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尿液红细胞白细胞

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尿液红细胞白细胞相关的论坛

  • 红细胞与白细胞的重新定向

    白细胞与红细胞在此重新定向。白细胞(WBC)和红细胞(RBC)是血液中的重要组成部分,在生命体延续发展和生物治疗中具有不同的功能。红细胞,又称红血球,含有一种蛋白质称作血红蛋白。当血红蛋白从肺部吸收氧气时,血液呈红色。随着血液流经全身,血红蛋白向人体组织释放氧气。红细胞的生命周期为4个月,其形如圆盘,中间下凹,边缘较厚,呈圆饼状。白细胞,又称白血球,具有更加复杂的功能。白细胞构成了人体抵抗感染的一种防御机制。有多种不同类型的白细胞,其生命周期和功能各不相同。白细胞还能够产生一种特殊的蛋白质,称作抗体,能够识别并吞噬入侵人体的外来异物。 红细胞白细胞物理特征红细胞呈双凹圆盘状,无核。尺寸大约为6-8 μm。白细胞呈不规则性,但有一个核和外缓冲层。生命周期120天。几天,但在健康人体中可存活数天至数年不等。类型:血液中只有一种红细胞在血液中存在许多类型的白细胞,其功能各不相同:嗜中性粒细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞(巨噬细胞)、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞。循环系统:心血管系统。心血管和淋巴系统总计红细胞700:1白细胞男性每立方毫米460-6200万个;女性每立方毫米4200-5400万个。每立方毫米4000 – 11000个功能:向身体的不同部位提供氧气,并负责运送二氧化碳和其它废物。产生抗体,对感染形成免疫力,有些具有噬菌功能。血液中含量:

  • 尿液分析仪和手工镜检尿液中红细胞的结果分析

    尿干化学法分析仪和传统显微镜镜检是基于两种不同原理的检验手段,因此检测结果可能存在一定程度的差异。临床中两种诊断血尿方法常配合使用以达到检测效率与质量的统一,总结起来,对检测结果的影响因素主要有以下几方面。  3.1 假阳性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阳性,但镜检却呈阴性 。其原因包括:(1)尿液分析仪潜血实验可与完整红细胞阳性反应,也能够与血红细胞释放的血红蛋白(hemoglobin,Hb)进行反应,这与显微镜只能够观察到完整的红细胞存在差异。健康人群尿Hb水平极低,定为阴性;(2)肌红蛋白(myoglobin,Mb)分子中包含Hb基团,当骨骼肌、心肌严重受损,血MB浓度升高,经肾排泄,导致尿液MB水平升高,潜血反应因此呈阳性,而显微镜检查却呈阴性;(3)部分患者尿中存在对热不稳定的酶,也可导致试剂块发生颜色变化,发生潜血反应;氧化性物质的污染也是造成潜血反应假阳性因素;高温或标本存放时间过长导致潜血反应阳性率增高 ;(4)尿试纸条超过保质期,或没有妥善保存、操作不当、仪器故障等均可能造成假阳性。  3.2 假阴性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阴性,但镜检却呈阳性。其原因包括:(I)食物、药物影响:某些饮食、药物可引起尿液成份的改变如当尿液中存在大量的维生素时,维生素具有的强还原性使其竞争性结合反应产生的氧,导致尿试纸条无法出现潜血反应即出现假阴性反应;(2)高蛋白、高比重尿样削弱了试剂块潜血反应的敏感度,使能够发生反应的成分被包裹,反应试剂无法接触到,从而出现假阴性结果。  3.3 离心对检测结果的影响 离心中若速度过快,致使有形成分遭到破坏;但过慢时,沉渣中可能无法找到,以至于漏掉。因此对检验结果出现怀疑时,可实验潜血证实进行验证。总之,随着尿干化学分析仪普及,工作效率得到了极大提升,也使检测红细胞敏感度提高,但显微镜镜检也是无法替代的。对于疑似阳性反应的病例,应采用尿沉渣镜检进行复测,以求结论准确,提高检测可靠性。

  • 【求购】液基细胞保存液

    【求购】液基细胞保存液

    产品简介:保存液快速对脱落上皮细胞、腺细胞、白细胞等进行很好的保存和固定,保持标本采集时的原始细胞形态,防止细胞在保存过程中发生变形、自溶等。并通过制片使细胞均匀涂布在载玻片上制成薄层细胞涂片。染色后细胞结构在显徵镜下清晰易辨,同时把血液、粘液和炎症细胞减少到最底程度,从而易发现和确认异常细胞。更有利于从细胞的形态变化判定细胞的病变程度,使判定结果更加准确可靠,提高异常细胞的检出率,大大提高宫颈癌筛查方法的特异性和诊断的准确率。·产品性能特点::红细胞处理能力强:无需另加裂解液,既可将全部红细胞彻底清除,同时完美保存有诊断价值的各种有核细胞形态,从而对于临床上重度宫颈糜烂病人(或大量血细胞标本)能轻松一次性处理干净·消化分解黏液能力强:充分消化粘黏液,去除标本中普遍存在的黏液等干扰成份,释放具有诊断价值的细胞,保留有价值的诊断背景,有效提高检出率,检测结果准确。·细胞形态:核结构完整,其中核膜、核仁、核染色质颗粒及分布清晰可见,胞浆的嗜染性正常,有利于鉴别细胞的类别及来源。 细胞萃取:采用梯度离心分离萃取及红细胞处理专利技术和黏液消化技术多合一去除液基细胞学标本中的血液、黏液等干扰成份,富集提取细胞及诊断成份。 ·兼容性强:保存的细胞同时可做免疫细胞化学、HPV-DNA和衣原体等病原微生物的分子生物学检测,无需多次采样的烦恼。·应用广泛:细胞保存液临床运用非常广泛,除了运用宫颈细胞学检查外,还有胸腹积液、尿液、滑膜液、支气管冲洗液、脑脊液、针吸穿刺细胞及痰液标本细胞检测。·保存时间长:细胞在保存液中保存30天形态不变,真正保持细胞原始形态,更接近本身的组织学结构,更有利于恶性病变与良性反应性改变的鉴别诊断。·保存液细胞包裹技术,可以使细胞均匀悬浮,保证操作者在涂片标本时的随机性,任意取样涂片都具有代表性。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106231241_301155_2324710_3.jpg

  • 离心机如何应用于红细胞压积容量测定

    [b]离心机[/b]如何应用于红细胞压积容量测定摘要:红细胞压积(packedcellvolume,PCV)又称红细胞比容(hematocrit,Hct),是指红细胞在血液中所占容积的比值,测定时将抗凝血在一定的条件下离心沉淀,即可测得每升血液中血细胞所占容积的比值。  1原理[b]离心机[/b]  在100刻度玻璃管中,充入抗凝血至刻度,经一定时间离心后,红细胞下沉并紧压于玻璃管中,读取红细胞柱所占的百分比,即为红细胞压积容量(PCV又称压容、比容)。  2.器材  (1)温氏管:管长11cm,内径约2.5mm,管壁有100个刻度。一侧自上而下标有0~10,供测定血沉用,另一侧标有10~0,供测定比容用。如无这种特制的管子,可用有100刻度的小玻璃管代替。  (2)长针头及胶皮乳头:选用长12~15cm的针头,将针尖磨平,针柄部接以胶皮乳头。也可用细长毛细吸管代替。  (3)水平电动离心机:转速能达4000rpm者。  3.方法  (1)用长针头吸满抗凝血,插入温氏管底部,轻捏胶皮乳头,自下而上挤入血液至刻度10处。  (2)置离心机中,以3000rpm的速度离心30~45min(马的血液离心30min,牛、羊的血液离心45min),取出观察,记录红细胞层高度,再离心45min,如与第一次离心的高度一致,此时红细胞柱层所占的刻度数,即为PCV数值用%表示。  4.注意事[b]离心机[/b]项  (1)温氏管及充液用具必须干燥,以免溶血。  (2)此时,离心机的转速必须达3000rpm以上,并遵守所规定的时间。  (3)用一般离心后[b]离心机[/b],红细胞层呈斜面,读取时应取斜面1/2处所对应的刻度数。血浆与红细胞层之间的灰白层由白细胞与血小板组成,不应计算在内。  5.临床意义  (1)红细胞压积增高:见于各种原因所引起的血液浓缩,使红细胞相对性增多,如急性胃肠炎、肠便秘、肠变位、瓣胃阻塞、渗出性胸膜炎和腹膜炎,以及某些传染病和发热性疾病。由于红细胞压积增高的数值与脱水程度成正比,因此在临床上可根据这一指标的变化而推断机体的脱水情况,并计算补液的数量及判断补液量的实际效果。另外。也见于各种原因所致的红细胞绝对性增多,如真性红细胞增多症、肺动脉狭窄、高铁血红蛋白血症等。  (2)红细胞压积降低:见于各种贫血,但降低的程度并不一定与红细胞数一致,因为贫血有小细胞性贫血、大细胞性贫血及正细胞性贫血之分。

  • 【原创大赛】奶牛疾病之泌尿系统检查——尿液检查

    [align=center][b][color=#33383D]奶牛疾病之泌尿系统检查——尿液检查[/color][/b][/align][align=center]作者:宋娜娜[/align][color=#33383D]正常奶牛的尿液性质较为稳定,病牛尿液的性质往往发生一定变化。检查尿液的物理性状(尿量、颜色、透明度、粘稠度、气味、比重等),化学性质(酸碱性质、蛋白质、蛋白胨,葡萄糖、血液及血红蛋白、胆色素、尿兰母)及尿沉渣(红细胞、白纲胞、脓细胞、上皮细胞、管型及无机物等),对诊断肾脏疾病具有十分重要意义。[/color][color=#33383D]1[/color][color=#33383D]尿液的采集法[/color][color=#33383D]检查前采尿,最好用导尿法导尿,或趁奶牛排尿时直接接取,或将手伸入直肠内按压膀胱促其排尿。导尿时,奶牛须站立保定,用2%来苏儿洗净外阴部,将消毒过的右手伸入阴道,用中指挑起尿道外口。左手持消毒过的导尿背沿手指下插入尿道。如插入尿道忙囊时,要抽出导尿管重新插入,严禁粗暴,防止尿道损伤。[/color][color=#33383D]尿中蛋白质检查正常尿液含极微量蛋白质,用一般方法不能检出,如在尿中检出蛋白质称为蛋白尿,见于肾炎,膀胱炎和尿道炎等。检查方法常用的有以下两种。[/color][color=#33383D]血尿是指尿液中含有红细胞。奶牛排尿过程中,常用三杯法判定血尿来源。尿初有血,而后无血,表示尿道出血,尿初无血,仅最后排出血尿,表示膀胱出血,排尿自始至终都含有血液。表示肾脏出血。血尿常见于肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、尿结石、某些传染病(如钩端螺旋体病、炭疽等)、中毒病及肾、膀胱、尿道损伤。[/color][color=#33383D]血红蛋白尿及肌红蛋白尿尿液呈淡红色、红色、深红色乃至黑红色,无红细胞,尿中含有血红蛋白,称血红蛋白尿,见于产后血红蛋白尿病、牛焦虫病等。尿中含有肌红蛋白,称肌红蛋白尿,多见于犊牛自肌病等。[/color][b][color=#33383D] [/color][color=#33383D]三、尿中酮体的检查可用改良骆氏法[/color][/b][color=#33383D] 1[/color][color=#33383D]、骆氏试剂[/color][color=#33383D]硫酸铵100克,无水碳酸钠50克,亚硝基铁氰化钠8克,共研成粉末储于褐色瓶内备用。[/color][color=#33383D] 2[/color][color=#33383D]、检查方法[/color][color=#33383D]在一干燥小试管内加入骆氏试剂l~2厘米高。然后小心地将被检尿重积于试剂之上,放置数分钟后,如有酮体存在。则呈现红色,如酮体量多,呈现紫色。多应用于牛醋酮血病的检查。[/color][color=#33383D]3[/color][color=#33383D]、检查尿沉渣种类[/color][color=#33383D]尿沉渣显微镜检查尿沉渣可分为两类,一类为无机沉渣,包括各种无机盐类的结晶,另一类为有饥沉渣,包括红细胞、白细胞、上皮细胞、管型和微生物等。有机沉渣的检查,对诊断肾脏和尿道疾病有重要意义。[/color][color=#33383D] [/color][color=#33383D]制作尿沉渣标本前,要采取新鲜尿液5~10毫升,用离心机按每分钟l000~1500转,离心5~10分钟,倾去上清液。播匀沉淀物,用吸管吸取一滴置载玻片上,加上盖玻片,即可镜检。如无离心机,可将尿液静置2~8小时,使之自然沉淀。[/color][b][color=#33383D]四、镜检时[/color][/b][color=#33383D]镜检时,应缩小光圈,在较暗的视野先用低倍接物镜全而观察标本,找出需要检查的区域后,再换高倍接物镜,仔细辨认细胞成分和管型等。检查结果,对细胞成分可按每个高倍视野内最低至最高数值报告,对管型和无机盐类,按偶见、少量或多量等记载。[/color][b][color=#33383D]五、红细胞[/color][/b][color=#33383D]红细胞,健康奶牛尿中无红细胞。如上面说到,尿中出现多量红细胞时,则表示肾脏、输尿管、膀胱或尿道有出血[/color][color=#33383D]奶牛排尿时直接接取,或将手伸入直肠内按压膀胱促其排尿。导尿时,奶牛须站立保定,用2%来苏儿洗净外阴部,将消毒过的右手伸入阴道,用中指挑起尿道外口。左手持消毒过的导尿背沿手指下插入尿道。如插入尿道忙囊时,要抽出导尿管重新插入,严禁粗暴,防止尿道损伤。[/color][b][color=#33383D]六、脓细胞[/color][/b][color=#33383D]在肾脏和尿道有炎症时,白细胞积聚成堆,其结构模糊,在细胞中有残存颗粒,即称为脓细胞,但应与自细胞区别。[/color][b][color=#33383D]七、上皮细胞[/color][/b][color=#33383D]是泌尿系统发生病变时脱落下来的上皮组织。当肾脏病变时,特别是肾小管病变时,可见到肾上皮细胞,比白细胞约大1/3,多呈多角形、圆形、椭圆形或圆锥形。肾盂、输尿管发生疾患时,可见到肾盂上皮细胞,其形状呈梭形或犁形,有较大的核,比脓细胞大2~4倍。膀胱炎时,可见到膀胱上皮细胞,细胞大而扁平,核小而圆,有时呈长尾状。[/color][b][color=#33383D]八、管型[/color][/b][color=#33383D]也称尿圆柱。正常尿液中没有管型,肾脏发生病变时,肾小球滤出的蛋白质在肾小管中变性凝固,形成透明管状物,故称管型。管型是直的或稍弯曲的圆柱状物,两端多钝圆,或呈折断样。长短和宽窄很不一致。根据管型的来源及构造不同,可分下列几种。[/color][b][color=#33383D]九、上皮细胞管型[/color][/b][color=#33383D]是细尿管中脱落的上皮细胞与蚤自质粘集而成,见于急性肾炎。[/color][b][color=#33383D]10[/color][color=#33383D]、玻璃样管型(即透明管型)[/color][/b][color=#33383D]玻璃样管型(即透明管型)是肾小管中蛋白质凝固而成。结构均匀,无色半透明,多见于慢性肾病。 [/color][b][color=#33383D]十、血细胞性管型[/color][/b][color=#33383D]肾小管中的血细胞互相粘集而成。红细跑管型是在透明或颗粒管型内含有多量红细胞,见于肾脏出血性炎症。白细胞或脓细胞管型为白细胞或脓细胞所构成,地予化脓性肾炎、肾盂肾炎、急性肾炎。[/color][b][color=#33383D]十一、颗粒性管型[/color][/b][color=#33383D]是由肾上皮细胞的分解产物互相粘集而形成,较粗短,内含有颗粒,见于慢性肾炎或肾脏变性。[/color][b][color=#33383D]十二、蜡样管型[/color][/b][color=#33383D]一般较粗,有蜡样光泽,末端往往折断呈正方形。边缘常有缺口,近似玻璃样管型,但色较灰暗。尿中出现蜡样管型,表明肾小管有严重变性和坏死,表示预后不良,见于重症慢性肾炎。[/color][color=#33383D] [/color][color=#33383D]尿中无机沉渣检查在尿沉渣中有很多无机盐类结晶和非结品形物,各种结晶有其特有形状,但在奶牛疾病诊断上意义不大。[/color]

  • 【讨论】丙酮与白细胞

    今天餐桌上我留意了一个话题,有个从事农药残留检测多年的老前辈说,在实验室里久了,由于经常接触到丙酮,发现体内白细胞数目减少了,不在正常范围内,现在不做实验了,又恢复到4左右(正常范围4000-10000/UL(微升)),她把罪魁祸首指向了丙酮,不知道大家有没有注意过自己体检报告里的这一项呢,丙酮真的能杀死白细胞,天天用到丙酮,还有点畏惧~

  • 【分享】免疫细胞的分离和保存技术

    用体外方法对机体各种具有免疫反应的细胞分别作鉴定、计数和功能测定,是观察机体免疫状态的一种重要手段。为此,须将各种参与免疫反应的细胞从血液或脏器中分离出来。参与免疫反应的细胞主要包括淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等。由于检测的目的和方法有同,分离细胞的需求和技术也异。有的仅需分离白细胞,有的则需分离单个核细胞(mononuclearcell),其中含淋巴细胞和单核细胞(monocyte),有的则需分离T细胞和B细胞以及其亚群。分离细胞选用的方法应力求简便可行,并能获得高纯度、高获得率、高活力的细胞。现用分离细胞群的原则,一是根据各类细胞的大小、沉降率、粘附和吞噬能力加以组分,另一则按照各类细胞的表面标志,包括细胞表面的抗原和受体加以选择性分离。 一、白细胞的分离 (一)血液中红细胞与白细胞比例约600~1000:1,两者的比重不同其沉降速度亦异,通常用两种方法加以分离。 本法是利用血细胞自然沉降率的分离法,采集血液后应及时抗凝,通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶,从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静置室温30~60min后,血液分成明显三层,上层为淡黄色血浆,底层为红细胞,紧贴红细胞层上面的灰白层为白细胞,轻轻吸取即得富含白细胞的细胞群,离心洗涤后加入少量蒸馏水或含氯化铵的Gey溶液,经短时间的低渗处理,使红细胞裂解,经过反复洗涤可得纯度较高的白细胞悬液。 (二)聚合物加速沉淀法 本法是利用高分子量的聚合物如明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮(polyvinylpyrolidone,PVP)等使红细胞凝集成串,加速红细胞沉降,使之与白细胞分离。本法的细胞获得率比自然沉降法高。

  • 1%猪红细胞配制方法

    如题,哪位大神知道1%猪红细胞的配制方法?跟1%鸡红细胞配制方法一样吗?本中心扩项急用,跪求各位老师指点一二[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em63.gif[/img]

  • 做透射电镜的老师,白细胞数值调查?

    一直做电镜,最近发现白细胞低的厉害,不知道是不是有同感的老师?但是发现好像男性影响不大?女老师白细胞偏低的多,看看大家是否都正常。日常如何防护呀,有没有防辐射服可以穿?

  • 全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗?

    全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗?库尔特原理库尔特原理指出:悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时,在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。这主要是根据血细胞与稀释剂相比,血细胞是不良导体的特性而提出的。起初,原始的库尔特计数器只能计算和测量红细胞。后来,随着技术的不断发展和设备的不断改进,临床医生还可以利用它来计算和测量白细胞。到20世纪70年代,技术的进一步发展使技术人员能够分离血小板。全自动细胞计数器的演进传统意义上的血细胞计数器是通过研究外周血涂片,使用血细胞仪和白细胞分类计数而手动完成的(也称为100个细胞涂片分类,手动白细胞分类计数或手动计数器)。根据库尔特原理导致了库尔特计数器的发明,随后又开发出了技术先进的全自动血液细胞分析仪。自此,仪器的技术水平得到不断提高。由于技术的进步,一台仪器可以分析越来越多的参数,从而大大提高了血液检测的效率,减少在多台仪器上分析一个样品的情况。现代的细胞分析仪能够测量白细胞(WBC)、白细胞分类(五分类)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积,并且可以自动计算血细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度,血小板比积和血小板分布宽度。自动分析仪的其他重要因素包括它们运行的速度和每批次可以处理的样本数量(大处理容量可以减少周转时间)。即时检验(POCT)即时检验([/

  • 目视法细胞计数的改进方案

    谈到血常规检查,大家马上会想到WBC、RBC计数,虽然现在各种全自动和半自动的三分类、五分类血球分析仪已经普及,但在广大基层单位,条件尚不许可,仍然是一台显微镜加一块计数板,“目视计数法”还有顽强的生命力,及很强的实用价值,即使在仪器铺天盖地,大口吞噬“人工检验市场”的今天,我们依旧需要手工法进行样本复检、机器校正等工作。目视计数法在我们的印象中无非是数数方格,传统的计数法是按操作规程之规定,先找到相应的方格,但老方法中几十年来都一成不变的计数区域用到实际工作中并不让人感觉舒适和便利,当出现细胞数过多,堆得密密麻麻时,更容易视觉疲劳和出错;且动辄采血20μl,有些病人不易采足量(在同时进行多项检验时,更易出现采不到量而必须多次穿刺,增加了病人的痛苦)。因此,改进一下计数区域和采血量,寻找一种人性化的方法就很有其必要性了。对于这个问题,我研究了一套解决方案,并在工作中使用了近十年,一直感觉良好。下面,我就把该方案贴出来,和大家做一交流。一、RBC、PLT计数改进法:1. RBC:取血10μl加入红细胞稀释液3.0ml内混匀充池(即稀释300倍)2. PTL:取血10μl加入血小板计数液0.29ml内混匀充池(即稀释30倍)下面是计数池中间的那部分结构图,以红笔勾出的阴影部分为本法计数区域(两个细长长条区域)http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224036.jpg【计算】RBC数 / L = 计数区红细胞总数 / 100 ×10^12 / LPLT数 / L = 计数区血小板总数 ×10^9 / L二、WBC计数改进法:方法1:此法又可称为“盘龙法”,它覆盖面广,可较好的中和细胞不易分布均匀的固有误差,适用于精确计数。【操作】(同原法) 取血20μl加入白细胞计数液0.38ml内混匀充池(稀释20倍) 计数区域见下图所标示(蓝色箭头示意为计数起止方向)http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224121.jpg【计算】(亦同原法) WBC数 / L= 计数区白细胞总数 / 20 ×10^9 / L方法2:此法较上法简便而易于操作,采血量少,更不易疲劳和利于连续计数多量标本,且可灵活应对白细胞过低和过高的特殊情况,但准确性和精密度比上法稍差,适用于日常工作。【操作】取血10μl加入白细胞计数液0.29ml内混匀充池(即稀释30倍)(1)当白细胞数在合理区间时的计数区域(即用红线勾出的四个长条形区域):http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224324.jpg【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 / 10 ×10^9 / L(2)当白细胞数低于4.0 ×10^9 / L时,不必加量采血重做,计数区域:http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224506.jpg【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 / 20 ×10^9 / L(3)当白细胞数高于80 ×10^9 / L时,亦不必进行二次稀释,计数区域与新法计数RBC或PLT的计数区域相同,请见上面的第一幅贴图【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 ×10^9 / L我的这套方法好用与否,大家一试便知。最终的计算公式是怎么推导来的,这里我就不做详细论述,大家可以自己试着推导一下,如果对我的文章有疑异的,可以随时和我联系,欢迎大家批评和指正。我的QQ:59889501 作者:景德镇第二医院检验科 黄知进

  • 河北省血液中心不规则抗体及残余白细胞等试剂耗材采购项目

    [quote][b]项目概况[/b]河北省血液中心不规则抗体及残余白细胞等试剂耗材采购项目 招标项目的潜在投标人应在河北省成套招标有限公司601室获取招标文件,并于2023年02月22日 09点30分(北京时间)前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:HBCT-230115项目名称:河北省血液中心不规则抗体及残余白细胞等试剂耗材采购项目预算金额:34.5100000 万元(人民币)采购需求:01包:不规则抗体检测细胞等试剂;02包:残余白细胞试剂耗材;03包ABO血型、RH血型室内质量控品合同履行期限:合同签订后一年本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称:河北省血液中心地址:石家庄市和平路299号联系方式:袁女士 0311-870443142.采购代理机构信息名 称:河北省成套招标有限公司地 址:石家庄市工农路486号联系方式:常女士 0311-830869303.项目联系方式项目联系人:常女士电 话:  0311-83086930

  • 尿液检查有隐血3+是什么情况

    尿液检查中出现隐血3+(潜血试验阳性),表示尿液中含有较高浓度的红细胞或红细胞分解产物,这可能是肾脏、泌尿系统或生殖系统存在某些问题的信号,例如肾炎、肾结石、泌尿系统感染、肿瘤或其他炎症。需要注意的是,剧烈运动、月经污染等因素也可能导致暂时性的尿潜血阳性。发现这种情况时,建议及时就医,通过进一步检查来确定具体原因并接受相应治疗。

  • 【技术@创新】科学家:人类血红细胞变形机制 利于治疗疾病

    美国俄亥俄州立大学李巨研究小组首次在分子层面上设计一种模型,能够描述血红细胞是如何从正常的扁圆形缩成子弹形,穿过比它们的正常直径还小的血管。该研究结果在线发表在3月12日的《美国科学院院刊》上。   研究血红细胞如何从柔软的物体变成几乎液化的形态,能够帮助科学家们更好地了解疟疾、镰状细胞贫血症以及球形红细胞贫血症等。  人类血红细胞在其4个月的生命中,要成百万次地挤过细小的毛细血管,以便输送氧气,运走二氧化碳等废物。这是生命必需的过程。血红细胞的直径约为8微米,它们在流动过程中,常常穿过直径只有2微米的血管。血红细胞会拉长成子弹形状,然后在穿过血管后,恢复成本来的扁圆形。  李巨研究小组设计的这种模型显示,血红细胞的细胞骨架在这个变形过程中起到了重要作用。每个血红细胞都有一个细胞骨架,它由一种名为“血影蛋白”的蛋白分子构成,以一种类似毛刷的结构附着在细胞膜内侧。当这层蛋白质结构之间的键接破裂,或者这层结构与细胞膜之间的附着破裂,细胞就会变得更加柔软,从而能够穿过狭窄的通道。  研究人员发现这种变化或者是由于两个血影蛋白分子之间的键被断开,或者是由于血影蛋白与一种细胞膜中的肌动蛋白的键被断开。而加诸机械力(如挤压或者切断)或者化学能(如ATP),都足以断开这些化学键,进而引起细胞骨架的变形。  研究人员将利用该模型进一步研究几种血液疾病,包括疟疾、镰状细胞贫血症以及球形红细胞贫血症等。在疟疾患者中,细胞里的寄生虫会改变细胞膜和细胞骨架,从而使细胞失去原有的弹性,无法穿过血管。在镰状细胞贫血症中,红细胞会变成镰刀状,而在球形红细胞贫血症中,红细胞会变成球形,因而都无法正常地通过血管。  李巨博士1994年毕业于中国科学技术大学少年班。2000年获得麻省理工学院核工程技术系博士学位,之后在该系从事博士后研究工作,2002年成为俄亥俄州立大学助理教授。曾获美国材料学会2006年度青年科学家奖。

  • 尿液分析技术及仪器

    4.1尿液分析仪1.尿液分析仪的分类(1)按工作方式分类 可分为湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪。其中干式尿液分析仪主要用于自动评定干试纸法的测定结果,因其结构简单、使用方便,目前临床普遍应用。(2)按测试项目分类 可分为8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。(3)按自动化程度分类 可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。 2.尿液分析仪工作原理(1)尿液分析仪的试剂带①试剂带的结构 单项试剂带以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层,再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。尿液浸入试剂带后,与试剂发生反应,可产生颜色变化。多联试剂带是将多种项目试剂块集成在一个试剂带上,使用多联试剂带,浸入一次尿液可同时测定多个项目。②试剂带的反应原理 pH测定:采用pH指示剂原理,常用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂,呈色范围从pH4.5~pH9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色,由此反映尿液的pH值。 尿蛋白质测定:利用pH指示剂蛋白质误差的原理。 尿葡萄糖测定:当前有两种完全不同的检测尿糖的方法,一种是基于葡萄糖氧化酶法原理,能特异地检出尿中的葡萄糖;另一种是基于铜还原法的原理,能检测葡萄糖和其他还原性物质。 尿酮体测定:采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。 尿隐血测定:利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用,能催化过氧化氢释放出新生态氧,使色原氧化而显色,其颜色深浅与血红蛋白含量有关。 尿胆红素测定:采用重氮反应法原理。 尿胆原测定:采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。 尿亚硝酸盐测定:尿亚硝酸盐试验的化学基础是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐的特性。 尿白细胞测定:利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸,吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理;或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色,颜色深浅与粒细胞量的多少有关。 尿比密测定:基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa变化来测量比密。 尿维生素C测定:采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维生素C进行反应,形成钼蓝,颜色由蓝色变成紫色,颜色深浅与尿中维生素C含量有关。③试剂带的应用 不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带。试剂块要比测试项目多一个空白块,有些仪器还多一个位置参考块。各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差,提高测量准确度而设置的。固定块是为了消除在测试过程中为免每次测定试剂块的位置不同产生测试误差设置的,每次测定前,检测头都会移到参考位置进行自检,必要时,自动调整发光二极管的亮度和灵敏度,以提高检测的信噪比。3.尿液分析仪的检测原理 把试剂带浸入尿液中后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小;反之,反射率越大。因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中各种成分的浓度。 尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。一种波长为测定波长,它是被测试剂块的敏感特征波长;另一种为参比波长,是被测试剂块不敏感的波长,用于消除背景光和其它杂散光的影响。各种试剂块都有相应的测定波长,其中亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆素原的测定波长为550nm,pH、葡萄糖、蛋白质、维生素C、潜血的测定波长为620nm。各试剂块所选用的参考波长为720nm。 试纸块颜色的深浅除了随各被测成份的不同而变外,还与尿液本身的颜色有关。空白试纸块随着尿液的颜色而变化。试纸块的反射率R试纸由式13-1计算:R试纸= ×100% 空白块的反射率R空白由式13-2计算::R空白= ×100% 总的反射率R为试纸块的反射率与空白块的反射率之比:R= = ×100% 采用双波长测定法,抵消了尿液本身颜色引起的误差,可提高测量精度。4.仪器的结构与功能 尿液分析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。其结构见图13-2。http://www.care100.com/yqxjpkc/images/131.jpg图13-2 尿液分析仪结构示意图

  • 【汗颜】茶水当尿竟被检出“发炎”

    近日,记者将茶水当做尿液的样本送至杭州多家医院化验,十家医院有六家检出茶水“发炎”,有五家医院开出消炎药,总计药费1300元左右。  随着人们健康知识和法律意识的不断增强,患者对医院、医务人员的期望值不断增高,而现代医学的局限以及一些医务人员的不负责任,使医患矛盾成为社会的热点和难点。  这段时间,针对医院看病问题前来投诉的人很多:杭州的一位陈女士看了个小病花了两千多元,病历和药物的明细单都没有;一个医院口腔门诊部花四千块钱给患者装的烤瓷牙居然是个合金的假货;明明是一般的主治医师却偏偏说成是北京大医院来的教授。这两天,记者暗访了这些医院。仅仅化验一项得出的结论就让人不寒而栗。  茶水竟“发炎“了  我们用一只崭新玻璃杯泡了绿茶,并将茶水当做尿液的样本送检。  记者首先来到了位于杭州萧山区萧绍路1541号的萧山钱江医院。值班的蔡医生在问了记者的大致情况后,叫记者先去做个小便化验。  记者把事先准备好的茶水送进了化验室。不到5分钟,化验结果就出来了。上面的数值显示:包括胆红素在内的三个指标超标。蔡医生看了化验单后表示,从化验单显示的:“白血球,1-3个”说明有炎症,可能是尿道炎,必须先配点药回去吃,不好的话马上再来。  蔡医生给记者开了三盒消炎药,一共花了两百二十多元。  在位于杭州萧山区萧绍路608号的萧山华东医院,化验员拿到我们的茶水样本后,把它送进检验机,几分钟后,报告单出来了,胆红素一个加。“胆红素什么意思?”记者问。值班医生告诉记者:“胆红素一个加问题不大,不像白细胞,有白细胞可就问题大了。当记者问可不可以不配药,这位医生没有回答,只是说最好做进一步检查。  记者来到的第三家医院是位于杭州学士路一号的浙江大学附属妇产科医院,听说记者小便时有点痛,这位医生让记者先做个小便化验,同样记者把事先准备好的茶叶水送进了化验室。半小时后化验结果出来了,白细胞2个加,白细胞显微镜检测2到3个。“有炎症了,尿路感染,挂盐水效果好。”医生让记者不要紧张,并给记者开了3天的盐水消炎,花费了近400元钱。  茶叶水难道真的会发炎?大医院难道也会搞错?带着这样的疑问,记者又在这家医院用同样的茶叶水做了第二次检测。化验单上显示,仪器检测白细胞一个加,人工显微镜检测白细胞1到3个加。这次医生给记者开的药是,一盒西药,五盒中药,药费70元。  记者跑的第4家医院是浙江省中医院,10分钟后化验结果出来了,胆红素一个加,人工显微镜检出红细胞1到3个,还没等记者弄清楚是怎么回事,化验室的医生说话了:“这个要查一下肝功能,应该排除一下肝脏疾病。”  两天时间,记者跑了10家医院,其中4家是民营医院,6家公立医院,6家公立医院里有4家是省级医院,都是用同一杯茶叶水作尿液样本,检测结果是:2家民营医院和2家省级医院茶叶水中没有被检出白细胞,另外6家医院不同程度地检测出了白细胞和红细胞,其中2家医院的化验单上显示,用显微镜也能看到白细胞,5家医院给记者配了消炎药,总计药费1300元左右。  茶水绝不会“发炎”  那么茶叶水中到底有没有白细胞和红细胞呢?记者就此问题专门请教了浙江省著名的茶生化专家、中国国际茶文化研究会副会长、前国家农业部茶叶研究所所长程启坤教授。  “到目前为止,没有文献报道茶叶中有胆红素和白细胞这样的成分,这个东西主要存在于动物细胞里面,白细胞在动物的血液里存在。”据程教授介绍,现在已经知道茶叶当中化学成份有五六百种,其中96%左右都是有机化合物,茶水里没有红细胞也没有白细胞。  那么茶叶水中到底能不能被检测出白细胞呢?我们请来了杭州邵逸夫医院检验科的主管化验师为我们作了试验。仪器试验结果显示:胆红素阴性、尿阴血阴性。也就是说没有红细胞、尿白细胞微量。仪器检测后,主管化验师又把尿液拿到显微镜下用肉眼进行仔细观察,一二分钟后金主管告诉记者茶叶水里根本看不到白细胞,也没有红细胞。  难道是人为所致?  既然茶生化专家和主管化验师都肯定茶水中不可能有红、白细胞的存在,那么记者去医院检测出的那些数据又是怎么回事呢?  是检验仪器出了问题还是化验师的检验水平有问题?难道是一些化验员在有意篡改化验数据?  据杭州邵逸夫医院检验科的主管化验师金主管介绍,小便的检测程序其实很简单,因为现在的仪器自动化程度很高,一些条件好的医院,尤其是一些大医院用的都是进口品牌,它们的工作原理都是采用激光照射来分析尿液的成分,当然在实际使用过程当中,比如试纸的过期、仪器的老化等原因会影响检验的正确性,为了弥补这些可能的误差,还要做第二步的人工显微镜检测,这一步才是医生判断病人有没有炎症的主要依据。那么为什么仪器的检测结果显示白细胞微量呢?  金主管告诉记者,这个主要是仪器的工作原理导致,茶叶水可能对仪器有一定的干扰作用。“但有一点是肯定的,那就是在显微镜下是永远也看不到白细胞,也看不到红细胞的。”  而记者调查的萧山钱江医院、省中医院和省妇保医院的4张化验单,显微镜检测白细胞1-3个,红细胞1-3个,白细胞2-3个,白细胞1-3个,也就是说这3家医院的化验师在显微镜上看到了白细胞也看到了红细胞,其中省妇保医院还两次在同一杯茶叶水中看到了白细胞。  医学是一门非常严谨的学科,现代高自动化的仪器加上镜检,一杯茶水竟然“发炎”了。这一结果至少说明这些医院的工作作风极不严谨,像这样的医院能让患者放心吗?谁又能排除这种“马虎”不会发生在患者身上呢?  中新  (编辑:赵芳)http://www.sina.com.cn 山西新闻网

  • 重组细胞因子分类及应用概述

    一、细胞因子的概念细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质,通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有 非常广泛的生物学活性,包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和细胞杀伤效应,促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达,促进炎症过程,影响细胞代谢 等。二、细胞因子的命名细胞因子按其来源可分为:由单个核吞噬细胞产生的细胞因子称为单核因子(monokine);由淋巴细胞产生的细胞因子称为淋巴因子 (lymphokine)等。按其作用可分为干扰素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、生长因子和趋化因子等。部分由不同细胞分泌的细胞因子,其基因及编码蛋 白与结构清楚者,在免疫调节、造血和炎症中发挥重要作用,又称为白细胞介素(interleukin,IL)。也可以依据结构或者其受体结构分类,我们的 趋化因子目前没有受体产品。三、细胞因子的特征1、低分子量;一般为<60kD的多肽或糖蛋白。多以单体形式存在,少数为二聚体,三聚体。2、天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌,通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。3、一种细胞因子可由多种细胞产生,同一种细胞可产生多种细胞因子。4、需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。5、具有高效性、多效性、叠性、拮抗性、协同性和网络性。四、细胞因子的分类1、白细胞介素(interleukin,IL-s)最初是指由白细胞产生又在白细胞间发挥作用的细胞因子。2、干扰素(interferon,IFN)最早发现的细胞因子,有干扰病毒感染和复制的能力。分α、β和g三种类型。3、肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor,TNF)1975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质。4、集落刺激因子(colony-stimulating factor,CSF)指能够刺激多能造血干细胞和不同造血祖细胞增殖分化,在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。包括G-CSF(粒细胞)、M-CSF(巨噬细胞)、 GM-CSF(粒细胞、巨噬细胞)、Multi-CSF(多重)(IL-3)、红细胞生成素(EPO)、干细胞生长因子(SCF)、血小板生成素 (TPO)等。5、趋化因子(chemokine)主要功能是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入特定的淋巴器官和组织以及感染发生的部位。根据趋化因子近N端半胱氨酸(Cys)的位置、排列方式和数量,可分为CC、CXC、C、CX3C四个亚家族。6生长因子(growth factor,GF)生长因子(GF)是具有刺激细胞生长作用的细胞因子。五、细胞因子的生物学活性1.介导自然免疫、参与抗肿瘤和抗感染2.调节T、B细胞活化、生长和分化,介导细胞免疫和体液免疫3.刺激造血生成、刺激骨髓祖细胞生长和分化为各种成熟血细胞4.在炎症、感染和内毒素血症中的作用5.在超敏反应和自身免疫病中的作用6.细胞因子通过激活其相应受体(CKR),导致细胞的增殖与分化或分泌某种蛋白质。六、四种蛋白表达体系比较表达细胞优点缺点原核E. coli繁殖快、成本低、产量高遗传背景及基因表达调控机制清楚易于大规模培养,成本低廉蛋白常为包涵体,纯化困难无糖基化(分泌蛋白,细胞膜上蛋白不可用),生物活性不定无翻译后修饰,内毒素含量高酵母Pichia使用简单,表达量高,His-tag便于纯化,一定的翻译后加工可进行糖基化修饰,操作简单,适合大规模生产可诱导表达,也可分泌表达,产物便于纯化有时会出现蛋白切割问题糖基化不能满足要求昆虫High-5产量高 ,翻译后加工与哺乳动物相似对于部分有毒性或较难表达蛋白有优势无内毒素污染蛋白活性不如哺乳动物适合表达激酶等定位于细胞内的真核蛋白哺乳CHO HEK293完善的翻译后加工,活性接近天然蛋白周期长、技术要求高表达产量低

  • 【原创大赛】浅谈体内哺乳动物红细胞微核实验的疑难点

    [align=center]浅谈体内哺乳动物红细胞微核实验的疑难点[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安评中心:闫敏[/align] 本人长时间从事毒理学研究和安全评价工作,主要负责一般毒理和遗传毒理,微核试验属于遗传毒理实验中的一项重要研究,在不断的摸索和实验过程中,总结了几点经验和摸索出的关键点并做以下讨论: 红细胞微核实验经过前几次的失败,总结了存在的问题和可能的影响因素如下: 1.阳性结果不明显 阳性对照使用环磷酰胺,环磷酰胺的水溶液不稳定,配制好后2-3h后有可能就会失效,并且要避光2-8℃保存。有时候实验使用的阳性对照溶液配制时间过长,可能已经失效。一般的阳性对照组溶液均为现配现用,不宜长时间放置,容易变质。 2.取材,制片过程存在问题 a.取骨髓时,肌肉组织未完全剥离,导致挤出骨髓时所含杂质太多;可以用纱布进行擦拭并剔除多余组织和肌肉,得到干净的股骨; b.取骨髓的方式有两种,用止血钳挤或者用注射器捅出骨髓,但是两种方法都不能将股骨损坏,导致取出量少,没有代表性,用小牛血清推片后,镜下阅片细胞量很少,达不到阅片效果。止血钳挤骨髓:剪去股骨大骨一端,用止血钳平行夹住股骨,然后轻轻挤压,骨髓会像牙膏一样挤出来,然后放在玻片上。注射器捅骨髓:剪去股骨两端,用镊子镊住股骨,置于小牛血清上,用注射器来回捅骨髓腔,让骨髓释放在血清中,混匀,推片。 c.推片方法:推片一定要和玻片呈角度,一般为45°,推片向内侧倾斜,向外推片,使小牛血清平铺在载玻片面上。 3.染色问题 a.染液配比浓度高,染色时间过长。一般可采用1:9的比例来配制姬姆萨染液,染色10min,染液使用的PBS缓冲液的ph很重要,保持在6.8,ph偏酸或者偏碱都有可能导致红细胞染色效果不好,无法分辨成熟红细胞和嗜多染红细胞。 b.冲洗染液时一定要彻底,及时,不能让染液残留较多。用流水沿玻片磨砂端冲洗,直至洗出的流水为无色。 以上是在做红细胞微核试验时遇见并解决的问题,科研实验和研究就是在不断的失败和改正中获得成功。

  • 荧光标记DNA探针在细胞核混悬液杂交中的应用

    (1)细胞核的分离: 将培养的细胞制成细胞混悬液,或以胰蛋白酶消化法于培养盖上收集培养细胞。应用MgSO4染色分离方法分离细胞核(Van den Engh et al 1986, 在Traok和Van Den Engh 34章 )。细胞混悬液浓度为5×106/ml。利用RNA酶消化后,使核从细胞分离,细胞核混悬液浓度为4~5×106细胞核/ml。(2)细胞固定和酸的处理:在5 ml试管内加冷的100%酒精不断旋转以达到满意的固定。在冰上停留10 min。在4 ℃离心(×150 g)10 min。重复加三次冷的100%酒精入试管内,离心,倾去。置于冰上10 min,再离心。然后加入相当核悬液1/2量的0.1 n HCl , 0.5% Triton X-100。室温停留10 min。加入IBM-0.25%Triton X-100(IBM配方:50 mmol/l KCl, 10 mmol/L MgSO4, 5 mmol/L HEPES pH8.0)。再离心,重复IBM漂洗(这时细胞核可在不染色情况下,以荧光显微镜观察)后,以2×SSC-0.1%Tween漂洗1×3min,继之加入等量2%的多聚甲醛在1×PBS-5 mmol/l MgSO4。在室温静置站立10min。倾去上清液,加IBm -Triton X-100漂洗,离心,使细胞核混悬液最终浓度为108/ml,(可用IBM-Triton X-100稀释约50倍,在血球计数器计数),混悬液镜检应含单个,完整的细胞核。(3)细胞核混悬液杂交①配制杂交混合液:甲酰胺5份,20×SSC1份,50%硫酸葡聚糖2份,pH调至7.0。此原液(stock solution)可贮存在4 ℃冰箱内。应用时加1份10 mg/ml鲱鱼精子DNA(herring sperm DNA)。②混合1 μl的细胞核混悬液(108/ml)与18μl的杂交混合液,充分混匀。将此19 μl混合液移入1.5 ml容积的Eppendorf 管中(核含量约为105)。③加入100 ng/每管的AAF标记DNA探针(如为生物素标记DNA探针浓度为20~40 ng/每管)。④置70 ℃10min使DNA探针和核DNA变性。⑤和组织切片与DNA探针杂交方法相较,不同的是在加热变性后切勿置冰上迅速冷却以终止反应,而应迅速转入37 ℃孵育过夜。(4)杂交后漂洗在每管中加入1.25 ml 50%甲酰胺-2×SSC(pH7.0),在42 ℃静置10~15min。偶尔旋转以助混匀。冷却至室温。加100 μl经dimethylsuberimidate(DEMS)处理的血细胞(107/ml)混匀,离心,室温,10min,轻弹试管使沉淀的小块散开,加入1.25 ml 2×SSC(pH7.0),42 ℃,继之,静置于室温10~15min,如前离心,再加1.25 ml IBM-Triton X-100,室温静置5min,离心。注:DEMS处理红细胞方法:经漂洗并离心去除白细胞和血清的红细胞在盐液如PBS中,细胞含量为108/ml,以K2CO3和DEMS溶液处理3次,第1次:K2CO3为20 mmol/L,DEMS为3 mmol/L,以后2次:K2CO3依然为20 mmol/L,而DEMS为10 mmol/L。在应用前将K2CO3和DEMS液混合加入红细胞混悬液中。在最后2次漂洗液中,应用100 mmol/l K2CO3将pH调至9~10。在25 ℃,15min后,加入50 μl,100 mmol/l 的柠檬酸(citric acid)/每ml细胞混悬液的浓度以达固定红细胞的目的。固定的红细胞离心倾去上清液后,用2×SSC稀释到108/ml,加0.1%叠氮钠可在4 ℃保存至少1年。(5)AFF标记的荧光显示:加200 μl的PBS含0.05%Tween和2%正常血清(NGS),轻轻振荡混匀,室温静置10min,加20 μl 1:100的单克隆抗AFF抗体,37 ℃孵育45min,加1.25 ml的PBS-Tween,室温静置10min,加20间歇性振荡,离心,倾去上清液,加200 μlPBS含0.05%Tween –2%NGS,振荡,室温静置10min,加20 μl的羊抗小鼠–FITC荧光标记抗血清,稀释度1:100~1:300。孵育于37 ℃ 45min,加1.25 ml PBS –Tween,室温静置10min,离心,倾去上清液。(6)生物素标记探针的荧光显示:加200 μl 4×SSC含0.1%Trion X-100 和5%BSA。室温静置10 min后,加20 μl抗生物素标记FITC抗血清15 μg/ml,孵育在37 ℃ 30min,以1.5 ml 4×SSc –0.1% Trion X-100洗1次,加入1.25 ml IBm –Triton X-100,室温静置10~15min,间歇振荡、离心。(7)荧光显微镜观察:将细胞核混悬液稀释于250 μl的IBM-Trion X-100中,轻加振荡混匀。为抗荧光褪色可加等量的抗褪色溶液至载片上的细胞核涂片上,选择适当的激发波长观察。(8)流式细胞计:将750 μl的细胞核混悬液通过流式细胞仪(Flow cytometry, FCM),DEMS处理过的红细胞作为对照(Df 530/30nm, Omega ·Optical Inc, Brattleboro, VT)。

  • 【转帖】卫生部批评浙江媒体“茶水尿检”式监督

    此前本论坛的做了讨论: http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20070324/780248/ 2007年04月12日14:30   人民网    近日,浙江一家媒体称不断接到群众热线,批评和投诉医院看病贵、乱检查、无病也当有病医等现象。该栏目记者决定对部分医院进行暗访。记者以茶水冒充尿液,送到杭州10家医院化验,结果6家医院不同程度地从送检的茶水中检测出了白细胞和红细胞。根据检验结果,部分医生还为记者开出了消炎药方。消息经媒体曝光后,迅速在浙江当地引起强烈反响。 4月10日,在国家卫生部召开的例行新闻发布会上,卫生部新闻发言人毛群安公开回应说,茶水充尿液检验出炎症属正常,以这种方式对医院进行舆论监督有违科学精神。 “茶水尿检”93%呈假阳性 卫生部新闻发言人毛群安针对记者提问时表示,有关报道出来后,卫生部组织了北京的各大医院和卫生部的临床检验中心进行了专题研究。北京的医疗机构也用茶水作为样本让各医院进行了化验,结果许多医院的报告也出现了假阳性。 4月8日,专业医学网“丁香园”在其网站上公布了全国92家三级甲等医院的“茶水尿常规”化验结果。昨天下午,“丁香园”网站负责人周先生告诉记者,为了查明真相,该网站发动会员将茶水当作尿液送到医院检验。结果在136份化验单中,未检出“阳性”项目的报告单为9份,占总数的6.6%;检出“阳性”项目的报告单为127份,占总数93.4%。周先生说,这个结果与卫生部组织的检测结果是一致的。 仪器无鉴别样本种类功能 茶水为何会被检测出呈阳性?毛群安的解释表明,让医院的尿检程序去检验茶水,打乱了有具体运行环境设定的电脑程序。医疗机构的检验是针对特有指向的检验品来测试,有一些检测只通过设备本身来进行,而设备并没有鉴别“样本是尿液还是茶水”的程序。所以,对于这个检测设备而言,放进去的是茶水,它就会直接将其作为尿液来化验。提供的检测样品里面,只要有物质与尿液中可能检出的物质相似,仪器就会诊断出来,如白细胞、红细胞、胆红素这些物质都是由机器来自动识别的。 茶水中检出白细胞、红细胞是否还与仪器灵敏度不够有关呢?上海新华医院副院长陈方在接受记者采访时说,尿检仪器是根据尿液中颗粒的形状、大小等指标进行检测的,将茶水中的颗粒误认为是白细胞、红细胞很正常,这与仪器灵敏度无关。 [众说纷纭] ■卫生部新闻发言人毛群安:把茶水当尿液送到医院检验,记者的出发点也是希望改善医疗服务质量,但由于不了解其中的专业知识,结果事与愿违。这种做法误导了广大公众,有悖于媒体职业道德。 ■新华医院副院长陈方:采取这种方式对医院进行舆论监督,有点“恶作剧”,也反映出媒体和医院之间的不信任,这种不恰当的外行式暗访,还会降低公众对医院的信任度。 ■“丁香园”的网友跟帖:媒体的报道损害了6家医院的名誉,医院完全可以起诉媒体。 ■报道所涉及的萧山钱江医院和浙江省中医院:卫生部对此事的回应相当于给医院作了“平反”。 ■复旦大学新闻学院博士张志安:此事应从报道的出发点和采访方式两方面来看。如果记者“以茶当尿”的出发点不是为了敲诈医院,也不是为了个人利益,就无可厚非,也无关新闻职业道德。但是由于缺乏专业医学知识,选择了“策划新闻”的不恰当监督方式,这才是媒体在实施舆论监督时应该反思的。

  • 牛奶中的体细胞

    牛奶体细胞数的英文为somatic cell count,SCC。牛奶体细胞数是指每毫升牛奶中的细胞总数,多数是白细胞,通常由巨噬细胞、淋巴细胞、多形核嗜中性白细胞和少量乳腺组织上皮细胞等组成,约占牛体细胞数的95%,其余是乳腺组织死去脱落的上皮细胞。体细胞数反映了牛奶质量及奶牛的健康状况,在正常情况下,牛奶中体细胞数一般在20万~30万个/mL。

  • 【求购】自动液基细胞制片染色系统

    【求购】自动液基细胞制片染色系统

    ◆产品特点 1、真正高效全自动:全球独家全自动多动能制片染色一体化设备,标本处理、制片、染色一次完成。 2、杜绝拖带污染:使用一次性加样针脱针系统和自动独立滴染湿式染色系统,杜绝了传统染色可能造成的交叉污染。 3、提取黏液包裹细胞:采用梯度离心分离及红细胞处理裂解和黏液消化技术三合一有效提取细胞及诊断成份,富集细胞及诊断成份,保证诊断细胞不丢失。 4、捕获病变细胞:根据人体不同类型细胞比重不同的特点,尤其是病变细胞比重大、沉降速度快,从而最大程度地捕获病变细胞和具诊断价值的成份,提高检出率。 5、薄层细胞均匀分布:基液使细胞均匀悬浮,保证随机性,任意取样涂片都具有代表性,形成均匀分布的真正薄层细胞涂片。 6、无需前处理:直接上机,标本无需前处理,三合一独家技术,细胞结构保存更完好,操作更加方便,省时高效,较国内外同类方法机型自动化程度更高。 7、高品质诊断保障:三合一独家技术有效提取细胞及诊断成份,完全清除黏液、红细胞等干扰成份,有利于病变细胞的鉴别诊断。 8、强大而简捷微机界面:人机对话式中文界面,可选择妇科及非妇科,不同数量及不同染色方法,操作更加方便,功能强大 9、绿色环保:不含一点甲醛,对于临床一线操作人员身体没有损害,无需采取特殊的防护。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106231242_301156_2324710_3.jpg

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