抗击新冠中医药表现突出,使用SPEX组织研磨仪鉴定中药材银柴胡
文中使用筛选合适的DNA条形码序列,以建立基于DNA条形码技术的银柴胡及其混伪品鉴定方法。该研究团队共收集了60份银柴胡及其混伪品,进行DNA提取:取经鉴定的银柴胡及其混伪品基原植物样品30 mg, 干燥药材去除表皮取中间部分50 mg,加入GP1 缓冲液和钢珠2 枚, 经高通量组织研磨机(美国SPEX公司 Geno 2010)研磨4 或6 min 后, 采用DNA 提取试剂盒提取总DNA,详细操作参照试剂盒说明书。结果显示, ITS序列的PCR扩增及测序成功率最高,为95.2%, matK最低,为75% 4种序列的长度范围为211~797 bp, ITS的GC含量在各序列中最高,为54.35% matK和ITS的鉴定成功率较高,分别为92%和90% Barcoding gap图显示ITS有明显的间隔区, rbc L、mat K和psb A-trn H序列间隔区不明显或种间种内变异有部分重叠 NJ系统进化树显示, ITS可将银柴胡聚为一支,同属混伪品二柱繁缕与银柴胡明显分为不同支, rbc L和mat K不能把混伪品二柱繁缕分开。因此, ITS序列可作为银柴胡及其混伪品鉴定的优选条形码序列,为银柴胡的真伪鉴定提供科学依据。