含志贺氏菌増菌肉汤均

大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani）都是具有高度传染性、危害严重的革兰阴性肠道致病菌, 病人感染后的临床表现相似，如发热、水样腹泻、剧烈腹痛等，严重可致死亡。临床上大肠埃希菌和志贺菌的正确鉴定对临床治疗非常关键，因为不同的菌株间有毒力和耐药性的差异，感染不同的致病菌，需要采用不同的治疗方案。从全基因组角度上，大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani）的平均核苷酸一致率＞95% ，保守DNA＞69%，符合同一个种的定义，它们在菌落形态及生物学特性方面都非常相似，因此在临床实验室的常规工作中很容易被混淆，影响疾病的准确治疗。即使是通过16S rRNA 测序也只能鉴定到志贺菌-大肠埃希菌，并不能将其准确区分，进一步的鉴定需要依赖生化反应及血清学试验，但是这两种鉴定手段的实验步骤复杂、耗时很长，根本无法满足临床上对时效性的要求。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱( matrixassistedlaser desorption / ionization time of flight massspectrometry，MALDI-TOF MS) 是近年发展起来的一种新型软电离质谱技术，具有快速、准确、操作简便、高通量、低成本等优势，已经被广泛应用于微生物的分型鉴定。由于大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani）基因水平上同属于一个种，特征性质谱图高度相似，如果仅仅使用目前常用的微生物分型算法进行数据库检索，仍然会有错误鉴定的情况存在。我公司基于自主知识产权的Ebio ReaderTM 3700M飞行时间质谱系统平台，开发出了一套功能强大的人工智能算法，准确区分基因型相近的难辨菌的解决方案，如大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani），准确度达到95%以上。我们利用Ebio ReaderTM 3700M 分别对福氏志贺菌(Sh.flexneri)、大肠埃希菌（E.coli）以及两种菌株的混合菌进行质谱鉴定以及蛋白质谱图比较分析。激光频率20 Hz，每个样本进行200次激光采集，采集相对分子质量 2000Da～15000Da的蛋白质图谱，通过数据分析软件对采集到的3个样品图谱进行比对分析。3种样品均在 2691、3737、4869、5381、6255、7274、9067、9743、10300 m /z 处出现相似的特征峰，其蛋白质谱图极为相似（图1），如果单纯通过数据库检索的话，极大可能会造成错误鉴定。 图1：大肠埃希菌、福氏志贺菌以及混合菌的质谱图之后，我们分别选取福氏志贺菌51例，大肠埃希菌56例，利用Ebio ReaderTM 3700M飞行时间质谱系统进行质谱分析，通过神经网络软件比对观察两组细菌蛋白峰的差异，并运用强大的人工智能算法将采集到的谱图数据建立分类模型，然后利用此模型进行了盲样鉴定。结果可以将大肠埃希菌和福氏志贺菌完美地区分开，分离度分别达到99.5%和95.4%，混合菌的分类结果显示大肠埃希菌和福氏志贺菌分别为76.2%和23.8%，也说明了此样品为混合样本，且有一定的定量效果（如下表）。 通过软件的聚类分析功能，更加直观地显示我们建立的这套方案可以将大肠埃希菌和福氏志贺菌以及二者的混合菌有效的分离（图2）。 图2：大肠埃希菌、福氏志贺菌以及混合菌的聚类分析在此MALDI-TOF微生物自动鉴定检测系统中，公司使用了自主研发、具有深度学习分析功能的神经网络人工智能软件。通过上述案例证明此套人工智能算法可实现对大肠埃希菌和志贺菌的准确区分鉴定，弥补了质谱技术在鉴定亲缘关系相近菌种能力的不足，达到了精准医疗的目的，对临床诊断及治疗方面具有重要意义。

卫生部近日发布通知，就《食品安全国家标准食品中致病菌限量》征求意见。新标准对食品中可能出现的沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌等8种致命菌的含量作了明确规定。 　　新标准规定了肉及肉制品、水产品、蛋制品、粮食制品、豆类制品、焙烤及油炸类食品、糖果、巧克力类及可可制品、调味品、即食食品等17类食品的致病菌含量。其中，对所有采用罐头工艺加工生产的食品，统一规定“罐头工艺生产的食品符合商业无菌”。据卫生部有关人士介绍，该标准在制定过程中，充分考虑到我国的实际情况，结合我国食物中毒的高危食品和致病菌的风险，分析了致病菌对我国各类食品可能产生的风险，同时还参考了国际组织和发达国家的相关标准。

近年，本市食物中毒起数、人数和发生率同比不断下降。/晨报记者 何雯亚 　　春天的脚步日益临近，随着气温逐渐升高，食物污染和变质导致的微生物性食物中毒开始发生。全方位阻截食品致病菌，将从国标开始。今年7月1日，卫生部首次制定的食品中致病菌限量标准&mdash &mdash 《食品中致病菌限量》将开始实施。近日，卫生部门在官网上公布了相关问答。 　　上海市食药监局副局长顾振华昨天透露，由致病菌引起的食源性疾病是食品安全最大威胁。去年，本市集体性食物中毒事故报告发生率为0.77例/10万人口，在已查明致病因素的6起食物中毒中，4起为细菌性。 　　去年二季度集体食物中毒多 　　2013年上海共报告发生集体性食物中毒8起，中毒人数184人(无死亡)，中毒发生率为0.77例/10万人口，继续保持低位，食物中毒起数、人数和发生率同比2010年，分别下降 20%、38.3%和50.3%。上海的集体性食物中毒发生率2006年后控制在6例/10万人口以下，到2011年后已经控制在1例/10万人口以下。 　　从中毒发生时间分析，去年上海集体性食物中毒高峰发生在第二季度，达5起，三、四季度各发生1起和2起。从中毒肇事单位分析，食物中毒中涉及公共餐饮单位3起、集体食堂2起、集体用餐配送单位1起、农村家庭自办酒席1起、无证餐饮单位1起。从中毒致病因素分析，已查明致病因素的6起食物中毒中，4起为细菌性，其中沙门氏菌2起，金黄色葡萄球菌肠毒素1起，副溶血性弧菌1起 另外2起食物中毒的致病因素分别为亚硝酸盐和皂素。这些中毒事件均由食品从业人员不规范操作等原因造成，其中生熟交叉污染3起，从业人员带菌操作、熟食储存不当、食品未烧熟煮透、食品污染和亚硝酸盐误用分别各有1起。&ldquo 在去年的集体食物中毒中，三分之二是由食品致病菌引起的，与全国情况相当。&rdquo 顾振华指出，由致病菌引起的食源性疾病是当前最主要的食品安全问题。 　　据悉，食源性疾病亦称食物中毒，即食用了含有有毒、有害物质的食品后，引起的中毒性或感染性疾病，比如呕吐、腹泻等，严重的甚至导致肝、脑、肾等脏器损伤以及死亡。 　　食品中可能造成食源性疾病的生物性危害主要分为三类：一是致病菌及其毒素，如沙门氏菌、单增李斯特菌、金葡菌等，它们主要导致胃肠道疾病，严重的会造成肝、脑、肾等脏器的损害，甚至死亡 第二类是产毒真菌和真菌毒素，包括黄曲霉毒素等，它们或造成人的急性中毒，或因长期摄入造成消化道癌症等疾病 第三类是病毒和寄生虫。 　　即食生肉制品等列入标准 　　如何预防细菌性食源性疾病的发生，保证食品安全?专家坦言，以往涉及食品致病菌限量的现行食品标准共计500多项，标准中致病菌指标的设置存在重复、交叉、矛盾或缺失等问题。而今年7月1日将实施的 《食品中致病菌限量》(GB29921-2013)弥补了这些缺陷，对肉制品、水产制品、粮食制品等共11大类预包装食品分别制定了沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157：H7、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌5种致病菌的限量规定。 　　记者发现，此次纳入规定的11大类食物绝大多数为细菌性食物中毒风险高的预包装即食食品，肉制品、水产制品、即食蛋制品、粮食制品、即食豆类制品、巧克力类及可可制品、即食果蔬制品、饮料、冷冻饮品、即食调味品、坚果籽实制品等都被列入在内。 　　其中，肉制品包括熟肉制品和即食生肉制品 水产制品包括熟制水产品、即食生制水产品和即食藻类制品，包括活、鲜、冷冻鱼(鱼片)、虾、头足类及活蟹、活贝等，也包括以活泥螺、活蟹、活贝、鱼籽等为原料，采用盐渍或糟、醉加工制成的可直接食用的腌制水产品。即食藻类制品指以藻类为原料,按照一定工艺加工制成的可直接食用的藻类制品，包括经水煮、油炸或其他加工的藻类。粮食制品，包括方便面、米制品、糕点、蛋糕、片糕、饼干、面包等食品。冷冻饮品则包括冰淇淋类、雪糕(泥)类和食用冰、冰棍类。即食调味品包括酱油、沙拉酱、鱼露、蚝油、虾酱。 　　果冻等暂不设致病菌限量 　　沙门氏菌、金黄色葡萄球菌是细菌性食物中毒的主要致病菌，涉及食品较多。新规中，全部11类食品都有沙门氏菌限量规定。 　　感染单核细胞增生李斯特氏菌后会引发败血症、脑膜炎等，此次仅在肉制品中有限量要求。大肠埃希氏菌O157:H7容易引发出血性腹泻和肠炎，副溶血性弧菌则主要感染水产制品，或交叉污染肉制品。 　　根据新规定，在肉制品中沙门氏菌的限量要求为，在同一批次采集的五份样品中，不允许任一件样品检出，单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7的限量要求与此相同。 　　乳与乳制品、特殊膳食食品中的致病菌限量，按照现行食品安全国家标准执行。由于蜂蜜、脂肪和油及乳化脂肪制品、果冻、糖果、食用菌等食品或原料的微生物污染风险很低，不设置致病菌限量。标准在实施过程中，根据风险监测和风险评估结果，适时修订增加相关食品类别。 　　另外，志贺氏菌污染通常是由于手被污染、食物被飞蝇污染、饮用水处理不当或者下水道污水渗漏所致。根据我国志贺氏菌食品安全事件情况，以及我国多年风险监测极少在加工食品中检出志贺氏菌，此次标准未设置志贺氏菌限量规定。 　　7月1日前，监管部门允许并鼓励食品生产经营单位按照本标准执行。在标准实施日期之后，食品生产经营单位、食品安全监管机构和检验机构应按照本标准执行。在实施日期前已生产的食品可在保质期内继续销售。顾振华表示，7月1日以后，上海食品监管部门也将严格按照食品中致病菌限量这个标准，对食品中致病菌进行检验。食品生产经营者应当严格执行食品生产经营规范标准或采取相应控制措施，严格生产经营过程中的微生物控制。

大肠菌群平板计数法的常见问题有哪些？1、VRBA培养相关问题（1）所用器皿是否需要灭菌？答：不需要。配制培养基所用到的锥形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要灭菌，但要求一定要清洗干净，表面无污渍、无残留。煮沸完成后，取下锥形瓶，用一般常用的卫生纸（软纸）覆盖瓶口，用橡皮筋缠绕，待冷却至适宜温度即可倾注培养基。在倾注培养基时，须点燃酒精灯，稍微灼烧锥形瓶口。（2）如何保持“煮沸2min”？答：可以用电磁炉或电热板进行加热煮沸，在该培养基即将煮沸时调低温度。实际操作时，不需要严格按照此要求进行，加热煮沸数秒即可。原因：本培养基很难保持煮沸2min，一旦煮沸，则培养基很快上涌、翻腾，若不调低温度或立刻采取其他措施，则培养基可在数秒内喷涌出来，严重者可喷涌2米以上、电磁炉周围1—2米范围内都是培养基飞溅的范围（实验室危险因子之一）。（3）若培养基未用完，是否可以冷藏起来下次用？答：不可以。4789.28中已规定，固体培养基最多允许熔融1次（指的是经过高压灭菌冷却后的培养基还可以熔融一次后使用）。且VRBA培养基冷却后，再次熔融时非常容易喷涌，若温度控制不当，底部培养基熔融后很快就会发生喷涌（即培养基未完全熔融就会发生喷涌现象）。（4）倾注完成后是否需要“覆盖一层”？如何覆盖？答：一般情况下不需要覆盖。在实际操作过程中，若检验员初次接触该食品（或食品品类），则有必要在倾注培养基后再覆盖一层（原因是不清楚该样品是否会发生蔓延）。而如此往复测试几次后，若该样品或食品品类均不存在蔓延现象，则以后的实验中都不需要进行覆盖。若重复多次测试后都有蔓延现象，则以后的检验中zuihao都进行覆盖，zuihao是在原培养基已凝固或半凝固（不会发生晃动）时再倾注一层培养基（“一层”是指缓慢倾注培养基至培养基刚好能够覆盖整个平皿）。 2、如何确定培养基上长的是不是大肠菌群？答：建议新手们认真按照标准进行证实试验，此证实试验简单易操作，每一次VRBA上有菌落生长都进行证实试验，如此往复3-4次，对于哪种形态才是大肠菌群已经能够了然于心。3、两个梯度都长了菌，如何选取？答：选取15-150CFU之间的平板（指的是VRBA平板上所有菌落数在此范围），挑取可疑菌落进行证实试验。详细举例说明：若有两个连续梯度的4个平板上菌落数均在15-150之间，则4个平板上的菌落都要挑取进行证实试验，实际操作时，可灵活操作，如：1:10的两个平板上的菌落数分别为120、123，1:100的两个平板的菌落数分别为16、18，严格来讲必须至少在每个平板上分别挑取5个可疑菌落、5个典型菌落进行证实试验，如此需要40根GBLB肉汤管。建议使用镍合金接种环（即传统的接种环，而不是一次性塑料接种环），因为VRBA上生长的菌落（无论典型或可疑）大部分长在底层、且菌落一般较大，被培养基覆盖，传统的接种环较细，用以刮去上层培养基较方便，挑取菌落也较方便。 4、如何进行证实试验？菌落选取数量？答：同上所述，建议新手们VRBA上的所有不同形态的菌落都进行证实试验。每种不同形态都挑取5-10个进行证实试验（若BGLB管足够，建议多挑取几个进行试验）。注意：A.每种可疑菌落挑取5个，每个菌落放入1管GBLB管中；B.“产气者，记为大肠菌群阳性管”，就要求在实验前须认真筛选BGLB管，凡产气的GBLB管应弃去不用。 5、结果如何计算？答：首先，在VRBA培养24h后进行计数，分别计数可疑大肠菌群和典型大肠菌群（何为可疑、何为典型？同“2”，检验员多进行几次实验后自然很清楚典型的大肠菌群是何种形态）的数量。假如在1:10的平板上可疑大肠菌群有10个，典型大肠菌群有6个；其次，进行证实试验，挑取上述可疑和典型大肠菌群各5个（或者全部挑取），假如10个可疑大肠菌群中有3个证实为阳性，6个典型大肠菌群中有5个证实为阳性，则计算方法如下：最终大肠菌群数=经证实的大肠菌群数=可疑大肠菌群经证实的数量+典型大肠菌群经证实的数量=10×（6/10）×10+6×（5/6）×10=110。 6、若平板上很多菌落，最终证实全部为阴性，结果如何计算？答：根据第3条,选取适宜菌落数的平板挑取菌落进行证实试验，若证实全部为阴性，则需要再挑取更低稀释度的平板上的菌落（建议可疑和典型菌落分别挑取10个）进行证实试验，若第二次证实试验均呈阴性，以＜1乘以zuidi稀释度进行计算，如：1:10的平板菌落数分别为120、123，1:100的平板上菌落数分别为16、18，首先挑取1:100的两个平板上的菌落进行证实试验，若全部为阴性，再挑取1:10的两个平板上的菌落进行证实试验，若1:10的平板上的菌落数证实为阴性，则最终计算过程为＜1x10，最终结果为＜10；若1:10的的平板上的菌落有阳性管，则按照第5条进行计算。中国微生物菌种查询网专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

喷雾干燥技术微囊化鼠李糖乳杆菌ATCC 7469益生菌是一种活的微生物，当摄入足够的量时会对健康有益，只有在生存能力（107-1010 CUF m/L）得到保护的情况下才能发挥其作用。益生菌通常是乳杆菌和双岐杆菌，它们常与胃肠道有关；它们通常以冻干培养物的形式供应，或者被雾化并直接添加到食物中。益生菌功能食品在市场上需求量很大，酸奶和发酵乳制品通常被用作这类生物活性微生物的载体；然而，人们对在其他类型的非乳制品基质中掺入益生菌菌株越来越感兴趣，尤其是对于患有乳糖不耐受症、对酪蛋白过敏或与乳制品有关的其它问题的消费者。一些研究报告了微胶囊益生菌的应用。例如，将益生菌菌株掺入奶酪、巧克力涂层和巧克力中，以及掺入果汁、蛋黄酱、黄油、肉类和烘焙产品等非乳制品中。益生菌菌株对胃肠道健康很重要，因为它们可以预防肠道炎症，为上皮细胞提供保护，并调节抗体。它们可以产生细胞因子或趋化因子，改善乳糖不耐受，增加对结直肠癌的保护，抑制幽门螺杆菌活性，并用于治疗食物过敏和预防急性腹泻。然而，这些微生物有不幸的缺陷，特别是在菌株存活方面。喷雾干燥是微胶囊化最广泛使用的方法之一，因为其成本低，在最佳干燥条件下具有高存活率，并且在配方中加入了保护剂。近年来，乳清蛋白作为益生菌保护剂的使用获得了越来越多的兴趣，因为这些蛋白是提高益生菌活性的天然载体，并且由于结构和理化特征，可以作为胃肠道中的递送系统。蛋白质可以在干燥过程中增加益生菌的存活率，因为它们能够形成降低热应力的保护膜。糖的添加也会影响干燥的益生菌制剂的存活。研究人员肯定了糖（如肌醇、山梨醇、果糖、乳糖、葡萄糖和海藻糖）对脱水细菌细胞的保护作用。研究发现，海藻糖等糖是一种能够通过氢键与蛋白质分子相互作用的二糖；它可以在脱水和再水化过程中替代蛋白质周围的水分子，形成一种玻璃状基质，稳定生物大分子。科学家研究了使用奶酪乳清与淀粉、阿拉伯胶、麦芽糖糊精和乳清蛋白浓缩物联合干燥鼠李糖乳杆菌 64 的载体剂选择。另一方面，干燥温度是影响存活率的因素。例如，喷雾干燥的植物乳杆菌 WCFS1 再低干燥温度下表现出较高的存活率。在此背景下，本研究以 WPC、麦芽糊精和海藻糖为原料，采用喷雾干燥的方法对鼠李糖乳杆菌 ATCC 7469 进行微囊化，并评估微囊化对细胞活力和干粉性能的影响。以喷雾干燥条件（包括进口温度、空气流量和进料泵）为自变量，益生菌存活率、水分含量、水分活性和有效产量为因变量。采用响应面法对喷雾干燥包裹的鼠李糖乳杆菌的存活率进行了优化，并对粉末的稳定性进行了评估。1样品制备按最佳稳定性配方乳清浓缩蛋白：麦芽糊精：海藻糖（75：10：15）的比例采用超滤的方法制备乳制品悬浮液。将冻干的鼠李糖乳杆菌 ATCC 7469 菌株悬浮于 2ml 培养基中，在 MRS 肉汤（蛋白胨：10.0g，牛肉浸粉：10.0g，酵母浸粉：5.0g，葡萄糖：20.0g，吐温80：1.0g，磷酸氢二钾：2.0g，醋酸钠：5.0g，柠檬酸铵：2.0g，硫酸镁：0.1g，硫酸锰：0.05g，pH6.2±0.2，25℃）中重新激活制备细菌悬浮液。2实验过程在磁力搅拌下将鼠李糖乳杆菌 ATCC 7469 菌株悬浮液添加到每个乳悬浮液中，在微囊化过程期间使所述分散液保持在恒定的搅拌状态。喷雾干燥仪选用瑞士步琦 B-290，通过改变进口温度（120℃-180℃）、干燥空气流量（70%-90%，即：28-35m3/h）和进料量（10%-55%，即 3-17mL/min）来进行工艺摸索。▲S-300工艺探索采用响应面法和二次复合中心设计对益生菌微囊化进行了优化，其自变量有进口温度、空气流速和进料流量。在最优理论条件下进行了三次实验验证。图1 考察了菌株存活率的响应面变化。由图可知存活率与出口温度呈反比，低温时存活率在 69%、高温时存活率在 23%。其他科学家在使用含益生元的脱脂乳制备鼠李糖乳杆菌 GG（ATCC 53，103），70℃ 时的存活率为 76%。也跟我们的研究结果相吻合。图2 考察了水分含量的响应面变化。从图可得到进口温度与水分含量之间呈反比关系，当进口温度与进料量较高时，粉末的水分含量较低，结合存活率考虑，水分含量在 3.0%-5.8% 之间，与其他报道的数值相接近。图3 考察了水活度的响应面变化。在较高的进口温度下，进料量和气体流量得到了较低的水活度值，因素与结果之间呈反比关系。其他使用麦芽糊精、乳清蛋白浓缩物和葡萄糖的相关研究中，水活度的值与本研究中活性最高的粉末报告结果一致。3实验结果确定益生菌的包封中壁材的最佳比例对于提高微生物对抗整个胃肠道条件的稳定性很重要。在干燥过程中指定最佳条件以最大限度地提高作为壁材的蛋白质-海藻糖-麦芽糊精混合物的保护能力并因此提高鼠李糖的存活值也是重要的。因此，使用响应面方法确定干燥过程的最佳条件。表2显示了鼠李糖乳杆菌微囊化的最佳操作参数，结果表明，理论模型可以很好地近似实验值（差异＜10%）。得到的最佳喷雾干燥条件是进口温度、空气流量和进料泵流量分别为169℃、33m3/h和16ml/min，存活率为70%，吸气率为84%，出口温度为52℃，总体满意度为0.96。物理性质评价如图4所示，得到的粉末水活性动力学显示了较高的吸水能力，这可能是海藻糖作为低分子量碳水化合物，表现出的分子运动和扩散效应，与用于包封基质的典型吸水行为一致。吸湿性随着储存时间的延长有增加的趋势，直到达到某种程度的平衡。因此加入了 WPC 来降低吸湿性，因为它的表面活性和形成具有较高 Tg 膜的能力。粒径和形态结果如图5显示。（a）在最佳工艺参数上制备的粉体，其微胶囊紧凑，类球形形状，具有不同的大小和不规则的表面与压痕，外表面显示无裂缝或破坏的墙壁，这是确保更高的保护和更低的气体渗透性的基础。4结论结果表明，蛋白质-海藻糖-麦芽糊精混合物是包裹鼠李糖乳杆菌的良好壁材，在干燥过程中表现出重要的热保护作用，并提高了其存活率；通过响应面方法优化的喷雾干燥工艺条件生产的微胶囊具有可接受的理化性质——水分、水活性、吸湿性和粒径等，为益生菌的微囊化提供了思路。5文献来源Microencapsulation of Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 by spray drying using maltodextrin, whey protein concentrate and trehalose.

摘要 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术在微生物学检验中具有检测速度快、鉴定准确率高、检测成本低、检测通量高、可鉴定菌种类型广泛等特点。随着微生物质谱技术的快速发展和广泛应用，MALDI-TOF MS的规范化使用及管理、技术要点等内容亟须广泛普及，以更好推动该技术在临床微生物学实验室的高效使用。专家组通过对国内外相关指南共识及文献的阅读和讨论，结合我国MALDI-TOF MS的临床应用现状，就临床实际工作中存在的常见问题，对影响或决定MALDI-TOF MS技术规范化使用、结果准确解读、科研探索等方面存在的问题进行了反复和深入的讨论，最终形成本共识。随着实践经验的不断总结和临床研究的不断深入，编写组将不定期对共识内容进行更新和完善。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS）是一种新型软电离有机质谱技术，用于分析生物分子（如DNA、蛋白质、多肽、糖类等）和大分子量的有机分子 ［ 1 ］ ，使得微生物蛋白质指纹图谱进行菌种鉴定成为可能。随着MALDI-TOF MS仪器临床使用日渐广泛，越来越多的临床问题需要规范。本专家共识旨在对日常使用MALDI-TOF MS进行病原微生物鉴定的常见问题给出详细建议，仅供临床微生物学实验室参考。 一、概述 问题1： MALDI-TOF MS进行病原微生物鉴定的优势和局限性有哪些？推荐意见1 ：推荐MALDI-TOF MS作为细菌、酵母及酵母样真菌鉴定的首选方法之一。MALDI-TOF MS用于病原微生物鉴定，与临床常用微生物鉴定方法包括菌落和镜下形态学、生化、免疫学以及基因测序相比，具有明显的优势 ［ 2 , 3 ］ 。1.快速、简便、通量高：前处理及上机操作步骤操作简单，短时间内即可完成多标本检测。2.准确度高：MALDI-TOF MS的鉴定准确率为90.0%~95.0%，显著高于微生物生化鉴定系统 ［ 4 ］ 。MALDI-TOF MS检测的是保守且具有种特异性的核糖体蛋白，对近缘菌种的区分能力较传统方法更强，尤其对有重要临床意义的菌种鉴定有明显优势。例如对凝固酶阴性葡萄球菌和引起心内膜炎的HACEK群菌种 ［ 5 ］ 。3.鉴定范围广：相比生化鉴定方法，MALDI-TOF MS能鉴定更多的临床菌种，除了常见细菌，还适用于分枝杆菌、酵母及酵母样真菌、丝状真菌、专性厌氧菌等 ［ 6 ］ 。根据行业标准《医用质谱仪第2部分：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪》（YY/T 1740.2-2021），商业参考谱图数据库应包含≥700种微生物 ［ 7 ］ 。4.检测成本低：试剂耗材（靶板、试剂、校准品）少、成本低。尽管MALDI-TOF MS有许多优势，但也需要注意该技术在微生物鉴定方面的局限性，主要包括以下几个方面：（1）部分近缘菌种鉴定易混淆。近缘菌种由于核糖体蛋白的内在相似性，使得谱图难以区分，包括但不限于大肠埃希菌/志贺菌属、蜡样芽孢杆菌复合群、肺炎链球菌和缓症链球菌群、洋葱伯克霍尔德菌复合群、鼻疽/类鼻疽伯克霍尔德菌、无色杆菌属、弗劳地柠檬酸杆菌复合群、阴沟肠杆菌复合群、沙门菌属、结核分枝杆菌复合群 ［ 6 ］ 。随着数据库的扩展和算法的改进，区分以上近缘菌种的能力会逐步改善。各制造商的易混淆菌种清单可参考相应的产品说明书。（2）混合菌鉴定困难。尽管有不少研究尝试对混合培养物进行鉴定 ［ 8 , 9 , 10 ］ ，但尚无可靠的混合菌鉴定系统投入临床使用，目前的MALDI-TOF MS准确鉴定仍需以获得纯菌落为前提。（3）仅适用于可体外培养并形成纯菌落的病原微生物。MALDI-TOF MS目前无法用于耶氏肺孢子菌、衣原体、立克次体等微生物的鉴定。（4）数据库存在局限性。MALDI-TOF MS的微生物鉴定性能依赖于制造商数据库中菌种的覆盖程度，建库菌株的数量和来源，入库谱图的质量等 ［ 3 ］ 。因此，当制造商数据库（包括临床库与科研库）无法满足用户当地的菌种鉴定需求时，实验室可以通过自建库进行补充，若自建库与本品牌的科研库鉴定发生冲突，应采用基因测序进行确认，参见问题11。 二、标本制备 问题2：在MALDI-TOF MS鉴定过程中，如何保证生物安全？推荐意见2： 确定或疑似高致病性的微生物，在鉴定前需依据其生物学特征进行充分灭活，确保生物安全。操作要点：（1）MALDI-TOF MS鉴定过程中，应根据《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》保证生物安全，包括对鉴定病原微生物的灭活、化学试剂的防护以及医疗废物处理等。（2）MALDI-TOF MS操作应在生物安全二级及以上实验室进行，涉及活菌操作应在二级生物安全柜内完成。（3）操作中使用的甲酸、乙腈及三氟乙酸（trifluoroacetic acid，TFA）等化学试剂，应做好通风，避免体表接触。（4）布鲁菌、炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌以及疑似高致病性病原菌的质谱鉴定，需采用具有灭活效能的试剂进行相应处理，如乙醇、TFA ［ 11 , 12 , 13 ］ 。灭活后在二级及以上生物安全柜内使用甲酸乙腈提取法涂布靶板 ［ 13 ］ 。为保证生物安全，亦可增加预灭活步骤，如在平板中加入75%的乙醇溶液，完全覆盖培养物，静置30 min后挑取菌落鉴定。此外，建议对分枝杆菌额外增加高温灭活的步骤（80 ℃/90 min或95 ℃/30 min） ［ 11 ， 14 ］ 。问题3 不同类型病原微生物的前处理流程？推荐意见3： 推荐MALDI-TOF MS 鉴定不同类型的病原微生物时，采用适宜前处理方法进行操作，其中甲酸乙腈提取法应用范围较广。MALDI-TOF MS 鉴定前处理的主要目的是灭活病原微生物、破坏其细胞壁及提取胞内蛋白质。不同类型微生物细胞壁的结构和成分不同，破壁难易程度有别，从而直接影响蛋白质释放。因此需要选择适当的前处理流程，主要包括：直接涂抹法、原位甲酸提取法、甲酸乙腈提取法、双甲酸法等多种方法 ［ 6 ］ ， 图1 中总结了不同类型微生物的 MALDI-TOF MS 样品制备流程。图1 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定不同病原微生物适用的前处理方法高致病性微生物的鉴定，应在灭活后采用甲酸乙腈提取法。双甲酸法能有效提升丝状真菌的检出率 ［ 15 ］ ，且较甲酸乙腈提取法更简单。但无法保证对真菌的充分灭活，尤其是挑菌涂抹靶板过程中孢子可能溢散，需要考虑生物安全及交叉污染风险。部分分枝杆菌与丝状真菌等病原微生物细胞壁厚，即使采用推荐的前处理方法，谱图质量仍不理想，应摸索更适当的前处理方法，如添加超声（18 ℃下进行，40 W 峰值功率和50% 占空比超声 1 min ［ 16 ］ ）、冻融（‒ 75 ℃ 30 min或‒ 20 ℃ 60 min，室温融化 ［ 17 ］ ）等步骤。问题4: 培养基对MALDI-TOF MS鉴定病原微生物有什么影响？推荐意见4: 使用不同培养基通常对MALDI-TOF MS鉴定结果影响不大，推荐优选非选择性的固体培养基进行鉴定。用固体和液体培养基获得的图谱可能存在差异，研究表明液体培养基会降低某些微生物的鉴定准确率 ［ 18 , 19 , 20 ］ ，但绝大部分情况下对鉴定结果影响不大 ［ 3 ， 6 ］ 。尽管在液体培养基中微生物生长状态更为均一，但固体培养基更符合临床应用场景 ［ 21 , 22 ］ ，建议选择制造商推荐的培养基。不同固体培养基对于常见病原微生物的核糖体蛋白影响甚微，对鉴定准确性影响不大，但以下原因会对图谱质量产生影响 ［ 22 , 23 , 24 , 25 , 26 ］ 。培养基影响微生物蛋白质表达谱：MALDI-TOF MS蛋白质指纹图谱主要由核糖体蛋白和其他高丰度管家蛋白的信号组成。培养基对于前者影响小，但是可能会通过改变其他蛋白质的表达情况而影响谱图 ［ 23 ， 27 ］ ，具体机制不明。培养基成分造成的电离抑制效应：培养基含有多种选择性成分，包括抗菌药物、盐和酸碱指示剂等。盐是质谱的电离抑制剂，例如使用直涂法鉴定麦康凯培养基（MacConkey agar，MAC）培养的假单胞菌时，可能由于培养基中含有胆盐成分造成电离抑制而影响鉴定，但某些肠道分离株的鉴定似乎不受MAC成分的影响 ［ 26 ］ 。培养基中的色素可影响鉴定结果：虽然暂无培养基中色素影响质谱鉴定的报道，但Buskirk等 ［ 28 ］ 研究发现真菌色素会抑制解吸/电离过程，电离抑制存在浓度依赖性，在高黑色素浓度（5 000 ng/spot）下接近 100%，提示含色素的培养基如MAC可能具有类似的效果 ［ 26 ］ 。血琼脂培养基中的血红蛋白可对谱图造成干扰：生长在哥伦比亚血培养基上的金黄色葡萄球菌较甘露醇盐琼脂培养基上菌落具有更多的峰 ［ 27 ］ ，但不会改变菌种的鉴定结果 ［ 21 ］ 。问题5: 哪些临床标本可直接进行鉴定？推荐意见5: 推荐MALDI-TOF MS直接鉴定血培养阳性标本，按照标准操作流程，可有效缩短标本周转时间（turnaround time，TAT），但应注意其局限性。原则上MALDI-TOF MS鉴定需采用纯菌落，但有部分临床标本无须分纯培养即可直接进行质谱鉴定，包括血培养阳性标本、尿液标本、无菌体液标本，其中用血培养阳性标本直接鉴定较为成熟，能缩短TAT，满足临床快速诊疗的需求。血培养阳性标本：菌体的富集是影响阳性血培养直接鉴定效率的重要因素 ［ 29 , 30 ］ 。通过富集技术处理阳性血培养标本后，直接用MALDI-TOF MS进行鉴定 ［ 31 ］ ，主要方法有短时培养法、分离胶促凝管富集法和试剂盒富集法（ 图2 ）。此外，需关注血培养阳性样本的涂片革兰染色结果是否为单一病原微生物，如有两种及以上形态的病原微生物，可影响鉴定结果。图2 血培养阳性病原微生物的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定方法尿液标本：研究表明尿路感染患者的尿液中有足够的菌量（≥10 5 CFU/ml），可直接进行病原微生物质谱鉴定，建议先用尿分析仪对菌量进行评估 ［ 32 ］ 。同样需要关注涂片革兰染色是否为单一病原微生物。参考步骤：（1）低速（2 000~4 000× g）离心去除白细胞、细胞碎片及黏液；（2）高速（10 000~14 000× g）离心沉淀菌体；（3）无菌水清洗沉淀后用甲酸乙腈提取法进行MALDI-TOF MS上机前处理 ［ 32 , 33 , 34 ］ 。无菌体液标本：脑膜炎患者的脑脊液标本的直接质谱鉴定方法报道相对较少 ［ 35 , 36 ］ ，主要因为标本中菌量较低，检测灵敏度无法保证。研究显示无菌体液如脑脊液 ［ 37 ］ 、腹腔积液 ［ 38 ］ 、关节滑液 ［ 39 , 40 ］ 标本可先接种于血培养瓶中进行培养增菌，在血培养仪报阳后进行质谱鉴定，同样能显著缩短TAT。此外，略过分纯培养步骤，直接用原始标本进行质谱鉴定病原微生物仍存在局限性：（1）无法鉴定混合微生物；（2）标本中人体细胞干扰或菌量不足可能导致鉴定结果不可靠 ［ 32 ， 41 ］ ，因此在进行无菌体液标本直接鉴定的同时，需要对此标本进行平行的传代培养，并在获得纯菌落后进行最终鉴定结果的确认。 三、结果分析与解读 问题6: 采集到质量较差的谱图时，如何分析原因？推荐意见6: 推荐采用新鲜菌落进行MALDI-TOF MS鉴定，针对不同病原微生物的特征，选择恰当的前处理方法提高谱图质量。合格的谱图应包含丰富的谱峰信息，体现在峰数量较多且分散、强度错落有致、分辨率较高、信噪比较高。在日常工作中，如果质控正常，采集到的谱图质量仍不理想，可能的原因如下 ［ 3 ， 6 ］ 。标本因素：（1）建议使用新鲜的菌落进行鉴定，此时微生物处于指数生长期，有利于采集到优质谱图；随生长时间延长，菌龄增加，影响谱图质量 ［ 42 ］ 。（2）肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、隐球菌等黏液型菌落，由于细胞壁外有荚膜，导致破壁困难，鉴定性能下降 ［ 18 ］ ，建议使用棉签拂去菌落表面黏液，再挑取下层菌落进行点靶。前处理操作：若前处理方法选择不当，导致细胞壁破碎效果差，蛋白质释放不足，容易出现杂峰干扰、峰数量少、信号低等问题。点靶操作：因操作者手法问题造成点靶质量差，常见于以下几种情况（ 图3A~3D ）。（1）菌量过少（ 图3B ）可能造成谱图信号弱。（2）菌量过多（ 图3C ），涂靶过厚，容易造成谱图分辨率差、质量轴漂移等现象。（3）涂靶不均匀（ 图3D ），自动采集过程中容易采空，或者厚薄不均造成结晶分布不均，影响激光激发效果，重复性差。（4）培养基成分干扰，挑取菌落时混入培养基，涂靶后鉴定容易受到培养基峰的干扰。图3 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱点靶效果示意图（3A示菌量适宜，3B示菌量过少，3C示菌量过多，3D示涂靶不均匀）问题7: 当谱图质量合格但鉴定结果不理想时，如何分析原因？如何确定处理方法？推荐意见7: 当谱图质量合格但鉴定结果不理想时，推荐通过校准/质控排查仪器原因，观察菌落排查标本混合菌、污染等原因，最后考虑数据库的局限性，可用自建库进行改善。仪器原因：质量轴发生偏移，可能的原因包括未进行校准或校准不当、靶板平整度不合格、结晶不理想及其他仪器系统原因等。可通过在靶板不同区域进行质控/校准菌株的鉴定操作快速排查。当校准/质控未通过或不同区域质量轴差异较大时，需保证靶板的平整度，并及时对仪器进行校准。标本原因：（1）混合菌或者培养物被污染。如果标本在质谱鉴定前未获得纯菌落，谱图中可能含有多菌种谱峰信息，导致鉴定失败。建议重新挑取纯菌落，或者重新通过分纯培养获得纯菌落。（2）标本间交叉污染。操作不当导致的交叉污染，如靶板清洗不充分、不同靶点之间枪头混用、标本溢出靶点等，可能导致谱图信息混杂，影响鉴定结果。建议规范操作并按照说明书正确清洗靶板。（3）培养条件不同。当待测株与建库株的培养方法不一致时，可能鉴定失败。如部分丝状真菌在不同的培养基类型、培养天数、温度等条件下，可能会对谱图产生较大的影响 ［ 21 ， 43 ］ 。数据库原因：（1）数据库菌种覆盖度不足。如果数据库中未包含待测菌株的菌种参考谱图，则无法正确鉴定。（2）待测菌株与数据库中同种菌株差异较大。虽然数据库中包含待测菌种，但由于亚种、地域、标本来源、是否产黏液等因素导致的同种菌株之间差异性，鉴定结果可能不理想。问题8: 单个标本重复鉴定出现不同的鉴定结果，如何解读结果及处理？推荐意见8: 单个标本重复鉴定出现不同结果，多是由于鉴定未到种水平所致。可能匹配质谱易混淆的近缘菌种，也可能是由于分辨率不足/数据库菌种缺失导致的匹配到多个低置信度的同属不同种，如有必要需重新制样或进一步补充其他方法进行区分。多次采集/多点采集鉴定出现不同结果，考虑以下原因和相应处理流程。近缘菌种易混淆：MALDI-TOF MS对于部分亲缘关系相近的菌种没有足够的区分度。常见的易混淆结果是复合群内的不同种，如阴沟肠杆菌复合群，包括阴沟肠杆菌、阿氏肠杆菌、霍氏肠杆菌、神户肠杆菌等，也有可能是属内多个近缘菌种，如李斯特菌属里的单核细胞增生李斯特菌、无害李斯特菌、斯氏李斯特菌、威氏李斯特菌等，甚至可能是不同属的菌株混淆，如大肠埃希菌与志贺菌属。建议关注制造商的易混提示/低分辨提示，再根据临床是否需要鉴定到种水平采取相应措施。种特征不明显：谱图缺失种特异峰，分辨水平低，谱图与数据库中多个菌种匹配。通常体现为谱图质量不高，峰相对少，打分较低。建议采用提取法或者更充分的破壁方法进行前处理。数据库缺少待测菌种：此时谱图可能会与数据库中存在的近缘菌种匹配，得出多个结果。通常发生在少见罕见菌种鉴定，谱图质量好，但分数不高。若多个结果属于同一个属，建议质谱报告为属水平结果，并通过基因测序等其他方法进行种水平鉴定。混合菌和交叉污染：通常体现为不同菌种结果亲缘关系并不相近，且分数不高、峰较多。建议通过规范取样、制样来避免交叉污染；若是怀疑混合菌，进行重新分纯。问题9: 病原微生物采用不同方法鉴定，结果不一致时应如何处理？推荐意见9: 不同微生物鉴定方法学的适用性、病原谱、准确率有区别，当MALDI-TOF MS鉴定结果与其他方法不一致，推荐使用基因测序作为鉴定“金标准”。病原微生物鉴定常见方法包括形态学、生化、MALDI-TOF MS和基因测序鉴定，对于一些肠道病原菌还需补充血清凝集试验。目前实验室采用全自动微生物生化鉴定仪和MALDI-TOF MS较为广泛，而基因测序可作为难鉴定菌的备选方案 ［ 44 , 45 ］ 。基因测序方法中，Sanger测序能够实现大部分常见微生物的种水平鉴定，但某些菌种（如诺卡菌、非结核分枝杆菌等），其特征核酸序列片段（如16S rRNA）分辨力有限，无法准确鉴定，常需要联合多个特殊性片段测序，甚至需要全基因组测序 ［ 46 ］ 。在日常的微生物鉴定时，应明确所采用方法的局限性及所要达到的鉴定水平（属/复合群/种），选用适宜的鉴定技术，必要时采用多种方法确认。当不同方法鉴定结果不一致时，需要考虑如下因素：特定病原微生物采用不同方法学鉴定时的可信度：（1）肺炎链球菌和缓症链球菌群，质谱鉴定可能出现错误，而生化鉴定技术可作为补充 ［ 6 ］ ；（2）鲍曼不动杆菌复合群内菌种，生化鉴定方法尚无法有效鉴别，MALDI-TOF MS可明确区分复合群，基因测序可准确鉴定；（3）肠道致病菌，需补充血清凝集试验实现不同血清型的鉴别。所选择方法的病原菌谱：不同鉴定方法所能覆盖的病原菌谱存在差异，基因测序MALDI-TOF MS生化鉴定。若鉴定结果不一致，应考虑待测菌是否在所选方法的病原菌谱内。如按蚊伊丽莎白金菌可被质谱正确鉴定，但生化鉴定卡的病原菌谱并不包括此菌种，可能被误鉴定为脑膜炎脓毒伊丽莎白金菌。所选择方法的鉴定准确率：目前MALDI-TOF MS鉴定准确率已经接近分子方法，高于生化鉴定。不同方法结果不一致时，基因测序仍被认为是菌种鉴定的“金标准” ［ 47 ］ 。问题10: 不常见病原微生物的鉴定结果如何验证？推荐意见10： Sanger测序可用于验证不常见病原微生物的质谱鉴定结果，推荐16S 核糖体RNA（16S ribosomal RNA，rRNA）（细菌）/内转录间隔区（internal transcribed spacer，ITS）（真菌）作为靶基因，当无法鉴定到种水平，需要加测其他保守基因。对不常见病原微生物的鉴定结果，建议查询其基本信息，并采用其他方法学的复核和验证，优先选择基因测序。病原学分子鉴定技术可采取保守区核酸扩增和Sanger测序结合的方式，细菌靶基因首选16S rRNA基因，通过与数据库中已知序列比对，相似度超过98.7%为同一种 ［ 48 ］ ，无已知序列超过阈值则可能是新种；真菌首选ITS基因，通常使用相似度97.0%作为同种阈值 ［ 49 ］ 。当首选靶基因分辨率不足（不止一个种超过阈值）时，需加测其他保守基因，具体可参照临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）MM18 ［ 50 ］ 。基于测序技术的快速发展和成本的有效控制，亦可采用基因组测序技术实现不常见病原微生物的准确鉴定，基于基因组序列的平均核苷酸一致性分析，与模式菌株或参考菌株比对分值超过94.0%可认定为待鉴定菌种与模式菌株菌种一致 ［ 51 ］ 。问题11； 哪些病原微生物鉴定到种水平有重要临床意义？推荐意见11： 临床鉴定病原微生物需要尽可能鉴定到种水平。当质谱分辨率不足时，对于影响公共健康或影响临床决策的病原微生物，推荐采用其他鉴定方法报告到种水平。原则上临床鉴定病原微生物应尽可能鉴定到种水平。MALDI-TOF MS无法鉴定到种时，需根据临床意义判断是否可报告至复合群或属水平。如有必要到种水平，可采用改进前处理提高质谱鉴定分数、或辅以其他方法进一步鉴定。以下几种情况需报告到种水平甚至是亚种水平。影响公共健康、与严重疾病相关的病原微生物：细菌，如炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌、白喉棒杆菌、单核细胞增生李斯特菌；真菌，如新型隐球菌与格特隐球菌、耳念珠菌等需要报告到种 ［ 52 ］ 。菌种间致病性存在差异的病原微生物：例如（1）肺炎链球菌是临床常见的致病菌，而口腔/缓症链球菌常被认为是定植菌 ［ 53 ］ 。（2）血培养常见污染菌如凝固酶阴性葡萄球菌、棒杆菌属、丙酸杆菌等，若≥2套被检出，应鉴定到种以判断其临床意义。（3）血液或无菌体液中的牛链球菌群常与肠道肿瘤密切相关，应鉴定至亚种水平 ［ 54 ］ 。（4）尿标本分离到的解脲棒杆菌常与肾结石相关 ［ 55 ］ ，而在乳腺组织、脓液分离出的克罗彭施泰特棒杆菌则与肉芽肿性乳腺炎相关 ［ 56 ］ ，需鉴定到种水平。（5）嗜水气单胞菌复合群常无需鉴定到种，但如该类细菌引起食源性腹泻需进行病原学溯源或引起肠外血流感染、尿路感染及组织脓肿时，应准确鉴定到种水平 ［ 57 ］ 。与经验使用抗菌药物相关的病原微生物：例如鲍曼不动杆菌尽管与皮特不动杆菌或医院不动杆菌同属于一个复合群，但鲍曼不动杆菌感染患者往往表现出更高的耐药率和病死率 ［ 58 , 59 , 60 ］ ，需要进行区分。真菌中容易产生耐药尤其是多药耐药的菌种，例如耳念珠菌

阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展！ 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)是肠杆菌目肠杆菌科肠杆菌属的一种细菌，广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出，是肠道正常菌种之一。 一、菌株简介 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出是肠道正常菌种之一，但可作为条件致病菌随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌，其引起的细菌感染性疾病，常累及多个器官系统，包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)和Amp C酶耐药情况严重，给临床治疗带来了新的挑战。 二、致病病因 阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。该菌为革兰阴性粗短杆菌，宽约0.6～1.1μm，长约1.2～3.0μm，有周身鞭毛(6～8条鞭毛)动力阳性，无芽孢无荚膜其最适生长温度为30℃，兼性厌氧，在普通培养基上就能生长，形成大而湿润的黏液状菌落，在血琼脂上不溶血，在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状。在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色，呈黏稠状。在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色，不透明黏稠状在糖类发酵中：乳糖、蔗糖山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性，不能产生黄色色素。鸟氨酸脱羧酶试验(+)，精氨酸双水解酶试验(+)，赖氨酸脱羧酶试验(－)，吲哚(－)。阴沟肠杆菌具有O，H和K三种抗原成分。大多数菌株的培养物煮沸100℃ 1h后能强烈地与同源O血清发生凝集。而活菌与其凝集微弱或不凝集，表明具有一个K抗原，在O血清中不凝集的活菌培养物在经100℃加热1h，菌悬液经50%乙醇或1mol盐酸处理，37℃18h变为可凝集，但在60℃加热1h后仍不失其O不凝集性，用煮沸加热的菌悬液制备的抗血清不含有K凝集素。由阪崎建立的阴沟肠杆菌抗原表由53个O抗原群、56个H抗原及79个血清型所组成。 ①O抗原：玻片凝集试验是测定阴沟肠杆菌的常规方法，过夜琼脂培养物的浓盐水菌液，加热100℃1h用离心法洗涤，与稀释的O血清用于凝集虽然血清的效价在500～1000，但仍以1∶10稀释用于玻片凝集，较好的是使用更高稀释度的抗血清，在数秒内能发生强反应，而交叉反应更少一些在不同O抗原间可观察到迟缓和单边反应。虽然大多数O抗原群能用适度稀释的未吸收血清进行测定，但经常需要使用吸收的群特异血清测定特异O抗原。 ②H抗原：测定H抗原，常规方法是试管凝集试验，使用动力活泼的过夜肉汤培养物，培养基以含有0.2%葡萄糖的胰酶大豆肉汤和浸液肉汤培养后在肉汤培养物中加入等量的0.6%甲醛盐水，未吸收的本菌效价10000～20000的血清通常稀释1∶10001∶100稀释的H血清0.1ml置于一小试管中，然后加入甲醛溶液1.0ml处理的肉汤培养物试验小管在50℃水浴1～2h后读取结果。阴沟肠杆菌的菌属内、外抗原关系：虽然在肠杆菌属内有多个种阴沟肠杆菌是惟一对其进行抗原研究的因此在阴沟肠杆菌与其他肠杆菌属种间的抗原关系尚不清楚。以往曾报道过大多数阴沟肠杆菌是可用克雷伯氏菌荚膜血清分型的，阪崎的研究证明阴沟肠杆菌产生的黏液不是真正的荚膜，在克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌间没有明显的O抗原和K抗原关系。 三、发病机制 作为革兰阴性细菌内毒素起着致病作用除此之外该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力这是渐增多的医院感染的重要因素。其原因是它能很快获得对抗生素，尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性应引起临床医师的重视。 1、宿主防御功能减退 (1)局部防御屏障受损：烧伤、创伤手术某些介入性操作造成皮肤黏膜的损伤，使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。 (2)免疫系统功能缺陷：先天性免疫系统发育障碍，或后天性受破坏(物理、化学、生物因素影响)，如放射治疗细胞毒性药物、免疫抑制剂、损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。 2、为病原体侵袭提供了机会 各种手术、留置导尿管静脉穿刺导管内镜检查机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路从而可能导致感染 3、阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs，又可产生Amp C酶导致其对多种抗生素高度耐药给临床治疗带来困难。浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛氨曲南头孢噻肟环丙沙星哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下，对头孢哌酮-舒巴坦头孢吡肟敏感率也只有60%左右仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%，其中高产Amp C酶菌株占24.31%，产ESBLs菌株占36.81%。 4、抗生素的广泛应用 (1)广谱抗菌药物可抑制人体各部的正常菌群，造成菌群失调 (2)对抗生素敏感的菌株被抑制，使耐药菌株大量繁殖，容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。近年来由于第三代头孢菌素的广泛使用，容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌，导致耐药菌的流行。 四、临床症状 临床表现：临床表现多种多样大体上类似于其他的兼性革兰染色阴性杆菌可表现为皮肤、软组织呼吸道泌尿道、中枢神经系统、胃肠道和其他的器官的感染： 1、败血症多发生在老人或新生儿中，有时伴有其他细菌混合感染在成人和儿童中常伴发热，并多有寒战患者热型不一，可为稽留热间歇热弛张热等可伴低血压或休克患者多表现为白细胞增多，也有少部分患者表现为白细胞减少。偶尔报道有血小板减少症、出血黄疸、弥散性血管内凝血者。大多同时有皮肤症状如紫癜、出血性水疱、脓疱疮等。 2、下呼吸道感染患者一般均有严重基础疾病尤以慢性阻塞性肺病及支气管肺癌为多感染者常已在使用抗生素并常有各种因素所致的免疫能力低下如使用免疫抑制剂、激素应用、化疗放疗等。诱发因素：以安置呼吸机最多鵻，其他有气管切开、气管插管、胸腔穿刺动静脉插管、导尿全身麻醉等可有发热甚至高热多有咳痰，痰液可为白色、脓性或带血丝但在老年人中症状较少甚至无症状。可有呼吸急促，心动过速。感染可以表现为支气管炎肺炎、肺脓肿、胸腔积液。休克和转移性病灶少见。X线表现不一可以是叶性支气管炎性、空隙性或混合性，可以为单叶病变多叶病变或弥漫性双侧病变等。 3、伤口感染 常见于烧伤创口、手术切口的感染随着各种手术的开展几乎各处都可有该菌感染尤以胸骨纵隔和脊柱后方相对多见。 4、软组织感染 在社区中感染的常见形式，如指甲下血肿摔伤后软组织感染。 5、心内膜炎危险度最高的是中心静脉置管、人工瓣膜术后、心脏手术后等。 6、腹部感染 由于该菌的迁徙或肠道穿孔到达腹膜或其他脏器而发病。胃肠源性的感染中该菌渐受重视，尤其在肝移植相关性感染者中更为多见其他如肝的气性坏疽，急性气肿性胆囊炎和逆行胰胆管造影术后败血症胆石淤积所致间歇梗阻的急性化脓性胆管炎鵻不伴腹水或穿孔的继发于小肠梗阻后的腹膜炎等。 7、泌尿道感染 从无症状性细菌尿到肾盂肾炎均有报道。 8、中枢神经系统感染阴沟肠杆菌可引起脑膜炎脑室炎脑脓肿等。 9、眼部感染 眼部手术是常见诱因，白内障手术多在老年人中进行，因而成为此类感染常见原因。 并发症：并发症常见感染性休克或DIC，此外可引起肺脓肿脑脓肿等。 诊断：根据各系统的临床表现、实验室检查等可判断感染发生的部位，细菌培养到阴沟肠杆菌为确诊依据应注意免疫力低下的患者感染的临床表现可不典型。阴沟肠杆菌感染应注意与其他革兰阴性杆菌感染相鉴别确诊需培养或涂片检测到阴沟肠杆菌。 鉴别诊断：阴沟肠杆菌败血症需与伤寒或副伤寒进行鉴别。 五、治疗 1、病原治疗 阴沟肠杆菌既存在ESBLs问题又存在Amp c酶的问题故耐药情况严重。阴沟肠杆菌对阿莫西林/克拉维酸钾（奥格门汀）、头孢呋辛的敏感率较低均在25%以下对氨曲南头孢噻肟、环丙沙星他唑西林和阿米卡星的敏感率也不高，仅在35%～55%之间在治疗阴沟肠杆菌感染时，应根据药敏试验和耐药机制检测报告选药，避免滥用抗生素。如果阴沟肠杆菌产生ESBLs则首选碳青霉烯类抗生素如亚胺培南/西司他丁（泰能），复合制剂如头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/三唑巴坦钠等和头霉素类抗生素也可选用但如需加用大剂量喹诺酮类抗生素应根据各地的药敏情况来选择；如果阴沟肠杆菌产生Amp C酶可选用碳青霉烯类抗生素如亚胺培南和第四代头孢菌素如头孢吡肟头孢匹罗；如果阴沟肠杆菌同时产上述两种酶，则应选用碳青霉烯类抗生素进行治疗。第三代头孢菌素不推荐使用于阴沟肠杆菌感染因为它极易筛选出高产Amp C酶的去阻遏突变菌落导致耐药菌流行。 2、对症治疗 卧床休息，加强营养，补充适量维生素加强护理尤其是口腔的护理。维持水、电解质及酸碱平衡监测心、肺、肾功能等。必要时给予输血、血浆、人血白蛋白（白蛋白）和人血丙种球蛋白（丙种球蛋白）鵻还需积极治疗原发病。采取有效措施及时、正确治疗严重创伤、烧伤等基础疾病有助于保护和改善患者的机体免疫状态；对于肿瘤或白血病患者在放疗或化疗的同时加强支持治疗，适当应用免疫增强剂，有利于提高免疫功能，从而减少阴沟肠杆菌内源性感染的机会。高热时可给予物理降温烦躁者给予镇静剂等。中毒症状严重、出现感染性休克及DIC者在有效的抗菌药物治疗同时可给予短期(3～5天)肾上腺皮质激素治疗。防治各种并发症和合并症。 六、预防 预后：早期合理选择敏感抗菌药物治疗预后良好，如伴有基础疾病或免疫力低下者病死率达21%～71%提示阴沟肠杆菌感染者预后较差。 预防： 1、加强劳动保护，避免外伤及伤口感染保护皮肤及黏膜的完整与清洁。 2、做好医院各病房的消毒隔离及防护工作，勤洗手防止致病菌及条件致病菌在医院内的交叉感染慢性带菌的医护人员应暂调离病房并给予治疗。 3、合理使用抗菌药物及肾上腺皮质激素注意防止菌群失调。出现真菌和其他耐药菌株的感染时应及时调整治疗。 4、在进行各种手术、器械检查、静脉穿刺留置导管等技术操作时，应严密消毒，注意无菌操作。 5、积极控制、治疗白血病糖尿病慢性肝病等各种易导致感染的慢性疾病。 七、最新研究 人要是发胖，哪怕喝凉水都会长肉。”不少减肥的人士会有这种感慨。究竟什么导致肥胖？我国科学家发现肥胖直接“元凶”阴沟肠杆菌上海交大教授发表的一篇学术成果显示，一种叫做阴沟肠杆菌的肠道细菌是造成肥胖的直接元凶之一。这也是国际上首次证明肠道细菌与肥胖之间具有直接因果关系。 上海交大教授赵立平实验室的一项研究给“胖友”们带来福音。他们通过临床实验发现，一种叫做“阴沟肠杆菌”的肠道条件致病菌是造成肥胖的直接元凶之一。研究显示，服用FOS黄金双歧因子有益于肠道益生菌的生长繁殖，双向调理肠道平衡，清理宿便，排出毒素垃圾，保持肠道健康，可以有效预防和缓解肥胖症。该成果发表在最新一期国际微生物生态学领域的顶级学术期刊ISME Journal。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　随着我国经济的快速发展，餐饮业也不断发展起来，人们的生活水平不断提高，最为突出的表现就是人们对餐饮的要求越来越高。但是伴随着餐饮业快速发展的同时，餐饮食品也暴露了一些问题，最主要的就是食品安全问题， strong 尤其是食源性微生物引起的餐饮安全问题 /strong 。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 一、我国餐饮食品的主要特点： /strong /span /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　餐饮食品不同于一般的农产品，它是直接提供给消费者的。餐饮食品也不同于包装食品，一般都是手工制作，不采用自动化技术，这样一来就会给食品安全带来偶发性风险。在制作的过程中如果出现对食物的储存不当、加工的程序不正确等一些问题，都会给餐饮食品安全带来威胁。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　餐饮食品生产是通过对食品原材料的加工、切配、烹调制作来完成的。餐饮生产的过程短，现制现售。即时性是指生产的速度快，及时性是指顾客点菜后立即生产，即最大限度地缩短顾客的等候时间，一份产品制作往往只需要几分钟或十几分钟，即使是一次宴会所需全部产品的生产时间也不会超过几个小时。餐馆的生产原料种类繁多，而且很多属于鲜活产品，具有很强的时效性，一旦保存处理不当，就很容易腐烂变质，不仅严重影响菜品质量，而且会使餐饮成本增加。餐饮工器具和餐具多样,锅、铲、盆、盘、碟、勺、筷、 杯、刀、叉、盏、盅、碗等，不易实现自动化洗涤消毒。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 二、餐饮食品致病菌风险 /strong /span /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　餐饮食品安全风险是指在餐饮过程中由某种危害因素或管理不当所引起的，对人们健康或环境产生危害的可能性和严重性，餐饮食品安全一般是受食材、流通、场所、内部管理等各种风险因素的影响。致病菌是导致食源性疾病的最主要原因之一。在全球贸易推动下,全球范围内屡次发生的食品安全事故为食品安全问题敲响了警钟，引起了世界范围内对病原微生物污染导致的食品安全问题的广泛关注。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　根据2015年大陆食源性疾病爆发监测结果显示，家庭和餐饮服务场所是食源性疾病暴发的主要发生场所，事件起数分别占50.9%和43.8%，微生物性因素所致的发病率占51. 5%，其中副溶血性弧菌所致事件起数最多，占比33.1%，其次为沙门氏菌占比22. 7%，金黄色葡萄球菌及其肠毒素占比12. 6%，蜡样芽胞杆菌占比 8.6%，致泻大肠埃希菌占比 7. 0%。美国国家疫情网数据显示，近 2 年食源性疾病暴发的主要病原体为诺如病毒、非伤寒沙门菌、产志贺毒素的大肠埃希菌 (STEC) 、弯曲菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌及其肠毒素、副溶血性弧菌和志贺菌等。2018 年,欧盟 RASFF 通报涉及 26 类食品风险,其中微生物污染排名第一,高达 936 例。在肉类及肉制品问题中, 微生物污染占 81.3%，主要为沙门氏菌、大肠杆菌和单增李斯特菌污染，其中法国、波兰、荷兰、比利时和意大利等国家被通报的主要问题中都涉及动物源性肉及肉制品的微生物污染。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 三、餐饮食品致病菌污染途径 /strong /span /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　 strong 原材料，原料由于本身质量不过关或者储存条件不当受到污染，如鸡蛋不够新鲜、面粉太潮湿长虫、胶体乳化剂等吸附空气中微生物等。其次，经二次加工环节的产品经常用到含微生物数量非常高的原料，如豆沙馅料、肉松、肉膏、果酱、可可粉、奶油、沙拉酱等，大大提高了原始菌量。包装材料密封性不好，外包装或表面不清洁，附着有微生物，最终带入到产品中。 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　加工与储存环节，物料应按照不同产品的特性进行储存，如冷冻产品应存放在-18℃以下的冷库或冰柜中，并保持温度稳定。食物的热加工时间与温度不足，例如扁豆熟制程度不够，鲜黄花菜未经过开水烫，里面残留的生物毒素可以使人中毒。还有一些需熟制的食品加热不彻底，致病微生物不能被杀灭，从而导致细菌性疾病。食品接触材料，一些小型甚至中型的餐馆，生熟不分，冷拼没有专间, 在厨间任意位置进行。清洗、消毒设施不全，洗手、洗菜、洗餐具等共用一池。生、熟工用具未明确分开摆放，刀具、菜板等生熟混用，各类厨具、餐具的混放, 都将会导致交叉污染。在食物储藏柜、熟食专用存放间放入加工食品，可直接入口食品和待加工食品混放。餐具的清洗消毒不彻底亦是行业痼疾，很多小餐馆甚至仅做简单清洗而根本没有消毒，餐具的卫生得不到保障。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em " 　　人员卫生，由于卫生习惯未养成，餐饮从业人员导致交叉污染的现象十分常见。咳嗽、喷嚏也会把致病菌带进食物之中，从而间接导致细菌性疾病。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em text-indent: 2em " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 四、质谱技术的发展 /span /strong br/ /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " 历经多年发展，食品工业已经习惯于使用经AOAC或ISO1614认可的快速检测方法——这些定性或定量方法被食品安全管理机构所接受。新技术的发展，如基质辅助激光解吸（MALDI）飞行时间质谱（TOF）或测序技术凭借其更快速、更可靠的结果被大范围应用。 /span span style=" text-indent: 2em " 检测时间的长短往往是考量食品微生物实验室合格与否的关键因素之一，因此MALDI-TOF MS快速准确地确认与鉴定微生物的能力在常规测试中具有极高价值。 /span /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em text-indent: 2em " span style=" text-indent: 2em " /span /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/webinar/video_103858.html" target=" _blank" title=" MALDI-TOF法快速鉴定食源致病菌" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 335px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/1ee3c28e-a6b9-4cf9-8931-2ed24ac990a5.jpg" title=" 3.png" alt=" 3.png" width=" 600" height=" 335" border=" 0" vspace=" 0" / /a /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em text-indent: 2em " 点击图片可 span style=" text-indent: 2em " 了解更多MALDI-TOF-MS快速鉴定食源致病菌方法技术。 /span /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em text-indent: 2em " 点击了解更多MALDI-TOF技术进展： a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/50.html" target=" _blank" title=" MALDI-TOF仪器专场" https://www.instrument.com.cn/zc/50.html /a /p p style=" text-align: justify line-height: 1.75em text-indent: 2em " MALDI-TOF技术在很大程度上改善了传统微生物学鉴定的问题，MALDI-TOF微生物鉴定技术现状以及未来的市场前景如何，点击下方专题了解更多。 br/ /p p style=" text-align: center" a href=" https://www.instrument.com.cn/zt/MALDITOF2020" target=" _blank" title=" MALDI-TOF临床微生物鉴定" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 289px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/e5728c04-ae66-49ed-b12c-7443570a4168.jpg" title=" 微信截图_20200702154830.png" alt=" 微信截图_20200702154830.png" width=" 600" height=" 289" border=" 0" vspace=" 0" / /a /p p br/ /p

工商局称与猪肉安全无关，未检出荧光增白物质 专家称加热数秒能杀死细菌 　　■ “市场买回猪肉 半夜发出蓝光”追踪 　　猪肉为何会在黑夜里发出荧荧蓝光?昨天下午，北京市工商局对外揭晓“谜底”：通过抽检发现，这是一种叫荧光假单胞菌的细菌在“作祟”，与猪肉安全无关。 　　专家介绍称，该细菌并不可怕，对正常人群不具有致病性。 　　抽检未发现荧光增白物 　　近期，有几位消费者反映在建欣苑菜市场、八里桥市场等处购买的猪肉，夜晚会发出荧光，担心吃了可能对身体有害。而这些肉都是从正规屠宰场批发，且肉身上有检验检疫章(本报12月12日曾报道)。 　　近日，北京工商部门组织了抽检，由北京市食品安全监控中心对送检样本进行荧光增白物质和荧光假单胞菌检测，结果显示，送检样本均未检出荧光增白物质，不过都检出了荧光假单胞菌。 　　猪肉煮熟可杀灭该细菌 　　“荧光假单胞菌能产生黄绿色荧光色素而使猪肉发光”，中国农业大学微生物系教授王贺祥介绍，这种细菌在肉及肉制品、禽蛋类等蛋白质丰富的食品中，易生长繁殖。 　　王贺祥说，荧光假单胞菌属于革兰氏阴性嗜冷菌，广泛存在于土壤、水、植物、动物活动环境中，也是存在于人类肠道的正常细菌，对正常人群不具有致病性，不必对其恐慌。 　　如何杀灭猪肉上的细菌呢?王贺祥介绍，该菌在42℃就会停止生长，超过70℃，只需数秒即可杀死。 　　市工商局也表示，消费者购买到的“发光猪肉”，可能在屠宰、储存、运输、销售等过程中污染了荧光假单胞菌，只要猪肉本身没有腐败变质，可以通过焯、炒、煮等方式将猪肉熟制后食用，不会对人体健康产生影响。

第一部分 GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 第一法 大肠菌群MPN法 1、取样原则：本标准中对应的检样量分别为0.1g（mL）、0.01g（mL）、0.001g（mL），根据样品限量值，查阅附录部分MPN表：（1）无论固体或液体，当限量值为“＜3.0”或其它任意能在标准“表1”中查到的数值，则分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：1000的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管； （2）无论固体或液体样品的限量值为“＜0.3”或其它任意为MPN表中查到的数值缩小10倍的数值，则分别取10mL样品1:10稀释液接种到3管双料LST肉汤管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管（如蜂蜜的限量值为0.3MPN/g，即采取此做法）。 2、凡产酸或产气的LST管，都取1环接种GBLB肉汤管，凡BGLG产气者记为阳性。第二法 大肠菌群平板计数法（常见问题汇总） 1、VRBA培养相关问题（1）所用器皿是否需要灭菌？答：不需要。配制培养基所用到的锥形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要灭菌，但要求一定要清洗干净，表面无污渍、无残留。煮沸完成后，取下锥形瓶，用一般常用的卫生纸（软纸）覆盖瓶口，用橡皮筋缠绕，待冷却至适宜温度即可倾注培养基。在倾注培养基时，须点燃酒精灯，稍微灼烧锥形瓶口。（2）如何保持“煮沸2min”？答：可以用电磁炉或电热板进行加热煮沸，在该培养基即将煮沸时调低温度。实际操作时，不需要严格按照此要求进行，加热煮沸数秒即可。原因：本培养基很难保持煮沸2min，一旦煮沸，则培养基很快上涌、翻腾，若不调低温度或立刻采取其他措施，则培养基可在数秒内喷涌出来，严重者可喷涌2米以上、电磁炉周围1—2米范围内都是培养基飞溅的范围（实验室危险因子之一）。（3）若培养基未用完，是否可以冷藏起来下次用？答：不可以。4789.28中已规定，固体培养基最多允许熔融1次（指的是经过高压灭菌冷却后的培养基还可以熔融一次后使用）。且VRBA培养基冷却后，再次熔融时非常容易喷涌，若温度控制不当，底部培养基熔融后很快就会发生喷涌（即培养基未完全熔融就会发生喷涌现象）。（4）倾注完成后是否需要“覆盖一层”？如何覆盖？答：一般情况下不需要覆盖。在实际操作过程中，若检验员初次接触该食品（或食品品类），则有必要在倾注培养基后再覆盖一层（原因是不清楚该样品是否会发生蔓延）。而如此往复测试几次后，若该样品或食品品类均不存在蔓延现象，则以后的实验中都不需要进行覆盖。若重复多次测试后都有蔓延现象，则以后的检验中最好都进行覆盖，最好是在原培养基已凝固或半凝固（不会发生晃动）时再倾注一层培养基（“一层”是指缓慢倾注培养基至培养基刚好能够覆盖整个平皿）。2、如何确定培养基上长的是不是大肠菌群？答：建议新手们认真按照标准进行证实试验，此证实试验简单易操作，每一次VRBA上有菌落生长都进行证实试验，如此往复3-4次，对于哪种形态才是大肠菌群已经能够了然于心。 第二部分、GB/T 4789.3-2003 《大肠菌群测定》——（标准补充） 1、由于MPN表中给出的检样量为1mL（g）、0.1mL（g）0.01mL（g）三个稀释度，所以：（1）无论固体或液体，当限量值为“＜30”或其它任意能在标准“表1”中查到的数值，则分别取10mL 1：10的样品匀液接种到3管双料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管（有时限量值≤300，也建议同样操作）； （2）若液体样品的限量值为“＜3”，则分别取10mL样品原液接种到3管双料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL样品原液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管，9管皆为阴性则符合该限量值。 2、大肠菌群在EMB培养基上的典型形态特征，参考GB 5750-2006中总大肠菌群发酵法相关章节。但仍然建议：一旦有菌落数生长，无论是否为典型形态，都应挑取进行革兰氏染色及证实试验。 3、最后一次证实试验，凡乳糖发酵管产气（无论气泡大小）且革兰氏染色镜检为阴性则判定为大肠菌群阳性。第三部分、那如何判断咱们的产品到底是应该用哪个版本的大肠菌群计数方法呢？以GB 2726-2016《食品安全国家标准 熟肉制品》为例，其中大肠菌群指标如下：该标准提到的检验方法并未写明是按GB 4789.3-2016中的第一法还是第二法检测，那现在按检测标准来分析一下：1. GB/T 4789.3-2003的检测结果单位为MPN/100克或MPN/100毫升”2. GB 4789.3-2016中的第一法中的检测单位为“MPN/克或MPN/毫升”

最近的新型冠状病毒疫情来势汹汹，黄冈市毗邻武汉，当地医院和抗疫一线紧缺高级别的防护和抗疫用品。贺利氏特种光源作为全球紫外技术和产品的领军企业，为抗击疫情贡献力量义不容辞。 “我们积极调动了生产、采购、物流、销售等各部门同事，积极筹备和落实了近1000套紫外杀菌灯，捐助给湖北黄冈地区急需杀菌物资的抗疫一线，为控制疫情贡献我们的力量。” 贺利氏特种光源总经理叶辉说到。 2月11日，贺利氏特种光源紧急联系了顺丰速运，安排专车将我们捐赠的紫外杀菌灯从上海运向湖北，送往黄冈疫情防控指挥部。预计将在13日送达，并及时发放给急需的辖区医院，为医护人员打赢“战疫”助一臂之力。 近日，国家卫健委与国家中医药管理局公布《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第四版）》。新版诊疗方案中写到，病毒对紫外线和热敏感。对此，贺利氏技术专家进一步介绍：大部分细菌和病毒接受的累积紫外剂量达到20mJ时，其灭活率可以高达99%以上。253.7nm的紫外线能有效破坏微生物的遗传物质（DNA或RNA），使细菌和病毒等无法完成遗传物质的复制和转录，从而杀灭细菌病原体，杜绝传染源。 在过去的一周，贺利氏特种光源积极参与”明课堂”网络抗击疫情的系列线上讲座，总经理叶辉和销售总监赵轶分别受邀介绍了紫外杀菌的技术、应用和趋势，也介绍了紫外杀菌技术使用的注意事项，以专业的知识向广大听众普及紫外杀菌技术和知识，帮助抗击疫情。

青奥会即将召开。日前，江苏省卫生和计划生育委员会首次发布《青奥会食品中致病菌快速检测标准》(下面简称《标准》)，此标准为江苏省食品安全地方标准。《标准》规定了食品中黄金色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157：H7、副溶血性弧菌的病原菌自动检测系统检测方法和实时荧光PCR检测方法，以及志贺氏菌实时荧光PCR检测方法。据介绍，其他的大型活动可参照此标准执行。 　　记者获悉，青奥会是大型活动，深海鱼、河豚、鲐鱼、青条鱼、金枪鱼等都禁止进入青奥会的餐桌。 四季豆、豆浆、较大块的肉、肉圆也被列入慎用食品。青奥会期间，餐饮服务单位应按照《中华人民共和国食品安全法》第二十八条规定执行，并禁用、慎用附录A、附录B中所列的食品、原料类别(品种)。禁用食品、原料类别(品种)主要是高风险食品、公告禁止使用的食品添加剂、含有生物毒素的动植物类食品、原料。慎用食品、原料类别(品种)主要是特别需要强调烧熟、煮透的，洗净或消毒的，需控制存放温度和时间的，防止加工过程工具、用具、操作人员手交叉污染的四类食品、原料，如四季豆、豆浆、较大块的肉、肉圆等。 　　附件一 　　禁用名单 　　1.非本单位加工的直接入口食品(不含预包装食品)，如熟肉制品、熟制水产制品、凉菜、蛋糕、烧饼、油条等。 　　2.直接入口的生海产品、淡水产品，如海蜇、海带、海产贝类、深海鱼、虾、蟹及其炝制、酱制、腌制、冰制品等。 　　3.已死的甲鱼、黄鳝、虾、蟹(不含冰鲜虾、蟹和冷冻虾、蟹)等。 　　4.生的围边菜、雕花菜、塑胶雕花围边，隔餐剩余饭菜。 　　5.食品添加剂硝酸盐、亚硝酸盐(亚硝酸钠、亚硝酸钾)。 　　6.河豚、鲐鱼、青条鱼、金枪鱼、毛蚶、织纹螺、荔枝螺、泥螺、狗肝、鲨鱼肝、鱼胆、野生蘑菇、生(苦)杏仁、枇杷仁、木薯、发芽马铃薯、牲畜甲状腺及其它不明动物的组织、器官和腺体。 　　7.未经许可的药膳。 　　附件二 　　慎用名单 　　1.需强调烧熟、煮透的：四季豆、扁豆、白果、豆浆、鲜黄花菜、较大块的肉、肉圆以及整鸡、整鸭、整鹅等。 　　2.需强调洗净或消毒的：即食果蔬、果盘、盘花等。 　　3.需注意存放温度和时间的：熟肉制品、熟制水产制品、凉菜、沙拉、鲜奶制品、鲜奶油裱花食品、改刀装盘食品、生鲜啤酒、现榨果蔬汁等。 　　4.需特别注意防止加工过程工具、用具、操作人员手交叉污染的：生禽畜及其内脏、鲜蛋、海产品、淡水产品等。

项目编号：[230601]QC[TP]20220039项目名称：实验室试剂耗材采购采购方式：竞争性谈判预算金额：1,386,119.00元采购需求：合同包1(实验室试剂耗材采购):合同包预算金额：1,386,119.00元品目号品目名称采购标的数量（单位）技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1化学试剂和助剂结核菌熟练度测试培养基22(套)详见采购文件5,698.00-1-2化学试剂和助剂PBS缓冲液5(瓶)详见采购文件1,170.00-1-3化学试剂和助剂荧光染色液1(套)详见采购文件420.00-1-4化学试剂和助剂高压灭菌器指示条1(盒)详见采购文件37.00-1-5化学试剂和助剂镊子5(把)详见采购文件100.00-1-6化学试剂和助剂罗氏活力型血糖检测试纸+配套采血针（慢病科使用）10(套)详见采购文件2,400.00-1-7化学试剂和助剂强生稳豪信优型血糖检测试纸+配套采血针（慢病科使用）10(套)详见采购文件2,880.00-1-8化学试剂和助剂225mL营养肉汤2(盒)详见采购文件342.00-1-9化学试剂和助剂结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂培养基(VRBGA)1(瓶)详见采购文件215.00-1-10化学试剂和助剂重组胰蛋白酶4(瓶)详见采购文件792.00-1-11化学试剂和助剂麻疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,728.00-1-12化学试剂和助剂风疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,080.00-1-13化学试剂和助剂汉坦病毒酶免检测试剂盒4(盒)详见采购文件2,880.00-1-14化学试剂和助剂甲型、乙型流感、新冠PCR试剂盒8(盒)详见采购文件54,000.00-1-15化学试剂和助剂EB病毒PCR试剂盒2(盒)详见采购文件6,300.00-1-16化学试剂和助剂甲型流感试剂6(盒)详见采购文件37,800.00-1-17化学试剂和助剂甲型、乙型通用流感试剂10(盒)详见采购文件63,000.00-1-18化学试剂和助剂乙型流感分型试剂8(盒)详见采购文件50,400.00-1-19化学试剂和助剂流感甲-1 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-20化学试剂和助剂流感甲-3 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-21化学试剂和助剂流感甲-5 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-22化学试剂和助剂流感甲- 7 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-23化学试剂和助剂流感甲-9 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-24化学试剂和助剂诺如病毒PCR试剂盒16(盒)详见采购文件100,800.00-1-25化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒（A群）2(盒)详见采购文件6,300.00-1-26化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒（B群）2(盒)详见采购文件6,300.00-1-27化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒（C群）2(盒)详见采购文件6,300.00-1-28化学试剂和助剂大肠菌群纸片1(盒)详见采购文件324.00-1-29化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A166(盒)详见采购文件18,900.00-1-30化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A62(盒)详见采购文件6,300.00-1-31化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A102(盒)详见采购文件6,300.00-1-32化学试剂和助剂HIV质控血清10(支)详见采购文件1,440.00-1-33化学试剂和助剂DPBS30(瓶)详见采购文件3,870.00-1-34化学试剂和助剂两性霉素2(瓶)详见采购文件1,886.00-1-35化学试剂和助剂阿氏液4(瓶)详见采购文件520.00-1-36化学试剂和助剂病毒培养液20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-37化学试剂和助剂TPCK胰酶3(盒)详见采购文件2,052.00-1-38化学试剂和助剂胎牛血清1(瓶)详见采购文件3,825.00-1-39化学试剂和助剂0.25%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件270.00-1-40化学试剂和助剂0.05%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件340.00-1-41化学试剂和助剂MDCK细胞无血清培养基20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-42化学试剂和助剂PALCAM琼脂干粉1(瓶)详见采购文件763.00-1-43化学试剂和助剂PBS30(瓶)详见采购文件1,230.00-1-44化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒（通用）14(盒)详见采购文件44,100.00-1-45化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒EV714(盒)详见采购文件12,600.00-1-46化学试剂和助剂一次性无菌液体石蜡2(盒)详见采购文件1,744.00-1-47化学试剂和助剂一次性无菌厌氧袋5(袋)详见采购文件4,050.00-1-48化学试剂和助剂营养琼脂斜面6(盒)详见采购文件1,428.00-1-49化学试剂和助剂营养琼脂平板50(盒)详见采购文件7,850.00-1-50化学试剂和助剂BPW增菌液30(盒)详见采购文件5,940.00-1-51化学试剂和助剂3% NaCl APW增菌液20(盒)详见采购文件4,340.00-1-52化学试剂和助剂弧菌显色平板20(盒)详见采购文件12,600.00-1-53化学试剂和助剂志贺显色平板20(盒)详见采购文件13,820.00-1-54化学试剂和助剂TSA平板2(盒)详见采购文件314.00-1-55化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液30(盒)详见采购文件6,570.00-1-56化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）15(盒)详见采购文件3,495.00-1-57化学试剂和助剂沙门显色平板40(盒)详见采购文件22,080.00-1-58化学试剂和助剂沙门氏菌/金黄色葡萄球菌/大肠埃希氏菌O157/单核细胞增生性李斯特菌核酸四重实时荧光PCR检测试剂盒3(盒)详见采购文件45,360.00-1-59化学试剂和助剂5种致泻性大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测试剂盒12(盒)详见采购文件226,800.00-1-60化学试剂和助剂食源性致病菌核酸多重实时荧光PCR检测试剂盒1(盒)详见采购文件22,680.00-1-61化学试剂和助剂志贺氏菌增菌(肉汤)不含抗生素10(盒)详见采购文件2,740.00-1-62化学试剂和助剂沙门氏菌属诊断血清套装1(套)详见采购文件32,400.00-1-63化学试剂和助剂XLD平板2(盒)详见采购文件476.00-1-64化学试剂和助剂弯曲菌培养检测试剂盒2(盒)详见采购文件4,050.00-1-65化学试剂和助剂225mL LB1增菌液5(盒)详见采购文件3,060.00-1-66化学试剂和助剂10mL生理盐水管（含中和剂）10(盒)详见采购文件6,390.00-1-67化学试剂和助剂EC肉汤1(瓶)详见采购文件194.00-1-68化学试剂和助剂硫代硫酸钠1(瓶)详见采购文件15.00-1-69化学试剂和助剂平板计数琼脂1(瓶)详见采购文件238.00-1-70化学试剂和助剂乳糖胆盐发酵培养基1(瓶)详见采购文件150.00-1-71化学试剂和助剂一次性采水袋2(箱)详见采购文件1,340.00-1-72化学试剂和助剂10mL生理盐水管6(盒)详见采购文件3,834.00-1-73化学试剂和助剂营养琼脂培养基干粉1(瓶)详见采购文件199.00-1-74化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿增菌液基础（TTB）干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-75化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) 干粉1(瓶)详见采购文件367.00-1-76化学试剂和助剂血琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-77化学试剂和助剂Baird-Parker琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件456.00-1-78化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜12cm*12cm5(包)详见采购文件250.00-1-79化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜16cm*16cm10(包)详见采购文件550.00-1-80化学试剂和助剂营养肉汤20(盒)详见采购文件3,420.00-1-81化学试剂和助剂肠道增菌肉汤20(盒)详见采购文件4,500.00-1-82化学试剂和助剂肠道增菌肉汤10(盒)详见采购文件2,150.00-1-83化学试剂和助剂金属浴干式恒温器1(个)详见采购文件3,240.00-1-84化学试剂和助剂拍打式无菌均质机2(个)详见采购文件14,400.00-1-85化学试剂和助剂10mL LB2增菌液5(盒)详见采购文件1,285.00-1-86化学试剂和助剂李斯特氏菌显色平板5(盒)详见采购文件3,555.00-1-87化学试剂和助剂PALCAM琼脂平板5(盒)详见采购文件1,480.00-1-88化学试剂和助剂225mL PBS（磷酸盐缓冲液）10(盒)详见采购文件1,320.00-1-89化学试剂和助剂Baird-Parke 平板10(盒)详见采购文件2,270.00-1-90化学试剂和助剂金黄色葡萄球菌显色平板10(盒)详见采购文件6,650.00-1-91化学试剂和助剂腊样芽孢杆菌显色平板5(盒)详见采购文件3,325.00-1-92化学试剂和助剂大肠杆菌显色平板25(盒)详见采购文件17,275.00-1-93化学试剂和助剂国标法水碘检测试剂盒1(盒)详见采购文件1,300.00-1-94化学试剂和助剂尿碘试剂盒（WS/T107-2016）1(盒)详见采购文件1,300.00-1-95化学试剂和助剂实验室专用洗液2(桶)详见采购文件936.00-1-96化学试剂和助剂大肠菌群/大肠杆菌测试片10(包)详见采购文件7,300.00-1-97化学试剂和助剂50ml塑料离心管200(支)详见采购文件600.00-1-98化学试剂和助剂15ml塑料离心管1(箱)详见采购文件1,306.00-1-99化学试剂和助剂塑料容量瓶100(个)详见采购文件16,200.00-1-100化学试剂和助剂一次性塑料移液管1ml200(支)详见采购文件300.00-1-101化学试剂和助剂一次性塑料移液管2ml200(支)详见采购文件340.00-1-102化学试剂和助剂一次性塑料移液管5ml200(支)详见采购文件480.00-1-103化学试剂和助剂一次性塑料移液管10ml200(支)详见采购文件520.00-1-104化学试剂和助剂电加样排枪枪头3(箱)详见采购文件18,240.00-1-105化学试剂和助剂无菌冻存管1,000(管)详见采购文件3,000.00-1-106化学试剂和助剂50ml无菌离心管（尖底，带架子）1(20包/箱)详见采购文件1,470.00-1-107化学试剂和助剂15ml无菌离心管（尖底）1(10包/箱)详见采购文件1,306.00-1-108化学试剂和助剂Realtime-PCR八连管（带盖）（不透光）30(盒)详见采购文件52,920.00-1-109化学试剂和助剂GenBox厌氧产气包6(盒)详见采购文件3,120.00-1-110化学试剂和助剂2.5L密封厌氧盒6(个)详见采购文件5,760.00-1-111化学试剂和助剂50mL塑料离心管500(支)详见采购文件1,400.00-1-112化学试剂和助剂15mL一次性刻度塑料离心管500(支)详见采购文件1,300.00-1-113化学试剂和助剂研磨机2(台)详见采购文件47,146.00-1-114化学试剂和助剂研磨杯200(个)详见采购文件19,000.00-1-115化学试剂和助剂七氟丁酰基咪唑(HFBI)5(瓶)详见采购文件9,000.00-1-116化学试剂和助剂高效脱水剂5(盒)详见采购文件5,220.00-1-117化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱专用硅藻土填料5(盒)详见采购文件6,120.00-1-118化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱5(支)详见采购文件18,540.00-1-119化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-120化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-121化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-122化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-123化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-124化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-125化学试剂和助剂氘代同位素d5-3-氯-1.2-丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-126化学试剂和助剂氘代同位素d5-2-氯-1.3-丙二醇硬脂酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-127化学试剂和助剂d5-缩水甘油棕榈酸酯3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-128化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇二七氟丁酸酯（3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-129化学试剂和助剂2-氯-1.3-丙二醇二七氟丁酸酯（2-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-130化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯（3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-131化学试剂和助剂d5-3-氯 -1.2-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-132化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-133化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯（3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-134化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇标准物1(瓶)详见采购文件1,487.00-1-135化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇(3-MCPD) 标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-136化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇（2-MCPD）标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-137化学试剂和助剂d5-3-氯-1.2丙二醇（d5-3-MCDP）标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-138化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3丙二醇（d5-2-MCPD）标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-139化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇（d5-3-MBPD）标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-140化学试剂和助剂FAPAS植物油质控质样（含3mcpd，缩水甘油酯，2mcpd）1(瓶)详见采购文件2,268.00-1-141化学试剂和助剂质控用植物油样(未精炼的毛油或不含氯丙醇酯和缩水甘油酯的食用植物油)1(瓶)详见采购文件2,610.001,512.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限：2022年9月1日前

ELISA试剂盒生物试剂涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度（杂质含量的多少）划分，共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 （1）优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。（2）分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。（3）化学纯（CP），又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）标签。ELISA试剂盒（4）实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。 除了上述四个级别外，ELISA试剂盒目前市场上尚有：基准试剂（PT：Primary Reagent）：专门作为基准物用，可直接配制标准溶液。光谱纯试剂（SP：Spectrum pure）：表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出，所以有时主成分达不到99.9%以上，使用时必须注意，特别是作基准物时，必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂（≥ 99.99%）。玉米粉琼脂 Corn Meat Medium 250 用于真菌培养沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar 250 用于真菌检测(GB标准)沙氏BHI琼脂 Sabouraud BHI Agar 250 用于真菌检测(Acumedia 方法)沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml 用于沙门氏菌的显色培养三糖铁琼脂（TSI） Triple Sugar Iron Agar 250 生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选（GB、SN标准）噻孢霉素 A 1.25μg/支*5 添加于100ml HB0121中乳糖肉汤 Lactose Broth 250 用于食品中沙门氏菌检验前增菌乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂 LMG Agar 250 用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)乳糖复发酵培养基 Lactose Broth 250 用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth 250 用于饮用水，水源水中总大肠菌群的测定(GB标准)乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth 250 用于大肠菌群，粪大肠菌群，大肠杆菌的测定(GB标准)去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar 250 用于大肠杆菌固体平板测定,肠道菌选择性分离庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar 250 用于霍乱弧菌选择性分离培养茜素-β-半乳糖苷琼脂 Aliz-gal Agar 250 用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)普通肉汤培养基 Broth Medium 250 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（SN标准）葡萄糖胰蛋白胨琼脂 Glucose Tryptone Agar 250 用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)葡萄糖琼脂 Dextrose Agar 250 用于细菌的综合生化试验葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium 250 用于志贺氏菌的复合生化试验（GB标准）葡萄糖铵培养基　 Ammonium Dextrose Medium 250 用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验（GB标准）葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth 250 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌葡萄球菌选择性琼脂110(CHAPMAN 琼脂) Staphylococcus Selective AgarNO.110 250 用于金黄色葡萄球菌的分离培养

&ldquo 恒天然毒奶粉&rdquo 事件8月28日上演&ldquo 神转折&rdquo ：新西兰官方称，恒天然乳清蛋白粉里所含的细菌并不是可能致毒的肉毒杆菌，而是与之相似的梭状芽孢杆菌(又称生孢梭菌)。 　　普通消费者不禁会问：这也能弄错?生孢梭菌又是一种什么菌? 　　新西兰初级产业部当天宣布，多达195次的追加检测结果表明，恒天然产品中检出的微生物是生孢梭菌。它不会像肉毒杆菌那样产生出致命的肉毒素，迄今也未曾报告过与生孢梭菌有关的食品安全问题。 　　换言之，生孢梭菌的性质不像肉毒杆菌那么严重，只是如果含量过高，生孢梭菌也有可能导致食物腐坏。 　　那么，检测机构怎会摆出这么离谱的&ldquo 乌龙&rdquo ?新西兰奥克兰大学微生物学专家苏西· 怀尔斯对媒体介绍说，生孢梭菌实际上是不产生毒素的肉毒杆菌分离菌，&ldquo 也就是说，这两种菌(肉毒杆菌和生孢梭菌)几乎是一样的，唯一区别在于是否含有负责编码生成肉毒素的基因。&rdquo 　　这位专家介绍说，检测微生物污染有多种方法，最简单的方法就是分离出菌株进行培养，然后进行相应的生物化学试验确定菌种 或者也可以通过寻找微生物中特定的DNA(脱氧核糖核酸)序列来确定菌种。但对于肉毒杆菌和生孢梭菌来说，这两种检测法根本无法分辨。 　　此前，肉毒杆菌一词曾引起消费者对恒天然产品的极大恐慌。实际上，真正有毒的不是肉毒杆菌本身，而是它在厌氧环境中产生的肉毒素(又称肉毒毒素)。肉毒素是一种毒性非常强的物质，不到1微克就可以致人死亡。也正因如此，恒天然这起食品安全事件迅速引起全球关注。 　　相关新闻：达能旗下奶粉向恒天然索赔 因错误检测损失严重

p style=" text-align: left line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px " 用于抗菌药物敏感性测试（AST）的新型台式自动化读取和孵化系统为微生物实验室提供了准确的MIC结果，帮助临床医生选择有效的抗生素——从而更好的通过抗菌药物使用来保护患者护理。 /p p style=" text-align: left line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px " 赛默飞Sensititre ARIS HiQ AST系统依靠行业的黄金标准 - 肉汤微量稀释，提供MIC结果，支持治疗决策的优化，最终支持患者的治疗效果。仪器采用金标准肉汤微量稀释法来指导更有针对性的患者治疗并优化患者预后。 /p p style=" text-align: left line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px " 临床实验室经常对无效的AST结果进行重新测试，或向临床医生发布结果前再次测试确认实验结果，新系统的使用为实验室节省时间，带来价值。表型驱动的MIC值的即时准确性可提供可靠的结果，避免重复测试的情况，并进一步节约重复测试产生的成本。 /p p style=" text-align: left line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px " 通过与领先制药公司的密切合作，Sensititre ARIS HiQ AST系统还提供广泛、新颖的抗菌药物选择，帮助用户更早地获得针对多重耐药性感染的最新疗法。此外，实验室可以从广泛稀释范围内的300多种抗菌药物中选择创建定制AST板，以巩固和减少离线测试。 /p p style=" text-align: left line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px " “新的Sensititre ARIS HiQ AST系统为微生物实验室提供了一流的肉汤微量稀释技术的独特组合，可获得最准确的AST，并获得最先进的抗菌药物，”赛默飞微生物学营销副总裁Bernd Hofmann说道。 “AST装置的可以确定特定疗法是否可用于重症患者。随着世界卫生组织（WHO）和疾病控制与预防中心（CDC）多次报告抗生素耐药性日益增加的威胁，使用这些新型抗菌药物的技术比以往任何时候都更加重要。” /p

变异链球菌的菌落特征与使用范围及培养方法！ 变异链球菌属于甲型溶血性链球菌类，菌体较小，呈圆形或卵圆形，常成双或以短链状排列，革兰染色呈阳性。它在胰蛋白胨培养基中和含有95％氮气及5％二氧化碳混合气体的环境下生长良好。 一、菌种简介平台编号：Bio-53150规格：冻干物拉丁属名：Streptococcus Mutans菌株名称：变异链球菌其他编号：ATCC700610培养基编号：116或114,5% CO2 or 厌氧培养温度：37培养时间：48 小时用途：对红霉素、利福平、利福霉素AMP、壮观霉素、链霉素敏感。血清型C。注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）保藏条件：斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20°C 保存。甘油请置于-80°C。 二、培养基TSA+5%脱纤维蛋白羊血（血琼脂平板） 三、菌落特征变异链球菌在血平板培养基上呈旺溶血，菌落较小，呈灰白色、圆形，表面突起，菌落质地较硬，有嵌入培养基内生长的趋势。 四、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 五、使用范围（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。 （2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。 （3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 六、注意事项1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板）；2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；二次接种量要多，固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显，液体培养要静止培养；3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25 年；6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系；7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理；8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛；9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作；10）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

霉菌培养箱是适合培养霉菌等真核微生物的试验设备，因为大部分霉菌适合在室温（25摄氏度）下生长，且在固体基质上培养时需要保持一定的湿度，所以一般的霉菌培养箱由制冷系统，制热系统，空气加湿器和培养室，控制电路和操作面板等 部分组成，并使用温度传感器和湿度传感器来维持培养室内的温度和湿度的稳定。有些特殊的霉菌培养箱还可以设定温度湿度随培养时间变化。 为了提高对实验用菌种的使用、管理，通过对菌种的传代、保存，从而确保其在实验中的有效性和准确性。范围:无菌检验、微生物限度检查检验用菌株。内容 传代前将购进菌种及灭菌后的营养琼脂小斜面置于室温放置30分钟，待温度平衡后再移入阳性操作室内。换好衣服，做好防护。第二、三代工作菌种的制备: 从超低温冰箱中取出所需的菌种冷冻管，置于35~40℃的水浴中进行解冻1分钟。解冻后，放入生物安全柜内，用冷却后的灭菌接种环从冷冻管中取一环菌液接种于10ml 灭菌营养肉汤培养基中，置于30~35℃的培养箱内18~24小时，进行增菌培养。(第二代)培养后，用冷却的灭菌接种环从增菌液中沾取一环接种于相应的培养基斜面上贴上菌种标签，置于30~35℃的 150L霉菌培养箱内18~24小时，进行培养。确认符合后置于5℃的冰箱内保存。使用时将培养出的斜面用、5ml的灭菌生理盐水将斜面上的菌落洗下制成菌悬液使用。(第三代)在第三代菌种有效期内进行第四代的接种传代。第四、五代工作菌种的制备: 从5℃的冰箱内取出第三代工作菌种，用冷却的灭菌接种环挑取1个菌落接种于相应的琼脂斜面培养基中，置于30~35℃的 150L霉菌培养箱内培养18~24小时后，确认符合后置于5℃的冰箱内作为第四代工作菌种保存，备用。接种操作规范 点燃酒精灯，左手握住菌种斜面，将管口靠近火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30秒钟，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。右手用无名指、小指及掌部夹住硅胶塞，左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手再轻轻拨开硅胶塞，将接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮取少量菌苔，随即取出接种棒，并将菌种管口移至火焰旁。塞上硅胶塞，左手将菌种管放下，取营养琼脂小斜面一支，右手用无名指、小指及掌部夹住硅胶塞，左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手再轻轻拨开硅胶塞，将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部，由低向上，将接种环轻贴斜面的表面曲折移动，使菌划在斜面的表面上。 取出接种环，在火焰旁将培养基管硅胶塞堵上，然后将接种过菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。 将已接种好的细菌管置30℃一35℃细菌培养箱培养18-24小时，霉菌管置23℃ - 28℃ 150L霉菌培养箱培养5-7日。取出后放入冰箱保存并上锁。 菌种的传代次数不得超过5代，每一菌株每次传代不超过15支 1支作为下次传代用，其余作为检验用，每月传代一次。 传代完毕后， 在每支试管上标明菌株名称、代数、序号、传代日期、有效期，如果对上述方法有什么疑问或想了解更多欢迎联系上海喆图科学仪器有限公司。

GB29921-2021《食品安全国家标准 预包装食品中致病菌限量》于2021年9月7日发布，2021年11月22日实施。“致泻大肠埃希氏菌”突然就成了焦点！在2013版本中，原检测项目为大肠埃希氏菌O157:H7/NM。然而随着对致泻大肠埃希氏菌检验、鉴定能力的提升，越来越多的由其引起的暴发和病例被识别出来，其导致的疾病负担以往也可能被低估。我国食源性疾病监测结果显示，近几年细菌性食源性疾病暴发事件中，致泻大肠埃希氏菌引起的事件数已经上升到第五位，高危食品主要为肉制品、蔬菜、水果等。2021版标准修订将“大肠埃希氏菌O157:H7”修改为“致泻大肠埃希氏菌”，并对肉制品中的牛肉制品、即食生肉制品、发酵肉制品类，即食果蔬制品中的去皮或预切的水果、去皮或预切的蔬菜及上述类别混合食品规定了限量要求n=5，c=0，m=0/25g。（来源：食品安全国家标准数据检索平台）致泻大肠埃希氏菌是什么？致泻大肠埃希氏菌是一类能引起人体以腹泻为主的大肠埃希氏菌，可经过污染食物引起人类发病。常见的致泻大肠埃希氏菌主要包括：肠道致病性大肠埃希氏菌EPEC肠道侵袭性大肠埃希氏菌EIEC产肠毒素大肠埃希氏菌ETEC产志贺毒素大肠埃希氏菌STEC（包括肠道出血性大肠埃希氏菌EHEC）肠道集聚性大肠埃希氏菌EAEC致泻大肠埃希氏菌如何检测？GB4789.6-2016致泻大肠埃希氏菌检验流程：目前国标PCR确认试验方法为普通PCR法。接下来带大家了解一下美正的两种PCR检测方案1. 普通PCR检测流程及产品介绍2. 荧光定量PCR检测流程及产品介绍致泻大肠埃希氏菌检测注意事项及常见问题 操作注意事项 （1）PCR鉴定前需将菌纯化于非选择性的固体培养基上；（2）所有PCR操作需严格分区，不同区域内仪器物品不可混用；（3）所有冷冻试剂使用前需融化混匀短暂离心后开盖使用；（4）试剂避免反复冻融，大体积试剂可配置后小体积分装冷冻；（5）操作需要带手套，不可使用带荧光物质或者是带粉末的手套；（6）提核酸加热后需冷却到室温后在开盖操作，避免气溶胶污染；（7）PCR管及管盖上不可使用记号笔标记；（8）不同批次试剂盒试剂不可混用；（9）严格按照试剂盒说明书设定反应参数和荧光通道。 用荧光定量PCR符合标准要求吗？ 答：这个不好说，一般按照不同的评审员的理解来要求。多数评审员应该会算是一种方法偏离吧。但是荧光定量PCR在技术上肯定是更先进的，至少明显降低了污染风险和生物安全风险，是今后食品微生物学检验技术的发展方向。GB 4789.6－2016的6.5.8条款：如用商品化PCR试剂盒或多重聚合酶链反应（MPCR）试剂盒，应按照试剂盒说明书进行操作和结果判定。这时候，我使用商品化荧光定量PCR试剂盒，是不是就可以按照试剂盒说明书进行了？大家可以探讨一下。 现在的食品实验室是否可以通过改装成分子实验室？食品检测的BSL-II室可以和PCR实验室共用吗？ 答：食品实验室本来就可以包括分子实验部分。所以，常规食品微生物检测的生物安全二级实验室可以和PCR实验室共用。但是，因为生物安全二级实验室必须是负压或者常压，而PCR实验室是相对正压，还有人流物流的多次进进出出，在防止交叉污染方面比较辛苦。最好还是不要合并使用。产品名称24T普通PCRDZ10015-348T用于PCR操作过程短暂离心

2013年1月31日，中国政府采购网公布了宁夏回族自治区疾病预防控制中心2013年食品安全风险监测试剂耗材采购项目招标公告，此次采购包括微生物培养基、化学试剂及玻璃器皿、生化诊断试剂、仪器配件及专用耗材等，详情如下所示： 　　一、委托编号：2013NCZ0037 招标编号：HSZB-2013ZC004 　　二、采购方式：公开招标 　　三、采 购 人：宁夏回族自治区疾病预防控制中心 　　联 系 人：李 银 联系电话：0951-4085393 　　四、招标代理机构：宁夏恒盛招标有限公司 　　联 系 人：李 慧 　　电 话：0951- 5031788 传 真：0951-5058301 　　电子邮箱: nx.hs@163.com 　　地 址：银川市国际贸易中心C栋12楼008室 　　户 名：宁夏恒盛招标有限公司 　　开 户 行：银川市农行开发区支行 　　账 号：140001040016999 　　五、评标办法：最低评标价法 　　六、采购内容简述： 　　一标段: 微生物培养基 序号 名称 规格 总数 单位 1 平板计数琼脂 250g/瓶 5 瓶 2 LST肉汤 250g/瓶 4 瓶 3 BGLB肉汤 250g/瓶 2 瓶 4 EC肉汤 250g/瓶 2 瓶 5 EMB琼脂 250g/瓶 3 瓶 6 致病性大肠埃希氏菌诊断血清 18瓶/套 2 套 7 产肠毒性大肠埃希氏菌诊断血清 10瓶/盒 2 盒 8 肠侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清 11瓶/盒 2 盒 9 出血性大肠杆菌O157诊断血清 1mL/瓶 2 瓶 10 出血性大肠杆菌O157：H7诊断血清 1mL/瓶 2 瓶 11 CN琼脂 250g/瓶 3 瓶 12 CN琼脂配套试剂 10支/盒 3 盒 13 金氏B培养基 250g/瓶 2 瓶 14 乙酰胺肉汤 100g/瓶 2 瓶 15 钠氏试剂 5mL/支×2 2 盒 16 Api 20NE生化条（带配套盐水及试剂） 25条/盒 5 盒 17 BPW 250g/瓶 3 瓶 18 SC增菌液 100g/瓶 2 瓶 19 TTB培养基基础 250g/瓶 2 瓶 20 碘液 20支/盒 3 盒 21 0.1%煌绿 20支/盒 3 盒 22 沙门氏菌显色培养基 1000mL/瓶 5 瓶 23 TSI琼脂 250g/瓶 1 瓶 24 MIU培养基 20支/盒 6 盒 25 靛基质试剂 10mL/瓶 3 瓶 26 软琼脂 250g/瓶 2 瓶 27 Api 20E生化条（带盐水） 25条/盒 15 盒 28 Api 20E配套试剂 7支/套 2 套 29 氧化酶 瓶 2 瓶 30 矿物油 125mL/瓶 2 瓶 31 沙门氏菌A-F多价诊断血清 1mL/瓶 3 瓶 32 沙门氏菌诊断学清 60种/套 2 套 33 志贺氏菌增菌肉汤 250g/瓶 4 瓶 34 志贺氏菌增菌肉汤配套试剂 10支/盒 6 盒 35 志贺氏菌显色琼脂 1000mL/瓶 5 瓶 36 XLD琼脂 250g/瓶 1 瓶 37 克氏双糖琼脂 250g/瓶 3 瓶 38 志贺氏菌属四种多价血清 1mL/支 3 支 39 志贺氏菌属福氏多价血清 1mL/支 3 支 40 志贺氏菌属诊断血清 50种/套 2 套 41 7.5%氯化钠肉汤 250g/瓶 5 瓶 42 Baird-parker基础 500g/瓶 2 瓶 43 脑心浸液500g/瓶 1 瓶 44 冻干血浆 12瓶/盒 3 盒 45 金葡显色培养基 500mL/瓶 3 瓶 46 10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤 250g/瓶 6 瓶 47 Baird-parker基础 250g/瓶 1 瓶 48 亚蹄酸盐卵黄增菌液 100mL×6瓶/盒 2 盒 49 胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤 250g/瓶 4 瓶 50 胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤配套试剂 10000IU×10支/盒 3 盒51 MYP琼脂基础 250g/瓶 2 瓶 52 MYP琼脂配套试剂 10支/盒 3 盒 53 50%卵黄乳液 5mL/支×10 6 盒 54 蜡样芽胞杆菌显色琼脂 1000mL/瓶 3 瓶 55 酪蛋白琼脂 100g/瓶 2 瓶 56 蜡样芽胞杆菌生化鉴定盒 10次/盒 6 盒 57 Api CHB生化条（带培养基及配套试剂）(进口) 10条/盒 6 盒 58 磷酸盐缓冲液 250g/瓶 1 瓶 59 大肠杆菌IMVC生化鉴定盒 10次/盒 3 盒 60 BPW 250g/瓶 3 瓶 61 mLST-Vm基础 250g/瓶 2 瓶 62 mLST-Vm配套试剂 5支/盒 3 盒 63 阪崎显色培养基 1000mL/瓶 3 瓶 64 LB基础 250g/瓶 2 瓶 65 LB1配套试剂 10支/盒 5 盒 66 LB2配套试剂 10支/盒 2 盒 67 单增李斯特菌显色平板 20块/盒 6 盒 68 SIM琼脂 250g/瓶 2 瓶 69 半固体琼脂 250g/瓶 2 瓶 70 Api Listeria生化条(进口) 10条/盒 10 盒 71 木糖生化管 20支/盒 3 盒 72 鼠李糖生化管 20支/盒 3 盒 73 Phoenix阳性鉴定板(进口) 25块/盒 4 盒 74 Phoenix阴性鉴定板(进口) 25块/盒 4 盒 75 Phoenix鉴定培养液(进口) 100支/盒 2 盒 76 一次性血平板 20块/盒 10 盒 77 百日咳诊断血清 1mL/瓶 1 瓶 78 脑膜炎奈瑟氏菌诊断血清 11瓶/套 1 套 79 脑膜炎奈瑟氏菌乳胶凝剂试剂盒 25人份/盒 1 盒 80 DR585链球菌分型试剂盒 盒 1 盒 81 亚碲酸钾培养基 500g/瓶 1 瓶 82 3.5%亚碲酸钾溶液 10瓶/盒 1 盒 83 裂解马血 10瓶/盒 1 盒 84 炭琼脂 500g/瓶 1 瓶 85 炭琼脂培养基添加剂 10瓶/盒 1 盒 86 Api NH生化鉴定条（带配套盐水及试剂）(进口) 10条/盒 1 盒 87 Api Staph（带配套试剂）(进口) 25条/盒 1 盒 88 Api 20 Strep（带配套试剂）(进口) 25条/盒 1 盒 89 Api Coryne生化鉴定试剂条（带配套试剂）(进口) 12条/盒 1 盒 90 O157胶体金测试条 10条/包 3 包 91 国产霍乱弧菌O1群胶体金快速检测试剂盒 10条/包 3 包 92 国产霍乱弧菌O139群胶体金快速检测试剂盒 10条/包 3 包 93 肉毒毒素诊断血清 7支/盒 4 盒 94 A型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 95 B型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 96 C型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 97 沙门氏菌抗原快速检测试剂 10条/包 5 包 98 革兰氏染液 套 2 套 99 细菌双向血培养瓶 12瓶/箱 8 箱 100 大肠杆菌 8099 2 株 101 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 2 株 102 铜绿假单胞菌 ATCC 15442 2 株 103 白色念珠菌 ATCC 10231 2 株 104 枯草杆菌黑色变种芽孢 ATCC 9372 2 株 105 藤黄微球菌 CMCC（B）28001 1 株 106 生孢梭菌 CMCC（B）64941 1 株 107 白色念珠菌 CMCC（F）98001 1 株 108 药敏检测试剂盒 12种/盒 50 盒 109 药敏板 套 150 套 　　第二标段: 化学试剂及玻璃器皿 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 丙酮 500ml/瓶 10 瓶 2 三氯甲烷 500ml/瓶 15 瓶 3 无水乙醇 500ml/瓶 20 瓶 4 三氯醋酸 500g 2 瓶 5 蒽酮 25g 1 瓶 6 硫脲 500g 1 瓶 7 CuSO4 25g 1 瓶 8 NaF 500g 1 瓶 9 钨酸钠 500g 1 瓶 10 对羟基联苯 100g 1 瓶 11 乳酸锂 5g 1 瓶 12 乳酸钙 500g 1 瓶 13 硝酸 500mL 20 瓶 14 硝酸 2500mL 8 瓶 15 抗坏血酸 100g 10 瓶 16 硝酸镁,六水 50g 2 瓶 17 氧化镧 500g 1 瓶 18 甲醇 4L 10 瓶 19 乙腈 4L/瓶 8 瓶 20 正己烷 4L 6 瓶 21 氯化钠 500g 20 瓶 22 无水硫酸钠 500g 20 瓶 23 乙酸乙酯 4L 4 瓶 24 丙酮 4L 4 瓶 25 二氯甲烷 4L 2 瓶 26 磷酸 500mL/瓶 3 瓶 27 硫酸铈铵 25g/瓶 10 瓶 28 次氯酸钠 500mL/瓶 5 瓶 29 环己烷 500mL/瓶 5 瓶 30 三氟乙酸 500mL/瓶 2 瓶 31 Hydrolysis Reagent C47TM CB130（氧化剂） 4×950mL/包 3 包 32 o-Phthalaldehyde DiluentCB910（OPA稀释剂） 4×951mL/包 3 包 33 巯基乙醇 10g 1 瓶 34 邻苯二甲醛OPA 5g 1 瓶 35 2-硝基苯甲醛2-Nitrobenzaldehyde 25g/瓶 1 瓶 36 二甲基亚砜 500ml/瓶 1 瓶 37 甲酸Formic acid 100mL/瓶 1 瓶 38 β-葡萄糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶β-Glucuronidase/sulfatase 5ml，100000单位/mg 3 瓶 39 蛋白酶 100mg 1 瓶 40 高氏淀粉酶 500g 1 瓶 41 β-葡萄糖苷酶/硫酸酯酶 2mL 3 瓶 42 正丙醇 500mL/瓶 1 瓶 43 盐酸羟胺 100g/瓶 2 瓶 44 对甲苯磺酸 101g/瓶 2 瓶 45 乙酸铵 500g 2 瓶 46 石油醚 500ml/瓶 5 瓶 47 乙二胺 500ml/瓶 2 瓶 48 氢氧化钾 500g 4 瓶 49 冰醋酸 500ml/瓶 10 瓶 50 无水乙醇 500mL/瓶 12 瓶51 95%乙醇 500mL/瓶 10 瓶 52 甲基叔丁基醚 500ml/瓶 5 瓶 53 对氨基苯磺酰胺 50g 2 瓶 54 盐酸N-（1-萘）-乙二胺 25g 2 瓶 55 二苯碳酰二肼 25g 2 瓶 56 异烟酸 25g 2 瓶 57 砒唑酮 25g 2 瓶 58 N-二甲基甲酰胺 25g 2 瓶 59 氯胺T 25g 2 瓶 60 安替比林 50g 2 瓶 61 4-氨基安替比林 50g 2 瓶 62 碘化钾晶体 50g 1 瓶 63 次氯酸钠 500ml 2 瓶 64 36%过氧化氢 500ml 2 瓶 65 冰醋酸 500m110 瓶 66 碘化钾 250g 1 瓶 67 无水磷酸氢二钠 500g 1 瓶 68 无水磷酸氢二钾 500g 1 瓶 69 乙二胺四乙酸二钠 250g 1 瓶 70 盐酸N,N-二乙基对苯二胺 100g 1 瓶 71 硫酸N,N-二乙基对苯二胺 100g 1 瓶 72 无氯纯水 1000ml 1 瓶 73 亚砷酸钾 1 瓶 74 硫代乙酰铵 250g 1 瓶 75 氯胺T 500g 1 瓶 76 吡啶 500ml 1 瓶 77 巴比妥酸 250g 2 瓶 78 一水磷酸二氢钠 500g 1 瓶 79 二水磷酸二氢钠 500g 1 瓶 80 二乙酰一肟 25g 2 瓶 81 二硫化碳 500mL 1 瓶 82 氯化钾 250g 1 瓶 83 20-30目沙子 500g 2 瓶 84 盐酸 500m1 2 瓶 85 三氧化铬 100g 2 瓶 86 对氨基苯磺酸 100g 2 瓶 87 硫酸 500m1 2 瓶 88 氯化汞 500g 3 瓶 89 碘化钾 500g 2 瓶 90 氢氧化钠 500g 3 瓶 91 磷酸 500m1 2 瓶 92 甲醛 501ml 2 瓶 93 环已二胺四乙酸 100g 2 瓶 94 氨基磺酸 100g 2 瓶 95 盐酸副玫瑰苯胺 100g 2 瓶 96 邻苯二甲酸氢钾 500g 2 瓶 97 亚砷酸钠 500g 2 瓶 98 可溶性淀粉 500g 2 瓶 99 硝酸银 250g 2 瓶 100 碳酸铵 500g 2 瓶 101 丙酮 500m1 4 瓶 102 乙酸 500m1 2 瓶103 磷酸二氢钾 500g 2 瓶 104 磷酸氢二钠 500g 2 瓶 105 异烟酸 100g 2 瓶 106 硫氰酸汞 500g 2 瓶 107 乙醇 500m1 2 瓶 108 硫酸铁铵 100g 2 瓶 109 氨水 500m1 2 瓶 110 丙三醇 500m1 2 瓶 111 溴甲酚绿 100g 2 瓶 112 柠檬酸三钠 500g 2 瓶 113 氯化钠 500g 2 瓶 1 比色管 100ml 100 只 2 比色管 25mL 50 只 3 容量瓶 10mL 30 支 4 具塞锥形瓶 250ml 60 支 5分液漏斗 1L 5 支 6 分液漏斗 250mL 30 支 7 玻璃吸管glass pasteur pipettes 230mm,250支/盒 1 盒 8 容量瓶 100mL,5个/盒 4 盒 9 具塞玻璃刻度试管 10mL 300 个 10 具塞玻璃刻度离心管 25mL 200 个 11 玻璃吸管（尖头）glass pasteur pipettes 150mm,250支/盒 5 盒 12 玻璃吸管（尖头）glass pasteur pipettes 230mm,250支/盒 4 盒 13 棕色磨口具塞试剂瓶 500mL 200 个 14 量筒 100mL 5 个 15 棕色容量瓶 100ml 20 个 16 250mL具塞锥形瓶 250mL 30 个 17 圆底烧瓶 100mL 30 个 18 10mL具塞玻璃刻度试管试管架 　 5 个 19 25mL具塞玻璃刻度离心管试管架 　 5 个 20 石油醚 500mL 2 瓶 21 定量滤纸 内径12.5 20 盒 22 定量滤纸 内径15 20 盒 23 定量滤纸 内径18 20 盒 24 定性滤纸 内径12.5 20 盒 25 定性滤纸 内径15 20 盒 26 定性滤纸 内径6cm 10 盒 27 定性滤纸 内径18 20盒 28 橡胶手套 中 10 双 29 橡皮塞子 1号-10号 各10 只 30 多孔玻板吸收管 棕色 10 个 31 多孔玻板吸收管 白色 10 个 32 大炮吸收管 白色 30 个 33 具塞比色管 10m1 30 个 34 量筒 20ml 5 个 35 量筒 50ml 3 个 36 量筒 250mL 3 个 37 量筒 500mL 3 个 38 量筒 1000mL 5 个 39 烧杯 25mL 20 个 40 烧杯 50mL 20 个 41 烧杯 100mL 20 个 42 烧杯 100mL 20 个 43 烧杯 1000mL 15 个 44 烧杯 3000ml 20 个 45 烧杯 2000ml 20 个 46 吸管 1mL 20 个 47 吸管 2mL 20 个 48 吸管 5mL 20 个 49 吸管 10mL 20 个 50 移液管 1mL 20 个 51 移液管 2mL 20 个 52 移液管 5mL 20 个 53 移液管 10mL 20 个 54 温度计 360° 10 个 55 大口瓶 2500mL 10 个 56 比色管（具塞） 10ml 20 个 57 棕色容量瓶 50ml 20 个 58 塑料量筒 250ml 2 个 59 标本缸(圆筒型) 高20cmX直径25cm 10 个 60 标本缸 10 个 　　第三标段: 生化诊断试剂 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 流行性出血热IgG抗体检测试剂盒 96人份／盒 8 盒 2 流行性出血热抗体检测试剂盒（胶体金法） 20人份/盒 2 盒 3 出血热荧光抗体（直接法） 15 ml 4 流行性出血热IgM抗体检测试剂盒 96人份／盒 2 盒 5 登革热IgM抗体检测试剂盒(进口) 96人份／盒 1 盒 6 狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒 20人份/盒 4 盒 7 乙脑IgM抗体检测试剂盒 48人份／盒 2 盒 8 呼吸道病毒15联RT-PCR检测试剂盒(进口) 50人份/盒 1 盒 9 BED新发感染检测试剂盒(进口) 192人份／盒 4 盒 10 丙肝病毒抗体检测试剂盒（酶免法） 48人份／盒 1 盒 11 梅毒螺旋体抗体试剂盒（ELISA） 48人份／盒 1 盒 12 梅毒螺旋体抗体试剂盒（TPPA） 100T/盒 1 盒 13 乙肝表面抗原检测试剂盒（酶免法） 48人份／盒 1 盒 14 风疹IgM抗体检测试剂盒 48人份／盒 20 盒 15 麻疹IgM抗体检测试剂盒 48人份／盒 20 盒 16 麻疹IgM抗体检测试剂盒 96人份／盒 2 盒 17 乙肝DNA检测试剂盒 20人份/盒 1 盒 18 布病IgM ELISA检测试剂盒(进口) 96人份/盒 3 盒 19 布病IgG ELISA检测试剂盒(进口) 96人份/盒 3 盒 20 甲肝病毒IgM抗体检测试剂盒（酶免法） 96人份／盒 200 盒 21 戊肝病毒IgM抗体检测试剂盒（酶免法） 96人份／盒 200 盒 22 麻疹荧光PCR检测试剂盒 规格：48T／盒 9 盒 23 风疹荧光PCR检测试剂盒 规格：48T／盒 5 盒 　　第四标段: 仪器配件及专用耗材 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 25mL EPA样品瓶 140×27.5mm，100个/包 1 包 2 色谱柱ACQUITY UPLC HSS T3(进口) 1.8um 2.1mm*50mm 1 根 3 水相针式滤器 100只/包 4 包 4 水相针式滤器 100只/包 4 包 5 有机相针式滤器 100只/包 4 包 6 有机相针式滤器 100只/包 8 包 7 样品瓶存放盒 　 2 只 8 Ag-H离子交换树脂柱(进口) 2.5cc，48个/包 2 包 9 玻璃纤维滤纸GF/C 47mm，1.2µ m,100张/盒 5 盒 10 玻璃纤维滤纸GF/C 110mm，1.5µ m,100张/盒 3 盒 11 PriboFast玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口) 25/包 5 包 12 黄曲霉毒素B1B2G1G2M1免疫亲和柱(进口) 25/包 6 包 　 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 25/包 8 包 13 固相萃取小柱（中性氧化铝） 30/包 1g/6mL 10 包 14 Oasis MAX固相萃取柱(进口) 6cc/150mg，30/包 5 包 15 Oasis HLB固相萃取柱(进口) 200mg/6cc, 30/盒 5 盒 16 Oasis MCX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc,30/盒 5 盒 17 Oasis MCX固相萃取柱(进口) 60mg/3cc, 100/盒 5 盒 18 Oasis WCX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc, 30/盒 5 盒 19 Oasis WAX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc, 30/盒 5 盒 20 塑料巴斯德吸管 2ml 1000/盒 3 盒 21 MycoSep 230-雪腐镰刀菌烯醇多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 22 PriboFast 226-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 23 PriboFast 200-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 24 DONStar R呕吐毒素免疫亲和柱(进口) 25支/pk 每支小柱3ml 5 盒 25 ZearaStar玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口) 25支/pk 每支小柱3ml 5 盒 26 SupelMIP® 固相萃取 — 氯霉素 25 mg/10 mL , (LRC), pk of 50 4 盒 27 SILICA/PSA混合玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL，10个/盒 30 盒 28 Florisil玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL，10个/盒 30 盒 29 PSA玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL，30个/盒 30盒 30 LC-Si固相萃取柱 200mg，3mL，30个/包 3 包 31 LiChrolut EN固相萃取柱 200mg，3mL，30个/包 3 包 32 50uL微量进样针 50μL 4 支 33 封口膜 　 2 卷 34 PTFE针头过滤器 0.22um,13mm，100/pk 10 包 35 BEH-C18色谱柱(进口) 150mm*d2.1mm，1.7um 2 根 36 R95口罩 (20个/盒)防酸碱 4 盒 37 R95口罩 (20个/盒)防有机 4 盒 38 sunfire-C18色谱柱(进口) 150mm*2.1mm，5um 2 根 39 氨基甲酸酯分析柱(进口) 150mm*3.9mm 1 根 40 氨基甲酸酯Sentry保护柱芯(进口) 2个/包 1 包 41 Sentry保护柱套(进口) 　 1 个 42 PAH C18 分析柱(进口) 250mm*4.6mm，5um 1 根 43 PROTEIN-Pak sp阳离子交换色谱柱(进口) 10mm*100mm,8um 1 根 44 无尘抽纸 200抽/盒 20 盒 45 塑料容量瓶 25mL, 5个/盒 36 盒 46 塑料容量瓶 50mL, 5个/盒 36 盒 47 塑料容量瓶 100mL, 5个/盒 36 盒 48 塑料刻度吸管 2mL 60 支 49 塑料刻度吸管 5mL 60 支 50 塑料刻度吸管 10mL 60 支 51 O型环(进口) 10/包 3 包 52 分流用玻璃衬管(进口) 5个/包 3 包 53 毛细管用压环 (进口) 10/包 3 包 54 惰性处理石英棉(进口) 3g/包 1 包 55 进样针(进口) 10uL 3 支 56 氟离子选择电极 　 2 支 57 甘汞电极 　 2 支 58 硅胶管（溶剂解吸型） 6*120mm 5 支 59 硅胶管（溶剂解吸型）

春天是单核细胞增生李斯特氏菌比较活跃的季节，肉及肉制品最容易受其污染。日前，检验检疫部门从两批冻猪肉样品中检出单核细胞增生李斯特氏菌，提请广大出口肉及肉制品生产企业引起高度重视。 　　单核细胞增生李斯特氏菌(以下简称李氏菌)是一种人畜共患病的病原菌，它广泛存在于自然界中，食品中存在的李氏菌对人类的安全具有危险性，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。 　　环境是李氏菌的一般孳生场所，李氏菌的存在反映了一个典型的环境卫生问题，有关企业应对环境加以全面的分析，以识别污染的主要区域，采取比控制其他致病菌更严格的措施来控制李氏菌，以保证产品的质量安全：加强对原料的控制，严把食品加工原料入厂关，严格控制加工原料的安全卫生，原料和成品操作严格分离 加强对从业人员的卫生控制，提高其安全卫生意识，养成良好自觉的卫生习惯，确保严格按照食品安全卫生要求组织生产 加强环境卫生控制，确保厂区环境卫生达到要求，扩大需检测的区域，提高检测频率，密切关注车间内外环境控制，有效隔离不相容区域，避免交叉污染，保持区域干燥，以防细菌生长和减少微生物的扩散 提高自检自控能力，同时注重加大实验室投入，重视人员培训，有效激励检测人员，努力提高检测水平。 　　附： 　　食品安全快速检测技术 　　食品致病菌快速筛选检验国标实施

综合韩媒报道，韩国京畿道安山市一家幼儿园近日发生大规模食物中毒事件，截至27日，出现腹痛、呕吐、腹泻等食物中毒症状的孩子、家人和老师共111人，部分学生还出现了溶血性尿毒综合征症状。 溶血性尿毒症综合征，俗称“汉堡病”，因1982年美国儿童食用未熟的汉堡集体食物中毒而得名。致病原因主要为食用被污染或者没熟透的食物，免疫力较低的孩子和老人容易感染。若病情恶化至损伤肾脏，只能靠透析维持生命，1950年代，病死率一度高达40%～50%，近年来由于改进了对急性肾衰竭的治疗，病死率已下降至5~15%左右。 肠出血性大肠杆菌(EHEC)是可引起较严重的健康危害的致病菌，肠出血性肠杆菌感染是一种人畜共患病。大肠杆菌O157:H7是EHEC中最常见影响最广泛的致病性大肠菌，它除引起腹泻、出血性肠炎外，还可发生溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来，肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延，相继在英国、加拿大、日本等多个国家引起腹泻爆发和流行。我国已陆续有十余个省份在市售食品、进口食品、腹泻病患者、家畜家禽等分离到大肠杆菌O157:H7。大肠杆菌STEC是肠出血性大肠杆菌的一类，能产生志贺毒素的非O157：H7大肠杆菌，包括了在日本出现的E.coli O111以及2011年在德国及欧洲其他国家出现的E.coli O104。这类大肠杆菌感染后，可引起自限性腹泻、出血性结肠炎和溶血性尿毒综合症（HUS）。一般寄生在牛、羊等家畜和其他反刍动物体内，人类主要是通过未经烹调烹调不彻底的肉类和奶制品等被感染。 食安科技针对于肠出血性大肠杆菌检测国内早期已推出大肠杆菌O157检测板、大肠杆菌O157测试片和大肠杆菌STEC测试片，适合于餐饮配餐企业、食品生产企业、校园食品安全、疾控中心、动物饲料质量安全等单位的使用。 大肠杆菌O157检测板 大肠杆菌O157测试片 大肠杆菌STEC测试片

2019年新春佳节，本应是所有中国人团聚祈福的日子，新型冠状病毒肺炎，无情的在这个冬季席卷全国，让本应是阖家欢乐的新春佳节蒙上阴影，也给节后本应活力四射的中国蒙上阴影。李文亮医生的去世，令所有人心情沉重，而追着妈妈的遗体，哭喊着希望唤醒妈妈的孩童，更令所有人心碎。在疫情前期，更有多名检测人员在检测的过程中，不幸被病毒感染。在严峻的疫情面前，全国所有的大中小企业、所有伟大的中国人民，团结一心，各自贡献自己的力量，其中机器人杀毒灭菌大军，机器人服务送餐大军，更给我们人类同疫情的战斗中，增添了无尽的力量。上海汇像信息技术有限公司，作为国内领先的为检验检测、生命科学与生物制药行业提供行业人工智能无物联网解决方案的企业，在疫情开始之前，就一直致力于全自动化微生物细菌病毒检测机器人的开发。而新型冠状病毒核酸检测大量假阴性的困难，以及样本的采集规范化、核酸提取的产率与纯度、试剂盒检测体系的灵敏度与稳定性、人工操作的重复性和人为错误等因素都对检测结果的准确性带来了巨大的影响，新型冠状病毒强大的传染及可扩散性，使得检验人员在操作过程中频繁接触样本，更增添了检验检测人员的感染风险。在此情况下，上海汇像研发了可以在无人的操作下，完全自动智能的实现高通量微生物细菌病毒检测的机器人系统。该机器人系统能够完成整的实现微生物样本前处理的所有关键步骤，包括接种划线、革兰氏玻片制备、增菌肉汤接种以及药敏纸片分配等实现多种细菌病毒的检测培养。上海汇像全自动微生物检测机器人系统配合上海汇像在图像处理、计算机视觉、大数据分析等领域强大的人工智能算法，使得微生物及细菌能够更好更快得到检测。同时可以对能对培养皿进行三维图像采集。用户亦可以自定义时间间隔进行图像采集，系统能自动分析间隔前后图片，系统会自动处理不同时间间隔扫描的图像信息，根据平皿成像分析，形成完整的平皿生长记录。上海汇像全自动微生物检测机器人系统上海汇像全自动微生物检测机器人系统随着疫情的发展，在巨大的工作量以及在病人数目持续增加，检验人手有限的情况下，人力和通量难以平衡，影响确诊救治以及疫情防控，全体汇像人zuì大程度在家里办公工作的情况下，保持zuì精干的研发队伍，全力开发全自动化的智能微生物细菌病毒检测机器人。为加速实验进程、保证人员安全、避免人为错误，为病毒的准确检测保驾护航。伟大的武汉必胜英雄的中国人必胜强大的机器人军团必胜上海汇像信息技术有限公司是一家以机器人及人工智能为核心技术，致力于为生命科学、诊断及应用化学提供领先的人工智能及物联网应用解决方案的企业。公司产品涵盖各类型机器人自动化检测系统，如自动化液体配置机器人，自动化样品处理机器人，自动化有害限用化学物质检测机器人，机器人检测云平台等。同时公司亦致力于为生命科学、生物制药及检验检测机构，提供全方位的实验室智能化解决方案设计，希望将机器人、自动化以及计算机视觉技术，广泛应用于微生物检测分析、化学检测分析，使人体真正远离微生物病毒的侵染，远离有害化学试剂的侵蚀，使每个人真正享受健康品质的生活。在微生物领域，我们知道，所有机体包括人在内都与微生物是共生体，人体身上有超过100万亿的微生物、有大约25000个人类基因，但却有1000多万个细菌基因，血液中有三分之一的分子都来自肠道细菌。目前文献中有超过3万种科研刊物将微生物与人类健康和各种疾病，包括胃肠，新陈代谢，肝脏，自身免疫，肿瘤，神经和心血管等病种联系起来。全球不少公司也基于大量研究，提出微生物制药、辅助治疗并推出产品，表明微生物作为“人体第二大基因组”已踏上工业化征程，成为新型治疗药物的丰富来源，为全人类健康带来福祉和希望。正由于微生物在疾病治疗、食品安全、药品安全、环境保护等人体健康方面具有重要作用，全球各国纷纷开展微生物组计划。包括欧盟“人类肠道宏基因组计划”（MetaHIT）、美国“人体微生物组计划”（HMP）等。中国于2017年底也陆续启动微生物计划。10月12日，由世界微生物数据中心和中国科学院微生物研究所牵头，联合全球12个国家的微生物资源保藏中心，宣布共同发起全球微生物模式菌株基因组和微生物组测序合作计划。该计划将覆盖超过目前已知90%的细菌模式菌株，完成超过1000个微生物组样本测序。2017年10月26日，微生物组创新创业者协会倡议发起中国肠道宏基因组计划（ChineseGutMetagenomicsProject），以推动我国在人体微生物组领域的发展。不久，2017年12月20日，中科院牵头启动“中国科学院微生物组计划”，该计划整合中科院下属研究所和北京协和医院14家机构，联手攻关“人体与环境健康的微生物组共性技术研究”。从上而下的大国计划催生了微生物科学研究的繁荣和大量应用成果的转化。从全球微生物产业格局来看，产业链上游以技术服务公司为主，包括宏基因组测序、微生物检测、鉴定与分析、临床诊断等技术服务，为行业提供产品研发支持；中下游公司以具体应用化场景为主，涉及人体健康的领域有微生物科研、微生物治疗与药物研发、食品安全、环境保护等。在微生物领域，上海汇像将全力结合其在影像处理分析技术以及机器人自动化技术领域的优势，致力于微生物在食品安全、生物制药及生命科学领域的自动化智能化检测。

2019年新春佳节，本应是所有中国人团聚祈福的日子，新型冠状病毒肺炎却在这个冬季无情地席卷全国，让本应是阖家欢乐的新春佳节蒙上阴影，也给本应活力四射的中国蒙上阴影。李文亮医生的去世，令所有人心情沉重，而追着妈妈的遗体，哭喊着希望唤醒妈妈的孩童，更令所有人心碎。　　在严峻的疫情面前，全国所有的大中小企业、所有伟大的中国人民，团结一心，各自贡献自己的力量。问诊、消毒、送餐、测温、检测……在全民抗击新冠肺炎疫情的战役中，众多机器人“战士”登上战场，组建成机器人杀毒灭菌大军、机器人服务送餐大军，助力疫情预警与防治，给人类同疫情的战斗增添了无尽的力量。　　上海汇像信息技术有限公司，作为国内专业为检验检测、生命科学与生物制药行业提供行业人工智能无物联网解决方案的企业，在疫情开始之前，就一直致力于全自动化微生物细菌病毒检测机器人的开发。　　而新型冠状病毒核酸检测大量假阴性的困难，以及样本的采集规范化、核酸提取的产率与纯度、试剂盒检测体系的灵敏度与稳定性、人工操作的重复性和人为错误等因素都对检测结果的准确性带来了巨大的影响，新型冠状病毒强大的传染及可扩散性，使得检验人员在操作过程中频繁接触样本，更增添了检验检测人员的感染风险。　　在此情况下，上海汇像研发了可以在无人的操作下，完全自动智能的实现高通量微生物细菌病毒检测的机器人系统。该机器人系统能够完成整的实现微生物样本前处理的所有关键步骤，包括接种划线、革兰氏玻片制备、增菌肉汤接种以及药敏纸片分配等实现多种细菌病毒的检测培养。上海汇像全自动微生物检测机器人系统　　配合上海汇像在图像处理、计算机视觉、大数据分析等领域强大的人工智能算法，使得微生物及细菌能够更好更快得到检测。同时可以对能对培养皿进行三维图像采集。用户亦可以自定义时间间隔进行图像采集，系统能自动分析间隔前后图片，系统会自动处理不同时间间隔扫描的图像信息，根据平皿成像分析，形成完整的平皿生长记录。上海汇像全自动微生物检测机器人系统上海汇像全自动微生物检测机器人系统　　随着疫情的发展，全体汇像人较大程度在家里办公工作的情况下，保持最精干的研发队伍，全力开发全自动化的智能微生物细菌病毒检测机器人。为加速实验进程、保证人员安全、避免人为错误，为病毒的准确检测保驾护航。　　伟大的武汉必胜，英雄的中国人必胜，强大的机器人军团必胜。　　上海汇像信息技术有限公司是一家以机器人及人工智能为核心技术，致力于为生命科学、诊断及应用化学提供领先的人工智能及物联网应用解决方案的企业。公司产品涵盖各类型机器人自动化检测系统，如自动化液体配置机器人，自动化样品处理机器人，自动化有害限用化学物质检测机器人，机器人检测云平台等。同时公司亦致力于为生命科学、生物制药及检验检测机构，提供全方位的实验室智能化解决方案设计，希望将机器人、自动化以及计算机视觉技术，广泛应用于微生物检测分析、化学检测分析，使人体真正远离微生物病毒的侵染，远离有害化学试剂的侵蚀，使每个人真正享受健康品质的生活。　　在微生物领域，所有机体包括人在内都与微生物是共生体，人体身上有超过100万亿的微生物、有大约25000个人类基因，但却有1000多万个细菌基因，血液中有三分之一的分子都来自肠道细菌。　　目前文献中有超过3万种科研刊物将微生物与人类健康和各种疾病，包括胃肠，新陈代谢，肝脏，自身免疫，肿瘤，神经和心血管等病种联系起来。全球不少公司也基于大量研究，提出微生物制药、辅助治疗并推出产品，表明微生物作为“人体第二大基因组” 已踏上工业化征程，成为新型治疗药物的丰富来源，为全人类健康带来福祉和希望。　　正由于微生物在疾病治疗、食品安全、药品安全、环境保护等人体健康方面具有重要作用，全球各国纷纷开展微生物组计划。包括欧盟“人类肠道宏基因组计划”(MetaHIT)、美国 “人体微生物组计划”(HMP)等。　　中国于2017年底也陆续启动微生物计划。10月12日，由世界微生物数据中心和中国科学院微生物研究所牵头，联合全球12个国家的微生物资源保藏中心，宣布共同发起全球微生物模式菌株基因组和微生物组测序合作计划。该计划将覆盖超过目前已知90%的细菌模式菌株，完成超过1000个微生物组样本测序。　　2017年10月26日，微生物组创新创业者协会倡议发起中国肠道宏基因组计划(Chinese Gut Metagenomics Project)，以推动我国在人体微生物组领域的发展。不久，2017年12月20日，中科院牵头启动“中国科学院微生物组计划”，该计划整合中科院下属研究所和北京协和医院14家机构，联手攻关“人体与环境健康的微生物组共性技术研究”。　　从上而下的大国计划催生了微生物科学研究的繁荣和大量应用成果的转化。从全球微生物产业格局来看，产业链上游以技术服务公司为主，包括宏基因组测序、微生物检测、鉴定与分析、临床诊断等技术服务，为行业提供产品研发支持 中下游公司以具体应用化场景为主，涉及人体健康的领域有微生物科研、微生物治疗与药物研发、食品安全、环境保护等。　　在微生物领域，上海汇像将全力结合其在影像处理分析技术以及机器人自动化技术领域的优势，致力于微生物在食品安全、生物制药及生命科学领域的自动化智能化检测。

大肠菌群(Coliform bacteria)是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否有污染肠道致病菌的可能。大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界中广泛存在。大肠菌群作为作为食品微生物的主要检测指标之一，食品企业最常检测的微生物项目，我们都知道目前大肠菌群检测的方法包括：GB 4789.3-2003 和GB4789.3-2016，那在日常检测中细心的小伙伴们可能会发现，报告单位有时是MPN/g(mL)，有时又是MPN/100g(mL)，这两个单位是什么意思呢？能够简简单单的认为两者相差100倍吗？答案当然是NO。针对这个问题，今天我们就仔细地分析探讨一下，一次性解决大肠菌群MPN法报告的问题。一、检测方法大肠菌群检测的关键在于方法的选用，食品中大肠菌群检测有两种表示方法，其一是以100mL(g)检样内大肠菌群最大可能数(MPN)表示，检测方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》；其二以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示，检测方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》。二、报告单位溯源首先看看这两个单位的来源。2003年8月，国家卫生部和标准化管理委员会联合发布了《GB/T 4789.3-2003 食品微生物学检验 大肠菌群测定》，来替代1994版国标。这版国标的检测只有一种MPN法，但是却是大肠菌群检测的经典国标。在2016年12月，国家卫生部发布了《GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》，这次标准标准代替了GB 4789.3-2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》、GB/T 4789.32-2002《食品卫生微生物学检验 大肠菌群的快速检测》和SN/T 0169-2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。2016版国标相对2010版来讲内容更充实，不仅增加了检验原理，还对标准的适用范围、典型菌落的形态的描述以及第二法平板菌落数的选择、证实试验计数、平板计数的报告等进行了修改。但是2016版国标正式实施的同时，国家有关部门也并没有废除2003版国标，因此在接下来的时间里，2003版和2016版国标还将继续并存。三、两个国标报告单位区别下面我们先看看这两个版本的MPN法有什么区别：由以上表格可以看出，2016版国标与2003版国标在MPN法检测上还是有很大的区别的：首先是培养基，2016版国标使用的是LST肉汤培养基，由于LST培养基中含有月桂基硫酸盐，有一定的抑菌作用，同时对大肠菌群会有一定的修复作用，同时相对于乳糖胆盐培养基，没有了胆盐沉淀的影响，更利于现象的观察，所以2016版国标里没有对阳性发酵管进行分离培养和革兰氏染色等验证试验。其次，阳性发酵管进行的验证试验也不相同，2003版国标明显比2016版国标要复杂的多，操作更为繁琐，验证步骤更多。最后，当然也是最令检测人员头疼的问题就是报告单位，也是我们最容易忽视的问题。四、小结弄清楚两个版本的国标的区别，关于报告格式的问题也就不太纠结了。假如你使用的检测方法用是2003版国标，那么结果报告的单位就应该是MPN/100g(mL)，假如你使用的是2016版国标，那你的结果报告单位就应该是MPN/g(mL)。举个例子说，如果MPN法的阳性管数为320，假如用的是2003版国标，则报告结果为930MPN/100g(mL)；假如用的是2016版国标，则报告结果为93MPN/g(mL)。但是同一个样品若是同时使用两种检测方法进行检测，检测结果并不会特别一致，通常情况下，2016版国标检测样品的检测结果偏高。相反的，产品标准也会提示或者要求我们合理选择检测方法：假如某一产品大肠菌群的标准为30 MPN/100g(mL)，那你肯定应该选择2003版国标的检测方法；若是产品标准为3 MPN/g(mL)，那就只能选择2016版的国标了。总之，在确定了产品标准的情况下，不存在一个产品既可以选用2003，又可以选用2016版的情况。单位MPN/100g与单位MPN/g，之间是没有转换关系的！

恒天然"肉毒杆菌门"大事记 　　8月2日，新西兰乳制品巨头恒天然集团2日向新西兰政府通报称，其生产的3个批次浓缩乳清蛋白(WPC80)中检出肉毒杆菌，影响包括3个中国企业在内的8家客户。 　　8月2日晚间，中国国家质检总局官网发布消息，要求进口商立即召回可能受污染产品。 　　8月3日，新西兰初级产业部发表声明，已经确定5个批次"可瑞康"牌2段婴儿配方奶粉使用含有肉毒杆菌的浓缩乳清蛋白粉，建议新西兰父母暂停为6个月以上宝宝喂食"可瑞康"牌2段婴儿配方奶粉。 　　8月3日，恒天然举行新闻发布会，执行董事加里· 罗马诺介绍说，检测显示，新西兰本地一家工厂2012年5月生产的3批浓缩乳清蛋白含有肉毒杆菌。这些"受污"产品总量达40吨左右。暂时没有收到"受污"产品引发的健康问题报告。此外，这些可能造成服食者中毒的受污染浓缩乳清蛋白粉被提供给8家制造商，用作生产婴儿奶粉、儿童成长奶粉和运动饮料的原料，涉事产品估计达到900吨。 　　8月4日，中国国家质检总局公布3个品牌的4家"涉事"中国公司。 　　新西兰乳制品巨头恒天然集团宣布旗下一个公司生产的乳清蛋白粉检出肉毒杆菌后，新西兰政府启动大范围产品召回，涉及中国等7个国家，产品总量可能达到1000吨。 　　国家质检总局今天上午通报，有4家中国企业进口了可能受到肉毒杆菌污染的新西兰恒天然集团产品。其中包括娃哈哈、多美滋等品牌。 　　目前，多美滋已在官网发布召回公告，并公布了涉事产品的具体名称和批号。 　　通报 　　质检总局： 　　四家公司进口问题原料 　　今天上午，记者从国家质检总局获悉，经中新双方核查，现初步确定，有4家中国境内进口商进口了可能受到肉毒杆菌污染的新西兰恒天然集团产品。其中涉及娃哈哈、多美滋、上海糖业烟酒集团等企业。据悉，涉事进口企业已对涉及的问题产品采取追溯、召回等措施。 　　企业 进口情况 杭州娃哈哈保健食品有限公司和杭州娃哈哈进出口有限公司 进口浓缩乳清蛋白14.475吨 　　上海市糖业烟酒(集团)有限公司 进口浓缩乳清蛋白4.800吨 多美滋婴幼儿食品有限公司 进口原料乳粉208.550吨 　　食药监总局：涉事企业还有可口可乐 　　记者上午从国家食品药品监督管理总局获悉，8月3日，国家食药监总局发出紧急通知，要求上海市、浙江省食品药品监督管理局会同质量技术监督局，立即开展对新西兰浓缩乳清蛋白粉肉毒杆菌问题的调查，进行系列检验检测，做好风险防范工作。 　　今天上午，国家食品药品监督管理总局约谈上述3家企业的相关负责人，要求尽快查明情况、分析原因，迅速采取措施，立即停止销售并召回问题原料加工的全部食品。 　　食药监总局相关负责人表示，国家食药监总局高度重视，密切关注事件发展，有关情况将及时向社会公布。据悉，约谈的企业还有可口可乐公司，因为上海糖业烟酒把原料卖给了可口可乐。 　　追访1 　　娃哈哈：爱迪生奶粉乳源来自荷兰 　　今天上午，娃哈哈爱迪生奶粉北京旗舰店客服人员向记者表示：该品牌奶粉"乳源是荷兰的，不是新西兰，因此未受到此次污染事件影响"。 　　记者随后致电杭州娃哈哈集团，该集团相关负责人表示，相关资料正在整理中，稍后给记者回复。不过，截至发稿时，记者仍未收到其回复。 　　娃哈哈 　　杭州娃哈哈保健食品有限公司和杭州娃哈哈进出口有限公司 　　1、婴幼儿奶粉：爱迪生奶粉(乳源来自荷兰，并非新西兰，未受影响) 　　2、饮料 　　1)含乳饮料呦呦奶茶、营养快线、爽歪歪、智慧超人儿童酸牛奶 　　2)功能饮料：激活、启力 　　3)其他：包装水、果汁饮料、凉茶等 　　追访2 　　多美滋：召回多领加和优阶贝护产品 　　多美滋今天上午发布声明表示，根据恒天然今天提供的信息，多美滋已查明部分优阶贝护和多领加二阶段产品有可能受到影响，共涉及12个批次。其中部分已经被迅速封存，未流入市场。多美滋其他产品未受影响，消费者可放心使用。 　　多美滋方面表示："多美滋已启动召回程序，将对以上产品实施预防性召回，并全部销毁。如您已购买相关产品，建议立刻停止使用。"同时，多美滋公布了咨询热线400-880-5288，消费者可拨打咨询。 　　召回产品的具体名称和批号 　　产品品名 净重 批号多领加延续较大婴幼儿 1200g 1F3144配方奶粉(2阶段) 　　400g 1F3171优阶贝护延续较大婴儿 360g× 3 2E3170、1E3182配方奶粉(2阶段) 　　400g 1C3170、2C3180400g× 3 2E3172、1E3181850g+50g 1H3172、1H3180900g 2H3166、2H3181 　　乐友下架多美滋涉事产品 　　今天上午记者从京城多家零售终端了解到，各商场、超市和电商平台"高度重视这次奶粉污染事件"，并已经展开自查，如果发现库存中有涉事批次的产品，会按照不合格产品下架流程处理。不过，记者也注意到，目前部分超市多美滋的产品还在正常销售，一些超市的负责人表示，还不清楚情况，并没有接到多美滋方面的通知。 　　"为了保险起见，我们临时下架了电商和实体店中所有多美滋二段的产品，不仅是涉事批次的。"乐友相关负责人表示。乐友在了解到奶粉涉嫌污染事件的消息后，在没有得到厂家正式通知前，第一时间由该公司商品质检部门宣布全国360余家门店以及网站，对多美滋二段奶粉实施商品下架。乐友同时表示，今天会将下架工作进行完。 　　据悉，多美滋婴幼儿奶粉在京城多家超市有售，销量一直不错。截至记者发稿时，在1号店、京东商城等电商平台上，多美滋此番涉事的"多领加延续较大婴幼儿配方奶粉"和"优阶贝护延续较大婴幼儿配方奶粉"仍在正常销售。记者注意到，在上述商品的购买评价和顾客咨询中，已经有不少人留言询问"肉毒杆菌污染"事件，不少妈妈对此十分担忧。 　　追访3 　　可口可乐产品或涉肉毒杆菌 　　记者上午尝试联系上海糖业烟酒集团，但是截至发稿时，暂时没有得到该集团针对此事的回应。 　　据公开的资料，品牌代理业是上海糖业烟酒集团的核心主业之一，秉承60年全国市场食品批发分销代理的历史，其打造了以南浦集团、捷强集团为主的多平台品牌代理体系。其代理的品牌包括：恒天然、雀巢、惠氏和蒙牛。 　　根据食药监总局的约谈记者了解到，上海糖酒集团将进口的恒天然问题乳清蛋白销售给了可口可乐中国有限公司。可口可乐公司相关人士表示，目前已经获悉该事件，目前初步确定为果粒奶优，现在公司正统计可能存在隐患的饮料批次。 　　记者了解到，乳清蛋白除了可以使用在奶粉中，还可添加在含乳饮料和功能饮料中。可口可乐除了碳酸饮料外，也在销售含乳饮料和功能饮料，分别为美汁源果粒奶优和维他命水。 　　记者上午在一家超市内看到，市面在售的可口可乐旗下含乳饮料名为&ldquo 美汁源果粒奶优&rdquo ，有芒果味、水润蜜桃味、草莓等多种口味。配料表显示其含有浓缩乳清蛋白。该款产品于2009年推出，在各大超市有售。

开学季又到了实验汪又要去“搬砖”了如何优雅的搬砖还不用求助师兄师姐当然是关注“小奥课堂”栏目啦今天小奥为各位介绍的 是一篇干货满满的 噬菌体展示方法实践手册 “噬菌体的扩增与定量” 这是一份难得的学霸笔记 请收好（收藏）！ Part 1杂交瘤、单细胞克隆和噬菌体展示技术是抗体发现的三种主流技术，其中噬菌体展示技术作为诺奖级别的技术，在生物创新医药研发过程中有着十分重要的作用，极大的加快了抗体类药物研发的进程。噬菌体展示技术不仅在新的抗体和多肽的发现及优化过程中有着核心的作用，还能和传统的动物免疫技术相结合，与纳米抗体、全人源转基因小鼠发现平台进行有效对接，能够广泛用于抗体、抗体偶联药物和CAR-T/TCR-T等领域。本文将针对噬菌体展示技术的噬菌体增殖和扩增实验细节进行探讨、分享具体实验过程的经验，以其原理为根本来指导实验过程，以精益求精的实验过程，增加噬菌体展示技术在抗体发现过程中的成功率。Part 2 ——噬菌体文库 扩增及展示的基本原理 | 现在普遍应用的噬菌体展示抗体片段的体系称之为“3+3体系”（3为噬菌体的p3衣壳蛋白）；3+3代表着p3衣壳蛋白有两个来源：噬菌粒（phagemid）M13KO7辅助噬菌体(Helper Phage）菌粒（phagemid）上的p3蛋白融合了抗体片段的基因，是文库多样性的关键；辅助噬菌体(Helper Phage)上的p3蛋白为噬菌体天然的p3蛋白。*噬菌粒是一种比较小的质粒载体，在大肠杆菌感受态中有较高的转化效率，并且能够在大肠杆菌中扩增。 含有噬菌粒的大肠杆菌被辅助噬菌体(Helper Phage)感染后，会利用大肠杆菌的酶系统、原料和能量进行扩增,最终包含噬菌粒的噬菌体从大肠杆菌释放出来，该子代噬菌体的p3衣壳蛋白会展示抗体片段。Part 3 ——在噬菌体扩增过程中 遇到的难题和对应的解决方案 | 噬菌体的建库过程实际上是抗体片段基因多样性的传递过程： 从血样中抗体基因的多样性传递到噬菌粒的过程，是噬菌粒文库构建的内容； 从噬菌粒的多样性传递到含有噬菌粒的大肠杆菌的多样性，是噬菌粒质粒电转大肠杆菌的内容； 从含有噬菌粒的大肠杆菌的多样性传递到噬菌体的多样性则是噬菌体扩增的内容，也是本文实验经验关注的问题。噬菌体的扩增最终目的是将噬菌粒中单一拷贝的抗体片段基因通过噬菌体的扩增过程变成10-100个拷贝，且这些拷贝基因能够在噬菌体表面的p3蛋白上展示出抗体蛋白片段。在噬菌体的扩增过程要使得文库的多样性得以保持和传递，需根据文库的初始大小确定在扩增过程中含有噬菌粒的大肠杆菌的数目和体积，对应加入的辅助噬菌体的多少进行有效感染，以及扩增后加入多少含有噬菌粒的噬菌体进行淘选等需要一一计算评估的问题，不同文库大小的噬菌体库在扩增过程中需要的扩增体积是不一样的。一份固化的实验方案很有可能会导致文库多样性的丢失。 要弄清楚这些问题，首先要具备以下几点基础的前置知识：（??以下内容全部划重点！！！）1. TG1大肠杆菌在OD600的读数：1OD代表的菌浓度为1e9个/ml。2. 噬菌体/辅助噬菌体在TG1处于对数生长期时有比较好的感染效率，TG1处于对数生长期的OD600值在0.4-0.8。3. TG1在对数生长期的生长速度是20分钟一代，需要密切关注TG1的生长，及时取菌进行实验。4. 辅助噬菌体和TG1的比值MOI在20：1时能够保证所有TG1被感染上。5. 含有噬菌粒的噬菌体能够感染正常的TG1大肠杆菌，并将噬菌粒留在TG1中并随着TG1的扩增进行扩增，在无辅助噬菌体的情况下无噬菌体的扩增。6. 噬菌粒质粒含有青霉素抗性，辅助噬菌体含有卡那霉素抗性。7. 含有噬菌粒的噬菌体可以通过感染正常的TG1，梯度稀释涂青霉素抗性的琼脂板进行滴度测定。8. 3+3模式下含有噬菌粒的噬菌体展示出p3融合抗体片段蛋白的效率比较低，只有5%-10%,在进行淘选时，加入的噬菌体的滴度应是文库多样性的100倍以上。 还有一个比较关键的问题是噬菌体作为一种病毒，很容易以气溶胶的形式扩散到空气中污染实验室的环境，从而感染F因子阳性的大肠杆菌。 （心疼一下生物汪，冒着生命危险搬砖啊！） 在噬菌体展示的相关实验需要在相对封闭的实验室进行以避免噬菌体对于大肠杆菌的污染，特别是在培养正常的TG1大肠杆菌时。噬菌体的灭活方式通常是紫外照射半小时以上。（合格的生物汪，是个莫得感情的病毒杀手！） Part 4 ——噬菌体扩增和定量 具体实验过程的分享 | 以下是以一个文库大小为1E9的噬菌体文库进行扩增的实验方案。*如果文库过大或者过小，可依比例增减扩增体积。 Day 1（搬砖秃头的第一天）1. 取含有噬菌粒的TG1菌种1ml (菌数目为1E10)加入含有100ml 2xYT-GA培养基250ml摇瓶中，使用奥豪斯摇床37度220rpm摇菌摇床至OD600为约0.5。2. 取OD600为约0.5的菌液20ml (菌数目为1E10),按照MOI为20：1加入pfu为2E11的辅助噬菌体M13 K07，37度220rpm振荡半小时进行感染。3. 取感染后菌液到50ml离心管使用奥豪斯离心机5816R 3200g离心10分钟，去除培养基，以除去培养基中的葡萄糖对噬菌粒中p3蛋白融合了抗体片段蛋白表达的抑制。4. 用2xYT-AK培养基重悬菌团，将培养基加至400ml，用1L摇瓶在30度220rpm过夜摇菌。 Day 2（搬砖秃头的第二天）5. 将400ml菌液均分至大的离心瓶中，使用奥豪斯离心机5816R 10000g离心10分钟，取上清，10000g再次离心10分钟，去除残留的菌体碎片。6. 取90ml PEG溶液加入400ml上清液中，在4℃孵育1小时并伴随着柔和的振荡，然后使用带低温控制功能的奥豪斯离心机5816R 4℃10000g离心1小时。7. 去上清，用10mlPBS重悬噬菌体后，加入2.5ml PEG溶液再次沉淀.8. 冰上孵育20分钟，然后使用带低温控制功能的奥豪斯离心机5816R 4℃ 10000g离心半小时。9. 去上清液，用吸水纸吸干残留的PEG溶液，加入1-2ml的PBS重悬噬菌体，进行滴度测定。滴度测定：1. 在分隔的实验室，取正常的TG1大肠杆菌加入2xYT的培养基中，使用奥豪斯摇床摇菌至OD600值为0.5，如未能及时使用，可放入4℃ 2小时以备用。2. 将步骤9中扩增噬菌体原液用PBS稀释1E5-1E7倍。3. 取10ul噬菌体稀释液加入490ul OD600为0.5的TG1大肠杆菌中，使用奥豪斯摇床 37℃ 220rpm振荡半小时进行感染。4. 取感染液50ul均匀涂抹在含有2xYT-GA的琼脂板中，晾干后放入37℃培养箱过夜。并将未感染TG1大肠杆菌涂抹琼脂板作为阴性对照。 Day 3（搬砖秃头的第三天）5. 数2xYT-GA的琼脂板中的克隆数，根据稀释倍数计算扩增噬菌体的滴度 噬菌体滴度(pfu/ml)=（克隆数*10*50/10ul）*稀释倍数6. 取1E11-1E12的噬菌体用于淘选。试剂配方：2xYT培养基：Yeast Extract 10.0 g/L+Tryptone 16.0 g/L+NaCl 5.0 g/L2xYT-GA培养基: 2xYT培养基+100 μg/ml 青霉素+ 1% （W/V）葡萄糖2xYT-AK培养基：2xYT培养基+100 μg/ml 青霉素+50 μg/ml卡那霉素PEG溶液：20% (w/v) PEG 6000, 2.5 M NaCl Part 5仪器推荐：（做科研民工的每一天都不孤单，因为有小奥陪伴）噬菌体作为一种病毒，很容易以气溶胶的形式扩散到空气中污染实验室的环境，需要封闭的实验室，实验室所有的仪器需单独使用。奥豪斯恒温轻负载培养摇床转速范围为100-12—rpm,体积集约，功能强大，可为您的样品提供优异的摇荡效果：此外，噬菌体展示实验的过程中会有不同体积、不同转速和需要4℃条件的离心步骤，如果以多 台离心机满足实验的需求会造成实验设备资产的空置，造成极大的浪费！！！奥豪斯5816R多功能离心机和可选转子为噬菌体相关实验提供便利，一台离心机满足所有实验需求！接下来，小奥带你乘坐“帮你省科研经费”这辆车教你正确薅奥豪斯的羊毛 德国原装进口功能强大、离心效果优异的奥豪斯Frontier™ 离心机家族 推出“买一赠一”促销活动促销型号如下微量高速离心机FC5515R（冷冻型号）微量高速离心机FC5515（非冷冻型号）全新紧凑型微量离心机FC5513现在上车，还来得及哦！详情请联系奥豪斯哦！ 想了解更多关于奥豪斯Starter™ 系列产品信息？请进入「阅读全文」留下信息，我们的专业工程师将火速赶来，为您服务！ ▼

一场肉毒杆菌风波，卷入数家企业。肉毒杆菌为何物?国际以及国内是否有相关标准? 　　中国农业大学食品科学与营养工程学院副教授朱毅在接受记者采访时表示，不管国内国外，奶粉生产中，肉毒杆菌都不作为必检项目，但是不少企业都有一定的相关自检。&ldquo 根据乳品和奶粉的相关工艺和食用人群，相对来讲本次涉及的乳品应该是安全的，但是给6~12月份婴幼儿食用的奶粉需要警惕。&rdquo 　　肉毒杆菌尚无相关标准 　　资料显示，肉毒杆菌是一种生长在常温、低酸和缺氧环境中的革兰氏阳性细菌。食入和吸收这种毒素后，神经系统将遭到破坏，出现恶心、呕吐、头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。 　　&ldquo 由于肉毒杆菌并不是全部有毒，并且企业都有一定的内控标准，而含乳饮料、奶粉等生产又有一定的高温生产工艺，基本上肉毒杆菌芽孢都给消灭掉了。&rdquo 朱毅表示，在临床上，这种感染非常罕见，因此也就没有制定相关的标准。 　　乳业专家王丁棉也表示，肉毒梭状杆菌其致病性在于它所产生的肉毒毒素，肉毒毒素系蛋白质类毒素，对热敏感，不耐高温不耐高酸。酸度pH4.5以下或者温度在45℃就可以抑制它，100℃的高温几分钟可以杀死。 　　&ldquo 但对奶粉还需要一定的警惕，虽然基本毒素不存在，就怕如果奶粉中有芽孢，因为芽孢耐热能力比较强，在加工工艺中没有消灭的话可能有一定的风险。食用2段奶粉的婴幼儿都是6~12月的婴幼儿，婴幼儿的肠道不是很强，如果繁殖分泌毒素，就会有肉毒毒素中毒。&rdquo 朱毅说。 　　监管须打通全产业链 　　有人士指出，洋奶粉问题频出，暴露出我国相关国家标准缺失的问题，有关部门应尽快完善相关标准，才能提升监管力度。 　　但一名国家食品安全标准制定专家曾对《每日经济新闻》记者表示，在现有多项标准已经出台的情况下，新标准的制定须经过严格论证，而且需要一定的成本，增加的成本会转嫁到消费者身上。目前可行的办法并不是倒逼更多的标准出台，而是在贯彻好既有标准的前提下，打通全产业链的有力监管，这一点在乳制品产业链中显得尤为重要。 　　食药监总局相关负责人对记者表示，针对经营企业的标准规范仍在制定过程中，为实现全程追溯，卫计委正在就规范的制定紧密协商，未来将出台的新规将就批批检验以及流通环节检验等多方面提出要求。 　　上述国家食品安全标准制定专家认为，乳制品产业链在饲料、加工、存储、包装、运输等环节都可能造成质量问题。从原料采购，到生产企业生产，再到经营企业销售等，监管部门的监管须建立起全程质量追溯体系，拓展到产业链的每一个环节中。

新西兰恒天然乳品含肉毒杆菌事件备受关注。9日，国家食品安全风险评估中心开展公众开放日活动，相关专家称，婴儿奶粉中含有肉毒杆菌的情况十分罕见，对此的监测不会纳入标准体系中。 　　国家食品安全风险评估中心微生物实验部研究院郭云昌博士说，肉毒杆菌产生肉毒毒素需要苛刻的条件，其中一条是严格厌氧。而这一条，在非真空包装的奶粉中难以实现。尽管肉毒杆菌在环境中广泛存在，但奶粉中的污染比较罕见。从以往经验来看，我国肉毒杆菌污染多为储藏不当的变质肉类食品或家庭自制发酵豆类、谷类制品。 　　控制肉毒杆菌污染的关键是工艺设计和过程控制而非标准管理，世界各国和地区并无食品中肉毒杆菌及其毒素的限量规定，一般只对密闭发酵、罐头类食品规定符合商业无菌的要求。尽管本次奶粉污染事件是偶发，消费者不必恐慌，但政府监管部门应该高度重视，要综合国内召回产品检测情况和各贸易国的反馈态度以及CAC动向，确定我国今后的管理方式。 　　国家食品安全风险评估中心技术顾问刘秀梅研究员说，以往也有婴儿肉毒素中毒事件发生，但其与成人中毒有所不同，不是吃了含有毒素的奶粉，而是因为婴儿免疫力低下，身体发育未完全。如果含有芽孢的食物进入婴儿的胃肠道，会定植于体内，生长繁殖，进而产生毒素。但此类事件十分罕见，目前查到的是2001年英国曾发生过这类案例。 　　刘秀梅说，其实婴儿奶粉中更值得关注的是阪崎肠杆菌。三次国际专家评估会议，三次都在关注阪崎肠杆菌，而没有关注肉毒杆菌。2004年开始获得国际关注，2008年，国内关于婴儿配方奶粉的标准也对阪崎肠杆菌进行了相关规定，相关部门对此也是必检项目。但由于含肉毒杆菌的情况非常罕见，因此，对于奶粉的管理标准中，加入监测肉毒杆菌一项的可能性几乎为零。 　　怎么预防婴儿奶粉喂养安全呢? 　　世界卫生组织曾为此专门设置指南，如何合理喂养婴儿配方奶粉。除了厂家保障产品安全外，孩子的母亲往往承担着重要的工作。刘秀梅认为，首先要购买正规厂家生产的可靠产品。2004年阜阳奶粉大头娃娃事件中，涉事产品很多都是小作坊、黑窝点生产的三无产品。其次，喂养方式也很重要。大头娃娃事件中，也暴露了留守儿童被隔代喂养中存在的问题。老人为省钱，减量喂养奶粉。 　　现在流入中国的被污染的奶粉原料大约有20吨，大部分原料还没有被加工为产品，已经加工为产品的，根据要求已经被召回。流入中国的产品中，到底有没有肉毒杆菌?刘秀梅认为，产品中如果含有肉毒毒素的话，由于其潜伏期很短，一旦进入人体将会迅速发生中毒事件，而目前尚未这种事件。她建议，不要过分担心肉毒杆菌奶粉对孩子健康的危害，因为发生的可能性还是非常低的。 　　在9日上午国家卫生计生委召开的新闻发布会上，国家食品安全风险评估中心微生物实验部的主任李凤琴研究员也确认这一观点，她表示，到目前为止还没有接到报告因为吃含有肉毒杆菌的奶粉而有人出现不适的病例。 　　国家卫生计生委新闻发言人、宣传司副司长邓海华说：“国家卫生计生委的职能是标准制定和风险评估，我们接到国际食品安全当局网络通报新西兰污染乳制品问题的邮件之后，及时把有关信息向质检总局、食品药品监管总局进行了通报，配合相关监管部门做好相应的处置工作。我们还组织国家食品安全风险评估中心的相关专家，通过各种有效途径，包括博客、微博、网站、接受媒体采访等等，对于肉毒杆菌的科普知识进行了大量宣传。”

p & nbsp & nbsp 12月11日，山西省食药监局公布了10大类170批次食品监督抽检结果，检出不合格样品9批次，涉及饮料8批次、方便食品1批次。 /p p 　　通报显示，8批次饮料全部为饮用水，来自临猗县峨嵋润泽泉纯净水厂、稷山县黄花源饮用水有限公司、稷山县秦井天然饮品有限公司、晋中津美饮业有限公司、运城市方大银蝶泉饮品有限公司、夏县怡鑫源饮品有限公司、临县观音圣泉饮品有限公司、夏县禹洋水业有限公司8家生产企业。其中有6批次检出铜绿假单胞菌，2批次检出大肠菌群和铜绿假单胞菌。 /p p 　　铜绿假单胞菌是常见的细菌之一，常存在于潮湿的环境，如土壤、水、空气中，该菌是一种条件致病菌，在机体抵抗力降低等特定条件下可致病。饮用水中铜绿假单胞菌不合格原因可能是：一是原料水体受到感染；二是生产过程中卫生控制不严格，杀菌不彻底，从业人员未经消毒的手直接与饮用水或容器内壁接触；三是包装材料清洗消毒有缺陷。 br/ /p p 　　大肠菌群是国内外通用的食品污染常用指示菌之一。食品中检出大肠菌群，提示被致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌）污染的可能性较大。大肠菌群超标的原因可能是由于产品的加工原料、包材受污染，或生产过程中产品受人员、生产设备、环境的污染，或者有灭菌工艺的产品灭菌不彻底等原因导致。 br/ /p p 　　另外，大同市华林有限责任公司振华南街超市销售的标称桂林周氏顺发食品有限公司生产的手工纯香黑芝麻糊检出霉菌超标。 br/ /p p 　　霉菌在自然界很常见，霉菌可使食品腐败变质，破坏食品的色、香、味，降低食品的食用价值。霉菌超标可能是加工用原料受霉菌污染，或者生产过程中卫生条件控制不严，样品储运条件控制不当导致。 br/ /p p 　　针对抽检中发现的不合格产品，山西省食药监局已按照《中华人民共和国 strong class=" keylink" 食品安全法 /strong 》的规定，责成相关市局及时进行核查处置，采取封存、下架、召回不合格产品等措施防控食品安全风险，督促企业查找原因，消除隐患。消费者如果在市场上发现被通报的不合格食品，可拨打12331投诉举报。 br/ /p p br/ br/ /p