荧光素游离酸

[color=#444444]本人最近按2015版药典做了一个药用辅料-醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯的的游离乙酸的含量测定实验。实验过程如下：[/color][color=#444444] 游离乙酸、琥珀酸 取本品0.102g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入磷酸盐溶液（取0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，用1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7.5）4.0ml，搅拌2小时，加磷酸溶液（取1.25mol/L磷酸1ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）4.0ml，强力振摇，离心，上清液作为供试品溶液；精密称取琥珀酸0.13g，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使完全溶解，加水至刻度，摇匀，作为琥珀酸贮备液；取加有水20ml的100ml量瓶，称重，精密加入冰乙酸2ml，再称重，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取6ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为乙酸贮备溶液；精密量取乙酸贮备液和琥珀酸贮备液各4.0ml，置同一25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512)试验。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.02moI/L磷酸二氢钾溶液（用6mol/L磷酸溶液调pH值至2.8）为流动相，流速每分钟1ml，检测波长为215nm。取对照溶液10μl， 注入液相色谱仪，按琥珀酸峰计算，理论板数不得少于8000。取供试品溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，按干燥品计算,游离乙酸和琥珀酸总量不得过1.0%。[/color][color=#444444]计算公式： 游离乙酸含量=0.0768（WA/(W(1-干燥失重))）（γUA/γSA）[/color][color=#444444] 式中 WA为乙酸贮备溶液中冰乙酸量，mg；[/color][color=#444444] W为供试品的取样量，mg；[/color][color=#444444] γUA、γSA为供试品溶液、对照溶液中乙酸的峰面积。[/color][color=#444444] 游离琥珀酸含量=1.28（WS/(WUS(1-干燥失重))）（γUS/γSS）[/color][color=#444444] 式中 WS为琥珀酸贮备液中琥珀酸量，mg；[/color][color=#444444] WUS为供试品取样量，mg；[/color][color=#444444] γUS、γSS为供试品溶液、对照溶液琥珀酸的峰面积。[/color][color=#444444]我的问题是，根据“干燥品计算,游离乙酸和琥珀酸总量不得过1.0%”这句话，游离乙酸含量的最后计算的结果要不要乘以100%，比如我最后计算结果是0.0139，如果这个结果再乘以100%，就变为1.39%，从而超过限度，那么就需要重新做实验复核一遍。[/color]

今天有个同事突然问我什么是游离酸，其实我也不知道具体详细的概念，所以在这里求助下各位老师。 他分析的是铜湿法冶金侵出液游戏酸的测定 ，以甲基橙为指示剂，用氢氧化钠标准液滴定游离酸的含量。

最近想检测一下三氟乙酸乙酯中游离酸的含量，参照乙酸乙酯游离酸的检测方法不行，有哪位高手能帮忙提个方案，在此不甚感激！

[color=#3333ff]请问：[/color][color=#3333ff]日本药典标准里面的 醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯 的质量标准中，（如下为标准的译文）[/color]（2）游离醋酸以及游离琥珀酸 精密称量本品约0.1g，准确加入pH7.5的0.02mol/L磷酸盐缓冲液4mL，盖紧瓶盖，搅拌2小时。准确添加稀释后的磷酸（1→500）4mL，数次倒置振摇混合。对该溶液进行离心分离，取上清液作为供试溶液。另将20mL水放入100mL的量瓶中，精密称量其质量，加入2.0mL醋酸（100），精密称量其质量，计算出醋酸（100）的质量，再加入水，使其达到100mL。准确称量6mL该溶液，加水使其达到100mL，制成醋酸原液。接下来，精密称量大约0.13g的琥珀酸，溶解于水中，使之达到100mL，作为琥珀酸原液。准确称量4mL醋酸原液以及4mL琥珀酸原液，添加流动相，使之达到25mL，作为标准溶液。准确量取供试溶液以及标准溶液各10μL，在下述条件下根据液相色谱法进行试验，测定各个液体的醋酸以及琥珀酸的峰面积A[sub]TA[/sub]、A[sub]TS[/sub]以及A[sub]SA[/sub]、A[sub]SS[/sub]，根据以下公式求出游离醋酸和游离琥珀酸的量，其总量不得超过1.0%。游离醋酸（C[sub]2[/sub]H[sub]4[/sub]O[sub]2[/sub]）的量（%） =M[sub]SA[/sub]/M[sub]T [/sub]× A[sub]TA[/sub]/A[sub]SA [/sub]× 48/625游离琥珀酸（C[sub]4[/sub]H[sub]6[/sub]O[sub]4[/sub]）的量（%） =M[sub]SS[/sub]/M[sub]T[/sub] × A[sub]TS[/sub]/A[sub]SS[/sub] ×32/25M[sub]SA[/sub]：醋酸（100）的称取量（mg）M[sub]SS[/sub]：琥珀酸的称取量（mg）M[sub]T[/sub]：换算成干燥品之后的本品的称取量（mg）[color=#3333ff]计算公式中的48/625和32/25是怎么得来的啊？[/color][color=#3333ff]请各位帮忙讨论一下，不甚感激。[/color]

小弟用气相色谱测定了一下蛋中脂肪酸与游离脂肪酸的变化规律，结果发现脂肪酸种类变少，游离脂肪酸种类却变多，想请教一下大侠们这结果是不是错了呀，游离脂肪酸不是脂肪酸的一种么，应该与脂肪酸的变化规律一样吧，还有同一批次中测得的脂肪酸中应该包含游离脂肪酸呢吧，求高人指点。

新购的玻璃器皿一般均含有游离碱，所以要泡酸除去游离碱，对吗？

游离酸找不到具体资料，厂家也不能提供资料！！原样稀释100倍然后取稀释液10毫升，加指示剂，用0.1mol/l的氢氧化钠滴定，消耗了3.4毫升，哪位大大能告诉我怎么算酸点！！不胜感激，

因为实验需要检测粪便中游离氨基酸的含量，有没有人做过吗？这个能冻存后再检测吗？而且除了自动氨基酸分析仪，有人用气相色谱-质谱连用或者气象色谱检查的吗？

我们要检测购买的产品中游离酸的含量，用滴定法。但是对方提供的QB中用的试剂与GB中（非所购买级别）不同，我是按GB还是按他们的QB检测呢？[em53]

想用层析柱分离出藻类的游离脂肪酸，却找不到游离脂肪酸的各种性质，溶于什么溶剂之类的。检测方法？求各大虾指导求EPA的化学结构式？？？

国标中的检测方法为：称取2 g试样，称准至0.01g ，溶于20ml不含二氧化碳的水(2.4.1.3)中，加2滴酚酞指示液(2.4.1.1)，如溶液无色，加0.3 m l氢氧化钠标准溶液(2.4.1.2 )，应显粉红色;如溶液呈粉红色，加0.3 ml盛酸标准溶液(2.4.1.4),粉红色应退去。国标中没有给出相应的公式，请问，游离酸或碱是按酸碱反应计算出来的吗？因为即使是0.1M的盐酸或氢氧化钠，滴定用的量都很少，请问大伙怎么准确操作的呢，是在滴定管中滴定呢，还是用移液器调到小量程多次加的呢？针对于上面国标的方法，是只能检测出游离酸或游离碱吗？有没有可能里面既含游离酸又含游离碱呢？因为国标上最后列出来的指标是游离酸小于多少，游离碱小于多少。非常谢谢大家。

如何改变中和硫酸铵中游离酸的操作顺序,使得被滴定溶液中不含甲基红指示剂

如何用气相测定植物油中的游离脂肪酸？因为油样中，有游离型的脂肪酸与结合型的脂肪酸。如果是甲酯法的话，测出来的话应该是脂肪酸的总合，而我只需要测游离脂肪酸的含量。我想问的是不经过甲酯化进行测定，有没有坛友做过呢？

茶叶中游离氨基酸含量占干重2-5%, 由于它与茶叶的滋味, 茶叶的药理作用及营养辅助作用密切相关, 所以在茶叶品质鉴定以及茶树品种特性鉴别中乃是一个重要的理化指标，本文报道了在英国Biochrom 30+型氨基酸分析仪上, 采用4.6*200mm分离柱和标准生理体液分析方法,一次完成茶叶中茶氨酸及其它游离氨基酸的测定。该方法重现性好,分辨率高,取得了令人满意的分析结果。

请教：如何分析有机溶剂中的游离甲酸？N-甲酰吗啉中含有微量游离酸，用什么方法分析？

中和甲醛中游离酸的指示剂选择，书上采用酚酞，用甲基红是不是也可以？谢谢！

请问苯磺酸中游离酸,游离水,结晶水以及主含量,苯二磺酸,二苯砜的检测方法?

我的样品是纯的游离脂肪酸，我用硫酸甲醇甲酯化后，没信号。请问有其他甲酯化方法？

最近在分析微生物油脂过程中遇到很多问题，希望写在这里能跟大家一起讨论脂肪酸通常的检测方法是甲酯化后用GC检测，已经非常成熟，但是关于游离脂肪酸的分析却很少报道，而我在采用GC对游离脂肪酸检测中存在以下问题附操作过程：发酵液离心-水洗2次-超声破碎-氯仿甲醇（1:1）萃取，55oC氮吹干，正己烷溶解，250oC气化进GC检测检测结果中出现微生物所不产的脂肪酸甲酯，其含量不低，不知道哪一步出了问题，是在氮吹过程中温度过高发生反应？还是在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]进样口处发生酯化？希望能有更多的人参与讨论。

大家测过2,4-D酸吗？怎么控制里面的游离二氯酚？用分光光度计吗还是液相？还有行标是用液相内标法，可用外标法吗?谢谢！

请教一下如何检测牛奶中的游离脂肪酸？是否有相关国标？用FT120可以测吗？测原奶和稀奶油是否有不同方法？谢谢

[color=red]荧光[/color]分光光度法测定阿司匹林中游离水杨酸——PEG 1500-OP-(NH_4)_2SO_4-H_2O双水相体系萃取分离

求助大家，求助！牛乳体外消化模拟如何根据消化液中游离氨基酸含量推导到牛乳中游离脂肪酸含量？单位该怎么推导？我想测定氨基酸的生物利用率。需要游离氨基酸与牛乳中总氨基酸进行比较

现在要做油脂中游离脂肪酸的TLC，没有接触过TLC，通过今天在论坛的学习，了解不少，现在有三个问题（1） 我选择 “十八烯酸”作为标准可以吗？标准与自己的样品是分开点吗？（2）我选择的展开剂是 己烷：乙醚：甲酸/80：20：2先分离中性脂，待干后又在 氯仿：甲酸：甲醇：水/70 25：5：2中展开，不知可行吗？（3）显色剂用20％硫酸/乙醇可以吗？谢谢

应用QB/T 2623.1-2003和QB/T 2623.2-2003测香皂中的游离碱总游离碱,所用指示剂为酚酞,然后说对于有色香皂说可用百里香酚蓝指示剂,可样品香皂溶解乙醇后是那种灰绿色浑浊液,滴定颜色肉眼很难辨别.试过用pH计判定,结果也很不理想.出现很奇怪的现象,刚回流完的试样,pH显示6点多，用盐酸乙醇标液滴定的过程逐渐升高，本以为酚酞的变色点是8.20，滴至8.20便是终点，发现它还是会不断升高。让我觉得奇怪的是盐酸是中和试样中的游离碱，可过量酸pH值该是降低才对啊......不知我这过程有哪些错误,请高手指点!

有关人血清中游离酸甲酯化处理的问题本人现做人血清中脂肪酸含量的测定，通过阅读大量文献发现，人血清中游离脂肪酸采用硫酸甲醇法甲酯化后，提取溶剂有的用正己烷，有的用氯仿，请教各位大侠，选择提取溶剂有么有什么依据及注意的地方，请不吝赐教

打算用HPLC测定游离氨基酸，看到一篇文献其样品前处理步骤如下：称取5g 左右(精确到0.001g)，加入去离子水20ml，在冰浴中用ULTRA TURRAX(IKAT18 basic, German)组织捣碎3次(22000r/min，每次10s，间隔10s)，然后加入10% 磺基水杨酸20ml 混合均匀，于4℃下放置17h，中速滤纸过滤后，用4mol/LNaOH调整滤液pH 值至6.0，并定容至50ml，经10kDa 超滤膜超滤除去大分子。超滤液用AccQ•Fluor Reagent Kit进行衍生处理后，用外标法测定样品中的游离氨基酸含量。想请教一下这里“用4mol/L NaOH调整滤液pH 值至6.0”的作用是什么呢，谢谢!

求助肠溶阿司匹林片中游离水杨酸的含量测定!谢谢大家了!

游离脂肪酸与我们常说的猪油等有什么关系和区别？

主要是测血清中游离谷氨酸和天冬氨酸。。。磺基水杨酸去蛋白离心取上清，然后直接用PITC做衍生，反应一小时后用等体积的正己烷萃取，然后上柱检测。求助PITC衍生有什么注意事项吗？？标准品可以走出峰来，但是样品总是做不出来，氨基酸出峰有很大的干扰，几乎看不到氨基酸的峰。请教有什么注意事项吗？或者有好的萃取小柱吗？目前样品都用磺基水杨酸处理过了[em0812]