琼脂糖低

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(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时，共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确，在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。[实验仪器与设备]1.恒温培养箱 2.恒温摇床3.台式离心机(最大转速4000rpm) 4.冷冻高速离心机5.高压灭菌锅 6.超净工作台7.微量移液器 8.eppendorf tupe、tip[实验材料]1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲/烷(Tris)3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.氢氧/化钠5.十二烷基硫酸钠(SDS) 6.乙酸钾7.冰乙酸 8.氯/仿9.乙醇 10.胰RNA酶11.氨苄青霉素 12.蔗糖13.溴酚蓝 14.酚15.β巯基乙醇 16.盐酸17.含pUC18质粒的大肠杆菌附：试剂的配制1.溶液Ⅰ50mmol/L 葡萄糖5mmol/L 三羟甲基氨基甲/烷(Tris) TrisHCl (pH8.0)10mmol/L 乙2胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)2.溶液Ⅱ0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合3.溶液Ⅲ5mmol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 ml4.TE缓冲液10mmol/L TrisHCl1 mmol/L EDTA(pH8.0)5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回)6.胰RNA酶将RNA酶溶于10mmol/L TrisHCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15min,缓慢冷却至室温，保存于-20℃。7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚8.酚[实验步骤](一) 提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中，4000rpm，离心2min。3.吸去培养液，使细胞沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中，充分混匀，室温放置10 min。5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制)，混匀内容物，将离心管放冰上5 min。6.加入150μl溶液Ⅲ(冰上预冷)，盖紧管口，颠倒数次使混匀。7.1200rpm，离心15 min，将上清转至另一离心管中。8.向上清中加入等体积酚：氯/仿(去蛋白)，反复混匀，12000rpm，离心5min,将上清转移到另一离心管中.9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体。10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，振荡并离心，倒去上清液，真空抽干或空气中干燥。11.加50μl TE缓冲液，其中含有20μg/ml的胰RNA酶，使DNA完全溶解，-20℃保存。(二)琼脂糖凝胶电泳检测DNA[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB)，在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带，在电场中，pH8.0条件下，凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。琼脂糖凝胶有如下特点：(1) DNA的分子大小 在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比，分子越大迁移得越慢。(2) 琼脂糖浓度 一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。(3) 电压 低电压时，线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加，不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过5v/cm。(4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显，不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变，但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱，最好在4℃条件下电泳。(5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA，染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。(6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶，电导率最小，DNA几乎不移动，在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液)，则电导很高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化。对于天然的双链，常用的几种电泳缓冲液有TAE、TBE等，一般配制成浓缩母液，室温保存，用时稀释。[实验仪器与设备]1. 恒温培养箱2. 琼脂糖凝胶电泳系统3. 高压灭菌锅 4. 紫外线透射仪[实验材料]1.三羟甲基氨基甲/烷(Tris) 2.硼/酸3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.溴酚蓝5.蔗糖 6.琼脂糖7.溴化乙锭 8.DNA marker9.DNA样品[实验步骤]1.缓冲液的配制① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液)配1000ml 5×TBE:Tris 54g硼/酸 27.5g0.5mol/l EDTA 20mlPh8.0② 凝胶加样缓冲液(6×)溴酚蓝 0.25%蔗糖 40%③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml2.制备琼脂糖凝胶按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表：琼脂糖凝胶浓度 线性DNA的有效分离范围0.3% 5-60 kb0.6% 1-20 kb0.7% 0.8-10 kb0.9% 0.5-7 kb1.2% 0.4-6 kb1.5% 0.2-4 kb2.0% 0.1-3 kb3.胶板的制备(1) 用高压灭菌指示纸带将洗静、干燥的玻璃板的边缘(或电泳装置所皿备的塑料盘的开口)封住，形成一个胶膜(将胶膜放在工作台的水平位置上，用水平仪校正)。(2) 配制足够用于灌满电泳槽和制备凝胶所需的电泳缓冲液(1×TBE)。准确称量的琼脂糖粉。缓冲液不宜超过锥瓶或玻璃瓶的50%容量。 在电泳槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液，离子强度或pH值的微小差异会在凝胶中形成前沿，从而大大影响DNA片段的迁移率 。(3) 在锥瓶的瓶颈上松松地包上一层厚纸。如用玻璃瓶，瓶盖须拧松。在沸水浴或微波炉中将悬浮加热至琼脂糖溶解。注意：琼脂糖溶液若在微波炉里加热过长时间，溶液将过热并暴沸。应核对溶液的体积在煮沸过程中是否由于蒸发而减少，必要时用缓冲液补充。(4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml，充分混匀。(5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘，凝固后，在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子，以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近，则拔出梳子时孔底将有破裂的危险，破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。(6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。(7)在凝胶完全凝固后(于室温放置30-45分钟) ，小心移去梳子和高压灭菌纸带，将凝胶放入电泳槽中。低熔点琼脂糖凝胶及浓度低于0.5%的琼脂糖凝胶应冷却至4℃，并在冷库中电泳。(8)加入恰好没过胶面约1mm深的足量电泳缓冲液。4.加样DNA样品与所需加样缓冲液混合后，用微量移液器，慢慢将混合物加至样品槽中。此时凝胶已浸没在缓冲液中。 一个加样孔的最大加样量依据DNA的数量及大小而定，一般为20-30μl样品。已知大小的DNA标准，应同时加在凝胶的左凝胶的左侧和右侧孔内。确定未知DNA的大小。测量未知DNA的大小时，要所有样品都用相同的样品缓冲液。5.电泳在低电压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,但是,在电场增加时,不同相对分子质量的DNA片段泳动度的增加是有差别的。因此，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围随之减小。为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率，电场强度不应高于5V/cm。当溴酚蓝指示剂移到到距离胶板下沿约1-2cm处，停止电泳。

《疫苗纯化 -- 病毒类疫苗纯化》凝胶过滤介质Tanrose 4FF或Tanrose 6FF是经典的病毒类疫苗纯化方法，可以去除培养基中的杂蛋白、处理量大、快速的特点。柱高一般40-70cm，上样量一般为10-15%。目前使用此方法生产的疫苗品种有：乙肝、狂犬、出血热、流感等。《纯化 -- 重组蛋白》His标签重组蛋白可以很方便用镍 IDA琼脂糖凝胶FF（Ni Tanrose 6FF IDA）或镍NTA琼脂糖凝胶FF（Ni Tanrose 6FF NTA）分离，填料已经螯合好了镍离子，使用非常方便，有更高的吸附载量，特异性更强，可以选择多种洗脱方式，是纯化这类融合蛋白的zui佳工具。GST融合蛋白可以用GST琼脂糖凝胶FF（GST Tanrose 4FF）分离，然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物。凝血酶可以用肝素琼脂糖凝胶FF（Heparin Tanrose 6FF）或苯甲脒琼脂糖凝胶FF（Benzamidine Tanrose 4FF）分离。《纯化 -- 血浆蛋白》阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛，结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用DEAE-琼脂糖凝胶FF（DEAE Tanrose 6FF）吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的，同样也可以在白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附PKA、微量的IgG以及聚体，在凝血VIII因子纯化过程中使用大孔径的Q琼脂糖凝胶（Solid Q）可以增加载量和回收率。《纯化 -- 核酸、病毒》核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Tanrose 4FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换 Q琼脂糖凝胶（Q Tanrose 6FF）分离核酸。也可以用DEAE琼脂糖凝胶FF（DEAE Tanrose 6FF）或Q琼脂糖凝胶FF（Q Tanrose 6FF）富集和分离后再上琼脂糖凝胶6B或6FF得到纯的病毒。《去除 -- 蛋白中的核酸》核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如 SP 或CM Tanrose FF 结合目标蛋白，可除去大量核酸。核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。《纯化 -- 中草药有效成分》中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用，有效成分多较为亲水，包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析，更容易分离到单一活性成分。葡聚糖凝胶LH-20（Tandex LH-20）同时具备吸附性层析和分子筛功能，例如：用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，zui后是甙元。葡聚糖凝胶LH-20（Tandex LH-20）可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在Q阴离子交换柱上分离效果良好。《样品净化 -- 脱盐、小分子去除》使用凝胶过滤介质Tandex G10、G15、G25等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子，简单直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分种至半小时完成。月旭Tandex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计。病毒、DNA疫苗或质粒可以用琼脂糖凝胶6B除盐或交换缓冲液，蛋白、抗体等可以用葡聚糖凝胶G25快速去盐和交换缓冲液。

背景介绍近年来，肿瘤发病率逐年上升，推动了相关疗法药品的研发。从全球销售排名前列的药物来看，抗体药物在市场中占据重要份额，其在肿瘤治疗市场的需求日益上涨。同时，抗体偶联药物（ADC）因其在精准癌症治疗方面的巨大潜力，备受关注。Protein A亲和层析作为抗体药物纯化的核心工艺步骤，在抗体药物生产中扮演着至关重要的角色。随着生物制药上游工艺的优化，表达量不断提升，对下游纯化工艺提出了更高的要求。传统的Protein A亲和层析填料虽然性能稳定，但在处理高表达量的抗体类纯化时，效率和经济性方面仍存在不足。为了更好地满足行业发展的需求，并助力生产工艺的降本增效，博格隆推出了新一代重组耐碱Protein A亲和层析介质——AT Protein A Diamond Ultra。新品介绍AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质是将重组耐碱的Protein A配基偶联到高刚性琼脂糖基架上的新一代Protein A亲和层析介质，适用于单抗、双抗、多抗和Fc融合蛋白类生物大分子的分离纯化。与前一代AT Protein A Diamond Plus相比，AT Protein A Diamond Ultra具有高动态结合载量（≥75mg 人IgG/mL介质）。AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质能够满足从实验室到工业化大规模生产的各种需求。Table 1.AT Protein A Diamond Ultra 与AT Protein A Diamond Plus技术参数对比+颗粒大小呈正态分布，D50值对应的粒度代表小于此粒度的颗粒体积之和与大于此粒度的颗粒体积之和相同。++动态结合载量为3mg/mL的静脉注射用人IgG在PBS缓冲液中，接触时间为6min时的10%动态结合载量。AT Protein A Diamond Ultra的优势载量高，耐碱性好：有效减少介质的使用量，延长介质寿命，降低生产成本。反压低，流速快：优越的压力流速表现，有效提高生产效率，更适合工业化大规模生产。批间一致性稳定： 稳健的工艺流程，确保产品质量稳定和生产稳步进行。载量高、耐碱性好AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质采用优化后的Protein A配基密度，使其具有高动态结合载量；经过重组耐碱改造的Protein A配基，也赋予了层析介质良好的耐碱性，可耐受0.1~0.5M NaOH。以人IgG抗体为例，使用0.1M NaOH浸泡温度23℃进行浸泡处理，每间隔20h进行一次10%DBC测试，共累积浸泡160h。结果显示（见Fig. 1），AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质的起始10%DBC高达75mg/mL，在0.1M NaOH浸泡140h后，动态结合载量仍保持80%以上的初始载量水平。AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质的高载量和良好的耐碱性，可以有效减少生产中的介质使用量并提高介质使用次数，从而有效地降低生产成本，提高生产效率。Fig. 1 0.1M NaOH碱处理的介质10%DBC数据层析柱：EzScreen 4.6mL；样品：人IgG；保留时间：6min层析柱柱效：泡碱测试前As1.09/7106；泡碱160h后As1.15/7041反压低、流速快AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质采用高刚性的琼脂糖基架，具有优异的机械性能，在宽泛的线性流速范围内可以保持良好的压力流速性能，具有反压低、流速快的特点。如Fig. 2所示，在600mm*26cm装柱规格下，使用1M NaCl作为流动相进行测试，当线性流速为360cm/h时，柱前压仅为2.183bar。AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质优越的压力流速性能和柱床稳定性，有利于亲和层析的工业化放大生产，提高抗体和Fc融合蛋白的生产纯化效率，减少设备投入和工艺耗时，降低生产成本。Fig. 2 AT Protein A Diamond Ultra层析介质压力流速曲线（流动相1M NaCl）层析柱直径：600mm；柱床高度：26cm批间一致性稳定通过10%DBC测试和抗体纯化重复实验对AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质的批间一致性进行检测。Fig. 3 介质批间一致性测试（10%DBC）样品：人IgG；保留时间：6minFig. 4 不同批次介质纯化结果比较层析柱规格：EzScreen 4.6mL；样品：mAb IgG2；保留时间：6min；上样载量：58mg/mL结果显示，AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质具有稳定的批间一致性，为生产工艺的稳健保驾护航。总结AT Protein A Diamond Ultra具有载量高、耐碱性好，反压低、流速快，批间一致性稳定等综合优势，其问世将进一步提升抗体药物纯化的效率，助力制药企业提升生产效率。订购及试用申请更多产品信息请联系当地技术支持或客户经理。

近期，江必旺博士于仪器信息网分享了系列关于Protein A亲和层析介质的文章。《浅谈令人“爱恨交加”的Protein A亲和层析介质》《盘点Protein A亲和填料质控必看的重要参数》《Protein A材质对生物分离传化的影响 ，微球精准制造技术应运而生》本期，江必旺博士将就Protein A 发展方向与大家分享。高载量，高机械强度，高耐碱性是Protein A 发展方向。目前市场上用于生物分离层析介质主要由两大类材料组成：第一类是以琼脂糖，葡聚糖为代表的天然高分子层析介质；第二类是以聚苯乙烯和聚丙烯酸酯为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强，生物兼容性好，能减少对生物分子的非特异性吸附等特点，因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构，因此多糖介质表面积大，容易做成高载量的介质。但软胶在干燥状态下脱去水容易导致孔道结构塌陷，因此，软胶填充的层析柱一般不能干，否则介质容易孔道结构容易塌陷从而失去分离性能。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久，应用最广泛的层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶，其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等。相反，合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高，化学稳定性好等特点，因此可以耐受更大的压力、更快的流速，从而提高分离效率，其市场应用增速最快。另外合成高分子微球粒径大小，粒径均匀性更容易控制，使得合成高分子介质更容易装柱，柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀，分子进不去，因此其表面积比琼脂糖基质的小，但孔径通透性更好，因此分子传质速度快，在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大，导致非特异性吸附大，容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点，但它们的目标都是一致的，都是往高载量、高机械强度，高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质，交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度，而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。未来离子交换层析介质的发展方向就是融合软硬胶的优点，做成载量高，机械强度大的介质。

在离子交换过程中保持pH的恒定是十分重要的，正如前面讨论过的，pH的改变会造成蛋白质带电荷数量和分布状况发生变化，从而直接影响到蛋白质是否能结合在交换剂上以及结合力的强弱。因此，在离子交换色谱中流动相必须使用缓冲液。缓冲液的种类很多，能够起缓冲作用的物质可分为两类：第yi类是由弱酸（或弱碱）及相应的盐构成的系统；第二类是兼性离子化合物。对于第yi类缓冲物质，在进行离子交换时，如果缓冲离子所带的电荷与离子交换剂上的功能基团相反，将参与离子交换过程，并可能对局部pH产生影响，因此应尽可能采用与功能基团带同种电荷的缓冲离子，即：使用阴离子交换剂时选择带正电荷的缓冲离子；使用阳离子交换剂时选择带负电荷的缓冲离子。当然这也并不是jue对的，比如磷酸盐缓冲液也经常在阴离子交换过程中被采用，但在这种情况下应特别注意在上样前充分平衡，确保色谱系统的pH和离子强度与起始缓冲液一致。第二类缓冲物质在阴、阳离子交换中均能采用。表1和表2分别列出了阳离子交换色谱和阴离子交换色谱时常用的缓冲液。在离子交换过程中虽然可以除去很多杂蛋白，起到纯化效果，但目的蛋白的洗脱峰中必然含有大量缓冲物质和盐的成分，这些成分的引入对于目的蛋白来说本身也是一种杂质。特别在色谱后需对洗脱峰进行冷冻干燥，以得到纯蛋白样品时，在冻干后的粉末中往往绝大部分是缓冲物质和盐。如果在冻干前进行脱盐或透析操作，虽然可以基本除去这些杂质，但也有可能造成蛋白活性的回收率下降。此时应优先考虑采用挥发性的缓冲物质，这样在冻干阶段可以将这部分杂质除去，常见的挥发性缓冲物质列于表3。◌ Q /SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质◌ DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质

早前，江必旺博士分享了《浅谈令人“爱恨交加”的Protein A亲和层析介质》、《盘点Protein A亲和填料质控必看的重要参数》，本期带大家了解Protein A 亲和层析介质的制备过程中需要考虑的那些影响因素以及纳微科技带来的创新成果，也欢迎大家在评论区留言讨论。纯化后的Protein A配基可以通过其分子上的氨基或末端的巯基与微球上的功能基团偶联制备成Protein A 层析介质。Protein A层析介质的性能与其本身的配基性能，基球材料组成，基球孔径大小，孔容积及表面功能化等都有关系。为了高效率把目标生物分子从复杂样品里分离出来，并保持其生物活性，用于分离纯化的层析介质材料必须满足苛刻的要求如介质材料组成、形貌、粒径大小、粒径分布、孔径大小和分布、功能基团、及表面亲水性能等。 Protein A材质的影响 目前Protein A 亲和层析介质基球主要由两大类材料组成：第一类是以琼脂糖，葡聚糖为代表的多糖层析介质；第二类是以聚丙烯酸酯和聚丙烯酰胺为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强，生物兼容性好，能减少对生物分子的非特异性吸附等特点，因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构，因此多糖介质表面积大，容易做成高载量的介质。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久，最广泛的亲和层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶，其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等，另外软胶在干燥状态下脱水容易导致孔道结构塌陷从而失去分离性能，因此，软胶填充的层析柱床一般不能脱水。相反，合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高，化学稳定性好等特点，因此可以耐受更大的压力、更快的流速，从而提高分离效率，虽然其在市场应用的晚但其市场增速最快。另外合成高分子微球粒径大小，粒径均匀性更容易控制，使得合成高分子介质更容易装柱，柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀，分子进不去，因此其表面积比琼脂糖基质的小，但孔径通透性更好，因此分子传质速度快，在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大，导致非特异性吸附大，容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点，但它们的目标都是一致的，都是往高载量、高机械强度，高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质，交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度，而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。 介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响 除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外，孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质最重要参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果，层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素之一，可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上，而内孔表面积主要由孔径大小，孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大，但如果孔径太小，目标生物分子进不去，这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大，比表面积也会降低，因此对于不同分子量大小的生物分子，有个最优的孔径大小，其可及表面积最大，分离效果最好。比如说用于抗生素这类分子量小的生物分子，孔径一般选择小于30纳米以下，而对于抗体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右，而对于病毒这种大尺寸的生物，需要400纳米以上超大孔的介质。另外孔隙率越大，比表面积越大，载量也会越大，同时机械强度越差，因此选择孔隙率也需要平衡机械强度和载量的要求 Protein A 配基的影响 Protein A 亲和层析分离是基于Protein A 配基与抗体的特异性结合。天然Protein A 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系，它含有5个可以和抗体IgG 分子Fc 段特异性结合的结构域。由于天然的Protein A 配基耐碱性差，为了提高Protein A 耐碱性，延长其使用寿命，因此现在市场上使用的Protein A都是经过天然Protein A序列改造过的重组蛋白。每家重组蛋白A的序列不同，亲和力不同，洗脱pH 条件不同，耐碱性能不同。Protein A 配基对抗体纯度，回收率等有重要影响。 粒径大小和粒径均匀性的影响 粒径大小和均匀性不仅影响柱效，分离效率，对Protein A 载量影响也很大。粒径越小，分子传递路径越短，Protein A 与抗体结合的效率越高，载量就越大，比如说以琼脂糖为基质的Protein A 介质，如果粒径是90微米，载量只有50毫克/毫升，如果粒径减小到50微米，载量可高达90毫克/毫升，因此粒径与载量成反比，但粒径越小，反压越大，因此选择粒径大小需要考虑压力和载量。另外粒径越均一，其洗脱越集中。粒径分布均匀，形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好，流动相在柱床中的流速均匀，流动相经过柱床的路径长短一致，从而有效降低涡流扩散系数，使色谱峰宽变窄，理论塔板数升高。纳微十多年坚持不懈的研究开发出世界领先的微球精准制造技术，该技术可以对微球的材料组成、粒径大小、粒径均匀性、孔径大小及表面性能达到前所未有的精准控制。纳微利用这一技术平台开发出新一代单分散多孔聚丙烯酸酯为基质的Protein A 亲和层析介质克服了传统Protein A 软胶的缺点。纳微Protein A 介质创新点主要有以下几点：首先，纳微Protein A 介质具有精准的粒径大小和高度的粒径均一性，使其具有流速均匀、洗脱集中、流动相用量少而且装柱容易、柱效高、柱床稳定、压力低、柱与柱重复性好等优点；图4 纳微单分散Protein A介质与传统软胶基质微观结构对比图5 传统多分散Protein A亲和软胶与UniMab液流路径对比示意图第二，纳微Protein A 基球经过优化筛选专门设计的大孔结构，其孔径远大于GE Protein A 产品。因此该介质具有蛋白传质速度快，使得介质在高流速下具有高载量。从实验测试数据可以看到，纳微UniMab与GE MabSelectSuRe在驻留时间大于4分钟时，载量都差不多，当驻留时间小于2分钟时UniMab的载量高于MabSelectSuRe载量50%以上, 而且速度越快UniMab载量优势越明显。抗体生产效率是由载量和流速共同决定，但流速越快载量越低，因此对于每个亲和层析来说有个最优的流速。实验证明对于批次亲和层析，驻留时间是2分钟时生产效率达到最高，对于连续层析驻留时间是1分钟时生产效率最高；图6 UniMab与MabSelectSuRe产品不同驻留时间动态载量对比图7 不同Protein A 层析介质驻留时间与抗体生产效率与关系对比从抗体流穿曲线对比图也可以看出具有大孔结构及高度粒径均匀性的单分散Protein A亲和层析介质与进口软胶相比具有更陡的穿透曲线，说明纳微单分散层析介质具有更畅通的孔道结构，分子在介质里扩散速度快。抗体流穿少，回收率高。图8 抗体流穿曲线对比图第三，纳微Protein A 基球是高度交联的聚丙烯酸酯组成，与市场上软胶或低交联度聚丙烯酸酯为基质的Protein A 介质相比具有溶胀系数小，压缩比例低，而且具有优异机械性能，可以承受更高流速条件产生的压力，并装更高的柱床，有利于增加抗体批处理量，提高抗体生产效率，减少设备投资。UniMab在2公斤压缩比例只有5%，而市场上Protein A 介质压缩比例往往超过15%。图9 UniMab与软胶与压力流速曲线对比第四，纳微用于Protein A 介质的基球是通过多步表面亲水化改性，因此表面亲水性能好，非特异性吸附低，在抗体分离过程中，HCP去除效果好。一般来说聚合物基质的Protein A 因为亲水性问题，HCP 去除效果往往比软胶差，但UniMab可以达到软胶Protein A 的同等水平。图10 纳微UniMab与对照填料的HCP去除效果第五，除了创新基球外，纳微又经过多年的努力通过优化组合不同片段的Protein A 设计出有自主知识产权的耐碱性Protein A 配基，并实现大规模生产。最后通过优化偶联工艺成功地生产出世界首个单分散Protein A 亲和介质产品，不仅实现该产品的国产化，而且克服了现有市场上Protein A 介质的主要缺陷。纳微单分散Protein A 介质不仅可以提高抗体的生产效率，降低抗体的生产成本，更是下一代连续层析理想的介质。亲和层析分离条件影响ProteinA亲和条件相对简单，无需繁琐参数优化。平衡阶段，盐浓度及pH是两个重要参数。由于ProteinA与抗体分子核心区域主要作用力依靠组氨酸疏水性介导，所以增加平衡盐浓度一般可增加3-5mg载量。pH则通常控制在6-7.5，若低于5.0以下，可能会降低动态结合载量，从而降低了回收率。上样后清洗是去除结合于填料的宿主蛋白（HCP）及核酸（DNA）等杂质的主要过程。清洗pH较为关键，在抗体分子未清洗掉的前提下，选择尽可能低的pH作为清洗条件，以去除更多的HCP等杂质。若常规pH条件无法奏效，可以加入高盐（1M氯化钠）或添加剂如精氨酸、吐温80、尿素及异丙醇等。pH是洗脱过程中最关键工艺参数，在确保回收率的前提下，尽可能选择更高的pH进行洗脱。较低pH会导致洗脱的抗体浓度过高，产生更多的聚集体。另外，洗脱buffer类型也会对洗脱浓度及杂质含量有影响，如相同pH的柠檬酸洗脱强度高于醋酸。表4 不同Buffer洗脱液效果比较缓冲液洗脱体积（ml）洗脱浓度（mg/ml）收率（%）HCP（ppm）洗脱液20mM HAc pH3.546.591.5129洗脱液20mM Gly pH3.563.880.3167洗脱液20mM Citric pH3.53.77.395.186另外，洗脱液加入精氨酸、氯化钠、聚乙二醇、尿素、组氨酸、咪唑等皆有助于减缓低pH的破坏作用，提高洗脱液纯度。下图是UniMab50纯化过程中在淋洗及洗脱步骤加入了1%聚乙二醇PEG3350，SEC纯度提示PEG可显著降低聚集体含量。

近日，赛分科技成功开发了首款亲和层析填料——MabPurix™ Protein A，该填料以琼脂糖凝胶为基质，表面键合配体Protein A，主要应用于生物制药领域——抗体的纯化。作为全球色谱产品最为完善的企业之一以及生物分离色谱的领航者，赛分科技十分重视新产品研发，目前的色谱分离填料已涵盖反相、正相、离子交换、手性、体积排阻、亲和、HILIC、离子排斥、配体交换等十几种类型，产品品种齐全，性能优越。其中，色谱填料产品包括硅胶基质和聚合物基质两大类，几十小类，可根据客户实际需要分别应用于不同的领域中。本次所开发的MabPurix™ Protein A填料是赛分科技推出的首款亲和层析填料，也是首次推出的以琼脂糖凝胶为基质的填料，此前，赛分科技的填料基质包括球形硅胶、不定形硅胶、聚甲基丙烯酸酯、PS/DVB等。与其它基质相比，琼脂糖基质填料具有更好的生物相容性。MabPurix™ Protein A的加入使得赛分科技的产品品种更加齐全，尤其对于生物分离色谱产品家族里，MabPurix™ Protein A的成功推出具有里程碑的意义。赛分科技的聚合物基质填料家族MabPurix™ 亲和层析填料 MabPurix™ 亲和层析填料专为大规模抗体纯化而设计，是由高纯度Protein A与高交联度琼脂糖偶联后的产物，用于从血清、腹水、细胞培养上清和细胞提取物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein A是金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白，单链，它通过与免疫球蛋白的Fc区相互作用，可结合大多数哺乳动物的IgG，尤其对人IgG1、IgG2、IgG4，小鼠IgG 2a和IgG 2b具有高亲和力。MabPurix™ Protein A亲和层析填料具有高稳定性、高选择性、高效率的特点，是抗体纯化的优选。● 可根据用户的需要提供各种规格的预装柱；● 强化基质保证了高流速、低背压；● 特殊设计的定向键合技术保证了高的载量；● 可耐受苛刻的在线清洗条件；● 可以很容易的由小规模的实验室制备向大规模的工业化生产进行线性放大。更多信息请登录：http://www.sepax-tech.com.cn/products/gytl/juhe/infinity/99.html关于赛分科技 赛分科技有限公司（Sepax Technologies, Inc）总部位于美国特拉华州高新技术开发区，致力于开发和生产药物与生物大分子分离和纯化领域的技术和产品。赛分科技是集研发、生产和全球销售为一体的实业型企业。公司主要产品为液相色谱柱及耗材、固相萃取柱（SPE）及耗材、液相色谱填料以及分离纯化仪器设备。在液相色谱领域里，赛分科技已开发出了100多种不同型号的液相色谱材料，涵盖了反相、正相、超临界（SFC）、手性（Chiral）、离子交换、体积排阻、亲和、HILIC等各种类别，为世界范围内液相色谱产品最为完善的企业之一。 赛分科技的创新技术使之生产出具有最高分辨率及最高效的生物分离产品，包括体积排阻、离子交换、抗体分离、和糖类化合物分离色谱填料和色谱柱，可广泛地应用于单克隆抗体、各种蛋白、DNA、RNA、多肽、多糖和疫苗等生物样品的分析、分离和纯化。赛分科技先进的技术和完善的产品线已使赛分成为全球生物分离的领航者。 公司网站：www.sepax-tech.com.cn www.sepax-tech.com

p 新华社杭州2月23日电 浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队研发出低成本、高效率、完全国产化的高通量单细胞测序平台“Microwell-seq”，并在短时间内利用这一平台构建全球首个哺乳动物的细胞图谱。该成果于23日刊登在国际学术期刊《细胞》杂志上。/pp 细胞是生命最小的独立遗传单位。传统的测序技术“看”的是一组一组、成群的细胞，“读”的是一堆细胞遗传信号的均值，因此单个细胞的特异性表现容易被忽略。郭国骥认为，单细胞组学技术使人类能够从单个细胞的视角，精确解析细胞的分化、再生、衰老以及病变，“这类技术正带来一场细胞检测、分类和鉴定的方法学革命”。/pp “我们利用微孔矩阵、分子标记和扩增技术，高通量、高精度地实现单细胞水平分析，解决了传统测序中单个细胞核酸物质少、容易丢失、分析成本高的难题。”郭国骥说。/pp 研究人员向记者展示了一块边长三厘米的正方形薄片，这是一块有10万个直径30微米“小坑”的琼脂糖微孔板。实验中，科学家用消化酶将一团相对紧实的细胞解离成单个细胞的悬浮液，倾倒在琼脂糖微孔板上，大约有1万个细胞会“一个萝卜一个坑”地落入“坑”。之后，研究人员为 每一个被捕获的细胞贴上“编号”——“磁珠索引”，数万个直径为25微米的磁珠倾倒入“坑”中，在封住单个细胞同时标记上DNA索引。第三步则是常规的测序流程，每个细胞的表达谱得到解析。这项技术能够测试单个细胞所有的信使RNA，这是将细胞DNA遗传信息翻译成蛋白质的重要物质。/pp 借助这一高通量单细胞测序平台，研究人员对小鼠不同生命阶段的近50种器官组织的40余万个细胞进行了系统性的单细胞转录组分析，构建了首个哺乳动物细胞图谱。/pp 专家认为，小鼠细胞图谱的完成，将对下一步人类细胞图谱的构建带来指导性意义，并惠及细胞生物学、发育生物学、神经生物学、血液学和再生医学等多个领域。/p

4月12日，苏州纳微科技股份有限公司（简称“纳微科技”）发布公告，拟向特定对象发行股票募集资金总额不超过19,674.24万元（含本数），扣除相关发行费用后的募集资金净额拟投资于收购赛谱仪器部分股权和常熟纳微淘汰1000吨/年光扩散粒子减量替换生产40吨/年琼脂糖微球及10吨/年葡聚糖微球层析介质技术改造项目。募集资金使用计划序号项目名称投资总额（万元）拟用募集资金（万元）1收购赛谱仪器部分股权11,320.2411,320.242常熟纳微淘汰1000吨/年光扩散粒子减量替换生产40吨/年琼脂糖微球及10吨/年葡聚糖微球层析介质技术改造项目3,400.002,954.003补充流动资金5,400.005,400.00合计20,120.2419,674.24收购赛谱仪器部分股权项目投资总额为11,320.24万元，其中拟使用募集资金金额为11,320.24万元，全部用于收购赛谱仪器 43.9621%股权。 收购交易对手方包括苏州纽德敏技术咨询有限公司、聂红林、吴江海博科技创业投资有限公司、徐娟娟、苏州海达通科技创业投资有限公司、苏州谱纯管理咨询合伙企业（有限合伙）、岑云东、张斌和张志娟。股权收购完成后，纳微科技合计持有赛谱仪器953.9880万元出资，占赛谱仪器注册资本的76.6664%，赛谱仪器将成为纳微科技控股子公司。赛谱仪器成立于2011年4月，主要从事蛋白纯化系统研发、生产和销售，截至目前已推出SCG系列、SCG-P系列、SDL系列等用于大分子分离纯化的产品以及Relianx系列等用于小分子分析纯化的产品，2021年度营收8467.51万元，净利润2071.18万元。常熟纳微淘汰1000吨/年光扩散粒子减量替换生产40吨/年琼脂糖微球及10吨/年葡聚糖微球层析介质技术改造项目项目投资总额为3,400.00万元，其中拟使用募集资金投入2,954.00万元。项目实施主体为纳微科技全资子公司常熟纳微。该项目拟立足纳微科技现有产业平台和核心技术，对常熟纳微现有的光扩散粒子车间进行适应性改造，利用部分原项目车间厂房和设备，并新购置反应釜、双锥干燥机、振动筛、清洗柱、蒸馏装置、制冷机等生产公辅设备，完成产线技术改造。项目建成后，常熟纳微将形成年产40吨琼脂糖微球和10吨葡聚糖微球层析介质的生产能力。补充流动资金纳微科技本次发行股票，拟使用募集资金5,400.00万元用于补充流动资金。纳微科技2019年、2020 年和2021年分别实现营业收入12,970.09万元、20,499.29万元和44,634.68万元，复合增长率达到85.51%。纳微科技表示，随着公司营业收入快速增长、研发支出增加以及业务和人员规模扩大，公司的日常运营资金需求也将持续增加，保证营运资金充足对于抵御市场风险、提高竞争力和实现战略规划具有重要意义。

摘要本次横评使用AllSheng和国内外市场主流FFPE组织样本DNA提取试剂盒，进行提取效果的详细对比，主要指标核酸提取效率和片段大小及分布情况，前者通过Fluo-200荧光计定量，后者通过生物分析仪检测。结果显示，奥盛试剂盒在DNA提取率以及产物片段分布与其他品牌试剂盒表现一致，在一些样品上的表现甚至更优于同类产品。此外，我们对比了AllShengFFPE组织样本DNA提取试剂盒手动法提取与在Leap-Pure S24上全自动提取上进行自动化提取的差异。结果显示上述两种方法得到的核酸产量及片段完整性均无显著差异。试剂简介FFPE（Formalin fixation and paraffin embedding）样本，即福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本，被视为病理科的“瑰宝”，因为它们保存了大量疾病相关信息，为医学研究提供了宝贵的数据来源，是目前长期保存病理样本的主要方法，过去的几十年中，按照该方法，全世界已经存档了大量生物样品。然而，由于技术的限制，FFPE样本在过去的几十年中并未得到充分的利用。随着科技的进步和研究的发展，现在对FFPE样本的应用已经越来越广泛。从最初的免疫组化用于疾病诊断和病理分型，到现在已经应用到各种组学研究中，FFPE样本的价值得到了更全面的发掘。每一个FFPE样本都是珍贵且独一无二的。在样本量有限的情况下，我们应当在尽可能减少损耗的同时释放其所蕴含的生物信息。现阶段在FFPE样本中提取核酸仍存在一定的挑战性。如石蜡样本在制作过程中导致的核酸降解，难以兼容下游qPCR、测序等应用，以及提取操作过程繁琐用时较长，试剂中二甲苯会危害实验员健康，其次二甲苯会影响组织切片质量，若使用不当，容易使组织产生收缩、硬化变脆等变化。因此我们需要在有限的样本中尽可能提取出高质量的核酸，同时实现提取操作自动化，在这里我们展示的是奥盛试剂盒从大鼠石蜡包埋组织样本和人体组织样本中提取基因组DNA的方法，与市面上同类型试剂盒提取效果进行对比，结果显示，DNA提取浓度、完整性等方面与国内外同类型产品表现一致。材料与方法试剂提取效率对比配制三个不同批次的试剂，根据FFPE切片/卷片组织面积的大小，刮取5-10张表面积为25-30mm2的卷片，分别进行手工法提取，等体积（50 μL）洗脱所有样本提取流程如图1所示，将所得纯化的DNA通过Fluo-200荧光计dsDNA高灵敏定量分析试剂盒精准定量提取浓度（dsDNA），并通过琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性，使用GAPDH基因（扩增片段长度分别为322bp和99bp）对DNA产物进行qPCR分析，所有样本的起始体积/量一致。图1 试剂整体操作流程。上图为奥盛试剂盒操作流程。其中手工法提取需要根据步骤按顺序添加试剂。而配合仪器进行自动法提取，只需要直接将样品加入到指定孔中即可，其余试剂均以提前加入其他孔位，操作相对来说更加便利各品牌试剂抽提效果对比奥盛试剂盒和其他国内外三种对标试剂盒分别提取不同人组织FFPE样本，等体积（50 μL）洗脱所有样本，将所得纯化的DNA通过Fluo-200荧光计和dsDNA高灵敏定量分析试剂盒精准定量提取浓度（dsDNA），琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性，以及通过Allsheng NGS Universal DNA Library Prep Kit for Illumina试剂盒进行不同品牌提取产物的建库产量及峰型图分析对比。与同类产品提取人体石蜡包埋组织样本比较。自动化提取效果验证为确定全自动和手动抽提方法是否可以获得相同的核酸产量和质量，我们使用奥盛试剂盒进行手动抽提以及在Leap-Pure S24上全自动提取连续的FFPE样本。每个样本上样量一致，洗脱体积均为50μL，进行对比测试。结果与分析试剂抽提效率验证对三批提取产物浓度测定分析发现，AllSheng与A品牌试剂盒对不同FFPE组织样本的提取效率接近或超出对标试剂（图2-1），片段分布和片段完整性（用不同大小引物对产物进行扩增后，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，均显示出完整的4条片段）与对标产品一致（图2-2、图2-3），对DNA产物进行GAPDH基因（扩增片段长度分别为322bp和99bp）qPCR分析，发现不同长度扩增片段浓度均无明显差异（图2-4）。图2-1 AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物浓度图2-2 AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物琼脂糖电泳结果图2-3 AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物的片段完整性分析结果图2-4对提取产物进行不同片段的qPCR结果各品牌试剂抽提效果验证通过对不同人组织FFPE样本提取发现，四种试剂盒对不同样本的提取情况一致，奥盛试剂盒和其他国内外三种对标试剂盒对不同的样本提取效率有差异。在C样本提取中，奥盛试剂盒提取效率显著高于三种对标试剂盒(图3-1），三个样本的片段分布和片段完整性与对标产品一致（图3-2），将四种试剂盒提取产物投入相同量进行建库，奥盛试剂盒建库后的文库产量与另外三种试剂盒的文库产量无明显差异。图3-1四种试剂盒提取不同人组织FFPE样本的浓度图3-2 四种试剂盒提取不同人组织FFPE样本提取产物琼脂糖凝胶电泳图及完整性分析图实验组Qubit 浓度文库产量T品牌17.8ng/µ l445ngQ品牌13ng/µ l325ngA品牌17.1ng/µ l427.5ng奥盛17.5ng/µ l437.5ng图3-3 四种试剂盒提取产物建库实验结果自动化提取效果验证在Leap-Pure S24上全自动提取连续的FFPE样本与手工法提取对比。结果显示Leap-Pure S24提取产物浓度均可达到手工的90%以上（图4-2），琼脂糖凝胶电泳效果表明两种方式的提取产物片段分布一致（图4-3），用于下游应用（如使用Agilent Bioanalyzer系统进行DNA分析，以及qPCR和RT-PCR分析）的核酸质量基本一致（图4-4、4-5）。且在操作方式上Leap-Pure S24全自动核酸提取仪均需将样本放入试剂条中即可，手工操作时间较手工提取缩短90%以上。点击图片查看详情图4-1 全自动核酸提取与手工法提取效率对比图4-2 手工与S24提取产物的琼脂糖凝胶电泳结果图4-3 手工法与S24提取产物在安捷伦4150上片段分析结果图4-4 S24与手工的提取产物对不同大小扩增子的qPCR结果总结FFPE组织样本是目前国内外运用最为广泛的组织保存形式。目前，分子靶向治疗逐步成为肿瘤治疗的主流。在临床用药前对患者基因突变状态进行检测，可正确指导临床个体化用药。减轻患者经济负担．提高分子靶向药物治疗效果。因此，从FFPE样本中提取高质量的DNA进行分子靶标检测也逐渐受到关注。从FFPE组织样本中提取到能够有效扩增的DNA不仅适用于回顾性研究，也对疾病的诊断与鉴别、评估疾病预后和探索疾病分子机制具有重要意义。AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒采用高效组织裂解缓冲液和无毒除蜡剂进行一步法脱蜡裂解，利用硅羟基磁珠与核酸分离纯化方法的原理，从石蜡包埋组织切片、石蜡块或福尔马林等固定液组织中快速高效的提取样品中的DNA，在浓度、片段分布与质量（下游实验）方面与对标试剂一致。试剂不含二甲苯等有害物质，并且操作简单，无需多次离心。该试剂盒适用于多种FFPE组织类型，可以进行手工抽提，也可以配套仪器进行全自动化操作。搭配我司Leap-Pure S24全自动核酸提取仪，可实现提取过程全自动化，极大减少了人工操作步骤。

由国家自然科学基金委员会化学科学部主办并由清华大学、中国科学院化学研究所、北京大学承办的第二届全国生命分析化学学术报告与研讨会，于2008年3月29日~30日在北京西郊宾馆隆重举行。随着生命科学研究的迅猛发展，各学科与生命科学的交叉已成为科学研究发展的趋势。以方法和手段为研究要素的分析化学在很早的时候就已与生命科学研究交叉。岛津公司是分析仪器的著名生产厂家，多年来致力于生命科学领域的新产品与方法的开发。岛津公司新产品MCE-202 MultiNA 微芯片电泳系统在本次会议上首次亮相，立刻受到各位专家的关注。这也是本产品在国内的首次亮相。本产品是替代琼脂糖电泳，可全自动、低成本地测定DNA/RNA Size的全新的微芯片电泳装置。screen.width-300)this.width=screen.width-300"业界专家关注岛津新产品MCE-202 MultiNA在本次大会上岛津公司分析专家Yuki Hashi先生做了题为《在线前处理LCMS系统直接测定血桨血清中十溴联苯醚（DBDE）及分析时残留问题解决》的报告，受到各位专家的好评。多溴联苯醚（PBDEs）是广泛使用的一种阻燃剂，其在食品链和人体中会聚集，因此是一个潜在的环境健康问题。在这类多溴联苯醚阻燃剂中，DBDE其阻燃效果好及毒性小，是唯一允许使用在几乎所有塑料材质中的阻燃添加剂。研究发现DBDE在环境样品和生物样品中的含量持续上升。因而，目前对血样中残留的DBDE分析备受瞩目。 本次大会势必为我国生命分析化学的研究起到积极的推动作用。screen.width-300)this.width=screen.width-300"岛津员工向专家介绍岛津产品Microchip ElectrophoresisMCE-202 MultiNA 微芯片电泳系统——用于DNA/RNA快速分析MultiNA—是通过将岛津公司先进的微芯片技术和自动化分析技术完美结合，缔造出的全新的DNA/RNA快速分析系统，与传统的琼脂糖电泳技术相比，费用更低、速度更快、灵敏度更高！简单易用的MultiNA，提供更加卓越的分析精度，使电泳分析进入新境界。MultiNA！为生命科学实验室带来突破性变革的新一代微芯片电泳系统。 分析成本极低采用精湛工艺制作的可重复利用的微芯片使消耗品费用在为减少,与琼脂糖凝胶电泳相比,运行成本更低。 分析速度快高速自动化分析，分析顺序表中一次最多可设定120个分析循环，可承载4枚微芯片平行样品前处理，顺序电泳分析，最快分析循环仅75秒。 高灵敏度检测采用LED激发的荧光检测器，达到比溴化乙锭染色法高出10倍以上的分析灵敏度。 分辨率高，重现性好根据样品的类型选择相应的分离缓冲液，样品与内标一起电泳，实现和保证了分析结果的可靠性和重现性。 使用简单方便控制和数据处理软件提供直观的图形界面，操作和掌控极为简单。三步操作即可完成从设置到启动的全过程。screen.width-300)this.width=screen.width-300"

最近几年，关于单细胞测序的报道日益增多。事实上，单细胞测序是一个新兴的领域。据了解，单细胞测序萌芽于2010年，13年左右才真正发展起来。2014年，单细胞测序的应用被列为《自然—方法学》(Nature Methods)年度最重要的方法学进展。2015基因组学前沿研讨会将单细胞组学单独列为一个单元，可见单细胞测序在当前基因组学前沿研究中的热度。　　本次研讨会上，报告主题涉及单细胞组学领域的报告人，包括美国哈佛大学终身教授谢晓亮博士,美国德克萨斯大学达拉斯分校张奇伟博士，厦门大学杨朝勇博士，中国科学院重庆绿色智能技术研究院王德强博士，北京大学汤富酬博士，美国贝勒免疫研究所林巍博士，华中科技大学宁康博士，南方科技大学贺建奎博士，华中农业大学李响同学等。　　事实上，即使是来源相同的单个细胞，由于随机生物过程和环境扰动的原因，彼此在许多方面也存在差异，即细胞的异质性。常见的基因组测序技术避免不了这一现象带来的影响，基于这一原因，研究人员开启了单细胞测序技术的探索之路。此次研讨会的单细胞组学单元中也有多个报告涉及了单细胞/单分子测序技术的最新进展。　　其中，谢晓亮教授，于2012年在Science发表的论文中推出了一项新技术，多重退火和成环循环扩增技术(Multiple Annealing and Looping-Based Amplification Cycles, MALBAC)。这项技术能从一个细胞的基因组中，分离出DNA。据了解，这种技术能降低PCR扩增偏倚，使得单细胞中93%的基因组能够被测序。从而使得检测单细胞中较小的DNA序列变异变得更容易，也能够发现个别细胞之间的遗传差异。这样的差异可以帮助解释癌症恶化的机制，生殖细胞形成机制，甚至是个别神经元的差异机制。目前，这项技术已经应用到体外受精以及肿瘤的个性化治疗中。谢晓亮　　来自厦门大学的杨朝勇教授，运用液滴微流控技术进行高通量的单细胞检测，包括分离，处理和分析DNA、RNA和蛋白质，这种技术是在微流控芯片上发展起来的一种操纵微小体积液体的全新技术。在传统的液滴微流控技术基础上,将“油包水”改成“油包琼脂糖”,同时杨教授提出了一种琼脂糖液滴微流控技术。这项技术已经成功应用到蛋白结晶、酶分析、化学合成、单分子/单细胞研究等分子与细胞生物学及分析化学研究领域中。杨朝勇　　据了解，上世纪90年代已有关于利用纳米孔进行核酸序列识别的报道，该方法存在DNA易位速率过快的问题。中国科学院重庆绿色智能技术研究院王德强博士，正在研发新一代单分子测序技术，在直径小于双螺旋的固态纳米孔中，通过拉伸双链DNA，减慢单个分子的双链DNA的易位速度。王德强　　目前，单细胞的RNA或DNA测序方法不允许同时分析转录组和基因组序列。来自深圳南方科技大学的贺建奎博士介绍到，他们利用基于新一代测序技术的策略解决了这一问题。以小鼠卵母细胞为例，这种将单个卵母细胞DNA和RNA测序合并的方法可以达到基因组的高覆盖率和低偏好性转录组的可重复性。这项技术将有助于实现生物学和医学的核目标，即将生理或病理条件下单个细胞的基因型和表型完美地联系起来。贺建奎　　从此次研讨会上单细胞组学的热烈讨论中，我们可以感受到，现在是单细胞测序的蓬勃发展阶段，相信在不久的将来，科学工作者们能解释更多的诸如遗传性疾病的成因、癌症恶化机制等问题，为精准医学和个性化医疗等临床应用提供更坚实的理论基础。 编辑：史秀明

湖南某单位是一家俄语区国家实验室耗材、成套设备及通风系统的配套商，现需采购一批仪器设备及试剂，需要国内优质的生产企业对接，满足要求的生产厂商可与之联系。同时该单位将于2022年4月25日下午的“后疫情时代国产仪器的出海机会”网络研讨会上进行线上的采购交流会，届时会现场讲解采购需求及注意事项，满足要求的国内生产厂商也可点击报名参与下。采购产品清单如下（联系方式见文末）：Маркер гидрофобный ImmEdge Pen 免疫组化笔RNA Cleanup Kit (10 μg)трис(гидроксиметил)аминометан/Tris base, 99% 三羟甲基氨基甲烷Агароза 高纯度低电渗琼脂糖1-е антитела第一抗体Ligation Sequencing Kit (Q20+) 连接测序试剂盒 (Q20+)MinION Flow Cell (R10.4) 测序芯片Ultra-Long DNA Sequencing Kit超长DNA测序试剂盒Spermine tetrahydrochloride精胺四盐酸盐Short Read Eliminator Kit XL短读消除试剂盒 XLShort Read Eliminator Kit 短读消除试剂盒Gentra Puregene Tissue Kit组织试剂盒NEBNext RNA Depletion Core Reagent Set RNA 去除核心试剂套装NEBNext Small RNA Library Prep Set 1 小 RNA 文库制备套装 1Monarch HMW gDNA Tissue Lysis Buffer Monarch HMW gDNA 组织裂解缓冲液Monarch Protein Separation Solution Monarch 蛋白分离Monarch gDNA Wash Buffer RIPA裂解液Monarch gDNA Elution Buffer II gDNA 洗脱缓冲液 IIMonarch DNA Capture BeadsMonarch Bead RetainersMiSeq Reagent Kit v2 (50 cycle) 基因测序试剂盒v2 （50循环）Glycerin (glycerol), 50% (v/v) Aqueous Solution 甘油（甘油），50% (v/v) 水溶液Ethanol, Pure (200 Proof, anhydrous) 乙醇，纯（200 证明，无水）Вода UltraPure, не содержащая ДНКаз / РНКаз 不含 DNase/RNase 的超纯水Картридж BluePippin 2% агароза, без крас.,100-600 п.о., 层析柱 BluePippin 2% 琼脂糖，无染料，bp 100-600，Картридж BluePippin 3% агароза, без крас.,100-200 п.о., 层析柱BluePippin 3% 琼脂糖，无染料，bp 100-200，1-Bromo-3-chloropropane 1-溴-3-氯丙烷c dna synthesis kitc DNA合成试剂盒Reliance Select cDNA Synthesis cDNA 合成试剂盒N,N-Dimethylformamide N,N-二甲基甲酰胺MiSeq Reagent Kit v3 MiSeq 试剂盒 v3SP6 RNA Polymerase (20 U/µL) SP6 RNA 聚合酶 (20 U/µL)dUTP Solution (100 mM） dUTP 溶液（100 mM）Epredia™ Neg-50™ Frozen Section Medium Epredia™ Neg-50™ 冷冻切片培养基Обратная транскриптаза Mint 逆转录酶Эмбриональная бычья сыворотка (FBS, происхождение Южная Америка), 500 мл (-20°) 胎牛血清（FBS，原产南美），500 毫升（-20°）Agarose, low gelling temperature Type VII-A, 琼脂糖，低胶凝温度 VII-A 型，Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline, Dulbecco 的磷酸盐缓冲液Sony Sorting Chip-70um for SH800 and MA900 (box of 40) 适用于 SH800 和 MA900 的 Sony Sorting Chip-70um（40 盒）GM 6001 伊洛马司他 基质蛋白酶抑制剂Aphidicolin 艾菲地可宁Glutaraldehyde solution 戊二醛溶液Click-iT™ EdU Cell Proliferation Kit for Imaging, Alexa Fluor™ 488 dyeGreen features 细胞增殖检测试剂盒Grid-Stick Glue (For recoating Grid-Stick)HEPES 4-羟乙基哌嗪乙磺酸High Sensitivity DNA Kit高灵敏度 DNA 试剂盒RNA 6000 Pico Kit RNA 6000 Pico 试剂盒RNA 6000 Nano Kit RNA 6000 纳米试剂盒Goat anti-Rat IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 546 山羊抗大鼠 IgG (H+L) 交叉吸附二抗，Alexa Fluor™ 5465ml tips 吸头Axygen TF-1000Axygen T-300Стекла предметные Superfrost plus с углами 90° со шлифованной кромкой с зоной для маркировки белого цвета Superfrost plus 带有 90° 角的幻灯片和带有白色标记区域的磨边шт Планшет для 25 предметных тонких стекол, прозрачная крышка, ПЭ, 用于 25 个薄载玻片的板、透明盖、PE、Планшет на 50 ст. тонких предм. стекол, ПЭ, прозрачная крышка, белый, 用于 50个薄载玻片的板、白色、透明玻璃Grid-Stick KitGrid-Stick, uncoated 无涂层Staining Pipettes with 2 plugs 带 2 个塞子的染色移液器Filter Tips 10μl, 50 racks 带滤芯吸头Filter Tips 200μl, 50 racks 带滤芯吸头Filter Tips 1000μl, 50 racks 带滤芯吸头Дозатор 0,5-10 мкл, 8 каналов, biohit proline plus 8通道移液器Дозатор 10-100 мкл, 8 каналов, biohit proline plus8通道移液器Дозатор 30-300 мкл, 8 каналов, biohit proline plus8通道移液器Охлаждающий ПЦР-штатив, 0,2мл 低温PCR架 有机玻璃Охлаждающий ПЦР-штатив, 2мл 低温PCR架 有机玻璃Система обратного осмоса Angstra R-5C 实验室反渗透纯水机Редуктор давления 隔膜式减压阀 DRVN 1.5-6 barМанометр 压力表Картридж B150 Миди 滤芯椰壳活性炭 140X330Мешок 20л储水袋Комплект промывки 反渗透及管路清洗组件УФ лампа 双波长紫外灯Картридж умягчителя软化柱картридж сверхчистой воды 超纯化柱Патрон предварительной обработки预处理柱2 модуля обратного осмоса (RO модуля)反渗透柱SterilePlus (стерильный фильтр, Sartopore 2 150)Galileo 1214 Mini Gel Unit 水平电泳迷你凝胶系统 Pbs без кальция и магния Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline D5652-10L杜氏磷酸盐缓冲盐水 PBS 不含钙和镁Пробирки с оптически-прозрачной плоской крышкой объемом 0,2 мл 带光学透明平盖的试管，0.2 mlСуспензия магнитных частиц CleanMag DNA - 5 мл (пробирка 1 мл - 5 шт) BC35S 磁性粒子悬浮液 CleanMag DNA - 5 ml（管 1 ml - 5 pcs）пробирка 1 мл 悬浮液管1mlШтатив RA-20002 Компания Хеликон Артикул RA-20002 pcr变色冷冻盒Магнитный штатив для пробирок объемом 1.5-2.0 мл pcr PCR冷冻盒Суспензия магнитных частиц CleanMag DNA - 5 мл (пробирка 1 мл - 5 шт) BC35S磁力冷冻盒Штатив RA-20002 Компания Хеликон Артикул RA-20002 离心管托盘VWR (Amresco) Агароза (Biotechology Grade) Am-O710-0.5 500г VWR（Amresco）琼脂糖（生物技术级）Am-O710-0.5 500gEncyclo полимераза PK002L 0X смесь полимераз Encyclo, 5 x 100 мкл10X Encyclo буфер, 5 x 600 мкл 1000 р-ций объемом 25 мкл环聚合酶 PK002L 0X 环聚合酶混合物，5 x 100 µl10X Encyclo 缓冲液，5 x 600 µl 1000 25 µl p-tions 采购单位：湖南中星科技有限公司联系人：樊先生（总经理）联系电话：15388055177邮箱：282794290@qq.com还需要其他的试剂，请优质生产厂家直接发英文目录至邮箱，或添加微信（同手机号）。

核酸的高电荷磷酸骨架要比其他生物大分子如蛋白、多糖、脂肪等更具有亲水性，所以利用强亲水性表面的硅羟基磁珠可以有效捕获核酸，实现核酸与其他生物大分子的分离。硅羟基磁珠表面的硅羟基能够与溶液中的核酸通过氢键和静电作用发生特异性结合，在高盐条件下与核酸结合，在低盐条件下被洗脱，从而实现核酸分子的快速分离。华大智造最新推出的硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ是一款专门用于核酸提取和纯化的磁珠，属于多分散磁珠，表面修饰有大量的硅羟基基团，具有亲水性好、捕获效率高、容易在粘稠样本中分散等特点，尤其适用于从血液、唾液等样本中提取大量的gDNA。产品亮点● 磁响应性快，满足自动化提取需求；● 磁珠不规则结构，易于分散和重悬，特别适用于血液、唾液等粘稠样本的提取；● 氧化硅层包裹完整，性能稳定性好。性能表现1采用以硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ为关键原料的血液基因组DNA提取试剂盒对冻存多年的白膜层细胞进行提取后，提取产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析，表明本试剂盒可以高效从冻存多年的白膜层样本中提取gDNA。图1，从冻存多年的白膜层样本中提取的gDNA上样于1%琼脂糖凝胶电泳图。A1-A4是冻存5年的白膜层样本，C1-C6是冻存4年的白膜层样本；M1和M2分别是λ-Hind Ⅲ digest DNA Marker和50bp DNA Ladder Marker。性能表现2采用以硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ为关键原料的血液基因组DNA提取试剂盒对冻存的全血、新鲜唾液等样本进行提取，提取的产物分别进行产量和纯度的计算,结果见表1。结果表明：本试剂盒可以从血液、唾液样本中提取高纯度、高产量的gDNA。表1：提取结果样本类型A260/A280A260/A230产量（µg）冻存的抗凝全血1.831.9410.2冻存的抗凝全血1.831.939.1冻存的抗凝全血1.821.937.3冻存的抗凝全血1.842.0212.6新鲜的唾液1.771.579.94新鲜的唾液1.801.6413.64新鲜的唾液1.911.526.3新鲜的唾液1.841.7314.24新品有试用活动，可导华大智造官方公众号了解详情。

很早人们就发现，太阳光通过三棱镜折射后会形成红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫，像彩虹一样，这种现象在1666年被牛顿证明白光含有七种单色光。像太阳光这种复色光经过色散系统(如棱镜)分光后，单色光按波长(或频率)大小依次排列的图案，被成为光谱。　　1906年，俄国植物学家茨维特在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入装有碳酸钙微粒的玻璃柱子上部，然后加入石油醚使其自由流下，结果使不同的色素在柱中得到分离而形成不同颜色的谱带，按光谱的命名方式，这种方法因此得名为色谱法。　　以后色谱法逐渐应用于无色物质的分离，但“色谱”二字仍被人们沿用至今。　　苏州赛分科技股份有限公司(下称“赛分科技”)是一家研发、生产、销售用于药物分析检测和分离纯化的液相色谱材料的企业，在2022年12月30日向上交所科创板递表。赛分科技拟发行不超过4,072.09万股普通股，募资8亿元，用于20万升/年生物医药分离纯化用辅料项目、研发中心建设项目、补充流动资金。保荐机构为中信证券，审计机构为容诚。目前已回复第二轮问询。　　有媒体研读其招股书(特指赛分科技2022年12月30日提交的申报稿)后，认为赛分科技此次上市之路或有波折。为何?　　一、实控人减持数年，控制权或旁落　　2002年2月，36岁的学霸黄学英与妻子一起，和另一对夫妻在美国特拉华州共同成立Sepax Technologies, Inc(美国赛分)，并担任董事长至今。当时黄学英任职为美国杜邦研发中心资深化学家，2005年他离开了工作五年的以科研为基础的化工巨头美国杜邦。　　美国赛分主要从事分析色谱产品的研发、生产及销售，2009年同时成为Agilent Technologies Inc.(美国安捷伦科技有限公司及其关联公司)和Wyatt Technology(怀雅特技术公司)的OEM供应商。　　自己的产品却贴上别人的标签，不知这是不是有违黄学英从杜邦出来自己创立公司的本意，从双方保持合作至今来看，应该是欣然接受的。　　黄学英为江苏南京人，同样在2009年，他和沈建林、潘鼎在苏州创立苏州赛分科技有限公司(下称“赛分有限”)，即赛分科技的前身，注册资本1,000万元，黄学英出资比例90%。2012年4月，赛分有限注册资本增至2,000万元，由三位老股东按原始出资比例认缴。　　此后，到2021年9月赛分有限整体变更为股份公司前，黄学英一直在转让自己的出资额，受让方有看好公司发展的个人投资者，有员工持股平台，有黄学英的好友组建的投资平台，也有外部投资机构。　　根据转让数量与转让价格，我们测算这9年间黄学英的6次有价转让大约可以套现4,400万元：　　令人不解的是，表中的外部投资机构高新同华、华泰大健康一号和二号、道兴投资在受让黄学英出资额三个月后就对赛分有限进行了增资 复星惟盈更是在和黄学英签署《股权转让协议后》的两天，又和赛分有限签署了增资协议。而且这些投资机构的增资价格均高于受让黄学英出资额的价格，对复星惟盈来说，差不多同时签署的两份合同，整体估值却差了6,000万元。　　据招股书，到了2019年年初的时候，黄学英直接持有赛分有限的出资比例已由设立时的90%大幅降至36.69%。报告期(2019年至2022年1-6月)内前两年赛分有限未发生股权变动，近半年赛分科技未发生股份变动。2021年却很热闹，股改前赛分有限有2次股权转让、1次增资，股改后赛分科技有2次外部机构增资、1次资本公积转增资本。　　因此到了报告期末，赛分科技股东共计32名，黄学英直接持股比例已下降至25.20%。若此次IPO成功，黄学英直接持股比例会进一步被稀释至22.68%，就算加上通过员工持股平台而间接持股的5.75%，合计比例也才28.43%(见下图)。　　自己本有90%的绝对控制权，却陆续将所持股份对外转让至30%都不到，不知这是不是有违黄学英回国创立企业的初衷，但从他可以套现4,400万元来看，可能是不亦乐乎的。　　科创板上市审核问答第5问关于实控人认定有要求：发行人股权较为分散但存在单一股东控制比例达到30%的情形的，若无相反的证据，原则上应将该股东认定为控股股东或实际控制人。由此可知30%是一般而言认为控制权较为稳定的最低比例，如果低于这个比例，可能会存在其他股东通过收购公司股权或其他途径导致现有实控人的控制地位不稳的风险，进而对公司的发展战略和经营方针存在不利影响，甚至损害中小股东的利益。　　此外，外部投资机构华泰大健康一号、高新同华、国寿疌泉和复星惟盈，入股赛分科技后均委派了董事，除复星惟盈外其他投资机构持股比例都在5%以上。因此赛分科技目前董事会的9名董事中，3名独立董事全部系由黄学英提名，6个非独立董事席位上述投资机构占据了4席，其余为董事长黄学英和员工持股平台委派的董事。　　即便加上独立董事黄学英能控制的表决权不到三分之二，何况上交所2023年8月4日发布的《科创板股票上市规则(2023年8月修订)》中明确“要求独立董事履职不受上市公司及其主要股东、实际控制人等单位或者个人的影响”。　　二、科创属性或不够“硬”　　赛分科技招股书中关于其科创属性披露见下图，认为其自身符合相关要求：　　图中的4项指标需同时符合，其中“形成主营业务收入的发明专利数量”这一项几乎是踩线达标。研发费用、收入及员工数量是否有水分我们下文再讨论，此处就先由从专利说开去，来看看赛分科技的科技实力到底如何。　　1.专利少于同行　　赛分科技与可比企业专利取得数量比较情况如下图：　　赛分科技表示，与其同处国内医药分离纯化领域、以液相色谱材料为主营产品的上市公司仅纳微科技一家，而纳微科技(688690.SH)专利中还有光电、仪器设备等相关的专利，经过咨询业内专业人士筛选后，其色谱材料相关的专利为28项。赛分科技自身色谱材料相关专利为18项。　　据了解比美国赛分成立晚五年的纳微科技未曾公布披露以不同领域分类的专利数量，先不论赛分科技咨询的专业人士筛选得是否准确，筛选后的纳微科技细分专利数量仍然比赛分科技的数量高。　　2.市场占有率低　　一般来说市场份额能够最直观的反映企业在市场上的地位，市场占有率越高，说明产品的竞争力越强。　　赛分科技的主营产品包括分析色谱和工业纯化：分析色谱产品主要用途是将每组成分精确地分离开来并准确测定其含量，通常应用于药品的分析检测 工业纯化产品的主要用于实现目标成分的提取，侧重于对目标物的捕获以及杂质的去除，以确保最终药品的纯度。　　黄学英2002年先创立美国赛分的时候，就是以色谱材料领域起家的。后被苏州的赛分科技收购，成为赛分科技境外业务的核心运营主体，自身具备采购、生产及销售模式。报告期内分析色谱产品收入占比在60%以上。　　据问询回复，分析色谱柱市场主流厂商均为境外上市公司。因无相关公开数据和行业报告，尚无可获取这些主流厂商在我国的市场份额。于是赛分科技结合关于我国分析色谱市场规模预测的相关行业研究，自己测算出在分析色谱市场其2022年国内市场占有率为5.68%。　　这个比例是不高的，至少与2021年相比还有所下降。据招股书，2021年中国色谱柱市场规模达到12.5亿元，以赛分科技2021年分析色谱柱收入0.81亿元测算，其市场份额为6.48%。　　其实从网上可检索到很多专业机构对我国色谱柱行业的研究报告，在赛分科技2023年6月披露问询回复之前，某家咨询机构已推出《2023-2029年中国色谱柱行业发展战略规划及市场规模预测报告》，并被多家主流媒体推荐，据说其核心数据已更新至2022年12月底。以下为该报告对外展示的部分内容截图：　　该报告提到色谱柱行业重点企业的目录和内容都没有看到赛分科技的身影，我们不禁想套用一下国内当红带货主播近日引发人们热议的句式：在色谱柱领域发展二十余年，市场份额仍不理想、没被专业机构视作重点企业，有的时候要找找自己的原因，有没有认真研发提升产品竞争力?　　工业纯化领域方面就更不用说了，赛分科技自己也说前期聚焦于分析色谱业务，工业纯化业务仍处于起步阶段，自2020年起才开始积极布局。该领域同样被国外主流厂商占据主导地位，2021年五大国际主流厂商占据了约54%-67%的全球市场份额。赛分科技自己测算的其2022年色谱介质市场的国内占有率为0.98%，可以说是很低了。　　3.产品优势是否“优”了个寂寞?　　赛分科技在经营规模远低于可比企业、市场份额也较低的情况下，仍然认为其核心产品的关键性能指标总体持平甚至个别指标优于Cytiva(美国思拓凡公司)、Tosoh(日本东曹株式会社，股票代码4042.T)等全球主流厂商同类产品比如赛分科技报告期内收入占比最高的产品体积排阻色谱柱，赛分科技选取分析色谱领域主流厂商Tosoh在全球最大的医药综合服务平台之一VWR上销量排名第一的产品相比较。对比结果显示赛分科技的体积排阻色谱柱粒径更小、可耐受pH范围更广、耐高温性能更佳、能分离的蛋白质分子量范围更广、耐压性更高、可耐受的盐浓度范围更广。　　六个“更”字显得方方面面都比国外最牛的产品要好，可是赛分科技的体积排阻色谱柱在2019年至2022年的收入占比分别为39.32%、37.24%、30%、27.84%，在2019年至2021年的毛利占比分别为42.16%、39.74%、31.97%，均呈下降趋势。　　按理说，既然是如此好的产品，是赛分科技成立后首先推出的产品，也是由2006年就加入美国赛分的研发部总监Mathew George博士主导研发的产品，不是应该继续往前推，去和国外产品抢市场吗?怎么就慢慢退居二线了呢?　　赛分科技在报告期内重点开拓市场的是工业纯化业务，其核心产品亲和层析填料收入规模及比重不断增加，2022年收入占比23.72%，在赛分科技所有产品中排名第二，仅次于体积排阻色谱柱。　　对于该产品赛分科技选取了Cytiva、纳微科技及经销商Thermo Fisher(股票代码TMO.N)的相关产品进行比较。一共7个指标，有4个指标基本相同或无显著差异，有2个指标赛分科技与两个可比企业无显著差异，还剩一个指标不置可否，只说和其他企业存在区别。　　这样看来，赛分科技主推的亲和层析填料貌似并没有独自优于主流厂商的地方。如果没有显著的技术优势，国外大佬先不谈，仅仅是国内的纳微科技可能就会让赛分科技望尘莫及。赛分科技坦言，纳微科技由于进军该领域较早，已先于自己完成对部分客户的生产阶段替换。下游企业商业化生产阶段如果替换填料供应商，涉及的工作主要依次包括小试、中试、PPQ、药监局审批等，总替换周期通常需要18个月以上。这意味着赛分科技想再次替换纳微科技，似乎没那么容易。　　总而言之，赛分科技的科创属性从定量和定性两方面都表现得差强人意。赛分科技表示，在分析色谱领域将“凭借先进的技术水平、优异的产品性能及优质的客户资源，预计未来将进一步推动国产化率的提升”，在工业纯化领域将“在部分医药项目中实现供应商替换，并用于大规模商业化生产，预计未来将逐步打破由国外巨头和进口产品主导的竞争格局，进一步推动国产化率的提升”。然而，科创属性不是靠口号喊出来的，也不是用饼画出来的。　　三、经销疑云　　赛分科技报告期内经销收入占比分别为38.99%、29.14%、29.63%和21.45%，据招股书其境内销售采用直销为主，经销为辅的业务模式 境外由于国外客户数量分布广泛，采用直销和经销相结合的业务模式，境外经销商客户Thermo Fisher在报告期内一直位居前五大客户。　　1.股东“送”来的“一次性”经销商?　　值得注意的是，赛分科技之前“素未谋面”的千络供应链(上海)有限公司成为2021年第二大客户、第一大经销客户，也从而将当年经销模式下新增客户收入占比整体拉高至34.05%。　　千络供应链分别于2021年7月、9月向赛分科技支付预付款，合计1,491万元(含税)，采购色谱填料1,500L(工业纯化业务)。赛分科技当期确认收入1,319.47万元，实现营业利润1,149.65万元。　　上述交易之后，千络供应链未再次采购，而且据审核问询，2021年年末该批填料千络供应链并未对外销售，2022年末未销库存数量还有700L，之后的销售情况千络供应商拒绝提供。　　对这诸多不合常理之处，赛分科技的解释长达19页，涉及当事人也较多：什么这批填料的终端客户为北京生物，来自其疫苗生产项目的需求 该疫苗项目的研发工作主要由国药中生研究院负责，后续转产则由北京生物承接，两者均为国药集团下属企业 北京生物通过谈判采购招标确定中标方为国药集团旗下采购平台—国药化学试剂，千络供应链系国药化学试剂的采购代理商。　　我们将赛分科技解释内容的主要节点按时间顺序重新整理如下：　　不得不说，表中反映的信息量有些大。2019年才成立的外商独资企业千络供应链如何成为国药化学试剂的采购代理商?未实现销售的700L填料目前的情况为何拒绝提供?国药化学试剂对接赛分科技时，为何为商业谈判而不涉及履行招投标程序?为何未公布中标结果前就开始找生产商?离职的陈志后来新增的500L填料采购是否源自北京生物相关疫苗生产项目所需填料的复购需求?　　超出本文讨论内容的我们不予置评，要关注的是，国药中生基金入股赛分科技从尽调到最后签署合同，正好与这笔1,500L合同前后交易的时间差不多。如果将千络供应链的这笔交易纳入客户国药集团，赛分科技测算出2021年国药集团这家股东关联客户收入合计占当期主营业务收入的比例高达12.92%。这很难让人不觉得是客户的关联方给与的特殊照。　　赛分科技表示向千络供应链销售产品的单价与向其他客户销售同类产品的单价较为接近，不存在重大差异。但其实这里比较的不应该是价格差异了，而应该比较的是销售机会，尤其是在报告期，尤其是科创属性对营业收入有要求。　　2.实控人“关注”的非买断式经销商?　　在遇到国药集团这样的有资源有实力的股东之前，赛分科技自己为收入也费了些心思。一边宣称经销业务是买断式经销，一边又以“提高经销商相应市场需求的能力”为由，在2020年确定了一批重点合作的经销商名单，并口头承诺给予较合同约定更为宽松的信用政策及退换货政策，但签订的协议仍然是买断式销售协议，即合同约定的信用政策与实际执行存在差异。　　于是这些经销商们在2020年四季度“备货式”采购，2020年末经销商未实现销售的存货金额为343.42万元，这批存货赛分科技在2020年确认收入661.71万元。　　上述存货中金额前两位的经销商是山东创祥化工科技有限公司和通化捷创科技有限公司，分别持有“备货”库存72.23万元、67.26万元，产品大类均主要为硅胶机智填料。你说巧不巧，山东创祥实控人的配偶刘立峰系赛分科技的前员工。刘立峰2016年3月入职赛分科技，担任销售工程师，2017年6月从离职后加入山东创祥。　　此外，实控人黄学英对这两家经销商也格外关注。问询回复显示，“备货”相关合同履行的内部审批大多是运营长审批后销售总监审批就行，但山东创祥与通化捷创的审批流程是销售总监审批后总经理亲自审批：　　其实，这种操作赛分科技肯定自己都觉得不合理、不合规。不然的话，为何协议约定的条款不敢按实际执行的情况来写?中介机构也觉得不合规，要求赛分科技与上述重点合作经销商协商后于2021年1-5月陆续收回尚未实现终端销售的商品，并作为发出商品列报。　　可能中介机构认为主动整改了应该没什么问题，谁知上交所发出灵魂拷问-存货的含义，收回的存货能否按照赛分科技控制的库存商品进行管理和盘点?结果，赛分科技于2023年7月10日进行了会计差错更正，将2020年4季度经销商提前备货采购而发送至相关经销商的商品由“存货”重分类至“其他流动资产”。　　赛分科技如果能将这些心思多花在研发上，可能这二十年结出的果会更大更甜。　　综上所述，赛分科技科创属性或不突出，市场份额低，技术优势不显著 变相向经销商压货，股东关联客户“介绍”业务，以小见大可知内控不够规范，收入疑有水分 连创始人都多年减持所持的股份，可能难以说服潜在投资者对赛分科技保持信心 加之其持股比例已在30%边缘，日后控制权或旁落，或对企业经营发展可能有不利影响。　　2023年8月，赛分科技已完成两轮问询。从所披露的信息来看，赛分上市的挑战远不止上面那些。　　原材料采购量、领取量数据矛盾　　报告期(2019年至2022年上半年)各期末，赛分科技的营收规模分别为7,373.07万元、9,766.97万元、15,488.71万元、7,493.60万元，净利润分别为-1,064.81万元、938.57万元、2,162.02万元、977.11万元，扣非后的归母净利润为-964.01万元、646.82万元、2,001.72万元、492.27万元。2022年上半年赛分科技的经营成果受非经常性损益影响较大，其中购买的理财产品及结构性存款获取的投资收益为利润出了一份力。　　与纳微科技相比，2020年刚扭亏为盈的赛分科技在营收规模及利润方面尚有一定差距。2022年1-6月，纳微科技的半年度利润已突破亿元大关。　　赛分科技生产的色谱柱和色谱填料，根据应用可划分为分析色谱和工业纯化两大领域。分析色谱材料的微球粒径通常在10微米及以下，主要用于药物的研发分析、质量控制和小量样品的制备，实现对不同组分的分离，分析色谱产品多以填装成柱的色谱柱形态存在。工业纯化色谱填料(又称“层析介质”)的微球粒径通常在10微米以上，主要在药物的临床研究阶段以及工业化生产阶段用于分离纯化，实现目标成分的提取，工业纯化类色谱产品形态多为散装层析介质，便于药企大规模纯化使用。　　赛分科技生产产品所需的原材料包括基质及基质生产试剂、色谱柱柱管及配件、表面功能化用试剂等。其中，基质及基质生产试剂主要为琼脂糖、多孔硅胶、聚合物单体等。据首轮问询回复文件，2019年至2022年，赛分科技采购琼脂糖的金额分别为2.79万元、23.52万元、996.69万元、890.58万元。　　赛分科技还在首轮问询回复文件里披露了琼脂糖、多孔硅胶、聚合物单体采购量、领用量和产品产量的匹配关系表，但是表格中琼脂糖仅在2021年和2022年有采购量，分别为3,051.50L、2,543.50L，另外两种原材料多孔硅胶、聚合物单体则披露了2019年至2022年的四年的采购量。为什么琼脂糖2019年和2020年有采购额，却没有披露采购数量?首轮问询回复文件中提及，赛分科技在2019年及2020年尚未规模化开展琼脂糖基质填料生产，不知是否是此因素影响。　　然而，赛分科技的信披显然不够充分。赛分科技在首轮问询回复文件中分析存货中原材料的去向时，2019年期初，琼脂糖结存数量为10.52L，2019年至2022年的各期入库量分别为0L、107.00L、3,083.90L、2,828.56L，对应的入库金额分别为0万元、78.15万元、1,074.68万元、1,057.48万元。琼脂糖仅2019年没有入库量，其后三年入库数量均高于前文披露的采购数量。琼脂糖2019年至2022年的入库金额也与前文披露的采购金额不一样，除2019年的入库金额低于采购额外，其余三年的入库金额均高于采购额。　　分析存货中原材料去向的表格下有一条注释，“上表金额勾稽差异系汇率波动所致”。以上数据的差异若是汇率波动导致，那为什么该表格中琼脂糖2021年和2022年的生产领用数量、研发领用数量又与之前披露琼脂糖采购量、领用量和产品产量的匹配关系时同期的生产领用量、研发领用量一致?　　再来看赛分科技另一种原材料滤片的生产领用和研发领用数量情况，在首轮问询回复文件中也出现了数据打架的情况。　　根据首轮问询回复文件，赛分科技在披露“色谱柱柱管采购量、领用量和产品产量的匹配关系”时，滤片2020年的生产领用量为39,747.00个，研发领用量为2,155.00个 2022年的生产领用量为44,626.00个，研发领用量为6,515.00个。但是赛分科技披露存货中滤片的使用去向时，2020年滤片的生产领用量和研发使用量分别为39,743.00个、2,155.00个，2022年的生产领用量和研发领用量分别为44,626.00个、6,495.00个。　　扬州一、二期项目多处数据有变　　赛分科技在工业纯化领域形成了系统完善的技术及产品体系，为满足生物制药下游分离纯化需求，于2017年12月成立全资子公司赛分科技扬州有限公司(下称“扬州赛分”)，建设占地达41,405㎡的生产基地，专注色谱层析介质的生产。据招股书，扬州一期工程建设抗体、疫苗、胰岛素等药物专用介质八条生产线，年产能达24,760升，在2021年正式投产。　　这次IPO，扬州赛分实施建设的募投项目“20万升/年生物医药分离纯化用辅料”也就是扬州二期工程建设项目。　　从招股书披露的扬州一期工程相关信息来看，一期工程项目的全称或为“新建生物医药分离纯化用色谱介质生产基地项目”。　　根据扬州市邗江区人民政府官网2019年8月公示的项目环评文件，新建生物医药分离纯化用色谱介质生产基地项目的投资总额为20,000.00万元，在扬州生物科技园征地41,405㎡并分两期来建设，其中一期新建色谱层析介质生产线5条(含1条小批量线)，形成年产小分子药物专用色谱介质、胰岛素专用色谱介质、生物大分子专用介质共计21,760升 二期新建色谱层析介质生产线4条，形成年产小分子药物专用色谱介质、胰岛素专用色谱介质、生物大分子专用介质共计21,000升。其中一期土建工程包括车间1、车间2、仓库1、公用工程房、综合楼及其他公用配套工程 二期土建工程包括车间3、车间4、车间5、仓库2、产品应用中心等，另外配套环保工程在一期工程建设过程中一次性建成。　　从江苏卓环环保科技有限公司(下称“江苏卓环”)2022年8月编制的项目竣工环境保护验收监测报告来看，新建生物医药分离纯化用色谱介质生产基地项目的实际投资金额缩减至10,000.00万元，在实际建设中，一期建设车间一、车间二生产小分子药物专用色谱介质、胰岛素专用色谱介质、生物大分子专用介质共计21,760L/年，生产规模未发生变化。一期工程在2020年6月开工，2021年3月竣工，于同年6月通过竣工环境保护验收。二期在车间一生产胰岛素专用色谱介质、生物大分子专用介质共计13,000L/年，放弃建设8,000L小分子生产线，而且二期土建工程(三座生产车间、一座仓库、一座产品应用中心)也未建设。二期于2021年11月开工，2022年3月竣工。建成后，项目的合计规模为34,760L/年。以上新增产能比招股书披露的扬州一期工程产能多出了10,000L/年，并且投产时间也存在分歧。　　据招股书(签署日期2022年12月24日)，扬州二期工程“20万升/年生物医药分离纯化用辅料”建设项目的投资总额为41,467.68万元，拟使用募集资金33,423.41万元，年新增20万升色谱介质产能，建设周期为两年。　　根据扬州市邗江区人民政府官网去年12月公示的20万升/年生物医药分离纯化用辅料项目环评文件(江苏卓环于去年11月编制的项目环评文件)。该份文件中，扬州赛分要利用现有厂区内的预留用地来建设之前放弃的土建工程(车间三、车间四、车间五、仓库二等)，同时建设配套公用工程、辅助工程、环保工程等。扬州二期工程也将分成两期来建设，其中一期工程依托车间一现有生产线，通过延长工作时间实现年产药物分离纯化用辅料4,000L/a，二期工程新建四条生产线，年产药物分离纯化用辅料196,000L/a。项目投资总额为55,000.00万元，施工期为一年。　　赛分科技的招股书签署日期与扬州二期工程项目环评文件的编制时间仅相差一个月，但是项目的投资金额与建设周期均发生了重大变化，不知道该环评是否需要重新报批。

导读尽管各国卫生系统发展迅速，但由病原菌引起的传染病仍然是人类健康的主要威胁之一。据报道，全世界每年有220多万人死于水传播大肠杆菌病原体。尽管大多数大肠菌群是无害的，但某些大肠杆菌的存在可能会导致甚至威胁到人类健康，例如，大肠杆菌O157:H7和其他产志贺毒素的大肠杆菌菌株（非O157 STEC）是食源性疾病的常见因素，可能对健康造成严重后果，尤其是对幼儿。因此，检测大肠杆菌对于生物医学应用以及食品、水和空气质量监测非常重要。大连理工大学环境科学与技术学院，工业生态学与环境工程教育部重点实验室的科学家，开发出基于naica全自动微滴芯片数字PCR系统的单细菌检测方法，该方法可以在1.5小时内以单细胞灵敏度选择性检测临床尿液样本中的大肠杆菌 。该方法发表在《Analytical Methods》，题为“Single bacteria detection by droplet DNAzyme-coupled rolling circle amplification”。应用亮点：▶ dDRCA系统，能够快速、选择性地检测具有单细胞敏感性的大肠杆菌 ，dDRCA系统的检测灵敏度比之前报道的PAD高1000倍。▶ 证明了dDRCA系统在尿路感染诊断中的潜在临床适用性，dDRCA能够在不到1.5小时内，从20份临床尿液样本中成功识别出5名UTI患者，而传统的基于培养的方法需要数小时。文中采用naica️全自动微滴芯片数字PCR系统液滴微流控技术，快速精准的检测到复杂样本和高背景样本中的致病大肠杆菌。通常扩增需要约4小时进行定量大肠杆菌检测。在这项研究中，我们描述了DNA酶偶联滚圈扩增（RCA），这是一种高效的等温酶DNA复制过程，可在naica️全自动微滴芯片数字PCR系统上进行，以建立液滴DNA酶偶联RCA（表示为dDRCA）系统。我们进一步证明，该系统能够在1.5小时内以单细胞敏感性选择性检测临床尿液样本中的大肠杆菌。▲图2（a）通过琼脂糖凝胶电泳分析RCA产物（RP）。（b） 反应混合物在指示反应条件下的荧光响应：+RFD-EC1/+ RDS/+ E. coli (blue line) RFD-EC1/+ RDS/+ E. coli (green line) RFD-EC1/+ RDS/-E. coli (red line) + RFD-EC1/+ RDS/-E. coli (pink line)。（c） Naica Prism3阅读器图像（左）、CLSM图像（中）和荧光显微镜图像（右）为微晶芯片液滴的大小。比例尺：1.4 mm（左）和100 mm（中、右）。指示反应条件下dDRCA系统的荧光图像和荧光滴数：（d）+RFD-EC1/+ RDS/+ E. coli （e）-RFD-EC1/+ RDS/+ E. coli (f) -RFD-EC1/+ RDS/ E. coli (g) + RFD-EC1/+ RDS/ E. coli.使用Naica Prism3阅读器对生成的荧光液滴进行成像和分析。dDRCA系统能够在75分钟内选择性计数具有单细胞敏感性的大肠杆菌，包括20分钟的细胞裂解时间、12分钟的液滴生成时间和43分钟的液滴反应时间。通过比较其他三种常见细菌，包括枯草芽孢杆菌（B.subtilis）、酸性乳片球菌（P.acidilactici）和唐菖蒲伯克霍尔德菌（B.gladioli）存在时的信号反应，也检查了dDRCA检测大肠杆菌的选择性。当用缓冲液或尿液中的这些意外靶点测试每个dDRCA系统时，未观察到明显的荧光液滴（图4c和S4†）。▲图4（a）不同大肠杆菌浓度（每毫升细胞数）下dDRCA反应的荧光图像。比例尺：1.4 mm。（b） 不同浓度下计数的液滴数与大肠杆菌之间的关系。提供了计数的液滴数量，插图显示了1–104大肠杆菌范围内的线性反应。误差条代表三个独立实验的标准偏差。（c） dDRCA的特异性。最终证明了dDRCA系统在尿路感染（UTI）诊断中的潜在临床适用性。分析了20份患者和健康献血者的临床尿样。整个操作程序包括：（1）细胞收集和裂解（25分钟）；（2） 液滴生成（12分钟）；（3） 液滴反应（43分钟）。如图5c所示，五个尿样，即ID 6、8、9、12和14，比其他尿样产生大量荧光液滴（3000）。使用传统的大肠杆菌培养方法进一步确认了这些有无大肠杆菌感染的样本（图5d）。因此，对UTI的诊断有很大的希望。▲图5（a）检测尿液样本中的大肠杆菌。（b） 显示尿液样本中计数数与大肠杆菌细胞在1-104范围内的线性相关性的曲线图。（c） 20份临床尿液样本中阳性液滴的数量。（d） CLED（胱氨酸、乳糖电解质缺乏）琼脂细菌尿液培养板。黄色菌落代表大肠杆菌在37℃的CLED琼脂中培养22小时后的生长。该系统能够在不到1.5小时的分析时间内，从20份临床尿液样本中成功识别出5名UTI患者，而传统的基于培养的方法需要数小时。原文：https://doi.org/10.1039/D2AY00656Anaica六通道数字PCR系统法国Stilla Technologies公司naica六通道数字PCR系统，源于Crystal微滴芯片式数字PCR技术，自动化微滴生成和扩增，每个样本孔可实现6荧光通道的检测，智能化识别微滴并进行质控，3小时内即可获得至少6个靶标基因的绝对拷贝数浓度。

SERVA 于1953年建立于德g海德堡（德g生命科学的中心），以其生产的胶原酶、电泳试剂、生化试剂等闻名于世界，拥有ISO9001：2000 证书。 SERVA不仅是世界上胶原酶z大的生产厂家，还是蛋白质电泳方面的专家，30多年来，在两性电解质和预制胶方面处于世界l先水平，目前还在继续研发和生产更多的蛋白质研究和蛋白组学方面的产品，为全球各地的用户生产和提供高pz的产品与专业化服务。 2006年百灵威与SERVA正式签署战略合作协议，由百灵威负责SERVA在中g市场的产品销售、技术应用与支持等各项业务。百灵威始终秉承&ldquo 资源共享，共同发展&rdquo 之理念，y如既往地为中g化学行业广大科研和生产用户提供卓越的产品与服务！ SERVA产品系列 电泳试剂 电泳产品 其他类产品（染色剂、标准品） 常用产品（DNA琼脂，琼脂糖、丙烯酰胺） 电泳仪器 仪器（供电器、凝胶） 生物分离 生物分离试剂（溶剂） 生物分离介质（离子交换试剂） 生命科学 分子生物学（分子生物试剂） 微生物学（琼脂，蛋白胨，酵母提取物） 细胞生物学（胶原酶） 生物化学 蛋白质（白蛋白） 酶学（酶） 燃料（四唑盐） 试剂（表面活性剂 网址：www.serva.de

北京德泉兴业商贸有限公司作为Cytiva 思拓凡品牌的代理商将继续秉承公司及品牌理念，以客户为中心，为您提供优质的实验室解决方案。凝胶过滤层析 (GF)，也称为尺寸排阻层析 (SEC)，基本原理是根据样品分子大小和形状进行分离的一种常用的纯化方法，属于非吸附性层析。图1: Cytiva全新一代Increase系列分子筛预装柱，专门为小规格制备纯化及分析而设计根据应用目的的不同，凝胶过滤层析主要可以分为以下三种方法：1分析型凝胶过滤层析：对于分辨率有很高的要求，上样体积一般在柱体积的0.3% - 0.5%；使用柱子的高度一般为30cm。而在快速纯度检测和筛选的实验中，常用的是15cm柱高的柱子，可以在提供足够分辨率的前提下，缩短运行时间，节省样品和缓冲液。2制备级凝胶过滤层析：对于分辨率有较高的要求，上样体积一般在柱体积的0.5% - 4%。同时，运行时流速较低，使用的柱子高度也比较高 (一般≥ 60cm)。经过纯化后的样品将被直接置换到合适的缓冲液条件中，用于后续的实验或储存。3脱盐与缓冲液置换：与上述精细分离不同，脱盐或缓冲液置换属于组分分离，即，将大分子样品与小分子或离子进行分离的过程，因此对于分辨率的要求相对不高。上样体积可达柱体积的30%。SephadexSephadex填料是早期发现的一种填料，按照交联度的不同，用Sephadex G加数字来区别，数字越小交联度越大，形成的孔径越小，对应的分离范围越小。Sephadex G系列填料目前一般主要用于脱盐与缓冲液置换，且有多种分离范围、颗粒大小可以选择。粗颗粒 (Coarse)流速较快，细颗粒 (Fine)流速较慢，分辨率较高。图2.不同上样量对于脱盐实验结果的影响SepharoseSepharose填料是高流速大分子分离。作为琼脂糖基质的填料，具有非特异性吸附低、回收率高等特点，分离范围宽阔，从10kD – 2×104kD，适合分子量大小差异大而对分辨率要求不高的样本。Sepharose和2,3二溴丙醇反应而成的Sepharose CL系列填料，增强了Sepharose的物理和化学稳定性。特别适合含有机溶剂的分离，能承受较强的在位清洗，并可以高温消毒，同时在流速方面也比传统的Sepharose填料有了明显的提升。Sepharose Fast Flow填料为粒径90μm的高度交联的琼脂糖填料，大大加强了机械性能，流速特快，适合工业规模生产。该填料经去电荷处理，非特异性吸附特低，回收率也得到了了提高。极高的化学稳定性，可用多种促溶剂、有机溶剂工作及1-2M NaOH进行在位清洗。SephacrylSephacryl填料是葡聚糖与N,N-亚甲基二乙酰胺交联而成的一种新型葡聚糖填料。目前Cytiva提供5种不同分离范围的Sephacryl填料：Sephacryl S-100 HR、Sephacryl S-200 HR、Sephacryl S-300 HR、Sephacryl S-400 HR、Sephacryl S-500 HR，选择性广阔。排阻极限甚至可以达到108，不仅可以用于分离一般的蛋白，也可以用于分离蛋白多糖、质粒、甚至较大的病毒颗粒。同时经济型HiPrep 16/60、26/60 Sephacryl S-100，200，300，400，500HR预装柱提高了分辨率和重复性，具有较好的分离特性。SuperoseSuperose填料是分离范围广的填料，同时宽广的分离范围配合高分辨率，能一次性分离生物分子大小差异大的混合物。刚性相比传统填料有了极大的提升，在高粘性液体如8M尿素下也能保持流速，适合糖类、核酸、病毒，特别是包涵体蛋白在促溶剂中的纯化。Superose填料的颗粒细小，大小分布集中，允许高流速纯化，所以适合中、高压层析系统使用。图3.用于精细分离的凝胶过滤层析产品的分离范围SuperdexSuperdex由葡聚糖和琼脂糖的复合基质高度交联形成，是目前Cytiva产品中分辨率、选择性最高的凝胶过滤层析填料。该填料流速快且反压低，同时较低的非特异性吸附提高了回收率的表现能力。Superdex可以在高粘性洗脱液 (如8M尿素)在相对较高的流速下运行。在常用的水性缓冲液和添加剂 (如去污剂、变性剂)中化学稳定，并可以耐受1M的NaOH清洗。Increase平台系列预装柱：进一步缩小了填料粒径，提高了填料的耐压性能，提升了分辨率的同时有效缩短了分离纯化所需的时间。❖相同流速下更高分辨率：提高蛋白的纯度与分析数据的精度图4. 与Superdex Peptide相比较，新一代Superdex 30 Increase在相同流速下提高了50%分辨率❖相同分辨率下更高流速：节省实验时间，同等分辨率下时间更短，或通量更高图5. 与Superdex Peptide相比较，新一代Superdex 30 Increase在相同的分辨率下，只需要1/3的实验时间。❖批次差异更小，获得更好的可重复性图6. 在Superdex 30 Increase预装柱上重复注射由蛋白质和肽组成的样品混合物，并显示了运行1、50、150、250和350的结果。 蛋白质和肽的峰标记为1-5。Cytiva针对不同的实验目的，提供了3种不同规格的预装柱：适应于不同的上样量以及应用目的，Cytiva SEC Increase预装柱提供了丰富的选择与卓越的性能，为每一次蛋白纯化，样品分离都保证了不凡的表现。

分子生物学研究对提取RNA要求较高，纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法：常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法（Trizol法）、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强，尤其适合小样本及特别难提取的组织，如皮肤，动物结缔组织等总RNA的提取；另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂，还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法，电泳条带较为均一，但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合，在磁场作用下，磁珠-核酸复合物与液体分离，再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解，保证RNA质量？如何避免RNA降解？1.避免RNA酶的产生：A 、避免内源性RNAase：内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时，内源性RNA酶释放，降解RNA，降解速度与酶含量和温度有关，所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法：①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存；②立即切成小块投入液氮中保存；③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase：使用无RNase的塑料制品和枪头，玻璃器皿要消毒避免交叉污染，注意：戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套，在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率：A 、组织RNA提取：选用新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好；如果不是新鲜的(最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的)组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，待组织解冻后，用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，进行匀浆处理。注意：速度不要太快，要有间隙，否则由于摩擦产热，RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取，也要这样做，更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取：贴壁细胞，需要先用胰酶消化后，然后收集到离心管中，离心，去上清然后用PBS多洗2-3次，以去除多余的胰酶。悬浮细胞，直接用吸管或者加样枪吹打，以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清，不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测：RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度：OD260/280的值在1.9-2.1之间，认为RNA纯度较好；OD260/280的值小于1.8时，表明蛋白质杂质较多；OD260/280的值大于2.2时，表明RNA已经降解；注意：如果用TE溶液洗脱RNA，会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测：1）通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带，28s条带宽度为18s条带的两倍；2）通过色谱方法检测，RIN值：28s/18s为1.8-2.0，表明RNA完整性较好，基本无降解发生。RNA电泳带型的特征：☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍，其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现，出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失，没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染，而且是很大量的 DNA污染。参考文献：[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，配备高品质温度模块，采用光纤和CMOS的检测系统，高能LED的激发，提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统

广州程启招标代理有限公司(简称“采购代理机构”下同)受中国热带农业科学院环境与植物保护研究所的委托，就以下(招标编号：GZCQC1202HG04009)所需的货物及相关服务，组织公开招标，欢迎合格的国内投标人提交密封投标。有关事项如下：　　一、招标项目的名称、用途、数量、简要技术要求或者招标项目的性质　　1、项目名称：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所2012年仪器设备釆购　　(第一批)子包一：序号名称数量备注1人工气候培养箱1国产设备2人工气候培养箱1国产设备3人工气候培养箱1国产设备4生化/霉菌培养箱1国产设备5霉菌培养箱3国产设备6高速组织匀浆机1国产设备7鼓风干燥箱1国产设备8电热恒温鼓风干燥箱1国产设备9电热鼓风干燥箱1国产设备10超声波清洗器1国产设备11立式双层全温摇床2国产设备12台式恒温摇床1国产设备13单人单面净化工作台1国产设备14超净工作台1国产设备15超净工作台1国产设备16冰箱2国产设备17冰箱1国产设备18冷柜1国产设备19冰箱2国产设备20冰柜1国产设备21立式冷柜1国产设备22卧式冷柜1国产设备23解剖镜4国产设备24烟雾机2国产设备25温湿度记录仪2国产设备26电热恒温水浴锅2国产设备27恒温水浴锅1国产设备28涡轮式除尘粉粹机1国产设备29高效旋压式造粒机1国产设备30温控一维运动混合培养机1国产设备31pH计1国产设备32磁力搅拌器2国产设备33微型台式高速冷冻离心机1国产设备34小型高速离心机1国产设备35小型高压灭菌锅1国产设备36电子天平1国产设备37普通天平1国产设备38漩涡混合器1国产设备39琼脂糖水平电泳槽（中号）1国产设备40琼脂糖水平电泳槽（微型）1国产设备41转印电泳仪电源1国产设备42DNA序列分析电泳槽１国产设备43琼脂糖水平电泳槽（中号）１国产设备44多用电泳仪电源１国产设备45双目生物显微2国产设备46移液器1国产设备47PCR仪１进口设备子包二：序号名称数量备注11吨发酵罐1国产设备子包三：序号名称数量备注1育苗基质营养块压片机1国产设备子包四：序号名称数量备注1热带果蔬预冷系统1国产设备2果蔬气调参数试验系统1国产设备3可调(低)恒温循环水浴1国产设备4果蔬催熟装置1国产设备5恒温/制冷摇床1国产设备　　2、用途：科研　　3、数量及分包：一批，共分4个子包　　4、简要技术要求或招标项目的性质：见《用户需求书》　　5、本次招标采用明标方式投标，按包内项目小计公开最高限价，超过最高限价则做废标处理。　　投标人可选择部分或所有子包进行投标，但应对所选子包应进行整体投标，不允许仅对包内其中部分内容进行投标。　　二、供应商资格要求　　1、必须在本公司报名并购买招标文件参加本项目的，并提交投标保证金的 　　2、必须符合《中华人民共和国政府采购法》和相关法规规定的资格条件 　　3、投标人近两年以来完成2个以上类似项目的经验(需提供合同复印件) 　　4、注册资本金在人民币200万元以上(含200万元) 　　5、上年度经营状况良好。　　三、采购文件公示与下载　　根据《广东省实施〈中华人民共和国政府采购法〉办法》第三十五条的规定，现将该项目采购文件进行公示(请点击下载)，公示期为2012年4月13日至2012年4月19日五个工作日。　　四、获取招标文件的时间、地点、方式及招标文件售价　　1、获取招标文件时间：2012年4月13日起至2012年5月3日　　2、获取招标文件地点：广州程启招标标代理有限公司　　3、获取招标文件方式：报名购买或邮购，出示投标人介绍信原件、营业执照复印件(加盖公章)，如需邮寄每份加收人民币50元的邮寄快件费　　4、招标文件售价：人民币200元/套(售后不退)　　五、投标截止时间、开标时间及地点　　1、递交投标文件时间：2012年5月4日上午09：00-09:30时(北京时间)　　2、投标截止时间、开标时间：2012年5月4日上午09:30时(北京时间)　　3、开标地点：广州程启招标代理有限公司(广州市恒福路238号218室)　　六、采购人、采购代理机构的名称、地址和联系方式　　1、采购人名称：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所　　采购人机构所在地点：海南省儋州市宝岛新村　　联系人：黄先生　　电话：0898-23306653　　邮编：571700　　2、政府采购代理机构名称：广州程启招标代理有限公司　　政府采购代理机构地点：广州市恒福路238号218室　　采购项目联系人：马小姐　　联系电话：020-83576900　　传真：020-83499619　　邮编：510095　　广州程启招标代理有限公司　　二〇一二年四月十三日

GenoSens S2一体式凝胶成像系统又添新成员啦！全新升级GenoSens S2 Pro/Ultra“龙”重发布，新增302nm LED紫外透射台，并可选837万像素高灵敏数字相机，拓展的功能将满足更多实验需求！新产品将延续GenoSens S2精致小巧的设计，10.1英寸大屏触控，自动进出仓，图像自动采集处理，高效便捷。软件操作直观友好，同时可支持安全切胶。“一键点击，成像无忧”，GenoSens S2系列凝胶成像一体机将在分子生物学研究、蛋白质研究和药物研究等领域加速您的科研发现。 升级特点：● 增加了302nm紫外投射成像和采集功能更宽的成像范围，轻松应对EB、Gel Red 等染色核酸胶的成像需求。 ● 830万物理像素科研级别冷CCD相机提供了更高分辨率和更精准的成像质量，捕捉更多精彩细节，为科研用户提供更准确的数据分析和研究结果 ● 拓展的应用满足更多实验需求升级后的功能满足多种实验需求，从SYBR&trade Safe，SYBR&trade Gold，SYBR&trade Green I&II,，Gel Signal&trade Green等生物安全染料标记的琼脂糖核酸胶，到使用EB、Gel Red 等染色的核酸胶，以及考马斯亮蓝染色或银染的蛋白胶的成像、切胶回收及图像分析。图像模式可捕获哪种信号蛋白质预制胶凝胶（例如，考马斯亮蓝染色、银染）核酸凝胶使用EB、Gel Red 等染色的核酸胶，以及SYBR&trade Safe，SYBR&trade Gold，SYBR&trade Green I&II,，Gel Signal&trade Green等生物安全染料标记的琼脂糖核酸胶型号及规格

岛津积极参与2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析会议 由国家自然科学基金委、中国化学会联合主办的&ldquo 2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议（2010 Symposium on Micro/nano-scale Separation and Analysis & 6th Chinese Conference on Micro Total Analysis System）&rdquo 于2010年10月17&mdash 20日在上海复旦大学隆重召开。本次学术会议由杨芃原等教授倡议，由复旦大学和上海交通大学联合承办。期间，2009年诺贝尔化学奖得主、耶鲁大学Thomas A Steitz教授，国家自然基金委化学部常务副主任梁文平，分析化学学科主任庄乾坤院士、姚守拙院士、陈洪渊院士、张玉奎院士、江桂斌院士给大家带来了精彩的大会报告。本次会议是我国微/纳技术近十年研究成果的一个阶段性总结，也对未来该技术的发展方向以及对其他学科的影响进行了展望。 在这次学术盛会中，岛津公司积极参与，为大会提供了赞助。上海分析中心赵宁伟先生做了题为《MultiNA微芯片毛细管电泳》的报告，就MultiNA的原理，特点和应用进行了具体的介绍，与会者反响强烈。另外，赵宁伟先生的一篇题为《MultiNA毛细管电泳对DNA外显子的定性与定量》也被本次大会收录。 MultiNA微芯片毛细管电泳装置，解决了用户对于琼脂糖凝胶电泳的不满，提供了基因分析的新平台，具有以下主要特长： 全自动分析 可自动分析最多至108个样品。 低运行成本 微芯片的重复使用/使用专用试剂套件，实现了可与琼脂糖凝胶电泳匹敌的低分析成本。 不使用有害物质溴化乙啶的高灵敏度检测 不使用有害的溴化乙啶。使用SYBR色素，能够以约10倍以上的灵敏度进行检测。 维护简便 分析结束后自动进行清洗，可继续下一个样品的分析。即使分析在夜里或周末结束也没有问题。 作为有着135年悠久历史的分析仪器界最大供应商之一，岛津公司一直秉持着&ldquo 为人类做贡献&rdquo 的宗旨，近年来一直致力于生命科学仪器的开发与推广。岛津现有的产品线覆盖了生命科学的很多领域，相信一定会为21世纪生命科学的发展起到巨大的推动作用。

盛夏的七月里，伴随着淅淅沥沥的小雨，BioCon China 2020第七届国际生物药大会暨生物技术仪器设备与试剂展览会今日于上海圆满落幕。月旭科技携众多明星产品亮相展会，并为展会现场的参观者提供了专业的技术支持服务，为今年的展会打下了良好的开端。是怎样的产品在现场受到了大家的一致好评和青睐呢？快跟随我们的一起回顾一下吧。本次展会，除了月旭科技高柱效、稳定的重现性和长寿命的色谱柱精彩亮相之外，更有强度高，流速快，非特异性吸附小的蛋白纯化填料和简单快捷的手动重力预装柱强势出席，为您带来更加丰富的产品选择。明星产品 强势亮相1 蛋白纯化层析填料月旭科技专注于蛋白质纯化分离，为客户带来琼脂糖系列（Tanrose）、葡聚糖系列（Tandex）、琼葡糖系列（SuperTandex）、高刚性琼脂糖系列（Solid）填料的多种选择，并可根据客户需求，定做不同颗粒大小及孔径的特殊介质。2 蛋白纯化层析预装柱月旭科技可提供凝胶过滤预装柱、离子交换预装柱、疏水层析预装柱、亲和层析柱预装柱等适用于蛋白纯化设备的各型号预装柱，可用于生物大分子纯化的条件筛选、工艺优化和规模化制备。热门产品 精彩亮相3 液相色谱柱月旭科技自成立以来，一直致力于高效液相色谱柱的研发，为客户提供重现性最好、分离效果最佳的色谱柱。其五大系列色谱柱产品Ultimate、Xtimate、Topsil、Welchrom和Zapchrom以高选择性、高柱效等优势收获了客户的一致好评！现场沟通 清晰高效4 与众多客户线下沟通本次展会是我们今年的首场线下展会，也迎来了久违的与客户面对面沟通交流的机会。诸多客户与我们针对产品的相关问题进行了深入的探讨与沟通，也对我们此次重点推出的蛋白纯化层析系列产品有了更进一步的了解。对我们今后产品的改进和开发，以及为客户持续提供高质量的服务都十分重要。本次展会已于今日正式落幕，而在为客户提供更专业的色谱分离分析技术、产品和整体解决方案的道路上，我们不会停歇。我们将为每一位客户带去更专业的产品和更优质的服务，也期待下一次能与你在展会相见。

上海比朗仪器有限公司生产产品有：小型喷雾干燥机、无菌均质器、光化学反应仪、超声波细胞粉碎机、紫外交联仪、分子杂交仪、分液漏斗振荡器、氙灯光源、 超声波清洗机、索氏提取器、制冰机、低温冷却液循环泵、高速组织捣碎机、低温恒温循环器、高低温循环器、高温循环器、电热恒温鼓风干燥箱、电热恒温水槽、 水浴恒温振荡器、恒温金属浴、恒温器、回旋振荡器等等。　　BLUV07-II紫外交联仪是一种多用途的254mm紫外辐射系统，主要用于将核酸交联于膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UA灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用价值。BLUV07-II紫外交联仪　　紫外交联仪参数及应用，现在紫外交联仪分为3种波长的:254nm 312(302)nm 365nm 一长寿命滤光片，312 nm和365 nm下可终身使用，254 nm下，寿命为3000小时。对于312nm波长的紫外交联仪,312nm紫外光是目前EB/DNA复合凝胶电泳荧光显色的最佳光源，因为它灵敏度高且能产生了最大的荧光量。　　与254nm波长紫外线相比，312nm能把光损伤，光切割及光二聚体作用的程度降至最低，应用如：克隆和染色体作图。另外，312nm波长紫外线过于暴晒而老化，从而保护UV传输装置的原有性能。　　紫外交联:为使核甘酸固定在膜上，传统方法是将膜置于真空烘箱中在80℃下烘2小时,而在紫外光下照射几秒即可 信号强度的提高,紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5~10倍　　紫外用途:琼脂糖凝胶中DNA的切割，RecA突变筛选，胸腺二聚体产生的部分限制性内切酶消化，UV 灭菌消除PCR污染。　　紫外交联仪操作方法：将紫外交联仪设备水平放在工作台上。确保有足够的空间，在前面开门。插入电源线的母头到交联剂。插头插入正确接地的电源插座中。(交联剂的正确的工作电压是产品信息的标签上找到。注：对于230V型号，或那些需要特殊的电源线连接器，确保男性的连接器或插头已经正确的配置已正确连接电源线。)打开ON / OFF开关到ON的位置。(注：当交联剂的默认转向上次使用的紫外线曝光设置)。最后的紫外线照射的设置将显示在LED上。其中最后一个函数设置将会在发光显示面板上的红点(S)上指出。将您的样品进入会议厅的要求曝光。

实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估基因的活力。RNA样本提取的质量直接影响基因表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种：RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种：紫外分光光度计法：测量260nm吸收值计算RNA浓度，测量260nm/280nm吸收值的比值，用于评估RNA纯度。需要注意的是：在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。260nm/280nm的比值范围在 1.9~2.1 之间。＜1.9，说明有蛋白质残留；＞2.1，说明RNA可能发生降解。琼脂糖凝胶电泳：完整的RNA通常有三条带，最亮的是28S条带，其次是18S条带，最淡的是5S条带（部分试剂盒提取时会过滤掉5S条带）。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利，28S的亮度在18S条带的两倍以上，我们认为RNA的质量最好。若RNA条带出现弥散，原因可能：RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。上述两种方法在实验室比较常用，此外还有几种检测方式供大家选择。荧光染料检测：通过荧光染料和RNA结合，荧光活性增强。此方法的灵敏度较高，主要用于检测RNA的浓度。微毛细管电泳：可使用软件的RIN（RNA Integrity Number）分数评估，10为RNA完整性最好，0为最差。此方法的灵敏度和分辨率较高，可用于检测RNA浓度、纯度和完整性。3’-5’完整性检测：是在一个RNA样本中检测GAPDH mRNA的完整性来代表所有RNA的完整性，主要用于检测RNA的完整性。得到高品质RNA的小建议：1、尽量避免RNA酶污染，使用无RNA酶的耗材和试剂，建议将扩增前后的场所分开。2、尽量减少采样时间，样品处理后快速冷冻，可以加入RNA保护剂。3、RNA提取过程中可以使用RNA酶抑制剂。4、存储过程中避免反复冻融。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，可为您提供3/6检测通道，根据实验需求灵活配置。这款产品采用了高能LED作为光源系统，可保证光源强度高，光源一致性好；高品质的帕尔贴温度模块作为温控系统，升降温速率快，可设置12列跨度30°C的温度梯度；卓越的CMOS拍照+光纤信号传输作为检测系统，CMOS检测灵敏度高，光纤传输速度快，无光损失和噪音干扰，无需ROX校准。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统可为您的科学研究提供高精准度、高灵敏度和高可靠性的实验结果。

稀土材料在生物医学和高科技领域发挥着不可替代的作用。然而，典型的稀土元素开采和提取方法往往因涉及危险化学品而导致严重的环境问题和资源浪费。尽管生物采矿展示了优雅的替代方案，但由于提取金属的微生物和清除稀土的大分子工具不足，可持续地分离和回收自然界中的稀土仍然面临巨大挑战。为了直接从稀土矿石中获得高性能的稀土材料，需要开发新一代生物合成策略来高效地制备稀土元素(REEs)。在此, 清华大学刘凯研究员、张洪杰院士团队建立了一种微生物合成体系实现了高纯稀土产品的主动生物合成。此外，通过与结构工程蛋白生物偶联的亲和柱，获得了良好的Eu/Lu和Dy/La分离，纯度分别为99.9%(Eu)、97.1%(La)和92.7%(Dy)。更重要的是，原位一锅法合成的稀土依赖的甲醇脱氢酶得到了很好的治理，并独占地吸附了稀土尾矿中的La、Ce、Pr和Nd，具有先进的生物催化作用，具有高附加值的应用前景。因此，开发的新型生物合成平台提供了一个有洞察力的路线图，以扩大生物铸造方面的底盘工程范围，并生产与稀土相关的有价值的生物制品。该研究以题为“The Construction of Microbial Synthesis System for Rare Earth Enrichment and Material Applications”的论文发表在《Advanced Materials》上。在这里，成功地筛选和收集了126株新型稀土吸附菌株，作为轻、中、重稀土的微生物合成系统，实现了高纯度稀土生物产品的制备。新型稀土亲和生物材料通过结构蛋白DLanM的生物偶联，实现了Eu/Lu和Dy/La的良好分离，分别得到99.9%的Eu、97.1%的La和92.7%的Dy。最重要的是，生物工程MDHs可以作为La、Ce、Pr和Nd的选择性吸附剂，显示出在稀土产品中的先进应用。因此，这些生物合成策略为稀土研究建立了一个新的范式，并将促进稀土的高价值应用。图1. 稀土微生物分离筛选及稀土生物材料高值化利用 有效吸附和生物合成稀土的菌株筛选 为了获得能特异吸附稀土进行生物合成的微生物，从所有采集的样品中通过富集培养和鉴定方法分离出126株细菌(命名为清华稀土微生物，TR-1至TR-126)。将获得的菌株的16S rRNA序列与GenBank上的已知序列进行比较分析。结果表明，稀土尾矿场及原矿伴生区中假单胞菌为优势种。假单胞菌属，如铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌、荧光假单胞菌和斯图策尔假单胞菌都能在其微环境中合成无机纳米颗粒。因此，选择收集的菌株(即TR-21、TR-22、TR-27和TR-54)来测试它们对稀土的吸附能力。电感耦合等离子体发射光谱分析结果表明，TR-21对14种稀土元素的吸附能力最强。TR-21对Sm(Ⅲ)、Eu(Ⅲ)和Tb(Ⅲ)具有较高的吸附容量，但对La(Ⅲ)的吸附能力最弱。用Tb(III)、Dy(III)和Ho(III)在细胞外矿化的稀土盐都是细小的线性形状，长度约为100 nm，并在细胞外使用Er(III)、Tm(III)、Yb(III)和Lu(III)形成层状或水凝胶状的生物合成。在HRTEM下没有观察到该生物合成的明显晶格结构。用高分辨电子能谱对所有从TR-21矿化的纳米线、细丝和片状/水凝胶稀土矿物进行了元素分析，结果表明，矿化产物区含有稀土元素(Ⅲ)、磷、氧和碳。这进一步表明，稀土(III)与PO43−结合后，以矿物相的形式与细菌表面的PO43−共存，即合成的稀土盐为REEPO4。此外，该菌株不仅可以通过表面吸附回收稀土元素，还可以在细胞表面以一锅法原位合成稀土磷酸盐。与这些配合物的化学合成方法相比，微生物原位合成稀土磷酸盐不仅可以减少对环境的污染，而且具有较高的成本效益。稀土磷酸盐具有良好的化学稳定性和热稳定性，被广泛应用于发光材料的制备。当稀土离子浓度较低时，稀土元素主要与细菌细胞壁上的磷酸基团结合。随着时间的推移，生物矿化晶体的数量增加，使稀土以纳米线或片状晶体的形式沉积在细胞表面。当TR-21不与稀土元素相互作用时，细菌细胞呈椭圆形，表面光滑。TR-21对稀土的生物合成发生在细菌细胞的外部。微生物合成稀土磷酸盐后，可通过三种方法回收稀土盐。首先，稀土氧化物可以通过燃烧回收。其次，微生物细胞可以通过细胞超声裂解，稀土磷酸盐可以通过离心法回收。第三，稀土磷酸盐可以通过加入海藻糖降解胞外多糖来回收，从而使稀土磷酸盐解离，然后通过离心法回收。图2.有效吸附和生物合成稀土的菌株筛选 熔融DLanM器件的吸附容量和选择性测试 受LanM的启发，设计了一种新型的含有两个拷贝的LanM的新型嵌合蛋白DLanM。由于DLanM有8个EF-Hand，它不仅可以结合更多的稀土元素，而且对稀土具有高选择性，超快的吸附速度，稳定的吸附能力，对非稀土阳离子没有吸附能力。这使得DLanM成为一种很有前途的回收和分离稀土的生物分子。上述优点使其成为高稀土亲和力功能材料的理想候选者。为了促进转化为具有流动形式的稀土回收能力的产品，我们使用氨基的点击化学将DLanM偶联到修饰的琼脂糖凝胶微球上。在25℃下反应16 h后，DLanM的负载率约为83.3%，蛋白密度为0.678±0.004 μmol DLanM/mL琼脂糖凝胶。DLanM偶联材料具有显著的稀土亲和力。特别是，生物共轭色谱柱可以重复使用几十次，对稀土元素的回收表现出很好的性能。用混合溶液测试了DLanM基柱对稀土元素和其他金属元素的选择性。Eu和Dy可以通过DLanM柱和两步解吸的单一吸附过程从Lu和La中分离出来，从而证明了稀土之间分离的可能性。总之，固定化DLanM材料从广泛的金属离子杂质中选择性地富集稀土的功效，甚至到在稀土中分离特定的离子对。这种改进的选择性代表了现有生物吸附方法的替代使用胶囊细胞或聚合物纳米凝胶。图3.熔融DLanM器件的吸附容量和选择性测试 生物合成工具对稀土尾矿的高效利用 TR-21对稀土具有吸附和生物合成作用，对稀土尾矿中的稀土具有浸出和溶解作用。稀土尾矿中金属元素的形态和含量分析表明，稀土含量较低，使其难以恢复和分离。用离子交换法从低浓度尾矿中提取稀土成本高，而用氯化钠、硫酸铵、氯化铵、硫酸镁作浸出剂，对环境有害。相比之下，TR-21的生物浸出过程相对简单，不会产生二次污染。该方法具有环境友好、经济高效等优点，可作为尾矿中稀土有效浸出回收的一种新方法。甲醇脱氢酶(MDH)是AM1菌株甲醇代谢的关键和必需的酶。最近的研究表明，AM1菌株具有以稀土为辅因子的XoxF型MDH。XoxF型MDH的催化机理除依赖于其辅因子外，还与稀土元素的结合有关。AM1菌株不仅能从稀土尾矿中浸出稀土离子，还能从稀土尾矿中提取稀土离子，也可利用尾矿中的部分稀土进行生物合成，XoxF型MDH可以作为稀土的选择性吸附剂来提纯和分离稀土。图4.生物合成工具对稀土尾矿的高效利用【小结】该研究提出了一种新型的生物合成材料体系，以实现稀土元素的高效制造和先进利用。从稀土尾矿中筛选出的昆明菌株可以通过原位合成的方法从细胞外收集稀土生物产品。将新设计的DLanM蛋白与琼脂糖凝胶进行固定化，制备了一系列高亲和力的稀土生物吸附柱。Eu/Lu和La/Dy对的分离效率分别达到99.9%(Eu)、97.1%(La)和92.7%(Dy)。此外，生物吸附柱可重复使用长达19个周期，显示出良好的稀土回收性能。最重要的是，M.extorquens中的工程MDH不仅可以作为La、Ce、Pr和Nd的选择性吸附剂用于稀土的提纯和分离，还可以作为功能稀土-配体组合用于先进的生物合成。与化学提纯方法相比，这些生物合成策略实现了稀土的一锅法高价值利用。该生物制造系统作为新一代灵活的生物铸造，在稀土微生物底盘工程中显示出巨大的前景，特别是当与先进的编辑工具集成时，如CRISPR或同源定向修复，用于先进的生物修复和有价值的稀土生物制品制造。原文链接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adma.202303457

p　　用于药物发现的色谱填料包括离子交换色谱填料、亲和色谱填料、疏水相互作用色谱填料、体积排除色谱填料以及多模态色谱填料等。据MarketsandMarkets预测，至2022年，用于药物发现的色谱树脂市场将达到4.01亿美元，2017年到2022年，以6.65%年均复合增长率增长。该市场增长驱动力主要来源于不断增长的治疗性抗体的需求以及和生物制药研发的快速增长等因素。/pp　　strong离子交换树脂份额最大/strong/pp　　报告分析，用于药物发现的填料中，离子交换层析填料的市场份额最大。报告指出，在2016年，离子交换树脂已经成为用于药物发现的份额最多的色谱填料，未来预期将以相当大的速度增长。离子交换色谱技术广泛应用于生物制药纯化工艺。生物药物的工业规模净化和药物的定性和定性分析是色谱树脂的关键应用领域。越来越多地使用色谱法来制造生物药物，例如单克隆抗体和其他重组蛋白质，这有望推动色谱树脂在药物发现中的应用。/pp　　strong天然聚合物领域需求最大/strong/pp　　报告指出，2016年，天然聚合物的药物发现对色谱树脂的需求最多，尤其是琼脂糖，纤维素和葡聚糖三类天然聚合物。此类聚合物最大的特点是在其结构中具有大量的羟基，因此，亲水性较好，提供了适当配体偶联功能位点。/pp　　strong北美最大 亚洲增长最快/strong/pp　　从区域上看，用于药物发现的色谱树脂市场主要分布在北美、欧洲、亚太和其他地区。研究报告指出，美国是此类色谱树脂的主要市场，其次是加拿大，主要是因为该地区单克隆抗体治疗市场的强劲增长带动了色谱树脂的需求。此外，由于中国，印度和南韩等国家仿制药和生物仿制药的增长，亚太地区药物发现的色谱树脂市场预计将从2017年至2022年以最高的速度增长。由于经济效益和技术专业人才的可用性，全球大量制药企业正在这些国家建立研发中心。/pp　　用于药物发现的色谱树脂供应商包括通用电气、德国默克、美国颇尔、伯乐、赛默飞和日本东曹。这些公司通过新产品发布，扩张，合同和协议等策略，逐步加强市场地位，扩大产品组合，扩展客户群。/ppbr//p

数字PCR是第三代PCR技术，和qPCR技术相比具有灵敏度高、精准度高、对抑制剂耐受性更强等优势，不依赖于标准品和标准曲线，并可直接对起始核酸进行绝对定量，尤其适用于对低丰度样品的检测。目前，数字PCR在医学、制药、环境、食品检测等多个领域展现出了良好的应用前景。集多重优势于一体的数字PCR实验该如何实施呢？今天呢，我们就一起来看一下数字PCR实验的第一步：模板的制备。图源：gene-π数字PCR学习网站模板制备是数字PCR实验成功的关键一步。模板提取、质量控制、避免污染和保存都是模板制备过程中的重要因素。1、清除环境污染大多数Taq聚合酶的敏感性都比较高，一旦存在污染可能会发生外源DNA扩增并影响整个实验。而外界环境中存在多种污染源，因此必须遵守严格的实验规程并做好清除污染措施。为了避免DNA污染，应遵循以下常规PCR建议：☑ 定期使用3%漂白剂溶液和水/乙醇清洁实验室工作台和设备，或根据应用情况使用DNase/RNase；☑ 尽可能将管盖好；☑ 涡旋后进行离心；☑ 设置无模板对照。2、模板提取数字PCR的DNA和RNA模板提取方法与实验室中各种提取方法是兼容的，包括苯酚氯仿法,各种试剂盒提取方法。☑ 在提取过程中，尽量简化步骤，缩短提取时间；☑ 减少化学因素对核酸的降解；☑ 减少物理因素对核酸的降解，如机械剪切力和高温；☑ 防止核酸的生物降解。3、质量控制模板提取之后，我们需要对模板的纯度和质量进行检测，以保证得到最佳的实验效果。例如分光光度法可以验证提取的DNA溶液的良好吸光度(A260/280)的比例。常用的方法还有PicoGreen荧光染料定量检测、琼脂糖凝胶电泳、毛细管凝胶电泳和3' ：5' 分析等，尽量避免污染物和潜在抑制剂的存在。4、保存提取的DNA模板的存储也是一个重要的监控因素。保存时需要避免核酸降解，如胞嘧啶脱氨和8-Oxo-2' -脱氧鸟苷的形成，因为氧化损伤可能导致在PCR扩增过程中的碱基转位。缓冲液和温度条件对样品的质量也有影响，一般提取的DNA模板用TE溶解并-20℃保存。除了上述这些，样本本身固有的其他参数也可能会对数字PCR实验产生影响：A 、富含GC的模板因为GC键非常稳定，如果模板包含富含GC的区域可能导致模板不能完全扩增。因此，为了使模板获得更好的变性，可以尝试在PCR混合物中添加DMSO或甜菜碱。B、高分子量DNA与qPCR一样，模板的复杂性可能会影响检测性能，例如质粒和长片段基因组DNA。对DNA片段进行限制性酶切可以平衡模板差异，并防止对目标分子的低估。但要保证扩增子序列中不能有酶切位点，对已经片段化的DNA(例如来自福尔马林固定、石蜡包埋组织或细胞游离的DNA)进行酶切可能导致信号丢失。通常高分子量的DNA或质粒作为模板可能会影响阴阳性微滴分区，建议在进行数字PCR之前使用化学或酶切方法进行DNA剪切，而且剪切步骤可以直接在PCR mix中进行。C、DNA拷贝数的转换在数字PCR实验中，需要对模板浓度进行检测，以避免浓度过高造成检测结果饱和（全部都是阳性微滴）。当浓度足够高时，常用的方法如荧光法和分光光度法，可用于定量核酸，从而初步预估使用数字PCR的适合测量浓度。值得注意的是，这种方法测量的是组成核酸碱基单位体积的质量。因此，使用测量质量的方法来确定基因组拷贝数，需要进行相应的换算。当以质量为基础的核酸定量与dPCR结果进行比较时，或从任何用于计算分子拷贝数的方法中得出的结果时，必须包括用于计算基因组分子量的清晰描述，以及用于计算该值的方法。在数字PCR中，DNA拷贝数的计算只需要知道被研究基因组的质量，然后应用以下公式即可：反应体积中拷贝数=反应体积DNA质量(ng)/研究基因组质量(ng) 。这里还有在线网站供大家参考：http://cels.uri.edu/gsc/cndna.html详情可参考深蓝云公众号的推文：技术小站 | 浓度到拷贝数的换算。D、逆转录酶在逆转录酶数字PCR (RT-dPCR)中，RNA转录本需通过一步法或者两步法转化为互补DNA (cDNA)进行使用。在一步法中，逆转录和PCR均在同一分区中按顺序排列。即使每个RNA分子产生多个cDNA拷贝，结果也不会被高估。在两步法中，先进行批量转录，然后对cDNA进行微滴分区，在单独的反应中进行dPCR。逆转录酶的步骤可能是一个主要的错误来源，应在实验设计中考虑。通过上述的介绍，大家是不是发现数字PCR的模板制备并没有那么复杂呀，感兴趣的小伙伴可以先把模板制备好，然后联系我们，赶紧来体验一下数字PCR的魅力吧。快速学习网址：足不出户，网页自动翻译让您轻松快速掌握Gene π数字PCR学堂。参考文献：1 Cai, Y., Li, X., Lv, R., Yang, J., Li, J., He, Y., & Pan, L. Quantitative Analysis of Pork and Chicken Products by Droplet Digital PCR. BioMed Research International, 2014, 810209. http://doi.org/10.1155/2014/810209. PMID: 252431842 Pérez-Barrios, C., Nieto-Alcolado, I., Torrente, M., Jiménez-Sánchez, C., Calvo, V., Gutierrez-Sanz, L., Palka, M., Donoso-Navarro, E., Provencio, M., Romero, A. Comparison of methods for circulating cell-free DNA isolation using blood from cancer patients: impact on biomarker testing. Transl Lung Cancer Res. 2016 Dec 5(6):665-672. doi: 10.21037/tlcr.2016.12.03. PMID: 281497603 Demeke, T., Malabanan, J., Holigroski, M., Eng, M. Effect of Source of DNA on the Quantitative Analysis of Genetically Engineered Traits Using Digital PCR and Real-Time PCR. J AOAC Int. 2017 Mar 1 100(2):492-498. doi: 10.5740/jaoacint.16-0284. Epub 2016 Dec 22. PMID: 281181374 Holmberg, R.C., Gindlesperger, A., Stokes, T., Lopez, D., Hyman, L., Freed, M., Belgrader, P., Harvey, J., Li, Z. Akonni TruTip and Qiagen Methods for Extraction of Fetal Circulating DNA-Evaluation by Real-Time and Digital PCR. PLoS One. 2013 Aug 6 8(8):e73068. doi: 10.1371/journal.pone.0073068. Print 2013. PMID: 23936545.5 Rajasekaran, N., Oh, M. R., Kim, S.-S., Kim, S. E., Kim, Y. D., Choi, H.-J., Byum, B., Shin, Y. K. Employing Digital Droplet PCR to Detect BRAF V600E Mutations in Formalin-fixed Paraffin-embedded Reference Standard Cell Lines. Journal of Visualized Experiments : JoVE, 2015, (104), 53190. Advance online publication. http://doi.org/10.3791/53190. PMID: 26484710.6 Devonshire, A. S., Whale, A. S., Gutteridge, A., Jones, G., Cowen, S., Foy, C. A., & Huggett, J. F. Towards standardisation of cell-free DNA measurement in plasma: controls for extraction efficiency, fragment size bias and quantification. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2014, 406(26), 6499–6512. http://doi.org/10.1007/s00216-014-7835-3. PMID: 24853859.7 Group T D , Huggett J F . The Digital MIQE Guidelines Update: Minimum Information for Publication of Quantitative Digital PCR Experiments for 2020[J]. Clinical Chemistry(8):8.

华粤瑞科科学器材有限公司成为ThermoFisher旗下Oxoid&Remel微生物实验室产品2013年全国总代理。Oxoid 公司是全球领先的微生物培养和诊断产品的供应商之一。Oxoid最初起源于欧洲，其历史可以追溯到微生物科学开始的年代。自1860年Justus von Liebig 首次提出&ldquo Extractum carnis&rdquo (肉精) 至今，Oxoid已经是世界微生物学领域的重要组成部分。Oxoid公司一直遵循着&ldquo 致力于微生物&rdquo 的宗旨，其产品涵盖整个微生物科学领域，为临床检验、工业生产领域和基础学术研究的微生物诊断提供优质的解决方案。Oxoid公司在全球多个地方设有制造厂，如加拿大、德国、澳大利亚等，2006年在中国北京设立了一条新的微生物制成培养基生产线，这条生产线的投产是Oxoid历史上首次在亚洲地区进行直接生产。它的运营使中国的微生物工作者在微生物培养基产品上可以与世界标准接轨，并大幅度减少了微生物实验室操作的工作量，有效地提高了微生物实验室检验的标准化程度。2006年Oxoid正式成为全球科学服务领域的领导者Thermo Scientific旗下的品牌之一，与另一微生物品牌Remel组成微生物产品部，2011年又收购另一品牌Trek，资源整合优化后，为全球的微生物工作者提供更全面的产品与更专业的服务！2013年2月，ThermoFisher 正式授权华粤瑞科科学器材有限公司成为其中国地区Oxoid&Remel品牌总代理商，为其工业、科研以及政府单位提供优质的产品和服务。华粤瑞科科学器材有限公司于2009年由华粤企业集团广州市华粤行仪器有限公司试剂耗材部独立而成为华粤企业集团子公司，主要为生命科学领域的广大研究者、生物制药及食品饮料的企业客户提供高品质的产品与服务。目前我们是Oxoid&Remel，Corning，Merck，Kimble，greiner，Saint-gobain，Wheaton等生产厂家的总代理和一级代理，拥有自主Reacon品牌，成立自己的生产基地和研发中心。微生物实验室整体解决方案供应商----我们为全国各地的制药/日化/食品工业企业、CDC、CIQ、SFDA等政府机构以及第三方检测实验室的提供完整的微生物实验室解决方案。 Oxoid&Remel产品线：培养基原材料：我们为培养基生产商、发酵工业客户以及广大科研院校客户提供全套培养基原材料产品。如：酵母浸出物（LP0021）、胰蛋白胨（LP0042）、植物蛋白胨（VG0100）、酪蛋白水解物（LP0041）、琼脂糖（LP0028）等。干粉培养基：我们为全球制药/食品/日化工业客户、政府科研客户、第三方检测客户提供符合各类标准配方的干粉培养基产品。如：胰蛋白胨大豆琼脂（CM0131）、营养琼脂（CM0003)、哥伦比亚血琼脂（CM0331)、平板计数琼脂（CM0325）等。成品平板培养基：我们为全球洁净空间环境控制客户、各类微生物实验室用户，提供制成的成品平板培养基产品。如：胰蛋白胨大豆琼脂平板（PO0480B）、胰蛋白胨大豆琼脂接触碟（PO0262D）、沙保氏葡萄糖琼脂平板（PO0410B）等厌氧环境生成系统：我们专为需要厌氧或微需氧环境培养的微生物，生产提供Oxoid气体生成系统。如：2.5L厌氧产气袋（AN0025A）、2.5L厌氧产气罐（AG0025A）、厌氧指示剂刃天青（BR0055B）RapID快速生化鉴定板条：我们为微生物生化鉴定提供全球最快速、最准确的解决方案。如：肠杆菌鉴定板条RapID One（R8311006），4小时内鉴定出超过70种重要的氧化酶阴性、革兰氏阴性细菌。ATCC标准菌株：我们为全球微生物实验室，提供ATCC授权的Remel公司生产商业化包装ATCC标准菌株产品。产品操作方便，可溯源，可定性，可定量。空气浮游菌采样仪：我们为制药工业环境监控部门，提供专业的ThermoFisher品牌空气浮游菌采样仪。 Oxoid&Remel产品将为华粤瑞科科学器材有限公司在中国市场的迅猛发展添砖加瓦，我们将致力于提供更全面完整的行业解决方案。我们将在2013年为中国客户创造更有专业水准的服务，取得更卓越的成就。欢迎全国各类用户、经销商，来电咨询。华粤瑞科科学器材有限公司http://www.huayueco.com.cn/ 联系方式：Tel:020-34821111 Fax:020-34820098广州市华粤瑞科科学器材有限公司广州市番禺区兴南大道483号华粤大厦邮编:511442