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野鸢尾苷

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野鸢尾苷相关的论坛

  • 35.1 高效液相色谱法测定射干利咽口服液中射干苷、次野鸢尾黄素的含量

    35.1 高效液相色谱法测定射干利咽口服液中射干苷、次野鸢尾黄素的含量

    1.5。以峰面积对进样浓度(ng.mL-1)线性回归,射干苷回归方程:Y=7 485.5X+82.95,r=0.999 7,线性范围:150~3 000 ng.mL-1;次野鸢尾黄素回归方程:Y=2 031X-78.14,r=0.999 9,线性范围:50~1 000 ng.mL-1。射干苷和次野鸢尾黄素的回收率分别为97.2%和98.7%、RSD分别为2.1%和2.8%。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于射干利咽口服液中射干苷、次野鸢尾黄素的含量测定。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061051_381727_1606903_3.jpg

  • 射干中次野鸢尾黄素成分的测定

    射干中次野鸢尾黄素成分的测定

    [align=center][img=,600,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909111545058835_3538_932_3.jpg!w690x460.jpg[/img][/align]今天为您带来月旭Ultimate LP-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱对射干中次野鸢尾黄素成分的测定。[align=center][b]色谱条件[/b][/align]色谱柱:月旭Ultimate LP-C18(4.6×250mm,5μm)。流动相:0.2%磷酸溶液/甲醇=47/53;检测波长:266nm;柱温:40℃;流速:1.0ml/min;进样量:10μL。[align=center][b]谱图和数据[/b][/align][b]1、对照溶液图[/b][align=center][img=,600,317]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909111545087418_772_932_3.jpg!w690x365.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,38]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909111545138748_9028_932_3.png!w690x44.jpg[/img][/align][align=left]2、样品溶液图[/align][align=center][img=,600,310]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909111545196029_4284_932_3.jpg!w690x357.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,38]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909111545249614_3231_932_3.png!w690x44.jpg[/img][/align][b][/b][align=center][b][/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][b]结 论[/b][/align]使用月旭Ultimate LP-C18(4.6×250mm,5μm),在此色谱条件下,能满足检测需求。

  • 【原创大赛】记一Gatan 652双倾原位加热杆维修

    【原创大赛】记一Gatan 652双倾原位加热杆维修

    [align=center][b][font='Times New Roman',serif]Gatan 652[/font][font=宋体]双倾原位加热杆倾转机构损坏维修[/font][/b][/align][align=left][font=宋体] 原位透射电镜技术虽然上世纪六七十年代就已经被研发出来,但近些年却有越发热门的趋势,近年材料科学领域不少优秀的成果都来自原位透射观察。相比现在比较热门的原位气氛、液相等技术,原位加热则是一个比较老的技术,最早的[/font][font='times new',serif]TEM[/font][font=宋体]原位主要就是原位加热观察。尽管[/font][font='times new',serif]TEM[/font][font=宋体]原位加热并不是新技术,但也有不少新的成果出自原位加热,仍然是值得研究的一个方向。[/font][/align][font=宋体][font='times new',serif][/font][/font][align=left][font='times new',serif] Gatan652[/font][font=宋体]原位加热样品杆(如图[/font][font='times new',serif]1[/font][font=宋体])采用的是较为传统的炉式加热方案,虽然不如现在的芯片加热精确度高,但优点是可以直接对常规φ[/font][font='times new',serif]3[/font][font=宋体]透射样品进行加热观察,不需要高成本的[/font][font='times new',serif]FIB[/font][font=宋体]制样,实验和操作成本都比较低。实验室的这个样品杆在角落里放了五年,拿出来仔细检查了一番,发现是倾转部件损坏,这种状态下加热炉没有得到良好固定,使得加热的样品高温下更容易漂移,也无法作为单倾使用。既然五年无人问津,预计没人愿意出这个高昂的原厂维修费用,遂自行捉摸进行了“粗糙的”维修尝试。[/font][/align][align=center][font=宋体][img=Gatan 652双倾原位加热样品杆,690,518]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/09/202109081358350679_4529_3002960_3.jpg!w690x518.jpg[/img][/font][/align][align=center][font=宋体]图1 [font='times new',serif]Gatan652[/font][font=宋体]双倾加热样品杆[/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][/font][/font][/align][align=left][font=宋体][font=宋体][font=宋体] 如图[/font][font='times new',serif]2[/font][font=宋体]所示,样品杆β角的倾转是通过电机驱动中心轴的齿轮转动,撬动加热炉倾转的。经过检测加热线路及测温电偶部分均正常,因此只要修复倾转功能就可以正常使用了。由于需要高稳定性,使用说明书上说了连接加热炉的部件为低膨胀材料,加上目测推断带动加热炉倾转的这个部件最可能是氧化锆陶瓷。通过与同期的的[/font][font='times new',serif]Gatan 636[/font][font=宋体]低温样品杆进行对比,可以发现是倾转带动杆(不知道该叫啥,暂且这么叫吧)前端断裂,球状部分已经不见了(见图[/font][font='times new',serif]3[/font][font=宋体])。试过直接将剩余部分怼在加热炉上,但是无法正常倾转,因为没有那个球状前端,与炉体的接触就是个大问题,而且这样极不稳定,不利于原位现象的捕捉。我们也可以参考低温杆画出这个带动杆来,如果能找到人给我加工出来就是最好不过了。[/font][/font][/font][/align][align=left][font=宋体][font=宋体][font=宋体][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][img=倾转原理,690,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/09/202109081401559935_217_3002960_3.jpg!w690x307.jpg[/img][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体]图2 [font='times new',serif]Gatan652[/font][font=宋体]样品杆倾转原理[/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][img=,690,501]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/09/202109081403065651_9515_3002960_3.jpg!w690x501.jpg[/img][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体]图3 [font=宋体]倾转带动杆损坏及参考图[/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][/font][/font][/font][/align][align=left][font=宋体][font=宋体][font=宋体] 然而,在万能的某宝各种询问之后,得到的答复都是加工不了,都说这玩意儿太小了,搞不了。难道就此罢手,当然是不可能的,还没能感受到折腾成功之后的喜悦,不能轻易放弃。既然没人能够给我加工,那我可不可能自己加工呢,于是开始尝试。[/font][font=宋体]首先尝试自己烧结无果,因为模具我做不出来,确实太小了。然后开始尝试用陶瓷棒加工成接近的形状。某宝购买材料及工具:[/font][font='times new',serif]0.8*100 mm[/font][font=宋体]氧化锆陶瓷棒一根(花费[/font][font='times new',serif]35[/font][font=宋体]元钱),[/font][font='times new',serif]18 mm[/font][font=宋体]金刚砂切割片(连杆带[/font][font='times new',serif]10[/font][font=宋体]片锯片花费[/font][font='times new',serif]10[/font][font=宋体]元钱),[/font][font='times new',serif]775[/font][font=宋体]型小台钻(记得是[/font][font='times new',serif]70[/font][font=宋体]元,电源都没带,拿笔记本电源插上用了)。经过三天的努力,成功打磨出一个接近尺寸的部件,并成功装到了样品杆上。[/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][img=,690,230]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/09/202109081404584392_2182_3002960_3.jpg!w690x230.jpg[/img][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体]图 4 简单粗糙维修材料及工具(实图忘拍了)[/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体][font=宋体][img=,690,461]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/09/202109081423107367_4334_3002960_3.jpg!w690x461.jpg[/img][/font][/font][/font][/align][align=center][font=宋体]图5 维修完成效果(手工打磨陶瓷棒过程及成品也忘记拍摄,测温电偶丝也被我搞的有点变形)[/font][/align][align=left][font=宋体] 尽管过程是比较折腾的,但是利用自行修复的样品杆,发出了个人的第一篇一区论文,而且能够让角落吃灰五六年的样品杆重新被利用起来,也算是感受到了折腾后的喜悦。通过这次维修也发现,其实真正敢于动手,愿意动手,不少看起来比较精密的仪器也并非多么的神秘。像这种动辄百万的原位样品杆,如果官方原厂维修可能数万刀的费用,别看就是一小个部件,垄断的价值就是高昂的。[/font][/align]

  • 关于原位杆

    请问各位大大,哪位有原位杆厂商在华销售的联系方式?想调研一下,我在网上找了DENSSolutions和nanofactory的,发了邮件都没回应,只好上论坛求助一下,多谢多谢~

  • TEM原位加热微栅选择

    大家好,我想做个TEM的原位加热实验,材料是500nm-1um的纳米片片,想看看其热稳定性和加热下晶格的变化。用的仪器是样品杆加热,然后通过铜网热传导过去,在仪器上实际上显示的温度是样品杆头的温度。目前的一个问题是,选择什么样的微栅可以导热好一点?之前用铜网微栅,被导师质疑说虽然铜可以很好导热,但微栅碳的导热不行,所以实际加到样品上的温度会很低。因此想请教,用什么微栅可以导热好一点,另外样品较小,要可以撑得住样品。二是类似的实验,是否有办法做个标样标定,比如用一个标样在我的微栅上,由其特定温度下的变化,标定用这种微栅的热传导大概差了多少。谢谢大家!

  • 【求助】nanofactory的原位电学杆加不上电的情况…

    不抱希望地发个帖…想用实验室比较古老的nanofactory原位电学杆做个加电实验,结果在钨针尖与样品接触之后没有电流的响应,不断加电压至100伏样品都没啥变化…换用单倾杆还是同样的情况,所以推测不是样品杆的问题而是加电系统的问题根据我比较浅薄的理解,这个加电系统的电路应该比较简单,我知道nanofactory公司已经倒闭了,所以只能求助万能的网友,有没有人碰巧遇到过类似的问题而且知道怎么解决的呢ORZ或者知道这种情况可以找谁求助?

  • 一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花6

    一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花6

    [b][color=#cc0000]一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花6[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210120930336148_5970_1841897_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/color][/b]

  • 一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花1

    一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花1

    [b][color=#cc0000]一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花1[/color][/b][img=,640,800]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210120926307967_8886_1841897_3.jpg!w640x800.jpg[/img]

  • 一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花5

    一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花5

    [b][color=#cc0000]一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花5[img=,668,800]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210120929297599_6361_1841897_3.jpg!w668x800.jpg[/img][/color][/b]

  • 一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花2

    一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花2

    [b][color=#cc0000]一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花2[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210120927260365_4114_1841897_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/color][/b]

  • 一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花3

    一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花3

    [b][color=#cc0000]一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花3[img=,648,800]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210120928003199_9647_1841897_3.jpg!w648x800.jpg[/img][/color][/b]

  • 一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花4

    一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花4

    [b][color=#cc0000]一起欣赏丹麦公园蓝紫鸢尾花4[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210120928341117_2752_1841897_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/color][/b]

  • 【求助】什么是原位和非原位?

    文献上看到这么一句话:地尔硫卓原位生成盐酸地尔硫卓(英文原文是Diltialzem base is converted in situ into Diltiazem hydrochloride.)请问“原位”(in situ)和“非原位”(ex situ)是什么意思?谢谢!补充一下:这是某个药物生产工艺中的一句话,应该属于有机合成的范围。不知道该在哪里发,就发到这里来了。版主觉得哪个版面合适的话请帮我转一下,谢谢。

  • 【资料】中红外光谱技术用于人体肿瘤在体原位检测的研究

    [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=65125]中红外光谱技术用于人体肿瘤在体原位检测的研究[/url]本文采用傅立叶变换中红外光谱技术实现了胃、肝、胆囊等肿瘤组织的在体原位检测。样品的红外光谱为美国热电Nicolet公司生产的中红外光纤、ATR探头与北京第二光学仪器厂改进的WQF-500型红外光谱仪联用测定。实验是在北京大学第三医院外科手术室中进行,实验前已经获得病人同意。实验结果表明在体原位的肿瘤组织的光谱特征同我们先前液氮冰冻样品以及新鲜离体样品研究中所得到的鉴别癌症与正常组织光谱变化规律的结果是相似的。在体原位红外检测结果与病理检验结果一致。

  • 扫描显微环境下原位高温力学测量技术及其应用研究

    分享一篇关于原位高温SEM的文献,中国科学: 物理学 力学 天文学 ,[color=#ffffff] [/color]2018 年 第 48 卷 第 9 期扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope, SEM)是科学研究中的重要观察设备, 在过去的几十年, 人们一直致力于借助SEM从微尺度层面对热端部件所涉及的关键合金材料和构件的力学性能进行原位高温测量和表征. 这一研究对认识合金材料微结构损伤演化物理机制、 理解其高温失效和破坏机理、 提取力学表征参数和提高寿命预测方法的准确性等有重要的理论意义和工程价值. 本文首先介绍了SEM环境下原位高温力学实验的困难和挑战, 综述了近年来国内外在SEM环境下发展的原位高温变形测量技术, 涉及扫描环境下的原位高温测量设备、 高温成像技术、 高温变形测量方法等. 在此基础上, 介绍了作者近年来对镍基合金材料在高温变形、 蠕变、 以及疲劳与断裂方面的研究工作. 最后, 论文对该领域进一步的研究工作进行了展望.

  • 《Science》大子刊:原位电子显微学用芯片厚度的重大突破!

    [color=#000000]原位电镜(in situ transmission electron microscopy)是一种在电子显微镜下实时高空间分辨率观察和记录材料或样品在不同条件下变化的技术,这种技术的应用涵盖了多个领域,包括材料科学、纳米科技、生物学等。特别是得益于气体和液体环境的引入,大大的拓展了原位电镜技术的应用范畴,如腐蚀科学和催化反应等。电子显微镜本身具有非常高的真空工作环境,因此,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]反应介质通常被密封在一个非常小的纳米反应器里面。由于氮化硅(SiNx)具有易于微纳米制造且在一定厚度下仍有可靠的力学特性及适度的电子透明度等优点,被广泛应用于原位电镜中芯片用的密封膜材料。[/color][color=#000000]在过去20年,基于像差校正器、单色器及直接探测器等硬件技术的发展,电子显微镜本身的性能包括空间和能量分辨率都得到显著提升。但是原位电子显微学直到目前为止,在空间分辨率上并无显著突破。关键原因是作为密封的SiNx膜材料限制了电镜本身及原位实验的品质因子。目前商用的SiNx膜的厚度一般为50 nm,而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]电子显微学一般需要用两个原位芯片,这样仅密封膜的厚度就高达100 nm。如此厚的密封膜会造成非常高的有害电子散射,大大降低了原位电子显微学实验中采集的各种数据的信噪比。在原位电子显微学领域,学者们都一直认为降低SiNx膜的厚度非常必要,但是直到目前仍很难实现,因为仅通过刻蚀降低SiNx膜厚度,会造成力学性能的显著恶化。[/color][color=#000000]针对此问题,[b]美国西北大学的Xiaobing Hu[/b]和[b]Vinayak Dravid教授[/b]研究团队从自然界蜂窝结构稳定性获得灵感,巧妙利用[b]掺杂浓度对Si的刻蚀速率影响,在观察窗口区域引入了额外的微米尺度Si支撑图案,成功的将SiNx膜的厚度从50 nm降至10 nm以下。[/b]这种在窗口区域具有支撑图案的超薄原位芯片具有很多优点,如优异的力学性能、耐电子束辐照、充分大的可观察区域,保证了该超薄芯片在原位电子显微学上的广泛应用。基于Pd的储氢特性,作者系统了探索了超薄芯片对原位实验测量品质因子的影响,及Pd纳米颗粒的吸/析氢行为。[/color][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/c12df4c5-8db9-4fce-8ddf-16d17cfd42fd.jpg[/img][/align][align=center][size=14px][color=#7f7f7f]图1. 超薄原位电镜用芯片的制备及其优异的力学稳定性和电子束耐辐照性能,插图A、C中标尺分别为10 mm, 100 μm[/color][/size][/align][color=#000000]图1A显示超薄芯片的制备过程,图1B显示了具有不同厚度的SiNx窗口的原位芯片。图1C的扫描透射模式下的暗场和明场像显示出超薄芯片窗口区域的蜂窝状特征。图1D显示出这种超薄芯片优异的力学特性,即使在5 nm厚的情况下,仍能承受1个大气压,完全满足绝大多数的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]原位实验。图1E显示出超薄芯片非常好的耐电子束辐照特性,当厚度从50 nm降到10 nm时,临界电子束剂量几乎没有改变。图1E为用光学方法和电子能量损失谱测量的不同厚度的SiNx膜数据。[/color][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/6f3b49eb-f7b1-4f8f-8a5f-362aa1e61846.jpg[/img][/align][align=center][size=14px][color=#7f7f7f]图2. 基于超薄原位芯片的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]电子显微学实验品质因数的显著提升[/color][/size][/align][color=#000000]图2A为理论模拟不同厚度的SiNx对Au纳米颗粒明场像信噪比的影响,对于超薄原位芯片而言,即使在电子剂量比较低的情况下,仍可以拥有很好的信噪比,成像质量比较高。图2B、C显示出在一个大气压的Ar环境不同SiNx膜厚度下的高分辨像对比。可以看出与常规50 nm厚的原位芯片相比,超薄芯片的应用不仅提高了图像的信噪比,分辨率也从2.3 ?提高到1.0 ?。图2C显示出了能谱对比结果,可以看出在一个大气压的Ar环境下,当原位芯片窗口区域膜厚度从50 nm 降低到10 nm时,Ar/Si峰值比从0.59%升到8.3%,提高了14倍以上。图2E-G数据显示了超薄原位芯片显著提高了电子能量损失谱分析的灵敏度。[/color][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/6d6e2657-12c9-4711-80d5-725e65b1eeb9.jpg[/img][/align][align=center][size=14px][color=#7f7f7f]图3. 基于超薄原位芯片电子显微学在储氢材料中应用[/color][/size][/align][color=#000000]图3A、3B为在不同支撑载体下纳米Pd颗粒的电子衍射对比图,可以看出超薄芯片显著压制了膜材料本身的有害电子散射,提高的电子衍射的信噪比。而这也允许研究人员在原位[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]实验中进行定量衍射分析。图3C-D的原位电子衍射,显示出Pd纳米颗粒在原位充氢、放氢过程中的相变行为。图3E的电子能量损失谱分析确认了相变产物PdHx的产生。[/color][color=#000000]基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]超薄原位芯片的设计与探索实验,作者提出这种超薄芯片的设计策略可大规模推广到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]原位及其它基于SiNx的原位芯片上,大大提高原位电子显微学实验的品质因子,从而允许研究人员在原位实验过程中不单单观察形貌变化,可将其它先进电子显微学方法应用到原位实验上来。更进一步,这种超薄芯片也可拓展到原位X射线领域。可以说,超薄芯片的概念提出,将大大的影响整个原位实验领域。[/color][color=#000000]这一成果近期发表在[b][i]Science Advances[/i][/b]上,美国西北大学[b]胡肖兵研究副教授[/b],[/color][color=#000000][b]Vinayak Dravid讲席教授[/b][/color][color=#000000]为文章的通讯作者,[b]Kunmo Koo博士[/b]为文章的第一作者。[/color][来源:材料学网][align=right][/align]

  • 【第三届原创参赛】枳葛保肝颗粒中葛花和枳椇子提取工艺及含量测定的研究

    【第三届原创参赛】枳葛保肝颗粒中葛花和枳椇子提取工艺及含量测定的研究

    维权声明:本文为19861005原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。 枳葛保肝颗粒中葛花和枳椇子提取工艺及含量测定的研究一、实验目的酒精中毒问题已成为严重的社会问题,过度的饮酒,则会引起慢性乙醇中毒、心肌乏力,肾功能衰竭等症状,对人体消化、神经、循环等系统造成严重损害,还会损脏腑、耗气血,严重危害人体健康。葛花和枳椇子是中国传统医学中最具代表性的解酒药物。对急性酒精性肝损伤具有保护作用。研究葛花和枳椇子的最佳提取工艺,测定葛花中鸢尾苷和枳椇子中槲皮素的含量二、实验部分1 葛花提取工艺及含量测定的研究。Ⅰ高效液相法测定葛花中鸢尾苷的含量 色谱条件:色谱柱:DiamosilC18(2)(5μm,150×4.6mm);柱温:室温;流动相:乙腈:水(20:80);波长:265nm;流速:1.0ml/min 。进样量为20μl分离度大于1.5理论塔板数按鸢尾苷峰计算,大于2000线性关系的考察 分别吸取6个浓度(1.1μɡ/mL、2.2μɡ/mL、4.4μɡ/mL、8.8μɡ/mL、22μɡ/mL、33μɡ/mL)的对照品溶液20μL,在上述色谱条件下分别进样,测定峰面积。以峰面积Y(千伏)为纵坐标,对照品浓度X(μɡ/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=0.1781X-0.0056 ,R =0.9999,实验结果表明鸢尾苷在1.1μɡ/mL~33μɡ/mL范围内线性关系良好。(见图)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012052308_264770_2166112_3.jpg精密度实验:取同一对照品溶液,重复进样5次,测定精密度。峰面积的RSD 为1.3%(n=5)。表明精密度良好。稳定性实验:取同一样品溶液,在0,2,4,8,12h分别按上述色谱条件进样,测得峰面积的 RSD 为2.47%(n=5)。结果表明,供试品溶液在12小时内稳定。[/fon

  • 冷冻光电关联:让原位微观生命过程可视化

    冷冻光电关联:让原位微观生命过程可视化

    结构生物学是用物理学方法在原子水平阐明生物大分子的三维结构,进而诠释生物大分子的生物学功能及其分子机制的科学。近几年,冷冻电镜在生物物理,特别是结构生物学领域掀起了一轮新的革命。冷冻电镜技术包括单颗粒技术和原位冷冻电镜技术,2017年单颗粒技术已获得诺贝尔奖,放眼未来,冷冻电镜更多的是要应用于获取细胞和组织样品的原位信息,尤其是利用冷冻电镜电子断层扫描成像技术(Cryo-ET)获得三维图像,将细胞内的生命过程可视化,在原位对生物大分子的结构进行解析,并进一步分析其与所处周围环境之间的相互作用关系,进而阐明其发挥功能的分子机制。蛋白质聚集是许多神经退行性疾病的典型症状,包括帕金森病(Parkinson’sdisease)、亨廷顿病(Huntington’sdisease)、以及肌萎缩侧索硬化症(amyotrophiclateral sclerosis)等,至今为止还没有针对这类疾病的有效治疗方案,因此了解这类疾病的致病机理尤为重要。在细胞内表达这些疾病相关的蛋白会导致细胞毒性以及形成大的胞内包涵体,然而这些包涵体的具体致病机理还不清楚,而且这些包涵体的组成以及其精细的细胞原位结构信息也无人知晓。为了回答这一科学问题,德国马克斯普朗克生物化学研究所Baumeister教授组的研究人员利用先进的冷冻电镜光电关联技术(Cryo-CLEM)、冷冻聚焦离子束切割技术(Cryo-FIB)、以及冷冻电子断层扫描三维重构技术(Cryo-ET),在小鼠原代神经细胞原位解析了亨廷顿基因1号外显子中衍生的多聚谷氨酰胺(polyQ)所形成的包涵体及其微环境的原位精细结构,相关结果发表在2017年9月的Cell杂志。他们发现polyQ包涵体是由淀粉样肽的纤维构成,与细胞的内膜系统特别是内质网相互作用,使内质网膜发生形变并扰乱其组成,还改变了包涵体周围的内质网膜的动态性。该研究结果暗示淀粉样肽的纤维和内质网的异常相互作用导致了蛋白质聚集物所产生的细胞毒性。[align=center][img=,690,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271518599236_8463_3224499_3.jpg!w690x424.jpg[/img][/align]2018年3月,该研究组在PNAS杂志发表在酵母系统内的polyQ原位分子的结构解析,他们发现在酵母细胞内polyQ蛋白聚集体形成了无定形的包涵体以及少量的纤维丝,并使线粒体和脂滴的形态发生变形。对比这两种不同的机体系统下的差异,我们可以看到同样的polyQ蛋白聚集体在不同的环境中采用了不同的构像并利用特定的机制来靶向不同的细胞结构,从而产生细胞毒性。[align=center][img=,690,770]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519325828_4209_3224499_3.jpg!w690x770.jpg[/img][/align]另外,2018年2月的Cell杂志报道了该研究组在大鼠神经细胞原位解析了一种重复短肽(poly-GA)蛋白聚集体及其微环境的结构,不同于polyQ形成的纤维状结构,poly-GA聚集体是由平面扭曲的长短不一的丝带状结构组成。poly-GA聚集体大量募集了26S蛋白酶体复合物,而其他生物大分子如核糖体或分子伴侣却被排除在聚集体外部。与poly-GA的直接相互作用使蛋白酶体处于失活状态,虽然在整体水平上细胞内的蛋白酶体表达量没有变化,但有功能的蛋白酶体的数量大幅减少,揭示了蛋白质聚集物所产生细胞毒性的另一原因。[align=center][img=,690,378]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519469883_8555_3224499_3.jpg!w690x378.jpg[/img][/align]Baumeister教授组是Cryo-CLEM、Cryo-FIB以及Cryo-ET等关键技术方法发展的开拓者和领航者。Cryo-CLEM-FIB-ET即是在整个细胞内定位荧光标记的特定目标分子,观察其动态变化并在感兴趣的时刻进行快速冷冻,然后转移到冷冻扫描电镜利用冷冻聚焦离子束进行光电关联匹配,精确定位目标分子位置并进行聚焦离子束切割产生一层100-200nm厚的切片,最后利用冷冻电子断层扫描成像从原子分辨率上解析其未被破坏的天然原位结构信息。目前冷冻光电关联的一大瓶颈是光镜的分辨率较低,虽然超分辨光电关联技术在飞速发展,但是其缺点如高强度激光照射可能使样品升温,成像速度慢等还需要一一克服。超分辨光电关联令人振奋的一大潜在应用是来精确指导冷冻聚焦离子束切割,使得大的细胞样品中的任何感兴趣目标分子都能被精确定位切割,进而进行高分辨率数据收集。另外,随着技术进一步发展,用高电子密度标签来标记目标分子并在电镜下直接成像也将会成为可能。结构生物学的终极目标是了解细胞生命过程中每一个分子的结构、功能以及它们之间的相互作用,Cryo-CLEM-FIB-ET则是在结构生物学与细胞生物学之间架起的一座桥梁,让细胞内的微观生命动态过程可视化![b]参考文献[/b]1. Bauerlein,F. J. B., et al. 2017. In Situ Architecture and Cellular Interactions of PolyQInclusions. Cell 171(1): 179-187.2. Guo, Q., etal. 2018. In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates RevealsProteasome Recruitment. Cell 172(4): 696-705.3. Gruber, A.,et al. 2018. Molecular and structural architecture of polyQ aggregates inyeast. Proc Natl Acad Sci U S A. .4. Wolff, G.,et al. 2016. Towards correlative super-resolution fluorescence and electroncryo-microscopy. Biol Cell 108(9): 245-258.Oikonomou, C. M. 2017. Cellular ElectronCryotomography: Toward Structural Biology In Situ. Annu Rev Biochem 20(86):873-896.来源:【生物成像中心】

  • 【原创大赛】原位拉伸试样制备

    【原创大赛】原位拉伸试样制备

    SEM原位拉伸是在扫描电子显微镜下动态的观察试样破坏和断裂的整个过程。从而得到试样破坏和断裂过程中的动态信息。原位拉伸能够及时的观察材料的动态破坏过程。拉伸之后的静态观察很难分析材料破坏过程中的薄弱区,很难真实准确的寻找到材料的裂纹源。因此,试验采用在SEM上架设的拉伸台上动态的观察拉伸过程中材料变形和破坏的过程。这样得到的结果真实可信。首先,用电火花线切割机切割成如下的尺寸(如图1所示):用502胶将试样片粘在一定厚度的模型钢块上(如图2所示),粘牢固后依次用400#、600#、800#、1000#、1200#、1500#、2000#的水砂纸处理式样表面,再用抛光布抛光至表面光洁无划痕程度。抛光处理结束后,将试件浸入并丙酮溶液中5小时朝上,直至式样与基座分离,将试样取下,使用酒精清洗试样。清洗后的试样用电吹风吹干,保存在干燥瓶中。之后,用4%的硝酸酒精溶液侵蚀式样。[b][/b][align=center][b] [img=,690,251]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061650_02_3009082_3.png[/img][/b][/align][align=center][b]图1 常温原位拉伸试样尺寸[/b][/align](说明:试验机最大载荷1KN,因此试件中部横截面积应根据材料的强度做适当调整——试件中部宽度可变细,小于5mm,如图所示;试件厚度可增厚、变薄,但是不要小于0.7mm。抛磨后小于0.7mm的试件两端必须要加工直径为5的孔;大于0.7mm的试件不需要加工此孔。此外,试件的长度以及两端的尺寸不要随意改动。)[align=center][img=,438,163]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061651_01_3009082_3.png[/img][/align][b][/b][align=center][b]图2 试样加工过程:a 镶嵌试样;b取下试样[/b][/align]

  • 【讨论】原位高温X衍射,峰位左移如何解释?

    我做样品的原位高温X衍射,随着温度的升高,衍射峰出现左移。这是一个含金属成分的样品,如是说热膨胀,衍射峰右移还差不多,左移这怎么解释呢?我做无机物的样品,一般峰位不变,只是强度增加,是否可以说随着温度增加,结晶度变好呢?若从物理学上说,温度增加,无序度增加,正好反过来。请各位提出自己的观点。

  • 【分享】高效薄层色谱-原位免疫分析

    随着生命科学研究的深入发展,生物组织或体液中一些微量的物质越来越引起科学家们的浓厚兴趣。对于这些物质的分离分析常采用柱色谱、薄层色谱、液相色谱和质谱技术。但是对于那些具有重要生物功能而含量甚低(低于十万分之一)的物质,即使经过反复富集的浓缩,仍然得不到供研究所需要的纯品量。高效薄层色谱(HPTLC)除了与其它色谱技术一样具有分离能力之外,它独有的优点是能够在HPTLC板上进行原位反应和原位检测。即从生物组织中提取的混合物经HPTLC分离后,利用免疫反应具有的高度特异性,在HPTLC板上直接与给体(抗体或毒素)进行原位免疫反应,再与酶标记或同位素标记的第二抗体进行原位反应,最后与酶的底物反应使之生成有色物质以其定性。使用TLC扫描仪测定光密度进行定量。这是一种综合利用HPTLC的高分离效率,免疫反应的高度特异性,以及酶联显色的高灵敏性的原位分析方法。把传统的HPTLC和酶联免疫反应测定技术发展到一个崭新的水平。省去了纯化纯品的复杂步骤。为微量生化物质的研究提供了一种有用的检测方法。1 实验方法1.1 HPTLC分离 用于HPTLC-原位免疫分析的硅胶板除了具有好的分离性能之外,硅胶涂的必须牢固,以防止在实验中经多次洗涤硅胶脱落。Nagel(德国)公司的以塑料片或铝片为支持体的硅胶板具备这些性能。硅胶板的尺寸一般用10×0cm, 硅胶涂层厚度为0.5mm。对于展开剂的要求除了对要鉴定的物质有分离能力之外,要呈中性(pH6.8-7.2), 并且挥发性要好,在温和的条件下易于除去。目的是使HPTLC板上的物质保持免疫活性。1.2 HPTLC板的处理   在每一步原位免疫反应之前,都要对HPTLC板进行处理。目的是避免非特异性反应。将完成样品分离的HPTLC板经干燥后,放入一个塑料盒子中,用滴管缓慢加入0.1ml/cm2的含1%鸡清蛋白和1%的聚乙烯吡咯啉酮的磷酸盐缓冲溶液(pH 7.2)。在室温下浸泡2h后移出浸泡液,用滴管沿塑料盒子壁缓慢加入磷酸盐缓冲溶液,轻轻摇动盒子2min后,用滴管吸出洗涤液。重复洗HPTLC板3-5次。1.3 原位免疫反应 将处理好的HPTLC板放入盛有反应介质和反应物的塑料盒子中,反应条件要根据实验内容而确定。例如检测糖脂抗原时,盒子中加入0.1ml/cm2含特异性糖脂抗体的缓冲溶液,HPTLC板上的糖脂与抗体在4°C下反应2h。又如检测病毒与受体结合能力时,盒子中加入含有病毒的缓冲溶液,HPTLC板上的受体物质与病毒在4°C下至少反应9h。移出反应液,HPTLC板经洗涤后,再与抗病毒抗体反应2h。1.4 免疫反应的鉴定 酶联抗体市场上有售。酶是作为免疫反应的示踪物,最常用的是辣根过氧化酶。最后将已形成抗原抗体复合物的HPTLC板,置于含有酶联抗体的塑料盒子中,在4°C下反应2h

  • 求找能做辰砂原位微区微量元素分析的机构

    各位大佬,本人目前有几个辰砂树脂靶样想利用LA-(MC)-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICP-MS[/color][/url]做原位微区微量元素分析,辰砂的主要成分是硫化汞,我问了很多机构都说做不了,请问诸位大佬们知道哪里能做么?

  • 【求助】怎样做好原位

    我想知道怎样用原飞利蒲的X射线衍射仪做原位分析,它的样品架是陶瓷做的,好象没说明书,谁能提供,我现在遇到困难做不下去了. 我做不下去了,原位样品架有孔,粉末根本就不能放的怎么做粉末的原位啊????

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