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果糖二磷酸二钙盐标准

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  • 【原创大赛】糖标准品的困惑-从购买到假乳果糖谈起

    【原创大赛】糖标准品的困惑-从购买到假乳果糖谈起

    糖标准品的困惑-从购买到假乳果糖谈起最近为了测定一批甘露醇和乳果糖的样品（采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法），原来乳果糖对照品几乎用完了，需要重新购，于是我在学校的虫洞采购平台上订购，从麦克林公司购买了乳果糖的对照品，一般而言，我不可能去验证糖对照品的准确性。将对照品给学生后，就把以前的色谱条件交给她们，让她们去做。做了几次后，学生反映，跟原来的结果不一样，保留时间对不上，我自己也没仔细查看，就跟学生说，这样品做了数百个了，条件和色谱柱都是固定不变了，不会有问题。不行，继续试，不行，再继续做。在几次失败后，学生无意用了原来剩下的标样试了一下，发现跟新买来的标样保留不一样，跑过来跟我说，这时我才有点醒悟。在仔细观察了色谱图，并查阅色谱条件后，我明白学生为什么做不出来的原因。买来的乳果糖标样不对，因为原来的乳果糖标样不止买过一次，十年来都没出过问题。而且从色谱图的保留时间看，买来的乳果糖标样出峰时间在单糖的位置，肯定是糖标样有问题。本来我想狠狠批评学生，但也怪我，我之前没有仔细查看色谱图，我负有不可推卸的责任！学生第一次做，缺乏经验，但对于单糖双糖的保留时间位置，应该有感性的认识，我只能教育他们，并告诉他们判断的依据。客户在催，我只能再从网上订购，这次另外换了一家公司，从迈瑞尔公司订购了乳果糖。试剂到后，让学生先测试一下，是否是乳果糖。实验的结果跟从麦克林买来一样，不对，还是单糖不是双糖（乳果糖是双糖）。[img=,690,387]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908192347296833_4583_1617661_3.jpg!w690x387.jpg[/img]甘露醇和购买的假乳果糖的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图[img=,690,387]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908192348130616_5401_1617661_3.jpg!w690x387.jpg[/img]甘露醇和原来的乳果糖（原来试剂时间放长了，有变质，图不是很好，但能说明问题，）二次从二个不同的厂家采购相同的乳果糖，结果表明二者都不是乳果糖，都是单糖，可能是半乳糖（没核对），这个漏洞也太大了吧，说明麦克林和迈瑞尔对进货的乳果糖都没有检验，或者检验有缺失，万一出错，这是多么可怕的事，会对实验造成严重的后果，如果一个第一次使用这种糖的人，如果缺乏判断经验，不可想象。我不敢再买了，那个是真的？那些小的试剂公司更不敢碰。用户一边在催实验结果，另一边试剂还没着落，买进口保险吗？或许如此，但价格高很多了。时间上也不见得来得及。为了保险起见，我再次联系了第三家试剂公司，阿拉丁，通过电话沟通，让他们确认试剂的可靠性，如果有检验的话，单糖和双糖是极容易区分的。在他们保证后，第三次购买了乳果糖，实验结果表明，这次购买的是正确的，跟留下来的乳果糖是同一种糖，实验终于可以进行了。通过这次事件，我预感到，试剂市场可能存在一定的乱象，一旦出现滥竽充数，如果不加检验，一些小公司可能根本没有能力判断。错误试剂会对实验结果造成严重的后果。但是让用户去检验试剂的可靠性，虽然我能做到，但是测试成本会远远高于购买的成本。而一般用户，根本没有能力。这也许是低价造成的恶果！大家是否有相同的经历！！！

  • 果糖中二氨基苯乙酮的测定

    测果糖中的二氨基苯乙酮,标准曲线好做吗?为什么我的老是不出峰,且基线不是很稳.紫外220nm,1.0ml/min,柱子C1840度.进样量是300ul很大的,各位有谁做过,给支个招吧谢谢

  • 【求助】果糖标准物质期间核查

    前几天我的实验室进行复查评审，提出一项不符合项，果糖标准物质没有进行期间核查。我是用果糖做标准曲线，来测定蜂蜜中的果糖含量。祈求各位大侠怎样做果糖标准物质的期间核查?

  • 【求助】磷酸二氢锂 标准

    各位大虾，大家好！本人最近开始分析磷酸二氢锂这种材料，但是这种材料的纯度、杂质元素含量都不知道怎么测，我们买的是四川天齐锂业股份有限公司的磷酸二氢锂，但是他们的检测标准和手段都保密，有一次产品里面都有明显的沙子，搞的我们合成的产品成品率非常低。最近看到轻金属委员会有一个四川天齐锂业股份有限公司制定的磷酸二氢锂标准，看看有大虾能找到该标准么，非常感谢，在珠三角的虫子当面感谢。[size=4][color=#DC143C]轻金属分标委会审定、预审和讨论的标准项目磷酸二氢锂 四川天齐锂业股份有限公司等 制定[/color][/size]

  • 长期摄入果糖好吗？

    很多饮品中都在使用果糖，那么果糖到底有危害吗？ 果糖是一种单糖，在自然界中主要存在于水果和蜂蜜等食品中，在植物中也有存在，尤以菊科植物为多。在各种天然糖中，果糖的甜度最高，其甜度大约是蔗糖的1.8倍。在蜂蜜中果糖约含49%。在体内，果糖可以转化为葡萄糖或合成糖元，但葡萄糖和糖元不能逆向转化为果糖，机体的果糖主要由肠道的二糖酶将蔗糖分解为葡萄糖和果糖而来。由于果糖可绕过糖酵解中的限速酶，故肝脏中的分解速度快于葡萄糖，且不受胰岛素的影响。正是由于果糖的这些特点，人们往往放松了对果糖的戒备。特别是一些糖尿病患者利用蜂蜜作为甜味剂，认为蜂蜜中的果糖不会造成血糖升高，以此作为养生的佳品。实际上，果糖吃多了危害性更大。在我们的血液中果糖的含量非常少，主要的糖是葡萄糖，我们平时所说的血糖也是指血液中葡萄糖含量。那么我们每天摄入的果糖哪儿去了?当果糖进入体内后，在肠道与肠粘膜上皮细胞载体蛋白结合后，能顺利地被吸收转化，果糖转化的主要场所是肝脏，可分别转化成糖原、葡萄糖和脂肪。所以，血液中果糖的含量不多。从这一点来看，果糖摄入过多后，同样会导致血糖的变化，并不是糖尿病患者安全的甜味剂。果糖不仅可以转化成葡萄糖，还可转化成脂肪，并引起脂肪合成增多。与葡萄糖相比，果糖转化合成脂肪更容易。在人体内有一种物质叫做磷酸果糖激酶，又被称为糖酵解的限制酶，对糖的酵解有调节作用，而果糖则不受磷酸果糖激酶的控制，因而很容易转化为合成脂肪需要的甘油部分。当果糖摄入量少时，果糖能转变为葡萄糖，使肝脏中糖原的储存量增加。但是，当果糖摄入量大时，果糖就成为合成脂肪不受限制的原料。在导致人体肥胖的因素中，可以说果糖的危害性甚至超过了葡萄糖和蔗糖。

  • 【第三届原创作品】紫外分光光度法测定灭菌乳中乳果糖的含量

    【第三届原创作品】紫外分光光度法测定灭菌乳中乳果糖的含量

    摘要:对灭菌乳中乳果糖含量进行研究,初步探索了用紫外分光光度法对其进行测定的方法.牛奶在加热处理过程中, 部分乳糖异构为乳果糖, 经β-D- 半乳糖苷酶水解后生成半乳糖和果糖,通过酶转化为NADPH,确定其最大吸收波长为340nm,可在此波长下测出它的吸光度并计算出其质量浓度.结果表明:该方法灵敏度高,准确性好,适用于灭菌乳中乳果糖含量的测定。关键词：紫外分光光度 灭菌乳 乳果糖国务院办公厅《关于加强液态奶生产经营管理的通知》要求，完善液态奶标准并严格按标准组织生产，凡在灭菌乳 、酸牛乳等产品生产加工过程中使用复原乳的，不论数量多少 ，生产企业必须在其产品包装上醒目标注“复原乳”。农业部近发布的《巴氏杀菌乳和ＵＨＴ灭菌乳中复原乳的鉴定》标准，为巴氏杀菌乳和ＵＨＴ灭菌乳中复原灭菌乳中复原乳的乳成分的检测提供了科学依据 。 本实验采用紫外分光光度法对灭菌乳中乳果糖含量进行测定，并优化了试验方法，采用光谱扫描功能对最大吸收波长进行优化，并采用时间扫描功能监控酶的反应速率。确定在紫外光区340nm处测定乳果糖的方法，该方法灵敏度高，准确性好，对乳品中复原乳的监控起到积极作用。 1仪器和试剂1.1 仪器和设备1.1.1 UV-2550型紫外可见分光光度计（岛津有限公司）1.1.2 水浴或干燥箱: 温度能维持在40℃±2℃。1.2 试剂除非另有说明, 在分析中仅用分析纯试剂和GB/T 6682- 1992中一级水。碳酸氢钠(NaHCO3)；过氧化氢(H2O2) , 质量分数为30%；辛醇(C8H18O)；灭菌水；300g.L-1硫酸锌溶液；150 g.L-1亚铁氰化钾溶液；0.33mol.L-1氢氧化钠溶液；1mol.L-1氢氧化钠溶液；缓冲液A: pH= 7.5称4.8 g 磷酸氢二钠, 0.86 g 磷酸二氢钠和0.1 g 硫酸镁溶解于80mL水中, 用1mol.L-1 氢氧化钠溶液调整pH 到7.5±0.1 ( 20℃) , 稀释到100mL , 摇匀；缓冲液B: pH= 7.6称取14.00g三乙醇胺和0.25g硫酸镁溶解于80mL水中。用1 mol.L-1氢氧化钠溶液调整pH到7.6±0.1( 20

  • 【原创】紫外分光光度法测定灭菌乳中乳果糖的含量

    摘要:对灭菌乳中乳果糖含量进行研究,初步探索了用紫外分光光度法对其进行测定的方法.牛奶在加热处理过程中, 部分乳糖异构为乳果糖, 经β-D- 半乳糖苷酶水解后生成半乳糖和果糖,通过酶转化为NADPH,确定其最大吸收波长为340nm,可在此波长下测出它的吸光度并计算出其质量浓度.结果表明:该方法灵敏度高,准确性好,适用于灭菌乳中乳果糖含量的测定。关键词：紫外分光光度 灭菌乳 乳果糖 国务院办公厅《关于加强液态奶生产经营管理的通知》要求，完善液态奶标准并严格按标准组织生产 ，凡在灭菌乳 、酸牛乳等产品生产加工过程中使用复原乳的，不论数量多少 ，生产企业必须在其产品包装上醒目标注“复原乳”。农业部近发布的《巴氏杀菌乳和ＵＨＴ灭菌乳中复原乳的鉴 定》标准，为巴氏杀菌乳和ＵＨＴ灭菌乳中复原灭菌乳中复原乳的乳成分的检测提供了科学依据 。 本实验采用紫外分光光度法对灭菌乳中乳果糖含量进行测定，并优化了试验方法，采用光谱扫描功能对最大吸收波长进行优化，并采用时间扫描功能监控酶的反应速率。确定在紫外光区340nm处测定乳果糖的方法，该方法灵敏度高，准确性好，对乳品中复原乳的监控起到积极作用。 1仪器和试剂1.1仪器和设备1.1.1 UV-2550型紫外可见分光光度计（岛津有限公司）1.1.2 水浴或干燥箱: 温度能维持在40℃±2℃。1.2试剂除非另有说明, 在分析中仅用分析纯试剂和GB/T 6682- 1992中一级水。碳酸氢钠(NaHCO3)；过氧化氢(H2O2) , 质量分数为30%；辛醇(C8H18O)；灭菌水；300g.L-1硫酸锌溶液；150 g.L-1亚铁氰化钾溶液；0.33mol.L-1氢氧化钠溶液；1mol.L-1氢氧化钠溶液；缓冲液A: pH= 7.5称4.8 g 磷酸氢二钠, 0.86 g 磷酸二氢钠和0.1 g 硫酸镁溶解于80mL水中, 用1mol.L-1 氢氧化钠溶液调整pH 到7.5±0.1 ( 20℃) , 稀释到100mL , 摇匀；缓冲液B: pH= 7.6称取14.00g三乙醇胺和0.25g硫酸镁溶解于80mL水中。用1 mol.L-1氢氧化钠溶液调整pH到7.6±0.1( 20℃),稀释到100mL ,摇匀；缓冲液C将40.0mL缓冲液B 用水稀释到100mL ,摇匀；β-D- 半乳糖苷酶悬浮液用3.2 mol.L-1 硫酸铵溶液将活性为30 IU.mg-1 的β-D- 半乳糖苷酶制备成浓度为5mg.mL-1的悬浮液；葡萄糖氧化酶悬浮液；用灭菌水将活性为200 IU• mg-1 的葡萄糖氧化酶制备成浓度为20 mg.mL-1悬浮溶液；过氧化氢酶悬浮液：用灭菌水将活性为65000 IU.mg-1的过氧化氢酶制备成浓度为20 mg.mL-1的悬浮液；己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶悬浮液(混酶)：在1mL浓度为3.2 mol. L-1硫酸铵溶液中加入2 mg 活性为140 IU.mg-1 的己糖激酶和1 mg 活性为140 IU.mg-1的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,轻摇均匀,成悬浮液；磷酸葡萄糖异构酶悬浮液用3.2 mol. L-1硫酸铵溶液将活性为350 IU.mg-1的磷酸葡萄糖异构酶制备成浓度为2 mg.mL-1 的悬浮液； ATP 溶液将50 mg 5'-ATP-Na2 和50 mg 碳酸氢钠溶于1mL水中；NADP 溶液：将10mgβ-NADP-Na2溶于1mL水中。2 试验方法2.1 试液制备量取50.0mL样品到100mL容量瓶中, 用水稀释到刻度后混匀。2.2 纯化 吸取10.0mL试液于50mL锥形瓶中, 依次加入1.75mL亚铁氰化钾溶液、1.75mL硫酸锌溶液和6.5mL缓冲液A。每加入一种溶液后, 充分振荡均匀。全部溶液加完后, 静置10 min，过滤, 弃去最初的1mL～2mL滤液，收集滤液。2.3 水解乳糖和乳果糖吸取5.00mL滤液于10mL容量瓶中, 加入50μL的β-D-半乳糖苷酶悬浮液, 混匀后加盖。在40℃水浴或干燥箱培养至少10 h。2.4 葡萄糖氧化依次加入2.0mL 缓冲液C、100μL葡萄糖氧化酶悬浮液、1 滴辛醇、0.5mL 浓度为0.33mol.L -1氢氧化钠溶液、50 μL 过氧化氢和0.1 mL 过氧化氢酶悬浮液, 每加入一种试剂均要摇匀。全部溶液加完后, 在40℃水浴或干燥箱中培养3 h。冷却后稀释至10mL , 过滤, 弃去最初的1mL～2mL滤液, 收集滤液。2.5 空白依照2.1到2.4步骤处理空白溶液, 但不加β-D-半乳糖苷酶悬浮液。2.6 测定 在石英比色皿中依次加入1.00mL缓冲液B,0.100mLATP溶液,0.100mLNADP溶液,1mL滤液和1mL水, 每加入一种试剂均要摇匀.混合均匀后，静置3min.加入20μL混酶.混合均匀后上机,并同时做试剂空白. 反应过程大约10min,每隔1min记录一次吸光度的变化,等两次吸光度不再变化,反应停止。此过程中吸光度的变化见表1表1 加入混酶后反应吸光度的变化情况时间/min吸光度/Abs时间/min吸光度/Abs10.11370.20820.16880.21530.17490.22040.182100.23050.195110.23260.202120.232等反应到达终点后,记录下吸光度。加入20μL磷酸葡萄糖异构酶悬浮液,混合均匀后上机。反应过程大约15min,每隔1min记录一次吸光度的变化,等两次吸光度不再变化,反应停止.此过程中吸光度的变化见表2.表2 加入磷酸葡萄糖异构酶后反应吸光度的变化情况时间/min吸光度/Abs时间/min吸光度/Abs10.232720.38580.75830.46890.77640.557100.78250.649110.78660.732120.7862.7结果计算2.7.1吸光值差样品吸光值差△As的计算:△As = As2-As1空白吸光值差△Ab的计算:△Ab= Ab2- Ab1样品净吸光值差△AL的计算:△AL=△A s-△A b 2.7.2乳果糖含量乳果糖的含量以样品的质量浓度c 计, 数值以毫克每升(mg/L) 表示, 按下列公式计算: 式中:△AL-样品净吸光值差；ML-乳果糖的摩尔质量( 342.3 g/mol)；ε-NADPH 在340 nm 处的摩尔吸光值( 6.3 L.mmol-1.cm-1) ；V1-比色皿液体总体积, V1=3.240mL ；V2-比色皿中滤液的体积, V2=1.00mL；d -比色皿光通路长度, d = 1.00cm；V-测试样体积( L) 。计算结果精确到小数点后一位。3 结果与讨论3.1最大吸收波长的选择在光谱模式下，测定标准系列的光谱图，仪器条件见表3。表3 仪器条件波长扫描范围/nm420~650光谱带宽/nm0.5采样间隔0.5扫描速度中速在此仪器条件下，扫描出标准系列的吸收光谱图，见图1。 图1 标准系列的吸收光谱图由以上标准系列的吸收光谱图可知，乳果糖的最大吸收波长为540nm，与国标方法的一致。 在样品测定过程中，同样做光谱扫描，结果见图2。图中实线为样品吸收光谱图，虚线为标准溶液吸收光谱图。从图中可以看出，样品和标准溶液的峰形基本吻合，最大吸收波长一致，基本不存在干扰对测定结果的影响。 图2 乳果糖样品吸收光谱图3.2精密度试验在重复性条件下获得六次独立测定结果，其标准偏差S和相对标准偏差见表4。表4 精密度试验结果 n=6样品编号测定值范围mg/L平均值mg/L标准偏差S相对标准偏差RSD1430.9~438.0434.72.4770.0062525.8~534.4529.82.9580.0063722.3~746.8735.09.2940.0134808.5~823.4816.05.3480.0073.3回收率试验本试验采用浓度为984 mg/L的乳果糖标准溶液进行加标回收。分别添加10.00、15.00、20.00、25.00mL的标准溶液进行试验，其结果见表5。表5样品测定及加标回收试验样品编号本底值mg/L加标量mg/L加标测定值mg/L回收率%1217.3598.4311.295.382264.90147.6392.386.313367.50196.8541.888.574408.00246.0634.592.074结论 试验表明：本方法准确性高，重现性好，相对标准偏差在0.006~0.013之间，加标回收率在86.31%~95.38%之间，适用于灭菌乳中乳果糖的测定。参考文献：[1] 中华人民共和国农业行业标准 NY/T939-2005.巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定[S][2] 黄萌萌，王加启等，牛奶乳果糖的研究进展[J]，中国乳品工业，2007，35（6）：54~57.[3] 黄萌萌，王加启等，UHT灭菌乳贮存期间乳果糖的变化规律[J]，中国乳品工业，2007，35（12）：10~12.[4] 黄萌萌，王加启等，牛乳中乳果糖含量测定的快速酶法[J]，中国农业大学学报，2007 ,12 (5) ：57~60[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=146088]紫外分光光度法测定灭菌乳中乳果糖的含量[/url]

  • 【每日一贴】磷酸二钙

    【每日一贴】磷酸二钙

    【中文名称】磷酸氢钙；磷酸二钙【结构或分子式】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646874_1855403_3.jpg【相对分子量或原子量】172.09【密度】2.306【性状】 白色单斜晶体或粉末。无臭、无味。【溶解情况】 稍溶于水，溶于稀盐酸、硝酸、乙酸，不溶于乙醇。【用途】 用于医药、牙科，也用作塑料稳定剂、食品添加物和肥料、饲料添加剂补充禽畜饲料中的磷、钙元素等。二水物有肥效，无水物无肥效。【制备或来源】 由钙盐与磷酸氢二钠作用或由不含氟的磷酸与石灰乳作用而制得。【其他】 加热至75℃开始失去结晶水而生成无水磷酸氢钙。【生产单位】 略

  • GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定-示差折光检测器

    GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定-示差折光检测器

    GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 ——第一法 示差折光检测器　　本实验依据2017年6月23日起实施的《GB5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》的第一法——示差折光检测器法，对果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖标准品进行分析，并对标准曲线进行考察。　　使用资生堂CAPCELL PAK NH2 UG80 S5; 4.6mm i.d ×250mm色谱柱，通过对标准方法进行微调（将乙腈比例提高至85%，柱温提高至45°C），可实现五种单糖和二糖的良好分离（见图1）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171413_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171413_02_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171413_03_2222981_3.png　　进一步，依据标准，配制2mg/mL, 4mg/mL, 6mg/mL, 10mg/mL系列标准工作液，以峰面积为纵坐标，标准工作液浓度为横坐标，绘制标准曲线。由图2~6所示，果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和麦芽糖在2mg/mL~10mg/mL浓度范围内线性良好，R2均在0.999以上。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171413_04_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171413_05_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171413_06_2222981_3.png注： 图中色谱峰线条不平滑是由于图像在复制过程中解像度问题引起的。

  • 【求助】关于酶的稀释和保存

    由于要测一些酶的活性实验室订购了一下一些酶（试剂）：辣根过氧化物酶葡萄糖氧化酶磷酸葡萄糖变位酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（辅酶Ⅱ，NADP+）尿嘧啶核苷-5'-二磷酸葡萄糖（UDPG）D-果糖-6-磷酸二钠盐（6-磷酸果糖）D-葡萄糖-1-磷酸二钠盐（1-磷酸葡萄糖）现在要稀释这些酶（试剂）1.用蒸馏水稀释可以吗？如果不可以，用什么缓冲剂比较好？2.稀释后的溶液可以长时间保存吗？如不能，最长的时间是多久？小弟初入此道，望各位大侠细心解答，不胜感激！！

  • 【原创大赛】基于《NYT939-2016》标准乳果糖含量测定的操作细则

    [align=center][b][font=宋体][font=宋体]基于《[/font]NYT939-2016[font=宋体]》标准乳果糖含量测定的操作细则[/font][/font][/b][/align][font=宋体]1 [/font][font=宋体]检测原理[/font][font=宋体][font=宋体]牛奶仔加热处理过程中，部分乳糖结构异构为乳果糖，经[/font]β-D-半乳糖苷酶水解后生成半乳糖和果糖，通过酶法测定产生的果糖量计算牛乳中乳果糖含量。[/font][font=宋体]2 试剂与材料[/font][font=宋体]2.1 碳酸氢钠（NaHCO[/font][sub][font=宋体]3[/font][/sub][font=宋体]）[/font][font=宋体]2.2 过氧化氢（H[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]O[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体][font=宋体]），质量分数为[/font]30％[/font][font=宋体]2.3 辛醇（C[/font][sub][font=宋体]8[/font][/sub][font=宋体]H[/font][sub][font=宋体]18[/font][/sub][font=宋体]O）[/font][font=宋体]2.4 灭菌水[/font][font=宋体]2.5 300g/L硫酸锌溶液[/font][font=宋体] [font=宋体]称量[/font]534g ZnSO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体]7H[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]O定容到1L水中[/font][font=宋体]2.6 150g/L亚铁氰化钾溶液[/font][font=宋体] [font=宋体]称量[/font]17.2g K[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体][Fe(CN)[/font][sub][font=宋体]6[/font][/sub][font=宋体]]?3H[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]O定容到100ml水中[/font][font=宋体]2.7 0.33mol/L氢氧化钠溶液（NaOH）[/font][font=宋体] [font=宋体]称量[/font]3.3g氢氧化钠定容到250mL水中[/font][font=宋体]2.8 3.2mol/L硫酸铵溶液[/font][font=宋体] [font=宋体]称量[/font]42.28g (NH[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体])[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]?SO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体][font=宋体]定容到[/font]100ml水中[/font][font=宋体]2.9 1mol/L氢氧化钠溶液（NaOH）[/font][font=宋体]2.10 缓冲液A:pH=7.5[/font][font=宋体][font=宋体]称[/font]4.8g磷酸氢二钠（Na[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]HPO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体][font=宋体]）[/font],0.86g磷酸二氢钠(NaH[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]PO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体]H[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]O)和0.1g硫酸镁（MgSO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体]7H[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]O）溶解于80mL水中，用1mol/L氢氧化钠溶液调整pH到7.5±0.1（20℃），稀释到100ml，摇匀。[/font][font=宋体][font=宋体]（注：若是[/font]NaH[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]PO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体]2H[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]O则称量0.972g）[/font][font=宋体]2.11 缓冲液B: pH=7.6[/font][font=宋体] [font=宋体]称取[/font]14.00g三乙醇胺[N(CH[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]CH[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体]OH)3HCl]和0.25g硫酸镁（MgSO[/font][sub][font=宋体]4[/font][/sub][font=宋体]7H2O）溶解于80ml水中。用1mol/L氢氧化钠溶液调整pH到7.6±0.1（20℃），稀释到100ml，摇匀。[/font][font=宋体]2.12 缓冲液C[/font][font=宋体][font=宋体]将[/font]40.0ml缓冲液B用水稀释到100ml，摇匀。[/font][font=宋体]2.13 β-D-半乳糖苷酶悬浮液[/font][font=宋体][font=宋体]用[/font]3.2mol/L硫酸铵溶液将β-D-半乳糖苷酶制备成浓度为150U/100μl的悬浮液。[/font][font=宋体][font=宋体]若[/font]β-D-半乳糖苷酶酶活为8.9U/mg，则称量337㎎的β-D-半乳糖苷酶，用3.2mol/L硫酸铵溶液定容到2ml；若β-D-半乳糖苷酶酶活为10.3 U/mg，则称量292㎎的β-D-半乳糖苷酶，用3.2mol/L硫酸铵溶液定容到2ml。[/font][font=宋体]2.14 葡萄糖氧化酶悬浮液[/font][font=宋体] [font=宋体]用灭菌水将活性为[/font]200U/mg的葡萄糖氧化酶制备成浓度为20mg/ml（4000U/ml）悬浮溶液。[/font][font=宋体]2.15 过氧化氢酶悬浮液[/font][font=宋体][font=宋体]用灭菌水将活性为[/font]40000—60000U/mg（18mg protein/ml）的过氧化氢酶制备成15000U/ml的悬浮液。（要求15000U/样品管）[/font][font=宋体][font=宋体]可以取[/font]1.2ml活性为40000—60000U/mg（18mg protein/ml）的过氧化氢酶定容到50ml灭菌水，每个样品管加1ml；或者直接向每个样品管中加入21μl的该过氧化氢酶。[/font][font=宋体]2.16 己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶悬浮液[/font][font=宋体] [font=宋体]在[/font]0.4ml浓度为3.2mol/L硫酸铵溶液中加入1mg活性为187U/mg或2mg活性为100U/mg的己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，轻摇均匀，成悬浮液。[/font][font=宋体]2.17 磷酸葡萄糖异构酶悬浮液[/font][font=宋体]2.18 ATP溶液[/font][font=宋体] [font=宋体]将[/font]50mg 5′-ATP-Na[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体][font=宋体]和[/font]50mg碳酸氢钠溶于1ml水中。[/font][font=宋体]2.19 NADP溶液[/font][font=宋体] [font=宋体]将[/font]10mgβ-NADP-Na[/font][sub][font=宋体]2[/font][/sub][font=宋体][font=宋体]溶于[/font]1ml水中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]3 分析步骤[/font][font=宋体]3.1 试液制备[/font][font=宋体] [font=宋体]量取[/font]20.00ml样品和20.00ml水于锥形瓶中，混匀。[/font][font=宋体]3.2 纯化[/font][font=宋体][font=宋体]向锥形瓶中依次加入[/font]7.00ml亚铁氰化钾溶液、7.00ml硫酸锌溶液和26.0ml缓冲液A。每加入一种溶液后，充分振荡均匀。全部溶液加完后，静置10min，过滤，弃去最初的1ml-2ml滤液，收集滤液。[/font][font=宋体]3.3 水解乳糖和乳果糖[/font][font=宋体][font=宋体]慢速法：吸取[/font]5.00ml滤液于10ml容量瓶中，加入100μl的β-D-半乳糖苷酶悬浮液，混匀后加盖。在40℃水浴或干燥箱培养至少10h（10h—13h时间也不要太长）。[/font][font=宋体][font=宋体]快速法：吸取[/font]5.00ml滤液于10ml容量瓶中，加入200μl的β-D-半乳糖苷酶悬浮液，混匀后加盖。在50℃培养1h。[/font][font=宋体]3.4 葡萄糖氧化[/font][font=宋体][font=宋体]依次加入[/font]2.0ml缓冲液C、100μl葡萄糖氧化酶悬浮液、3滴辛醇、0.5ml浓度为0.33mol/L氢氧化钠溶液、50μl过氧化氢和1ml过氧化氢酶悬浮液（或直接加入21μl活性为40000—60000U/mg（18mg protein/ml）的过氧化氢酶原液），每加入一种试剂均要摇匀。全部溶液加完后，在40℃水浴或干燥箱中培养3.5h。冷却后稀释至10ml，过滤，弃去最初的1ml—2ml滤液，收集滤液。[/font][font=宋体]3.5 空白[/font][font=宋体][font=宋体]依照[/font]2.1到2.4步骤处理空白溶液，但不加β-D-半乳糖苷酶悬浮液。[/font][font=宋体]3.6 测定[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]测定步骤见下表。[/font][table][tr][td][align=center][font=宋体]步骤[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]空白[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]样品[/font][/align][/td][/tr][tr][td][font=宋体]比色皿中依次加入：[/font][font=宋体]缓冲液B[/font][font=宋体]ATP溶液[/font][font=宋体] NADP溶液[/font][font=宋体] 滤液[/font][font=宋体] 水[/font][/td][td][font=宋体] [/font][align=center][font=宋体]1.00ml[/font][/align][align=center][font=宋体]0.100ml[/font][/align][align=center][font=宋体]0.100ml[/font][/align][align=center][font=宋体]1.00ml[/font][/align][align=center][font=宋体]1.00ml[/font][/align][/td][td][font=宋体] [/font][align=center][font=宋体]1.00ml[/font][/align][align=center][font=宋体]0.100ml[/font][/align][align=center][font=宋体]0.100ml[/font][/align][align=center][font=宋体]1.00ml[/font][/align][align=center][font=宋体]1.00ml[/font][/align][/td][/tr][tr][td=3,1][font=宋体]混合均匀后，静置3min （此步骤可省略）[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]加入己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶悬浮液[/font][/td][td][align=center][font=宋体]20μl[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]20μl[/font][/align][/td][/tr][tr][td][font=宋体]混合均匀，等反应停止后（15min左右），记录吸光值[/font][/td][td][align=center][font=宋体]Ab1[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]As1[/font][/align][/td][/tr][tr][td][font=宋体]加入磷酸葡萄糖异构酶悬浮液[/font][/td][td][align=center][font=宋体]20μl[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]20μl[/font][/align][/td][/tr][tr][td][font=宋体]混合均匀，等反应停止后（25min左右），记录吸光值[/font][/td][td][align=center][font=宋体]Ab2[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]As2[/font][/align][/td][/tr][tr][td=3,1][font=宋体]注1：以上反应均在同一比色皿中完成。[/font][font=宋体]注2：如果1ml滤液吸光值增加超过1.3，则减少样品滤液取样体积，注意增加水以保证比色皿中反应液总体积不变（3.24ml）。[/font][/td][/tr][/table][font=宋体]4 结果计算[/font][font=宋体]4.1 吸光值差[/font][font=宋体][font=宋体]样品吸光值差[/font]△As的计算：[/font][font=宋体] △As=（As2 - As1）[/font][font=宋体][font=宋体]空白吸光值差[/font]△Ab的计算：[/font][font=宋体] △Ab=（Ab2 - Ab1）[/font][font=宋体] [font=宋体]样品净吸光值差[/font]△AL的计算：[/font][font=宋体] △AL=△As - △Ab[/font][font=宋体]4.2 乳果糖含量 [/font][font=宋体][font=宋体]乳果糖的含量以样品的质量浓度[/font]C计，数值以毫克每升（mg/L）表示，按下列公式计算：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]C=[/font][font=宋体]△AL[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]式中：[/font][font=宋体] △AL——样品净吸光值差；[/font][font=宋体] ML ——乳果糖的摩尔质量（342.3g/mol）；[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]——NADPH在340nm处的摩尔吸光值（6.3Lmmol-1cm-1）；[/font][font=宋体] V1 ——比色皿液体总体积，V1=3.240mL；[/font][font=宋体] V2 ——比色皿中滤液的体积，V2=1.00mL；[/font][font=宋体] d ——比色皿光通路长度，d=1.00㎝；[/font][font=宋体] V ——测试样体积（L）。[/font][font=宋体] [font=宋体]计算结果精确到小数点后一位。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（注：代入数值后公式即为[/font]C=1408.32×△AL）[/font][font=宋体]5 精密度[/font][font=宋体] [font=宋体]在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的[/font]5％。[/font][font='Times New Roman'] [/font]

  • GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定-NQAD检测器

    GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定-NQAD检测器

    GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 ——第一法 NQAD检测器数据　　GB 5009.8-2016第一法中推荐使用蒸发光散射检测器对五种单糖和二糖进行检测。本实验室使用资生堂新型高灵敏度气溶胶型NQAD检测器进行检测。　　（关于NQAD检测器的介绍，详见http://bbs.instrument.com.cn/topic/6377766）　　使用资生堂 CAPCELL PAK NH2 UG80 S5; 4.6mm i.d ×250mm色谱柱，通过将乙腈比例提高至85%，柱温提高至45°C，最终可以实现五种单糖和二糖的良好分离（见图1）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171434_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171434_02_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171434_03_2222981_3.png　　进一步对标准曲线进行绘制，国家标准中使用2mg/mL, 4mg/mL, 6mg/mL, 10mg/mL系列糖标准工作液进行标准曲线的制作，因NQAD检测器灵敏度较高，对于响应较强的果糖、葡萄糖和蔗糖易发生过载，故将原标准工作液均稀释十倍。以峰面积为纵坐标，标准工作液浓度为横坐标，用0.2mg/mL,0. 4mg/mL, 0.6mg/mL, 1.0mg/mL系列工作液进行标准曲线绘制。由图2~6所示， 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖在0.2mg/mL~1.0mg/mL浓度范围内线性良好，相关系数R2均在0.99以上。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171434_04_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171434_05_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704171434_06_2222981_3.png注： 图中色谱峰线条不平滑是由于图像在复制过程中解像度问题引起的。

  • 【分享】卫生部关于批准菊粉、多聚果糖为新资源食品的公告

    卫生部关于批准菊粉、多聚果糖为新资源食品的公告（2009年第5号）根据《中华人民共和国食品卫生法》和《新资源食品管理办法》的规定，批准菊粉、多聚果糖为新资源食品。上述2种新资源食品用于食品生产加工时，应当符合有关法律、法规、标准规定。特此公告。附件：2种新资源食品目录 二○○九年三月二十五日附件2种新资源食品目录中文名称菊粉英文名称Inulin基本信息来源：菊苣根（拉丁学名：Cichorium intybus var. sativum，Asteraceae）生产工艺简述以菊苣根为原料，去除蛋白质和矿物质后， 经喷雾干燥等步骤获得菊粉。食用量≤15克/天质量要求性状白色粉末菊粉（果糖聚合体的混合体，聚合度范围2－60）＞86.0％其他糖类（葡萄糖+果糖+蔗糖）＜14.0％水分≤4.5％灰分≤0.2％其他需要说明的情况使用范围：各类食品，但不包括婴幼儿食品中文名称多聚果糖英文名称Polyfructose主要成分多聚果糖基本信息来源：菊苣根(拉丁学名：Cichorium intybus var. sativum，Asteraceae )结构式：分子式：（C6-H12-O6）-(C6-H10-O5)n n＝2-60分子量：344～11400生产工艺简述以菊苣根为原料，经提取过滤，去除蛋白质、矿物质及短链果聚糖，喷雾干燥等步骤制成多聚果糖。食用量≤8.4克/天质量要求性状白色粉末多聚果糖≥94.5％平均聚合度（DP）≥23水分≤4.5％灰分≤0.2％pH值（10％在普通水中）5.0～7.0其他需要说明的情况使用范围:儿童奶粉、孕产妇奶粉

  • 【原创】【第三届原创大赛+极限体验】-Ca型阳离子交换柱测试果葡糖浆中的果糖和葡萄糖

    【原创】【第三届原创大赛+极限体验】-Ca型阳离子交换柱测试果葡糖浆中的果糖和葡萄糖

    摘 要: 目的：建立并验证了用高效液相色谱-示差折光检测器测定果葡糖浆中果糖和葡萄糖含量的检测方法；方法：以水为溶剂，Ca型阳离子交换柱进行分离；以相对保留时间定性，色谱峰面积定量；结果：该方法平均回收率为98.33％～102.69％，RSD为0.865％～1.253％。检测限(S／N=3)分别为葡萄糖：1.94ug/ml；果糖2.49 ug／ml；结论：实验表明该方法对果葡糖浆中的葡萄糖和果糖含量的测试简单、可靠。关键词：示差折光检测器；果葡糖浆；Ca型阳离子交换柱。HPLC-RI测试果葡糖浆中的果糖和葡萄糖摘 要: 目的：建立并验证了用高效液相色谱-示差折光检测器测定果葡糖浆中果糖和葡萄糖含量的检测方法；方法：以水为溶剂，Ca型阳离子交换柱进行分离；以相对保留时间定性，色谱峰面积定量；结果：该方法平均回收率为98.33％～102.69％，RSD为0.865％～1.253％。检测限(S／N=3)分别为葡萄糖：1.94ug/ml；果糖2.49 ug／ml；结论：实验表明该方法对果葡糖浆中的葡萄糖和果糖含量的测试简单、可靠。关键词：示差折光检测器；果葡糖浆；Ca型阳离子交换柱。HPLC-RI determination of Glucose and Fructose which in High Fructose Corn Syrup Abstract: Objective: Established and tested the Glucose and Fructose which in Fructose Corn Syrup using HPLC-RI. Methods: Using water as solvent, Cation exchange column with Ca type for separate; qualitative with relatively retention time and quantitative with peak area; Results: The average recovery rate is 98.33％～102.69％, RSD is 0.994%~1.377%, and the limit of detection(S/N=3) respectively as Glucose: 1.94ug/ml; Fructose: 2.49 ug／ml; Conclusion: the experiment shows that this method is simple and reliable for the control of Glucose and Fructose which in High Fructose Corn Syrup.Key words: RI Detector; High Fructose Corn Syrup; Cation exchange column with Ca type. 果葡糖浆是由植物淀粉水解和异构化制成的淀粉糖晶，是一种重要的甜味剂。本品为无色或浅黄色、透明的黏稠液体。甜味柔和，具有果葡糖浆特有的香气，无异味。无正常视力可见杂质。因为它的组成主要是果糖和葡萄糖；故称为“果葡糖浆”。 果葡糖浆是由葡萄糖和果糖组成的一种混合生物酶转化糖浆，同时也是一种高甜度的淀粉糖，除作为糖源可替代蔗糖应用于食品加工外，果葡糖浆还具有蔗糖所不具备的优良特性，如在口感上，越冷越甜；甜度；在风味上具有不掩盖性；冰点温度低，以及在营养和代谢方面的功能性作用等。国家标准GB/T 20882-2007果葡糖浆中，将其分为两种类型：F42型（果糖含量不低于42%的果葡糖浆）和F55型（果糖含量不低于55%的果葡糖浆）。其质量要求为：对于果葡糖浆的成分控制，目前常采用HPLC法进行控制。 1 实验部分1.1 仪器和试剂[s

  • GB18932-2002蜂蜜中高果糖淀粉糖测定

    最近实验室要做高果糖淀粉糖的检测，蜂蜜样品。按照“GB18932-2002蜂蜜中高果糖淀粉糖测定”这个方法。请高人指点下：GB18932-2002蜂蜜中高果糖淀粉糖测定这个国标里面用的这个“二苯胺盐酸盐”纯度有没有什么特别要求啊？这个是配显色剂用的，哪里有卖的啊？实验很急，最好有现成的卖！！！

  • 【我们不一YOUNG】果糖的测定--酚—硫酸法

    [align=center][font=DengXian]果糖的测定[/font]--[font=DengXian]酚—硫酸法[/font][/align][font=DengXian]半胱氨酸—咔唑法：[/font][font=DengXian]果葡糖浆行业标准[/font][font=DengXian]在一定条件下[/font],[font=DengXian]果糖与半胱氨酸盐酸盐——咔唑反应生成紫色物质[/font],[font=DengXian]而在此条件下[/font], [font=DengXian]葡萄糖呈浅蓝色。用比色法测定[/font],[font=DengXian]选择合理的比色波长（波长[/font]560nm [font=DengXian]）[/font],[font=DengXian]可以减少其它糖的干扰。[/font][font=DengXian]果糖标准溶液：取一定量的[/font]D[font=DengXian]－果糖[/font](C6H12O6)[font=DengXian]放入真空干燥箱内[/font],[font=DengXian]在[/font]55[font=DengXian]℃下真空干燥至恒重。迅速称取果糖[/font]300mg,[font=DengXian]用水定容至[/font]100mL,[font=DengXian]贮于冰箱内。使用时用水稀释[/font]100[font=DengXian]倍[/font],[font=DengXian]即含果糖[/font] 30[font=DengXian]μ[/font]g[font=DengXian]／[/font]mL[font=DengXian]。[/font]

  • 磷酸盐标准曲线斜率

    我现在正在做磷酸盐，做了两次曲线斜率都不一样。第一次没水浴，第二次水浴，而第二次吸光度整体偏小，空白还是负的。线性也不是很好？我想知道磷酸盐标准曲线的斜率范围，请高人指教一下！

  • 葡萄糖二酸钙在液相中出两个峰

    [color=#444444]各位高手，我在做葡萄糖酸钙中葡萄糖二酸钙时用C18柱，加离子对试剂，葡萄糖二酸钙出两个峰，月旭AQ色谱柱，用10mmol/L磷酸氢二钾和10mmol/L的四丁基硫酸氢铵做流动相(调节pH为7.5)，葡萄糖二酸钙出两个峰，有没有高手看一下是什么原因，谢谢。[/color]

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