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篮状菌属

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篮状菌属相关的论坛

  • 转我还是喜欢竹篮装菜草绳扎肉

    “限塑令”10年:效果喜忧参半,塑料袋仍是主角。[url]http://k.sina.com.cn/article_1700720163_655eee2302000a70n.html?cre=tianyi&mod=pcpager_focus&loc=11&r=9&doct=0&rfunc=78&tj=none&tr=9[/url]竹篮、草绳还是比塑料袋环保。

  • 【原创大赛】材料中真菌类型鉴定试验分析

    【原创大赛】材料中真菌类型鉴定试验分析

    [align=center][b]材料中真菌类型鉴定试验分析[/b][/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]食品事业部:张锐[/align][b]1 检验方法[/b]1.1菌种分离1.1.1 用浸湿生理盐水的无菌棉签在材料板表面涂抹,放于10mL无菌蒸馏水中,充分混匀备用。取原液1.0mL加入9.0mL无菌蒸馏水中,充分混匀为1:10样液,依次稀释至10[sup]-[/sup][sup]2[/sup]或10[sup]-3[/sup]的样液。1.1.2 取适当稀释度样液100μL于PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂)涂布,25℃培养,连续观察,对不同形态的菌落进行分离、纯化。1.2 形态学鉴定1.2.1 将分离的不同菌株分别接于PDA培养基25℃培养7d观察菌落形态,并待产孢后,在显微镜下观察分生孢子、产孢器及其产孢细胞的形态。1.3 分子鉴定1.3.1 DNA提取: 取200g菌丝,液氮研磨,将研磨好的菌至 1.5mL离心管中混匀,加入 0.6 mL TE(pH 8.0)、 250 μL 10% SDS、3 μL 蛋白酶 K(20 ng/μL),轻轻混匀,37℃水浴 1 h;加入 150 μL 5mol/L NaCl、 150 μL 2% CTAB,轻轻混匀,65℃水浴 20 min,12000 rpm 常温离心 20 min;吸取上清液加入等体积异丙醇,充分混匀,室温放置 30 min,12000 rpm,4℃离心 10 min;吸掉上清液,在吸水纸上空干液体,加 750 μL 70%乙醇,轻弹管壁混匀,12000rpm,4℃离心 2min;加入 30 μl 纯化水溶解沉淀(水中加 Rnase,终浓度 10 ng/μL),用手轻弹管壁,4℃溶解保存。 利用真菌通用引物ITS1(5'-CTT GGT CAT TTA GAG GAA GTA A -3')、ITS4(5'-TCC TCC [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]T TAT TGA TAT [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-3')和真菌特异性引物5.8s(5'-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]A TCG ATG AAG AAC [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]A [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-3')、28s(5'-TCC TCC [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]T TAT TGA TAT [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-3')分别对J2和J4基因组DNA进行PCR扩增,其扩增体系为:3 μLBuffer,2 μLDTP,引物各3 μL,DNA模板1 μL(以加1 μL双蒸水为空白对照),最后用双蒸水定容到30 μL。扩增程序为:95℃预变性3 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,共35个循环;最后72℃延伸10 min。PCR扩增产物用0.8%琼脂糖凝胶电泳检测后,对具特异性条带的产物进行测序。将测序结果与GenBank中的相关序列进行同源性比较,明确其种类。[b]2 结果与分析[/b]2.1 菌种分离2.1.1 经涂布法分离培养,在2种材料上均分离得到5株相同菌株,分别编号为J1、J2、J3、J4和J5。J1在油漆试件和辅助电源板黑色镶嵌模块材料上生长良好,分离频率均最高,表明2种材料均能促进J1菌丝生长,其次为J2;在油漆试件材料上J3分离频率为0,表明油漆试件材料能抑制J3 菌丝的生长;J5在2种材料上的分离频率均最低,表明2种材料对J5菌丝的生长促进缓慢(表1)。[align=center][img=,609,164]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709111103_01_2904018_3.png[/img] [/align]将菌株在PDA培养基上25℃培养7d后,经形态学比对,将J1鉴定为黑曲霉,将J3鉴定为黄曲霉,将J5为鉴定杂色曲霉,均为试验菌株。J2菌落圆形,7d菌落直径4~6cm,菌丝絮状,初生菌丝白色,后变为黄色、黄绿色,培养基背面淡黄色,分生孢子穗半圆形、圆筒形,小梗1层或2层,顶囊半球形、圆拱形至球形,分生孢子球形;J4菌落圆形,7d菌落直径4~5cm,菌丝细,絮状,白色,不易产孢,产孢器扫帚状,分生孢子梗轮生,分生孢子球形。2.2 形态学鉴定2.3 分子鉴定 利用引物ITS1/ITS4和5.8s/28s分别对J2和J4基因组DNA进行PCR扩增,扩增产物经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测(图1),以DNA Marker-DL5000为对照,具特异性条带的扩增产物进行测序,将测序结果在GenBank中进行同源序列比较,下载相似性高的序列,并用Mega(5.0)软件采用邻接法构建系统发育树。结果显示,J2 ITS基因扩增序列为607 bp,与[i]Aspergillus oryzae[/i] (KF154415.1)相似度达99%,在系统发育树上聚在一起(图2);J4 5.8s/28s扩增序列349 bp,在GenBank中经同源序列比较发现其与[i]Talaromyces macrosporus[/i](KX011505.1)的同源性在98%以上,且在系统发育树上与其聚在一起(图3),即二者亲缘关系最近。结合形态特征,将J2鉴定为米曲霉[i]Aspergillus oryzae[/i],将J4鉴定为篮状菌[i]Talaromyces macrosporus[/i]。[align=center][img=,536,478]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709111105_02_2904018_3.png[/img] [/align][align=left]3 讨论[/align]不同的供试材料能为菌株生长提供养分,该试验对接种5种试验菌株的材料在高温高湿的环境下处理,确定材料在有利于霉菌生长的条件下霉菌对他们产生的有害影响。试验结果表明,2种试验材料均能促进黑曲霉菌丝的生长,其次为米曲霉,对篮状菌菌丝生长促进缓慢;均能抑制绳状青霉、球毛壳霉菌丝的生长。菌株是否可以在材料上良好生长取决于供试材料能否提供该菌所需要的营养类型和培养环境是否满足菌株生长。该试验分离得到的菌株分离频率越大,表明该材料越能为菌株生长提供养分,但菌株是否对材料产生有害影响,需观察菌株对材料物理性质的影响。

  • 弯曲菌属及其检验

    1.弯曲菌属的主要特点及分类弯曲菌属(Campylobacter) 是一类呈逗点状或S形的革兰阴性杆菌,广泛分布于动物界,其中有些可引起动物和人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染。目前弯曲菌属共有18个菌种和亚种,引起人类疾病的主要是空肠弯曲菌空肠亚种,其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。2.细菌特性(1)形态染色 本属细菌为革兰阴性无芽孢的弯曲短杆菌,不易染色,菌体弯曲呈S状或海鸥展翅状等,一端或两端各有一根鞭毛,运动活泼,暗视野显微镜下呈“投标样”运动。(2)培养特性微需氧菌,最适生长环境是含氧气5%、二氧化碳10%、氮气85%;孵育温度通常取决于所需要分离的菌株,在不同的温度下培养基的选择性也不同,通常绝大多数实验室用42℃作为初始分离温度,这一温度对空肠弯曲菌、大肠弯曲菌的生长有利,相反其他菌株在37℃生长良好。营养要求高,在普通培养基上不生长,分离弯曲菌常用的选择性培养基大多含有抗生素(主要为头孢哌酮),以抑制肠道正常菌群。常用的有含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基(CVA)和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐(CCDA)、碳基选择性培养基(CSM)和半固体动力培养基等。(3)生化反应 氧化酶和触酶阳性,可还原硝酸盐为亚硝酸盐,不分解和不发酵各种糖类,不分解尿素,具体生化反应见表13-1。(4)抵抗力 本属细菌的抵抗力弱,对一般消毒剂敏感,但耐寒,在4℃冰箱或水中可存活达4周。http://www.foodmate.net/file/upload/201106/17/16-11-11-54-510998.jpg注:+,>90%阳性;-,<10%阳性;V,可变;ND,未定;W,反应较弱;S,敏感;R,耐药

  • 发酵蓝莓汁OD值测活菌数

    友友们,是这样的我想测24小时内蓝莓汁中的益生菌数,紫外设置的是600处,然后刚开始测试2小时的时候 值已经是0.6几了,好像太高了。是不是要做一个全扫描?不了解。是这个600nm值的事还是蓝莓汁有色影响了吸收光的值呀?

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包**头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~**5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~4.5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

  • 【转帖】活性污泥中丝状菌与絮体结构的关系研究环境保护

    摘要:通过试验和观察,研究了活性污泥中丝状菌与絮体结构的关系。常见的活性污泥絮体可分为六大类型,在不同的处理工艺和运行条件下,各类型污泥比例不同,丝状菌在污泥絮体的形成过程中所起的作用也不相同。而在活性污泥膨胀时,生物相结构中的丝状菌可分为结构性的和非结构性的两大类,它们起着不同的作用,运行中必须通过不同的方法和措施加以防治。丝状微生物是一大类菌体相连而形成丝状的微生物的统称,其中包括丝状细菌、丝状真菌、丝状藻类等[1]。荷兰学者Eikelboom将丝状微生物分为29个类型、7个群,并制成了活性污泥丝状微生物检索表。  丝状微生物的功能与结构形态密切相关,长丝状形态有利于其在固相上附着生长,保持一定的细胞密度,防止单个细胞状态时被微型动物吞食;细丝状形态的比表面积大,有利于摄取低浓度底物,在底物浓度相对较低的条件下比胶团菌增殖速度快,在底物浓度较高时则比胶团菌增殖速度慢。许多丝状微生物表面具有胶质的鞘,能分泌粘液,粘液层能够保证一定的胞外酶浓度,并减少水流对细胞的冲刷,其中还含有特定的抗体,以防止其他生物附着。  丝状微生物种类繁多,对生长环境要求低。其本身生理生长特性很特别:增殖速率快、吸附能力强、耐供氧不足能力以及在低基质浓度条件下的生活能力都很强,因此在废水生物处理生态系统中存活的种类多,数量大。如何使丝状微生物相互聚集,使之在废水处理中达到较好的泥水分离效果,如何确定丝状微生物同其他微生物的相互作用,以及不同丝状微生物的最适需氧量等,都是需要进一步研究的问题。1 试验设计及过程试验分别在本院给水排水实验室、重庆市唐家桥污水处理厂、重庆市渝北区城南污水处理厂进行。活性污泥采样自本实验室活性污泥法小试反应器、唐家桥污水处理厂和城南污水处理厂的曝气池、初沉池和二沉池。通过镜检观察记录活性污泥絮体大小、形态和结构,对不同反应器的丝状微生物进行鉴定,从而寻找丝状微生物与絮体形态结构之间的关系。试验历时5个月。  丝状微生物鉴定采用Eikelboom法,镜检观察以下八项特征:①是否存在衣鞘;②滑行运动;③真、假分枝;④丝状体长度、形状、性质;⑤细胞直径、长度、性质;⑥革兰氏染色反应;⑦纳氏染色反应;⑧有无胞含体(聚-β-羟基丁酸PHB、硫粒、多聚磷酸盐等)。染色采用石炭酸复红染色法、革兰氏染色法、纳氏染色法和积硫试验法。通过目微尺测定污泥絮体直径,记录各种大小、形状和结构的絮体数量,归纳污泥絮体的主要类型及特征。通过大量观察,寻找丝状微生物种类、浓度与污泥絮体大小、形状、结构的关系。2 试验结果2.1 絮体结构形态类型  通过大量的观察发现,活性污泥在正常运行和膨胀时呈现不同的结构形态和种类。正常运行时活性污泥结构形态可分为四类,Ⅰ型:致密、细小,看不到丝状菌为骨架的污泥;Ⅱ型:有明显丝状骨架、呈长条形的污泥;Ⅲ型:厚实、具有网状结构的巨型污泥;Ⅳ型:有孔洞结构的巨型污泥。污泥膨胀时其结构形态可分为两类,Ⅴ型:结构丝状菌大量生长、伸长,絮体结构松散;Ⅵ型:非结构丝状菌大量生长,不形成絮体。  试验过程中发现,Ⅰ型污泥在两污水厂正常运行的曝气池中所占比例较低,城南污水厂为10%左右,唐家桥污水厂更低,而在二沉池上清液中比例较高,因此它是从良好结构的污泥上脱落下来的,在二沉池随出水流失。正常运行时长条形污泥、网状污泥和孔洞污泥(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型)占很高比例,两污水厂中均占90%以上。根据絮体伸出的部分丝状菌,可以判断这些具有良好结构的污泥是以丝状菌为骨架,胶团菌附着于其上而形成的。它们是去除有机物的主要部分。  在混合液中可见到其他丝状微生物游离于菌胶团之外,见不到附着生长物,三种样本见到的菌种有:球衣菌、发硫菌、0803型、0581型、硬发菌、链球菌等,但数量都十分少。  试验过程中,城南污水厂由于发生停电事故时仍保持进水流量,发生了结构丝状菌大量增殖的现象,污泥结构呈松散状(Ⅴ型),SVI达到142mL/g干污泥;待供电正常,按正常方式运行一段时间后,污泥结构恢复正常,SVI回落至90mL/g 干污泥。而活性污泥小试过程中多次出现污泥膨胀,泥水分离困难(Ⅵ型),SVI高达500mL/g 干污泥以上,调节运行方式仍不能控制,镜检发现球衣菌、发硫菌大量增殖,最终通过投加漂白粉杀生剂再经逐步培养才恢复正常。2.2 微生物鉴定结果  根据Eikelboom法对作为污泥良好结构骨架的丝状菌进行鉴定,发现各处取样污泥的结构丝状菌特征一致:丝状体直径1.5~2μm,丝体长200μm左右,不运动,略弯,在絮体内扭曲,细胞呈柱状,长0.5~4μm,直径0.7~1.0μm,有鞘,横隔明显,常见分枝,有大量附着生长物,无硫粒,革兰氏染色阴性,纳氏染色可见兰灰色颗粒,呈阳性。  查丝状微生物鉴定表,找不到特征完全相符的种,比较接近的是Eikelboom1701型。Eikelboom1701的特征是:链状圆柱形细胞,被鞘紧裹,丝体长100~200μm,偶尔超过200μm,虽然丝体正常时稍弯,但可有很强的盘绕性,细胞长2.5~3.5μm,直径0.5~0.9μm,有鞘,有时可见PHB黑色小颗粒,横隔和缩缢明显,偶有假分枝,常有大量附着生长物,无硫粒,革兰氏染色阴性,纳氏染色阳性。3 分析与讨论3.1 絮体形成过程  许多絮体可以同时具有Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型污泥的多种特征,在絮体中心部分为孔洞结构,向四周伸展的长条形污泥相互搭接形成网状结构,最外侧则可见新伸出的骨架丝状菌。从这种污泥的形态可以推断其形成过程为:结构丝状菌交织生长,胶团菌附着其上形成新生污泥,新生污泥逐渐成熟形成条状、网状污泥,在氧和营养物充足等条件下,网状污泥的胶团菌增粗,网孔逐渐变小形成孔洞状,最后孔洞被填实,而结构丝状菌的伸出为胶团菌提供了新的附着面,包裹形成新的条状污泥,条状污泥相互交织又形成新的网状污泥,重复上述过程,形成更大的污泥絮体。  一些污泥能见到成节的形态,大的孔洞结构污泥之间由细的条状污泥连接,有的由丝状微生物连接,这种污泥的形成可能是絮体成长到一定成熟度后,由于内部供氧不足,促进了包埋于其中的结构丝状菌的生长,将絮体撑开导致结构松散形成节状。  还有极少量的污泥,可以见到极粗大的丝状骨架,上面附着胶团菌,经多次对比鉴定,这些丝状骨架为死亡累枝虫的杆,由于结构松散,这类污泥易于在二沉池发生漂浮,因此保持原生动物稳定的生长条件可以有效地减少二沉池的污泥上浮。3.2 丝状微生物与微生态群落的关系  试验表明,胶团菌与结构丝状菌之间相互依存,丝状微生物形成了絮体骨架,为絮体形成较大颗粒同时保持一定的松散度提供了必要条件。而胶团菌的附着使絮体具有一定的沉降性而不易被出水带走,并且由于胶团菌的包附使得结构丝状菌获得更加稳定、良好的生态条件,所以这两大类微生物在活性污泥中形成了特殊的共生体。  根据生态学的观点,环境因子对微生物个体的影响首先是影响某些敏感生物,然后通过微生物之间的相互作用逐步传递,最终当影响超过一定限度时引起结构上的波动。正是因为生态系统中生物种类多,并按一定结构组成了微生态群落,环境压力在逐级传递过程中受到消减,所以生态系统具备了一定抗冲击负荷的能力。与纯培养相比,生态系统能通过优势种群的变化维持良好的结构,而纯培养只需轻微刺激就会引起强烈反应,直接破坏其脆弱的结构。这也是保证活性污泥微生态群落稳定性的根本原因。  根据本试验结果,可以将活性污泥微生态群落描述如下:活性污泥微生态群

  • 兰菌净变身疫苗被滥用

    进口药品兰菌净(Lantigen B)是一种增强抵抗力药物,然而却进入了多地疾控部门的“二类疫苗”采购目录,在基层被滥用成疫苗推广。 记者调查发现,在进入我国市场时,兰菌净是以“治疗用生物制品”类别获批,并没有获得“疫苗”(即预防性生物制品)的身份,根本不能被当作疫苗在接种门诊给健康儿童使用。一瓶兰菌净零售价300多元,药商、流通环节、接种门诊各得其所,而服用儿童的生命健康权益却无人关心。 有业内人士公开表示,兰菌净在中国的经销故事也是医药市场乱象的一个缩影,其也远不止“非疫苗变身疫苗”那么简单,其背后暗藏的利益链更是行业里的一个深水区。变身疫苗 据业内人士介绍,疫苗分为两类。第一类疫苗,是指政府免费向公民提供,公民应当依照政府的规定受种的疫苗;第二类疫苗,是指由公民自费并且自愿受种的其他疫苗。 常用二类疫苗有28种,其中乙肝、狂犬、流脑、流感疫苗等用量较大。根据《疫苗流通和预防接种管理条例》相关规定,第二类疫苗的采购主体主要是县、市级疾病预防控制机构。所有疫苗在药品注册时分类为预防用生物制品。 根据国家食品药品监督管理总局(以下简称“国家药监局”)药品注册批件显示,细菌溶解物(商品名称:兰菌净)注册分类为治疗用生物制品7类,可用于上呼吸道细菌感染(如鼻炎、鼻咽炎、鼻窦炎、扁桃体炎、支气管炎等)的预防和治疗。 公开资料显示,兰菌净是一种人工制备的细菌抗原提取物的混悬液。 然而,这样一种治疗药品却摇身一变成为疫苗进入了多地疾控部门的“二类疫苗”采购目录。宁波市卫生局关于2014年度宁波市预防性生物制品使用目录的公示显示,“兰菌净”在进入了浙江省第二类疫苗使用目录基础上,进入了2014年度宁波市第二类疫苗使用目录。 据业内人士反映,兰菌净还曾出现在宁波市疫苗接种本13版本上,14版本已消失。 宁波市疾控中心也曾公开说明,兰菌净目前注册的是治疗性生物制品。兰菌净包括6种常见呼吸道感染细菌的抗原成分,对于预防多种呼吸道感染和哮喘等有一定作用。兰菌净属于自愿自费接种的二类疫苗,家长可根据幼儿身体情况自行决定是否接种。 记者梳理发现,四川、湖南、广东、福建、湖南、广西等省二类疫苗采购项目清单中,都有“兰菌净”在列。公开资料显示,2004年,兰菌净在中国正式上市,2007年国家CDC(中国疾病预防控制中心)正式发文(154号文件))将兰菌净纳入中国儿童预防接种信息管理系统。一位行业人士表示,CDC也犯糊涂,居然在预防接种信息系统里,将兰菌净作为一个与乙肝疫苗、流感疫苗同等级别的疫苗种类,出现在疫苗种类选项的下拉菜单里,这也是全国同行都普遍将兰菌净视作疫苗的重要原因。“2014年,中疾控纠正了这个问题,现在有些省疾控也意识到问题了,但已不知道该怎么办。” 据业内人士提供的一份此前儿童预防接种信息管理系统数据交换集成标准显示,在疫苗名称编码表中,兰菌净疫苗编码为2701,疫苗全称为兰菌净细菌溶解物,疫苗种类英文简称为Lan。 重庆医科大学附属儿童医院医师蒋志阳公开表示,兰菌净不是疫苗,属于“增强抵抗力药物”,可在医院开处方拿药。但医院走量不好,厂家换个思路走预防接种,结果异常火。它在国家食品药品管理局注册的类别是治疗用生物制品7类,属于药物,但不等于是疫苗(预防用生物制品)。 南宁市疾病预防控制中心二类疫苗采购采用单一来源采购方式征求意见公示显示,“兰菌净”的供应商为四川科泽药业有限公司。 四川省药品经营企业GSP认证公示公告(2014第026号)显示, 四川科泽药业有限公司GSP认证、经营范围为生化药品、中药材、中药饮片、生物制品(不含预防性生物制品)、化学原料药、抗生素原料药、中成药、化学药制剂、抗生素原料药,根本没有疫苗的经营资质。 2005年8月23日,国家药监局颁发的《关于进一步实施生物制品批签发工作的通知》(国食药监注424号)明确规定,自2006年1月1日起,其他所有已批准上市的预防用疫苗类制品均纳入批签发管理。 值得关注的是,本报记者在中国食品药品检定研究院批签发数据库却查不到“兰菌净”批签发的任何信息。 目前兰菌净是否为预防用疫苗类制品?是否需要生物制品批签发管理?记者为此致函国家卫计委相关部门,3月13日下午,卫计委回复记者称,上述问题请咨询 国家药监局。而兰菌净的药品批件明确显示,该药品分类为治疗性生物制品,而不是预防性生物制品。灰色利益链 为什么一个治疗药品能摇身一变成“二类疫苗”,堂而皇之地进入多地疾控机构的采购名单? 业内人士透露,无利不起早,“兰菌净”背后隐藏着惊人的利益链条。 据福建省漳州市物价局、漳州市卫生局、漳州市食品药品监督管理局关于2014~2015年度二类疫苗各流通环节最高销售价格的批复显示,兰菌净(18ml/瓶)中标采购价为228元/瓶,市级供应价为242元,县级最高销售价为271元,接种点最高销售价为310元。一瓶药品在流通环节加价82元,超过了采购价的35%。按该药品说明书要求,儿童需要服2瓶,接种点向一名儿童推广成功,从每名儿童身上得到的利益是80元左右。 然而,该药品在漳州市的销售价和其他城市相比还是非常低的。 记者注意到,同样规格的兰菌净在深圳市南山区接种点最高销售价为356.50元/瓶;而成都市成华区建设路社区卫生中心公布的零售价为398元/瓶。 据2009年度广西医疗机构药品网上限价竞价集中采购重点监控药品公示显示,兰菌净(18ml/瓶)采购价为136.05元/瓶,采购零售价为156.46元/瓶。 五年时间,治疗药品变身二类疫苗后,零售价翻了一倍,由此,兰菌净流通的各个环节赚得盆满钵满。 上述业内人士告诉记者,根据目前国家相关规定,公立医疗机构使用的所有药品(不含中药饮片)均应通过省级药品集中招标采购平台采购,县及县以上公立医疗机构销售药品,以实际购进价为基础,顺加不超过15%的加价率作价,在加价率基础上的加成收入为药品加成。县级以下公立医疗机构药品基本上是零差率销售。 如果兰菌净不变身为“二类疫苗”,而通过省级药品集中招标采购进入基层疾控机构或接种点,药品最高零售价只能在省级采购价基础上顺加不超过15%的加价,并不能在流通环节层层加价。 兰菌净作为“二类疫苗”进入后,流通环节和接种门诊推广该药品可以获得丰厚的利润,从而采购使用该产品的动力十足。简而言之,药厂、代理公司、疾控部门、接种门诊等各个环节都是该产品变身疫苗的受益者。 而此前的一桩陈年旧案,也暴露了“兰菌净”上游全国代理商的利润高得惊人。 2011年11月,上海医药(集团)有限公司原总裁吴建文因受贿,被判处死刑缓期两年执行。 据新华社报道称,在吴建文帮助下,重庆煜澍丰医药有限公司负责人杨某获得了药品“兰菌净”的代理权,该药品每年销售额高达1000多万元。2009年底,吴建文向寻求药品代理权的杨某索贿60万元。 重庆煜澍丰医药有限公司招聘信息显示,公司现在拥有国内独家经销权的意大利贝斯迪大药厂预防呼吸道感染药物:细菌溶解物(兰菌净 Langentin B),兰菌净自2009年销售以来,借助公司市场部和销售部强大的专业化的推广力度,销售数量每年200%的增长,销售金额近6亿元人民币。 记者以家长的身份向重庆煜澍丰医药有限公司电话咨询兰菌净是治疗药品还是疫苗时,接电话的工作人员表示:“这个产品是预防,健康儿童可以用,这个我不能跟你说它是什么,你要去问接种点的医生。” 随后,记者亮明身份要求就此事采访该公司时,相关人士表示:“我不清楚此事,我们也不接受采访。”随即挂掉了记者的电话。

  • 生物显微镜下细菌的理化性状!

    物显微镜下细菌的理化性状!细菌的理化性状一、细菌的化学组成  细菌和其他生物细胞相似,含有多种化学成分。 1、就其元素来讲,包括:有机元素(C、N、H、O)和灰分元素(P、K、Mg、S、Ca以及Fe、Na、Cl、Cu、Zn等)。这些元素主要以化合物的形式存在,构成了细菌细胞的水分和有机物、无机物的固体成分。http://jpkc.yzu.edu.cn/course/shywshw/pictures/t4001.jpg 2、细菌的化学组成 (1)小分子物质:水分是菌细胞重要的组成部分,占细胞总重量的75%~90%; (2)无机盐:占干重的10%; (3)大分子物质:蛋白质、糖类、脂类、核酸; (4)特殊化学物质: 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸(DAP)、吡啶二羧酸(DPA)等。二、细菌的物理性状  1、光学性质:细菌为半透明体。当光线照射至细菌,部分被吸收,部分被折射,故细菌悬液呈混浊状态。  2、表面积:细菌体积微小,相对表面积大,有利于同外界进行物质交换。如葡萄球菌直径约1μm,则1cm3体积的表面积可达60000cm2;直径为1cm的生物体,每cm3体积的表面积仅6cm2,两者相差1万倍。  3、带电现象:细菌固体成分的50%~80%是蛋白质,蛋白质由兼性离子氨基酸组成。革兰阳性菌pI为2-3,革兰阴性菌pI为4-5,故在近中性或弱碱性环境中,细菌均带负电荷,尤以前者所带负电荷更多。  4、半透性:细菌的细胞壁和细胞膜都有半透性,允许水及部分小分子物质通过,有利于吸收营养和排出代谢产物。  5、渗透压: 细菌体内含有高浓度的营养物质和无机盐,一般革兰阳性菌的渗透压高达 20~25个大气压,革兰阴性菌为5~6个大气压。细菌所处一般环境相对低渗,但有坚韧细胞壁的保护不致崩裂。第二节 细菌的生长繁殖一、细菌生长的条件  1、营养:水、碳源、氮源、无机盐,有些细菌还需要生长因子。    生长因子:为细菌生长所必需的一类物质,有维持细菌正常发育和促进生长的功能,极其微量就能显示其影响, 而足够份量可促进某些细菌生长加快数百倍。如:维生素(主要是VB)、有机酸、嘌呤、嘧啶等,以及色素和某些细菌的抗生素等。生长因子多为辅酶或辅基的主要成分,对细菌的生命活动至关重要  2、酸碱度:多数致病菌的最适pH为7.2-7.6  3、气体:   (1)根据对氧的需要不同将细菌分为4类:  ① 专性需氧菌(obligate aerobe)             ② 微需氧菌(microaerophilic bacterium)   ③ 兼性厌氧菌(facultative anaerobe)          ④ 专性厌氧菌(obligate anaerobe)  (2)某些细菌在培养的时候还需要一定浓度的CO2: 5% CO2   4、温度:多数致病菌的最适温度为37℃二、细菌的生物氧化与能量代谢  细菌能量代谢活动中主要涉及ATP形式的化学能。细菌的有机物分解或无机物氧化过程中释放的能量通过底物磷酸化或氧化磷酸化合成ATP。主要有发酵、需氧呼吸、厌氧呼吸等方式。 三、细菌的营养类型  不同种类的细菌,对能源和碳源的要求并不一样,据此可将细菌区分为不同的营养类型。  1、根据碳素营养的区分  (1)自养菌:只能从无机物取得碳源的细菌。能利用无机碳(如CO2、H2CO3等)合成所需要的含碳有机物,如硝化菌。   (2)异养菌:凡能从有机物中取得碳源的细菌。不能利用无机碳,需要有机碳来合成所需要的含碳有机物;必须依赖其他生物供给现成的有机物而营寄生生活  2、根据能源的区分:  (1)光能营养菌:能将光能转变为化学能的细菌;这类细菌都是属于土壤和水中的细菌,在病原菌中不存在此种类型的细菌。   (2)化能营养菌:从无机和有机物中取得能量的细菌;大部分细菌属于此类。前者称为无机化能营养菌;后者称为有机化能营养菌。   3、因此,细菌的营养类型分为:(1)光能自养菌   (2)光能异养菌    (3)化能自养菌    (4)化能异养菌 http://jpkc.yzu.edu.cn/course/shywshw/pictures/t4004.jpg四、细菌吸收营养物质的机制  细菌代谢能力极强,繁殖很快,消耗营养很多。 细菌没有特殊的摄食和排泄器官,这些营养物质,是通过细菌半透性的细胞壁和胞浆膜进行吸收的。  细菌主要有4种吸收营养物质的方式,不同营养物质可沿不同的方式进入:    (1)单纯扩散(simple diffusion)     (2)促进扩散(facilitated diffusion)     (3)主动运输(active transport)     (4)基团转移(group translocation)  1.单纯扩散  也称为被动扩散,是一种最简单的细胞内外物质交换方式。只靠简单的分子运动进行扩散。  吸收的是溶液中的溶质。   特点:  ① 无特异性;  ② 不需要载体   ③ 不需要能量   ④ 速度较慢   ⑤ 可逆,但不能逆浓度梯度.  因此不是细菌取得营养的主要方式   2. 促进扩散   营养物质通过透酶吸收营养基质的方式称为促进扩散,也称为协助扩散。  特点:  ① 严格的特异性,  ② 需要载体,  ③ 不需要能量;   ④ 可逆   ⑤ 与被动扩散相同,也不能逆浓度梯度  3. 主动运输   特点:  ① 需要载体,  ② 严格的特异性,  ③ 需要能量.  ④ 不可逆,可逆浓度梯度; 胞内的基质可高于胞外100~1000倍,  ⑤ 饱和效应:如胞外基质浓度甚高,足使载体饱和,输送的速度达到一定高度时就无法进一步提高;  ⑥ 吸收竞争:某些性质极为相似的化合

  • 实验室菌种的传代和复壮方法

    1、简述菌种的传代系装菌种在使用一段时间后,菌种数量减少,将菌种进行传代培养,增加数量经多次传代后,菌种有衰退、变异现象,对菌种进行复壮,得到纯化菌种。2、菌种传代2.1 仪器及培养基酒精灯、接种环、营养琼脂培养基。2.2 操作步骤2.2.1 将新鲜的无菌斜面琼脂养基、酒精灯、接种环和将要传代的菌种管均放置于洁净工作台上,备用。2.2.2 点燃酒精灯,以左手持菌种管,右手持接种环,将接种环通过火焰消毒俟冷后,从菌种管中挑取菌落。2.2.3 左手立即换取斜面培养基管,以右手无名指和小指拔取棉塞(先转动棉塞后拔去),夹持于手指间。2.2.4 立即将管口通过火焰灭菌后将接种环伸入斜面管内,先从斜面底部到顶端拖一条接种线,再自下而上蜿蜒涂布。2.2.5 轻轻取出接种环,用棉塞塞住管口,立即将接种环通过火焰消毒。2.2.6 将接种好的管口用牛皮纸包位,置于35±2℃恒温箱中培养18-24小时,取出置4-6℃冰箱中保存。3、菌种复壮3.1 仪器及培养基酒精灯、接种环、曙红亚甲蓝琼脂培养。3.2.1 菌种在经过几次传代之后,对其进行革兰氏染色、镜检。3.2.2 染色、镜检后若发现菌种有退化、变异现象,则将其划线接种在相应的培养基平板上,于35±2℃培养18-24小时后,观察生长菌的形态特征。3.2.3 挑取具有典型特征的菌落再次进行划线接种培养后进行革兰氏染色、镜检。3.2.4 选择特征明显,生长良好的菌种,将其接种于营养琼脂培养基斜面,培养后置冰箱中保存。

  • 光阑扩束均匀光源的理论分析

    [font=&]【题名】: 光阑扩束均匀光源的理论分析[/font][font=&]【链接】:[/font]https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=23de92fd5a098b10eb58e65ca4b30e75

  • 关于革兰氏阳性细菌的转化

    【关键词】中检所对照品目录 药检所标准物质 标准物质网站 中华标准物质网 内容摘要:双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合,并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解,同时另一条单链逐步进入细胞。 一、革兰氏阳性细菌,转化过程的几个阶段: 1.细菌感受态的形成 由于分泌一种称为感受态因子的小蛋白而导致细菌感受态的形成。 2.转化因子的吸收 双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合,并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解,同时另一条单链逐步进入细胞。 3.整合复合物前体的形成 一种特殊蛋白与单链DNA结合,有效保护单链DNA免遭核酸酶的降解,并将其引导至受体菌染色体DNA处。 4.单链DNA转化因子的整合 转化DNA单链可以通过同源重组,置换受体细胞染色体DNA的同源区,形成异源杂合双链DNA结构。 5.转化子的形成 受体菌染色体组进行复制,杂合区段亦半保留复制,当细胞分裂后,此染色体发生分离,于是新形成一个转化子。 二、影响转化的因素 1.DNA能否进入细胞; 2.DNA进入细胞后的稳定性; 3.质粒DNA的大小,大质粒的转化效率低于小质粒,到目前,大于30kb的质粒,转化效率仍很低; 4.DNA的浓度、纯度和形状; 5.诱导感受态细菌所用的离子的种类和浓度; 6.热休克时间的长短及平板培养条件等。 本文参考了 国家标准物质网

  • 【分享】细说沙门氏菌属(源自网络)

    沙门氏菌属(solmonell)  沙门氏菌属是一群寄生于人和动物肠道内的元芽孢直杆菌,革兰氏阴性,生化特性和抗原结构相似,兼性厌氧。除极少数外,通常都以周生鞭毛运动。绝大多数发酵葡萄糖产酸产气,也偶尔有不产气的。在三糖铁琼脂上常产生H2S。一般利用拘椽酸盐。能使赖氨酸和鸟氨酸脱羧基,但对苯丙氨酸和色氨酸均不脱氨基。除亚利桑那沙门氏菌外,大部分沙门氏菌都不发酵乳糖。运常不利用杨苷、肌醇、蔗糖、侧金盏花醇和棉子糖,也不产生a甲基葡萄糖苷。不产吲哚,不免解尿素,甲基红试验阳性,但VP试验阴性。DNA中G十Cmol%为50~53。  绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并为人类食物中毒的主要病原之一,在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。  根据新近的沙门氏菌的分类方案,本属菌现可分为:肠道沙门氏菌和邦戈尔沙门氏菌两个种,肠道沙门氏菌又分为6个亚种:肠道亚种、萨拉姆亚种、亚利桑那亚种、双相亚利桑那沙门氏菌、豪顿沙门氏菌以及因迪卡沙门氏菌。这些种和亚种均属于对应的DNA同源群。长期以来沙门氏菌根据其血清型分类,目前已有2500种以上,其中只有10个以内的罕见血清型属于邦戈尔沙门氏菌,其余均属于肠道沙门氏菌,几乎包括了所有对人和温血动物致病的各种血清型菌株,并具有属的典型生化特性。  虽然对沙门氏菌已规定新的命名法,但通常仍惯用简单的通用命名,即以该菌所致疾病、或最初分离地名、或抗原式三种方式来命名。目前,对沙门氏菌或各亚种成员的鉴定主要根据生化试验,而血清型分型可作为一项亚种水平以上的鉴定内容。  形态及染色特性 沙门氏菌的形态和染色特性与同科的大多数其他菌属相似,呈直杆状,0.7~1.5umx2.0~5.0um,革兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余名菌均以周生鞭毛运动,且绝大多数具有Ⅰ型菌毛。  培养及生化特性 本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似。只有鸡白痢、鸡伤寒羊流产和甲型副伤寒等沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘩,形成较小的菌落。在肠道杆菌鉴别或选择性培养基上,大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。本菌属在培养基上也有S-R变异。file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps_clip_image-16167.pngfile:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps_clip_image-13473.png  培养基中加入硫代硫酸钠、胱氨酸、血清、葡萄糖、脑心浸液和甘油等均有助于本菌生长。本菌属与其他主要菌属的生化鉴别见表16-1。与肠道亚种相比,其余各亚种的生化反应虽然不太典型,但同一亚种各菌间的生化特性相当一致。有时极个别分离菌株在某一特性上可能有所不同,如发酵蔗糖或产生吲哚等,只要它们仍具有本菌属典型的O和H抗原,就不应将其排除在本菌属外。[fo

  • 【分享】大肠菌群革兰氏染色技术的实验研究结果

    [size=18px][font=宋体] 在大肠菌群测定过程中,革兰氏染色(Gram Stain)又是一步很重要的鉴定阶段,革兰氏染色的正确性直接关系到能否正确判断该菌落是不是大肠菌群,而革兰氏染色正是一门难以掌握的最基本的细菌学实验技术,许多分析人员因缺少这方面熟练技术而显得对革兰氏染色结果没有把握,有的只好通过多次反复试验以求得一个仍不很肯定的判断结果,既浪费时间又不能保证染色结果是否正确,很可能还导致大肠菌群测定错误或失败,我们在多年的大肠菌群测定分析的实践基础上,通过纯培养一株大肠杆菌(Escherchiacoli )和一株枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)并进行多种条件下的革兰氏染色实验比较,以观察革兰氏染色易受哪些因素影响,从而进一步研究这项技术的最佳操作方法。[/font][/size][font=宋体][size=18px][font=宋体]1 [/font][/size][size=18px][font=宋体]实验材料1.1 大肠杆菌 大肠杆菌是大肠菌群中很重要也很有代表性的一种.在某次大肠菌群测定过程中,选取伊红美兰琼脂培养基上不同的典型菌落,按《应用微生物学实验法户〕 中大肠菌群细菌分离法得到甲基红试验阳性、VP 试验阴性、发酵柠檬酸盐阴性、利用脉酸试验阴性等特征的一株大肠杆菌.[/font][/size][font=宋体][size=18px]2 [/size][size=18px]实验结果与分析 2.1菌龄的影响 16h 和24h的大肠杆菌和枯草芽抱杆菌革兰氏染色均能得到正确结果,但32h以上的枯草芽抱杆菌有13.3%出现阴性结果。出现阴性反应的枯草芽抱杆菌同时发现很多菌体已经不呈典型杆状,显然由于培养时间过长,枯草芽抱杆菌(阳性菌)或已死亡或部分菌自行溶解了,造成细胞壁通透性增大而呈假阴性。因此在大肠菌群测定时,细菌在伊红美兰琼脂培养基上培养时间不宜超过24h,以免阳性菌呈假阴性干扰革兰氏染色的正确性.2.2细菌堆积密度影响 涂片时生理盐水中细菌浓厚时,菌体明显堆积在一起,从而影响酒精脱色效果,甚至在细菌堆中仍残留结晶紫,因而无论大肠杆菌还是枯草芽抱杆菌,凡密集成堆的常常呈阳性反应,而均匀分散的大肠杆菌和枯草芽抱杆菌都能得到正确结果,因此测定时应以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准. 我们认为在大肠菌群革兰氏染色时菌龄、细菌密集程度、媒染时间、酒精脱色程度这几方面因素会对染色的正确性产生影响.在大肠菌群测定时,革兰氏染色的最佳条件应该是:细菌在伊红美兰琼脂培养基上培养时间不宜超过24h ,涂片时应以分散开的细菌染色为准,碘媒染时间以1 min为宜,酒精脱色程度是革兰氏染色的关键,脱色时间应严格控制在2S 一30S之间。为进一步确证革兰氏染色操作正确,应把未知菌伊红美兰琼脂培养基上的典型菌落(cdony)与已知的大肠杆菌和枯草芽抱杆菌的混合菌同片染色,如果混合菌能分辨出阳性菌和阴性菌,则也能肯定未知菌革兰氏染色结果是正确的.[/size][/font][/font]

  • 【分享】10种病害可引发茄果类蔬菜烂果

    1、绵疫病 绵疫病危害下部老果较多。初期出现水浸状小斑,逐渐扩大产生白色棉絮状菌丝,果实内变黑,极易脱落。病果落地后,遇潮湿全果腐烂产生白霉,最后干缩,成为黑褐色僵果。发病初期,根据病情7~10天喷1次25%百菌清可湿性粉剂500倍液,或65%代森锌可湿性粉剂500倍液,连喷2~3次。 2、软腐病 软腐病主要危害果实。受害果最初病斑呈水浸状暗绿色,后变暗褐色,不久内部果肉腐烂发臭。果皮变白,失水后干缩,遇外力脱落。发病初期喷1:0.5:200的波尔多液,或新植霉素400倍液防治。 3、灰霉病 灰霉病以青果染病较重。病部呈水浸状,病斑圆形或近半圆形,暗绿色至灰白色,变软腐烂后,其上密生绿色霉层,病斑扩展到果实的1/3~1/2时脱落,全果腐烂干缩成僵果。可用75%百菌清可湿性粉剂500倍液或50%甲基硫菌灵(甲基托布津)150克对水75公斤喷雾。 4、炭疽病 炭疽病多发生在成熟的果实上,初期果实表皮上出现褐色或黑色病斑,并呈同心轮纹状凹陷,严重时整个病果烂掉脱落。发病初期及时喷洒80%代森锌可湿性粉剂500倍液,或50%福镁锌300~400倍液防治。 5、褐纹病 褐纹病初期为褐色近圆形病斑,稍凹陷,边缘明显,病果后期落地软腐,或留在枝上呈干腐状僵果。药剂防治可用65%福美锌500倍液喷雾,7~10天喷1次。

  • 【讨论】出血性大肠杆菌感染有何特殊症状

    近日德国当局称,德国致命出血性大肠杆菌开始在人际间传播。法兰克福附近一家餐厅女服务员,食用过遭污染豆芽感染这种大肠杆菌,并经由她处理过的食物,将她携带的病菌传染给了20名餐厅顾客,出现了人际传播。大肠杆菌如何在人与人之间进行传播?应该如何预防大肠杆菌?  大肠杆菌人传人的秘密  大肠杆菌通常经过消化道进行传播,很容易在人际间传播。这主要有两个途径:其一,随着生活方式的改变,购买加工食品的人越来越多,一旦被加工食品的一个环节受到大肠杆菌的污染,就会导致一批食品被污染。这些被污染的食物卖到哪里,大肠杆菌就会如影随形,进而使食用者被感染。  其二,一个人食用了感染大肠杆菌的食物,病菌会随着粪便排出,病菌极易附着在厕所某些部位,例如冲水按钮或把手上。其他人再触摸这些部位,而又没有便后洗手,大肠杆菌则会存在于手上,之后进食时,手上的病菌则会随口而入。  夏季是大肠杆菌流行季  每年6月至9月期间,都是大肠杆菌的流行季节。因为,此时温度最适宜病菌繁殖,而且雨水充沛,它们喜欢温热潮湿的环境。在适当的环境下,一个大肠杆菌一天能繁殖72代,不到20分钟就可能繁殖1代。  以往,多个国家都曾出现过大肠杆菌疫情,最初都是食物性暴发,病菌随着成品或半成品进入人体。其次为水源性暴发,尤其是在洪涝灾害后,自来水容易受到污染,引发疾病。因此建议,相关部门应对食品加工把好每一道关卡,定期严查。在受到水灾地区,应倡导人们把水澄清并彻底烧开饮用。

  • [讨论]样品状态如何描述??样品标识如何体现??

    实验室资质认定评审准则5.8.2检测和校准报告应至少包括以下信息:a标题..............................[color=#DC143C]f样品的状态描述和标识[/color]问题1:样品的状态描述大家是如何描述的呢?你认为怎样的描述是正确的、合适的?PS:我见过不少单位的报告,有计量认证的,有实验室认可的。有的在样品状态一栏填写的是:符合检测要求 有的在样品状态一栏填写的是具体的描述,如:黑色、粉状、袋装、固态、完好。问题2:样品的标识大家是如何体现的呢?你认为报告上还用专门加一栏吗?PS:我们的报告编号和样品编号是一样的,另外在报告上还有一个检测编号。

  • 样品的状态该怎样描述?

    RT:样品的状态该怎样描述?农业部推荐的检验报告模板中有这样一栏:样品等级、状态,你们是怎样做的呢?

  • 肉毒梭状杆菌和肉毒素

    鉴于目前恒天然奶粉出肉毒杆菌一事,一起学习一下肉毒杆菌和肉毒素。肉毒杆菌的全名叫肉毒梭状杆菌(也叫肉毒梭菌Clostridium botulinum),是一种革兰氏阳性厌氧杆菌,其生长繁殖及产毒的最适温度为18~30℃。肉毒杆菌广泛分布于土壤、淤泥及动物粪便中,其中土壤是重要污染源,它可借助食品、农作物、水果、海产品、昆虫、禽类等传播到各处。肉毒杆菌家族一共兄弟7个,本身其实没有毒性,但其中有4个能在厌氧环境下(比如肠道、密闭发酵食品)产生肉毒毒素。食品在加工、贮藏过程中被肉毒杆菌污染,食前对带有毒素的食品又未加热或未充分加热,就易引起中毒。在我国的新疆、青海等少数民族地区几乎每年都会出现自制发酵肉制品导致的肉毒中毒、甚至死亡。肉毒毒素(botulinum toxin,AX)是肉毒杆菌产生的含有高分子蛋白的神经毒素,是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强烈的生物毒素,它主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱,引起肌肉松弛麻痹,特别是呼吸肌麻痹是致死的主要原因。肉毒毒素真正被大众了解,是因为一些明星注射肉毒来除皱。虽然这个毒素的毒性比较大,一点点就能毒死人,但它本身对热不稳定,煮开几分钟就破坏掉了,真正难解决的是它的芽孢。肉毒杆菌在感觉不舒服的时候就像作茧一样用一些蛋白和糖类物质把自己包起来,然后就能“刀枪不入”,一般的加工手段都杀不死它。等它重新进入合适的环境,比如人的肠道,它又能苏醒过来继续干坏事。成人由于肠道里面的菌群早已站稳了脚跟,少量的肉毒杆菌是斗不过这些“地头蛇”的,因此对成人的危险性相对较小。但婴儿尤其是1岁以下的小宝宝,正常菌群还处于建设阶段,这个时候肉毒杆菌来捣乱的话,有可能对宝宝造成较大影响。  我国乃至全世界都没有乳粉中肉毒杆菌的限量标准,因为肉毒杆菌在乳品中并不是常见的污染物,而标准的管理是要考虑成本的,正因如此,各国都不把它写入标准。但这并不意味着根本不管,比如这次恒天然是在企业的质量控制中发现的问题。用标准管理有限的问题,用过程的控制实现更全面的安全保障,这才是科学的食品安全管理理念。对于负责任的大企业,其质控项目数量和质控要求都是远远高于国家标准要求的。

  • 活性污泥中丝状菌膨胀的条件和成因

    正常的活性污泥中都含有一定量的丝状菌,它是形成活性污泥絮体的骨架材料。如果活性污泥中丝状菌数量太少,则形不成大的絮状体,沉降性能不好 如果丝状菌过度繁殖,则形成丝状菌污泥膨胀。在正常的环境中,菌胶团的生长率远大于丝状菌,不会出现丝状菌过度繁殖的现象。但如果活性污泥环境条件发生不利变化,丝状菌因其表面积较大,抵抗环境变化能力比菌胶团的细菌强,丝状菌的数量就有可能超过菌胶团细菌,从而导致丝状菌污泥膨胀。引起活性污泥中丝状菌膨胀的环境条件有:1、进水中有机物质太少,曝气池内F/M低,导致微生物食料不足。2、进水中氮、磷等营养物质不足。3、PH太低,不利于微生物生长。4、曝气池混合液内溶解氧太低,不能满足微生物需要。5、进水水质或水量波动太大,对微生物造成冲击。6、进入曝气池的污水因“腐化”产生出较多的H2S(超过1-2mg/l)时,还会导致丝状硫磺菌的过量繁殖,使丝硫磺菌污泥膨胀。7、丝状菌大量繁殖的适宜温度在25℃~30℃,因而夏季易发生丝状菌污泥膨胀。

  • 【分享】直接入口食品中变形杆菌污染状况调查

    《直接入口食品中变形杆菌污染状况调查》现代预防医学, Modern Preventive Medicine, 2010年 07期 摘要:了解直接入口食品中变形杆菌的污染状况。对丰台区9类餐饮业7种直接入口食品进行了调查,检测方法按照WS/T9-1996进行。调查的1129件食品中检出变形杆菌117株,检出率为10.36%,其中奇异变形杆菌占71.8%;夏秋季检出率高于冬季,8月份高达33.57%;熟肉制品及凉拌菜中变形杆菌检出率高,分别为20.00%和12.07%,炝拌菜、爆炒菜和盒饭全餐中则未检出变形杆菌。直接入口食品中变形杆菌的污染比较严重,以奇异变形杆菌为主,夏秋季严重,污染的高危食品主要是熟肉制品及凉拌菜。变形杆菌是常见的腐生菌, 在环境中经常存在, 属于条件致病菌, 污染食物后在放置过程中易于大量繁殖, 当食品中该菌的含量达到一定数量时便会引起食物中毒。近年来关于变形杆菌引起的食物中毒屡有报道, 目前变形杆菌已成为食源性疾患的主要条件致病菌之一。近年有许多关于其他食源性致病菌污染的调查报道, 但缺乏关于变形杆菌在直接入口食品中污染状况的资料。为此, 本文作者于2007 年5 月下旬~12 月对丰台区9 类餐饮业7 种直接入口食品中变形杆菌的污染情况做了调查。

  • 食品工厂中霉菌污染的状况

    1、高湿度场所的霉菌污染食品工厂由于湿度高 , 而高湿度条件下霉菌特别容易生长(在湿度 85%~90%以上时 , 霉菌会迅速生长), 所以常有霉菌污染的发生。当食品工厂使用大量的水、热和水蒸气时 , 内部容易形成高温高湿的环境 , 容易有壁面潮湿及冷凝水形成的情况 ,此时霉菌污染特别容易发生。此外 , 常有有机物附着的墙壁和机器、一些混凝土与木材结构的物体 , 也特别容易发生霉菌生长的情况(故食品工厂内 ,宜少用木质的物体) 。2、通风不良场所的霉菌污染在建筑物的构造中 , 通风不良的场所容易生长霉菌。在一些通风不良的地方 ,由于原料附着以及使用易吸湿的混凝土、木材及纤维等材质时 , 容易生长霉菌 , 而且一旦有霉菌生长时 , 其蔓延速度非常快速 ,并且由于污染的地方的霉菌孢子会四散飞扬 , 直接的会污染成品 , 间接的则污染输送带、机械与操作人员手指等处 ,将造成制品间的间接污染。在湿度高及通风不良的场所 , 可看见枝孢霉、交链孢霉等霉菌生长。3、水环境中的霉菌污染霉菌易于在湿度高的地方生长。所以一些水槽、水桶、水管、自来水的水龙头、自来水管、地板与底板等处 ,皆可看见霉菌生长。这些地方由于长期贮水 , 所以污染情形特别常见 , 而且几乎由水槽、水桶污染开始 , 渐次地污染。此外 ,地板、底板若常含水 , 几乎未干燥 , 也会逐渐开始污染。而水管、地板与底板 , 也有最初并无污染 , 但由于作业员对卫生知识欠缺 ,而发生污染的例子 , 而且其污染几乎皆与空气来源的霉菌污染有关。这些水环境中的霉菌 , 属好湿性霉菌 (孢子在 Aw0.9 以上萌发 ,在Aw1 时为其最适生长 Aw ), 在自然环境中孢子形成粘块状 , 当接触水的瞬间即四散飞去 ,孢子粘块也会借空中浮游 , 造成污染。

  • 英国宣布召回感染肉毒杆菌的意大利橄榄制品

    据英国食品安全局消息,近日英国宣布召回意大利产"Gaudiano"牌橄榄制品,因为在芬兰首都赫尔辛基,有两人食用这种产品后出现了肉毒杆菌中毒症状。 据了解,两位感染者均称曾经食用了含有杏仁的Gaudiano有机橄榄,检测结果显示他们食用的橄榄制品含有肉毒杆菌毒素。 相关问题产品的规格为314ml,装于玻璃瓶中,保质期为2012年9月,产品自2010年9月进口至英国,目前所有产品均已暂停销售。 目前英国尚未出现肉毒杆菌中毒患者,英国食品安全局建议已购买问题产品的顾客应将产品丢弃。该局通过欧盟食品饲料快速预警系统(RASFF)获取了此次事故,目前该局正同地方当局以及企业合作共同召回问题产品。 原文链接:http://www.food.gov.uk/news/newsarchive/2011/oct/gaudiano

  • 冷热冲击试验箱它的吊篮出现故障的原因

    冷热冲击试验箱我们都知道有两厢式和三厢式之分,两厢式比起三厢式而言,少了一个实验室。那么由于少了一个实验室,两厢式的冷热冲击试验箱采用的是吊篮装置来进行工作的。把样品放置在吊篮里,通过电机带动吊篮运动来实现测试样品在高温到低温之间的切换。  那么一旦吊篮出现了故障,没有正常的工作了,就势必会影响试验的进程。那么出现不工作的原因是什么呢?外部电源未供气或调压阀损坏;提蓝卡死,打开试验箱门,目测吊篮是否有卡住现象;气动电磁阀损坏,导致气缸气路无法切换,吊篮只能停留在起始位置,气缸内部不密封;钢丝绳松动或断裂这四个是吊篮发生故障的原因。  而且随着像航空航天、质检院、科研单位、各类高校等对环境检测设备的需求量越来越大,带动了冷热冲击试验箱的发展。我国冷热冲击试验箱无论从数目上、还是质量上都满足了各行业的开展,并带动了仪器仪表、机械行业的开展。

  • 固体样品霉菌酵母菌辨认方法

    我们测定固体样品中霉菌和酵母菌,刚开始使用“马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)”进行测定,由于样品是灰色粉末状,培养了三天后看不出长菌迹象。 同时采用“霉菌酵母菌显色培养基”进行了检测,不到两天就长出蓝绿色圆点,根据说明书说是酵母菌,我又将PDA培养基覆盖到蓝绿色菌的平皿中培养了24小时,长出很多菌,请帮忙分析一下是什么菌?为什么同一样品采用PDA和“显色培养基”进行检测,一个可以检测出霉菌,而另一个检测不出来,很头痛,也不知道怎么判定,求助!

  • 活性污泥中非丝状菌膨胀的条件和成因

    非丝状菌膨胀是由于菌胶团细菌本身生理活动异常,导致活性污泥沉降性能恶化。可分为两种。一种是由于进水中含有大量的溶解性有机物,使污泥负荷F/M太高,而进水中缺乏足够的氮、磷等营养物质,或者混合液内溶解氧不足。高F/M时,细菌会把大量的有机物质吸入体内,而由于缺乏氮、磷或溶解氧不足,又不能在体内进行正常的分解代谢。此时细菌会向体外分泌出过量的多聚糖类物质。这些物质由于分子式中含很多羟基而具有较强的亲水性。使活性污泥的结合水高达400%(正常污泥结合水为100%左右)以上。呈粘性的凝胶状,使活性污泥在二沉池内无法进行有效的泥水分离及浓缩。这种污泥膨胀称为粘性膨胀。另一种非丝状菌膨胀是由于进水中含有大量的有毒物质,导致污泥中毒。使细菌不能分泌出足够的粘性物质,形不成絮体,因此也无法在二沉池进行有效的泥水分离及浓缩。这种污泥膨胀有时又称为非粘性膨胀或离散性膨胀。

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