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我妻氏血平板

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    [size=4]血平板在常温下放置久了,没有长菌,但是颜色发生了改变,变成了巧克力色,却是透明的,是什么原因造成的?怎么样避免这种情况?谢谢![/size]

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    2011年,平板电脑已经进入到百花齐放的年代,众多品牌的平板电脑群雄奋起,其性能也在翻番。近日,我在采购一款样品前处理设备时看到,厂家紧跟潮流,也配置了iPad。这样一来,远程监测分析仪器,就有了可能。你认为明年起,跟光谱仪器配套的电脑,会改为平板电脑吗?

  • 【分享】铸铁平板平台的修复之压砂

    【分享】铸铁平板平台的修复之压砂

    铸铁平板平台压砂前的预备工作:研磨方法 铸铁平板平台的研磨方法一般有两种:一种是三板互研法,这种方法压砂的结果是,三块平板平面度都很好,三块平板的压砂效果基本一样,并且三块平板都可以使用,不用常常压砂,但对修理技术要求较高。所谓三板互研法是指三块平板相互之间依次互研,并且每块平板只能当下板两遍,实际共研磨6遍。 另一种方法是两块板互研法,也叫子母板压法。这种方法是只用两块平板一上一下互研,用这种方法压砂结果是,两块平板的平面度基本吻合,上面平板的平面度凹,下板的平面度凸,并且下板的压砂效果要比上板的好。因为上板中间凹,不轻易修理量块,一般不用上板,只用下板。缺点是下板的突出程度不易把握,只能用一块平板。每次压砂时需要研磨3~4遍才可以完成,每遍6分钟左右。两种方法比拟较,本人经验觉得仍是前者较好。平板的选用 压砂前的预备工作很重要。首先选用什麽样的铸铁平板平台?采用那种压砂方法?选用什麽规格的砂子?心里应该清晰。修理量块的平板一般有灰铸铁、高磷球墨铸铁、高磷低金属球墨铸铁等三种。平板的硬度在HB (130~250)之间。采用硬度较低的平板压砂,嵌粗砂轻易,适合于粗研,修出的量块表面粗拙度比较低,表面发白。采用硬度较高的平板,嵌粗砂难题,轻易嵌入细砂,耐磨性不理想,修出量块的表面粗拙度高,光彩青亮。从我二十来年的工作经验看,采用硬度在HB(180~210)的平板,既压砂轻易,耐用,又合用于高精度的精密研磨,特别合用于量块修理。 金刚砂规格的选用 平板的压砂有两种方法:(1)从开始到结束只用一种规格的砂子,修理量块一般用M2.5规格的砂子.(2)压砂从开始到结束,砂子从粗到细循序渐进地压砂,一般选取M4,M3,M2.5规格的砂子。 研磨平板需要的辅料 (1)混合油:煤油和变压器油的比例3:1。 (2)硬脂。 (3)用汽油泡好的砂子即金刚砂。 平板恒温 修理室的温度很重要,太高或太低都不轻易嵌砂,一般温度在(20±5)°C。有的单位压砂房间恒温前提比较差,当平板从一温度拿到另一温度的房间研磨时,平板受热涨冷缩现象的影响,表面产生变形,故等温一段时间,一般平板在压砂前等温数小时或更长时间,待平板变形不乱后,再开始研磨。 平板的修整 对于新铸铁平板平台和表面划痕、碰伤较重的平板,先用油石打磨一下,打磨后,我们先用M4的砂子修一下板面,三块平板互相研磨,待推拉费力的时候,卸下平板,直到平板的平面度较好时,休止修理平板,做到冷暖自知。 对于使用中划痕、碰伤较轻的平板,只用油石把突起的部门打磨下去就行,不用修理平板,直接压砂就可以了铸铁平板平台的压砂 从我们多年来的工作经验看,选用(300×300)mm的平板,采用三板互研法压出来的平板修理量块最为相宜,由于它简朴易操纵,只用一种规格的砂子,不用多次换砂,并且压一次砂三块平板都可以使用。 首先我们把第一块平板放在工作台上,用汽油把平板擦干净。在铸铁平板平台上涂上少许硬脂,然后倒上用汽油泡好的M2.5的金刚砂(一吸管的量),等汽油挥发后,滴入 10滴混合油,把下板涂匀,再在上板的四角及中央处涂些,这样可以防止在压砂开始时,因为油膜厚度不均两板之间形成一个楔角,会泛起“啃”板现象。 前两次压砂所达到的推拉力和所用油量一样,后四次压砂滴入7~8滴混合油,推拉力达到750N左右,这时的推拉速度达每行程10秒左右。 每遍压砂大约需要20分钟左右。把握了以上压砂要领,就可以达到预期的效果。我们用这种方法得到的研磨平板用试块试,手感:⑴很柔和;⑵切削力很快。目测试块:切削痕迹平均即粗拙度好。这样的平板经久耐用,可以修理量块250~300块,我们一年只需要压砂3~4次,就可以保证全市各大企事业单位、计量站的量块修理量。

  • 噬菌体-----双层平板

    我想请问一下,就是做噬菌体的实验时,为什么要用双层平板啊?这个双层平板有什么作用吗?跟单层的话有什么区别

  • 稀释平板计数

    一、实验目的了解稀释平板计数的原理,掌握涂抹平板培养法和混合平板培养法,认识细菌、放线菌、霉菌的菌落特征。二、实验原理 稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些成品检定(如杀虫菌剂等)、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。三、实验器材 1.活材料:苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌剂。2.培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(附录三、1)3.器材:90ml无菌水、9ml无菌水、无菌平皿、lml无菌吸管、天平、称样瓶、记号笔、玻璃刮铲等。四、实验方法 1.样品稀释液的制备 准确称取待测样品l0g,放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置摇床上振荡20 min,使微生物细胞分散,静置20-30s,即成10-1稀释液;再用1ml无菌吸管,吸取10-1稀释液lml,移入装有9ml无菌水的试管中,吹吸3次,让菌液混合均匀,即成10-2稀释液;再换一支无菌吸管吸取10-2稀释液1 ml,移入装有9ml无菌水的试管中,也吹吸三次,即成l0-3稀释液;以此类推,连续稀释,制成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液(图22-1)。图22-1 平板计数法中样品的稀释和稀释液的取样培养用稀释平板计数时,待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时,稀释度应高,反之则低。通常测定细菌菌剂含菌数时,采用10-7、10-8、10-9稀释度,测定土壤细菌数量时,采用10-4、10-5、10-6稀释度,测定放线菌数量时,采用l0-3、10-4、10-5稀释度,测定真菌数量时,采用10-2、10-3、10-4稀释度。2.平板接种培养 平板接种培养有混合平板培养法和涂抹平板培养法两种方法。 (1)混合平板培养法 将无菌平板编上10-7、10-8、10-9[fo

  • 平板加热器、石墨消解器、赶酸器的区别

    目前我们实验室大部分样品消解采用的是平板加热消解的方式,发现加热不均匀,有意采用石墨消解器。在网上查询了一下,发现石墨消解器和赶酸器的外形是一模一样的,不知道到底有什么区别。另外,平板加热器、石墨消解器、赶酸器到底有哪些不同,请熟知的版友上来说道说道。

  • 【求助】平板上的水蒸气

    在倒琼脂时,琼脂以冷却到45摄氏度,倒入琼脂冷却后平板上会有水蒸气,这样放入培养箱后对菌落的增长有没影响?忘给准确答案谢谢!

  • 微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数

    一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些产品检定,如根瘤菌剂等产品检定,生物制品检验,土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下,微生物常以群落状态存在,这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物,必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中,土壤是微生物生活的良好环境,其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的,因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关,肥沃的土壤中多,贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质,如通气、pH有关,例如在通气良好的菜园土中,好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌,并进行数量测定。分离微生物时,一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同,供给它们适宜的生活条件,或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长,不利于其它菌种生长的环境,从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法,根据不同的材料,可以采用不同方法,其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落,必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时,还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物,是重要的抗生素产生菌,在土壤中的数量仅次于细菌,尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌,主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难,但由于其菌落大,容易扩展,计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素,但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液,且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上,放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制,但大多数真菌能够生存,且其菌落受孟加拉红的抑制而较小,从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。

  • 【求助】细菌平板计数问题

    我做微生物时间不是很长,这一次实验发现了这么一个问题。我做了两个稀释级1:10和1:100的供试液,各自进行营养琼脂平板的培养。观察结果的时候,我发现,1:10稀释级的两个平板都没有菌落生长,但是1:100稀释级的两个平板各有1个和2个菌落生长,而且菌落的形态也不像平常黄白实心的圆点,而是呈絮状的,有点像霉点一样的。像这种情况的话,是样品本身含有的菌还是样品被污染了呢?结果是要按1:100的稀释级来计数吗?

  • 出口食品平板菌落计数

    出口食品平板菌落计数 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0168-92代替 ZB X09 001-86 Plate count for bacterial colonies in food for export 1 主题内容与适用范围  本标准规定了出口食品平板菌落计数的方法。  本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。2 设备和材料2.1 工作台:超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露15 min,每平板不得超过15个菌落。2.2 恒温培养箱:36±1℃。2.3 恒温水浴箱:45±1℃。2.4 均质器。 2.5 振荡器。2.6 吸管:1、10和25mL,具0.1mL刻度。2.7 平皿:直径为90 mm。2.8 稀释瓶:广口瓶或三角烧瓶,容量为200 mL和500 mL。2.9 玻璃珠:直径为5mm左右。 2.10 天平:感量0.1g。3 培养基和试剂 3.1 平板计数琼脂。3.2 75%乙醇。3.3 稀释剂:磷酸盐缓冲稀释液。4 操作程序 4.1 样品制备 4.1.1 以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内,如有包装,则用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.1.2 制备样品匀液4.1.2.1 固体或半固体食品:以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1~2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水冷却。4.1.2.2 干燥或干粉食品:以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1 : 10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。4.1.2.3 液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2~4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。4.2 稀释样品匀液 4.2.1 用10 mL灭菌吸管准确吸取1:10的样品匀液10 mL,放入装有90 mL稀释剂的200mL, 稀释瓶中。按4.1.2.2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。4.2.2 分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如10**-3、10**-4、10**-5……。4.3 平板接种4.3.1 对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。 4.3.2 分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3 min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品液。4.3.3 分别加12~15mL平板计数琼脂(已放45+1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平皿倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。同时将平板计数琼脂倾入加有1 mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min。4.4 培养   待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h。培养箱应 保持一定的湿度,经48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15%。4.5 菌落计数和记录4.5.1 培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25~250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将平板存放于0~4℃,但不得超过24 h。 4.5.2 如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。4.5.3 如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。4.5.4 当最低稀释度的两个平板上都少于25个菌落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*), 表明该数系从菌落数在25~250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)。4.5.5 当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4)(下表,样 品4)。4.5.6 如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低稀释倍数报告平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4条) (下表,样品5)。4.5.7 同一稀释度的两个平板中,一个有25~250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)。4.5.8 两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25~250个范围内,而另一个的菌落数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。 4.5.9 某稀释度的两个平板都有25~250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数在 25~250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条 (下表,样品8、9)。4.5.10 蔓延生长菌落 通常有三种不同类型的蔓延生长菌落。第一种类型是链状菌落,菌落之间没有明显界线,这些菌落是当琼脂和试验物混合时,一个细菌块被分散所致;第二种类型是在琼脂和 平皿底之间形成的水膜样菌落;第三种是在平皿边缘或琼脂表面形成的水膜样菌落。如果所选择的平板出现过量的蔓延菌落生长,以致a.被蔓延菌落盖住的地方,包括由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的50%,或b.由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的25%,这样的平板报告为“蔓延菌落”,不予计数。计数其他平板上的菌落数,将这些数值的算术平均值报告为平板菌落数(下表,样品10)。  当有必要计数除以上a.和b.外的蔓延生长菌落时,将三种不同类型的蔓延菌落分别计数。对于第一种类型,如果仅有一条链,将它作为一个菌落计。如果有来源不同的几条链, 将每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。第二种和第三种类型的蔓延生长形成易于鉴别的菌落,即按一般菌落计数,把计数的蔓延生长菌落数同一般菌落数加在一起,计算平板菌落数。4.5.11 操作者对同一平板复核自己的计数结果,其差异应在5%之内,而其他人对这一平板重复计数,其差异应在10%之内。否则,应找出原因,加以校正。 4.6 计算和记录数字  适宜稀释度的两个平板的菌落数平均值或两个稀释度的平板菌落数平均值乘以相应稀释倍数计算出每克(毫升)样品中平板菌落数。  记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中平板菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的平板菌落数记录为10的指数形式(见下表中的例子)。5 结果报告   报告每克(毫升)样品中平板菌落数或估计的平板菌落数。              平板菌落数计算 样品号 菌 落 数 平板菌落数/g(mL) 1:100 1:1000 1:10000 1 多不可计 175 16 多不可计 208 17 190000(1.9×10**5) 2 多不可计 224 25 多不可计 245 30 250000(2.5×10**5)* 3 18 2 014 0 0 1600(1.6×10**3)* 4 多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5100000(5.1×10**6)* 5 0 0 00 0 0 <100 (<1.0×10**2)* 6 多不可计 245 23 多不可计 278 20 260000(2.6×10**5) 7 多不可计 225 21多不可计 255 40 270000(2.7×10**5) 8 多不可计 210 18多不可计 240 28 230000(2.3×10**5) 9 多不可计 260 30 多不可计 230 28 270000(2.7×10**5) 10 多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落 290000(2.9×10**5) 注:带星号*者为估计数。附 录 A 培养基制备 (补充件) A1 平板计数琼脂   胰蛋白胨      5.0g   酵母浸膏      2.5g   葡萄糖       1.0g   琼 脂       15.0g   蒸馏水       1000mL   将各成分加于蒸馏水中,煮沸溶解。分装试管或烧瓶,121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.1。A2 磷酸盐缓冲稀释液 贮存液:     磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g   蒸馏水       500mL   用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液:用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器,121℃高压灭菌15min。附加说明:  本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。  本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局、湖南进出口商品检验局负责起草    本标准主要起草人李志培、邓明义。  本标准主要参考美国食品和药物管理局(FDA)《细菌学分析手册》第6版第4章(1984年)。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实施

  • 【资料】-出口食品平板菌落计数

    出口食品平板菌落计数 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0168-92代替 ZB X09 001-86 Plate count for bacterial colonies in food for export 1 主题内容与适用范围  本标准规定了出口食品平板菌落计数的方法。  本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。2 设备和材料2.1 工作台:超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露15 min,每平板不得超过15个菌落。2.2 恒温培养箱:36±1℃。2.3 恒温水浴箱:45±1℃。2.4 均质器。 2.5 振荡器。2.6 吸管:1、10和25mL,具0.1mL刻度。2.7 平皿:直径为90 mm。2.8 稀释瓶:广口瓶或三角烧瓶,容量为200 mL和500 mL。2.9 玻璃珠:直径为5mm左右。 2.10 天平:感量0.1g。3 培养基和试剂 3.1 平板计数琼脂。3.2 75%乙醇。3.3 稀释剂:磷酸盐缓冲稀释液。4 操作程序 4.1 样品制备 4.1.1 以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内,如有包装,则用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.1.2 制备样品匀液4.1.2.1 固体或半固体食品:以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1~2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水冷却。4.1.2.2 干燥或干粉食品:以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1 : 10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。4.1.2.3 液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2~4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。4.2 稀释样品匀液 4.2.1 用10 mL灭菌吸管准确吸取1:10的样品匀液10 mL,放入装有90 mL稀释剂的200mL, 稀释瓶中。按4.1.2.2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。4.2.2 分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如10**-3、10**-4、10**-5……。4.3 平板接种4.3.1 对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。 4.3.2 分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3 min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品液。4.3.3 分别加12~15mL平板计数琼脂(已放45+1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平皿倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。同时将平板计数琼脂倾入加有1 mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min。4.4 培养   待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h。培养箱应 保持一定的湿度,经48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15%。4.5 菌落计数和记录4.5.1 培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25~250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将平板存放于0~4℃,但不得超过24 h。 4.5.2 如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。4.5.3 如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。4.5.4 当最低稀释度的两个平板上都少于25个菌落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*), 表明该数系从菌落数在25~250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)。4.5.5 当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4)(下表,样 品4)。4.5.6 如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低稀释倍数报告平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4条) (下表,样品5)。4.5.7 同一稀释度的两个平板中,一个有25~250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)。4.5.8 两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25~250个范围内,而另一个的菌落数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。 4.5.9 某稀释度的两个平板都有25~250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数在 25~250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条 (下表,样品8、9)。4.5.10 蔓延生长菌落 通常有三种不同类型的蔓延生长菌落。第一种类型是链状菌落,菌落之间没有明显界线,这些菌落是当琼脂和试验物混合时,一个细菌块被分散所致;第二种类型是在琼脂和 平皿底之间形成的水膜样菌落;第三种是在平皿边缘或琼脂表面形成的水膜样菌落。如果所选择的平板出现过量的蔓延菌落生长,以致a.被蔓延菌落盖住的地方,包括由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的50%,或b.由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的25%,这样的平板报告为“蔓延菌落”,不予计数。计数其他平板上的菌落数,将这些数值的算术平均值报告为平板菌落数(下表,样品10)。  当有必要计数除以上a.和b.外的蔓延生长菌落时,将三种不同类型的蔓延菌落分别计数。对于第一种类型,如果仅有一条链,将它作为一个菌落计。如果有来源不同的几条链, 将每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。第二种和第三种类型的蔓延生长形成易于鉴别的菌落,即按一般菌落计数,把计数的蔓延生长菌落数同一般菌落数加在一起,计算平板菌落数。4.5.11 操作者对同一平板复核自己的计数结果,其差异应在5%之内,而其他人对这一平板重复计数,其差异应在10%之内。否则,应找出原因,加以校正。 4.6 计算和记录数字  适宜稀释度的两个平板的菌落数平均值或两个稀释度的平板菌落数平均值乘以相应稀释倍数计算出每克(毫升)样品中平板菌落数。  记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中平板菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的平板菌落数记录为10的指数形式(见下表中的例子)。5 结果报告   报告每克(毫升)样品中平板菌落数或估计的平板菌落数。              平板菌落数计算 样品号 菌 落 数 平板菌落数/g(mL) 1:100 1:1000 1:10000 1 多不可计 175 16 多不可计 208 17 190000(1.9×10**5) 2 多不可计 224 25 多不可计 245 30 250000(2.5×10**5)* 3 18 2 014 0 0 1600(1.6×10**3)* 4 多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5100000(5.1×10**6)* 5 0 0 00 0 0 <100 (<1.0×10**2)* 6 多不可计 245 23 多不可计 278 20 260000(2.6×10**5) 7 多不可计 225 21多不可计 255 40 270000(2.7×10**5) 8 多不可计 210 18多不可计 240 28 230000(2.3×10**5) 9 多不可计 260 30 多不可计 230 28 270000(2.7×10**5) 10 多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落 290000(2.9×10**5) 注:带星号*者为估计数。附 录 A 培养基制备 (补充件) A1 平板计数琼脂   胰蛋白胨      5.0g   酵母浸膏      2.5g   葡萄糖       1.0g   琼 脂       15.0g   蒸馏水       1000mL   将各成分加于蒸馏水中,煮沸溶解。分装试管或烧瓶,121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.1。A2 磷酸盐缓冲稀释液 贮存液:     磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g   蒸馏水       500mL   用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液:用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器,121℃高压灭菌15min。附加说明:  本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。  本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局、湖南进出口商品检验局负责起草    本标准主要起草人李志培、邓明义。  本标准主要参考美国食品和药物管理局(FDA)《细菌学分析手册》第6版第4章(1984年)。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实施

  • UV平板打印机的维护和保养?

    UV平板打印机,虽然方便快捷,一次成型,环保,但UV平板打印机来说也比一般的机器来得贵重,这么贵重的机器改如何维护和保养呢,下面富发uv打印机厂家给大家讲解一下:1、确保UV平板打印机周围环境的清洁。工作环境灰尘太多,容易导致小车导轴润滑不良,使打印喷头在打印过程中的移动受阻,引起喷绘位置不准确或撞击机械框架造成损伤及死机。当打印喷头未回到初始位置而重新开机时,UV平板打印机首先会让打印喷头回到初始位置,接着将进行清洗喷头的操作,所以会造成墨水不必要的浪费。解决这个问题的方法是经常将导轴上的灰尘擦掉,并对导轴进行润滑。2、必须确保UV平板打印机有一个稳固的工作平台,不要在UV平板打印机顶端放置任何物品。喷绘机在工作时必须关闭其前盖, 以防止灰尘进入机内或其它坚硬物品阻碍喷绘机小车的运动。禁止带电插拔打印机电缆,这样会损坏喷绘机的喷绘口以及PC的并行口, 严重的甚至会损坏PC的主板。如果打印输出不太清晰,可用喷绘机的自动清洗功能清洗喷头,但要消耗少量墨水。若连续清洗几次之后打印仍不满意,这时可能墨水已用完,需要更换墨盒。3、关机前,让打印喷头回到初始位置(UV平板打印机在暂停状态下,打印喷头自动回到初始位置)。这样做一是避免下次开机时UV平板打印机重新进行清洗喷头操作浪费墨水,二是因为喷头在初始位置可受到保护罩的密封,使喷头不易堵塞。4、墨盒在长期不使用时应置于室温下避免日光直射。因为在这种环境中墨水蒸发得很快,很容易造成喷头堵塞。另外在低温潮湿的环境下,打印喷头电路与墨水都易出问题。5、换墨盒时一定要按照操作手册中的步骤进行,特别注意要在电源打开的状态下进行上述操作。因为更换墨盒后,UV平板打印机将对墨水输送系统进行充墨,而这一过程在关机状态下将无法进行,UV平板打印机也无法检测到重新安装上的墨盒。另外,有些UV平板打印机对墨水容量的计量是使用喷绘机内部的电子计数器来进行的(特别是在彩色墨水使用量的统计上),当该计数器达到一定数值时,UV平板打印机判断墨水用尽。而在墨盒更换过程中,喷绘机将对其内部的电子计数器进行复位,从而确认安装了新的墨盒。6、此外UV平板打印机的光栅条,也要做好保护,不要用手去摸,不要让它沾染灰尘,以防定位不准。做好了以上几点,可以保证机器在工作和使用中长时间的不出问题,从而开足马力生产,为赚取更我的利润和以后多上机器提供可靠坚实的保障!需要购买或了解UV平板打印机可以直接到我们公司进行实地考察, 现场看机器,现场打印效果

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  • 沙门氏菌用的平板

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    【分享】英国新型平板扬声器轻薄如纸

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    我现在碰到了一个难题,CNAS上要求:所有实验室用的培养基及试剂使用之前都要进行验证,但是如何验证呢?平板计数琼脂如何验证呢?北京陆桥的琼脂不稳定,有哪位高手可以告诉我,平板计数琼脂如何验证?那实验室用的其他培养基及试剂如何验证?先谢谢了

  • 大肠平板法总结 转

    关于大肠菌群平板计数法还有哪些困惑?1.导读经常用来衡量食品卫生情况的重要指标,绝大部分食品都会要求检测的项目。在食品微生物实验室里,大肠菌群和菌落总数的检测频次应该是最高的,但检测过程中总会有一些小问题困扰着大家,以下来讲解一下大肠菌群平板计数法的注意事项。2.方法选择相比于MPN计数法,平板计数法更适用于大肠菌群含量较高的食品。但大肠菌群多少算是含量较高呢?国标里没有明确规定,但通常认为,产品大肠菌群以100CFU/g(mL)为界,超过这个含量一般认为是含量较高。但具体什么时候选用平板计数法进行大肠菌群的检测,大部分情况还是要看你的产品执行的标准。假如产品标准要求大肠菌群含量的单位为CFU/g(mL),那必须选用平板计数法。若是/g(mL)或者MPN/100g(mL),就应选择MPN计数法,MPN法具体选用哪版国标此处不再赘述。因此,根据自己产品的情况选择适当的检测方法。件、酸3.培养基的要求平板计数法使用的培养基为结晶紫中性胆盐琼脂培养基,简称VRBA。无论是国标,还是培养基的使用说明中都明确表示,VRBA是不需要进行灭菌的,煮沸2min即可使用。特地点出这一点是因为很多朋友都在问VRBA的灭菌条件,对不灭菌的培养基不信任,害怕出现检测异常,那是因为这些小伙伴们对其中的原理不清楚。大肠菌群的定义是在一定培养条件下能够在发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌,因此大肠菌群是不能形成芽孢的,在VRBA培养基煮沸的过程中,即使有大肠菌群存在也会被杀灭,所以从培养基带入污染的可能性是没有的。当然盛装培养基的容器是需要进行灭菌的,以免容器引入污染。另外,VRBA是一种选择性的培养基,含有的结晶紫对革兰氏阳性菌有比较强的抑制作用而对革兰氏阴性菌几乎没有作用,而且平板培养产生的菌落还需要进行复发酵的验证,因此VRBA培养基就不需要进行灭菌了。但值得注意的是,VRBA需要现配现用,配制出的培养基应当在3h之内使用完毕。4.稀释度的确定国标中要求选择2-3个适宜的连续稀释度。什么样的稀释度是合适的呢?这要根据计数来决定。计数环节要求选择菌落数在15CFU-150CFU的平板进行计数,因此培养后菌落数在这个范围内的稀释度就是适宜的稀释度。实验室经常检测的产品的大肠菌群的水平检测人员可以预计的,但是对盲样,我们能做的只有根据实际情况多检测几个稀释度了。这里需要提一句,液体样品的检测稀释度可以包括原液。5.证实试验需要从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落,少于10个菌落的挑取全部的典型和可疑菌落进行BGLB肉汤管验证。这里挑取的菌落也是应当有选择的,典型菌落和可疑菌落的比例应当与平板上培养的两种菌落的比例相同或相近,这样能够降低检测过程中的误差。6.计数的报告报告过程是很多朋友存在疑问的地方,因为平板计数法的结果报告需要结合培养基菌落数和复发酵验证两方面进行计算。存在疑问的情况主要有以下几种:6.1、所有稀释度都不在计数范围内怎么办?这种情况一般都是最低稀释度的平板都小于15CFU,这种情况就是以最低稀释度的平板菌落数乘以验证试验的比例来计算。例如10倍稀释的两个平板上菌落数分别为10、8,菌落数为10的平皿挑取10个菌落复发酵中有8个菌落产气,菌落数为8的平皿挑取8个菌落复发酵中有7个菌落产气,则计算过程是这样的:(10*8/10+8*7/8)/2*10=75CFU/g(mL)。6.2、连续两个稀释度的四个平皿的菌落数都在计数范围内怎么办?这个需要参考菌落总数检测国标里7.1.2里的公式计算。我们需要先计算每个平皿的验证后的菌落数,再代入公式计算即可。例如10倍稀释度两个平皿菌落数为120和125,100倍稀释度两个平皿的菌落数为17和16,经过复发酵验证产气的管数分别为7、8、8、8,则我们先计算每个平皿上的菌落数分别为120*7/10=84,125*8/10=100,17*8/10=13.6(我们14),16*8/10=12.8(我们计13),然后将84、100、14、13四个数代入公式:(84+100+14+13)/(2+0.2)*10=959,结果应报告960 CFU/g(mL)。6.3、只有一个稀释度的一个平皿的菌落数在计数范围,其他均不在计数范围怎么办?这样我们只需要复发酵验证这一个平皿即可,根据这一个平皿的菌落数进行报告。例如10倍稀释度两个平皿菌落数为160和142,100倍稀释度两个平皿的菌落数为12和13,则我们只需要从菌落数为142CFU的平皿里挑取10个菌落进行复发酵验证即可,假如共有7支发酵管阳性,则应计算142*7/10=99.4,结果报告99CFU/g(mL)。其实只要是平板菌落计数的相关问题,我们都应按照GB 4789.1-2016里要求的结果与报告要求进行计算和报告即可,无论那种情况,都是万变不离其宗的。

  • 岛津气相有分流平板吗

    岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]有分流平板吗,岛津和安捷伦是一样的方式分流的吗?

  • 气相仪器分流平板污染有什么影响

    进样口的清洗在检修时,对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]进样口的玻璃衬管、分流平板,进样口的分流管线,EPC等部件分别进行清洗是十分必要的。玻璃衬管和分流平板的清洗:从仪器中小心取出玻璃衬管,用镊子或其他小工具小心移去衬管内的玻璃毛和其它杂质,移取过程不要划伤衬管表面。如果条件允许,可将初步清理过的玻璃衬管在有机溶剂中用超声波进行清洗,烘干后使用。也可以用丙酮、甲苯等有机溶剂直接清洗,清洗完成后经过干燥即可使用。分流平板最为理想的清洗方法是在溶剂中超声处理,烘干后使用。也可以选择合适的有机溶剂清洗:从进样口取出分流平板后,首先采用甲苯等惰性溶剂清洗,再用甲醇等醇类溶剂进行清洗,烘干后使用。分流管线的清洗:[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]用于有机物和高分子化合物的分析时,许多有机物的凝固点较低,样品从气化室经过分流管线放空的过程中,部分有机物在分流管线凝固。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]经过长时间的使用后,分流管线的内径逐渐变小,甚至完全被堵塞。分流管线被堵塞后,仪器进样口显示压力异常,峰形变差,分析结果异常。在检修过程中,无论事先能否判断分流管线有无堵塞现象,都需要对分流管线进行清洗。分流管线的清洗一般选择丙酮、甲苯等有机溶剂,对堵塞严重的分流管线有时用单纯清洗的方法很难清洗干净,需要采取一些其他辅助的机械方法来完成。可以选取粗细合适的钢丝对分流管线进行简单的疏通,然后再用丙酮、甲苯等有机溶剂进行清洗。由于事先不容易对分流部分的情况作出准确判断,对手动分流的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]来说,在检修过程中对分流管线进行清洗是十分必要的。对于EPC控制分流的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url],由于长时间使用,有可能使一些细小的进样垫屑进入EPC与气体管线接口处,随时可能对EPC部分造成堵塞或造成进样口压力变化。所以每次检修过程尽量对仪器EPC部分进行检查,并用甲苯、丙酮等有机溶剂进行清洗,然后烘干处理。由于进样等原因,进样口的外部随时可能会形成部分有机物凝结,可用脱脂棉蘸取丙酮、甲苯等有机物对进样口进行初步的擦拭,然后对擦不掉的有机物先用机械方法去除,注意在去除凝固有机物的过程中一定要小心操作,不要对仪器部件造成损伤。将凝固的有机物去除后,然后用有机溶剂对仪器部件进行仔细擦拭。

  • 只有一个平板张菌

    比如稀释10倍的平板,一个没长,一个长了一个菌落那么按照4789的要求,小于100CFU“按照四舍五入”在取整数 结果是5CFU<10CFU也不行,因为其中也规定了要所有稀释度中均无菌落生长。我这还长了一个所以遇到这种情况是还计为5CFU还是10CFU

  • 请教金葡平板与测试片的相关问题

    前天我进行了金葡的国标平板定量法与3M的测试片对比实验,是称的25g香辣酱,挑取保存的以前金葡质控样长出的金葡菌在样液里,昨天出的测试片结果,都没有长;今天出平板的结果,我一共做了六个梯度,只有-3的三个板都长了菌,想请教一下为什么会这样。

  • tangtang,建议你别买7寸平板了。

    7寸平板,好大个。你买那个,还不如买个笔记本。同样配置的,笔记本肯定比平板便宜吧。要买平板,就买3.5寸的。支持多点触控,就行了。3.5寸的,看个文档,比如pdf,word文档,都没问题的。上网,应该没问题吧。关键这个尺寸正好。你拿个7寸的到处跑....也太扎眼了,呵呵。

  • 霉菌平板倒置

    霉菌平板倒置对结果有影响吗?做完实验一时迷糊吧霉菌平板倒置了,对结果有影响吗?

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