干酪乳杆菌假植物亚种

求助高手帮忙一样品中含有鼠李糖乳杆菌和植物乳杆菌，其中鼠李糖乳杆菌占优势，比例较大，如用什么样的培养基较合适

如题，请问有没有什么培养基能将植物乳杆菌和屎肠球菌区分出来？或者什么方法也可以。在MRS培养基上能区分出来吗？能分别计数吗？

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包**头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～**5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

昆虫病原细菌广泛存在自然界，在不同的环境条件下，对昆虫数量的调节起着重要的作用。其中特别是某些芽孢杆菌已发展成为微生物杀虫剂，具有控制农林害虫的巨大潜力，是一种很有发展前途的防治害虫的新途径，在综合防治中越来越引起人们的重视。 自从19世纪末期开始研究家蚕、蜜蜂细菌病害的近一百年间，发现并被描述的昆虫病原细菌约有90多个种和亚种，它们大多属于真细菌纲（Eubacteria）的芽孢杆菌科（Bacilliacene）、假单孢菌科（Pseudomonadacea）和肠杆菌科（Enterobacteriaceae）。从防治害虫的角度来说，在这三科中以芽孢杆菌科最为重要。此科包括有两个属：芽孢杆菌属（Bacillus）和芽孢梭菌属（Clostridium）。在芽孢杆菌属中的乳状病芽孢杆菌（Bac.popillia）、缓死芽孢杆菌（Bac.lentimorbus）、苏云金芽孢杆菌（Bac.thuringiensis）的某些亚种以及球形芽孢杆菌（Bac.spuericus）,目前在国内外均已发展成为防治农林害虫及卫生害虫的微生物杀虫剂。而且，迄今为止，昆虫病原细菌的主要研究力量也仍然集中在这些细菌上。 但是在这些众多的病原细菌中，真正能够开发成为一种具有实际应用价值杀虫剂的却并不多，目前应用最广泛的主要是形成芽孢的病原细菌。如乳状病芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64035]苏云金芽孢杆菌[/url]

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～4．5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

11月15日，据《每日邮报》网站报道题：大多数糖变为生物柴油？肠胃中的大肠杆菌可能会在将植物变为无限的生物燃料方面发挥关键作用。 生物柴油常被誉为可能减轻我们依赖矿物燃料的解决之道。 用植物或用过的烹调油制成的生物柴油较为浓稠，化学性质与我们目前使用的矿物燃料相似，因此，易于在大型引擎中使用。 火车、汽车甚至飞机已经在使用这种燃料。 但是，大多数使用生物柴油的交通工具用的是经过再加工的烹调油———这种油过于昂贵和稀少，无法大规模商用。 为了让生物柴油真正产生影响力，必须使之直接来自植物。 如今，美国斯坦福大学的研究人员说，产生廉价而且基于植物的生物柴油的化学过程可能即将被发现。 最近用大肠杆菌进行的实验表明，这种细菌可能是关键所在。大肠杆菌在哺乳动物的肠道内很常见，有些菌株会引起食物中毒。

可用于食品的菌种名单 名称 拉丁学名 一 双歧杆菌属 Bifidobacterium 1 青春双歧杆菌 Bifidobacterium adolescentis 2 动物双歧杆菌（乳双歧杆菌） Bifidobacterium animalis （Bifidobacterium lactis） 3 两歧双歧杆菌 Bifidobacterium bifidum 4 短双歧杆菌 Bifidobacterium breve 5 婴儿双歧杆菌 Bifidobacterium infantis 6 长双歧杆菌 Bifidobacterium longum 二 乳杆菌属 Lactobacillus 1 嗜酸乳杆菌 Lactobacillus acidophilus 2 干酪乳杆菌 Lactobacillus casei 3 卷曲乳杆菌 Lactobacillus crispatus 4 德氏乳杆菌保加利亚亚种 （保加利亚乳杆菌） Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus （Lactobacillus bulgaricus） 5 德氏乳杆菌乳亚种[

培养基及成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 [Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml [Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌） 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基） Peptone（蛋白胨） 10g Yeast extract （酵母膏） 5g Glucose （葡萄糖） 1g Distilled water （蒸馏水） 1L 8. Glycerol Agar （甘油琼脂） Peptone （蛋白胨） 5g Beef extract （酵母膏） 3g Glycerol （甘油） 20g Top water （自来水） 1000ml Agar （琼脂） 15g pH 7.0-7.2 9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9 Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml Mannitol （甘露醇） 10g Agar （琼脂） 15g Distilled water （蒸馏水） 800ml pH 7.2 [Note]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

文/李莎（华测检测） 鲜乳能够由液态转化为凝固态的发酵乳，并产生令人心怡的风味和丝滑的口感，这华丽的转变和其中的奥秘离不开微小的生命——乳酸菌。传统的酸奶就是由嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌混合发酵而成的。[b]乳酸菌简介[/b] 乳酸菌是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。除极少数外，绝大部分都是人体内不可缺少的且具有重要生理功能的菌群，广泛存在于人体的肠道中。乳酸菌具有调节肠道微生态、促进营养成分在肠道的消化吸收、降低血清中的胆固醇含量、缓解高血压以及抗肿瘤作用等诸多益生功能，其分泌的物质如细菌素、胞外多糖、胞外糖苷酶等更是对机体健康有益的。 乳酸菌已经在食品发酵、医药、饲料等领域中长期应用。特别是在食品发酵领域，乳酸菌的品质和性能直接决定发酵乳品质的好坏。不同性能的乳酸菌能够产生不同黏度、风味和生理功能的发酵乳。乳酸菌能够利用鲜乳中的蛋白质进行生产繁殖，并产酸、酯、游离脂肪酸、游离氨基酸，当鲜乳的pH降低至酪蛋白的等电点时，酪蛋白变性凝固。乳酸菌分泌出的胞外多糖，还能将乳酸菌细胞和酪蛋白链接在一起形成网络结构，使得发酵乳的凝胶结构更加稳定。 经研究发现，将优良乳酸菌菌株进行组合有利于提升发酵乳的整体性能，将一种保加利亚乳杆菌与两种以上嗜热链球菌进行组合可以使混合乳酸菌同时具备发酵速率快、产品黏度好、特征风味浓郁等优良性能。 目前，主要通过收集天然乳酸菌来获得性能优良的新型乳酸菌。天然乳酸菌经过筛选、培育和研究，确定其种属，以及产酸、产香、益生功能等特性。由于越来越多功能性乳酸菌的发现，酸奶中除了添加嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌外，还会添加一些功能性乳酸菌，增加发酵乳的益生功能，例如降低胆固醇、降血糖、抗菌消炎、提高人体免疫力。一方面，这些功能性乳酸菌能够在生长过程中会分泌出一些胞外多糖、细菌素、胞外糖苷酶等物质。另一方面，嗜热链球菌菌株和保加利亚乳杆菌菌株存在局限性，它们不耐胃酸和胆汁，在经过人体消化道时，这些常规的乳酸菌会失活，而发酵乳中添加的功能性乳酸菌能够在肠道内大量存活，发挥调节肠道菌群平衡，促进人体消化吸收等作用，被人们认为是新一代的益生菌。[b]可用于食品的乳酸菌菌种名单[/b] 2010年卫生部办公厅发布了《可用于食品的菌种名单》（卫办监督发〔2010〕65号），其中包含乳制品中常用的两歧双歧杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种（保加利亚乳杆菌）、嗜热链球菌等。该公告还规定，对于新菌种需要按照《新资源食品管理办法》执行。2011年卫生部又发布了《关于批准翅果油等2中新资源食品的公告（2011年 第1号）》，其中将乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种和乳酸乳球菌双乙酰亚种列入《可用于食品的菌种名单》，增加了可用于食品的乳酸菌种类。 此外，这几年我国卫生计生委也陆续发布了一些公告，增加了可用于食品的菌种名单，其中也包含有乳酸菌。[b]乳酸菌与人体的肠道健康[/b] 在人体肠道中，双歧杆菌和乳杆菌在肠道中普遍存在。婴儿时期，母乳喂养的婴儿肠道中双歧杆菌的数量占绝对优势，而人工牛乳喂养的婴儿肠道中最初普遍没有双歧杆菌，或者个别的双歧杆菌数量处于波动之中，而且常定植某些其它厌氧菌如拟杆菌和梭状芽孢打菌等。婴儿停止母乳或人工喂养后，由于食物的摄取，其肠道转变为类似成年人肠道。健康成年人肠道微生物可大致分为三类：第一类乳酸菌，包括双歧奸菌、乳杆菌和链球菌等，与宿主共生；第二类腐败菌，如拟杆菌、梭菌、消化球菌、大肠杆菌和葡萄球菌等；第三类包括真细菌、瘤胃球菌和巨型球菌等。该时期，双歧杆菌和乳杆菌数量较儿童期显著减少，有害菌滋生。老年人肠道中双歧杆菌和乳杆菌数量减少，拟杆菌、梭菌、肠杆菌和链球菌数量显著增加。 乳酸菌与人体的健康息息相关，特别是人体的胃肠道，其中最主要的两种乳酸菌是双歧杆菌和乳杆菌。双歧杆菌参与宿主的消化代谢、免疫及抗感染过程，它能通过细胞上的磷酸与肠黏膜上皮细胞特异性结合构成生物学屏障，也可产生具有分解肠黏膜上皮细胞内复杂多糖的细胞外糖苷酶，刺激肠道产生免疫抗体和病毒抗体，降低肠道pH及氧化还原电位，从而拮抗肠道需氧菌和条件致病菌的入侵，维持肠道微生态平衡。对于某些腐败菌和低温细菌，双歧杆菌通过产生有机酸对其产生抑制作用从而起到抗菌作用；由于机体吞唾细胞的吞噬活性可以在双歧杆菌的存在下激活，从而提高了机体的抗感染能力及免疫功能；双歧杆菌可以降低机体胆固醇水平，因其在发酵过程中产生一种影响胆固醇合成的物质；双歧杆菌还可以调节肠道正常细菌菌群平衡，起到防止便秘的作用；双歧杆菌的代谢活动还可以明显增加血液中超氧化物歧化酶的含量，从而起到抗衰老的作用。 乳杆菌对人体健康同样十分重要。由于其发酵碳水化合物的终产物是乳酸，可以帮助机体消化吸收；乳杆菌可以通过酸化肠内环境来阻止某些有害菌与肠上皮细胞的黏附，从而阻碍有害菌在肠道内的定植，进而优化胃肠功能，减少了疾病的发生率；乳杆菌还可以刺激免疫球蛋白的产生，从而增强机体的免疫力。 乳酸菌无处不在，与人类和动物的健康息息相关。随着人们对乳酸菌进一步深入地研究，相信越来越多的新型乳酸菌和其益生功能及机理会被人类发现，并造福于人类。

文/袁靖琳 （华测检测 食药农化事业部）2002年，联合国世界粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）共同起草了《食品益生菌评价指南》，评价指南中给出了益生菌的定义：“益生菌是活的微生物，当摄入充足的数量时，它会赋予宿主某种健康益处”。随着人们健康意识的增强和经济社会等因素的影响, 益生菌越来越受到人们的重视。益生菌特有的保健功能而引发的相关研究日渐热门。益生菌的应用已被深入的研究并在不断的发展中, 它不仅仅被应用于食品中, 而且在医药、畜牧业也有着广泛的应用。虽然益生菌的研究历史不过百年, 但是发展速度很快, 在菌种开发产品研发方面都取得了进步。目前, 世界上许多科学家也在研究如何利用益生菌中的活性, 激活免疫功能, 使它更好的调节免疫系统、控制肿瘤和抑制癌症、改善肠胃环境，甚至可以用于辅助治疗某些精神类疾病，为人类的健康作更大的贡献。[b]1. [b]益生菌研究史简介[/b][/b]1857年，法国微生物学家巴斯德在研究牛奶酸变的过程中发现了乳酸菌；1878年，李斯特首次从酸败牛奶中分离出乳酸乳球菌；1899年，法国儿童医院的蒂赛从婴儿粪便中分离出双歧杆菌，发现其与婴儿腹泻有关；1900-1901年，丹麦奥拉严森首次对乳酸菌进行了分离；1905年，保加利亚斯塔门格里格罗夫首次发现并从酸奶中分离了保加利亚乳杆菌；1930年，日本代田稔首次成功分离出源自人体肠道的乳酸杆菌，并取名干酪乳杆菌代田株，即后来被称为养乐多菌的益生菌；1935年，乳酸菌饮料问世，益生菌开始走向产业化；1974年，Paker将益生菌定义为对肠道微生物平衡有利的菌物；1988年，丹麦科汉森实验室生产出超浓缩的直投式酸奶发酵剂；1996-1999年，欧共体PROBDEMO CT96-1028项目研究标明了益生菌产品的益生功效；2002年，联合国世界粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）共同起草了《食品益生菌评价指南》，评价指南中给出了益生菌的定义：“益生菌是活的微生物，当摄入充足的数量时，它会赋予宿主某种健康益处”。[b]2. [b]益生菌益生功能简介[/b][/b]多方研究标明，益生菌具有调节体内微生态平衡、恢复正常生理功能、预防或治疗疾病、促进健康的功效。总结归纳为：ü 预防或改善腹泻ü 缓解乳糖不耐症ü 改善便秘ü 辅助治疗幽门螺杆菌引发的肠胃疾病ü 增强人体免疫力ü 促进消化ü 降低血清胆固醇ü 辅助治疗糖尿病ü 延缓衰老2013年，加州理工学院的研究人员发现，益生菌疗法可以减轻小鼠自闭症，这一结果或许将会改变治疗人们对孤独症传统疗法的看法。[b]3. [b]益生菌在食品工业的应用[/b][/b]目前，益生菌大体上可以分为三类：（1）乳杆菌类（如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌）；（2）双歧杆菌类（如长双歧杆菌、短双歧杆菌）；（3）革兰阳性球菌（如嗜热链球菌、粪链球菌、乳链球菌）；此外，有些酵母菌等也可以归入益生菌的范畴。被应用到食品中的益生菌应具有以下功能性要求:( l) 耐酸耐胆盐 (2) 可粘附在上皮表面并且能在人的胃肠道存活 (3) 免疫刺激, 并不引起某些炎症 (4 )对病原菌有拮抗作用, 如幽门螺杆菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、艰难梭菌等。同时还得具备以下的加工性要求（1）好的感观特性 (2) 抗噬菌体 ( 3 )加工过程中存活 (4 )在产品和储藏过程中稳定。益生菌在食品加工生产过程中被当做天然发酵剂广泛应用--在乳制品行业生产发酵乳、干酪等，《GB 19302-2010国家安全标准 发酵乳》中则明确指定酸乳和风味酸乳使用的菌株仅为嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌（德氏乳杆菌保加利亚亚种）；在肉制品行业用于生产发酵香肠；在果蔬行业，用于生产泡菜、果蔬汁饮料；近几年还有研究人员将乳酸菌、酵母和谷物混合也得到了感官风味较好的产品；在婴幼儿食品中则是作为益生菌补充剂。益生菌也被用在了保健品中。保健品中常用的两大类乳酸菌群：一类为双歧杆菌，如婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌；一类为乳酸杆菌，如如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌和罗伊氏乳杆菌等。市场上常见的养乐多便是添加了干酪乳杆菌LcS的具有保健功能的乳酸菌饮料。目前，我国可以用于保健食品的益生菌菌种有：两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum）、婴儿双歧杆菌（Bifidobacterium infantis）、长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）、短双歧杆菌（Bifidobacterium breve）、青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）、德氏乳杆菌保加利亚种（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）、干酪乳杆菌干酪亚种（Lactobacillus casei subsp. Casei）、嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）、罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）。[b]4. [b]国内存在的问题[/b][/b]到目前为止，我国尚没有系统的研究和制定益生菌及其发酵乳制品的标准。益生菌及发酵乳制品市场异常混乱，出现功能夸大的虚假宣传，甚至在益生菌发酵乳制品中检验不出该益生菌的现象。较为典型的例子--对于声称添加了某种或某些特定活性益生菌的乳酸菌型饮料，套用《GB7101-2015食品安全国家标准 饮料》—“标示活菌（未杀菌）型的产品乳酸菌数应≥10[sup]6[/sup]CFU/g(mL)”评价产品的合格性显然并不合适，因为这一判定标准仅仅只对活菌数进行了要求，而对于那些声称添加了某种或某些益生菌的产品，消费者无从知晓在这数目≥10[sup]6[/sup]CFU/g(mL)乳酸菌中是否真的含有产品声称的益生菌。此外，在益生菌食品方面，我国尚有许多问题亟待解决。第一，与国外相比，我国消费者对乳制品的消费数量仍然较低；第二，在我国大品牌的益生菌乳制品所用菌种绝大多数依赖于进口国外品牌，如杜邦（丹尼斯科）、拉曼、科汉森等，我国应尽快在菌种选育上下功夫，筛选和培育优良益生菌菌种，打破国外的垄断，开发适合我国消费者口味的产品；第三，高新生物技术与益生菌产品生产相结合，提高益生菌的生物利用率。[b]5. [b]申报及生产益生菌类保健食品小贴士[/b][/b]益生菌类保健食品申报除了要按保健食品注册管理有关规定提交申报资料外，依据益生菌保健食品申报与评审规定（试行）（国食药监注202号）还应注意如下几点：[b][b]5.1菌种应满足的条件[/b][/b]（一）必须是人体正常菌群的成员，可利用其活菌、死菌及其代谢产物。（二）生产用菌种的生物学、遗传学、功效学特性明确和稳定。（三）种子批系统。原始种子批应验明其记录、历史、来源和生物学特性。工作种子批的生物学特性应与原始种子批一致，每批主种子批和工作种子批均应按规程要求保管、检定和使用。在适宜的培养基上主种子传代不超过10代，工作种子传代不超过5代。（四）菌种及其代谢产物必须无毒无害，不得在生产用培养基内加入有毒有害物质和致敏性物质。（五）从活菌类益生菌保健食品中应能分离出与报批和标识菌种一致的活菌。[b][b]5.2生产要求[/b][/b]（一）必须有专门的厂房或车间、有专用的生产设备和设施；必须配备益生菌实验室，菌种必须有专人管理，应由具有中级以上技术职称的细菌专业的技术人员负责；制定相应的详细技术规范和技术保证。益生菌需建立档案。（二）[color=#333333]生产用菌种及生产工艺不得变更。[/color]（三）[color=#333333]所用益生菌菌种在其发酵过程中，除培养基外，不得加入具有功效成分的动植物及其它物质。[/color][b][b]5.3申报附加资料[/b][/b]（一）菌种的属名、种名应有对应的拉丁学名。（二）菌种的培养条件(培养基、培养温度等)。（三）菌种来源及国内外安全食用资料。（四）[b]国家食品药品监督管理局确定的鉴定机构[/b]出具的菌种鉴定报告。（五）菌种的安全性评价资料(包括毒力试验)。（六）菌种的保藏方法。（七）对经过驯化、诱变的菌种，应提供驯化、诱变的方法及驯化剂、诱变剂等资料。（八）以死菌和/或其代谢产物为主要功能因子的保健食品应提供功能因子或特征成分的名称和检测方法。（十一）使用《可用于保健食品的益生菌菌种名单》之外的益生菌菌种的，还应当提供菌种具有功效作用的研究报告、相关文献资料和菌种及其代谢产物不产生任何有毒有害作用的资料。当注册的产品工艺是购买活菌冻干粉混合、灌装过程，上述资料可以由活菌种冻干粉原料供应商提供复印件（加盖原料供应商公章）,并提供购销凭证。[b][b]5.4益生菌产品要求[/b]（一）[color=#333333]能够促进肠道菌群生态平衡，对人体起有益作用的微生态产品。[/color]（二）[color=#333333]必须安全可靠，即食用安全，无不良反应[/color][color=#333333]。[/color][/b]（三）不提倡以液态形式生产益生菌类保健食品活菌产品。[b]（四）活菌类益生菌保健食品在其保质期内活菌数目不得少于10[sup]6[/sup]cfu/mL(g)。[/b]（五）益生菌类保健食品如需在特殊条件下保存，应在标签和说明书中标示。[b][b]6.小结[/b][/b]从益生菌首次被定义至今，不到百年的时间里，益生菌这一产业迅猛发展，菌种开发、产品研究等都取得了长足的进步。虽然我国对微生态这一领域研究起步较晚于国外，核心菌种也长期依赖于进口，但令人欣慰的是由内蒙古大学张和平教授带领的科研团队从酸马奶中筛分得到的干酪乳杆菌Zhang、乳双歧杆菌V9、植物乳杆菌P-8 等35 株乳酸菌已经实现了产业化，并且广泛应用于食品工业、健康医疗、畜牧养殖和农业种植等领域。部分产品在国内多家三甲医院已经投入到临床应用。在解决肠道菌群失衡、抵抗力差等方面都有较好效果。随着人们对健康生活的愈加重视，我国益生菌市场迅速发展。如何规范益生菌产品市场、如何充分利用益生菌菌种提高产品价值、如何结合高新技术提高益生菌的生物利用率等等都成为了我国益生菌市场亟待解决的问题。

培养基及成分 1、Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 2、 Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 ：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 3、Azotobacter Medium (固氮菌培养基) KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O　　 0.1ｇ Na2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量) Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g Adjust (调) pH to 7.2 适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌 4、Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml :Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5、Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌 6、Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌） 7、Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基） Peptone（蛋白胨） 10g Yeast extract （酵母膏） 5g Glucose （葡萄糖） 1g Distilled water （蒸馏水） 1L 8、Glycerol Agar （甘油琼脂） Peptone （蛋白胨） 5g Beef extract （酵母膏） 3g Glycerol （甘油） 20g Top water （自来水） 1000ml Agar （琼脂） 15g pH 7.0-7.2 9、Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9 Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml Mannitol （甘露醇） 10g Agar （琼脂） 15g Distilled water （蒸馏水） 800ml pH 7.2 ：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10、 Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11、 Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂） Glucose （葡萄糖） 10g Asparagine （天门冬素） 0.5g K2HPO4 0.5g Water （水） 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌） 12、Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂） KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉） 20g K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4 0.01g Agar （琼脂） 20g water （水） 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌 13、Wort Agar （麦芽汁琼脂） Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。15磅灭菌30分钟。) 适用范围：克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊

[b][font=微软雅黑]双歧杆菌[/font][/b][font=微软雅黑]在食品工业中，喷雾干燥是一种生产率高、操作费用低的工艺，是普遍采用的制备干燥、稳定、体积小的食品或食品添加剂的方法之一。此外，还可用用保护和浓缩微生物。[/font][font=微软雅黑]许多人还报道了用喷雾干燥制备发酵用于生产发酵乳制品或作为提高奶酪风味的附加物。然而，微生物对喷雾干燥的温度及脱水很敏感。因此，如果喷雾干燥应用于发酵剂制备注意微生物的存活率。[/font][b][font=微软雅黑]双歧杆菌[/font][/b] [font=微软雅黑]Bifidobacterium是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌，末端常常分叉，故名双歧杆菌。双歧杆菌分布在胃肠的数量随年龄阶段的增长而减少，分布多的是母乳营养儿。已经发现，双歧杆菌有32个亚型，含有双歧杆菌的生物制剂多达70种。婴儿双歧杆菌占总肠道菌的百分之六十，60岁以上老人双歧杆菌只占百分之七点九。[/font][b][font=微软雅黑]双歧杆菌[/font][/b][font=微软雅黑]形态很不一致的杆菌，0.5~1.3 μm×1.5~8μm，常呈弯、棒状和分支状。单生、成对、V字排列，有时成链，细胞平行成栅栏状，或玫瑰花结状。偶尔呈膨大的球杆状 。[/font][align=center][img]https://img69.chem17.com/9/20190409/636904143730081616114.png[/img][/align][b][font=微软雅黑]双岐杆菌[/font][font=微软雅黑]药理作用：[/font][/b][font=微软雅黑]治疗便秘[/font][font=微软雅黑]、[/font][font=微软雅黑]肿瘤防治[/font][font=微软雅黑]、[/font][font=微软雅黑]保护肝脏[/font][font=微软雅黑]、[/font][font=微软雅黑]防治心血管疾病、改善乳糖消化[/font][font=微软雅黑]等[/font][b][font=微软雅黑]双岐杆菌[/font][color=#000000][font=微软雅黑]营养食品作用[/font][/color][color=#000000][font=微软雅黑]：[/font][/color][/b][font=微软雅黑]促吸收[/font][font=微软雅黑]、[/font][font=微软雅黑]抗衰老[/font][font=微软雅黑]、[/font][font=微软雅黑]防治疾病[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑]如此重要的[/font][b][font=微软雅黑]双岐杆菌[/font][/b][font=微软雅黑]是如何在喷雾干燥中存活的呢？[/font][font=微软雅黑]双岐杆菌在喷雾干燥的存活情况和载体有很大的关系；有研究表明，双歧杆菌分别与含有明胶、树胶和可溶性淀粉的载体一起喷雾干燥，结果发现喷雾干燥后双歧杆菌的存活因其载体种类不同而不同。[/font][font=微软雅黑]很大程度上取决于所用的载体。比较不同的载体浓度对存活的影响。发现双歧杆菌在与明胶、树胶或可溶性淀粉喷雾干燥后存活率高。经喷雾干燥后双歧杆菌表现大存活，温度升高则失活升高，然后温度升高引起的失活程度因所用载体不同而不同。已有研究表明，采用可溶性淀粉程度大，采用脱脂乳则小。[/font]

培养基及成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 ：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml :Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌） 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基） Peptone（蛋白胨） 10g Yeast extract （酵母膏） 5g Glucose （葡萄糖） 1g Distilled water （蒸馏水） 1L 8. Glycerol Agar （甘油琼脂） Peptone （蛋白胨） 5g Beef extract （酵母膏） 3g Glycerol （甘油） 20g Top water （自来水） 1000ml Agar （琼脂） 15g pH 7.0-7.2 9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9 Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml Mannitol （甘露醇） 10g Agar （琼脂） 15g Distilled water （蒸馏水） 800ml pH 7.2 ：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂） Glucose （葡萄糖） 10g Asparagine （天门冬素） 0.5g K2HPO4 0.5g Water （水） 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌） 12. Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂） KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉） 20g K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4 0.01g Agar （琼脂） 20g water （水） 1000ml pH 7.2-7.4

美国:奶酪染大肠杆菌致25人染病来源：食品伙伴网 日期：2010年11月6日 技术支持:PONY TEST近日美国发生一起感染大肠杆菌O157:H7的食物中毒事件，中毒的25人均食用了美国第一大会员制连锁仓储式超市好事多（Costco）销售或者免费赠予样品的方式得到的一种奶酪。涉嫌奶酪是布拉沃农场（Bravo Farms）公司生产的荷兰豪达式奶酪（Dutch Style Gouda cheese）。美国FDA和亚特兰大疾控中心等部门警告消费者不要食用该产品。消费者在食用该奶酪后出现了一些不适症状，其中有9人住院，1人可能感染溶血性尿毒症，无死亡病例。FDA认为，购买该高达奶酪的消费者应该将产品装在密封塑料袋中回收或者将其丢进密封的垃圾桶内以防止被其他人和动物食用。大肠杆菌O157:H7的症状表现为腹痛和腹部痛性痉挛。有些相关疾病较为严重而且持续较长时间。由它造成的溶血性尿毒症出现的几率很小，一般发生在5岁以下的儿童和老年人身上。患有溶血性尿毒症的人应该尽快到医院就医，因为可能损害肾脏以及可能导致更严重的疾病。

绪言随着人民生活水平的不断提高，乳制产品的种类日益丰富和多样化，人体所需的乳酸菌如嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜热乳链球菌和保加利亚乳杆菌等通常被作为重要成分加入到各种乳产品当中。乳制品被人体摄入之后，其中包含的活性菌也同时进入到人体内部消化系统，它们能够帮助平衡肠胃功能健康，抑制对人体有害的各类细菌繁殖，能够显著提高人的身体健康水平。但不是随便摄入活性菌就能够起到这种效果，而是需要摄入人体内的活性菌达到一定的数量才能够有效发挥作用。科学表明，人体内部活性菌数量要达到 97cfu/ g (m L) 以上才能够具有明显效果。实际上，科学家在对市场上出售的各种乳制品的研究分析发现，大多产品中的包含的乳酸菌的活跃度与浓度都严重偏低，这一方面是由于生产企业不负责任所导致，另一方面也与当缺乏一种行之有效的活性乳酸菌检测工具有关，因此也不难理解当前市面上为什么存在那么多含超低乳酸菌的乳制品。为有效检测出乳制品中活性乳酸菌的活力和浓度，市场上和学术界都有必要尽快找到一种科学有效的计算方法。当前，对于嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等计数方法已有一些研究文献，但都不是在其纯度较低条件下的计数方法，笔者通过文献综述发现，关于其他菌类计数方面的研究也有学者尝试过，但并没有取得突破性进展。对此，本文在已有研究文献的基础上，总结了一种新的非纯度条件下对活性菌计数的方法，能够有效针对嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜热乳链球菌和保加利亚乳杆菌进行科学合理的定量分析，为提高软制品产品品质提供可靠度科学测量工具。1. 材料与方法1. 1 供试菌种嗜热乳链球菌( S t r e p t o c o c c u st h e r m o p h i l u s , S T ) 、保加利亚乳杆菌( L actobacil lus delbr ueckii ssp.bulgaricus,LB) 、嗜酸乳杆菌( Lactobacill u s a c i d o p h i l u s , L A) 、双歧杆菌( Bif idobacter ia, BB) 、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei , LC) 均由华中农业大学生物科技学院微生物实验室提供。1. 2 仪器与设备厌氧培养箱; 厌氧培养罐; 好氧培养箱。1. 3 待检样品( 1) 已知菌样品： 以脱脂乳为培养基,在所需培养条件下分别培养供试的5 种菌,即为已知菌待检样品。( 2) 乳品样品： 为市售酸乳或乳酸菌发酵乳饮料, 均含有活性乳酸菌。2. 结果与分析2. 1 嗜热乳链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌对糖的利用情况将M R S 琼脂培养基中的葡萄糖分别以柳醇、纤维二糖、果糖、甘露醇、山梨醇等糖类代替, 配制成系列不同的M R S 琼脂培养基, 并制成平板, 分别接种ST 、LB、LA和BB 菌株, 在所需条件下培养, 观测平板上菌落的生长情况, 结果如表2 所示。从表2可以看出： 仅LA 可以利用柳醇, 故MRS-柳醇琼脂培养基可用于L A 的选择计数。当柳醇质量浓度为0. 5% 时, LA 便可形成大小合适的菌落。另外, M R S- 纤维二糖琼脂、MRS- 甘露醇琼脂和MRS- 山梨醇琼脂也可用于LA 的计数。2. 2 不同培养基平板上ST、LB、LA、BB 和LC 形成的菌落数检测结果按照国内外文献介绍的最先进的方法制成十种各不相同的实验培养基, 并制成平板,分别接种ST、LB、LA、BB 和LC 的纯培养菌株, 观察检测菌落的形成和数量，并分别做好相关试验数据记录。检测结果表明：s T-琼脂和M17-琼脂适合嗜热乳链球菌的计数; L C- 琼脂适合干酪乳杆菌的计数;M R S- N N L P 琼脂适合双歧杆菌的计数;MRS- pH5. 2 琼脂适合保加利亚乳杆菌的计数。MRS- 柳醇琼脂、MRS- 山梨醇琼脂、MRS-核糖琼脂和MRS- 葡萄糖酸盐琼脂均可用于LA 和LC 的计数, 但因LC- 琼脂培养基能抑制LA 和BB的生长, 从而适宜于L C 的选择计数, 因此当产品中只有L A和LC 存在时, 可用LC- 琼脂测定LC 的菌落数, 再用MRS- 柳醇琼脂或MRS- 山梨醇琼脂或MRS- 核糖琼脂或MRS- 葡萄糖酸盐琼脂测其总数,两者之差即为L A 的数量。2. 3 对几种含LA 和BB 的市售乳品的检测结果通过使用上述培养基进行菌类培养成熟后，在对市面上出售的乳制品进行抽样检测， 从检测结果分析来看： 所选的培养基和培养条件适合对S T 、L B、L A 和B B的选择计数,对照样品的检测结果接近实际菌数, 同时还发现除了对照样品和加LA 与BB的酸乳中LA 和BB 的数量较高外, 其它市售酸乳中含的LA 和BB 菌数均较低。2. 4 对几种市售产品中LC 的选择计数检测结果以L C- 琼脂培养基分别检测9 种市售乳品中干酪乳杆菌的数量, 其结果如表5 所示, 可见在其它乳酸菌存在下LC- 琼脂适合对干酪乳杆菌的选择计数。在所测的9 种产品中, 只有3 种干酪乳杆菌活菌数在106cfu/g( mL) 以上, 其余数量均较低, 而对照样品中的干酪乳杆菌数最高, 与实际数接近。3. 结束语本文通过设计研究方案，对含活性乳酸菌乳制品中不同活性菌的计算方法进行尝试，并取得了不错的试验效果。本文发现：用R I-琼脂培养基来分离热乳链球菌能够收到显著效果; 可用K L-乳酸菌培养基来分离干酪乳杆菌;用NG V-MMWN氨基培养基分离双歧杆菌; N L H-p C7.1碳酸培养基分离和提取保加利亚乳杆菌; NUL-氧脂酸 分离和提取嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌; 如果只需要提取和分离嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌, 则可在计算其总数量之后，在用N L-碳酸基培养基分离干酪乳杆菌数, 剩余即为嗜酸乳杆菌数量。希望本文的研究能过为有关食品质量监督部门和生产企业提供一种科学可靠的活性菌检测工具，以提高市场上乳制产品的质量。

干酪素是动物乳汁中的含磷蛋白。结构式为NH2RCOOH，无臭、无味的白色至黄色粉末，相对密度1. 25-1.31。几乎不溶于水、醇及醚。溶于稀碱液、碱性碳酸盐溶液和浓酸，在弱酸中沉淀。有吸湿性，干燥时稳定，潮湿时迅速变硬。Casein http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101132036_273929_1633128_3.gif　　又称：酪蛋白；酪蛋白酸钠；酪朊；乳酪素；奶酪素　　目前主要生产地为甘肃地区，应用大部分在南方城市。　　英文名: Caseins；casein；caseini'ihammersten　　CAS号：9000-71-9　　通常是指由牛乳腺分泌的多种(约20种)磷蛋白(phosphoproteins)的混合物。存在于牛奶或干酪(cheese)中　　干酪素是等电点为pH4.6的两性蛋白质。在牛奶中以磷酸二钙；磷酸三钙或两者的复合物形式存在，构造极为复杂，直到现在没有完全确定的分子式，分子量大约为57000-375000。干酪素在牛奶中约含3%，约占牛奶蛋白质的80%。纯干酪素为白色；无味；无臭的粒状固体。相对密度约1.26。不溶于水和有机溶剂。干酪素能吸收水分，浸于水中，则迅速膨胀，但料子并不结合。　　用干酪素可配成制造胶合板的水溶性胶粘剂。　　贮存于阴凉、干燥、通风的库房内，远离火种、热源，防潮、防霉变。

新西兰乳制品巨头恒天然8月3日发布消息称，在三批次浓缩乳清蛋白粉中检出肉毒杆菌。多美滋、娃哈哈、可口可乐等多家企业涉案，并启动召回工作。　　肉毒杆菌的毒素被用来开发成生化武器，是世界上最毒的物质之一。此次婴儿配方奶粉和运动饮料使用了受肉毒杆菌污染的乳清蛋白粉，会有哪些风险？肉毒杆菌真的有这么恐怖吗？　　艺康(中国)食品安全经理陆有开告诉《第一财经日报》记者，肉毒杆菌(也叫肉毒梭菌)是一种产芽孢的革兰氏阳性杆菌，主要来源于土壤、水、水底沉积物及动物粪便等。　　“肉毒杆菌生长到一定数量时会产生神经毒素，这种神经毒素是世界上最毒的物质之一，可以抑制人体神经信号的传递，让人出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状，因此，有些国家把它开发成生化武器。”陆有开称。　　不过，肉毒杆菌对生长条件要求“苛刻”。陆有开说，肉毒杆菌需要在ph值4.6以上的非酸性食品和无氧气或很少氧气的环境下才能生长。肉毒杆菌生长体本身耐热性并不强，通常100℃烹煮过程就能将肉毒杆菌生长体杀死，但其在不良环境下芽孢的抵抗力更强，芽孢是细菌的休眠体，对干燥、热处理和消毒剂等具有很强的抵抗力，121℃热杀菌10秒左右才能杀死90%的肉毒杆菌芽孢。芽孢本身不能进行生长繁殖，也不能导致食品的腐败，但是，一旦碰到合适的条件，芽孢会发芽变成生长体而进行繁殖。肉毒杆菌最适合的生长温度范围为30℃~37℃，大部分菌株在10℃以下不能生长，但有的菌株在3℃以上就能生长。　　肉毒杆菌能在奶粉中生长吗？陆有开说，奶粉中的水分活度较低，因此肉毒杆菌在奶粉中不能生长。但这并不意味着奶粉中就完全不存在肉毒杆菌的芽孢。“在奶粉上检出的应该是肉毒杆菌的芽孢，它的来源估计是由杀菌工艺失效和杀菌后污染引起。”　　肉毒杆菌的中毒路径有两种，一种是对一岁以下的婴儿来说，吞食了含有肉毒杆菌毒素芽孢的食物，由于婴儿肠道内的正常肠道细菌群落还没有建立，肉毒杆菌毒素芽孢发芽生长产生毒素，导致婴儿中毒；另一种是对一岁以上的人群来说，由于他们的肠道菌群已经建立，肉毒杆菌毒素芽孢不可能发芽生长，因此，其致病性就是由于肉毒杆菌先行在食物中生长产生了毒素而使人致病。　　陆有开称，在西方，肉毒杆菌中毒案例主要发生在家庭自制罐头上。　　他说，目前的奶粉没有检测肉毒杆菌的项目和要求，根据风险评估的结果，在婴儿奶粉中，肉毒杆菌的风险要比其他致病菌风险小得多，如沙门氏菌和阪崎肠杆菌，也不可能将所有的致病菌都进行检测，这主要靠良好的操作规范和卫生保持来控制。

求助：保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的光学显微镜的镜检照片和菌落形态的照片，谢谢！！！！！！！！！！！！

卫办监督发〔2010〕65号各省、自治区、直辖市卫生厅局，新疆生产建设兵团卫生局，中国疾病预防控制中心、卫生部卫生监督中心： 根据《食品安全法》及其实施条例的有关规定，我部组织制定了《可用于食品的菌种名单》。现印发给你们，请遵照执行。[align=left][font=仿宋_GB2312 ] 附件：可用于食品的菌种名单[/font][/align][align=right][font=仿宋_GB2312 ]二○一○年四月二十二日[/font][/align][b][b][font=黑体 ][/font][/b][/b][b]可用于食品的菌种名单 [/b][font=仿宋_GB2312 ][/font][table][tr][td=1,1,36][/td][td=1,1,255]名称[/td][td=1,1,277]拉丁学名[/td][/tr][tr][td=1,1,36]一[/td][td=1,1,255]双歧杆菌属[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]1[/td][td=1,1,255]青春双歧杆菌[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium adolescentis[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]2[/td][td=1,1,255]动物双歧杆菌（乳双歧杆菌）[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium animalis[/i]（[i]Bifidobacterium lactis[/i]）[/td][/tr][tr][td=1,1,36]3[/td][td=1,1,255]两歧双歧杆菌[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium bifidum[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]4[/td][td=1,1,255]短双歧杆菌[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium breve[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]5[/td][td=1,1,255]婴儿双歧杆菌[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium infantis[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]6[/td][td=1,1,255]长双歧杆菌[/td][td=1,1,277][i]Bifidobacterium longum[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]二[/td][td=1,1,255]乳杆菌属[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]1[/td][td=1,1,255]嗜酸乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus acidophilus[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]2[/td][td=1,1,255]干酪乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus casei[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]3[/td][td=1,1,255]卷曲乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus crispatus[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]4[/td][td=1,1,255]德氏乳杆菌保加利亚亚种（保加利亚乳杆菌）[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus delbrueckii [/i]subsp. [i]Bulgaricus[/i][i]（Lactobacillus bulgaricus）[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]5[/td][td=1,1,255]德氏乳杆菌乳亚种[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus delbrueckii[/i] subsp. [i]lactis[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]6[/td][td=1,1,255]发酵乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus fermentium[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]7[/td][td=1,1,255]格氏乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus gasseri[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]8[/td][td=1,1,255]瑞士乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus helveticus[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]9[/td][td=1,1,255]约氏乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus johnsonii[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]10[/td][td=1,1,255]副干酪乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus paracasei[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]11[/td][td=1,1,255]植物乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus plantarum[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]12[/td][td=1,1,255]罗伊氏乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus reuteri[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]13[/td][td=1,1,255]鼠李糖乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus rhamnosus[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]14[/td][td=1,1,255]唾液乳杆菌[/td][td=1,1,277][i]Lactobacillus salivarius[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]三[/td][td=1,1,255]链球菌属[/td][td=1,1,277][i]Streptococcus[/i][/td][/tr][tr][td=1,1,36]1[/td][td=1,1,255]嗜热链球菌[/td][td=1,1,277][i]Streptococcus thermophilus[/i][/td][/tr][tr][td=3,1,568]注：1.传统上用于食品生产加工的菌种允许继续使用。名单以外的、新菌种按照《新资源食品管理办法》执行。2.可用于婴幼儿食品的菌种按现行规定执行，名单另行制定。[/td][/tr][/table]

在自然界存在一种叫做土壤杆菌的细菌，它能感染植物的受伤组织，特别是根茎交接处的受伤组织，引起冠瘿瘤。冠瘿病损害为数众多的双子叶植物，特别是葡萄、核果类树木和观赏植物。冠瘿细胞是植物肿瘤细胞，在许多方面与动物肿瘤细胞类似。它们只有无限生长的能力，把一小块冠瘿组织放入不含植物激素的培养基中培养，能长成大的细胞团块(愈伤组织)，而正常植物细胞在不加植物激素的培养基中则不能生长。冠瘤拥胞能制造一类叫做冠瘿碱(opine)的氨基酸衍生物(如章鱼碱和蓝曙红)，供根癌土壤杆菌作为养料使用，在正常植物细胞中从未发现过这类物质。 根癌土壤杆菌能把植物细胞转化为肿瘤细胞，是由于它含有一种肿瘤诱导质粒，简称Ti质粒。当细菌感染植物时，Ti质粒中大约占这个质粒l／10的DNA片段(称为转移DNA或T—DNA)进入植物细胞，并整合到植物的染色体上，随染色体一起复制。随后T—DNA携带的细菌基因（致瘤基因和合成冠瘿碱的基因)使在植物细胞中表达，使植物细胞转化成肿瘤细胞，并合成冠瘿碱。由于根癌土壤杆菌能把细菌基因引入植物细胞，并在那里表达出蛋白质来，所以人们称它为天然的“遗传工程师”。这给人们以启示。能否用重组DNA技术把与高产、优质、抗病、抗旱和抗盐碱等优良件状有关的基因循人到T—DNA中，然后再通过根癌土壤杆菌的感染把这些基因引入植物细胞呢?最近几年的研究进展表明，这是完全可能的。 Ti质粒是独立复制的环状DNA分子。由大约1．5—2xl05碱基对组成，相当于细菌染色体的3—5％。它有两个主要类型：一类叫章鱼碱质粒，含有这种质粒的细菌能以章鱼碱为氮源和碳源生长；另一类叫蓝署红质粒，含有这种质粒的细菌能利用蓝曙红。每一种根癌土壤杆菌只含有一种Ti质粒，或者是章鱼碱质粒，或者是蓝曙红质粒。这两种质拉的DNA同源性很低，一般为12—16％，说明它们可能具有不同的进化史。T—DNA是Ti质粒中最重要的组成部分．它所携带的基因主要有两个功能：一是决定肿瘤的形成和肿瘤的形态；二是控制冠瘿碱的合成。如果T—DNA中的致瘤基因发生突变，可能出现三种表型：一是产生比正常肿瘤个大的肿瘤；二是使肿瘤长出许多根；三是使肿瘤长出许多芽。在T—DNA区域以外也有一些基因已被定位，其中毒性基因的功能是决定根癌土壤杆菌对植物的感染以及T—DNA的进入和整合；章鱼碱代谢基因和蓝曙红代谢基因分别编码代谢这两种冠瘿碱的酶；质粒转移基因控制细菌的接合作用；不相容性基因控制Ti质粒与其它质粒的不相容性。 Ti质粒之所以能成为把外源基因引入植物的良好载体有两方面的原因。第一，携带质粒的根癌土壤杆菌的寄主范围很广，实际上它能转化所有的双子叶植物。第二，整合到植物染色休上的T—DNA能随种子遗传，而且T—DNA有自己的启动基因，可以启动与其连接的外源基因的转录。此外，也有人研究以植物病毒DNA为载体转移目的基因，或者直接把DNA注射到植物的花粉管和子房中。Ti质粒直接用作基因载体有两个困难：一是它的分子量太大，内切酶位点很多，不容易进行体外重组DNA操作；二是被T—DNA转化的植物细胞成为肿瘤细胞，不能再生成植株。克服第一个困难的办法是先把T—DNA克隆到大肠杆菌的小质粒上，把目的基因插入到小质粒的T—DNA中，然后再设法转移到天然的Ti质粒中。克服第二个困难的办法是在T—DNA的特殊位点中插入目的基因和供筛选用的抗药基因，一方面使致瘤基因发生插入突变，从而使转化细胞能再生成植株，另一方面使目的基因正好位于T—DNA的启动基因的下游，以便启动目的基因的转录。有人经过研究发现了这样一种作用模型：大多数双子叶植物受伤后会产生一种叫丁香酮(acetosyringone)的物质，这时土壤农杆菌感染后，丁香酮在Ti质粒上Vir A的产物A的协同作用下促进了Vir G产物G的活化(即磷酸化)，然后产物G相继激活Vir B、V ir c、Vir D、Vir E等操纵子，特别是Vir D和Vir E。前者产生两种蛋白，D1为缺刻酶(nickase)，它能特异性地在T—DNA两端产生缺刻；D2则是一种蛋白复合物，它粘在已断开的T—DNA的两端，具“导航”的功能，有人认为它是Rec A，起重组的作用。后者产生单链结分蛋白(SSB)，有保护缺刻产生后的T—DNA的功能。T—DNA在诸多蛋白的导航、保护下重组进核基因组。这种转比方法优点是方便，不需分离原生质，且插入的基因拷贝数目少，比较稳定。但它的缺点是土壤农杆菌主要只适于侵染双子叶植物，单子叶植物能被侵染的较少，这就在一定程度上影响了这种方法的推广。有人发现单子叶植物受伤后很少产生丁香酮，这是否是侵染的关键呢?目的许多实验室都在作这方面的探索，以期望能克服这种方法的局限性。http://hiphotos.baidu.com/wfvcshengwu/abpic/item/629fdb39539824d63b87ce6e.jpg

阪崎肠杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰阴性无芽孢杆菌。作为肠杆菌科的一种，一直被称为黄色阴沟肠杆菌，直到1980年才更名为阪崎肠杆菌。该菌是肠道正常菌丛中的一种，在一定条件下可引起人和动物致病，所以称为“条件致病菌”。 　　阪崎肠杆菌自然来源非常广泛，在水、土壤、植物根茎、动物肠道甚至加工食品都可存在，其中婴儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要渠道。阪崎肠杆菌的繁殖、宿主和感染途径一直是研究人员正在进行的课题。2002年，有研究人员从奶酪、碎牛肉、腊肠和蔬菜中分离到阪崎肠杆菌，但目前仍不能确定该菌的自然宿主到底是什么。 　　2003年又有研究人员从厩螫蝇中肠中分离到阪崎肠杆菌?熏因而认为厩螫蝇幼虫肠道是阪崎肠杆菌的环境宿主之一。而厩螫蝇在世界范围内广泛分布?熏以牛、马、狗、猪和人的血液为食?熏在牛、猪或马的养殖场所可见该蝇?熏在牛棚更常见?熏因而可能污染牛奶。流行病学研究发现厩螫蝇的地理分布和阪崎肠杆菌感染直接相关。 　　同时，美国一家疫情控制公司的技术报告中记载舍蝇中存在阪崎肠杆菌，但没有确切记录该菌究竟是在舍蝇体内还是体外。研究人员推测，昆虫很可能是阪崎肠杆菌的环境宿主。 　　阪崎肠杆菌感染并非是不治之症，用抗生素就可以有效控制。虽然阪崎肠杆菌的毒力因子和致病性现在还不太清楚，但已发现有些阪崎肠杆菌可能产生一种毒力因子——类肠毒素样化合物。而且，组织培养也发现一些菌株可产生细胞毒效应。 　　与肠杆菌属其他细菌相比?熏阪崎肠杆菌对常用的抗菌药更敏感。但是由于阪崎肠杆菌耐药性不断增强?熏近来一些专业人员建议采用碳青霉烯类或新一代头孢霉素和其他药物联合治疗阪崎肠杆菌。不过在临床上，需要根据临床诊断和细菌的药敏试验来找到合理的药物配伍治疗方案。

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308050854_456024_2762510_3.bmp新西兰初级产业部3日宣布，新西兰乳制品巨头恒天然集团旗下部分产品可能含有肉毒杆菌毒素。可能受污染的产品被用于婴儿配方奶粉和运动饮料的生产。 国家质检总局对此高度重视，立即与新西兰驻华使馆取得联系，要求新方立即采取措施，防止问题产品影响中国消费者健康，同时要求进口商立即召回可能受污染产品。 综合新华社 现代快报记者 吴怡　　恒天然集团声明　　38吨浓缩乳清蛋白受污染　　涉事产品或达900吨，已提醒8家客户　　恒天然集团3日举行新闻发布会，恒天然集团新西兰奶制品公司执行董事加里·罗马诺说，有3批浓缩乳清蛋白出现质量问题，这些产品是去年5月在新西兰本地一家工厂生产的，涉嫌被污染的产品总量为38吨。污染源是该公司在北岛怀卡托地区豪塔普工厂的一根受污染的管道。　　据悉，这些可能造成服食者中毒的受污染浓缩乳清蛋白粉被提供给8家制造商，用作生产婴儿奶粉、儿童成长奶粉和运动饮料的原料，涉事产品估计达到900吨。　　恒天然集团表示，检测结果显示，这些浓缩乳清蛋白可能含有肉毒杆菌的菌株，有可能造成食用者中毒。据介绍，这种浓缩乳清蛋白被广泛用于婴儿奶粉、儿童成长奶粉和运动饮料中。但一般的乳制品如鲜奶、奶酪、酸奶和经过超高温消毒的牛奶产品，则不会受到影响。目前，还没有收到问题产品引发的健康问题报告。2日，恒天然集团已将情况向包含3个中国客户在内的8家客户进行了通报。目前，这些客户已紧急展开调查。如有必要，将召回产品。该集团发言人表示，目前不能透露这8家公司和相关产品的名称，也不能透露这些产品销往哪些国家。但新西兰初级产业部表示，受影响国家包括澳大利亚、中国、马来西亚、泰国、越南和沙特阿拉伯。　　恒天然集团全球首席执行官西奥·史毕根斯定于3日从欧洲前往中国，向相关机构和客户通报最新情况。史毕根斯表示，集团将尽全力协助这8家客户进行检查，确保受污染的产品从市场收回，同时让公众知情，如果已经卖出就退货。　　今年1月被查出含微量双氰氨　　今年1月，新西兰初级产业部宣布，恒天然集团生产的奶粉中曾被检测出含有微量双氰氨。　　新西兰政府建议　　暂停向宝宝喂食可瑞康2段奶粉　　新西兰初级产业部3日发表声明，建议新西兰父母暂停为6个月以上宝宝喂食“可瑞康”牌2段婴儿配方奶粉，因为这种奶粉可能使用含有肉毒杆菌的浓缩乳清蛋白粉。　　新西兰初级产业部负责食品安全事务的代理局长斯科特·加拉赫当天表示，目前已经确定5个批次“可瑞康”牌2段婴儿配方奶粉使用含有肉毒杆菌的浓缩乳清蛋白粉。其中3个批次在奥克兰仓库中，1个批次在货轮上，另1个批次在澳大利亚。这些“问题奶粉”不会被投放到市场销售。　　反应　　国家质检总局要求立即召回　　针对新西兰企业在浓缩乳清蛋白粉中检出肉毒杆菌一事，国家质检总局对此高度重视，立即与新西兰驻华使馆取得联系，要求新方立即采取措施，防止问题产品影响中国消费者健康。　　国家质检总局要求进口商立即召回可能受污染产品，并要求各地检验检疫机构进一步加强新西兰输华乳制品的检验监管。　　调查　　网购平台仍在销售据了解，新西兰恒天然集团是全球最大的乳品出口企业，也是世界上第6大乳品生产商。目前，恒天然在中国的上海、北京、广州设有分公司。昨天，记者来到位于新街口和进香河的几家大型超市，在进口乳制品货架上，并没有见到这款蛋白粉及恒天然旗下的乳制品品牌。“我们这里的进口乳制品主要来自美国、法国等地，而进口的乳清蛋白粉只有来自美国的一个牌子。”一位售货员告诉记者。　　虽然在部分超市里未见到被爆出的这款恒天然浓缩乳清蛋白粉，但在网购平台上搜索，这款蛋白粉在多家网店都有销售。在产品描述信息中，都写着“奶源世界第一，零污染”的口号。现代快报记者联系上其中一家店主，询问查出肉毒杆菌的消息，店主表示并未听说。【多美滋问题乳粉流入市场400多吨 上海卖场开始下架】由新西兰恒天然受肉毒杆菌污染乳粉制成的多美滋奶粉流入市场达420吨。目前，上海质监部门已经全部封存多美滋公司现场涉及问题乳粉的原料及成品，并要求公司立即启动召回程序。4日下午起上海多家超市已开始下架多美滋涉事产品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308050900_456025_2762510_3.bmp

2014年食源性致病菌蜡样芽孢杆菌风险监测分析 人类对蜡样芽孢杆菌致病性的认识过程进展缓慢，但是大量证据证明，从1898年起，就有蜡样芽孢杆菌造成泌尿系统感染及胃肠炎的记载，有些感染的病例很严重，甚至造成死亡，蜡样芽孢杆菌也可以引起牛的口蹄炎。Lubenau 1906年描述了发生在一家医院的严重的食物中毒事件，300名医务人员及病人用餐后出现急性胃肠炎，对剩余的食物进行检验，发现含有大量的好氧芽孢杆菌，尽管从原文中的描述分析，该污染菌应为蜡样芽孢杆菌，但原作者将其定名为B.peptonificans。Seitz 1913年从一例患肠炎和腹泻的病人中分离出蜡样芽孢杆菌。按照当今的流行病学标准来衡量，有关芽孢杆菌引起食物中毒的早起报道很粗略。很少有人对食物等病检标本的污染菌做过计数，对污染菌的鉴定、命名也不确切，从而造成了不少混乱。正是由于分类学的进展，Hauge经过对4起食物中毒事件的认真调查，于1955年首次确认蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的致病菌。因为蜡样芽孢杆菌在自然界分布广泛，常存在于土壤、空气、水和尘埃中，所以不可避免地会进入到食品中。现将2014年本地蜡样芽孢杆菌的检测情况作如下总结。1 材料与方法1.1试剂和仪器 使用的培养基有磷酸盐缓冲液（PBS）、甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂、胰酪胨大豆多粘菌素肉汤、营养琼脂购买于北京路桥公司。主要仪器包括均质器，电子天平:感量0.1g，VITEK-2 Compact 全自动微生物鉴定系统。1.2依据和方法 根据国家食品安全风险评估中心制定的“食源性致病菌监测工作手册”要求进行增菌、分离、鉴定、菌种保存及送上级实验室复核。试验程序见图2。

事件回放：新西兰乳制品巨头恒天然集团3日宣布，旗下部分婴儿奶粉和运动饮料等产品可能 “受到污染”，含有肉毒杆菌。之后，娃哈哈，可瑞康，多美滋，可口可乐均中招相继中招。据专家介绍，低的ph值不适宜细菌生长，高温也可以破坏毒素，但是这个温度未必可以杀死芽孢。肉毒杆菌芽孢抗热性很强，芽孢通常认为对人是无害的，但在儿童体内，由于肠道菌群的缺乏，肉毒杆菌的芽胞在儿童的肠道弱碱厌氧环境中是能够产毒的，也就是说即便将食物中的肉毒素破坏掉，但是对儿童的危害是不容忽视的，对成人也是不能排除的。肉毒杆菌，全名肉毒梭状杆菌(也叫肉毒梭菌)，是目前毒性最强的毒素之一，在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力。人们食入和吸收这种毒素后，神经系统将遭到破坏，出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。目前检测方法有：GB/T 4789.12-2003 食品卫生微生物学检验肉毒梭菌及肉毒毒素检验SN/T 2525-2010 食品中肉毒梭菌的PCR检测您是否做过有关肉毒杆菌的检测？有什么样的简便方法？而对于这样的一种细菌毒素，全世界都没有奶粉中肉毒杆菌的限量。于是，不仅是事件本身，限量标准也引起了大家的讨论。有专家表示：肉毒杆菌在乳品中并不是常见的污染物，而标准的管理是要考虑成本的，正因如此，各国都不把它列入标准。但这并不意味着根本不管，比如这次恒天然是在企业的质量控制中发现的问题。你认为该不该制定相关的标准？为防止肉毒杆菌的污染，在食品的生产过程中该如何控制和监管？

牛乳从乳腺分泌以至被挤出时为无菌状态，但挤乳过程中可能有细菌侵入，挤乳后的处理、器械接触及运输过程亦可能使牛乳中混人微生物，如若处理不当，可以引起牛乳的风味、色泽、形态都发生变化。（一）细菌牛乳中存在的微生物有细菌、酵母和霉菌，其中以细菌在牛乳贮藏与加工中的意义为最重要。细菌大小平均约为牛乳脂肪球的1/125，直径约为O.6um。1、乳酸菌乳酸菌可利用碳水化合物产生乳酸，即进行乳酸发酵。从牛乳中很容易分离得到乳酸菌，其在分类学上属于乳酸菌科。乳酸菌一般为无孢子球菌或杆菌，属厌氧型或兼性厌氧型细菌。进行乳酸发酵时，其有时产生挥发性酸或气体。 2、丙酸菌此为产生丙酸发酵的菌群，可将乳糖及其他碳水化合物分解为丙酸、醋酸与二氧化碳。此种菌为革兰氏阳性短杆菌，为制造瑞士干酪的发酵剂，其制出的干酪上有孔。3、肠细菌肠细菌寄生于肠中，为革兰氏阴性短杆菌。肠细菌为兼性厌氧性细菌，以大肠菌群、病原菌、沙门氏菌为主要菌群。大肠菌群可将碳水化合物发酵，产生酸及二氧化碳、氢等气体。因大肠菌群来自于粪便，所以被规定为牛乳污染的指标菌。4、孢子杆菌孢子杆菌为形成内孢子的革兰氏阳性杆菌，可分为好氧性芽孢杆菌属与厌氧性梭状芽孢杆菌属。5、小球菌属 小球菌属为好气性产生色素的革兰氏阳性球菌。在牛乳中常出现的有小球菌属与葡萄球菌属。葡萄球菌的菌体如葡萄串般排列，其多为乳房炎乳或食物中毒的原因菌。6、假单胞菌 假单胞菌是利用鞭毛运动的需氧性菌，荧光假单胞菌和腐败假单胞菌为其代表菌。这种菌可将乳蛋白质分解成蛋白胨或将乳脂肪分解产生脂肪分解臭。这种菌能在低温下生长繁殖。7、产碱杆菌属 产碱杆菌可使牛乳中所含的有机盐(柠檬酸盐)分解而形成碳酸盐，从而使牛乳转变为碱性。粪产碱杆菌为革兰氏阴性需氧性菌，这种菌在人及动物肠道内存在，它随着粪便而使牛乳污染。这种菌的适宜生长温度在25-37℃。稠乳产碱杆菌常在水中存在，为革兰氏阴性菌，是需氧性的。这种菌的适宜生长温度在10-26℃，它除能产碱外，并能使牛乳粘质化。8、病原菌牛乳中有时混有病原菌，会在人群中传染疾病，因此必须严格控制牛乳的杀菌、灭菌，使病原菌不存在。混入牛乳中的主要病原菌有：沙门氏菌属的伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌、肠类沙门氏菌，志贺氏菌属的志贺氏痢疾杆菌，弧菌属的霍乱弧菌，白喉棒状杆菌，人形结核菌，牛形结核菌，牛传染性流产布鲁氏杆菌，炭疽菌，大肠菌，葡萄球菌，溶血性链球菌，无乳链球菌，病原性肉毒杆菌。（二）真菌新鲜牛乳中的酵母主要为酵母属、毕赤氏酵母属、球拟酵母属、假丝酵母属等菌属，常见的有脆壁酵母菌、洪氏球拟酵母、高加索乳酒球拟酵母、球拟酵母等。其中，脆壁酵母与假丝酵母可使乳糖发酵而且用以制造发酵乳制品。但使用酵母制成的乳制品往往带有酵母臭，有风味上的缺陷。 牛乳中常见的霉菌有乳粉胞霉、乳酪粉胞霉、黑念珠霉、变异念珠霉、腊叶芽枝霉、乳酪青霉、灰绿青霉、灰绿曲霉和黑曲霉，其中的乳酪青霉可制干酪，其余的大部分霉菌会使干酪、乳酪等污染腐败。（三）噬茵体 侵害细菌的滤过性病毒统称为噬菌体，亦称为细菌病毒。目前已发现大肠杆菌、乳酸菌、赤痢菌、沙门氏杆菌、霍乱菌、葡萄球菌、结核菌、放线菌等多数细菌的噬菌体。噬菌体长度多为50-80nm，可分为头部和尾部。噬菌体头部含有脱氧核糖核酸(DNA)，可以支配遗传物质，使其对宿主菌株有选择特异性；尾部由蛋白质组成。噬菌体先附着宿主细菌，然后再侵入该菌体内增殖，当其成熟生成多数新噬菌体后，即将新噬菌体放出，并产生溶菌作用。 对牛乳、乳制品的微生物而言，最重要的噬菌体为乳酸菌噬菌体。作为干酪或酸乳菌种的乳酸菌有被其噬菌体侵袭的情形发生，以致造成乳品加工中的损失。

据法新社报道，泰国周五表示，进口自欧洲的鳄梨中检出的大肠杆菌菌株不同于德国的致命疫情菌株。泰国卫生部长扎林（JurinLaksanawisit）称，此次鳄梨中检出的大肠杆菌从平常的环境中便可找到，它不会成为一种有害健康的因子，因此当局继续维持欧洲鳄梨的进口。 泰国当局周四表示，从欧洲某国进口的鳄梨中检出了大肠杆菌，正对该种病菌是否系致命的出血性大肠杆菌作进一步测试。 截至目前，欧洲致命疫情菌株已导致30多人死亡，并且死者大部分来自德国。 德国国家卫生机构于周五表示，此次导致超过14个国家2800多人染病的疫情元凶为芽菜。 大肠杆菌感染症状包括：胃痉挛、腹泻、发烧、呕吐。

在生乳中的大部分嗜冷菌属于假单胞菌科，包括革兰氏阴性无芽孢的非发酵假单胞菌属。荧光假单胞菌是乳中最长分离的假单胞菌。草莓假单胞菌和恶臭假单胞菌重要性稍差。动物、种植物、水、土壤是乳中发现假单胞菌的主要来源。被污染的设备和空气提供了另外一个的污染来源。特别是在加工后，乳中只需要很少的菌量就能使冷藏设备中的乳在5天内腐败变质。这些微生物在乳中的生长繁殖导致的缺陷包括苦味和水果异味。虽然革兰氏阴性嗜冷菌对热没有抵抗力，但他们产生的热稳定的胞外蛋白水解酶和脂肪水解酶，能破坏热处理后的乳制品。其他的腐败革兰氏阴性杆菌包括不动杆菌、黄杆菌、嗜冷杆菌、产碱杆菌和腐败希瓦氏菌。1. 莫拉氏菌家族莫拉氏菌属于革兰氏阴性嗜冷菌，不能运动，无色素，为需氧球杆菌。他们有三类，不动杆菌属氧化酶阴性菌，莫拉氏菌属于氧化酶阳性菌，第三种为嗜冷杆菌。莫拉氏菌很少破坏乳，主要是因为它们缺乏充足的生化活性，不能发生蛋白水解和脂肪水解以产生异味。此外，它们在冷藏过程中会被假单胞菌的繁殖而超越。2. 产碱杆菌属产碱杆菌属于革兰氏阴性需氧短杆菌，不能代谢乳糖，可在水、土壤和乳中被发现。粪产碱菌可产生胞外多糖，是乳制品潜在的污染。产碱杆菌能够在冰箱温度下生长，产生不愉快的气味并降低乳制品的货架期。3. 腐败希瓦氏菌腐败希瓦氏菌属于革兰氏阴性杆菌，先前被认为是腐败假单胞菌属或腐败互生单胞菌。可在水、土壤和被污染的乳与乳制品中被发现，是导致污染奶油表面污斑的原因。4. 黄杆菌属黄杆菌是在水、土壤和乳中发现的革兰氏阴性微生物。它们可以水解酪蛋白并导致冷藏期中乳与乳制品的腐败变质。

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