柱黄曲霉

代版友问:黄曲霉M1测定，需要一种免疫亲和小柱，手里有一种测黄曲霉总量的小柱，能不能代替呢？

请教各位,我要用HPLC分析黄曲霉毒素,从前用的前处理柱是维康(vicam,今年被Waters收购了)的.现在我要购买一批新的前处理柱,但是不知道这个处理黄曲霉毒素的是什么型号的.如果有人知道这个,麻烦告诉一下啊.多谢了

请问有谁知道测黄曲霉毒素所需的硅胶柱规格和价格是多少

刚接触做黄曲霉毒素，只知道毒性很大。请问做黄曲霉毒素检测时应注意哪些问题？

柱后衍生的福音——黄曲霉毒素光化学衍生器黄曲霉毒素（AFT）B1和G1显示天然荧光性，因此B1和G1在检测之前必须进行衍生。传统的电化学衍生费时费力，应用的化学药品不仅会腐蚀色谱仪而且对操作人员有毒副作用，黄曲霉毒素光化学衍生器（Pribolab® MDU）是一款新型的柱后衍生器，尤其适用于当前较为流行的UPLC。该方法结果与电化学方法一致但其不使用任何腐蚀性试剂，HPLC的使用寿命将会增加，且不需要额外的清理工作，更加省时省力省心。黄曲霉毒素光化学衍生器实现了对黄曲霉毒素在线衍生和检测，有效提高检测效率，准确性，检测灵敏度以及重复性，此方法已被AOAC认可。

各位大侠，我在用柱前衍生，高效液相做黄曲霉检测时，回收率只有百分之七十多，这样子能接受么？请问有用液相，柱前衍生做黄曲霉的前辈，你们的回收率是多少呀？我是用免疫亲和柱净化后再衍生的，能指点一下检测黄曲霉有那些地方是比较关键的控制点么？帮忙提高一下回收率，谢谢

食用油中黄曲霉毒素B1的柱前衍生法怎么也做不好，回收只有20%，找不到原因，有做过的吗？具体方法：称取油样5g，加入84+16乙腈-水20毫升浸泡过夜，次日超声20min，离心5min，取上清液过黄曲霉专用柱，取净化液2毫升，氮吹，吹干后，加入正己烷0.6毫升，三氟乙酸0.3毫升，混匀，40度烘箱衍生15min，取出氮吹，吹干后1毫升15+85乙腈+水定容，上机测定。

刚接触做黄曲霉毒素，只知道毒性很大。请问做黄曲霉毒素检测时应注意哪些问题？

请教黄曲霉毒素检测用M226柱开苞以后怎么保存，我这里发现好几根溶剂没有，溶剂过一下柱子就有黄曲霉毒素了。

测黄曲霉B1的价格可以抱着住成本吗

最近看报纸上报到这方面的问题比较多，感觉将黄曲霉和黄曲霉毒素混为一谈，还说巴氏杀菌不能杀死黄曲霉毒素，哎我个人理解，黄曲霉是一种霉菌，是微生物，黄曲霉毒素是由其产生的一种真菌毒素，是一种化学物质，怎能用杀菌去杀死化学物质呢？

一、背景信息　　近日，媒体曝光了广西梧州和广东肇庆两地市场所出售的部分散装花生油存在黄曲霉毒素超标情况。黄曲霉毒素是什么?毒性怎样?本期将为您解读。　　二、专家解读　　(一)黄曲霉毒素的污染在世界范围内广泛存在。　　黄曲霉毒素(Aflatoxin，AF)最早被发现于1960年，是黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillusparasiticus)的次级代谢产物，目前已分离鉴定出12种以上，常见的有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、B2a、G2a、BM2a和GM2a等。黄曲霉毒素的热稳定性非常好，常规烹调和加热法不易分解。　　世界范围内黄曲霉毒素的污染相当广泛，包括谷物、坚果和籽类以及牛乳等，尤以玉米、花生被污染的程度最严重。其主要原因是食物在田间未收获前被黄曲霉等产毒菌浸染，在适宜的气温和湿度等条件下繁殖并产毒，或未经充分干燥，在储藏期间产生大量毒素。食用油也存在容易受黄曲霉毒素污染的问题，但通过原料筛选、碱炼、吸附等控制手段可以使成品油中黄曲霉毒素降到非常低的水平。　　(二)摄入量决定黄曲霉毒素是否引起急性中毒。　　世界范围内曾报道数起人类的黄曲霉毒素急性中毒，如非洲的霉木薯饼中毒，印度的霉玉米中毒等。2004-2005年肯尼亚暴发了迄今史上最大规模的黄曲霉毒素急性中毒事件，中毒千余人，死亡125人，中毒玉米中检出黄曲霉毒素B1的含量高达4400ppb(μg/kg)，是罕见的黄曲霉毒素中毒事件。黄曲霉毒素中毒的症状一般为一过性发烧、呕吐、厌食、黄疸、腹水、下肢浮肿等肝中毒症状，严重者出现暴发性肝功能衰竭、死亡。　　根据我国及世界其他国家的标准规定，黄曲霉毒素的含量如果在安全限量范围之内，并不会对消费者的健康构成风险。　　(三)全球已高度重视对食品中黄曲霉毒素的控制。　　黄曲霉毒素B1是影响人和动物健康的主要真菌毒素之一，也是全球食品安全控制中最主要的真菌毒素。2003年联合国粮农组织(FAO)发布的全世界食品和饲料真菌毒素法规报告中显示，除国际食品法典委员会(CAC)的规定以外，全球100多个国家和地区制定了各类食品中黄曲霉毒素限量标准。食品中黄曲霉毒素B1的限量范围为1-20ppb，黄曲霉毒素总量(AFB1、B2、G1、G2)的限量范围为0-35ppb。　　2011年我国发布的《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》(GB2761-2011)中规定花生及其制品中黄曲霉毒素B1的限量为20ppb。　　(四)“土榨油”看似原生态实存安全隐患。　　近年来，“纯天然”和“原生态”成为部分消费者的追求，除了购买“土榨油”外，也有使用家用榨油机自制油的方式。对于这两种榨油方式，专家认为存在较大安全隐患。除了原料品质是否过关的问题，“土榨油”或自榨油还存在下列问题：未经过精炼加工，杂质多，易氧化变质;榨油设备不易彻底清洗干净，残留的油渍及谷物残渣在氧化后会产生霉变，食品安全隐患很大;此外，资源利用率低，会造成很大浪费。　　三、专家建议　　(一)科研人员应加大“从田间管理到加工过程”对黄曲霉毒素污染及控制手段的研究力度，为保证食品安全提供更加有效的科技支撑。　　(二)以玉米、花生等为主要原料的食品生产、加工企业，特别是“土榨油”生产作坊，应严格执行食品安全国家标准和相关技术规范，积极采取有效措施，重视原料安全，严格把关每一个生产环节，确保产品的质量和安全。　　(三)媒体应注重全面、科学、客观报道，采用相应领域权威专家的专业观点，以正确解读国家相关标准法规，引导消费者理性认识和理解黄曲霉毒素的危害，避免公众过度恐慌。　　(四)消费者应注意培养良好的消费习惯，注意产品的标签、标识，做到在保质期内妥善储藏。特别应注意通过正规可靠渠道购买食用油，不要片面迷信“纯天然”和“原生态”制品。来源：国家食药监局

什么是黄曲霉毒素[color=#85624b]黄曲霉毒素是主要由黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率较高。[/color][color=#85624b]B1 、B2和G1、G2，就是经常经常出现在农产品中的黄曲霉毒素的代表，毒性较强的排行“B1”，B表示蓝色，因为它在紫外光的照射下会发出蓝色荧光。[/color][color=#85624b]除了亲兄弟B2之外，它还有堂兄弟G1和G2，因为在紫外光下发射黄绿色荧光而得名。[/color][color=#85624b][b]为什么要检测黄曲霉毒素[/b][/color][color=#85624b][b][color=#85624b]当人摄入大量的黄曲霉毒素时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。[/color][color=#85624b]当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。[/color][color=#85624b]AFT的致癌力也居首位，是目前已知致癌物之一。[/color][/b][/color][color=#85624b][b][color=#85624b][b]方法简介[/b][/color][/b][/color][color=#85624b][b][color=#85624b][b][color=#85624b]本方法是采用免疫亲和柱净化，液相色谱荧光检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，严格按照2015版药典相关要求，此法适用于各种中药材、饲料、食品等几十种黄曲霉的检测。[/color][/b][/color][/b][/color]

检测黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2时，样品前处理均要使用到免疫亲和柱，查了下月旭的免疫亲和柱有如下的几种：黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2：免疫亲合柱（Welchrom®Aflatoxin G1 G2 B1 B2 货号：01140-00031 ） 免疫亲和柱：Welchrom® Immunoaffinity Column (3 mL) （以下部分简写为Welchrom® IAC）（中药材） Welchrom® Aflatoxin M1乳制品中M1： 黄曲霉毒素免疫亲和柱：Welchrom® IAC (1ml，25支[/si

黄曲霉的生长条件是什么？它容易在哪些食品里面滋生？在什么情况下会产生黄曲霉毒素？ 黄曲霉是一种容易在种子类食物中滋生的霉菌。在25-30℃的温度下，80%-100%的相对湿度，17%-18%的种子水分含量，粮食、坚果、油籽等产品最容易滋生黄曲霉。幸好，各种豆类，包括大豆，并不是黄曲霉喜欢繁殖的材料，它更喜欢花生、玉米和大米等食品。 从这里可以看出，黄曲霉是粮食、豆类、油籽等种子类食品受潮时滋生的，种子总体而言仍然处在水很少的状态，而不是已经充分吸水的状态。人们都有一个经验：水汪汪的大米粥、绿豆汤，从来不会长霉，而是很快变味坏掉——因为水多的时候细菌繁殖非常快，根本轮不到霉菌繁殖。霉菌们所热爱的培养基质，大多是一些相对“干”一点，但又干得不够的食品，比如馒头啊，面包啊，糕点啊，受潮的种子之类。所以，面包放久之后会长出白色、绿色、黑色的霉斑，却不会发酸变臭，正是因为它的状态符合霉菌的胃口。 为什么呢？因为霉菌是非常喜欢氧气的，具有较强的“陆生”特性。如果把食品泡在水里，氧气不足，它们就很难繁殖起来。知道这个微生物学的基本知识，就会明白，霉菌几乎不能在淹水条件下产毒，所以泡豆子不可能长出黄曲霉毒素来。 所以说，买大豆的时候，要注意大豆的干燥程度，储藏中也要避免让它受潮。如果担心豆子在储藏当中被黄曲霉污染，那么先用水泡一泡，然后把泡豆水扔掉，实际上反而更为安全。 事实上，绝大部分豆制品加工时，都需要经过泡豆程序。不管是煮豆粥，做豆腐，做纳豆，或做豆酱等。所谓泡豆带来致癌危险，纯属违背科学常识的不实说法，大可不必为此惶恐不安，更不必为此不敢喝豆浆、不敢吃豆腐。 需要注意的是，在夏天泡豆子，如果超过4小时，最好能放在冰箱当中。因为泡豆的水分很高，很容易繁殖各种细菌。细菌不会产生黄曲霉毒素，却可能让豆子产生难闻的味道。如果不幸污染了某些致病菌，它们繁殖过度，或产生细菌毒素，都可能引起胃肠道疾病。尽管在打豆浆、做豆腐时还需要经过加热杀菌，也不可不防啊！

黄曲霉毒素是天然存在的霉菌产生的一种毒素，已经被证明对人体容易产生癌症，是一类致癌物质。美国联邦政府有关法律规定人类消费食品和奶牛饲料中的黄曲霉毒素含量不能超过20ppb，人类消费的牛奶中的含量不能超过0.5ppb。而其它动物饲料中的含量不能超过300ppb。黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素 M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，薄层层析法(TLC)，酶联免疫法（ELISA）等。而使用黄曲霉毒素M1 免疫亲和柱则能够快速而准确的提纯纯化并浓缩样品中黄曲霉毒素M1组分，使得后面的分析更加轻松简单。PriboFast黄曲霉毒素总量亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素（B1,B2,G1,G2），从而对黄曲霉毒素总量（B1,B2,G1,G2）样品起到非常针对性的纯化作用，过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素总量（B1,B2,G1,G2）含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。PriboFast黄曲霉毒素总量亲和柱用于定性、定量检测谷物、副食品、酒类等食品和饲料等样本中的黄曲霉毒素总量（B1,B2,G1,G2）时的样品前处理。柱容量：≥200ng 回收率：80-90%可用于快递纯化检测牛奶，奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1。

[color=#333333]黄曲霉素（[/color][color=#333333]AFT[/color][color=#333333]）是由黄曲霉和寄生曲霉产生的次生代谢产物，它们是一类结构相似的化合物，已知的种类包括[/color][color=#333333]B1[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]B2[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]G1[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]G2[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]G2a[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]M1[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]M2[/color][color=#333333]、[/color][color=#333333]P1[/color][color=#333333]等十几种。由于不同种类的黄曲霉素的形成条件不同，所以来源分布和毒性也不同。其中最受关注的黄曲霉素[/color][color=#333333]M1[/color][color=#333333]是由动物摄入[/color][color=#333333]B1[/color][color=#333333]后在体内经一系列的化学变化而形成的，而[/color][color=#333333]B1[/color][color=#333333]是自然界中最为常见、毒性最强的一种，仅次于[/color][url=http://www.labtool.net/products.php?cid=157][color=#3f88bf]肉毒毒素[/color][/url][color=#333333]。[/color][color=#333333][/color][color=#333333]黄曲霉无处不在，是我国粮食和饲料中常见的真菌，对食品和饲料污染的发生和程度随地理和季节因素以及作物生长、收获、贮存的条件不同而异。当粮食未能及时晒干及储藏不当时往往容易被黄曲霉或寄生曲霉污染而产生此类毒素，而南方及沿海湿热地区更有利于霉菌素的产生。[/color][color=#333333][/color][color=#333333]黄曲霉素主要存在于被[/color][url=http://www.labtool.net/products.php?cid=157][color=#3f88bf]黄曲霉菌[/color][/url][color=#333333]寄生过的的粮食、油及其制品中，如粮食、油料、水果、干果、调味品、乳和乳制品、蔬菜等，在动物性食品如肝、肾脏、咸鱼中以及奶和奶制品中也比较常见。它通常喜欢[/color][color=#333333]“[/color][color=#333333]亲近[/color][color=#333333]”[/color][color=#333333]以下四类食物：[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、坚果类[/color][color=#333333]花生、核桃、瓜子、开心果、榛子、松仁等。当你发现花生、瓜子、榛子、松仁等果仁轻微变黄甚至发黑、味苦，皱皮变色，看起来有霉变之嫌时，很有可能已被黄曲霉素污染了，一定要丢弃。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、谷物类[/color][color=#333333]玉米、大米、大麦、小麦、豆类。凡表面上长有黄绿色霉菌或破损、皱缩、变色、变质的谷物都有可能被黄曲霉素污染，在食用前应仔细挑选，剔除霉变粒。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、粮油制品[/color][color=#333333]花生油、玉米油。生产企业如果没有严格挑拣原料，使用霉化的花生、菜籽、玉米等生产食用油，或没有采用精炼工艺或工艺控制不足，都有可能造成黄曲霉素超标。[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、家庭自制[/color][url=http://www.labtool.net/products.php?cid=157][color=#3f88bf]发酵食品[/color][/url][color=#333333] [/color][color=#333333]腐乳、黄酱。高水分含量和齐全的营养物质很容易使家庭自制的[/color][url=http://www.labtool.net/products.php?cid=157][color=#3f88bf]发酵食品[/color][/url][color=#333333]被黄曲霉污染。[/color][color=#333333]黄曲霉素的耐热性非常好，要在[/color][color=#333333]280[/color][color=#333333]℃[/color][color=#333333]以上才能分解，一般的烹调加工温度都不能将其破坏，而且其在水中的溶解度也较低。有研究证明：在不改变牛奶品质的前提下，先将鲜奶加热至[/color][color=#333333]90[/color][color=#333333]℃[/color][color=#333333]保持[/color][color=#333333]10[/color][color=#333333]分钟，然后冷却至[/color][color=#333333]20[/color][color=#333333]℃[/color][color=#333333]，再经紫外线辐照[/color][color=#333333]30[/color][color=#333333]分钟，才能使其中的黄曲霉素[/color][color=#333333]M1[/color][color=#333333]减少[/color][color=#333333]56.2%[/color][color=#333333]。[/color][color=#333333][/color][color=#333333]在紫外线照射下，毒素可显示荧光，低浓度的纯毒素易被紫外线破。另外，碱性条件下也能破坏一部分黄曲霉素。然而经过碱性、紫外线和高温处理，食物中的营养物质早已丧失殆尽，不适宜食用[/color][color=#333333]预防黄曲霉素的危害要从身边做起、从饮食习惯做起，从生活中的点滴做起，才能使我们更好地远离黄曲霉素。那么，在日常生活中如何应对可能的黄曲霉素的危害呢？[/color][color=#333333]黄曲霉素在日常生活中无处不在，自己在家也要把好食物关，注意一些细节，避免黄曲霉素的危害。[/color][color=#333333][/color][color=#333333]黄曲霉生长产毒的温度范围为[/color][color=#333333]12~42[/color][color=#333333]度，最适产毒温度为[/color][color=#333333]33[/color][color=#333333]度，在潮湿的气候条件下，含水量大于[/color][color=#333333]14%[/color][color=#333333]的花生、大米、玉米、坚果尤其容易滋生黄曲霉菌，一般[/color][color=#333333]3~10[/color][color=#333333]天就可达到致命剂量。当水分含量下降到[/color][color=#333333]14%[/color][color=#333333]以下时，即使污染了黄曲霉也不会产生毒素。[/color][color=#333333][/color][color=#333333]因此，最好的防治方法是预防食物霉变。家中所有食品的储藏都要注意防霉、防氧化，最好在低温、通风、干燥处保存[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]温度最好在[/color][color=#333333]20[/color][color=#333333]℃[/color][color=#333333]以下，相对湿度在[/color][color=#333333]80%[/color][color=#333333]以下[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]，并避免阳光直接照射。坚果、花生、粮食等尽量购买小包装，打开时认真嗅一下味道，一旦有变味情况立即整袋扔掉，以免抖开后霉菌孢子飞散出来；如果是散装花生、核桃等，最好带壳保存，晒干后，用保鲜盒等密闭储存；购买食物时，如果发现包装不清洁、已破损的不要买。[/color][color=#333333][/color][color=#333333]有霉味的食物一定要坚决丢弃，不能食用；若不小心吃到了霉变食物，要全部吐掉再用清水漱口；哺乳期的母亲尤其要注意饮食，母乳里面的黄曲霉素就是婴儿最早的感染毒素的途径。[/color]

关于黄曲霉毒素的检测，迪马科技应用实验室做了一系列的应用，分享给大家～方法优势：目前检测黄曲霉毒素主要主要是免疫亲和柱-高效液相色谱法串联质谱法等，免疫亲和柱-液相色谱法和液相色谱法-串联质谱能够准确定量，但是由于免疫亲和柱与质谱检测成本高，应用范围受到限制。而迪马科技使用SPE的前处理净化方法，不但能保持与免疫亲和小柱差不多的回收率和重现性，而且过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，这对于企业来说还是非常经济实惠的～实验应用 《黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2 》 - 方法：HPLC - 应用编号：103148 2014-05-05 《DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的测定》 - 方法：HPLC - 应用编号：103121 2014-01-15 《DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的测定》 - 方法：SPE - 应用编号：103120 2014-01-15 《乳制品中黄曲霉毒素M1检测》 - 方法：SPE - 应用编号：103002 2013-01-31 《粮谷中黄曲霉毒素检测》 - 方法：SPE - 应用编号：102977 2013-01-30 《粮谷中黄曲霉毒素检测》 - 方法：HPLC - 应用编号：102976 2013-01-30 《新型、快速、低成本SPE法检测黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1》 - 方法：SPE - 应用编号：101897 2012-07-03 《新型、快速、低成本SPE法检测黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1》 - 方法：HPLC - 应用编号：101895 2012-07-02 《乳制品中黄曲霉毒素M1检测》 - 方法：HPLC - 应用编号：101713 2012-01-12 《谷物、坚果及其制品中黄曲霉毒素的测定》 - 方法：HPLC - 应用编号：101314 2010-07-02 《谷物、坚果及其制品中黄曲霉毒素的测定》 - 方法：SPE - 应用编号：101200 2010-07-01

我们按照药典2351的方法来做黄曲霉毒素。用的安捷伦SB-C18的柱子，检出限的分离度一直不太好，峰都太近了。大家有什么好用的方法或者色谱柱嘛？

各位大佬麻烦问一下，我走的黄曲霉为什么会这样，用的方法是5009.27-2016的柱前衍生（第二法），条件是12:12:76(乙腈:甲醇:水) 柱温是40 检测波长是 360nm到440nm 除了没用方法规定的15cm柱子其余都是一样，为什么会走成这样[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305311535415716_9092_5517077_3.png[/img]

黄曲霉毒素光化学器柱後衍生法的B1及G1会因为紫外线254nm照射而结构改变

大家在测定黄曲霉毒素B1的时候 是直接拿乙腈提取过滤 还是按标准提取后过小柱净化呢 我感觉区别不大 直接过滤回收率稍微低点 不知大家怎么操作的

黄曲霉毒素B1柱后衍生法，标曲不出峰什么情况

怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??

食品中黄曲霉毒素的测定，主要有TLC、ELISA、HPLC 等方法，TLC法灵敏度和重现性较差；ELISA法重现性差，易受样品基质干扰假阳性率高，仅能作为筛选方法。近年来，由于HPLC法具有灵敏度和准确度高、方法重现性好等优点，现已成为黄曲霉毒素分析的主要手段。HPLC法测定黄曲霉毒素，一般使用灵敏度和选择性较好的荧光检测器。但由于黄曲霉毒素的荧光强度会受溶剂影响，正相色谱中，B1和B2的荧光强度仅稍低一点，不需衍生化；而在常用的反相色谱中，B1和G1两种异构体荧光强度很弱，需进行衍生化，提高其荧光强度，灵敏度才能满足一般食品法规的限量。衍生化的方法一般有柱前和柱后两类， 柱前衍生一般使用三氟乙酸，柱后衍生有碘液、过溴化吡啶溴以及电化学和光化学等方法。近年来，很多标准方法利用免疫亲合柱净化，HPLC柱后衍生对花生和玉米等农产品和食品中黄曲霉的含量进行了分析，方法检出限能够达到1 μg/kg以下。Q1。免疫亲和柱的填料是什么，它是怎样工作的，为什么要用它？ 免疫亲合柱对于欧们学化学的好像陌生了一点，不过你把它当成一种层析柱就行了。它的所谓填料就是固定了抗体的凝胶（黄曲霉毒素的柱子一般是单克隆抗体），基于抗原抗体反应进行工作，专一性很强，再加上另一种原理（反相或正相液相色谱）的分离，即使你把它当作确证方法也能说的过去。其实免疫亲和柱净化后的样品已经非常干净，直接加溴水也可在荧光分光光度计上进行测定，也是AOAC 991。31正式方法。现在还有一种普通霉菌毒素净化柱（不是免疫柱）要便宜一些，能做的霉菌毒素品种也多，但是专一性就差些。Q2。Kobra cell可以在线产生溴，这对分析有什么作用？是可以提高灵敏度吗？如果是，溴是如何与黄曲霉素反应的？络合？氧化？还是别的什么？ 由欧以上的论述，应该说是提高反相HPLC分析中黄曲霉毒素B1、G1的灵敏度。反应原理欧还真的没研究，可能和柱后衍生类似（氧化？），考虑到进入精益求精的要求还是不乱猜了吧。Q3。看到书上说黄曲霉素的毒性是KCN的10倍，是砒霜的68倍。晕啊。。。操作时有没有特别的个人防护措施？这个阿胖讲得差不多了，方法也就是用次氯酸钠溶液泡器皿，当然最好不要自己称固体标样，那东东有静电，很容易飞出来，买溶液就行了。要补充的1、就是没阿胖讲的那么可怕，对欧盟出口花生及制品的检测实验室都使用免疫亲和柱净化-HPLC—RF法确证，每年可能要做上万个样品。2、HPLC法的干扰比酶免方法不知道要小多少，有的HPLC筛选方法，提取后不净化就直接进样了，也很少有干扰。采用哪种方法主要是和要求有关，如果让洋人拿着鞭子在后面抽着干，肯定是要用HPLC法；如果就骗骗中国的官僚和老百姓，那就像啊胖说的，酶免法又省钱有省事，嘿嘿。。。。3、GB/T 5009的TLC法，净化方法很差，UV灯下看上去是一条亮带，满足国标20PPB的限量都很勉强，这一点你可看看旧贴http://www.sepu.net/dvbbs/dispbbs.asp?BoardID=5&replyID=47615&id=18220&skin=0欧论述的也差不多了。1、AOAC方法简述25g均匀样品，加入氯化钠5 g和125 mL甲醇：水（7+3），均质2min，过滤。取15 mL滤液加30 mL水，再次过滤后，取10 mL过免疫亲和柱，2×10 mL水洗柱，最后用1 mL甲醇洗脱黄曲霉毒素，用水定容至2 mL，供HPLC测定。HPLC条件：色谱柱：4.6×250 mm, 5 μm，C18；流动相：甲醇-乙腈-水（1+1+3）；流速：1.0 mL/min； 柱后衍生试剂：100 mg碘溶于2 mL甲醇，加水至200 mL。流速0.3 mL/min；衍生化温度：70 ℃；衍生化时间：55 s；激发波长：360 nm；发射波长： 420 nm；进样量：50 μL。3. 方法技术指标：免疫亲和柱净化，HPLC柱后衍生化的方法回收率(1) 2000年AOAC协同试验结果B1: 82- 109 %(添加水平：1.0- 5.0 ng/g)B2: 77- 123 %(添加水平：0.2- 0.8 ng/g)G1: 58- 93 %(添加水平：1.0- 5.0 ng/g)G2: 62- 105 %(添加水平：0.2- 0.8 ng/g)(2) 1991年AOAC协同试验结果B1: 77- 90 %(添加水平：5.8- 17.5 ng/g)B2: 55- 70 %(添加水平：0.83- 2.5 ng/g)G1: 76- 98 %(添加水平：2.5- 7.5 ng/g)G2: 36- 55 %(添加水平：0.83- 2.5 ng/g)碘衍生化方法的反应温度要70 ℃，需要单独的柱温箱，还要一个打衍生剂的泵。故可以采用以下两种方法来代替碘溶液作柱后衍生（1）过溴化吡啶溴（PBPB）衍生色谱柱：4.6×250 mm, 5 μm，C18；流动相：水-乙腈-甲醇（6+2+3）；流速：1.00 mL/min；衍生化溶液：25 mg PBPB (CAS: 39516-58-3)溶于500 mL水，室温下避光可保存5天；衍生化溶液流速：0.30 mL/min；衍生化反应管：55 cm × 0.5 mm id. 衍生化反应温度：室温。（2）电化学反应池衍生色谱柱：4.6×250 mm, 5 μm，C18；流动相：水-乙腈-甲醇（6+2+3），每升加350 μL HNO3 (5 mol/L)，同时溶解120 mg KBr；衍生化反应池：Kobra cell Rhone Diagnostics Technologies Ltd.，衍生化操作电流：100 μA。

什么是黄曲霉毒素　　黄曲霉毒素（Aflatoxins）是生长在食物及饲料中的黄曲霉和寄生曲霉代谢的一组化学结构类似的产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少，目前已分离鉴定出的黄曲霉毒素有17种，主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2等。黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素），前者为基本毒性结构，后者与致癌性有关。B1的毒性（其毒性比氰化钾毒性高）及致癌性极强且耐热（B1的分解温度为268℃左右，一般烹调加工破坏很少），在天然污染的食品中以B1最为多见。　黄曲霉毒素分布　　黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米等食物中；在水中的溶解范围为10毫克/升~20毫克/升， 可大量溶解于氯仿、甲醇、二甲基亚砜等中等极性的有机溶剂中，不溶于己烷、石油醚和乙醚；易被碱或强氧化剂破坏；进入人体后主要经消化道吸收，大部分分布 在肝脏、肾脏，少部分分布在血液、肌肉、脂肪组织中，其在体内的代谢过程主要为羟基化作用、去甲基作用和环氧化作用。

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有没有不过免疫亲和柱测定黄曲霉素的方法[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif[/img]