大鼠胸大动脉平滑肌细胞

心脑血管疾病是全球发病率、死亡率最高的疾病，近年来以动脉粥样硬化为代表的心脑血管疾病的发病率持续升高，严重威胁人们的身体健康，给家庭和社会带来沉重的负担，已成为一个重要的公共卫生问题[1]。心血管疾病已成为威胁人类健康的最主要疾病，其中动脉粥样硬化是心血管疾病的主要原因和病理基础。动脉粥样硬化常累及大动脉、中动脉，临床主要特征为慢性管腔狭窄，是冠心病、脑梗死、外周血管疾病等心脑血管疾病的主要病理基础，可影响心脏、大脑、肾脏、眼睛、外周血管的动脉系统[2]。大黄素从大黄、虎杖的根和树皮中获得的蒽醌衍生物，是橙色长针状晶体，易溶于醇和碱性溶液，几乎不溶于水[3]。大黄素具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制、镇痛、器官保护等多种药理作用，临床可用于痢疾、肺炎、脑炎、中耳炎、小儿麻痹、肝炎、肿瘤、心脑血管疾病等多种疾病的治疗[4]。大黄素可通过降低炎症反应、降低氧化应激反应、调节脂质代谢、阻止血管平滑肌增殖、保护血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块等多种途径对动脉粥样硬化发挥防治作用。本文综述了大黄素防治动脉粥样硬化的作用机制研究进展，为大黄素防治动脉粥样硬化的临床应用提供参考。 1 降低炎症反应 1.1 阻止核因子-κB（NF-κB）激活 NF-κB是动脉粥样硬化的重要信号通路，可介导主动脉平滑肌细胞中促炎细胞因子和生长/迁移因子表达，促进主动脉平滑肌细胞的增殖和迁移，促进动脉粥样硬化的形成[5]。Meng等[6]使用大黄素干预大鼠主动脉平滑肌细胞，结果0.1～10 μmol/L大黄素可呈浓度相关性抑制肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对主动脉平滑肌细胞的促增殖作用，阻止主动脉平滑肌细胞迁移和基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达，降低白细胞介素（IL）-6、IL-1β、血管细胞黏附分子-1、细胞间黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）等炎症因子的表达，抑制TNF-α引起的主动脉平滑肌细胞中NF-κB的活化，结果证实大黄素可通过阻止NF-κB激活以发挥抗炎作用，降低动脉粥样硬化的病情。赵剑锋等[7]使用高脂饲料饲养大鼠建立动脉粥样硬化模型，结果600、900、1 200 mg/kg大黄素能呈浓度相关性抑制大鼠体质量增加，继而降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）的水平，显著降低超敏C反应蛋白（hs-CRP）、纤维蛋白原（FIB）的水平，表明大黄素可通过抗炎发挥抗动脉粥样硬化的作用。吴迪等[8]使用大黄素干预大鼠血管平滑肌细胞，结果50 μmol/L大黄素能抑制血管平滑肌细胞重叠和变性，抑制CRP、一氧化氮合酶（iNOS）、TNF-α基因和蛋白的表达，表明大黄素能通过抑制多种炎症因子的表达发挥抗动脉粥样硬化的作用。 1.2 调节γ-干扰素（IFN-γ）、MCP-1的分泌 IFN-γ属于II型干扰素，能抑制LDL-C的表达，阻止泡沫细胞的形成，在动脉粥样硬化进程中发挥双向调节作用[9]。MCP-1能促使单核细胞聚集，促进泡沫细胞形成，加速动脉粥样硬化的形成，介导多种促炎因子的分泌和血管内皮的增殖[10]。夏丽等[11]使用大黄素干预高脂饲料诱导的载脂蛋白E缺陷动脉粥样硬化小鼠，结果显示，10、20、40 mg/kg大黄素能降低小鼠LDL-C、TC、三酰甘油（TG）的水平，提高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的水平，上调IFN-γ基因的表达，下调MCP-1基因的表达，降低血清IFN-γ、MCP-1水平，表明大黄素可通过调节IFN-γ、MCP-1的分泌减轻炎症反应，发挥抗动脉粥样硬化的作用。 1.3 抑制同型半胱氨酸（Hcy）的表达 血浆Hcy水平升高是动脉粥样硬化的独立危险因素，能够通过活性氧（ROS）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路刺激血管平滑肌细胞中CRP的表达，加剧血管壁的炎症过程，从而促进动脉粥样硬化进程[12]。Pang等[13]使用大黄素干预大鼠血管平滑肌细胞，发现0.1、1、10、100 μmol/L大黄素能呈浓度相关性降低血管平滑肌细胞的活力，有效降低Hcy引起血管平滑肌细胞的CRP的表达，抑制细胞外信号调节激酶（ERK）1/2和p38磷酸化进程，以浓度相关性方式拮抗Hcy对过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的抑制作用，还有助于降低大鼠血清Hcy和CRP水平，表明大黄素通过抑制Hcy表达以阻止ERK1/2/p38信号通路激活和促进PPARγ表达，发挥抗动脉粥样硬化作用。 2 降低氧化应激反应 缺氧、氧化应激可通过磷脂酰肌醇3-激酶途径激活磷脂酶C，导致神经酰胺的形成，神经酰胺可调节细胞凋亡和炎症，有助于动脉粥样硬化或血栓性疾病的发展[14]。Hei等[15]使用1%胆固醇和5%脂肪的饮食喂食家兔建立动脉粥样硬化模型，结果10 mg/kg大黄素能显著降低兔血清丙二醛（MDA）、氧化低密度脂蛋白（OX-LOL）的水平，提高血清超氧化物歧化酶（SOD）的水平，显著减轻家兔动脉粥样硬化程度，降低主动脉的神经酰胺浓度、鞘磷脂酶活性和凋亡泡沫细胞指数，结果证实大黄素可通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。张翔等[16]使用大黄素治疗高脂饲料喂养的动脉粥样硬化大鼠，结果发现20、40、80 mg/kg大黄素有助于提高大鼠的体质量，呈剂量相关性降低MDA的水平，升高SOD、总抗氧化能力（T-AOC）的水平，减轻平滑肌细胞增生和向内膜迁移，提示大黄素通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。张翔等[17]使用大黄素治疗高脂饲料建立的动脉粥样硬化大鼠，结果20、40、80 mg/kg大黄素能浓度相关性降低LDL、TG、TC的水平，提高HDL的水平，上调SOD、T-AOC的水平，降低MDA的水平，减轻平滑肌增生、内膜迁移、内膜水肿等动脉粥样硬化改变，提示大黄素可通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。 3 调节脂质代谢 3.1 消耗胆固醇以破坏脂筏 脂筏位于细胞膜和内膜中，是含有高浓度胆固醇和鞘糖脂的微结构域，参与多种信号通路的活化，可加剧炎症反应，促进动脉粥样硬化的发展，GM1-神经节苷脂是脂筏的标志物，脂质筏的破坏将导致GM1-神经节苷脂从脂筏重新分布到细胞膜非脂质筏结构域[18]。胆固醇是脂筏中主要成分，胆固醇富集使脂筏比细胞膜周围富含磷脂的非筏相更紧密，消耗脂筏中的胆固醇可破坏脂筏[19]。Meng等[20]使用大黄素干预原代人脐静脉内皮细胞，结果1～50 μmol/L大黄素能显著降低脂多糖引起的IL-1β、IL-6、IL-8、趋化因子配体2、MCP-1等多种炎症因子的分泌，阻断核因子κB抑制因子α（IκBα）的降解和NF-κB活化，大黄素将脂筏中的GM1-神经节苷脂分散到膜或内膜的非脂质筏结构域，证实大黄素通过消耗胆固醇来破坏脂筏，阻止脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞中NF-κB活化，发挥抗炎作用，以减轻动脉粥样硬化进程。 3.2 激活PPARγ信号通路 PPARγ在巨噬细胞中大量表达，尤其是动脉粥样硬化内的脂质泡沫细胞，PPARγ通过转录诱导ox-LDL参与动脉粥样硬化进程，还能促进ATP结合盒转运体（ABC）A1、ABCG1的表达，通过肝X受体α（LXRα）介导巨噬细胞中胆固醇的外排，在动脉粥样硬化的炎症反应、胆固醇稳态中发挥关键作用[21]。Fu等[22]使用大黄素干预THP-1单核巨噬细胞，结果1、5、10 μmol/L大黄素能促进细胞中PPAR-γ蛋白和基因的表达，以浓度相关性促进载脂蛋白A1诱导的巨噬细胞内胆固醇外排，还能促进THP-1细胞中LXR-α（PPARγ靶点）的蛋白和基因的表达，促进ABCA1、ABCG1的表达，证实大黄素可通过激活PPARγ信号通路以促进胆固醇排除，发挥抗动脉粥样硬化的作用。Zhou等[23]使用脂肪喂养载脂蛋白E建立小鼠动脉粥样硬化斑块模型，结果发现10 mg/kg大黄素能显著减轻斑块中脂质核心面积和胶原蛋白数量，抑制斑块MMP-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-GSF）的表达，促进PPARγ的表达，提示大黄素可通过激活PPARγ信号通路以促使动脉粥样硬化斑块稳定有关。 4 阻止血管平滑肌增殖 动脉内膜血管平滑肌细胞的增殖是动脉粥样硬化斑块形成的关键步骤，诱导动脉内膜血管平滑肌细胞凋亡或细胞周期停滞，还会损害血管内皮细胞生理机能，导致内膜增生[24]。Xu等[25]使用大黄素干预动脉内膜血管平滑肌细胞，发现0.05～5 μmol/L大黄素可呈浓度相关性抑制动脉内膜血管平滑肌细胞的增殖，显著降低了细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）、Ki67、E2F-1基因表达，显著降低线粒体活性，还能显著减轻大鼠损伤动脉的内皮化进程，证实大黄素可通过阻止血管平滑肌增殖以抗动脉粥样硬化。 活化的半胱天冬酶（Caspase）能促使Bid断裂，诱导细胞色素C从线粒体释放，激活线粒体途径，继而激活下游Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9，导致多种DNA链断裂，导致细胞凋亡，以阻止血管平滑肌增殖[26]。Heo等[27]使用大黄素干预大鼠主动脉平滑肌细胞，发现0.1、1、10 mmol/L大黄素能浓度相关性抑制血小板源生长因子诱导的主动脉平滑肌细胞增殖，抑制IκBα的磷酸化，促进主动脉平滑肌细胞凋亡，促进Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达，还能调节B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的表达，促使MMP紊乱，证实大黄素通过Caspase途径促进线粒体依赖性细胞凋亡，进而阻止血管平滑肌细胞增殖，降低动脉粥样硬化发生。 5 保护血管内皮功能 内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/一氧化氮（NO）系统与动脉粥样硬化密切相关，前者活性降低可促进内皮细胞增生，抑制NO的合成，后者能强效促使血管舒张，阻止血管平滑肌增殖和血栓形成[28]。吴健虹等[29]使用大黄素治疗膳食诱导的高脂血症大鼠，10 mg/kg大黄素能显著降低LDL-C、TG、TC的水平，降低肝脏脂肪变性程度，显著提高胸主动脉的总NO的水平和eNOS基因和蛋白的水平，证实大黄素能上调eNOS/NO系统以保护血管内皮细胞，减轻动脉粥样硬化的风险。 6 稳定动脉粥样硬化斑块 MMP能特异性降解细胞外基质中多种胶原蛋白的表达，破坏动脉粥样硬化斑块纤维帽结构，导致血栓形成和斑块破裂[30]。白文武等[31]使用大黄素治疗高脂饮食建立的载脂蛋白E缺陷小鼠模型，结果60 mg/kg大黄素能显著抑制血管内膜增厚和平滑肌增生，抑制粥样斑块的形成，下调MMP-2、MMP-9的表达，提高组织抑制剂1（TIMP-1）的表达，证实大黄素可通过调节MMP的分泌以稳定动脉粥样硬化斑块，发挥抗动脉粥样硬化的作用。 7 结语 大黄素可通过降低炎症反应、降低氧化应激反应、调节脂质代谢、阻止血管平滑肌增殖、保护血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块等多种途径对动脉粥样硬化发挥防治作用。由于大黄素用于人体的机制尚不明确，目前大黄素多用于动物研究，尚未用于临床试验，因此，需要进一步的研究和更多的试验来验证大黄素对人动脉粥样硬化的益处。大黄素的肝毒性、肾毒性和口服生物利用度差的问题应该在未来的研究中得到解决。总之，大黄素防治动脉粥样硬化具有良好的应用前景，可能在未来用于临床实践。

[size=15px][color=#595959]近年来，[b]淋巴脉管系统[/b]和淋巴运输在胃肠道疾病中的作用受到越来越多的研究关注，淋巴[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]畸形[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]和淋巴结重塑已被认为是许多胃肠道疾病的标志。此外，胃肠道淋巴引流受损和[b]淋巴淤滞[/b]会阻碍大分子、死细胞和病原体离开肠道的清除，从而加剧感染并延迟[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]免疫[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]反应。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]近年来，肠道和肠系膜淋巴管在肠道疾病，特别是炎症性肠病(IBD)中的作用已被广泛研究。然而，对[b]胃淋巴管(GLVs)[/b]的研究一直落后于胃肠学本身的发展。虽然最早对[b]胃淋巴泵(GLP)[/b]的可视化研究可以追溯到Nagata和Guth在1984年的报告，但在随后的40年里，关于GLP在胃疾病中的作用以及针对GLP的药物的报道很少。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]半夏泻心汤(BXD)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]出自《伤寒论》，在现代医学实践中被广泛应用于治疗各种肠胃疾病，对[b]应激性胃溃疡(SIGU)[/b]等多种胃肠道疾病有明确的治疗效果，但对胃淋巴泵(GLP)的影响尚不清楚。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]阐明GLP在SIGU和BXD治疗中的作用，探讨GLP调控的分子机制。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]对SIGU大鼠模型进行体内GLP显像，评价淋巴动力学参数。采集胃窦组织及血清进行宏观、组织病理学及溃疡参数分析。收集胃淋巴管(GLV)组织进行RNA-Seq检测。从RNA-Seq结果中筛选差异表达基因(DEGs)并用于转录组学分析。采用qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和WB检测关键DEGs及其衍生蛋白。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]SIGU大鼠GLP明显受到抑制。[b]BXD能恢复GLP，改善胃淋巴淤积，减轻溃疡损害[/b]。GLV转录组分析显示，上调的DEGs集中在[b]平滑肌收缩信号通路[/b]，下调的DEGs集中在能量代谢通路，尤其是脂肪酸降解通路，说明BXD可以促进淋巴平滑肌收缩，调节能量代谢，减少脂肪酸降解。这些机制最有可能的目标是驱动GLP的[b]淋巴平滑肌细胞(LSMCs)[/b]。qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和WB对关键基因和蛋白水平的评估进一步验证了这一推测。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][font=&][/font][font=&][/font][/color][/size][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]BXD通过激[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959][b]活平滑肌收缩信号通路，恢复能量供应，调节能量代谢程序，减少脂肪酸降解，有效回收GLP，减轻胃内炎症细胞因子和代谢废物的积累[/b]，是其治疗SIGU的重要作用机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size]

【序号】：1【作者】：张晓宇 【题名】：香烟提取物通过周期蛋白D1促进支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖【期刊】：《华中科技大学》 2009年 【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10487-2009173427.htm【序号】：2【作者】：田峰【题名】：结缔组织生长因子在烟雾致肺动脉平滑肌细胞增殖及细胞外基质积聚中的作用【期刊】：《华中科技大学》2007【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10487-2009033720.htm【序号】：3【作者】王苒 徐永健 刘先胜 曾大雄 向敏 【题名】：结缔组织生长因子和周期蛋白D1在烟雾暴露大鼠肺血管重塑中的表达变化 【期刊】：中华结核和呼吸杂志【年、卷、期、起止页码】：2010, 33(9)【全文链接】：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zhjhhhx201009012.aspx

肌肉能提供干细胞来促进肌肉的生长和受伤肌肉的再生，但肌肉干细胞必须驻留在特殊的部位才能有助肌肉的生长和修复。德尔柏林布吕克分子医学中心（MDC）发育生物学家Dominique Bröhl和Carmen Birchmeier教授已经阐明这些干细胞是如何定植于肌肉干细胞“巢穴”中的。肌肉干细胞也被称为卫星细胞，位于平滑肌细胞的质膜和周围基底层之间。可发育分化为成肌细胞，后者可互相融合成为多核的肌纤维，形成骨骼肌最基本的结构。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201209/2012091813042153.jpg在本研究中，Bröhl博士和教授Birchmeier表明，小鼠的肌肉祖细胞缺乏Notch信号后，不能定植于干细胞“巢穴”。相反，肌肉祖细胞会定植于肌纤维之间的组织中。发育生物学家认为，这是肌肉弱化的原因。干细胞定植于错误的地方就不再像以前那样拥有多种生物学功能，难以有助于肌肉生长。此外，Notch信号通路在肌肉的发育过程中具有第二大功能。它可以通过抑制肌肉发育促进因子MyoD防止干细胞分化成肌肉细胞，从而确保肌肉中总会存在能保存有修复和再生功能的干细胞“巢穴”。这项工作对肌肉再生和肌肉无力的研究具有重大意义。这实验势必为肌肉严重损伤和肌肉萎缩的患者提供新的希望！多么希望此技术能在中国普及。

[b][size=15px][color=#595959]丹参酮IIA[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959] (TIIA)[/color][/size][size=15px][color=#595959]是中药丹参的主要脂溶性活性成分，具有延缓[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]动脉粥样硬化[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959](AS)[/color][/size][size=15px][color=#595959]的作用。[/color][/size][size=15px][color=#595959]TIIA还可以通过发挥抗炎和抗氧化作用来治疗帕金森病等神经系统疾病。[/color][/size][size=15px][color=#595959]然而，目前尚不清楚TIIA是否[/color][/size][size=15px][color=#595959]可以通过调节[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]胞葬作用(e[/color][/size][size=15px][color=#595959]fferocytosis)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]从而改善动脉粥样硬化。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]该研究旨在[b]确定TIIA是否可以通过增强胞葬作用来减少脂质积累和治疗AS[/b]。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]首先，对LDLR敲除(LDLR-/-)小鼠进行为期24周的体内实验，分别采用组织病理学染色、[/color][/size][size=15px][color=#595959]免疫[/color][/size][size=15px][color=#595959]荧光和Western blot实验从疗效和机制两部分进行验证；此外，利用细胞在体外再次验证。具体实验设计方案如下：在体内，以西方饮食（高脂肪饮食）喂养12周的LDLR-/-小鼠为AS模型，以正常饮食喂养的LDLR-/-小鼠为空白对照组。TIIA组和阳性对照组(阿托伐他汀，ATO)分别通过腹腔注射(15 mg/kg/d)和灌胃(1.3 mg/kg/d)干预12周。体外分别用ox-LDL (50 ug/mL)或ox-LDL (50 ug/mL) + TIIA (20 uM/L或40 uM/L)培养RAW264.7细胞。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]采用Masson染色和油红O染色分别评价[/color][/size][size=15px][color=#595959]主动脉[/color][/size][size=15px][color=#595959]斑块和RAW264.7细胞泡沫细胞形成的病理变化。采用生化方法检测小鼠血脂水平。采用免疫荧光法检测斑块中凋亡细胞和胞葬作用相关信号的表达。采用RT-q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和Western blot方法观察小鼠主动脉和RAW264.7细胞中胞葬作用相关分子的变化趋势。还使用中性红法评估RAW264.7细胞的吞噬能力。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]与模型组比较，TIIA降低了血清TC、TG、LDL-C水平(p 0.01)，减少了小鼠主动脉富含脂质斑块的相对管腔面积(p 0.01)，增强了小鼠主动脉斑块的稳定性(p 0.01)，减少了ox-LDL诱导的RAW264.7细胞脂质堆积(p 0.01)，上调了ox-LDL诱导的RAW264.7细胞的胞葬作用相关分子表达，提高了胞葬作用率。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]TIIA可能[b]通过增强巨噬细胞的胞葬作用功能来减少脂质积累[/b]，从而治疗AS。继续深入研究TIIA使巨噬细胞在AS中保持[b]强吞噬和[/b][/color][/size][b][size=15px][color=#595959]消化[/color][/size][size=15px][color=#595959]吸收[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]的具体机制，可能会推动TIIA作为巨噬细胞胞浆作用的靶向治疗剂的进展。[/color][/size]

从大小来讲，细胞培养瓶约可分为约600ml，250ml，50ml和25ml的，一般都经过表面改性处理，适合细胞贴壁和生长。600ml 、300ml的多用于大规模培养时用（如单克隆细胞的培养等），50ml的多用于一般性细胞实验用（一般性的传代，保存细胞，为实验提供细胞等），25ml一般是用来复苏细胞或细胞较少时的培养，还有做原代细胞时也可以做多瓶而避免交叉污染。当然还有其他如圆形的等，都可根据个人爱好和实验需要自己选择。 根据细胞培养瓶制作材料的不同，也有玻璃和塑料之分，这里谈一点自己的浅见（欢迎不同意见的战友拍砖）。不同的细胞对胰酶的敏感度不一样，所以在实验中我们常常会遇到一些细胞消化半天也没有起色，导致细胞状态不断下滑，直至最后的死亡以至于实验进展的不顺利。当然，有时候是可以通过加一些EDTA等来增强胰酶的能力，或者提高胰酶的浓度来实现，在培养一些细胞过程中，我发现，一些细胞对玻璃和塑料制品粘附能力不同，如RAW264.7，平滑肌细胞等，在转换培养瓶之后，可以发现好消化了很多，并且在回到原制品的培养瓶时不会改变它的贴壁能力。这里希望有经验的战友可以分享你们的经验。 关于培养板的购买其实我也没有什么经验，想说的就是要尽量避免购买国产的培养板，国产的一些培养瓶还可以，但是培养板我们买过很多国产的，确实效果不是很好，细胞在里面基本上长的非常非常磕碜。所以经费富余的情况下，这些东西能买进口的就买吧。大公司的基本都可以买，BD，Corning等等。这些东西原则上是一次性的，但是我们大部分实验室根本不可能做到，其实泡酸，洗干净再用也没问题，毕竟我们没有老外那么富足的经费，所以我们就累点吧，多做点体力活锻炼一下身体吧。滴管其实也没什么好说的，国产的就足够了。要说的是图中我比较喜欢用C类的滴管，原因就是塞上棉花后吹打细胞不会怕棉花湿掉而引起污染，而且用完棉花也方便取出，便于下次再用。

虽然经过几个世纪的研究，人类的生长于发育过程中仍遗留有很多的未解之谜。人类胚胎发育的研究始于20世纪，一般以观察胚胎的组织图像的方式来研究如器官发生的机制等，传统的方式如切片一直使用至今。现今，对于胚胎3D图像的数字化构建也已经开始，使用核磁共振、X光摄影等方法均可获得胚胎的3D图像，但分辨率仍无法达到细胞水平。本研究使用了妊娠期6-14周的胚胎和胎儿共36个，结合免疫染色、3DISCO组织透明技术和光片照明技术，获得了人类胚胎细胞级分辨率的3D图像，清晰地显示了胚胎的外周神经、肌肉、血管、心、肺和泌尿系统。通过这种方法，我们可以建立人类生长发育的图库，研究人类胚胎发育的分子机制。[b]3D图像示例：1) 周围神经系统3D成像（使用中间纤维外周蛋白（Prph）的抗体标记Prph）： [/b][align=center][img=,450,317]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/2.jpg[/img] [/align][align=center]（A）7周龄胚胎的表面造影图像（左）；对Prph进行标记所得图像。[/align][align=center]（B）8周龄胚胎的表面造影图像（灰色）和标记Prph所得图像（绿色）的叠加图像。[/align][align=center]（C）8周龄胚胎的面部神经分布。表面造影图像和标记Prph所得图像的叠加（中）（右）。 [/align][align=center]感觉神经轴突和运动神经轴突在手脚的分布：分别使用胆碱乙酰转移酶（ChAT）和瞬态粘附糖蛋白-1（Tag-1）的抗体来标记。[/align][align=center]（D）在外周神经，染色产生重叠现象，但在末端Tag-1（绿色）更为明显。（D-F）ChAT染色与Prph和Tag-1均无重叠。 [/align][align=center][img=,550,177]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/3.jpg[/img] [/align][align=center]（D）9.5周龄的拇指，标记Prph和Tag-1。染色发生重叠，但在末端区域Tag-1更显著。[/align][align=center]（E）9.5周龄的左手，ChAT与Prph表达区域不同。[/align][align=center]（F）9周龄的右脚，ChAT与Tag-1表达区域不同。 [/align][align=center] [img=,550,177]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/4.jpg[/img][/align][align=center]（G）7周龄的头部，标记Prph显示颅神经。（右）对颅神经分布使用Imaris软件进行3D虚拟解剖、区分并着色。 [/align][b]2) 手足的神经分布的3D成像：对Prph和Tag-1进行免疫染色以建立胚胎和胎儿手部的感觉神经及其分支的3D图像，并可观察感觉神经随时间推移的发育情况。 [/b] [align=center] [img=,450,362]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/5-1.jpg[/img][/align][align=center]（A）8周龄标记Prph的右手，感觉神经分为尺骨神经、正中神经和桡神经。[/align][align=center]（B）右手从7周龄到11周龄的神经分布随时间的变化。肌皮神经（指针处）很快便延长深入手部。 [/align][align=center] 之后分别对ChAT和Tag-1标记，建立了运动和感觉神经的分布的图像，以确定两种神经在何处以何种方式分离。 [/align][align=center][img=,550,286]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/5-2.jpg[/img] [/align][align=center]（C）（D）9周龄的右脚和8周龄的左手的感觉神经和运动神经的3D图像。 [/align][b]3) 对肌肉生长进行3D成像分析：[/b]转录因子Pax7是有颌下门动物的肌肉干细胞标记物，是肌肉生成的关键启动因子。在肌肉的生长中，表达Pax7的细胞均匀分布于生长中的肌肉，表达肌细胞生成素（Myog）的细胞成簇分布于运动神经末端。生长中的肌肉表达了双皮质素（Dcx），可能影响神经肌肉接点的发育。 [align=center][img=,550,259]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/7-1.jpg[/img] [/align][align=center]（A）9.5周龄标记Pax7的右脚和右手。[/align][align=center]（B）10.5周龄标记Pax7与ChAT的右脚。[/align][align=center]（C）9周龄标记Myog、ChAT和Tag-1的右脚。[/align][align=center]表达Myog的细胞成簇分布于运动神经分支末端。[/align][align=center]（D）9.5周龄的左脚标记Dcx与ChAT。[/align][align=center]Dcx在肌肉（*号）和感觉神经中检测到，但在运动神经轴突中未检测到。 [/align][align=center] [img=,450,334]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/7-2.jpg[/img][/align][align=center]（E）8周龄标记MHC与Tag-1的胚胎。[/align][align=center]（中上）动眼肌肉的图像。[/align][align=center]点状线标示出了肌肉的分界线，此处照明被色素上皮所减弱。[/align][align=center]（中下）肌肉与感觉神经。（右）左臂的肌肉与感觉神经。[/align][align=center]（F）9.5周龄标记MHC与ChAT的左手，显示了肌肉与运动神经。[/align][align=center]使用不同颜色对肌肉进行了区分，同时能够观察到正在发育的骨骼。 [/align][b]4) 人类胚胎脉管系统的3D成像分析：[/b]质膜膜泡关联蛋白（Plvap）是一种由网状微血管内皮细胞表达的跨膜糖蛋白。对整个胚胎标记Plvap并成像，可以观察到致密的血管网络。对平滑肌表达的α肌动蛋白（SMA）进行免疫染色可以观察到生长中的动脉的3D结构。 [align=center][img=,450,414]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/9.jpg[/img] [/align][align=center]（A）（B）8周龄标记Plvap的胚胎。[/align][align=center]Plvap在整个胚胎中形成了致密的网络。[/align][align=center]（A中、右）右臂与右手。（B左）左腿的Z轴投射图像。[/align][align=center]（*号）血管网络穿过了除了骨骼的所有组织。[/align][align=center]（B右）面部图像。（箭头）角膜处没有血管。[/align][align=center]（C）11周龄胎儿，标记胶原IV的肋骨表面。[/align][align=center]（D左）11.5周龄胎儿的右腿和右膝，标记MyoSM的动脉。[/align][align=center]（D右）11.5周龄胎儿的右脚，标记SMA的动脉。[/align][align=center] 对胃肠道的淋巴细胞表达的Podoplanin进行标记以研究淋巴管形成，表达Podoplanin的细胞覆盖了肠胃，[/align][align=center]而含Podoplanin的微管数量较少，说明人类淋巴系统成熟可能晚于血管系统。[img=,550,181]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/10.jpg[/img][/align][align=center]（E）14周龄标记Podoplanin的消化道。表达Podoplanin的细胞位于肠胃上方。 [/align][align=center]（右）表达Podoplanin的细胞尚未发育形成淋巴管。[/align][b]5) 肺的生长发育的3D分析：[/b]标记鼠的性别决定基因Sox9转录因子和Dcx，观察到Sox9在人的末端支气管芽处表达，Dcx在每个气道的近端上皮部分表达。用Plvap标记肺部的血管，发现肺间质内微血管和大血管形成了连续的网络。肺部气道的分支方式是高度保守的，包括域分支、水平分支和垂直分支，使用Sox9/Dcx标记小支气管，可以观察到3种分支方式，并发现了不对称分支现象。 [align=center][img=,550,329]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/11.jpg[/img] [/align][align=center]（A）9.5周龄标记Sox9、Dcx和Plvap的胎儿的肺部。Sox9在上皮小管的末端表达，Dcx在近端表达。Plvap在整个肺的血管中表达。[/align][align=center]（B）肺上皮小管Z轴光学切面。[/align][align=center]（C）末端的微血管网络。[/align][align=center]（D）气道分支的3D图像。肺叶（蓝绿），支气管（红）。[/align][align=center]（E）支气管的3D图像。（右）三种分支方式。[/align][align=center] 标记SMA和平滑肌肌凝蛋白（MyoSM），两者均于围绕支气管和气道上皮小管的平滑肌处表达。标记Sox9显示出末端没有平滑肌。[/align][align=center]对平滑肌进行染色同时可以显示动脉和微动脉。可以使用SMA和酪氨酸羟化酶（TH）标记心脏来观察血管和神经分布。 [/align][align=center][img=,550,289]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/12.jpg[/img] [/align][align=center]（F）9.5周龄的标记MyoSM的肌凝蛋白平滑肌的染色。（箭头）支气管及分支。[/align][align=center]（G）11.5周龄的左肺标记SMA显示出气道平滑肌的分支方式。（箭头）动脉周围肌肉和（指针）近端气道周围肌肉。[/align][align=center]（H）10周龄的肺的分支图像。末端芽部用Sox9标记。表达SMA的平滑肌分布于不表达Sox9的近端区域。[/align][align=center]（I-K）心脏的光片显微图像。 [/align][b]6) 泌尿生殖系统发育的3D分析：[/b]人类生殖道分为两种结构：由中肾分化而来的中肾管（WD）和由中肾管诱导分化而来的副中肾管（MD）。性别决定伴随着生殖道的重构。Pax2转录因子可用于标记中肾和WD。8周龄的雄性胚胎中，MD尖端与WD紧密接触但并未完全生长。肾处于腹侧位置邻接生殖嵴。9.5周龄时MD继续沿WD延伸但并未连接。10周龄时两条MD连接，从两侧WD的中间延伸至泌尿生殖窦，同时开始降解，融合的剩余MD分化为前列腺囊。14周龄时，WD的中肾肾小管退化，附睾与输精管出现。Sox9是睾丸分化的必需因子，在睾丸索中表达，对Sox9使用免疫染色可以观察到睾丸索。[align=center][img=,350,415]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/13.jpg[/img][/align][align=center]（A）8周龄标记Pax2的胚胎。[/align][align=center]（B）（箭头）MD/WD连接。[/align][align=center]（C）（D）9.5周龄的泌尿生殖系统。（箭头）MD尾端沿WD延长但仍未融合。[/align][align=center]（E）10周龄的泌尿生殖系统。MD在底端融合（指针）并开始降解（箭头）。[/align][align=center]（F）降解的继续。[/align][align=center]（G）14周龄的泌尿生殖系统。输精管进一步发育（指针）。[/align][align=center]（H）10周龄标记Pax2和Sox9的睾丸。[/align][align=center]（I）10周龄标记Pax2的睾丸。[/align][align=center]（J）14周龄的睾丸。[/align][align=center][img=,350,452]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/14.jpg[/img][/align][align=center]（A）10.5周龄标记Pax2的泌尿生殖系统。WD连续，MD已融合。（B）11.5周龄标记Pax2的生殖系统。（箭头）WD开始降解。（C）13周龄，标记Pax2的生殖系统。（箭头）子宫大小增加，WD显著降解。（右）MD顶端发育中的输卵管纤毛。（D）8周龄标记Pax2和Plvap的睾丸。（指针）微血管覆盖了睾丸和WD。而MD却没有血管形成。（E）10周龄的雄性胎儿中，MD没有微血管形成。（F）（G）10.5和13周龄标记Pax2和Plvap的卵巢。WD和MD均有致密的血管覆盖。 [/align][align=center][/align][b]总结：[/b]将免疫标记与3D成像技术结合，能够完好地保存器官的3D结构并使分辨率达到细胞水平，简单、快速、稳定、可重复，以上这些优势适合其应用于胚胎学，可用于研究遗传疾病或畸胎。此方法的限制条件主要在材料的获得，同时使用得抗体最大数量，抗体与实验方法的兼容性和大容量数据的存储。然而其应用的广泛程度依然不可限量。以后甚至可用于建立人类生长发育的3D图库。

[color=#c00000][i]同济大学附属东方医院再生医学研究所何志颖研究员表示：项目研究从2018年开始，2021年4月Pre-IND，2024年1月18日IND获批！历时6年艰辛。[b]这是东方医院首个干细胞成药临床试验项目，希望能造福于心衰患者！[/b][/i][/color]据报道1月18日，天士力公告其一款创新干细胞药物获得国家药监局批准进入临床试验，主治慢性心力衰竭。公告称，公司收到国家药监局核准签发关于[b]人脐带间充质干细胞注射液（B2278注射液）[/b]项目的《药物临床试验批准通知书》，同意开展伴冠状动脉旁路移植术指征的慢性缺血性心肌病导致的慢性心力衰竭的临床试验。[b]人脐带间充质干细胞注射液[b]（B2278注射液）[/b]由上海市东方医院（同济大学附属东方医院）研发，2022年8月天士力与东方医院签署《技术转让（合作）合同》受让相关技术及成果，并在全球范围内，优先在中国开展药品注册申报及后续临床试验开发。[/b]临床前研究证明，B2278注射液可通过旁分泌作用调控心肌组织微环境，对于缺血性心肌病中的心肌细胞组织损伤有明显抑制作用，增加动物心功能，促进血管再生，减少心肌凋亡。心力衰竭是由于心脏结构和/或功能异常导致心室充盈和/或射血能力受损的一组临床综合征，是大部分心血管疾病发展的最终阶段，随着年龄增长，心衰患病率和发病率均明显增加。目前对于心力衰竭的治疗主要包括药物治疗、血运重建、细胞和基因治疗，其中冠状动脉旁路移植术（CABG）是常用的血运重建治疗方式，《2022年中国心血管外科手术和体外循环数据白皮书》显示，2022年CABG占心外科手术总量21.1%。上述治疗手段可以在一定程度上延缓心力衰竭的进展，但不能使死亡心肌再生。伴随CABG手术的心肌局部注射干细胞有望通过刺激心脏细胞的增殖和分化、抑制心肌细胞损伤及免疫调节等作用，修复心肌细胞使心肌收缩增强从而对心力衰竭发挥治疗作用。目前国际上获批的干细胞品种已达十余种，但是尚无治疗心衰的干细胞产品上市。[来源：仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

[font=宋体]动脉粥样硬化（[/font]atherosclerosis[font=宋体]，[/font]AS[font=宋体]）引发的动脉血管狭窄以及斑块的破裂可造成心肌梗死、冠心病、脑卒中等严重心脑血管疾病的发生。据全球数据显示，全球每年约有[/font]2 000[font=宋体]万人死于[/font]AS[font=宋体]，且患病个体日趋年轻化，对人类健康和生命构成极大威胁[/font][sup][1][/sup][font=宋体]。[/font][font=宋体]随着现代生活方式的改变，高龄、肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝病（[/font]nonalcoholic fatty liver disease[font=宋体]，[/font]NAFLD[font=宋体]）、高血压、高血脂等成为[/font]AS[font=宋体]的传统危险因素。[/font]AS[font=宋体]是一种累及大、中动脉的慢性血管炎性疾病，其特征为脂质蓄积、炎症、氧化应激、血管内皮细胞（[/font]endothelial cells[font=宋体]，[/font]ECs[font=宋体]）活化、巨噬细胞活化和泡沫细胞形成、血管平滑肌细胞（[/font]vascular smooth muscle cells[font=宋体]，[/font]VSMCs[font=宋体]）增殖[/font][sup][2][/sup][font=宋体]。[/font]AS[font=宋体]的发病机制首先是各种危险因素下引起的内皮功能障碍，单核细胞分化为巨噬细胞，巨噬细胞通过吞噬氧化或其他化学修饰的低密度脂蛋白（[/font]low density lipoprotein[font=宋体]，[/font]LDL[font=宋体]）形成泡沫细胞，脂质沉积进而[/font]VSMCs[font=宋体]增殖和迁移，最终导致内膜不断增生和动脉粥样斑块的形成[/font][sup][3][/sup][font=宋体]。目前，针对[/font]AS[font=宋体]，临床药物治疗主要集中在调脂和抗炎[/font]2[font=宋体]个方面，调脂药物主要靶向降低低密度脂蛋白胆固醇（[/font]low-density lipoproteincholesterol[font=宋体]，[/font]LDL-C[font=宋体]）或三酰甘油（[/font]transglutaminase[font=宋体]，[/font]TG[font=宋体]），抗炎药物治疗靶点主要为炎症因子白细胞介素[/font]-6[font=宋体]（[/font]interleukin-6[font=宋体]，[/font]IL-6[font=宋体]）和[/font]IL-1β[sup][4][/sup][font=宋体]。[/font] [font=宋体]中医理论认为[/font]AS[font=宋体]其可归属于“脉痹”“胸痹”等范畴。现代人过食肥甘厚味，饮食不节，或长期偏嗜饮酒导致脾胃虚损，或者素体脾虚，脾主运化功能减弱，升清降浊功能失调，津液运行不利，湿聚为痰。痰浊黏滞内停于脉道之内，滞涩气血运行，凝聚成核块，形成瘀血，致痰瘀互结，阻塞脉道，影响脉行血气化功能，损伤脉络结构。脾运失健、痰浊阻滞是[/font]AS[font=宋体]发病机制的关键。健脾化浊法为[/font]AS[font=宋体]的治本之法。泽泻利水渗湿，泄热化浊，白术健脾益气，助脾运化水湿，泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对为健脾祛湿之经典药对。薛伯寿教授治疗[/font]AS[font=宋体]使用频率较高的药对中包括泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对[/font][sup][5][/sup][font=宋体]。董波教授善用泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对治疗冠心病伴高血压[/font][sup][6][/sup][font=宋体]。黄永生教授治疗[/font]AS[font=宋体]使用频次超过[/font]30[font=宋体]次的有[/font]35[font=宋体]味中药中，泽泻和白术位列其中[/font][sup][7][/sup][font=宋体]。泽泻为泽泻科植物泽泻[/font][i]Alisma orientale [/i](Samuel) Juz.[font=宋体]的干燥块茎，白术是菊科植物白术[/font][i]Atractylodes macrocephala [i]Koidz[/i].[/i][font=宋体]的干燥根茎，被称为“补气健脾第一要药”。根据国家卫健委颁布的可用于保健食品的物品名单，泽泻和白术位列其中，均具有良好的食用和药用价值[/font][sup][8][/sup][font=宋体]。众多研究发现，泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对及其有效成分可通过多靶点、多途径防治[/font]AS[font=宋体]，本文通过梳理泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对现有文献，分析并总结泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对及活性成分在防治[/font]AS[font=宋体]中的作用机制，以期为泽泻[/font]-[font=宋体]白术药对后续的深入实验研究和临床应用及保健食品开发提供参考。[/font] [b]1 [font=黑体]泽泻[/font]-[font=黑体]白术药对物质基础[/font][/b] [font=宋体]现代研究表明泽泻中主要化学成分为三萜、倍半萜，此外还包括二萜类、挥发油、含氮化合物、苯丙素及其他类[/font][sup][9][/sup][font=宋体]。药理研究结果表明，泽泻醇[/font]A[font=宋体]（[/font]alisol A[font=宋体]）、[/font]24-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]A[font=宋体]（[/font]alisol A 24-ace[font=宋体]，[/font]AA-24-a[font=宋体]）、泽泻醇[/font]B[font=宋体]（[/font]alisol B[font=宋体]）、[/font]23-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]B[font=宋体]（[/font]alisol B 23-acetate[font=宋体]，[/font]AB23A[font=宋体]）等三萜类成分为泽泻中发挥调血脂、降血压、利尿、抗炎作用的主要有效成分[/font][sup][10][/sup][font=宋体]。[/font][font=宋体]白术化学成分中倍半萜类、聚乙炔类、多糖类为主要成分，此外还有三萜、聚乙炔、香豆素、苯丙素、黄酮、黄酮苷、甾体等类化合物。白术内酯[/font]I[font=宋体]（[/font]atractylenolide-Ⅰ[font=宋体]，[/font]AT-Ⅰ[font=宋体]）、白术内酯[/font]Ⅱ[font=宋体]（[/font]atractylenolide-Ⅱ[font=宋体]，[/font]AT-Ⅱ[font=宋体]）、白术内酯[/font]Ⅲ[font=宋体]（[/font]atractylenolide-Ⅲ[font=宋体]，[/font]AT-Ⅲ[font=宋体]）是发挥抗炎、抗菌、健脾功效的倍半萜白术内酯类成分，是白术的主要有效成分及白术质量控制的关键指标[/font][sup][11][/sup][font=宋体]。多糖指白术多糖，在白术总成分中含量较高，主要有抗肿瘤活性、降糖、调节脂质代谢、抗炎、神经保护作用、肝脏保护作用以及生长促进等作用[/font][sup][12][/sup][font=宋体]。吴嘉朔[/font][sup][13][/sup][font=宋体]通过[/font]UHPLC-QE-Orbitrap-MS[font=宋体]方法研究发现泽泻醇[/font]A[font=宋体]、[/font]24-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]A[font=宋体]、泽泻醇[/font]B[font=宋体]、[/font]23-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]B[font=宋体]、[/font]AT-I[font=宋体]、[/font]AT-Ⅱ[font=宋体]、[/font]AT-Ⅲ[font=宋体]均为泽泻汤入血成分。[/font] [b]2 [font=黑体]泽泻[/font]-[font=黑体]白术药对配伍后对其有效成分含量与功效的影响[/font][/b] [font=宋体]中药发挥药效的物质基础为其活性成分，药对配伍后成分发生变化是研究中药配伍机制的关键。朱玉岚等[/font][sup][14][/sup][font=宋体]通过高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法研究发现泽泻白术共煎时[/font]23-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]B[font=宋体]、[/font]24-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]A[font=宋体]的提取率都较泽泻单煎时的提取率高。唐文强等[/font][sup][15][/sup][font=宋体]通过建立泽泻汤的[/font]UPLC[font=宋体]指纹图谱，发现[/font]15[font=宋体]批泽泻汤中[/font]AT-Ⅰ[font=宋体]、[/font]AT-Ⅱ[font=宋体]、[/font]AT-Ⅲ[font=宋体]、泽泻醇[/font]A[font=宋体]、泽泻醇[/font]B[font=宋体]和[/font]23-[font=宋体]乙酰泽泻醇[/font]B[font=宋体]的含量平均值分别为[/font]0.031 2[font=宋体]、[/font]0.0326[font=宋体]、[/font]0.017 2[font=宋体]、[/font]0.121 3[font=宋体]、[/font]0.581 0[font=宋体]、[/font]0.577 8 mg/mL[font=宋体]。[/font] [font=宋体]药对配伍后的药效学评价是判断药物配伍合理性的重要考察标准。鞠爱霞等[/font][sup][16][/sup][font=宋体]通过建立高脂血症模型，发现泽泻汤全方及其拆方逆转了高脂血症对[/font]CYP3A4 mRNA[font=宋体]表达水平的抑制作用，对酶活性的影响具有一致性，且单味泽泻组与全方组治疗效果优于白术组。彭敏[/font][sup][17][/sup][font=宋体]通过建立高脂血症模型，发现与单味泽泻相比，泽泻白术复方在血清和肝脏的总胆固醇（[/font]total cholesterol[font=宋体]，[/font]TC[font=宋体]）和[/font]TG[font=宋体]浓度，以及脏器指数方面，都具有护肝方面的优势。泽泻组和复方组均激活了小鼠肝中对胆固醇代谢有关的基因的表达，而白术组对相关基因表达影响不大。以上研究表明泽泻白术配伍合理，相较于单方使用，泽泻和白术联合使用在调血脂方面更具优势，且泽泻较白术具有较强的调血脂作用。[/font]

中医认为，气与血，一阴一阳，互相维系，气为血之帅，血为气之守。“一身气血，不能相离，气中有血，血中有气，气血相依，循环不已”（《不居集》）。若血气不和，则百病丛生。 活血药。是指以通畅血脉，促进血行，调整脏腑功能，以及治疗瘀血证候为主要作用的一类药物；此类药物善于走散，具有行血、散瘀、通经、利痹、消肿、定痛等作用。 理气药，是指以疏畅气机，解郁降气调整赃腑功能，以及治疗气滞、气逆证候为主要作用的一类药物；此类药物大多气香性温，善于行散或泄降，但易于耗气伤阴，故气虚及阴亏者不宜食用。 ①三七——三七为五加科植物三七的根，内含大量三七皂甙，约12种以上皂甙的混合物，有些与人参中的皂甙类似，试验证明：三七粉或浸液能缩短动物的血凝时间，对内脏如肝、脾等出血有良好的止血效果；各种出血性病症的咯血、血尿、眼出血，使用三七治疗均能获得明显疗效，此外，三七还能扩张冠状动脉，增加冠脉流量，降低血压，减少肌耗氧量，提高动物缺氧的耐受能力，因而具有抗心肌缺血的作用。 中医认为，其性温，味甘、微苦，功能散瘀止血，适用于跌仆瘀血，外伤出血，痈肿疼痛等；三七熟品尚有补血和血之功，用于失血和贫血。 用量：常作为粉末用温开水送服或随汤药冲服；每次0．5--3克(止血)或3--6克(治外伤、筋骨折伤等)，1日2次。②川芎——川芎为伞形科植物川芎的根茎，含挥发油、生物碱、酚性物质、内酯类、有机酸等；有抗血小板凝集的作用，能降低血小板表面活性，抗血拴形成，并对已形成的凝聚块有解聚作用；有扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量和降低心肌耗氧量的作用；还有改善微循环的作用；有镇痛、镇静和降压作用，有抗维生素E缺无的作用，对白血病细胞有抑制作用。 中医认为，其性温、味辛，功能活血行气祛风止痛，适用于外感风邪引起的头痛、风湿身痛、关节痛，瘀血所致的各种病症，如高血压。③丹参——丹参为唇形科植物丹参的根，含菲醌类成分：丹参酮，异丹参酮，隐丹参酮等；能改善微循环，提高机体耐缺氧能力；能扩张冠状动脉，曾加冠状动脉血流量，并能减缓心率；能促进组织的修复与再生；有抗凝血作用，还有一定的抑菌作用，一切急慢性病，只要有瘀血或血流不畅征象者都可运用。 中医认为，其性微寒，味苦，功能活瘀血，生新血，凉血，安神，适用于心绞痛、月经不调、闭经、血崩带下、症癜、结聚、瘀血腹痛、骨节疼痛、惊悸不眠、恶疮肿痛等症。 用量：一般9--30克，但月经过多及咳血、尿血者，慎用。 ④红花——红花为菊科植物红花的花，含二氢黄酮类成分：红花甙，红花醌甙以及新红花甙，另外，还含红花油，木聚糖类等。红花制剂有增加冠状动脉及股动脉血流量的作用；有降低血压，抗凝血及抑制血栓形成的作用；有使心脏迅速恢复正常跳动且不易发生纤颤的伏点，并有显著的抗缺氧作用；对子宫平滑肌有兴奋作用，使子宫收缩的节律性明显增加。 中医认为，其性温，味辛、功能活血通经、祛瘀止痛，适用于闭经、痛经，恶露不行、腹部肿块、跌扑损伤等症。 用量：一般2—9克；但无瘀血者及孕妇忌用。⑤益母草 益母草为唇形科植物益母草的全草，含益母草碱植物甾醇以及多量氯化钾等；益母草有明显的兴奋肠管及子宫平滑肌的作用；有降低血压和增加冠状动脉血流量，改善微循环，减慢心率及抗血小板凝集的作用。临床上证明，益母草煎剂用于治疗月经不调，产后子宫出血，子宫复归不全，月经过多等均有显著疗效。 中医认为，其性凉、味辛，苦，功能调经活血，祛瘀生新，利尿消肿，适用于月经不调、痛经、闭经、恶露不尽、急性肾炎水肿。 用量一般为6克—9克。 ⑥香附——香附为莎草科多年生草本植物莎草的根茎，内含挥发油，酚性物质，葡萄糖，果糖，淀粉等，能抑制子宫平滑肌收缩，并能缓和其肌张度；水煎剂有降低肠管紧张性和拮抗乙酰胆碱的作用；对某些真菌有抑制作用，有镇痛作用。中医认为，其性平、味辛、甘，功能疏肝理气，调经止痛，适用于肝胃不和，气郁不舒，胸胁脘腹胀痛，痛经，月经不调，肝郁积食等症。 用量：6—12克。

生物力学的发展简史生物力学一词虽然在20世纪60年代才出现，但它所涉及的一些内容，却是古老的课题。例如，1582年前后伽利略得出摆长与周期的定量关系，并利用摆来测定人的脉搏率，用与脉搏合拍的摆长来表达脉搏率等。1616年，英国生理学家哈维根据流体力学中的连续性原理，从理论上论证了血液循环的存在；到1661年，马尔皮基在解剖青蛙时，在蛙肺中看到了微循环的存在，证实了哈维的论断；博雷利在《论动物的运动》一书中讨论了鸟飞、鱼游和心脏以及肠的运动；欧拉在1775年写了一篇关于波在动脉中传播的论文；兰姆在1898年预言动脉中存在高频波，现已得到证实；材料力学中著名的扬氏模量就是英国物理学家托马斯扬为建立声带发音的弹性力学理论而提出的。1733年，英国生理学家黑尔斯测量了马的动脉血压，并寻求血压与失血的关系，解释了心脏泵出的间歇流如何转化成血管中的连续流，并他在血液流动中引进了外周阻力概念，并正确指出：产生这种阻力的主要部位在细血管处。其后泊肃叶确立了血液流动过程中压降、流量和阻力的关系；夫兰克解释了心脏的力学问题；斯塔林提出了透过膜的传质定律，并解释了人体中水的平衡问题。克罗格由于在微循环力学方面的贡献获得1920年诺贝尔奖金。希尔因肌肉力学的工作获得1922年诺贝尔奖金。他们的工作为60年代开始的生物力学的系统研究打下基础。到了20世纪60年代，一批工程科学家同生理学家合作，对生物学、生理学和医学的有关问题，用工程的观点和方法，进行了较为深入的研究，使生物力学逐渐成为了一门独立的学科。其中有些课题的研究也逐渐发展成为生物力学的分支学科，如以研究生物材料的力学性能为主要内容的生物流变学等。中国的生物力学研究，有相当一部分与中国传统医学结合，因而在骨骼力学、脉搏波、无损检测、推拿、气功、生物软组织等项目的研究中已形成自己的特色。生物力学的研究内容生物的各个系统，特别是循环系统和呼吸系统的动力学问题，是人们长期研究的对象。循环系统动力学主要研究血液在心脏、动脉、微血管、静脉中流动，以及心脏、心瓣的力学问题。呼吸系统动力学主要研究在呼吸过程中，气道内气体的流动和肺循环中血液的流动，以及气血间气体的交换。所有这些工作，包括生物材料的流变性质和动力学的研究，不仅有助于对人体生理、病理过程的了解，而且还能为人工脏器的设计和制造提供科学依据。生物力学还研究植物体液的输运。环境对生理的影响也是生物力学的一个研究内容。众所周知，氧对生物体的发育有很大影响，在缺氧环境下生物体发育较慢，在富氧环境下发育较快。即使在短期内，环境的影响也是明显的。实验表明：在含10%的氧气、压力为一个大气压的环境中的幼鼠，即使只生活24小时，在直径为15～30微米的肺小动脉壁下，也会出现大量的纤维细胞。若延续4～7天，纤维细胞则会过渡为典型的平滑肌细胞，这无疑会影响肺循环中血液的流动。又如处于高加速度状态中的人，其血液的惯性会有明显的改变，悬垂器官会偏离原位，从而改变体内血液的流动状态。

【序号】：2【作者】：黄可欣1于军2石搏【题名】：大鼠骨髓间充质干细胞培养方法改良与鉴定【期刊】：中国老年学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2019,39(14)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iLik5jEcCI09uHa3oBxtWoNXIvaiQB80L3Jul38AtFf3UeTB_BlOzKJibUJyew7WW&uniplatform=NZKPT

【序号】：4【作者】：宋丽丽【题名】：细胞外基质化组织工程神经移植物修复大鼠臂丛神经缺损的研究【期刊】：吉林大学【年、卷、期、起止页码】：2022【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=hqt_j-uEELGBdZ64e_NeKorNyHTEXc4WYj-JgSxFHTEpCLC63y8VE8Mu3IzigvqsHSk6VdDKHqm2DTJ_TXRYEqQmRqDJKz4V5h2yvTxnQgxouHPXRH9w56VOku-572pIgg-Gv-EJdinh9kmJyVIkbA==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

[b][size=15px][color=#595959]血管[/color][/size][size=15px][color=#595959]钙化[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是伴随动脉粥样硬化性[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]心[/color][/size][size=15px][color=#595959]血管疾病[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]和[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]慢性肾脏[/color][/size][size=15px][color=#595959]疾病[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]的一种破坏性血管并发症，它增加了心血管不良事件的发生率，降低了血管干预的疗效。然而，缺乏有效的治疗药物和治疗方法来延缓或预防血管钙化。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]杓唇石斛素(Moscatilin，又称石斛酚)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是从霍山石斛茎中分离出来的天然产物，是石斛的活性成分，具有[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]增强[/color][/size][size=15px][color=#595959]免疫[/color][/size][size=15px][color=#595959]力、辅助消化、抗[/color][/size][size=15px][color=#595959]白内障[/color][/size][size=15px][color=#595959]、调节血糖水平、抗肿瘤等[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]多种生物活性。杓唇石斛素被认为是普遍存在的NF-κ b依赖性促炎途径的抑制剂。许多研究已经证明了钙化和炎症之间的联系。该团队前期的研究发现转录因子21 (TCF21)诱导的炎症可以加速血管钙化的过程。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]研究杓唇石斛素在体内、体外及体外抑制血管钙化的作用及机制。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959]25周龄雄性C57BL/6J小鼠经尼古丁和[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]维生素D[/color][/size][size=15px][color=#595959]3(VD3)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]诱导血管钙化。体外建立磷酸盐条件下人[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]主动脉[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]平滑肌细胞(HASMCs)成骨细胞模型。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959]通过使用内部药物筛选方案，我们确定杓唇石斛素是一种新的天然化学实体，可以减少HASMC钙积累。在培养的HASMCs中证实了杓唇石斛素对血管钙化的保护作用。无偏转录谱分析和细胞热移分析表明，杓唇石斛素通过结合[b]白细胞介素13受体亚基A2 (IL13RA2)[/b]并增加其表达来抑制血管钙化。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]此外，在HASMC成骨过程中，[b]IL13RA2减少，从而通过STAT3促进炎症因子的分泌[/b]。进一步验证了杓唇石斛素抑制血管钙化通过经典的[b]WNT/β-catenin通路[/b]参与，其中WNT3在这一过程中发挥了关键作用。杓唇石斛素[b]减轻WNT3/β -catenin与IL13RA2/STAT3之间的串扰[/b]，从而降低HASMCs的成骨分化。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]该研究强调[b]IL13RA2可能成为血管钙化及其严重心血管不良后果的新的潜在治疗靶点[/b]，而杓唇石斛素作为一种新的天然候选药物，通过调节IL13RA2/STAT3和WNT3/β -catenin信号通路，[b]在血管钙化的治疗中具有治疗前景[/b]。[/color][/size]

[b][size=15px][color=#595959]动脉粥样硬化(AS)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是一种以[b]内皮[/b]损伤引起的动脉壁炎症和脂质沉积为特征的慢性[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]血管[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]疾病。[b]铁死亡[/b]是一种新的细胞死亡类型，内皮性铁死亡是AS进展的重要因素。[b]瓜蒌薤白(GLXB)[/b]是一种著名的[b]中药药对[/b]，对治疗AS有重要作用。然而，GLXB是否通过[b]抑制内皮细胞铁死亡[/b]而发挥抗动脉粥样硬化作用的潜在机制尚未确定。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]探讨GLXB对AS内皮细胞铁死亡的影响及其作用机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]在ApoE?/?小鼠中，用[b]高脂饮食(HFD)喂养12周[/b]的小鼠进行超声检查，以评估AS的建立是否成功。然后，用GLXB和辛伐他汀(阳性对照)治疗ApoE?/?小鼠4周。通过[b]主动脉[/b]显像和苏木精-伊红(HE)染色评估GLXB对AS病理的影响。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]为了证实铁死亡的存在，通过透射电子显微镜(TEM)观察[b]线粒体损伤[/b]，并分析游离铁和脂质过氧化水平。体外实验：ox-LDL诱导的[b]人血管内皮细胞(HUVECs)损伤[/b]，用GLXB、[b]铁死亡诱导剂Erastin[/b]和[b]Nrf2抑制剂ML385[/b]处理。采用CCK-8法测定各组细胞活力。流式细胞术检测脂质过氧化和细胞内亚铁水平。[b]免疫[/b]荧光染色显微镜证实Nrf2核易位。Western blot检测蛋白表达。 [/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]GLXB改善了动脉粥样硬化性病变和血管斑块[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]。GLXB通过降低炎症因子和粘附因子的水平以及减少内皮细胞的脱落来抑制主动脉内皮损伤。GLXB通过减轻ECs线粒体损伤，增加主动脉组织谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平，下调过氧化脂质(LPO)和丙二醛(MDA)水平，抑制ApoE?/?小鼠的铁死亡。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]有趣的是，Erastin被用于在体外证明GLXB抑制铁死亡可以减弱ox-LDL诱导的HUVECs损伤作用，而这种作用被Erastin逆转。机制上，[b]GLXB通过增加下游抗铁死亡靶蛋白，促进Nrf2与SLC7A11的相互作用，激活Nrf2信号通路抑制铁死亡[/b]。更令人信服的是，ML385 (Nrf2抑制剂)逆转了GLXB的抗铁死亡作用。[/color][/size][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][/color][/size][color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]GLXB通过激活Nrf2信号通路抑制铁死亡介导的内皮细胞损伤，进一步减轻AS病理损伤[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959] [/color][/size]

【序号】：1【作者】： 魏琴1张雪2马磊3【题名】：血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化【期刊】：中国组织工程研究. 【年、卷、期、起止页码】：2021,25(19)【全文链接】：[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDAUTO&filename=XDKF202119004&v=j8jbbSidXsBwt6CegOsPRqTVMGOu%25mmd2FMC7ro6GCgRrno2qtSuBEwAuvA6jkvL9cScE[/url]【序号】：2【作者】： 朱晋坤1毛华1尹扬光2【题名】：血小板源性生长因子和血小板源性内皮细胞生长因子在内皮细胞和血管平滑肌细胞中的作用研究【期刊】：中国全科医学. 【年、卷、期、起止页码】：2015,18(09)【全文链接】：[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2015&filename=QKYX201509015&v=MprlmDKX9%25mmd2FM8kAtqA24%25mmd2Blvb9ZojeMhvT6jMKdDuFEq1jPsbqHre0g7Mjt2emTujq[/url]

乙醚提取液。小剂量对子宫亦可出现抑制，或先抑制后兴奋等作用，尤其是乙醇提取液应用于未孕家兔子宫时，多见抑制现象。兴奋子宫的作用，可被乙磺酸麦角毒碱（肾上腺素能阻滞剂）所部分阻断，而阿托品则不能；故认为对子宫的作用，一部分为对子宫肌细胞的直接作用，一部分则与肾上腺素能受体有关。②对循环系统的影响煎剂可使麻醉狗、猫血压降低，并能维持较长时间；对呼吸还有兴奋作用。降压时肾容积缩小，显示肾血管收缩；对蟾蜍血管亦呈收缩作用。在离体蟾蜍心脏上有较显著的抑制作用。有人对它作为手术过程中使心跳暂停的药物进行了探讨，发现水浸剂在离体蟾蜍、大鼠心脏、急性猫在位心脏标本上，均能导致心脏的迅速完全停跳于舒张期，历时达十数分钟以上，且极易恢复；如与乙酰胆碱同用，则停跳更迅速而完全。复跳时无纤颤发生，复跳后心脏活动均形加强。但经化学分析，抑制心脏的成分与钾盐有关，此点颇堪注意，盖番红花中既含多量钾盐，而钾盐不仅可抑制心脏，引起降压，对平滑肌如小肠、子宫、支气管、血管等的紧张度及收缩亦均具兴奋作用，因此今后番红花之药理研究应首先除去钾盐。③其他作用番红花能廷长小鼠的动情周期，以含番红花0.23～2％的食物饲喂正常小鼠3周，阴道涂片检查全角化的持续时间从正常的1～2天延长至3～4天；停药后作用迅速消失。煎剂注射于青蛙淋巴囊内，皮肤腺体有大量分泌。对小鼠急牲毒性试验中，测得灌胃时之半数致死量为20.7克/公斤。

【序号】：3【作者】：周年1,2,3刘波1,4徐彭【题名】：大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和分化能力鉴定【期刊】：江西中医药. 【年、卷、期、起止页码】：2018,49(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7i0-kJR0HYBJ80QN9L51zrP3ylMAV4CgQ9wpp7ZMmE5O8NBqbZq4aly75LaltU8u1l&uniplatform=NZKPT

【序号】：4【作者】：李倩晓1那荣妹2刘百亭【题名】：SD大鼠骨髓间充质干细胞原代培养条件的选择【期刊】：中国老年学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2017,37(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0RqLtq4qv82HhSJrd4mMlLD1sEVOCJ2Utcht-M6YZ-Ko0&uniplatform=NZKPT

【序号】：1【作者】：柏秀娟李一凡时霄冰【题名】：SD大鼠骨髓间充质干细胞的原代培养及鉴定【期刊】：中国煤炭工业医学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2022,25(02)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iJTKGjg9uTdeTsOI_ra5_XQ1nc-PzVE0xyf-gP3YJd2uBAacMkWEJ5FZ3Wo5eFSGS&uniplatform=NZKPT

3月25日，由南开大学药学院团队自主研发的化药1类新药CP0119片取得国家药品监督管理局签发的《药物临床试验批准通知书》，获准用于治疗结肠慢传输的临床试验。该项目是南开大学作为申报单位的第二项获得临床批件的新药项目，团队曾在2017年获批了南开大学首个新药临床批件。流行病学调查结果显示，我国结肠慢传输发病率达7.3%～20.39%，且近年来发病率呈逐年上升趋势，严重影响患者生活质量，损害患者身心健康，而且可能引发多种严重并发症。现有治疗方法主要分为基础治疗和药物治疗，基础治疗包括调整生活方式和认知治疗，经过4-8周的基础治疗无效可选用药物治疗。但目前现有的治疗手段与治疗效果存在局限性，可选用的治疗方法常常不能令人满意，结肠慢传输的治疗仍然具有挑战性。因此，研发一种高效低毒的治疗药物具有重要意义。[align=center][img=,600,598]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/f56ec165-88cb-40a1-854c-0c4d27555528.jpg[/img][/align][align=center]CP0119靶向Transgelin治疗结肠慢传输性便秘的作用机制[/align]基于此，南开大学药学院院长领衔成立了CP0119创新药物研发团队，项目负责人为周红刚、孙涛和杨光教授。据项目负责人介绍，CP0119是一种新型小分子胶转蛋白（Transgelin）激动剂，Transgelin是钙调蛋白家族中的一种肌动蛋白结合蛋白，相对分子量为22 kDa，主要分布于平滑肌细胞中。同时，CP0119能够激动肠道平滑肌细胞上的Transgelin，促进G激动蛋白（G-actin）向F激动蛋白（F-actin）的聚集，增加肠平滑肌细胞中应力纤维束的形成，进而增强细胞收缩能力，促进肠道蠕动，最终达到改善结肠慢传输的效果。目前没有以Transgelin为靶点治疗便秘的同类药物上市，CP0119的成功开发属于全新靶点的化药1类创新药物。项目骨干艾笑羽副教授和谷小婷老师主要负责推动项目的临床前研究工作。该项目历时4年完成了原料药的中试放大、制剂开发、系统化药理和药代研究以及标准化临床前GLP安全性评价，充分证明了CP0119质量可控、安全有效。因此，CP0119的开发有望成为结肠慢传输患者的新治疗选择，具有较高的经济效益和社会效益。该项目成果还得到了天津医科大学总医院消化科王邦茂主任等临床专家的高度评价。CP0119项目的研发由南开大学药学院和药物化学生物学全国重点实验室（全重）的创新药物研发团队承担，也是与华润医药中国医药研究开发中心和天津国际生物医药联合研究院合作的重要成果，是践行产学研和全重共建单位之间合作的实例。在国家大力发展新质生产力和鼓励高校科研成果转化的大背景下，CP0119片临床试验的成功获批，不仅进一步助力南开大学创新药物研发能力，同时也对培养我校创新药学人才和助力健康中国建设具有重要意义。[来源：南开大学][align=right][/align]

【序号】：5【作者】：王博荣1鲁曦1张敏龙【题名】：一种改良大鼠骨髓间充质干细胞培养方法【期刊】：中华肺部疾病杂志(电子版). 【年、卷、期、起止页码】：2017,10(01)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0RrntXS8bbQWa2nxXxa6LsSXxNfFO7FPG8wvrj5FsSgFx&uniplatform=NZKPT

[size=14px] [/size] [size=14px]Highlights[/size] [size=14px]1）PU可减弱高脂饮食（HFD）喂养的ApoE-/-小鼠的AS和血浆TMAO水平；[/size] [size=14px]2）PU处理的供体小鼠的粪菌移植减轻了HFD喂养ApoE-/-受体小鼠的AS；[/size] [size=14px]3）PU特异性降低了普雷沃氏菌的膜功能来抑制菌的丰度，从而导致TMA和TMAO的产生减少，普雷沃氏菌定植破坏了PU对AS的有益影响；[/size] [size=14px]4）AS患者的斑块评分与普雷沃氏菌的丰度和血浆TMAO水平呈正相关，口服PU 1周有效降低了颈动脉斑块患者的普雷沃氏菌水平并降低了TMAO浓度。[/size] [size=14px]研究结果[/size] [size=14px]1、PU减轻HFD喂养的ApoE?/?小鼠的AS并降低血浆TMAO水平[/size] [size=14px]作者首先评估了PU对 ApoE?/? 小鼠中HFD相关AS的保护作用，发现PU成功地减弱了高脂饮食喂养引起的的小鼠体重增加和脂肪积累，减少主动脉斑块，降低炎症标志物水平，表明PU对改善AS具有积极作用。此外，口服的PU主要积累在粪便样本中，表明PU可能通过调节肠道微生物群在肠道局部发挥其抗动脉粥样硬化作用。由于与肠道微生物群相关的TMAO已被证明可以加速动脉粥样硬化病变的发展，作者检测发现PU处理后下降ApoE?/?小鼠血浆TMA和TMAO的水平。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、PU处理的供体小鼠的粪便微生物群移植可减轻HFD喂养的ApoE?/?受体小鼠的 AS[/size] [size=14px]为了阐明 PU对AS的改善作用是否是由肠道微生物群介导的，作者分离了来自PU处理的供体小鼠（HFD+PU FMT）或载体处理的小鼠（HFD FMT）的粪便微生物群移植物，并将其移植到HFD小鼠，发现接受HFD+PU FMT的小鼠体重显著减轻，AS 斑块病变减少，炎症因子水平降低，血浆 TMAO 浓度显著降低，这些结果表明PU对AS的有益作用是由肠道微生物群调节的。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、PU降低普氏菌的丰度及其TMA的产量[/size] [size=14px]为了进一步研究PU影响的特定微生物群，作者分析了接受或未接受 PU 治疗的 HFD 喂养的ApoE?/?小鼠的肠道微生物组。发现以其产生TMA的能力而闻名的普雷沃氏菌成为区分PU和对照处理的最重要的分类标记之一，qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]发现PU降低了粪便样本中的P. copri含量。此外，Spearman相关分析揭示了普氏菌的相对表达与血浆TMAO水平的正相关性。体外实验也证实普氏菌促进TMA产生，表明PU有效地减少了普氏菌产生的 TMA。机制研究显示PU可能通过破坏普氏菌的膜功能来抑制普氏菌，从而导致TMA产量减少，进而减少TMAO产量，最终有助于改善AS。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、普氏菌促进 HFD喂养的ApoE?/?小鼠的AS[/size] [size=14px]为了进一步研究普氏菌在加重AS中的因果作用，作者通过口服强饲法将普氏菌单定植到 HFD喂养的ApoE?/?小鼠中，使用qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 证实HFD组中普氏菌的成功定植，并发现接受普氏菌定植的小鼠表现出更严重的AS表型，表现为体重增加，主动脉斑块病变面积增强，炎症细胞因子水平升高，血浆TMAO水平增加，这些结果共同表明普氏菌在HFD诱导的AS发病机制中发挥着重要作用。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、长时间灌胃普氏菌会破坏 PU对HFD喂养的ApoE?/?小鼠AS的有益作用[/size] [size=14px]为了评估普氏菌作为PU干预治疗AS的靶点的重要性，作者研究了普氏菌对抗PU缓解AS的能力，发现在普氏菌定植后，PU对AS的有益作用发生了逆转，表现为体重增加，主动脉斑块病变扩大，炎症细胞因子升高。这些发现表明普氏菌的存在可能会削弱PU减轻AS症状的有效性。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、PU抑制普氏菌并降低颈动脉斑块患者血浆TMAO水平[/size] [size=14px]为了探讨临床环境中普氏菌、TMAO水平与颈动脉粥样硬化斑块形成之间的潜在相关性，作者对高脂血症患者的颈动脉评分、普氏菌表达和TMAO水平进行了相关性分析，发现有颈动脉粥样硬化斑块的患者粪便样本中普氏菌的表达较高，且血浆TMAO水平显著升高。重要的是，颈动脉斑块评分与普氏菌表达和TMAO水平呈正相关，为普氏菌及其TMA产生参与AS的发展提供了临床证据。进一步招募24名被诊断患有颈动脉斑块的个体每天口服PU持续1周，发现普氏菌丰度减少，血浆 TMAO 水平降低。总之，这些发现证实了PU对AS的有益作用和对普氏菌的抑制作用之间的潜在联系。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px]本研究确定普氏菌是一种重要的细菌物种，它通过促进小鼠和人类体内 TMAO 的积累而加重 AS。 PU 的干预已显示出通过抑制普氏菌来降低 TMAO 水平的良好效果，为临床环境中微生物靶向治疗 AS 提供了宝贵的机会。[/size]

骨髓间充质干细胞总结 2003年8月，为给大家提供一个网上交流干细胞研究经验的平台，我们干细胞版设立了骨髓间充质干细胞培养讨论区，经过近三个月的讨论学习，我们既学习丰富了自己的知识体系，也对间充质干细胞尤其是分离培养方面有了更为详实的认识，为了大家阅读的方便，我们决定把本版中的相关内容，同时参考部分书目和文献，做一总结。一、骨髓间充质干细胞的分离 目前常用的分离MSC的方法有全骨髓法和密度梯度离心法，全骨髓法即根据干细胞贴壁特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中细胞成分比重的不同，提取单核细胞进行贴壁培养。随着对MSC表面抗原认识的深入，有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化，但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题，加之耗费较大和技术的难度，在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。1. 直接培养法（全骨髓培养法） 1987年，Friedenstein等发现在塑料培养皿中培养的贴壁的骨髓单个核细胞在一定条件下可分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞，而且这些细胞扩增20－30代后仍能保持其多向分化潜能，这类细胞即为骨髓间充质干细胞（BMSC），其工作对今后MSC的研究具有重要意义，不仅证实了骨髓MSC的存在，而且创建了一种体外分离和培养MSC的简便可行的方法，得到了广泛的应用。culture-spirit采用直接贴壁法，24-36小时首次换液，换液时用PBS洗两次，7-10天传第一代，以后2-3天传代。培养基采用Hyclone的DMEM/F-12（1：1），血清是天津TBD的FBS（顶级），得到了较好的培养结果。布兰卡根据自己培养大鼠MSC的经验，详细介绍了实验步骤：（1）接种后60-80分钟,换液去除悬浮细胞（2）原代培养24 h,48 h各换液一次（3）观察细胞情况，在原代培养7天左右时，如观察到成片的典型形态的细胞，在瓶底用Marker笔标记，0.25%胰酶消化，镜下观察控制，约5-10分钟（室温太低时应放置到孵箱中），加入全培养基终止消化，瓶体朝上，吸管轻轻吹打4-8分钟，尤其是标记部位。不要用力吹打，以免把贴壁较牢的成纤维细胞，上皮样细胞吹打下来。（4）传代到新瓶中，加入少量培养基，孵箱静置20-30分钟后，MSC大多牢固贴壁。瓶底朝上，轻轻吹打，丢弃悬浮以及贴壁不牢的细胞（大多是上皮样细胞），加入全培养基开始传代培养，如观察仍有较多杂细胞，可重复上述步骤。（5）经上述处理后，原代的那瓶细胞仍有一些MSC生长，可继续按原代培养，如观察到MSC的克隆，仍可按上述步骤纯化处理。（6）原代或传代的细胞如观察的少量成片的杂细胞，可直接镜下瓶底标记后，超净台里用长吸管尖端机械刮除，吸出去掉。菊花与刀用的是全骨髓培养法，直接用含10%的FBS培养基冲洗大鼠的股骨和胫骨，为了避免冲起许多气泡应缓慢冲，冲的次数不应太多。冲洗后不用离心直接接种在培养瓶里，48 h~72 h后首次换液，一般7~10天可传代。天之饺子介绍的小鼠MSC的分离方法：取6 w小鼠的股骨和胫骨，直接用含培养基冲出骨髓，一定要尽量把干垢端的骨髓冲干净。冲洗后不离心直接接种在培养瓶里，24－48 h后去悬浮，再接下来的每3－4天换液一次，直到需要传代。2. 密度梯度离心法 裴雪涛等用比重为1.073 g/ml的percoll分离（400 g×20 min）人骨髓MSCs，取界面处细胞层，离心后洗涤以2×105/cm2的密度接种，72 h后更换培养液，弃掉未贴壁细胞，以后每3 d换液一次。细胞长到80％汇合时1：1传代。菊花与刀利用PERCOLL密度1.073分离大鼠MSC 时，用2400 rpm×20 mins后可见中间有一层约1～2 mm厚的白色层，仔细用吸管吸取这一层再用PBS离心2遍即可加培养基和胎牛血清培养即rMSCs。周进明等利用密度为1.082的percoll分离小鼠MSCs，500g×30min离心后，取中间的单个核细胞层，PBS洗两次，接种于IMDM培养基，1 d后换液，去掉非贴壁细胞，以后每3-4天换液。jetter用过FICOLL,FERCOLL,上海二分厂的淋巴细胞分离液分离MSC细胞效果都不错，当然所获细胞群的纯度不一，Percoll最纯，而上海二分厂的淋巴细胞分离液所获细胞群的传代能力优秀（35 PASSAGE）。本版的部分园友认为MSC贴壁培养得到的细胞不均一，但是多能分化能力和增殖力好，percoll分离得到的细胞较为均一，多能分化性和增殖力不如贴壁培养的，尤其是增殖力相差很远，有人添加bFGF或/和表皮生长因子发现可以增强增殖能力。二、骨髓间充质干细胞的培养 天之饺子认为，间质干细胞的培养一定要用塑料培养瓶，不能用玻璃的。因为象间质干这类的基质细胞不易贴玻璃，而且现在买的进口好品牌的培养瓶都涂有一层促细胞贴壁的物质，多数园友培养时都添加10－15％胎牛血清。分离培养结果的差异可能是由于各个研究小组标本来源、采用的分离方法不同从而所获得的细胞不同，或者用来检测的细胞代数不同，或者培养过程中用的胎牛血清不同，导致MSCs获得或失去这些表面标记物的表达。三、骨髓间充质干细胞的特性 体外培养的MSC体积小，成梭形，核浆比大。不表达分化相关的细胞标志，如I、II、III型胶原、碱性磷酸酶或Osteopontin；也不表达SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124、CD166和多种表面蛋白，这群细胞特性稳定，扩增一代和两代后的细胞同质性分别达到95％和98％。MSC联系传代培养和冷冻保存后仍能具有多向分化潜能，而且保持正常的核型核端粒酶活性，但不易自发分化，在体外特定的诱导条件下，MSC可以分化为骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉、神经等多种细胞。四、其他相关内容 Jiang将从成人以及成年大鼠和小鼠骨髓分离的间充质干细胞（CD45－TER119－）命名为多潜能成年祖细胞，他们证明，MAPC高表达端粒酶，而且随着细胞的扩增，端粒的长度不变，单个MAPC来源的细胞群不仅能在体外向3个胚层的细胞分化，而且能在体内能够向各种组织细胞分化，相比较而言，形态与MSC相似的体外培养的皮肤成纤维细胞则不具有类似的分化潜能。参考文献 生理学报2003.55（2）：153－159 人骨髓间充质干细胞在成年大鼠脑内的迁移及分化中华放射医学与防护杂志.2002,22(3).-167-169 培养小鼠骨髓间充质干细胞及其移植后在体内的定位分布Exp Biol Med Vol. 226:507 520, 2001 Mesenchymal Stem CellsNATURE |VOL 418 | 4 JULY 2002 Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow干细胞生物学 裴雪涛 主编

【序号】：3【作者】：方煊宇【题名】：褪黑素联合神经干细胞3D移植促进大鼠颅脑损伤的修复【期刊】：西南大学【年、卷、期、起止页码】：2020【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C475KOm_zrgu4lQARvep2SAkyRJRH-nhEQBuKg4okgcHYpRQmPqn9Cd1hYQd3dLCoxO0J8XYRH0LQZVFjVspOatq&uniplatform=NZKPT

【序号】：3【作者】：宁浩然苏俭生【题名】：水凝胶三维培养大鼠脂肪间充质干细胞【期刊】：第十二次全国口腔修复学学术会议论文汇编【年、卷、期、起止页码】：2018【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C467SBiOvrai6TdxYiSzCnOEqtmLmQZJXLeUh6QFM0rx2UDHJFXfLdbCf_CecgfZHToqiZmFtoGkxZa9AvGmaw9haE2jgVy9Pt8%3d&uniplatform=NZKPT

[b]离心机[/b]如何应用于红细胞压积容量测定摘要：红细胞压积（packedcellvolume，PCV）又称红细胞比容（hematocrit，Hct），是指红细胞在血液中所占容积的比值，测定时将抗凝血在一定的条件下离心沉淀，即可测得每升血液中血细胞所占容积的比值。　　1原理[b]离心机[/b]　　在100刻度玻璃管中，充入抗凝血至刻度，经一定时间离心后，红细胞下沉并紧压于玻璃管中，读取红细胞柱所占的百分比，即为红细胞压积容量（PCV又称压容、比容）。　　2．器材　　（1）温氏管：管长11cm，内径约2.5mm，管壁有100个刻度。一侧自上而下标有0～10，供测定血沉用，另一侧标有10～0，供测定比容用。如无这种特制的管子，可用有100刻度的小玻璃管代替。　　（2）长针头及胶皮乳头：选用长12～15cm的针头，将针尖磨平，针柄部接以胶皮乳头。也可用细长毛细吸管代替。　　（3）水平电动离心机：转速能达4000rpm者。　　3．方法　　（1）用长针头吸满抗凝血，插入温氏管底部，轻捏胶皮乳头，自下而上挤入血液至刻度10处。　　（2）置离心机中，以3000rpm的速度离心30～45min（马的血液离心30min,牛、羊的血液离心45min）,取出观察，记录红细胞层高度，再离心45min，如与第一次离心的高度一致，此时红细胞柱层所占的刻度数，即为PCV数值用％表示。　　4．注意事[b]离心机[/b]项　　（1）温氏管及充液用具必须干燥，以免溶血。　　（2）此时，离心机的转速必须达3000rpm以上，并遵守所规定的时间。　　（3）用一般离心后[b]离心机[/b]，红细胞层呈斜面，读取时应取斜面1/2处所对应的刻度数。血浆与红细胞层之间的灰白层由白细胞与血小板组成，不应计算在内。　　5．临床意义　　（1）红细胞压积增高：见于各种原因所引起的血液浓缩，使红细胞相对性增多，如急性胃肠炎、肠便秘、肠变位、瓣胃阻塞、渗出性胸膜炎和腹膜炎，以及某些传染病和发热性疾病。由于红细胞压积增高的数值与脱水程度成正比，因此在临床上可根据这一指标的变化而推断机体的脱水情况，并计算补液的数量及判断补液量的实际效果。另外。也见于各种原因所致的红细胞绝对性增多，如真性红细胞增多症、肺动脉狭窄、高铁血红蛋白血症等。　　（2）红细胞压积降低：见于各种贫血，但降低的程度并不一定与红细胞数一致，因为贫血有小细胞性贫血、大细胞性贫血及正细胞性贫血之分。