小鼠肺癌细胞

本文利用电子鼻系统对三组含挥发性有机化合物的顶空癌细胞样品的挥发性生成模式进行了初步研究。由32个导电聚合物传感器（Cyranose 320）组成的商业化电子鼻用于分析三种类型的信号，这些信号是在培养基中生长的肺癌细胞、在培养基中生长的乳腺癌细胞和空白培养基（没有细胞）。应用基于神经网络（PNN）的分类技术，研究了电子鼻（E鼻）系统对癌肺细胞分类的性能。

美国的科研人员通过对TTF-1的调控发现，TTF-1能直接调节血管内皮生长因子（VEGF），并且发现VEGF启动子上有多处TTF-1响应序列。 比如，VEGF的主要受体，VRGFR2显示出收到TTF-1的直接正调节。本文中显示，低氧并没有促进 TTF-1+肺癌细胞中的VEGF的表达。而采用外泌体培养基或者是去外泌体的培养基（EDM）时，TTF-1都能促进VEGF表达。但在研究中意外的发现TTF-1+肺癌细胞的去外泌体培养基（EDM-TTF-1+）能够内皮细胞的血管形成。

人非小细胞肺癌抗原(LTA)检测试剂盒人非小细胞肺癌抗原(LTA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人非小细胞肺癌抗原(LTA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人非小细胞肺癌抗原(LTA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人非小细胞肺癌抗原(LTA)抗原、生物素化的人非小细胞肺癌抗原(LTA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人非小细胞肺癌抗原(LTA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

非小细胞肺癌患者血浆中EGFR含量及突变量分析是一种较好的判断肿瘤分子特征及预后评判的工具，治疗前EGFR总拷贝数及突变的EGFR拷贝数具有指示临床预后的作用。

【应用案例】超分辨率荧光成像揭示Trop2对非小细胞肺癌和正常细胞膜的变化

植入物被植入人体后，会被蛋白质和细胞覆盖。为了了解这些界面上的相互作用，需要使用体外工具。允许动态和静态流动条件的实时无标签平台被用来了解细胞粘附，并以这种方式提高植入物的兼容性。同样的特点也有利于基于细胞检测的生物传感器的发展。细胞也可以用作临床生物传感器(用于癌症)研究中的分析物。 采用多参数表面等离子体共振(MP-SPR)技术测定了人间充质干细胞(ADMSC)和溶菌酶蛋白在几十微米厚的羟基磷灰石(HA)表面上的附着。羟基磷灰石是存在于牙齿和骨骼中的一种成分，其合成形式被广泛用于骨科假体中，以增强种植体的骨整合。MP-SPR测量结果表明，细胞倾向于与HA涂层结合，而不是金涂层。 在另一项实验中，开发了一种生物传感器来检测肿瘤细胞，测定乳腺癌细胞(MCF7)和非癌细胞(MCF-10A)与表面结合的靶向肽(18-4)和参比肽的结合情况。生物传感器表面能够区分癌细胞和正常细胞。

样品介绍：小鼠肺组织是实验研究中经常出现的实验组织。通过制备小鼠肺组织的单细胞悬液，可以将肺组织中的细胞分散为单个细胞，并保持其完整的细胞膜和细胞器结构。通过单细胞悬液的制备，研究人员可以对每个单个细胞进行分析，了解其基因表达、蛋白质水平、代谢状态等信息。

二氧化碳培养箱是生物医学研究中不可或缺的工具，特别是在癌症研究领域。本文将介绍如何利用二氧化碳培养箱培养癌细胞，以便进一步探索癌细胞的生物学特性和治疗方法。实验材料与设备

癌细胞通过细胞外囊泡（EVs）与全身细胞相互作用。细胞外囊泡在体内循环并传递引起恶性表型的分子信息。通过同时培养大肠癌转移淋巴节细胞和5-氟尿嘧啶，我们建立了对化疗耐药性增强的细胞。将通过超速离心分离从该细胞的培养上清液中回收的细胞外囊泡，用作体液中循环的源于癌细胞的生物标志的模型。本文通过MALDI-TOF-MS测定了细胞外囊泡中蛋白质的差异表达，这是由于其母细胞的化疗耐药性增加的结果。

探讨左金丸水提物WEZP对人胃癌细胞SGC-7901 生长的活性抑制和凋亡诱导作用。Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析各剂量WEZP作用。 结论是WEZP对SGC-7901生长有明显的抑制作用并可诱导SGC-7901的凋亡。

目的:小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于：（1）细胞保种；（2）分子生物学研究；（3）基因治疗相关研究。实验原理:将小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置MEF生长培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。

观察2型糖尿病模型db/db小鼠胰岛β细胞的超微结构、胰岛素表达及数量变化，探讨β细胞的病理改变与2型糖尿病病因的关系。 分别选取3、5、8月龄尾静脉空腹血糖高于10.1mmol/L，且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠，每组8只，作为糖尿病组；选取相应年龄段尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L，体重正常的db/+m表型正常小鼠，每组8只，作为对照组。于相应年龄段取胰尾，用于透射电镜观察、免疫组织化学观察和图像分析。

2020年3月3日， 北京协和医院病理科曾瑄教授团队在《Journal of Cancer Research and Clinical Oncology》发表题为 “ALK detection in lung cancer: identification of atypical and cryptic ALK rearrangements using an optimal algorithm” 的研究论文，该研究使用新羿TD-1数字PCR平台，采取融合诱导的不平衡转录分析（Fusion-induced asymmetric transcription assay， FIATA）策略，比较了逆转录微液滴数字PCR（RT-ddPCR）法与IHC和FISH在非小细胞肺癌ALK融合检测中的优势，并提出了更优化的临床ALK检测策略。

癌症是与影响正常细胞功能的遗传变化有关的多种不同疾病的集合，而代谢重编程正在成为癌症治疗性干预的一个关键靶标。癌细胞高度依赖代谢通路来产生多种致癌过程所需的能量（快速增殖、生存、入侵和转移），并对代谢进行重编程以支持这些过程。如今，研究人员正在使用多种基于细胞的分析方法，如基因和 RNA 表达、蛋白质定量、流式细胞术和质谱法，以进一步了解癌症生物学。利用实时细胞功能检测可以研究细胞代谢的动态特征，以及癌细胞如何重新编程其代谢过程来适应环境并存活，从而得以揭示癌细胞的代谢特性。这些代谢特性可以用于开发癌症靶向治疗。

研究表明，通过采用SC-ICP-MS 方法，能够测定细胞内金属成分、定量分析金属及金属掺杂药物、纳米粒子的细胞摄取率。在本文中，我们证明了，在单个细胞基础上通过PerkinElmer 的NexION® 2000 单细胞ICP-MS 解决方案来量化癌细胞的金纳米粒子摄取量。该技术能够准确定量出含金纳米粒子（AuNP）的细胞数，还能够分析每单个癌细胞中的AuNP 数，给出细胞群的摄取分布。

人肺癌标志物检测试剂盒人肺癌标志物检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人肺癌标志物含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人肺癌标志物水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人肺癌标志物抗原、生物素化的人肺癌标志物抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肺癌标志物呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

目的：探讨丙戊酸镁对小鼠急性脑缺血再灌注损伤的预防作用及其机制。方法：取小鼠随机分为假手术组、模型组和丙戊酸镁高、低剂量（0.04、0.02 mgg－1）组，每组10 只，灌胃给予相应药物，每日2 次，连续14 d，末次给药1 h 后对后3 组小鼠建立急性脑缺血再灌注损伤模型，建模成功后检测各组小鼠脑指数和脑组织中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，并观察大脑皮层和海马CA1 区细胞形态的变化。结果：与模型组比较，丙戊酸镁高、低剂量组小鼠神经元损伤减轻，脑指数和MDA含量明显降低，GSH-Px活性明显升高（P＜0.01 或P＜0.05），且丙戊酸镁高剂量组SOD活性明显升高（P＜0.01）。结论：丙戊酸镁对小鼠急性脑缺血再灌注损伤具有预防作用，其机制可能与抗氧化作用有关。

据报道，许多微观生理系统成功地模拟了器官微环境。然而，目前只有少数系统专注于实时生理监测，用于候选药物的临床前细胞毒性评估。本文中介绍一个多传感器肺癌芯片平台，用于基于跨上皮电阻抗（TEER）的候选药物细胞毒性评估。ITO电极的优异透明度允许使用3D打印数字显微镜对芯片上的细胞进行视觉监测，在此之前从未报道过。采用光学pH传感器在线监测培养基pH值。作为概念验证，将癌症NCI-H1437细胞培养在玻璃基微流控芯片上，实时获取生物传感器数据。然后使用TEER阻抗传感器实时监测不同浓度药物阿霉素（DOX）和多西他赛的毒性。根据细胞指数（CI）评估TEER阻抗响应，而在实验结束时进行活/死测定以比较细胞活力。细胞指数评估表明，阿霉素浓度的增加导致的细胞死亡率高于多西他赛。药物治疗期间还记录了pH反应和显微镜图像。本文中开发的平台是一个很有前途的工具，用于未来微观生理系统的新药化合物的细胞毒性评估和特殊药物的开发。

Machado 等发现，呼出气VOC成分在肺癌组（n=14）和对照组（n=20）间有差异，M距离为3.25，交叉验证的准确率（CVA）达71.6%（14）。然而，不同分期或不同组织学亚型肺癌间并无差异。但是，训练组使用新的肺癌人群（n=14）和健康人群（n=62）作为模型验证呼出气VOC组分时，电子鼻的敏感性和特异性可达到71.4%和91.9%。2008年，Dragonieri等发现，使用Cyranose 320可有效鉴别肺癌患者（n=10）和COPD患者（n=10），其准确性为85%（M距离=3.73）；用于鉴别肺癌患者和健康人群时（n=10），准确性可达90%（M距离=2.96）（28）。

在西方国家，顺铂，卡铂和奥沙利铂是使用最广泛的铂类癌症化疗药物。卡铂的有效性是由于其可以与DNA结合从而导致DNA- 铂（Pt）加合物的形成，但这也会造成DNA 的弯曲。因此在化疗后细胞必须修复DNA损伤，否则DNA复制受阻会导致细胞死亡。许多癌症患者最初对基于铂类的治疗比较敏感，但一段时间后，患者通常对顺铂治疗表现出耐药性，导致了癌症的复发。顺铂耐药性归因于三种主要的分子机制：DNA 修复的加速，胞浆失活的加速和细胞摄取药物能力的变化。其中，细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对顺铂的摄入能力降低或者顺铂转运的加速。细胞内顺铂的摄入与肿瘤负荷相关，也就是说肿瘤对顺铂反应降低会导致细胞内顺铂的含量降低。所以，分析单个细胞水平对顺铂的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。过多顺铂进入细胞内会增加DNA 损伤和细胞死亡的频率。了解细胞对顺铂的摄入将能为新疗法的开发提供参考，以提高肿瘤对顺铂的敏感性。传统方法的缺陷在于铂的浓度只反映整体细胞群内的浓度而不是个体细胞内的浓度。因此，顺铂摄入在个体细胞之间的分布和差异无法通过传统方法体现。实际上，细胞对顺铂的摄入最有可能根据个体有很大差异，但至今还没有有效的方法来评估。本文介绍了一种全新的技术，可对金属在单一细胞水平上进行定量：单细胞电感耦合等离子体质谱 (SCICP-MS)。SC-ICP-MS 是以单颗粒电感耦合等离子体质谱（SP-ICP-MS）技术为基础，后者能够在溶液中对纳米粒子进行评估与定量。两种技术都基于测量单个细胞（或单个纳米颗粒）在进入等离子体时产生的离散信号的原理。每个细胞中的金属成分离子化，产生离子流，检测器以每秒100000 数据点的速度快速对信号采集测量，从而使得单个细胞中的金属含量能被定量到阿克（ag）/ 每细胞的水平。相比测量细胞内顺铂摄入的传统方法，SC-ICP-MS 所得结果的信息量更加全面。

制造一个空白的无细胞的地带，然后对这个无细胞地带的边缘的细胞进行观察；这些边缘的细胞会开始进行迁移活动，并且最终覆盖整个无细胞的区域，重新互相接触在一起。法国的科研人员在2015年的 STEM CELL上发的文章中提出神经生长因子（NGF）和神经生长因子前体（proNGF）会自动的激活乳腺癌干细胞，并且发生侵袭。文中，使用乳腺癌细胞系和肿瘤分离的细胞进行伤口愈合实验，得出，由NGF处理的肿瘤离的乳腺癌细胞的伤口愈合速率有非常显著的提高。说明在NGF能促进乳腺癌细胞迁移活动。

目前的癌症研究和药物测试主要基于二维细胞培养和动物模型。 然而，这些方法具有局限性并且产生不同的药物反应模式。 本研究通过使用 3D 生物打印技术开发创新的体外人类三维 (3D) 正常皮肤模型和人类皮肤鳞状细胞癌 (cSCC) 的多细胞模型来解决这一空白。 对由 HaCaT 角质形成细胞、原代正常人真皮成纤维细胞和 A431 癌细胞（三细胞）组成的生物打印 3D-cSCC 模型、仅由A431 癌细胞（单细胞）、A431 癌细胞球体组成的生物打印 3D-A431 模型和传统 2D 模型进行比较分析 楷模。 通过光学显微镜、免疫荧光（LIVE/DEAD 测定、共聚焦显微镜）和免疫组织化学（苏木精/伊红、p63、波形蛋白、Ki67、表皮生长因子受体染色）对模型进行结构表征。 使用ARIVIS 科学图像分析平台分析 3D 模型的空间排列。 所有模型还通过 MTS 测定的西妥昔单抗(CTX) 反应测试进行功能评估。 3D-cSCC 模型维持长达 16 周。 形态学和组织学检查证实了生物打印的正常皮肤 3D 模型中存在类皮肤层，以及生物打印的皮肤癌模型复杂多样的特征，复制了关键的体内特征。 在单细胞和三细胞生物打印肿瘤结构中，癌细胞球状簇逐渐形成并持续生长，显着影响模型的形态。 与球体和 2D 培养物相比，3D 生物打印结构中的癌细胞对 CTX 的敏感性降低。 这项研究强调了三维多细胞模型在阐明药物反应和更好地了解肿瘤微环境中细胞成分复杂的相互作用方面的潜力。 开发多细胞 3D 肿瘤模型为新研究铺平了道路，这对于推进基础癌症研究和未来临床应用（特别是药物反应测试）至关重要。

摘要自然杀伤(NK)细胞是一种先天免疫细胞，通过发挥细胞毒性作用，在清除转化或癌变细胞方面发挥着重要作用。近年来，一些免疫刺激分子和生物制剂被用来提高NK细胞的溶瘤作用。三维(3D)细胞培养技术已经发展到更好地概括体内结构和生理相关性，以评价这些药物和生物制剂的体外。在这个概念验证研究中， 我们开发了一个三维生物打印的子宫颈癌肿瘤模型，以证明NK细胞的细胞毒活性。用Ⅰ型胶原3D生物打印GFP标记的人宫颈癌细胞SiHa和CaSki，并与人外周血源性NK细胞共培养96h。NK细胞对肿瘤细胞的细胞毒性作用通过荧光显像进行评估，显示在NK细胞浓度增加的情况下，肿瘤杀伤程度更高。本文描述的方法是可缩放的，与高含量成像兼容，并且容易翻译到其他肿瘤模型。

突变K-Ras是癌症中最为常见基因突变之一，它存在于约25%的肿瘤中，是热门的肿瘤靶点。2021年，针对K-Ras（G12C）的小分子药物Sotorasib获得FDA批准上市，用于治疗该基因突变的晚期非小细胞肺癌患者。

人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)检测试剂盒人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)抗原、生物素化的人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

细胞的迁移运动不仅是细胞进行很多重要生理活动的基础，同时也是炎症反应和肿瘤发生等病理过程中的重要步骤和关键环节。细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。目前人们对恶性肿瘤的研究是多方面的，从癌症的产生到转移，血管供给以及分裂增殖都一直是医学和生物学研究的热点。恶性肿瘤与良性肿瘤的最大区别就在于是否可以对周遭组织进行浸润，结果是形成边界不分明的癌组织，或是进入血管转移到远端（见远端转移）。根据观察可将癌症浸润分为四步。首先癌细胞表面的粘附分子会减少，与周围的细胞彼此分离，被“解除束缚”。同时癌细胞与基底膜的粘附却会增加，这是癌细胞通过增加自身基底面层粘连蛋白（laminin）受体实现的。然后癌细胞会释放蛋白酶，用以降解细胞外基质成分，如Ⅳ型胶原酶，使基底膜受损，产生缝隙。最后是癌细胞阿米巴运动样的迁移，钻过基底膜的缝隙，到达底下的间质组织。癌细胞此后会继续用蛋白酶为自己在间质组织开路，直到血管，然后它会以同样方式进入血管，经血到转移后，又以同样方式出管。因此，癌症的形成与肿瘤细胞的迁移能力密不可分，这也成为了一个诊断和治疗癌症的一个靶点。研究细胞迁移的方法有很多，比如划痕法、实时细胞追踪、Transwell和细胞芯片等，本文将一一介绍现今比较主流的与细胞迁移相关的实验方法。

细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡，是由基因控制的主动性细胞死亡过程。越来越多数据发现，细胞凋亡与多种疾病密切相关，如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力，利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿瘤诊断，疗效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

适度消化细胞：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落，2min足矣，P19Cl6和293细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。

诱导多能干细胞在再生医学中的应用已获得巨大进步，且已有相关临床报道。研究表明，诱导多能干细胞的特征，如菌落形状、增殖速率，取决于细胞系来源及培养方法，且在特定情况下可形成癌细胞。因此可推测诱导多能干细胞的差异，即个体性，是决定其分化为不同细胞的重要因素之一。阐明该细胞的个体性有望成为再生医学的创新技术。然而，目前仍存在许多对细胞的个体性产生影响的不确定性因素，这已阻碍了诱导多能细胞的应用。本文借助扫描探针显微镜（SPM）观测细胞形状，所用样品为无差别的诱导多能干细胞，同时以癌变的海拉细胞（Hela Cells）作为反例。实验证明海拉细胞为圆形，而诱导多能干细胞呈扁平状且细胞间的黏连作用使之形成网络结构。

因小鼠的基因和人类基因达到了极高的相似度，最高可以达到98%，在小鼠身上做实验获得的结果，和人类身上的很是相似，很多人类难以治愈的疾病，可以在小鼠身上找到相似性状，从而加以实验发现治病基因。使用扫描电镜对小鼠各器官细胞微观形貌的观察在临床病理上的研究有重要意义。本篇文章我们分享的是关于小鼠各器官在扫描电镜下的微观形貌。