或转移）在μ-Slide ibiPore IV型胶原涂层3μm孔径中人类内皮细胞的免疫荧光染色，相位对比度、DAPI（蓝色）、VE钙粘蛋白（绿色）和F肌动蛋白（红色）的叠加图像。技术特点：1.SiMPore的微孔氮化硅膜2.中间具有多孔光学膜的跨通道结构3.优异的光学性能，堪比盖玻片4.孔径大小0.5μm，3μm，5μm，8μm供选择5.中间膜0.4µ m（400 nm）6.使用工作距离0.5mm的物镜7.与ibidi泵系统（流体剪切力系统）完全兼容8.下部通道中明确的剪切力和剪切速率范围µ -Slide ibiPore SiN工作原理µ -Slide ibiPore SiN由插入两个通道之间的水平多孔膜组成。上部通道是膜上方的静态储液池。下部通道是灌注通道，用于对附着在膜上的细胞施加限定的剪切应力。上部通道和下部通道仅通过隔膜彼此连通。图2. ibipore组成示意图多孔膜由氮化硅（SiN）制成，这种材料具有非常高的化学和机械稳健性。400nm厚的氮化硅膜非常适合成像和显微镜观察，没有任何自发荧光或透明度问题（如玻璃）。SiN材料可以直接用于贴壁细胞培养，也可以选择用ECM蛋白包被。应用建议：孔径 & 孔密度什么是孔密度孔密度是指膜的空隙体积分数。是孔隙的体积除以膜的总体积。下面的图形为采用相同的放大倍数。图3. 不同孔径的氮化硅膜不同应用的建议孔径：不同的细胞大小和直径不同，根据具体实验请选择不同孔径图 4. 为不同应用推荐的不同孔径的氮化硅膜Intended Use经证实的应用这些应用已由ibidi研发团队或者我们的用户进行过试验。Endothelial Barrier Assays内皮屏障分析在膜一侧培养单层细胞。细胞可以在静止或者流动剪切力条件下培养。Co-Culture and Cell Barrier Assay共培养和细胞屏障分析在膜的两侧分别培养单层细胞。通过这种方法可以进行信号传递、共培养以及迁移实验（例如，分析药物通过上皮或内皮屏障的传递）。Apical-Basal Cell Polarity Assays顶端-?基底端细胞极性分析3D凝胶基质中的化学因子可以导向在膜另一侧培养的单层细胞的极性发生。Potential Use潜在应用以下示例将讲述该产品进一步的潜在应用。ibidi仍需在内部测试这些应用，因此我们无法提供特定的实验方案。但是，从技术角度来看，这些应用应该是可行的。Trans-Membrane Migration in 2D/2D跨膜迁移在膜的一侧培养单层细胞。可以观察悬浮的白细胞在流动状态下的滚动、粘附以及侵袭情况。Cell Transport in a 3D Gel Matrix细胞在3D凝胶基质中的传递3D凝胶基质中的细胞迁移：在流动状态下，观察白细胞的滚动、粘附以及向3D凝胶基质中肿瘤细胞方向的迁移情况。Application Examples 应用实例MDCK和NIH-3T3细胞的相差显微镜观察Madin-Darby犬肾（MDCK，左）和NIH-3T3（右）细胞在μ-Slide ibiPore SiN，孔径0.5μm的玻片中，无蛋白质包被。接种后，将细胞在静态条件下在培养箱中保持20小时。相差显微镜，4倍物镜。请注意，这张图像中的中心多孔区域看起来更暗，因为0.5μm的孔隙无法用低分辨率物镜分辨。流动条件下HUVECS的相差显微观察人脐静脉上皮细胞（HUVEC）在μ-Slide ibiPore SiN中，孔径3μm的玻片中，有纤连蛋白包被。将细胞接种并在具有ibidi泵系统/流体剪切力系统的流动条件（10达因/cm2）下在培养箱中保持12小时。固定后的相位对比显微镜，10倍物镜。流动下HUVECs F肌动蛋白细胞骨架的荧光显微镜观察人脐静脉上皮细胞（HUVEC）在μ-Slide ibiPore SiN，孔径5μm玻片中的免疫荧光染色，有纤连蛋白包被。将细胞接种并在具有ibidi泵系统/流体剪切力系统的流动条件（10达因/cm2）下在培养箱中保持12小时。绿色：肌动蛋白（鬼笔肽），蓝色：细胞核（DAPI）。荧光显微镜，20倍物镜。选择指南：ibidi跨膜分析实验解决方案参考文献：Salvermoser, Melanie, et al. "Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation." Blood, The Journal of the American Society of Hematology 131.17 (2018): 1887-1898. 10.1182/blood-2017-10-811851Rohwedder, Ina, et al. "Src family kinase-mediated vesicle trafficking is critical for neutrophil basement membrane penetration." Haematologica (2019). 10.3324/haematol.2019.225722Non-Recommended Applications不建议的应用因技术原因，本产品不适用于以下应用，应避免使用.本产品不适用于：1.上通道灌流2.两个通道的灌流3.跨膜流动4.筛选应用订购信息

1. ADAM能否用于细胞增殖实验分析？ 答：ADAM细胞活力分析与计数仪的专长在于能够进行精确的细胞计数和活力分析。对于在24孔板中进行的实验，如果计数的次数不是太多，就可以考虑使用ADAM来做；而对于那些需要用96孔板来做通量分析的实验，因为每孔细胞的数量太小，细胞计数法已不再适用，因此，还是建议使用酶标仪来做。 如，2012发表的一篇文章《Ethanol extract of Gleditsia sinensis thorn suppresses angiogenesis in vitro and in vivo》使用ADAM做了皂角刺的乙醇提取物对人脐静脉内皮细胞的增殖影响分析。 再如，2012发表的另一篇文章《Metronomic Ceramide Analogs Inhibit Angiogenesis in Pancreatic Cancer through Up-regulation of Caveolin-1 and Thrombospondin-1 and Down regulation of Cyclin D1》则使用ADAM做了四种不同类型的神经酰胺类似物抗肿瘤药物分别对两个人内皮细胞系和两个胰腺癌细胞系细胞的增殖影响分析。2．ADAM能否用于其它非哺乳类细胞的计数？ 答：ADAM细胞活力分析与计数仪通常用于哺乳类动物细胞的计数，当然您也可以尝试用在其它非哺乳类细胞上面。 如，2012年发表的一篇文章《Osteoblast and osteoclast behavior in zebrafish cultured scales》则首次报道了使用ADAM计数斑马鱼鱼鳞细胞，为ADAM的应用范围作出了积极的拓展。（斑马鱼鱼鳞细胞的制备：取成年斑马鱼（6月龄）的体侧鱼鳞，用胶原酶消化后，收集鱼鳞细胞。）更多产品信息请浏览：http://www.biomart.cn/infosupply/10050648.htm

4月8日，国际学术期刊Circulation Research(《循环研究》)在线发表了中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所周斌研究组的最新研究成果“Endocardium minimally contributes to coronary endothelium in the embryonic ventricular free walls”。该研究利用遗传谱系示踪技术发现胚胎期心脏壁上的冠状血管起源于静脉窦而非心室心内膜，从而揭示了心血管研究领域内长期存在的争论性问题，为研究冠状血管的发生发育与再生治疗提供了理论基础。　　心血管领域关于胚胎期冠状血管的起源一直存在争论，静脉窦和心室心内膜是最主要也是最具争议的两个起源。周斌组通过利用传统的心内膜标记基因Nfatc1构建了Nfatc1-Cre等工具小鼠，并对心室心内膜进行了谱系示踪实验。研究发现，虽然Nfatc1-Cre可以标记上大量冠状血管，但Nfatc1基因并不仅仅表达在心室心内膜，还表达在胚胎早期的静脉窦内皮细胞中。由此，研究人员对冠状血管的心室心内膜起源提出了质疑。　　为了对心室心内膜实现特异性标记，周斌组等研究人员利用单细胞实时定量PCR、原位杂交实验等技术，发现并鉴定了特异性表达在心室心内膜的基因Npr3。通过构建Npr3-CreER等工具小鼠，对心室心内膜开展谱系示踪实验发现，心室心内膜很少贡献到胚胎期冠状血管。通过多种工具小鼠实验，进一步证实静脉窦内皮细胞很可能是胚胎期冠状血管的主要来源。　　心内膜细胞和冠状血管内皮细胞虽都是内皮细胞，但两者的基因表达存在很大差异。在该课题中，研究人员还利用多种工具小鼠，分离出了胚胎期心内膜细胞和冠状血管内皮细胞，通过RNA-sequencing实验发现并鉴定出了一系列特异性表达在心内膜细胞或冠状血管内皮细胞上的基因，这对心血管领域内的后续研究具有重要意义。　　该课题由张辉在研究员周斌的指导下完成，并得到了合作者斯坦福大学教授Sean M. Wu和南加州大学教授Henry M. Sucov的帮助。该工作得到了中科院、国家科技部、基金委、中组部、上海市科委等经费支持。 文章链接心内膜来源的细胞（红色）很少形成胚胎期心脏壁的冠状血管（绿色）。蓝色为细胞核。

近日研究发现，药理学家已经成功地绘制出心肌细胞的表观基因组。他们希望这一发现引起有关先天性心脏病和慢性心力衰竭的新见解。科学家们在《自然通讯》杂志上发表了相关内容。表观基因组是表观遗传机制的总体，表观遗传机制决定细胞中哪些基因是活跃的，哪些基因是不活跃的。内部或环境条件的变化，如营养、压力、或药物，可以留下表观遗传模式。这样的机制在癌症的发展过程中发挥重要作用，但它对心脏病的意义还不太为人所知。中文名称：人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human mucosae associated epithelia chemokine,MEC ELISAkit中文名称：人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family 中文名称：人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascuoar endothelial cell growth factor 中文名称：人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascuoar endothelial cell growth factor 中文名称：人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D 中文名称：人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C 中文名称：人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B 中文名称：人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISAkit 中文名称：人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 中文名称：人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis 中文名称：人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human tumor necrosis factor-related apoptosis-中文名称：人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human tumor necrosis factor-related apoptosis-中文名称：人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human tumor necrosis factor-related apoptosis-中文名称：人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISAkit 中文名称：人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISAkit 中文名称：人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ 中文名称：人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ中文名称：人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISAkit 中文名称：人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human transforming growth factor α,TGF-α ELISAkit中文名称：人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β 中文名称：人干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISAkit 中文名称：人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Stem cell factor/mast cell growth 中文名称：人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand,sCD40L ELISAkit 中文名称：人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISAkit 中文名称：人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human regulated on activation in normal T-cell 中文名称：人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISAkit 中文名称：人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISAkit 中文名称：人神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Neurotrophin 4,NT-4 ELISAkit 中文名称：人的神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒价格96t/48t英文名称：Human Nerve growth factor,NGF ELISAkit 心脏在人出生和发育后起着无可替代的作用。它是胚胎发育形成时的第一个器官，并不断用氧气和营养供应着整个身体所需。心肌细胞的细胞核承担着控制基因表达过程中的中央功能。Ralf Gilsbach博士 和Lutz Hein教授领导的研究小组现在已经开发出一种新颖的方法，他们分离心脏组织中不同类型细胞的心肌细胞的细胞核。科学家们应用下一代DNA测序的方法分离创建高分辨率的DNA甲基化图像的细胞核，该细胞核调整基因活性和所有基因的表观遗传标志一样的最重要的表观遗传机制。这使他们确定在出生过程中打开心脏基因程序的表观遗传开关会引起慢性心脏衰竭。目前研究人员想在微小的组织切片活检中进行表观遗传分析，比如在心导管检查中进行分析

[报告简介]单细胞粘附力作为生物机械学分支的重要组成部分，是细胞与外周相互作用的直观体现，能够有效的反映出细胞与基质或细胞之间相互作用能力。细胞与基质之间的作用力十分微小，一般都在nN别，过去通常使用原子力显微镜才能够进行测量。但是原子力显微镜方案往往具有通量低，操作繁琐等问题，使得单细胞力谱的研究非常繁琐。基于此，Cytosurge推出的全新多功能单细胞显微操作FluidFM技术给细胞力谱测量带来了新的希望。该技术结合了的原子力显微镜探测技术与微流体控制系统，能够直接通过使用中空的原子力探针将细胞通过负压抓取在探针表面，并不需要激活细胞的任何通路信号，为粘附力的测量带来了大的优势。一方面，这种方法能够提供远比蛋白结合牢固的多的粘附力，能够将细胞牢固的固定在探针上并且无需包被探针。另一方面，由于没有生物化学处理，这种方法不会改变任何细胞表面的通路，从而能够得到接近细胞原生的数据。该系统具备高度自动化，能够快速，全自动的完成力学的测定，让单细胞力谱研究变得十分容易。本报告将介绍FluidFM单细胞显微操作技术的原理和发展，并结合多篇发表在期刊Nature、Cell、Bioactive Materials等上的近科研成果，深入阐述这种技术在单细胞力谱测量方面的新进展。[直播入口]请扫描下方二维码进入FluidFM单细胞显微操作技术群，届时会在微信群中实时更新直播入口，无需注册！扫码进群，即刻获取直播链接，无需注册！[报告时间]05月25日 下午15:00-16:00 [主讲人介绍]Tamás Gerecsei 亚太区席应用科学家，高FluidFM解决方案工程师，Cytosurge AGTamás是一位生物物理学家，毕业于Etvs Loránd（ELTE罗兰大学）。 在与FluidFM在学术环境中合作多年后，他加入了Cytosurge公司，成为了一名训练有素的微纳米系统工程师。在Cytosurge AG，Tamás不断推动并拓展FluidFM技术的应用边界，并使FluidFM技术应用于各地研究人员的课题中。您可以经常发现他在各种专业的学术会议上传播关于Cytosurge和FluidFM技术的信息。 郭亚茹 北京大学口腔医院，口腔医学中心，获中国博士后科学基金，并入选北京大学医学部 2021年博雅博士后项目，在Advanced functional materials、Bioactive Materials、Journal of dental research等杂志上以作者或共同作者的身份发表5篇。 2021年，在Bioactive Materials发表了题为：Matrix stiffness modulates tip cell formation through the p-PXN-Rac1-YAP signaling axis的研究文章，报道了基质硬度通过p-PXN-Rac1-YAP信号轴调节细胞形成，这项工作不仅有助于在组织工程和再生医学中寻找佳材料，也为肿瘤治疗和病理性血管再生提供了新的治疗策略。在生物材料设计和治疗一些病理情况方面具有特殊意义。本实验研究人员采用了多功能单细胞显微操作系统——FluidFM技术，实现了单个细胞的分离，单个细胞粘附力的测量。 [原理&应用简介]FluidFM技术如何测定细胞粘附力？众所周知，细胞在基质上进行单层培养时，吸附在基质表面时主要会产生两种不同类型的力，一种是细胞与基质之间的粘附力，另一种是细胞与细胞之间的粘附力。因此对于细胞粘附力来说，单个细胞的粘附力就是细胞与基质之间的作用力。而单层细胞的细胞粘附力则是细胞之间相互作用力和细胞基质与细胞之间作用力之和。如下图所示：因此只要同时测定单个细胞粘附力即可得到细胞与基质之间的相互作用力，而细胞间的相互作用力则可以通过同时测量单层细胞的细胞粘附力和单个细胞的粘附力做差得到，如下公式所示：Force cell-cell ≌ Force Monolayer – Force Indiv.cellFluidFM测量力学步骤与一般的原子力显微镜十分类似，但是操作却远比原子力显微镜简单，这得益于FluidFM有的中空探针。这种探针无需像普通原子力探针一样对探针进行修饰或者将细胞提前粘连在探针上，可以直接在液体中原位抓取细胞，完成粘附力测定，并且在测量后探针仍然可以继续进行测试，并且无需对探针进行更换或再修饰。FluidFM技术测量单细胞力谱的基本流程。仅需操作鼠标系统即可自动完成对细胞的抓取和粘附力的测量。此外FluidFM系统会自动记录探针运动轨迹和力学曲线，如上图中所示当探针开始靠近细胞后，探针表面开始出现压力变化，当系统达到设定力学值后系统会自动停止下降并开始施加负压抓住细胞。随着探针开始上升，细胞给予探针的拉力随之增高，并逐渐达到临界，随后细胞脱离基质，探针受力趋近于零，而这一过程中探针受力的大值即为细胞粘附力。FluidFM技术测量HeLa细胞核CHO细胞的粘附力。能够高通量测量单细胞粘附力谱FluidFM测量粘附力十分智能化，仅需5分钟即可完成单个细胞的粘附力测定，一天可完成上百个细胞的测量，能够大幅度提升单细胞力谱测量的通量，让单细胞力谱研究变得简单、快速、高通量。 应用举例一：FluidFM技术测定衰老内皮细胞的力谱内皮细胞衰老导致细胞表型的改变与心血管疾病有着密切关系。随着细胞的衰老，细胞的粘附力等机械属性会有很大改变，因此对于细胞粘附力的研究将有助于理解细胞衰老的变化。Nafsika Chala等人利用FluidFM技术对血管内皮细胞与基底之间的粘附力进行研究发现，衰老的细胞与正常细胞存在着nN别粘附力差异。如下图所示：FluidFM技术用于衰老与正常细胞的单细胞粘附力测定。对比衰老小、大和正常细胞的细胞尺寸（a）、细胞粘附力（b）和细胞周长（c）及单细胞粘附力/面积（e）和单细胞粘附力/周长（f）的变化。研究者认为，衰老内皮细胞的粘附力增加是与细胞的粘着斑增加有关，表明衰老细胞能够加强与基质的相互作用从而防止内皮剥脱，但是受制于血流的影响这种能力受到了很大限制。 应用举例二：FluidFM揭示应力依赖性酵母交配中的分子相互作用性凝集素是芽殖酵母酿酒酵母介导细胞聚集交配的关键蛋白。交配细胞表达的互补凝集素类“a”型和“α”型的结合是促进细胞的凝集和融合的关键。Marion Mathelié-Guinlet等通过测量“a”型和“α”型结合的单个特定键的强度（~100 pN），发现延长细胞间的接触能够大地增加了交配细胞间的粘附力，而这种增强可能是由于凝集素的表达。FluidFM技术用于酵母属间交配过程单细胞力谱测量。MATa与MATα相互作用的示意图（a）和Fluid测量细胞间相互作用示意图（b）及测量结果（c）；用DTT和DEPC药物刺激研究二硫键和His273对粘附的影响（d）、其示机制意图（e）和无粘附、DTT和DEPC粘附发生的概率（f）；以及物理应力增强MATa和MATα细胞之间的粘合力（g）、发生频率（h）及破裂长度（i）。此外，研究组发现凝集素二硫键在粘附过程中起到了关键作用，而这一作用主要来自于α-凝集素的组氨酸残基His273。更为有趣的是，作者发现机械张力增强了相互作用的强度，这可能是由于激诱导凝集素构象从弱结合折叠状态转换成强绑定伸展状态导致。这项研究很好地展现了一种理解控制酵母性别的复杂机制的可能方法。 总结 细胞粘附力测定在细胞生命科学研究中起着至关重要的作用，然而传统手段中有着各种各样的局限性，主要原因是缺乏一种能够有效抓取细胞并进行力学测定的手段。现如今FluidFM技术在细胞粘附力测定中的使用，使得研究者们有了一种能够有效、低损的方式抓取细胞，配合原子力显微镜的测量的特性，真正意义上做到、无损、快速的测量单细胞粘附力，帮助研究者寻找细胞粘附力与细胞生命发展、肿瘤细胞转移之间的关系。

约翰霍普金斯大学的研究者开发出了一种方法，能将人体干细胞转变为视网膜神经细胞，这是一种位于视网膜内能将视觉信号传递给大脑的神经细胞。这类细胞的死亡或者紊乱能引起视力丧失，譬如青光眼和多发性硬化症（MS）。“我们的研究不仅让人们更深入的了解了视神经的生物学功能，也为开发防治视力疾病的药物提供了细胞模型，”研究者Donald Zack博士表示，他是约翰霍普金斯大学医学院的眼科教授。“并且，这也有利于开发细胞移植方法来来恢复青光眼或者MS患者的视力。”整个实验的详细过程发表于《科技报告》杂志上，通过修饰一系列的人体胚胎干细胞使其具有荧光特性，以区别视网膜神经细胞，然后使用此类细胞来区分生成的细胞。研究者们使用一种叫做CRISPR-Cas9的基因组编辑技术，向干细胞DNA中插入了荧光蛋白基因。这种红色的荧光蛋白只有在另一个基因BRN3B (POU4F2)表达的情况下才会表达。BRN3B通过成熟的视网膜神经细胞表达，所以一旦干细胞变成了视网膜神经细胞，它就会在显微镜下显红色。接下来，他们运用荧光激活细胞筛选法来分离纯化新生成的视网膜神经细胞。Zack表示，新生成的细胞表现出了与自然生成的视网膜神经细胞一样的生物学和物理特性。研究者也发现，在实验的第一天添加一种叫做毛喉素的化学物质，有助于提高视网膜神经细胞的生成效率。研究者提醒到，毛喉素广泛用于减肥和肌肉塑形，也常作为中药治疗各种紊乱，但是对于防治视力损失和其它一些紊乱并不一定安全有效。“在培养的第30天，显微镜下能看到明显的成簇的荧光细胞，”首席研究者Valentin Sluch博士表示，他以前是霍普金斯大学生物化学、细胞分子生物系的学生，现在任职于诺华公司。Sluch在加入诺华之前就完成了该研究。“第一次成功的时候我很高兴，”Sluch说道。“我几乎跳了起来，然后跑去告诉我一个同事。就好像马上就能分离出细胞进行研究一样，这在以前是不可能的。”“我们知道，这仅仅是个开始，”Zack补充道。在随后的研究中，他的实验室旨在找出其它与视神经细胞生存和功能相关的基因。“我们希望这些细胞能为治疗青光眼和其它类型的视神经疾病提供新的方法。”为了能够利用这些细胞治疗MS，Zack正与Peter Calabresi合作，他是霍普金斯大学多发性硬化症研究中心的主管、神经病学教授。

目前科学家对人类细胞如何互相作用以组成不同组织与器官的认识仍然十分有限。近年来，一系列单细胞测序的研究工作揭示了正常组织与疾病状态下的单细胞图谱，描绘了组织中多种细胞类型及其丰度与互作，但这些工作往往局限于单一器官。系统性地比较多种组织间的细胞类型及其转录组的异同，有助于科学家理解器官特异性的细胞状态分化。2022年5月12日，Science杂志在线发表了Tabula Sapiens Consortium、Eraslan、Domínguez Conde、Suo等研究人员报道的4篇跨组织人类单细胞图谱的研究，共涉及来自68位捐献者的30余种组织类型，超过100万单细胞，涵盖500种以上细胞类型。北京大学张泽民课题组受邀于Science同期发表Perspective观点文章，对以上研究进行了总结，并对将来单细胞测序技术在疾病研究与药物研发中的应用进行了展望。跨组织单细胞测序揭示了组织间保守的细胞特征。Eraslan等人通过比较多种器官中的巨噬细胞，发现了保守的巨噬细胞发育路径，即monocyte前体在组织中发育为高表达HLAII、行使免疫功能的巨噬细胞类群，与高表达LYVE1、行使血管支持与免疫细胞浸润抑制功能的巨噬细胞类群。跨组织单细胞测序发现了组织特异性的细胞状态。记忆T细胞是经过抗原刺激后的T细胞，Domínguez Conde等人发现了三类CD8记忆T细胞亚型，分别为分布在血液丰富组织中的TEM/EMRA细胞，分布在肠道中的TRM细胞，以及主要分布在脾脏与骨髓当中的TRM/EM细胞，这些T细胞亚型各自特异表达的细胞因子受体可能是形成组织差异性分布的机制。对组织间细胞构成的比较识别了稀有的细胞类型。Tabula Sapiens Consortium发现来自肺、心脏、子宫、肝脏、胰腺、脂肪、肌肉等组织的内皮细胞有着各自独特的转录组特征，提示了高度组织适应的功能。同时胸腺、血管、前列腺、眼球来源的内皮细胞更为相似。泛组织研究的方法发现了心脏内皮细胞的特异性marker SLC14A1，提示了心脏内皮细胞可能的适应性代谢功能。同时，Eraslan等人发现了稀有的细胞类型，包括前列腺中的神经内分泌细胞与食管中的肠系神经。跨组织单细胞图谱同时提示了疾病相关的细胞类型。Eraslan等人以肌肉疾病为例研究了单基因遗传病中的潜在致病细胞类型。研究发现在一种影响神经-肌肉细胞信号传递的疾病中，仅神经与肌肉连接处的肌肉细胞富集该类疾病的相关基因。同时，对受体-配体进行的分析发现细胞间互作失调是肌肉疾病的成因之一。例如在一种致死性的肌肉疾病中，ERBB3突变会导致肌肉细胞与施旺细胞（一种生成神经元旁髓鞘的细胞类型）的互作失调。这一系列跨组织单细胞测序数据集同时为药物副作用和安全性研究提供了重要的参考。虽然新药的分子靶向性不断提高，但全身系统性的给药仍然是最主流的方式，使得药物副反应成为重要的临床问题。对这一系列跨人类组织的单细胞数据集进行基因表达查询将大大助力于新药研发的毒性预测，将毒副作用识别在人体试验之前。本期Science发表的四项跨组织单细胞测序研究代表了构建综合性人类细胞图谱的重要里程碑。将来的研究有必要在更大队列的人群中进行探索与验证。同时，将跨组织的研究方法应用于疾病研究十分重要，例如肿瘤。理解组织保守性与组织特异性的肿瘤发生过程对开发泛癌种与癌症类型特异的肿瘤药物至关重要。例如，对肿瘤免疫的认识促进了靶向PD1抗体药物在多种癌症类型中的成功。近年来张泽民课题组报道了一系列泛癌种的髓系细胞与T细胞单细胞测序研究，这一系列研究方法适合被推广至更全面的细胞类型和患者队列，并最终使科学家在单个基因、细胞、组织与表型层面系统性地理解疾病与生物学过程。

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人细胞周期素D1(Cyclin-D1)Elisa试剂盒人内皮抑素(ES)Elisa试剂盒人铁蛋白(FE)Elisa试剂盒人微量转铁蛋白(MTF)Elisa试剂盒人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)Elisa试剂盒人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)Elisa试剂盒人组织多肽抗原(TPA)Elisa试剂盒人肺癌标志物Elisa试剂盒人胃癌标志物Elisa试剂盒

前言人类严重急性呼吸窘迫综合征冠状病毒(SARS-CoV-2) 感染会导致多种临床表现，从无症状疾病到急性呼吸窘迫综合征 (ARDS) 和多器官衰竭。除了病毒对呼吸系统和其他器官的直接损伤外，越来越多的证据表明，由 SARS-CoV-2 感染引起的免疫反应有助于冠状病毒病 (COVID-19) 的病理生理学，尤其是在严重的疾病过程中。CD4+ T 辅助细胞和 CD8+细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 都有助于控制呼吸道病毒感染。T 细胞免疫反应与 COVID-19 期间疾病结果之间存在复杂的关系。微环境中存在的其他因素可能会影响 T 细胞反应的质量，从而影响病理学。因此，重要的是确定哪些 T 细胞亚群具有致病作用？2022年02月，德国柏林夏里特医学院研究团队在 Cell期刊（IF：66.850）发表了题为 &ldquo Complement activation induces excessive T cell cytotoxicity in severe COVID-19&rdquo 的研究成果，采用单细胞蛋白质组学(CyTOF)和单细胞转录组学研究方法，评估COVID-19重度过程中致病T细胞的功能和诱导信号，发现了患者体内的补体激活可使其T细胞过度毒性。表明T细胞毒性加剧和补体激活使得COVID-19患者患重度疾病或死亡的风险增大。研究背景本篇作者将单细胞蛋白质组学和转录组学与机制研究相结合，揭示 T 细胞区室的改变及它们的上游信号和功能相关性，解释了在严重 COVID-19 中观察到的重要免疫病理学特征。大规模细胞术（飞行时间细胞术 [CyTOF]）和单细胞 RNA-seq (scRNA-seq) 结合基于 VDJ 测序 (VDJ-seq) 的 T 细胞克隆型鉴定用于确定 COVID-19 和严重程度-T细胞区室的特异性改变。作者描述了 C3a 驱动对COVID-19 重症患者的活化 CD16 表达细胞的诱导。这些 T 细胞表现出增加的免疫复合物介导的、不依赖于 TCR 的细胞毒性，导致肺内皮细胞激活和释放趋化因子。这种机制可能导致 COVID-19 患者出现严重的肺损伤和内皮炎。研究思路研究结果1.严重的 COVID-19 中表达CD4 +、CD8 + TCRab +和 TCRgd + T 细胞作者对急性和恢复期的轻度和重度 COVID-19 患者、患有其他急性呼吸道感染（流感样疾病）的患者以及慢性感染人类免疫缺陷病毒 (HIV) 或乙型肝炎 (HBV) 和对照组（图1A）。为了进一步探究 T 细胞空间，将获得的 T 细胞（CD45 + CD3 +CD19 - CD15 -）预先门控到 CD4+T 辅助细胞（CD3 +，CD8 - TCRgd -），CD8 +CTLs（CD3 +，CD8 + TCRgd - ) 和 TCRgd + (CD3 - , CD8 - TCRgd + ) 细胞使用 29 种表面抗原标记。对来自对照、FLI、HIV、HBV 和急性 COVID-19 的样本进行无监督聚类分析，对预先门控的 T 辅助细胞、CTL 和 TCRgd 进行分区T 细胞分别分为 19、15 和 14 个单独的细胞簇（图 1 B-1D）。来自轻度或重度 COVID-19 患者的大部分细胞在统一流形逼近和降维投影 (UMAP) 空间中与其他患者组或对照组的细胞明显分离（图 1B）。与其他组相比，轻度和重度 COVID-19 患者的簇 25 T 细胞（CD8 + CD38 hi HLA-DR +Ki67 +）的比例增加（图1D 和 1E）。重症 COVID-19 的进一步特征是簇 26 T 细胞（CD8 +，高度活化的 NKT 样细胞）的丰度增加，也表达高水平的 CCR6 和 CD16。图1 | HLA-DR hi CD38 hi高度活化但也表达 CD16 的 CD4 +和 CD8 + T 细胞在重症 COVID-19 中的积累2.单细胞转录组学揭示重症 COVID-19 中 T 细胞向高细胞毒性和脱粒潜力转变为了获得有关 COVID-19 和严重程度特异性 T 细胞簇的功能信息，作者对来自急性感染和恢复期轻度和重度 COVID 的外周血单核细胞 (PBMC) 样本以及纯化的表达 CD38 的 T 细胞进行了单细胞转录组scRNA-seq 分析，并对齐 CyTOF 和 scRNA-seq T 细胞簇，得到了 17 个簇（图 2A和2B)。与 FLI 或 HBV 患者以及对照组相比，COVID-19 患者中属于第 7、8 和 10 组的 T 细胞比例更高（图 2D 和 2E)。作者观察到其他具有FCGR3A表达的 T 细胞簇（簇 9、11、12 和 13）。接下来，作者对集群 7、8、9 和 10 进行了基因本体论 (GO) 富集分析，比较了轻度和重度 COVID-19 T 细胞（图 2F）。作者观察到重症 COVID-19 T 细胞脱粒相关基因的特定富集，接着对选择性富集通过基因集富集分析进行基因验证。最后，对来自队列的样本进行的单细胞转录组学scRNA-seq 分析支持了作者在重症 COVID-19 的主要 T 细胞区室中发现了一部分活化的 CD16+T 细胞，并确定了与细胞毒性相关的转录程序的增加。图2 | 急性轻度和重度 COVID-19 期间 T 细胞的单细胞转录组学来自对照组 (n = 6)、FLI (n = 8)、HBV (n = 4)、轻度 COVID-19 (n = 9) 和重度 COVID-19 (n = 10) 的 T 细胞簇的 UMAP患者。3.CD16 介导的 CD8+T 细胞脱粒导致内皮细胞释放趋化因子CyTOF 和 scRNA-seq 分析确定了两个主要的 T 细胞活化特征：(1) 形成高度活化、增殖的 TFH 样 CD4 +细胞和表达 CXCR3 的 CTL，与疾病严重程度无关；(2) 活化的 CD16 + T 细胞特异性。作者测试了 SARS-CoV-2 特异性抗体反应在这些患者中是否更明显？SARS-CoV-2 特异性 IgA 的血清浓度，结果显示，特定 IgG 水平在重症 COVID-19 中更高（图 3A）。接下来，作者研究了与 CD16+CD4+和 CD8+簇相关的功能特性。如 scRNA-seq 所示，与对照组相比，来自重症 COVID-19 患者的样本含有明显更多的表达粒酶 B 的 CD8+T 细胞（图 3C）。CD16 参与重症 COVID-19 最可能的影响之一是在与内皮细胞相互作用期间 T 细胞脱粒增强。事实上，根据对重症 COVID-19 的尸检结果，已经观察到 T 细胞浸润和内皮细胞损伤，即淋巴细胞性内皮炎。可以想象，免疫复合物介导的 CD16+T 细胞脱粒会导致内皮损伤。为了验证这一假设，作者在抗 CD16 抗体存在的情况下，将原代肺微血管内皮细胞与从轻度/重度 COVID-19 患者/对照中分离的富集的非初始 CD8 + T 细胞共同培养。随后，作者分析了炎症介质的释放（图3G）。抗 CD16 触发的严重 COVID-19 T 细胞通过共培养的内皮细胞引起增强的 CXCL8 (IL-8) 和 CCL2 (MCP-1) 释放。与对照 T 细胞相比，来自 COVID-19 患者的 T 细胞放大了伴刀豆球蛋白 A 诱导的跨内皮电阻损失，表明内皮屏障破坏，但这种效应仅对来自重症 COVID-19 患者的 T 细胞显著（图 3 H ）。为了补充作者在外周血中的发现，作者研究了COVID-19 患者肺部CD16 + T 细胞的组织定位。作者发现与来自不同对照尸检组的肺组织相比，CD3 + CD16 + T 淋巴细胞的数量增加（图 3 I 和 3J）。并在死亡的晚期时间点下降（图 3 J）。这些发现支持作者的假设，即在重症 COVID-19 患者中 CD16 +高细胞毒性 T 细胞的生成和局部积累增强，可诱导肺内皮细胞的活化和损伤。T 细胞诱导的化学引诱剂 CXCL8 和 CCL2 的释放可导致 COVID-19 肺炎中中性粒细胞和单核细胞的浸润增加。图3 | 重症 COVID-19 的 T 细胞的脱粒和细胞毒性潜力增加4. 在急性重症 COVID-19 期间诱导的表达FCGR3A的 T 细胞克隆持续存在并保持其增加的细胞毒性潜力来自重症 COVID-19 患者的 CD16 + T 细胞表现出增强的细胞毒性特性，可能导致器官损伤，作者分析了它们在清除急性感染后的持久性。症状发作后 3-8 个月恢复期（图 4A -4E），作者分析了单个 COVID-19 T 细胞簇的克隆富集是否不同。进一步揭示这些克隆的高细胞毒性潜力。随后探索富含反应性缺氧特征的区域。结果显示，重症 COVID-19 患者的 CD16 + CD8 + T 细胞在恢复期持续存在，采用更分化的 CD62L -表型，但仍保持其高细胞毒性潜力。图4 | 在急性 COVID-19 期间扩增的 T 细胞克隆的时间依赖性进化和表型5. C3a 促进表达 CD16 的高细胞毒性 T 细胞的分化因为 COVID-19 的死亡率和严重发病率会不同程度地影响老年人，作者研究了总 CD16 + T 细胞的形成是否与年龄增加有关。作者利用已发表的流式细胞术数据揭示了来自老年人的样本中检测到显著更高比例的 CD16 +细胞，这支持了作者的年龄依赖性增加的假设（图 5 A）。重症 COVID-19 的一个关键特征是补体生成和激活增加，作者分析了补体成分补体因子 D (CFD) 与年龄的相关性。接下来，作者在重组 IL-2 和来自轻度或重度 COVID-19 患者的血清或对照血清的存在下，用板结合的抗 CD3/CD28 抗体刺激来自健康未暴露对照的富集 CD3 +细胞。最后，作者测试了 C3a 是否是导致重症 COVID-19 患者血清 T 细胞分化潜能改变的原因。总之，在重症 COVID-19 中高水平产生的补体分裂产物（如 C3a）会产生炎症环境，促进 CD16+高细胞毒性 T 细胞的分化。图5 | C3a促进表达CD16的高细胞毒性T细胞分化6.活化的 CD16 + T 细胞在严重 COVID-19 期间的病理作用作者比较了死于 COVID-19 的患者和幸存者中活化 CD16 +T 细胞的比例。与幸存者（幸存者）相比，死亡的重症 COVID-19 患者（非幸存者）样本中所有 CD4 +和 CD8 + T 细胞中活化的 CD16 + TCRab +细胞的百分比显著更高（图 6 A）。接下来，作者在更大的队列中测试了 C3a 生成上游补体蛋白的血浆水平是否与患者的病程和结果相关。与轻度 COVID-19 相比，重症患者血浆样本中经典和替代途径的正调节因子水平较高（图6B ）。作者还分析了与疾病轨迹相关的补体蛋白水平，特别是随后疾病严重程度的恶化。临床恶化的患者样本中 C1R 和 CFD 升高，而随后疾病进展的患者样本中抑制经典和凝集素依赖性补体途径的补体因子 I (CFI) 的丰度较低（图 6C）。最后，C1QA、C1QB、C1QC 和 CFD 的数量不仅在重症 COVID-19 中较高，而且与致命结果相关（图 6 D）。总之，这些数据进一步支持了补体系统和活化的 CD16 + T 细胞在严重 COVID-19 期间的病理作用。图6 | 活化 CD16 + T 细胞的比例和血浆补体蛋白水平与 COVID-19 的结果相关相关讨论过度的 T 细胞活化和改变的表型可能导致感染相关的器官损伤。在重症 COVID-19 患者中，作者检测到活化的 CD16 +T 细胞的分化，这显示出免疫复合物介导的细胞毒性潜力和激活肺微血管内皮细胞的潜力。CD16 中的扩展克隆+ T 细胞区室持续存在并保持其高细胞毒性潜力。作者将 C3a 鉴定为分化改变的活化 T 细胞表型的上游信号。活化 CD16 +T 细胞的比例和血浆补体蛋白丰度水平与重症 COVID-19 患者的不良预后相关。因此，SARS-CoV-2 触发的补体激活创造了一种炎症环境，驱动具有高免疫致病潜力的 T 细胞分化。在这里，作者显示重症 COVID-19 患者中 C3a 生成的增加促进了 CD16 +、高细胞毒性 CD4 +和 CD8 + T 细胞的分化。总结全文，研究发现新冠重症患者体内出现高度活化、高细胞毒性的CD16 +T细胞亚群。新冠重症患者体内免疫复合物介导的CD16 + T细胞可以与内皮细胞相互作用促进微血管内皮细胞的损伤、释放炎性趋化因子以及中性粒细胞和单核细胞浸润肺组织。而CD16 + T细胞克隆在急性疾病后仍能保持其细胞毒性表型。补体成分C3a作为其上游信号可以促进高毒性CD16 +T细胞的分化。活化CD16 +T细胞的比例和血浆补体蛋白水平与新冠患者的死亡风险有关，表明T细胞的高毒性和补体激活使得新冠患者死亡风险增加。总之，特别严重的 COVID-19 导致活化的 CD16 + T 细胞数量增加，这些细胞通过不依赖 TCR 的细胞毒性 T 细胞功能触发补体级联反应与内皮损伤和患者存活相关。这在功能上将先天和适应性免疫系统与内皮损伤联系起来，这可能构成一个重要的分子轴，解释了在 COVID-19 中观察到的广泛的器官损伤。

核磁共振扫描显示，使用ALN-VSP疗法后肝脏肿瘤中的血流量明显减少　　据美国媒体8月24日报道，美国阿尔尼拉姆生物技术公司日前宣布他们找到了一种能够治愈所有癌症的新型药物，首批接受临床试验的19名晚期肝癌患者病情都有较大好转。不仅如此，该公司称，假以时日，这种药物甚至有可能治愈一切疾病。　　首批患者反应良好　　2010年4月，19名接受化疗但没有好转的肝癌病人开始服用这种名为ALN-VSP的新型药物。服用第一剂后的数周内，药物就已经很明显地开始阻止肿瘤产生自身生长需要的蛋白质。　　到2010年6月，阿尔尼拉姆公司称，通过“唤醒”人体自身的一种很少使用的免疫防御系统，ALN-VSP成功切断肝癌患者体内肿瘤62%的血流量。在治疗肝癌时，传统药物一般使用消除致病蛋白质的方法，而ALN-VSP则通过核糖核酸干扰(RNAi)疗法直接阻止细胞生成致病蛋白质。　　唤醒人体自身防御机制　　科学家在研究中还发现核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)之间一个奇妙的联系―――如果说DNA对蛋白质来说是一张图纸，那么RNA就是能够下达指令的建筑商。RNA把DNA上的基因复制成单链的信使RNA，再由它向细胞传递信息继而产生蛋白质。　　1998年，科学家发现了核糖核酸干扰(RNAi)机制，原始生物就利用这个系统来甄别和摧毁病毒双链RNA和病毒信使RNA。研究人员发现，将一小段双链RNA引入细胞即能触发这一埋藏在人体内的古老机制，使RNAi再次发挥停止生产特定蛋白质的功效。　　从这一角度看，可以说RNAi具有治愈包括癌症在内的许多疾病的能力，这些疾病的特点一般都是由病变细胞产生过量的常见蛋白质所致。从理论上说，操控RNAi来杀死蛋白质并不难。比方说，ALN-VSP内就含有合成的双链RNA，它与肝脏肿瘤用于编码两种蛋白质的信使RNA相匹配，那两种蛋白质分别是促进肿瘤血管生长的血管内皮生长因子(VEGF)和加速肿瘤细胞快速分裂的纺锤体驱动蛋白(KSP)。　　合成的双链RNA进入肝细胞后，人体内的RNAi机制便会摧毁合成的RNA和任何与之匹配的、与肿瘤生长相关的信使RNA，阻止蛋白质的继续产生，从而使肿瘤停止生长。　　有望“包治百病”　　除了在癌症领域的应用，这项能攻击单个基因的技术还在其它医学领域掀起一阵RNAi疗法旋风。目前，阿尔尼拉姆公司已经将这种疗法用于亨廷顿氏舞蹈症、视网膜黄斑变性、肌肉萎缩和艾滋病等疾病的研究。　　加利福尼亚州知名分子遗传学家约翰・ 罗西称，RNAi疗法有望在两年内成熟。由于首批试验效果相当好，ALN-VSP有望成为首批基于RNAi理论而推向市场的药物。罗西表示：“我认为RNAi疗法对所有的病都有效。”

p style="text-align: justify "　　2012年，诺贝尔生理学或医学奖授予了英国科学家John B. Gurdon先生和日本科学家Shinya Yamanaka博士，表彰他们将成熟细胞重新编程，转化为可以分化为多种细胞类型的诱导多能干细胞(iPSC)方面的突破性研究。自从在2006年被发现以来，iPSC被誉为能够为再生性医药带来革命的发现。12年已经过去了，它们的研究进展到了那个阶段呢?/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/8fdee30a-2486-4dd7-a816-3f842a0fc0da.jpg" title="2.jpg" alt="2.jpg" width="496" height="352" style="width: 496px height: 352px "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "2012年诺贝尔生理学或医学奖得主John B. Gurdon先生和Shinya Yamanaka博士/span/pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "(图片来源：nobelprize.org)/span/pp style="text-align: justify "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strongiPSC的最初临床试验/strong/span/pp style="text-align: justify "　　在2018年10月的一项外科手术中，京都大学(Kyoto University)的神经外科医生将240万细胞移植到一名帕金森病(PD)患者的大脑中。这些细胞是由匿名捐献者的外周血细胞重新编程成为iPSC，然后再分化生成的多巴胺能前体细胞。研究人员希望它们能够提高多巴胺水平，缓解患者的症状。/pp style="text-align: justify "　　这项手术是临床医生们检测iPSC能否用于治疗疾病的最新尝试。近几年来，日本的科学家们启动了几项临床研究，检验它们在治疗心脏疾病和视网膜黄斑变性方面的功效。而世界其它地方的研究人员在探索将这些细胞转化为治疗从子宫内膜异位到脊髓损伤等一系列疾病的疗法。这些临床研究的启动给人们带来希望，这项获得诺贝尔奖的科学发现终将开花结果，为患者带来创新疗法。/pp style="text-align: justify "　　“我很高兴他们试图将这项技术推入临床期，因为iPSC领域需要证明这些细胞具备成为再生性疗法的潜力。”伊利诺伊大学芝加哥分校的Jalees Rehman博士说。然而，将这一技术推入临床的过程也暴露出开发疗法时需要面对的挑战。/pp style="text-align: justify "　　目前，只有少数患者接受了基于iPSC的治疗。在2014年，一名患有黄斑变性的女性接受了从iPSC分化的视网膜细胞的移植，这些iPSC来自于她自身的细胞。虽然她的视力没有因为这一治疗得到显著改善，但是“iPSC分化细胞的安全性得到了确认”，京都大学的Jun Takahashi博士写道。他也是帮助将iPSC分化为多巴胺能前体细胞的干细胞生物学家，这些细胞被用于植入到PD患者大脑中。他的太太，RIKEN发育生物学中心的Masayo Takahashi博士，生成了在这项临床试验中使用的视网膜细胞。/pp style="text-align: justify "　　去年，有5名患者使用iPSC分化的视网膜细胞治疗同样的眼科疾病，这些iPSC细胞是从其它捐献者中获得的。其中一名患者出现了对移植体的严重但不致命反应，迫使医生摘除移植体。/pp style="text-align: justify "　　更多的临床试验即将开展。明年，心脏外科医生们计划将由iPSC分化形成的心肌细胞组织移植到3名心脏病患者的心脏中，Takahashi博士计划在2022年之前再治疗6位PD患者。这些研究都处于临床试验的最早期。“现在对我们的临床试验做出任何判断都为时过早。”Takahashi博士说。/pp style="text-align: justify "　　在有些研究人员等待临床试验的结果来验证iPSC是否具有再生疗法潜力的同时，另外一些学者正在大幅度推动临床前研究，开发出更多使用它们治疗疾病的方法。例如，加州大学洛杉矶分校的干细胞生物学家April Pyle博士最近开发出一种可能用于治疗杜氏肌营养不良症(DMD)的疗法。这是一种由于编码抗肌萎缩蛋白的基因出现变异而导致的严重疾病。她和她的同事使用CRISPR-Cas9技术在人类iPSC中修复了产生突变的基因，然后将它们分化成为骨骼肌细胞，并且将这些细胞注射到抗肌萎缩蛋白缺失的小鼠肌肉中。“我们能够在肌肉的局部区域恢复抗肌萎缩蛋白的表达。”她解释道。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/a58008f7-08a8-40f6-a434-3fd201ce687a.jpg" title="3.jpg" alt="3.jpg" width="466" height="471" style="width: 466px height: 471px "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "April Pyle博士(图片来源：April Pyle实验室官网)/span/pp style="text-align: justify "　　“我认为这才是开始，”Pyle博士说：“我觉得我们终于将要看到以前辛勤工作带来的成果，在这些最初的临床试验之后将会有许多后续的临床试验。”/pp style="text-align: justify "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong克服进入临床研究面对的挑战/strong/span/pp style="text-align: justify "　　如今，研究人员已经找出将iPSC诱导分化成为大多数已知细胞类型的方法。但是让这些细胞能够在新的组织环境中承担成熟细胞的功能是需要克服的另一个问题。例如在心脏中，研究人员发现新的干细胞需要与其它细胞在电生理特征方面达成一致。在细胞培养环境下对人类iPSC分化的心肌细胞的研究表明，对这些细胞进行电刺激，让它们在发育的过程中产生收缩，会让细胞更快成熟，意味着它们可能更能够承担在体内需要面对的工作量。/pp style="text-align: justify "　　如何整合新细胞，让它们能够在受伤或疾病组织中生存是另一个问题。“你需要一个特别的基质么?它是水溶胶，还是一个补丁，还是一个类器官?如何能够让这些细胞长期生存?”Rehman博士问道：“这是我们在所有器官中都会遇到的挑战。”/pp style="text-align: justify "　　研究人员已经在使用猴子模型来评估移植过程的效率，Takahashi博士解释道。去年，他的团队证明，在猴子模型中，人类iPSC分化的多巴胺能神经元能够稳定地整合到已有的大脑组织中，这些细胞能够生成多巴胺并且最终可以改善类似PD的症状。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/45a8a316-9e69-4ece-98bb-28e46829043d.jpg" title="4.jpg" alt="4.jpg"//pp style="text-align: justify "　　另一个移植iPSC生成组织的挑战是这些细胞可能触发癌症的风险。这一风险一直存在，因为这些细胞是从增殖能力非常强的细胞中分化而来。为了预防这一风险，Takahashi博士和他的同事们对移植细胞进行严密筛选，过滤掉那些未分化，最可能过度增殖的细胞。同时他们会将这些细胞植入到小鼠身上，检测它们生成肿瘤的可能性。/pp style="text-align: justify "　　然而，“我们无法完全消除肿瘤生成的可能性。” 庆应义塾大学(Keio University)的妇科教授Tetsuo Maruyama博士说。因此，他认为这些手术应该聚焦于非必需器官，例如眼睛或者子宫。他最近成功地从iPSC中分化出健康的子宫细胞，计划用这些细胞来研究子宫内膜异位的机理，并且生成人类子宫内膜在临床使用。/pp style="text-align: justify "　　另一个研究人员经常关注的问题是患者在接受由其它供体产生的iPSC时需要使用免疫抑制药物。例如，Takahashi博士的PD患者在长达一年的时间里需要使用免疫抑制药物，这可能让他们抵抗感染和癌症的能力下降。虽然存在这样的风险，很多研究人员仍然选择使用同种异体的干细胞，主要原因是这一策略在扩大化生产时可以节省时间、成本、和人力。/pp style="text-align: justify "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong“即用”型iPSC的优势/strong/span/pp style="text-align: justify "　　开发“即用”型iPSC疗法对学术界和工业界都具有很大的吸引力。例如，澳大利亚的生物技术公司Cynata Therapeutics最近完成了一项1期临床研究，使用iPSC分化生成的间充质干细胞来治疗移植物抗宿主病(GVHD)。这种疾病在骨髓移植手术后发生，供体的免疫细胞认为受体细胞是外来物，并且对它们进行攻击，这往往会造成患者死亡。但是间充质干细胞可以分化成熟为一系列不同的细胞类型，抑制供体T细胞的增殖和激活，Cynata公司的产品开发副总裁Kilian Kelly博士说。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/903cbf81-f1f4-4f13-8730-5e80922b8a60.jpg" title="5.jpg" alt="5.jpg" width="520" height="188" style="width: 520px height: 188px "//pp style="text-align: justify "　　这项临床试验中，间充质干细胞通过静脉注射到15名GVHD患者体内，这些患者对类固醇疗法没有响应，预后情况非常糟糕。虽然现在评估疗效还为时过早，但是Kelly博士表示，他很高兴看到其中14名患者的病情得到了显著改善，这是一个好兆头。更便捷的是，免疫排斥对间充质干细胞来说不是一个问题，因为它们不表达触发免疫排斥的特异性抗原。“这意味着我们可以使用从单一iPSC库中获取的细胞来治疗几乎所有人。”Kelly博士说。/pp style="text-align: justify "　　这也是多个机构在开发可以用来大规模开发再生疗法的iPSC细胞库的原因之一。例如，日本政府决定投资2.5亿美元来开发iPSC库存，帮助生物医学研究。捐献这些细胞的志愿者经过精心筛选，包括了不同种类的常见人类白细胞抗原(HLA)类型。这样，这些细胞和人群中的大多数人都具有免疫相容性。在进行移植时，患者可能只需要少量的免疫抑制。这是在使用患者特异性细胞和从随机供体中获得的细胞之间的折中方案。/pp style="text-align: justify "　　综合来看，这些细胞能够与日本人口中70%的人群免疫相容。对于像美国这样的遗传背景复杂的国家来说可能更为困难，但是研究人员已经开始向这个方向努力。一家位于威斯康辛的名叫Fujifilm Cellular Dynamics的公司正在试图开发一个iPSC细胞库，它可以与大部分美国人口相匹配。/pp style="text-align: justify "　　在这些努力继续进行的同时，世界各地的研究人员仍在研究将这些细胞应用于临床的细节。“我们离临床应用越接近，对需要解决的挑战的认知就越清晰，”Rehman博士说：“我认为这是科学发现非常正常的过程。”/pp style="text-align: justify "　　span style="font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) "参考资料：/span/pp style="text-align: justify "span style="font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) "　　[1] Increasing Number of iPS Cell Therapies Tested in Clinical Trials. Retrieved December 4, 2018, from https://www.the-scientist.com/news-opinion/increasing-number-of-ips-cell-therapies-in-clinical-trials--65150/span/p

细胞迁移，指的是细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的浓度梯度后而产生的移动。移动过程中，细胞不断重复着向前方伸出突触/伪足，然后牵拉后方胞体的循环过程。细胞骨架和其结合蛋白，还有细胞间质是这个过程的物质基础，另外还有多种物质会对之进行精密调节。细胞的运动有很多种，有生理性运动，如发育过程中的细胞运动，生殖细胞、干细胞的成熟过程中的位置变化。也有病理性变化，如肿瘤的迁移和侵袭。从癌症的产生到转移，血管供给以及分裂增殖都一直是医学和生物学研究的热点。癌症细胞增殖失控，短时间内可以繁殖出大量后代，这样首先会造成生长空间的局促和养分，如氧气的紧张。这样恶性肿瘤内会形成一片坏死区，正如上面在组织损伤里面提到的，机体会尝试“修复”这些损伤。坏死组织会释放出一系列促血管生成因子，如血管内皮生长因子以及各种免疫细胞，如巨噬细胞。巨噬细胞也会释放大量促血管生成细胞因子和生长因子。因此肿瘤的研究伴随着复杂的细胞运动，如肿瘤细胞沿着循环系统的运动，血管内皮细胞和免疫细胞进入肿瘤实体的运动。划痕法是经典的细胞行为学检测方法。在平铺的细胞单层上划出一条痕迹，然后清洗更换培养液后，细胞会从原有位置向划痕处迁移。统计划痕宽度和面积的变化就可以监控细胞迁移的速度和细胞迁移的能力。以前在做划痕实验的时候受到诸多限制：首先微孔板的孔不能太小，孔越小，枪头越难伸进去；其次划出的痕迹边缘歪斜，无法形成一条直线；孔与孔之间的划痕宽度也不均一。这给划痕这个时间梯度的实验带来了很大的困扰。在多次的拍照过程中，由于划痕宽度的差异性对于划痕拍照位置的复位要求甚高。然而随着细胞迁移的发生，细胞的原位的形态和分布也发生的动态变化。所以复位划痕的拍照位置成为就成为了一个力气活：既然无法准确找到，那就全部拍下；既然每个位置宽度不一，那就全部统计。借助MuviCyte™ 长时间活细胞成像系统的划痕套装。轻轻一划，解决全部困扰。借助Scratcher整齐的96针，可以在96孔微孔板底面整齐的划出宽度均一的划痕。借助MuviCyte™ 长时间活细胞成像系统可以盯住一个视野不停的拍。然后生成无抖动的视频。借助专业的划痕分析软件，对划痕宽度、面积、愈合速度进行分析，可以获取的参数包括：划痕面积划痕的覆盖度划痕的宽度划痕的愈合速度相对划痕密度对于原始细胞区域、原始划痕区域、划痕分界线、迁移后细胞的区域进行精准的划分，保证分析结果的精确。轻松的完成整个实验，再也不用熬夜拍划痕了。MuviCyte™ 已于2020年1月1日全新上线，借助它的多荧光通道和多种物镜选择，可以完成多种复杂的复杂细胞模型的拍摄和观察，在肿瘤免疫、干细胞等多个领域都有重要的应用。扫描下方二维码或点击下载链接，即可下载珀金埃尔默MuviCyte™ 活细胞成像系统相关资料。下载链接: http://hyw3rjq7ezkfsnvu.mikecrm.com/naj9QZD

近日，深圳市圳市科技创新委员会公示了深圳市科技创新委员会关于2022年度基础研究专项（深圳市自然科学基金）面上项目拟资助项目，共计1044个项目。以下为公示信息全文：深圳市科技创新委员会关于2022年度基础研究专项（深圳市自然科学基金）面上项目拟资助项目的公示根据《深圳市科技研发资金管理办法》《深圳市科技计划项目管理办法》《深圳市基础研究项目管理办法》等有关规定，深圳市科技创新委员会拟对2022年度基础研究专项（深圳市自然科学基金）面上项目1044个项目进行资助，现予公示，向社会征求意见。任何单位和个人对公示项目持有异议的，请在公示之日起10天内以书面形式（注明通讯地址和联系方式）向我委反映。单位提出异议的，应当在异议材料上加盖本单位公章；个人提出异议的，应当在异议材料上签署本人真实姓名（姓名不能打印），我委对异议人身份和反映情况予以保密。其他行政主管部门提出异议的，按照有关规定办理。为保证异议处理客观、公正、公平，保护拟资助项目依托单位的合法权益，凡匿名提出异议的，我委将不予受理。异议受理处室：科技监督和诚信建设处异议受理邮箱：complain@sticmail.sz.gov.cn传真：88101180地址：深圳市福田区福中三路市民中心C区5045室邮编：518035业务咨询电话：基础研究处：88127371、88103567附件：附件：2022年度基础研究专项（深圳市自然科学基金）面上项目拟资助项目清单.xlsx深圳市科技创新委员会2022年10月13日2022年度基础研究专项（深圳市自然科学基金）面上项目拟资助项目清单序号项目名称1体外反搏干预PCI术后支架内生物力学环境的几何多尺度数值仿真研究2质子和重离子辐照致DNA损伤的蒙特卡罗模拟和验证3基于近红外荧光增强效应的高通量检测芯片用于血液中多种痕量阿尔茨海默症标志物的同时检测4线粒体靶向的光活化铱配合物前药用于乳腺癌治疗研究5针对β受体激动剂类药物分子血液浓度实时监测用于心脏保护的荧光探针的研究与应用6丝状噬菌体切离酶XisF4对铜绿假单胞菌PAO1毒力的影响及分子机制7芽殖酵母lncRNA-DRC通过参与翻译调控维持基因组稳定性的分子机制8双组分系统BfmSR在鲍曼不动杆菌缺壁持留菌形成中的作用机制研究9STEAP3参与心力衰竭的作用机制研究10罕见病中KRAS突变引发MAPK信号通路失调的结构机制研究11食管癌亚型特异性低甲基化区域鉴定及其功能研究12心肌肥厚中组蛋白甲基化与乙酰化修饰协同调控机制的研究13基于深度迁移学习和多源数据融合的脓毒症精准检验模型研究14天然产物厚朴酚联用新型自噬与内体运输抑制剂靶向调控肿瘤细胞溶酶体功能及其抗肿瘤的分子机制研究15METTL7B通过调控TOM20甲基化维持线粒体稳态在AMD发展中的作用及机制研究16应用小分子诱导建立胸腺类器官及其促进器官移植免疫耐受的研究17CD4+T细胞线粒体能量代谢失调触发焦亡程序及其与艾滋免疫重建不全的机制研究18TRIM59通过调控巨噬细胞缓解急性呼吸窘迫综合征的机制研究19靶向新冠病毒NTD的特异性抗体筛选及其作用机制研究20NMDA型谷氨酸受体在慢性应激诱导阿尔茨海默病相关tau蛋白磷酸化中的作用及机制研究21意识下眼跳过程中空间坐标位置转换的神经机制22精神分裂症模型小鼠的神经生物学机制研究23基于白蛋白的共负载声敏剂和STING激动剂的微针递送系统用于增强的声动力-免疫抗肿瘤治疗24二维纳米片负载聚集诱导发光光敏剂构建新型肺靶向多模态诊疗一体化平台25基于间充质干细胞膜的靶向RNA纳米微球载体用于原位骨缺损的修复及骨质疏松症的治疗26有氧运动诱导骨骼肌释放外泌体miR-486改善肝脏胰岛素抵抗及其机制27线粒体E3泛素连接酶MARCH5在卵母细胞染色体分离中的功能研究28猪δ冠状病毒利用新鉴定的关键受体GRP78蛋白实现跨物种传播感染人的分子机制29携带不同基因元件的染色体外环状DNA的合成及其功能研究30TCL方法用于高通量筛选精准CBE碱基编辑工具31基于框架核酸纳米技术介导中和适配体抑制新冠病毒感染的机制研究32聚合物纳米自噬抑制剂的研发及其增强前列腺癌免疫治疗的研究33自愈合生物活性医用弹性纤维的研制34双重靶向外泌体协同I型光动力-化学动力学-药物治疗脑胶质瘤的研究350.5um悬浮粒子计数动态变化对于一级洁净手术间SSI管控影响的研究36基于载小檗碱含氧微泡介导的光-声动力治疗乏氧肿瘤的研究37基于深度学习的儿童中枢神经系统感染性疾病多模态智能诊断模型研究38基于VisionTransformer和多模态图像的DBT肿块检测方法研究39人工智能门诊就医新模式体系的建立和测试研究40基于同行评议及真实世界数据的儿童抗菌药物处方决策模型、精准管理指标构建及实证研究41IL6反式信号调控GLI1阳性间充质干细胞肌样分化在哮喘气道重塑中的作用和机制研究42肺结节患者循环异常细胞非整倍体检测对诊断早期肺癌的价值研究43TMEM176B对肺腺癌转移与血管新生机制之研究44基于SCGB3A2抑制NF-κB通路调控气道上皮细胞自噬探讨姜黄素治疗哮喘的作用机制研究45LC3通过调控线粒体自噬参与非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的机制研究46外源性孕激素增加宿主结核分枝杆菌易感性的机制及干预策略47结核分枝杆菌通过BTLA/SHP1/2/HLA-DR途径调控DC抗原提呈能力实现免疫逃逸的分子机制研究48低氧条件下m6A识别蛋白YTHDF1表观调控OGT表达促进肺癌的分子机制研究49感觉神经TRPA1-SP信号通路在过敏性鼻炎继发咳嗽高敏感中的作用及机制研究50结核分枝杆菌下调巨噬细胞H3K4me3逃逸宿主免疫的作用和机制研究51肺结核结构性肺病流行病学分析及早期肺康复方案构建与临床应用研究52PEDF通过抑制内皮间质转化减轻血管重构从而改善肺动脉高压的作用与分子机制研究53用于气道粘膜免疫耐受功能重建的靶向性纳米疫苗的构建与机理研究54基于Nanopore适应性采样测序技术在疑似结核病患者病原体诊断中的应用55阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征育龄男性患者的生育能力研究56靶向铁调素-铁代谢通路对COVID-19的肺保护作用及机制57基于CRISPR基因编辑的结核分枝杆菌耐药基因突变检测及应用58失功能HDL通过调控microRNA-181a-5p靶向ATG5表达损伤血管新生59BMP信号通路介导的成纤维细胞与平滑肌细胞间相互作用在主动脉夹层发展过程中的作用及机制研究60基于巨噬细胞chemerin/CMKLR1信号调控铁死亡促进动脉粥样硬化的作用机制研究61TTN基因突变在早发型和迟发型扩张型心肌病中的功能差异及分子机制研究62血浆外泌体非编码RNA的动态变化对社区高血压患者缺血性脑卒中发生风险的预测研究63Mas受体通过调节巨噬细胞亚型功能降低老年腹主动脉瘤形成的作用和机制64PD-L1介导DNA损伤化疗药物诱发血管钙化的作用与机制研究65PLLAASD封堵器植入后局部内皮化关键基因DDIT4-p53分子机制研究66circRNASIPA1L1的m6A甲基化修饰在远隔缺血后处理心肌保护中的作用研究67儿童肥厚梗阻性心肌病的基因—临床—病理分型及其分子特征研究68琥珀酸脱氢酶活性受损诱发巴氏综合征患者心律失常的机制研究69IPC注射用温敏复合水凝胶缓释EPC外泌体修复心梗后心肌纤维化的机制及应用研究70CCR7调控VSMCs表型转化促进腹主动脉瘤形成与进展的机制研究71基于多因素数据的心房颤动预后脑卒中智能风险评估方法研究72PCSK9调控Smac在线粒体-细胞浆转位对缺氧诱导的内皮细胞焦亡的机制研究73组蛋白甲基化酶SETD2调节淋巴内皮细胞功能与淋巴管发育的机制研究74肠道NE通过NETosis/ZO-1信号通路调控肠上皮通透性-动脉粥样硬化的研究75线粒体分子伴侣调控小鼠胚胎心脏发育及其分子机制研究76腹主动脉瘤生长生物力学机理研究与虚拟介入治疗仿真评估77环状RNA作为急性非ST段抬高型心肌梗死预警标记物的筛选和功能研究78内脏脂肪源性Thbs1通过激活serpina3n促进心肌纤维化机制研究79基于scRNA-seq研究巨噬细胞与平滑肌细胞的相互作用调控急性主动脉夹层发生的分子机制80血浆外泌体源性circFSTL1：治疗M1型巨噬细胞相关心肌炎症浸润损伤的新靶点81钙通道蛋白Orai1调控整联蛋白αvβ6活性来影响结肠上皮屏障功能的实验研究82基于数字病理的胃癌淋巴转移人工智能辅助诊断临床研究83巨噬细胞糖代谢重编程介导肠道共生菌Blautia促进溃疡性结肠炎黏膜稳态重建的作用及机制研究84circ_0003265结合miR-579-3p靶向KLF5调控肝母细胞瘤恶性进展的研究85纳米药物工程化Treg细胞治疗肝移植急慢性排斥及其机制研究86NLRP3炎症小体参与调控NAFLD相关肝癌发生发展的机制研究87“cGAS-STING-自噬”轴感应及调控幽门螺杆菌感染的机制研究88HBV-ACLF患者肝脏细胞图谱绘制和免疫-代谢机制研究89TGF-β1激活JAK/STAT3信号通路诱导树突状细胞免疫耐受促进结直肠癌肝转移的分子机制研究90环状RNAcircSETD3在肝细胞癌中的临床意义及功能机制的研究91双歧杆菌携带氨基修饰介孔硅荷载的二氧化铈纳米酶治疗小鼠结肠炎的机制研究92基于CT-3D模型-US的混合现实技术(MixedReality,MR)经皮肝穿刺胆道引流手术导航系统研究93MiR-328-5p/Saa3/TGF-β/Smad3轴调控胰腺星状细胞活化参与胰腺纤维化进展的机制94肠道菌群及其代谢产物对厌食儿童营养状况的影响95溃疡性结肠炎肠黏膜屏障修复药物靶标-LPCAT1的发现与验证96胞外囊泡MicroRNA-21靶向肝细胞端粒酶Teb1调控NASH病理进程的研究97色氨酸代谢物通过GPR35维持肠道屏障调节结肠炎症的作用及机制98产群体感应淬灭酶的基因工程噬菌体对新生儿呼吸机相关性肺炎致病的铜绿假单胞菌生物膜的作用99母乳EVs运载circ_0003221对BPD的防治作用研究100胆汁酸代谢菌介导的Treg/Th17稳态失衡参与孕期免疫激活子鼠自闭症样行为发生的作用和机制研究101拟脂联素多肽对未成熟脑白质损伤的保护机制研究102γδT细胞TCR基因在早产儿先天性巨细胞病毒感染中的表达特征103PirB介导信号通路在孕中期脂多糖暴露仔鼠导致神经细胞损伤的机制研究104基于早产儿CD146+Nestin+人脐带华尔通氏胶来源间充质干细胞治疗早产儿支气管肺发育不良的作用机制研究105EIF2AK1通过m1A表观修饰调控滋养细胞抗病毒免疫应答致胚胎丢失的机制研究106Notch信号调控RUNX1-PAD4激活NETs形成在阴道光滑念珠菌感染中的机制研究107远程胎监对围产儿结局影响的队列研究108聚焦超声介导的隐生型锰基金属有机框架纳米平台用于子宫内膜癌的诊疗及机制研究109α7nAChR通过TLR4/NF-κB/HIF-1α调控蜕膜巨噬细胞极化在子痫前期发病中的作用和机制研究1104D打印类卵巢支架及其血管化对卵巢组织移植效果评价111m6A甲基化修饰在早期自然流产中的调控机制研究112慢性子宫内膜炎抑制SPHK1/S1P介导的信号通路引起内膜蜕膜化障碍的机制研究113常见子宫内膜病变发病风险及生育力评估的多组学研究114基于激酶组学研究蛋白激酶调控血管内皮功能异常在新生儿脓毒症中的作用机制115乳杆菌通过组蛋白乳酸化诱导蜕膜巨噬细胞极化改善反复种植失败患者蜕膜化不足的作用机制研究116Pink1-Parkin介导小胶质细胞线粒体自噬在母代肥胖诱发下丘脑神经干细胞发育编程紊乱中的作用和机制117基于结构方程的围产期创伤后应激障碍预测模型构建与早期预警识别模式研究118CD71+红系细胞和髓外红系造血在母胎免疫耐受中的作用119METTL7B通过RNA甲基化激活滋养层细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路在子痫前期中的作用及机制研究120铁超载诱导OIR视网膜新生血管增殖的作用和机制研究121调节卵巢巨噬细胞极化在激活生殖干细胞中的作用：探究电针重塑卵巢功能的新机制122PDGFB通过Raf/MEK/ERK信号途径促进中胚层细胞系分化发育研究123SIRT1缓解高雄激素诱导的PCOS子宫内膜基质细胞氧化应激的机制研究124二甲双胍通过SRC-1/MIG6信号通路调控子宫内膜异位症孕激素敏感性的机制研究125Keap/Nrf2信号调控NLRP3小体-细胞焦亡通路抑制早产鼠支气管肺发育不良发病机制研究126胎儿外侧裂发育成熟度简化分级法筛查脑发育异常产前多维诊断研究127中孕期胎儿唇腭部正常与异常产前超声智能自动诊断研究128家庭整合式（FICare）的疼痛干预对新生儿眼底筛查中疼痛影响的研究129维生素D调控miR-155/SOCS1对子痫前期的保护作用及机制研究130布洛芬通过调控血小板生成及功能参与早产儿动脉导管关闭的机制研究131冻融胚胎移植周期激素替代方案对子宫内膜功能影响的分子机制132低剂量射线增敏纳米疫苗用于宫颈癌精准免疫-放化疗133胎儿生长异常风险预测工具及人工智能辅助评估模型研究134深圳地区超早/极早产儿整群队列研究135miR-18a-5p靶向IGF-1调控颗粒细胞雄激素受体信号通路在多囊卵巢综合征卵泡发育障碍中的相关机制研究136基于单细胞测序的妊娠期糖尿病遗传易感性与遗传免疫调节的研究分析137基于多组学技术单绒毛膜双胎选择性生长受限的发病机制、预后评估及产前产后一体化诊疗体系的构建138LncRNA-MEG3/miRNA-214/Caspase-1轴介导小胶质细胞焦亡在早产儿脑白质损伤的机制研究139基于类器官模型探究ARID1A失活突变在调节膀胱癌EMT中的分子机制及在抗肿瘤药物初筛的应用140靶向KPNA2的miRNAs系统性筛选、鉴定及其对膀胱癌细胞生物学行为影响的研究141YAP通过细胞周期蛋白影响前列腺上皮细胞增殖/凋亡平衡的机制研究142TBX6通过上调细胞维甲酸结合蛋白(CRABP2/CRABP1)调控肾发育的机制及其对先天性肾畸形的影响143EIF4A3介导的hsa_circ_0001162加剧糖尿病肾损伤的机制研究144BMSCs源外泌体在顺铂诱导AKI中的作用及机制研究145LYZ基因新突变致淀粉样变表型的分子机制及二甲双胍干预的疗效研究146基于外泌体介导LincRNA/miRNA/mRNA网络化调控作用研究慢性肾脏病相关血管钙化的发病机制147MiR-19b-3p在Ang-II/IL6介导炎症反应的桥接作用在肝移植术后急性肾损伤的机制研究148UC-MSCs在单侧输尿管梗阻模型（UUO)中通过逆EMT过程缓解肾间质纤维化（RIF）和修复肾小管上皮作用机制研究149环状RNAcircFUT8介导母基因pre-mRNA可变剪接参与膀胱癌进展的分子机制研究150α2AR激活Nrf2/HO-1通路在抗双重打击致急性肾损伤中的作用及机制研究151外泌体miR-182调控c-kit影响ARPKD肾间质纤维化进展的机制研究152穿透肽在肾缺血再灌注损伤细胞铁死亡中的作用及机制研究153METTL3调控破骨细胞lncRNA1527的m6A修饰在强直性脊柱炎病理性成骨中的作用及机制研究154Rab7蛋白调控干细胞线粒体转移治疗骨关节炎的机制研究155纳米磷酸钙掺杂的抗肿瘤骨水泥开发及其在治疗骨肉瘤中的应用研究156前列腺癌发生脊柱转移的分子机制研究157基于新型仿生功能化镁合金复合支架调控成骨分化及促进骨缺损修复的作用机制研究158CD34+细胞在关节软骨发育与再生修复中的作用及机制研究159基于MICA技术的足拇外翻矫形3D打印导板研制及其临床应用研究160基于数字化骨科技术的韧带精准重建治疗膝关节韧带损伤的操作流程创建与临床应用研究161软骨ECM结合多肽修饰关节液MSCs源性外泌体治疗OA关节软骨损伤的分子机制及应用研究162骨端空间姿态数字孪生构建高智能化骨折复位机器人视觉系统163基于多组学联合临床特征的多模态女性骨质疏松预测模型的建立及效果验证164加速康复外科围手术期管理联合同质化护理在机器人辅助老年髋部骨折患者围手术期康复中的应用165皮质骨横向搬移促进糖尿病创面修复的免疫调节机制研究166TEN髓内固定治疗骨盆前环骨折的分子机制及生物力学研究167装载内源性TGF-β3因子的3D打印仿生软骨支架诱导自体干细胞分化修复关节软骨缺损的疗效及机制研究168m6A甲基转移酶METTL3介导炎症条件下强直性脊柱炎MSC成骨增强的机制研究169circ-SHPRH调控激素性股骨头坏死骨修复的分子机制170Tregs细胞经胞外囊泡途径调控免疫微环境和血管再生促进糖尿病创面愈合的机制研究171镁植入物表面功能化梯度层通过TRPM7通道诱导巨噬细胞极化的抗菌作用机制172淋巴引流综合疗法预防前交叉韧带重建术后深静脉血栓的效果研究173基于低温沉积成型3D打印纳米纤维素半月板支架的制备及实验研究1744D磷酸化蛋白组学解析LSD1调控MAPK/ERK信号通路促进胰岛beta细胞分化与成熟的分子机制175CAV1-ATG12-ATG5调节自噬在高糖促进LDL穿胞加速AS形成中的作用及分子干预176STING介导E3泛素连接酶TRIM32调节2型糖尿病胰岛β细胞功能的作用及机制研究177胎盘壁蜕膜间充质干细胞外泌体通过P62/Keap1/Nrf2通路调控自噬减轻糖尿病肾病血管损伤的机制研究178BBR通过KLF16/PPARα信号通路逆转糖尿病动脉粥样硬化内皮损伤的机制研究179O-GlcNAc修饰致TXNIP线粒体易位在高脂诱导糖尿病前期周围神经病变中的作用机制180CDR1as作为miR-7海绵参与干细胞治疗糖尿病的机制研究181c-Abl-YAP信号通路和相分离在高糖引发的动脉粥样硬化形成中的作用和机制研究182骨质疏松症中间充质干细胞线粒体的作用及机制研究183IL-1β通过PPARγ下调β-Klotho促进白色脂肪FGF21抵抗在妊娠糖尿病中的作用和机制研究184糖尿病外泌体非编码RNA特征图谱建立及其作用机制研究185Sigmar1对非酒精性脂肪肝的调控作用及其分子机制研究186强迫游泳应激通过PI3K/Akt通路促进2型糖尿病大鼠内皮祖细胞血管修复和生成功能的机制研究187基于靶向CXCR4的Mcl-1/Bcl-xL双特异性拟肽抑制剂的设计及协同治疗的研究188CAR-NK细胞清除血友病A患者抑制物的研究189Aurora激酶B抑制剂在靶向治疗幼年型粒单核细胞白血病中的机制研究190儿童急性B淋巴细胞白血病细胞高频DSB通过改变表观遗传学诱发B细胞谱系转变在疾病复发的作用机制研究191CRM1调控低氧下溶酶体扣押诱导急性髓系白血病耐药的机制研究192四甲基吡嗪通过mTORC1信号调控间充质干细胞外泌体分泌对再生障碍性贫血的免疫调节作用的研究193FTO/m6A-YTHDF2信号轴通过介导CDK11B的mRNA降解促进儿童Ph阳性急性淋巴细胞白血病的发生发展194ApoE、AMT和普朗尼克P85联合修饰的苯妥英钠电场敏感纳米水凝胶在耐药性癫痫模型中的应用研究195颅内旋转多靶点定向移植脐带源神经干细胞治疗大鼠大脑中动脉梗塞的安全性和有效性的临床前研究196下丘脑室旁核至中央杏仁核环路在可卡因诱导的厌恶性记忆中的作用及其神经元集群机制197IL1α介导Grin2c/Ca2+/CaMK通路调控星形胶质细胞增殖导致脊髓损伤后胶质疤痕形成的机制研究198儿童难治性癫痫病灶区PV神经元功能异常的生物学分析199纳米利福平递药通过调控α-synuclein的SUMO化-泛素化修饰平衡抑制神经毒性的机制研究200基于FTH1/NCOA4铁蛋白自噬研究CBS/H2S系统对脑出血后脑保护的作用及分子机制201基于多模态深度学习的面向儿童结节性硬化症相关性癫痫预后的早期快速诊断研究202KDM6A通过去甲基化修饰上调线粒体功能以减轻孕期空气污染造成的胎儿大脑发育障碍的机制研究203双侧Theta爆发式经颅磁刺激对抑郁症患者自杀意念的临床疗效安全性及潜在作用机制研究204HIF-1α/MFN2/β-catenin信号调控人诱导性多能干细胞功能性神经分化及干预治疗神经退行性疾病的机制研究205基于MRI分子影像探讨hiPS-MSC来源的外泌体协同脑类器官移植修复脑缺血损伤的作用和机制206基于多模态MRI对孤独症刻板重复行为的神经机制研究207基于神经影像的内在脑功能网络探索青少年双相障碍认知功能改善的重复经颅磁刺激治疗靶点的研究208TSP4-BMSC移植介导的血管生成对缺血性中风神经血管单元重构的作用和机制研究209基于血管内皮细胞MKP-1/MAPKs通路探讨黄柏酮缓解缺血性血脑屏障损伤的作用及机制210巨噬细胞膜包覆仿生纳米载药颗粒联合双输入逻辑电路通过Wnt5a靶向调控失神经肌萎缩的作用及机制研究211基于记忆再巩固的认知重评对抑郁症患者创伤记忆的干预作用及机制研究212雷公藤红素通过BiP调控反应性星形胶质细胞表型转化在缺血再灌注脑损伤中的作用与机制研究213ERK信号通路介导自闭症中氧化应激效应对小胶质细胞增殖的调控与分子机制研究214FoxO3a转录因子过度激活在双相障碍中的作用及机制研究215DRG卫星胶质细胞TLR9的上调介导紫杉醇诱发的神经病理性疼痛的机制研究216基于SIRT1/PGC1α信号通路探讨PACAP对缺氧缺血性脑损伤的保护机制217PPARα通过促进GPX4表达抑制铁死亡缓解小鼠脑缺血再灌注损伤的机制探究218靶向TRPV4防治糖尿病周围神经病变的线粒体机制研究219组织驻留B细胞在肝硬化进展中的特征探索及功能异常的代谢调节机制220SARS-CoV-2膜蛋白正调控肺泡巨噬细胞焦亡致肺炎的分子机制研究221HLA-A分子间的相互作用影响新冠病毒Spike特异性CD8+T细胞应答的机制研究222RNA结合蛋白hnRNPLL调节记忆性T细胞介导移植排斥的机制研究223IFN-α治疗儿童慢乙肝患者实现功能性治愈的作用机制研究224非经典记忆B细胞免疫学特征及功能研究225TWEAK调控细胞自噬影响类风湿关节炎中结核潜伏感染再激活的机制研究226OX40+CD4+CD28-T细胞参与系统性红斑狼疮发病及器官损伤的机制研究2273D打印微针在骨关节炎诊断和治疗中的应用研究228M2型丙酮酸激酶抑制剂通过阻断MDSCs招募抑制黑素瘤进展的作用及机制研究229hUC-MSCs调控AIM2炎症小体信号轴介导的炎症反应在银屑病治疗中的作用机制研究230KLF4/LC3/NF-kB通路对角质形成细胞增值、分化、炎症反应调控机制及其在寻常型银屑病发病中作用231LSS调控SMO/GLI在掌跖角化症发病中的机制研究232功能性释氧微球负载自体内皮祖细胞促进糖尿病创面修复研究233LncRNARP11-818024.3调控FGF2活化PI3K/Akt信号通路增强毛囊干细胞干性治疗雄激素性秃发的机制研究234TWEAK调控毛囊干细胞功能促进创伤愈合235GS-9620调控KCs中自噬依赖性非常规分泌发挥抗银屑病皮肤炎症的机制研究236SNARE家族蛋白调控角质形成细胞-神经元信号传导参与玫瑰痤疮发病的机制研究237烟酸通过FOXO/Akt信号通路改善小梁网细胞线粒体功能的实验研究238超声微泡介导基于NPR-cGMP-PKG信号通路的C型利钠肽对青光眼性视神经损害的修复研究239LAMP2调控ROS/Snail通路介导上皮-间质转化参与增生性玻璃体视网膜病变的机制研究240BMSCs-EXOs+miR-486-3p调控Treg细胞分化改善糖尿病视网膜病变的机制研究241miR-523-3p抑制DKK1通过调控PD-L1和乳酸影响视网膜母细胞瘤免疫微环境的机制研究242应用深度学习技术构建基于角膜地形图的飞秒激光弓形切口矫正角膜散光手术规划模型研究243二十烷二酸通过PI3Kδ/AKT/FOXO1信号通路诱导ANGPTL4表达在早产儿视网膜病变病理性新生血管生成中的作用机制研究244SLX4基因在爪蛙视神经激光损伤和DNA修复中的作用和机制研究245METTL3通过m6A甲基化调控视网膜微环境在AMD发展中的作用及机制研究246circPVT1通过miR-765/NEU3轴调控视网膜母细胞瘤发展的机制研究247EBV上调多肽促进鼻咽癌侵袭和转移机制的研究248多组学技术探索PPARs激动剂调控耳蜗毛细胞铁死亡的机制研究249大气污染物调控DC免疫代谢重编程诱发呼吸道过敏反应的作用及机制研究250基于单细胞转录组测序探究少突胶质细胞与成纤维细胞的相互作用在耳部瘢痕疙瘩形成中的作用机制251Mcl-1通过诱导并维持Th2细胞极化促进变应性鼻炎发病的机理研究252IRF1来源的LPDWHIPV小分子多肽增加p53蛋白稳定性招募FBXW7失活MYH9/Snail信号抑制鼻咽癌转移的作用机制研究253二甲双胍基于STAT3-铁死亡通路调控喉癌上皮间质转化和转移机制的研究254IGF2BP3介导的m6A修饰在PD-L1表达及鼻咽癌免疫逃逸中的作用255IL-25调控嗜酸性鼻息肉异位淋巴组织形成的作用和机制256基于卷积神经网络的腺样体标准化分度和转归预测研究257Stat3调控Wnt/PCP信号通路介导颅颌面骨发育和MSCs成骨向分化的研究258人牙囊来源间充质干细胞分泌组调控巨噬细胞向炎症抑制型极化的机制研究259上颌中切牙穿龈轮廓的数据库构建及个性化种植基台的生物力学研究260脂肪组织外泌体通过激活巨噬细胞中NF-kB信号通路间接诱导前成脂细胞归巢并促进组织再生的研究261m6A甲基化介导施万细胞在涎腺腺样囊腺癌嗜神经侵袭的作用机制研究262基于光控的智能响应型黑磷复合物水凝胶在颌骨缺损骨组织可控再生中的研究263变异链球菌rnc基因调控变异链球菌-白色念珠菌双菌种生物膜致龋性的机制研究264仿生原位成型水凝胶在牙周组织工程中的研究265神经元衍生孤儿受体1调控牙周膜干细胞成骨/成脂分化平衡在修复牙槽骨缺损中的作用机制研究266IL-1α诱导TRPA1功能异常介导细胞焦亡在牙髓炎进展中的机制研究267SOSTDC1通过Wnt/β-catenin信号通路调控牙胚间充质干细胞成牙诱导干性的机制研究268牙龈卟啉单胞菌上调巨噬细胞sPD-1表达促进类风湿关节炎的机制研究269炎症牙髓干细胞外泌体miR-146a-5p促进巨噬细胞极化介导牙髓炎症的机制研究270孤儿核受体ERRα介导小胶质细胞铁死亡减轻脓毒症相关性脑损伤的机制271CircRNA通过FoxO3a调节中性粒细胞凋亡介导糖尿病脓毒症急性肾损伤的研究272Mettl3通过FNDC5调控糖尿病心肌病的机制研究273METTL3通过修饰YB-1促进巨噬细胞极化在肠缺血再灌注损伤中的作用274内源小分子代谢物琥珀酸通过抑制RIPK1-RIPK3坏死信号通路减轻脓毒症的功能与分子机制研究275ELA/APJ经miR-124激活CTDSP1/PI3K/AKT通路减轻氧糖剥夺诱导的神经元凋亡和轴突损伤的机制研究276负压创面治疗技术通过YAP/En1通路调节糖尿病创面瘢痕化的机制研究277脂联素调节APPL1/PPARɑ/NF-κB通路影响心律失常型心肌病的炎症机制研究278负载hyBMSC源外泌体的多功能水凝胶促糖尿病创面修复及机制研究279MCU/mCa2+/ROS途径介导PARP-1激活在心肌缺血再灌注损伤中的作用及机制研究280脓毒性脑病中电压门控质子通道Hv1增加NLRP3炎性小体调控小胶质细胞线粒体自噬的实验研究281miRNA-296-5p通过ACE2信号通路对内皮祖细胞增殖的调控作用研究282MiR-146a通过TLR7受体调节皮层神经元可塑性促进脓毒症相关性脑病的研究283基于炎症靶向的MDC@Ex-γ3-CeO2@PDA设计及其对脓毒症急性肺损伤的保护作用284仿生“砖-砂浆”多层组装矿化微支架的构建及其骨再生修复应用与机制研究285新型化合物J147对脓毒症相关脑病保护作用的机制研究286激活肝癌细胞EGFR/STAT3/ABCB1信号轴促进仑伐替尼获得性耐药的机制研究287肝细胞表达CYP21A2通过Integrin-FAK信号通路促进HCC转移机制研究288METTL7B通过甲基化调控线粒体稳态促进肺腺癌TKI耐药的机制研究289骨胶原的氨基酸代谢通过抑制铁死亡信号促进骨转移的机制研究290Hsa_circ_0003176通过miR-182-5p/RBM5/mTOR通路调控自噬和糖酵解抑制非小细胞肺癌进展的研究291酒精通过黏附侵袭性大肠杆菌异常激活YAP促进细胞再生失控与炎症相关结肠癌的机制292IKZF4通过调控内吞转运调节器转录促进胃癌进展的作用及机制研究293纳米磷酸钙载药5-Fu介导YAP/TAZ降解抑制胰腺癌转移的机制294基于表观基因组图谱识别KDM5A及其对肝癌特异性启动子的调控机制研究295溶质转运蛋白SLC6A19介导氨基酸代谢重编程抑制肾透明细胞癌发生的作用及机制研究296基于CRISPR/Cas9系统对突变型KRAS胰腺癌治疗靶点的筛选及其机制研究297铬纳米促进免疫细胞瘤内高效浸润的作用机制及其在肝癌免疫检查点阻断联合治疗中的应用研究298OLFML1诱导侵袭前沿微环境CD70+癌相关成纤维细胞形成促进结直肠癌免疫逃逸的机制研究299Pri-miR-19a-3p甲基化调控肿瘤外泌体对口腔颌面部骨肉瘤骨破坏的影响及机制研究300脂肪酸受体CD36促进宫颈癌干细胞样特性和诱导耐药及其机制研究301物理穿孔基因递送技术介导的卵巢癌化疗联合基因治疗及其机制研究302低流体剪切应力通过ET-1/YAP途径诱导肺腺癌细胞发生上皮间质转化机制的研究303外泌体旁分泌网络促脑胶质瘤血管生成的机制及mRNA治疗研究304中性氨基酸转运蛋白SLC6A19增强谷氨酰胺摄取促进肾癌细胞铁死亡的上游调控机制研究305双lncRNA“对话”调控胃癌细胞迁移侵袭性的效应机制研究306结直肠癌外泌体lncRNASNHG10通过FOXP3/INHBC轴调控NK细胞毒性介导肿瘤免疫逃逸的机制研究307长链非编码RNACALML3-AS1通过调控miR-20a-5p/RBM38轴促进肺癌增殖和转移的分子机制研究308AKR1B10促进乳腺癌组蛋白乳酸化修饰的分子机制及其调控肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的研究309基于综合生物信息学分析鉴定的低级别胶质瘤转化高级别胶质瘤相关的新型枢纽基因对替莫唑胺化疗敏感性影响的机制研究310RAB24在前列腺癌骨转移免疫微环境中的作用及机制研究311H3K27乙酰化修饰的lncRNA-OTUD6B-AS1/miR-129-5p/LRG1分子轴介导TGF-β信号通路促进非小细胞肺癌血管生成的机制研究312METTL7B通过m6A甲基化修饰c-Jun促进脑胶质瘤进展的分子机制探究313CAR-NK疗法联合免疫检查点抑制剂打破免疫抑制微环境并杀伤肺癌实体瘤的机制研究314共表达杂合IgGAFc-PD-L1抑制剂和PGDH溶瘤腺病毒病毒免疫治疗宫颈癌的研究315NRF2介导的氧化磷酸化在食管癌淋巴结转移中的作用及机制研究316唑来膦酸通过上调POR诱导铁死亡在骨肉瘤中的机制研究317PUM1调控PD-L1核心岩藻糖基化介导胃癌免疫逃逸的机制及转化研究318雌激素相关受体α通过双重调控三羧酸循环中乌头酸酶2促进前列腺癌干细胞自我更新的机制研究319应用单细胞转录组和TCR测序解析CD4CAR-T细胞治疗重塑皮肤T细胞淋巴瘤免疫微环境的作用机制320LncRNA-C6orf223编码蛋白促进肾癌转移的分子机制研究321UBE2O调控PIK3R1泛素化降解促进骨肉瘤化疗耐药的作用机制研究322PMSA靶向的工程化巨噬细胞纳米载体用于前列腺癌的诊疗一体化323骨形态发生蛋白4介导干细胞样变在肺癌侵袭转移的作用及机制研究324硬脂酸通过调节转铁蛋白受体的S-脂酰化促进前列腺癌细胞铁死亡的作用及机制研究325pri-miR-122编码新型小肽抑制肝癌转移的功能及机制研究326lncRNAHAND2-AS1高甲基化促进膀胱癌演进的分子机制研究327miR-15a下调脂肪酸合成酶所介导的失巢凋亡抵抗对骨肉瘤生长和转移的影响328细胞黏附分子CD11a通过影响免疫细胞调控乳腺癌侵袭型的机制研究329MEX3A通过FOXO3/SOX2信号通路促进乳腺癌他莫昔芬耐药的机制研究330Piezo2第32位外显子跳跃影响奥沙利铂诱发痛觉过敏的作用机制331PAR2/miR-204/ACSL4通路调控结直肠癌细胞铁死亡抑制肿瘤发生发展的研究332基于IKAP模式的出院准备度护理干预在乳腺癌病人配偶或子女的应用研究333Integrinβ4调控肿瘤外泌体中miR-21诱导血管内皮细胞焦亡以促进甲状腺癌转移的机制研究334内分泌治疗通过激活GAPDH糖酵解活性促进前列腺癌神经内分泌转化的机制研究335质子放疗联合免疫治疗重塑恶性胶质瘤免疫微环境的机制研究336卡介苗通过TLR4/LY96重编程肿瘤相关巨噬细胞增强宫颈腺癌PD-L1单抗疗效的机制研究337等离子体活化液促进双硫仑增强肺腺癌干细胞的放化疗敏感性及相关机制研究338G蛋白偶联受体GPR158通过内质网应激应答通路推动GBM前神经元表型可塑性的分子机制研究339eEF1A1通过调控自噬通路在神经母细胞瘤发生发展中的作用及分子机制研究340FOXP3在肺腺癌微环境内通过PVR/TIGIT、PVR/CD96信号轴诱导肿瘤细胞免疫逃逸的机制研究341谷氨酰胺转运体SLC1A5通过调控巨噬细胞募集和M2型极化介导肝癌免疫逃逸的机制研究342LINC00963介导转录调控HMGA2-POU1F1轴募集CXCL12/CXCR4依赖的肿瘤相关中性粒细胞影响结直肠癌肝转移的作用机制研究343TRIM28在硼替佐米治疗胃癌产生耐药中的作用机制研究344肺腺癌源外泌体过表达miR-197-3p抑制IGFBP3通路促进肿瘤血管生成的作用及机制研究345超级增强子调控的m6A修饰在非酒精性脂肪肝引起癌中的分子机制研究346IGF2BP2通过下调结直肠癌细胞CD99的表达抑制CD8+T细胞免疫浸润的作用及机制研究347LanCL2入核激活STAT3-CTTN转录信号轴促进恶性胶质瘤侵袭与复发的机制研究348KRT18+CENPKhigh细胞通过WNT-NOTCH-EPH信号轴促进邻近微环境新血管生成在尿路上皮癌进展中的作用和潜在应用研究349循环肿瘤细胞(CTC)PD-L1活检在晚期非小细胞肺癌疗效评估中的应用研究350Caspase-activatedDNase诱导TP53阳性骨髓瘤细胞停滞于G2/M期促进突变积累和克隆演变351基于转录组及微量蛋白组学探讨乳腺叶状肿瘤的分子病理表型352NCAPD2与CDK1形成复合物作用ATF-6α/Ca2+/Caspase9信号通路影响内质网应激并抑制乳腺癌细胞凋亡353面向脑卒中后单侧空间忽略认知障碍的AR-ROBOT康复评定方法研究354神经型胸廓出口综合征的多模态电生理评估及康复研究355Duchenne型肌营养不良慢性疼痛的中枢敏化机制和预后模型研究356基于多模态MR神经成像技术的脑tDCS与音乐治疗协同治疗脑卒中意识障碍患者的脑网络机制研究357rTMS通过调控Glu/GABA-Gln代谢环路改善缺血性脑卒中失眠的治疗作用及机制研究358基于Smad蛋白介导TGF-β/BMPs信号通路的挤兑效应探讨创伤性异位骨化发病机制及富血小板血浆的抑制作用359微能量经颅超声LIPUS通过PTEN/PI3K/AKT通路调控脑膜淋巴管引流改善缺血性卒中的机制研究360利用单个细胞外囊泡测序新技术建立基于TIMP1/MMP9的缺血性脑卒中活动能力康复效果精准预测模型及其机制研究361RNA解旋酶DHX9负向调控外泌体circRMST介导的神经元突触受损在颅脑创伤急性期的机制研究362微环境敏感型纳米载体介导c-Myc调控戊糖-磷酸途径对细胞抗氧化应激和肿瘤微环境耐受机制的研究363精准靶向CD147的小分子近红外探针的肿瘤显像研究364UTMD介导的双配体修饰主动靶向脑胶质瘤双模式成像的研究365射频消融联合肺炎克雷伯菌原位炎症辅助对原发性肝癌免疫调节影响的研究366超声空化效应介导的外泌体-仿生纳米硅载药体系协同增效三阴性乳腺癌PD-1/L1免疫治疗的研究367RNA介导的免疫检查点分级调控用于逆转肿瘤免疫抑制微环境的研究368不同声响应支架对缺血组织血管生成影响的机制研究369新型双特异性抗体177Lu-DOTA-DLL3/CD3分子探针研发及其在小细胞肺癌的放射-免疫协同治疗研究370肝癌精准靶向型CAR-LrNK细胞的构建及其治疗机制研究371聚焦超声刺激迷走神经调控胆碱能抗炎通路减轻急性心肌缺血再灌注损伤的研究372基于AI辅助婴儿发育性髋关节发育不良三维超声检查多中心研究373高帧频超声造影对乳腺BI-RADS4类结节微血管灌注模式的功能评估技术研究374肝细胞癌消融术后肿瘤残留与炎症反应带鉴别的多模态磁共振影像组学研究375多模态MRI定量功能成像联合核基质蛋白EPCA-2精准预测PSA诊断灰区早期前列腺癌及Gleason评分上调376基于超声图像轻量级肝纤维化分级识别模型的研究及分布式网络构想377基于铁死亡调控的青蒿琥酯磁性金纳米载药体系协同增强三阴性乳腺癌免疫治疗的研究37889Zr/177Lu标记CD46抗体用于多发性骨髓瘤诊疗一体化的研究379基于半球间镜像同伦和动态功能连接对偏瘫儿童上肢精细运动调控脑区的重构研究380超声可视化靶向递送环状RNA-FKBP52治疗薄型子宫内膜的疗效及其机制研究381肝靶向抗氧化酶纳米胶囊用于药物性肝损伤的预防和治疗382基于在线单个投影预测实时四维锥束CT的运动管理方法研究383卷积神经网络结合颈椎双开门椎管扩大成形术中超声影像评估脊髓减压状态预测脊髓功能恢复的研究384NIR-II荧光微泡用于血脑屏障开放及脑胶质瘤光热治疗的研究385CathepsinB激活的NIR-IIb比率荧光探针用于乳腺癌前哨淋巴结转移灶精准示踪的研究386APOE基因DNA甲基化修饰调控脑白质疏松症形成的机制研究387L-HBsAg/CD147双靶向CAR-NK/NK细胞产业化培养系统及其对HCC的治疗效果研究388吲哚类先导化合物结构改造及其衍生物对粪肠球菌的抗菌/抗生物膜活性的作用机制研究389CD137/CD137L信号通路对脑弓形虫病的免疫调节机制研究390TCR特征及动态变化与儿童CHB功能性治愈的相关性研究391锌元素在艾滋病合并结核感染者中对免疫重建的调节机制研究392基于新型荧光纳米机器的多重耐药致病菌感染诊疗一体化新策略研究393西那卡塞靶向ClpX蛋白抑制革兰阳性细菌生长及生物被膜形成的机制研究394仿生纳米酶通过诱导巨噬细胞极化治疗耐药细菌感染的研究395新型冠状病毒突变及抗体逃逸的前瞻性研究396PD-1调控T细胞免疫代谢功能抑制脓毒症患者细胞免疫应答的作用机制研究397中国境内主要致病性军团菌抗生素药物敏感性及耐药机制研究398靶向HBVcccDNA转录环节新型抑制剂的筛选与鉴定399肝移植术后下呼吸道感染病原谱解析及重要病原致病机制探究400基于深度测序的新冠病毒广谱中和抗体长效克隆扩增群的鉴定及其抗病毒机制研究401LINC02528/IFI6信号轴调节网络在结核菌免疫逃逸过程中的作用和机制研究402环境砷暴露增加GDM发病风险的作用机制研究403纤维化中肌成纤维细胞活化演变关键生物标记物筛选及功能研究404曲霉菌四重realtime-RPA检测体系的建立及其在诊断侵袭性曲霉病时的应用价值405口服重组Hp-NAP枯草芽孢抑制花生过敏的机制研究406前列腺素代谢产物15d-PGJ2通过调控人支气管上皮样细胞焦亡抗矽肺纤维化的作用机制研究407基于水凝胶LAMP技术的快速单细胞HPV检测方法学研究408SUMO1泛素化在非酒精性脂肪性肝炎中诱发腹泻的机制研究409基于非酶型多级信号放大的病毒超灵敏可视化检测和高效杀灭410肝癌侵袭转移相关tRF&tiRNAs的筛选及其分子作用机制研究411NR2BDNA甲基化、酪氨酸磷酸化和其相互作用蛋白在低氧预适应脑保护作用中的研究412电离辐射通过mRNAm6A甲基化修饰上调食管癌细胞PD-L1表达的机制研究413基于深度学习优化算法的脑膜瘤MRI图像自动分割与精准预测414基于功能化锰纳米探针的乳腺癌双靶向多模态成像和PDT/PTT疗效监测研究415基于斑马鱼放射性脑损伤模型中LncRNAC2dat1调节METTL14/Nrf2/ROS通路的放射性脑损伤机制研究416基于CT影像组学和临床特征的COPD患者早期肺癌风险因素的分析及预测研究417基于多模态MRI影像的儿童急性淋巴细胞性白血病化疗完全缓解期认知功能障碍及脑网络机制研究418金属硫蛋白对汞中毒致大鼠肾病综合征的影响419mTORC1调控caveolae结构稳态在老龄血管舒缩功能中的作用研究420七氟醚调控小胶质细胞糖代谢重编程和MDH2O-GlcNAc糖基化修饰促进阿尔茨海默病的机制研究421Sirt2乙酰化调控延缓FoxO3a/MnSOD介导的氧化应激并预防血管衰老的机制422细胞外基质通过PI3K/AKT/β-Catenin信号通路干预prelaminA诱导的血管平滑肌细胞衰老423CircSTX12表达上调通过竞争性结合C-Cbl调控Hippo通路介导MSC自我更新减慢和骨脂分化失衡在老年性骨质疏松症发病中的机制和应用研究424基于全环境组关联分析和贝叶斯网络的抑郁风险预警模型的构建与验证研究425宫内环境内分泌干扰物暴露对婴幼儿神经行为发育的影响及代谢通路探索426Chemerin通过非基因途径Gαi/RhoA/ROCK调控胎盘滋养细胞功能致妊娠期代谢性疾病的机制研究427环境挥发性有机物通过AhR-S1P轴引发哮喘的作用机制研究428β-淀粉样多肽清除在高脂饮食诱导认知功能障碍中的作用及机制研究429BPDE通过AhR/MARCHF1/GPX4通路促进HUVEC铁死亡而抑制血管形成并引发流产的损害效应和调控机制430静脉注射脂肪乳联合血液灌流在敌草快中毒中的应用——基于毒代和毒效动力学的实验研究431Trim39/moap1通路在SAHH调控糖尿病肾病中的作用和机制432藏红花素调控Nrf2抑制铁死亡改善阿尔茨海默症的机制研究433基于CD4+T细胞介导的Th1/Th2和Th17/Treg免疫平衡探讨维生素D补充与新冠疫苗免疫接种交互作用对动脉粥样硬化人群的影响及其机制研究434变点统计分析方法在医学和医院管理中的应用研究435肝癌特异性cfDNA甲基化诊断标志物筛选及验证436泛素连接酶和去泛素化酶基因甲基化在结直肠腺瘤及结直肠癌中的作用437有机磷酸酯TDCIPP调节的溶酶体自噬在认知损伤中的作用机制研究438维生素A通过Th17细胞/IL-17(IL-17A)在孤独症谱系障碍发病机制中的作用研究439VR眼动追踪认知功能评估与AD的早期筛查的应用研究440长工时对职业人群睡眠障碍影响及心理社会发生机制的前瞻性队列研究441辐射损伤细胞遗传学异常图形库的建立及应用442基于肺癌类器官探讨细胞膜表面张力失调在苯并(a)芘致肺癌EMT中的作用及分子机制443硒和铁在少精症中的交互作用及SLC7A11-GPX4铁死亡机制研究444职业性噪声对接触者代谢组的影响及其在噪声性听力损失中的作用研究445基于肠道菌群和ctDNA甲基化构建结直肠癌早期病变风险预测模型446深圳市青少年生殖健康行为决策模型及KAP干预模式研究447大气臭氧暴露对儿童肺功能的影响及炎性小体作用机制的前瞻性出生队列研究448唐菖蒲伯克霍尔德氏菌产高致死率毒素米酵菌酸的产毒条件的研究449大陆气候升温下入侵病媒藁杆双脐螺在深圳的适生性分布格局和遗传多态性进化趋势分析450基于多元传感技术与机器学习构建深圳市癌性疼痛转归的预测模型及针刺早期介入对疼痛缓解的前瞻性队列研究451电针激活AMPK/mTOR通路介导糖脂能量代谢调节胃炎癌转化的分子响应机制研究452基于多模态MRI与机器学习探索调任通督针刺法治疗脑小血管病性认知障碍的中枢响应机制453基于mtDNA-cGAS-STING信号通路介导的心肌炎症研究橙皮素改善心力衰竭的机制454基于fMRI成像技术探讨通督调神针法治疗缺血性脑卒中的脑功能效应机制研究455健脾化瘀解毒法介导IL-33/ST2/ILC2信号轴调控胃解痉多肽表达化生“炎-癌”转化机制研究456基于外泌体miRNA-223调控FOXO3a/Bim途径抑制Aβ诱导的神经元凋亡探讨参知健脑方改善AD的作用机制研究457基于注意偏侧化探讨八段锦训练对卒中后认知障碍的效应机制458基于转录-代谢组学和网络药理学研究半枝莲治疗眼镜蛇咬伤的药效物质基础与作用机制459归肾活血汤治疗宫腔粘连临床疗效观察及网络药理学研究460益肾生髓龟板调控VDR自发相分离抗多发性骨髓瘤骨病骨髓间充质干细胞铁死亡的机制研究461解毒通络调肝方通过FMO3-FXR通路调控肠肝轴改善T2DM-IR作用机制的研究462脑髓康通过调控PERK-eIF2α-QRICH1信号通路保护脑微血管内皮细胞的机制研究463基于“脑-肠-菌”轴探讨电针对阿尔茨海默病模型大鼠β-淀粉样蛋白和γ分泌酶的影响研究464基于外泌体miR-145-HIF2α-CD36介导脂质摄取研究疏肝消脂方干预NASH伴纤维化的作用机制465基于介导IL-27-IL-27Rα信号传导探讨热量限制联合加味苓桂术甘汤治疗后肠道菌群对肥胖小鼠的生物学效应466改良紫云膏调控miR-29c-3p/VEGFA/AGE-RAGE通路激活血管内皮细胞促进糖尿病溃疡愈合机制研究467基于PKC通路探讨疏肝振阳汤调控海马神经元细胞凋亡改善抑郁大鼠勃起功能的机制研究468基于Slit2/Robo1/VEGF信号通路探讨中医“二补五通”法及配方颗粒合剂改善肾纤维化的分子机制469基于Hippo通路调控小胶质细胞重塑胞外基质促进突触可塑性探讨针刺抗抑郁的机制研究470基于“肠道菌群-SCFAs”探究合募配穴对功能性消化不良的临床疗效研究471基于心身评估干预系统对动静调神法治疗慢性失眠的效应评价研究472基于“通督益髓”理论针刺八髎穴治疗疑难性面瘫眼睑闭合不全的临床研究473园艺疗法联合皮内针治疗COVID-19疫情防控期间相关隔离人员广泛性焦虑的疗效观察及相关机制研究474基于NF-κB信号通路对肿瘤微环境中M1-M2型巨噬细胞极化的影响探讨柴芪益肝颗粒防止乙肝肝癌转移的作用机制475基于能量应激调控铁死亡探究健脾益肾方抗糖尿病肾损伤分子机制476基于肾脑相济理论与神经元铁死亡调控探讨加味补阳还五汤治疗卒中后认知障碍的作用机制477基于调控CCL2-CCR2轴研究健脾活血解毒方调控肝癌微环境治疗原发性肝癌的机制研究478基于免疫调节探讨蛇毒清合剂治疗蝰蛇咬伤致急性肾损伤的疗效研究479基于HMGB1琥珀酰化修饰途径探讨疏肝消脂方干预NASH的炎症性损伤机制480基于“气荣生心”理论设计智能酶响应型外泌体系统及其在靶向治疗心肌梗死中的应用481新冠疫情下护士心理契约内容、结构、违背效应及人才保持策略研究482益气化痰活血方药调控NF-κB对间歇性低氧大鼠左心功能不全的作用研究483基于微生物-肠-脑轴探讨升督平木方治疗慢传输型便秘的作用机制484基于ACC介导脂肪酸从头合成研究益气活血法干预CKD肾小管间质纤维化的作用机制485基于人工智能算法的经络诊断在阈下抑郁防治中的应用及早期识别模型研究486基于Ism1/mTORC2/AKT/GLUT4信号通路探讨热量限制双重调节葡萄糖稳态及肝脏脂质异位沉积的机制研究487基于PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬调控HBx探讨正肝方对乙肝相关肝癌的干预机制488通脉消斑汤对FTO调控的m6A甲基化修饰在心肌细胞缺氧复氧中影响的研究489从Sirt6/PPARα/ROS信号调控中性粒细胞胞外诱捕网的角度探讨灌肠方溃疡灵治疗溃疡性结肠炎的作用机制490泻肺散表观调控组蛋白去乙酰化酶3抑制2型固有淋巴细胞干预呼吸道过敏性疾病的作用机制研究491JapoflavoneD抑制Keap1烷基化调控SOD2/ROS信号通路清除结核菌的机制研究492华蟾酥毒基逆转胶质母细胞瘤替莫唑胺耐药的作用及机制研究493从核蛋白PXR/NF-κB介导的EMT探讨广藿香有效成分抑制幽门螺杆菌所致胃肿瘤细胞迁移的作用机制494基于“体内过程-谱效关系”研究鸦胆子-三七药对治疗溃疡性结肠炎的药效物质和配伍机理495异甘草素通过介导H2A.Z.1调控黑色素瘤细胞DNA损伤的机制研究496基于“破壁降毒”策略研究“锦红汤颗粒”治疗脓毒症的药效物质及作用机制497基于“脾主肌肉”探讨活血降糖饮通过FGF1—GLUT4轴调控骨骼肌糖代谢的机制498黄芪散通过调控胆汁酸代谢稳态介导肠肝对话干预果糖诱导NAFLD的机制研究499基于超级增强子驱动的PADI2促组蛋白瓜氨酸化探讨黄连碱抗奥西替尼耐药非小细胞肺癌的机制研究500基于“肠-肾轴”研究黄芪-大黄药对调控“SCFA/PPARγ/Klotho/FGF23”信号通路改善慢性肾衰钙磷代谢紊乱的作用机制501肾衰营养胶囊对CRF-PEW骨骼肌萎缩氧化应激的分子机制502肠道微生物在小檗碱调控结肠癌细胞生长和分化过程中的相关机制研究503基于SYN1相分离探究艾灸调控α-syn聚集抗帕金森病的机制研究504基于线粒体质子漏调节细胞代谢表型探讨蒿甲醚改善糖尿病肾小管损伤的机制505基于“肝郁脾虚”理论探讨乳康饮通过免疫原性细胞死亡对乳腺癌的免疫调控作用506叶下珠消癥汤结合西医疗法对HBV相关中晚期肝癌临床疗效研究507中药单体黄芩素通过肿瘤微环境基质粘附通路抑制胰腺癌细胞转移能力的机制研究508基于超分子自组装构建抑制DNA损伤修复系统的纳米孪药用于逆转结肠癌多药耐药和化疗增敏研究509尿素酶驱动表达穿膜肽的细菌外膜囊泡的纳米系统用于膀胱癌灌注治疗510miRNA-155介导Treg细胞在丁酸梭菌促进过敏小鼠免疫耐受中的作用研究511免疫佐剂单磷酰脂质A的单分子态递送与动态识别研究512GLS剪接体GAC通过PINK1调控线粒体自噬作为IDH突变型胶质瘤药理靶点的机制研究513GSDME在药物性肝衰竭进程中的作用机理与抑制剂研究514基于靶点蛋白PGK1晶体结构的新型抗胶质瘤药物P7C3药理机制研究515伊曲康唑经Hedgehog信号通路调控P-gp逆转结肠癌耐药细胞对5-FU耐药的研究516血管平滑肌细胞MAP3K2促进腹主动脉瘤形成及机制研究517METTL3小分子抑制剂通过抑制m6ARNA甲基化修饰影响恐惧记忆的作用及机制518CYP2E1在慢性肾脏病诱导药物性肝损伤易感性增强中的作用和机制519虎乳灵芝糖蛋白通过靶向DC细胞增强PD-1抑制剂抗黑色素瘤的机制研究520仿生肠-肝类器官芯片技术在中药毒性评价及作用机理的探索研究521机理与数据驱动的复杂多尺度物理问题的机器学习算法研究522狄拉克上同调在朗兰兹纲领研究中的应用523非线性方程的正则化及其相关研究524区域几何与拓扑对非线性偏微分方程的影响525线性二次随机最优控制与微分对策526半经典随机薛定谔方程的理论和数值分析527基于力电耦合调制的全固态聚电解质弹性体柔性可变焦透镜研究528基于分布式传感-激励及人工智能的汽车减阻技术529光调控机械性能力学超材料设计制造与应用530海马体的力电耦合特性及其机制研究531基于量子网络的多方量子任务532利用机器学习探究非晶复杂网络的力学特性并构造超构材料533RuO2嵌钠的物理机制及其在电解水产氢中的研究与应用534二维石墨炔膜的热电和光学性质研究535面向新一代光子芯片的可切换相变半导体的逆向设计及光场调控536胶体马达与磷脂结构的相互作用研究537基于中子全散射方法的非晶态固态电解质材料微观结构及离子输运机制研究538多维度调控Cu基催化剂CO2还原多碳产物的原位同步辐射研究539基于d-p电子排斥构建富电子硅配体540可见光催化从无机铵制备有机含氮杂环的多元化策略研究541电化学驱动的烷基醇类脱羟甲基官能团化反应研究542手性Z式Grubbs催化剂的设计合成及其在环烯醚萜类天然产物合成中的应用543用于光电催化氮还原过程的二氧化钛纳米柱阵列反应微环境调控544自支撑多孔碳纤维@金属硫族化物设计构筑锂硫电池中间层材料及其作用机理研究545基于多重碳氢键活化的炔烃环化聚合制备新型聚集诱导发光共轭聚电解质及其构-效关系研究546碲基稀土配合物的合成、磁性及发光性能研究547铜/手性磷酸催化自由基参与的sp3碳氢键不对称官能团化反应及其在手性药物分子合成及后期修饰中的应用548无CO2排放型SOFC双钙钛矿电催化材料制备和脱氢机理研究549n型梯度掺杂策略激活晶化氮化碳近红外光活性的研究550高效稳定非晶催化剂的活性结构表征与动态催化机理研究551热载流子钙钛矿太阳能电池及其A位阳离子调控机制552结合机器学习的蛋白-药物分子结构的量子精修方法与应用553新型金纳米簇-纳米有机金属框架复合材料发光传感探针的设计与制备及其生物传感应用554荧光传感器阵列与深度学习工具用于癌症液体活检的研究555单原子催化剂的电催化硫还原反应研究556非对称电解质膜在固液混合锂电池中的应用及其界面作用机制557纳米线基多波段光谱调控电致变色智能窗口的设计与机理研究558有机光诊疗纳米粒子胶束结构优化在提升诊疗性能、药代动力学和生物安全性中作用的研究559太阳光诱导海水分解产氢-有机分子原位储氢串联反应研究560大面积宽带隙二维钙钛矿太阳能组件的制备及衰减机制研究561钙钛矿晶体可控合成及高效率太阳能电池562多酸团簇与碳纳米材料的限域组装与电催化氧还原性能研究563喹吖啶酮离子型添加剂提高钙钛矿太阳能电池性能及其机理研究564基于MOF-CD界面调控策略的无枝晶水系锌离子电池研究565基于大环配位分子的硝酸根还原电催化剂研究566小分子原位开环聚合调控复合固态电解质中锂镧锆氧与PEO间快离子传输和耐高电压研究567低维铜基卤化物的设计合成及其自陷态发光机制研究568陆海交互过程中活性卤素化学对深圳市臭氧污染的影响569放射性污泥微波固化机理与技术研究570基于锁核苷结构的mRNA帽子类似物的合成571声激活金属药物用于细菌靶向多模式治疗的研究572新型高能量密度锂硒液流电池系统的开发与优化573细菌新型RNA靶向CRISPR-Cas系统作用机制研究574化学吸收剂和光照协同强化微藻固碳的机制及其自动化调控技术575玉米microRNA529通过调控雄穗发育改良耐密植性研究576海水入侵对滨海地区豆科与非豆科作物系统氮固持的影响577台风对深圳市植被碳吸收能力的影响及其机制578DEAD-boxRNA解旋酶促进核糖体成熟的机制研究579人源糖原脱支酶的结构与功能研究580人类疱疹病毒4型间质蛋白BKRF4的结构与功能研究581染色质微结构域作为肿瘤新型诊疗靶标的研究582基于miRNAs表达预测模型的肝癌标志物发现及其与基因的调控关系研究583非小细胞肺癌中新型mTOR调控小G蛋白分子的鉴定及机制研究584机械感应蛋白α-Parvin在肺纤维化发展中作用及其机制585泛素化复合物UBE4A-UBXN4-IP6K1参与脂滴和肝癌发生发展的功能机制研究586RNA剪接因子hnRNPF在生发中心B细胞反应中的作用及机制研究587USP43调控P65介导的炎症反应促进银屑病发生发展的作用研究588自杀风险的认知机制、应对策略、脑成像识别与因果模型研究：建构本土化自杀风险常模及评估防范指南589早期抑郁障碍的多模态社会脑网络特征及预测研究590记忆加工深度视角下主观认知下降和认知老化关系的神经机制研究591新型近红外二区聚集诱导发光探针的设计、合成及其在癌症光热治疗中的应用研究592新型带袢镁板在交叉韧带重建中的应用探索与作用机制研究593基于活体仿生自组装用于乳腺癌MR精准成像和高效免疫治疗的研究594三维乳腺癌类器官芯片设计及其微环境可视化研究595铁死亡因子GPX4介导的氧化还原平衡调控神经发生的机制研究596番茄SlMIR164A及其靶基因SlNAM2/SlNAM3调控果实品质的机理解析597假胚来源的microRNAs在寄生蜂抑制寄主化蛹中的功能及机制研究598ABA受体SlPYL3/10调控番茄花粉高温胁迫响应机制的研究599丛枝菌根提升足球运动场草坪水肥涵养能力的作用机制研究600III型CRISPR家族TtCsm复合物靶向RNA的分子机理研究及其结合RPA应用于水产病毒检测的智能手机检测系统601食品危害物丙烯酰胺加重食物过敏的机制研究602香菇中的天然硫化氢供体研究603互穿交联网络活体微凝胶的构建及其在多酶生物催化中的应用604新型药物靶点GPR3蛋白的结构解析和药物开发605融合深度学习和地理-流双视角的城市群功能协同优化技术研究606近30年深圳社会生态系统碳汇数字制图与情景预测607融合分频、数值气象模型、和时空滤波的深圳及大湾区长波段卫星雷达影像干涉测量联合大气改正方法研究608深海富稀土沉积的古环境约束与成矿机制研究609海底热液区氢气和烷烃形成机制原位实验研究610分立极光弧的形态特征与地球磁尾注入的相关性研究611大湾区近岸油气井压裂致灾风险评估和预警技术612水力压裂改造受效区形成机理和规律研究613融合多平台雷达干涉测量技术的深圳市海堤高精度三维形变监测与韧性评估研究614穿透性对流活动对粤港澳大湾区臭氧输送特征影响的研究615深圳市含氟温室气体监测与排放通量反演616海洋微生物对大亚湾有害藻华演变趋势的指示作用研究617复杂地层海底盾构隧道建造关键技术研究618用于海洋赤潮早期预警的原位电化学检测机理研究619深圳地区室内空气臭氧污染和暴露特征及影响研究620深圳湾红树林潮位变化对土壤微生物驱动碳氮循环的调控机制621深圳市典型河流氮污染源解析及生物地球化学过程622糖尿病微环境调控活性金属骨植入物的构建及促骨修复应用研究623基于主动机器学习算法的铝基水解制氢材料的智能设计与性能研究624基于高能脉冲磁控溅射的多孔特殊复合结构陶瓷基底金属涂层的制备及性能研究625多组元NiCoAlTi基金属间化合物的合金化调控及其高温力学性能研究626超高循环稳定性非晶-纳米晶镍钛形状记忆合金的制备及抗疲劳机理研究627激光增材制造高强高导耐热铜合金的设计制备及其强化机理研究628高熵合金高频动态加载的微观演化机理及多尺度成形研究629析出强化超高强钢的设计与性能优化研究630无机非铅钙钛矿单晶膜可控制备及其宽谱弱光探测应用631磁性水凝胶纳米机器人集群的胆管内递送和治疗632耐高压钠离子固态电解质的研发633基于固体核磁共振技术的固态电池修饰界面离子传输研究634新型BiFeO3-Y(Mn,Fe)O3-BaTiO3多铁陶瓷的制备和机理研究635超低亚阈值摆幅场效应晶体管的设计、开发和优化636本征磁性拓扑材料的缺陷工程与物性调控研究637固态电池中固态电解质与锂金属间相互作用的研究与应用638碲基柔性热电薄膜电声输运性能的协同调控639螺烯类聚集诱导发光分子的设计、手性光学及生物医学应用研究640基于工程化益生菌的微纳机器人增效胰腺癌免疫检查点治疗的研究641基于双噻吩酰亚胺衍生物的高性能聚合物半导体及其单组分有机光伏器件642具有仿生多级定向孔道的聚轮烷导管用于神经功能性修复的研究643一种新型天然多糖光敏分子的构建及其协同抗肿瘤效果644仿电解液设计的聚偏氟乙烯基固态电解质及其离子电导率研究645高通量筛选极端环境下特异性识别及高精确的软机器人皮肤646高渗透选择性水淡化膜材料的研究647柔性聚合物复合热电材料的多级结构构筑及热电性能优化648螺环类有机半导体及其复合材料的热电性能研究649新型OLED蓝光显示材料的设计合成及性能研究650源自失效锂电池负极的氧还原催化剂制备及其活性中心形成机制研究651大湾区地热田花岗岩温压耦合非线性力学特性与增强取热机制研究652人机协同全向行走的外肢体式辅助负重行走机器人研究653超声振动辅助微孔成形开颅及其智能控制方法研究654快速响应光电微驱力系统及其在微尺度流体操控中的应用655基于压电声学超构材料的低频带隙及航空降噪特性研究656光学镜面加工刀具干涉机理及抑制方法研究657刚柔折展软体驱动器闭环形变耦合机理及构型设计研究658基于齿面真实三维形貌的电驱动齿轮瞬态润滑演变与疲劳点蚀机制659基于氨基酸类二氧化碳水合物动力学促进剂机理研究660金属有机框架与水合物协同捕集CO2的相变机制研究661聚合物支撑石墨烯的微观结构对导热性能的影响及其声子散射机制研究662采用非独立同分布联邦学习及时空解耦交替方向乘子法的高信息安全性车网能量交互模型预测及调度优化663考虑数据内在随机性的电力时序数据隐私保护机制设计664基于Z箍缩等离子体约束的微纳卫星推力器推进特性研究665弹性配电网负荷恢复优化理论及策略研究666动力锂电池正反脉冲快速充电策略实时优化667复杂海洋环境下高韧性高防腐ECC-FRP复合防护材料的耐久性能及设计理论668湾区环境中低碳耐久混凝土结构669基于地聚物涂层的滨海钢筋混凝土锈蚀防护机理研究670渣土基海水合成地聚合物混凝土的设计及其耐久性研究671面向公共建筑群体智能衍生的数据共享及通用性能效诊断方法672动力扰动诱发滨海岩溶区隧道突水灾变机制及风险评估673复杂风环境下海洋桥梁非线性风致效应及其智能气动控制研究674装配式高层建筑结构整体性能监测与评价关键技术研究675滨海环境腐蚀下钢桥焊接接头疲劳损伤随机演化特征研究676波纹钢地下综合管廊震害破坏机理及其抗震性能研究677计算化学模型介导材料定向设计用于水中新兴有机微污染物的去除678准分子光源深紫外线/过硫酸盐氧化对再生水中PPCPs及毒性的去除机制679新型靶向吸附-光催化氧化双效耦合除醛机制及其关键技术研究680厌氧氨氧化菌群适应氧气胁迫的微生物学机制研究681新型群体淬灭菌调控下Anammox-MBR系统的膜污染控制和脱氮效能维持机制682导电材料强化餐厨垃圾厌氧消化耦合沼气纯化工艺开发和机理研究683抗病毒药物在城市污水处理厂中的迁移转化规律及其污染控制技术研究684深水天然气水合物地层固井水泥浆控温微胶囊的制备及其对水泥环力学性质的影响685波浪作用下深远海养殖工船的水动力性能研究686仿蜻蜓高效静音微型扑翼飞行器关键技术研究687粤港澳大湾区复杂服役环境下城际铁路无砟轨道结构延寿关键技术研究688直写3D打印技术制备铁酸铋压电光催化材料的研究689基于MoS2的金属单原子多活性中心设计及其在生物传感器的应用690基于时变图方法的机器学习及应用691新型全并行神经网络视觉传感器的研究692非接触早产儿生理监测的关键技术研究693面向多模属性识别的摩擦觉电子皮肤关键技术研究694面向智能物联网的通信感知计算一体化技术研究695快时变车联信道中的OTFS收发信机设计研究696分布式贝叶斯学习驱动的智能导航-感知-通信一体系统697面向下一代光纤承载无线接入网络的硅基光电集成方案研究698人工超表面调控下的微波热声成像技术及其在乳腺癌早期诊断中的应用研究699近全向超宽带复合吸波材料研究700基于分布式多智能体深度强化学习的自适应频谱接入技术研究701非欧氏数据共形几何深度学习的关键技术702基于MEMS激光照明多视角解析的复杂反光表面三维重建703分布式天线系统中D2D通信异构网络能量效率优化研究704语义启发的频谱空间感知与构建705心脏成像分析中的变分贝叶斯方法研究706面向高动态范围显示的视觉显著性预测研究707基于移动边缘多智能体的6G空天地融合感知关键技术研究708面向异构物联网的自进化轻量级入侵检测技术研究709面向电商知识图谱的异常行为检测方法研究710基于稀疏无约束视角图像的高保真衣物重建711面向开放式监控视频的行人重识别研究712多模态融合增强的点云解析及应用研究713群智感知数据收集分析中的隐私保护与安全关键技术研究714面向用户体验优化的沉浸式流媒体高效传输机制研究715脑启发式神经网络建模及其在医疗数据挖掘上的应用研究716融合推拉语义的多标识网络传输控制协议研究717基于轻量级融合网络的视觉内容清晰化方法研究718基于区块链的可信数据交易机制研究719无线联邦边缘学习中资源协同优化关键技术研究720数据偏差视角下的高可靠智能化编程模型研究721基于跨模态前背景语义对比的弱监督图像分割722用于静态纹理重构的柔性触觉传感器研究723一类面向未知对抗环境的多机器人系统实时分布式决策探究724一体化刚柔混合手术辅助机器人的多目标优化设计及控制研究725复杂环境下水面无人船安全可靠控制方法研究726面向多模态行为软体机器人重构与集群的驱控联一体化研究727核正则化线性系统辨识的若干关键问题研究728应用于5G射频功放电源调制器的升压变换器芯片研究729应用于GaNp-FET器件的新型低阻源/漏欧姆电极制备及机理研究730用于MEMS发声器件的超高变比电源变换器芯片研究731用于降低新冠病毒传播的高稳定输出深紫外氮化镓基光电集成器件基础研究732基于超高导热金刚石的GaN功率器件散热研究733异质衬底Ga2O3场效应晶体管耐压增强研究734用于嵌入式存储器的高寿命铁电薄膜机理研究735基于盐类掺杂聚乙烯醇超低电压神经形态器件的研究736面向可植入医疗设备的无线输电芯片关键技术研究737窄带隙金属-有机配位半导体材料研究及红外探测器的制备738稀土上转换发光材料的开发及其在紫外激光中的应用739面向矢量光场对偏振不敏感的光参量啁啾脉冲放大技术研究740基于悬空二维黑磷应力诱导各向异性光探测器的研究741基于低维异质材料的硅基激光器研究742面向电泵浦激光应用的低损耗微腔量子点发光二极管的研究743全无机钙钛矿纳米材料的稳定性提升策略及其光电器件应用744光束自净化低阈值时空锁模光纤激光器研究745基于双极性非稠环电子受体的三元有机太阳能电池研究746电池热-力-副反应产气的光学原位传感技术研究747基于高精度3D打印技术的集成化微型光流体成像芯片研究748基于线性和非线性效应协同管理的大能量飞秒光纤放大器研究749基于钙钛矿三阶非线性光学特性的全光开关研究750硅基单片集成的卷曲薄膜光源及多维度调控研究751基于有机-无机杂化闪烁体材料的柔性X射线探测器研究752超分辨成像在纳米药物治疗中关键技术的研究753用于储能电池系统健康监测的超灵敏分布式光纤力热传感器754基于近场光场全参量表征的物质手性识别及成像技术研究755面向装载运输一体化的智慧物流系统研究756飞机翼面气动前缘结冰区域机器视觉识别技术理论研究及实验验证757基于多任务优化的无人机集群航迹规划研究758面向人体运动感知、理解与分析的细粒度动作模式建模与知识表示研究759基于多组学数据的噬菌体细菌相互作用预测关键技术研究760面向智慧健康养老的可信深度学习关键技术研究761基于可解释机器学习的围产期并发症早筛与预测762智能制造系统中产品质量预测与优化方法研究763面向证券分析师监管的大数据与多模态融合深度学习技术研究764基于多源数据的城市暴雨内涝灾害智能定位、实时推演和出行影响评估关键技术研究765不是所有假评论都会降低消费者忠诚：假评论分类与多角度信任的影响研究766数字经济时代基于网络社交旅程的客户终身价值模型研究767双碳目标下深圳市分布式光伏发展模式比较研究768基于GIS的深圳市应急医疗资源空间可及性测度和优化策略研究769环境污染物PAHs通过Tfh/Tfr调控早期GC源性B细胞反应加重过敏性哮喘的机制研究770Calhex231调控巨噬细胞极化对盐敏感性高血压血管重塑的抑制作用研究771肠粘膜上皮内CD8+Trm记忆菌谱窄在溃疡性结肠炎发病中的作用及机制772DEHP暴露诱导SHMT1表达下调损害生精细胞减数分裂早期发生的机制773LaminB1在骨髓间充质干细胞迁移和成骨分化中的作用与相关机制研究774V-ATPase附属蛋白(P)RR协同调控糖原代谢和糖异生：新的糖代谢稳态调控因子？775t(8 21)急性髓系白血病中组蛋白甲基化和RNA甲基化协同调控选择性剪接体AML1-ETO9a的机理研究776C9ORF72突变导致神经退行性疾病ALS与FTD的细胞分子机制研究777重置下丘脑中央生物钟GLP-1逆转阿尔兹海默症生物钟紊乱的机制研究778生命早期压力应激易化外侧缰核相关环路内ATX-LPA信号通路致酒精成瘾共病抑郁症机制研究779EIF5A下调促进线粒体分裂和转移参与CADASIL脑血管内皮损伤的机制研究780DNA修复因子FAM72在EB病毒感染中的作用781环状RNAcirc_CCDC21靶向调节SGK1促进下咽癌侵袭转移的分子机制及临床意义研究782基于多组学整合分析研究口腔黏膜白斑恶性转化的发病机制783长效可控释氢敷料通过双向调控巨噬细胞极化促进糖尿病创面修复的机制研究784靶向乙酰化KLF5克服前列腺癌的去势抵抗性785高功能性CAR-T记忆干细胞（TSCM）亚群的分化机制研究786D-2HG促进Angiogenin超甲基化在抑制少突胶质瘤肿瘤恶变中的作用机制研究787IP6K2通过促进内吞维持肠上皮稳态的功能机制研究788PRMT5诱导结直肠癌乏氧耐受的分子机制与转化研究789基于蛋白质组学技术对磷酸酶PTP4A3促肝癌转移机制的研究790TRIM25通过降解TJP1抑制膀胱癌血管重塑的机制及其PROTAC靶向药物研究791血小板型磷酸果糖激酶促进肺癌进展的分子机制研究792N1-甲基腺苷修饰基因与神经母细胞瘤遗传易感的机制研究793脂肪酸转运蛋白CD36促进高脂环境下肺腺癌细胞增殖和侵袭的机制研究794基于混合增长模型的癌症患者疾病获益感变化轨迹识别及其健康相关生命质量预测795用于阿尔兹海默症早期诊断的深度学习网络研究796面向协同任务的上肢双边运动学神经解码技术研究797面向肝肿瘤穿刺消融治疗实时精准导航系统关键技术研究798基于层状半导体纳米片的低成本多导睡眠呼吸监测皮肤贴片集成系统的研制799肠道病毒EV71特异上调HSPA6表达对其毒力的影响及机制研究800蛋白激酶PYK2催化新冠病毒Nucleocapsid蛋白Y268位点的酪氨酸磷酸化修饰的生物学功能及机制研究801登革病毒激活潜伏感染EB病毒的分子机制研究802LncRNALRP11-AS1作为三阴性乳腺癌分子标志物及其调控机制研究803BICC1调控Sca-1+BMSCs成骨分化在老年骨重塑中的作用及机制研究804肠源性三甲胺及其关键遗传因素在妊娠糖尿病发病中的作用和机制研究805环境内分泌干扰物双酚A及其替代物暴露和DNA甲基化相关基因与代谢综合征的关联研究806基于大规模双向队列HIV感染人群的心血管疾病风险评分系统构建及其发病机制研究807基于云计算神经网络的丹参三七对药物质基础及作用机制研究808基于人胃中Telocytes特异性表达的左金方抗胃癌新靶点的研究809基于Nrf2和YAP双靶点探究鸦胆子抗结直肠癌化疗耐药的活性成分及作用机制8104-咪唑基药效团对L型谷氨酰胺酰基环化酶抑制剂抗AD活性影响及作用机理研究811基于PROTAC技术的冠状病毒双功能蛋白nsp14靶向降解剂的设计、合成及功能研究812精准靶向METTL3的蛋白降解PROTAC药物的设计合成及抗肿瘤活性评价813NLRP3选择性抑制剂的设计、合成及其构效关系研究814EGFR突变靶向丹参酮IIA衍生物的分子设计及其抑制非小细胞肺腺癌的作用机制研究815BRD4抑制剂与TLR7激动剂协同发挥抗黑色素瘤的效果及其调控肿瘤微环境的机制研究816时辰给药在Polo样激酶1抑制剂增效减毒抗食管癌中的作用机制研究817AML1-ETO/CDK12复合物促进CPT1A超级增强子活性维持白血病干细胞自我更新的机制研究818个体化心-脑耦合血流动力学并行数值算法研究819细胞力学对肿瘤耐药的调控及力学生物力机制研究820智能粘附材料的仿生梯度设计及高强耐久协同改性研究821基于无铅钙钛矿薄膜声子调控的光致超声换能器及应用研究822非简并纠缠光源的实验研究823石墨烯/三氧化钼异质结腔中面内杂化极化激元的调控及中红外光偏振器应用824微应力应变作用下的压电系应力发光特性开发和机理研究825银基离子固体场发射聚焦离子束（FIB）研究826高精度X射线波前相位传感器827基于NEG镀膜的自由电子激光高洁净度超高真空获得研究828乏氧响应型人工离子通道的合成及其高选择性抗癌应用研究829廉价金属催化下甘氨酸衍生物的氟烷基化修饰830二维过渡金属硫化物的转角堆叠生长方案研究831催化去消旋化反应制备若干手性胺药物关键中间体的研究832非碳原子手性中心的不对称氧化构筑833AuNCs/ZIFs复合材料的构筑及其抗菌防护应用研究834面向低温甲醇水高效制氢的新型铈基催化材料的设计与制备835钙钛矿氧化物“重构-体相”异相界面调控及协同OER反应机理研究836双金属单原子协同催化硝酸根制氨837缺陷调控BiVO4光阳极电子空穴分离机制及光电化学分解水制氢性能研究838近零缺陷铌基氮氧化物单晶定制及太阳能光解水制氢性能研究839动态结构塑性非柔性链的流体动力学行为840基于固态纳米孔道进行膀胱癌早期诊断和复发监测的基础研究841球形核酸催化发夹自组装反应用于miRNA检测和细胞调控842基于AIE机制的重金属离子敏感水凝胶设计、制备及现场水质分析应用基础研究843锂离子电池新型预锂化技术的研究844二维过渡金属氮化物电催化水分解的晶面调控研究845“亲锂性”集流体设计及其对全柔性锂金属电池储能性质增强的研究846用于高效电催化二氧化碳还原为多碳产物的二维铜纳米片阵列自支撑电极的微观结构工程847COFs基锌/镁离子电池正极材料的结构设计和电化学性能研究848石墨负极的自蔓延合成与快充性能研究849开发长效稳定贵金属催化剂应用于电化学能源转化的基础研究850基于金属酞菁衍生物的锂硫电池多效改性隔膜设计、制备及电化学性能研究851氢燃料电池超薄钛双极板表面C/Ti涂层研究852种质胰岛素信号介导低剂量纳米塑料颗粒跨代毒效应形成的分子机制853两级“O3/H2O2+Fe2+”催化氧化体系下磷酸氯喹（CQP）的降解机理和毒性控制研究854气固两相流颗粒破裂耦合机理与数字孪生模型855基于P450酶的大环内酯类抗生素结构理性改造和生物合成途径重构856唾液酸乳糖生物合成过程机制解析与代谢调控研究857大肠杆菌O157中非编码RNA调控细菌致病能力的研究858河流塑料际中抗性基因的传播与微生物风险评估859动物毒素多肽的致痒新型毒理作用与机制及相关抗瘙痒研究860HCO3–转运体NBCe1磷酸化调控分子机制的研究861细胞死亡调控在脓毒症相关并发症中的作用及机制研究862间充质干细胞在非酒精性脂肪性肝炎中的作用及其机制的研究863特异性胸腺肽Tβ4在损伤血管内膜新生再狭窄中的作用和机制研究864靶向VDR-PD1轴增强CAR-γδT细胞杀伤肺癌细胞功能及其机制研究865线粒体功能在调控间充质干细胞分化命运中的作用及机制研究866Th17/Treg免疫平衡的代谢调控新机制与应用研究867靶向抑制TREM2蛋白功能干预胶质瘤发展的机制及策略研究868Wnt/PCP通路介导小胶质细胞特异性修剪Celsr3阳性突触的分子机制研究86940Hz视觉刺激干预AD中警觉缺陷的神经环路机制870核外泌体靶向复合体核心因子Zcchc8在大脑皮层发育中的功能研究871自闭症谱系障碍早期筛查工具的开发及应用—基于半结构化的亲子互动视频观察872阿尔茨海默病嗅觉障碍的胆碱能神经元环路机制873外侧苍白球神经元集群参与抑郁症相关恐惧与睡眠异常的机制研究874CMCTs/Ga调控巨噬细胞参与糖尿病创面再生的机制研究875基于生物膜仿生载体的抗体多聚化策略介导慢乙肝免疫治疗及机制研究876诊疗一体型黑磷基水凝胶的构筑及其在慢性伤口治疗的应用研究877生物3D打印活性梯度支架调控炎症促OA软骨修复研究878内皮细胞Foxp1-Twist1-N-cadherin轴介导的内皮-成纤维细胞连接形成及其在压力后负荷所致心脏纤维化中的作用与机制研究879转座子ORR1A2在早期胚胎染色质重塑中的作用及机理研究880基础水平ABA在水稻幼苗根系生长和铁稳态调控中的功能及机制研究881土壤有效组分耦合效应介导城市餐厨垃圾高负荷厌氧消化提质增效的机理研究882苹果树腐烂病菌NRPS类基因VmG10调控关键毒素的鉴定及其致病机制解析883苹果GABA合成关键基因挖掘及作用机制研究884LpANN3改善多年生黑麦草的抗旱耐盐性的分子机制885肠道菌群经NOD1/RIP2信号调控热应激猪Treg/Th17的作用机制886对虾胞质DNA感受器鉴定及其介导STING-IRF-Vago信号通路抗病毒免疫的分子机制887鰤鱼诺卡氏菌线粒体靶向定位分泌蛋白（MTSP）的功能研究888基于多组学及机器学习技术的石斑鱼虹彩病毒药物靶标发现及海洋药物开发889基于异源超分子组装改良鳕鱼胶原蛋白肽抗冻活性的分子机制研究890基于LXR/ABCA1/ApoE调控的DHA对脑脂质代谢紊乱及认知功能障碍的影响及机制研究891光合固碳胶囊的构建及其高效持续固碳的研究892高灵敏度‘绿色-红色’FRET探针与高内涵药物筛选系统研究893基于芯片毛细管电泳-自上而下质谱的Kindlin蛋白高级结构和磷酸化的在线分析方法研究894光能驱动CO2固定合成葡萄糖的多酶催化系统的设计与构建895从头构建己内酰胺生物合成通路及其高产研究896海绵城市植被物候遥感监测与碳收支研究897物理约束大数据挖掘算法和深部岩体破裂过程实时监测系统898深圳近海底栖鱼类和沉积物汞污染同位素地球化学研究899海洋干扰环境下水面无人艇集群协同导航关键技术研究900大涡模拟研究水凝物相变热源对台风强度和结构的影响901结合环境DNA及RNA数据评价养殖水体健康程度的探讨902基于Bio-LCMS-GNPS和“干-湿”结合策略发现海洋真菌抗老年痴呆先导化合物的研究903生物炭/矿物复合材料修复深圳市典型流域底泥重金属污染机理研究904核壳双相增强非晶复合材料的结构调控及强韧化机制905高阻氢型氮氧化物复合涂层的设计制备及氢防护应用研究906锆合金包壳表面耐事故梯度高熵涂层设计及性能评估907纳米孪晶铜-石墨烯复合材料结构调控与力热特性研究908直接甲醇燃料电池中铂基催化剂的电子结构调控及其抗毒化性能强化研究909可织造锌纤维负极梯度构筑及全织物电容器一体化织造研究910高温高压水蒸气环境高熵合金防护涂层设计及失效机制研究911新型高强高韧轻质高熵合金结构调控和塑韧化机理的研究912宽禁带氧化镓半导体薄膜外延及日盲紫外光电探测器研究913掺杂与固溶共调控铌酸钠基无铅反铁电陶瓷的储能性能研究914量子异质结阵列化生长及近红外面阵探测器研究915面向快速充电钙离子电池的溶剂化钙离子共嵌反应机制研究916基于熵工程的GeTe基热电材料与器件性能优化机制研究917Ag纳米线网络强化二维TMDC材料疲劳性能的原位研究与机制探索918新型中子伽马双模探测用晶体生长研究919可逆质子陶瓷电池空气电极的铬中毒机理及稳定化设计920纳米多孔硅的绿色可控制备与电化学行为研究921空穴传输材料的组分设计及光浸润效应的机制研究922丝素基活性导电材料的研究923基于融合供体策略构建高效率窄谱带荧光蓝光材料与发光器件924原位交联聚合物对钙钛矿埋底界面缺陷的调控机制研究925微针纳米复合疫苗的靶向设计与抗肿瘤免疫治疗机制研究926基于光诱导聚合的活性酶接枝修饰及其在酶反应器的应用927316L超薄跨尺度构件多道次拉深成形的缺陷预测和控制研究928基于大型复材构件高性能加工的复杂机器人系统颤振控制研究929高度集成的海洋多源俘能系统构建及自供电浮标应用研究930机理驱动的扑翼飞行器耦合仿生设计方法931快变工况下谐波减速器故障机理与故障诊断方法研究932高性能IPMC离子柔性传感器传感机理研究及应用933高温合金波形弹簧疲劳失效机理及抗疲劳制造方法研究934非均质微纤维软体驱动器的变形机理研究935应变调控下石墨烯泡沫的传热特性及跨尺度机理研究936有机半导体-二维材料异质结构界面热输运机理及调控研究937微尺度流电双场作用下生物粒子迁移与聚焦的动力学机理研究938高效抑垢的新型仿生改性表面抑垢规律与机理研究939高比例混合型新能源接入弱电网主动支撑技术研究940混联微能源系统互联变流器可靠控制关键理论与技术941基于多端口并网逆变器的高能效分布式光储联合发电关键技术研究942新能源汽车交流调磁永磁同步电机驱动/充电一体化系统研究943基于非线性电磁声发射的新能源汽车宽禁带功率器件内部损伤在线检测理论和方法944火羽流作用下地下综合管廊内液氮相变运移与灭火机理研究945深圳市极端降水事件的驱动机制及关键水文过程响应946单质硫自养反硝化耦合典型喹诺酮类抗生素生物降解效能与机制的研究947改性纳米铁耦合脱卤呼吸菌强化修复有机氯农药污染土壤的效能与协同机理研究948电子穿梭体介导的厌氧氨氧化氮代谢通路与电子传递机制949基于多酸功能化离子液体的非水相可再生液相氧化脱硫与硫回收新方法研究950面向水下机器人全航速作业的新型舵控操纵技术研究951欠驱动多无人艇自适应预设综合性能协同一致性研究952岸船基雷达水上溢油智能监测方法953动力电池快充析锂现象的电化学-热-质-力耦合机理及材料-结构-运维协同的快充方法研究954金团簇基光控荧光开关的构建及其双模态防伪应用研究955氟取代空穴传输材料的设计、合成与应用956无人机辅助大规模反向散射通信技术研究957物理模型与数据驱动联合的高光谱数据解混技术958基于纳米级单元空间的DNA化学合成研究959基于深度强化学习的电动汽车充电价格定价策略研究960亚毫米高时间分辨率器官专用PET探测器研究961关联多通道图像信息显示的颜色恒常机制研究962基于喷墨打印的全集成柔性可穿戴人体健康监测系统963复杂环境下多目标普适协同定位关键技术研究964基于柱镜光栅的立体影像系统设计及瞳孔跟踪机理研究965无约束条件下的多视影像三维几何重建和纹理映射方法研究966基于石墨烯-金属超表面的太赫兹相控阵研究967针对复杂数据和多任务协同的大脑胶质瘤智能诊断技术968时空环境多维度关联的私家车出行模式挖掘与应用研究969面向视频分析与理解的可伸缩融智视频语义编码研究970混部分布式AI系统中的参数同步加速方法研究971基于人工智能的物联网可信信息覆盖可靠部署与传输理论与方法研究972面向低冗余成本的大规模全闪集群下大比例纠删码技术研究973基于新型影像基因组学分析方法的癌症诊断与肿瘤标志物挖掘研究974大规模点云弱监督下语义理解关键技术研究975基于三维腹腔镜图像的深度估计及不确定性研究976基于多模态和弹性机制的无人机集群智能导航技术研究977基于深度特征自举的弱监督工业产品表面缺陷检测方法研究978航空发动机起飞阶段气路多点故障的安全深度强化学习控制研究979面向舰载三维打印系统的主动稳定系统关键核心技术研究980针对转录组预测的基因向量嵌入和自注意力网络模型研究981基于抗阻横向行走的髋关节外展肌肉锻炼外骨骼研究982无惯性变曲率扫描光学曲面干涉测量技术研究983透明宽禁带IAZO忆阻器类脑芯片的多功能调控984n型磷掺杂金刚石薄膜缺陷形成机理及调控研究985侧壁缺陷与侧壁绝缘对蓝光micro-LED光电性能的调控机制986基于超构表面的多功能全光计算芯片开发与应用9875-10微米宽谱中红外飞秒激光研究988基于消色差混合超透镜的光学镜头研究989基于高速、高分辨光学成像的激光加工熔池在线监测技术研究990基于非线性傅里叶变换的超短脉冲纯化研究991基于太赫兹克尔效应的生物大分子溶液超快动力学研究992面向高效光伏器件被动降温的透明导电窗口设计研究993非线性升幂效应在光声成像中的作用规律研究——突破“横纵分辨率失配”光声成像瓶颈994阿尔茨海默症标志物定制化的高灵敏超表面生物检测芯片研究995复杂环境下高分辨率动态三维成像原理方法研究996高分辨超细多模光纤内窥成像关键技术研究997镧系掺杂氟化物微晶玻璃深紫外激光器件的设计及性能研究998基于非厄米光学系统的片上光隔离器和激光器技术研究999基于CsPbX3/上转换核壳结构纳米晶的结构设计及其光学性质的宽光谱调控研究1000基于自然刺激的脑功能网络时空特性研究及应用1001面向非理想半监督学习的深度视觉理解1002面向开放行车场景的图像迁移方法研究1003面向混合现实的单视角三维视觉重建关键技术研究1004基于智能场景感知体系的物流移动机器人预测性维护研究1005端粒蛋白Rap1的缺失介导Trx1/NADPH氧化酶信号通路增强氧化应激并加剧心脏衰老的机制研究1006IsoalloLCA致敏Treg细胞来源的外泌体对小鼠结肠炎抑制作用及机制研究1007脂肪因子chemerin调控糖脂代谢导致胎盘结构和功能病理性改变的机制研究1008通过CTRP6/PPARγ信号轴调控巨噬细胞的脂代谢重编程并影响多囊卵巢综合征发生发展的机制研究1009剪接因子MATR3在前列腺癌发生发展中的作用和分子机理研究1010感觉神经C纤维异常激活导致尿路上皮稳态失衡—脊髓损伤后下尿路感染易感性增加的新机制研究1011基于活性螯合体系的形状记忆骨修复支架及其生物学机制研究1012应激经由DNA损伤-Chk1信号通路促进阿尔兹海默病的分子机制和防治研究1013脊髓损伤后再殖微血管周细胞的起源及大量聚集的机制研究1014骨钙素通过GPR37调节中枢髓鞘发育和损伤修复的分子机制1015基于人工智能算法判读多导睡眠脑电实现早期诊断轻度认知障碍的研究1016FcRγ工程化巨噬细胞特异性吞噬杀伤机制及协同增效NKG2DCAR-T细胞治疗前列腺癌的研究1017髓样细胞触发受体2调控小胶质细胞中ASC介导的炎症小体激活在视网膜色素变性发生的作用机制研究1018组蛋白甲基转移酶EZH2促进多发性骨髓瘤溶骨性骨损伤的分子机制1019阿帕替尼通过调控肠癌细胞外泌体重塑微环境增强PD-1抗体疗效的作用机制研究1020新型髓系免疫检查点药物c-RelsiRNA用于癌症免疫治疗的探究1021利用PDX模型研究表达三特异性杀伤细胞接合器TriKE的溶瘤腺病毒对卵巢癌的杀伤作用及机制1022多维免疫共刺激疫苗介导HBV系统性免疫耐受中T细胞功能重塑1023集成纳米传感器的微流控芯片平台用于乳腺癌来源细胞外囊泡的多维度检测1024基于蓝细菌的超声驱动IL12基因递送系统光免疫治疗肿瘤研究1025基于仿生蛋白制剂的定量可视化肝癌磁免疫治疗策略及其机制研究1026铁死亡分子影像探针构建及其对药物导致急性心肌/肾损伤的诊疗评价研究1027多级靶向纳米基因递送系统用于肿瘤相关巨噬细胞重编程研究1028增材制造复合人工骨支架用于个性化治疗骨质疏松性骨缺损的研究1029基于GAGG/SiPM的大面积、高分辨率和高效率AR探测器研发1030PET肿瘤动态成像的关键技术研究1031集成自适应信息提取及融合的乳腺多对比度磁共振图像定量分析方法研究1032仿生可黏附、可视化柔性传感器的设计与构建研究1033谷氨酰胺降低肠出血性大肠杆菌定植能力的分子机制研究1034SET苏木化异常修饰参与阿尔茨海默病机制研究1035基于反向病原学开展深圳市啮齿动物携带的重要病毒病原学和流行病学研究1036他汀药物在不同剂量下预防脑卒中后痴呆的真实世界效果及中介机制研究1037黄连解毒汤抑制CSF1R依赖的小胶质细胞激活缓解认知障碍的研究1038生脉散活性成分干预BCAT介导的铁死亡改善心肌缺血损伤的作用研究1039山金车内酯D通过内质网应激途径诱导肝癌细胞胀亡的作用机制研究1040溪黄草调控PI3K/Akt/NF-κB信号轴双重抑制食管癌细胞增殖的机制研究1041病毒感染引发脑损伤的靶向成像和药物干预研究1042NK细胞递药体系的肿瘤定向改造级联启动细胞焦亡增强实体瘤免疫治疗的作用机制研究1043LncRNASEC61G-DT调节胶质瘤发生与耐药的分子机制研究1044靶向DKK2蛋白的抗体药物开发及其对缺血性脑卒中的作用与机制研究