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大肠杆菌显色培养基

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大肠杆菌显色培养基相关的论坛

  • 【求助】为什么测定大肠杆菌时要用双倍和单倍的乳糖培养基进行除发酵呢?

    在GB/T 5750.12-2006微生物大肠杆菌测定中,先取10mL水样于10mL双料乳糖蛋白胨培养液中,取1mL水样接种到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中,在取稀释10倍的水样于10mL单料乳糖蛋白胨培养液中,每一稀释度接种管5管。那请教下大家, 为什么要先双倍再单倍、单倍,这样培养的区别在哪里?可不可以都用单倍或都用双倍或三倍?浓度高的培养基中为什么移取的水样要多点呢?请大家多多指教。我是新手。谢谢!

  • 蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基Bacillus cereus Chromogenic Medium用途:用于蜡样芽孢杆菌的显色培养,蜡样芽孢杆菌显蓝绿色蜡样芽孢杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。蜡样芽孢杆菌显蓝绿色且菌落比较大,苏云金芽孢杆菌显蓝绿色,李斯特氏菌显深蓝色,菌落比较小,其它菌显黄色或无色,革兰氏阴性菌被抑制。 成份 (g/L) 特殊营养物质41.9 显色剂 0.5 抑菌成份 0.6琼脂 15.0 pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 注意 此培养基仅供实验室使用。 用法 称取本品 11.6g 加入200ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,备用。 贮存 制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。 失效 干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。 操作步骤 1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液; 2、样品液在30±1℃增菌培养18-24小时; 3、取增菌液划线接种于蜡样芽孢杆菌显色培养基平板上,30±1℃培养18~24h。蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落比较大。若24小时没有出现典型菌落,可延长培养至48小时。 4、对可疑蜡样芽孢杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃培养18-24小时,挑取单菌落做蜡样芽孢杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装SHBG09 7种x2套/盒*5盒)

  • 大肠杆菌检测仪如何检测大肠菌群

    大肠杆菌检测仪如何检测大肠菌群

    [size=16px]  大肠杆菌检测仪如何检测大肠菌群  检测大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)群的方法通常需要使用特定的实验室仪器和技术,而不是简单的手持式检测仪。以下是一般的步骤,说明如何使用传统的实验室方法检测大肠杆菌群:  样品采集:  收集你要检测的样品,这可以是水样、食品样品、环境样品等。  确保采样过程是卫生的,以防止样品污染。  样品预处理:  根据样品类型,可能需要进行样品的预处理步骤。例如,对于食品样品,可能需要将其加入到适当的培养基中以培养细菌。  培养:  将样品或样品预处理液接种到含有营养成分的培养基中,通常使用MacConkey培养基,它有助于选择性生长大肠杆菌。  培养基可能会在37°C的恒温培养箱中培养一段时间,通常为24小时。  大肠杆菌群的鉴定:  观察培养后的培养基,大肠杆菌通常会呈现典型的粉红色或红色粘液样的生长。  使用细菌学技术,例如格拉姆染色、生化测试或分子生物学技术,来进一步确认大肠杆菌的身份。  统计计数:  可以使用传统的计数方法,如涂布法,在含有大肠杆菌的培养基上制作细菌计数板,然后通过计算细菌的数量来确定菌群浓度。  数据分析:  分析实验结果,记录大肠杆菌群的数量,并将其与相关法规或标准进行比较,以确定样品是否符合健康和卫生标准。  需要注意的是,上述步骤是传统的实验室方法,通常需要专业实验室设备和培训的操作人员才能执行。此外,大肠杆菌检测通常需要一定的时间,因为培养和鉴定的过程可能需要一至数天。对于快速的检测需求,也可以使用分子生物学方法,如聚合酶链式反应([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]),来快速检测大肠杆菌的存在。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309181131200540_8358_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 大肠杆菌检测仪如何检测食品大肠杆菌

    大肠杆菌检测仪如何检测食品大肠杆菌

    [size=16px]  大肠杆菌(Escherichia coli,简称E. coli)是一种常见的细菌,其中某些菌株可能会引发食品中的食源性疾病。为了检测食品中的大肠杆菌,通常需要使用专门设计的检测方法和仪器。以下是一般的大肠杆菌检测过程:  样本收集: 首先,需要从待测食品样本中取样。这可能涉及到食品的取样器具和技巧,以确保样本的代表性和卫生。  样品准备: 样品通常需要经过样品制备步骤,以浓缩或净化潜在的大肠杆菌。这可能包括液体培养、离心、过滤或其他处理方法。  培养: 可以将样品接种到培养基中,通过培养大肠杆菌以增殖它们的数量。这通常需要一定的时间,通常在恒温条件下进行。  检测方法选择: 有几种方法可以检测大肠杆菌,包括分子生物学技术、生物化学方法和免疫学方法。以下是一些常见的方法:  [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测: 聚合酶链反应([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])可以检测DNA中的大肠杆菌基因。这是一种高度敏感和特异性的方法。  生化检测: 这包括检测大肠杆菌的特定代谢产物,如大肠杆菌在培养基中产生的气体或底物转化产物。  免疫学检测: 这些方法使用特定的抗体来检测大肠杆菌的抗原。酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常见的免疫学检测方法。  结果解释: 根据所选的检测方法,可以得出阳性或阴性结果,或者是数量性的结果,反映大肠杆菌在样品中的存在或数量。  结果确认: 有时需要进行进一步的确认测试,以确保结果的准确性。这可能包括对阳性样品进行亚型鉴定,以确定是否存在致病性大肠杆菌株。  数据记录和报告: 检测结果应该被记录并报告给相关部门或机构,以便采取必要的食品安全措施。  云唐大肠杆菌检测仪通常是专门设计用于执行其中一种或多种检测方法的设备,具体取决于实验室或食品工厂的需求。选择适当的检测方法和仪器取决于样品类型、检测的目的以及可用的资源。食品安全是非常重要的,因此确保正确执行大肠杆菌检测是保障公众健康的一项重要措施。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309200919189229_1894_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【求助】大肠杆菌的检测

    筒子们,我想问一个问题啊,做水质大肠杆菌检测时,不能直接把水样接种到EC-MUG培养基中培养吗,然后看是否有荧光吗?为什么要先接种到乳糖胆盐中培养,然后把产酸产气的再接种到EC-MUG培养基中培养看是否产生荧光?

  • 【原创大赛】大肠杆菌标准菌株的复苏及传代

    【原创大赛】大肠杆菌标准菌株的复苏及传代

    今年,我单位准备增项做水中耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌,作为学化学出身的,做微生物检测真是一头包http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif,我看了标准,主要问题有2个,第一是在耐热大肠菌群标准中伊红美篮琼脂培养基中典型菌落是什么样子,第二是如何进行准确度的验证,我查了资料,当然也在论坛上发了不少求助帖子,不少同志建议我使用标准菌株,我咨询了路桥公司,采购了大肠杆菌的标准菌株,这标准菌株怎么用呢,我给路桥打了无数电话,终于心里有点谱了,硬着头皮做吧,现在,我把试验经过发上来,欢迎拍砖呀……首先,我学了标准菌株复苏操作说明http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311150957_477348_1681389_3.jpg,按规定大肠杆菌复苏的培养基是营养琼脂培养基,也有的同志用营养肉汤培养基,为了保证成功,我两种培养基均准备了,营养琼脂培养基是市售平板http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151000_477350_1681389_3.jpg,营养肉汤培养基是买的培养基粉,自己加水、灭菌的http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151002_477351_1681389_3.jpg,准备好培养基,我在无菌室打开标准菌株http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151003_477352_1681389_3.jpg去掉外包装标准菌株是这样的,http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151004_477353_1681389_3.jpg,有点儿像一支笔,撕开标准菌株上的不干胶标签仔细观察,可以看到在一端有干粉状物质,拿起标准菌株(有干粉状一端朝下,拧上段部分,可以将标准菌株拧开,下段是干粉部分,上端末端是一个棉签,仔细观察上半部分可见有部分液体,将标准菌株按原状拧好,捏其上半部分,至上端液体流下,与干粉部分完全混合,搅动棉签,是菌粉完全溶解。用蘸着菌液的棉签在营养琼脂培养基上涂抹1/4区域,用接种环从涂抹区域向培养基其他区域划线。在营养琼脂培养基接种完成后,将菌液接种至营养肉汤培养基,将接种好的培养基及空白培养基置于37摄氏度培养箱中培养24小时。第二天,营养琼脂培养基上长出了菌落http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151007_477354_1681389_3.jpg,营养肉汤培养基变浑浊了http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151008_477355_1681389_3.jpg,第一代标准菌种基本算复苏传代成功了,大肠杆菌确实比较好活!于是,我又将营养琼脂平板上的菌落接种在新的平板上进行标准菌株的复壮,过程不再赘述,第三天,平板上长出了第二代菌株。为了验证典型菌落在伊红美篮琼脂培养基上的状态,我配制了伊红美蓝营养琼脂培养基,并且将第2代标准菌株接种在培养基上于44.5摄氏度培养了24小时,结果如下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311151015_477356_1681389_3.jpg,做到这里,标准菌株的复苏传代及大肠杆菌在伊红美篮琼脂上的状态我已经有一点数了。

  • 大肠杆菌乳糖发酵实验

    请问,乳糖发酵大肠杆菌,培养基颜色变黄导管产气,但是培养基是混浊的,请问这样的结果对吗,求大神指点,拜托拜托[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/01/201901180941516446_2797_3545162_3.png[/img]

  • 关于大肠杆菌计数的异常情况

    大家好!我用多管发酵法测大肠杆菌时,在初发酵时,移取水样少的比移取水样多的显阳性的管数还多,这是怎么回事呢,已经出现好几次了。可是也做了培养基的空白实验了,没有被污染的迹象呀,很郁闷,请教高人。盼复!

  • 大肠杆菌发酵液样品制备

    没有做过GCMS,求问各位大佬大肠杆菌在m9培养基中的发酵液,高速离心过0.22μm滤膜后可不可以作为样品用以检测发酵液中的组分,如果不行的话要怎么制备样品呀,求教(仪器是安捷伦7890a-7000B*

  • 【分享】饮用水中大肠杆菌及检测方法

    我找了好久才找到的资料,在这里和大家共同分享。一、大肠杆菌细菌是单细胞的原核生物。细菌细胞的结构有细胞壁、细胞膜、细胞质等。细菌无成型的细胞核,细胞壁由肽聚糖组成。由于细菌细胞壁结构不同,细菌可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。革兰氏阳性菌细胞壁厚,无荚膜,多产生外毒素;革兰氏阴性菌细胞壁薄,有荚膜,多产生内毒素。革兰氏阳性菌对青霉素更为敏感。大肠杆菌是革兰氏阴性、异养兼性厌氧型肠道杆菌。在肠道中一般对人无害,但任何大肠杆菌进入人的泌尿系统,都会对人体产生危害。大肠杆菌在基因工程技术中被广泛的应用,它的质粒是最常用的运载体,它也是基因工程中常用的受体细胞。二、培养基配置微生物生命活动过程中需要的化合物有碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。有的化合物既是碳源又是氮源、能源。生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物,但不一定需要外界补充,有的微生物可以自身合成。在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌,培养后可在LB固体培养基上划线分离。以下为本实验中培养基配置步骤:1.称量:准确称取各成分。蛋白胨0.5g,酵母提取物0.25g,氯化钠0.5g,加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。2.溶化:加热熔化,用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂,整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。3.调pH:用1mol/L NaOH溶液调节pH至偏碱性。4.灭菌:在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基,加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好,放入灭菌锅内,1kg压力灭菌15min。5.倒平板:灭菌后,待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:①将灭过菌的培养皿放在火焰旁,右手拿装有培养基的三角瓶,左手拔出棉塞;②右手拿三角瓶,使三角瓶的瓶口迅速通过火焰;③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖;④待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时,也不要把培养基沾在皿壁上。否则,空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖,并污染皿内培养基。三、灭菌和消毒1.无菌技术: ①对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒; ②将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌; ③为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰旁进行; ④避免已灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2.消毒方法: ①日常生活经常用到的是煮沸消毒法; ②对一些不耐高温的液体,则使用巴氏消毒法; ③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒; ④实验操作者的双手使用酒精进行消毒。3.灭菌方法: ①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法; ②培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅; ③表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。4.比较消毒和灭菌: 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能5.注意事项: ①实验中用的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易造成污染。灭菌后,通常在60~80℃烘箱中除去灭菌时的水分; ②物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是有利于锅内温度升高,随后关闭排 气阀继续加热,加热结束切断热源后,要使温度自然降低,气压务必降至零时打开锅盖,其目的是防止容器中的液体暴沸; ③在用任何器皿转接时,瓶塞和封口膜只能夹在手上,不许放在台面上,接种时要在酒精灯火焰旁操作; ④培养基一定不能沾在三角瓶口、试管管口和培养皿壁上,否则容易污染; ⑤接种时要胆大心细,动作快捷,这是减少污染的关键; ⑥接种后,培养皿必须倒放(盖在下方)在恒温培养箱中,如正放则水蒸气在盖上凝成水滴,滴到接种后的培养基表面, 水流扩散会使菌落扩散,就很难形成单菌落了。四、细菌的分离1.划线分离法:用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少。划线到最后,可使细菌间的距离加大。在培养10~20h后,可由一个细菌产生单菌落,菌落不会重叠。如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上,在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。其操作步骤是:将培养皿底部用拇指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁将培养皿稍微打开。在此同时,用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液,迅速送入培养皿内,在平板培养基的一边,作第1次平行划线 3~5条,转动培养皿约70°角,用烧过冷却的接种针,通过第1次划线部分作第2次平行划线,然后再用同样方法,通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。划线时,接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养基划破。划线完毕后,盖上皿盖,倒置于恒温箱培养。取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物;除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种;取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是防止高温杀死菌种;最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。2.涂布分离法:先将培养的菌液稀释,通常稀释到10-5 ~10-7之间,然后取0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上,用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿有20个以内的单菌落最为适合。将每个菌落分别接种在斜面上扩增培养后,再做功能性实验。划线分离法,方法简单;涂布分离法,单菌落更易分开,但操作复杂些。细菌的两种分离法各有优点,都可采用。五、菌落和菌种种类的辨认单个细菌用肉眼是看不见的,但是,当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,便会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、颜色、光泽度、透明度等方面具有一定的特征。细菌的菌落表面一般是光滑而湿润的,有黏稠性,多数透明或半透明,但也有细菌的菌落表面是干燥、有褶皱的;放线菌由于有纤细的菌丝并可产生孢子,所以菌落表面是紧密的绒状、坚实多皱,长孢子后就成粉末状,由于菌丝和孢子有多种色素,所以在菌落培养基底部和菌落表面都有不同的颜色,菌落不易用接种环挑动;酵母菌落类似于细菌菌落,表面光滑而湿润,有黏稠性但大多呈乳白色,少数呈红色。如果菌落无法辨认,只有借助于显微镜观察。在显微镜下细菌一般为杆状、球状和弧状,直径都在1um左右;放线菌菌丝是没有横隔的分枝丝状体,气生菌丝顶端分裂成串状孢子,孢子丝有直线形、螺旋状、弯曲式或轮生等;酵母有卵圆型或丝状,但卵圆形细胞大于细菌,直径约5~7um。

  • 【分享】水质测试Ⅱ系列---大肠菌、大肠菌群检查用培养基

    水质测试Ⅱ系列---大肠菌、大肠菌群检查用培养基 水质测试Ⅱ系列是特定酶基质法培养基,是大肠杆菌群、E.coli的检查用培养基。现追加三种添加了丙酮酸的X-GAL、MUG培养基。Aqua Test Ⅱ组成表蛋白胨 5.0g氯化钠 5.0g硝酸钾 1.0g丙酮酸钠 1.0g月桂酸钠 0.1g磷酸氢二钾 4.0g磷酸二氢钾 1.0gXgal 0.1gMUG 0.1gIPTG 0.1g水质测试Ⅱ试管型产品编号编码品名容量307-14251ATⅡ-10AquaTestⅡ ATⅡ-10(10ml用×10支)×20 309-14691ATⅡ-100AquaTestⅡ ATⅡ-100100ml用×100支 水质测试Ⅱ袋型产品编号编码品名容量308-13201ATB-50AquaTestⅡ ATB-50(50ml用×5袋)×20 304-14401ATB-100AquaTestⅡ ATB-100(100ml用×5袋)×20  水质测试Ⅱ浓缩液体型产品编号编码品名容量304-16601ATS-100AquaTestⅡ ATS-100(10ml用×5支)×20  如有更多其它试剂产品需求与查询,请及时接洽:info@express-cn.com 或在我公司查询主页客户留言处(http://www.express-cn.com/expressgb/lyb.htm )留下您的查询内容,我们即会在当天为您作出回复。伊普瑞斯科技有限公司info@express-cn.com 总机:010-60206266传真:010-60206773www.express-cn.com

  • 水中大肠杆菌问题

    第一次做水中的大肠杆菌,想请问一下,要把水样跟培养液混匀是怎样操作的?那个初发酵中的培养是要斜面培养还是直立培养就行了?一般借助什么工具在灭菌和培养的时候放好试管?谢谢!

  • 大肠杆菌检测仪常见的检测方法有哪些

    [size=16px]  大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)是一类存在于人体和动植物的肠道内的细菌,大部分都是无害的。但某些菌株可能会引起食物中毒和其他健康问题。因此,在食品安全、水质监测等领域,对大肠杆菌的检测是很重要的。  检测大肠杆菌通常需要进行微生物培养和定量检测。常见的方法包括:  培养法: 这是传统的方法,将样本放入培养基中培养,然后观察菌落的生长情况。这种方法需要一定的时间,通常需要24小时以上才能得出结果。  分子生物学方法: 包括聚合酶链式反应([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])、实时定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url](q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])等,这些方法可以更快速地检测出特定的基因序列,从而确定是否存在大肠杆菌。  快速测试方法: 一些现代的快速测试方法,如免疫层析试纸法(Lateral Flow Immunoassay)等,可以在短时间内提供初步的检测结果。  自动化检测设备: 在实验室和食品加工行业,一些自动化的微生物检测设备可能会用于大肠杆菌等微生物的检测,这些设备通常能够更快速、精确地进行检测。  当考虑是否购买或使用大肠杆菌检测仪时,您可能需要考虑以下因素:  准确性: 检测仪的准确性是关键,特别是在食品安全等领域,错误的结果可能导致严重后果。  速度: 检测的速度对于食品生产等需要及时结果的情况非常重要。  操作简便性: 设备是否易于使用和操作,是否需要专业技能。  成本: 设备的购买、维护和运行成本是需要考虑的因素之一。  适用范围: 不同的检测仪可能适用于不同类型的样本和环境,您需要确保选择的设备适合您的需求。  认证与标准: 确保设备符合相关的认证标准,以及在您所在领域被广泛接受和使用。  在考虑购买或使用任何检测仪器之前,云唐建议您进行充分的市场调研,了解不同设备的特点、优势和限制,并根据自己的实际需求做出决策。如果您有特定的产品名称或更多背景信息,我可以提供更具体的建议。[/size]

  • 培养基结核杆菌的固体培养基

    培养结核杆菌的培养基,从性状上分主要有固体培养基、液体培养基、半流体培养基、固液双相培养基等类型,这些培养基各有特点。  1.1 固体培养基 最常用的是罗氏(Lownstein-Jenson,L-J)培养基,也是最具代表性的一种,其他的还有小川辰次(Tatsujiogawa)鸡蛋培养基和Middle brook 7H10、7H11等琼脂培养基等。在固体培养基中,由于可以直接观察菌落的形态并可做鉴别用,因此常用于临床标本的分离培养、鉴别、保存菌种及对抗结核药物的敏感性测定等方面,缺点是结核菌生长缓慢。  1.2 液体培养基 常用的有苏通(Sauton)培养基、Middle brook 7H9等液体培养基。结核杆菌在液体培养基中能够更广泛的接触营养成分,因此在液体中生长相对较快,主要在液体表面生长,搅动时下沉至管底,可获得大量的结核杆菌。主要缺点是:在对临床标本的收集、采样、运输方面有不利的一面;不能根据肉眼观察菌落形态;培养基污染机会多,影响结核杆菌的生长,污染时不易与结核杆菌鉴别,需涂片染色镜检判断结核杆菌是否生长。  1.3 半流体培养基 改良苏通半流体琼脂培养基是一种人工综合培养基,基质透明,呈半流体状态,生长的结核杆菌形成白色颗粒状菌落悬浮于培养基中段,便于观察。  1.4 固液双向培养基 Septi-Check AFB双相培养基是国外应用较早的一种培养基,采用BD专利式封闭式固液双相一体化培养基设计。液相为Middle brook 7H9分枝杆菌专用增菌培养基,可迅速繁殖分枝杆菌,固相为3种固体培养基平面:Middle brook 7H11和改良的L-J培养基用于及时将增菌肉汤内分枝杆菌进行分离纯化以获得单个菌落,巧克力琼脂用于早期发现污染菌,避免时间浪费。由于有液相作为基础,因此结核杆菌生长较快,也是一种非常有效的培养基。国内有用平菇制备的平菇双相培养基是利用平菇浸出液为基础,加小牛血清、琼脂等成分而配制的一种培养基,根据琼脂的量不同制成液相、固相培养基。在国内应用较少,主要特点是成本低,制备简单,适合于基层使用,有一定的研究价值。

  • 【资源】大肠杆菌发酵经验总结

    大肠杆菌发酵经验总结首先,补料速率与比生长速率直接影响着乙酸的生成速率和积累量(主要是补料速率与比生长速率影响发酵液中的残糖量,进而影响),所以适当的控制补料速率和比生长速率,对于控制乙酸的量有很好的效果。 其次,必须要保证充足的溶氧,并严格控制pH值,而且补酸碱的速率尽量缓和,不能太快;温度对于蛋白的表达也有很重要的影响,较低的发酵温度下所生产出的蛋白大多是有活性的,而较高的发酵温度下产生的蛋白大多一包涵体形式存在。第三,选取合理的诱导时间非常重要,一般的诱导时间选在指数生长后期,而且诱导时的比生长速率最好能控制在0.2之内,选在此时诱导,1.将菌体的快速生长期与蛋白合成期分开,使这两个阶段互不影响,有利于蛋白的高表达;2.已经得到了大量的菌体,而且菌体的生物量基本接近稳定,不论是从动力学角度,还是能耗,物料成本方面,都比较合理。第四,补料过程中的碳氮比也很重要。若氮源过高,会使菌体生长过于旺盛,pH偏高,不利于代谢产物的积累,氮源不足,则菌体繁殖量少从而影响产量;碳源过多,则容易刑场较低的pH,抑制菌体生长,碳源不足,则容易引起菌体的衰老和自溶。另外,碳氮比不当还会引起菌体按比例的吸收营养物质,从而直接影响菌体的生长和产物的合成。 根据自己的经验,一般情况下,对于一个稳定的发酵工艺下,如果总是在固定的发酵时间段出现溶菌现象,而且能排除噬菌体和染菌的可能性后,那就可能是因为碳氮比不合理造成的。可以适当调整碳氮比。 大家讨论得较多的是关于代谢副产物乙酸对大肠杆菌发酵的影响,针对我们论坛所发的帖,我先总结以下几点,并作出相应解决措施。一、代谢副产物-乙酸乙酸是大肠杆菌发酵过程中的代谢副产物,在多大的浓度下产生抑制作用各种说法不一,一般认为在好气性条件下,5~10g/L 的乙酸浓度就能对滞后期、最大比生长速率、菌体浓度以及最后蛋白收率等都产生可观测到的抑制作用。当乙酸浓度大于10或20g/L 时,细胞将会停止生长,当培养液中乙酸浓度大于12g/L 后外源蛋白的表达完全被抑制。预防乙酸产生的措施: 1、通过控制比生长速率来减少乙酸的产生:比生长速率越高,乙酸产生越多,当比生长速率超过某个值时,乙酸开始产生。可以通过降低温度,调节酸碱度,控制补料等方法来降低比生长速率。 2、透析培养: 在大肠杆菌的培养过程中可以用透析技术除去发酵液中的有害物质,降低乙酸含量从而实现重组菌的高密度发酵和产物的表达。3、 控制葡萄糖的浓度:葡萄糖是大肠杆菌发酵过程中重要的碳源之一,用其作碳源是要将其控制在一个较低的水平上,以减少乙酸的产生。 常用的控制方法主要有: 恒pH法:大肠杆菌会代谢葡萄等产生乙酸,使pH 值下降。因此可通过pH值的高低作为控制葡萄糖的指标,该法的缺点是pH 的变化不完全是由葡萄糖代谢的结果,容易造成补料体系出错。 恒溶氧法:菌体代谢时会消耗氧,使溶氧下降,当葡萄糖浓度低到一定程度时菌体代谢下降,消耗氧能力下降,溶氧上升。因此,根据溶氧曲线补加葡萄糖,保持溶氧恒定,可以控制葡萄糖在一定的水平。 二、温度大肠杆菌发酵最适温度是37 C,当温度最适菌体生长时,比增长速率将会增大。随温度上升细菌代谢加快,其产生代谢副产物也会增加。这些副产物会对菌体的生长产生一定的抑制作用。菌体生长过快也会影响质粒的稳定性。降低培养温度,菌体对营养物质的摄取和生长速率都会下降。同时也减少了有毒代谢副产物的产生和代谢热的产生。有时降低温度更有利于目的蛋白的正确折叠及表达。在重组大肠杆菌的发酵中不同发酵阶段其最适温度也不 同,为了能获得大量的目的蛋白,首先要保证菌体的量,因此在前期可优先考虑菌体的生长,到诱导阶段应将目的产物的表达放在首位。三、培养方式 微生物的培养方式主要有分批、连续和补料分批3种。大肠杆菌发酵大多采用补料分批培养,这是在现代发酵工艺得到优化的一种方式,能有效的优化微生物培养过程中的化学环境。使微生物处于最佳的生长环境。这种方式一方面可以避免某些营养成分初始浓度过高出现底物抑制现象,另一方面能够防止限制性营养成分被耗尽而影响细胞的生长和产物的形成。补料分批培养已广泛应用于各种各样的初级、次级生物产品和蛋白等的发酵生产中。

  • 大肠杆菌指示菌的方法学定义

    总大肠菌群(Total Coliforms) 大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便,具有指标菌的一般特征故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。耐热大肠菌群(Thermotolerant Coliforms) ,原名:粪大肠菌群(Fecal Coliforms ) 用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开,在44.5℃仍能生长的大肠菌群,称为粪大肠菌群。是水体受人畜粪便污染的比较直接指标。大肠埃希氏菌(大肠杆菌,E.Coli.) 大肠埃希氏菌是指能产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培养液呈黄色,能产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的细菌。大肠埃希氏菌是粪大肠菌群的组成部分,是水体受人畜粪便污染的最直接指标,水中含有大肠埃希氏菌提示有粪便污染。

  • 大肠杆菌检测仪数据处理过程

    大肠杆菌检测仪数据处理过程

    [size=16px]  大肠杆菌检测仪数据处理过程  大肠杆菌检测仪数据处理过程包括以下步骤:  用去离子水通过蠕动泵清洗分析模块数次,以去除上次测量留下的样品和残留物。  开启蠕动泵对有样品的模块进行清洗,防止模块壁上的水稀释样品,可减少环境造成的误差。  使用MPN法自动定量和自动检测100ml水样中1-2419MNP(单位)的目标细菌。检测100ml水样中的活性大肠菌群和大肠埃希氏菌,假阴性率低。  单位试剂通过精确试剂抑制数百种异养细菌,假阴性低。检测时间不超过24小时,自动进样,自动分析,显示结果。  在整个检测过程中,大肠杆菌检测仪通过清洗、稀释、培养、计数等步骤对水样进行处理和分析,以得到准确的检测结果。在检测过程中,应注意操作规范,确保检测结果的准确性和可靠性。  以上信息仅供参考,如需了解更多信息,建议咨询相关领域的专业人士。另外,使用大肠杆菌检测仪时应按照说明书进行操作,并注意安全和卫生。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/12/202312130900045905_6476_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【分享】“大肠杆菌”正流行,生吃蔬菜有风险

    5月15日,德国下萨克森州一位83岁老妇发生严重的肠出血症状,被紧急送往医院。7日后,她在医院死去。谁也没有预料到,一场严重的疫情就此拉开序幕。短短几天时间,德国上下1000多名患者出现不同程度的肠出血、腹水和肾功能衰竭症状。截止5月31日,已经有14人死在病魔手中,他们被确诊为某种大肠杆菌感染。德国汉堡医学实验室通过细菌培养实验,在排除了土豆和莴苣之后,宣布西班牙进口黄瓜为罪魁祸首。不过很快,他们又发现这种黄瓜上虽然携带有大肠杆菌,但并不是引起德国本次疫情的那一种,还了西班牙黄瓜的清白。(西班牙政府昨天表示,正在考虑起诉德国汉堡市政府,后者的这次轻率举动使西班牙蔬菜出口遭到重创。)所以罪魁祸首到底是谁,仍然成谜。作为远在地球另外一边的中国人,面对细菌凶猛、黄瓜逆转的跌宕情节,我们不禁要问:大肠杆菌怎么突然变得来势汹汹?有什么严重的状况发生?我们要怎么办?

  • 【求助】微生物大肠杆菌测定为什么要先双倍再单倍、单倍?

    在GB/T 5750.12-2006微生物大肠杆菌测定中,先取10mL水样于10mL双料乳糖蛋白胨培养液中,取1mL水样接种到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中,在取稀释10倍的水样于10mL单料乳糖蛋白胨培养液中,每一稀释度接种管5管。那请教下大家, 为什么要先双倍再单倍、单倍,这样培养的区别在哪里?可不可以都用单倍或都用双倍或三倍?浓度高的培养基中为什么移取的水样要多点呢?请大家多多指教。我是新手。谢谢!

  • LB培养基

    什么是LB培养基?还有LB1,LB2培养基?一种是做大肠杆菌,一种做李斯特的,这两个的LB含义是什么?

  • 培养基中英文

    微生物常用培养基中英文对照一、显色培养基:大肠杆菌显色培养基 E.Coli Chromogenic Medium大肠菌群显色培养基 Coliform Chromogenic Medium大肠杆菌/大肠菌群显色培养基 E.Coli/Coliform Chromogenic Medium细菌总数显色培养基 Total Genes Chromogenic MediumO157显色培养基 O157 Chromogenic Medium沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium李氏菌显色培养基 Listera Chromogenic Medium金黄色葡萄球显色培养基Staphylococcus Chromogenic Medium霉菌和酵母菌显色培养基 Mould and Yeast Chromogenic Medium弧菌显色培养基Vibrio Chromogenic Medium坂崎杆菌显色培养基Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium二、常用检测培养基:平板计数琼脂(PCA) Plate Count Agar月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) Lauryl Sulfate Tryptose Broth煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB) Brilliant Green Lactose Bile BrothEC 肉汤 E.Coli Broth伊红美蓝琼脂 (EMB) Eosin-Methylene Blue Agar营养肉汤 (NB) Nutrient Broth营养琼脂 (NA) Nutrient Agar乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth乳糖发酵培养基 Lactose Broth结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) Violet Red Bile Agar去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar肠道菌计数琼脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar肠道菌增菌肉汤(EE) Enterobacteria Enrichment Broth7.5%氯化钠肉汤 7.5% Sodium Chloride BrothBaird-Parker琼脂基础 Baird-Parker Agar Base胰蛋白胨大豆肉汤(TSB) Trypticase (Tryptic) Soy Broth胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) Tryptose Soya Agar胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础 (TSC) Tryptose Sulfite Cycloserine Agar Base甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP)Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base亚碲酸盐卵黄增菌液 Egg-Yolk Tellurite Emulsion缓冲蛋白胨水(BPW) Buffered Peptone Water亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) Selenite Cystine Broth四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB) Tetrathionate Broth Base胆硫乳琼脂(DHL) Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose AgarSS 琼脂 Salmonella Shigella Agar亚硫酸铋琼脂(BS) Bismuth Sulfite Agar亚利桑那菌琼脂(SA) Salmonella Arizona AgarHE 琼脂(HE) Hekton Enteric Agar三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA) Potato Dextrose Agar高盐察氏琼脂 Salt Czapek Dox Agar沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar孟加拉红培养基 Rose Bengal MediumYPD琼脂Yeast Peptone Dextrose Agar胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base酪蛋白琼脂Casein Agar产芽孢肉汤Sporulation Broth溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 Glucase Peptone Water Medium李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础Listeria Enrichment Broth Base半固体动力培养基Motility Test三、培养基基础:胰蛋白胨Tryptone酪蛋白胨Peptone from Casein植物(大豆)蛋白胨Peptone from soy月示胨Proteose peptone多价蛋白胨Polypeptone特殊蛋白胨Peptone Special牛心浸粉Beef Heart Infusion肝浸粉Liver Infusion牛肉浸粉Beef Extract Powder酵母浸粉Yeast Extract Powder酸水解酪蛋白Casein acid Hydrolysate细菌琼脂粉Bacterial Agar牛胆盐Bile Salt

  • 大肠杆菌检测仪检测灵敏度高吗

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#05073b]大肠杆菌检测仪检测灵敏度高吗,大肠杆菌检测仪的检测灵敏度很高。具体地说,大肠杆菌检测仪器的灵敏度可以达到1CFU/mL(g),这意味着它可以检测到非常低浓度的目标微生物。这种高灵敏度使得该仪器在食品安全、环境监测等领域具有广泛的应用前景。此外,大肠杆菌检测仪通常还具备其他优势,如快速培养和高灵敏度创新检测方法,操作简便,无需任何前处理,全密闭检测系统安全无害,以及广泛的适用性。这些特点使得大肠杆菌检测仪成为一种高效、可靠的检测工具,能够有效地保障人们的健康和安全。请注意,虽然大肠杆菌检测仪的灵敏度高,但在使用过程中仍需注意正确操作和维护,以确保其准确性和可靠性。同时,不同型号和品牌的大肠杆菌检测仪可能在性能上存在差异,因此在实际应用中需要根据具体需求进行选择。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404111036138716_1852_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/color][/size][/font]

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