二氢丹参酮分析标准品

请问，增补二，丹参—丹参酮类中隐丹参酮与丹参酮1的峰就是分不开的吗？[img=,690,511]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907251441315687_7589_1750127_3.jpg!w690x511.jpg[/img]

[align=center][b][/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][b]液相色谱泵及色谱柱对丹参酮类化合物分离度影响[/b][/align]1. [b]色谱条件与系统适用性试验[/b] 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02% 磷酸溶液为流动相B ，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为20°C 检测波长为270 nm。理论板数按丹参酮II A峰计算应不低于60000。表1 梯度洗脱程序表[img=,598,240]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041605406100_5206_2613952_3.jpg!w598x240.jpg[/img]2. [b]对照品溶液的制备[/b] 取丹参酮II A对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成25.2 μg/mL溶液，即得。3. [b]供试品溶液的制备 [/b] 取本品粉末（过三号筛）约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率140W，频率42kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。4. [b]测定法 [/b] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL, 注入液相色谱仪测定。以丹参酮IIA对照品为参照, 以其相应的峰为S 峰，计算隐丹参酮、丹参酮I的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的± 5 %范围之内。相对保留时间及校正因子见下表：表2 药典丹参酮类化合物相对保留时间及校正因子[align=left][img=,523,200]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041606235938_8876_2613952_3.png!w523x200.jpg[/img][/align]5. [b]结果与讨论[/b]5.1 二元高压泵色谱峰定位 依次将隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA对照品溶液在配置有二元高压泵的液相色谱仪上机分析，在依据保留时间对隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA进行色谱峰定位。隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA色谱图及保留时间见下图。[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041641467848_7200_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图1 丹参酮I色谱图[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041642177002_7482_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图2 隐丹参酮色谱图[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041642305674_9673_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图3 丹参酮IIA色谱图5.2 四元泵色谱峰定位 依次将隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA对照品溶液在配置有四元泵的液相色谱仪上机分析，在依据保留时间对隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA进行色谱峰定位。隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA色谱图及保留时间见下图。[img=,690,219]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041646050499_4164_2613952_3.png!w690x219.jpg[/img] 图4 四元泵隐丹参酮色谱图[img=,690,232]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041646211305_4912_2613952_3.png!w690x232.jpg[/img] 图5 四元泵丹参酮I色谱图[img=,690,220]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041646454301_6774_2613952_3.png!w690x220.jpg[/img] 图6 四元泵丹参酮IIA色谱图5.3不同色谱柱对丹参酮类化合物分离度影响（二元高压泵） 在配置有二元高压泵的液相色谱仪上，分别以XDB C18、SB C18色谱柱分析同一丹参药材供试品溶液，色谱图见图7、图8。[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041647134017_3086_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图7 XDB C18色谱柱药材色谱图[img=,690,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041647453361_5976_2613952_3.jpg!w690x307.jpg[/img] 图8 SB C18色谱柱丹参药材色谱图5.4 不同泵对丹参酮类化合物分离度影响 分别在在配置有二元高压泵、四元泵的液相色谱仪上，SB C18色谱柱分析同一丹参药材供试品溶液，色谱图见图9、图10。[align=left][img=,690,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041649350009_4280_2613952_3.jpg!w690x307.jpg[/img][/align][align=left] 图9 SB C18色谱柱丹参药材色谱图（二元高压泵）[/align][align=left][img=,690,220]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041650042149_4182_2613952_3.png!w690x220.jpg[/img][/align][align=left] 图10 SB C18色谱柱丹参药材色谱图（四元泵）[/align][b]6 讨论[/b]6.1 丹参中丹参酮类化合物含量测定时不同色谱柱、不同类型的泵对隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA分离度影响较大。6.2 丹参酮类化合物在同一厂家二元泵的分离度优于四元泵，二元泵仪器上隐丹参酮、丹参酮I分开，隐丹参酮、丹参酮I在四元泵仪器采集色谱图上是一个对称性良好的一个色谱峰，未见分开趋势。6.3 不同类型的C18色谱柱对于丹参酮类化合物分离度也有影响，本实验中二元泵仪器上XDB色谱柱分离丹参酮类化合物效果优于SB色谱柱。 综上，建议测定丹参中丹参酮类化合物时选择合适的仪器、色谱柱，丹参酮类化合物才能更好分离，进而准确定位及含量计算。

丹参中丹参酮IIA的测定和丹参中丹酚酸B的测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/10/200910311036_179302_1896702_3.jpg

[align=center][b][font=宋体][color=#333333]近期测外样发现丹参对色谱柱的柱效及柱温要求很高，现对实验中注意的问题做一下讨论：[/color][/font][/b][/align][font='Times New Roman', serif]1[/font][font=宋体]材料[/font][font=宋体]丹参药材（送检样）；乙腈（色谱级），甲醇、磷酸（分析纯）；丹参酮Ⅱ[/font][font='Times New Roman', serif]A[/font][font=宋体]对照品（购自中检院）。[/font][font='Times New Roman', serif]2 [/font][font=宋体]仪器与设备[/font][font=宋体]岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url][/font][font='Times New Roman', serif]LC-20AT[/font][font=宋体]配制[/font][font='Times New Roman', serif]UV/DAD[/font][font=宋体]检测器，安家[/font][font='Times New Roman', serif]Eclipse XDB C18[/font][font=宋体]色谱柱[/font][font='Times New Roman', serif](250mm*4.6μm*5μm)[/font][font=宋体]，超声波清洗器。[/font][font='Times New Roman', serif]3 [/font][font=宋体]实验方法[/font][font='Times New Roman', serif]3.1 [/font][font=宋体]色谱条件[/font][font=宋体]流动相（参照中国药典[/font][font='Times New Roman', serif]2020[/font][font=宋体]年第一部）：乙腈[/font][font='Times New Roman', serif]-0.02%[/font][font=宋体]磷酸水[/font][font=宋体][color=#333333]为流动相，进行梯度洗脱；检测波长[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]270nm[/color][/font][font=宋体][color=#333333]；柱温：[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]20 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]℃[/color][/font][font=宋体][color=#333333]；流速：[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]1.0mL/min[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，进样量：[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]10μL[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]3.2[/color][/font][font=宋体][color=#333333]对照品溶液制备[/color][/font][font=宋体][color=#333333]取丹参酮[/color][/font][font=宋体][color=#333333]Ⅱ[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]A[/color][/font][font=宋体][color=#333333]对照品适量，精密称定，加甲醇制成每[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]1mL[/color][/font][font=宋体][color=#333333]含[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]20 μg[/color][/font][font=宋体][color=#333333]的溶液，即得。色谱图如下：[/color][/font][align=center][img=,432,233]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209010920076504_5804_1858223_3.jpg!w432x233.jpg[/img][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体][color=#333333]图[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]1[/color][/font][font=宋体]丹参酮Ⅱ[/font][font='Times New Roman', serif]A[/font][font=宋体][color=#333333]标准品（[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]Eclipse XDB C18 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]）[/color][/font][/align][font='Times New Roman', serif][color=#333333]3.3 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]供试品溶液的制备[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333] [/color][/font][font=宋体][color=#333333]（参照中国药典[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]2020[/color][/font][font=宋体][color=#333333]年版第一部）[/color][/font][font=宋体][color=#333333]供试品溶液的制备[/color][/font][font=宋体][color=#333333]取本品粉末（过三号筛）约[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]0.3 g[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]50 mL[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，密塞，称定重量，超声处理[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]30[/color][/font][font=宋体][color=#333333]分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法[/color][/font][font=宋体][color=#333333]分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]10[/color][/font][font=宋体][color=#333333]μ[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]L[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，注入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]，测定。以丹参酮Ⅱ[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]A[/color][/font][font=宋体][color=#333333]对照品为参照，以其相应的峰为[/color][/font][font='Times New Roman', serif][color=#333333]S[/color][/font][font=宋体][color=#333333]峰，计算隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对保留时间[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。色谱图如下：[/color][/font][align=center][img=,533,590]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209010921297596_689_1858223_3.jpg!w533x590.jpg[/img][/align][align=left][font='Times New Roman', serif]4 [/font][font=宋体]结果与讨论[/font][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]使用中关键因素是流动相和色谱柱，根据待测物质的化学性质，选择合适的色谱柱，但是测定丹参的过程中发现柱温对其影响也比较大，使得待测物质不能能够有效分离，从而不能准确定性定量。丹参药材注意的就是柱温一定要在20[font=宋体]±2[/font][font=宋体][color=#333333]℃左右，进样才能达到有效分离。[/color][/font][/color][font=宋体][color=#333333] [/color][/font][/align]

10，抽取5个版友）；中奖名单：ZHAOGUANGXI（注册ID：ZHAOGUANGXI）yifan1117（注册ID：yifan1117）dahua1981（注册ID：dahua1981）牛一牛(注册ID：v2700892)翠湖园（注册ID：hhx050）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702221529_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702221529_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================筋骨痛消丸中丹参酮ⅡA的测定方法：HPLC基质：药品应用编号：102869化合物：丹参酮ⅡA固定相：Diamonsil C18色谱柱/前处理小柱：Diamonsil C18, 150 x 4.6mm样品前处理：对照品溶液的制备：取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含10 μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，研细，取约0.4 g，精密称定，至具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30ml，超声处理45min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18，150×4.6 mm，5 μm (Cat#：99901) 流动相：甲醇：水=75:25 流速： 1.0 mL/min 柱温： 30 ℃ 检测器：UV 268 nm 进样量：10 μL文章出处：迪马科技关键字：丹参酮ⅡA，hplc，diamonsil C18，钻石一代，筋骨痛消丸摘要：Diamonsil C18检测筋骨痛消丸中丹参酮ⅡA。谱图：http://www.dikma.com.cn/u/image/2015/03/19/1426742973115325.pnghttp://www.dikma.com.cn/u/image/2015/03/19/1426742977113113.png

问题：精制冠心软胶囊中丹参酮IIA的检测药典要求理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应？答案：药典要求理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于18000【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：抽奖软件，当天随机抽取3个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午3：00），每人奖励2个钻石币大川之子,纵横四海(注册ID：chuangu120)zgx3025（ID：v2844608）WUYUWUQIU（注册ID：wulin321）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601281519_583857_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601281519_583858_1610895_3.png积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。======================================================================= 精制冠心软胶囊中丹参酮IIA的检测样品制备 制备方法1. 对照品：取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含7 μg的溶液，即得。2. 供试品：取装量差异项下的本品内容物，混匀，取0.3 g，精密称定，精密加入甲醇50 mL，称定重量，超声处理（功率400 W，频率40 kHz）20分钟，轻摇使分散，70 ℃加热回流1小时，取出，趁热摇匀，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件 色谱柱Platisil ODS 250 x 4.6 mm，5 μm (Cat#：99503)流动相A：乙腈 B：0.1%磷酸 梯度流速1.0 mL/min柱温30 ℃检测器UV 270nm进样量10 μL色谱图对照品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601280958_583751_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 22.638 530257 43763 77157.275 0.969 -- *药典要求理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于18000供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601280959_583752_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 22.602 475768 39344 77352.888 0.975 -- *药典要求理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于18000本品种同时使用了DiamonsilC18、DiamonsilC18(2)两款色谱柱，在药典规定条件下进行丹参酮IIA的检测，均满足药典要求。

问题：精制冠心片中芍药苷、丹酚酸B、丹参酮ⅡA的检测使用了哪几款液相色谱柱？答案：Platisil ODS 、Diamonsil C18、Leapsil C18 【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：抽奖软件，当天随机抽取3个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午3：00），每人奖励2个钻石币吕梁山（ID：shih20j07）mengzhaocheng（ID：mengzhaocheng）梧桐（ID：mengzhou）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601251513_583448_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601251514_583449_1610895_3.png积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================精制冠心片中芍药苷、丹酚酸B、丹参酮ⅡA的检测样品制备制备方法1. 对照品：取芍药苷对照品、丹酚酸B对照品、丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL各含芍药苷80 μg、丹酚酸B 0.16 mg、丹参酮ⅡA10 μg的混合溶液，即得。2. 供试品：取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.5 g，精密称定，精密加入75%甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率400 W，频率40 kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件色谱柱Platisil ODS 150 x 4.6 mm，5 μm (Cat#：99501)流动相A：乙腈 B：0.1%磷酸溶液 梯度流速1.0 mL/min柱温30 ℃检测器芍药苷、丹酚酸B：UV 230 nm，丹参酮ⅡA：UV 270 nm 进样量5 μL 色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601251002_583419_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 12.068 1598880 89096 10350.125 0.958 -- 2 59.100 863860 30575 99529.191 0.971 76.864 *药典要求理论板数按芍药苷峰计算应不低于8000 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601251002_583420_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数 N USP拖尾因子 分离度 1 92.337 372136 25387 865104.545 0.974 -- 供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601251003_583421_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 [a

[b]Q：[b][b][b][/b][/b]宁神补心片中丹参酮ⅡA的检测，色谱条件是？[/b]A：色谱柱： Diamonsil C18 250*4.6 mm, 5 μm （Cat#：99903）流动相： 甲醇 -水=78：22流速： 1.0 mL/min柱温： 30 ℃检测器： UV 270 nm进样量： 10 μL===============================================================【活动内容】1、每个工作日上午10：00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖：抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；中奖名单：莫名其妙(注册ID：moyueqiu)PAEs（注册ID：v2911392）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）[img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810261502264899_878_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810261502287949_4850_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励：所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color]（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法：HPLC基质：药品应用编号：103658化合物：丹参酮ⅡA色谱柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-229.html]Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm[/url]样品前处理：1.对照品溶液：取丹参酮ⅡA对照品 适量， 精密称定， 加甲醇 制成每 1ml 含 16 μg的溶液，即得。2.供试品溶液：取本品10 片，除去包衣，精密称定，取约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。色谱条件：色谱柱： Diamonsil C18 250*4.6 mm, 5 μm （Cat#：99903）流动相： 甲醇 -水=78：22流速： 1.0 mL/min柱温： 30 ℃检测器： UV 270 nm进样量： 10 μL文章出处：天津应用实验室关键字：宁神补心片、丹参酮ⅡA、HPLC、2015药典、Diamonsil C18摘要：Diamonsil C18检测宁神补心片中丹参酮ⅡA。图谱：[img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2015/07/22/1437545772408543.png[/img][img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2015/07/22/1437545776938092.png[/img]

问题：宁神补心片中丹参酮ⅡA的检测：用了迪马哪几款色谱柱？答案：Diamonsil C18（2）、PlatisilODS、Diamonsil C18获奖名单：吕梁山（ID：shih20j07）999youran（ID：999youran）梧桐（ID：mengzhou）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601221610_583213_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601221610_583214_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601221610_583215_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601221611_583216_708_3.jpg【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：抽奖软件，当天随机抽取3个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午3：00），每人奖励2个钻石币积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。宁神补心片中丹参酮ⅡA的检测样品制备 制备方法1. 对照品：取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含16 μg的溶液，即得。2. 供试品：取本品10片，除去包衣，精密称定，取约1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250 W，频率33 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件 色谱柱Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm，5 μm (Cat#：99603)流动相甲醇：水=78：22流速1.0 mL/min柱温30 ℃检测器UV 270 nm进样量10 μL色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601221051_583177_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 24.663 1158959 40545 16962.300 0.964 -- *药典要求理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601221051_583178_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 24.591 1022036 36288 17183.645 0.969 -- *药典要求理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000本品种同时使用了PlatisilODS、Diamonsil C18两款色谱柱，在药典规定条件下进行丹参酮ⅡA的检测，均满足药典要求。

商品名称：精制冠心软胶囊成分：丹参、川芎、赤勺、红花、降香。功能主治：活血化瘀；用于心血瘀阻之冠心病，心绞痛。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/11/201611281133_01_1610895_3.jpg样品制备：1、对照品溶液：取芍药苷对照品、丹酚酸B对照品适量，精密称定加 75%甲醇制成每 1ml 各含15 μg的混合溶液， 即得。2、供试品溶液：取装量差异项下的本品适量，研细，取约0.5g，精密称定，精密加入75%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率400W, 频率40kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得。色谱条件：色谱柱： Platisil ODS 250*4.6 mm，5 μm（Cat#：99503） 流动相： A：乙腈 B：0.1%磷酸 流速： 1.0 mL/min 柱温： 30 ℃ 检测器： UV 265 nm 进样量： 5 μLhttp://www.dikma.com.cn/u/image/2015/08/03/1438573476130902.pnghttp://www.dikma.com.cn/u/image/2015/08/03/1438573490326137.pnghttp://www.dikma.com.cn/u/image/2015/08/03/1438573503569482.png2015药典要求理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于18000，而Platisil ODS检测的理论塔板数为77157.275，远远高出药典要求。

10，抽取5个版友）；中奖名单：玲儿响叮当（注册ID：jshbhh）zengzhengce163(注册ID：zengzhengce163)dahua1981（注册ID：dahua1981）mengzhaocheng（注册ID：mengzhaocheng）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701201542_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701201542_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================复方丹参软胶囊质量标准的研究方法：HPLC基质：药品应用编号：102722化合物：丹参酮亚ⅡA固定相：Diamonsil C18色谱柱/前处理小柱：Diamonsil C18, 250 x 4.6mm色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99903) 流动相: 甲醇-水(73 : 2 7 ) 流速: 1.5 mL/min 柱温: 30℃ 进样量: 10 μL 检测器: UV 270 nm文章出处：中国药品标准 2002,3(6):365-368关键字：复方丹参软胶囊, 丹参, 三七, 冰片, 质量标准, 丹参酮亚ⅡA, Diamonsil C18, 钻石一代, 高效液相色谱法, HPLC谱图：摘要：目的:改进复方丹参软胶囊质量标准。方法:采用TLC鉴别处方中丹参、三七;采用RP-HPLC法测定复方丹参软胶囊中丹参酮ⅡA的含量,色谱条件:Diamonsil C18;流动相:甲醇-水（73:27）;流速:1.5ml/min;检测波长:270nm。 结果:含量测定线性范围8～80μg/ml,r=0.9999。加样回收率99.60％,RSD=1.10％。结论:建立了专属性较强的薄层色谱鉴别并解决了辅料（PEG）对薄层展开的干扰;采用高效液相色谱法测定复方丹参软胶囊中丹参酮ⅡA的含量,方法简便,准确,灵敏度高,重现性好,其他组分对测定无干扰,可用于该制剂的质量控制。http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/91-9.JPG

【作者】 孙棣； 刘文英； 梁彩；【Author】 SUN Di,LIU Wen-ying,LIANG Cai Department of Pharmaceutical Analysis,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China【机构】 中国药科大学药物分析教研室； 中国药科大学药物分析教研室 南京210009； 南京210009；【摘要】 目的:建立一种快速准确同时测定丹参片中脂溶性及水溶性有效成分的方法。方法:建立PR-HPLC法,以甲醇-0.5%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,丹参素、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA在Diamonsil C18(250mm×4.6mmID,5μm)柱上得到完全分离。结果:4种物质线性良好,回收率在96.63%～100.3%之间且RSD小于2%。结论:该法能在35min 测定丹参片中脂溶性及水溶性有效成分。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207181219_378454_1761902_3.jpg

[align=center][img=,600,254]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201412140213_28_932_3.jpg!w690x293.jpg[/img][/align]近期有不少客户来向我们反馈，在按照药典条件进行丹参中丹参酮类含量测定的过程中，分离度经常达不到要求。月旭科技今天就通过对丹参的测定，一起来寻找分离度达不到要求的原因，并且解决它！[b]中国药典的色谱条件：[/b]色谱柱：月旭Ultimate Plus-C18，4.6×250mm，5μm。流动相：[table=378][tr][td=1,1,88]时间min[/td][td=1,1,178]A:0.02%磷酸溶液（%）[/td][td=1,1,112]B：乙腈（%）[/td][/tr][tr][td=1,1,88]0[/td][td=1,1,178]39[/td][td=1,1,112]61[/td][/tr][tr][td=1,1,88]6[/td][td=1,1,178]39[/td][td=1,1,112]61[/td][/tr][tr][td=1,1,88]20[/td][td=1,1,178]10[/td][td=1,1,112]90[/td][/tr][tr][td=1,1,88]20.5[/td][td=1,1,178]39[/td][td=1,1,112]61[/td][/tr][tr][td=1,1,88]25[/td][td=1,1,178]39[/td][td=1,1,112]61[/td][/tr][/table]检测波长：270nm；柱温：20℃；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。在与客户交流的过程中发现，客户的所有测定参数都一样，只有柱温有所区别，客户使用的柱温是35℃。那么问题究竟是不是出在了柱温上呢？我们今天就用35℃以及20℃两种柱温进行测试，来一探问题究竟！[align=center][b]柱温20℃测试效果[/b][/align][align=center][img=,600,255]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201413018211_3604_932_3.png!w690x294.jpg[/img][/align][align=center][color=#333333]丹参酮IIA对照溶液[/color][/align][align=center][img=,600,48]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201413055825_8536_932_3.png!w690x56.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,260]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201413084428_255_932_3.png!w690x300.jpg[/img][/align][align=center][color=#333333]供试品溶液[/color][/align][align=center][img=,600,92]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201413111660_9521_932_3.png!w690x106.jpg[/img][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][b]柱温35℃测试效果[/b][/align][align=center][img=,600,260]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201413140383_8150_932_3.png!w690x300.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,61]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201413170926_4920_932_3.png!w690x71.jpg[/img][/align][align=center][/align]怎么样？！是不是发现目标物合并掉了，并没有分开呢？所以我们得到的结论就是：在按照药典条件进丹参中丹参酮类含量测定的过程中，影响分离度的主要因素是柱温。在按照药典中要求的20℃进行测试时，分离度就可以达到要求。如果您在日常的实验中也会遇到类似的问题，包括色谱柱的使用问题，色谱柱的筛选，项目优化等等一系列的问题，均可以联系我们！我们将全心全意解决您的问题！[align=center][color=#f96e57][b]垂询热线[/b][/color][/align][align=center][color=#f96e57][b]400-810-6969[/b][/color][/align][color=#f96e57][b][/b][/color]

【作者】魏华 【摘要】：药物代谢动力学旨在通过测定生物样本中的药物或者代谢产物的浓度,定量描述药物进入体内以后的吸收、分布、代谢、排泄过程,进而阐明药物的药效或者毒性,为新药研究的代谢筛选和临床用药的疗效评价提供重要依据。丹参素为从唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge的干燥根中提取出的单体化合物,具有明显的药理活性。作为丹参的主要活性成分之一,有必要对丹参素进行药代动力学研究,探讨其体内过程。本文建立的LC-MS/MS法测定血浆、尿液、胆汁等多种生物样本中的丹参素钠浓度,满足临床前药代动力学研究对高灵敏度、高选择性检测的技术要求。此外,本文还进行了丹参素钠的体内、体外代谢研究,初步建立了体外代谢筛选研究平台,为进一步开展临床用药及剂型开发提供参考依据。 一、生物样品中丹参素钠定量分析方法的建立与确证 在临床前药代动力学研究中,定量分析方法的建立与确证占有举足轻重的地位,只有建立可靠、专一、灵敏、快速的生物样品分析方法,才能保证药代动力学研究的顺利进行。本文采用高灵敏度的LC-MS/MS方法检测生物样品中丹参素钠的浓度,生物样品以盐酸酸化后用乙酸乙酯提取其中的丹参素钠。色谱分析采用迪马Diamonsil C-18,5μm,200×4.6mm,柱温25℃;流动相组成为甲醇:水=80:20(含0.01‰甲酸),采用等梯度洗脱方式,流速0.80mL/min,3:2分流入质谱的流速为0.32mL/min,进样量20μl。质谱检测采用ESI离子源、负离子检测模式,选择MRM工作方式进行质谱分析。经完整的方法学确证,所有测定生物样品的线性、准确度、精密度、回收率、基质效应、稀释效应、稳定性等均满足生物样品的定量分析要求。该方法成功用于SD大鼠的药代动力学研究及尿液和胆汁的排泄研究。 二、丹参素钠在SD大鼠体内的临床前药代动力学研究 本试验设计SD大鼠单剂量尾静脉注射给药丹参素钠15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg三个剂量组进行药代动力学研究。采用LC-MS/MS测定方法分别测定了给药后不同时间的体内丹参素钠血药浓度。按血浆样品预处理操作,测得数据代入相应样品随行标准曲线中求得含量。经非房室模型法估算药代动力学参数。结果表明,大鼠单剂量静注给药丹参素钠15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg三个剂量组药代动力学药时曲线末端相消除半衰期(t1/2)分别为2.73h、2.37h、1.95h;AUC0～∞分别为15.29μg·h/mL、34.58μg·h/mL和58.49μg·h/mL,AUC与给药剂量基本呈正相关,相关系数r~2为0.9836。 SD大鼠单剂量尾静脉注射给药丹参素钠30mg/kg后,于给药后收集0～96h的尿液,按尿液样品预处理操作,测得数据代入相应样品随行标准曲线中求得含量。结果表明,丹参素钠在SD大鼠体内主要经尿液排泄,96h药物累积排泄量为46.99%。SD大鼠单剂量尾静脉注射给药丹参素钠30mg/kg后,于给药后0～24h取其胆汁,按胆汁样品预处理操作,测得数据代入胆汁样品随行标准曲线中求得含量。结果表明,丹参素钠在SD大鼠体内经胆汁排泄量少,24h内胆汁累积排泄量为给药剂量的0.82%。综上所述,丹参素钠在SD大鼠体内主要以原型药的形式直接由尿排出体外。 三、丹参素钠体内外代谢的初步研究 丹参素钠给药后大鼠胆汁和尿液样品的分析结果显示,其进入体内后,主要发生II相代谢反应,主要代谢物为:甲基化丹参素~-、硫酸酯结合物~-、甲基化硫酸酯结合物-、经尿液排出体外;胆汁中主要存在着甲基化丹参素。丹参素钠经在体肠灌流、原位肝灌流等实验后,主要产生甲基化代谢产物,说明这些器官组织中存在着参与其甲基化反应的酶。经过体外肝匀浆、肝微粒体、肾匀浆、肾微粒体温孵后,主要代谢产物为甲基化丹参素。丹参素钠在大鼠肝微粒体酶中代谢的酶动力学结果显示,它在大鼠肝微粒体酶中代谢的Vmax为185.19ng/(mL·min·mg)蛋白,Km为98940.74ng/mL,即5.0×10~(-4)mol/L,内在代谢清除率Clint为1.87×10~(-3)mL/(min·mg)蛋白。此外,本章还进行了丹参素钠在COMT单一酶中的酶促反应动力学研究。与肝微粒体酶相比,丹参素钠与COMT有较大的亲和力,Vm、Km与Clint均偏大:Vmax为243.90ng/(mL·min·mg)蛋白,Km为102156.1ng/mL,即5.16×10~(-4)mol/L,内在代谢清除率Clint为2.34×10~(-3)mL/(min·mg)蛋白。说明催化丹参素发生甲基化反应的主要酶是COMT。【关键词】：丹参素 LC-MS/MS 药代动力学 排泄 大鼠 代谢产物 肝微粒体 酶促反应动力学 COMT 【学位授予单位】：第二军医大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R96http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210834_384889_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210834_384890_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210834_384891_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210834_384892_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210834_384893_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210835_384894_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210835_384895_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210835_384896_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210835_384898_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210835_384899_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210835_384900_2352694_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208210836_384901_2352694_3.jpg

RP-HPLC测定丹参通脉颗粒中丹酚酸B的含量目的：建立一种高效液相色谱法测定丹参通脉颗粒中丹酚酸B的含量的方法。方法：色谱柱　Kromasil C18 4.6×250mm 5μm，流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水 (30：10：1：59)，检测波长286nm，流速0.8ml.min-1。柱温30℃。结果: 丹酚酸B在9.2μg·mL-1（0.0184μg）―184μg·mL-1（0.368μg）范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数r = 0.9995；丹酚酸B的回收率为100.46%，相对标准偏差RSD=1.87%,丹参通脉颗粒中丹酚酸B的含量为210.99mg.g-1, RSD=1.03% 。 结论：本法灵敏、准确、专属性强、重现性好，可作为丹参通脉颗粒剂中丹酚酸B的含量测定方法。关键词：丹参通脉颗粒；丹酚酸B[

目的：研究不同干燥方式对丹参质量的影响方法：以指标性成分进行HPLC和TLC检测一、三种干燥方法简介：减压干燥原理：湿物料进行干燥时，同时进行着二个过程：（1）热量由热空气传递给湿物料，使物料表面上的水分立即气化，并通过物料表面处的气膜，向气流主体中扩散；（2）由于湿物料表面处水分气化的结果，使物料内部与表面之间产生水分浓度差，于是水分即由内部向表面扩散。因此，在干燥过程中同时进行着传热和传质二个相反的过程。干燥过程的重要条件是必须具有传热和传质的推动力。物料表面蒸气压一定要大于干燥介质（空气）中的蒸气分压，压差越大，干燥过程进行得越快。冷冻干燥（以下简称冻干）就是将含水物质，先冻结成固态，而后使其中的水分从固态升华成气态，以除去水分而保存物质的方法。喷雾干燥是利用不同的喷雾器，将悬浮液或黏滞的液体喷成雾状，与热空气之间发生热量和质量传递而进行干燥的过程。成品以粉末状态沉陷于干燥室底部，连续或间断地从卸料器排出。二、TLC检测结果（1）取本品粉末lg，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥于，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参酮Ⅱ对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)一乙酸乙酯(4：1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。结果如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112031621_335254_1913683_3.jpg斑点依次为：对照、喷雾干燥样品、减压干燥样品、冷冻干燥样品（2）取本品粉末0.2g，加75%甲醇25ml，超声30min，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加75%甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯一三氯甲烷一乙酸乙酯一甲醇一甲酸(2：3：4：0.5：2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112031623_335255_1913683_3.jpg斑点依次为：对照、喷雾干燥样品、减压干燥样品、冷冻干燥样品三、HPLC检测结果 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的普通C18柱；以甲醇-乙腈-甲酸- 水(30：10：1：59)为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备 [font=宋

一、仪器：Varian HPLC 230泵/325紫外检测器（单波长）、配国产柱温箱、手动进样、Varian C18(5μm，4.6mm×150mm).二、实验过程：测丹参片中丹参酮IIA溶出度 1、配系列丹参酮IIA标准溶液（溶剂用85%甲醇），共5个标样，先在紫外分光光度计上进行光谱扫描，峰值检出，在269.3nm有最大吸收峰，再做定量测定，标准曲线相关系数为0.998，溶出介质为稀盐酸，溶出样品按时间点分别取样7个，针筒过滤器过滤，不稀释上紫外测试，30分钟前溶出不明显，测出吸光度值低，30分钟后有明显溶出，吸光度值高，位于标3与标4之间。 下面是标样的及溶出样品的紫外定量测定图:(见17楼的补充贴) 2、溶出条件不变，溶出样品采用液相进行测试，液相条件：检测波长270nm；流动相：85%甲醇：15%水；等度洗脱，分析时间10分钟；柱温：30度；流速：1ml/min。 3、取丹参酮IIA标准溶液（溶剂用85%甲醇），共5个标样，分别依次手动进样，进样量100uL(定量环20uL)，标样均在5.4min左右出峰，各标样保留时间非常重合，对照品标准曲线相关系数：0.996。 下面是5个标样的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察，从前往后分别是标1-5：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012003_256541_1630080_3.jpg 下面的图是标准曲线图，标1的峰面积有的偏小，但还是基本成线性：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011011954_256536_1630080_3.jpg 4、前面实验过程都比较顺利，在预想在范围内，问题出现在最后时刻，开始对溶出的7个时间点样品（直接从溶出杯中取样，溶剂为稀盐酸，针筒过滤器过滤）上HPLC进行测定，怪事发生了，竟然没出有一个出峰的，连一个其它的杂峰都没有，只有开始时的一个溶剂峰。 下面是7个溶出样品的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012030_256550_1630080_3.jpg 5、原来我们做过丹参片中丹参酮IIA含量的液相测定，方法基本一致，标准曲线比较容易做，样品用85%甲醇超声定容，除了和标样在同样位置出峰外，在这峰之前还有其它成分的峰。 下面是以前做的丹参片样品及丹参酮IIA标样的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察，前面的丹参片，后面的丹参酮IIA：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012020_256546_1630080_3.jpg 6、我怀疑稀盐酸在其中做怪，于是调整样品配置方法，将第6、7时间点采集的溶出样品各取1mL，用85%甲醇定量到10mL，以图消除稀盐酸的影响，重新配制的第6、7的溶出样品分别进样，结果还是让人晕倒，竟然还是一条直线，除了溶剂峰外，一个峰都没有，跟进一针试剂空白一样，由于今天太晚了，没有再做其它方案调整，于是冲柱2h后走人了，谱图也忘记拷贝了。 下面是用甲醇稀释过的溶出样品6、7的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012026_256548_1630080_3.jpg三、回家后，想想今天真是郁闷啊！本想今天实验十拿九稳，大不了线性不好，但竟然不出峰，让我摸不着头脑，做液相以来，这次让我最纠结，急盼高手指点迷津，万分感谢！四、第二天调整了色谱条件，同等度洗脱改为梯度洗脱，甲醇由60%梯度到90%，先进了一针标样，看出峰靠后，于是增加了分析时间，又进了一针同样的标样，但结果都让人不满意，标样出峰很怪，标样峰前面的驼峰正常吗？ 下面是梯度洗脱方法做的两次标样，两次的分析时间不同，第一针是15分钟，第二针改为了20分钟：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012040_256557_1630080_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012044_256561_1630080_3.jpg五、再次调整了色谱条件，改变梯度洗脱方式，先前甲醇由60%梯度到90%，改为甲醇由70%梯度到95%，进了一针溶出样品，看是否有出峰？ 下面是改变梯度洗脱方法进的一针溶出样品，分析时间是20分钟：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012049_256563_1630080_3.jpg六、问题不但没有解决，反而梯度洗脱又出了让人看不懂的色谱图，第一次梯度的色谱图中的驼峰还可以理解成梯度洗脱使得基线上漂，而第二次梯度的色谱图中驼峰与目标峰中间竟然又多出了一个峰，无法理解，再次陷入了困局，望高手再度出山，来拨云见日，多谢了！ 主贴内容在不断更新，望各位版友能持续观注！！！

[size=3][font=宋体]指纹图谱说白了就是出现的色谱峰间的分离度尚可以，没有含量测定要求那样严格，依我之见，分离度在[/font][font=Times New Roman]1.2[/font][font=宋体]以上即可，小峰间的分离度即使在[/font][font=Times New Roman]1.0[/font][font=宋体]以下，只要能区别，也可接受；这里的色谱无论是常用的液相、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]、电泳，或是薄层等。[/font][/size][size=3][font=宋体]现以丹参药材为类，丹参药材中含有一类极性较弱的丹参酮类成分：隐丹参酮、丹参酮[/font][font=Times New Roman]IIA[/font][font=宋体]、二氢丹参酮[/font][font=Times New Roman]I[/font][font=宋体]、丹参酮[/font][font=Times New Roman]I[/font][font=宋体]、二氢丹参酮等成分，以此为有效成分，进行提取，用液相进行分离，或用对照品，或用质谱等手段确定其峰归属，以此来检测丹参药材中丹参酮成分的变化，从一个侧面检查丹参药材的质量。[/font][/size][font=宋体][size=3][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]显示的是样品中含氢基团的倍频或泛频吸收峰，峰的特点是多、杂、低，需要先用常规方法测定所需值，再以之为一级数据，与其相应的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]下各吸收波长下的吸收值以化学计量学软件分析建立模型，如果模型良好，就可以此模型预测此类样品的相应值了。[/size][/font][size=3][font=宋体]同样以丹参药材为例，常规方法即是前面所说的丹参药材丹参酮成分的指纹图谱，以某一成分为指标，如丹参酮[/font][font=Times New Roman]IIA[/font][font=宋体]，以其峰面积或峰高为[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]，其它峰以相对值，这组二维数据构成一级数据，一维为[/font][font=Times New Roman]n[/font][font=宋体]个丹参酮成分，二维为各丹参酮成分的相对值；测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]后，在各吸收波长下会有各自的吸收值，此为二级数据；用化学计量学软件分析，会得出各丹参酮成分的预测值，这样就得出了丹参药材的丹参酮成分的预测指纹图谱。[/font][/size][font=宋体][size=3]如果有一软件，在指纹图谱与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]间建立模型，则由此模型可直接预测出指纹图谱。[/size][/font][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003151802_206079_1604723_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003151802_206080_1604723_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003151803_206082_1604723_3.jpg[/img][font=宋体][size=3]以此类推，建立了各成分的模型，也就有了各成分的相对预测值。[/size][/font][size=3][font=宋体]同样，也可以建立一个以样品数[/font][font=Times New Roman]n[/font][font=宋体]、成分数[/font][font=Times New Roman]m[/font][font=宋体]、相对值[/font][font=Times New Roman]q[/font][font=宋体]的三维图，当然这种想法是好的，但是否可行，不得而知。[/font][/size][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003151804_206083_1604723_3.jpg[/img][font=宋体][size=3]当然，直接预测指纹图谱还要考虑各峰的相对保留时间值等。请各位专家指教！[/size][/font]