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海可素腙普拉睾酮二

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海可素腙普拉睾酮二相关的论坛

  • 普拉克索杂质信息

    普拉克索杂质A,B,C,D,E欧洲药典标准。进口注册标准中代码【BI-II751XX】 【BI-II786BS】 【BI-II820BS】BI-II 546 CL】常用杂质对照品

  • COTO标准品|艾普拉唑杂质研究

    艾普拉唑杂质是一种化学物质,它是艾普拉唑的同分异构体或相关化合物。艾普拉唑是一种质子泵抑制剂,用于治疗胃溃疡、十二指肠溃疡和反流性食管炎等疾病。COTO标准品是一种高纯度的标准物质,用于测定艾普拉唑及其杂质的纯度、含量和化学性质。通过与COTO标准品进行对比和分析,可以确定艾普拉唑及其杂质的结构、组成和含量,从而保证艾普拉唑的质量和安全性。在药物研发和生产过程中,COTO标准品的使用非常重要。它可以提供可靠的参照物,用于质量控制、药物分析和化学计量学研究。通过使用COTO标准品,可以确保艾普拉唑及其杂质的准确性和可靠性,为药物的安全性和有效性提供保障。总的来说,COTO标准品在艾普拉唑杂质的研究和控制中具有重要作用。通过使用COTO标准品,可以更好地了解艾普拉唑及其杂质的性质和含量,从而确保药物的安全和有效性。同时,也需要加强生产过程中的管理和监督,加强质量标准和监管措施的执行力度,确保药物质量和安全。

  • 有谁检测过普拉替尼 吗?

    有谁检测过普拉替尼 吗?

    各位大佬 检测过普拉提尼含量吗》? [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]出峰很好 但无法分离底物,,液相也是很难分离底物,[img=,286,227]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107241132332101_3417_3150699_3.png!w286x227.jpg[/img][img=,242,189]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107241131527937_2159_3150699_3.png!w242x189.jpg[/img]

  • 【讨论】恐怖,你还敢吃中成药吗?

    恐怖,你还敢吃中成药吗?(棒棒按:喜欢吃中药的善良的人们,请好好看看这篇文章.我到文中提供的官方网站求证了一下,文中资料可靠.那么,这个事实充分的表明了现代中医的极度无耻和道德败坏.) 作者:张家玮 中国国家食品药品监督管理局3月14日《关于公布含有兴奋剂目录所列物质药品名单的通知》(http://www.sfda.gov.cn/WS01/CL0055/28492.html),公布了含兴奋剂目录所列物质的中药品种名单,看了其中含有激素普拉雄酮的中成药有五百多个, 如果不是SFDA的公告还真不敢信这是真的。 普拉雄酮(prasterone), 去氧异雄甾酮,化学名称为 3 β-羟基雄甾 -5-烯-17-酮(androst-5-en-17-one, 3 β-hydroxy), CAS 登录号53-43-0, 是在人体肾上腺皮质中合成的 C19肾上腺甾类化合物, 有广泛的生理和病理生理作用, 是性激素的前体, 目前主要通过化学或生物合成生产原料药, 还没有看到过从动物或植物提取的产物, 因此中成药中所含有的普拉雄酮只能是生产中添加的化学原料药。以国家食品药品监督管理局发布通知要求有关中成药标示“运动员慎用”的指示, 普拉雄酮在药品中的成分比重应该是可以检测出, 否则就没有必要做服药警示了。 普拉雄酮的药理作用是同化激素类药物, 可松弛子宫颈管, 促进宫颈成熟,使宫口开大, 缩短分娩时间。 药物静脉注入后,经肝脏分解成脱氢表雄酮,再经一种特异化酶(得尔塔5,4异构酶)作用后转化为雄烯二酮,然后再经卵巢内芳香化酶作用转化为雌酮和雌二醇。雌激素和雄激素在血液中95%与性激素结合球蛋白(SHBG)或睾酮-雌二醇结合球蛋白(TeBG)特异结合。游离后与靶细胞特异受体结合后形成“活化”复合体,产生生物效应。主要用作妇产科用药。 在美国将普拉雄酮添加做口服的健康食品类的产品有不少, 但所用的物质大部分为普拉雄酮的肝代谢产物脱氢表雄酮(DHEA), 主要作用是延缓衰老和提供免疫力的健康食品。但美国的健康食品和药品有严格的界限, 就是食品不能做药品, 不能用于治疗, 也不允许称有治疗作用。 SFDA列举的含普拉雄酮的中成药有500多种, 有很多是婴幼儿用药, 这类药品有必要添加普拉雄酮吗?列举其中如:珠珀惊风散 珠珀保婴散(珠珀保婴丹) 育婴丸 婴宁散 小儿太极丸 小儿清凉止痒酊 小儿七珍丸 小儿暖脐膏 小儿牛黄散 小儿牛黄颗粒 小儿惊风七厘散 小儿惊风片 小儿健脾帖膏 小儿急惊散 小儿回春丸 小儿肺热平胶囊 儿童感热清丸 儿科七厘散。 这些不少是传统育儿必备药品, 在普拉雄酮没有大量生产的年代是不会添加的,但现在居然给这些婴幼儿用药加入同化激素, 到底会起到什么作用?几年前有报道京津地区小胖墩特多, 说不准就是由于用药含有同化激素造成的肥胖症。但对于婴幼儿用同化激素的成药处方药监部门没有规定吗? 查《中华人民共和国药典》2000版一部的七厘散, 其成分为血竭,乳香,没药,红花,儿茶,冰片,麝香,朱砂八味, 普拉雄酮是哪儿来的, 如果没有添加能在服食者的尿检中验出普拉雄酮吗? 如果加了药典处方成分以外的物质, 那这个药还是原来的药吗? 另外像安宫牛黄丸 同仁牛黄清心片 同仁大活络片 片仔癀 牛黄清心丸(局方)这些药为什么要加普拉雄酮, 起到什么作用? 恐怖, 普拉雄酮, 为什么你会出现在这些中成药里.

  • 药物的溶剂选择禁忌。

    不宜选择氯化钠注射液溶解的有:促进降解:洛铂。浑浊:普拉睾酮。沉淀:两性霉素B.红霉素用氯化钠或含有盐类时会白色浑浊或结块沉淀。哌库溴铵与氯化钠,氯化钾,氯化钙联合会降低疗效。氟罗沙星与氯化钠,氯化钙会结晶。

  • 跪求双氢睾酮检测方法

    请教各位高手,哪位做过人双氢睾酮的GC-MS测定?能不能把衍生化的具体方法,上机的各项参数分享一下,急用,先谢谢啦!邮箱:flyingzhu06@163.com,再次感谢!

  • 6β-羟基睾酮的质谱响应低

    6β-羟基睾酮的质谱响应低

    化合物:6β-羟基睾酮(分子量:304.42,CAS:62-99-7)结构:[img=,60,47]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211051027464265_8701_5307635_3.jpg!w602x472.jpg[/img]流动相:0.1%甲酸水,0.1%甲酸乙腈仪器:岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS8060,esi源在建立质谱方法时,Q3scan扫出来发现母离子的响应就很低(不进样时Q3scan在305就有响应,10ug/ml以下时,样品浓度升高305的响应几乎不变),仪器自动优化子离子时,样品浓度需要设置在10ug/ml才能优化出子离子(离子对与文献中一致),最后用建立好的方法进样,定量限根本无法满足我的要求。但是文献中已经有成熟的质谱方法,我做的与文献做的差别只在仪器上,文献用的质谱是API-4000,求问这种情况要怎么解释呢,真的是仪器的差别导致的吗?

  • 【谱图】水产品中甲基睾酮的检测问题

    最近由于所处为奥运城市,突然出现了一些甲基睾酮的检测样品,按照所谓的农业行标处理了半天,麻烦不说,在进样品时还发现了几乎所有样品(包括空白样品)都在目标峰位置出现一个很高的峰,怎么调整流动相比例都不行。不知那位高手在甲基睾酮方面做的比较好,请指点一二,在此叩谢了!

  • 【原创】固相萃取(SPE)应用实例汇集(16)---每天一例

    [font=黑体]尿液中的合成代谢类固醇类药物固相萃取净化方法[/font]1.样品预处理在尿液中加入内标物和2mLβ-葡萄糖醛酸酶( 5000F单位/mL)充分混合,在65℃条件下水解3h,处理前冷却,用1.0mol/L的KOH溶液调节pH值至6.0±0.5;2. SPE净化a. 活化:分别用3mL甲醇,3mL去离子水和1mL 100mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH6.0);在上样前保持柱床湿润;b. 上样:以1~2 mL/min的流速将样品载入SPE柱;c. 淋洗:用3mL10%(v/v)甲醇去离子水溶液淋洗,通空气5min干燥柱床;再用1mL的正己烷或者正己烷/乙酸乙酯( 50/ 500,v/v)淋洗SPE柱;d. 洗脱:可以选择如下四种方法,收集洗脱液;1) 3mL二氯甲烷/异丙醇/NH4OH( 78/ 80/ 2, v/v),溶剂流速控制1~ 2mL/min,收集洗脱液;洗脱液必须为当天制备的新鲜溶液 2)3mL二氯甲烷/异丙醇(80/20) 3)3mL乙酸乙酯 4)3mL甲醇。3.蒸发干燥4.衍生化加入50μL MSTFA(含有3%的碘化三甲基甲硅烷基),充分混合,70℃条件下反应 20min,冷却。5. Varian Saturn 2200 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-MS检测6. 样品成分睾丸激素19-noretiocholanon16-A-hydroxyetiocholanone康复龙普拉睾酮10-去甲睾酮康复龙代谢物1康复龙代谢物211-B-羟基睾丸激素去氢甲基睾丸素19-norandosterone16-A-表睾(甾)酮司坦唑醇方法中使用的SPE柱:Bond Elut Certify(130mg, 3mL,PN.12102051)。

  • 甲基睾酮

    有谁做过甲基睾酮在鱼肉中提取的实验吗?好提取吗,还用过spe小柱吗

  • 液质法测定丙酸睾酮

    [color=#444444]有没有人做食品中兽残丙酸睾酮的测定?[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]法测定时,色谱柱中一直有残留,洗不下来,有没有好的方法?我参考的是SN/T3235-2012,流动相用的0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸甲醇溶液[/color]

  • 【原创】【第三届原创参赛】辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定(ISO 7543-1标准翻译)

    【原创】【第三届原创参赛】辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定(ISO 7543-1标准翻译)

    辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定(ISO 7543-1标准翻译)阿拉山口检验检疫局技术中心 赵晶晶 贺国庆 中哈管道石油公司 常健辉 译第一部分:分光光度法前言:国际标准化组织(ISO)是由各国标准化团体(ISO成员团体)组成的世界性联合会。制定国际标准的工作通常由ISO的技术委员会完成,各成员团体若对某技术委员会确立的项目感兴趣,均有权参加该委员会的工作。与ISO保持联系的各国际组织(官方的或非官方的)也可参加有关工作。在电工技术标准化方面,ISO与国际电工委员会(IEC)保持密切合作关系。 由技术委员会通过的国际标准草案提交各成员团体表决,需取得至少75%参加表决的成员团体的同意,才能作为国际标准正式发布。国际标准ISO-7543-1由技术委员会ISO/TC 34 /农业食品产品/SC 7/调味品 制定。ISO 7543 辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定包括以下部分:第一部分:分光光度法第二部分:高效液相色谱法ISO 1994版权所有。除非特别规定,未经出版者的允许,任何印刷物的部分不得复制或以其他形式使用-电子或文字的(包括照片复制和微缩胶片)。国际标准化组织瑞士 Geneve CH-1211 56号邮政信箱瑞士印刷国际标准化组织版权所有2002年11月6日 星期三 13:15:2002辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定第一部分:分光光度法1 范围ISO 7543 标准规定了用分光光度法测定辣椒、辣椒粉和辣椒油中总辣椒素含量的方法。本方法的分析需用活性炭脱色。在某些实验条件下,如不进行脱色,则必须参考ISO 7543-21的高效液相色谱法来测定辣椒素含量。2 标准文献下列标准所包含的条文,通过在本标准中的引用而构成本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。IEC[/fon

  • 【求助】甲基睾酮过LC18柱

    我是用20mL甲醇来提取鱼肉中的甲基睾酮,取5mL提取液+5mL水混和过LC18柱(预先用3mL甲醇和3mL水活化),用甲醇和水淋洗,最后最甲醇洗脱。你们说这种方法行不?甲基睾酮会被保留而最终洗脱下来吗?

  • 求助食品中甲基睾酮的测定方法

    最近按照水产行业标准测定水产品中甲基睾酮的含量,发现按照标准去做,效果不好,方法回收率较低,请问大家有什么好的方法吗?非常感谢

  • 【讨论】阳宗海污染事件

    中广网昆明9月23日消息 (记者 陈鸿燕) 千里之堤,溃于蚁穴。近三个月以来,由于砷浓度严重超标,昆明阳宗海水质已经由Ⅱ类急速降为了劣五类。1998年之前,阳宗海水质长期保持在Ⅳ类;此后,有关部门取缔阳宗海网箱养鱼、取缔机动渔船、取缔温水鱼塘、取缔岸边面山采石场、取缔畜禽养殖场;与此同时,投资2500多万建立了阳宗海环湖截污管道和污水处理厂,杜绝一切生活和工业用水直接进入阳宗海,在阳宗海东岸建立生态修复工程;在阳宗海入湖河道建设环保旱厕和垃圾池…… 2001年,阳宗海水质从Ⅳ类恢复到Ⅱ类。然而,一边是政府投巨资倾力治理,一边是少数企业偷偷排污。如今,阳宗海沿湖的7个村子和相关企业随处可见“三禁”告示牌,写着“禁止饮用阳宗海的水,禁止用阳宗海的水游泳和洗浴,禁止捕捞阳宗海的水产品。”以“海边”命名的宜良县汤池镇海边村村民如今每天的生活用水只能靠政府送来的桶装清洁水。这个毗邻阳宗海的村庄,在这里居住的村民祖祖辈辈都喝阳宗海的水,以阳宗海清澈的水而自豪。即便是现在,阳宗海仍然是湖面波光粼粼,湖水清冽顺着沟渠流淌。村民们对“禁止游泳”和“禁止取水”兴趣不大,而对“禁止捕鱼”,村民们则非常懊恼。许多村民靠捕鱼为生,打鱼的收入占到90%以上。如果不捕鱼,家庭经济来源就要面临危机。据调查,阳宗海沿岸有上千人靠渔业为生。三禁,他们被迫收拾渔具上岸,生活来源成为他们目前面临的最大难题。

  • 【分享】GB-T_21981-2008_动物源食品中激素多残留检测方法专用标样

    “奶粉疑致性早熟”事件已经给我们敲响警钟,若从食物中摄入过量激素,将会严重损害人体健康,因此食物中激素检测日益重要。GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法,用液相色谱- 质谱/ 质谱法,对猪肉、猪肝、鸡蛋、牛奶、牛肉、鸡肉和虾等动物源食品中50种激素残留进行检测,确保食物安全。为支持《GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法》及《农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱-串联质谱法》需求,百灵威现为专业分析研究者提供该国标涉及的各项标准品、配套产品。★ 标准品CAS 英文名 中文名734-32-7 (+)-19-Norandrost-4-ene-3,17-dione 去甲雄烯二酮10161-33-8 Trenbolone 孕三烯酮846-48-0 Boldenone 勃地酮76-43-7 Fluoxymesterone 氟甲睾酮434-22-0 19-Nortestosterone 诺龙 63-05-8 4-Androstene-3,17-dione 雄烯二酮72-63-9 Methandrostenolone 美雄酮58-22-0 Testosterone 睾酮53-43-0 Dehydro epiandrosterone 普拉雄酮58-18-4 17-alpha-Methyltestosterone 甲基睾酮481-29-8 Epiandrosterone 表雄甾酮10418-03-8 Stanozolol 康力龙521-18-6 5alpha-Androstan-17beta-ol-3-one 双氢睾酮1424-00-6 mesterolone 甲氢睾酮17230-88-5 Danazol 达那唑68-22-4 Norethindrone 炔诺酮64-85-7 21-Hydroxyprogesterone 去氧皮质酮68-96-2 17-alpha-Hydroxyprogesterone 17-α-羟基孕酮797-63-7 D-(-)-Norgestrel 左炔孕酮520-85-4 Medroxyprogesterone 甲孕酮595-33-5 Megestrol acetate 乙酸甲地孕酮302-22-7 Chloromadinon 17-acetate 氯化孕酮-17-乙酸酯57-83-0 Progesterone 孕酮,黄体酮71-58-9 Medroxyprogesterone-17-acetate 安宫黄体酮/醋酸甲羟孕酮124-94-7 Triamcinolone 曲安西龙52-39-1 Aldosterone 醛固酮53-03-2 Prednisone 泼尼松53-06-5 Cortisone 可的松50-23-7 Hydrocortisone 氢化可的松50-24-8 Prednisolone 泼尼松龙/氢化泼尼松 2135-17-3 Flumethasone 双氟美松50-02-2 Dexamethasone 地塞米松514-36-3 Fludrocortisone acetate 醋酸氟氢可的松83-43-2 6-alpha-Methylprednisolone 甲基泼尼松龙4419-39-0 Beclomethasone 倍氯米松76-25-5 Triamcinolone acetonide 曲安奈德67-73-2 Fluocinolone acetonide 氟轻松426-13-1 Fluorometholone 氟甲松龙51333-22-3 Budesonide 布地奈德25122-46-7 Clobetasol propionate 丙酸氯倍他索50-27-1 Estriol 雌三醇/1,3,5(10)-三烯-3β,16α,17β三醇50-28-2 17-beta-Estradiol β-雌二醇/β-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二醇 57-63-6 17α-Ethinylestradiol 17α-炔雌醇53-16-7 Estrone 雌酮56-53-1 Diethylstilbestrol 己烯雌酚84-16-2 Hexestrol 己烷雌酚/去氢己烯雌酚/4,4'-(1,2-二乙基亚乙基)二苯酚 84-17-3 Dienestrol 双烯雌酚/己二烯雌酚/2,3-二苯酚丁二烯N/A Norgestrel-D6 炔诺孕酮-D6N/A Progesterone-D9 孕酮-D9N/A Megestrol acetate-D3 甲地孕酮醋酸盐-D3162462-69-3 Medroxyprogesterone-D3 甲羟孕酮-D3N/A Norethindrone-ethynyl-13C2 炔诺酮-13C2869287-60-5 Methandrostenolone-D3 甲睾酮-D3N/A Boldenone 17-Sulfate-D3 勃地酮-D373565-87-4 Cortisol-9,11,12,12-D4 可的松-9,11,12,12-D453866-34-5 Estrone-D4 雌酮-D4N/A Hexestrol-D4 己烷雌酚-D4N/A Testosterone-3,4-13C2 睾酮-3,4-13C2N/A Estradiol-3,4-13C2 雌二醇-3,4-13C2N/A Diethylstilbestrol--D8 己烯雌酚-D8★ 配套产品CAS 英文名 中文名67-56-1 Methanol ,99.9% [HPLC/ACS] 甲醇75-05-8 Acetonitrile ,99.9% [HPLC/PREP] 乙腈75-09-2 Dichloromethane, stabilized with amylene, for HPLC, 99.8% 二氯甲烷7732-18-5 Water, for HPLC gradient grade 水64-19-7 Acetic acid, for analysis, 99.8% 乙酸64-18-6 Formic acid, for analysis, 99+% 甲酸9001-45-0 B-GLUCURONIDASE TYPE IX-A FROM E. COLI BETA-葡萄糖醛酸甙酶25561-30-2 N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide ,98% N,O-双(三甲基硅烷基)三氟甲基乙酰胺12252201 BOND ELUT CARBON, 500MG, 6ML, 30/PK 石墨化碳黑SPE小柱12256045 MEGA BE-NH2, 500MG 6ML, 30/PK NH2氨基SPE小柱1634-04-4 tert-Butyl methyl ether, for HPLC 叔丁基甲基醚MtBE497-19-8 Sodium carbonate, anhydrous, powder, for analysis, 99.8% 无水碳酸钠

  • 【求助】HPLC检测甲基睾酮的方法

    哪位朋友用HPLC做过甲基睾酮啊,能不能告诉我一下方法。我有水产行业的标准(SC/T 3029-2006),但是前处理太麻烦了,想问问大家有没有别的方法,前处理简单一些的。谢谢!!

  • 测定动物肌肉组织和鸡蛋中残留的11种甾体激素类药物

    测定动物肌肉组织和鸡蛋中残留的11种甾体激素类药物

    测定动物肌肉组织和鸡蛋中残留的11种甾体激素类药物甾体化合物具有一个四环的(A、B、C、D)母核,这个母核像“田”字,并且在C10和C13处各有一个角甲基,在C17处有一侧链,这样在母核上的三个侧链像“巛”字,“甾”字十分形象的表示了这类化合物。它们能促进畜禽生长,提高饲料转化率,有利于蛋白质的沉积,在畜牧业养殖中经常使用。但蛋白同化激素在动物食品中的残留可能会危及消费者的健康,具有潜在的致癌性。我国农业部于2002年发布的第235号文件中规定丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、甲睾酮、群勃龙等在动物性食品中的最高残留限量为不得在动物性食品中检出”。因此,检测可食性动物源食品中蛋白同化类激素及其代谢产物残留量是一项重要的指标。本实验建立了同时检测猪、牛、羊及鸡的肌肉组织与鸡蛋中睾酮、甲基睾酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙等10种蛋白同化激素类药物和孕激素黄体酮残留量的快速方法。1.1仪器与试剂ACQUITYlM超高压液相色谱仪和Micromass—Quattro Premier质谱仪(美国Waters公司)。睾酮(testosterone)、甲基睾酮(methyltestosterone)、黄体酮(progesterone)、群勃龙(trenbolone)、勃地龙(boldenone)、诺龙(nandrolone)、美雄酮(大力补,methandienone)、司坦唑醇(康力龙,stanozol01)、丙酸诺龙(nandrolone propionate)及丙酸睾酮(testosterone propionate)对照品购自德国Dr.Ehrenstoffer公司;苯丙酸诺龙(nadrolone phenylpropionate)对照品购自中国兽药监察所。叔丁基甲醚、乙腈、甲醇均为色谱纯(德国Merck公司);甲酸和碳酸钠均为分析纯(广州化学试剂厂);水为超纯水。1.2储备液的制备准确称取适量的睾酮、甲基睾酮、黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙,用甲醇分别配制成l g/L的单标准溶液及10 mg/L的混合标准溶液,冰箱中保存,备用。1.3色谱-质谱条件1.3.1色谱条件色谱柱:Ultimate XB-C18 4.60×250mm,5 um .Part Number 00201-31043 Serial Number 211302350.流动相:A相为0.1%甲酸水溶液,B相为0.1%甲酸乙腈溶液;梯度洗脱程序:0—5.0 min,50%B--,90%B;5.O一7.0 min,90%B;7.O一7.5 min,90%B一50%B;7.5—10.0 min,50%B;流速:0.3 mL/min。柱温:室温。进样体积:lo斗L。1.3.2质谱条件离子源:电喷雾离子源(ESI),电压3 200 V,温度300 oC。扫描方式:正离子模式。检测方式:多反应监测(MRM)。脱溶剂气、锥孔气均为高纯氮气,流速分别为600,20 L/h;碰撞气为高纯氩气,压力为0.36 Pa(3.6×lO—mbar)。锥孔电压、碰撞能量及定性离子对、定量离子对等参数见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507021634_553131_2433088_3.png 1.4试样制备称取约500 g猪、牛、羊或鸡肌肉组织,切碎后匀浆备用;取10枚鲜鸡蛋,去壳,均质备用。1.5样品前处理称取5 g均质试样(精确至0.01 g),置于50mL离心管中,加入叔丁基甲醚25 mL。于10 000r/min均质30 S,振荡10 min;于4℃、6 000 r/min条件下离心10 min,上清液转移至100 mL梨形瓶中,残渣中再加入20 mL叔丁基甲醚振荡提取一次。合并离心后的上清液,并用旋转蒸发仪于45℃水浴中蒸发至干。加人流动相A与B(体积比为1:1)混合溶液2.0 mL,超声溶解残渣,予一20℃冰箱中放置30 min,取适量溶液于16 000 r/min下离心5 min,上清液过O.22斗m针头滤膜,滤液供测定。 1.6标准曲线的绘制空白试样按照“1.5”节方法处理,取适量空白上清液加入不同量的蛋白同化激素标准储备液,配制成1,2,4,10,20及100斗g/L的基质空白标准溶液,混匀后进样。以待测物色谱图的峰面积为纵坐标,相应待测物质量浓度为横坐标,进行回归运算,求得直线回归方程。1.7回收率试验添加质量浓度为50,100,500斗g/L的混合标准工作液0.1 mL,制得1,2,10斗g/kg添加水平的样品,按上述方法处理,测定回收率。1.8检出限与定量限的测定取适量混合标准工作液,制得0.2,0.3,0.4,0.5斗g/kg添加水平的样品,按“1.5”节所述方法处理,以最低检出浓度计算,3倍信噪比为检出限,10倍信噪比为定量限。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509101132_565576_2433088_3.png 11种甾体激素类药物的RMR离子流图(10 ug/L)

  • 【金秋计划】青蒿素类衍生物可治疗多囊卵巢综合征及其机制

    [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种普遍存在的生殖内分泌疾病,全球发病率约为10%-13%。其特征是高雄激素血症、排卵功能障碍、多囊卵巢形态,并且通常伴有代谢紊乱。雄激素升高是驱动PCOS表型特征的关键因素。尽管多囊卵巢综合征的患病率很高,但针对这种复杂综合征的药物干预仍面临巨大挑战。目前可用于PCOS的治疗方案有限,主要针对特定症状的管理。因此,迫切需要制定创新的治疗策略。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]青蒿素是植物来源的化合物,作为疗效稳定且副作用小的一线抗疟疾药物而闻名,但也被证明具有一些有益的代谢作用。复旦大学汤其群教授团队早期系统筛选了促进白色脂肪棕色化的小分子化合物,发现青蒿素类衍生物能够激活产热脂肪细胞来增强能量消耗和胰岛素敏感性的能力,从而防止饮食引起的肥胖和代谢紊乱(Cell Research,2016)。青蒿素在啮齿动物PCOS样模型和人类PCOS患者中的治疗潜力及机制尚不清楚。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2024年6月14日,复旦大学附属中山医院汤其群教授团队在Science(IF=56.9)发表题为“Artemisinins ameliorate polycystic ovarian syndrome by mediating LONP1-CYP11A1 interaction”的文章,发现青蒿素类衍生物能够显著改善PCOS的疾病表型。机制上,青蒿素能够靶向线粒体蛋白酶LONP1,促进LONP1与其底物CYP11A1的结合,加速CYP11A1的降解,抑制卵巢雄激素的合成,降低PCOS患者的雄激素水平,改善月经周期及卵巢多囊样变。该研究证明青蒿素还可以缓解多种啮齿动物模型和人类患者中多囊卵巢综合征的内分泌表现,这表明了一种治疗这种内分泌疾病多个方面的潜在方法。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、在啮齿类动物模型中,蒿甲醚(ATM)对PCOS样表型有抑制作用[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]为了评估青蒿素对PCOS发展的影响,作者首先使用脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS样小鼠模型,并同时给药发现蒿甲醚(artemether,ATM,一种青蒿素),发现ATM可以消除DHEA处理小鼠血清中升高的睾酮,从而防止PCOS样特征,改善DHEA引起的发情周期中断,改善卵巢异常形态。在观察到预防效果的基础上,作者评估ATM的治疗效果。在建立DHEA诱导的PCOS样模型后,通过腹腔注射不同剂量的ATM处理小鼠,发现ATM降低血清睾酮,恢复正常的发情周期,抑制子宫水肿,并显著减少卵巢囊泡(图1)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]接下来,作者在大鼠模型中研究了ATM的抗PCOS作用,发现腹腔注射ATM足以使PCOS样大鼠的血清睾酮水平降至与对照大鼠相似的水平,并缓解被打乱的发情周期。卵巢组织学分析显示ATM逆转了DHEA处理大鼠的低排卵表型。在注射胰岛素和hCG(两者都是雄激素产生的强效诱导剂)建立的另一个PCOS样大鼠模型中,这一发现得到了进一步验证综上所述,在啮齿类动物模型中,ATM治疗改善了PCOS的主要特征,包括血清睾酮水平升高、发情周期不规则、多囊卵巢形态和低生育能力(图2)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、青蒿素抑制卵巢中的甾体生成和睾酮产生[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]ATM引起的睾酮急剧下降促使作者探索青蒿素在调节雄激素合成中的作用。发现在PCOS样模型中,无论是腹腔还是口服,ATM均未显示出对促卵泡激素(FSH)和黄体生成素(LH)的影响。作者猜测青蒿素通过靶向卵巢调节睾酮水平,发现ATM显著抑制卵巢间质细胞中睾酮的产生。同样,SM934,也是一种青蒿素类似物,显示出与ATM诱导的睾酮水平相当的抑制作用。除了降低睾酮,ATM和SM934还明显降低孕烯醇酮、孕酮和17a-OHP,这些都是卵巢甾体生成的中间体和睾酮的前体,这一观察结果被另一种青蒿素衍生物青蒿琥酯(ATS)进一步验证。这些数据强烈表明,青蒿素抑制卵巢膜间质细胞的类固醇生成过程和随后的雄激素合成(图3A-3I)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、青蒿素通过降低CYP11A1来限制睾酮的产生[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]为了揭示青蒿素诱导雄激素合成减少的细胞途径,作者对分离的卵巢间质细胞进行蛋白质组学分析,发现CYP11A1是ATM诱导下调最显著的蛋白,CYP11A1催化胆固醇向孕烯醇酮的转化,这是类固醇激素生物合成的第一步,ATM对CYP11A1的下调与前面观察到的青蒿素抑制雄激素合成相一致。作者接着在大鼠和小鼠卵巢间质细胞和PCOS样小鼠卵巢中验证了青蒿素剂量依赖性地下调CYP11A1蛋白,而不影响HSD3B2和CYP17A1。接下来,作者发现补充孕烯醇酮(CYP11A1催化反应的产物)或者过表达CYP11A1挽救了青蒿素处理细胞中下降的睾酮,而CYP11A1表达被破坏后青蒿素无法进一步降低睾酮的产生,表明上调和下调CYP11A1决定了睾酮的产生,青蒿素通过CYP11A1影响睾酮的产生(图3J-3O)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、青蒿素介导LONP1和CYP11A1之间的相互作用[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者接着探索青蒿素调节CYP11A1的机制。发现青蒿素诱导的蛋白水平降低,但Cyp11a1的mrna不受青蒿素的影响,表明青蒿素有转录后调控作用。随后,作者检测了CYP11A1的稳定性,发现ATM和SM934明显缩短了CYP11A1蛋白的半衰期。进一步研究表明,蛋白酶抑制剂MG132挽救了ATM和SM934诱导的CYP11A1下调,这共同表明青蒿素通过抑制其蛋白稳定性来降低CYP11A1水平(图4)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]为了确定导致青蒿素诱导的CYP11A1不稳定的介质,作者应用IP-MS来鉴定ATM或SM934治疗下CYP11A1的相互蛋白,确定了两个候选蛋白在ATM和SM934均存在,co-IP验证发现其中的LONP1蛋白(一种线粒体蛋白酶,在线粒体蛋白质质量控制中至关重要)为目标蛋白,通过ATM和SM934诱导,LONP1和CYP11A1之间的相互作用显著增强。此外,LONP1过表达显著下调CYP11A1,这些数据表明,LONP1而不是TFG可能参与调节CYP11A1蛋白水平。内源性co-IP进一步证实,ATM和SM934增强了LONP1和CYP11A1之间的结合亲和力。综上所述,这些数据强烈表明,青蒿素增强了CYP11A1-LONP1的关联,就像“分子胶”一样,是一类诱导或稳定蛋白质之间相互作用的小分子。接下来,通过分子对接预测了LONP1和CYP11A1的结合位点,蛋白突变验证了CYP11A1中F252-T259区域对于CYP11A1-LONP1相互作用至关重要(图4)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、LONP1促进CYP11A1降解,抑制睾酮合成[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]在确定了青蒿素增强了CYP11A1-LONP1的相互作用之后,作者试图研究LONP1在青蒿素诱导的CYP11A1降解中的作用。发现LONP1过表达降低了CYP11A1水平,MG132挽救了CYP11A1水平,MG132是一种蛋白酶抑制剂,也能够抑制LONP1。这些结果与上述数据一致,表明MG132可以恢复青蒿素引起的CYP11A1下降。此外, CDDO-Me(LONP1抑制剂)逆转了ATM引起的CYP11A1表达降低,敲低LONP1完全逆转了ATM诱导的CYP11A1下降。而催化失活的LONP1 (LONP1-S844A) 没有像WT LONP1那样降低CYP11A1的表达或缩短CYP11A1蛋白的半衰期,说明LONP1通过其蛋白酶活性降低了CYP11A1(图5)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]为了证实LONP1是否直接介导了CYP11A1的下调,作者使用纯化的CYP11A1和LONP1蛋白进行了体外蛋白酶测定,发现ATM促进了LONP1催化的CYP11A1降解,而在缺乏LONP1或ATP的情况下,ATM对CYP11A1没有影响。此外,CYP11A1 (DF252-T259)的突变体形式未能与LONP1结合,对青蒿素诱导的下调表现出抗性。这些观察结果共同支持了LONP1在介导青蒿素诱导的CYP11A1下调中不可或缺的作用。接下来,作者评估了LONP1对卵巢雄激素合成的影响,发现LONP1的过表达下调了CYP11A1蛋白,进而降低孕烯醇酮、孕酮、17a-OHP和睾酮水平。通过腹腔注射AAV-LONP1在小鼠卵巢中过表达LONP1。结果显示,LONP1降低了CYP11A1同时抑制了血清睾酮。这些数据共同表明,LONP1的过表达复制了青蒿素降低雄激素的作用(图5)。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、LONP1是青蒿素的直接靶点[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]然后,作者试图确定青蒿素是否直接靶向LONP1或CYP11A1。通过生物素标记的青蒿素进行Pulldown实验证实了bio-ATS有效地降低了CYP11A1,进一步发现bio-ATS对LONP1蛋白而不是CYP11A1具有结合亲和力。游离ATS、ATM或SM934的竞争以及实验热稳定性实验同样表明LONP1,而不是CYP11A1,是青蒿素的直接靶点。进一步分子对接确定了青蒿素与靶点的结合模式。SPR和蛋白突变实验证实青蒿素对CYP11A1水平的抑制作用很大程度上依赖于其与LONP1蛋白水解结构域的结合。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、双氢青蒿素治疗多囊卵巢综合征的疗效观察[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]最后,作者进行了一项试点临床研究,以验证青蒿素治疗多囊卵巢综合征患者的疗效。19例PCOS患者口服双氢青蒿素治疗12周,发现双氢青蒿素治疗显著降低了PCOS患者的血清睾酮。血清AMH水平与生长卵泡的数量密切相关,因此在PCOS患者中通常升高,而双氢青蒿素治疗显著降低了血清AMH。与这一结果一致的是,超声检查发现,双氢青蒿素治疗后,窦腔卵泡计数明显减少。63.16%的PCOS患者恢复了正常的月经周期。结果表明双氢青蒿素可有效改善PCOS患者高雄激素血症,改善多囊卵巢形态,促进月经正常。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]在这项研究中,作者将青蒿素确定为抗PCOS药物研究结果证明了青蒿素衍生物在缓解啮齿动物模型和人类患者的PCOS症状方面的功效,通过抑制卵巢雄激素合成来抑制高雄激素血症。青蒿素促进CYP11A1蛋白降解以阻止雄激素过量产生。从机制上讲,青蒿素直接靶向LONP1,增强了LONP1-CYP11A1相互作用,并促进了LONP1催化的CYP11A1降解。LONP1 的过表达复制了青蒿素的降雄激素作用。研究数据表明,青蒿素的应用是治疗多囊卵巢综合征的一种有前途的方法,并强调了LONP1-CYP11A1相互作用在控制高雄激素血症和多囊卵巢综合征发生方面的关键作用。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size]

  • 【转帖】当杰克逊的真相浮出 我们应该愧疚

    转自人民日报乔迪-钱德勒终于承认自己说谎了!杰克逊的离世让这位当年娈童案事件的主人公深感愧疚。他在自己的博客中承认,当年对杰克逊猥亵自己的指控纯属编造,并郑重地向杰克逊表示道歉。他称自己是为了父亲才撒谎的,而父亲则是为了摆脱贫困的生活而制造了这个骗局。乔迪的忏悔引发人们和媒体转而去探寻和揭发几十年来一直困扰迈克尔-杰克逊的各种丑闻背后的事实。于是,接下来一个个真相陆续呈现在公众眼前。杰克逊并非媒体报道的漂白皮肤背离种族,他患有一种很严重的叫做“白癜风”的皮肤病,导致黑色素大量流失,皮肤会不断出现大面积白色的斑块;他从来没有虐待儿童,当年的“高空抛婴”事件也并非媒体所报道的那样,杰克逊只是为了满足楼下歌迷要求抱孩子给他们看。他的孩子们脸上总包着纱巾是为了防止被绑架而采取的措施……此时,这些真相的出现对于已经离世的杰克逊和那些热爱他的人们而言来得太晚了,但也许会让那些曾经乐于制造谎言和追逐报道这些虚假的丑闻的媒体和播散流言的人们反思和愧疚。其实,他们应该也必须感到愧疚!当处于舆论漩涡中时,迈克尔-杰克逊对媒体有着极度的抗拒。在他的档案里,最讨厌的事物一栏赫然写着:小报。这个在镁光灯下成长起来的巨星,始终无法与媒体“成为朋友”。而这种关系的形成并非是偶然的。自20世纪80年代攀上流行音乐的巅峰之后,迈克尔-杰克逊一直深受各种丑闻困扰,人们不断从媒体上看到他越来越白的皮肤、塌陷的鼻子,以及总是带着口罩的脸、无休止的整容让他陷入破产、乱性、违约等传闻和官司,形象一落千丈。而这其中,卷入娈童案可谓其最被诟病的污点。1993年,杰克逊娈童案震惊了全世界,当时曾经辉煌耀眼的天王巨星顷刻间沦为千夫所指的“恶魔”。此案当时闹得沸沸扬扬,虽然最终以庭外和解、杰克逊付给乔迪-钱德勒2200万美元为结局,但媒体以及外界带来的压力让迈克尔-杰克逊精神上备受折磨,也就是从那时候起,他开始过分依赖止痛药。1993年的娈童指控和随之而来的争议仅仅是开始,2005年那场娈童诉讼案,才彻底将迈克尔-杰克逊拖进事业以及情绪的深渊。那段日子对他而言极其艰难,每一天里,杰克逊都会身着不同的服饰,出现在加州圣塔玛利亚法庭狭小的审判厅里,去聆听一个接一个的证人陈述,这折磨着他脆弱不堪的神经。漫长的噩梦之后,迈克尔-杰克逊被判无罪,从此,他没有再邀请过任何儿童到庄园做客。1993年,美国脱口秀女王奥普拉-温弗瑞终于说服杰克逊接受自己的专访。当时,关于整容、换肤以及各梦幻庄园的各种谣言正在甚嚣尘上,他第一次向人们敞开心门。“自从我打破唱片纪录开始——我打破了猫王的纪录,我打破了披头士的纪录——然后呢?他们叫我畸形人,同性恋者,性骚扰小孩的怪胎!他们说我漂白了自己的皮肤,做一切可做的来诋毁我,这些都是阴谋!当我站在镜前时看着自己,我知道,我是个黑人!”杰克逊说。作为继奥普拉之后第二个也是最后一个专访迈克尔-杰克逊的人,美国电视台主持人比利-布什后来在自己的博客上回忆了这一生难忘的采访经历。“两个小时里,他面对镜头最终也没有放松下来。他背负着痛苦,不胜其累。”而如今,已经在天堂的迈克尔-杰克逊终于可以远离是非纷争,不用再背负痛苦了。然而,在杰克逊离世后,人们才开始在各个媒体上不断看到在他生前那些从未被关注的事实:杰克逊是全世界艺人中慈善贡献最大的,他一个人支持了世界上39个慈善救助基金会……如果,如果在杰克逊生前,那些媒体和人们不是一味只关注制造谎言和追逐报道虚假的丑闻,也许他的人生会是另一个结果。[责任编辑:celiawu]

  • 克拉霉素欧洲药典标准检测色谱柱使用问题?

    目前我们实验室按欧洲药典标准检测克拉霉素含量、有关物质,所用的色谱柱是欧洲药典推荐的一款色谱柱:Kromasil 100-3.5-C18 100*4.6 ,目前该色谱柱使用寿命很短,一般不到100小时,请生产厂家在中国的代理商到实验 室指导也未找到问题所在,求助各位大侠问题可能出在哪里?或推荐相同规格能满足欧洲药典检测克拉霉素要求的色谱柱。

  • 如何绘制二硫腙比色法测定食品中微量元素的标准曲线

    如何绘制二硫腙比色法测定食品中微量元素的标准曲线 一、准备工作 试剂与仪器首先,要准备好标准微量元素溶液。这就好比我们有了不同刻度的尺子,用来确定微量元素的量。例如,如果要测定铅元素,就准备已知准确浓度的铅标准溶液。同时,还需要二硫腙溶液,这是能和微量元素发生反应显色的关键试剂。另外,缓冲溶液也不能少,它可以调节溶液的酸碱度,因为反应对酸碱度有要求。还有,要准备好干净的比色管、移液管和分光光度计等仪器。标准溶液浓度系列接下来,我们要配制一系列不同浓度的标准微量元素溶液。比如,我们可以取适量的原始标准溶液,用合适的溶剂(像蒸馏水之类的)进行稀释。例如,配制浓度为 0 微克 / 毫升、0.1 微克 / 毫升、0.2 微克 / 毫升、0.3 微克 / 毫升、0.4 微克 / 毫升、0.5 微克 / 毫升的铅标准溶液。这一步就像是准备了不同重量的砝码,用来做比较。二、反应操作 加样到比色管拿几个干净的比色管,分别标记好。然后用移液管准确地吸取不同浓度的标准溶液,比如说每个比色管里都加入 10 毫升的标准溶液。这就像是给不同的杯子里倒入不同量的水,但这里是不同浓度的微量元素溶液。调节酸碱度在每个比色管里加入适量的缓冲溶液,来调节溶液的 pH 值。不同的微量元素测定可能要求不同的 pH 值。以铅元素为例,可能需要把 pH 值调节到 8 - 9 左右。这一步很重要,就像厨师做菜要控制好火候一样,酸碱度不合适会影响后面的反应。调节的时候要慢慢加缓冲溶液,边加边用 pH 试纸或者 pH 计测量,确保达到合适的 pH 值。加入二硫腙溶液并反应接着,向每个比色管里加入等量的二硫腙溶液,比如每个比色管加入 2 毫升。然后把比色管的塞子盖好,轻轻地摇晃比色管,让溶液充分混合均匀,使微量元素和二硫腙充分反应。反应的时间可以根据实际情况,一般摇晃几分钟就可以了。这个过程就像是把颜料和水混合,让它们发生作用。三、测量与绘制曲线 测量吸光度反应完成后,把比色管里的溶液倒入比色皿中。先把分光光度计的波长调节到合适的值(这个波长是根据微量元素和二硫腙反应的特性确定的,比如测定铅时波长可能是 510nm)。然后用空白溶液(就是浓度为 0 微克 / 毫升的标准溶液反应后的溶液)对比色光度计进行调零。之后,依次把其他比色皿中的溶液放入分光光度计中,测量它们的吸光度。绘制标准曲线最后,我们把测得的吸光度数据和对应的标准溶液浓度整理出来。以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,在坐标纸上或者用绘图软件画出这些点,然后用直线把这些点连接起来。这样,一条标准曲线就绘制完成了。这条曲线就像一把尺子,以后我们测量食品中的微量元素含量时,只要测出吸光度,就可以根据这条曲线算出微量元素的浓度了。

  • 【原创】同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮

    [size=4][color=#DC143C][font=黑体]同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮[/font][/color][/size]=========================================在所使用的禁用物质中,类固醇激素是较为普遍使用的一类药物。人体自身能合成与分泌的类固醇激素称为内源性类固醇激素,如攀酮。由于在检测方法上有一定难度,一些运动员选择使用内源性类固醇制剂以逃避兴奋剂检测。目前,兴奋剂检测实验室应用同位素比质谱分析方法检测内源性类固醇来源。13C和12C是碳元素在自然界中的天然同位素。有机化合物的来源不同,其同位素比(如13C与12C的比值)也不同。人体自身分泌的类固醇与相同化学结构的类固醇制剂的同位素比不同。应用同位素比质谱分析技术可以测定化合物13C与12C的比值,同位素比用δ(‰)值表示。根据仪器的分析流程和组成部分,本文方法称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比质谱([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS)方法。该方法在兴奋剂检测中的应用时间较短,文献方法较为繁琐,本文建立了快速灵敏的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析方法。-------------------------------------------------试验材料与方法1. 试剂和对照品试剂:β-葡萄糖醛酸酶,Sigma;其余均为国产分析纯试剂。对照品:睾酮(缩写T)、雄酮(缩写An)、本胆烷醇酮(缩写Etio)、5α-雄烷-3α,17β-二醇(缩写5α-diol)、5β-雄烷-3α,17β-二醇(缩写5β-diol)、孕二醇(缩写PD)购自Sigma公司。2. 样品两名健康志愿者,一名男性40岁,尿样为sample 1;一名女性38岁,尿样为sample 2,均没有服用任何药物。收集其晨尿为阴性对照尿。阳性尿样为世界反兴奋剂机构水平考试所用尿样来自兴奋剂检测中心。3. 仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比值质谱仪(HP6890/DELTA PLUS,Finnigan);高效液相色谱仪(Waters2796,检测器:Waters2996 PAD,自动收集器:Waters Fraction Collector Ⅲ);Anilent 5973i[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪。4. 方法4.I [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS操作条件色谱柱:HP5毛细管色谱柱,25m×0.2mm i.d.×0.3μm;柱流速:1mL/min(室温);升温程序:60 ℃(2min)一50 ℃/min→255℃一2.5℃/min→280℃(6.5min);进样口温度:260℃;燃烧炉温度:960℃;质谱离子源:EI;参考气:CO2,1.8V。4.2 高效液相色谱仪操作条件色谱柱:ZQRBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:水-乙睛,梯度洗脱(0-18min:乙睛从30%→100%);流速1mL/min;柱温:室温。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD操作条件色谱柱:HP-1毛细管色谱柱,25 m×0.2mm i.d.×0.11μm;柱流速:1 mL/min (室温);升温程序:150 ℃(1min一5℃/min→200℃一30℃/min→310℃(10min)。4.4 样品预处理取尿样2mL,加人1Ml0.2mol pH=7.0的磷酸盐缓冲液和10μLβ-葡萄糖醛酸酶(5000 IU)混匀,在55℃恒温水浴中培养3h,取出后加pH=8.8的碳酸盐固体缓冲剂约100mg 和5mL叔丁基甲醚,振荡萃取,离心后,取出上层有机溶液,在加热的情况下,用氮气吹干,加人50μL甲醇溶解残渣,备用。将上述甲醇溶液置HPLC仪上,依前述色谱条件分离,分段收集流出液,确定收集时间程序。分别将流出组分用氮气吹干,加人50μL环己烷,备用。4.5 对照品溶液的制备分别配制对照品睾酮、雄酮、本胆烷醇酮、5α-雄烷-3α,17β-二醇、5β-雄烷-3α,17β-二醇,孕二醇的甲醇溶液,浓度为1mg/mL。4.6 样品测定4.6.1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD 分析依上述[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD仪器操作条件,取样品溶液及对照品溶液进行全扫描,扫描范围m/z 20~450,选择待测物的特征离子,获得SIM图。经对样品中与对照品有相同保留时间的峰进行质谱分析,及与标准品质谱图的对比,确定待测样品的组成。4.6.2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析依上述CC/C/IRMS仪器操作条件,对处理后的样品进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析,测得内源性类固醇激素的δ值。

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