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解酯假丝酵母解酯变种

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解酯假丝酵母解酯变种相关的论坛

  • 酵母酶解粉

    请问谁知道酵母酶解粉是什么?它和酵母粉之间有什么区别吗?

  • 【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    维权声明:本文为gl19860312原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。 本实验室主要工作就是:微生物发酵与代谢调控 、蛋白的分离纯化 、生物材料的研发与生产( 化妆品 、面膜、人工血管 、人工骨................)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012061858_264950_2019107_3.jpg啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究摘要:研究了PH、温度、食盐浓度三个因素对啤酒酵母细胞破壁的影响,确定出最佳的自溶法破壁条件 。进而为分离啤酒废酵母中的有效活性成分奠定了基础。关键词:啤酒酵母;破壁;自溶The Research of Autolysis on the Beer Yeast Cells wallAbstract:This paper researched the condition of autolysis on the waste yeast cells wall with three factors (pH 、Temperature 、Salt density) and determined the best condition based on autolysis. And build basis for separating the activity forms from beer waste yeasts.Key words: The beer yeast; Breaking Cells wall; Autolysis引言啤酒酵母(S.csrsviside)属于真菌门酵母属,多数为单细胞微生物,细胞呈圆形或卵圆形,革兰氏染色呈阳性G+。啤酒酵母细胞是由细胞壁、细胞膜、液泡、颗粒和线粒体等部分组成,细胞年幼的时候细胞壁很薄,所以不明显;细胞年老时,细胞壁较厚。啤酒酵母细胞内不但含有丰富的蛋白质、维生素、葡聚糖及甘露聚糖等营养及保健成分,可作为食用单细胞蛋白,此外还含有辅酶I、细胞色素,卵磷脂、RNA,,这些物质或其降解产物及衍生物如氨基酸制剂和核苷酸及核酸制剂等在生物化学、医药及保健食品中最有重要的作用。由于啤酒废酵母价格便宜,因此可利用啤酒废酵母来提取、制备这些物质。啤酒废酵母(waste brewer's yeast)是啤酒生产的副产物,是指啤酒酿造后沉降的酵母泥,主要是由大量的弱细胞和死细胞组成。在啤酒生产过程中,每生产 100吨啤酒大约有1-1.5吨废酵母 (以干重计)产生。传统的处理方法,是弃置不用或作为饲料处理,直接排放到河流湖泊中,将造成环境污染,同时也是对财富的浪费;因其具有坚韧的细胞壁和特有的酵母臭,适口性差,不易消化和吸收,故烘干作为饲料用的经济效益不高。充分利用啤酒废酵母可以有效地减轻污染,实现资源的二次转化,也可产生巨大的经济效益,如开发酵母抽提物。 为了增加酵母抽提物产量国内外同行做出不同努力,开展了有些研究。目前关于啤酒酵母破壁的研究很多,大体可归纳为:化学破壁(酸解、碱解)、物理破壁(液体剪 切、固体剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。其中,化学破壁不仅会造成一些营养成分的破坏,而且为有效成分的提取增加困难;物理破壁虽然方法简单、成本低,能完好保存营养成分,但其破壁效果较差;生物破壁中的酶解法会增加提取成本,故均不能大规模广泛的应用。而采用自溶法进行细胞破壁是一种简便易行的操作过程,通过确定啤酒酵母细胞最适合的自溶条件,可以建立一套利用酵母细胞生产酵母抽提物的工艺和方法,旨在为啤酒酵母的综合利用寻求一种新的方法,为工业化生产提供理论基础和实践指导。1.4实验方法 工艺流程 啤酒废酵母(保藏)—— 活化、两次斜面培养—— 接种、平板划线——摇瓶培养——取对数期的酵母细胞——做稀释梯度——做影响因素(温度、食盐浓度、pH并固定时间60分钟)的实验-——做正交试验——镜检(血球计数法)——计算啤酒酵母细胞的破碎率——得到自溶的最佳工艺参数1.5啤酒废酵母自溶条件的确定酵母自溶的实质是酵母细胞内的蛋白质在自身蛋白酶的作用下,降解为游离的氨基酸,那么,一切影响酶促反应的因素均影响酵母细胞的自溶,如自溶温度、食盐浓度、pH值、自溶时间等。自溶法是以存在酶活性的新鲜活酵母为原料,利用酵母细胞本身的酶系,在一定条件下,将酵母体内的糖类物质、蛋白质和核酸分解为还原糖、氨基酸、肤类、核昔酸等小分子物质并从酵母细胞内抽提出来的一种方法。利用自溶法生产的酵母抽提物,蛋白质分解率高,游离氨基酸含量高,风味好,成本较低,但呈味核昔酸含量低.目前,欧美及我国所生产的酵母抽提物绝大部分都是采用这种方法。[font=仿宋_GB2

  • 【讨论】酵母葡聚糖的抗辐射作用详解

    【讨论】酵母葡聚糖的抗辐射作用详解

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211307_284139_1641058_3.jpg 以上这个图是酵母葡聚糖对致死剂量的辐射的保护作用研究,小鼠经致死剂量的辐射后,观察其存活率。红色曲线是服用了酵母葡聚糖的小鼠存活率,蓝色是只用生理盐水的空白对照样小鼠。可以看到10天以后,服用了酵母葡聚糖的小鼠存活率显著高于空白对照样。到第16天后,空白样组小鼠没有存活,而服用酵母葡聚糖的小鼠还有50%左右存活。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211308_284140_1641058_3.jpg 人在遭受辐射后,白细胞水平会大大降低,严重影响免疫系统。这是酵母葡聚糖对辐射后白细胞水平恢复的作用研究。可以看到,服用酵母葡聚糖后,第10天开始,白细胞水平开始恢复,而空白对照样在第15天才开始恢复。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211309_284143_1641058_3.jpg 以下是我们酵母多糖胶囊对辐射小鼠白细胞计数的影响研究。可以看到辐照后小鼠的白细胞数都会显著降低,而服用酵母多糖的小鼠白细胞数比空白对照组较高,说明酵母多糖对辐射有保护作用。在30天后,酵母多糖组的小鼠白细胞数恢复较快,比对照组显著高。

  • 【每日一贴】饲料酵母

    【中文名称】饲料酵母【英文名称】feed yeast【性状】 黄色粉末。有特殊香味。【用途】 在饲料中作蛋白源,在鸡饲料中添加4%,相当鱼粉的效果。【制备或来源】 将黄粉(或味精废液)用酵母菌培养,制得的菌体与培养基混合,再经脱水,干燥制得。【其他】 含粗蛋白65%以上,并含有18种氨基酸,其中8种是动物必须氨基酸。另外含有磷、钾、钙、镁等微量元素及多种维生素。【生产单位】 浙江义乌糖厂;山东省科学院生物研究所;山东省莱州酵母厂;

  • 【每日一贴】脱核酵母

    【中文名称】脱核酵母【英文名称】yeast;as a by-product of RNA production【用途】 可代替鱼粉饲养水貂、鳗鱼、对虾等。【制备或来源】 将蜜糖经澄清、稀释后,成为清糖水,再加入营养盐类,经发酵,离心分离,弃去轻相,重相溶解,再离心分离,轻相用以制取核糖核酸,重相经烘干、粉碎即得成品。【其他】 含蛋白质≥50%,含赖氨酸核蛋氨酸分别≥和≥2.4%,营养价值高。【生产单位】 福建莆田糖厂

  • 【每日一贴】饲料酵母粉

    【中文名称】饲料酵母粉【英文名称】feed yeast powder【性状】 有浓香气味。【用途】 是一种蛋白质含量高,氨基酸齐全,且含有B族维生素、微量元素及各种酶,是一种营养价值高的单细胞蛋白。能促进禽畜的新陈代谢,可增强禽畜的抗病能力,提高禽畜的生长速度、繁殖能力、肉质和毛皮质量,特别适宜以气味觅食得鱼虾喂养。【制备或来源】 用酒糟液发酵而成。其工艺路线有三种:(1)酒糟经冷却、净化、增殖、浓缩、质壁分离后,再干燥、粉碎得产品;(2)将酒糟接种发酵后,经干燥,去杂质粉碎得产品;(3)将酒糟沉渣加营养盐液,以酵母为微生物源,发酵后,经分离、干燥、粉碎得产品。【生产单位】 杭州长征化工厂;河南南阳酒精总厂酵母厂;

  • 【转帖】Nature:转基因酵母细胞制造出能互相交流的“生物电路”

    Nature:转基因酵母细胞制造出能互相交流的“生物电路”生物电路, 转基因, Nature, 酵母, 细胞典和西班牙科学家使用转基因酵母细胞制造出了能够互相交流的“生物电路”,未来,科学家有望使用人体细胞构建出更复杂的系统,来检测人体健康状况。相关研究发表在12月9日出版的Nature杂志上。作为欧盟“分子计算机”项目的一部分,瑞典哥德堡大学和西班牙巴塞罗那庞培法布拉大学的科学家在哥德堡大学施特芬·霍曼教授的领导下进行了该项研究。哥德堡大学细胞和分子生物学系肯塔罗·弗瑞卡瓦表示,尽管经过重新编程的细胞不能像真正的计算机做同样的工作,但该研究为使用这样的细胞建立复杂的系统铺平了道路。未来人体健康状况有望通过这种“分子对分子”的交流系统来探测,将疾病消灭在萌芽阶段;或者将其作为生物传感器来探测污染物,分解环境中的有毒物质等。合成生物学是一个方兴未艾的研究领域,其中的一个应用是设计出自然界中不存在的生物系统。例如,研究人员已经成功地使用转基因细胞构建出许多不同的人工连接装置,诸如电路断路器、振荡器和传感器等。尽管这些人工连接器具有很大的潜力,但迄今为止还存在很多技术限制,主要原因是,分处不同细胞中的人工系统很少能按科学家的期望来工作,因此影响了最终结果。

  • 【求购】怎么做液体饲料如酵母糖蜜里金属元素铜的检测?

    我们饲料厂有时候还让做液体饲料如酵母糖蜜里金属元素铜的检测,你们各位觉得酵母糖蜜的前处理方法跟常规饲料有啥区别没啊,难道也是先电炉炭化,马弗炉灰化,然后加水润湿,加酸溶解,浓缩赶酸,然后转移定容过滤,上AAS测定吗?液体饲料会不会有别的处理方法呀?

  • 【资料】酵母菌:发酵之旅

    我们平常所吃的馒头、面包,都是面经过发酵而制成的,它们蓬松有弹性,口感很好,还带有特殊的香味。而用来发酵的无论是从前的酵头,还是现在的发酵粉,其实都是添加剂酵母菌。现在酵母菌的作用已经不仅仅只停留在发酵作用上了,由于其独特的品性,酵母菌的用途也越来越广,成为一种多功能的食品添加剂。 酵母菌功用之一发酵 发酵是酵母菌最主要的功用。人类很早就开始将酵母菌应用于食品生产中,例如酒精饮料、酱油、食醋、馒头和面包的发酵等等。在面包和馒头的生产中,酵母发酵产生大量二氧化碳.使面团膨胀,形成松软的组织。 在食品工业上常见的酵母菌有啤酒酵母,用于生产啤酒、白酒和酒精,以及制做面包;葡萄酒酵母,也称酿酒酵母,用于酿造葡萄酒和果酒,也用于啤酒和白酒的酿造。其中啤酒酵母是食品工业上应用最为广泛的微生物之一,啤酒酵母菌体内维生素、蛋白质含量很高,其药用价值也很高,还可以用于做饲料,提取核酸、麦角醇、谷胱甘肽、凝血质和三磷酸腺苷等。

  • 吐司酵母检测

    吐司生产中配料添加了酵母 那我出厂检验微生物的判定标准还是按GB7099执行吗 这样的话老是检测不合格,是不是要去除酵母的数量再计数?求各位大神指导一下,谢谢!

  • 【信息】转基因酵母能进行多种糖分混合发酵

    据美国物理学家组织网12月27日报道,美国伊利诺伊大学香槟分校食品科学与人类营养系、加州大学劳伦斯伯克利国家实验室和英国石油公司(BP)的科学家表示,他们对酿酒酵母进行了基因改造,新得到的酵母菌株可以发酵葡萄糖、纤维二糖(葡萄糖的前体物,由两个结合在一起的葡萄糖组成)和木糖,能更好更多地把植物发酵成替代燃料乙醇。相关研究发表在最新一期的美国《国家科学院院刊》上。酵母以糖为生,并在这个过程中能产生很多对人来说是“宝物”的废物——乙醇和二氧化碳,因此生物燃料工业也使用酵母将植物糖转变为生物乙醇。然而,大多数酵母无法将植物中的葡萄糖、纤维二糖和木糖这三种糖全部转化成有用的燃料,比如,酿酒酵母能很好地发酵葡萄糖,但对木糖却有心无力,这使得利用酵母制造生物燃料的成本居高不下。之前,科学家对酵母菌种进行基因改造,让其代谢木糖,但速度很慢,效率过低。研究小组成员之一、伊利诺伊大学食品科学和人类营养学教授金泳恕(音译)表示,经过基因改造的酵母无法发酵木糖的主要问题是,它接触木糖之前会吸收所有葡萄糖,酵母表面的葡萄糖转运蛋白更愿意同葡萄糖依附在一起。在此项新研究中,基因改造后的酿酒酵母可以同时将纤维二糖和木糖转化为乙醇。转化效率和转化得到的乙醇数量都提高了一倍,这主要归结于混合发酵的协同作用。金泳恕表示,新酵母菌种将木糖转化为乙醇的效率至少比目前已知酵母菌高20%,使其成为最好的发酵木糖的细菌。研究团队通过对酿酒酵母做出几个关键的改进而获得了这样的结果。首先,他们给予这种酵母一个纤维二糖转运蛋白,这意味着其能将纤维二糖直接带入细胞中,而只有当纤维二糖进入到细胞内部时,它才会被转化为葡萄糖。这种方法可以战胜酿酒酵母本身对葡萄糖的偏好,从而专注于将木糖吸收进酵母细胞中。接着,研究人员将从一个消耗木糖的酵母中提取的3种蛋白质插入酿酒酵母中,由此提高了新酵母菌种代谢木糖的速度和效率。他们也对一种人造的同功酶进行了基因修改,让木糖代谢的正常中间产物木糖醇积聚的数量最少。最后,该研究团队使用“进化工程”让新菌种利用木糖的能力达到最大。研究人员表示,混合发酵的成本优势也很明显,其乙醇产量也高于工业标准,这种研究很快将被商业化。

  • 【转帖】阿凡达的触须?酵母细胞“生物电路”研制成功

    《科技日报》报道据美国物理学家组织网12月15日(北京时间)报道,瑞典和西班牙科学家使用转基因酵母细胞制造出了能够互相交流的“生物电路”,未来,科学家有望使用人体细胞构建出更复杂的系统,来检测人体健康状况。相关研究发表在12月9日出版的《自然》杂志上。  作为欧盟“分子计算机”项目的一部分,瑞典哥德堡大学和西班牙巴塞罗那庞培法布拉大学的科学家在哥德堡大学施特芬·霍曼教授的领导下进行了该项研究。  哥德堡大学细胞和分子生物学系肯塔罗·弗瑞卡瓦表示,尽管经过重新编程的细胞不能像真正的计算机做同样的工作,但该研究为使用这样的细胞建立复杂的系统铺平了道路。未来人体健康状况有望通过这种“分子对分子”的交流系统来探测,将疾病消灭在萌芽阶段;或者将其作为生物传感器来探测污染物,分解环境中的有毒物质等。  合成生物学是一个方兴未艾的研究领域,其中的一个应用是设计出自然界中不存在的生物系统。例如,研究人员已经成功地使用转基因细胞构建出许多不同的人工连接装置,诸如电路断路器、振荡器和传感器等。尽管这些人工连接器具有很大的潜力,但迄今为止还存在很多技术限制,主要原因是,分处不同细胞中的人工系统很少能按科学家的期望来工作,因此影响了最终结果。  该研究团队使用酵母细胞制造出了合成电路,细胞之间可通过基因调控进行连接。他们对这些酵母细胞进行了基因修改,使它们能够基于设定的标准来感应周遭环境,并通过分泌出分子向其它酵母细胞发送信号。因此,这些不同的细胞能像乐高玩具的积木块一样连接在一起,产生更复杂的电路。与使用一种转基因酵母细胞制成的结构相比,这种由不同转基因酵母细胞组成的结构能完成更复杂的“电子功能”。   尽管迄今世界上还没有一台真正意义上的生物计算机,但许多实验室都在以极大热情追逐这个梦想。在如何实现生物计算这个根本问题上众口异词,以有机分子元件代替目前的半导体逻辑、存储元件便是其中之一。用酵母细胞制成“生物电路”当然是一种有益尝试,不过今天来判断其前景还为时太早。也许现有方案将来都派不上用场,最终脱颖而出的却是基于某种新材料的全新设计。完成这一伟大工程即使跨越到下个世纪,也不能算长。

  • 甲醇酵母表达常用溶液及缓冲液的配制

    1.毕赤酵母表达常用溶液及缓冲液的配制1.1 各种母液的配制10*YNB:(含有硫酸铵、无氨基酸的13.4%酵母基础氮源培养基) 4℃保存。34g酵母基础氮源培养基(无硫酸铵)+100g硫酸铵,溶于1000ml水中,过滤除菌。500*B:(0.02%生物素 Biotin) 4℃保存 保存期为1年。20mg的生物素溶于100ml水中,过滤除菌。100*H:(0.4%Histidine 组氨酸) 4℃保存 保存期为1年。400mg的L-组氨酸溶于100ml水中,(加热至50℃以促进溶解),过滤除菌。10*D:(20%Dextrose 葡萄糖)保存期为1年。200g葡萄糖溶于1000ml水中,灭菌15min或过滤除菌。10*M:(5%Methanol 甲醇) 保存期为2个月。将5ml的甲醇与95ml水混匀,过滤除菌。10*GY:(10%Glycerol 甘油) 保存期为1年以上。将100ml甘油和900ml水混匀后,高压灭菌或过滤除菌。100*AA:(0.5% of each Amino Acid,各种氨基酸) 4℃保存 保存期为1年。分别将500mg的L-谷氨酸、L-蛋氨酸、L-赖氨酸、L-亮氨酸和L-异亮氨酸溶于100ml水中,过滤除菌。1M 磷酸钾溶液(potassium phosphate buffer,pH6.0),将1mol/L的K2HPO4溶液132ml与1mol/L的KH2PO4溶液868ml混匀,其pH为6.0,如需调节pH,则使用磷酸和氢氧化钾调节pH。1.2 常用溶液及缓冲夜1.2.1 碱裂解法抽提质粒DNA所用溶液:溶液Ⅰ:50mmol / L glucose,100mmol / L EDTA,25mmol / L Tris-HCI (pH 8.0)溶液Ⅱ:0.2mol/L NaOH,1% SDS(临用时配制)溶液Ⅲ:29.44g KAc,11.5ml Acetic acid,加ddH2O至100 ml。4℃保存。1.2.2 10% 甘油 (Glycerol):将100ml甘油和900ml水混匀后,高压灭菌或过滤除菌。保存期为1年以上。1.2.3 Rnase-H2O:1ul Rnase 加入1ml 灭菌 dd H2O。4℃保存。

  • 中国科学家利用酵母菌实时在线监测PM2.5毒性

    空气污染特别是PM2.5是当前人类面临的重要的环境问题之一。北京大学课题组研究人员近期在此问题上取得跨学科进展,首次以荧光标记酵母菌的微流控装置取代现有方法中的半导体传感器,实现了对PM2.5多方面毒性的实时在线监测。据了解,目前对于大气颗粒物的毒性研究,大多采用离线的方式,不能及时知晓其毒性;而细胞染毒或动物暴露实验灵敏度偏低,一些健康效应不易检测到。在颗粒物致病机理方面,目前也存在类似“盲人摸象”的现象,不能够全方面地了解PM2.5的毒性机理。受酵母菌相关研究的启发,由北大环境科学与工程学院研究员要茂盛、物理学院副教授罗春雄领导的研究团队,集成利用空气采样、微流控、荧光蛋白标记的酵母菌以及单酵母菌蛋白荧光自动检测平台,用活体酵母菌替代传统半导体传感器,创建了大气PM2.5毒性实时在线监测系统。要茂盛介绍,课题组先将PM2.5颗粒物采集到液体中,再将样品实时输送至放有酵母菌的微流控芯片里。由于酵母菌会对来自颗粒物的刺激发生反应,通过用不同荧光蛋白标记酵母菌的所有基因,就可实时看到酵母菌的哪些基因对颗粒物的刺激发生了响应,就好像可“实时监测不同地区车辆行驶状况”。据悉,这种酵母菌俗称酿酒酵母,繁殖快,其基因序列于1996年测序完成,是第一个完成基因测序的真核生物,被广泛地应用在人类疾病研究中。研究人员认为,这种方法对于颗粒物对人体健康效应机制的研究提供了开创性的研究思路和方法,可从分子水平理解PM2.5对人体的可能损伤情况。目前,此项研究成果已申请国家发明专利。课题组正在利用该体系对不同国家、地区颗粒物的毒性进行研究,同时也在筛查更多有响应的酵母菌蛋白,并研究其灵敏度、响应的毒性标定,以进一步揭示PM2.5对人体的具体致病毒性机制。

  • 【原创】瓶装葡萄酒中酵母菌的检查方法

    葡萄酒在瓶装时,必须认真考虑葡萄酒是否已经达到了除菌、灭菌的目的。为了准确达到这个目的,就要对瓶装的葡萄酒进行快速而可靠的检验。这里列举了3个检查方法,仅供同行朋友们在实际生产中,根据企业的实际条件进行参考。  一、格森海姆(Geisenheimer)检定法  将被检验的葡萄酒在无菌的条件下,接入与其等量的葡萄汁,便为酵母提供了良好的繁殖条件,酵母开始快速繁殖和发酵。酵母繁殖的速度和发酵的强度,是衡量被检样品染菌的程度。  具体操作如下:  取标准试管3支,分别注入10mL葡萄汁,并加棉塞封口,置于高压灭菌锅中灭菌;将吸管用纸包好,并在160℃下灭菌。然后小心的拔除葡萄酒瓶的软木塞,立即用火焰将瓶口附着的微生物灭除,再用无菌吸管从瓶底吸出10mL被检葡萄酒,移入已灭菌葡萄汁的试管内,每份样品做平行样3支。  若被检的样品活酵母较多,在3—5天内即可检定其发酵度;若酵母较少,发酵需要两倍于此的时间,由此可断定生产线是否处于受控状态,断定瓶装酒出厂后是否会发生浑浊等质量事故。  这个方法十分简便,不需要特别的仪器,对小型葡萄酒厂十分适用,这是其优点。缺点是只能检定出葡萄酒中是否存在酵母菌,无法进行定量分析。  二、薄膜过滤法  借助于不同孔径的过滤片(孔径一般为2微米以下),在无菌条件下过滤被检葡萄酒,分离出酵母及其它微生物,然后对滤片上的微生物进行生长培养,计算出现的菌落数,并进行其它各项必要的检查。  操作方法如下:  将所有参与过滤的仪器、器皿进行彻底消毒,在无菌的条件下进行过滤等操作。在每次分析之前,将过滤器及过滤片置于高压锅内灭菌,用经火焰烧过的镊子取已灭菌的过滤片放入过滤器中。  被检瓶酒在开启前,必须仔细用75%酒精擦拭瓶口,小心地拔除软木塞,勿使开瓶刀穿通软木塞。  开始时先将软木塞拔出四分之三,然后用手轻轻取下软木塞,瓶口在倒酒前先用火焰烧一下,再将葡萄酒一点一点地倒入过滤漏斗中。  过滤结束后,用火焰烧过的镊子在漏斗内取出滤片,置于培养皿中,并摆放平整,倒入适量的酵母培养基(约3mL),然后标明日期和试样编号,置于生物培养箱内,在25℃下培养3—5天。为避免凝结水影响菌落生长,将培养皿反扣于培养箱内。若过滤片上的酵母菌是活的,酵母即进行繁殖,在培养基上会出现菌落。  如果未发现菌落生长,说明被检的葡萄酒是稳定的,不会出现酵母菌引起的浑浊;如果每瓶样有5个以上的菌落出现,说明葡萄酒的除菌或杀菌操作不彻底,葡萄酒有不稳定的因素,应该严格检查生产过程中的每个环节,直到查出原因为止。  这一方法能对瓶装酒内各种微生物进行定量检定,但需要选择适当孔径的滤片和培养基,并由掌握基本微生物学的熟练人员操作。  三、快速检定法  薄膜过滤法可以用显微镜对滤片做仔细检查,迅速检出活酵母;快速检定法则可将死的和活的微生物区别开来,但要求瓶装酒内必须不含其他悬浮物。  在适宜的温度下,于8—14小时内,具有繁殖能力的菌体生长成为微小的菌落,用显微镜观察,可将死的、没有繁殖能力的菌落区别开来。活菌体在培养时会形成小的菌落,死菌体只有单个的存在。

  • 酵母培养基的制备

    一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。  学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。二、基本原理 麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。 三、实验材料 (一) 药品 葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。   (二) 仪器 天平、高压蒸汽灭菌锅。   (三) 玻璃器皿 移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。   (四) 其他物品 药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。四、实验内容 (一) 麦芽汁培养基的配制 1.培养基成分 新鲜麦芽汁一般为10-15波林。 2.配制方法 (1) 用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。   (2) 取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。   (3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。   (4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。   (5) 如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。   (6) 分装、加塞、包扎。   (7) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (二) 马铃薯葡萄糖培养基的配制1.培养基成分   马铃薯   20g   葡萄糖   2 g   琼脂    1.5-2g   水     100ml   自然pH  2.配制方法  (1) 配制20%马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。   (2) 配制时,按每100 ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。   (3) 分装、加塞、包扎。   (4) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制 1.培养基成分   黄豆芽   10g   葡萄糖   5g   琼脂    1.5-2g   水     100ml   自然pH   2.配制方法  (1) 称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。   (2) 配制时,按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水。   (3) 分装、加塞、包扎。   (4) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。(四)察氏(czapck)培养基的配制1.培养基成分   蔗糖       3g   NaN03     0.3g   K2HP04     0.1g   KCl        0.05g   MgSO4·7H2O  0.05 g   FeS04      0.001 g   琼脂      1.5-2g   蒸馏水     100ml   自然pH   2.配制方法  (1) 称量及溶化 量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。   (2) 定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。   (3) 加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。   (4) 分装、加塞、包扎。   (5) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。

  • 草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试 (请大家抓紧时间报结果)

    草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试 (请大家抓紧时间报结果)

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646915_1618994_3.jpg 序:自2010年以来,我们已经组织了7期草根比对,此活动纯属交流切磋之使用。我们希望更多的版友参与进来,共同学习共同提高我们的仪器分析行业的水平。如果有想组织的,请与水中月联系(594695627@qq.com) http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20101101105747694_01_1618994_3.gif 草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试再次感谢下里巴人版友为本次活动提供样品,第八期草根能力比主要是针对“富硒酵母中总硒含量”进行分析测试,从事相关检测的版友或实验室,欢迎报名,请下载报名表发送到指定邮箱594695627@qq.com,欢迎有能力的实验室积极参加,本次活动样品邮寄到付。能力比对项目:富硒酵母中总硒含量测试参与人员费用:免费提供样品、邮费到付网上报名名额:100家报名截至时间:2012年5月5日样品发放时间:2012年5月6日--2012年5月10日结果反馈时间:2012年5月20日前http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110281511_327006_1622715_3.gif或者将下面的信息填好短信给我。申请单位: 联系人 : 地址: 邮编: 固定电话: 手机: email: QQ: 实验室通过哪些CNAS认证: 您对本次活动的意见、建议及要求:本次活动主要是针对富硒酵母中硒含量进行测试,热烈欢迎同行及各类有相关检测能力的实验室参加。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20101101105747694_01_1618994_3.gif参加比对注意事项特别说明:1、由于本次活动采取邮寄到付、样品免费提供的形式,欢迎大家积极参与,谢谢合作!2、以往有个别报名者未与实验室其他同事沟通,报名后拿到样品,未能在规定的时间内报出结果,浪费样品和大家的时间和精力,也失去了一次大家交流的机会,希望这次不会出现这样的情况。3、申请表填写:请认真填写申请表,特别是地址和联系方式,以方便快递及尽快接收到样品。4、样品邮寄:(1)本次比对纯属相互交流、学习,免费提供样品,样品到达时参加者只需要付快递费。 如果报名表填写完整正确,本人会根据报名表进行快递单填写。(2)样品邮寄时间:2012年5月7日-2012年5月10日(3)样品收到后请反馈样品已经收到:请发邮件至594695627@qq.com5、检测结果反馈:1) 样品结果反馈时间:请于2012年5月20日前将结果报告单以邮件的形式发送至594695627@qq.com。2) 本次比对纯属技术交流自查自纠,请认真对待不要对结果,比对结果不会对实验室产生负面影响。3) 请在能力验证版面(http://bbs.instrument.com.cn/forum_529.htm)发样品操作过程的话题,凡参与者可获得最多50分的奖励,优秀者还可获得仪器信息网提供的精美礼品一份。6、检测结果汇总报告: 本人会尽快将大家的结果以编号的形式进行汇总统计,并保证不会泄露大家的联系方式,请放心!如果有版友想策划草根能力比对,能提供测试样品,请与水中月联系(594695627@QQ.com)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20101101105747694_01_1618994_3.gif往期回顾:第七期:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120306/3905627/

  • 介绍酵母的营养需求

    ?酵母的营养需求酒精发酵过程中,可吸收氮是酵母必不可少的营养物质,?即铵盐(NH4?+?)和氨基酸(有机氮)。它们天然存在于葡萄果汁中且含量随时都在变化。往往,天然的氮源并不能满足酵母的发酵需求。

  • 面包酵母问题

    面包制作中添加了酵母,出厂检验还是以7099的微生物标准执行或不执行,酵母属不属于7099中的未熟制的发酵配料,要是按7099执行,出厂检验菌落总数不合格,大概率就是酵母在熟制过程中未杀死了是不是

  • 酵母类型和连续发酵对经典酒类酵母类型和连续发酵对经典酒类参数的影响

    酵母类型和连续发酵对经典酒类酵母类型和连续发酵对经典酒类参数的影响酒精发酵结束时,所有连续的S的乙醇浓度在9.0到11.5% (v/v)之间,糖浓度低于2.0g.L-1。与不完全酒精发酵的纯培养物相比,接种P的样品完成发酵的时间最长,至少12天。对于其他NS酵母来说,7天就足以完成酒精发酵,而对于S纯培养物来说,则需要5天。与NS纯培养发酵相比,顺序发酵有助于增加乙醇浓度,但也减少了发酵时间。与S纯培养物相比,来自连续发酵的葡萄酒酒精含量的降低证实了NS酵母用于降低乙醇含量的效用。由于所有形式的葡萄汁和发酵条件都是相同的,使用代谢组学在最终葡萄酒成分和亮点中检测到的差异是由酵母的类型、酵母之间的相互作用和添加S的时间引起的。数的影响酒精发酵结束时,所有连续的S的乙醇浓度在9.0到11.5% (v/v)之间,糖浓度低于2.0g.L-1。与不完全酒精发酵的纯培养物相比,接种P的样品完成发酵的时间最长,至少12天。对于其他NS酵母来说,7天就足以完成酒精发酵,而对于S纯培养物来说,则需要5天。与NS纯培养发酵相比,顺序发酵有助于增加乙醇浓度,但也减少了发酵时间。与S纯培养物相比,来自连续发酵的葡萄酒酒精含量的降低证实了NS酵母用于降低乙醇含量的效用。由于所有形式的葡萄汁和发酵条件都是相同的,使用代谢组学在最终葡萄酒成分和亮点中检测到的差异是由酵母的类型、酵母之间的相互作用和添加S的时间引起的。

  • 【原创大赛】霉菌酵母计数的实验室操作规程

    [b]1. 目的[/b] 对《食品安全国家标准 食品生生物学检验 霉菌和酵母计数》GB4789.15-2016进行细化,指导微生物实验室霉菌和酵母计数检测具体操作。[b]2. 适用范围[/b]本操作规程适用于食品、化妆品及一次性筷子中霉菌和酵母菌的计数。[b]3. 设备及材料[/b]冰箱、霉菌培养箱、拍击式均质、显微镜、电子天平、高压灭菌器及其他灭菌和常规检测用器皿、材料。[b]4. 培养基及试剂[/b] 生理盐水(0.85%氯化钠溶液) 孟加拉红培养基或马铃薯葡萄粮琼脂[b]5. 检验程序 [/b] [table][tr][td=1,1,35] [/td][/tr][tr][td] [/td][td][img=,527,469]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181712248843_5332_3247208_3.png[/img][/td][/tr][/table][b] 6. 操作步骤6.1 1:10样品匀液制 [/b]以生理盐水做样品稀释液。6.1.1食品样品 样品适宜时,取25g/ml样品加入装有225ml稀释液的均质袋中,用拍击式均质器充分混匀;如果样品硬度较大,不宜使用拍击式均质器时,取25g样品加入装有225ml稀释液的椎形瓶中充分振摇,制成1:10样品匀液。6.1.2 化妆品样品 油性液体,取10g/ml样品,先加入5ml灭菌石腊混匀,再加10 ml灭菌吐温80,42℃水浴,加75ml灭菌生理盐水,拍击均质1min,制成1:10样品匀液; 水溶性液体、膏、霜、粉剂等,称10 g样品加90ml灭菌生理盐水,拍击均质1min,制成1:10样品匀液 疏水性膏、霜及眉笔、口红等,称10 g/ml样品加10 ml灭菌液体腊和10 ml灭菌吐温80,再加入70 ml灭菌生理盐水,拍击均质3 min,制成1:10样品匀液。6.1.3 一次性筷子样品 取一次性筷子25g(通常取6双,表面积约为50平方厘米)加入装有225ml稀释液的无菌袋中充分振摇,作为1:10的样品匀液。[b]6.2 样品匀液稀释[/b]用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]取1ml 1:10的样品匀液注入装有9ml稀释液的试管中,另换一个枪头,反复吹吸,制成1:100样品匀液。按此法依次制备10倍递增稀释的系列样品匀液。根据对样品污染状况的估计,选择2-3个适宜稀释度(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1ml样品匀液加入2个无菌平皿内。同进分别取1ml样品稀释液加入2个平皿作空白对照。[b]6.3 倾注平皿[/b] 将冷却至46℃的孟加拉红培养基倾注平皿,及时转动平皿使培养基和样品匀液混合均匀。[b]注意:[/b]孟加拉红培养基可置46±1℃的水浴箱中保温,但不应超过4小时。凝固后的培养基只可复溶一次,否则将影响培养基质量。[b]6.4 培养[/b] 待琼脂凝固后,将平皿倒置,于28±1℃霉菌培养,3天后观观察,5天记录结果。[b]6.5 计数[/b] 肉眼观察,选取菌落数在10-150CFU的平板计数。根据检测要求,计数霉菌和酵母的总和或分别计数霉菌数和酵母数。霉菌、酵母和细菌的菌落鉴别可参照以下方法。[align=left]6.5.1肉眼观察菌落特征[/align][align=left]通常情况下肉眼观察,霉菌、酵母、细菌三种菌落在孟加拉红培基上的特征如下:[/align] [table][tr][td=1,1,83] 霉菌菌落[/td][td=1,1,482] 绒毛状、棉絮状、蛛网状。具有菌丝体,菌落较大,扁平,较干燥。颜色多样,白色、黑色、黄色多见,菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致,菌落周围有晕圈。[/td][/tr][tr][td=1,1,83] 酵母菌菌落[/td][td=1,1,482] 菌落较细菌大且厚,质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色均一。光滑、湿润、常带黏性,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色。培养时间较长时可呈皱缩状,表面较干燥。位于琼脂内的菌落,可呈铁饼形、三角形及多角形。[/td][/tr][tr][td=1,1,83] 细菌菌落[/td][td=1,1,482] 由于受到抑制,通常会很小,红色,常呈橄榄形。[/td][/tr][/table]6.5.2 低倍镜观察菌落边缘形态肉眼观察菌落形态无法区别孟加拉红培养基上酵母和细菌时,可用低倍普通光学显微镜观察平板表面菌落边缘较薄较透光的部分,在边缘能看到细胞的是酵母,看不见的则是细菌。 [table=565][tr][td=1,1,83] 霉菌菌落[/td][td=1,1,482] 边缘可见明显的菌丝体。[/td][/tr][tr][td=1,1,83] 酵母菌菌落[/td][td=1,1,482] 边缘较规整,调节聚焦螺旋可见到细腻如细沙的结构。若无法确认可用接种针从边缘稍稍刮开菌落,即可在镜下见到卵圆形的细胞。[/td][/tr][tr][td=1,1,83] 细菌菌落[/td][td=1,1,482] 菌落紧密,边缘整齐,不易透光,看不到细沙粒样的结构。[/td][/tr][/table]6.5.3 染色法观察挑取菌落用亚甲基蓝或革兰氏染色,酵母菌霉菌在低倍镜下即可见到细胞或菌丝,而细菌不可见,无菌丝的酵母体积较大,在40倍显微镜下清晰可见,细菌则需在油镜下才能清楚观察。[b]7. 结果记录与报告[/b]7.1 结果记录计算两个平板菌落的平均值,再将平均值乘以相应的稀释倍数计算。7.1.1 若所有平板上菌落数均大于150CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他夹板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。7.1.2 若所有平板上菌落数均小于10CFU,则按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。7.1.3 若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算;如为原液,则以小于1计数。7.2 报告7.2.1 菌落数在100以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。7.2.2 菌落数大于或等于100时,可将前3位数字采用“四舍五入”原则修约,取前两位数字,后面用0补齐位数表示结果(例如:结果为1210可表示为1200);也可采用两位有效数字乘以10的指数形式来表示(例如:结果为1210可表示为1.2*10[sup]3[/sup])。7.2.3 称重取样以CFU/g为单位,体积取样以CFU/ml为单位。7.2.4 根据检测要求分别报告霉菌和酵母数,或报告霉菌和酵母总数。[b]8. 参考文件[/b]《食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》 GB 4789.15-2016《一次性筷子 第1部分 木筷》 GB19790-2005《化妆品微生物标准检验方法》 GB 7918-1987

  • 【讨论】酵母检测仪器

    生产过程中,酵母浓度的控制是产品质量的一个关键因素,为了控制酵母浓度,最好的方式就是在线快速测定。目前国内外有哪些公司生产或代理酵母在线活性检测仪,就是那种生产发酵过程中能在线快速准确测定酵母活细胞数的仪器。在网上查了一下美国Aber公司有酵母监测仪,法国FOGALE公司有活细胞浓度在线检测议,请问各位有用过吗?哪家好用一些呢?

  • 近二十多年来 酵母菌在中国的研究与开发

    酵母菌在中国的研究与开发 从2000年开始,在国家葡萄产业从2000年开始,在国家葡萄产业技术体系、国家自然基金等项目的支持下,刘延琳教授团队二十多来坚持不懈进行本土酵母资源的收集、鉴定、挖掘、优选,建立了保藏2万余份本土葡萄酒酵母的种质资源库,开发了典型特征突出、综合性状优良、功能细分的系列本土酵母菌种30株。经过研究测试,CEC01和CECA这2株中国本土优良葡萄酒酵母菌种具有耐受力强、发酵力强、香气表达力强等特点,率先于2013-2014年进入产业化应用,现已实现对进口葡萄酒酵母30%的国产化替代。经过规模化产业应用,这2个菌种生产的葡萄酒活性干酵母已批量出口至欧洲传统葡萄酒主产国,提升了中国葡萄酒产业的国际竞争力和美誉度。技术体系、国家自然基金等项目的支持下,刘延琳教授团队二十多来坚持不懈进行本土酵母资源的收集、鉴定、挖掘、优选,建立了保藏2万余份本土葡萄酒酵母的种质资源库,开发了典型特征突出、综合性状优良、功能细分的系列本土酵母菌种30株。经过研究测试,CEC01和CECA这2株中国本土优良葡萄酒酵母菌种具有耐受力强、发酵力强、香气表达力强等特点,率先于2013-2014年进入产业化应用,现已实现对进口葡萄酒酵母30%的国产化替代。经过规模化产业应用,这2个菌种生产的葡萄酒活性干酵母已批量出口至欧洲传统葡萄酒主产国,提升了中国葡萄酒产业的国际竞争力和美誉度。

  • 酵母抽提物的应用领域

    目前酵母抽提物应用最多的是食品加工业和生物培养基,在方便面料包、鸡精粉、酱油、肉制品、食用香精等产品中,酵母抽提物已经得到了较好的应用推广;在膨化食品、饼干糕点等产品中的应用也有出现。 我想知道它可以在营养功能食品,如针对特殊人群的低脂,降血糖食品中使用吗?

  • 关于酵母抽提物

    [b][color=#646464][color=#1a1a1a]酵母抽提物,英文Yeast Extract,简称YE。[/color][/color][/b][color=#1a1a1a]酵母抽提物可以说是食物风味诱惑的原动力,让吃货们欲罢不能的味道,很多时候其实是YE在起作用。[/color][color=#1a1a1a][color=#1a1a1a]对于食品工业生产和餐饮门店,是非常熟悉的。家庭厨房中一般不会见到,其实他是隐藏的。[color=#1a1a1a]回家看看家里酱油瓶子的配料表上,不管是老抽、生抽、味极鲜,都能看到他的名字。[/color][/color][/color][color=#1a1a1a]它的神奇之处,在于包含了人体可直接吸收利用的可溶性营养及风味物质的浓缩物,[color=#1a1a1a]如20种氨基酸和多肽、核苷酸、维生素、有机酸和矿物质等等。[color=#1a1a1a]复杂成分带来多种丰富而饱满的味道。[/color][/color][/color][color=#1a1a1a]家用时,假如手抖放多了,除了味道太重,也没别的危害。[color=#1a1a1a]而且素食者也可以用,是难得的同时营养、调味和保健三大功能的食品调味料。[/color][/color][color=#1a1a1a]酵母抽提物的原料是啤酒酵母、葡萄酒酵母和面包酵母为原料。[color=#1a1a1a]主流产品是啤酒酵母,很大一部分产量是啤酒酿造的副产品。[color=#1a1a1a]这个以前是当做废弃物的,后来发现这个宝贝的味道太浓郁,再稍作加工大有可为。[/color][/color][/color]

  • 关于啤酒酵母标示的内容

    [font=SimSun, STSong, &]可否提供国卫食品标便函[2014]141号,关于啤酒酵母标示的内容,找不到原文。谢谢[/font][font=SimSun, STSong, &]想知道酵母在啤酒的配料里是不是必须标注的[/font]

  • 酵母双杂感受态的制备及转化

    酵母感受态的制备:1. 取500-1000微升的酵母感受态菌株,加入到3到5毫升的新YPDA培养基中,30度震荡5-8小时,250rpm2. 取5微升摇好的感受态菌液加到25-50毫升的新YPDA培养基中,30度震荡培养15-20小时,浓度0.15-0.3(视情况想快点可多取点少摇一会)3. 离心700g,5分钟室温下,倒掉上清加入25-100毫升的新YPDA培养基,把菌体摇起来摇匀,30度震荡培养3-5小时4. 离心700g,5分钟室温下,倒掉上清,无菌水重悬(5-10毫升)5. 离心700g,5分钟室温下,倒掉上清,1.5毫升(1倍TE和LiAc的混合液)重悬,并转移到2毫升的离心管中6. 高速离心15秒(12000就可以)去上清加入50微升乘以感受态管数的量(1倍TE和LiAc的混合液)重悬并分装。感受态已制成7. 吸取50微升感受态到1.5或2.0的离心管中,加入5到15微升的质粒100ng(及5微升的carrier DNA有了加没有可以不加)8. 加入500微升的PEG/LiAc(1倍TE和LiAc、 PEG 40%的混合液)轻轻混匀9. 30培养30min,10分钟震荡一次10. 加入20微升的DMSO混匀11. 42度热激15min,每5min混匀一次12. 高速离心15秒,去掉上清加入500-800微升的YPDA或YPD plus重悬,30度培养,(转化时是可选步骤,筛库转化时需要培养90min)13. 离心去上清,以0.9%的生理盐水重悬。(可选步骤)14. 吸取100微升涂板,pGBKT→SD/-Trp→Y2H pGADT→SD/-Leu→Y187

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