阿奇霉素对照品

请问坛子里有做阿奇霉素有关物质(2010版药典)的没?我们现在做的分散片有关物质超大（用得原料是在新药典生效前买的，测效价。河北一知名厂商的），用其他公司的要小的多。杂质阿奇霉素B，阿奇霉素GX，红霉素A偕亚胺醚的相对保留时间分别为1.53；0.61；0.27.柱子用得是资生堂的250*46的C18柱(就是2010版药典征求稿中提到的)。由于现在买不到系统适用性的对照品，按保留时间总是不能确定这几个峰的位置，请问哪位兄弟在阿奇霉素原料厂做过，这几个峰如何确定？用什么柱子？谢谢！另:鄙视下中检所，卖的对照品(92.2%比USP.EP.JP的都低2个多点)检所有厂家的阿奇霉素原料都不合格，也导致这些厂家欲生。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011291238_262620_1638724_3.jpg

【中文名称】阿维霉素；卑霉素【英文名称】avilamycin;Surmax【结构或分子式】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203112053_353986_1855403_3.jpg 【相对分子量或原子量】1404.24（阿维霉素A）；1376.19（阿维霉素B）【用途】 主要对革兰氏阳性菌有效，而对革兰氏阴性菌效果差。其中以阿维霉素A的活性最高，特别是对梭菌、链球菌和杆菌有效；而阿维霉素B对葡萄球菌的活性最高。用量：用于4月龄以内的仔猪，每吨饲料20～40g；6月龄的猪每吨饲料加10～20g。【制备或来源】 由Streptomyces viridochromogenes发酵生产的甲基羟基甲氧基苯甲酸（DCIEA）的一种酯。是低聚糖抗生素orthosomycin类的总称。约有A、A′、B、C、D、D2、E、F、G、H、I、J、K等十多个组分。【生产单位】略

高效液相色谱法快速测定血清中的庆大霉素和阿米卡星庆大霉素和阿米卡星是用于严重革兰氏阴性细菌感染治疗的氨基糖苷类抗生素。像其他氨基糖苷类抗生素一样，庆大霉素和阿米卡星的有效治疗范围狭窄容易导致肾脏毒性和耳毒性。因此，监测庆大霉素和阿米卡星血清中的水平对于安全和有效的临床应用十分重要。最近，高压液相色谱法已被报道用于氨基糖苷类抗生素的测定。多数测定需要柱前或柱后衍生荧光检测。这些方法涉及耗时的预处理，如血清中氨基糖苷类抗生素的柱萃取以及溶剂。本实验开发了一种较为简单的预处理方法来测定血清中的庆大霉素和阿米卡星，并与荧光偏振免疫测定法进行了比较。材料和方法：庆大霉素和阿米卡星购自药店，邻苯二甲醛（瑞尔丰化工），2-巯基乙醇、庚烷磺酸钠、1,2-乙烷二磺酸二钠、色谱乙腈、蒸馏水。蛋白质沉淀剂（10mM辛烷磺酸钠溶解于3.5％高氯酸中）。庆大霉素的流动相为含有22 mM的1,2 - 乙烷二磺酸二钠和5mM辛烷磺酸钠的水 - 乙腈混合物（80：20，体积/体积），用乙酸调节pH至约3.5。阿米卡星的流动相为含有37 mM的1,2 - 乙烷二磺酸二钠和5mM辛烷磺酸钠的水 - 乙腈混合物（80:20，体积/体积），用乙酸调节pH至约3.5。仪器和色谱条件：安捷伦高效液相色谱仪1200，UV检测器，色谱柱：安捷伦Agilent液相色谱柱4.6﹡150﹡5u，流动相的流速保持在1毫升/分钟。邻苯二甲醛试剂用泵以0.6毫升/分钟的流速。实验部分：将50ul血浆加入到50ul蛋白质沉淀剂，涡旋混合数秒后，使用KM-15200离心机离心2分钟（15000rpm）,离心后上清液进样。正常血清，分别加入已知量的庆大霉素和阿米卡星，进行分析，根据加入量和峰面积绘制标准曲线。荧光偏振免疫通过市售的试剂盒进行。结果：图1为庆大霉素的标准色谱图，庆大霉素加入对照血清的色谱图以及对照血清的色谱图。（其中交标庆大霉素的含量为15ug/ml）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409300949_516466_2188679_3.jpg图2为阿米卡星的标准色谱图，阿米卡星加入对照血清的色谱图以及对照血清的色谱图，经过蛋白质沉淀剂处理后的血清和未处理的色谱图基本形同，皆未见到影响抗生素检测的干扰杂质峰。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409300949_516467_2188679_3.jpg以峰面积作为纵坐标，血清中的药物浓度为横坐标得到庆大霉素的线性标准曲线（3-50ug/ml）为y =0.979x - 0.006，阿米卡星的线性标准曲线（0.5-10ug/ml）为y= 0.998x - 0.04根据庆大霉素和阿米卡星在血清中不同浓度的重复测定，得到庆大霉素和阿米卡星的批内变异系数分别为0.8 -2.9％和1.6-3.1％，批间变异系数为2.0-5.0％及1.9-5.6％。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409300949_516468_2188679_3.jpg回收率试验：分别将15ug/ml的庆大霉素水溶液加入含有15ug/ml阿米卡星的血清中和将4ug/ml的阿米卡星水溶液加入4ug/ml的血清中。将它们的峰面积进行比较。基于三个样品的平均值，庆大霉素和阿米卡星的分别为99.0%和98.5%.通过该方法获得的结果与用荧光偏振免疫测定法进行了比较,回归方程和相关系数分别为庆大霉素：y=1.027x - 1.090，n =44和r=0.996。阿米卡星y=0.998x - 0.206， n =42和r=0.957。讨论：本实验采用了蛋白质沉淀剂，排除干扰物，再将样品进行分析，优化的分析方法与荧光偏振免疫测定法进行了比较种，该方法方法的优点是速度快，操作简便，重复性好。因此，该方法可用于该药物的分析。

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/05/201605200951_594019_3110244_3.jpg在对阿奇霉素过液相的时候，出现的问题时浓度梯度和峰面积不成正比，是什么问题

请大家参考一下[img]http://bbs.instrument.com.cn/images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=200213]阿奇霉素.pdf[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/02/201002031811_200369_1638724_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/02/201002031811_200370_1638724_3.jpg[/img]

（一）分析背景及色谱条件 红霉素是一种十四元大环内酯类抗生素，一直是临床上治疗革兰氏阳性菌感染的重要药物，半个世纪以来为人类提供了一条安全高效的用药途径。经过不断研究人们相继开发出了耐酸性好的第二代红霉素和不易引起细菌耐药性的第三代红霉素。阿奇霉素可以说是目前第二代红霉素中最具有活力的大环内酯类抗生素，其生产步骤简单，在国内外都具有很大的生产量，尤其在国内，在许多药厂都有生产。但与其它第二代大环内酯类抗生素相比阿奇霉素的HPLC分析一直是个难点，这也与其独特的十五元环结构有关系。而且我们经过试验发现不同色谱柱对其检测的结果差别很大，普通的C18柱无法保证效果，C18 BDS的色谱柱的检测结果也不是很好，我们尝试了几种不同的在C18柱基础上经过各种填料处理的色谱柱，其中包括了“极限”系列的色谱柱。 阿奇霉素分子式http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911211508_185763_1916092_3.jpg 色谱条件：磷酸氢二钾盐水溶液与乙腈以45：55混合。检测波长210纳米，柱温30°C，流速1.0ml/min，进样量50微克。阿奇霉素样品取自上海某药厂提供的产品，其纯度在95%以上。色谱柱我们共尝试了五根：（1）普通C18柱，编号为1；（2）某品牌BDS C18柱，编号为2；（3）大连某国产色谱柱，编号3；（4）日本某色谱柱（药检所推荐）。编号4；（5）Ultimate XB-C18色谱柱，编号5.（二）试验结果 （1）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911211502_185756_1916092_3.jpg（2）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911211503_185757_1916092_3.jpg（3）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911211503_185758_1916092_3.jpg（4）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911211503_185759_1916092_3.jpg（5）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911211503_185760_1916092_3.jpg 主峰时间 拖尾因子不对称度半峰宽 理论塔板数 杂质分离度118.4324.8567.2580.6534409——216.7801.4551.7040.42088440.452318.6201.0381.0390.41711067——428.9951.2311.4490.583136981.860527.3920.7440.4750.582123061.172（三）分析与讨论（1）对于两种主要杂质的显示情况，1和3只能显示出一种。4对它们的分离度最好，5次之。（2）从主峰阿奇霉素的峰型来看3最好，4，5次之。（3）关于主峰也就是阿奇霉素的出峰时间，4，5明显晚于前三个色谱柱。关于不同厂家不同批次的阿奇霉素我们已做过很多实验，绝大多数杂质出峰都在阿奇霉素之前，而且种类很多，也就是除了本实验所测样品显示的这两种主要杂质之外还存在有很多杂质，理论上讲主峰出峰时间晚有利于前面杂质峰的分离。 总结起来，从初步的对比检测中发现Ultimate XB-C18色谱柱对阿奇霉素杂质检测的情况还是很令人满意的，甚至不亚于药检所推荐使用的色谱柱。我们准备继续进行一系列的分析实验，对几种较难分离的杂质进行对比分析。

先和大家唠唠青霉素酶的主要来源：奶牛每到换季容易发作乳腺炎等疾病，往往通过注射抗生素进行治疗。凡经治疗过的乳牛，其牛奶在一定时期内残存着青霉素，而在原奶收购检测时，抗生素超标会拒收，奶户为了私利会人为添加青霉素分解酶。别小看这东东，个人认为危害大着呢：1.青霉素酶的安全性以及是否可以在食品中添加尚未有定论。2.在分解青霉素后，可能引进其他有害物质。3.这种做法纵容了奶牛饲养过程中抗生素的滥用。（这三条都个人主义的看法仅供参考）一.杯碟法检测原理：采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株，利用舒巴坦特性抑制β-内酰胺酶的活性，并加入青霉素作对照，通过比对加入β-内酰胺酶抑制剂与未加抑制剂的样品所产生的抑菌圈的大小来间接测定样品是否含有β-内酰胺酶类药物。二.实验试剂与材料1 菌种：藤黄微球菌，对青霉素较敏感，有青霉素存在时藤黄微球菌不会生长繁殖（如图）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/05/201405231328_500247_2227357_3.jpg2 试剂及药品1）磷酸盐缓冲液（配药)：取8g磷酸二氢钾和2g磷酸氢二钾，用1000ml溶解，121℃高压灭菌15min。2）舒巴坦标准储备溶液：将舒巴坦标准品用磷酸盐缓冲液溶解并定容为10mg/ml。4℃保存，可使用一周。3）舒巴坦标准工作溶液：吸取100ul舒巴坦标准储备溶液到1ml

[img=,389,134]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/03/202303011649083145_7537_5933835_3.jpg!w389x134.jpg[/img]如图，啊奇霉素的分子量是748，那591.2是如何确定的，678.9又是怎么确定的 ???