大肠埃希氏菌噬菌体

近日，美国巴尔的摩Intralytix公司研制出一种基于噬菌体的EcoShield产品，该产品能显着减少甚至清除碎牛肉中的大肠杆菌O157:H7,此产品目前已获得FDA批准，其纯天然的除菌方式受到FDA的高度评价。 Intralytix公司首席执行官表示，虽然EcoShield产品并非对抗大肠杆菌的"高招",然而它确实提供了一个"杀灭步骤",由此可将大肠杆菌显著得减少或清除99%至100%。 EcoShield产品由三种噬菌体混合而成，对人体、动物、植物无害，能有效的防护大肠杆菌O157:H7。

[font=宋体]噬菌体展示技术是一种筛选技术，通过基因工程技术将外源蛋白或多肽的基因序列插入到噬菌体，进行多轮筛选，最终在体外获得具有高特异性和高亲和力的重组抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]噬菌体展示技术原理[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体展示技术[/b][/url]（[/font][font=Calibri]phage display[/font][font=宋体]）是将外源编码多肽或蛋白质的基因通过基因工程技术插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，在阅读框能正确表达，使外源多肽或蛋白在噬菌体的衣壳蛋白上形成融合蛋白，随子代噬菌体的重新组装呈现在噬菌体表面，可以保持相对的空间结构和生物活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]然后利用靶分子，采用合适的淘洗方法，洗去未特异性结合的噬菌体。再用酸碱或者竞争的分子洗脱下结合的噬菌体，中和后的噬菌体感染大肠杆菌扩增，经过[/font][font=Calibri]3-5[/font][font=宋体]轮的富集，逐步提高可以特异性识别靶分子的噬菌体比例，最终获得识别靶分子的多肽或者蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]噬菌体抗体库的构建和筛选技术流程：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]噬菌体展示技术中，[/font][font=Calibri]M13[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]f1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]fd[/font][font=宋体]噬菌体是最常用的噬菌体，属于[/font][font=Calibri]Ff[/font][font=宋体]家族。与展示密切相关的有两种结构蛋白质：主要衣壳蛋白[/font][font=Calibri]pVIII[/font][font=宋体]（或[/font][font=Calibri]gp8[/font][font=宋体]）和次要衣壳蛋白[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]（或[/font][font=Calibri]gp3[/font][font=宋体]）。[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]含有[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]个拷贝，以较低的价态存在； [/font][font=Calibri]pVIII[/font][font=宋体]含有[/font][font=Calibri]2700[/font][font=宋体]个拷贝，以较高的价态存在。因此，[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]有利于筛选具有较高亲和力的配体，[/font][font=Calibri]pVIII[/font][font=宋体]可用于筛选具有较低亲和力的配体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该技术实现了基因型与表型的统一，目的基因（粉红色）被克隆至噬菌体[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]基因，其产物（抗体、肽）以融合蛋白的形式展示到噬菌体的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]噬菌体展示技术的筛选过程包括：[/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）一个包含[/font][font=Calibri]106~1011[/font][font=宋体]个克隆的噬菌体文库与包被抗原孵育。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]）清洗并除去未结合的噬菌体。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）洗脱与抗原结合的噬菌体。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]）洗脱下来的噬菌体在辅助噬菌体的帮助下感染大肠杆菌从而扩增洗脱下来的候选噬菌体。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]）将细胞接种到可筛选的平板上并进行扩增。以上步骤重复[/font][font=Calibri]2-3[/font][font=宋体]次，使得与目标抗原结合噬菌体被富集。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供噬菌体抗体库技术平台，包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤，义翘神州利用灵活的筛选策略、多种筛选方法以及上清介入检测，筛选的成功率达到[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]，可根据客户的特殊需求构建不同物种的噬菌体抗体库，并提供全面高效的抗体发现服务。详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display[/font][/font][font=宋体] [/font]

噬菌体的主要作用是()。 A、噬菌体的分型鉴定 B、杀灭细菌 C、繁殖 D、A+C

[font='calibri'][size=13px]噬菌体展示技术流程、原理及九大问题解析[/size][/font]原理：噬菌体展示技术，是利用基因工程技术将抗体的基因连接到噬菌体中，并以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面，通过与靶蛋白的结合，完成噬菌体展示抗体的筛选。基于噬菌体展示抗体库构建和筛选的专业知识，义翘神州能为客户提供个性化的抗体定制服务，包括鼠源单克隆抗体、兔源单克隆抗体、鸡源单克隆抗体和全人源抗体等多个种属的抗体发现服务。噬菌体展示技术流程：噬菌体抗体库开发技术包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤，义翘神州利用灵活的筛选策略、多种筛选方法以及上清介入检测，筛选的成功率达到90%，可根据客户的特殊需求构建不同物种的噬菌体抗体库，并提供全面高效的抗体发现服务。①义翘神州的噬菌体展示平台可以针对哪些种属的抗体进行开发？目前可以对小鼠 、兔子、鸡、人等多个种属的抗体开发进行建库。②义翘神州的噬菌体展示库建库库容有多大？免疫库的库容在5×108~2×109，天然库的库容可以达到1011。③义翘神州的噬菌体展示库筛选抗体的多样性如何？根据不同要求，可以提供十几个到上百个unique hits。④义翘神州噬菌体展示库抗体开发周期需要多长时间？免疫库从建库到获得质粒需要8周时间，天然库需要6周时间。⑤义翘神州噬菌体展示库及其筛选出的克隆可以保存多久？均可保存一年以上。⑥怎样衡量一个库的好坏，有哪些标准？除了库容大小，还可以通过电泳判断插入率，以及通过一代测序验证抗体构建的正确率，评估抗体库的真实库容。或通过二代测序，获得库的序列多样性和覆盖率等具体信息。⑦淘洗时筛选到非特异抗体怎么解决？被动的方法是利用负筛，尽快能去掉非特异克隆。主动的方法是更换免疫原，选择不仅免疫原性好且活性好、特异性强的免疫原。⑧淘洗过程中，如何判断淘洗是否可以终止？有多种途径可以判断，比如通过计算噬菌体淘洗前后的产出和投入比、将每轮淘洗的克隆测序观察序列是否出现富集、以及将噬菌体库检测ELISA等。⑨如何筛选到亲和力高的抗体？可以尝试降低抗原包被量，同时增加洗涤力度。更多详情可以关注：噬菌体抗体库技术平台https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display

原理噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒，其个体形态极其微小，用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，然后它们再扩散和侵染周围细胞，最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清，或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑——噬菌斑。了解噬菌体的特性，快速检查、分离并进行效价测定，对在生产和科研工作中防止噬菌体的污染具有重要作用。检样可以是发酵液、空气、污水、土壤等（至于无法采样而需检查的对象，可以用无菌水浸湿的棉花涂拭表面作为检查样品）。为了易于分离可先经增殖培养，使样品中的噬菌体数量增加。采用生物测定法进行噬菌体检查，约需12h，因而不能及时判断是否有噬菌体污染。通过快速检查可大致确定是否有噬菌体污染，以便采取必要的防范措施。根据正常发酵（培养）液离心后菌体沉淀，上清液蛋白含量很少，加热后仍然清亮；而侵染有噬菌体的发酵（培养）液经离心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白，加热后发生蛋白质变性，因而在光线照射下出现丁达尔效应而不清亮，可以进行噬菌体检查。此法简单、快速，对发酵液污染噬菌体的判断亦较准确。但不适于溶源性细菌及温合噬菌体的诊断，对侵染噬菌体较少的一级种子培养液也往往不适用。噬菌体的效价即1mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数。效价的测定一般采用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，一般一个噬菌体产生一个噬菌斑，故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑数，计算出噬菌体的效价。此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致，且清晰度高，故计数比较准确，因而被广泛应用。

各位好，我想请教一个问题，我们做噬菌体的实验，请问噬菌体买回来怎么处理啊，就是怎么扩增、保存啊？和细菌的保存一样吗？谢谢！

噬菌体的主要作用是()。 A、噬菌体的分型鉴定 B、杀灭细菌 C、繁殖 D、A+C

病毒（噬菌体）买回来以后，应该怎么操作啊，是跟细菌菌种一样进行复苏，传代吗？我们要买的是MS2病毒，具体操作步骤能否提供一下啊（用什么培养基，怎么操作）以前没有接触过这类测试，谢谢！

大肠杆菌发酵过程经常会发生各种各样的菌体自溶，可以发生在分批阶段，补料阶段，诱导后阶段。每个阶段有不同的原因和对策，下面我会分批次说说各种自溶的原因以及对策，希望有抛砖引玉之效。首先，我说说分批阶段。在分批阶段，通常自溶可以发生在几乎任何阶段，比较早的可能是接种后菌体生长过慢延滞期大大增加从数小时至十数小时，晚的大致出现在补料前。早期自溶可能出现的现象：延滞期增加，溶氧pH变化可能不大（也有上升至某一点不动）泡沫少或者几乎无泡沫；中晚期的表现大致可以有泡沫形成（停止搅拌后泡沫经久不散），加入消泡剂无效，pH上升，溶氧上升，镜检可见碎片，发酵液味道异常等现象。分批阶段自溶的原因：菌种，培养基，噬菌体，工艺异常，人为失误等。以下贴子将一一分析。

噬菌体可以用质谱定量分析吗，不管是根据蛋白或者根据核苷酸。噬菌体的蛋白可以被酶切吗。酶切后定量特征肽段，可行吗？

[font=宋体]噬菌体展示技术是一种筛选技术，通过基因工程技术将外源蛋白或多肽的基因序列插入到噬菌体，进行多轮筛选，最终在体外获得具有高特异性和高亲和力的重组抗体。下面为大家介绍噬菌体展示技术基本流程：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一般来说，[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体展示技术[/b][/url]有以下[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]个步骤[/font][font=Calibri]:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]1:[/font][font=宋体]构建噬菌体展示库[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术用于将外来[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体]整合到病毒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]中。不同的基因组被插入到多个噬菌体的基因组中。剪接到一个外壳蛋白的基因中，使该蛋白显示在噬菌体颗粒的外面，而这些分离的噬菌体只展示一种蛋白、肽或抗体。这些噬菌体的集合即为库，如抗体噬菌体库、蛋白质噬菌体库或随机噬菌体库。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]：结合[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]这些库暴露于选定的目标，只有一些噬菌体会与目标相互作用。这些目标是计划识别特定的配体，如固定的蛋白、细胞表面蛋白或组织细胞表面蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]：洗涤[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]未结合的噬菌体可以被洗涤缓冲液冲走，只留下那些对受体有亲和力的噬菌体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]：洗脱[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]洗脱缓冲液洗脱回收对目标有亲和力的噬菌体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]：放大[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]展示特异性的洗脱噬菌体被用来感染新的宿主细胞进行扩增，或直接进行细菌感染和扩增回收的噬菌体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]噬菌体展示的应用[/b][/font][font=宋体]噬菌体展示技术在基础研究、诊断和治疗应用领域发挥了关键作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组抗体具有高特异性和高亲和力，可用于在侧流分析（[/font][font=Calibri]LFA[/font][font=宋体]）、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]和细胞成像等多种诊断平台中快速准确地识别样本中的目标抗原。大多这些平台都利用抗原捕获测定或抗体捕获测定来诊断某些疾病的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]阿达木单抗（市场名为[/font][font=Calibri]Humira[/font][font=宋体]）是首款通过噬菌体展示技术获得上市批准的治疗性抗体，其可中和肿瘤坏死因子，主要用于治疗类风湿性关节炎。噬菌体展示技术的出现，使得抗体药物的研发有了突破性进展，已成为最重要的药物筛选平台之一。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display]噬菌体展示技术平台[/url]，详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display[/font][/font][font=Calibri] [/font]

我想请问一下，就是做噬菌体的实验时，为什么要用双层平板啊？这个双层平板有什么作用吗？跟单层的话有什么区别

[font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体展示技术[/b][/url]是一种筛选技术，通过基因工程技术将外源蛋白或多肽的基因序列插入到噬菌体，进行多轮筛选，最终在体外获得具有高特异性和高亲和力的重组抗体。[/font][font=宋体][font=Calibri]1985[/font][font=宋体]年，[/font][font=Calibri]Smith[/font][font=宋体]首先发现外源[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]片段可以融合到非裂解丝状噬菌体[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]外壳蛋白的编码基因上，并以融合蛋白的形式表达在病毒表面，而不影响噬菌体的传染性。随后，[/font][font=Calibri]Winter[/font][font=宋体]颠覆了噬菌体展示的过程，他使用噬菌体展示抗体（而不是蛋白质），然后找出与分子甚至细胞结合的目标抗体。噬菌体展示技术这一发明，为单克隆抗体药物的发现带来了巨大的改变。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]杂交瘤和噬菌体展示技术都属于重要的单克隆抗体制备技术。然而，每种方法都有其局限性，以下表格是两者的优势和缺点对比。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]噬菌体展示技术优缺点介绍：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点：[/font][font=宋体]? 大规模生产[/font][font=宋体]? 周期快[/font][font=宋体]? 筛选过程易于控制[/font][font=宋体]? 易于筛选大量的不同克隆[/font][font=宋体]? 可直接筛选人类文库[/font][font=宋体]? 可用于筛选有毒抗原[/font][font=宋体][font=宋体]? 无免疫原性问题（对于[/font][font=Calibri]na?ve[/font][font=宋体]文库）[/font][/font][font=宋体]? 无克隆生存能力问题[/font][font=宋体]? 直接获得序列[/font][font=宋体][font=宋体]? 无动物使用（对于[/font][font=Calibri]na?ve[/font][font=宋体]文库）[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点：[/font][font=宋体]?价格昂贵[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]binders[/font][font=宋体]可能有较低的亲和力[/font][/font][font=宋体]? 技术更难[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]杂交瘤技术优缺点介绍：[/b][/font][font=宋体]优点：[/font][font=宋体]? 大规模生产[/font][font=宋体]? 高产量[/font][font=宋体]? 高特异性[/font][font=宋体]? 高灵敏度[/font][font=宋体]? 低成本[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点：[/font][font=宋体]? 周期长[/font][font=宋体]? 需要人源化[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]基于噬菌体展示平台，义翘神州可为客户提供多种噬菌体展示文库构建和筛选服务，包括鼠源单克隆抗体、兔源单克隆抗体、鸡源单克隆抗体和全人源抗体等多个种属。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州噬菌体抗体库开发技术包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤，利用灵活的筛选策略、多种筛选方法以及上清介入检测，筛选的成功率达到[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]，可根据客户的特殊需求构建不同物种的噬菌体抗体库，并提供全面高效的抗体发现服务。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多噬菌体展示技术和[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display][b]噬菌体抗体库技术平台[/b][/url]详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display[/font][/font]

请教各位：我现在想用透射电镜拍摄噬菌体（一种病毒），负染后电镜，请问支持膜选哪种好呢，碳支持膜、微栅、超薄碳膜、多孔膜？非常感谢！！！

目前只接触到《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750.12-2006中有一个大肠埃希氏菌的检测方法 ，不知道有没有废水的大肠埃希氏菌的检测方法呢？

请问有没有哪位做过大肠埃希氏菌呢，可以请教一下吗？谢谢！

美国典型物保藏中心，又称美国模式典型物收集中心(ATCC)，ATCC是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供以下物品：细胞系（3000种）；细菌和噬菌体（15000种）；动植物病毒（2500种）；原生动物 1200种以及重组物品等。北京时代新光TEl: 010-87875910 010-87875015 13371681771 E-mail: zfyu@ bio-life.cnweb: www.bio-life.cn

耐热大肠菌和大肠艾希氏菌属于包含关系吗？它们之间是否一定是耐热大肠菌的结果大于大肠艾希氏菌结果呢？是理论上这样，在实际中有没有不同的。有同时测定过的一起来讨论吧。

我们这次实验室认可现场评审，评审老师要求我们要做培养基的阳性和阴性对照实验，我们申报的项目的污水中粪大肠菌群，所用的培养基是乳糖蛋白胨和EC肉汤。按照四版书的要求，我们已购回大肠埃希氏菌和产气肠杆菌，粪链球菌，不知道具体的实验应该怎么做。想请问具体的实验方法和步骤？

美丽而危险——大肠埃希氏菌。(以下来源百度百科)不同的致泻性大肠埃希菌引起的中毒，症状各不相同。①产肠毒素性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是水样腹泻、腹痛、恶心、低热。每天腹泻可达8～12次。②肠道侵袭性大肠埃希菌的中毒症状与志贺菌引起的痢疾相似，发热、剧烈腹痛、水样腹泻、粪便中有少量粘液和血。③肠道致病性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是发热、不适、呕吐、腹泻、粪便中有大量粘液但无血，有约20%患者由呼吸道症状，感染的症状通常比较严重。④肠集聚性黏附性大肠埃希菌引起的中毒症状成年人表现为中度腹泻，病程1～2天。婴幼儿多表现为2周以上的持续性腹泻。⑤肠出血性大肠埃希菌引起的中毒，一般3～10天发病，常有突发性的腹部痉挛，有时类似于阑尾炎的疼痛。有的病人只有轻度腹泻；有些病人由水样便，转为血性腹泻，腹泻次数有时可达10多次，低热或不发热；许多病人同时有呼吸道症状。可发展为溶血性尿毒综合征和血栓性血小板减少性紫癜等多器官损害。老人和儿童患者死亡率很高。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806202256255611_546_3251800_3.jpeg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806202256248080_9226_3251800_3.jpeg[/img]

新的《生活饮用水卫生标准》正是实施，领导要我开展大肠埃希氏菌这个项目。但是看了GB5750－2006后还是有些不能理解，不知道怎么开展。希望各位能帮帮我。所用的紫外灯一定得是6w 366nm吗？这种紫外灯是连工作台的吗？用多管发酵法做水源水时，用金属环接种是吗？每个大肠菌群的阳性管接种几个EC-MUG管啊？所用的培养箱是用恒温培养箱（做总大肠菌群的）还是隔水式恒温培养箱？计算EC-MUG阳性管数，查的MPN是查哪个啊？

国标5750上大肠埃希氏菌的检测要求紫外波长为366nm，在此条件下观察是否有荧光。我们超净工作台里面的紫外灯波长是254nm的，不知道对检测有没有影响？还是说大肠埃希氏菌必须要波长为366nm才能看到荧光现象？

我这里做GB/T4789.6-2003致泄大肠埃希氏菌检验，缺产肠毒素大肠埃希氏菌LT和ST酶标诊断试剂盒 谁有？？急用！！联系我：rtx1999@163.com 谢谢同时谁能帮忙告诉我，买标准菌株哪里有卖？谢谢@！

水中大肠埃希氏检测中要求用366nm紫外灯检测，我查了一下有专用的紫外分析仪带254nm灯及366nm灯及标准点样灯，也有的是三用紫外分析仪带254nm灯及365nm灯，我想请教各位大侠1.检测水中大肠埃希氏菌必须用专用的检测仪吗？用365nm灯不可以吗？2.这个灯用检定吗？3.标准点样灯是做什么的？谢谢解答？

问题描述：如何看待血清型与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]结果不符的情况？以致泻大肠埃希氏菌检测为例解答：[align=left][font=宋体][color=black]确实有这情况存在，由于血清型判定依据是菌体抗原（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]O[/color][/font][font=宋体][color=black]抗原、[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]H[/color][/font][font=宋体][color=black]抗原、[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]K[/color][/font][font=宋体][color=black]抗原），这些抗原并不是致泻大肠埃希氏菌发病的根本原因，而且相同血清型致泻大肠埃希氏菌中，存在不同致病型的大肠埃希氏菌，也就是说不同致泻大肠埃希氏菌[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]“[/color][/font][font=宋体][color=black]共享[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]”[/color][/font][font=宋体][color=black]同一个血清型，这是血清鉴定致泻大肠埃希氏菌的不足之处，另外，随着人类对致泻大肠埃希氏菌致病机制的认识，并找到引起不同致病型的特征性毒力基因，因此，现行标准以[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/color][/font][font=宋体][color=black]为确认方法，而血清学诊断只是选做项目。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

大肠杆菌发酵经验总结首先，补料速率与比生长速率直接影响着乙酸的生成速率和积累量（主要是补料速率与比生长速率影响发酵液中的残糖量，进而影响），所以适当的控制补料速率和比生长速率，对于控制乙酸的量有很好的效果。 其次，必须要保证充足的溶氧，并严格控制pH值，而且补酸碱的速率尽量缓和，不能太快；温度对于蛋白的表达也有很重要的影响，较低的发酵温度下所生产出的蛋白大多是有活性的，而较高的发酵温度下产生的蛋白大多一包涵体形式存在。第三，选取合理的诱导时间非常重要，一般的诱导时间选在指数生长后期，而且诱导时的比生长速率最好能控制在0.2之内，选在此时诱导，1.将菌体的快速生长期与蛋白合成期分开，使这两个阶段互不影响，有利于蛋白的高表达；2.已经得到了大量的菌体，而且菌体的生物量基本接近稳定，不论是从动力学角度，还是能耗，物料成本方面，都比较合理。第四，补料过程中的碳氮比也很重要。若氮源过高，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代谢产物的积累，氮源不足，则菌体繁殖量少从而影响产量；碳源过多，则容易刑场较低的pH，抑制菌体生长，碳源不足，则容易引起菌体的衰老和自溶。另外，碳氮比不当还会引起菌体按比例的吸收营养物质，从而直接影响菌体的生长和产物的合成。 根据自己的经验，一般情况下，对于一个稳定的发酵工艺下，如果总是在固定的发酵时间段出现溶菌现象，而且能排除噬菌体和染菌的可能性后，那就可能是因为碳氮比不合理造成的。可以适当调整碳氮比。 大家讨论得较多的是关于代谢副产物乙酸对大肠杆菌发酵的影响，针对我们论坛所发的帖，我先总结以下几点，并作出相应解决措施。一、代谢副产物-乙酸乙酸是大肠杆菌发酵过程中的代谢副产物，在多大的浓度下产生抑制作用各种说法不一，一般认为在好气性条件下，5～10g/L 的乙酸浓度就能对滞后期、最大比生长速率、菌体浓度以及最后蛋白收率等都产生可观测到的抑制作用。当乙酸浓度大于10或20g/L 时，细胞将会停止生长，当培养液中乙酸浓度大于12g/L 后外源蛋白的表达完全被抑制。预防乙酸产生的措施： 1、通过控制比生长速率来减少乙酸的产生：比生长速率越高，乙酸产生越多，当比生长速率超过某个值时，乙酸开始产生。可以通过降低温度，调节酸碱度，控制补料等方法来降低比生长速率。 2、透析培养： 在大肠杆菌的培养过程中可以用透析技术除去发酵液中的有害物质，降低乙酸含量从而实现重组菌的高密度发酵和产物的表达。3、 控制葡萄糖的浓度：葡萄糖是大肠杆菌发酵过程中重要的碳源之一，用其作碳源是要将其控制在一个较低的水平上，以减少乙酸的产生。 常用的控制方法主要有： 恒pH法：大肠杆菌会代谢葡萄等产生乙酸，使pH 值下降。因此可通过pH值的高低作为控制葡萄糖的指标，该法的缺点是pH 的变化不完全是由葡萄糖代谢的结果，容易造成补料体系出错。 恒溶氧法：菌体代谢时会消耗氧，使溶氧下降，当葡萄糖浓度低到一定程度时菌体代谢下降，消耗氧能力下降，溶氧上升。因此，根据溶氧曲线补加葡萄糖，保持溶氧恒定，可以控制葡萄糖在一定的水平。 二、温度大肠杆菌发酵最适温度是37 C，当温度最适菌体生长时，比增长速率将会增大。随温度上升细菌代谢加快，其产生代谢副产物也会增加。这些副产物会对菌体的生长产生一定的抑制作用。菌体生长过快也会影响质粒的稳定性。降低培养温度，菌体对营养物质的摄取和生长速率都会下降。同时也减少了有毒代谢副产物的产生和代谢热的产生。有时降低温度更有利于目的蛋白的正确折叠及表达。在重组大肠杆菌的发酵中不同发酵阶段其最适温度也不 同，为了能获得大量的目的蛋白，首先要保证菌体的量，因此在前期可优先考虑菌体的生长，到诱导阶段应将目的产物的表达放在首位。三、培养方式 微生物的培养方式主要有分批、连续和补料分批3种。大肠杆菌发酵大多采用补料分批培养，这是在现代发酵工艺得到优化的一种方式，能有效的优化微生物培养过程中的化学环境。使微生物处于最佳的生长环境。这种方式一方面可以避免某些营养成分初始浓度过高出现底物抑制现象，另一方面能够防止限制性营养成分被耗尽而影响细胞的生长和产物的形成。补料分批培养已广泛应用于各种各样的初级、次级生物产品和蛋白等的发酵生产中。

请问大肠杆菌与大肠埃希菌可认为是一种菌，叫法的差别吗？如不是，它们的区别？

请问大肠埃希菌就是大肠杆菌？谢谢

买的斜面的大肠埃希氏菌该如何在粪大肠15管发酵法中，用作阳性对照呢