化妆品中补骨脂特征成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的检测方法1 适用范围 本方法规定了用高效液相色谱法定性检测化妆品中补骨脂特征成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的方法。 本方法适用于化妆品中补骨脂特征成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的定性测定。2 方法提要 样品在经过提取后,经高效液相色谱仪分离,二极管阵列检测器检测,经与平行操作的补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮对照品及补骨脂对照药材比较,以保留时间和紫外光谱图定性,鉴别补骨脂特征成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的存在。本方法对补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的检出限和取样品0.5 g时的检出浓度见表1。 表1 4种补骨脂特征成分的检出限和检出浓度化合物检出限(ng)检出浓度(μg/g)补骨脂素0.30.6异补骨脂素0.30.6新补骨脂异黄酮0.30.6补骨脂二氢黄酮0.30.63 试剂和材料 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为实验室用一级水。3.1 乙腈,色谱纯。3.2 补骨脂素,纯度≥99%。3.3 异补骨脂素,纯度≥99%。3.4 新补骨脂异黄酮,纯度≥98%。3.5 补骨脂二氢黄酮,纯度≥99%。3.6 补骨脂,中国食品药品检定研究院,供鉴别用。3.7 补骨脂特征性成分混合标准溶液(=0.1 μg/mL):分别称取补骨脂素(3.2)、异补骨脂素(3.3)、新补骨脂异黄酮(3.4)、补骨脂二氢黄酮(3.5)对照品各5 mg(精确到0.1 mg),置500 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,配制成质量浓度各为10 μg/mL的标准溶液。精密量取各标准溶液0.1 mL置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得0.1 μg/mL的混合标准溶液。3.8 补骨脂标准储备溶液:取补骨脂对照药材0.2 g,置50 mL三角瓶中,加30 mL 70%乙醇回流提取1h,滤过,滤液置100 mL量瓶中,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,即得。4 仪器4.1 高效液相色谱仪:具二极管阵列检测器。4.2 分析天平:感量为0.1 mg。4.3 移液器。4.4 涡旋振荡器。4.5 超声波清洗仪(功率不低于200W)。4.6 高速离心机:转速不小于10000 r/min。
不同产地葛根中总黄酮含量测定明朝著名的医学家李时珍对葛根进行了系统的研究,认为葛根的茎、叶、花、果、根均可入药。他在《本草纲目》中这样记载:“葛,性甘、辛、平、无毒,主治:消渴、身大热、呕吐、诸弊,起阴气,解诸毒”。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281450_525067_2206222_3.jpg葛根的保健作用越来越受到人们的重视,其作用广泛:1.提高肝细胞的再生能力,恢复正常肝脏机能,促进胆汁分泌,防止脂肪在肝脏堆积。2.促进新陈代谢,加强肝脏解毒功能,防止酒精对肝脏的损伤。3.对高血脂形成的冠状动脉硬化,通过改善心肌缺血状态,防治冠心病、心绞痛、心肌梗塞等心血管疾病。4.对高血脂形成的脑动脉硬化,通过改善脑缺血状态,防治脑梗塞、偏瘫、血管性痴呆等脑血管疾病。5.强化肝胆细胞自身免疫功能,抵抗病毒入侵。6.降血糖,具有延缓衰老、调节血脂血糖、促进造血功能等方面的作用,并应用于临床。适用人群有:1. 成年男子,经常饮酒,抽烟的人士、酒精代谢中毒者2. 预防肝炎,提高肝脏解毒功能,修复肝损细胞的人群3.高血压、高血脂、高血糖及偏头痛等心脑血管病患者4.更年期妇女、易上火人群、常用烟酒者5.女性滋容养颜,中老年人日常饮食调理等6.预防黑斑、青春痘、肝斑的人群7.改善微循环促进尿酸结晶溶解,提高肾血流量,促进多排尿酸。由于葛根产地不同可能导致其所含的总黄酮量不同,本试验为了对不同产地葛根的质量做一个初步评价,对四个不同产地葛根的总黄酮含量进行了分析比较。实验材料:Agilent8453紫外-可见分光光度计(美国Agilent公司);FW100型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);DH-101电热恒温鼓风干燥箱(天津市中环实验电炉有限公司);YB-Z真空恒温干燥箱;FX-200 型千分之一电子分析天平(日本AND公司);AE240型十万分之一电子分析天平(瑞士METTLER公司);KQ-250DE型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);HH·S21-4 型电热恒温水浴锅(北京长安科学仪器厂)。葛根分别与采集于安徽、陕西、湖北、河南四地。甲醇(分析纯)、自制纯净水。对照品溶液的制备:精密称取芦丁对照品19.20mg,至50ml容量瓶中,加甲醇适量,超声使溶解,加甲醇至刻度,摇匀,制成每 1ml含0.384mg 的对照品溶液,即得。标准曲线的制备:分别精密吸取上述对照品溶液 0、1、2、3、4、5、6ml,置25ml容量瓶中,分别加水至6ml,分别加 5%亚硝酸钠溶液1ml,混匀,放置 6 分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,混匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液 10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟。照紫外-可见分光光度法,在510nm 波长处测定吸光度,以浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。结果见表: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281450_525068_2206222_3.jpg供试品溶液的制备:取葛根粉末2g,精密称定,置索氏提取器中,加甲醇适量,加热回流至提取液无色,用甲醇少量洗涤容器,洗液并入提取液,蒸发浓缩并转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。测定:精密吸取上述供试品溶液1ml,置25ml 容量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至 6.0ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的重量,计算
如题请问用芦丁对照品绘制标准曲线是否能用槲皮素或其他的黄酮对照品替代?由于实验室的芦丁标准品不见了,老师建议先用槲皮素替代,请问是否可行?
【作者】 姜泓; 白丽萍; 康廷国;【机构】 辽宁中医学院; 辽宁中医学院 110032; 辽宁沈阳; 110032; 辽宁沈阳;【摘要】 目的:对紫穗槐果实的中5,7-二羟基-8-牻牛儿基双氢黄酮进行含量测定,初步探讨其在紫穗槐果实中的变异规律及其与地理分布的关系。方法:色谱柱:迪马公司Diamonsil C18柱(200×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.025mol/L磷酸水(90:10);流速:1ml/min;柱温:35℃;检测波长:293nm。结果与结论:首次对紫穗槐果实中的5,7-二羟基-8-牻牛儿基双氢黄酮进行含量测定,确定其定量方法。测定结果发现,土质肥沃地区的果实中5,7-二羟基-8-牻牛儿基双氢黄酮的含量较高。 更多还原【Abstract】 Objectve To determine its contents and to find out the variation regularity in fruits of Amorpha frutioosa L.. Methods Diamonsil C18 (2004.6mm, 5μm)column was used with the mixture of 0.025mol/L H3PO4 water and methanol as the mobile phase, and the UV absorbance detection was set at 270nm. Results and Conclusion The content of 5,7 - di-hydroxy - 8 - geranylflavanone in many samples collected with localities were determined by HPLC for the first time. The variation of tephrosin in the fruits was ... 更多还原【关键词】 紫穗槐; 5,7-二羟基-8-牻牛儿基双氢黄酮; 高效液相色谱法; 【Key words】 Amorpha fruticosa L.; 5,7 - dihydroxy - 8 - geranylflavanone; HPLC;
有关二氢黄酮的质谱裂解问题,数据如下: MS: 316(100) 298(9) 283(10) 269(3) 255(3) 196(34) 181(25) 170(34) 153(10) 这是全部的裂解数据。 化合物的结构式在附件里面,希望谁能帮我分析下怎么脱去一分子水和一个甲基,谢谢啦!
本实验分别提取两年生、三年生无腺毛甘草主根、侧根、水平根及茎中的黄酮,并测定其含量,初步找出消长规律。以甲醇为提取溶剂,索氏提取法提取黄酮,分光光度法测定总黄酮含量。结果表明两年生无腺毛中主根、侧根、水平根及茎中的黄酮含量分别为1.28%、1.28%、1.56%、0.73%;三年生无腺毛中主根、侧根、水平根及茎中的黄酮含量分别为1.75%、1.46%、1.81%、0.41%。随着年限的增大,无腺毛甘草中根部的黄酮含量逐渐增大。同龄期无腺毛甘草中黄酮含量:水平根最高,主根和侧根次之,茎最小。 无腺毛甘草 黄酮 含量测定 消长规律1.前 言无腺毛甘草(Glycyrrhiza eglandulosa X.Y.Li)是石河子大学李学禹教授在新疆发现、1993年命名的新种,也是我国的特有种。它生长的环境条件比乌拉尔甘草(G. uralensis)更恶劣,因而更加耐干旱、耐盐碱,而且是很适合于低产地、弃耕地等恶劣环境条件下生长的抗逆性极强的甘草物种。这个种在形态分类系统学、细胞学、生态学都有研究,根据细胞染色体组型分析与形态数值分析,都证实它与乌拉尔甘草、光果甘草亲缘关系较近,但在化学成分方面未进行系统研究。根据资料报导,产于新疆的胀果甘草(G.inflata)、黄甘草(G.eurycarpa)及云南的云南甘草(G.yunnanensis)都发现过大量的具有生理活性的新的化学成分。由此可知:一个形态性状特异、分布于逆境条件下能正常生长的新物种,肯定具有抗逆性较强的基因所决定的代谢产物,肯定有特殊性。为此,我们拟从应用开发的角度,提取无腺毛甘草中黄酮类化合物,对其进行含量测定,并进一步研究其在不同龄期、不同部位黄酮类化合物的消长规律,为进一步研究其化学组成和结构打下基础,并且为退耕还草大面积栽培无腺毛甘草提供科学依据。2.实验部分2.1实验仪器、样品与试剂2.1.1实验仪器:紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公司),索氏提取器(自治区化玻站提供),烘干箱(湖北省黄石医疗器材厂),电光分析天平(上海棱光技术有限公司),精密PH计(上海雷磁仪器厂)。2.1.2实验样品:两年生、三年生的无腺毛甘草(石河子大学甘草栽培基地李学禹教授提供)。2.1.3实验试剂:柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定所),10%的氢氧化钾溶液,甲醇(AR)。2.2黄酮类化合物的提取分别称取3份两年生无腺毛甘草的主根粉碎后放入索氏提取器中,加入甲醇回流2h,冷却后分别将回流液转移至容量瓶中,提取两次,提取液合并,用甲醇定容。用同样的方法分别提取两年生无腺毛甘草的水平根、侧根和茎以及三年生无腺毛甘草中主根、侧根、水平根、茎中的黄酮。2.3黄酮类化合物的含量测定2.3.1对照品溶液的制备准确称取柚皮苷对照品适量,用甲醇溶解并定容于10mL容量瓶中,制得浓度约为1.0mg.mL-1的对照品溶液。2.3.2最大吸收峰的确定精确吸取柚皮苷对照品溶液0.5ml,加入5ml甲醇,再加入10%KOH溶液2.5ml,室温放置5min,用甲醇稀释至50ml[
[align=center][b]超高效液相色谱-串联质谱法测定大豆中大豆异黄酮的含量[/b][/align][align=center]户江涛[/align][align=center](农业农村部豆类产品质量安全风险评估实验室(佳木斯),黑龙江省农垦科学院测试化验中心,黑龙江佳木斯 154007 )[/align]摘要:采用超高效液相色谱-串联质谱法建立了检测大豆中大豆异黄酮含量的分析方法。试样经90%甲醇水提取后,6种大豆异黄酮在C[sub]18[/sub]色谱柱上以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相,进行液相色谱分离;质谱检测采用电喷雾正离子化模式和多反应监测模式(MRM)。结果表明,6种大豆异黄酮分别在0.01~0.5 mg/L(D、GL、G)和0.002~0.1 mg/L(De、GLe、Ge)范围内线性关系良好,相关系数(R)为0.9993~0.9998,定量限(LOQ)为0.0001 g/kg。在大豆空白样品添加浓度分别为0.01、0.05、0.2 g/kg(De、GLe、Ge)和0.2、1、2 g/kg(D、GL、G),6种大豆异黄酮的平均回收率为86.6%~96.2%,相对标准偏差(RSD)为1.07%~5.93%(n=6)。本方法简便、灵敏、抗干扰,适用于大豆中大豆异黄酮含量检测。关键词:超高效液相色谱-串联质谱;大豆;大豆异黄酮[align=center]Determination of soybeanisoflavone in soybean by ultra performance liquid chromatography-tandem massspectrometry[/align][align=center]HU Jiangtao[/align][align=center]([i]Laboratory of Qualityand Safety Risk Assessment for Soybean products, Ministry of Agriculture andRural Affairs, Testing and Analysis Center of Heilongjiang Academy of LandReclamation Sciences, Jiamusi 154007,China[/i])[/align][b]Abstract:[/b]A methodwasdeveloped for the determination of soybeanisoflavone in soybean by ultra performance liquid chromatography-tandem massspectrometry(UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS). The samples were extracted by 90% methanol-water, then 6 soybean isoflavones were separated on aWaters BEH C[sub]18[/sub] column with gradient elution with the mobile phase of0.1% formic acid and acetonitrile, and finally detected by positive eletrosprayionization-mass spectrometry(ESI[sup]+[/sup]-MS/MS) in multiple reactionmonitoring(MRM) mode. The results showed the linearities of 6 soybean isoflavones were good in the concentrationrange of 0.01~0.5 mg/L(D、GL、G)and 0.002~0.1 mg/L(De、GLe、Ge), the correlation coefficients were 0.9993~0.9998. The limitof quantification(LOQ) of soybean isoflavone was 0.0001 g/kg. At the spiked levels of 0.01、0.05、0.2 g/kg(De、GLe、Ge)and 0.2、1、2 g/kg(D、GL、G) in the blank soybean samples, the mean recovery of soybeanisoflavone was 86.6%~96.2%, andthe relative standard deviation(RSD) was 1.07%~5.93%(n=6).This method is simple,sensitive, anti-jamming and suitable for simultaneous determination of soybean isoflavone in soybean.[b]Key words: [/b]ultra performance liquid chromatography-tandem massspectrometry (UPLC-MS/MS) soybean soybean isoflavone大豆异黄酮(soybean isoflavone)是一族化合物的统称,是大豆植物体内的一种次生代谢产物,是大豆主要活性成分之一,其母核为3-苯并吡喃酮,主要包括大豆苷、大豆黄苷、染料木苷及其相应苷元[sup][/sup]。研究表明,大豆异黄酮除具有天然抗氧化作用外[sup][/sup],还具有降低胆固醇含量、预防多种癌症及改善妇女更年期综合征等多方面生物功效[sup][/sup]。大豆异黄酮主要存在于大豆籽实中,其总含量约为0.4~5 g/kg,其中大豆苷、大豆黄苷和染料木苷这三种含量约占总量的97%~98%,而其对应的苷元含量仅占2%~3%左右[sup][/sup]。目前,大豆异黄酮的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)[sup][/sup]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法[sup][/sup]、紫外分光光度法[sup] [/sup]、质谱法(HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS[sup][/sup])等。紫外分光光度法[sup] [/sup]只能测定大豆异黄酮总量,且灵敏度不高;[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法[sup][/sup]需要对异黄酮进行衍生,前处理复杂;目前,大豆异黄酮检测现有的国家标准GB/T 26625-2011[sup] [/sup]采用的是高效液相色谱法(HPLC),在实际检测过程中发现,由于紫外检测器灵敏度不高,存在个别样品中异黄酮相应苷元检测不到的情况;同时大豆提取液中含有蛋白、脂肪等杂质影响色谱柱柱效,以至于不能满足分离度要求,严重干扰低含量组分峰面积积分定量。而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法质谱检测器灵敏度高,通过选定大豆异黄酮的特征离子,能有效去除上述杂质干扰,定量更加准确可靠。目前,国内外采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法检测大豆中大豆异黄酮含量的文献很少[sup][/sup]。本文对大豆中大豆异黄酮检测的前处理方法借鉴GB/T 26625-2011[sup][/sup],提取液改用UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS测定。该方法前处理过程简便、灵敏度高、分析时间短、抗干扰能力强,适用于大批量大豆样品中大豆异黄酮含量的检测。[b]1 实验部分[/b]1.1 材料与试剂大豆苷(daidzin,记为D,以下同)、大豆黄苷(glycitin,GL)、染料木苷(genistin, G)、大豆素(daidzein,De)、大豆黄素(glycitein, GLe)、染料木素(genistein,Ge)(纯度≥99%,Dr.Ehrenstorfer公司);甲醇、乙腈、甲酸(色谱纯,Fisher公司);实验用水为Millipore纯水仪制备。1.2 仪器与设备Acquity UPLC型超高效液相色谱仪(Waters公司);XEVO TQ-S三重四级杆质谱仪(Waters公司);KQ-500DE型超声波仪(昆山市超声仪器有限公司);涡旋混合器(IKA公司);CR21GⅢ型高速离心机(HITACHI公司)。1.3 大豆异黄酮标准储备液的配置分别称取适量的D、GL、G、De、GLe、Ge标准品,用甲醇配置成质量浓度为1mg/mL标准储备液,于-18℃冰箱保存(有效期6个月),待用;使用时用10%甲醇水逐级稀释成所需浓度的混合标准工作液,现用现配。1.4 样品前处理提取:称取粉碎均与后的试样1.0g(精确到0.01g)于50mL聚乙烯离心管中,加入10.0 mL90%甲醇水,涡旋混合30 s后置于60℃超声波清洗器中提取30 min,在离心机中以15000 r/min离心5 min,将上清液转移至100 mL容量瓶中,残渣再加入10.0 mL90%甲醇水溶液按上述步骤提取后,合并两次上清液于100 mL容量瓶中,用10%甲醇水溶液定容至刻度,摇匀。a)De、GLe、Ge的测定:取1 mL过0.22um有机系微孔滤膜,供UPLC/MS/MS分析测定;b)D、GL、G的测定:由于D、GL、G含量较高,需要将a)中过完滤膜的待测液用10%甲醇水稀释50倍后,供UPLC/MS/MS分析测定。1.5 液相色谱及质谱条件液相色谱:色谱柱:Waters BEH C[sub]18[/sub](1.7 μm,50mm×2.1mm);柱温:30℃;流速:0.5 mL/min;进样量:1μL;流动相A:乙腈;流动相B:0.1%的甲酸水溶液。梯度洗脱程序:0~0.5min,10% A;0.5~3. 0 min,10%~100% A;3. 0 ~4. 0 min,100%A,4 ~4.1.1min,100% A~10% A,4.1 ~5.0min 10% A。质谱:离子源:电喷雾离子源( ESI [sup]+[/sup] ) ;扫描方式:正离子扫描;检测方式:多反应监测( MRM);毛细管电压:3.2 kv;离子源温度:150℃;去溶剂气温度:500℃;去溶剂气流量:1000 L /h;定性、定量离子对及碰撞能量见表1。[align=center]表1大豆异黄酮的质谱参数[/align][align=center]Table 1 MRM parameters of soybean isoflavone[/align] [table][tr][td] [align=center]Analyte[/align] [/td][td] [align=center]Cone/V[/align] [/td][td] [align=center]Parent ion/(m/z)[/align] [/td][td] [align=center]Daughter ion/(m/z)[/align] [/td][td] [align=center]Collision energy/V[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]D[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]30[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]417[/align] [align=center][sup] [/sup][/align] [/td][td] [align=center]255﹡[/align] 137[/td][td] [align=center]27[/align] [align=center]18[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]G[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]30[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]433[/align] [align=center][sup] [/sup][/align] [/td][td] [align=center]271﹡[/align] 153[/td][td] [align=center]21[/align] [align=center]50[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]GL[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]30[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]447[/align] [align=center][sup] [/sup][/align] [/td][td] [align=center]285﹡[/align] 270[/td][td] [align=center]25[/align] [align=center]46[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]De[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]25[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]255[/align] [align=center][sup] [/sup][/align] [/td][td] [align=center]137﹡[/align] 181[/td][td] [align=center]30[/align] [align=center]26[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]Ge[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]25[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]271[/align] [align=center][sup] [/sup][/align] [/td][td] [align=center]153﹡[/align] 215[/td][td] [align=center]30[/align] [align=center]25[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]GLe[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]25[/align] [align=center] [/align] [/td][td] [align=center]285[/align] [align=center][sup] [/sup][/align] [/td][td] [align=center]242﹡[/align] 168[/td][td] [align=center]27[/align] [align=center]35[/align] [/td][/tr][/table]﹡quantitativeion[b]2 结果与讨论[/b]2.1 色谱及质谱条件的优化流动相的选择:对比了酸性体系(0.1%甲酸水溶液)与非酸性体系(纯水、乙酸铵溶液)分别与甲醇、乙腈的流动相体系组合,结果发现目标物在酸性体系中比非酸性体系响应更高、峰形更好;同时大豆提取液中含有蛋白、脂肪等杂质可能会残留在色谱柱上,影响色谱柱的使用寿命,而乙腈比甲醇体系洗脱能力更强,可以有效去这些杂质。综合考虑目标物信号强度、色谱分离效果以及除杂等因素,本研究采用0.1%甲酸水溶液+乙腈流动相体系。质谱的选择:根据6种大豆异黄酮的分子量,用10%甲醇水配置1.0 mg/L 大豆异黄酮标准溶液直接注射到质谱中,在正离子模式下分别对各种组分进行母离子及对应子离子全扫描,最终确定的质谱条件见表1。2.2 质谱法(UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS)与色谱法(HPLC)的比较国家标准《GB/T 26625-2011粮油检验大豆异黄酮含量测定高效液相色谱法》[sup][/sup]中规定的大豆异黄酮检测方法为HPLC法。对同一大豆样品分别采用本文UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法(MRM色谱图见图1、2)和GB/T 26625 HPLC法检测,结果表明这两种方法测定的大豆异黄酮总含量值基本一致。由于De、GLe、Ge这三种苷元在大豆中含量很低,用HPLC法检测时,紫外检测器灵敏度不高,存在个别样品中上述三种组分检测缺失的情况;同时在实际大批量样品检测中发现,随着进样次数的增加,色谱柱柱效下降,大豆提取液中存在的蛋白、脂肪等杂质对含量低的目标物峰干扰越来越大,定量困难。研究发现,同浓度的大豆异黄酮在质谱检测器上的响应值要远远超过紫外检测器,同时质谱法可以通过选定大豆异黄酮的特征离子,有效地去除杂质的干扰,其目标物分离度不受色谱柱进样次数增加的影响,定量更加准确可靠。[align=center][img=,690,651]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908050912587968_4111_3299836_3.jpg!w690x651.jpg[/img][/align][align=center]图1 大豆异黄酮标准溶液(0.01mg/L)MRM色谱图[/align][align=center]Fig.1 MRM chromatograms of soybean isoflavone standard solution at 0.01 mg/L[/align][align=center][/align][align=center][img=,690,653]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908050913342201_5843_3299836_3.jpg!w690x653.jpg[/img][/align][align=center]图2 大豆样品中大豆异黄酮MRM色谱图[/align][align=center]Fig.2 MRM chromatograms of soybean isoflavone in soybean[/align]2.3线性范围和定量限吸取不同体积的大豆异黄酮标准储备液(1.3),用10%甲醇水分别配置0.002、0.005、0.01、0.05、0.1(De、GLe、Ge)和0.01、0.05、0.1、0.2、0.5(D、GL、G)的大豆异黄酮上机混合标准溶液,以各自定量离子的峰面积为Y对应质量浓度X(mg/L)做标准曲线,得到的线性方程和相关系数见表2。结果表明,大豆异黄酮标准溶液在各自浓度范围内线性良好,相关系数R为0.9993~0.9999。以10倍信噪比(S/N)计算,大豆异黄酮上机液最低定量浓度为0.001 mg/L,通过公式(1)计算得到大豆中大豆异黄酮含量,最终确定本方法大豆异黄酮的定量限(LOQ)为0.0001 g/kg。糠氨酸质量分数计算公式:[align=center][img=,207,87]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908050915166414_5621_3299836_3.jpg!w207x87.jpg[/img] ………………(1)[/align] 式中:X为试样中大豆异黄酮含量,以g/kg计;C为大豆异黄酮上机浓度(mg/L);V为定容体积(V=100)。表2 大豆异黄酮标准溶液的线性方程和相关系数[align=center]Table 2 Linear equation and correlation of soybean isoflavone in 10% methanol-water standard solutions[/align] [table][tr][td] [align=center]Analyte[/align] [/td][td] [align=center]Linear range/(mg/L)[/align] [/td][td] [align=center]Linear equation[/align] [/td][td] [align=center]R[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]D[/align] [align=center]GL[/align] [align=center]G[/align] [align=center]De[/align] [align=center]GLe[/align] [align=center]Ge[/align] [/td][td] [align=center][sup]0.01~0.5[/sup][/align] [align=center][sup]0.01~0.5[/sup][/align] [align=center][sup]0.01~0.5[/sup][/align] [align=center][sup]0.002~0.1[/sup][/align] [align=center][sup]0.002~0.1[/sup][/align] [align=center][sup]0.002~0.1[/sup][/align] [/td][td] [align=center]Y=2393.6x+479.38[/align] Y=1885x+139.66 [align=center]Y=1470.9x+187.97[/align] [align=center]Y=4287.9x+442.79[/align] [align=center]Y=3521.7x-103.62[/align] [align=center]Y=1993x+122.79[/align] [/td][td] [align=center]0.9995[/align] [align=center]0.9999[/align] [align=center]0.9993[/align] [align=center]0.9998[/align] [align=center]0.9997[/align] [align=center]0.9998[/align] [/td][td] [/td][/tr][/table]2.4回收率和精密度大豆中De、GLe、Ge含量较低,而D、GL、G含量较高,故本方法准确度实验分为高低浓度梯度组进行加标。称取大豆试样1.00 g,分别添加0.01、0.05、0.2 g/kg(De、GLe、Ge)和0.2、1、2 g/kg(D、GL、G),每个水平重复6次,同时做该大豆的空白本底实验。按照1.4前处理方法处理后上机检测,计算回收率(扣除空白),结果表明:不同添加浓度下,De、GLe、Ge的平均回收率为91.7%~96.2%,相对标准偏差(RSD,n=6)为2.78%~5.93%;D、GL、G的平均回收率为86.6%~93.8%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.07%~3.77%。[b]3 结语[/b]本文建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS)测定大豆中大豆异黄酮含量的分析方法。该方法灵敏度高,线性范围宽,能同时覆盖大豆中多梯度浓度大豆异黄酮组分含量的测定。同时该方法具有较高的准确度和精密度,前处理步骤简单,分析速度快,可有效避免由于色谱柱柱效下降对最终检测结果的影响,特别适合大批量样品的检测。田娟娟, 宋宏哲, 张飞, 等. 水剂法纯化大豆异黄酮的研究. 大豆通报, 2005, 6:19-22. Hagen M K, Ludke A, Araujo A S, et al.Antioxidant characterization of soy derived products in vitro and the effect ofa soy diet on peripheral markers of oxidative stress in a heart disease model .Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 2012,90(8):1095-1103. 徐春华, 张治广, 谢明杰, 等. 大豆异黄酮的抗氧化和抗肿瘤活性研究研究 . 大豆科学, 2010, 29(5): 870-873. 李俏俏, 王清路, 薛金艳, 等. 大豆异黄酮对绝经女性血清中脂类物质的影响的研究 . 大豆科学, 2009, 28(1):172-174. 胡润芳, 张玉梅, 陈宇华, 等. 大豆异黄酮含量的初步研究. 东南园艺, 2017, 6:9-11. 刘琴, 朱媛媛, 白兴梁. 不同种类大豆中大豆异黄酮含量及抗氧化性比较. 北京工商大学学报(自然科学版), 2012, 30(6): 45-51. 袁凤杰, 姜莹, 董德坤, 等. 中国大豆核心种质异黄酮含量分析.中国粮油学报, 2011, 26(2):5-8. Tepavcevic V, Atanackovic M,Miladinovic J,et al. Isoflavone composition,total polyphenolic content,and antioxidant activity in soybeans of different origin. MedFood,2010,13(3):657-664 GB/T 26625-2011《粮油检验大豆异黄酮含量测定高效液相色谱法》. Liggins J,Bluck J C. Deidzein and genistein content of fruits and nuts. Journal ofNutritional Biochemistry,2000,11(6):326-331. 鞠兴荣, 袁建, 汪海峰. 三波长紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量的研究. 食品科学, 2001, 22(5):46-48.
大豆异黄酮是一种植物性雌激素,又称为植物动情激素,是一种天然荷尔蒙,被认为有防癌丰胸之效,目前几乎没有明显副作用的报告。这个东西可防治一些和雌激素水平下降有关的疾病,延缓女性衰老、改善更年期症状、骨质疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心脏病、疏松症、心血管疾病等。对于高雌激素水平者,表现为抗激素活性,可防治乳腺、子宫内膜、结肠、前列腺、肺、皮肤等癌细胞的生长和白血病,及其它心血管疾病。其性状为:浅黄色粉末,气味微苦,略有涩味。来源于大豆类植物的胚芽,主要成分有:大豆甙(Daidzin),大豆甙元(Daidzein),染料木甙(Genistin),染料木素(Genistein),黄豆黄素(Glycitin),黄豆黄素甙元(Glycitein)。1 材料与方法1. 1 仪器与试剂1. 1. 1 仪器Waters2695高效液相色谱仪,配有二极管阵列检测器和Empower 色谱工作站; 脱气泵( 美国Millipore 公司) ; 超纯水系统( 美国Millipore公司) ; CW - 2000 超声波萃取仪(上海) 。1. 1. 2 试剂大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素和染料木素对照品由美国Sigma 公司生产; 甲醇为色谱纯( 美国Fisher 公司) ; 乙醇、丙酮均为分析纯( 天津市科密欧化学试剂有限公司) ,磷酸为优级纯( 天津市化学试剂三厂) ; 实验用水为超纯水。1. 2 方法1. 2. 1 色谱条件色谱柱:Ultimate XB-C18 4.60×250mm,5 um .PartNumber 00201-31043Serial Number 211302350.检测器: 二极管阵列。检测波长: 254 nm。流动相: 1% 磷酸水溶液和甲醇采用梯度洗脱,洗脱程序如下: 0 ~ 4 min,70% 磷酸水溶液+30%甲醇; 14 ~ 24 min, 45% 磷酸水溶液+55% 甲醇; 25~ 30 min,70% 磷酸水溶液+ 30% 甲醇。柱流速: 1. 0 ml /min。柱温: 30℃。进样量: 10μl。1. 2. 2 标准曲线制作1. 2. 2. 1 标准溶液配制 单标标准储备液配制: 准确称取大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、染料木素和大豆黄素对照品各0. 0500 g,分别置于小烧杯中,加70%乙醇溶解,如果不好溶解,可以在超声波中超声加速溶解,或者加入少量丙酮也可以加速溶解,待溶解完全后,移入50 ml 容量瓶中,加70% 乙醇定容至刻度,混匀,此溶液作为单标储备液,浓度各为1. 0 mg /ml。混合标准储备液配制: 准确吸取大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、染料木素和大豆黄素单标储备液各5. 0 ml 于50 ml 容量瓶中,加70%乙醇定容至刻度,混匀,此混标溶液6 种成分浓度各为100 μg /ml。1. 2. 2. 2 标准工作曲线制备 准确吸取混合标准储备液2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0、12. 0 ml 分别于100ml 容量瓶中,加70%乙醇定容至刻度,混匀,6种成分的浓度各为2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0、12. 0 μg /ml,按1. 2.1 色谱条件进行测定; 以各组分浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线,得回归方程。1. 2. 3 样品测定1. 2. 3. 1 样品前处理 固体样品: 准确称取2. 0 g样品于100ml 容量瓶中,加入50 ml 70% 乙醇超声波提取30min,加70%乙醇定容至刻度,混匀, 0. 45μm 滤膜过滤后,供高效液相色谱测定用。液体样品: 准确吸取5. 0 ml 样品于100 ml 容量瓶中,加70%乙醇定容至刻度,混匀,0.45 μm滤膜过滤后,供高效液相色谱测定用。1. 2. 3. 2 样品测定 吸取样品处理液及标准溶液各10 μl,按1. 2. 1 色谱条件进行测定,以标准保留时间定性,峰面积外标法与标准系列比较定量。
紫外分光光度法测定广金钱草中总黄酮含量摘要:目的 建立广金钱草中总黄酮含量的测定方法。方法 以硝酸铝、亚硝酸钠及氢氧化钠为显色剂,以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定。结果 芦丁在4.4μg/ ml~53.1μg/ ml范围内呈良好的线性关系,r =0.999 9(n=7),平均回收率为100.2% ,RSD为1.5%。结论 本法简便易行,有助于广金钱草药材的质量控制。关键词 广金钱草;芦丁;总黄酮;分光光度法Determination of Total Flavonoids in Desmodium Styracifolium by UV SpectrophotometryLI Rui(Nanning Institute for Food and Drug Control, nanning 530001,China)Abstract:AIM To establish the determination method for total flavonoid compounds in Desmodium styracifolium.METHODS With A1NO3一NaNO2一NaOH as chromogenic agent,rutin was used as reference sample by ultraviolet spectrophotometry.RESULTS The absorbability and concentration of rutin had good linear in the range of 4.4μg/ ml~53.1μg/ ml,r =0.999 9(n=7).The average recovery rate was 100.2% and RSD was 1.5%.CONCLUSION The method is reliable and can be helpful to efectively the quality control of Desmodium stymcifolium.Keyword Desmodium styracifolium(Osbeck)Merr;;rutin;total ilavonoids;UV spectrophotometry
大豆异黄酮是从植物中提取,与雌激素有相似结构,因此又称植物雌激素,大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性,是天然的癌症化学预防剂。主要成分:大豆甙(Daidzin),大豆甙元(Daidzein),染料木甙(Genistin),染料木素(Genistein),黄豆甙(Glycitin),黄豆甙元(Glycitein)。迪马科技用户采用Endeavorsil C18超高效液相色谱柱成功实现8分钟内6种大豆异黄酮的良好分离,对于大豆异黄酮的分离和检测具有实际意义。UPLC色谱分析条件*:色谱柱:Endeavorsil C18 50 × 2.1 mm, 1.8 μm(Cat.#.:87002)流动相:A:0.2%的磷酸水溶液,B:乙腈时间(min)02467A(%)9085706090B(%)[align=cente
硝酸铝显色法测银杏提取物总黄酮含量,以芦丁为对照,紫外波长扫描结果显示芦丁对照品在500nm左右有最大吸收峰,而供试品在400-600nm范围内均无最大吸收峰,而是呈上升趋势。特此求助,谢谢!
[align=center][b][font='times new roman'][size=18px]卷柏[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]中[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]穗花杉双黄酮[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]测定[/size][/font][/b][/align][font='tahoma'][size=14px]小记:[/size][/font][font='tahoma'][size=14px]我们当时接收到客户样品,进行测定出现[/size][/font][font='tahoma'][size=14px]跟之前[/size][/font][font='tahoma'][size=14px]枳壳的问题,发现样品有可能是被提取过又卖出的,含量没测到,后来去药店买来饮片测[/size][/font][font='tahoma'][size=14px] [/size][/font][font='tahoma'][size=14px]是没有问题的[/size][/font][font='tahoma'][size=14px][color=#000000]。[/color][/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231829035304_6700_1858223_3.jpeg[/img][/align][font='times new roman']1 [/font][font='times new roman']材料与试剂[/font][font='times new roman']乙腈(色谱级)、[/font][font='times new roman']甲醇、磷酸[/font][font='times new roman'](分析纯)、[/font][font='times new roman']穗花杉双黄酮[/font][font='times new roman'](购自中检院)、[/font][font='times new roman']卷柏[/font][font='times new roman']药材[/font][font='times new roman']样品(送检样品)[/font][font='times new roman']和药店购买[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman']2 [/font][font='times new roman']色谱条件[/font][font='times new roman']LC-20AT[/font][font='times new roman'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url](日本岛津),色谱柱:[/font][font='times new roman']Zorbax[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']SB[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']C18(250mm*4.6μm*5μm)[/font][font='times new roman'](安捷伦),流动相:以[/font][font='times new roman']甲醇[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']0.1%[/font][font='times new roman']磷酸水[/font][font='times new roman']梯度洗脱[/font][font='times new roman'];[/font][font='times new roman']柱温[/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']℃[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman']检测波长为[/font][font='times new roman']33[/font][font='times new roman']0nm[/font][font='times new roman'],流动相如下表:[/font][align=center][img=,690,152]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231831114264_3477_1858223_3.jpg!w690x152.jpg[/img][/align][align=left][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']溶液制备[/font][font='times new roman'](按照中国药典[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']020[/font][font='times new roman']年版一部[/font][font='times new roman']卷柏[/font][font='times new roman']项下测定)[/font][/align][font='times new roman']对照品溶液的制备[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']取穗花[/font][font='times new roman']杉双黄酮对照品适量,精密称定,加甲醇制成每[/font][font='times new roman']1m[/font][font='times new roman']L[/font][font='times new roman']含[/font][font='times new roman']0.1[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']mg[/font][font='times new roman']的溶液,即得。[/font][align=center][font='times new roman'] [img=,671,183]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231832332250_1831_1858223_3.jpg!w671x183.jpg[/img][/font][/align][align=center][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']穗花杉双黄酮[/font][font='times new roman']对照品色谱图[/font][/align][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']供试品溶液[/font][font='times new roman']的制备[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']取本品粉末(过三号筛)约[/font][font='times new roman']0.2g[/font][font='times new roman'],精密称定,[/font][font='times new roman']置具塞[/font][font='times new roman']锥形瓶中,精密加入甲醇[/font][font='times new roman']50m[/font][font='times new roman']L[/font][font='times new roman'],称定重量,加热回流[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']小时,放冷,再称定重量,用甲醇[/font][font='times new roman']补足减失的[/font][font='times new roman']重量,摇匀,滤过,[/font][font='times new roman']取续滤液[/font][font='times new roman'],即得。分别精密吸取对照品溶液[/font][font='times new roman']10[/font][font='times new roman']μ[/font][font='times new roman']L[/font][font='times new roman'],注入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url],测定,即得。[/font][align=center][img=,683,186]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231832537485_797_1858223_3.jpg!w683x186.jpg[/img][/align][font='times new roman'][/font][align=center]卷柏药材色谱图[/align][font='times new roman']结果:客户送检样品[/font][font='times new roman']穗花杉双黄酮[/font][font='times new roman']未检出,药店购买卷柏药材[/font][font='times new roman']穗花杉双黄酮[/font][font='times new roman']含量为[/font][font='times new roman']0.[/font][font='times new roman']41%[/font][font='times new roman']注:[/font][font='times new roman']因为卷柏回流时间比较长,要多关注冷凝水及水浴锅,以免冷凝不及时,溶液挥干,影响提取效果。[/font][font='times new roman']我们再购买药材时不仅要从性状进行鉴别,更要根据中国药典进行含量检测,有必要的可以要求出示相关检测报告,以免买到劣药或者假药。[/font]
化妆品中补骨脂特征成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的检测方法
我在用高效液相色谱法分析一个类酰胺类化合物,用的流动相是5mmol/L的磷酸氢二钠(用磷酸调节pH=7.0)-乙腈(80:20),但是连续用过两根色谱柱(分别为C8 C18),两三天后柱效就下降很明显(具体表现是峰变宽),我分别测过供试品和对照品溶液的pH值,分别为4.5及7.2,均在液相色谱所要求的条件之内,请帮我分析一下原因,谢谢!!
问题: 各位老师,有人做过北豆根的含量测定吗?对照品蝙蝠葛苏林碱用甲醇很难溶,试了用流动相也几乎不溶,请问有什么好建议吗
草乌薄层喷稀碘化铋钾试液后三种对照品都显什么颜色
寒冷的冬天,整个人都是懒洋洋的,尽管有很多试验经历、色谱柱使用体会、很多的原创素材,都懒的起笔。2013年马上来临,趁着2012年的第五届原创大赛,赶快记录一篇原创,分享自己更多的使用体会与试验经历给大家探讨。这次检测的是大豆异黄酮,说起这个,估计很少人接触,而我已经跟它已经认识了好几年。异黄酮是一类物质,有苷和苷元之分,可是接触了很久都不知道苷和苷元有什么区别,为什么这个叫苷,另外一个就叫苷元。而且保健品中有很多叫甙,我也搞不清楚甙和苷有什么区别。大豆异黄酮的测定,目前存在的标准方法:GB/T 23788-2009保健食品中大豆异黄酮的测定方法 高效液相色谱法NY/T 1252-2006大豆异黄酮http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212281607_416709_1608710_3.jpg实验过程:色谱柱:Topsil 液相色谱柱(C18,5um,4.6*250mm)检测波长:260nm流动相:乙腈+0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱流速:1.0mL/min进样量:20ul先晒晒标准上的图谱http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212281611_416712_1608710_3.jpg以下是我测定的色谱图,根据出峰顺序依次是大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素。标准色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212281614_416716_1608710_3.jpg保健食品样品色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212281615_416718_1608710_3.jpg总结:1、总体来说,4个组分的保留时间和色谱峰都能与标准对应重现2、色谱峰的理论塔板数都很好,这根柱子已经用了一段时间,具体测了多少样品就不清楚了3、以前检测测的是大豆素和染料木素,同时测定4个还是第一次,效果还算满意你测试过大豆异黄酮吗?有经验赶快讨论吧
葛根配方颗粒特征图谱黄豆苷元对照品配制时,在水浴上加热溶解了,但是放冷就析出了,有大神可以指导一下吗?
三氯化铝法测定总黄酮的含量,基本上还是可靠的,但对有些样品本身颜色就比较黄比较 深的,我就先用活性碳脱色了,然后再稀释再去与三氯化铝显色,可是却出现了如下 情况 :加入三氯化铝的样品颜色反而浅,样品本身做对照的倒是颜色深,这样一来就没法 代入标准曲线去计算了,因为减去空白后就是负值,请问这是为什么?如何解决?
硝酸铝显色法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在510nm波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般以芦丁标准品定量。 先用亚硝酸钠还原黄酮, 然后加入硝酸铝络合,最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环,生成 2''''羟基查耳酮而显色。显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时不显色。用亚硝酸钠还原黄酮,还原那个基团?硝酸铝络合,与那个基团?
[color=#cc6600]请问在配制磷酸根标准溶液和磷酸二氢根标准溶液时都选用磷酸二氢钾作为原料,那么将磷酸二氢钾溶于水后不应该既存在磷酸根离子又存在磷酸二氢根离子吗?是如何做到所配的标液是磷酸根或是磷酸二氢根标液呢,谢谢![img=,690,471]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209142216569606_1437_3494177_3.png!w690x471.jpg[/img][img=,690,479]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209142216569459_3472_3494177_3.png!w690x479.jpg[/img][/color]
请帮忙分析原因我用HPLC法分析1,6-二氢-2-甲基-6氧代[3,4‘-双吡啶]-5-甲腈时,分别用过C8,C18色谱柱,流动相用的是5mmol/l的磷酸氢二钠(pH=7.0)与乙腈甲醇以一定比例混合,使用过程中,柱压也没有升高的现象,供试品及对照品溶液的pH值分别为4.5和7.2,但色谱柱的柱效下降很快。后来我又尝试着调节pH值分别为6.5、5.8、4.0、均没有很大的起色,用这根色谱柱分析别的化合物峰形很差,难道真是这种化合物对色谱柱有损伤?两根色谱柱连续用三天以后均会如此,为什么?请帮忙分析。谢谢!!
请问水中磷酸根、磷酸氢根、磷酸二氢根用AS11柱能分开么,什么条件?
[size=4]请教一个问题,我用紫外测翻白草中的黄酮,可是发现测芦丁标准液的时候,[font=宋体]加入[/font][font='Times New Roman']50 g[/font][font='Times New Roman']/ L [/font][font=宋体]亚硝酸钠溶液[/font][font='Times New Roman'] 1 mL ,[/font][font=宋体]摇匀[/font][font='Times New Roman'] ,[/font][font=宋体]放置[/font][font='Times New Roman'] 6 min ,[/font][font=宋体]加入[/font][font='Times New Roman']100 g[/font][font='Times New Roman']/ L [/font][font=宋体]硝酸铝溶液[/font][font='Times New Roman']1 mL ,[/font][font=宋体]摇匀[/font][font='Times New Roman'],[/font][font=宋体]放置[/font][font='Times New Roman']6 min ,[/font][font=宋体]加入[/font][font='Times New Roman']40 g[/font][font='Times New Roman']/ L [/font][font=宋体]氢氧化钠溶液[/font][font='Times New Roman'] 10 mL ,在[font='Times New Roman']25 mL [/font][font=宋体]容量瓶[/font]用[font='Times New Roman']700 mL/ L[/font]乙醇定容至刻度,[/font][font=宋体][font=宋体]用不含芦丁的空白管对照调零。[b]结果没有在510nm出峰,而是在250附近出峰。[/b]后来又测了下样品,也是在250nm附近出峰。好多文献都是说在510nm出峰。所以想请问一下,这是什么原因。[/font][/font] 麻烦大家帮忙解释下 [/size]
各位老师,这是一黄酮苷类的化合物,母核是黄酮二糖苷,现在多出一组信号,无法拼出合理结构,δCδHDept170.6-C季碳107.54.16(s)-CH83.7-C季碳74.84.25(q)-CH60.24.05(q)-CH240.31.98(m)-CH222.41.20(t)-CH314.01.12(d)-CH3根据QC和BC,我们推出以下结构,通过chemdraw模拟了一下碳氢数据,也基本符合。但是感觉是不是不太符合生源关系。有那位大侠能给出一些建议。样品纯度不是很高,大概92%左右,高分辨扣除母核外,这个集团的分子式应为C8H14O5,已经加了一个氢。谱图都是纸版的,都没有扫描,麻烦大家先帮着看一下,给出一些可能的结构及推测,有见过类似集团的就更好了,谢谢了。
黄酮类化合物在自然界分布非常广泛,是一类非常重要的天然有机化合物。传统意义上黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮类化合物,现在泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B-环)通过中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。根据黄酮类化合物结构特点,可分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷醇、查耳酮、异黄酮、双黄酮、花色素等种类。黄酮类化合物具有多方面的生物活性,如葛根总黄酮及葛根素(puerarin)、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作用,临床用于治疗冠心病;水飞蓟素(silymarin)、异水飞蓟素( silydianin)及次水飞蓟素(slychristin)等有肝脏保护作用,临床上用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤等;木犀草素(luteolin)、黄芩苷( baicalin)、黄芩素(baicalein)以及槲皮素等具有抗菌、抗病毒作用;牡荆素( vitexin)、桑色素、儿茶素等具有抗肿瘤作用等。游离黄酮类化合物一般难溶或不溶于水,易溶于甲醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等有机溶剂及稀碱水溶液中。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中。花色苷及其苷元以离子形式存在具有盐的通性,亲水性较强,水溶度较大。黄酮化合物单体的分离主要依靠各种色谱方法来实现,除经典的柱色谱法和薄层色谱法、HPLC外,近年来HSCCC已经得到广泛的应用。对于多数极性较弱的黄酮苷元,在进行HSCCC分离实验时,通常可以选用氯仿-甲醇-水的溶剂系统,而氯仿-甲醇-水(4:3:2或5:3:2)则是最常用的溶剂系统。根据被分离样品的具体情况,在上述溶剂系统的基础上,对组成诸元的比例进行适当的调整,就能获得良好的分离效果。还有些苷元也可采用正己烷(石油醚)-乙酸乙酯-甲醇-水的溶剂系统,通过调整溶剂的组成比例来实现有效分离。对于极性较强的黄酮糖苷类成分的HSCCC分离,通常使用的是乙酸乙酯–水为基本结构的溶剂系统,可以通过添加正丁醇、甲醇、乙醇、乙酸来调节溶剂系统的极性。分离这类化合物的典型性溶剂系统有:氯仿-[color
二氢香豆素酸值测定,不论是指示剂法还是酸度计法,一直都达不到终点,滴定几秒后就会褪色,或者酸度计PH值下降到8以下,无法保持稳定,这是怎么回事,求大神指导,另外有没有老师知道关于国标14455.5香料 酸值的测定的编制说明,参考一下呢
中药制剂中木瓜的薄层鉴别:供试品与对照药材处相应的点颜色不同是为什么?狗脊的薄层鉴别也是一样,提取时处理方法是一样的图1前三供试品(绿色),中二木瓜对照药材(蓝色),后二阴性对照图2前二供试品(亮的点蓝色),中二狗脊对照药材(绿色),后二阴性对照不知道该怎么办,诚请各位大师解答,谢谢[img=,690,459]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908061329352099_2969_1816508_3.jpg!w690x459.jpg[/img][img=,380,362]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908061329533546_2463_1816508_3.jpg!w380x362.jpg[/img]
各位大佬,有个很粗浅但又没法在教科书上找到的问题想请教下大佬们!我再测总黄酮的含量,使用硝酸铝显色,然后我参比池是该放我用的试剂 (乙醇)还是该放空白对照(试剂乙醇+亚硝酸钠+硝酸铝)?
CEO, director ,president ,chairman, general manager 这些个单词看上去都差不多,签协议的时候用那个比较好点? 都有什么区别?CEO中有个单词是非法字符