支原体、衣原体检查多久出结果,与采取的检测方法有关。 1、直接观察法:取眼结膜、男性尿道口、女性子宫颈分泌物等做涂片,直接在显微镜下观察是否存在支原体、衣原体。一般1-2小时即可出结果。 2、细胞培养法:从患者体液中分离出支原体、衣原体,在实验室内一定条件下培养观察。此方法一般1-2天出结果。 3、基因扩增检测法:利用DNA探针或聚合酶反应(PCR)来检测支原体、衣原体的DNA。此方法一般24小时出结果。
通过研究疯牛病和类似疾病(新型克雅氏病、克雅氏病、绵羊痒病),人们得出了关于疯牛病致病病原体的三个理论。这些理论使我们相信,这种病原体是: 一种未知的病毒或病毒类粒子:尽管病原体的大小符合病毒的特点,但其抗热性、抗化学物和缺少核酸的特征,不同于任何已知病毒。 一种移动细菌(螺原体):螺原体的许多感染特征和疯牛病相似,但没有直接的证据可以将螺原体和疯牛病联系起来。 一种变异蛋白(朊蛋白):在感染了疯牛病的牛、新型克雅氏病患者、克雅氏病患者和患绵羊痒病的羊的脑部,都发现了变异朊蛋白。这种蛋白质比病毒小,在高温或消毒剂的作用下不发生改变。这种假说在媒体中最流行,但它与公认的许多生物学理论相矛盾。
大家一起来讨论阿如何消除污水中的病原体污染物那?
核酸支原体检测和支原体检测的区别
广州支原体衣原体检查多少钱
首先,我们要准备好硬件,既然是支原体微生物,肯定要用到培养箱。既然是培养的人体内微生物,培养箱肯定是37℃±1℃。再者,微生物培养用得到载体物,比如平板什么的,这里用的是孔。微生物也不能老饿着不是,还得有培养基。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015021011380401_01_1702689_3.jpg图中黄色液体就是培养基。板上的孔就是用来装支原体的。哇,原来这样啊,还以为是装13的呢!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif你下去!口味这么重!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif检验的标本都是什么啊?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif尿,尿道分泌物,精液,前列腺液,宫颈分泌物。歪,我就是说说,你一大老爷们脸红个屁啊!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif采样又不用你管!采样可以用棉拭子,液体的话就用小杯子好了。这个可以吗?http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502101201_535093_1702689_3.pnghttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif准确的讲,只要是无菌的,也可以,但请你不要拿我的水杯来举例子!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif杯子来啦!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502101202_535094_1702689_3.jpg对嘛,这个才正常。先休息下,一会再讲操作
最近我养细胞发现小黑点现象很严重,原来对“黑胶虫”一说嗤之以鼻,认为那不过是自欺欺人的借口,觉得怎么也不会发生在自己身上。但是真的就碰上了:要来的细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全死亡。上述现象很像所谓的“黑胶虫”。我感觉实际是支原体感染以后细胞生长不好造成的碎片和感染原虫的混合体。这种现象的直接原因是支原体等原虫感染,间接表象是小黑点,被以讹传讹成为了“黑胶虫”。光镜下看不到支原体,但是可以看到支原体感染的终末现象——细胞凋亡坏死,释放出大量碎片,看起来就像小黑虫子。查找类似的帖子——很多人是更换血清后出现这种问题;说空气传播的可能是一个培养箱的人都用了同一种血清,而不是可以通过培养箱空气传播;感染最可能是牛源性的支原体,通过产道或血行感染,所以兽用的泰乐菌素比较有效。用plasmocin等抗支原体的药物有效;用巨噬细胞共培养有效(吞噬支原体);很多人更换进口血清就好了。感染也有个疾病谱,在质和量上从低烈度到高烈度,所谓“细胞生长不受影响”,其实是感染的烈度不高而已;烈度高的感染就出现细胞大量空泡形成,细胞间空旷地带出现大量黑点,细胞最终凋亡、坏死,漂起来。有些国产血清写着建议灭活,其实是挂羊头卖狗肉,那个56度30分钟更多的是为了杀杀支原体的。实际上也有杀不死的。但可以降低产品的风险。我用阿奇霉素(有针对支原体衣原体功效)75-100ug/ml的浓度洗了细胞和加入培养基中,小黑点确实明显抑制。不过我想根治就很难了。据说invivogen公司的plasmocin可以根治,不过就成本来说不如直接更换血清。以上是自己个人总结的一点看法。建议不要总拿子虚乌有的“黑胶虫”来说事。多考虑看不到的支原体,不要还停留在培根时代——只相信自己眼睛看见的。
在做致病菌中会碰到不小心掉落病原体的事情,要是碰到这样的事情应该怎么处理应对呢?
由于传播途径多样、影响范围广泛,症状发展迅速,传染病仍然是世界范围内引起人类大量死亡的重要原因。21世纪以来多次严重疫情给我们留下深刻印象:一是2003年的“非典”(SARS),二是2009年的甲型H1N1流感(人感染猪流感),再有就是现在席卷全球的新型冠状病毒肺炎疫情。因此,传染病的防控一直是医学科学工作者面临的巨大挑战。其中,对病原体进行快速准确的鉴定是传染病精准防控的基础。中国医学科学院病原生物学研究所彭俊平研员自2000年起即深耕于病原体检测技术方法及基因组学、耐药机制相关的研究工作。近日,仪器信息网特别采访了彭俊平研究员,与他就核酸质谱技术在病原体检测领域的应用现状及前景进行了深入交谈。[align=center][img=彭俊平个人.JPG,600,337]https://img1.17img.cn/17img/images/202204/uepic/3407a132-360a-4424-b8f8-73b9d8028642.jpg[/img][/align][align=center]中国医学科学院病原生物学研究所 彭俊平研究员[/align][color=#ff0000]“国内最早开展核酸质谱病原体检测研究的团队之一”[/color]随着各项科学技术的进步,病原体检测技术也在不断发展,由病原分离、电镜观察、免疫学检测等传统生物学方法发展到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术、芯片技术、测序技术、质谱技术等分子生物学方法。“因为引起疾病的病原体种类繁多,单一的平台技术不能解决所有问题,所以,我们的主要工作是利用各种平台技术对病原体进行筛查。”彭俊平介绍到,“多年来我们课题组一直致力于搭建一个病原体组合筛查技术体系,这也是我国在传染病防控领域的一个重要工作。另外,我们利用多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应结合飞行时间质谱技术(以下简称:核酸质谱)在病原体检测领域开展了10多年的工作,这也是我们多年来的一个重点发展方向。”核酸质谱是什么?彭俊平为笔者解答到,核酸质谱其实是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)在核酸水平的应用,是一种将多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应与质谱结合的复合技术。此前,MALDI-TOF主要应用于蛋白质水平的微生物鉴定研究,应用发展不过30多年,而MALDI-TOF在核酸水平的相关应用则是近些年提出的概念,应用发展时间就更短。最初,MALDI-TOF在核酸研究领域开展的应用是SNP基因分型,其首先通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]扩增含有SNP的基因组片段,再通过检测核酸分子在真空管中的飞行时间而获得样品分析物的精确分子量,从而检测出SNP位点信息。因为MALDI-TOF本身的高灵敏度和高通量等特点,使其非常适合应用于SNP多位点的筛查。而MALDI-TOF在病原体检测领域的研究则鲜少有报道。彭俊平课题组是国内最早开展核酸质谱病原体检测研究的团队之一。“我们是在2009年引进的这个技术平台,正好是H1N1全球大流行的时候,当时核酸质谱的技术水平还不足以帮助我们开展相关工作,因此我们就开始自己开发方法。”核酸质谱病原体检测的原理是利用MALDI-TOF检测多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应的产物,即单碱基延伸的产物质量大小,来判定检测靶基因的有无,从而进一步判定样本中目标病原体的有无。与传统的病原体检测技术相比,核酸质谱在灵敏度、检测通量以及操作简便性等方面均有一定优势。此外,核酸质谱检测的核酸序列均来源于公共数据库,不需要依赖其他的数据库。[color=#ff0000] “开发了7种人冠状病毒的检测方法,成功申请专利”[/color]经过多年的技术摸索,彭俊平团队利用核酸质谱在病原体检测领域做出了很多成果。最近其团队开发了7种人冠状病毒的检测方法,并申请了发明专利。目前,已知可以感染人的冠状病毒共有7种,其中包括2003年的“非典”SARS冠状病毒、2012年在中东地区出现的MERS冠状病毒以及2019年12月爆发的严重性呼吸系统综合征冠状病毒SARS-Cov-2。彭俊平介绍到,课题组是从2012年开始开展人冠状病毒的检测技术研究,其中一部分工作内容就是利用核酸质谱进行检测应用。该部分成果是与岛津公司合作开发的,利用一步法多重反应[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]与MALDI-TOF质谱联用鉴定7种人冠状病毒与新型冠状病毒的重要突变位点。“本次合作中我们将多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应从两步法改进为一步法,既缩短了实验时间,又减少了人为操作的工作。而且我们改进的方法适用于所有的RNA病毒,可以说是摸索出了一种通用的解决方案。”彭俊平介绍到,“和岛津合作成果的应用价值很明确,我非常期待未来该方法的推广。接下来我们也将继续和岛津合作在MALDI-TOF平台上开发出更多病原体检测解决方案,并合力推动核酸质谱在临床领域的应用。”笔者追问到目前国际上核酸质谱在病原体检测领域的应用现状如何?彭俊平坦言道,国际上相关的成果并不多,而团队于2009年就开展了相关研究,可以说是走在了国际前列。不过,目前核酸质谱病原体检测的应用还以科研阶段为主,临床应用正处于拓展阶段。此外,彭俊平也谈到他认为核酸质谱走向临床所面临的瓶颈,一是MALDI-TOF本身的硬件设备比较贵;其次,基于MALDI-TOF平台提供给临床应用的成熟方法不多。因此,核酸质谱这样的技术平台想要真正推广到临床,首先需要提供“一揽子”的解决方案,这样应用场景就会被打开。不过,彭俊平也观察到,无论国内还是国外,越来越多的团队和厂商开始关注这一领域,相信核酸质谱的临床应用情况将在短短几年之内得到很大的改变。最后彭俊平表示,未来核酸质谱病原体检测值得重点关注的方向有呼吸道感染疾病、腹泻性疾病和性传播疾病等,其涉及的病原体种类繁多,是核酸质谱可以“大展身手”的方向。后记:采访中彭俊平反复提到“病原体的组合筛查技术体系”,他也为笔者解释到,为了获取更全面的生物信息,往往需要多种技术平台共同解决问题,而不是希望用一个技术平台去解决所有的问题。回到MALDI-TOF这一技术来说,总有人拿质谱与NGS测序相比较,其实它们的应用场景和目标都不一样,发展核酸质谱也并不是为了替代测序技术。事实上,核酸质谱只需要在中高通量的检测中建立并巩固其“王者地位”,在此基础上能够再提升灵敏度和分辨率等性能,就为自身的发展开辟了新天地。
本来今天应该上班的,可半夜孩子发烧了,今天去医院看了下,血常规一出来,医生怀疑是肺炎支原体感染。说是要做个支原体检测。收费70块哦。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012238_575900_1702689_3.jpg贫僧也做过支原体试剂盒的,一看取报告时间觉得不错,第二天就可以出结果,也就是最多培养24小时,只是不清楚他们只看阴阳性还是连同药敏一起做了。交了费用,从检验科领了支培养液。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012243_575901_1702689_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012243_575902_1702689_3.jpg去找护士做咽喉部取痰。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012244_575905_1702689_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012245_575906_1702689_3.jpg应该是碰到咽部了,孩子有点呕吐的感觉了。将取过痰的棉拭子放入培养液瓶中,折断,只留用棉拭子。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012247_575908_1702689_3.jpg将培养液交还检验科。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012248_575909_1702689_3.jpg时间仓促,未能找到该产品的说明书,但找到了相关资料。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012250_575910_1702689_3.jpg原先做过Uu和Mh的检测试剂盒,Uu是解脲支原体,24h时判读结果,Mh是人型支原体,48h时判读结果。原理是对N的利用不同,引起PH变化,最终从阴性(黄色)到阳性(红色)的变化。如下图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012304_575913_1702689_3.jpg这次的培养液很少,估计1.5ml以内,所以拿去做药敏的可能性很小。肺炎支原体属于人型支原体,比较有意思的是在这种快速培养法中是如何排除Uu的影响的。难道是加入了美满霉素?这种红霉素的衍生物对Uu有较好的抑制作用,且敏感性好。但是如何把培养时间从48h缩短到24h就不得而知了,应该是加入了其他的促生长因子吧。如果能看到说明书就好多了。欢迎一起讨论,一只培养液70块,还是很有搞头的。
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=54998]食物和动物饲料的微生物学.食物病原体检测用聚合酶链式反应[/url]
QX100一个应用的大方向是病原微生物的检测,尤其是复杂来源的样品。之前已有多篇HIV(病毒方面)相关的文献。最近又有2篇QX100对于细菌和衣原体检测方面的文献发表,结合之前的文献,可以得出,QX100可以对复杂来源样品中的病毒、细菌等病原微生物进行检测,而且是以绝对定量的方式进行,不再需要依赖于标准曲线,简化了实验操作。由英国科学家完成的采用QX100对沙眼衣原体的检测,发表于J Clinical Microbiol。沙眼衣原体是致盲的一个主要原因,该文章对1509个临床样品进行了双重的ddPCR反应体系与金标准Roche Amplicor CT/NG进行了对比,得到了如下的结论:
哪位有食品中重要人兽共患疾病病原体检测技术方面的资料,麻烦帮传一下,谢谢!haijun.yunfeng@yahoo.com.cn
由于工作的需要需要在7月1日前完成 欧洲药典6.1版2.6.7支原体检查法(若不是6.1版或USP也可,能够作为参照)的翻译愿以50分酬谢~~~~~~希望大家帮助,谢谢
导读:今年夏天,河南商城县,有多人被一种叫做蜱的小虫子咬伤,不治身亡,引起村民恐慌。据了解,当地去年已出现死亡病例,但今年尤其多,成为蜱虫“重灾区”。目前,国内还未分离出病原体,也不清楚它的传播途径,只是参考国际研究得知,蜱虫携带的病毒,能侵染人体细胞,致使人体血小板、白细胞锐减,并具传染性。蜱虫到底为何为?何方神圣?!咬人会导致人的死亡?无药可治?导致死亡的真正原因是什么?◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆1楼:蜱虫为何物?2楼:蜱虫的生活3楼:蜱虫的生存环境4楼:蜱虫致病5楼:蜱虫咬人图片(胆小误入)6楼:蜱虫视频(胆小勿入)◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆致命的“感冒”村民被蜱虫叮咬,起先高烧不退,随后血小板、白细胞锐减,最终多器官功能衰竭而亡看着父亲吴德政临终前的视频,吴玉涛泪流满面,他承包了商城县余集镇卫生院的一个门诊,他后悔,若早些将父亲送去信阳医治,或许还有救。吴德政,从医50多年,退休后,跟老伴在山区村子里带孙子。6月1日,他发烧到38度,去儿子吴玉涛的诊所看病。吴玉涛以为只是普通感冒,给父亲打了两天吊针。其间,他还在输液中加了点激素,以促进药效。事后才知道,这加速了病原体在体内的繁衍。6月3日,吴德政已无法站立。次日,家人将他抬到商城县人民医院,抽血检查,发现其血小板检测值已由正常的100到300个下降至25个,白细胞值由正常的4000到1万个降至1400个。“医生说,这是被蜱虫咬了,是无形体病,很多人来治,住几天院就好了。”吴玉涛说,县医院继续给父亲挂吊针,高烧依然不退,上吐下泻更加严重。6月7日,吴德政转院到信阳154医院。4天后,吴德政不治身亡。吴玉涛被告知,要是父亲早点住院,一开始就打强力霉素和多西环素的话,“救回一条命没问题”。无形体病会导致病人血小板和白细胞锐减,免疫系统趋于崩溃,最后多器官功能衰竭而死。蜱虫也在商城县鲇鱼山乡出现。该乡平塘村村民鲍祥义,喜欢赤膊上山干活,被蜱虫叮咬。从5月13日鲍祥义肋部出现红包到最后死亡,只有9天时间。5月22日,鲍祥义多个器官开始衰竭,血小板锐减使血液难以凝结,他手腕部被吊针刺破的血管,一直淌着血,必须有个人专门按压。一天之内,他仅输氧就花了两千多元。当天,鲍祥义转院到信阳,还没被抬上手术台,就停止了呼吸。7月3日凌晨,龚正成也告别人世。他是庙岗村村民,脚上被蜱虫叮咬。临死前一天,他牙关紧闭,水米难进。和鲍祥义一样,他腕部的“血直飙”。到7月底,“毒虫咬死人”的事,已传遍商城县的十里八乡。
测定动物肌肉组织和鸡蛋中残留的11种甾体激素类药物甾体化合物具有一个四环的(A、B、C、D)母核,这个母核像“田”字,并且在C10和C13处各有一个角甲基,在C17处有一侧链,这样在母核上的三个侧链像“巛”字,“甾”字十分形象的表示了这类化合物。它们能促进畜禽生长,提高饲料转化率,有利于蛋白质的沉积,在畜牧业养殖中经常使用。但蛋白同化激素在动物食品中的残留可能会危及消费者的健康,具有潜在的致癌性。我国农业部于2002年发布的第235号文件中规定丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、甲睾酮、群勃龙等在动物性食品中的最高残留限量为不得在动物性食品中检出”。因此,检测可食性动物源食品中蛋白同化类激素及其代谢产物残留量是一项重要的指标。本实验建立了同时检测猪、牛、羊及鸡的肌肉组织与鸡蛋中睾酮、甲基睾酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙等10种蛋白同化激素类药物和孕激素黄体酮残留量的快速方法。1.1仪器与试剂ACQUITYlM超高压液相色谱仪和Micromass—Quattro Premier质谱仪(美国Waters公司)。睾酮(testosterone)、甲基睾酮(methyltestosterone)、黄体酮(progesterone)、群勃龙(trenbolone)、勃地龙(boldenone)、诺龙(nandrolone)、美雄酮(大力补,methandienone)、司坦唑醇(康力龙,stanozol01)、丙酸诺龙(nandrolone propionate)及丙酸睾酮(testosterone propionate)对照品购自德国Dr.Ehrenstoffer公司;苯丙酸诺龙(nadrolone phenylpropionate)对照品购自中国兽药监察所。叔丁基甲醚、乙腈、甲醇均为色谱纯(德国Merck公司);甲酸和碳酸钠均为分析纯(广州化学试剂厂);水为超纯水。1.2储备液的制备准确称取适量的睾酮、甲基睾酮、黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙,用甲醇分别配制成l g/L的单标准溶液及10 mg/L的混合标准溶液,冰箱中保存,备用。1.3色谱-质谱条件1.3.1色谱条件色谱柱:Ultimate XB-C18 4.60×250mm,5 um .Part Number 00201-31043 Serial Number 211302350.流动相:A相为0.1%甲酸水溶液,B相为0.1%甲酸乙腈溶液;梯度洗脱程序:0—5.0 min,50%B--,90%B;5.O一7.0 min,90%B;7.O一7.5 min,90%B一50%B;7.5—10.0 min,50%B;流速:0.3 mL/min。柱温:室温。进样体积:lo斗L。1.3.2质谱条件离子源:电喷雾离子源(ESI),电压3 200 V,温度300 oC。扫描方式:正离子模式。检测方式:多反应监测(MRM)。脱溶剂气、锥孔气均为高纯氮气,流速分别为600,20 L/h;碰撞气为高纯氩气,压力为0.36 Pa(3.6×lO—mbar)。锥孔电压、碰撞能量及定性离子对、定量离子对等参数见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507021634_553131_2433088_3.png 1.4试样制备称取约500 g猪、牛、羊或鸡肌肉组织,切碎后匀浆备用;取10枚鲜鸡蛋,去壳,均质备用。1.5样品前处理称取5 g均质试样(精确至0.01 g),置于50mL离心管中,加入叔丁基甲醚25 mL。于10 000r/min均质30 S,振荡10 min;于4℃、6 000 r/min条件下离心10 min,上清液转移至100 mL梨形瓶中,残渣中再加入20 mL叔丁基甲醚振荡提取一次。合并离心后的上清液,并用旋转蒸发仪于45℃水浴中蒸发至干。加人流动相A与B(体积比为1:1)混合溶液2.0 mL,超声溶解残渣,予一20℃冰箱中放置30 min,取适量溶液于16 000 r/min下离心5 min,上清液过O.22斗m针头滤膜,滤液供测定。 1.6标准曲线的绘制空白试样按照“1.5”节方法处理,取适量空白上清液加入不同量的蛋白同化激素标准储备液,配制成1,2,4,10,20及100斗g/L的基质空白标准溶液,混匀后进样。以待测物色谱图的峰面积为纵坐标,相应待测物质量浓度为横坐标,进行回归运算,求得直线回归方程。1.7回收率试验添加质量浓度为50,100,500斗g/L的混合标准工作液0.1 mL,制得1,2,10斗g/kg添加水平的样品,按上述方法处理,测定回收率。1.8检出限与定量限的测定取适量混合标准工作液,制得0.2,0.3,0.4,0.5斗g/kg添加水平的样品,按“1.5”节所述方法处理,以最低检出浓度计算,3倍信噪比为检出限,10倍信噪比为定量限。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509101132_565576_2433088_3.png 11种甾体激素类药物的RMR离子流图(10 ug/L)
互相学习!上传USP39131-3934页翻译,求EP6.0-2.6.7支原体翻译!哪位大侠有EP2.6.12-2.6.13中英译文,谢谢![img]http://bbs.instrument.com.cn//images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=193198]3931-3934.doc[/url]大肠杆菌样品的制备和预培养—按在 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节下的描述,将不少于1克的供试品以1:10稀释来制备样品,并使用10毫升或对应1克或1毫升的数量,接种于适量(按照检查方法的适用性项下的内容来确定)的大豆酪蛋白消化物肉汤培养基,混匀,并在温度30o至35 o下培养18至24小时。选择和再次培养—摇动容器,转移1毫升大豆酪蛋白消化物肉汤培养基至100毫升的麦康凯(MacConkey)肉汤培养基,并在温度42 o至44 o下培养24至48小时。在温度30o至35o下,于麦康凯(MacConkey)琼脂培养基的平皿上再次培养18至72小时。说明—菌落的生长表明了大肠杆菌存在的可能性。这需通过鉴别检测来证明。如果没有菌落存在或如果确认鉴别检测为阴性,则该供试品符合该检测的要求。沙门氏杆菌样品的制备和预培养—按照在 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节下的描述制备供试品,并使用对应不少于10克或10毫升的数量接种于适量(按照检查方法的适用性项下内容来确定)的大豆酪蛋白消化物肉汤培养基,混合,在温度30 o至35 o下培养18至24小时。选择和再次培养—转移0.1毫升大豆酪蛋白消化物肉汤培养基至10毫升氯化镁孔雀绿沙门氏菌富集肉汤培养基,并在温度30o至35o之间培养18至24小时。在木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂培养基的平皿内再次培养。在温度30 o至35 o之间培养18至48小时。说明—可能存在的沙门氏菌通过生长良好的红色菌落,带有或没有黑色中心来识别。这由鉴定试验来确认。绿脓杆菌样品的制备和预培养—按照在 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节中的描述,将不少于1克的供试品以1:10稀释来制备样品,并使用10毫升或对应1克或1毫升的数量,接种于适量(按照检查方法的适用性项下描述来确定)的大豆酪蛋白消化物肉汤培养基,混匀。当检测贴剂时,通过无菌膜过滤器来过滤对应一贴制备品的样品(见 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节中样品的制备项下贴剂),并置于100毫升大豆酪蛋白消化物肉汤培养基。在温度30o至35 o之间培养18至48小时。选择和再次培养—在十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基的平皿内再次培养,并在温度30o至35 o之间培养18至72小时。说明—菌落的生长表明了绿脓杆菌存在的可能性。这需通过鉴别检测来证明。如果菌落不存在或如果确认鉴别检测为阴性,则该供试品符合该检测的要求。金黄色葡萄球菌样品的制备和预培养—按照 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节中的描述,将不少于1克供试品以1:10稀释来制备样品,并使用10毫升或对应1克或1毫升的数量来接种适量(按照检查方法的适用性项下的描述来确定)于大豆酪蛋白消化物肉汤培养基,并使其均匀。当检测贴剂时,通过无菌膜过滤器来过滤对应一贴制备品的样品(见在 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节里的样品的制备项下的贴剂),并置于100毫升大豆酪蛋白消化物肉汤培养基内。在温度30o至35o度下培养18至24小时。选择和再培养—再次培养在甘露醇氯化钠琼脂培养基的平皿上,并在温度30o至35o之间培养18至72小时。说明—金黄色葡萄球菌存在的可能性通过由黄色区域环绕的黄色或白色菌落的生长来识别。这需通过鉴别检测来证实。如果所描述类型的菌落不存在或如果确认鉴别检测为阴性,则该供试品符合该检测的要求。梭状芽孢杆菌样品的制备及热处理—按照 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节中的描述,将不少于1克供试品以1:10稀释来制备样品,分别取相对应不少于10毫升的两个供试品。将其中一份在温度80o加热10分钟,并快速冷却。不要加热另外一份。选择和再培养—使用10毫升或对应1克或1毫升的产品来做检测(按照检查方法的适用性项下的描述来确定)在无氧的条件下、温度30o至35o之间,培养48小时。培养之后,将来自每个试管的培养物在哥伦比亚琼脂培养基上进行再次培养,并在无氧条件下、温度30o至35o之间,培养48小时。说明—杆菌(带有或没有内生孢子)厌氧性生长出现阴性过氧化氢酶反应的现象,表明了梭状芽孢杆菌的存在。这需通过鉴别检测来证实。如果所描述类型的菌落不存在或如果确认鉴别检测为阴性,则该供试品符合该检测的要求。白色念珠菌样品的制备和预培养—按照在 非无菌产品微生物学检测:微生物计数检查法章节中的描述制备供试品,并使用10毫升或对应不少于1克或1毫升的数量,接种于100毫升Sabouraud(沙氏)葡萄糖肉汤培养基,并混匀。在温度30o至35o之间培养3至5天。选择和再培养—对在Sabouraud(沙氏)葡萄糖琼脂培养基的平皿中进行再次培养,并且在温度30o至 35o之间培养24至48小时。说明—白色菌落的生长可以表明白色念珠菌的存在。这需通过鉴别检测来证明。如果这样的菌落不存在或者如果确认鉴别检测为阴性,则供试品符合该检测的要求。
美媒揭露德特里克堡不仅有长期研究致命病原体的历史,还生产各类生物武器和毒剂,被指"策划饥荒和疾病",呼吁开展中立调查
[font=宋体][font=宋体]无细胞蛋白表达是一种体外重组蛋白质表达技术也称为无细胞蛋白质合成技术([/font][font=Calibri]CFPS[/font][font=宋体]:[/font][font=Calibri]Cell-free protein synthesis[/font][font=宋体]),是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体],氨酰合成酶,启动[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]延伸[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]终止因子,三磷酸鸟苷,[/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]Mg2+[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]K+[/font][font=宋体])的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。无细胞蛋白表达技术适用于制备各种类型的蛋白质,包括难表达蛋白质、毒性蛋白质、复杂蛋白质等。在药物研究、生物制造和生命科学等领域中得到广泛关注和应用,无论是研究、开发还是商业化应用过程。目前无细胞蛋白表达主要应用于药物研发领域,例如抗体制备和生物药物生产等。随着人工智能技术的不断发展,无细胞蛋白表达技术可以与人工智能算法结合,构建计算机辅助的高通量生产系统,实现个性化、精准的生物医学治疗。除此之外,还能够应用于其他领域,例如基因工程、环境保护和农业生产等。随着无细胞蛋白表达技术的不断发展和人工智能技术的不断进步,我们可以看到更多的新领域和新应用出现,给生物科技行业带来更多的机遇和挑战。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]相较于传统的活细胞蛋白表达技术,无细胞蛋白表达技术具有以下几个显著的优势:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]更高的蛋白质表达量:传统的活细胞蛋白表达技术受限于细胞本身的多方面因素,其表达的蛋白质数量往往受到限制。而无细胞蛋白表达技术通过在体外底物浓度高的环境中进行合成反应,不但避免了传统活细胞表达所面临的方方面面的限制,还能够很好地控制反应体系,从而获得表达量更高的蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]更快的表达速度:传统活细胞蛋白表达需要细胞生长并达到最佳密度才能进行蛋白质表达,这个过程往往需要数天时间。而无细胞蛋白表达技术通常只需要数小时就能够完成蛋白质的表达,这个速度明显快于传统活细胞表达技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]更精准的蛋白质合成:无细胞蛋白表达技术在体外进行蛋白质合成,能够精确控制底物浓度、反应温度、反应剂比例等参数,因此可以更加精准地合成定制的蛋白质,这对于研究和应用来讲具有重要意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]更灵活控制:在无细胞蛋白表达技术中,可以使用分离的组分体系进行蛋白质的合成,可以控制底物和反应剂的比例,也可以在适当的反应条件下进行自定义的修饰,如蛋白质标记、药效分析等。这些优点使得无细胞蛋白表达技术更加灵活、可控,适用于更广泛的应用领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]无细胞蛋白表达应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]无细胞蛋白表达技术是一种飞速发展的新型生物技术,具有广阔的应用前景和潜力。该技术可以快速、高效、经济地合成蛋白质,可广泛应用于医疗、制药、农业、生物材料等多个领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]医疗领域:无细胞蛋白表达技术在医疗领域应用广泛,可以用于生产多种蛋白质药品,如单克隆抗体等。其中,单克隆抗体是一种重要的治疗药物,具有高度特异性和亲和力,可用于肿瘤、心血管疾病、自身免疫性疾病等疾病的治疗。传统单克隆抗体生产方法需要花费大量时间和成本,而无细胞蛋白表达技术则可以在短时间内大规模合成单克隆抗体,从而大大缩短生产周期,并且可以降低成本。此外,无细胞蛋白表达技术也可以用于疫苗研发。比如疟疾疫苗研究开发昂贵又耗时,目前利用[/font][font=Calibri]WGE[/font][font=宋体]系统可加速疫苗研发,并建立高通量疟原虫抗体筛查系统。[/font][font=Calibri]Stark[/font][font=宋体]等利用大肠杆菌的便携式冻干裂解物再水化,[/font][font=Calibri]1h[/font][font=宋体]内合成高致病性病原体土拉弗朗西斯菌亚种的生物偶联疫苗,与工程菌生产的疫苗相比,其可引发更高水平的病原体特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]制药领域:是无细胞蛋白表达技术的一个重要应用领域。药物开发的成功率取决于药物分子对目标蛋白的亲和力,而目标蛋白对于专一的细胞表达系统和分类的组织或器官非常敏感。通过无细胞蛋白表达技术,研究人员可以在不依赖于细胞的情况下直接生产大量需要的蛋白质,为药物研发提供了更快更便捷的方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]基础研究领域:利用无细胞蛋白质合成系统可以直接对表达产物进行核磁共振分析,目前已确定了数千个蛋白质的结构。可以通过合成蛋白质建立蛋白质阵列,解开基因产物的功能;应用核糖体展示和 [/font][font=Calibri]mRNA [/font][font=宋体]展示技术,更有利于实现高通量筛选,全面深入研究基因特征和功能。通过无细胞蛋白表达技术可以实现对大型蛋白质的生产和分析,同时也为基础研究打开了新的研究领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州无细胞合成服务正在活动中,活动时间[/font][font=Calibri]2023[/font][font=宋体]年[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]月[/font][font=Calibri]23[/font][font=宋体]日[/font][font=Calibri]-12[/font][font=宋体]月[/font][font=Calibri]31[/font][font=宋体]日。有需求的可以咨询或者进入义翘神州网进行查看。更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/cell-free-protein-synthesis-service[/font][/font]
出现未知肽,是什么原因老师们好,我把酪蛋白用胰蛋白酶,酶切后,再通过载体分离的方法,分离出的多肽,有三条在库里边收不到,这是什么原因啊?
[font=宋体]在分子生物学和生物工程领域,蛋白表达载体构建是至关重要的技术之一,它涉及到将目的基因插入到适当的表达载体中,以便在宿主细胞内进行蛋白表达。这一过程不仅有助于研究基因的功能和蛋白质的结构,还为药物开发、基因治疗等领域提供了有力支持。本文将详细介绍蛋白表达载体构建的整个流程,包括目的基因的选择、载体的选择与改造、基因插入、转化、筛选与鉴定等关键步骤。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]蛋白表达载体构建流程:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]NCBI[/font][font=宋体]查找目的基因的[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列[/font][/font][font=宋体][font=宋体]进入[/font][font=Calibri]NCBI[/font][font=宋体](美国国家生物技术信息中心)的网站。[/font][/font][font=宋体]在搜索框中输入目的基因的名称或关键词。[/font][font=宋体][font=宋体]在搜索结果中找到[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Coding Sequence[/font][font=宋体])序列,通常会显示基因的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]序列。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]记录或复制所需的[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②选择合适的表达载体[/font][font=宋体]根据目的基因的性质和所需的表达水平,选择适合的表达载体。[/font][font=宋体]考虑载体的克隆容量、复制子类型、筛选标记等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③确定双酶切位点[/font][font=宋体]根据目的基因和载体,选择合适的双酶切位点。[/font][font=宋体][font=宋体]确保酶切位点在[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列和载体上都是独特的,避免切割其他部位。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][font=Calibri]Primer 5[/font][font=宋体]预测目的序列酶切位点[/font][/font][font=宋体][font=宋体]使用[/font][font=Calibri]Primer 5[/font][font=宋体]或其他相关软件,根据已知的[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列设计酶切位点的引物。[/font][/font][font=宋体]通过软件预测引物的特异性,确保它们仅与目的基因结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑤双酶切[/font][font=Calibri]buffer[/font][/font][font=宋体][font=宋体]根据选择的酶,准备相应的酶切[/font][font=Calibri]buffer[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]注意[/font][font=Calibri]buffer[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子浓度,确保酶的活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑥目的基因[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列引物设计[/font][/font][font=宋体][font=宋体]根据[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列,设计一对引物用于[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增目的基因。[/font][/font][font=宋体]确保引物的特异性,避免与其他基因序列发生非特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑦转化[/font][font=宋体][font=宋体]制备感受态细胞,使其处于易于接受外源[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的状态。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]将[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增得到的目的基因与载体混合,进行转化反应。[/font][/font][font=宋体]将转化后的细菌在选择培养基上培养,筛选含有重组载体的阳性克隆。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑧双酶切及鉴定[/font][font=宋体][font=宋体]提取阳性克隆的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体]使用设计的引物进行双酶切反应。[/font][font=宋体]对酶切产物进行电泳分析,观察是否获得预期的片段,并进行凝胶回收。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑨测序[/font][font=宋体]将回收的酶切产物进行序列测定。[/font][font=宋体][font=宋体]对比测序结果与目的基因的[/font][font=Calibri]CDS[/font][font=宋体]序列,确保没有突变或错误。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑩阳性菌落扩大培养,用于后期蛋白纯化研究[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择测序正确的阳性菌落进行扩大培养。[/font][font=宋体]在摇瓶或发酵罐中进行高密度培养,为后续的蛋白表达提供充足的原料。[/font][font=宋体]在确定目的基因在载体上正确表达后,可以进行蛋白纯化研究。[/font][font=宋体]通过适当的纯化技术,如亲和层析、离子交换等,分离和纯化目的蛋白。[/font][font=宋体]对纯化的蛋白进行质量分析和功能研究。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]综上所述,蛋白表达载体构建是一个系统性的过程,涉及到多个关键步骤和复杂的技术操作。通过遵循这一流程,研究人员能够成功地在宿主细胞内表达所需蛋白,并进一步对其进行分析和功能研究。随着生物技术的不断发展,蛋白表达载体构建的应用领域将越来越广泛,为人类对生命现象的深入理解和疾病的防治提供更多可能性。因此,不断优化和完善这一技术对于生命科学领域的发展至关重要。更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]蛋白表达生产[/b][/url]详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]
为什么红外光谱测定液体或固体样品是为什么常用溴化钾氯化钠这样的纯净晶体物做载
下 列 何 种 微生物培养时会产生β-溶血环现象( )。A :肺炎链球菌 B :军团菌 C :乙型溶血性链球菌 D :肺炎支原体正确答案:C答案公布后,请勿再作回答,谢谢合作!
[align=center][size=18px][/size][/align][align=center][b][font='Arial',sans-serif][color=#548DD4]#[/color][/font][font=等线][color=#548DD4]每日一篇分享一篇解决方案:[/color][/font][/b][/align][align=center][b][font=等线][color=#548DD4]今日行业领域:石油[/color][/font][font='Arial',sans-serif][color=#548DD4]/[/color][/font][font=等线][color=#548DD4]化工[/color][/font][/b][/align][b][color=#9999ff]如何用生物显微镜观察药物晶体[/color][/b]一、生物显微镜应用在药物领域能观察什么物质药物晶体:生物显微镜可以观察和研究药物中的晶体结构。这对于药物的物理性质、稳定性和溶解性等方面的研究非常重要。细胞结构:生物显微镜可以观察和研究药物中的细胞结构,包括细胞核、细胞质、细胞器等。这对于了解药物的组成和作用机制非常重要。细菌和真菌:生物显微镜可以观察和鉴定药物中的细菌和真菌。这对于评估药物的微生物污染情况以及对药物的杀菌效果进行研究和监测非常关键。病原体:生物显微镜可以观察和鉴定药物中的病原体,如病毒、寄生虫等。这对于药物的疾病治疗效果评估和病原体的研究具有重要意义。药物颗粒:生物显微镜可以观察和分析药物中的颗粒,如微粒、纳米颗粒等。这对于药物的制备工艺、释放特性和药效等方面的研究具有重要意义。药物载体:生物显微镜可以观察和研究药物中的载体材料,如纳米粒子、聚合物等。这对于药物的控释特性、靶向性和药物传递等方面的研究非常关键。通过生物显微镜的应用,可以对药物的微观结构和性质进行观察和分析,为药物研发、质量控制和治疗效果评估提供重要的信息。二、如何运用生物显微镜观察药物晶体要观察药物晶体,可以按照以下步骤使用生物显微镜:准备样品:将药物晶体制备成适当的样品。可以将药物晶体直接放置在载玻片上,或者将其溶解在适当的溶剂中后滴在载玻片上。调整显微镜参数:将载玻片放置在生物显微镜的样品台上,调整显微镜的参数,如聚焦、光源亮度、放大倍数等,以获得清晰的图像。选择合适的放大倍数:根据药物晶体的大小和细节,选择合适的放大倍数。开始时可以选择较低的放大倍数,然后逐渐增加放大倍数以观察更详细的细节。观察和记录:通过显微镜观察药物晶体的形状、大小和结构。可以使用相机或者计数器来辅助记录。同时,可以通过调整焦距和光源角度来改善图像的清晰度和对比度。分析和测量:根据观察到的药物晶体图像,可以进行进一步的分析和测量。例如,可以测量晶体的尺寸、形状参数,或者使用显微镜图像分析软件进行晶体图像处理和测量。需要注意的是,药物晶体可能具有不同的形态和晶体结构,因此在观察时应注意选择典型的晶体区域进行观察。此外,一些药物晶体可能在常温下易溶解,因此在观察前可能需要采取适当的保护措施,如使用显微镜温台或封闭载玻片等。[align=center][img]https://img0.baidu.com/it/u=3594765546,1888245350&fm=253&fmt=auto&app=138&f=JPEG?w=500&h=516[/img][/align][font='宋体']三、药物晶体的分析执行标准包括以下几个方面:[/font][font='宋体']纯度分析:对药物晶体的纯度进行检验,包括有机杂质、无机杂质、水分等的含量分析。[/font][font='宋体']结晶性质分析:对药物晶体的结晶性质进行评估,包括晶体形态、晶体尺寸、晶体形貌等的表征。[/font][font='宋体']结晶度分析:对药物晶体的结晶度进行检验,包括晶体的结晶度、结晶速度等的测定。[/font][font='宋体']热性质分析:对药物晶体的热性质进行评估,包括熔点、热分解温度、热容等的测定。[/font][font='宋体']光学性质分析:对药物晶体的光学性质进行检验,包括吸收光谱、荧光光谱等的测定。[/font][font='宋体']结构分析:对药物晶体的晶体结构进行解析,包括X射线衍射、核磁共振等的测定。[/font][font='宋体']总之,通过生物显微镜的应用,可以观察和分析药物晶体的形态、结构和特征,为药物的物理性质、稳定性和溶解性等方面的研究提供重要的信息。[/font][font='宋体']在国货崛起的今天,[/font][font='宋体']徕[/font][font='宋体']科光学研发的各种型号的生物显微镜已经被越来越多的高校、研究所、科研单位、企业所运用,并且已成为各客户在研究工作中的主流设备产品,这些设备所呈现出的效果与进口设备的毫无差别,但其价格仅为进口设备的三分之一左右,依靠着科技感和[/font][font='宋体']创新感双强[/font][font='宋体']的研发力量,可以根据不同客户的需求定制出高性价比的产品方案、内核稳定的售后方案,更加直接且高效地为客户做好售前、售中、售后服务保障。[/font][font='宋体']徕[/font][font='宋体']科光学研发的各种型号的生物显微镜已不仅仅是已经是当下最流行且性能稳定的国际大品牌“平替”产品,其已经成为了行业最受欢迎的TOP明星产品。[/font][font='宋体'][size=20px][color=#4f5862]产品配置单:[/color][/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310161108245283_6991_5996718_3.png[/img][/align][align=center][url=https://www.instrument.com.cn/show/C532699.html][font='宋体']生物显微镜LK-83[/font][/url]([url=https://www.instrument.com.cn/netshow/SH101998/][size=14px]天津[/size][size=14px]徕[/size][size=14px]科光学仪器有限公司[/size][/url])[/align][align=left][url=https://www.instrument.com.cn/application/Solution-947254.html][font='宋体'][size=16px]点击这[/size][/font] [font='宋体'][size=16px]里[/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]浏览[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]或[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]下载原[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]文档,更多解决方案内容请浏览[/color][/size][/font][url=http://www.instrument.com.cn/application/][font='宋体'][size=16px][color=#0081d7]行业应用[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]栏目:[/color][/size][/font][/align][align=left][url=http://www.instrument.com.cn/application/][font='宋体'][color=#0081d7][back=#ffffff]http://www.instrument.com.cn/application/[/back][/color][/font][/url][font='宋体'][color=#000000]行业应用栏目简介:[/color][/font][font='宋体'][color=#000000] [/color][/font][font='宋体'][color=#000000] 【行业应用】[/color][/font][color=#333333]是仪器信息网[/color]专业的行业导购平台。汇聚了行业内国内外主流厂商的优质解决方案及相应的仪器设备。建立了兼顾国家相关规定和用户习惯的专业分类,涉及食品、药品、环境、石化等二十余个使用仪器相对集中的行业领域。并以样品和标准为主线,为用户查找仪器提供一个独特的维度,也为仪器产品提供一个全新的展示渠道。[/align]
1、C反应蛋白概述 1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现一种物质,能在钙离子存在时与肺炎球菌C-多糖起沉淀反应,随后证实这种能与C-多糖反应的物质是一种蛋白质,因而将这种蛋白质命名为C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)。 CRP是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性相蛋白(注:急性时相反应包括感染、炎症及创伤时某些血清蛋白浓度的变化,这些蛋白除CRP外,还包括血清淀粉样蛋白A、纤维蛋白原、触珠蛋白、α1酸性糖蛋白、铜蓝蛋白、α1抗胰蛋白酶等。其中CRP在健康人血清中浓度<5mg/L,而在细菌感染或组织损伤时,浓度可升高上千倍,循环中的CRP半衰期为19小时,故被认为其最有价值),由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体,这一特征性结构使其归类于五聚素(一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白)家族。CRP是机体非特异性免疫机制的一部分,它结合C-多糖,在Ca2+存在时可结合细胞膜上磷酸胆碱,可激活补体的经典途径,增强白细胞的吞噬作用,调节淋巴细胞或单核/巨噬系统功能,促进巨噬细胞组织因子的生成,在动脉粥样硬化斑块中也可检测到CRP。 人CRP主要生物学功能: 通过与配体(凋亡与坏死的细胞,或入侵的细菌、真菌、寄生虫等的磷酰胆碱)结合,激活补体和单核吞噬细胞系统,将载有配体的病理物质或病原体清除。 (1)识别外来物质,激活补体系统; (2)增强条理作用,增强吞噬细胞吞噬作用; (3)与血小板激活因子(RAF)结合,降低炎症反应; (4)与染色体结合,消除坏死组织里的细胞DNA。
载体(也称担体)一般是化学惰性的多孔微粒。特殊载体如玻璃微珠,是比表面积大的化学惰性物质,但并非多孔。固定液分布在载体表面,形成一均匀薄层,构成气-液色谱的固定相。 1. 对一般载体的要求 ① 比表面积大,孔穴结构好;② 表面没有吸附性能(或很弱);③ 不与被分离物质或固定液起化学反应;④ 热稳定性好,粒度均匀,有一定的机械强度等。 2. 载体的分类 载体可分为两大类:硅藻土型载体和非硅藻土型载体。硅藻土型载体是天然硅藻土经煅烧等处理而获得的具有一定粒度的多孔性固体微粒。非硅藻土型载体种类不一,多用于特殊用途,如氟载体、玻璃微珠及素瓷等。 3. 硅藻土型载体 硅藻土型载体是将天然硅藻土压成砖型,在900℃煅烧后粉碎、过筛而成。⑴红色硅藻土载体:硅藻土与粘合剂直接煅烧而成。因煅烧后天然硅藻土中所含的铁形成氧化铁,而使载体呈淡红色,故称红色载体。红色载体表面孔穴密集,孔径较小,平均孔径为1um,比表面积约为4.0m2/g,机械强度高,但吸附性较强,这种载体常与非极性固定液配伍。 ⑵白色硅藻土载体:煅烧前在原料中加入少量助熔剂,如碳酸钠,煅烧后生成了无色的铁硅酸钠络合物,而使硅藻土呈白色。其颗粒疏松,表面孔径较粗,约8~9um。比表面积只有1.0m2/g,吸附性能弱,常与极性固定液配伍。 4. 载体的纯化 钝化是除去或减弱载体表面的吸附性能。 以硅藻土型载体为例,表面存在着硅醇基及少量的金属氧化物,常具有吸附性能。当被分析组分是能形成氢键的化合物或酸碱时,则与载体的吸附中心作用,破坏了组分在气-液二相中的分配关系,而产生拖尾现象,故需将这些活性中心除去,使载体表面结果钝化。钝化的方法有:酸洗、碱洗、硅烷化及釉化等。酸洗能除去载体表面的铁、铝等金属氧化物。酸洗载体用于分析酸类和酯类化合物。碱洗能除去表面的氧化铝等酸性作用点,碱洗载体适用于分析胺类等碱性化合物。硅烷化是将载体与硅烷化试剂反应,除去载体表面的硅醇基,消除形成氢键的能力。硅烷化载体主要用于分析具有形成氢键能力较强的化合物,如醇、酸及胺类等。
[color=#333333]植物甾醇能够抑制胆固醇的吸收,从而降低胆固醇。植物甾醇广泛存在于油脂和植物性食物中,例如米糠油、玉米油、芝麻油、蔬菜、水果、豆类、坚果及谷物。[/color]
[b]美国科学家制造出完全由[back=yellow][color=#ee6600]人造基因[/color][/back]控制的单细胞细菌[/b][url=http://news.qq.com/a/20100522/000019.htm][img]http://img1.gtimg.com/news/pics/hv1/172/177/528/34378507.jpg[/img][/url]20日,美国科学家宣布世界首例人造生命———完全由[back=yellow][color=#ee6600]人造基因[/color][/back]控制的单细胞细菌诞生,并将它命名为“人造儿”。这项具有里程碑意义的实验表明,新的生命体可以在实验室里“被创造”,而不是一定要通过“进化”来完成。[b]“一个新时代到来”[/b]这项研究由美国基因遗传学顶尖科学家克莱格凡特主持,历时10多年,耗资超过4000万美元。研究团队共有20多位科学家。名为“人造儿”的人造细菌内核是移植于实验室、完全人工合成的基因组。凡特博士表示这意味着“一个新时代的到来”。科学家们首先选取一种名为丝状支原体的细菌,对其基因组进行解码并复制,产生人造的合成基因组。然后,将[back=yellow][color=#ee6600]人造基因[/color][/back]组移植入另一种称为山羊支原体的细菌,通过分裂和增生,细菌内部的细胞逐渐为[back=yellow][color=#ee6600]人造基因[/color][/back]所控制,最终成为一种全新的生命。在培养皿中,合成细菌的分裂等行为就像天然细菌一样。科学家们在“人造儿”DNA上写入4个“水印序列”,使其有别于同类的天然细菌,以及在这种生物的后代中识别它的“祖先”。“当带着水印的细胞活了过来,我们欣喜若狂,它是一个活生生的生物了,成为了我们地球上各种生命的一部分。”凡特博士说。[b]应用前景广阔[/b]尽管这种技术目前仍处于实验阶段,但研究人员相信其运用前景广阔。研究小组计划,先合成出可供生命存在的最小数量的基因,然后通过向其中弥补其他基因,制造一系列新的微生物,比如可生产生物燃料的细菌、有用的药品、可以从空气中吸收二氧化碳和其他污染物的细菌或是制造合成疫苗所需的蛋白质。[b]人造生命原理图示[/b]1. 科学家选取一种名为丝状支原体的细菌,将它的染色体解码。然后利用化学方法一点一点地重新排列DNA。2. 将重组的DNA碎片放入酵母液中,令其慢慢地重新聚合。3. 将人造DNA放入另外一个受体细菌中。通过生长和分离,受体细菌产生两个细胞,一个带有人造DNA,另外一个带有天然DNA。4. 培养皿中的抗生素将带有天然DNA的细胞杀死,只留下人造细胞不断增生。5. 几个小时之内,受体细菌内原有DNA的所有痕迹全部消失,人造细胞不断繁殖。新的生命诞生了。[b]■ 链接[/b][b]反对者称“打开潘多拉魔盒”[/b]“创造生命”再次激起了古老的争论:人类是否可以扮演上帝的角色?英国牛津大学的伦理学教授朱利安萨乌莱斯库认为:“凡特推开了人类历史上最重要、最基础的那扇大门———窥视生命的本质。他直接扮演了上帝的角色———创造出自然界原本不存在的新生命。”一个名为“人类基因学警告”的团体负责人戴维金说:“凡特的研究无异于打开了潘多拉的魔盒。”反对者认为,人造的有机体如果扩散到自然界,引发生物基因变化,有可能造成环境灾难,它们还有可能被用来制造生物武器。
[b]甾体化合物的分离[/b][list=1][*]写在前面 多年前,绿百草在成都组织的一场推荐会中。某位研究所的大牛(时间太久远,恕我记不到名字)分享了一个甾体色谱分离的案例,他说在液相分离甾体的时候甲醇的分离能力较乙腈好很多,说是他们从乙腈里面的一个单峰中分离得到了四个化合物。当时只是当作奇闻一样的听下来。后来明白这只是溶剂的选择性。但是随着工作的深入,发现甾体有着一些特殊的液相色谱保留行为。下面以5α-Androst-2-ene-17-one的杂质5α-Androst-3-ene-17-one来阐述这一类的甾体化合物的分离特性[*]5α-Androst-2-ene-17-one的合成[img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/a26Yv57xgWd2wU4feksUmKG32c8vDLnLWSLk3xviaRDzNP3lDHEhMQFb8YpBA6UH7Ekol23xn1ibaJuDHlYgGqhw/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img]雄甾时一类激素,但是在该类成分的合成中,由于消除反应的选择性,往往会得到副产物1,在不同的合成途径中还会得到[img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/a26Yv57xgWd2wU4feksUmKG32c8vDLnLftjYo0YE9ibbWr8N03ebcolAUV2YN7Z9GzqB2Qlz9JWdseaOREE1sOw/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img]对于雄甾的非对应异构体分分离,可以通过常规的色谱分析方法解决,对于副产物和雄甾可以通过[color=#222222]CN106990186 A专利方法执行[/color][*]5α-Androst-3-ene-17-one的检测[/list][list][*] 5α-Androst-3-ene-17-one纯度检测色谱柱:Inertstil AQ-C18(250*4.6mm,5um)色谱方法:流速 1.0ml/min;柱温:室温[*][table][tr][td=1,1,184] [/td][td=1,1,184]甲醇[/td][td=1,1,184]水[/td][/tr][tr][td=1,1,184]0[/td][td=1,1,184]70[/td][td=1,1,184]30[/td][/tr][tr][td=1,1,184]40[/td][td=1,1,184]100[/td][td=1,1,184]0[/td][/tr][/table][/list][img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/a26Yv57xgWd2wU4feksUmKG32c8vDLnLRcicpia5dRBlfibib8rUjJpzEzGxqmuzNwInjIiaLpceqYDj79geryKmiaFg/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img]虽然在C18上检测纯度尚可,但是在衍生中我们发现在目标成分旁边多一色谱峰(以前从未见过)。因此我们怀疑该物质的纯度不足。考虑到PFP对于异构体有特殊的分离能力,因此我们尝试了PFP的分离[list][*]PFP 检测色谱柱:welch PFP(250*4.6mm,5um)色谱条件:甲醇:水=70:30;柱温:室温[*][img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/a26Yv57xgWd2wU4feksUmKG32c8vDLnLa56Y9RDI279aiahdOMFe13jBAwYwqOFB4UD4JdjDXTswnwgUxBbmQUQ/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img]出乎预料的是,该组分中并不只有两个化合物,而是至少三个。我们通过对照品定位,可以明确第二个化合物是目标产物。[/list]4. 结论 甾体化合物的色谱分离性质,与大部分差异较大,因此需要注意流动相的选择性以及色谱柱的选择性
[back=linear-gradient(to right, rgba(111, 75, 250, 0.12), rgba(111, 75, 250, 0.12)) center bottom / 100% 12px no-repeat]海洋沉积物检测常规指标[/back]主要包括以下几类: 重金属:包括铜、铅、锌、镉、铬、汞、砷等,这些重金属是常见的污染物,对海洋生物和人类健康构成威胁。 石油类:石油污染是海洋污染的一个重要来源,包括石油烃等。 DDT和多氯联苯:这些有机污染物对海洋生态系统有长期影响。 硫化物和有机碳:这些指标反映了沉积物的有机污染程度。 粒度:沉积物的粒度分布对其物理性质和生态功能有影响。 总磷和总氮:这些指标反映了沉积物的营养化程度,过高的磷和氮含量可能导致富营养化问题。 色(嗅、结构)、大肠菌群、粪大肠菌群、病原体:这些指标反映了沉积物的卫生状况,对人类健康有影响。 氧化还原电位:反映了沉积物的氧化还原状态,对沉积物中的生物和化学反应有影响。 此外,根据不同的监测目的,还可能包括其他特定的监测项目和时间频次。例如,近岸海洋沉积物的例行监测中,除了上述常规指标外,还包括总磷、总氮等必测项目,以及选测项目如废弃物、色(嗅、结构)、大肠菌群、粪大肠菌群、病原体、氧化还原电位、沉积物类型等。这些指标的选择和监测频率的确定,旨在全面评估海洋沉积物的质量状况,以及其对海洋环境和人类健康的影响。