本人需要按照GB-T 21315-2007 《动物源性食品中青霉素类药物残留量测定 液相色谱/质谱质谱法》检测青霉素族。由于刚刚接触,需要购买一批标样。 但是标准物质购买商给我提供的都是一些青霉素的钠盐或水合物。 如下所示,左边是标准上规定的,也是我需要的,右边是经销商提供的 羟氨苄青霉素 羟氨苄青霉素三水合物 氨苄青霉素 氨苄青霉素三水合物 邻氯青霉素 氯唑青霉素钠水合物 双氯青霉素 双氯青霉素钠水合物 乙氧萘氨青霉素 乙氧萘氨青霉素钠盐 苯唑青霉素 苯唑青霉素钠 …… …… 希望知道的同行们能够给与解答,这些钠盐和水合物能够代替标准上注明的标准物质吗?如果能够代替,要注意什么问题呢?如果不能代替,请问哪里可以购买到单独的青霉素,而非水合物或钠盐?
谁做过饲料里德青霉素G钠盐的检测?什么方法都行
GB/T 21315-2007 动物源性食品中青霉素族抗生素残留量检测方法 方法耗材包这块主要是标准品,前处理和分析柱,现货供应。序号库存编号库存名称规格1CDCT-C10242500阿莫西林三水合物(羟氨苄青霉素) 标准品纯品型,有证书,0.25g2CDCT-C10243080氨苄青霉素(氨苄西林)三水合物 标准品纯品型,有证书,0.1g(4℃保存)3CDCT-C11692100氯唑青霉素钠水合物(氯唑西林钠,邻氯青霉素钠) 标准品纯品型,有证书,0.25g(4℃保存)4CDCT-C12560500双氯青霉素钠盐水合物 标准品纯品型,有证书,0.1g(4℃保存)5CDCT-C15402500萘夫西林钠一水合物/乙氧萘胺青霉素钠一水合物 标准品纯品型,有证书,0.1g(4℃保存)6CDCT-C15755100苯唑青霉素(钠盐水合物)/苯唑西林钠 标准品纯品型,有证书,0.1g(4℃保存)7CDCT-C15935000青霉素G钾盐(苄青霉素钾盐) 标准品纯品型,有证书,0.25g(4℃保存)8CDCT-C15935010苯氧甲基青霉素钾盐(青霉素V钾盐) 标准品纯品型,有证书,0.1g(4℃保存)9CDCU-1410002甲氧苯青霉素钠(Methicillin Sodium) 标准品500mg10CDGO-130566-100mg苯咪青霉素(阿洛西林) 标准品100mg 2-8℃避光保存11CDAA-560001-1mg苯氧乙基青霉素钠盐1mg12SBEQ-CA3154Poly-Sery HLB SPE 小柱500mg, 6mL/30 pcs13SBEQ-CR1012CNW 12位固相萃取真空装置12位14SBEQ-CR1416CNW 16位固相萃取真空装置套15SBEQ-CR1824CNW 24管固相萃取真空装置套16LAEQ-462572Athena C18-WP 液相色谱柱4.6*250mm,5um17LBEQ-400272KAthena C18-WP 保护柱套装1个柱套+1个柱芯,5μm,4.0×20mm
做青霉素发酵液的HPLC检测时,所用的对照品到底应该是什么?我买的是青霉素G钾盐,到底能不能用来做青霉素G的对照品,另外我看到网上卖的青霉素G的标准品是Benzathine penicillin tetrahydrate,难道是苄青霉素?青霉素G和钾盐在反相色谱上的保留行为是一样的还是有差异的?
买的展青霉素有证书的液体标准品也需要浓度校准吗?望老师不吝赐教
[align=center][font='仿宋'][size=21px]青霉素[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]类药物[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]检测国内标准比较解读[/size][/font][/align] [font='仿宋'][size=18px]青霉素[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]类[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]杀菌剂[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]药物[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]属于[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]β[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]-[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]内酰胺类[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]广谱[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]抗生素[/size][/font][font='仿宋'][size=18px],[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]分子结构中含有[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]β[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]-[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]内酰胺[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]环,[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]代表药物主要[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]包括[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]青霉素[/size][/font][font='仿宋'][size=18px] G、青霉素 V、苯[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]唑[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]西林、氯唑西林、双氯西林、[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]萘[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]夫西林[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]等[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]。[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]该类药物用于动物呼吸、生殖、皮肤病毒感染等疾病的治疗和预防[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]。[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]青霉素类药物在[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]动物源[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]食品中的残留会对青霉素过敏的人产生健康危害,更重要的是抗生素残留会在人体内累积,破坏体内正常的菌群环境[/size][/font][font='仿宋'][size=18px],导致人体免疫力降低。[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]因此我国在[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]《[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]GB 31650-2019 食品中兽药残留最大限量[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]》[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]标准中[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]对氨[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]苄[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]西林、[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]氯唑西林[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]等青霉素药物[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]在动物源食品中的[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]残留限量做出了[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]明确规定——牛奶为4-30 [/size][/font][font='仿宋'][size=18px]ug[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]/kg,肌肉、组织等为50-300[/size][/font][font='仿宋'][size=18px] [/size][/font][font='仿宋'][size=18px]ug[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]。[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]目前该类药物的检测方法[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]主要包括[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]和[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]高效[/size][/font][font='仿宋'][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[/size][/font][font='仿宋'][size=18px],[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]现将[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]国内相关[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]主要[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]检测标准[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]总结如下[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]:[/size][/font] [table][tr][td] [font='仿宋']序号[/font] [/td][td] [font='仿宋']标准名称[/font] [/td][td] [font='仿宋']检测原理[/font] [/td][td] [font='仿宋']药物数量、种类[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']1[/font] [/td][td] [font='仿宋']GB 31656.12-2021 食品安全国家标准 水产品中青霉素类药物多残留的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法[/font] [/td][td] [font='仿宋']试样用乙腈+水(8+2)溶液提取[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']HLB固相萃取小柱净化,[/font][font='仿宋'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-[/font][font='仿宋']串联质谱[/font][font='仿宋']测定[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']内[/font][font='仿宋']标[/font][font='仿宋']法定量[/font][font='仿宋']。[/font] [/td][td] [font='仿宋']11[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']阿莫西林、氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']西林、青霉素[/font][font='仿宋'] G、青霉素 V、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']西林、氯唑西林、双氯西林、[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']夫西林、[/font][font='仿宋']哌[/font][font='仿宋']拉西林、阿洛西林和甲氧西林[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']2[/font] [/td][td] [font='仿宋']GB 29682-2013 食品安全国家标准 水产品中青霉素类药物多残留的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[/font] [/td][td] [font='仿宋']试样[/font][font='仿宋']用乙腈提取[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']HLB[/font][font='仿宋']固相萃取小柱净化,[/font][font='仿宋']高效[/font][font='仿宋'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-[/font][font='仿宋']紫外[/font][font='仿宋']测定[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']外[/font][font='仿宋']标法定量。[/font] [/td][td] [font='仿宋']4[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']青霉素[/font][font='仿宋']G、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']西林 、双氯青霉素[/font][font='仿宋']、[/font][font='仿宋']乙氧[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']青霉素[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']3[/font] [/td][td] [font='仿宋']GB/T 20755-2006 畜禽肉中九种青霉素类药物残留量的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法[/font] [/td][td] [font='仿宋']试[/font][font='仿宋']样用[/font][font='仿宋']0.15 [/font][font='仿宋']mol[/font][font='仿宋']/L磷酸二氢钠(pH=8.5)缓冲溶液[/font][font='仿宋']提取,[/font][font='仿宋']上清液经C[/font][font='仿宋'][sub][size=13px]18[/size][/sub][/font][font='仿宋']固相萃取小柱净化,[/font][font='仿宋'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url][/font][font='仿宋']色谱-[/font][font='仿宋']串联[/font][font='仿宋']质谱联用仪测定[/font][font='仿宋'],外标法定量[/font][font='仿宋']。[/font] [/td][td] [font='仿宋']9[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']夫西林、[/font][font='仿宋']青霉素G[/font][font='仿宋']、[/font][font='仿宋']哌[/font][font='仿宋']拉西林、青霉素V、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']西林[/font][font='仿宋']、[/font][font='仿宋']阿莫西林、氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']西林、氯唑西林、双氯西林[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']4[/font] [/td][td] [font='仿宋']GB/T 21315-2007 动物源性食品中青霉素族抗生素残留量检测方法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱/质谱法[/font] [/td][td] [font='仿宋']样品[/font][font='仿宋']用[/font][font='仿宋']乙腈+水([/font][font='仿宋']15[/font][font='仿宋']+2)[/font][font='仿宋']提取[/font][font='仿宋']浓缩后[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']用[/font][font='仿宋']0.[/font][font='仿宋']05[/font][font='仿宋'] [/font][font='仿宋']mol[/font][font='仿宋']/L磷酸[/font][font='仿宋']氢二钾[/font][font='仿宋'](pH=8.5)[/font][font='仿宋']溶解[/font][font='仿宋'],HLB小柱净化,[/font][font='仿宋']用[/font][font='仿宋'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱/[/font][font='仿宋']质谱[/font][font='仿宋']测定[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']外[/font][font='仿宋']标法定量[/font][font='仿宋']。[/font] [/td][td] [font='仿宋']11[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']羟氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']青霉素、氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素、乙氧[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']胺青霉素、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']青霉素、 青霉素、苯氧甲[/font][font='仿宋']基青霉素、乙氧[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']胺青霉素、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']青霉素、[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']青霉素、苯氧甲基青霉素、苯[/font][font='仿宋']咪[/font][font='仿宋']青霉素、[/font][font='仿宋']甲氧苯青霉素[/font][font='仿宋']、苯氧乙基青霉素[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']5[/font] [/td][td] [font='仿宋']GB/T 22975-2008 牛奶和奶粉中阿莫西林、氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']西林、[/font][font='仿宋']哌[/font][font='仿宋']拉西林、青霉素G、青霉素V、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']西林、氯唑西林、[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']夫西林和双氯西林残留量的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法[/font] [/td][td] [font='仿宋']试样[/font][font='仿宋']用[/font][font='仿宋']乙腈+水([/font][font='仿宋']3[/font][font='仿宋']+[/font][font='仿宋']1[/font][font='仿宋'])提取[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']HLB[/font][font='仿宋']固相萃取[/font][font='仿宋']小柱净化[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']高效[/font][font='仿宋'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联[/font][font='仿宋']质谱[/font][font='仿宋']测定[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']外[/font][font='仿宋']标法定量。[/font] [/td][td] [font='仿宋']9[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']阿莫西林、氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']西林、[/font][font='仿宋']哌[/font][font='仿宋']拉西林、青霉素G、青霉素V、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']西林、氯唑西林、[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']夫西林[/font][font='仿宋']、[/font][font='仿宋']双氯西林[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']6[/font] [/td][td] [font='仿宋']GB/T 18932.25-2005 蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']青霉素、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']青霉素、邻氯青霉素、[/font][font='仿宋']双氰青霉素[/font][font='仿宋']残留量的测定方法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法[/font] [/td][td] [font='仿宋']试样[/font][font='仿宋']用[/font][font='仿宋']去离子水溶解[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']溶液经[/font][font='仿宋']HLB固相萃取[/font][font='仿宋']小柱[/font][font='仿宋']净化,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url][/font][font='仿宋']-串联质谱[/font][font='仿宋']仪测定[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']外标法定量[/font][font='仿宋']。[/font] [/td][td] [font='仿宋']6[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']青霉素G、青霉素V、乙氧[/font][font='仿宋']萘[/font][font='仿宋']青霉素、苯[/font][font='仿宋']唑[/font][font='仿宋']青霉素、邻氯青霉素、[/font][font='仿宋']双氰青霉素[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']7[/font] [/td][td] [font='仿宋']农业部[/font][font='仿宋']958号公告-7-2007 猪鸡可食性组织中青霉素类药物残留检测方法 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[/font] [/td][td] [font='仿宋']肌肉样品[/font][font='仿宋']用[/font][font='仿宋']磷酸氢二钠缓冲溶液[/font][font='仿宋']提取[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']肝脏、肾脏样品先用乙腈再用[/font][font='仿宋']磷酸氢二钠缓冲溶液提取[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']C[/font][font='仿宋'][sub][size=13px]18[/size][/sub][/font][font='仿宋']固相萃取小柱净化[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']1,2,4-三唑汞溶液衍生,高效[/font][font='仿宋'][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-[/font][font='仿宋']紫外[/font][font='仿宋']检测器[/font][font='仿宋']测定[/font][font='仿宋'],[/font][font='仿宋']外[/font][font='仿宋']标[/font][font='仿宋']法定量。[/font] [/td][td] [font='仿宋']5[/font][font='仿宋']种:[/font][font='仿宋']阿莫西林、青霉素[/font][font='仿宋']G、青霉素V、氨[/font][font='仿宋']苄[/font][font='仿宋']西林、双氯西林[/font] [/td][/tr][tr][td] [font='仿宋']8[/font]
先和大家唠唠青霉素酶的主要来源:奶牛每到换季容易发作乳腺炎等疾病,往往通过注射抗生素进行治疗。凡经治疗过的乳牛,其牛奶在一定时期内残存着青霉素,而在原奶收购检测时,抗生素超标会拒收,奶户为了私利会人为添加青霉素分解酶。别小看这东东,个人认为危害大着呢:1.青霉素酶的安全性以及是否可以在食品中添加尚未有定论。2.在分解青霉素后,可能引进其他有害物质。3.这种做法纵容了奶牛饲养过程中抗生素的滥用。(这三条都个人主义的看法仅供参考)一.杯碟法检测原理:采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株,利用舒巴坦特性抑制β-内酰胺酶的活性,并加入青霉素作对照,通过比对加入β-内酰胺酶抑制剂与未加抑制剂的样品所产生的抑菌圈的大小来间接测定样品是否含有β-内酰胺酶类药物。二.实验试剂与材料1 菌种:藤黄微球菌,对青霉素较敏感,有青霉素存在时藤黄微球菌不会生长繁殖(如图)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/05/201405231328_500247_2227357_3.jpg2 试剂及药品1)磷酸盐缓冲液(配药):取8g磷酸二氢钾和2g磷酸氢二钾,用1000ml溶解,121℃高压灭菌15min。2)舒巴坦标准储备溶液:将舒巴坦标准品用磷酸盐缓冲液溶解并定容为10mg/ml。4℃保存,可使用一周。3)舒巴坦标准工作溶液:吸取100ul舒巴坦标准储备溶液到1ml
霉菌毒素是由农产品中不同真菌产生的次级代谢产物,真菌生长于农作物生产和贮藏过程中,能够存活于广泛的气候条件下。由于这些有毒的代谢物对人类和动物都有严重毒害作用,农产品中霉菌毒素造成的污染逐渐成为全球性的严重问题。其毒害作用主要包括肾中毒、神经中毒、致癌作用、促雌激素作用、以及抑制免疫系统功效。展青霉素是霉菌毒素的重要一员,又名棒曲霉素,由多种霉菌,尤其是曲霉菌和青霉菌代谢产生。展青霉素对人体的危害很大,导致神经.呼吸和泌尿等系统的损害,使人神经麻痹.肺水肿.肾功能衰竭,并有致癌作用。它主要存在于腐烂的苹果中,而且苹果及其产品中的展青霉素总量被普遍用作苹果产品质量的测量标准。 多项研究表明,展青霉素具有遗传毒性。世界上多个国家已经设立了苹果及其产品中展青霉素的限制标准。世界卫生组织、美国食品药品管理局和欧盟推荐的展青霉素最大浓度分别为:苹果汁50µg/L、苹果酱25µg/kg。欧盟成员国将婴幼儿对展青霉素的最大允许水平设定为:苹果汁和固体苹果产品10µg/kg,包括苹果蜜饯和苹果酱(欧盟委员会章程(EC)1881/2006)。
[em17] 请问一下各位大侠 青霉素G、羟氨苄青霉素、氨苄青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素都有那些性质?其酸碱性pH都等于对少??该用什么方法作前处理才能把他们分开??
青霉素治畜禽病须注意1.青霉素不能与碱性药物配合。在兽医临床中,常见的属于此种错误的配伍,为青霉素与碘胺类钠盐注射液或与碳酸氢钠注射液配伍。 2.青霉素不能与酸性药物配伍。有人把青霉素与土霉素、链霉素一起用蒸馏水溶解,给雏鸡喷雾,治疗传染性支气管炎。这是不对的。因土霉素溶液ph值为2~2.9,属于酸性较强的药物。ph值5以下的酸性药物还有很多,如四环素注射液、肾上腺素注射液、盐酸山梗菜碱注射液、注射用三磷酸腺苷、葡萄糖注射液、氯化钾注射液、氯化钙注射液、山梨醇注射液、甘露醇注射液、注射用促皮质素、杜冷丁注射液、盐酸氯丙嗪注射液、脑垂体后叶注射液、马来酸麦角新碱注射、催产素注射液等,都不可与青霉素配伍。 3.青霉素不能与氢化可的松注射液配伍。2%以下的醇,对青霉素无破坏作用;高于2%时,则有轻微破坏作用;25%以上的醇,可使青霉素失效。 4.青霉素不能与配伍后发生浑浊、沉淀和降低效价的注射剂配伍。如硫酸卡那霉素注射液、注射用辅酶a、注射用细胞色素c、氨茶碱注射液、盐酸异丙嗪注射液、注射用乳糖酸红霉素、注射用硫喷妥钠等。 5.青霉素不能与高浓度的盐酸普鲁卡因溶液配伍。盐酸普鲁卡因的最适宜浓度为0.25%~0.5%。浓度过高,则起相反作用。 6.单胃动物如猪、驴、骡、马,不能口服青霉素。多胃动物如牛和羊,可以口服青霉素。 7.青霉素必须重复使用。否则,那些漏网的和新繁殖的微生物,会产生抗药性,危害更烈。必须每隔4~6小时重复用药1次。用有延缓青霉素在体内作用时间的溶媒(如0.25%~0.5%的盐酸普鲁卡因)溶解青霉素,可每隔8~12小时重复用药1次。 8.家畜发生青霉素过敏反应的抢救。兽医界无作过敏试验的规定,用药前先询问畜主患畜有没有青霉素过敏史,如有,就改用其他抗菌素;如无,在注射青霉素后,要至少观察半小时,无反应时,方视作安全。家畜发生青霉素过敏,应立即抢救。可用0.1%盐酸肾上腺素注射液,皮下注射。用量:猪、羊、驹、犊0.2~1毫升,牛、马5毫升。也可稀释10倍静注,用量减半。也可静注10%葡萄糖酸钙注射液,猪、羊、驹、犊200毫升,牛、马500毫升。
[table=100%][tr][td=2,1]最近做到GB/T 20755这个标准的时候,遇到了一些问题,其中按照标准使用纯水溶解标准品的时候发现部分标准品不溶,后续使用1比1乙腈水可以溶解;其余标准品仍按照国标的要求用纯水来溶解。后续使用上述配制好的储备液用1+1的乙腈水进行稀释至1ppm,上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]进行优化方法参数,其中发现哌嗪西林、青霉素G、青霉素V、氯唑西林、双氯西林这5个物质在仪器上用1ppm的单标SCAN的时候找不到与国标对应的母离子峰,无法进行下一步优化;另外阿莫西林的优化中366/208这个离子对也没找到;各位老师有什么建议呢?关于流动相的使用是与国标相同,优化时使用的是50mm的C18柱;水相是0.3%乙酸-水;有机相是0.3%乙酸乙腈。使用的标准物质有一些是含盐的,名称和CAS号在下方。阿莫西林三水合物:61336-70-7;氨苄西林三水合物:7177-48-2;哌嗪西林:61477-96-1;青霉素G:61-33-6;青霉素V钾:132-98-9;苯唑西林钠:1173-88-2;氯唑西林钠:642-78-4;萘夫西林钠:7177-50-6;双氯西林:3116-76-5。[/td][/tr][/table]
最近在做抗生素。可是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]ESI+没有办法电离青霉素V和青霉素G。不知道为什么?标准品用甲醇溶解的找不到分子量+1的峰,(国家标准上的)。MSscan出来的也是没有联系的。后来改用70%水30%ACN,还是不行。不知道是不是标准品有问题还是其他原因。四环素类抗生素就电离的很好。请高手指教。
GB/T 21315-2007,动物源性食品中青霉素族抗生素残留量检测方法中的 苯氧乙基青霉素,phenethicillin,现在什么地方有提供啊?以前美国药典里有,但是现在停产了!请高手指点,谢谢!
先和大家唠唠青霉素酶的主要来源:奶牛每到换季容易发作乳腺炎等疾病,往往通过注射抗生素进行治疗。凡经治疗过的乳牛,其牛奶在一定时期内残存着青霉素,而在原奶收购检测时,抗生素超标会拒收,奶户为了私利会人为添加青霉素分解酶。别小看这东东,个人认为危害大着呢:1.青霉素酶的安全性以及是否可以在食品中添加尚未有定论。2.在分解青霉素后,可能引进其他有害物质。3.这种做法纵容了奶牛饲养过程中抗生素的滥用。(这三条都个人主义的看法 仅供参考)一.杯碟法检测原理:采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株,利用舒巴坦特性抑制β-内酰胺酶的活性,并加入青霉素作对照,通过比对加入β-内酰胺酶抑制剂与未加抑制剂的样品所产生的抑菌圈的大小来间接测定样品是否含有β-内酰胺酶类药物。二.实验试剂与材料1 菌种:藤黄微球菌,对青霉素较敏感,有青霉素存在时藤黄微球菌不会生长繁殖(如图)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081621_492377_2227357_3.jpg2 试剂及药品1)磷酸盐缓冲液(配药):取8g磷酸二氢钾和2g磷酸氢二钾,用1000ml溶解,121℃高压灭菌15min。2)舒巴坦标准储备溶液:将舒巴坦标准品用磷酸盐缓冲液溶解并定容为10mg/ml。4℃保存,可使用一周。3)舒巴坦标准工作溶液:吸取100ul舒巴坦标准储备溶液到1ml离心管中,用磷酸盐缓冲液定容,配置成浓度为1mg/ml。4)青霉素标准储备溶液:用磷酸盐缓冲液将青霉素溶解并定容为10mg/ml, 4℃棕色瓶中保存。使用时间根据实验情况而定。5)青霉素标准工作溶液:吸取10ul青霉素标准储备溶液于1ml离心管中,用磷酸盐缓冲液稀释,配置成浓度为0.1mg/ml ,4℃保存,可使用一周。6)生理盐水:称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中, 121 ℃高压灭菌15min。7)B-内酰胺酶标准储备溶液和工作溶液:方法要求16000U/ML(依据实际检验情况定浓度),目前用的是8千单位。如购买的青霉素酶的单位有IU/L,U/L,单位/ML,它们的换算关系是:1IU/L=609U/L=0.609单位/ML.8)无菌水:121℃高压灭菌15min。9)抗生素1号培养基,营养培养基。注:于配制药品的容器如不能高压灭菌,需用75%的酒精进行2-3次的消毒,再用所使用的无菌溶剂(生理盐水和磷酸盐缓冲液)进行2-3次的润洗后再进行药品的配制.3 主要实验器材http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081629_492378_2227357_3.jpg三.实验步骤1.试样处理:把离心管放入微孔中,标记为A、B、C、D,取试样1000ul分别放入A、B、C、D四个1.5ml离心管中,每个样品做三个平行,共12管。同时每次检验应取纯水1ml加入到1.5ml离心管中做对照。如样品为乳粉,则将乳粉按1:10的比例稀释,如样品是酸性乳制品,应调节PH值至6-7后,按顺序加入以下药品后混匀。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081633_492379_2227357_3.jpgA: 5ul青霉素标准工作溶液。B: 25ul舒巴坦标准工作液+ 5ul青霉素标准工作溶液。 C: 25ul β-内酰胺酶标准工作液+ 5ul青霉素标准工作溶液 。D: 25ul β-内酰胺酶标准工作液+ 5ul青霉素标准工作溶液+25ul舒巴坦标准工作液。2.菌悬液的制备1)菌种的制备:将营养琼脂培养基分装到试管中做成斜面,用接种环挑取适量藤黄微球菌在斜面上划线,36 ℃培养22-24h。2)菌悬液的制备:用2ml生理盐水将经过斜面培养的藤黄微球菌洗下,混合均匀,然后将菌悬液以大约2%的比例加入到营养琼脂培养基中。3.检定用平板的制备1) 在无菌培养皿中注入抗生素1号培养基10ml,作为基层培养基,水平静置,待其自然凝固后将皿盖盖好备用.2)2.将灭菌的营养琼脂培养基溶化后在水浴锅中冷却至55℃左右,加入适量的菌悬液,混匀,移取5ml含有浓度为1*108CFU/ml注入铺有基层培养基的培养皿中,均匀摊开,凝固。加入菌悬液的量以能产生17-27mm的抑菌圈为宜。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081639_492380_2227357_3.jpg3).凝固后将皿倒置,用笔在皿上画十字线,将皿平分四份,并标记样品的序列号,与原始记录对应。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081641_492381_2227357_3.jpg4).然后再把皿反转,在每个培养基表面均匀对称放置4个牛津杯。检定平板应为同一批次。放置牛津杯时,必须均匀对称的放置,以免各自产生的抑菌圈有交叉现象。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081642_492382_2227357_3.jpg4. 试样测定 1). 取ABCD四个离心管中的试液各200ul,分别加入到检定平板的四个牛津杯中,每组试验做3 -4个平行样。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081644_492383_2227357_3.jpg2)培养结束后去除牛津杯用游标卡尺精确测量ABCD四个试液的抑菌圈直径。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403081646_492384_2227357_3.jpg四.结果判定取ABCD抑菌圈直径的平均值,纯水空白结果应为A、B、D、均产生抑菌圈;A的抑菌圈与B的抑菌圈相比,差异在3mm以内(含3mm),C的抑菌圈小于D的抑菌圈差异在3mm以上(含3mm),且重复性良好。如此结果则系统成立,可对结果进行如下判定。样品结果B和D均产生抑菌圈,且D-C抑菌圈在以上3mm(含3mm)时,可以判定样品中A和B的抑菌圈差异小于3mm ,且重复性良好的青霉素酶结果为阴性;样品中A和B的抑菌圈差异大于3mm (含3mm) ,且重复性良好的青霉素酶结果为阳性;纯水空白对照品系统成立的情况下,为判定样品结果的前提条件。如果A和B均不产生抑菌圈,
展青霉素(patulin)你知道多少?展青霉素(patulin)又称展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素,它是一由曲霉和青霉等真菌产生的一种次级代谢产物,具有影响生育、致癌和免疫等毒理作用,同时也是一种神经毒素,具有致畸性,对人体的危害很大,导致呼吸和泌尿等系统的损害,使人神经麻痹、肺水肿、肾功能衰竭。展青霉素首先在霉烂苹果和苹果汁中发现,广泛存在于各种霉变水果和青贮饲料中。由于免疫学技术的问题,展青霉素不像其他毒素一样可生产免疫亲和柱,只能用分子固相印迹亲和柱来进行样品的前处理,据悉Pribolab率先攻克技术难关,制成展青霉素Elisa试剂盒,相信不久的将来,会有新的展青霉素检测产品问世。
大家做过乳制品中青霉素类抗生素的谈谈自己的经验以及遇到的各种问题,是用的那种方法,对GB/T 21315-2007 动物源性食品中青霉素族抗生素残留量检测方法-液相色谱-质谱质谱法以及GB/T 22975-2008牛奶和奶粉中阿莫西林、氨苄西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林和双氯西林残留量的测定-液相色谱-串联质谱法这两种方法的检测有什么看法,回收率怎么样?基质干扰明显嘛?样品测定液干净吗?大家共同来探讨一下,分享经验,共同进步!
10,抽取5个版友);中奖名单:sixingxing(注册ID:v2889187)玲儿响叮当(注册ID:jshbhh)mengzhaocheng(注册ID:mengzhaocheng)捌道巴拉巴巴巴(注册ID:v3082413)m3071659(注册ID:m3071659)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604181523_590639_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604181520_590636_1610895_3.png积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================牛奶中青霉素类药物的测定方法:SPE基质:奶制品应用编号:101020化合物:羟氨苄青霉素;邻氯青霉素;双氯青霉素;乙氧萘胺青霉素;氨苄青霉素;苯唑青霉素;苄青霉素;苯氧甲基青霉素;甲氧苯青霉素;苯氧乙基青霉素固定相:ProElut PLS色谱柱/前处理小柱:ProElut PLS 500mg/6mL 30/pkg样品前处理:1、提取 10 mL 样品与20 mL 乙腈混合,10000rpm 下均质1 min,4000 rpm 下离心5 min,收集上清液。取15 mL 提取液(相当于5 mL 样品),35 oC 下减压蒸馏除去乙腈,向剩余的水相加入20 mL 磷酸盐缓冲液*,并用0.1 mol/L NaOH 溶液调节pH 8.5,混匀,待净化。 注:0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液,pH 8.5 2、净化 a 活化: 将6 mL 甲醇、6 mL 水依次加入ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#68005),流出液弃去; b 上样: 将待净化的样品液加入柱中*,流出液弃去; c 淋洗: 依次用3 mL 磷酸盐缓冲液*、3 mL 水淋洗,淋洗液弃去,并将PLS 柱抽干; d 洗脱: 用6 mL 乙腈洗脱,收集洗脱液; e 重新溶解:35 oC 下将洗脱液用氮气吹干,然后用0.05 mol/L 磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0)定容至1 mL,微孔滤膜过滤后,LC-MS/MS 分析 注:样品体积大于柱容积,需分次上样或在PLS 柱上安装60 mL 储液管 (Cat.#4812),适配器 (Cat.#4803) ;0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液,pH 8.5。色谱条件:色谱柱:Platisil ODS 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99503) HPLC应用101025文章出处:P099关键字:牛奶,青霉素,SPE,ProElut PLS,羟氨苄青霉素;邻氯青霉素;双氯青霉素;乙氧萘胺青霉素;氨苄青霉素;苯唑青霉素;苄青霉素;苯氧甲基青霉素;甲氧苯青霉素;苯氧乙基青霉素摘要:适用于牛奶中羟氨苄青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素等10种青霉素类药物的检测。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604180953_590569_1610895_3.jpg图例:1. 羟基苄青霉素;2. 氨苄青霉素;3. 甲氧苯青霉素;4. 苄青霉素;5. 苯氧甲基青霉素;6. 苯唑青霉素;7. 苯氧乙基青霉素;8. 邻氯青霉素;9. 乙氧萘青霉素;10. 双氯青霉素
青蒿素的发现是全球抗疟药物发展史上继奎宁之后的又一里程碑,被誉为“中国神药”。近日,上海又传出喜讯:交大教授张万斌领衔的科研团队,历时7年,首次实现了抗疟药物青蒿素的高效人工合成,使青蒿素可以实现大规模工业化生产。这项科研成果的济世价值在于能使青蒿素更为易得、价格便宜。因为在全球范围内,只有中国部分地区生长的青蒿,才具有工业提取的价值。由于天然植物中青蒿素含量很低,药价昂贵。一吨黄花蒿可以提取6到8公斤青蒿素,每公斤青蒿素达4000至6000元,被称为“天价药”、“贵族药”。现在好了,张万斌团队使用一种特定催化剂,将青蒿酸还原后所得到的二氢青蒿素再次转化,以接近60%的高收率得到青蒿素。该项成果有望解决了困扰医药产业界三十多年的青蒿素高效人工合成重大难题。二、三年后,有望每年把近百万人从死亡线上救出。从发现、提取到人工合成、批量生产青蒿素,中国的科学家作了40年的不懈探索。张万斌团队的功不可没之处在于:把实验室内取得的成果化为大规模工业化生产,这是一大飞跃。青蒿素将投产,使我想到了青霉素。青霉素与青蒿素,一字之差,疗效不同,但其发现和推广应用历程,则有相似之处,但青霉素目前的处境发人深省。青霉素又名盘尼西林。1928年夏季,英国细菌学家弗莱明在一个金黄色葡萄球菌培养皿中发现了它。过了11年,病理学家弗洛里和生物学家钱恩用冷冻干燥法提取了青霉素晶体。1942年批量生产。青霉素的问世,挽救了千百万肺炎、脑膜炎、脓肿、败血症患者的生命。但是,当时青霉素价格极其昂贵。解放前,一支盘尼西林值要用1两黄金。解放后,上海成立了青霉素实验所,1953年5月1日。在上海第三制药厂的1500加仑发酵罐中,我国自行研制的第一批国产青霉素问世。从此,青霉素成为一种价廉物美的抗生素,走进全国各大中小医院。青霉素曾被老百姓亲切地称为“一针灵”。纵然使用青霉素者可能引起皮试的过敏反应,但它的药用价值还是举世公认的。在欧美许多医院里,青霉素还是最权威、最有效的抗生素,被正常地使用着。但是,在时下中国的许多三甲医院里,青霉素已被“淘汰出局”,在医生的处方中难以见到青霉素的名字,医院的药品进货单上也把它抹去。青霉素的被打入冷宫的主要原因是其价格太便宜。其市场价是0.81元一支,出厂价更只有0.6至0.7元钱。但它的兄弟们——同类抗生素的身价,却高出青霉素的数十倍乃至一百倍,如一支头孢他啶要卖到18元—78元不等。有些院长和厂长对青霉素说,医院不是慈善机构,药厂也不是政府的救济部门,在你身上赚不到钞票,只好请你靠边站了。青蒿素有望投入批量生产,从“天价药”成为常用药,这无疑是疟疾患者的福音。但是,目前青霉素的遭遇,值得青蒿素的研制者注意。青霉素从“贵族药”成为一种“平民药”,但现在平民无法使用它。用这样一种势利眼对待青霉素,对不起弗莱明和弗洛里、钱恩,也对不起上海第三制药厂的生产者们。青霉素从发明到普及,科学家们花了80多年时间,将天价药变成了廉价药,随着制药工艺的改进,青霉素的过敏问题也可以解决。而现在某些医院和药厂为了多赚几个钱,却把被誉为“人类治疗细菌性感染的第一武器”的青霉素弃之不用。这是非常可惜的。那么,有没有办法让青霉素重新为成千上万患者服务呢?有的。如果许多公立医院能走出“以药养医”的危局,医生处方不求最贵,而求最有效,处处为病人着想,青霉素也许就能堂堂正正地复出了。
[font=黑体, SimHei]点击链接查看更多:[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-36747.html[/url]展青霉素又称展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素,它是一由曲霉和青霉等真菌产生的一种次级代谢产物,棒曲霉素具有广谱的抗生素特点。展青霉素的毒性展青霉素对人及动物均具有较强的毒性作用,展青霉素对呼吸有妨害作用。[/font][font=黑体, SimHei][color=#0070c0]检测项目[/color][/font][font=黑体, SimHei][/font][font=黑体, SimHei]展青霉素含量检测[/font][font=黑体, SimHei][size=16px][/size][/font][color=#0070c0][font=黑体, SimHei][size=16px]检测范围[/size][/font][/color][font=黑体, SimHei]水果、蔬菜等[/font][color=#0070c0][font=黑体, SimHei][size=16px]检测周期[/size][/font][/color][font=黑体, SimHei][size=16px]:样品测试周期一般为7-15个工作日。[/size][/font][color=#0070c0][font=黑体, SimHei][size=16px]检测费用[/size][/font][/color][font=黑体, SimHei][size=16px]:工程师根据检测项目进行报价。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px][/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px][color=#0070c0]展青霉素检测标准[/color][/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]GB 2761-2017食品安全标准 食品中真菌毒素限量[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]GB 5009.185-2016食品安全标准 食品中展青霉素的测定[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]GB/T 23585-2009预防和降低苹果汁及其他饮料的苹果汁配料中展青霉素污染的操作规范[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px][img=检测流程.jpg]https://img2.17img.cn/pic/kind/20210810/20210810144358_5001.jpg[/img][/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px][/size][/font]
[align=center][img=,450,798]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902281250168777_532_960_3.jpg!w677x1202.jpg[/img][/align][align=center][b]安谱实验带你打通关[/b][/align] 展青霉素,别名棒曲霉素,广泛存在于烂苹果中,具有很强的毒性,对人体有极强的损伤,在2019年的国抽检测项目中榜上有名。国标GB 2761—2011规定了展青霉素的限量值为50μg/kg。 目前食品中展青霉素的检测标准是国标《GB 5009.185-2016 食品安全国家标准 食品中展青霉素的测定》,其方法是:用MAX小柱净化,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]方法检测。安谱实验依据国标方法,运用CNW Poly-Sery MAX小柱(SBEQ-CA3381)和Athena UHPLC C18色谱柱,用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的方法对苹果汁中的展青霉素进行测定,结果稳定可靠,回收率高。[align=center][b]全部装备任你挑[/b][/align][align=center][/align][align=center]一、样品前处理[/align] 取2g苹果汁(如果是浑浊未过滤果汁,7000r/min离心10min去除悬浮物),加入标品(上机浓度50ppb),待净化。[align=center]二、SPE操作过程[/align] 活化:6mL甲醇 平衡:6ml水 上样:待净化液 淋洗:3mL乙酸铵溶液,3mL水,抽干 洗脱:4mL甲醇 浓缩:在洗脱液中加入20 μL乙酸,置40℃下用氮气缓缓吹至近干,用乙酸溶液定容至1.0mL,涡旋30s溶解残留物,0.22 μm 滤膜过滤,收集滤液于进样瓶中以备进样。[align=center]三、色谱条件[/align] [b] 液相条件:[/b] 色谱柱:Athena UHPLC C18(2.1*50mm,5μm); 流动相:乙腈:水=5:95,等度洗脱; 流速:300μL/min; 柱温:30oC; 进样量:10μL; [b]质谱参数:[/b] Ionization Mode: ESI- Capillary Voltage: 4000V Gas Temp:350oC Gas flow:8 L/min Nebulizer:35 psi[align=center]四、实验谱图[/align][align=center][img=,600,208]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902281258193638_3095_960_3.png!w807x281.jpg[/img][/align][align=center]▲50ppb标准品谱图(基质配标)[/align][align=center][/align][align=center][img=,600,213]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902281258451974_9937_960_3.png!w800x285.jpg[/img][/align][align=center]▲苹果汁谱图(空白)[/align][align=center][/align][align=center][img=,600,211]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902281259199259_8621_960_3.png!w802x283.jpg[/img][/align][align=center]▲苹果汁谱图(加标 50ppb)[/align][align=center]五、实验数据[/align][align=center][img=,445,46]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902281300177816_24_960_3.png!w445x46.jpg[/img][/align][b]实验结论:[/b]苹果汁中含有1.6μg/kg的展青霉素,符合国标限量标准(50μg/kg)。[align=center]六、实验耗材[/align][align=center][img=,527,813]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902281301189169_8438_960_3.png!w527x813.jpg[/img][/align]
10,抽取5个版友);中奖名单:zgx3025(注册ID:v2844608)dyd3183621(注册ID:dyd3183621)dahua1981(注册ID:dahua1981)捌道巴拉巴巴巴(注册ID:v3082413)莫名其妙(注册ID:moyueqiu)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/05/201605311513_595484_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/05/201605311513_595485_1610895_3.png积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================动物组织、内脏中青霉素类药物的测定方法:SPE基质:动物组织应用编号:101109化合物:羟氨苄青霉素;氨苄青霉素;甲氧苯青霉素; 苄青霉素;苯氧甲基青霉素;苯唑青霉素; 苯氧乙基青霉素; 邻氯青霉素; 乙氧萘青霉素; 双氯青霉素固定相:ProElut PLS色谱柱/前处理小柱:ProElut PLS 500mg/6mL 30/pkg样品前处理:1、提取 5 g 样品与20 mL 90% 乙腈水溶液混合,10000 rpm 下均质2 min,4000 rpm 下离心5 min,收集上清液,向沉淀加入10 mL 90% 乙腈水溶液重复提取一次,合并提取液。35 ℃ 下减压蒸馏除去提取液中的乙腈,然后向剩余的水相中加入20 mL 磷酸盐缓冲液*,并用0.1 mol/L NaOH 溶液调节pH 8.5, 混匀,待净化。注:0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液,pH 8.5 2、净化a 活化: 将6 mL 甲醇、6 mL 水依次加入ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#68005),流出液弃去;b 上样: 将待净化的样品液加入柱中*,流出液弃去;c 淋洗: 依次用3 mL 磷酸盐缓冲液*、3 mL 水淋洗,淋洗液弃去,并将PLS 柱抽干;d 洗脱: 用6 mL 乙腈洗脱,收集洗脱液;e 重新溶解:35 oC 下将洗脱液用氮气吹干,然后用磷酸盐缓冲溶液* 定容至1 mL,微孔滤膜过滤后,LC-MS/MS 分析注: 由于样品量较大,需分次加样或在小柱上连接60 mL 储液管 (Cat.#4811),适配器 (Cat.#4803) c 中使用的磷酸缓冲溶液为0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液,pH 8.5, e 中使用的磷酸缓冲盐为0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液,pH 7.0色谱条件:色谱柱:Platisil ODS 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99503) 流动相:缓冲溶液+ 乙腈,梯度 流速:1.0 mL/min 进样量:20 μL 柱温:30 ℃ 检测器:串联质谱,ESI+,MRM 模式监测文章出处:P091关键字:动物组织,内脏,青霉素,SPE,ProElut PLS ,羟氨苄青霉素;氨苄青霉素;甲氧苯青霉素; 苄青霉素;苯氧甲基青霉素;苯唑青霉素; 苯氧乙基青霉素; 邻氯青霉素; 乙氧萘青霉素; 双氯青霉素摘要:适用于禽类、畜类组织和内脏中青霉素类药检测谱图:http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/p37%20copy.png图例:1. 羟氨苄青霉素;2. 氨苄青霉素;3. 甲氧苯青霉素;4. 苄青霉素;5. 苯氧甲基青霉素;6.苯唑青霉素;7. 苯氧乙基青霉素;8. 邻氯青霉素;9.乙氧萘青霉素
在GMP法规中,对一些药物的生产厂房设施做出了特殊的规定,跟小伙伴儿们分享一下,青霉素类和头孢类两者之间有没有本质的区别。抗生素是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)产生、能抑制或杀灭其他微生物的物质。抗生素分为天然品和人工合成品,前者由微生物产生,后者是对天然抗生素进行结构改造获得的部分合成产品,头孢是属于抗生素类。这两者都属于β-内酰胺类抗生素。头孢菌素类(Cephalosporins)是由冠头孢菌培养液中分离的头孢菌素C,经改造侧链而得到的一系列半合成抗生素。其抗菌谱广,对厌氧菌有高效;引起的过敏反应较青霉素类低;对酸及对各种细菌产生的β-内酰胺酶较稳定;作用机理同青霉素,也是抑制细菌细胞壁的生成而达到杀菌的目的.属繁殖期杀菌药。(头孢菌素是青霉素近源的头孢菌属的真菌发酵液离而来。)青霉素一般是静脉滴注的,药效强,但抗菌谱窄,且半衰期短。1.笫一代头孢菌素第一代头孢菌素是60年代初开始上市的。从抗菌性能来说,对第一代头孢菌素敏感的菌主要有β-溶血性链球菌和其他链球菌、包括肺炎链球菌(但肠球菌耐药),葡萄球菌(包括产酶菌株)、流感嗜血杆菌、大肠杆菌、克雷伯杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌、志贺菌等。不同品种的头孢菌素可以有各自的抗菌特点,如头孢噻吩对革兰阳性菌的抗菌作用较优,而头孢唑林则对某些革兰阴性菌有一定作用。但是,第一代头孢菌素对革兰阴性菌的β-内酰胺酶的抵抗力较弱,因此,革兰阴性菌对本代抗生素较易耐药。第一代头孢菌素对吲哚阳性变形杆菌、枸橼酸杆菌、产气杆菌、假单胞菌、沙雷杆菌、拟杆菌、粪链球菌(头孢硫脒除外)等微生物无效。本代抗生素中常用品种有头孢唑林、头孢氨苄、头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢克罗等。其中除头孢唑林只能供注射外,其他的均可用于口服,也称口服头孢。头孢噻吩、头孢噻啶、头孢来星、头孢乙腈、头孢匹林等均已少用或不用。 2.笫二代头孢菌素第二代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能与第一代相近或较低,而对革兰阴性菌的作用较为优异,表现在:(l)抗酶性能强一些革兰阴性菌(如大肠杆菌、奇异变形杆菌等)易对第一代头孢菌素耐药。第二代头孢菌素对这些耐药菌株常可有效。(2)抗菌谱广第二代头孢菌素的抗菌谱较第一代有所扩大,对奈瑟菌、部分吲哚阳性变形杆菌、部分枸橼酸杆菌、部分肠秆菌属均有抗菌作用。第二代头孢菌素对假单胞属(铜绿假单胞菌)、不动杆菌、沙雷杆菌、粪链球菌等无效。临床应用的第二代头孢菌素主要品种有头孢孟多、头孢西汀(美福仙),头孢呋新(西力欣),头孢克罗等。3.笫三代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能普遍低于第一代(个别品种相近),对革兰阴性菌的作用较第二代头孢菌素更为优越。(1)抗菌谱扩大第三代头孢菌素的抗菌谱比第二代又有所扩大,对铜绿假单胞菌、沙雷杆菌、不动杆菌、消化球菌、以及部分脆弱拟杆菌有效(不同品种药物的抗菌效能不尽相同)。对于粪链球菌、难辨梭状芽胞杆菌等无效。(2)耐酶性能强对第一代或第二代头孢菌素耐药的一些革兰阴性菌株,第三代头孢菌素常可有效。常用有:头孢哌酮(先锋必素)、头孢三嗪(罗塞秦、菌必治)、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等。 4.笫四代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的作用弱,不能用于控制金黄色葡萄球菌感染。近年来发现一些新品种如头孢匹罗(Cefpirome)等,不仅具有第三代头孢菌素的抗菌性能,还对葡萄球菌有抗菌作用,称为第四代头孢菌素。关于第一至第四代的划分不仅适用于头孢菌素,其他的一些β-内酰胺抗生素也可按此分代。常用有拉他头孢、头孢匹罗、氨曲南等。1.青霉素和头孢菌素都属于β-内酰胺类抗生素。2.青霉素是青霉菌培养液中提取精致获得的,是一种窄普抗生素,其基本结构是母核6--氨基青霉烷酸(6-APA),其中β--内酰胺环对抗菌活性起重要作用。3.头孢菌素是一类来自头孢菌的广谱抗生素。4.头孢菌素和青霉素类都具有相同的β-内酰胺环,所不同的是头孢菌素系7--氨基头孢烷酸(7--ACA)的衍生物,青霉素由6--氨基青霉烷酸(6-APA),两者的区别只是青霉素母核中五元噻唑环换成头孢菌素的六元双氢噻嗪环。
各位,本人按照《农业部781号公告-12》,在测定牛奶中青霉素时,需要配制含氯化汞的衍生试剂。我将三氮唑的溶液和氯化汞的溶液混合在一起后,出现白色片状沉淀,(混合之前都很透明)调节pH至9.0后,只能使沉淀减少一些,但不能完全溶解。请问各位,这个实验现象对吗?而且,我们用这个衍生化试剂衍生标准溶液后,效果非常差,几乎没有吸光度明显增强的现象,所以估计是衍生化试剂配的不对,请高人指点一下。在此感谢了。
请注意,这并不是因为解决抗生素的滥用才使青霉素量急剧下滑,取而代之是头孢类抗生素。感冒发烧或者扁桃体发炎就打青霉素,这曾是几代国人的集体记忆。因为疗效明显而且价格便宜,上个世纪,青霉素曾被老百姓亲切地称为“一针灵”。 但近几年,在诊所、医院里,青霉素却难觅踪影,取而代之的是头孢等价格较贵的抗生素药物。是因为青霉素有过敏反应,医生不敢用?还是因为太便宜,医生不愿用?抑或是效果不好,患者不想用?在诸多疑问背后,青霉素看似已经穷途末路。而省卫生厅有关人士表示,青霉素仍在我国基本药物目录内,它并不会轻易消失。 反映 社区服务站不见青霉素 57岁的陈女士感冒了,吃了几天药没见好转,她决定去家附近的河南豫财社区卫生服务站输点青霉素,“在俺们老家,只要感冒了,输青霉素可管用”。陈女士来自驻马店农村,半年前来到郑州,照顾小孙子。 但令陈女士遗憾的是,她赶到卫生服务站后,工作人员告诉她,没有这个药,后经邻居介绍,她赶到金水区总医院才最终输上青霉素。 “为什么社区服务站里没有青霉素呢,是药有问题了还是其他什么原因?”面对记者,陈女士发出一连串的疑问。 调查 医疗机构内青霉素用量急剧下滑 带着这个疑问,昨天,记者赶到河南豫财社区卫生服务站,接诊的是一女工作人员,刚一开口问青霉素,她立马回答“没有”。 “为什么没有呢?” “卫生局不让用,你去问问郑州市卫生局。”面对疑问,女工作人员头也不回地回答。 随后,记者拨通了郑州市卫生局妇社处相关负责人电话,该负责人说,局里没下发过类似的通知。 虽然没有文件限制,但是记者走访发现,在郑州各大小医院里,青霉素都“日渐灭绝”。 金水区总医院院长周国平说,他们医院一个月的青霉素用量大概为5000支,约占到抗生素类药品的1/10,而这在各个医院里还算多的,大医院里的用量则更少。但青霉素在上个世纪七八十年代却是风光无限,单以金水区总医院来讲,那时,青霉素可以占到所有抗生素用量的八九成。 为啥难觅青霉素? 1为了安全 郑州西区一家社区卫生服务中心负责人告诉记者,青霉素有过敏反应,患者必须在有抢救能力的大型医院经过抢救才有脱险的可能,一旦抢救不及时,可能会引起休克性死亡。 “在目前医患关系不是特别和谐的情况下,医生为了避免麻烦,一般不会主动给病人开青霉素。”该负责人说,遇到病人主动要求用青霉素,她们要询问病人有无过敏史,然后进行“皮试”,最后才使用。但在一些小的社区卫生服务站,由于抢救设施不完备,他们便不再使用青霉素。 2为了耐药性 在周国平看来,青霉素日渐被医生所抛弃,有着另外一个重要原因,那就是耐药性问题。 “上个世纪70年代,病人每次药量只需20万到40万单位,80年代变成80万单位,90年代变成400万单位,而现在需要800万单位甚至更多。”周国平说,药量不断增大说明青霉素所对抗的细菌力量不断强大。 河南中医一附院药学教授王又红对此表示认同:“任何一种抗生素在使用一段时间后,都会产生耐药菌。” 3为了利润 除了用药安全外,采访中,谈及青霉素的“失宠”,一些医生和专家还提到了另外一个原因:青霉素便宜利润少。 “一支青霉素8毛多钱,一支头孢要20多元,同是加价15%,你算算差价有多大。”郑州一家医院的医生给记者算了一笔账,如果病人感冒需要输液,青霉素输一天不到10元,但是输一天头孢要几十元甚至上百元。在此情况下,医院当然不愿意用青霉素了。 声音 青霉素不会消失 既然有着这么多因素存在,青霉素会逐渐淡出市场并进而消失吗? “青霉素应该不会消失。”据周国平介绍,青霉素用量减少,是全国普遍的现象。但青霉素物美价廉,对于那些平时使用抗生素较少的患者来说,还是能“药到病除”。 省卫生厅规财处副处长李红星说,青霉素仍在我国基本药物目录内,在政府举办的基层医疗机构内,青霉素是必备药。 对于青霉素的过敏问题,郑州大学药学院副院长张振中表示,青霉素过敏不是说青霉素本身的成分让人过敏,而是在生产过程中产生的一种叫青霉噻唑的杂质会让人过敏。 在张振中看来,随着药厂工艺的改进,这种杂质肯定会被很好地控制,这样一来,过敏问题就可以避免了。 建议 不要滥用抗生素 虽说青霉素仍会存在,而且便宜,但也不能随便使用,因为它也是一种抗生素。 据统计资料显示,我国为抗生素使用量最大的国家。在欧美,不到万不得已,医生绝不给患者使用抗生素类药物,而在我国,医生动辄就会开出抗生素类药物。 王又红说,除了人体主动接受抗生素之外,还有一些被动接受抗生素的例子。例如一些水产养殖企业,为了防止鱼、虾、蟹细菌感染,就在饲料中添加抗生素,而这些水产品被人们食用时,也摄入了不少抗生素。 “国家相关部门和老百姓应该联合起来,共同控制抗生素滥用问题,否则任其发展下去,某一天会出现无药可治的局面。”周国平建议,能不吃药就不吃药,能吃药绝不打针,能打针绝不输液。 相关链接 青霉素的前世今生 自1928年,英国细菌学家弗莱明发现青霉素之后,大半个世纪以来,青霉素拯救了千百万肺炎、脑膜炎、脓肿、败血症患者的生命。第二次世界大战时,青霉素得以大量生产,已有足够的青霉素用来及时抢救众多的伤病员。青霉素的出现,曾轰动世界,它的发现者弗莱明也因此获得诺贝尔奖。
山楂制品中展青霉素的测定 跑完板之后如何用薄层色谱来扫描定量呢?
展青霉素加外标没有回收,展青霉素[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]内标跑不出来,请问为啥
展青霉素(patulin)又称展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素,它是一由曲霉和青霉等真菌产生的一种次级代谢产物,具有影响生育、致癌和免疫等毒理作用。由于免疫学技术的问题,展青霉素不像其他毒素一样可生产免疫亲和柱,只能用分子固相印迹亲和柱来进行样品的前处理,当样品量较大,又不需要过分精确定量是使用分子固相印迹亲和柱费时费力而且花费也不比较大,为此Pribolab公司率先研制成功PriboFastR展青霉素Elisa试剂盒,该试剂盒性能稳定,操作简单,多个样本可同时出结果,极大地提高了检测效率。
科技日报讯 (记者王小龙)美国南卡罗莱纳州立大学的科学家刚刚发现了一种新的方法,不但能使青霉素——这位抗生素名将重拾昔日风采,还可能会让细菌界新近出现的“大反派”——超级细菌闻风丧胆。相关论文发表在《美国化学学会会刊》上。 青霉素,20世纪的科学奇迹之一,是第一种能够治疗人类疾病的抗生素,拯救过亿万人的生命,可谓是战功赫赫,如今在与细菌的战斗中却屡屡败下阵来。“青霉素老矣,尚能饭否”的非议也随之而起。 青霉素曾经在治疗金黄色葡萄球菌感染中能药到病除,但1960年代后,金黄色葡萄球菌变异成了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),连青霉素也无能为力了。如今MRSA感染已经成为严重的公共卫生问题,该病菌对常用的杀菌药物——抗生素具有极强的抵抗能力。面对这种病菌,人们几乎无药可用。 青霉素类药物的灭菌效果主要来自于分子核心,一种被称为β-内酰胺的环状四元环酰胺。β-内酰胺是青霉素家族中最常见的一种结构,是青霉素的合成、半合成衍生物以及其他相关分子共同的结构元件。常见的药物阿莫西林、氨苄西林和头孢唑啉都在此列。 这种结构很不讨细菌家族的喜欢,因为它极大阻碍了它们通过细胞分裂进行繁殖的能力。在与抗生素攻防战中,细菌们逐渐进化出了多种耐药机制。其中的一个“必杀技”就是合成和释放β-内酰胺酶,这种酶能够破坏抗生素中普遍存在的β-内酰胺结构,让抗生素失去杀菌效果。 物理学家组织网4月15日(北京时间)报道称,针对这个问题,南卡罗莱纳州立大学化学系和纳米中心的唐传丙(音译)教授所带领的研究团队开发出了一种具有聚合物保护机制的“加强版”抗生素。实验显示,这种名为二茂钴阳离子金属酶的物质大大减缓了β-内酰胺酶对硝噻吩样品中β-内酰胺类结构的破坏。来自该校医学院和阿诺德公共卫生学院的两支跨学科团队也分别证实了这一结果。 研究人员还发现这种金属酶自身也具有很强的抗菌性,实验显示它能裂解细菌细胞而不伤害人体红细胞。经过处理后,这种聚合物可以做到完全无毒,目前已在人体细胞实验中获得了证实。 唐传丙表示,虽然该项目距离临床应用还有很长的一段路要走,但仍然势在必行。因为由“超级细菌”引发的感染问题正在日益严峻。他们希望,通过这一方法不但能制造出新的药物,还能对传统抗生素进行改造,让它们重振雄风。 总编辑圈点: 发现青霉素能抑制细菌,运气必不可少。假如弗莱明当年勤快一点,把实验器皿给洗了,这件“大规模杀伤性武器”仍将多年不为人知。而科学家新研制出类青霉素,就不依赖幸运女神了。化学家们事先了解了青霉素威力所在,拟定几种可能的结构进行实验。这种开发模式类似于转基因工程,其产品都是自然界不存在的品种,只不过功能片断从基因碱基换成了化学环链。化学家真有本事!他们的小小进步,可能会挽救几百万人的生命。来源:中国科技网-科技日报 2014年04月16日
[url=https://www.instrument.com.cn/download/shtml/820257.shtml][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][b]GB 5009.185-2016 [font=宋体]食品安全国家标准 食品中展青霉素的测定[/font][/b][/size][/font][/url][font=宋体][size=10.5000pt]标准解读[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]包含方法的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果表述等主要技术内容。适用于食品(果汁饮料、果酒、果酱、果干及薯类制品等)中展青霉素的测定和确证。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](一)原理[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]澄清液体样品(果酒样品需[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]除[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]去乙醇)直接固相萃取净化;混浊液体样品和固体样品先用果胶酶水解,再以乙酸乙酯提取,吹干浓缩后固相萃取净化,液相色谱[/font]-[font=宋体]质谱[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]质谱法测定,外标法定量。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](二)试剂及仪器[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]液相色谱仪[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]:[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]Agilent 1200-6410 LC/MS[font=宋体],[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]色谱柱:[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]ACQUITY UPLC HSS T3 1.8[font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]m[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt];[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]柱[/font] [font=宋体]温:[/font]30 [font=宋体]℃;[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]进样量:[/font]10 μL[font=宋体];流速:[/font][font=Times New Roman]0.[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]2[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]mL/min[font=宋体];流动相:[/font][font=Times New Roman]A[/font][font=宋体]:纯水 [/font][font=Times New Roman]B[/font][font=宋体]:[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]甲醇[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt] [font=宋体]梯度洗脱;[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]Iron Source: ESI[/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]-[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体];[/font]Capillary: [/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]4 [/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]kV[font=宋体];[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]Fragmentor[/size][/font][font='Times New 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Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]。[/font][/size][/font][img=,490,74]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010546570107_6256_2166779_3.png!w490x74.jpg[/img][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]阴离子交换柱:[/font]Thermo HyperSep Retain-AX[font=宋体]固相萃取柱[/font][font=Times New Roman],3mL/60mg [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]上机工作液(临用现配)[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体]:[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]移取[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]5[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt].0 mL[font=宋体],[/font][font=Times New Roman]1.0 [/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]μg/mL[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体]展青霉素[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]标准溶液至[/font]10 mL[font=宋体]容量瓶中,用[/font][font=Times New Roman]pH[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]4.0[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]水定容,混匀,浓度为[/font]0.[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]5[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]μg/mL[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](三)[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]分析步骤[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]取混合均匀的样品[/font]4.0 g[font=宋体],加[/font][font=Times New Roman]50 [/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]μ[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]L[font=宋体]果胶酶,[/font][font=Times New Roman]4 mL[/font][font=宋体]水混匀,在[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]℃下酶解[/font][font=Times New Roman]2 h,[/font][font=宋体]放置室温后,[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体]加[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]入[/font]20 [/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mL[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]乙酸乙酯,涡旋提取[/font]1 min[font=宋体],于[/font][font=Times New Roman]4000 r/min[/font][font=宋体]离心[/font][font=Times New Roman]5 min[/font][font=宋体],取上清液至鸡心瓶中,[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]℃旋转蒸干[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]加[/font][font=Times New Roman]pH[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]4.0[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]水[/font]3 mL[font=宋体]洗脱(清汁样品不需要酶解、提取,直接过柱),过阴离子交换柱(使用前用[/font][font=Times New Roman]3 mL[/font][font=宋体]甲醇、[/font][font=Times New Roman]3 mL[/font][font=宋体]水活化),[/font][font=Times New Roman]2 mL [/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]5[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mmol/L[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]乙酸铵溶液、[/font]1 mL[font=宋体]水淋洗,抽干;弃去淋洗液;[/font][font=Times New Roman]2 mL[/font][font=宋体]甲醇洗脱,收集洗脱液于氮吹管中,加[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]滴冰乙酸,[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]℃氮气吹干,[/font][font=Times New Roman]2 mL pH[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]4.0[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]水定容洗脱,过水系滤膜,上机测试。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]说明[/font][font=宋体]:[/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体] 展青霉素在碱性条件下不稳定[/font][font=宋体];[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]GB 5009.185-2016果胶酶(液体):活性≥1500U/g。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]展青霉素在反相C18柱上保留较弱,检测时将色谱柱改为对极性化合物保留更强的HSS T3 1.8μm柱。[/font][font=宋体]4、[/font][font=宋体]对饮料清汁样品的前处理,[/font][font=宋体]采用[/font][font=宋体]直接固相萃取净化法,方法简单、安全、可操作性强、结果可靠。[/font][font=宋体]饮料混汁和果酱这样的试样,需要先将样品中的果胶累物质以果胶酶水解,以便于展青霉素能充分的被提取,经过实验发现,采用室温酶解果胶、乙酸乙酯萃取即可将展青霉素充分提取出,此前处理方法操作简单、安全、结果可靠。[/font][font=宋体]果干这类固体试样的试样,需要通过充分均质粉碎才能保证结果的可靠性,经过实验发现,果干类试样要粉碎粉状,用水充分浸泡后才能保证果胶酶能充分接触细胞壁这类的果胶物质,保证展青霉素完全释放出来,从而保证结果的准确性和重现性。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体][img=,690,494]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010550585807_4499_2166779_3.png!w690x494.jpg[/img][img=,690,472]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551119814_8081_2166779_3.png!w690x472.jpg[/img][img=,690,509]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551270460_418_2166779_3.png!w690x509.jpg[/img][img=,690,361]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551433257_2654_2166779_3.png!w690x361.jpg[/img][img=,690,281]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551566256_190_2166779_3.png!w690x281.jpg[/img][img=,690,318]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552115038_7049_2166779_3.png!w690x318.jpg[/img][img=,690,364]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552196545_9998_2166779_3.png!w690x364.jpg[/img][img=,690,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552301544_3508_2166779_3.png!w690x426.jpg[/img][img=,690,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552394129_8202_2166779_3.png!w690x424.jpg[/img][/font][/size][/font][font=宋体]检测展青霉素时须注意以下几个方面:[/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt]1、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt] 展青霉素在碱性条件下不稳定[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt];[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]GB 5009.185-2016果胶酶(液体):活性≥1500U/g。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]3、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]展青霉素在反相C18柱上保留较弱,检测时将色谱柱改为对极性化合物保留更强的HSS T3 1.8μm柱。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]4、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]对饮料清汁样品的前处理,[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]采用[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]直接固相萃取净化法,方法简单、安全、可操作性强、结果可靠。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]饮料混汁和果酱这样的试样,需要先将样品中的果胶累物质以果胶酶水解,以便于展青霉素能充分的被提取,经过实验发现,采用室温酶解果胶、乙酸乙酯萃取即可将展青霉素充分提取出,此前处理方法操作简单、安全、结果可靠。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]果干这类固体试样的试样,需要通过充分均质粉碎才能保证结果的可靠性,经过实验发现,果干类试样要粉碎粉状,用水充分浸泡后才能保证果胶酶能充分接触细胞壁这类的果胶物质,保证展青霉素完全释放出来,从而保证结果的准确性和重现性。[/size][/font][/font]
中科院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所郑之明研究员及其科研团队承担的国家863课题围绕“形态基因-代谢活性-产率”的研究思路,将RNA干扰技术与形态代谢工程相结合,在产黄青霉形态代谢工程研究方面取得重要进展。 产黄青霉( Penicillium chrysogenum)是工业上用于发酵生产青霉素的重要真菌。作为丝状真菌,产黄青霉一般是通过菌丝延伸和分枝进行生长,但具体调控机制尚未完全了解。 菌丝形态差异直接影响青霉素发酵效价,这已成为工业上的共识。几丁质作为真菌细胞壁的主要成分,在决定顶端生长、分枝以及细胞壁分化等形态变化的相关过程中居核心地位。技术生物所项目组采用调控几丁质合成酶表达量、细胞壁几丁质含量、发酵过程中菌丝体形态,实现促进次生代谢产物的技术途径。 在郑之明指导下,博士研究生刘会将III类几丁质合成酶CHS4基因选为目的基因,构建干扰载体以研究chs4的基因功能。反转录PCR结果显示,各转化株中,chs4基因沉默的程度有所不同。摇瓶发酵发现,突变株与原始菌形态差异明显,其生长缓慢,菌丝短、分支多,所有转化株的孢子产生率相对于原始菌都有明显下降,这暗示着chs4在孢子形成中有重要作用。 放大发酵发现,大多数突变株菌丝生长较原始菌短小,膨胀、分支数增加,进入发酵后期,菌丝发生缠绕形成菌丝团甚至菌丝球。在一定范围内,青霉素产量与菌丝团紧密度呈正相关,与chs4表达量呈负相关,其中,干扰突变株PcRNAi2-1青霉素产量比原始菌提高41%。研究人员由此推断,chs4基因沉默影响了产黄青霉形态,使菌丝体发生短小、膨胀、分支增加等变化,而此种形态更有利于菌丝聚集成菌球,进一步降低了发酵液粘度,有利于物质传递,提高青霉素产量。 相关研究论文发表在Applied Microbiology and Biotechnology及Biotechnology Letters。文章评审人认为通过chs4影响菌丝体形态,尤其是分支数增加,是获得青霉素高产突变菌株一种有效、实用的研究思路。 论文链接:http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00253-012-4581-3 http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs10529-012-1099-9http://www.cas.cn/ky/kyjz/201301/W020130105533542340753.jpg沉默突变株发酵过程形态与产率变化