肠膜明串珠菌

常用的有琼脂斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、沙土管保藏法、甘油冷冻管保藏法、低温冷冻保藏法等，方法很多。 我选用液体石蜡保存方法，该方法适用于不能分解液体石蜡的酵母菌、某些细菌（如芽孢杆菌属、乙酸杆菌属等）和某些丝状真菌（如：青霉属、曲霉属等），而某些细菌（如：固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌等）和一些真菌（如：卷霉菌、小克银汉霉、毛霉等）不宜采用此法进行保存。微生物检验常用以下菌种：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌药典也没有要求怎样保存，只说选用适宜的保存方法需要验证。但是肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌这些菌种用液体石蜡保存方法适合不？

德科学家近日发现，20名餐厅顾客进食1名带菌厨房女工处理的食物后发病，这是首次证实肠菌“人传人”。本报讯 20日，德国致命出血性大肠杆菌疫情又有最新发展，德国官员首次发现“人传人”案例。为此，德国当局警告民众进出餐馆、泳池等都要特别小心，因为病菌可能通过病患，传染给其他人。出现“1传20”感染据半岛电视台网站报道，德国当局指出，法兰克福附近一家餐饮业1名女性厨房员工，因为食用遭污染豆芽感染这种大肠杆菌，并经由她处理过的食物，将她携带的病菌传染给了20名餐厅顾客，出现了“人际传播”。目前，调查人员正检查肇事厨房。德国国家消费者权益机关称，若该厨房工当日如厕后有洗手，便可避免事件发生。德国当局表示，本案例首次证实，这次的致命大肠杆菌疫情会“人传人”。报道称，当局将于本周末进一步采样，检验结果有望于20日以后出炉。 （中新）

1、传代保存法：有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时，会很快死亡，因此在这种情况下，只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生产菌种的保存。传代保存时，培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙。一般地，大多数菌种的保藏温度以5℃为好，像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存，而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。传代培养保存法虽然简便，但其缺点也很明显，如：①菌种管棉塞经常容易发霉；②菌株的遗传性状容易发生变异；③反复传代时，菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低；④需要定期转种，工作量大；⑤杂菌的污染机会较多。 通派（上海）生物科技有限公司是供应国内/外各类细胞（人/大鼠/小鼠细胞 等），菌种，ELISA试剂盒（人/大鼠/猪），PCR试剂盒，免疫组化试剂盒，单克隆抗体，多克隆抗体，移液器，培养皿，BD培养基，实验室耗材，实验室小型耗材等产品的国内一流服务商。公司集生物科技产品生产、销售于一体，公司实验室热门提供：传代细胞，原代细胞，耐药株，细胞染色，免疫组化，ELISA试剂盒 等。2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。此法可防止干燥，并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。其具有方法简便的优点，同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物（如产孢能力低的丝状菌）的保存，而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。

据法新社报道，泰国周五表示，进口自欧洲的鳄梨中检出的大肠杆菌菌株不同于德国的致命疫情菌株。泰国卫生部长扎林（JurinLaksanawisit）称，此次鳄梨中检出的大肠杆菌从平常的环境中便可找到，它不会成为一种有害健康的因子，因此当局继续维持欧洲鳄梨的进口。 泰国当局周四表示，从欧洲某国进口的鳄梨中检出了大肠杆菌，正对该种病菌是否系致命的出血性大肠杆菌作进一步测试。 截至目前，欧洲致命疫情菌株已导致30多人死亡，并且死者大部分来自德国。 德国国家卫生机构于周五表示，此次导致超过14个国家2800多人染病的疫情元凶为芽菜。 大肠杆菌感染症状包括：胃痉挛、腹泻、发烧、呕吐。

食品工业上谈论的益生菌被定义为：益生菌是活的微生物，当摄入足够量时，对宿主起有益健康的作用。在谈论益生菌时必须满足三个条件：1） 活的微生物；2） 摄入足够的量；3） 对宿主健康有益。益生菌是从有益宿主健康出发给出的定义，目前研究较热的益生菌有：双歧杆菌、乳杆菌、芽孢杆菌、丁酸梭菌等，其中双歧杆菌、乳杆菌和芽孢杆菌都属于乳酸菌类，因此益生菌包括了部分乳酸菌，而乳酸菌不全是益生菌。 乳酸菌并不是一个严格的微生物分类规范，定义并不严谨，但目前已经得到大众的公认。因此食品工业上对乳酸菌的定义为：乳酸菌一般是指能发酵糖，主要生成乳酸的细菌的总称。在谈论乳酸菌时应该注意二个方面：1） 乳酸菌是一种细菌；2） 能发酵糖类生成乳酸。乳酸菌是从发酵糖产生乳酸的机理方面考虑给出的概念，对人类生活有益的乳酸菌有：双歧杆菌、乳杆菌、链球菌、明串珠菌等。并不是所有的乳酸菌都有益于人类健康，也有一些乳酸菌对人体是有害的，如有害的利斯特氏菌。目前市场上发酵奶制品中提到的乳酸菌传统意义上是指：1）保加利亚乳杆菌（Lactobacillus Bulgaricus）2）嗜热链球菌（Streptococcus Thermophilus）这两支菌是酸奶发酵过程中传统混合使用的乳酸菌。市场上发酵奶制品中提到的益生菌一般为：1）长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)2）青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)3）动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)4）干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)5）嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)6）鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)等等。它们也都是乳酸菌类，由于它们有的耐酸能经受住人体胃酸的考验，有的能在人体肠道中定植一段时间，总之能为人体肠道提供活的益生菌，因此现代微生态学研究中把它们定义为益生菌类。

1、玉米秸秆酸解副产物对酒精发酵影响的研究 作者：林贝2、肠膜明串珠菌发酵生成低聚糖的研究 作者:高丽丽3、发酵法制备丙酮、丁醇的研究 作者：王一雷4、微生物发酵法生产1，3-丙二醇的研究 作者：王领民5、酒精发酵过程控制的研究 作者：何向飞6、米根霉发酵产L-乳酸的代谢调控研究 作者：郑志7、木薯燃料酒精浓醪发酵工艺研究 作者：蒋常德 8、啤酒发酵代谢产物双乙酰和高级醇的控制与调 作者：方维明9、酒酵母代谢副产物的影响因素研究10、1,3-丙二醇发酵过程中pH调控策略研究 作者：纪晓俊 黄和 朱建国 高振 周慧 11、柠檬酸钠对L-亮氨酸发酵代谢流分布的影响 作者：陈宁、刘辉 天津科技大学生物工程学院12、青霉素生物合成与代谢流量控制 作者：徐亲民 13、基于代谢流量分析的黄色短杆菌TK0303合成L-亮氨酸发酵过程的优化 作者：刘辉、徐庆阳、陈宁14、作者：基于代谢流量分析的L-谷氨酸发酵过程优化 作者： 杜军 陈宁 刘辉 徐庆阳 谢希贤 15、L-谷氨酰胺产生菌的选育和代谢流量分析 16代谢工程在酿酒酵母茵育种中的应用研究进展 作者：秦丽娜 江贤章 田宝玉 舒正玉 黄建忠 17、乙醇转化率酿酒酵母工程菌株构建研究进展 作者：吴婷婷 吴雪昌18、高密度发酵的影响因素 作者：宋留君 孔毅 周长林 第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下) , 2004 年有点儿多，谢谢大家了！

饮用水的大肠菌群，有没有做滤膜法的，用品红亚硫酸钠培养基，我做的怎么没有张菌，一个菌也没长，这是怎么回事，有没有做过的求教

做水质检测时,用滤膜法同时检测总大肠菌群及耐热大肠菌群时,为什么总大肠菌群没有生长,而耐热大肠菌群却生长很多,这是什么原因

自来水滤膜法做总大肠菌群，有做的做出来菌长怎么样，我做出来好多红点，但用多管发酵法同时做比对，多管法确显示没有！想问各位有做过的同仁发个照片上来看看，滤膜法若显示有大肠菌群的话，菌在培养出来长啥样？若不是大肠菌群，是不是同时滤膜上也会同时长其他菌出来？

三鹿又验出致命肠杆菌 甘肃实行签字放行制http://www.tech-food.com 2008-9-24 9:12:25 中国食品科技网　 甘肃省质量技术监督局21日再次发出紧急通知，通报在“三鹿”较大婴儿及幼儿配方奶粉(慧幼2段)检出阪崎氏肠杆菌。甘肃全省的乳制品企业已经实行驻厂监管员签字放行制度，每一批检验合格的乳制品必须经监管员签字方可出厂销售。　　《兰州晨报》报道，甘肃质监局日前通报了该局送国家食品质量安全监督检验中心检验结果，结果显示，“三鹿”较大婴儿及幼儿配方奶粉(慧幼2段)检出阪崎氏肠杆菌。阪崎氏肠杆菌可能使初生婴儿染上脑膜炎和脓毒病，严重会导致婴儿死亡。　　甘肃省质监局要求，全省驻厂监管员必须严格监督企业检验进场原料，严格监督企业生产过程质量控制，严格监督企业对产品批批检验，严把产品出厂关口。所有的乳制品必须批批检验“三聚氰胺”等有害有毒物质，每一批检验合格的乳制品，必须经监管员签字后，方可销售。经监管员签字后出厂销售的乳制品，如被检出有毒有害物质，将严肃追究监管员的责任。　　甘肃省质监局同时要求，除已经公布的质监系统举报电话12365外，甘肃省各市、州还将公布辖区内的举报电话，引导社会力量举报食品中非法添加有毒有害物质的案件线索，对举报有毒有害物质有贡献的人员，要按有关规定实施重奖。　　甘肃省质监局还要求省质检中心和各市州质检所要发挥技术优势，充分运用精密分析仪器等手段，确定乳制品及相关食品中除“三聚氰胺”外其它有毒有害物质监测项目，实施重点监管和检验检测。　　截至9月20日下午6时，甘肃质监系统共检查生产企业115家，检查销售单位9880家，共查封三鹿牌慧幼系列婴幼儿配方奶粉150955袋(听)，三鹿牌其它系列婴幼儿配方奶粉39663袋(听)，总计查封190618袋(听)。ps:阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的致病菌。该菌已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌，它可导致任何年龄层人群的疾病，尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大，严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。二○○二年九月，香港食物环境卫生署曾在德国生产的「美乐宝ＨＮ２５」婴儿特别配方奶粉中，验出这种可能会导致初生婴儿肠脏及脑膜发炎的阪崎肠杆菌，当时香港也要求回收「美乐宝ＨＮ２５」婴儿特别配方奶粉。

[align=left]为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》等五项标准为国家环境保护标准，并予发布。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　标准名称、编号如下。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　一、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688590.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》（HJ 347.1-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　二、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688592.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ 347.2-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　三、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688594.shtml]《水质 细菌总数的测定 平皿计数法》（HJ 1000-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　四、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688595.shtml]《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》（HJ 1001-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　五、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688596.shtml]《水质 丁基黄原酸的测定 液相色谱-三重四极杆串联质谱法》（HJ 1002-2018）。[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　以上标准自2019年6月1日起实施，由中国环境出版集团出版，标准内容可在生态环境部网站（kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/）查询。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　自以上标准实施之日起，《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T 347-2007）废止。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　特此公告。[/align][color=#000000][/color][align=right]　　生态环境部[/align][color=#000000][/color][align=right]　　2018年12月26日[/align]

粪大肠 菌群的测定中滤膜法，HJ247.1-2018关于滤膜法的计算方法，我对标准的理解是：应该取粪大肠菌落数在20-60个的接种量为正确菌落数，其他接种量只是作为参考，不知道这样对不对，希望做过的朋友和我探讨研究研究。谢谢

加州大学洛杉矶分校(UCLA) Ozcan教授称，“医生可以使用这些设备来改善偏远地区的卫生健康问题”。　　该便携式设备使用激光而不是镜头识别中水、食物或血液中的病菌。廉价的造价还不到 100美金 (60 英镑）。其生成的图像可以被上载到远程计算机作进一步的分析。科学家们希望该技术将有助于缺乏先进的诊断设备的地区提高医疗健康服务。有关显微镜的发明内容，加利福尼亚大学洛杉矶分校 (ucla)的研究人员已经发表在《Biomedical Optics Express》。微三维技术　　该设备有两种操作模式：“传输模式”可以分析水和血液等液体，“反射模式”则可以产生高密度物质表面的全息图像。 “传输模式很好的观测透明的细胞或薄片”，Leicester大学先进显微镜中心Karl Ryder博士解释说。“但是，如果你想看看固体的表面，不能使用传输模式，因为光线不会穿透过去”。在反射模式中，显微镜使用全息技术产生样品的三维图形。“你采用一束激光并使用分束镜分成两束，然后使用这两束激光照亮样品”。“你可以再用数学模型让重组的两束光产生三维图形”。廉价芯片　　设计的关键优势是它采用廉价的电子元件而不是昂贵的镜头。Ryder博士说，“在此系统中没有光学器具，使得体积做得很小，而且用来看小样品，你不需要复杂的聚焦”。而且显微镜使用类似iPhone 和Blackberry手机中常见的数码照片感应器。这些仅用到少于15美金的成本。尽管它的价格低，研究者声称该显微镜可以监视难检测的细菌如大肠杆菌的暴发。UCLA教授Ozcan表示，“在水和食物检测低浓度大肠杆菌是十分艰巨的任务，这个显微镜可以提供现场调查的方案”。　　该设备可以获得原始数据，但简单的设计意味着需要具有计算能力的外部设备进一步处理。用户可以转发图像数据到他们的手机、笔记本电脑、或上传到互联网服务器。Ozcan教授相信该显微镜可以为发展中国家的医务工作提供不可估量的价值。“只需要简单培训，在缺乏医疗检测设备的偏远地区，医生可以使用这些设备提高医疗健康服务。

[align=left][b]简介[/b][/align]随着人民生活水平的提高，社会的进步，食品中微生物污染造成的[url=http://www.cnfoodsafety.com/]食品安全[/url]问题也越来越受到广大消费者、食品企业、政府监管部门的关注。食品变质原因90%是由微生物（细菌、真菌等）引起的，在此大环境下，食品加工企业要不断提高企业管理水平，保证所生产出的产品安全合格。[b]真菌[/b]说到真菌，很容易想到细菌，因为它们都能引起食品变质。其实真菌与细菌有本质上的不同，这种差别显示了生物进化历程：显微镜下可见细菌形态单一，呈球状或棒状；真菌形态比细菌复杂，有菌丝、芽胞等结构。所以真菌比细菌更难杀灭。真菌，是一类有细胞壁，不含叶绿素，无根叶茎，以腐生或寄生方式生存，能进行有性或无性繁殖的真核微生物。真菌中最常见的是各类蕈类，另外还有霉菌和酵母。世界上已被描述的真菌约有 1万属12万余种。真菌的危害在食品加工行业中是时时存在的。因为在空气中，水中，原料中都有真菌的孢子存在。遇到适宜的环境，即可繁育。同时，真菌通过产生真菌毒素也给人体健康带来危害。[b]食品生产过程中的真菌[/b]真菌在过去曾称为霉菌，是微生物中的一个大类，是一群数目庞大的细胞生物，估计全世界已有记载的真菌有10万种以上。它们的个头差别很大，小者用显微镜才能见到，大者可达数十厘米，如茯苓、蘑菇等。以食品行业为例，霉菌会造成食品腐败变质，是造成食品工业巨大经济损失的主要腐败微生物。霉菌污染频繁出现在食品、饮料、海产品、肉制品、熟食和新鲜的蔬菜中，每年都会给生产者和消费者造成极大的经济损失。霉菌除了会引起肉眼可见的腐败变质外，还会产生一些真菌毒素类物质，目前研究已经确定有超过200种霉菌在食品中生长时会产生对人体有害的物质，主要有黄曲霉毒素类、串珠镰刀菌素、赫曲霉毒素、棒曲霉素、单端孢煤烯类和玉米赤霉烯酮六大类。由于这些霉素具有致癌致畸形、同时对神经、肝肾也有毒害作用，因此这些腐败真菌给食品工业造成了巨大经济损失，同时也对公众的健康构成了极大危害。据统计，25%的农产品都含有霉菌毒素，在烘烤行业，霉菌造成的损失随着季节、产品种类、加工方法的不同在3%—10%之间浮动。假设仅有1%的损失，在英国每年由霉菌造成的污染的面包就有23000吨，价值2.42亿英镑。在澳大利亚每年由霉菌造成的经济损失大约在1千万美元。在水果行业，水果采摘后的使用杀菌剂的条件下也会有5%—10%的损失，在某些没有使用杀真菌剂的年份，损失达50%甚至更高。[b]食品厂杀灭真菌的方法[/b]食品加工厂生产车间温度、湿度适宜且营养物质丰富，较容易生长繁殖微生物，稍不加注意洁净车间卫生条件，很容易受真菌污染，导致食品腐烂变质。特别是食品厂霉菌因其特性一般的消毒剂很难对付。然而过氧化氢银离子复合型杀菌消毒剂杀孢子剂具有强烈杀灭食品厂真菌的作用，彻底分解不产生耐药性，并且对人健康无害，无色无味，无毒无残留，安全绿色环保，是新一代进口食品级消毒杀菌剂。[b]奥克泰士[/b]奥克泰士是进口德国，专为食品厂设计，奥克泰士配合空间、环境、物表等可达到食品企业消毒灭菌的要求，近来深受食品企业的青睐。奥克泰士杀菌消毒剂是由食品级过氧化氢和银离子组成的复合型溶剂，食品级无色无味无毒无残留型，IFS国际食品标准认证，欧盟EMAS检测认证等。所采用的氧化剂为过氧化氢，它与稳定剂结合形成复合溶液。作为催化剂添加的痕量银离子可以保持长久的效用。银离子的杀菌作用是基于单价银离子通过共价键和配位键来与细菌蛋白质牢固结合，从而使细菌钝化或沉淀。能在食品厂洁净区消毒中迅速杀灭一定空间内的的微生物（包括芽孢）或者抑制微生物繁殖的进口高效消毒剂。德国BUDICH INTERNATIONAL GMBH研制、生产，是目前国际上一款卓越的杀菌消毒剂。由于其独特的作用原理，能够快速杀灭包括芽孢、细菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支杆菌、酵母菌、霉菌、病毒在内的所有类型的微生物。做为新一代生态环保的消毒剂在欧美发达国家早已成熟应用。在欧盟食品企业已经完全禁止甲醛的大环境下，奥克泰士是目前众多欧盟食品企业的首选。也代表着过氧化氢银离子复合型杀菌消毒剂发展的新方向。产品技术引进国内短短几年。目前在食品饮料、制药安全、医疗卫生等国内众多高端灭菌领领域顺速推广。奥克泰士己成分中国食品企业杀菌消毒的首选。可用于洁净室空间和生产设备、各类洁净区物表消毒和空间消毒；操作台表面消毒。适用领域包括食品、食品设备、食品企业动态环境、食品企业生产等。也可用于不锈钢、钢、塑料、玻璃、地板、墙壁等各种表面的消毒、灭菌等。[b]奥克泰士特点[/b]1、它能够有效杀灭细菌、病毒、变形虫、真菌及藻类，其十分广泛的应用领域使得用户便于操作处理。只需采用一种产品，便能够达到目前2种、3种甚至多种产品的使用目的。2、由于产品具有良好的稳定性，因此保证了长久的贮藏时间。产品在高水/气温度下仍能保持稳定；甚至在高温下，其效用还会有所增强。3、由于产品在防止再污染方面具有长久的有效性并且性能卓越，因此，产品非常适合用于饮用水与井水的消毒。4、过氧化氢银离子复合型杀菌消毒剂型产品是生态无害的。对防止水受细菌和病毒的再污染特别有效。其主要成分－过氧化氢－不会污染废水。这是由于它会分解成为水和氧气(H[sub]2[/sub]O和O[sub]2[/sub])，即，其副产物不具毒害性。5、两种基本物质（H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub]和Ag）进一步促进了各自的优势（*协同作用）。两种物质的协同作用比其中任何一种物质单独作用要具有更快、更强的杀菌作用。*协同作用—两种或多种组份用以提高和增强效用6、过氧化氢银离子复合型杀菌消毒剂为在氧化和微动作用相结合的情况下所制成的两相产品——不同于其它消毒剂——具有破坏生物被膜的功效。这是杀菌消毒的一个重要步骤，因为细菌或病毒会产生出这种生物被膜作为自然防护。由过氧化氢所分离出的氧气会破坏生物被膜，使得银离子能够轻易地杀灭细菌或病毒。

各位前辈，新手刚开始做粪大肠菌群的测定，用的滤膜法，想请教一下计数计算问题。在做了三个梯度体积的过滤之后，按照标准要求是滤膜上生长的菌落数为20—60个，有时候会出现以下情况：1.三个体积的滤膜上菌落数均不在20-60之间，例如78、6、0 2.有其中一个体积的滤膜在20-60之间，例如45、3、0。请问以上两种情况应该如何进行结果表示，谢谢大家。

最近实验室要扩项，谁知道耐热大肠菌、粪大肠菌和大肠埃希氏菌的标准菌株是什么吗？我在网上查到了大肠埃希氏菌，但是有好多啊，不知道必须用ATCC25922和ATCC 13048呢，还是也可以用其他的标准菌株？网上有人说耐热大肠菌和粪大肠菌是一样的，到底一不一样呢？

最近实验室要扩项，谁知道耐热大肠菌、粪大肠菌和大肠埃希氏菌的标准菌株是什么吗？我在网上查到了大肠埃希氏菌，但是有好多啊，不知道必须用ATCC25922和ATCC 13048呢，还是也可以用其他的标准菌株？网上有人说耐热大肠菌和粪大肠菌是一样的，到底一不一样呢？

滤膜法测定粪大肠时，最小过滤体积为10mL，那么接种量为1mL时怎么做，还有抽滤完一个稀释度时抽滤下一个稀释度是不是要更换滤器还是直接用酒精灭菌滤器？

据美联社报道，近日法国出现7名儿童感染大肠杆菌病例，法国卫生当局已责令一家德国连锁超市召回汉堡牛肉饼，目前已排除该起感染与德国致命大肠杆菌疫情相关。 法国北部-加莱海峡地区卫生机构主管雷纳尔表示，可以确信此次感染疫情菌株不同于德国芽菜上的大肠杆菌菌株。目前德国大肠杆菌疫情已造成39人死亡，上千人感染。 在新闻发布会上，雷纳尔表示，感染大肠杆菌的7名儿童已住院接受治疗，感染大肠杆菌后会出现呕吐、血性腹泻。他同时还表示，据目前所知其中的5名儿童食用了由德国连锁超市利德尔（Lidl）出产、法国制造的冷冻碎牛肉馅饼。供应该款汉堡馅饼的法国制造商表示， 馅饼中的牛肉来自法国、德国、与荷兰的农场，此次召回同样涉及10吨牛肉。 欧盟发言人文森特称，欧盟委员会认为此次法国感染疫情远不及德国疫情那样严重。 文森特同时还表示，此次法国疫情菌株为常规菌株，去年欧盟地区共发生3500起大肠杆菌感染病例，93起发生在法国。

请教一下各位老师，滤膜法做粪大肠菌群一个水样要接种几张滤膜？我目前做的主要是河流水、湖库水，一般是10mL用生理盐水稀释至100mL，抽滤。但是我看《水和废水监测分析方法》这本书提到了要先估计适合体积，然后再取这个体积的1/10和10倍，分别过滤。那这个意思是不是一个水样应该至少过滤两片滤膜？那这样子如果最后培养出来菌落数倍数关系不成立又如何上报结果呢？谢谢老师们~

霉菌毒素的危害及对策近几年来，霉菌毒素中毒给畜牧业带来的危害越来越大。据联合国粮农组织调查，全世界贸易供应的谷物中，有25%受到霉菌毒素的污染。在高温高湿地区这种污染更加严重。我国是霉菌污染比较严重的国家，陈必芳等在1996年从全国28个省市采集104个饲料加工厂和养殖场饲料及饲料原料样品627份，检测结果显示配合饲料霉菌污染率100%，饲料原料污染率99%。另调查结果显示，我国配合饲料饲料和原料污染霉菌毒素超标的比例高达60 %～70 %以上。 霉菌毒素对动物除中毒和致死外，更重要的是不易被发现机体免疫机能下降、生长受阻、生产性能和抗病力降低，故饲料中霉菌毒素有“隐形杀手”之称。其对动物生产性能和人类健康的负面影响是非常大的。因此，饲料霉变问题是饲料工业和畜牧业生产中不可忽视的问题，霉菌毒素污染问题应引起世界的广泛关注。 1. 霉菌毒素及其污染现状 霉菌毒素是某些霉菌在谷物或饲料上生长繁殖过程中产生的有毒二次代谢产物，毒素在谷物的生长过程、饲料的制造、贮存及运输过程中皆可产生。对畜禽造成很大危害的便是由霉菌产生的霉菌毒素。一般而言，霉菌毒素主要是由四种霉菌属所产生：曲霉菌属（主要分泌黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等）;青霉菌属（主要分泌桔霉素等）;麦角菌属（主要分泌麦角毒素）;梭菌属（主要分泌呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、串珠镰孢菌毒素等）。迄今为止已经有超过300种霉菌毒素被分离和鉴定出来，上述的几种毒素即为现今普遍认识的8种主要毒素。

我们以前都是用多管发酵测coliforms，最近在尝试膜过滤（MF）法现在的问题是，35度培养出来的菌落密密麻麻，却看不出什么是带金属光泽的；放到解剖镜下还不如目视清楚。说明：由于实在买不到那个thiopeptone（硫蛋白胨？），所以我们最后买了millipore的m-Endo Broth。这个培养基是液体的，所以我们用滤纸吸取液体培养基用于支持滤膜培养。最后的滤膜颜色深红，使得解剖镜下菌落都不是很明显请有MF法经验的朋友说说问题出在哪儿，MF法一般需要注意哪些问题，谢谢

美国农业部（USDA）官员于周一（9月12）表示，为了预防疾病以及挽救生命，同时更好保护美国市场上的牛肉供应，将从牛肉供应中对被称为“the Big Six”的六种危险大肠杆菌菌株颁布禁令。USDA官员称，除了已知的肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7(E.coli O157:H7)外，将会新增六种额外的产志贺毒素大肠埃希菌（Shiga toxin-producing E.coli,STEC）菌株。出售携带有这些病原体的商品将被视为违法行为。美国农业部食品安全和检疫局将会就这些病原体对碎牛肉、牛肉等进行测试。1994年起，牛肉制品已被禁止添加E.coli O157:H7，原因是此前西北太平洋地区爆发的疫情导致几百名儿童患病，其中有四名儿童因此去世。按照规定，禁令将扩展至E coli O26、O45、O103、O111、O121和O145。根据美国疾病预防控制中心的统计数据，每年这六种病原体会引发11.3万起的疾病，约有300人因此住院接受治疗。据悉，肉类行业对该举动反应并不热烈，可是却受到了消费者的一致好评。

据国外媒体报道，科学家在冰川中发现了冻结数千年的细菌，它们可能有助于人类活到140岁。　　解冻自冰河世纪冻结的F杆菌之后，研究人员让老鼠和苍蝇的寿命成功延长一倍。这种细菌是检测冰川的研究人员在西伯利亚的雅库特北部地区马蒙托瓦山附近区域发现的，它们冻结在冰川中，科学家把从中提取的成份先对苍蝇后对老鼠进行了试验，结果把老鼠和苍蝇的寿命成功延长了一倍。他们相信使用同样的治疗方法能延长人类寿命，人们可能有望活到100岁到140岁。　　负责调查的科学家安纳托利亚布鲁斯科瓦表示，把从F杆菌的提取物注入老鼠和苍蝇体内的结果令他们惊讶。他说：“这还只是初期结果，不过如果这种细菌对老鼠与果蝇有效的话，那么就没有理由不适用于其他动物了。”　　该研究所的发言人纳德扎达米洛诺瓦说：“我们还让一组老鼠作为控制组，它们的平均期望寿命是589天。把细菌提取物注射到老鼠的肌肉中后，它们的寿命平均延长308天，而控制组的老鼠约在一年前就已死去。那些注入细菌提取物的老鼠的平均寿命为906天。”　　虽然给果蝇注射不可能，但是，给它们的食品中添加细菌提取物。他们注意到，果蝇变得似乎更健康更强壮也更活跃，科学家观察到这些苍蝇的肌肉活性增加了。布鲁斯科瓦博士说：“我们的下一步工作是解决我们如何开发这种提取物进行临床试验。我们希望知道，如何能够找到一种方法，最终对这种细菌进行测试开发药物。”(新浪科技讯 ）

[font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][b][font=SimSun][color=windowtext]摘要[/color][/font][/b][font=SimSun][color=windowtext]：[/color][/font][b][font=SimSun][color=windowtext]目的[/color][/font][/b][font='Times New Roman',serif][color=windowtext] [/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]研究滤膜法检测水中总大肠菌结果的不确定度及评定方法。[/color][/font][b][font=SimSun][color=windowtext]方法[/color][/font][/b][font='Times New Roman',serif][color=windowtext] [/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]实验依据美国《水和废水标准检验方法》中的滤膜法检测水中总大肠菌群，建立数学模型；根据微生物的生长呈几何级数变化的原理[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext], [/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]评定了几何级数和非几何级数变化的分量，并合成扩展不确定度。[/color][/font][b][font=SimSun][color=windowtext]结果[/color][/font][/b][font='Times New Roman',serif][color=windowtext] [/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]按照模型确定了[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext]3[/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]个几何级数的分量和[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext]5[/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]个非几何级数的分量，几何级数分量对不确定度结果影响较大，占总贡献的[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext]83%~87%[/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]；非几何级数分量的贡献在[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext]13%[/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]～[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext]17%[/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]。在检测中，应着重控制样品重复性、再现性、接种时间等关键步骤，可提高检测结果的准确性。[/color][/font][b][font=SimSun][color=windowtext]结论[/color][/font][/b][font='Times New Roman',serif][color=windowtext] [/color][/font][font=SimSun][color=windowtext]本方法合理可靠，不确定度分量覆盖检测的各个环节，便于进行评定；建立的模型可推广应用于水中其他微生物参数的不确定度评定。[/color][/font][font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][font='Times New Roman',serif][color=windowtext] [/color][/font][font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][b][font=SimSun]关键词[/font][/b][font=SimSun]：滤膜法，总大肠菌群，几何级数分量，不确定度评定模型[font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][/font][align=center][b][font=Times New Roman][size=16px][font=SimSun]本文依据[/font][font=SimSun]的滤膜法检测水中总大肠菌群，基于微生物生长的基本原理，考虑到细菌裂变的过程、单位统一、采样、实验过程等方面的影响因素，建立了水中总大肠菌群测量不确定度评定的数学模型，分别合成几何级数、非几何级数变化的不确定度分量。方法先将几何级数变化的分量取反对数（[/font][font='Times New Roman',serif]CFU/100mL[/font][font=SimSun]），再与非几何级数变化的分量（[/font][font='Times New Roman',serif]CFU/100mL[/font][font=SimSun]）合成扩展不确定度。采用[/font][font='Times New Roman',serif]Excel[/font][font=SimSun]可将本方法设计的数学模型模块化，亦可应用于细菌总数、粪大肠菌群等微生物指标不确定度的评定，有助于实验室开展水中微生物指标测量不确定度的评定。[/font][/size][/font][font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][/b][font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][/align][font=Times New Roman][size=16px][b][/b][/size][/font][font=Times New Roman][size=16px][/size][/font][b][/b][align=center][/align]

我找了好久才找到的资料，在这里和大家共同分享。一、大肠杆菌细菌是单细胞的原核生物。细菌细胞的结构有细胞壁、细胞膜、细胞质等。细菌无成型的细胞核，细胞壁由肽聚糖组成。由于细菌细胞壁结构不同，细菌可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。革兰氏阳性菌细胞壁厚，无荚膜，多产生外毒素；革兰氏阴性菌细胞壁薄，有荚膜，多产生内毒素。革兰氏阳性菌对青霉素更为敏感。大肠杆菌是革兰氏阴性、异养兼性厌氧型肠道杆菌。在肠道中一般对人无害，但任何大肠杆菌进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。大肠杆菌在基因工程技术中被广泛的应用，它的质粒是最常用的运载体，它也是基因工程中常用的受体细胞。二、培养基配置微生物生命活动过程中需要的化合物有碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。有的化合物既是碳源又是氮源、能源。生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，但不一定需要外界补充，有的微生物可以自身合成。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌，培养后可在LB固体培养基上划线分离。以下为本实验中培养基配置步骤：1．称量：准确称取各成分。蛋白胨0.5g，酵母提取物0.25g，氯化钠0.5g，加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。2．溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂，整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。3．调pH：用1mol/L NaOH溶液调节pH至偏碱性。4．灭菌：在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基，加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅内，1kg压力灭菌15min。5．倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。否则，空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。三、灭菌和消毒1．无菌技术： ①对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒； ②将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌； ③为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰旁进行； ④避免已灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2．消毒方法： ①日常生活经常用到的是煮沸消毒法； ②对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法； ③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒； ④实验操作者的双手使用酒精进行消毒。3．灭菌方法： ①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； ②培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅； ③表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。4．比较消毒和灭菌： 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能5．注意事项： ①实验中用的棉花不能用脱脂棉，因脱脂棉易吸水，吸水后容易造成污染。灭菌后，通常在60～80℃烘箱中除去灭菌时的水分； ②物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是有利于锅内温度升高，随后关闭排 气阀继续加热，加热结束切断热源后，要使温度自然降低，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸； ③在用任何器皿转接时，瓶塞和封口膜只能夹在手上，不许放在台面上，接种时要在酒精灯火焰旁操作； ④培养基一定不能沾在三角瓶口、试管管口和培养皿壁上，否则容易污染； ⑤接种时要胆大心细，动作快捷，这是减少污染的关键； ⑥接种后，培养皿必须倒放（盖在下方）在恒温培养箱中，如正放则水蒸气在盖上凝成水滴，滴到接种后的培养基表面， 水流扩散会使菌落扩散，就很难形成单菌落了。四、细菌的分离1．划线分离法：用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线过程中菌液逐渐减少，细菌也逐渐减少。划线到最后，可使细菌间的距离加大。在培养10～20h后，可由一个细菌产生单菌落，菌落不会重叠。如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。其操作步骤是：将培养皿底部用拇指和无名指固定成倾斜状态，在火焰旁将培养皿稍微打开。在此同时，用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液，迅速送入培养皿内，在平板培养基的一边，作第1次平行划线 3～5条，转动培养皿约70°角，用烧过冷却的接种针，通过第1次划线部分作第2次平行划线，然后再用同样方法，通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。划线时，接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘，也不要将培养基划破。划线完毕后，盖上皿盖，倒置于恒温箱培养。取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。2．涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释到10－5 ～10－7之间，然后取0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿有20个以内的单菌落最为适合。将每个菌落分别接种在斜面上扩增培养后，再做功能性实验。划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂些。细菌的两种分离法各有优点,都可采用。五、菌落和菌种种类的辨认单个细菌用肉眼是看不见的，但是，当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，便会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、颜色、光泽度、透明度等方面具有一定的特征。细菌的菌落表面一般是光滑而湿润的，有黏稠性，多数透明或半透明，但也有细菌的菌落表面是干燥、有褶皱的；放线菌由于有纤细的菌丝并可产生孢子，所以菌落表面是紧密的绒状、坚实多皱，长孢子后就成粉末状，由于菌丝和孢子有多种色素，所以在菌落培养基底部和菌落表面都有不同的颜色，菌落不易用接种环挑动；酵母菌落类似于细菌菌落，表面光滑而湿润，有黏稠性但大多呈乳白色，少数呈红色。如果菌落无法辨认，只有借助于显微镜观察。在显微镜下细菌一般为杆状、球状和弧状，直径都在1um左右；放线菌菌丝是没有横隔的分枝丝状体，气生菌丝顶端分裂成串状孢子，孢子丝有直线形、螺旋状、弯曲式或轮生等；酵母有卵圆型或丝状，但卵圆形细胞大于细菌，直径约5~7um。

最近做水质粪大肠的验证，精密度和准确度提到的标准菌株是指什么菌株，实验室耐热菌株可以做标准菌株用吗？

各位前辈好！最近练手革兰氏染色，拿江河水样，用多管发酵法和滤膜法。两个涂片结果都是红色，表明是革兰氏阴性菌。但有个疑问，是担心酒精脱色没把握好，导致把阳性菌变成假阴性。想问一下各位负责总大肠菌群的前辈，你们试验中会做一个革兰氏阳性菌来对照吗？个人觉得水体中（本人使用钱塘江水），不太可能出现革兰氏阳性菌，这种想法是不是不严谨呢。以及CMA认证时，担心老师会要求现场操作革兰氏染色，求问，大家有什么建议，比如什么地方需要注意。还有大家染色时都是在无菌操作台，还是只是在一般实验室，使用酒精灯保证一个无菌区呢？问题有点多，谢谢各位先。

霉菌毒素是由霉菌或真菌产生的有毒有害物质。在土壤中，在植物上，包括谷物、饲草和青贮饲料均可发现霉菌毒素。霉菌毒素对粮食、饲料的污染已是一个全球性热点问题。目前已知的霉菌毒素高达几百种，而食品、饲料、饮料、药材行业中危害较大的主要是以黄曲霉毒素（Aflatoxin），赭曲霉毒素A（Ochratoxin A），单端孢菌毒素（Trichothecenes），玉米赤霉烯酮（Zearalenone），烟曲霉毒素（Fumonisin）和串珠镰刀菌素（Moniliformin）发生较多，由于霉菌毒素种类繁多、结构复杂多样，这就造成实际生产中，真菌毒素的定量检测成为困扰我们的重要难题之一，对于这些毒素的检测样品的净化处理显得尤为重要。目前霉菌毒素的检测方法包括薄层色谱法、酶联免疫法、免疫亲和柱净化高效液相色谱法。但薄层色谱法操作繁琐、污染大、定量差、耗时长；而酶联免疫法虽操作简单、灵敏度高，但特异性差，假阳性高；免疫亲和柱高效液相色谱法成本太高, 对于高黄曲霉毒素含量的样品偏差较大。迫切需要一种样品处理简便易行、快速准确、灵敏度高、检测限低，检测成本低廉的检测方法和技术。尤其液相色谱分离技术具有分析速度快、样品用量少、灵敏度高、分离和测定一次完成，得到越来越多行业和单位的应用，然而整个过程样品前处理的好坏将直接导致测量结果的准确与否，对样品净化的方法要求更高。Pribolab推出的新一代霉菌毒素净化柱产品，在创新发展了霉菌毒素检测的样品处理技术基础上，可以保证整个检测一开始就具有较高的重现性和可靠性。现代前处理技术在要求净化效果的同时，越来越追求方法的快速及易操作性，PriboFastR系列多功能净化柱采取的方法就是多重机制吸附杂质并快速萃取净化的方法，，它将极性、非极性及离子交换等多类官能基团作为复合吸附填料作为填充剂填充到柱体中，这些填料可以选择性的吸附样品中的如脂类、蛋白类和色素等主要杂质吸附，同时将待测目标物（如中黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮等各种霉菌毒素）留在样液中，从而达到净化和富集的目的。使用PriboFastR 系列多功能净化柱，能够及时快速地对从食品、饲料、饮料、药材中提取的待检液进行净化，过柱净化后的样品可以用于检测黄曲霉毒素、 玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇等多种霉菌毒素。与一般的固相萃取柱（SPE）和亲和柱相比，多功能净化柱无需活化、上样、洗脱等步骤，能够将食品或饲料提取液中的杂质与真菌毒素进行一步分离，使用快捷、方便，减少萃取步骤，有效保证分析的更加准确可靠，降低检测成本，有效提高检测效率。广告嫌疑的内容部分已经过编辑（弗雷德）