机会致病菌菌——不动杆菌属摘要 常见菌的研究已经很多了,笔者就机会致病菌——不动杆菌属,主要研究了分类和耐药性的问题及产金属β-内酰胺酶的发生率。感觉结果还有点作用,就将结果总结了下,现就结果报告如下。
昆虫病原细菌广泛存在自然界,在不同的环境条件下,对昆虫数量的调节起着重要的作用。其中特别是某些芽孢杆菌已发展成为微生物杀虫剂,具有控制农林害虫的巨大潜力,是一种很有发展前途的防治害虫的新途径,在综合防治中越来越引起人们的重视。 自从19世纪末期开始研究家蚕、蜜蜂细菌病害的近一百年间,发现并被描述的昆虫病原细菌约有90多个种和亚种,它们大多属于真细菌纲(Eubacteria)的芽孢杆菌科(Bacilliacene)、假单孢菌科(Pseudomonadacea)和肠杆菌科(Enterobacteriaceae)。从防治害虫的角度来说,在这三科中以芽孢杆菌科最为重要。此科包括有两个属:芽孢杆菌属(Bacillus)和芽孢梭菌属(Clostridium)。在芽孢杆菌属中的乳状病芽孢杆菌(Bac.popillia)、缓死芽孢杆菌(Bac.lentimorbus)、苏云金芽孢杆菌(Bac.thuringiensis)的某些亚种以及球形芽孢杆菌(Bac.spuericus),目前在国内外均已发展成为防治农林害虫及卫生害虫的微生物杀虫剂。而且,迄今为止,昆虫病原细菌的主要研究力量也仍然集中在这些细菌上。 但是在这些众多的病原细菌中,真正能够开发成为一种具有实际应用价值杀虫剂的却并不多,目前应用最广泛的主要是形成芽孢的病原细菌。如乳状病芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64035]苏云金芽孢杆菌[/url]
革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包**头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~**5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。
革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~4.5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**
阪崎肠杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰阴性无芽孢杆菌。作为肠杆菌科的一种,一直被称为黄色阴沟肠杆菌,直到1980年才更名为阪崎肠杆菌。该菌是肠道正常菌丛中的一种,在一定条件下可引起人和动物致病,所以称为“条件致病菌”。 阪崎肠杆菌自然来源非常广泛,在水、土壤、植物根茎、动物肠道甚至加工食品都可存在,其中婴儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要渠道。阪崎肠杆菌的繁殖、宿主和感染途径一直是研究人员正在进行的课题。2002年,有研究人员从奶酪、碎牛肉、腊肠和蔬菜中分离到阪崎肠杆菌,但目前仍不能确定该菌的自然宿主到底是什么。 2003年又有研究人员从厩螫蝇中肠中分离到阪崎肠杆菌?熏因而认为厩螫蝇幼虫肠道是阪崎肠杆菌的环境宿主之一。而厩螫蝇在世界范围内广泛分布?熏以牛、马、狗、猪和人的血液为食?熏在牛、猪或马的养殖场所可见该蝇?熏在牛棚更常见?熏因而可能污染牛奶。流行病学研究发现厩螫蝇的地理分布和阪崎肠杆菌感染直接相关。 同时,美国一家疫情控制公司的技术报告中记载舍蝇中存在阪崎肠杆菌,但没有确切记录该菌究竟是在舍蝇体内还是体外。研究人员推测,昆虫很可能是阪崎肠杆菌的环境宿主。 阪崎肠杆菌感染并非是不治之症,用抗生素就可以有效控制。虽然阪崎肠杆菌的毒力因子和致病性现在还不太清楚,但已发现有些阪崎肠杆菌可能产生一种毒力因子——类肠毒素样化合物。而且,组织培养也发现一些菌株可产生细胞毒效应。 与肠杆菌属其他细菌相比?熏阪崎肠杆菌对常用的抗菌药更敏感。但是由于阪崎肠杆菌耐药性不断增强?熏近来一些专业人员建议采用碳青霉烯类或新一代头孢霉素和其他药物联合治疗阪崎肠杆菌。不过在临床上,需要根据临床诊断和细菌的药敏试验来找到合理的药物配伍治疗方案。
一、概述及分类肠杆菌科是由多个菌属组成,生物学性状相似,均为革兰氏阴性杆菌,这些细菌常寄居在人和动物的消化道,并随粪便排出体外,广泛分布在水和土壤中,大多数肠道杆菌属于正常菌群。当机体免疫力降低或侵入肠道外组织时,成为条件致病菌而引起疾病。部分肠道杆菌是致病菌。例如:产毒大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、各种志贺氏菌可使人患肠道传染病。肠杆菌科细菌种类繁多,主要根据细菌的形态,生化反应,抗原性质以及核酸相关性进行分类。肠杆菌科的细菌分为20个属。1、 什么是大肠菌群?大肠菌群名称并非细菌分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化反应及血清学方面并非完全一致。大肠菌群:需氧及兼性厌氧,在37℃能分解乳糖,产酸,产气的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括:大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。目前已被国内外广泛应用于评价食品卫生质量的重要指标之一。2、 什么是大肠杆菌?埃希氏菌属的代表菌种是大肠埃希氏菌。大肠埃希氏菌俗称大肠杆菌,它是人类和动物肠道正常菌群的成员,随粪便排到自然界,并污染食品,本菌是组成水、食品中大肠菌群成员之一,其数目多少代表粪便污染和程度。能引起肠道感染的大肠埃希氏菌有下列五个病原群(1)肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)产生ST、LT、引起婴儿、旅游者腹泻。(2)肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC)寄居十二指肠、回肠、空肠。引起婴儿腹泻。(3)肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)有侵袭力,痢疾样症状。(4)肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)引起出血性结肠炎,主要菌型O157。(5)肠粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)损害肠细胞外毒素,引起小儿顽固性腹泻。3、 什么是大肠杆菌O157:H7? EHEC O157:H7属于肠杆菌科埃希氏菌属。它是肠出血性大肠杆菌(EHEC)的主要血清型。
有总大肠杆菌数这个说法吗?今天领导我说和总大肠菌群数是一样的,因为我们平时只做总大肠菌群数,粪大肠菌群数和细菌总数,从来没做过什么总大肠杆菌数,后来我上面查了下只发现大肠杆菌是粪大肠菌群中的一类,可是这总大肠杆菌又是啥呢?而且我查阅一些文献发现,里面总大肠杆菌和总大肠菌群这两个概念混用,测试总大肠杆菌用的方法也是用的测试总大肠菌群的方法
[size=12px][b][b]一、形态学特征[/b][/b] 形态学鉴别菌种是最直接的方法,也是最简单的方法。[b][color=#000000][b][color=#000000][b]1.菌落特征[/b][/color][/b][/color][/b]不同的菌种在不同培养基上菌落形态不同,这是鉴别所有菌种的特征之一。不同的芽孢杆菌,菌落的大小、颜色、凸起、边缘形状等也不同。因此,根据菌落形态可以区分不同的芽孢菌种。有的边缘整齐,有的边缘呈锯齿状,特征非常明显。拿到菌种,记住菌落形态或拍照记录很重要。[b][color=#000000][b]2.芽孢位置[/b][/color][/b]芽孢杆菌,属于革兰氏染色阳性菌,最大的特点就是能够产生芽孢,不同的芽孢杆菌芽孢出现的位置不同,这是鉴别芽孢杆菌的重要特征之一。有的芽孢在菌体的中部、有的在菌体一侧或顶端。可以按照芽孢的位置区分是否属于自己的菌种。观察芽孢可以采用简单染色法也可以采用芽孢染色法。 [b][b]二、生化生化特征[/b][/b] 相比形态学特征,生化特性比较繁琐,但是鉴别芽孢杆菌的重要方法。通过分析芽孢杆菌分泌的代谢产物,比如说酶活、条带的位置、抑菌圈、有机酸等,鉴别是否是目标产物,进而鉴别是否是自己的菌种。 [b][b]三、分子生物学手段[/b][/b] 如果形态学方法和生理生化方法不能鉴别,只能采用分子生物学手段。每个菌种的遗传物质都不同,常采用16S rDNA测序,跟已知序列进行比对后,可以准确地定位芽孢杆菌的种属,这是鉴别菌种最重要的方法。 [/size]
《应用与环境微生物学》杂志刊登一项美国研究显示,养殖场中的大肠杆菌可借助空气传播,并污染周边农作物。 该研究由美国农业部肉用动物研究中心Elaine D. Berry及其同事花费两年时间完成。 研究显示,养牛场周边的蔬菜会受到养牛场大肠杆菌的污染,且距离越远污染程度越低。 研究发现,距离养牛场60米的地方平均会有3.5%的绿叶蔬菜被大肠杆菌污染,在距离180米的地方也有1.8%的蔬菜被大肠杆菌污染。说起大肠杆菌,想起来小时候生活的农村,最肥美的蔬菜都是用大粪水浇灌长出来的。这些蔬菜,难道不会被大肠杆菌污染吗?被大肠杆菌污染的蔬菜,会发生什么样的结果呢?
求助高手帮忙一样品中含有鼠李糖乳杆菌和植物乳杆菌,其中鼠李糖乳杆菌占优势,比例较大,如用什么样的培养基较合适
近日,国家质检总局公布了有关进境食品的不合格信息,其中“澳优”奶粉因被检出含有对婴幼儿危害极大的阪崎肠杆菌而备受关注。 据了解,阪崎肠杆菌属于条件致病菌,对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁很大,能引起肠道菌群紊乱,甚至菌血症、脑膜炎等严重疾病。 面对曾出事故的奶制品,广大消费者深感无法判断,不知道吃什么样的奶粉安全,而生产企业更是手足无措,唯恐自己的产品被牵连。为此,记者走访了国内权威的第三方检测机构——谱尼测试。作为国家质检总局制定的三聚氰胺检测机构,谱尼测试专家对消费者和企业分别给出了建议。 对于消费者而言,进口和国产不是区分奶粉质量的根本原因,产品质量好坏取决于生产、运输各个环节中的严格把控,如今很多奶制品都选择像谱尼测试这样的第三方检测机构进行检测,出具权威的检测数据,以证明产品安全性,消费者在商场购买时可以参考。 谱尼测试的专家还提醒奶制品企业,在进口原料或半成品时,不能盲目迷信国外的监督检验机制,内蒙古伊利实业集团股份有限公司从美国进口的奶酪,也被检验出大肠菌群超标。为此,专家建议企业联合像谱尼测试这样的大型检测机构,对进口原料或半成品进行检测,符合相关标准再进口,以杜绝后患。
按照化妆品卫生规范(国标)进行金黄色葡萄球菌的检验测定时,在BP培养基上发现了类似菌落,特点与国标描述相似!划血平板,也是很相似!但镜检,阴性杆状且能发酵甘露醇!我怀疑是普通变形杆菌,因为将BP菌落点到卵磷脂吐温80上呈波纹状扩散!活体镜检游动活泼!但BP培养基应该是选择培养基,且变形杆菌能发酵甘露醇么?求助!谢谢!
[b]阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种,如果用SN标准检测肠杆菌科还需要再另检阪崎肠杆菌吗?谢谢![/b]
近日,美国巴尔的摩Intralytix公司研制出一种基于噬菌体的EcoShield产品,该产品能显着减少甚至清除碎牛肉中的大肠杆菌O157:H7,此产品目前已获得FDA批准,其纯天然的除菌方式受到FDA的高度评价。 Intralytix公司首席执行官表示,虽然EcoShield产品并非对抗大肠杆菌的"高招",然而它确实提供了一个"杀灭步骤",由此可将大肠杆菌显著得减少或清除99%至100%。 EcoShield产品由三种噬菌体混合而成,对人体、动物、植物无害,能有效的防护大肠杆菌O157:H7。
一次完整的流感嗜血杆菌分离鉴定摘要:流感嗜血杆菌是革兰阴性小杆菌或球杆菌,生长是需要“X”和“V”两种生长辅助因子,因此,流感嗜血杆菌在巧克力平板上生长良好。总结:流感嗜血杆菌生长要求苛刻,临床采集后应立即检测。在巧克力平板上生长的菌落为无色透明、半透明或灰白色、湿润、露滴状。V+X因子纸片周围有菌落生长,而在V因子和X因子纸片周围无菌落生长。
一次完整的流感嗜血杆菌分离鉴定摘要:流感嗜血杆菌是革兰阴性小杆菌或球杆菌,生长是需要“X”和“V”两种生长辅助因子,因此,流感嗜血杆菌在巧克力平板上生长良好。总结:流感嗜血杆菌生长要求苛刻,临床采集后应立即检测。在巧克力平板上生长的菌落为无色透明、半透明或灰白色、湿润、露滴状。V+X因子纸片周围有菌落生长,而在V因子和X因子纸片周围无菌落生长。
[size=16px] 大肠杆菌(Escherichia coli,简称E. coli)是一种常见的细菌,其中某些菌株可能会引发食品中的食源性疾病。为了检测食品中的大肠杆菌,通常需要使用专门设计的检测方法和仪器。以下是一般的大肠杆菌检测过程: 样本收集: 首先,需要从待测食品样本中取样。这可能涉及到食品的取样器具和技巧,以确保样本的代表性和卫生。 样品准备: 样品通常需要经过样品制备步骤,以浓缩或净化潜在的大肠杆菌。这可能包括液体培养、离心、过滤或其他处理方法。 培养: 可以将样品接种到培养基中,通过培养大肠杆菌以增殖它们的数量。这通常需要一定的时间,通常在恒温条件下进行。 检测方法选择: 有几种方法可以检测大肠杆菌,包括分子生物学技术、生物化学方法和免疫学方法。以下是一些常见的方法: [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测: 聚合酶链反应([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])可以检测DNA中的大肠杆菌基因。这是一种高度敏感和特异性的方法。 生化检测: 这包括检测大肠杆菌的特定代谢产物,如大肠杆菌在培养基中产生的气体或底物转化产物。 免疫学检测: 这些方法使用特定的抗体来检测大肠杆菌的抗原。酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常见的免疫学检测方法。 结果解释: 根据所选的检测方法,可以得出阳性或阴性结果,或者是数量性的结果,反映大肠杆菌在样品中的存在或数量。 结果确认: 有时需要进行进一步的确认测试,以确保结果的准确性。这可能包括对阳性样品进行亚型鉴定,以确定是否存在致病性大肠杆菌株。 数据记录和报告: 检测结果应该被记录并报告给相关部门或机构,以便采取必要的食品安全措施。 云唐大肠杆菌检测仪通常是专门设计用于执行其中一种或多种检测方法的设备,具体取决于实验室或食品工厂的需求。选择适当的检测方法和仪器取决于样品类型、检测的目的以及可用的资源。食品安全是非常重要的,因此确保正确执行大肠杆菌检测是保障公众健康的一项重要措施。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309200919189229_1894_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]
鼠李糖乳杆菌培养不出来,琼脂培养基都没有菌长成,叶酸实验用的,容易在哪里出现问题?望老师不吝赐教
5月15日,德国下萨克森州一位83岁老妇发生严重的肠出血症状,被紧急送往医院。7日后,她在医院死去。谁也没有预料到,一场严重的疫情就此拉开序幕。短短几天时间,德国上下1000多名患者出现不同程度的肠出血、腹水和肾功能衰竭症状。截止5月31日,已经有14人死在病魔手中,他们被确诊为某种大肠杆菌感染。德国汉堡医学实验室通过细菌培养实验,在排除了土豆和莴苣之后,宣布西班牙进口黄瓜为罪魁祸首。不过很快,他们又发现这种黄瓜上虽然携带有大肠杆菌,但并不是引起德国本次疫情的那一种,还了西班牙黄瓜的清白。(西班牙政府昨天表示,正在考虑起诉德国汉堡市政府,后者的这次轻率举动使西班牙蔬菜出口遭到重创。)所以罪魁祸首到底是谁,仍然成谜。作为远在地球另外一边的中国人,面对细菌凶猛、黄瓜逆转的跌宕情节,我们不禁要问:大肠杆菌怎么突然变得来势汹汹?有什么严重的状况发生?我们要怎么办?
[color=#333333]扫描电镜(SEM)是介于透射电镜和光学显微镜之间的一种微观性貌观察手段,可直接利用样品表面材料的物质性能进行微观成像。扫描电镜的优点是,①有较高的放大倍数,20-20万倍之间连续可调;②有很大的景深,视野大,成像富有立体感,可直接观察各种试样凹凸不平表面的细微结构;③试样制备简单。目前的扫描电镜都配有X射线能谱仪装置,这样可以同时进行显微组织性貌的观察和微区成分分析,因此它是当今十分有用的科学研究仪器。[/color][color=#333333]对于扫描电镜我也仅是局限于对基本操作略知一二,其更专业的相关知识知之甚少,碰巧最近接了一个用扫面电镜观察大肠杆菌的实验,就借此机会互相讨论学习一下大肠杆菌在描电镜观察中的制样方法。[/color][color=#333333]制样过程可大体分为四步:[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、[/color]取样:取大量样品离心(转速3000r-4000r),去除上清液,加入适当PH(7.2-7.4)的1[color=#333333]XPBS[/color][color=#333333]清洗三遍;清洗时,菌体温柔悬浮,离心,去上清。[/color]1、[color=#333333]固定:2.5%戊二醛固定3h(1-12都可),离心,之后用PBS清洗三遍,离心,去上清。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、脱水用乙醇水溶液按30%、50%、70%、80%、90%的浓度梯度对样品进行脱水,每步约15min,[/color]离心,之后在100%乙醇中脱水15minX2次,离心,去上清,再将样品置于乙醇和叔丁醇1:1的混合液中15min,去上清;然后用纯叔丁醇置换酒精2次,每次15min,最后吸取混匀的细菌-叔丁醇悬浮液滴在盖玻片上。3、干燥 载有样品的盖玻片置-80℃冰箱冷冻后,放入冷冻干燥机中进行冷冻干燥。4、喷金 样品充分干燥后,将盖玻片粘附到贴好导电胶带的样品台上,镀金。5、电镜下观察。附图:[align=center][img=,690,507]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709050924_01_3224499_3.png[/img][/align] [align=center][img=,690,506]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709050924_02_3224499_3.png[/img][/align][align=center][img=,690,506]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709050924_03_3224499_3.png[/img][/align][align=center][img=,690,488]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709050925_01_3224499_3.png[/img][/align]制样过程比较简单,但是比较耗时,特别是脱水的过程。制样过程有多次离心,为防止多次离心后大肠杆菌样品损失过多,离心要充分,并且倾倒上清液时要小心缓慢,防止倒出样品。另外,冷冻的叔丁醇特别容易液化,将载有大肠杆菌-叔丁醇悬浮液的盖玻片拿出低温冰箱后要迅速放入冷冻干燥机内进行冷冻干燥。通过此次实验既学到了细菌在扫面电镜观察下的制样过程,又学习了扫面电镜的使用及其操作细节和注意事项,令我受益匪浅。
2014年食源性致病菌蜡样芽孢杆菌风险监测分析 人类对蜡样芽孢杆菌致病性的认识过程进展缓慢,但是大量证据证明,从1898年起,就有蜡样芽孢杆菌造成泌尿系统感染及胃肠炎的记载,有些感染的病例很严重,甚至造成死亡,蜡样芽孢杆菌也可以引起牛的口蹄炎。Lubenau 1906年描述了发生在一家医院的严重的食物中毒事件,300名医务人员及病人用餐后出现急性胃肠炎,对剩余的食物进行检验,发现含有大量的好氧芽孢杆菌,尽管从原文中的描述分析,该污染菌应为蜡样芽孢杆菌,但原作者将其定名为B.peptonificans。Seitz 1913年从一例患肠炎和腹泻的病人中分离出蜡样芽孢杆菌。按照当今的流行病学标准来衡量,有关芽孢杆菌引起食物中毒的早起报道很粗略。很少有人对食物等病检标本的污染菌做过计数,对污染菌的鉴定、命名也不确切,从而造成了不少混乱。正是由于分类学的进展,Hauge经过对4起食物中毒事件的认真调查,于1955年首次确认蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的致病菌。因为蜡样芽孢杆菌在自然界分布广泛,常存在于土壤、空气、水和尘埃中,所以不可避免地会进入到食品中。现将2014年本地蜡样芽孢杆菌的检测情况作如下总结。1 材料与方法1.1试剂和仪器 使用的培养基有磷酸盐缓冲液(PBS)、甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂、胰酪胨大豆多粘菌素肉汤、营养琼脂购买于北京路桥公司。主要仪器包括均质器,电子天平:感量0.1g,VITEK-2 Compact 全自动微生物鉴定系统。1.2依据和方法 根据国家食品安全风险评估中心制定的“食源性致病菌监测工作手册”要求进行增菌、分离、鉴定、菌种保存及送上级实验室复核。试验程序见图2。
众所周知,紫杉醇是重要的抗癌药物,其作用机制是抑制癌细胞的有丝分裂。紫杉醇对包括乳腺癌在内的多种癌症有很好的治疗效果,其最高销售额曾超过10亿美元。虽然随着专利的到期,其售价有了较大幅度的降低,但是其价格仍然相当昂贵,一个疗程的价格超过1万美元。 紫杉醇是植物来源的抗癌药物,最初治疗一个病人需要4-5棵太平洋红豆杉的树皮。由于太平洋红豆杉数量非常有限,生长周期很长,并且剥去红豆杉树皮后回导致红豆杉的死亡,因此使用红豆杉树皮来提取紫杉醇治疗癌症病人面临很强的伦理困境。面对此两难境地,科学家发挥科学创新精神,开发出了红豆杉植物细胞培养技术来获取紫杉醇,随着研究是深入,科学家发现可将使用decorative yew的树叶提取紫杉醇的前体,使用化学合成的方法合成紫杉醇。由于decorative yew树叶来源很广,使用树叶也不会杀死树木本身,加之后续合成的高效性,这种提取加合成的方法称为紫杉醇的主要来源。化学全合成是获得化合物的主要手段之一,科学家经过努力也成功地合成了紫杉醇,由于紫杉醇结构复杂,化学合成需要35-50步,得率很低,因此紫杉醇的化学全合成科学意义很大,实际应用的价值不大。 微生物具有底物利用广泛,生长速度快,研究深入,大规模生产容易等优点,非常适合药物的生产,与紫杉醇同为萜类化合物的青蒿素已经通过精确的途径改造和优化,已经实现了工业化生产,这表明通过代谢工程和合成生物学手段在微生物中合成宿主本身不产生的复杂小分子是可行的,也为后续的相关研究提供可供借鉴的策略和经验。 美国麻省理工大学和Tufts大学科学家沿着这个思路,合成紫杉醇的前体taxadiene和 taxadiene-5-alpha-ol。虽然大肠杆菌并不能够产生这两种物质,但是合成他们的前体IPP是大肠杆菌生理代谢过程中的一个中间产物,IPP能够通过两部的酶促反应合成taxadiene。催化后续两部反应的酶类已经从植物中克隆出来。 美国科学家首先优化了IPP的生物合成,以大量生成IPP为后续的酶促反应提供底物。 IPP的生物合成有8个步骤,研究发现其中的四个步骤是限速步骤,通过提高限速步骤的酶量,控制整个催化的效率,大量的合成了IPP。接着讲植物的催化酶引入到工程菌株中,优化催化酶的密码子和表达水平,产生了大量的taxadiene。与只加入催化酶没有进行相关优化相比,其产量提高了1500倍,也比已有的文献报道的产量提高了1000倍。接着科学家有加入能够催化taxadiene合成 taxadiene-5-alpha-ol的酶类,将合成紫杉醇的途径有往前迈了一步。 虽然离合成能够化学转化的前体浆果赤霉素(baccatin III)还有比较远的距离,但是本研究表明在弄清楚紫杉醇的合成途径后,使用大肠杆菌合成紫杉醇很有潜力。 本研究中使用的平台技术和手段对合成其他化合物具有通用性,因此使用代谢工程结合合成生物学手段将开启动植物来源的活性小分子微生物表达的大门。 Source: “Isoprenoid Pathway Optimization for Taxol Precursor Overproduction in Escherichia coli” by Parayil Kumaran Ajikumar, Wen-Hai Xiao, Keith E. J. Tyo, Yong Wang, Fritz Simeon, Effendi Leonard, Oliver Mucha, Too Heng Phon, Blaine Pfeifer, Gregory Stephanopoulos. Science, 1 October, 2010. Funding: Singapore-MIT Alliance, National Institutes of Health and a Milheim Foundation Grant for Cancer Research
近日德国当局称,德国致命出血性大肠杆菌开始在人际间传播。法兰克福附近一家餐厅女服务员,食用过遭污染豆芽感染这种大肠杆菌,并经由她处理过的食物,将她携带的病菌传染给了20名餐厅顾客,出现了人际传播。大肠杆菌如何在人与人之间进行传播?应该如何预防大肠杆菌? 大肠杆菌人传人的秘密 大肠杆菌通常经过消化道进行传播,很容易在人际间传播。这主要有两个途径:其一,随着生活方式的改变,购买加工食品的人越来越多,一旦被加工食品的一个环节受到大肠杆菌的污染,就会导致一批食品被污染。这些被污染的食物卖到哪里,大肠杆菌就会如影随形,进而使食用者被感染。 其二,一个人食用了感染大肠杆菌的食物,病菌会随着粪便排出,病菌极易附着在厕所某些部位,例如冲水按钮或把手上。其他人再触摸这些部位,而又没有便后洗手,大肠杆菌则会存在于手上,之后进食时,手上的病菌则会随口而入。 夏季是大肠杆菌流行季 每年6月至9月期间,都是大肠杆菌的流行季节。因为,此时温度最适宜病菌繁殖,而且雨水充沛,它们喜欢温热潮湿的环境。在适当的环境下,一个大肠杆菌一天能繁殖72代,不到20分钟就可能繁殖1代。 以往,多个国家都曾出现过大肠杆菌疫情,最初都是食物性暴发,病菌随着成品或半成品进入人体。其次为水源性暴发,尤其是在洪涝灾害后,自来水容易受到污染,引发疾病。因此建议,相关部门应对食品加工把好每一道关卡,定期严查。在受到水灾地区,应倡导人们把水澄清并彻底烧开饮用。
国家食品药品监督管理局修订双歧杆菌乳杆菌三联活菌片品种非处方药说明书范本 2011年02月14日 发布 为保证公众用药安全,根据《药品管理法》、《处方药与非处方药分类管理办法(试行)》有关规定以及药品标准变更等情况,国家食品药品监督管理局决定对双歧杆菌乳杆菌三联活菌片的非处方药说明书范本进行修订。 国家食品药品监督管理局要求各省(区、市)食品药品监督管理部门通知辖区内相关药品生产企业,按照要求尽快完成说明书和标签的修订工作,并按规定进行备案,相关品种原非处方药说明书范本自2011年5月1日起停止使用(已生产的产品除外)。【相关链接】 关于修订双歧杆菌乳杆菌三联活菌片品种非处方药说明书范本的通知
2007年7月下旬,国家质量监督检验检疫 总局公布了今年4月入境的不合格食品、化妆品信息,其中全球最大的乳品原料供应商新西兰恒天然多个批次的全脂奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。这些有问题的全脂奶粉,总数达277.9吨,分别是今年1月和3月进口的。 恒天然公司表示,尊重中国政府的相关考虑和规定,已对被检验出阪崎肠杆菌的产品按规定做了处理。 阪崎肠杆菌是寄生于人和动物肠道的“条件性肠道致病菌”。也许,阪崎肠杆菌目前只引起了专业人员的高度重视,并未吸引普通公众的目光,原因在于它不仅对公众是陌生的,且现在造成的危害似乎并不算重。回顾近年来国内的食品安全问题,阪崎肠杆菌也确实被忽略了。 2004年安徽阜阳出现著名的“大头婴儿”事件。据该市县级以上医疗机构核查统计,从2003年5月以来,因食用劣质奶粉出现营养不良综合征共171例,死亡13例,病死率7.6%。婴儿发病和死亡的主因是由于劣质奶粉导致的营养不良,但是现在回过头来看,有一个可能的致病因素在当时被忽略了——这些劣质奶粉中含有阪崎肠杆菌。 阜阳劣质奶粉事件发生后,中国疾控中心营养与食品安全研究所的刘秀梅等人运用来自美国和加拿大的方法,建立了婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分离鉴定技术。从87份阜阳劣质奶粉样品中,他们检测到11份阪崎肠杆菌阳性样品,污染阳性率为12.6%。 这是国内首次从婴儿配方奶粉中分离到阪崎肠杆菌菌株。固然,劣质奶粉导致婴幼儿死亡是因其中蛋白质含量极低,不能满足婴儿的生长需要。比如,按照3-6个月婴儿的生长需要,蛋白质每日摄取量为3g / kg,而劣质奶粉每日只能提供0.07g / kg的蛋白质。所以,长期食用这种几乎没有营养的伪劣奶粉的婴儿,会产生四肢短小,身体瘦弱,头部尤显偏大的症状。 阪崎肠杆菌的污染是否会对当地婴幼儿造成雪上加霜的伤害呢?事过境迁,要得出确切的结论已经很难。不过事后查出阜阳劣质奶粉含有阪崎肠杆菌,对今天的食品安全不啻是敲响了一次警钟。 对婴幼儿最具杀伤力 早在2004年,广州检验检疫局就率先提出,在进口婴幼儿配方奶粉和奶制品中,对阪崎肠杆菌进行监测,并首次从进口奶粉中检查出阪崎肠杆菌。2007年以来,广州、中山、汕头检验检疫部门在进口奶粉中已多次检出阪崎肠杆菌。因此国内的专业人员多次呼吁,要重视阪崎肠杆菌对食品污染和对人健康的危害。
在自然界存在一种叫做土壤杆菌的细菌,它能感染植物的受伤组织,特别是根茎交接处的受伤组织,引起冠瘿瘤。冠瘿病损害为数众多的双子叶植物,特别是葡萄、核果类树木和观赏植物。冠瘿细胞是植物肿瘤细胞,在许多方面与动物肿瘤细胞类似。它们只有无限生长的能力,把一小块冠瘿组织放入不含植物激素的培养基中培养,能长成大的细胞团块(愈伤组织),而正常植物细胞在不加植物激素的培养基中则不能生长。冠瘤拥胞能制造一类叫做冠瘿碱(opine)的氨基酸衍生物(如章鱼碱和蓝曙红),供根癌土壤杆菌作为养料使用,在正常植物细胞中从未发现过这类物质。 根癌土壤杆菌能把植物细胞转化为肿瘤细胞,是由于它含有一种肿瘤诱导质粒,简称Ti质粒。当细菌感染植物时,Ti质粒中大约占这个质粒l/10的DNA片段(称为转移DNA或T—DNA)进入植物细胞,并整合到植物的染色体上,随染色体一起复制。随后T—DNA携带的细菌基因(致瘤基因和合成冠瘿碱的基因)使在植物细胞中表达,使植物细胞转化成肿瘤细胞,并合成冠瘿碱。由于根癌土壤杆菌能把细菌基因引入植物细胞,并在那里表达出蛋白质来,所以人们称它为天然的“遗传工程师”。这给人们以启示。能否用重组DNA技术把与高产、优质、抗病、抗旱和抗盐碱等优良件状有关的基因循人到T—DNA中,然后再通过根癌土壤杆菌的感染把这些基因引入植物细胞呢?最近几年的研究进展表明,这是完全可能的。 Ti质粒是独立复制的环状DNA分子。由大约1.5—2xl05碱基对组成,相当于细菌染色体的3—5%。它有两个主要类型:一类叫章鱼碱质粒,含有这种质粒的细菌能以章鱼碱为氮源和碳源生长;另一类叫蓝署红质粒,含有这种质粒的细菌能利用蓝曙红。每一种根癌土壤杆菌只含有一种Ti质粒,或者是章鱼碱质粒,或者是蓝曙红质粒。这两种质拉的DNA同源性很低,一般为12—16%,说明它们可能具有不同的进化史。T—DNA是Ti质粒中最重要的组成部分.它所携带的基因主要有两个功能:一是决定肿瘤的形成和肿瘤的形态;二是控制冠瘿碱的合成。如果T—DNA中的致瘤基因发生突变,可能出现三种表型:一是产生比正常肿瘤个大的肿瘤;二是使肿瘤长出许多根;三是使肿瘤长出许多芽。在T—DNA区域以外也有一些基因已被定位,其中毒性基因的功能是决定根癌土壤杆菌对植物的感染以及T—DNA的进入和整合;章鱼碱代谢基因和蓝曙红代谢基因分别编码代谢这两种冠瘿碱的酶;质粒转移基因控制细菌的接合作用;不相容性基因控制Ti质粒与其它质粒的不相容性。 Ti质粒之所以能成为把外源基因引入植物的良好载体有两方面的原因。第一,携带质粒的根癌土壤杆菌的寄主范围很广,实际上它能转化所有的双子叶植物。第二,整合到植物染色休上的T—DNA能随种子遗传,而且T—DNA有自己的启动基因,可以启动与其连接的外源基因的转录。此外,也有人研究以植物病毒DNA为载体转移目的基因,或者直接把DNA注射到植物的花粉管和子房中。Ti质粒直接用作基因载体有两个困难:一是它的分子量太大,内切酶位点很多,不容易进行体外重组DNA操作;二是被T—DNA转化的植物细胞成为肿瘤细胞,不能再生成植株。克服第一个困难的办法是先把T—DNA克隆到大肠杆菌的小质粒上,把目的基因插入到小质粒的T—DNA中,然后再设法转移到天然的Ti质粒中。克服第二个困难的办法是在T—DNA的特殊位点中插入目的基因和供筛选用的抗药基因,一方面使致瘤基因发生插入突变,从而使转化细胞能再生成植株,另一方面使目的基因正好位于T—DNA的启动基因的下游,以便启动目的基因的转录。有人经过研究发现了这样一种作用模型:大多数双子叶植物受伤后会产生一种叫丁香酮(acetosyringone)的物质,这时土壤农杆菌感染后,丁香酮在Ti质粒上Vir A的产物A的协同作用下促进了Vir G产物G的活化(即磷酸化),然后产物G相继激活Vir B、V ir c、Vir D、Vir E等操纵子,特别是Vir D和Vir E。前者产生两种蛋白,D1为缺刻酶(nickase),它能特异性地在T—DNA两端产生缺刻;D2则是一种蛋白复合物,它粘在已断开的T—DNA的两端,具“导航”的功能,有人认为它是Rec A,起重组的作用。后者产生单链结分蛋白(SSB),有保护缺刻产生后的T—DNA的功能。T—DNA在诸多蛋白的导航、保护下重组进核基因组。这种转比方法优点是方便,不需分离原生质,且插入的基因拷贝数目少,比较稳定。但它的缺点是土壤农杆菌主要只适于侵染双子叶植物,单子叶植物能被侵染的较少,这就在一定程度上影响了这种方法的推广。有人发现单子叶植物受伤后很少产生丁香酮,这是否是侵染的关键呢?目的许多实验室都在作这方面的探索,以期望能克服这种方法的局限性。http://hiphotos.baidu.com/wfvcshengwu/abpic/item/629fdb39539824d63b87ce6e.jpg
鼠李糖乳杆菌还能怎么培养?厌氧条件也不行,望老师不吝赐教
蜡样芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌的鉴别 是怎么整的啊,国标里面的那种方法 靠谱吗?不好整吧,你是怎么 鉴别的啊,
培养结核杆菌的培养基,从性状上分主要有固体培养基、液体培养基、半流体培养基、固液双相培养基等类型,这些培养基各有特点。 1.1 固体培养基 最常用的是罗氏(Lownstein-Jenson,L-J)培养基,也是最具代表性的一种,其他的还有小川辰次(Tatsujiogawa)鸡蛋培养基和Middle brook 7H10、7H11等琼脂培养基等。在固体培养基中,由于可以直接观察菌落的形态并可做鉴别用,因此常用于临床标本的分离培养、鉴别、保存菌种及对抗结核药物的敏感性测定等方面,缺点是结核菌生长缓慢。 1.2 液体培养基 常用的有苏通(Sauton)培养基、Middle brook 7H9等液体培养基。结核杆菌在液体培养基中能够更广泛的接触营养成分,因此在液体中生长相对较快,主要在液体表面生长,搅动时下沉至管底,可获得大量的结核杆菌。主要缺点是:在对临床标本的收集、采样、运输方面有不利的一面;不能根据肉眼观察菌落形态;培养基污染机会多,影响结核杆菌的生长,污染时不易与结核杆菌鉴别,需涂片染色镜检判断结核杆菌是否生长。 1.3 半流体培养基 改良苏通半流体琼脂培养基是一种人工综合培养基,基质透明,呈半流体状态,生长的结核杆菌形成白色颗粒状菌落悬浮于培养基中段,便于观察。 1.4 固液双向培养基 Septi-Check AFB双相培养基是国外应用较早的一种培养基,采用BD专利式封闭式固液双相一体化培养基设计。液相为Middle brook 7H9分枝杆菌专用增菌培养基,可迅速繁殖分枝杆菌,固相为3种固体培养基平面:Middle brook 7H11和改良的L-J培养基用于及时将增菌肉汤内分枝杆菌进行分离纯化以获得单个菌落,巧克力琼脂用于早期发现污染菌,避免时间浪费。由于有液相作为基础,因此结核杆菌生长较快,也是一种非常有效的培养基。国内有用平菇制备的平菇双相培养基是利用平菇浸出液为基础,加小牛血清、琼脂等成分而配制的一种培养基,根据琼脂的量不同制成液相、固相培养基。在国内应用较少,主要特点是成本低,制备简单,适合于基层使用,有一定的研究价值。
威化产品,我们自检到大肠杆菌。然后抽了一些全部混匀揉碎,一半再做,还是测到大肠杆菌,另一半送到第三方,但第三方没捡到,说的合格,这是怎么回事