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乙酰异亮氨酸

仪器信息网乙酰异亮氨酸专题为您提供2024年最新乙酰异亮氨酸价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括乙酰异亮氨酸参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的乙酰异亮氨酸您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合乙酰异亮氨酸相关的耗材配件、试剂标物,还有乙酰异亮氨酸相关的最新资讯、资料,以及乙酰异亮氨酸相关的解决方案。

乙酰异亮氨酸相关的论坛

  • 关于异亮氨酸甲基化修饰位置的分析

    大家好,我们在进行蛋白质修饰鉴定过程中,发现有异亮氨酸甲基化的修饰(采用二级CID碎裂模式),分析软件(BioPharmaView)中给定的修饰中也含有异亮氨酸,为了确定甲基化修饰的机理,我们推测,甲基化修饰在了异亮氨酸形成的肽键N上,对此我们使用etHCD碎裂模式进行二级碎裂,结果显示,甲基化并非修饰在肽键N上,我们查询文献并没有相关的报道,想问下各位大神,有知道蛋白中异亮氨酸发生甲基化是发生在哪个位置么?如果有文献支持就更好了。

  • 分离氨基酸-脯氨酸和异亮氨酸重叠的峰

    我用GC MS 测20种氨基酸,MSTFA衍生,不加溶剂,HP 5-MS柱,70度,1min到5度/min,300度,得到的脯氨酸和异亮氨酸是一个峰,降低浓度也分不开,做SIM也分不开,请问谁遇到过这种情况?如何解决?

  • 求助叔亮氨酸的高效液相色谱方法

    [color=#444444]有没有哪位大侠做过叔亮氨酸的液相检测,文献里面查到1.用手性色谱柱,以2mM硫酸铜、5%异丙醇做流动相,流速1mL/min,254nm检测;2.同样是手性柱,用硫酸铜做流动相,检测波长为220nm。3.用C18柱,以0.25%磷酸二氢铵:甲醇=100: 5,检测波长205nm。4.另外有用OPA衍生后再检测的,检测波长340nm。由于目前没有标品,不知道叔亮氨酸的最大吸收波长在什么位置,叔亮氨酸上没有共轭结构,254nm检测是不是不靠谱啊?求有相关经验的大大指条明路[/color][img=,absmiddle]http://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/wink.gif[/img][img=,absmiddle]http://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/wink.gif[/img][color=#444444]另外听说手性柱金贵的很,求指教平时使用的注意点[/color][img=,absmiddle]http://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/biggrin.gif[/img]

  • OPA柱前衍生反向高效液相色谱测定L-叔亮氨酸

    [color=#444444]用OPA柱前衍生反向高效液相色谱测定L-叔亮氨酸的色谱图中出现了两个面积差不多的峰是什么原因?叔亮氨酸是手性氨基酸,流动相A用的是20mmol/ L 乙酸钠缓冲液,用1 %稀乙酸调p H 至71 2 流动相B ∶乙腈和甲醇混合液(1 ∶1),洗脱程序是等度洗脱,A:B是3:2. 求解释!!![/color]

  • 【分享】生物化学记忆歌诀

    [em09503][em09503][em09502]人体八种必须氨基酸(第一种较为顺口)1.“一两色素本来淡些”(异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、缬氨酸)。2.“写一本胆量色素来”(缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸)。3.鸡旦酥,晾(亮)一晾(异亮),本色赖。借来一两本淡色书。生糖、生酮、生糖兼生酮氨基酸:生酮+生糖兼生酮=“一两色素本来老”(异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸),其中生酮氨基酸为“亮赖”;除了这7个氨基酸外,其余均为生糖氨基酸。酸性氨基酸:天谷酸——天上的谷子很酸,(天冬氨酸、谷氨酸)碱性氨基酸:赖精组芳香族氨基酸在280nm处有最大吸收峰色老笨---只可意会不可言传. 一碳单位的来源肝胆阻塞死 (甘氨酸、蛋氨酸、组氨酸、色氨酸、丝氨酸)。(色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸),顺序一定要记清,色 酪 苯丙,酶的竞争性抑制作用按事物发生的条件、发展、结果分层次记忆:1.“竞争”需要双方——底物与抑制剂之间;2.为什么能发生“竞争”——二者结构相似;3.“竞争的焦点”——酶的活性中心;4.“抑制剂占据酶活性中心”——酶活性受抑。糖醛酸,合成维生素C的酶古龙唐僧(的)内子(爱)养画眉(古洛糖酸内酯氧化酶)双螺旋结构的特点:右双螺旋,反向平行碱基互补,氢键维系主链在外,碱基在内维生素A总结V.A视黄醇或醛,多种异构分顺反。萝卜蔬菜多益善,因其含有V.A原。主要影响暗视觉,缺乏夜盲看不见,还使上皮不健全,得上干眼易感染。促进发育抗氧化,氧压低时更明显。DNA双螺旋结构:DNA,双螺旋,正反向,互补链。A对T,GC连,配对时,*氢键,,十碱基,转一圈,螺距34点中间。碱基力和氢键,维持螺旋结构坚。(AT2,GC3是指之间二个氢键GC间三个.螺距34点中间即3.4)RNA和DNA的对比如下:两种核酸有异同,腺鸟胞磷能共用。RNA中为核糖, DNA中含有胸。维生素B6B6兄弟三,吡哆醛、醇、胺。他们的磷酸物,脱羧又转氨。三羧酸循环乙酰草酰成柠檬,柠檬又成α-酮琥酰琥酸延胡索,苹果落在草丛中。β-氧化β-氧化是重点,氧化对象是脂酰,脱氢加水再脱氢,硫解切掉两个碳,产物乙酰COA,最后进入三循环。酮体酮体一家兄弟三,丙酮还有乙乙酸,再加β-羟丁酸,生成部位是在肝,肝脏 生酮肝不用,体小易溶往外送,容易摄入组织中,氧化分解把能功

  • 迪马AAA氨基酸柱 这样测半胱氨酸 可以吗??

    迪马AAA氨基酸柱 这样测半胱氨酸 可以吗??

    先简单 介绍——————做氨基酸 检测想了解详细资料,请自己到迪马科技官网自行下载http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gifPITC柱前衍生法18种天然氨基酸分析(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)——序列号: D0241 适用范围 该方法适用于氨基酸注射液、动植物性食品和饲料中 Asp(天冬氨酸)、Glu(谷氨酸)、Ser(丝氨酸)、Gly(甘氨酸)、His(组氨酸)、Arg(精氨酸)、Thr(苏氨酸)、Ala(丙氨酸)、Pro(脯氨酸)、Tyr(酪氨酸)、Val(缬氨酸)、Met(蛋氨酸)、Cys(胱氨酸)、Ile(异亮氨酸)、Leu(亮氨酸)、Phe(苯丙氨酸)、Trp(色氨酸)、 Lys(赖氨酸)等 18种天然氨基酸的检测http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203131711_354396_2019107_3.jpg2 溶液配制 氨基酸储备液: 称取一定量氨基酸标准品,用 0.1 mol/L HCl水溶液溶解,胱氨酸为0.01 mol/L,酪氨酸为0.02 mol/L,其他氨基酸为 0.05 mol/L 氨基酸使用液: 将储备液用0.1 mol/L HCl水溶液稀释,得到浓度为 0.002 mol/L 的氨基酸单标和混标 内标液: 以正亮氨酸作为内标物。称取一定量正亮氨酸,溶于 0.1 mol/L HCl水溶液,得到 0.02 mol/L 的正亮氨酸内标液 异硫氰酸苯酯溶液: 将 250 μl 异硫氰酸苯酯用乙腈乙腈定容至 10 ml,得到0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯溶液 三乙胺溶液: 将1.4 ml三乙胺用乙腈定容至 10 ml,得到1.0 mol/L 三乙胺溶液 标准溶液衍生化 量取 200 µl氨基酸混合标准溶液(每种组分浓度均为 0.002 mol/L),置于 1.5 ml塑料离心管中,准确加入20 μl正亮氨酸内标溶液、100 µl 1 mol/L三乙胺乙腈溶液和100 µl 0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯乙腈溶液,混匀,室温反应 1 小时,然后加入正己烷 400 µl,旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取 200 µl下层溶液与 800 µl水混合,0.22 µm 针式过滤器过滤,待分析。注: 通过控制原始样品质量或稀释等方法,使样品溶液中的氨基酸总量不超过0.04 mol/L 或3.0 g/L(两者中取最小值) 只有采用内标法分析时,才需要加入正亮氨酸作为内标物 衍生得到的样品溶液中含有50%的乙腈,这与流动相溶剂体系存在较大差距,因而需要加水稀释,否则会引起峰前沿或分叉迪马科技AAA氨基酸柱子 洗脱条件 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646181_2019107_3.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104221943_290383_2019107_3.gif

  • 【求助】乙酰半胱氨酸的检验

    请各位大侠帮忙看看,下面这份标准是否存在错误。样品名称:乙酰半胱氨酸(原料)检验项目:有关物质方法:高效液相色谱法色谱条件与系统适应性试验:采用磺酸型强阳离子交换柱,以水(用0.05mol/L的硫酸溶液调节pH值为3.0)为流动相,检测波长:210nm。理论板数按乙酰半胱氨酸峰计算应不低于1200。测定法:取本品,加流动相制成每1ml中约含0.3mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取供试品溶液1.0ml,置100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液;精密量取对照溶液20ul注入氨基酸分析仪,调节检测灵敏度,使主成分峰高为满量程的10%-25%;再取供试品溶液20ul注入氨基酸分析仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍,按面积归一化法计算,杂质总量不得过1.0%。以上样品可以直接用高效液相色谱法紫外检测器进行检验,而不经过氨基酸分析仪吗?

  • 山葡萄酒中氨基酸含量

    山葡萄酒含有22种氨基酸,其中人体必需的8种氨基酸(指人体自身不能合成的氨基酸)有苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸等,总量为1350mg/L,占总氨基酸含量的45.6%,是一般葡萄酒的10~20倍;而一般葡萄酒只含有6~7种人体必需的氨基酸。

  • 【求助】求N6_三氟乙酰基_L_赖氨酸检测方法

    求HPLC检测N6_三氟乙酰基_L_赖氨酸 含量的方法,标准方法里面要用到0.25%KH2PO4,但我们实验室暂时没有,所以我就用了醋酸先代替调了一下PH到3~4,结果我的C18柱子堵的厉害,基线飘个不停.

  • 【原创大赛】饮料中乙酰磺氨酸钾检测方法验证报告

    【原创大赛】饮料中乙酰磺氨酸钾检测方法验证报告

    [align=center][b]饮料中乙酰磺氨酸钾检测方法验证报告[/b][/align][align=center][b]GB/T5009.140-2003[/b][/align][align=center][b]李晓东[/b][/align]一、[b]方法概述1 范围[/b]本标准规定了饮料中乙酰磺氨酸钾的测定方法。本标准适用于汽水、可乐型饮料、果汁、果茶等食品中乙酰磺氨酸钾的测定。[b]2 原理[/b]试样中乙酰磺氨酸钾经高效液相反相C18柱分离后,以保留时间定性,峰高或峰面积定量。二、[b]仪器与试剂[/b]1.仪器1.1高效液相色谱仪:配有紫外检测器,仪器编号:UNQD-YQF-1471.2超声波振荡器1.3抽滤瓶1.4 G3耐酸漏斗1.5高速离心机:转速不低于4000r/min。1.6微孔滤膜0.45μm1.7层析柱:可用10ml注射器筒代替,内装3cm高中性氧化铝。2. 试剂除非另有说明,本方法所有实际均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。2.1甲醇(CH3OH ):色谱纯。2.2乙腈(CH3CN) : 色谱纯。2.3 10%硫酸溶液2.4 中性氧化铝:层析用100目-200目2.5 0.02mol/L硫酸铵溶液:称取硫酸铵2.642g,加水溶解至1000mL。三、[b]分析步骤[/b]1.标准曲线绘制1.1 乙酰磺酸钾:纯度大于99.9%1.2标准储备液:准确称取100.0mg(精确到0.1mg)乙酰磺酸钾标准品于100ml容量瓶中,用流动相溶解并定容至刻度,配置成浓度为1mg/ml的标准储备液。1.3标准工作液:量取标准储备液适量,用流动相稀释成浓度为0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL/1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL标准工作液。2.样品的处理2.1汽水:将试样温热,搅拌除去二氧化碳,吸取2.5mL试样于25mL容量瓶中,加流动相至刻度,摇匀后,溶液通过微孔滤膜过滤,滤液做HPLC备用。2.2可乐型饮料:将试样温热,搅拌除去二氧化碳,吸取已除去二氧化碳的2.5mL试样通过中性氧化铝柱,待试样液流至柱表面时,用流动相洗脱,收集25mL洗脱液,摇匀后超声脱气,此液做HPLC备用。2.3果茶、果汁类食品称取2.5ml试样,加水20mL混匀后,离心(4000r/min)15 min,上清液全部转入中性氧化铝柱,待水溶液流至柱表面时,用流动相洗脱,收集洗脱液25mL,混匀后,超声脱气,此液做HPLC分析用。3.仪器测定条件3.1色谱柱:C18柱, 150mm×4.6mm,5μm,或相当者。3.2流动相:0.02mol/L硫酸铵(740ml-800ml)+甲醇(90ml-50ml)+10%硫酸(1ml)3.3流速:0.7ml/min3.4波长:214nm3.5进样量:10μL四、[b]结果处理[/b]分析结果的表述[b]1、计算公式[/b][table][tr][td=1,2]X(mg/L)=[/td][td]c× V×1000×f[/td][/tr][tr][td]m×1000[/td][/tr][/table]式中:X-试样中乙酰磺酸钾的含量mg/L或mg/L;C-标准溶液中乙酰磺酸钾的浓度,μg/mL;m-试样质量,g或ml;V-试样最终定容体积,mL;f-稀释倍数。五、验证结果1.线性结果将标准系列工作溶液分别注入液相色谱仪中, 测定相应的峰面积,以混合标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。[u]Y=33961.4*X-288.187 R^2=0.9994236[/u][align=center][img=,690,519]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807242046125748_6268_2904018_3.png!w690x519.jpg[/img] [/align][align=center]表1 乙酰磺酸钾标准系列试验结果[/align][table][tr][td]C(μg/mL)[/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][td][align=center]0.5[/align][/td][td][align=center]1.0[/align][/td][td][align=center]5.0[/align][/td][td][align=center]10.0[/align][/td][td][align=center]25.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]A[/align][/td][td][align=center]1292[/align][/td][td][align=center]2886[/align][/td][td][align=center]16454[/align][/td][td][align=center]50563[/align][/td][td][align=center]181428[/align][/td][td][align=center]307900[/align][/td][td][align=center]845643[/align][/td][td][align=center]1704096[/align][/td][/tr][/table] 以上结果表明乙酰磺酸钾在0.05μg/mL ~50.0μg/mL范围内,R=0.9997118,吸光值与浓度呈线性关系,线性良好,符合要求。2.检出限结果将0.5μg/mL标准溶液逐级稀释至S/N=3±1,得出乙酰磺酸钾的方法检出限为 1.7μg/ml[color=#ff0000],[/color]此检出限结果满足条件。[b]六、重复性测定[/b]对样品F1807000284进行7次进样,其乙酰磺酸钾测试值如下表所示:[table][tr][td][align=center]编号[/align][/td][td][align=center]m(ml)[/align][/td][td]C(μg/ml)[/td][td]V(ml)[/td][td][align=center]X(mg/L)[/align][/td][td][align=center]X[sub]平[/sub](mg/L)[/align][/td][td][align=center]RSD(%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.857[/align][/td][td]25[/td][td]18.57[/td][td=1,7][align=center]18.67[/align][/td][td=1,7][align=center]0.35[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.866[/align][/td][td]25[/td][td]18.66[/td][/tr][tr][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.876[/align][/td][td]25[/td][td]18.76[/td][/tr][tr][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.865[/align][/td][td]25[/td][td]18.65[/td][/tr][tr][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.874[/align][/td][td]25[/td][td]18.74[/td][/tr][tr][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.865[/align][/td][td]25[/td][td]18.65[/td][/tr][tr][td][align=center]7[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td][align=center]1.863[/align][/td][td]25[/td][td]18.63[/td][/tr][/table]本方法的精密度为 0.35% ,符合《饮料中乙酰磺氨酸钾的测定方法》GB/T5009.140-2003中给出的精密度要求。因此,本次测定均符合要求。[b]七、准确度验证(加标回收)[/b]对样品F1807000284加标,取乙酰磺酸钾浓度100 .0 μg/mL的标液 0.02mL、0.04mL和0.08ml同样品同步处理后,结果见下表[table][tr][td=2,1][align=center]测定编号[/align][/td][td=6,1]乙酰磺酸钾[/td][/tr][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]m(g)[/align][/td][td][align=center]V(mL)[/align][/td][td][align=center]C(μg/mL)[/align][/td][td][align=center]X(mg/L)[/align][/td][td][align=center]X[sub]平[/sub](mg/L)[/align][/td][td][align=center]加标量(mg/L)[/align][/td][td][align=center]回收率%[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1#[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td]25[/td][td][align=center]N.D[/align][/td][td][align=center]N.D[/align][/td][td=1,2][align=center]N.D[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2#[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td]25[/td][td][align=center]N.D[/align][/td][td][align=center]N.D[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标1#[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td]25[/td][td][align=center]1.863[/align][/td][td][align=center]18.63[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]93.2[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标2#[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td]25[/td][td][align=center]3.561[/align][/td][td][align=center]35.61[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][td][align=center]89.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标3#[/align][/td][td][align=center]2.5[/align][/td][td]25[/td][td][align=center]6.978[/align][/td][td][align=center]69.78[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]80[/align][/td][td][align=center]87.2[/align][/td][/tr][/table]由上表可以看出乙酰磺酸钾的加标回收范围在 87.2%-93.2% ,RSD值为3.43%符合规定要求。七、总结本方法的检出限为1.7μg/ml。小于GB/T5009.140-2003中给出的最低检出浓度4μg/ml。本方法的精密度为 3.45%,符合《饮料中乙酰磺氨酸钾的测定方法》GB/T5009.140-2003中给出的精密度要求.通过对饮料中乙酰磺氨酸钾的测定方法的检出限、精密度和准确度的评价,本方法测定乙酰磺酸钾据准确,结果可信。此方法的准确性好,测定结果真实可靠,可用于饮料中乙酰磺氨酸钾的测定。

  • 实验室间的仪器比对怎么做?

    实验室里的氨基酸仪没办法做检定/校准,好不容易找了家有相同仪器的实验室,想做一个仪器比对。该怎么做评价?有什么依据没?如下是两个仪器的测试结果,请各路高手指点指点。天门冬氨酸101.7101.3苏氨酸101.9101.7丝氨酸101.2101.8谷氨酸101.8100.5甘氨酸101.8101.9丙氨酸101.5101.5缬氨酸101.2100.2蛋氨酸100.7100.6异亮氨酸101.3100.2亮氨酸101.5102.3酪氨酸101.4102.2苯丙氨酸102.0101.1赖氨酸101.9101.4组氨酸101.9100.6精氨酸101.9101.8脯氨酸101.697.9

  • 混合氨基酸检测

    我有一个样品是三种氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)的混合物。想测定氨基酸的含量,但是有检测机构讲纯的氨基酸浓度过高,用氨基酸分析仪测定误差大。请问这种说法对吗?不用氨基酸分析仪,用什么方法测定比较好?国内哪家机构比较权威?

  • 【分享】极性化合物分析实例

    很多种类的极性化合物分离条件。􀂗 UDP-葡萄糖􀂗 UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、磷酸半乳糖􀂗 葡萄糖􀂗 蔗糖􀂗 红细胞中的UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、三磷酸腺苷(ATP)􀂗 ADP-葡萄糖、CDP-葡萄糖􀂗 糖核苷酸􀂗 胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤􀂗 三磷酸腺苷(ATP)、一磷酸腺苷(AMP)􀂗 黄嘌呤-磷酸、鸟嘌呤-三磷酸􀂗 体液中的黄嘌呤、尿酸、次黄嘌呤􀂗 色胺、五羟色胺、多巴胺􀂗 L-天冬氨酸、L-精氨酸􀂗 L-精氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸􀂗 谷氨酸、赖氨酸􀂗 亮氨酸、异亮氨酸􀂗 L-甲硫氨酸、L-谷氨酸􀂗 甲基琥珀酸、戊二酸、草酸、肌酸、4-羟脯氨酸、天冬氨酸、鸟氨酸􀂗 叶酸􀂗 抗坏血酸􀂗 胆汁酸􀂗 柠檬酸、马来酸、反式乌头酸􀂗 马来酸、富马酸􀂗 3-羟基肉桂酸􀂗 矮壮素、甲哌啶􀂗 苯海拉明􀂗 4-二甲氨基吡啶􀂗 草甘膦􀂗 三聚氰胺、三聚氰酸􀂗 胍

  • 【资料】极性化合物分析实例

    很多种类的极性化合物分离条件。􀂗 UDP-葡萄糖􀂗 UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、磷酸半乳糖􀂗 葡萄糖􀂗 蔗糖􀂗 红细胞中的UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、三磷酸腺苷(ATP)􀂗 ADP-葡萄糖、CDP-葡萄糖􀂗 糖核苷酸􀂗 胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤􀂗 三磷酸腺苷(ATP)、一磷酸腺苷(AMP)􀂗 黄嘌呤-磷酸、鸟嘌呤-三磷酸􀂗 体液中的黄嘌呤、尿酸、次黄嘌呤􀂗 色胺、五羟色胺、多巴胺􀂗 L-天冬氨酸、L-精氨酸􀂗 L-精氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸􀂗 谷氨酸、赖氨酸􀂗 亮氨酸、异亮氨酸􀂗 L-甲硫氨酸、L-谷氨酸􀂗 甲基琥珀酸、戊二酸、草酸、肌酸、4-羟脯氨酸、天冬氨酸、鸟氨酸􀂗 叶酸􀂗 抗坏血酸􀂗 胆汁酸􀂗 柠檬酸、马来酸、反式乌头酸􀂗 马来酸、富马酸􀂗 3-羟基肉桂酸􀂗 矮壮素、甲哌啶􀂗 苯海拉明􀂗 4-二甲氨基吡啶􀂗 草甘膦􀂗 三聚氰胺、三聚氰酸􀂗 胍

  • 【原创】保健品中16种氨基酸的液质联用法测定

    氨基酸是氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。无色晶体,熔点极高,一般在200℃以上。不同的氨基酸其味不同,有的无味,有的味甜,有的味苦。各种氨基酸在水中的溶解度差别很大,并能溶解于稀酸或稀碱中,但不能溶于有机溶剂。近年来,随着技术的发展,检测氨基酸的种类及含量的方法很多,目前测定氨基酸的方法主要有氨基酸分析仪法、高效液相色谱法、毛细管电泳法及液相色谱-质谱联用法等。本文主要是通过高效液相串联质谱法来对16种氨基酸的含量进行测定,方法简单,快速,不用柱前衍生,节省试剂和成本,为保健品中氨基酸的含量测定提供了新方法。1实验部分1.1 仪器和试剂 16种氨基酸的混合标准品,(包括丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丝氨酸)安捷伦;乙腈(色谱纯)CNW;乙酸铵(色谱纯);乙酸(色谱纯)。超声波清洗器(EQ-500);DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱(上海鸿都电子科技有限公司);BPZ-6090Lc型真空干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);高效液相色谱仪(安捷伦1260);色谱柱:安捷伦poroshell 120 EC-C18柱(4.6mm×50mm,2.7μm);质谱(API3200)美国AB公司。1.2 色谱条件色谱柱:以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂(柱长15cm,内径4.6mm,粒径2.7μm )或同等性能的色谱柱;柱温:40℃;流速:0.5 ml/min;进样量:5μL ;流动相:流动相A:称取0.386g乙酸铵,加水500mL溶解,用乙酸调pH至3.5;流动相B:乙腈,梯度洗脱:时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)0.0090100.00-5.0090→8010→205.00-9.0080→9020→101.3质谱条件1.3.1以电喷雾电离源(ESI)阳离子模式,气帘气20psi,碰撞气6,喷雾电压5500V,离子源温度600°C,雾化气是50 psi,辅助气是50 psi,时间9min。1.3.2 16种氨基酸的质谱参数,见表1。表1 16氨基酸的质谱参数氨基酸Q1Q3TIMEDPEPCECXP丙氨酸90.144.2353510153精氨酸175.2116353010153天冬氨酸134.474354110153胱氨酸241.174.11002610153谷氨酸148.2102353010153组氨酸156.1110353510163亮氨酸132.386.1352610113异亮氨酸132.286352610113赖氨酸147.3130353010153蛋氨酸150.1104352510103苯丙氨酸166.4120352510143脯氨酸116.270353510143苏氨酸120.174.3354110153酪氨酸182.3136353510153缬氨酸118.272354110153丝氨酸106.160.23530101331.4 标准品溶液的配制量取16种氨基酸的混合标准品1ml,置于50ml容量瓶,加0.1%甲酸水定容,摇匀即得标准品贮备液。1.5 供试品溶液的制备 精密称取样品约0.1g,置于25ml磨口的具塞比色管内,加6mol/L盐酸15ml,加入0.2g苯酚,用旋转混合仪和超声仪使样品充分分散并溶解,充氮气,盖紧塞子,置于110℃±1℃的恒温干燥箱内,水解22小时,取出冷却,过滤,用纯化水冲洗比色管,将水解液全部转移至50mL容量瓶中,用纯化水定容至刻度,摇匀,精密吸取1mL于10mL容量瓶中,置于真空干燥箱内,于40℃~50℃减压干燥(真空干燥箱内放入五氧化二磷作为干燥剂),干燥后残留物用0.1%甲酸水定容至刻度,摇匀,经0.45μm的微孔滤膜过滤,即得。1.6 线性实验将标准品贮备液稀释成0.004nmol/μl,0.008nmol/μl,0.012nmol/μl,0.016nmol/μl,0.020nmol/μl浓度梯度,每个浓度以5μL注入色谱系统。1.7 精密度实验将标准品贮备液稀释至一定的浓度,按色谱、质谱条件进行测定,连续进样6次。1.8 加样回收率实验精密称取五分的供试品,每份加入0.020nmol/μl标准品溶液5ml,定容。以5μL注入色谱系统。1.9供试品的测定 把1.5制备好的供试品溶液,以5μL注入色谱系统。以标准液的峰面积和浓度,通过外标法做曲线算出样品的浓度。2 结果与讨论2.1 色谱行为由于保健品中的氨基酸,用高效液相荧光法要进行柱前衍生,成本很高而采用液质联用法,不需要衍生,可大大节约成本,用流动相(0.35g乙酸铵加水0.5L溶解,然后加入0.5L乙腈,混合,用乙酸调pH=3.5)时,5min就能把16种氨基酸全部流出。采用液质联用法,通过MRM模式进行母离子及相应的子离子进行检测,能达到准确的分离和定量,见图1 。 从左到右,分别为丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丝氨酸。图1 16种氨基酸标准品的碎片离子色谱峰2.2 质谱行为在ESI(+)阳离子检测方式下,16种氨基酸的质谱定量分析,在质谱条件下,失去NH3形成+ 峰,或失去HCOOH重排生成+ 峰,从而进行色谱分离。2.3 线性回归方程和最低检测限以标准品的5个梯度浓度与其峰面积进行线性回归,拟合线性回归方程为Y=aX + b,相关系数r2 及最低检测限(S/N(信噪比)=3时,可测得标准品的最低检测限)见表2。表2 16种氨基酸线性回归方程、相关系数、最低检测限氨基酸Y=aX + b相关系数(r2)最低检测限(nmol/μl)丙氨酸Y=3.09e+006X + 6.95e+0030.99810.0013精氨酸Y=2.31e+007X + 1180.99990.0005天冬氨酸Y=3.45e+006X + 1.07e+0040.99760.0008胱氨酸Y=8.44e+005X + 1.72e+0030.99660.0006谷氨酸Y=7.6e+006X + 1.46e+0040.99840.0006组氨酸Y=7.58e+007X + 5.98e+0030.99990.0004亮氨酸Y=6.06e+007X + 5.24e+0040.99880.0001异亮氨酸Y=8.15e+007X + 6.26e+0040.99960.0001赖氨酸Y=1.24e+007X + 2.67e+0040.99780.0003蛋氨酸Y=1.34e+007X + 5.14e+0030.99890.0001苯丙氨酸Y=7.42e+007X + 4.08e+0040.99910.0001脯氨酸Y=7.9e+007X + 5.57e+0040.99970.0003苏氨酸Y=9.67e+006X + 2.49e+0040.99770.0003酪氨酸Y=1.76e+007X + 2.89e+0040.99920.0003缬氨酸Y=2.41e+007X + 3.31e+0040.99740.0003丝氨酸Y=1.06e+007X + 2.63e+0040.99810.00132.4 方法的精密度和重复性 取浓度0.012nmol/μl的16种氨基酸混合标准品连续进样6次。计算峰面积和保留时间的RSD值。结果见表3。表3 16种氨基酸峰面积和保留时间的相对标准偏差氨基酸峰面积RSD(%)保留时间RSD(%)丙氨酸4.480.57精氨酸4.670.34天冬氨酸4.570.44胱氨酸3.780.56谷氨酸3.360.24组氨酸3.330.13亮氨酸2.750.1异亮氨酸2.930.23赖氨酸4.790.43蛋氨酸3.920.09苯丙氨酸2.170.11脯氨酸4.540.28苏氨酸4.110.37酪氨酸3.610.13缬氨酸2.350.23丝氨酸3.280.162.5加样回收率实验,见表4。表4 16种氨基酸峰的回收率实验结果氨基酸平均回收率(%)RSD(%)丙氨酸94.114.05精氨酸82.912.73天冬氨酸82.694.66胱氨酸83.153.95谷氨酸98.234.1组氨酸78.671.61亮氨酸98.284.99异亮氨酸102.713.03赖氨酸98.584.49蛋氨酸95.983.34

  • 《NY/T 3001-2016 饲料中氨基酸的测定 毛细管电泳法》正本-农业部公告第2466号

    [align=left]《NY/T 3001-2016 饲料中氨基酸的测定 毛细管电泳法》等83项标准业经专家审定通过,现批准发布为中华人民共和国农业行业标准,自2017年4月1日起实施。[/align]本分析方法用于测定饲料和饲料原料中的下列氨基酸:精氨酸、赖氨酸、 酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、亮氨酸和异亮氨酸(总量)、蛋氨酸、缬氨酸、脯氨酸、苏氨酸、丝氨酸、丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、色氨酸、谷氨酸和天门冬氨酸。[url=http://www.instrument.com.cn/netshow/SH103892/Product-C0105-0-0-1.htm]高效毛细管电泳仪[/url]是一种快速、简便的分析仪器,可应用于该标准采用LUMEX的毛细管电泳仪及等。多个行业,可进行定性和定量分析。仪器性价比高,无需要色谱柱,维护成本趋于零。俄罗斯已有多家企业顺利应用。

  • 21万!吉林省疾病预防控制中心(吉林省预防医学科学院)理化所关于亮氨酸脑啡肽等82项试剂耗材采购项目

    一、项目基本情况 项目编号:BY-HWZB-20240918 项目名称:吉林省疾病预防控制中心(吉林省预防医学科学院)理化所关于亮氨酸脑啡肽等82项试剂耗材采购项目 采购方式:竞争性磋商 预算金额:21.918300 万元(人民币) 最高限价(如有):21.918300 万元(人民币) 采购需求: 理化所关于亮氨酸脑啡肽等82项试剂耗材采购,具体详见竞争性磋商文件技术标准和服务要求; 合同履行期限:合同签订后一个月内需按合同约定的试剂耗材总量供货至90%,剩余部分需在合同签订后两个月内供货完毕 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 本项目专门面向中小企业采购 3.本项目的特定资格要求:3.1供应商须具备相关经营范围的独立法人营业资格,具备有效的营业执照;3.2供应商须具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度,需提资格条件承诺函;3.3供应商须具有依法缴纳税收和依法缴纳社会保障资金的良好记录,需提资格条件承诺函;3.4拒绝列入政府取消投标资格记录期间的企业或个人投标,对在“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)、中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)等渠道列入失信被执行人、重大税收违法失信主体、政府采购严重违法失信行为记录名单及其他不符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定条件的供应商,不得参与政府采购活动;3.5本项目对投标申请人的资格审查方式采用资格后审方式,主要资格审查标准和内容详见磋商文件中的资格审查文件,只有资格审查合格的投标申请人才能进入后续评审;3.6本项目核心产品为:亮氨酸脑啡肽、HPLC级乙腈、41种农药混标、可见光/紫外可见光分光光度计、玉米赤霉烯酮同位素内标、12种真菌毒素混合同位素内标 (本项目为非单一产品采购,根据采购文件中载明的核心产品,对多家投标申请人提供的核心产品品牌相同的参加同一合同项下投标的,且通过资格审查、符合性审查的不同投标人,按一家投标人计算,评审后得分最高的同品牌投标人获得中标人推荐资格;评审得分相同的采取随机抽取方式确定,其他同品牌投标人不作为中标候选人)。 三、获取采购文件 时间:2024年09月25日 至 2024年09月30日,每天上午8:30至11:30,下午13:00至16:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:吉林省博扬招标项目管理有限公司(长春市二道区洋浦大街凯利中心十三楼1302开标室) 方式:将营业执照;法定代表人身份证明及法定代表人身份证;授权委托书及被授权人身份证(以上材料的复印件加盖公章的彩色扫描件以1个PDF发送至1173032238@qq.com报名并获取竞争性磋商文件)。 售价:¥500.0 元(人民币) 四、响应文件提交 截止时间:2024年10月09日 09点30分(北京时间) 地点:吉林省博扬招标项目管理有限公司(长春市二道区洋浦大街凯利中心十三楼1302开标室) 五、开启 时间:2024年10月09日 09点30分(北京时间) 地点:吉林省博扬招标项目管理有限公司(长春市二道区洋浦大街凯利中心十三楼1302开标室) 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 中国采购与招标网,中国招标投标公共服务平台,中国政府采购网。 八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:吉林省疾病预防控制中心(吉林省预防医学科学院) 地址:长春市景阳大路3145号 联系方式:张添一0431-87977303 2.采购代理机构信息 名 称:吉林省博扬招标项目管理有限公司 地 址:长春市二道区洋浦大街凯利中心十三楼1308室 联系方式:刘美男15004319373(办公电话) 3.项目联系方式 项目联系人:刘美男 电 话:  15004319373(办公电话)

  • “已知解离常数预测出峰顺序”答案大揭晓!!!

    前段时间开了一个讨论帖,推断缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、苏氨酸(T)、赖氨酸(K)、苯丙氨酸(F)、色氨酸(W)的出峰顺序。原帖链接如下:节后第一讨论贴--已知解离常数预测出峰顺序!http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130219/4574102/帖子的点击率说明还是有不少网友关注的,在此先谢过大家的捧场。该贴到目前为止共有两位网友参与讨论,并都给出了各自不同的答案。我的答案跟他们的相差比较大,特此摆出来跟大家分享讨论。说的不一定对,只是抛砖引玉,希望大家畅所欲言。以下讨论全部以CZE为前提,且GBE只有缓冲溶液,没有任何其他添加剂(如有机溶剂)。要预测出峰顺序,首先得弄清楚这个物质的酸碱性。如果是弱酸性物质,在羧基完全解离的情况下,物质带负电荷,则荷质比越大出峰时间越晚。如果是弱碱性物质,完全电离时物质带正电荷,出峰顺序正好反过来,即荷质比越大,出峰时间越短。另外酸性物质,pKapH时,羧基解离;碱性物质,pKa9.0 ,其他均9.0 赖氨酸第一个出来;分子量由大到小(其倒数由小到大顺序)为:色W: 204.23苯F: 165.19赖K: 146.19亮L: 131.17=异亮I: 131.17苏T: 119.12 缬V: 117.15我先猜一下顺序(不对莫怪):赖氨酸Lys色氨酸try苯丙Phe异亮氨酸iso亮氨酸leu苏氨酸thr缬氨酸valflysky97

  • 【求助】拖尾峰的峰高比正常的峰高低吗?应该怎样积分??

    用液相时遇到几个简单的问题不太清楚,请大家帮帮忙,谢谢!   1.查资料氨基柱的清洗要用5-10倍柱体积的含0.5- 1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗,0.5- 1.0%是指体积百分数还是质量百分数呢?  2.拖尾峰的峰高比正常的峰高低吗?应该怎样积分,积半峰对吗?  3.氨基酸分析时,用的混标溶液含有18种氨基酸(氯化铵、天门冬氨酸Asp、谷氨酸Glu、丝氨酸Ser、甘氨酸Gly、组氨酸His、精氨酸 Arg、苏氨酸Thr、丙氨酸Ala、脯氨酸Pro、酪氨酸Tyr、缬氨酸Val、蛋氨酸Met、异亮氨酸Ile、亮氨酸Leu、苯丙氨酸Phe、赖氨酸 Lyb各 2.5μmol/mL 胱氨酸Cys 1.25μmol/mL),但只跑出17个峰,没有氯化铵的峰,氯化铵不属于胺类,添加在混标溶液中有什么作用呢?

  • 饲料中氨基酸检测

    [font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多:[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39905.html[/url]服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]氨基酸是饲料营养成分检测项目必检项目之一。作为动物生长发育过程必须营养元素之一,部分必需氨基酸只能从饲料中摄取。当然非必需氨基酸可以通过动物自身的氨基酸转换或细胞代谢合成。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]苏氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、赖氨酸(Lys)、胱氨酸(Cys)、异亮氨酸(Ile)、色氨酸(Trp)、天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、酪氨酸(Tyr)、苯基丙氨酸(Phe)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)等。[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]饲料[/td][td]苏氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、赖氨酸(Lys)、胱氨酸(Cys)、异亮氨酸(Ile)、色氨酸(Trp)、天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、酪氨酸(Tyr)、苯基丙氨酸(Phe)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)等。[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测:环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务:高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享:HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询:实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

  • 【资料】整体柱在毛细管电色谱中的应用

    整体柱在毛细管电色谱中的应用 毛细管电色谱(CEC)是近年来建立在电泳技术不断发展和液相色谱理论日趋完善的基础上,利用电渗流或电渗流结合压力来推动流动相移动的微分离法。由于它结合了毛细管电泳及高效液相两种分离机制,因而具有快速,高效,使用范围广等特点,不管是中性物质还是带电物质都可以达到理想的分离效果。 CEC的毛细管柱主要有3种类型:填充柱、开管柱和整体柱。填充柱是发展最快使用最多的一类,95%的据报道都是使用填充柱进行分析,灵敏度高,重现性好。但填充柱需要在柱尾制作塞子,由此带来柱塞效应,引入了非均匀性因子引起气泡的产生,进而使谱带展宽。同时,塞子的制备具有一定的难度,条件控制不好将影响填充的均匀性,孔隙若太大流动相渗出,太小则易被污染甚至被样品中的“脏物”阻塞。开管柱虽没有塞子问题,固定相均匀,可使用较高的电压,但相比小,柱容量低,检测困难。整体柱不需要封口,避免了塞子制作的困难以及产生的气泡问题,且具有更好的多孔性和渗透性,即具有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔,利于实现生物大分子的快速分离。 溶胶-凝胶技术是指溶胶的凝胶化过程,光聚合法制备溶胶凝胶整体柱有许多优点,如可控制孔径,柱渗透性好,低温制备避免柱体变形,柱效高等。光聚合整体柱的进一步修饰,对于生物大分子而言具有更强的分析能力。Kato等采用两种方法修饰光聚合溶胶-凝胶整体柱,分离氨基酸混合物。一是与二甲基十八烷基氯硅烷反应,二是与二甲基十八烷基氯硅烷反应后,用氯三甲基硅烷进行封端反应。为提高检测灵敏度,将氨基酸衍生化,4-氟-7-硝基-2,1,3苯并二唑为荧光试剂。用第二种方法修饰的封端整体柱在流动相为 50 mmol·L-1醋酸铵(pH2.5)-水-乙腈(1:1:8)条件下,天冬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸在7 min内得到了很好的分离,柱效在每米58000~105000,亮氨酸与异亮氨酸具有相同的相对分子质量,在此条件下也得到了很好的分离。而使用未封端的整体柱由于吸附氨基酸,柱效比封端柱低 50%~67%。 微型化是未来分析仪器的发展方向,由于微芯片具有分析速度快,携带方便等优点越来越受到人们的关注,学者们已开始将整体柱制备技术应用于微芯片中。Daniel等将丙烯酸酯有机整体柱通过光聚合作用蚀刻到微芯片通道中作为固定相分离肽和氨基酸。整体柱技术与微芯片技术的结合将为生物大分子的分离分析带来极大的便利。

  • 【“仪”起享奥运】氨基酸仪器分析几种常用检测方法

    [font=宋体]蛋白质是生物体赖以生存的物质,而蛋白质又是由氨基酸所组成除含有组成蛋白质的各种氨基酸外,还有游离存在的各种氨基酸。氨基酸含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。是组成蛋白质的基本单位,氨基酸种类分为:蛋白氨基酸、蛋白质稀有氨基酸、非蛋白质氨基酸。随着对蛋白质及多肽研究的日趋重视,氨基酸分析技术也得到了飞速发展。[/font][font=宋体]蛋白质氨基酸分为:中性氨基酸(一氨基一羧基酸)、碱性氨基酸[/font]([font=宋体]二氨基一羧基酸[/font])[font=宋体]、酸性氨基酸(一氨基二羧基酸)和杂环氨基酸四类;中性氨基酸:甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、胱氨酸(二氨基二羧基酸);酸性氨基酸:天门冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、谷酰胺;碱性氨基酸:赖氨酸、精氨酸;杂环氨基酸:脯氨酸、组氨酸等二十种。其中缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和赖氨酸是八种人体必需氨基酸,不能自身合成,必须由食物供给;当食物缺少这些氨基酸时,正常生长发育就受到抑制。[/font][font=宋体]蛋白质稀有氨基酸:一些特殊类型的蛋白质水解液中分离出来的少数其他氨基酸,是正常氨基酸的衍生物,数量不会很多。如胶原蛋白的水解液中[/font]4-[font=宋体]羟脯氨酸,就是脯氨酸的衍生物。[/font][font=宋体]非蛋白质氨基酸:存在于各种细胞或组织中,游离状态或者是结合状态,但并不存在于蛋白质中,如γ[/font]-[font=宋体]氨基丁酸、鸟氨酸等大约[/font]150[font=宋体]余种。[/font][font=宋体]因此氨基酸分析技术是生命科学研究中重要的技术之一。[/font][b][font=宋体]氨基酸自动分析仪[/font][/b] [font=宋体]主要应用在农业(种子、饲料)、食品、水产、医药、生化、医学等领域。如日立全自动氨基酸分析仪[/font]L-8900[font=宋体]、英国[/font]Biochrom 30+[font=宋体]、德国赛卡姆([/font]sykam[font=宋体])全自动氨基酸分析仪[/font]S433D[font=宋体]等。适合蛋白质含量为常量的,大批量样品的分析测试。[/font][font=宋体]氨基酸自动分析仪原理:柱后衍生法,采用离子交换树脂(强酸性阳离子交换树脂[/font]Na+[font=宋体]型[/font][font=宋体])分离,茚三酮醋酸溶液柱后衍生。不同氨基酸对树脂的亲和力如下:碱性氨基酸[/font][font=宋体]芳香族氨基酸[/font][font=宋体]中性氨基酸[/font][font=宋体]酸性氨基酸及羟基氨基酸,即氨基酸分析仪出风顺序如下:天冬门氨酸([/font]Asp[font=宋体])[/font]----[font=宋体]苏氨酸([/font]Thr[font=宋体])[/font]----[font=宋体]丝氨酸([/font]Ser[font=宋体])[/font]----[font=宋体]谷氨酸([/font]Glu[font=宋体])[/font]----[font=宋体]脯氨酸([/font]Pro[font=宋体])[/font]----[font=宋体]甘氨酸([/font]Gly[font=宋体])[/font]----[font=宋体]丙氨酸([/font]Ala[font=宋体])[/font]----[font=宋体]胱氨酸([/font]Cys[font=宋体])[/font]----[font=宋体]缬氨酸([/font]Val[font=宋体])[/font]----[font=宋体]蛋氨酸([/font]Met[font=宋体])[/font]----[font=宋体]异亮氨酸([/font]Ileu[font=宋体])亮氨酸([/font]Leu[font=宋体])[/font]----[font=宋体]酪氨酸([/font]Tyr[font=宋体])[/font]----[font=宋体]苯丙氨酸([/font]Phe[font=宋体])[/font]----[font=宋体]赖氨酸([/font]Lys[font=宋体])[/font]----[font=宋体]氨([/font]NH3[font=宋体])组氨酸([/font]His[font=宋体])[/font]----[font=宋体]精氨酸([/font]Arg[font=宋体])。[/font][font=宋体]此方法优点是衍生自动完成,检出限在[/font]0.5 umol/L-2 umol/L[font=宋体]以下,衍生生成物稳定。缺点是检测用时偏长,每个样品检测时间通常为[/font]60[font=宋体]分钟。[/font][b][font=宋体]反相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]邻苯二甲醛([font=Arial, 微软雅黑 !important]OPA[/font])柱前衍生荧光法[/font][/b][font=宋体]主要适用蛋白质含量为超微量、微含量样品(海水、沉积物、味精、食盐等)。[/font][font=宋体]邻苯二甲醛([/font]OPA[font=宋体])柱前衍生荧光法原理:采用样品通过衍生剂([/font]125 mg OPA[font=宋体]溶解在[/font]5 ml[font=宋体]甲醇中,加入[/font]100 ul[font=宋体]β[/font]-[font=宋体]巯基乙醇,用[/font]pH=10.5[font=宋体]硼酸溶液定容[/font]25 ml[font=宋体])衍生,进入反相[/font]C18[font=宋体]色谱柱分离,荧光检测器(λ[/font]ex=334 nm[font=宋体],λ[/font]em=425 nm[font=宋体])检测。[/font][font=宋体]此方法优点在于其超高的灵敏度,检出限在[/font]100 fmol/L-1 pmol/L[font=宋体]以下,衍生反应瞬间即可完成,检测用时短,一般[/font]35[font=宋体]分钟可检测完成一个样品。缺点就是衍生反应强度受气温、光强限制,衍生反应后[/font]1[font=宋体]分钟之内立刻进样,衍生反应时间超过二十分钟,氨基酸就会衰减很快,脯氨酸不能和[/font]OPA[font=宋体]生成衍生物。[/font][img]http://www.qdio.ac.cn/ggjs/jlhz/202110/W020211021379701035423.png[/img][b][font=宋体]反相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]异硫氰酸苯酯([font=Arial, 微软雅黑 !important]PITC[/font])柱前衍生紫外法[/font][/b][font=宋体]主要适用蛋白质含量为半常量、微量(沉积物、生理体液、植物等);本法采用样品[/font]200 ul[font=宋体]先加入[/font]100 ul[font=宋体]三乙胺乙腈溶液,再加入异硫氰酸苯酯乙腈溶液[/font]100 ul[font=宋体],混均室温反应[/font]60[font=宋体]分钟,加[/font]400 ul[font=宋体]正己烷终止反应,取下层溶液过滤,进反相[/font]C18[font=宋体]色谱柱,紫外检测器[/font]254 nm[font=宋体]检测。[/font][font=宋体]此方法相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言[/font],[font=宋体]在可操作上和低成本等方面具有明显优势,检出限在[/font]200 nmol/L-800 nmol/L[font=宋体]以下,相比柱前衍生[/font]OPA[font=宋体]法和柱后衍生茚三酮法检测样品的范围更加广泛,而且衍生方法简便,不受气温和光强的限制,衍生物单一、稳定[/font]-20[font=宋体]℃可储存数月,[/font]4[font=宋体]℃冷藏可放一周。缺点就是衍生时间太长,灵敏度不高。[/font][img]http://www.qdio.ac.cn/ggjs/jlhz/202110/W020211021379701034546.png[/img]

  • 【资料】整体柱在毛细管电色谱中的应用

    整体柱在毛细管电色谱中的应用 毛细管电色谱(CEC)是近年来建立在电泳技术不断发展和液相色谱理论日趋完善的基础上,利用电渗流或电渗流结合压力来推动流动相移动的微分离法。由于它结合了毛细管电泳及高效液相两种分离机制,因而具有快速,高效,使用范围广等特点,不管是中性物质还是带电物质都可以达到理想的分离效果。 CEC的毛细管柱主要有3种类型:填充柱、开管柱和整体柱。填充柱是发展最快使用最多的一类,95%的据报道都是使用填充柱进行分析,灵敏度高,重现性好。但填充柱需要在柱尾制作塞子,由此带来柱塞效应,引入了非均匀性因子引起气泡的产生,进而使谱带展宽。同时,塞子的制备具有一定的难度,条件控制不好将影响填充的均匀性,孔隙若太大流动相渗出,太小则易被污染甚至被样品中的“脏物”阻塞。开管柱虽没有塞子问题,固定相均匀,可使用较高的电压,但相比小,柱容量低,检测困难。整体柱不需要封口,避免了塞子制作的困难以及产生的气泡问题,且具有更好的多孔性和渗透性,即具有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔,利于实现生物大分子的快速分离。 溶胶-凝胶技术是指溶胶的凝胶化过程,光聚合法制备溶胶凝胶整体柱有许多优点,如可控制孔径,柱渗透性好,低温制备避免柱体变形,柱效高等。光聚合整体柱的进一步修饰,对于生物大分子而言具有更强的分析能力。Kato等采用两种方法修饰光聚合溶胶-凝胶整体柱,分离氨基酸混合物。一是与二甲基十八烷基氯硅烷反应,二是与二甲基十八烷基氯硅烷反应后,用氯三甲基硅烷进行封端反应。为提高检测灵敏度,将氨基酸衍生化,4-氟-7-硝基-2,1,3苯并二唑为荧光试剂。用第二种方法修饰的封端整体柱在流动相为 50 mmol·L-1醋酸铵(pH2.5)-水-乙腈(1:1:8)条件下,天冬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸在7 min内得到了很好的分离,柱效在每米58000~105000,亮氨酸与异亮氨酸具有相同的相对分子质量,在此条件下也得到了很好的分离。而使用未封端的整体柱由于吸附氨基酸,柱效比封端柱低 50%~67%。 微型化是未来分析仪器的发展方向,由于微芯片具有分析速度快,携带方便等优点越来越受到人们的关注,学者们已开始将整体柱制备技术应用于微芯片中。Daniel等将丙烯酸酯有机整体柱通过光聚合作用蚀刻到微芯片通道中作为固定相分离肽和氨基酸。整体柱技术与微芯片技术的结合将为生物大分子的分离分析带来极大的便利。

  • 南瓜的营养价值与食用功效

    南瓜的营养分析  营养分析  每100克含蛋白质0.6克,脂肪1克。碳水化合物5.7克,粗纤维1.1克,灰分6克,钙10毫克,磷32毫克,铁0.5毫克,胡萝卜素0.57毫克,核黄素0.04毫克,尼克酸0.7毫克,抗坏血酸5毫克。此外,还含有瓜氨素、精氨酸、天门冬素、葫芦巴碱、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、戊聚糖、果胶。  南瓜中对人体的有益成分有:多糖、氨基酸、活性蛋白类胡萝卜素及多种微量元素等。各种成分的功用:  1. 多糖类:南瓜多糖是一种非特异性免疫增强剂,能提高机体免疫功能,促进细胞因子生成,通过活化补体等途径对免疫系统发挥多方面的调节功能。  2. 类胡罗卜素:南瓜中丰富的类胡萝卜素在机体内可转化成具有重要生理功能的维生素A,从而对上皮组织的生长分化、维持正常视觉、促进骨骼的发育具有重要生理功能。  3. 矿质元素:南瓜中高钙、高钾、低钠,特别适合中老年人和高血压患者,有利于预防骨质疏松和高血压。此外,还含有磷、镁、铁、铜、锰、铬、硼等元素。  4. 氨基酸和活性蛋白:南瓜中含有人体所需的多种氨基酸,其中赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸等含量较高。此外,南瓜中的抗坏血酸氧化酶基因型与烟草相同,但活性明显高于烟草,表明了在南瓜中免疫活性蛋白的含量较高。  5. 脂类物质:研究发现,在南瓜种子中的脂类物质对泌尿系统疾病及前列腺增生具有良好的治疗和预防作用。

  • 【转帖】肽 链 设 计

    肽 链 设 计简 介   多肽是复杂的大分子, 因此每条序列在物理和化学特性上都是独特的。有些多肽合成很困难, 另有些多肽虽然合成相对容易, 但纯化困难。最常见的问题是许多肽不溶于水溶液, 因此在纯化中, 这些疏水肽必须溶于非水溶剂中,或特殊的缓冲液, 而这些溶剂或缓冲液很可能不适合应用于生物实验系统, 因此研究人员不能使用该多肽达到自己的目的, 因此下面是对于研究人员设计多肽的一些建议。合成困难肽的选择1. 减少序列长度  由于肽的长度增加导致粗产物纯度降低, 小于15个残基的肽能较容易得到。当肽链长度增加到20个残基以上时, 正确产物的量就是一个主要考虑的问题。在许多实验中, 降低残基数低于20往往能得到更好的结果。2. 减少疏水残基数  疏水残基占明显优势的肽,尤其在距C端7-12个残基的区域,常常引起合成困难。这通常被认为是由于合成中形成b折叠片,这样产生不完全配对。在这些例子中, 用1个或几个极性残基置换, 或加入Gly或Pro以打开肽结构可能会有帮助。3. 减少"困难"残基  有多个Cys、Met、Arg、Try残基通常难于合成。Ser通常可作为Cys的非氧化替换。改善可溶性的选择1. 改变N端或C端  对于酸性肽 (即pH值为7时带负电荷), 我们推荐乙酰化(N端乙酰化, C端保持自由羧基), 以增加负电荷。而对于碱性肽 (即pH值为7时带正电荷), 我们推荐氨基化 (N端自由氨基, C端氨基化), 以增加正电荷。2. 缩短或加长序列  某些序列含有大量疏水氨基酸, 如Trp、Phe、Val、Ile、Leu、Met、Tyr和Ala等, 当这些疏水残基大于50%通常难于溶解。为了增加肽的极性, 加长序列可能会有帮助。另外一种选择是通过减少疏水残基的方法降低肽链的长度以增加极性。肽链极性越高, 就越有可能溶于水。3. 加入可溶性残基  对于某些肽链而言, 加上一些极性氨基酸能改善可溶性。我们推荐给酸性肽的N端或C端加上Glu-Glu。给碱性肽的N端或C端加上Lys-Lys。如果不能加入带电荷基团, 可以将Ser-Gly-Ser加到N端或C端。但是, 肽链的两端不能改变时, 该方法则不可行。4. 通过置换一个或多个残基改变序列  肽链的可溶性可通过改变序列内某些残基来改善。通常单个残基的替换就能显著改善其疏水性, 而这种改变通常是较为保守的, 如用Gly代替Ala。5. 通过选用不同"框架"来改变序列  如果能用某个序列来制备许多长度一定的相互串连或重叠的多肽, 则可以用改变各个多肽起始点的方法来实现改变序列的目的。其原理是: 在同一多肽的亲水和疏水残基间创造新的更好的平衡, 或将同一多肽内的"困难"残基(比如2个Cys)放进两个不同的多肽而不是集于同一分子内。特殊氨基酸残基对肽链特性影响的一些要点  对于由遗传密码编码的二十种氨基酸及蛋白质中常见的其他氨基酸, 按其特性可以用几种方法进行分类。下面列出了最常见的氨基酸的三字母代码和单字母代码,以及不同的分类方法。氨基酸的代码丙氨酸   Ala A  甲硫氨酸   Met M半胱氨酸  Cys C  天门冬酰胺  Asn N天门冬氨酸 Asp D  脯氨酸    Pro P谷氨酸   Glu E  谷氨酰胺   Gln Q苯丙氨酸  Phe F  精氨酸    Arg R甘氨酸   Gly G  丝氨酸    Ser S组氨酸   His H  苏氨酸    Thr T异亮氨酸  Ile I   缬氨酸    Val V赖氨酸   Lys K  色氨酸    Trp W亮氨酸   Leu L  酪氨酸    Tyr Y蛋白质中常见的其他氨基酸羟脯氨酸胱氨酸焦谷氨酸肽链设计中常见的其它氨基酸1. α-氨基丁酸 (Cys的置换物)2. β-氨基丙氨酸 (Ala的直链异构物)3. 正亮氨酸 (亮氨酸的线性侧链异构物)氨基酸按其亲水性、疏水性可分亲水性氨基酸: D, E, H, K, Q, R, S, T, 羟脯氨酸, 焦谷氨酸疏水性氨基酸: A, F, I, L, M, P, V, W, Y, α-氨基丁酸, β-氨基丙氨酸, 正亮氨酸C和G属于未定类其它的分类方法在温和条件下氧化的氨基酸--C, M脱氨或脱羧基的氨基酸--N, Q蛋白制备中易降解的氨基酸--M, W带正电荷的氨基酸--K, R, H带负电荷的氨基酸--D, E  当下列疏水氨基酸, 即Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Met, Phe, Trp存在于C端时,通常引起合成及纯化的困难, 这主要是因为它们难溶于水。如果您看见这些氨基酸, 即Cys、His、Pro 普遍存在于序列中或在C端时, 则在常规的固相合成中需要特殊的固相支持物。在用普通的固相支持物时, 在二肽阶段, 由于环化引起的损失非常高。在许多例子中, 甚至导致所有链从固相支持物上损失, 但是若C端为氨基化Pro时, 或者用特殊的PEG-聚苯乙烯固相支持物时, 能使产量大为提高, 则不会发生这种现象。

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