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斯氏大洋单胞菌

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  • 有了解大洋洲奶粉的吗?

    今天在新闻上看到大洋洲的优质奶源主要集中在澳大利亚和新西兰两地。澳新两地的气候比较干燥,有大面积的平坦草原,适合大面积的发展畜牧业,加上四面环海,地下水资源丰富,因此给畜牧业提供了极好的基础,绝对是拥有天时地利。政府对自然环境的积极保护政策也最大限度的保证了奶源的品质。此外,在奶牛场的监管方面,政府的评估和惩罚措施也非常严格。

  • 【求助】场放大样品进样

    本人欲采用场放大样品进样-毛细管区带电泳测定一种阳离子化合物。优化的结果是:0.5 psi 引入水柱3s;10kV下样品堆积40s; 水-乙腈(50/50,V/V)为样品溶液时,富集效果最好。可是对实际样品(如血清,尿样等)进行加标回收率实验,均未发现富集现象。本人又取了点基质干扰小的自来水样品,加标,同样测不出。我建立的方法只适合于测定去离子水中的化合物?问各位高手,为啥?坐等答案,谢谢。

  • 蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基Bacillus cereus Chromogenic Medium用途:用于蜡样芽孢杆菌的显色培养,蜡样芽孢杆菌显蓝绿色蜡样芽孢杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。蜡样芽孢杆菌显蓝绿色且菌落比较大,苏云金芽孢杆菌显蓝绿色,李斯特氏菌显深蓝色,菌落比较小,其它菌显黄色或无色,革兰氏阴性菌被抑制。 成份 (g/L) 特殊营养物质41.9 显色剂 0.5 抑菌成份 0.6琼脂 15.0 pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 注意 此培养基仅供实验室使用。 用法 称取本品 11.6g 加入200ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,备用。 贮存 制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。 失效 干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。 操作步骤 1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液; 2、样品液在30±1℃增菌培养18-24小时; 3、取增菌液划线接种于蜡样芽孢杆菌显色培养基平板上,30±1℃培养18~24h。蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落比较大。若24小时没有出现典型菌落,可延长培养至48小时。 4、对可疑蜡样芽孢杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃培养18-24小时,挑取单菌落做蜡样芽孢杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装SHBG09 7种x2套/盒*5盒)

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包**头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~**5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

  • 【求助】场放大样品进样-毛细管电泳(FASI-CE)

    【求助】场放大样品进样-毛细管电泳(FASI-CE)

    最近在做场放大样品进样(FASI),separate时总是出现电流断流或者波动很大的情况,不知道什么原因,请各位高手指点下。BGE:100 mMPBS(pH 2.5)+0.8 mM CTAB (buffer经超声脱气)样品溶解在0.1 mM H3PO4 / 正丙醇 (20/80, V/V)FASI步骤:1. 0.5 psi下引入3s中水柱 2. 10 kV电动进样 99s 3. 15 kV分离我做的是阳离子化合物这种条件下进样,电流不知道神马情况就断流或者波动很大??PS:直接CZE分离,压力进样0.5psi进样3s,电流很稳定,色谱峰出得也很好。下面是电流图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104231107_290438_1847768_3.jpg

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~4.5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

  • 细胞培养箱中出现霉菌如何消除

    细胞培养箱中的水盘里出现霉菌,虽然没有污染到细胞,而且也在水盘里加入新洁尔灭,但还是不放心,并且培养箱中现有很多细胞,请问有没有一种方法可以在不移除细胞的情况下能够消灭培养箱中的霉菌?已经长出霉菌,建议把所有细胞移出到其他培养箱。将这个培养箱全面消毒,喷酒精,紫外灭菌至少1个小时。因为我们组细胞染过菌,一旦培养箱不洁净,会导致所有培养细胞都要染菌的,爆发以后很可怕。培养箱出现霉菌很可能是水槽的水不够洁净,一定要用超净水超纯水来填充水槽,避免霉菌生长。要定期更换水槽中的纯水。一个月左右换一次。一个季度到半年要培养箱彻底灭菌一次。

  • 买了六个灯花了两万七千块大洋

    仪器型号:耶拿700P上个月申报了六个进口的空心阴极灯,今天无意中看到了报价,两万七千块大洋整。通过中间商采购的。我们是不是买贵了???

  • 【原创】一次自动进样器维修经历~~节约4万大洋~~

    【原创】一次自动进样器维修经历~~节约4万大洋~~

    [font=宋体][size=3][/size][/font] [font=宋体][size=3]前几天自动进样器进样针经常出现进样后针扎弯了,然后工作站变红出错,进行自动进样器复位,进样针第一次不能复位,点击复位命令两三次后才能复位,进样针又变直。这样带病运行了一晚,第二天一早发现进样针扎在进针座口旁边,彻底弯了,发现自动进样器的漏液传感器旁掉下两片半圆形的金属垫圈(估计前两天就有了没注意到),仪器瘫了。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003301037_209021_1846674_3.jpg[/img][/size][/font][align=center][size=3][font=宋体]掉下两片半圆形的金属垫圈[/font][/size][/align][size=3][font=宋体]连忙打[/font][font=Times New Roman]800[/font][font=宋体]询问工程师,把遇到的情况告诉了工程师,工程师没找到故障原因,建议上门检查原因后再做维修,公司没买保修合同,维修报价单传过来了[/font][font=Times New Roman]1390[/font][font=宋体]元。[/font][/size][font=宋体][size=3]个人考虑到工程师一来一回的耽搁时间、经费,干脆自己把故障原因找到,买个配件给老板节约点。[/size][/font][size=3][font=宋体]于是分析故障原因:[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]、进样针扎下来的位置向下移了;[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]、针座口堵了,针扎不下来变弯了。[/font][/size][size=3][font=宋体]进行故障原因确定,让进样针进几次样,在进样针回到针座时,沿进样针臂做一记号,发现每次记号不在同一位置,由此确认了故障是:进样针扎下来的位置向下移了。后来上下摇晃进样针臂,竟然上下有[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]3mm[/font][font=宋体]的移动,再次确认了故障问题所在。那是怎么造成的呢?跟掉下来的[/font][font=宋体]两片半圆形的金属垫圈有什么关系呢?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003301040_209024_1846674_3.jpg[/img][/font][/size][size=3][font=宋体]索性将进样器的上盖打开,看个究竟,最后确认,就是下面红圈的地方掉了一个垫圈,这个垫圈的作用是向上顶着进样针臂,不让上下晃动,难怪掉下了[/font][font=宋体]两片半圆形的金属垫圈。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003301041_209027_1846674_3.jpg[/img][/font][/size][font=宋体][size=3]连忙打电话给工程师,并将照片传给工程师,工程师也认可了故障原因,但问题也来了,这个垫圈在安捷伦没有备件,需要将整个进样部分全换了。后来仔细研究了一下,确实即便有这个垫圈备件,要换上这个垫圈也很难,这是一整块。[/size][/font][size=3][font=宋体]工程师将维修和备件报价传过来了,[/font][font=Times New Roman]40566.62[/font][font=宋体]元(含[/font][font=Times New Roman]1390[/font][font=宋体]元的维修费),这也太贵了吧。[/font][/size][font=宋体][size=3]自己动手,用薄铁片先搭一个支架。[/size][/font][size=3][font=Times New Roman] [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003301042_209029_1846674_3.jpg[/img][/font][/size][size=3][font=宋体]找来两节硅胶管(有弹性的),如图所示。将进样针扳直,上好。搞定,节约[/font][font=Times New Roman]4[/font][font=宋体]万大洋。[/font][/size][size=3][font=宋体] [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003301042_209030_1846674_3.jpg[/img][/font][/size][font=宋体][size=3]已正常运行一周了。[/size][/font][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003301044_209032_1846674_3.jpg[/img]

  • 【我们不一YOUNG】关于蜡样芽孢杆菌知多少

    [b][size=12px][font=微软雅黑]关于蜡样芽孢杆菌[/font][font=微软雅黑][/font][/size][/b][size=12px][font=微软雅黑]1、蜡样芽胞杆菌[i][/i]为革兰氏阳性大杆菌,大小为1-1.3×3-5μm,兼性需氧,[/font][b][font=微软雅黑]形成芽胞[/font][/b][font=微软雅黑],芽胞不突出菌体,菌体两端较平整,多数呈链状排列,与炭疽杆菌相似。引起食物中毒的菌株多为周鞭毛,有动力。[/font][font=微软雅黑][/font][/size][size=12px][font=微软雅黑]2、[/font][font=微软雅黑]培养特性  [/font][b][font=微软雅黑]蜡样芽胞杆菌生长温度为25-37℃,最佳温度30-32℃。在肉汤中生长混浊有菌膜或壁环,振摇易乳化[/font][/b][font=微软雅黑]。在普通琼脂上生成的菌落较大,直径3-10mm,灰白色、不透明,表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状,边缘常呈扩展状。[/font][font=微软雅黑][/font][/size][size=12px][font=微软雅黑]3、[/font][font=微软雅黑]耐热性  蜡杆芽胞杆菌耐热,[/font][b][font=微软雅黑]其37℃16小时的肉汤培养物的D80℃值(在80℃时使细菌数减少90%所需的时间)约为10-15分钟;使肉汤中细菌(2.4×107/mL)转为阴性需100℃20分钟。其游离芽胞能耐受100℃30分钟,而干热灭菌[i][/i]需120℃60分钟才能杀死[/font][/b][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑][/font][/size][font=微软雅黑][size=12px]4、在欧洲大都由甜点、肉饼、色拉和奶、肉类食品引起;在我国主要与受污染的米饭或淀粉类制品有关。 蜡样芽胞杆菌食物中毒通常以夏秋季(6-10月)最高。引起中毒的食品常于食前由于保存温度不当,放置时间较长或食品经加热而残存的芽胞以生长繁殖的条件,因而导致中毒。[font=微软雅黑](转载自[/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'PingFang SC', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif]食品微生物工程师[/font][font=微软雅黑])[/font][/size][/font]

  • 单增李斯特菌检测

    单核细胞增生李斯特氏菌及检验单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人畜李氏菌的疾病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。它广泛存在于自然界中,食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险,该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一,因此,在食品卫生微生物检验中,必须加以重视。一、生物学特性1、形态与染色该菌为革兰氏阳性短杆菌,大小约为0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍弯,两端钝圆,常呈V字型排列,偶有球状、双球状,兼性厌氧、无芽胞,一般不形成荚膜,但在营养丰富的环境中可形成荚膜,在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性,该菌有4根周毛和1根端毛,但周毛易脱落。2、培养特性该菌营养要求不高,在20--25℃培养有动力,穿刺培养2--5天可见倒立伞状生长,肉汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。该菌的生长范围为2--42℃(也有报道在0℃能缓慢生长),最适培养温度为35--37℃,在pH中性至弱碱性(pH9.6)、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好,在pH3.8--4.4能缓慢生长,在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。在固体培养基上,菌落初始很小,透明,边缘整齐,呈露滴状,但随着菌落的增大,变得不透明。在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色,刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)琼脂上,用45°角入射光照射菌落,通过解剖镜垂直观察,菌落呈兰色、灰色或兰灰色。3、生化反应该菌触酶阳性,氧化酶阴性,能发酵多种糖类,产酸不产气,如发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖(迟发酵)、山梨醇、海藻糖、果糖,不发酵木糖、甘露醇、肌醇、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖,不利用枸橼酸盐,40%胆汁不溶解,吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性,VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。4、血清型根据菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原,将单增李氏菌分成13个血清型,分别是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7”13 个血清型。致病菌株的血清型一般为1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b,后两型尤多。5、抵抗力该菌对理化因素抵抗力较强,在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活,对碱和盐抵抗力强,60-70℃经5-20min可杀死,70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌。该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。二、流行病学单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中,不易被冻融,能耐受较高的渗透压,在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在,所以动物很容易食入该菌,并通过口腔-粪便的途径进行传播。据报道,健康人粪便中单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70%的人可短期带菌,4-8%的水产品、5-10%的奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。人主要通过食入软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅饼、冻猪舌等而感染,约占85-90%的病例是由被污染的食品引起的。该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染,孕妇感染后通过胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于子宫颈的该菌也引起感染,性接触也是本病传播的可能途径,且有上升趋势。三、致病性单增李氏菌进入人体后是否发病,与菌的毒力和宿主的年龄、免疫状态有关,因为该菌是一种细胞内寄生菌,宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能。因此,易感者为新生儿、孕妇及40岁以上的成人,此外,酗酒者、免疫系统损伤或缺陷者、接受免疫抑制剂和皮质激素治疗的患者及器官移植者也易被该菌感染。该病的临床表现,健康成人个体出现轻微类似流感症状,新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症直至死亡。单增李氏菌的抗原结构与毒力无关,它的致病性与毒力机理如下:1、寄生物介导的细胞内增生,使它附着及进入肠细胞与巨噬细胞;2、抗活化的巨噬细胞,单增李氏菌有细菌性过氧化物歧化酶,使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物(为杀菌的毒性游离基团)分解;3、溶血素,即李氏杆菌素O,可以从培养物上清液中获得,为活化的细胞溶素,有α和β两种,为毒力因子。四、检验1、增菌培养取回的样品应在4℃下处理、存放和运送,如果是冷冻样品,则在检验前要保持冷冻状态。取25mL液体或25g半固体或固体样品放入含有225mL无选择性试剂增菌肉汤(EB)的均质杯中进行均质,然后转入三角瓶中,30℃培养4h,加入选择性试剂吖啶黄素、萘啶酮酸,继续培养20h和44h.。2、分离共培养24h和48h后,取EB培养物分别在OXA和LPM或加七叶苷/Fe3+LPM琼脂平板上划线。PALCAM琼脂可替代LPM琼脂。将OXA和PALCAM平板置于35℃培养24-48h,LPM平板在30℃培养24-48h。然后,把LPM平板放于解剖镜载物台上,以45°角入射光从平板下面照射平板,通过目镜垂直向下观察寻找可疑菌落。李斯特氏菌在LPM平板上呈有光泽的兰色或灰色。用已知阳性菌和阴性菌划线的平板作对照。加入七叶苷和Fe3+的LPM平板不用斜射光系统,选择可疑菌落的方法与在OXA上选择可疑菌落的方法相同。在OXA平板上李斯特氏菌菌落周围有一个黑色环,其它菌也可形成黑色环,但形成时间要在两天以上。李斯特氏菌在PALCAM和OXA平板上的菌落特征相似。在PALCAM和OXA或LPM平板上挑取5个或更多的典型菌落,分别划线于TSAYE平板上以得到更纯、更典型的单个菌落。食品检验中在TSAYE平板上纯化是必须的,因为在PALCAM和OXA或LPM平板上分离菌落时可能沾有不可见的受抑微生物。挑取5个典型菌落的原因是一个样品中可能分离到一种以上的李斯特氏菌。30℃TSAYE平板培养24-48h,如果不用于动力观察,也可在35℃培养。3、鉴定步骤(1)观察TSAYE平板通过斜射光观察,寻找呈兰灰至兰色菌落。在TSAYE上用已知菌作对照。(2)、从30℃或更低温度下培养的TSAYE平板上挑取典型菌落做成湿玻片在油镜下观察。湿玻片用0.85%生理盐水菌悬液制成。如果菌量太少,菌体黏附于载玻片上而呈现非运动性。李斯特氏菌是细短杆菌,可见轻微的旋转及翻滚。与已知的李斯特氏菌的对照相比,球形、大的杆状且快速泳动的都不是李斯特氏菌。(3)挑取典型菌落进行过氧化氢酶实验,李斯特氏菌呈过氧化氢酶阳性反应。(4)取16-24h的培养物进行革兰氏染色,李斯特氏菌呈革兰氏阳性杆菌。但是陈旧培养物革兰氏染色会发生变化,而且菌体可成球形。在染色过重的玻片上菌体有呈栅状排列的趋势,易误认为白喉菌而错判。(5)挑取典型菌落接种于TSBYE肉汤管中,35℃培养24h用做糖类发酵和其它生化项目实验。TSBYE肉汤管在4℃下可存放几天,也可反复接种。(6)在TSAYE平板上挑取典型菌落刺种到5%的绵羊血或马血琼脂平板上,刺种时避免触到平板底部和使琼脂破裂,同时设阳性对照(单核细胞增生李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌)和阴性对照(英诺克李斯特氏菌),35℃培养48h。单核细胞增生李斯特氏菌呈窄小的β-溶血环。(7)在明亮的光照下,观察经穿刺的血琼脂平板,单核细胞增生李斯特氏菌和西尔李斯特氏菌围绕穿刺点产生较清晰的β-溶血环,英诺克李斯特氏菌不产生溶血现象,而绵羊李斯特氏菌产生界限明显的较大溶血环,在此不要试图进行种间的区分,但要记录下溶血反应的特征,CAMP试验可区分它们间的溶血反应。(8)硝酸盐还原试验(选做)。用TSBYE肉汤培养物接种于硝酸盐肉汤中,35℃培养5天后,加入0.2mL试剂A,再加入0.2mL试剂B,混合,出现紫红色为阳性反应,表明硝酸盐已被还原,如无颜色出现,在试管内再加入少量锌粉,放置1h,如出现紫红色,表明硝酸盐仍存在,未被细菌还原。只有默氏李斯特氏菌还原硝酸盐,因此,从格氏李斯特氏菌中区分出默氏李斯特氏菌就必须进行这唯一的试验。本试验还有一等效试验,即加入0.2mL试剂A后,再加入0.2mL试剂C,出现橙色表明硝酸盐已被还原。如未出现颜色反应,也加入少量锌粉,若出现橙色表明硝酸盐未被还原。(9)将TSBYE培养物穿刺到SIM和MTM试管中,室温培养7天,每日观察,李斯特氏菌呈典型伞状生长。在MTM中伞状生长更典型。同时,30℃的TSBYE培养物在油镜下可见细菌作翻转运动。(10 )将TSAYE肉汤培养物分别接种于0.5%(W/V)葡萄糖、麦芽糖、七叶苷、甘露醇、鼠李糖、木糖发酵管内(可选用倒立发酵管),35℃培养7天,呈阳性反应的李斯特氏菌产酸不产气,李斯特氏菌发酵鼠李糖和木糖的情况见下表。所有李斯特氏菌对葡萄糖、七叶苷、麦芽糖均能发酵,除格氏李斯特氏菌均不能发酵甘露醇。如果在OXA、PALCAM或加七叶苷/Fe3+的LPM分离平板上菌落色素很明显,则七叶苷试验可免做。

  • 服务仪器仪表硬件快速PCB打样和批量厂家众一电路

    众一电路科技快速PCB打样厂家50元起可制造孔径¢0.2MM、线宽线隙3mil\3mil-全国PCB打样加急品质优越的PCB打样厂家众一电路下单星级业务注册跟单代码 W (热线 :18126038481 QQ3438698392)快速PCB样板/PCB小批量,批量均可加急出货,PCB打样最快可达4小时完成公司秉承:“诚信,创新,效率,协作,共享”的经营理念以高新技术创新为本。以高效的人力资源管理为基点,激发技术的转化力和推动力,坚持科学化,标准化,规范化,程序化的品质管理,致力于不断提高顾客满意度,打造PCB业界的特色名牌企业。“专业铸就卓越”相信我们会使您永远值得信赖的合作伙伴我们期待着您的支持与合作,热忱欢迎广大国内外客户来访注册业务跟单代码W 采用在线自助服务系统,透明的报价低价格、最小订单量,高质量15年PCB制造经验,全面的制造技术团队pcb打板单面加急4小时,四层pcb打样48小时加急!pcb打样单/双面:50元/10片(10*10CM以内)3天交货 四层板pcb打样:200元/10片(10*10CM以内)4-5天交货!免颜色费/测试费 ,免v割费/大板费!PCB板材: FR-4、半玻cem-1、94V0纸板、铝基板等小批量板费网络支付350元/平方 交期6-7天左右24小时加急费用为200元/款 48小时加急费为100元/款

  • 【资料】分光光度法应用5- 细菌细胞密度(OD 600)

    [size=5][font=宋体]实验室确定细菌生长密度和生长期,多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验,需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。[/font][font=Arial]OD600[/font][font=宋体]是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液,之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作,必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数,做出校正曲线。实验中偶尔会出现菌液的[/font][font=Arial]OD[/font][font=宋体]值出现负值,原因是采用了显色的培养基,即细菌培养一段时间后,与培养基反应,发生变色反应。另外,需要注意的是,测试的样品不能离心,保持细菌悬浮状态。[/font][font=Arial][/font][font=Arial][/font][font=Arial] [/font][font=宋体]分光光度计的重要配件[/font][font=Arial] —— [/font][font=宋体]比色杯[/font][font=Arial][/font][font=Arial] [/font][/size][size=5][font=宋体]比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。[/font][font=Arial][font=宋体]由于另外测试的样品量不同,所以一般分光光度计厂家提供不同容积的比色杯以满足用户不同的需求。目前市场已经存在一种既可用于核酸、紫外蛋白质定量,亦可用于蛋白比色法测定的塑料杯,样品用量仅需50μl,比色杯单个无菌包装,可以回收样品。如Eppendorf UVette?塑料比色杯,是目前比色杯市场上一个革新。随着生命科学以及相关学科发展,对此类科学的实验研究提出更高的要求,分光光度计将是分子生物学实验室不可缺少的仪器,也成为微生物、食品、制药等相关实验室的必备设备之一。[/font][/font][/size]

  • 【原创大赛】【奥运检测卫士】 永安市熟食中单增李斯特菌污染情况调查分析

    【原创大赛】【奥运检测卫士】  永安市熟食中单增李斯特菌污染情况调查分析

    永安市熟食中单增李斯特菌污染情况调查分析奥运会期间,运动员的身体健康是很重要的哦,所以对于熟肉制品中的被目前国际公认的单增李斯特菌的食源性致病菌检测理所当然,并且必须检测的了,重金属污染显然不会立即使运动员瘫倒,俗话说的好,“好汉禁不住三泡稀”,一旦有了致病菌污染,那么即使强健体魄的运动员,面对拉稀也禁不住哦,这样不但取不得好成绩,就是想站起来也相当困难,因此,借助于第五届原创大赛奥运主题,把去年9月至今年6月抽查本市的检测情况予以分析,至于伦敦奥运会期间的伙食检测,相信伦敦奥组委会做好相应的检测,俺就不关心了,直接为中国奥运健儿加油!随着全球性食品贸易的快速增长,目前微生物污染所引起的食源性疾病作为一个严重的公共卫生问题已引起人们的关注和研究。无论在发达国家或发展中国家都是影响食品安全的最主要原因之一。其中单增李斯特菌是目前国际公认的食源性致病菌,近几年来全球许多国家多次爆发由该致病菌所致的食源性疾病,因此,单增李斯特菌也是进出口食品的必检项目。随着我国食品安全风险监测网络直报系统已经全国性覆盖,李斯特菌属的检测也是微生物项目检测不可或缺的检测项目之一。李斯特菌属为革兰阳性、无芽孢杆菌,其中单增李斯特菌可引起严重的食源性李斯特菌病。该病是一种人畜共患病,主要能引起人与动物的脑炎、菌血症、流产、无败血症性单核细胞增多症等,尤其对免疫力低下,婴幼儿、老年人、孕妇等易受感染而发病,是病死率较高的,可引起爆发性食物中毒的重要病原菌之一(病死率为30% ~70%)。目前国际上公认的李斯特菌属(Listeria)共有7个菌种,即单核细胞增生性李斯特氏菌(L.monocytogenes,)、绵羊李斯特氏菌(L.ivanvii)、英诺克李斯特氏菌(L.innocua)、威尔斯李斯特氏菌(L.welshimeri)、西尔李斯特氏菌(L.seeligeri )、格氏李斯特氏菌(L.grayi)以及默氏李斯特氏菌(L.murrayi)。只有单核细胞增生性李斯特菌(L.moncytogenes,以下简称单增李斯特菌)与人的疾病密切相关。单增李斯特菌在太原市永安市的熟食中污染状况如何尚未报道,为杜绝和预防由单增李斯特菌引起的食物中毒事件在永安市发生,我们对太原市永安市的部分超市及农贸市场所供应的熟食进行了监测检验,为永安市预防李斯特菌病的爆发、流行及追踪污染源提供了科学依据。1 材料与方法1.1 样品来源2011年10月至2012年7月从永安市部分超市和农贸市场分批采样监测检验,共采集样品120份,见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647413_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012102003788_01_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012102152884_01_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012102293687_01_2355529_3.jpg1.2 标准菌株单增李斯特菌标准菌株由省中心下拨。1.3主要仪器与设备梅特勒万分之一电子天平、HBM一400B型无菌均质器、法国VITAK全自动微生物生化鉴定系统、电热恒温培养箱。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20120801210328682_01_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012103492167_01_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012104051426_01_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012104205671_01_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201208012104389322_01_2355529_3.jpg1.4培养基李氏增菌肉汤LB(LB1、LB2)、TSA-YE、SIM 动力培养基、PALCAM 选择培养基、TSI和其他鉴定用的生化培养基均购自北京陆桥技术有限责任公司。1.5 分离方法1.5.1增菌 以无菌操作取样品25 g加入到含有225 mL LB1 增菌液的均质袋中,在拍击式均质器上连续均质1 min~2 min;于30±1 ℃培养24 h,移取0.1 mL,转种于10 mL LB2 增菌液内,于30±[font=Times New Roman

  • 环氧乙烷灭菌气 —— 口罩消毒的坚实保障

    [font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]口罩是目前疫情防控中我们每个人生活中都要用到的,然而你是否注意到医用口罩的包装袋上有“本产品已采用环氧乙烷灭菌”的特别注明。什么是环氧乙烷?它是如何灭菌的?下面就一起来详细了解一下。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]灭菌气的有效成分[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]灭菌气以环氧乙烷(C2H4O,又称“EO”)为有效成分,混合二氧化碳而成。由于纯环氧乙烷易燃易爆,有较宽的爆炸极限,通过混合惰性气体二氧化碳,可以改变爆炸极限,降低爆炸风险,提高使用安全性。二氧化碳的比重和分子量和环氧乙烷比较相近,因此常用30%的环氧乙烷的混合气体来进行灭菌。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]环氧乙烷(C2H4O)的灭菌原理[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]环氧乙烷(C2H4O)与微生物的蛋白质分子发生非特异性烷基化作用,造成蛋白质失去反应基团,阻碍了蛋白质的正常生化反应和新陈代谢,导致微生物死亡,从而达到灭菌效果。环氧乙烷可以杀灭各种微生物,包括细菌繁殖体、芽孢、病毒和真菌孢子。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]环氧乙烷是一种烷化剂,穿透力强,能够使用各种包装材料并且可以在包装状态下灭菌。故多数不宜用一般方法灭菌的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌,它是目前最主要的低温灭菌方法之一。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]环氧乙烷(C2H4O)的灭菌过程[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]由于环氧乙烷易燃、易爆,且对人体有毒,所以必须在密闭的环氧乙烷灭菌柜内进行。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]环氧乙烷灭菌柜包括一个防泄漏、防爆炸的钢制腔室,首先通过加热(预处理)过程进行温度调节,然后进行抽真空,接着加湿器加湿以达到灭菌条件,再通入经过预热并且已经气化的灭菌气体。灭菌柜内的温度、湿度、浓度、时间、压力、包装方式都是影响灭菌效果的重要因素。灭菌效果通常使用生物指示剂来控制。[/color][/size][/font][b][font=Arial]灭菌气的应用[/font][/b][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]灭菌气广泛用于医用卫生材料(口罩、护垫等),一次性医疗器械(导管、注射针筒、内窥镜、起搏器等)和空心胶囊的生产。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]口罩生产完了,密封后,装在包装纸箱里,整个纸箱放到灭菌柜中进行灭菌。环氧乙烷有很强的穿透力,可以穿透箱子和塑料包装,穿透到产品上灭菌。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]虽然不是所有的口罩都做灭菌,但是医用的必须采用灭菌处理。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#000000]灭菌气的有效期[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]与其他气体不同,灭菌气的“寿命”较短,这就要求生产工厂通过较高技术和管理方法来确保灭菌气的稳定性,延长其有效期。气瓶处理工艺,充装工序操作,仪器分析质量监控,这每个环节的严谨把控,都决定了生产出的灭菌气的质量,稳定性及使用有效期。[/color][/size][/font][font=Arial][size=10.5pt][color=#222222]当然,作为环氧乙烷灭菌气的生产厂商,由于环氧乙烷的毒性和易燃易爆性质,其充装、储存、经营都需要具备专门的充装及经营资质许可证,相关部门对这些资质许可证的颁发有着严格的要求和控制。所以,选择灭菌气,一定要记住这些关键点。[/color][/size][/font]

  • MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达

    MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达

    MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达细胞模型的构建实验方法与步骤 细胞的复苏 1.复苏前的准备:打开水浴锅,设置温度37℃;紫外线将超净台消毒30 min;配置完全培养基。 2.将要复苏的H69、H446细胞从液氮取出,用一次性PE手套包裹冻存管,迅速放入水浴锅中震荡,使其快速融化。 3.在15 mL离心管中加入5 mL完全培养基及融化的细胞悬液,900 r/min离心8分钟,弃去上清,得到细胞沉淀。 4.在25 cm2的培养瓶中加入5 mL完全培养基,并用1 mL培养基将沉淀的细胞重悬并加入准备好的培养瓶中,放入CO2恒温培养箱中继续培养。 细胞的传代 1.选取在悬浮培养瓶中生长至90%的H69细胞,用移液枪将细胞悬液移入15 mL离心管中,选取在贴壁培养瓶中生长至90%的H446细胞,用PBS溶液将细胞吹至漂浮,并移入15 mL离心管中,两种细胞均900 r/min离心8分钟,弃掉上清。 2.分别在3个25 cm2培养瓶中加入5 mL完全培养基,在细胞沉淀中加入3 mL培养基并充分吹打混匀,将3 mL细胞悬液平均放入3个培养瓶中并混匀,放入培养箱中继续培养。 MSI1低表达细胞模型的构建1.从-80℃冰箱取出慢病毒载体冰上融化,将慢病毒用空白培养基稀释为滴度2×108,充分混匀,准备好病毒感染增强液。2.将25 cm2悬浮培养瓶中H69细胞移入15 mL离心管中并用移液枪充分吹打混匀,取其中500 μL放入细胞计数仪中计数,取出1.2×106个细胞置入新的离心管中,加入空白培养基至6 mL。3.在12孔板中以MOI=10的病毒滴度进行感染,培养16 h。4.16 h后将细胞悬液离心,换成不加双抗的完全培养基继续培养,72 h后观察荧光。5.待细胞生长至状态良好,加入1 μg/mL嘌呤霉素筛选至90%以上细胞均产生荧光。荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测MSI1在mRNA水平的表达 总RNA的提取分别将细胞离心,PBS缓冲液清洗2次,900 r/min离心8 min,得到细胞沉淀。分别加入1 mL Trizol,用移液枪吸打至细胞完全破裂,加入200 μL氯仿,震荡30 s,室温静置10 min,以有效分离无机相和有机相,随后4℃,12,000 g/min离心15 min。将上清移至高压过的1.5 mL离心管中,加入与上清等体积的异丙醇,轻柔颠倒震荡数次,室温静置10 min,随后4℃,12,000 g/min离心10 min。弃去上清,加入75%无水乙醇,4℃,12,000 g/min离心5 min。弃去上清,沉淀置于冰上自然干燥,但不可完全干燥。用30 μL DEPC水溶解总RNA。用NanoDrop One超微量分光光度计进行定量和纯度检测,用1%琼脂糖凝胶电泳进行完整性检测。 cDNA的合成逆转录体系试剂名称使用量模板RNAMonScriptTM 5*RT111 All-in-One MixMonScriptTM dsDNaseNuclease-Free Water1 μg4 μL1 μLup to 20 μL将混合液轻柔吹打混匀,瞬时离心,37℃ 2 min,55℃ 15 min,85℃ 5 min,得到cDNA。 Q-PCR检测MSI1 mRNA的表达GAPDH引物序列:Forward primer:Reverse primer:5’-GGTCGGAGTCAACGGATTTG-3’5’-ATGAGCCCCAGCCTTCTCCAT-3’MSI1引物序列:Forward primer:Reverse primer:5’-GAACCATCCCGTCCTGTATCA-3’5’-GAAACCATGAAGCCCCAACC-3’Q- PCR反应体系:Q-PCR反应体系试剂名称使用量cDNAForward primerReverse primerMonAmpTM Chemhs qPCR MixLow ROXNuclease-Free Water50 ng0.2 μL0.2 μL5 μL0.1μLup to 10 μLQ-PCR反应程序: Q-PCR反应程序反应步骤反应温度反应时间循环次数预变性95℃10 min1变性95℃10 s40退火55-65℃10 s延伸72℃30 s溶解曲线溶解曲线按仪器默认溶解曲线 结果采用t检验,用Graphpad prism5计算MSI1在mRNA水平的表达量。 Western blot检测MSI1在蛋白水平的表达总蛋白的提取将对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞移入15 mL离心管中,900 r/min离心8 min,并用PBS溶液洗涤2次,以去除培养基中血清影响。分别加入含PMSF的蛋白裂解液100 μL,与细胞充分混匀。4℃裂解1小时后,4℃,12000 g/min离心15 min,将上清移至新的离心管中,得到细胞总蛋白。 BCA法测定蛋白浓度 将Solution A和Solution B以50:1的体积比配置BCA工作液,充分混匀。将2 mg/mL蛋白标准品等比稀释,最小浓度为125 μg/mL,并分别与配置好的200 μL BCA工作液混匀,铺入96孔板中。37℃孵育30 min,测定波长562 nm处OD(光密度值)值,并绘制蛋白标准曲线。取适量H69-NC、H69-shMSI1细胞总蛋白,20:1稀释后,与200 μL BCA工作液混合均匀。37℃孵育30 min,用酶标仪测定波长562 nm处OD值,根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。Western blot检测MSI1蛋白的表达 分别收集对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞总蛋白,加入相应体积4×SDS Loading Buffer,沸水浴煮5 min,分别取40 μg细胞总蛋白,在提前配制的10% SDS-PAGE分离胶电泳。电泳结束后,将蛋白转至PVDF膜上。用含5%脱脂牛奶的封闭液 37℃封闭1.5 h。弃去封闭液,用TBST缓冲液洗3次,每次10 min,加入MSI1兔单克隆抗体(1:1000),并以GAPDH为内参,加入GAPDH鼠单克隆抗体(1:5000);4℃孵育过夜,次日用TBST缓冲液洗膜3次,每次10 min。在敷有MSI1抗体的膜上加入辣根酶标记山羊抗兔IgG(1:5000),在敷有GAPDH抗体的膜上加入辣根酶标记山羊抗鼠IgG(1:5000),37℃敷育1 h,TBST 缓冲液洗膜3次,每次10 min。用增敏化学发光底物试剂检测,暗室曝光显影。在GAPDH表达量相同的情况下比较MSI1的表达情况。多次重复,应用ImageJ计算出各个蛋白条带的灰度对比,结果采用t检验,并应用Graphpad prism5作出柱状图。 MSI1在人小细胞肺癌细胞系中高表达 提取人正常肺上皮细胞BEAS-2B、小细胞肺癌细胞H446、H69的RNA,利用Q-PCR检测MSI1在正常肺上皮及小细胞肺癌细胞系中的表达情况,结果如图2-1显示,MSI1在小细胞肺癌细胞系H446、H69中的表达远远高于正常肺上皮细胞。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201428158_6718_5389809_3.png1 MSI1 mRNA在小细胞肺癌细胞系中的表达(**代表与正常肺上皮细胞相比,小细胞肺癌细胞MSI1表达量增高具有统计学意义,P0.01)。 MSI1低表达细胞模型的构建本实验选取人小细胞肺癌细胞系H69细胞,使用慢病毒感染技术敲低MSI1的表达,同时设置对照组除外病毒本身对细胞产生的影响,待细胞状态良好使用嘌呤霉素筛选,然后在荧光显微镜下观察如图2-2,可见H69-NC、H69-shMSI1细胞均产生绿色荧光,表明人小细胞肺癌H69细胞慢病毒感染成功。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201428036_9359_5389809_3.png MSI1低表达细胞模型的构建。应用shMSI1慢病毒载体感染H69细胞,利用嘌呤霉素筛选,并在荧光显微镜下观察。 荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测MSI1的mRNA表达水平提取对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞的RNA,并测量RNA浓度及完整性,用1%琼脂糖凝胶电泳检测完整性可见,RNA有三条带,从上到下依次为28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA,且28S rRNA的亮度是18S rRNA的两倍。用NanoDrop One超微量分光光度计测定人总RNA的A260/A280的值为2.00左右,A260/A230的值为2.30左右,说明提取的RNA质量和完整性很好,可以用于后续试验。利用Q-PCR技术检测各细胞内MSI1 mRNA相对表达量,结果如图2-3所示,与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1 mRNA表达量明显降低(P0.01),抑制率约为75%。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201434330_8277_5389809_3.png MSI1在RNA水平的表达(***代表与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1 mRNA表达量下降具有统计学意义,P0.001)。 Western blot检测MSI1蛋白表达水平将BSA标准品(2 mg/mL)进行等比稀释,最低浓度为125 ug/mL,并应用BCA蛋白质浓度测定试剂盒测定在波长562 nm下的OD值,以OD值为纵坐标,对应蛋白质浓度(μg/mL)为横坐标,绘制标准蛋白曲线如图2-4所示。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201435248_4142_5389809_3.png图2-4 标准蛋白曲线分别提取H69-NC、H69-shMSI1细胞的总蛋白质,利用Western blot技术检测各细胞内MSI1蛋白的表达情况。结果如图2-5所示,与对照组相比,MSI1蛋白表达在H69-shMSI1细胞中明显降低。表明MSI1低表达细胞模型构建成功。ahttps://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201437240_855_5389809_3.pngbhttps://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201434999_3303_5389809_3.png图2-5 MSI1蛋白水平表达:(a)MSI1蛋白表达条带;(b)MSI1蛋白的相对表达量。(*表示与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1蛋白表达下降具有统计学意义,P0.05)。首先验证MSI1在小细胞肺癌细胞系中的表达情况,利用Q-PCR技术检测在RNA水平,MSI1在肺正常上皮细胞及小细胞肺癌细胞系中的表达,结果显示,MSI1在小细胞肺癌细胞中的表达明显高于正常肺上皮细胞。随后以人经典型小细胞肺癌细胞系H69细胞为研究对象,构建MSI1低表达细胞模型,应用shMSI1慢病毒载体感染H69亲本细胞,同时设置对照组除外病毒本身对细胞产生的影响,利用Q-PCR及Western blot验证MSI1在RNA及蛋白水平的表达,结果显示,H69-shMSI1组MSI1的mRNA及蛋白的表达明显降低。表明MSI1低表达细胞模型构建成功,可以用于后续实验。

  • 四、微生物知识及消毒与灭菌知识判断题试题

    四、微生物知识及消毒与灭菌知识判断题试题四、判断题(每题2分、共10分)1.细菌一般为有性繁殖,以二分法繁殖,几十分钟或1~2小时分裂一次。………………( )2.病毒是一类体积十分微小,结构简单,只含一种核酸(DNA或RNA),没有产生能量的酶系统,只能在活细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。…………………………( ) 3.氮是组成蛋白质和核酸的重要元素。…………………………………………………( )4.消毒——用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物,使其达到无害化。通常是指杀死病原微生物的繁殖体,但能破坏其芽孢。所以消毒是彻底的,能代替灭菌。( )5.环氧乙烷是广谱杀菌剂,能杀灭细菌、芽孢和多种病毒,还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒(有致变异性),用于药品方面极有限,多用于医疗器械、塑料制品等灭菌。…………………………………………………………………………………( ) 有兴趣的跟帖做一下,标准答案以后帖出。建议版主:如答案全对者能否适当给加分!

  • 大家来猜猜,这HCL值多少大洋?猜中有奖哦!

    大家来猜猜,这HCL值多少大洋?猜中有奖哦!

    如题。今天很不幸,我的金灯又坏了,前面一直用国产的金灯,最坏的时候一周就挂了,好的也能坚持一个把月,原来某拿公司的原装灯,用了也就三四个月吧,后来就一直买国产的灯,没办法,便宜呀!今天灯又坏了。我抽屉里已经有7只坏了的金灯了,怒了,准备买只进口的,致电某拿公司售后,然后我就犹豫了。看看图,下边是俺国家滴金灯,上边就是某拿公司的原装灯!大家猜猜,这某拿公司的灯值多少大洋!我还是给点选项,在图片下方哦!欢迎参与。。。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212191723_413920_2417632_3.jpgA .600RMB B. 1200RMB C. 3000RMB D. 6000RMB E. 9000RMB好吧 在此宣布正确答案 那就是E 9000RMB 只能兴叹,这灯俺买不起,咱国产灯,代理商带过来是450RMB

  • 146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基]

    培养基及成分 1、Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种 2、 Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 :When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 3、Azotobacter Medium (固氮菌培养基) KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O   0.1g Na2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量) Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g Adjust (调) pH to 7.2 适用范围:固氮菌、胶质芽孢杆菌 4、Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml :Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5、Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌)、嗜热乳酸链球菌 6、Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌) 7、Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基) Peptone(蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸馏水) 1L 8、Glycerol Agar (甘油琼脂) Peptone (蛋白胨) 5g Beef extract (酵母膏) 3g Glycerol (甘油) 20g Top water (自来水) 1000ml Agar (琼脂) 15g pH 7.0-7.2 9、Rhizobium medium (根瘤菌培养基)AS 9 Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol (甘露醇) 10g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 800ml pH 7.2 :Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加水200毫升,15磅蒸煮1小时,经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围:大豆根瘤菌(慢生型)、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌(快生型)、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10、 Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11、 Glucose Asparagine (葡萄糖、天门冬素琼脂) Glucose (葡萄糖) 10g Asparagine (天门冬素) 0.5g K2HPO4 0.5g Water (水) 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围:刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌(绛红小单孢菌) 12、Gause′s Synthetic Agar (高氏合成一号琼脂) KNO3 1g Soluble starch(可溶性淀粉) 20g K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4 0.01g Agar (琼脂) 20g water (水) 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围:刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌(绛红小单孢菌)、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌 13、Wort Agar (麦芽汁琼脂) Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料(未加酒花),稀释至12柏林,加琼脂15克,溶化后分装。15磅灭菌30分钟。) 适用范围:克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊

  • 【我们不一YOUNG】什么是羊肚菌 羊肚菌的功效与作用

    羊肚菌,这一名字可能初听之下并不为人所熟知,然而,它在真菌界的地位却是举足轻重的。作为一种珍贵的食用菌,羊肚菌不仅以其独特的形态和美味受到人们的喜爱,更因其丰富的营养价值和多种药用功效而被誉为“菌中之王”。一、羊肚菌的形态与生长环境羊肚菌,又称羊肚蘑、羊肝菜,其菌盖呈不规则圆形或长圆形,表面凹凸不平,似羊肚而得名。羊肚菌的菌盖表面呈黄褐色至黑褐色,菌柄呈白色至浅黄色,中空,基部稍膨大。这种独特的形态使得羊肚菌在众多的食用菌中脱颖而出,成为餐桌上的珍品。羊肚菌的生长环境相当特殊,一般生长在海拔2000~3000米左右的针叶阔叶林混交林中,多生于阔叶林的地上及路旁,单生或群生。它对于土壤、气候和光照等条件的要求都相当苛刻,这也使得羊肚菌的产量相对较少,价格较为昂贵。二、羊肚菌的营养价值羊肚菌的营养价值极高,含有丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素及多种矿物质。其中,蛋白质含量高达20%以上,比一般的食用菌都要高。此外,羊肚菌还含有多种人体必需的氨基酸,如赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等,具有很高的营养价值。除了基本的营养成分外,羊肚菌还含有多种具有特殊功效的活性物质,如多糖、皂苷、黄酮等。这些活性物质不仅赋予了羊肚菌独特的口感和风味,更使其具有了多种药用价值。三、羊肚菌的功效与作用1. 增强免疫力:羊肚菌中的多糖类物质具有增强免疫力的作用,能够提高人体的抗病能力。经常食用羊肚菌,可以有效预防感冒、流感等常见疾病。2. 抗肿瘤:研究表明,羊肚菌中的皂苷类物质具有抗肿瘤的作用,能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散。对于癌症患者来说,适量食用羊肚菌有助于辅助治疗和康复。3. 降血脂:羊肚菌中的黄酮类物质具有降低血脂的作用,能够调节血脂代谢,预防心血管疾病的发生。对于高血脂、高血压等患者来说,食用羊肚菌具有很好的保健作用。4. 抗氧化、抗衰老:羊肚菌中的多种活性物质还具有抗氧化、抗衰老的作用,能够延缓人体细胞的衰老过程,保持皮肤的弹性和光泽。经常食用羊肚菌,有助于美容养颜、延缓衰老。5. 健脾开胃、助消化:羊肚菌还具有健脾开胃、助消化的作用,能够改善食欲不振、消化不良等症状。对于脾胃虚弱、消化不良等人群来说,食用羊肚菌具有很好的调理作用。四、食用方法羊肚菌的食用方法多种多样,既可以作为主菜单独烹饪,也可以作为配菜与其他食材搭配使用。常见的烹饪方法有炖、炒、蒸、煮等。在烹饪过程中,可以适当添加一些调料和配菜,如葱、姜、蒜、辣椒等,以增加口感和风味。总之,羊肚菌作为一种珍贵的食用菌,不仅美味可口,更具有丰富的营养价值和多种药用功效。适量食用羊肚菌,不仅可以满足人们的味蕾需求,更有助于保持身体健康和延缓衰老。在享受美食的同时,我们也能感受到大自然的馈赠和生命的奇迹。

  • 显色培养基菌落辨识第二期【沙门氏菌】

    显色培养基菌落辨识第二期【沙门氏菌】

    显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色或产生不同菌落形态及周边培养基变化的原理来检测微生物的新型培养基。随着技术的发展显色培养基也逐步的被写入各类标准,但检测人员对该培养基的依赖程度越来越高,使得致病菌检测的漏检率或误判率逐步升高。这不仅给生产企业带来损失也给检测机构的检测成本大大增加。为此我们将给大家带来一系列关于食品微生物检测显色培养基的辨识图片及所用菌株。供大家参考[img=图A,651,651]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221430337039_780_3830199_3.jpg!w651x651.jpg[/img] 图A[img=图B,652,652]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221430541439_4962_3830199_3.jpg!w652x652.jpg[/img] 图B[img=图C,651,651]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221431046895_8486_3830199_3.jpg!w651x651.jpg[/img] 图C上图所用培养基为[color=#333333]chromagar 科玛嘉 沙门氏菌显色培养基。图A 为 ATCC 14028 [color=#333333]鼠伤寒沙门氏菌 ;图B为 ATCC 27853 铜绿假单胞菌;图C为 少动鞘氨醇单胞菌[/color][/color][color=#333333][/color]

  • 如何做好细胞培养?—实验室细胞培养技术面面观

    [align=center][b][size=14pt][font=等线]如何做好细胞培养?[/font]—实验室细胞培养技术面面观[/size][/b][/align][align=center][size=11pt]会议时间[/size][size=11pt]:[/size][size=11pt]2020年[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]月[/size][size=11pt]17[/size][size=11pt][font=等线]日[/font]1[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]:00[/size][/align][b][size=12pt]内容[/size][size=12pt]介绍:[/size][/b][size=10.5pt]1. 细胞培养简介[/size][size=10.5pt];[/size][size=10.5pt]2. 细胞培养实验室[/size][size=10.5pt]:实验室安全等级、培养设备[/size][size=10.5pt]/耗材[/size][size=10.5pt]、无菌技术;[/size][size=10.5pt]3. 细胞培养基础[/size][size=10.5pt]:细胞系、细胞培养环境([/size][size=10.5pt]PH,CO2浓度,温度,湿度)[/size][size=10.5pt];[/size][size=10.5pt]4. 细胞培养方案[/size][size=10.5pt]:贴壁细胞传代、悬浮细胞传代、细胞冻存、细胞复苏、细胞计数;[/size][size=10.5pt]5. 细胞培养常见问题[/size][size=10.5pt]:细胞污染、细胞太稀、细胞消化过度、细胞复苏状态不佳。[/size][b][size=12pt]讲师[/size][size=12pt]介绍:[/size][size=11pt]雷俊[/size][size=11pt]:[/size][/b][size=11pt]北京大学细胞生物学博士博士研究生期间,主要从事细胞周期事件与肿瘤发生关系的研究,具有细胞生物学、蛋白质组学等学科背景,精通分子细胞生物技术、成像技术等研究手段。现任瑞沃德生命科技有限公司细胞产线产品经理。[/size][b]报名地址:[/b][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10287.html][u][font='Times New Roman'][color=#0000ff]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10287.html[/color][/font][/u][/url]

  • 【分享】沙门氏菌是导致食源性疾病爆发的主要病原菌

    1 沙门氏菌基本概况及食品污染状况沙门氏菌(Salmonella)是一种无芽孢、无荚膜的革兰氏阴性杆菌。除雏鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外,其余都有鞭毛,能运动。多数具有菌毛,能吸附于细胞表面,发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露糖产酸产气,不发酵乳糖和蔗糖,不产生吲哚,不分解尿素,多数产硫化氢,不液化明胶,MR、VP 实验阴性(王辉等 2008)。沙门氏菌是肠杆菌科中最重要的病原菌属,目前全世界已发现约 2500 种血清型,这些血清型均可引起食源性疾病(Humphrey 2000)。与人类疾病有关的血清型主要包括伤寒沙门氏菌,甲、乙和丙型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鸭沙门氏菌和新港沙门氏菌等,其中以鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌及猪霍乱沙门氏菌最为常见。在国际上公认的沙门氏菌中有三个血清型以中国地名命名,分别是上海沙门氏菌(Salmonella Shanghai)、自贡沙门氏菌(Salmonella Zigong)和广州沙门氏菌(SalmonellaGuangzhou)(王辉等 2008)。进食被沙门氏菌污染的食品后,沙门氏菌可通过肠道上皮细胞经毛细血管和淋巴管进入血液,导致菌血症和全身感染。同时,沙门氏菌被巨噬细胞胞饮并内化时产生极强的内毒素,从而引起腹泻、发热及肠道炎症反应。沙门氏菌源于家畜、家禽、人类及鼠类的粪便之中,常污染的食品为鸡肉、猪肉、牛肉、鱼肉、香肠、火腿、熏肉制品和鸡蛋等(藤仁明 2007;Schroeter et al. 1994)。孙晓林等(2008)对兰州市肉与肉制品微生物污染状况研究结果表明,生猪胴体和肉样沙门氏菌检出率分别为 7.5%和 14%。洪文展(2005)发现深圳市售肉品沙门氏菌污染率为 26.2%。Capita 等(2003)对西班牙的鸡肉感染沙门氏菌情况做了调查,结果显示 49%的鸡肉含有沙门氏菌。Uyttendaele 等(1997)对比利时禽肉及其制品中沙门氏菌的流行状况研究表明,1993 年沙门氏菌的平均污染率为 19.4%,1994 年为 24.1%,1995 年为21.9%,1996 年为 36.7%。此外,Bosilevac 等(2009)对美国零售牛肉的研究结果、Berends等(1997)对猪胴体及猪肉的研究结果和 Jorgensen 等(2002)对市售生鸡肉沙门氏菌的污染状况研究均表明沙门氏菌广泛存在于食品性动物、动物胴体、零售肉及肉制品食品之中。

  • 南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室研究团队:痕量铝影响海洋碳循环与气候变化研究获进展

    近日,中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室研究团队联合德国赫姆霍兹基尔海洋研究中心、英国帝国理工学院、加拿大国立科学研究院等,采用痕量金属洁净培养技术、[font=等线][sup][size=13px]55[/size][/sup][/font]Fe同位素示踪方法,开展了多项实验,发现痕量铝添加可以显著提高受铁限制硅藻的叶绿素合成速率、光合效率和生长率。该研究揭示了痕量铝有益于铁限制海洋硅藻叶绿素合成的新现象,为铁铝假说提供了新证据,也为在南大洋等铁限制海域开展海洋铝施肥负排放技术研究提供了重要基础。相关研究成果以Promoting effects of aluminum addition on chlorophyll biosynthesis and growth of two cultured iron-limited marine diatoms为题,发表在《湖沼与海洋》(Limnology and Oceanography)上。[align=center][img=,600,220]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/1297eec2-03f0-4aa1-84f7-6961c9b394fe.jpg[/img][/align]铝是地壳中含量最高的金属元素,普遍存在于各种环境与生物体。然而,目前尚未发现铝具有确切的生物学功能。铝在淡水和土壤中的浓度可达mmol/L,相较而言,海水中溶解铝的浓度要低几个数量级,常处于痕量水平。中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室研究团队从十多年前开始关注铝添加对海洋浮游植物生长的影响,开展了一系列现场和室内实验研究,发现痕量铝添加可促进海洋浮游植物固碳,增强生源碳向深海输出、埋藏封存,从而影响海洋碳汇效能,进而调节气候变化。有证据表明,过去80万年,通过沙尘沉降输入到南大洋的铝与铁通量与冰期-间冰期气候回旋存在密切关联。通常认为,南大洋浮游植物生长受铁限制,铁输入的变动被认为是调节碳汇与气候变化的关键因子。研究人员发现,铝与铁协同作用,很可能是南大洋等海域碳输出、埋藏的关键,因而提出了“铁铝假说”,指出铝与铁一样,可能是调控海洋碳循环和碳汇形成的关键因子,在冰期-间冰期气候变化过程发挥重要作用。研究团队证实痕量铝添加显著提高硅藻净固碳量,降低颗粒有机碳分解速率。根据铁铝假说,研究团队提出“海洋铝施肥”观点,认为这有可能发展成为潜在高效的负排放技术与方法,并预测南大洋等受铁限制的高营养盐低叶绿素海域是开展铝施肥及铁铝同时施肥的理想区域。然而,在大规模现场施肥实验之前,仍需要在不同时空尺度上检验海洋铝施肥的效能及其潜在环境影响。痕量铝添加如何影响铁限制浮游植物尤其是硅藻的生长,是需要解答的关键问题之一。这些结果表明,铝可能会促进叶绿素的生物合成,有利于叶绿素受限硅藻的光合效率和生长。我们推测,添加 Al 可通过促进超氧化物介导的细胞内叶绿素生物合成,提高细胞内铁的利用效率。研究工作得到国家留学基金、广东省自然科学基金、南方海洋科学与工程广东省实验室(广州)人才团队引进重大专项等的支持。[来源:仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

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