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察氏琼脂

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  • 97.8万!南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购
    项目概况南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购(第二批) 采购项目的潜在供应商应在政采云平台(https://www.zcygov.cn/)获取(下载)获取采购文件,并于2021年12月22日 09点30分(北京时间)前提交响应文件。一、项目基本情况项目编号:NNZC2021-J1-991969-YZLZ(采购计划文号:NNZC[2021]7871号-003......具体内容详见附件招标公告项目名称:南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购(第二批)采购方式:竞争性谈判预算金额:97.7921000 万元(人民币)采购需求:预算金额:合计97.7921万元。A 分标 53.3652万元; B 分标 28.9772万元;C 分标15.4497万元;采购需求:A分标:项号采购标的单位数量简要技术需求或者货物要求1单通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(肠道病毒等)盒9具体详见采购文件《第二章 采购需求》2双通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(包括流感病毒、肠道病毒等)盒343新型冠状病毒2019-nCOV核酸定值质控品支354病毒DNA/RNA提取试剂盒(预封装)盒1085无RNase10µl带滤芯长吸头盒106无RNase250µl长吸头(带滤芯)箱870.1ml八连排定量管(带盖)箱28封口袋(透明)包1009封口袋(透明)包10010G1型消毒剂浓度试纸盒101196孔透明PCR板(适用于ABI)箱41296孔PCR板封口膜箱313N95防护口罩只120014VITEK细菌鉴定卡(ANC)盒115VITEK细菌鉴定卡(BCL)盒316API生化鉴定条(链球菌)盒117弯曲菌培养检测试剂(双孔滤膜法)盒418Karmali选择性平板盒419甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板瓶1020Baird-Parker琼脂平板瓶1021PALCAM琼脂基础瓶622PALCAM琼脂冻干配套试剂盒2023CIN-1培养基基础瓶224CIN-1培养基配套试剂盒825改良Y琼脂瓶226含铁牛奶琼脂瓶227甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP瓶428查氏琼脂培养基瓶129改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤基础(MLST)瓶430万古霉素(改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤配套试剂)盒431改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm肉汤)盒232脑心浸萃琼脂培养基瓶133脑-心浸萃液态培养基(BHI)瓶234改良克氏双糖铁琼脂瓶235KF链球菌琼脂培养基瓶236胆汁液态培养基瓶237改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基(mPDA)瓶238PCFA培养基基础瓶239PCFA培养基配套试剂盒440改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基配套试剂盒441葡萄糖肉浸液肉汤瓶142尿素盒343氰化钾对照管(KCN)盒244改良CCD琼脂基础(mCCD)瓶245改良CCD琼脂添加剂盒1046改良Skirrow氏琼脂基础瓶247改良Skirrow琼脂添加剂盒1048L-shaped Cell Spreader(一次性L棒)盒1049无菌均质袋(带滤膜,半张膜)包1050肠道致病性大肠埃希氏菌核酸检测试剂盒盒351猪链球菌2型核酸检测试剂盒盒152唐菖蒲伯克霍尔德氏菌核酸快速检测试剂盒盒153铜绿假单胞菌核酸实时荧光PCR检测试剂盒盒154血液等组织微量布鲁氏菌核酸DNA检测试剂盒盒155大肠埃希菌Escherichia coli NCTC 12923盒156金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus NCTC 10788盒157铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa NCTC 12924盒158巴西曲霉Aspergillus brasiliensis NCPF 2275盒159白色假丝酵母Candida albicans NCPF 3179盒160产气荚膜梭菌NCTC 8798盒161大肠埃希菌NCTC 12923盒162金黄色葡萄球菌NCTC 10788盒163蜡样芽孢杆菌NCTC 7464盒164单增李斯特菌NCTC 11994盒165巴西曲霉NCPF 2275盒166白假丝酵母菌NCPF 3179盒16750%卵黄乳液盒2068API加样滴管箱469Inhalation Solution瓶470一次性悬浮液管箱271一次性定量接种环 (10ul)箱672一次性定量接种环 ( 1ul)箱673蓝盖试剂瓶个1074蓝盖试剂瓶个1075蓝盖试剂瓶个1076蓝盖试剂瓶个10 B分标:项号采购标的单位数量简要技术需求或者货物要求1反应杯箱10具体详见采购文件《第二章 采购需求》2一次性无菌培养皿 φ9cm箱1003200ul国产吸头包504甲型肝炎病毒IgM抗体系列血清(液体)标准物质支205戊型肝炎病毒IgM抗体系列血清(液体)标准物质支106Probe Wash 3盒207SS琼脂瓶2508氯化镁孔雀绿肉汤(MM)瓶609带盖离心管包2010定值生化质控血清(水平2)盒111定值生化质控血清(水平3)盒112临床生化校准血清(定标用)盒113CENTAUR 酸/碱试剂 1&2盒114TIP头箱115样本杯箱116CL-50清洁液瓶517Sysmex血液分析仪用稀释液(PK-30L)桶218GPS套装针(URANUS AE180)箱1019全自动生化仪碱性洗液瓶520加厚不锈钢酒精灯盏1021医用垃圾袋扎50 C分标:项号采购标的单位数量简要技术需求或者货物要求1氨氮标准溶液瓶4具体详见采购文件《第二章 采购需求》2氰化物标准物质瓶13六价铬标准瓶14挥发性酚标准瓶15阴离子表面活性剂标准瓶16磷酸瓶67硫化物标准瓶184-氨基安替比林瓶19丙酮瓶610三氯甲烷瓶12115mL样品瓶架个512耐高温塑料试管架个1513移液器吸头包1014移液器吸头(盒装)盒515硅胶管米5016气相色谱柱根117二硫化碳中邻二氯苯支218甲醇中1,4-二氯苯支219二氯甲烷中1,3-丁二烯支220二硫化碳中2-丁酮支221水中甲醇支222水中甜蜜素支523水中氰成分分析标准物质支22420mL顶空瓶套件(带盖)套1025顶空瓶铝钳口盖包1026熔融石英管根527 气相色谱柱根128标样/水质 硒支529标准样品/水中硒支330标样/水质 砷支331标样/水质 砷支232硫代硫酸钠容量分析用标准溶液支233尿中碘的砷铈催化分光光度法配套试剂盒盒334原子荧光光谱仪的硒元素空心阴极灯个135塑料试管架(可拆卸)个1036聚苯乙烯锥形离心管保5037 32种混合金属标准溶液瓶138Bi,Ge,In,Rh,Sc,Tb,Y 标准溶液瓶139水质锰只240水质 铁标准溶液瓶141水质 铜标准溶液瓶142水质 锰标准溶液瓶143水质 锌标准溶液支644水质 铅标准溶液瓶145水质 镉标准溶液瓶146硝酸钯瓶147标准物质/乙腈中孔雀石绿草酸盐支148标准物质/乙腈中隐色孔雀石绿支149标准品/隐色孔雀石绿-D6同位素支150标准品/隐性孔雀石绿-D5同位素支151标准品/氯霉素-D5同位素支152标准物质/甲醇中氟苯尼考/氟苯尼考胺混标支153丙三醇(甘油)瓶154标准物质/尿素瓶155标样/水质pH瓶556标准物质/氯化钾电导率瓶157水中硝酸盐氮/以氮计瓶258标准物质/4种阴离子混标/氟氯硝酸根硫酸根瓶159氢氧化钠标准溶液瓶160盐酸标准溶液瓶161硼酸标准溶液瓶162硫代硫酸钠标准溶液瓶163甲醇中三氯甲烷溶液标准物质支364甲醇中三氯甲烷、四氯化碳支2065顶空瓶铝钳口盖包2066甲醇中四氯化碳溶液标准物质支367甲醇中一氯二溴甲烷支168甲醇中二氯一溴甲烷支169甲醇中1,2-二氯乙烷支170甲醇中二氯甲烷支171甲醇中1,1,1-三氯乙烷支172甲醇中三溴甲烷支173正己烷中七氯支174丙酮中马拉硫磷支175正己烷中α-666支176正己烷中β-666支177正己烷中γ-666支178正己烷中δ-666支179丙酮中六氯苯支180丙酮中乐果支181丙酮中对硫磷支182丙酮中甲基对硫磷支183丙酮中百菌清支184丙酮中毒死蜱支185丙酮中敌敌畏支186正己烷中溴氰菊酯支187正己烷中o,p' -DDT支188正己烷中p,p' -DDT支189正己烷中p,p' -DDE支190正己烷中p,p' -DDD支191甲醇中1,1-二氯乙烯支192甲醇中顺1,2-二氯乙烯支193甲醇中1,2-二氯苯支194甲醇中1,4-二氯苯支195甲醇中三氯乙烯支196甲醇中1,2,3-三氯苯支197甲醇中1,2,4-三氯苯支198甲醇中1,3,5-三氯苯支199甲醇中四氯乙烯支1100甲醇中六氯丁二烯支1101甲醇中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯支1102甲醇中环氧氯丙烷支1103甲醇中氯乙烯支1104甲醇中氯苯支1105丙酮中甲胺磷支1106甲醇中灭草松支1107甲醇中2,4-滴支1108甲醇中丙烯酰胺支1109容量瓶个100110容量瓶个100111quechers 萃取盐包包2112陶瓷均质子包5113质控样品/食品中亚硫酸盐/以二氧化硫计瓶2114苹果干中二氧化硫瓶2115蜜饯中二氧化硫标准物质袋2116铝制冰盒个2117小号硅胶套盒个2118ABS封口膜切割器+封口膜套装套2119不锈钢尖直头剪刀把18120有机玻璃容量瓶架个2121有机玻璃容量瓶架个2122有机玻璃容量瓶架个5123有机玻璃容量瓶架个5124圆底玻璃小导管(小试管)包3125二硫化碳中环己酮支3126色标/环己酮-GCS支2127质控样品/硅胶管中乙二醇套2128甲醇中乙二醇支2129色标/丙烯醇-GCS支2130甲醇中丙烯醇和异丙醇混标支2131乙醇中叔戊醇支2132质控样品/滤膜中硒3片/套3133富硒大米粉瓶1134鸭肝粉(681#)瓶1135三文鱼冻干粉成分分析标准物质瓶1136香菇粉成分分析标准物质瓶1137猪肝-生物成分分析标准物质瓶1138扇贝-生物成分分析标准物质瓶1139黄芪-生物成分分析标准物质瓶1140绿茶-生物成分分析标准物质瓶1141菠菜-生物成分分析标准物质瓶1142鸡肉-生物成分分析标准物质瓶1143一次性塑料勺包5144一次性塑料勺包5145石墨管盒1146样品杯包5147单层氧化石墨烯 粉末瓶2148壳聚糖瓶1149纳米二氧化硅瓶2150四氧化三钴纳米颗粒瓶115195%乙醇箱10 合同履行期限:接到采购人供货通知后,国内产品5个自然日内按照采购人要求的物品及数量完成供货;境外生产(进口)、且在国内没有现货的产品,在接到通知后,30个自然日内送达。签订合同后3个月内合同全部货物供应完成。如遇特殊情况,必须按采购人要求时间供货。本项目( 不接受 )联合体投标。二、申请人的资格要求:1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;2.落实政府采购政策需满足的资格要求:□专门面向中小企业采购的项目(供应商应为中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位)√非专门面向中小企业采购的项目3.本项目的特定资格要求:A分标、B分标:必须具备行政主管部门颁发的有效的证件(生产企业须提供《医疗器械生产许可证》;经营企业经营第二类医疗器械的须提供《第二类医疗器械经营备案凭证》,经营第三类医疗器械的须提供《医疗器械经营许可证》) C分标:必须具备易制毒化学品相关经营许可证和危险化学品等相关经营许可。 4. 本项目的特定条件:无5. 单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。为本项目提供过整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商,不得再参加本项目上述服务以外的其他采购活动。6. 对在“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn) 、中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单及其他不符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定条件的供应商,不得参与政府采购活动。三、获取采购文件时间:2021年12月16日 至 2021年12月22日,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59。(北京时间,法定节假日除外)地点:政采云平台(https://www.zcygov.cn/)获取(下载)方式:网上下载。本项目不发放纸质采购文件,供应商可自行在“政采云”平台(http://www.zcygov.cn)下载采购文件(操作路径:登录“政采云”平台-项目采购-获取采购文件-找到本项目-点击“申请获取采购文件”),电子响应文件制作需要基于“政采云”平台(http://www.zcygov.cn)获取的采购文件编制。售价:¥0.0 元(人民币)四、响应文件提交截止时间:2021年12月22日 09点30分(北京时间)地点:(1)响应文件提交方式:本项目为南宁市全流程电子化项目,通过“政采云”平台(http://www.zcygov.cn)实行在线电子响应,供应商应先安装“政采云电子交易客户端”(请自行前往“政采云”平台进行下载),并按照本项目采购文件和“政采云”平台的要求编制、加密后在投标截止时间前通过网络上传至南宁市“政采云”平台,供应商在“政采云”平台提交电子版响应文件时,请填写参加远程采购活动经办人联系方式,电子响应文件具体操作流程详见本公告附件2。 (2)未进行网上注册并办理数字证书(CA认证)的供应商将无法参与本项目政府采购活动,潜在供应商应要尽早完成电子交易平台上的CA数字证书办理(申领流程见本公告附件1),并在首次响应文件提交截止时间前提交响应文件。 (3)为确保网上操作合法、有效和安全,请供应商确保在电子响应过程中能够对相关数据电文进行加密和使用电子签章,妥善保管CA数字证书并使用有效的CA数字证书参与整个采购活动......具体内容详见附件招标公告五、开启时间:2021年12月22日 09点30分(北京时间)地点:政府采购云平台开标大厅六、公告期限自本公告发布之日起3个工作日。七、其他补充事宜1.谈判保证金:本项目不收取谈判保证金2.采购意向公开链接:http://www.ccgp-guangxi.gov.cn/reformColumn/ZcyAnnouncement10016/LcFC4hx+yh1QIPnKcpuW0A==.html3.网上查询地址www.ccgp.gov.cn(中国政府采购网),http://zfcg.gxzf.gov.cn (广西政府采购网)、http://ggzy.nanning.gov.cn(广西南宁市公共资源交易中心网)4. 本项目需要落实的政府采购政策(1)政府采购促进中小企业发展。(2)政府采购支持采用本国产品的政策。(3)强制采购节能产品;优先采购节能产品、环境标志产品。(4)政府采购促进残疾人就业政策。(5)政府采购支持监狱企业发展。5.供应商认为采购文件使自己的权益受到损害的,可以自获取采购文件之日或者采购文件公告期限届满之日(公告期限届满后获取采购文件的,以公告期限届满之日为准)起7个工作日内以书面形式一次性向采购人和采购代理机构提出同一环节的质疑。否则,逾期的质疑采购人及招标代理机构可不予接受。质疑供应商对采购人、采购代理机构的答复不满意或者采购人、采购代理机构未在规定的时间内作出答复的,可以在答复期满后十五个工作日内向同级政府采购监督管理部门投诉。6. 若对项目采购电子交易系统操作有疑问,可登录“政采云”平台(https://www.zcygov.cn/),点击右侧咨询小采,获取采小蜜智能服务管家帮助,或拨打政采云服务热线400-881-7190获取热线服务帮助。附件:1.CA证书申请方式及操作指南下载地址(现场申请方式见网址:http://www.ccgp-guangxi.gov.cn/OfficeService/DownloadArea/8354055.html?utm=a0003.39a112b4.cmp001.d0002.f0464b20ff2a11eb873141bf9e381949(广西政府采购网)/网上申请方式见网址: http://nncz.nanning.gov.cn/(南宁市财政局官网)-下载专区-“广西政采云西部CA办理方式”或“南宁市政采云CA证书办理操作指南”)2.电子投标文件制作与投送教程(在此网址下载:http://nncz.nanning.gov.cn/(南宁市财政局官网)-下载专区)八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名 称:南宁市卫生健康委员会、南宁市疾病预防控制中心     地址:南宁市青秀区长湖路26号        联系方式:郭俊坤0771-5358161      2.采购代理机构信息名 称:云之龙咨询集团有限公司            地 址:南宁市良庆区云英路15号南宁城建集团总部地块项目3号写字楼6楼             联系方式:0771-2618199、2618118 、2611898             3.项目联系方式项目联系人:唐冰、岑昌桦电 话:  0771-2618199、2618118 、2611898
  • 经验分享:透射电子显微镜应用领域及样品制备方法
    透射电子显微镜是使用较为广泛的一类电镜,具有分辨率高、可与其他技术联用的优点。已广泛应用于医学、生物学等各个研究领域,成为组织学、病理学、解剖学以及临床病理诊断的重要工具之一。常规电镜样品制备包括常温化学双固定、常温脱水包埋、常规超薄切片、普通电镜观察几个步骤。样品制备过程历时约一周,超薄切片经醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色后,电镜观察。所有操作均按照以下流程进行。一、试剂0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液Na 2 HPO 4 2H 2 O 35.61 g 或Na 2 HPO 4 7H 2 O 53.65 g / Na 2 HPO 4 12H 2 O 71.64 gNaH 2 PO 2 H 2 O 27.60 g 或NaH 2 PO 4 2H 2 O 31.21 g加双蒸水(ddH2O)到1000 mL0.1 mol/ L磷酸盐缓冲液(PBS)0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 250 mL加双蒸水到500 mL2 % 低温琼脂低温琼脂 1.0 g加双蒸水到 50 mL加热到沸腾,溶液均匀后备用1 % 戊二醛固定液25 %(m/v)戊二醛水溶液 2 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 25 mL加双蒸水到50 mL1 % 锇酸固定液2 %(m/v)锇酸水溶液 10 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 10 mL包埋剂A液Epon 812 树脂 50 mL十二烷基琥珀酸酐(modecenyl succinic anhydride, DDSA) 80 mL包埋剂B液Epon 812 树脂 50 mL六甲酸酐(methyl nadic anhydride, MNA) 44.5 mL2 , 4 , 6 - 三甲氨基甲基苯酚( 2, 4, 6 - tridimethylamino methyl phenol, DMP-30 )甲苯胺蓝染液甲苯胺蓝 1 g1 mol/ L NaOH 10 mL加双蒸水到50 mL混匀过滤后使用1 % 醋酸双氧铀染液醋酸双氧铀 0.2 g加双蒸水到10 mL封口膜封口,4℃避光保存1 % 柠檬酸铅染液硝酸铅 0.265 g柠檬酸钠(含2分子结晶水) 0.352 g加双蒸水到10 mL①① 配制铅染液时,要先加水6 mL,超声震荡30 min,使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH,并不是晃动,直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照,即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定,藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定,总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。封口膜封口,4℃保存仪器修块机 Leica EM TRIM切片机 Leica EM UC6光学显微镜 Nikon 80i 及配套拍照系统DS-L1透射电子显微镜 JEOL-1230Gatan Bioscan Camera 792低电压透射电子显微镜 JEM-1230二、实验流程一、 取材与固定A. 植物样品1. 自来水冲洗表面泥尘后,使用灭菌水清洗2-3次,置于铺有预湿滤纸的培养皿中。2. 使用干净锋利的刀片切取目标材料,所取材料体积不大于3 mm3。切取样品时应注意动作迅速、减小损伤,避免来回切拉;使用的灭菌水及器具应4℃预冷,并在操作中尽量保持低温以降低组织细胞活性。3. 将切下材料放入装有预冷的戊二醛固定液的青霉素小瓶中后抽气,抽几次后轻摇小瓶,并打开瓶盖。重复2-3次,直到样品沉入瓶底。4. 室温静置1h,或摇床轻摇1h。5. PBS清洗3次,10min/次。6. 1%锇酸固定液固定1h。7. PBS清洗3次,10min/次。B. 动物样品1. 4℃预冷生理盐水冲洗组织块,迅速切取组织块,体积不大于3 mm32. 将切取的组织块投入装有预冷戊二醛固定液的青霉素小瓶中,并抽气直至样品沉底。3. 室温静置1h,或摇床轻摇1h。4. PBS清洗3次,10 min/次。5. 1%锇酸固定液固定1 h。6. PBS清洗3次,10 min/次。C. 单层培养细胞或悬浮培养细胞样品②1. 3000 rpm离心5 min,收集细胞样品,尽量多的吸弃培养液上清。2. 加入4℃预冷PBS液,充分吹吸混匀,静置4 min,3000 rpm离心5 min,吸弃上清。① 配制铅染液时,要先加水6 mL,超声震荡30 min,使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH,并不是晃动,直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照,即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定,藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定,总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。3. 重复步骤2一次。4. 加入预冷的血清或蛋清,充分吹吸混匀,3000 rpm离心10 min,吸弃大部分上清,留少部分,吹吸悬浮沉淀细胞。(或离心后吸弃上清,留少部分上清,不悬浮沉淀细胞,视样品浓度而定)5. 缓慢加入戊二醛固定液,小心放入4℃冰箱,固定过夜。6. 吸弃上清,刀片小心划开离心管壁,用钳子拉开离心管,小心取出已凝成固体的血清包埋块。7. 使用干净的单面刀片或手术刀,将血清包埋块切成2 mm3左右的小块,取3-5个富集细胞样品效果较好的包埋小块继续下面实验。8. PBS清洗3次,10 min/次。9. 1%锇酸固定液固定1 h。10. PBS清洗3次,10 min/次。D. 藻类及其他游离培养样品1. 吸取2%低温琼脂液200μL到0.2mL离心管,并将离线管置于冰上,取10μL枪头迅速插入琼脂中并保持离心管竖直,且枪头竖直靠中的包裹在琼脂中。2. 静置1 min,待琼脂凝固后,小心拔出枪头,形成琼脂空腔,待用。3. 3000 rpm离心5 min,收集样品,尽量多的吸弃培养液上清。4. 加入4℃预冷PBS液,充分吹吸混匀,静置4min,3000 rpm离心5min,吸弃上清。5. 重复步骤2清洗,吸弃大部分上清,留极少部分上清液,吹吸悬浮样品。6. 使用10μL 移液器小心将样品加入已经制备好的琼脂空腔中,使样品充满空腔大部分,添加过程中尽量避免气泡出现。7. 吸取50μL溶化的琼脂,快速滴加到空腔琼脂上封口,冰浴5 min,待琼脂完全凝固。8. 使用单面刀片小心划开离心管壁,用钳子拉开离心管,小心取出已凝成固体的琼脂包埋块,稍作修葺。9. PBS清洗3次,10 min/次。10. 1%锇酸固定液固定1 h。11. PBS清洗3次,10 min/次。二、 脱水1. 按丙酮与灭菌水体积比3:7配制30%脱水剂。吸弃样品管/瓶中的PBS,快速加入现配的脱水剂(脱水换液过程禁止出现样品暴露空气中现象,可不全部吸完,略有剩余,使样品浸润;动作应迅速准确),室温放置或摇床轻摇45 min。加入按30%、50%、70%、90%、100%(v/v)的浓度梯度进行脱水。2. 配制50%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。3. 配制70%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。4. 配制90%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。5. 使用纯丙酮快速换液,室温轻摇30 min③。6. 重复步骤5一次。三、 渗透包埋在此步脱水操作完成后即可开始配制渗透用包埋剂,以免安排不周。样品浸泡在纯丙酮中时间不宜过久,以免造成样品较脆,不利于超薄切片。1. 配制渗透用树脂包埋剂1) 取干净的10 mL注射器,拔去活塞,用封闭针头堵住注射口,放于通风橱中。2) 小心倾倒B液9 mL到注射器中;然后再小心倾倒A液1 mL。3) 插入活塞,堵住注射器后,颠倒摇匀至液体颜色均匀,无丝状液体。4) 小心拔去活塞,通风橱中操作,缓慢滴加14滴DMP-30。5) 插入活塞,堵住注射器后,颠倒摇匀至液体颜色完全均匀,无丝絮状分色,竖直放置待用。2. 按照包埋剂与丙酮体积比3:7配制30%渗透剂,快速吸弃样品管中纯丙酮并加入渗透剂,轻摇渗透3 h。3. 按照包埋剂与丙酮体积比7:3配制70%渗透剂,快速换液,轻摇渗透过夜。4. 重新配制包埋剂,并小心推按注射器,将包埋剂挤到包埋模具中至液面略凸。5. 解剖针挑取样品到纯包埋剂中,渗透3 h。6. 小心挑取样品,滤纸上稍微沾下吸弃部分粘附的包埋剂,轻轻放置到未渗透过样品的包埋孔中,小心将样品按到底,摆放好位置。记录各样品对应包埋块编号。7. 梯度温度聚合包埋1) 37℃烘箱中12 h,期间定时观察样品有无漂移现象,如有,则再次小心摆放样品位置。2) 45℃烘箱中12 h。3) 60℃烘箱中24 h。四、 修块与切片1. 拿到包埋块后检查样品位置是否得当,选取位置好的包埋块优先进行修块、切片。2. 粗修包埋块1) 使用六角扳手将包埋块固定在样品头上,露出长度合适。2) 将样品头固定在修块机上,体视镜观察修块,分四个方向将包埋块头部多余的包埋剂修去,暴露出组织块。3) 使用锋利的单面刀片修去组织块周围毛刺的包埋剂,使其四边光滑清晰。4) 卸下样品头装至切片机上,使用玻璃刀修片,直至样品表面光滑清晰。3. 半薄切片1) 将粘有水槽的玻璃刀装至切片机刀台上,体视镜下小心对刀,不时转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮,使整个样品高于刀刃,点控制面板Start,设置切片区域上边界;转动手轮,使整个样品低于刀刃,点控制面板End,设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品,至出现彩色干涉光,继续步进刀台,并通过体视镜观察干涉光谱变化,直至干涉光消失。4) 转动手轮,使样品离开刀刃区域,使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中,体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度,按控制面板Run/Stop键,开始切片。体视镜观察可见900nm厚度切片反光为亮绿色。6) 待有切片下来形成4-6片的切片带,按Run/Stop键停止切片,体视镜观察下,使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃,并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域,根据水膜表面张力捞取切片,放到干净载玻片上,酒精灯略微加热,使水蒸干,并对着光亮用记号笔标示切片所在位置。4. 半薄切片染色1) 吸取20μL甲苯胺蓝染液,滴加到载玻片放有切片的位置,室温静置30 s 。2) 去离子水冲洗玻片,直至不再有蓝色。吸水纸上沥干,酒精灯略微加热,加速切片上的水分蒸发。3) 显微镜观察切片质量和样品位置。5. 精修包埋块1) 移去装有水槽的玻璃刀,取下装有包埋块的样品头,装至修块机上。2) 根据半薄切片结果,使用新的锋利刀口,小心修理包埋块四边,使其尽可能的光滑、平整。6. 超薄切片1) 将钻石刀装至切片机刀台上,体视镜下小心对刀,不时转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮,使整个样品高于刀刃,点控制面板Start,设置切片区域上边界;转动手轮,使整个样品低于刀刃,点控制面板End,设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品,至出现彩色干涉光,转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的干涉光谱颜色一致;继续步进刀台,并通过体视镜观察干涉光谱变化,直至干涉光消失。4) 转动手轮,使样品离开刀刃区域,使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中,体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度,按控制面板Run/Stop键,开始切片。体视镜观察可见70nm厚度切片反光为亮灰色及浅灰色。6) 待有切片下来形成10-20片的切片带,按Run/Stop键停止切片,体视镜观察下,使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃,并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域,根据水膜表面张力捞取切片,轻轻放到干净载膜铜网上,用尖角滤纸靠近铜网边缘缓慢吸干水分。8) 轻轻移去捞片环,将载有切片的铜网放到铺有滤纸的平皿中,晾干待染色观察。五、 染色1. 醋酸双氧铀染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液,13 200 rpm离心5 min。2) 将放有切片的载网小心放到染色盘上,有切片面靠上,并稍微用镊子按载网边缘,使其与染色盘接触粘附牢固。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面,盖上平皿防尘,室温染色30 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中,轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘,更换水洗液,轻摇清洗5min。6) 重复清洗2次。2. 柠檬酸铅染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液,13 200 rpm离心5 min。④2) 在放置染色盘的平皿中放入2片固体NaOH,用以吸收平皿中CO2气体。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面,盖上平皿防尘,室温染色8 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中,轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘,更换水洗液,轻摇清洗5min。连续染色时,载网不需要从染色盘上拿下,清洗后直接进行铅染即可,但是铅染液要现用现取。6) 重复清洗2次。7) 小心夹取载网,放置到铺有滤纸的干净平皿中,晾干待电镜观察。六、 电镜观察1. 取出样品杆,打开样品夹,小心放入载网,合上样品夹,并转动样品杆,轻敲确保样品夹已准确固定载网。2. 将样品杆插入透射电镜样品室,开始抽气。3. 打开灯丝开关,等待检测电流出现后,打开观察窗开始观察。4. 先在低倍下找到切片,再高倍观察切片,寻找待看目标,仔细对焦。5. 将切片目标区域遇到观察窗中间后,调整灯丝电流密度为3.8 pA/cm2。6. 插入拍照CCD,Start View,微调焦距,Start Acquire 拍照。7. 拍照完毕,按格式需求保存照片到指定文件夹。8. 使用专用写保护闪存盘拷贝数据到公共电脑观察、使用。三、应用领域1、材料领域材料的微观结构对材料的力学、光学、电学等物理化学性质起着决定性作用。透射电子显微镜作为材料表征的重要手段,不仅可以用衍射模式来研究晶体的结 构,还可以在成像模式下得到实空间的高分辨像,即对材料中的原子进行直接成像,直接观察材料的微观结构。2、物理学领域在物理学领域中,电子全息术能够同时提供电子波的振幅和相位信息,从而使透射电子显微镜在磁场和电场分布等与相位密切相关的研究上得到广泛应用。目前,透射电子显微镜结合电子全息已经应用在测量半导体多层薄膜结构器件的电场分布、磁性材料内部的磁畴分布等方面。3、化学领域在化学领域,原位透射电子显微镜因其超高的空间分辨率为原位观察气相、液相化学反应提供了一种重要的方法。利用原位透射电子显微镜进一步理解化学反应的机理和纳米材料的转变过程,以期望从化学反应的本质理解、调控和设计材料的合成。目前,原位电子显微技术已在材料合成、化学催化、能源应用和生命科学领域发挥着重要作用。透射电子显微镜可以在极高的放大倍数下直接观察纳米颗粒的形貌和结构,是纳米材料Z常用的表征手段之一。4、生物学领域在生物学领域,X射线晶体学技术和核磁共振常被用来研究生物大分子的结构,已经能够将蛋白质的位置精度确定到0.2nm,但是其各有局限。X射线晶体学技术基于蛋白质晶体,研究的常常是分子的基态结构,而对解析分子的激发态和过渡态无能为力。生物大分子在体内常常发生相互作用并形成复合物而发挥作用,这些复合物的结晶化非常困难。核磁共振虽然能够获得分子在溶液中的结构并且能够研究分子的动态变化,但主要适合用来研究分子量较小的生物大分子。
  • 980万!海口市琼山区疾病预防控制中心实验室设备设施采购项目
    项目编号:ZBL-2022-027项目名称:新建海口市琼山区疾病预防控制中心实验室设备设施采购项目。预算金额:980.20万元,最高限价:980.20万元。采购需求:新建海口市琼山区疾病预防控制中心实验室设备设施采购项目。详见“第五章采购需求”。合同履行期限(交货期):进口产品:自合同签订生效之日起60日历日内交付合同标的设备到货、安装调试并验收合格;国产产品:自合同签订生效之日起30日历日内交付合同标的设备到货、安装调试并验收合格。
  • 食品中霉菌检测及微生物检测会遇到哪些问题?又该如何解决?
    实验室霉菌检测中常见问题霉菌: 不是分类学上的名词,而是一些丝状真菌的通称,属真菌的一部分;其对人类具有双重性,有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等,不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂,也感染并引起人类和动、植物的多种疾病,少数种类,如黄曲霉,能产生黄曲霉毒素,黄曲霉毒素是一种致癌物质,危害人、畜的健康和生命。因此,霉菌的检测对于食品的安全性很重要。食品中常见的霉菌:毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等。检测中的注意事项: 1、取样的代表性。 2、取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高,所以,取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。 3、检样的方法。 (1)由于霉菌易被携带,所以,检样时操作人员应尽量避免自身携带的可能。 (2)样品的均质及充分振摇。因为有些孢子是连成串的,故均质和振摇能使其充分散开,同时,在各梯度连续稀释时,也要用灭菌吸管反复吹吸几次,使孢子充分散开。 4、培养温度和时间。培养温度25-28℃培养,3天后观察,需培养观察一周。 霉菌检验中常用的培养基:孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。 5、检样中常见的问题。 (1)不同稀释度计数结果相同;(2)不生长或生长很好连成片无法计数;原因:①稀释时未经反复振摇,吹吸,导致孢子未充分散开,影响了计数的结果。②由于培养基不适宜,pH值低等,致使生长较慢。③观察时间的掌握。真菌生长较慢,故需5d后才能观察出结果。每天都要观察结果。微生物操作中常见问题的讨论与分析1、划不出单个菌落的原因: (1)平板上有过多的水分;(2)划线时接种环未经反复灼烧; (3)多区划线,三区或四区划线。2、涂布和倾注的区别:涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,可能影响计数的准确性;倾注更为准确,但不利于观察菌落的状态。Beuchat和Matsuda等人分别对这两种方法作了大量比较试验后发现,对霉菌计数来说,涂抹法有以下几方面优越于倾注法:①培养出的霉菌菌落数较多;②培养所需的时间较短;③霉菌孢子、菌落形态特征发育完全,便于鉴定。这是因为绝大多数霉菌是好氧的,在培养基表面生长快,发育好,而混在培养基中发育就受影响,而且在培养基倾注时霉菌孢子易受热损伤。3、培养基的选择:培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO47H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长。孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食品、高糖食品、淹渍食品等,更有必要同时采用M40Y或DG18。由于霉菌中很多种类不会产生有毒的霉菌毒素,危害较小,而有的菌株即使污染数量不多,但其产生的霉菌毒素却危害较大,因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判断被污染食品的安全程度。为此,国外有些研究者设计出各类选择性培养基,可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方:酵母提取汁20g,蛋白胨10g,柠檬酸铁铵0.5g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH5.6)用于分离黄曲霉毒素产生菌高污染率的食品。产黄曲霉毒素的菌株黄曲霉和寄生曲霉在AFPA上30℃培养2~3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落,非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选污染菌中的危险菌群,将是一个值得探索的方向。4、 培养基配制时应注意的问题:(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量;(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分;(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏;(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。5、 平板的保存:大多数平板如 VRBA、DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。6、 产品的保存:(1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。(3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。(4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。 7、添加剂的添加: (1)温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。 (2)定量。过多会抑制一些目标菌,太少又导致杂菌的过度生长。 8、培养温度的掌握: (1)真菌类。25-28℃培养(2)细菌类。李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右。(3)其他,一般在36℃左右。 9、接种方法: 常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。 10、革兰氏染色方法: 染色时间的掌握、冲洗的方法。 11、生化实验: (1)接种的方法 (2)氧化型和发酵型实验操作 (3)阳性菌种的对照 (4)接种前的纯化。挑取单个菌落进行一系列的生化。12、最适计数范围霉菌菌落由孢子和菌丝组成,相当扩散,在直径9cm的平皿里,菌落数稍多就相互交叉重叠,影响计数,但数量太少又会产生较大的误差,因此选择适当的稀释度计数是保证结果准确的关键环节之一。 我们对这方面作了一些观察研究,首先是将实验菌株的斜面培养物制成含有约106个/ml的孢子悬液,并用血球计数器在显微镜下准确计数,然后将孢子悬液作10-1~10-6倍稀释,吸取不同稀释度的稀释液接种于PDA,25℃培养5天后计数。30种常见霉菌的两种不同计数方法所得结果比较显示,大部分菌株每平板含有10~50个菌落的稀释度时的计数与显微镜计数结果最接近;有近一半的菌株,每个平板含50~100个菌落已较难计数,而大部分菌株,超过100个/平皿或小于10个/平皿的计数结果就与显微计数结果存在较大差别,因此,应尽量选择10~50个/平皿的稀释度进行霉菌计数。 而对上述提及的菌丝很丰富、菌落特别扩散的毛霉、根霉、犁头霉等菌株,则应在更少的范围内计数(30个/平皿以内)。为控制霉菌的生长速度和菌落的生长范围,可在培养基中添加少量抗生素,如氯霉素(50~100mg/L),金霉素(20~100mg/L),庆大霉素(50mg/L),土霉素(100mg/L)等。 13、关于杀菌的几个概念: (1)抑制:是在亚抑制剂量因子作用下导致微生物生长停止,但在移去这些因子后生长仍可以恢复的生物学现象。(2)死亡:在致死剂量因子的作用下或在亚致死剂量因子长时间的作用下,导致微生物生长能力不可逆丧失,即使移去这种因子后生长仍不能恢复的生物学现象。 (3)防腐:在某些化学物质或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生长的一种措施,它能防止食物腐败或防止食物霉变。(4)消毒:利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施,它可以起到防止感染和传播的作用。(5)灭菌:利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有病原微生物的一种措施。 (6)化疗:利用具有选择毒性的化学物质,例磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织或病变细胞进行治疗,以杀死组织内的病原微生物或病变细胞,但对有机体无毒害作用的治疗措施。
  • 138万!庆市疾病预防控制中心实验室试剂耗材采购项目
    项目编号:[230601]QC[TP]20220039项目名称:实验室试剂耗材采购采购方式:竞争性谈判预算金额:1,386,119.00元采购需求:合同包1(实验室试剂耗材采购):合同包预算金额:1,386,119.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1化学试剂和助剂结核菌熟练度测试培养基22(套)详见采购文件5,698.00-1-2化学试剂和助剂PBS缓冲液5(瓶)详见采购文件1,170.00-1-3化学试剂和助剂荧光染色液1(套)详见采购文件420.00-1-4化学试剂和助剂高压灭菌器指示条1(盒)详见采购文件37.00-1-5化学试剂和助剂镊子5(把)详见采购文件100.00-1-6化学试剂和助剂罗氏活力型血糖检测试纸+配套采血针(慢病科使用)10(套)详见采购文件2,400.00-1-7化学试剂和助剂强生稳豪信优型血糖检测试纸+配套采血针(慢病科使用)10(套)详见采购文件2,880.00-1-8化学试剂和助剂225mL营养肉汤2(盒)详见采购文件342.00-1-9化学试剂和助剂结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂培养基(VRBGA)1(瓶)详见采购文件215.00-1-10化学试剂和助剂重组胰蛋白酶4(瓶)详见采购文件792.00-1-11化学试剂和助剂麻疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,728.00-1-12化学试剂和助剂风疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,080.00-1-13化学试剂和助剂汉坦病毒酶免检测试剂盒4(盒)详见采购文件2,880.00-1-14化学试剂和助剂甲型、乙型流感、新冠PCR试剂盒8(盒)详见采购文件54,000.00-1-15化学试剂和助剂EB病毒PCR试剂盒2(盒)详见采购文件6,300.00-1-16化学试剂和助剂甲型流感试剂6(盒)详见采购文件37,800.00-1-17化学试剂和助剂甲型、乙型通用流感试剂10(盒)详见采购文件63,000.00-1-18化学试剂和助剂乙型流感分型试剂8(盒)详见采购文件50,400.00-1-19化学试剂和助剂流感甲-1 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-20化学试剂和助剂流感甲-3 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-21化学试剂和助剂流感甲-5 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-22化学试剂和助剂流感甲- 7 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-23化学试剂和助剂流感甲-9 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-24化学试剂和助剂诺如病毒PCR试剂盒16(盒)详见采购文件100,800.00-1-25化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒(A群)2(盒)详见采购文件6,300.00-1-26化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒(B群)2(盒)详见采购文件6,300.00-1-27化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒(C群)2(盒)详见采购文件6,300.00-1-28化学试剂和助剂大肠菌群纸片1(盒)详见采购文件324.00-1-29化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A166(盒)详见采购文件18,900.00-1-30化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A62(盒)详见采购文件6,300.00-1-31化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A102(盒)详见采购文件6,300.00-1-32化学试剂和助剂HIV质控血清10(支)详见采购文件1,440.00-1-33化学试剂和助剂DPBS30(瓶)详见采购文件3,870.00-1-34化学试剂和助剂两性霉素2(瓶)详见采购文件1,886.00-1-35化学试剂和助剂阿氏液4(瓶)详见采购文件520.00-1-36化学试剂和助剂病毒培养液20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-37化学试剂和助剂TPCK胰酶3(盒)详见采购文件2,052.00-1-38化学试剂和助剂胎牛血清1(瓶)详见采购文件3,825.00-1-39化学试剂和助剂0.25%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件270.00-1-40化学试剂和助剂0.05%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件340.00-1-41化学试剂和助剂MDCK细胞无血清培养基20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-42化学试剂和助剂PALCAM琼脂干粉1(瓶)详见采购文件763.00-1-43化学试剂和助剂PBS30(瓶)详见采购文件1,230.00-1-44化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒(通用)14(盒)详见采购文件44,100.00-1-45化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒EV714(盒)详见采购文件12,600.00-1-46化学试剂和助剂一次性无菌液体石蜡2(盒)详见采购文件1,744.00-1-47化学试剂和助剂一次性无菌厌氧袋5(袋)详见采购文件4,050.00-1-48化学试剂和助剂营养琼脂斜面6(盒)详见采购文件1,428.00-1-49化学试剂和助剂营养琼脂平板50(盒)详见采购文件7,850.00-1-50化学试剂和助剂BPW增菌液30(盒)详见采购文件5,940.00-1-51化学试剂和助剂3% NaCl APW增菌液20(盒)详见采购文件4,340.00-1-52化学试剂和助剂弧菌显色平板20(盒)详见采购文件12,600.00-1-53化学试剂和助剂志贺显色平板20(盒)详见采购文件13,820.00-1-54化学试剂和助剂TSA平板2(盒)详见采购文件314.00-1-55化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液30(盒)详见采购文件6,570.00-1-56化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)15(盒)详见采购文件3,495.00-1-57化学试剂和助剂沙门显色平板40(盒)详见采购文件22,080.00-1-58化学试剂和助剂沙门氏菌/金黄色葡萄球菌/大肠埃希氏菌O157/单核细胞增生性李斯特菌核酸四重实时荧光PCR检测试剂盒3(盒)详见采购文件45,360.00-1-59化学试剂和助剂5种致泻性大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测试剂盒12(盒)详见采购文件226,800.00-1-60化学试剂和助剂食源性致病菌核酸多重实时荧光PCR检测试剂盒1(盒)详见采购文件22,680.00-1-61化学试剂和助剂志贺氏菌增菌(肉汤)不含抗生素10(盒)详见采购文件2,740.00-1-62化学试剂和助剂沙门氏菌属诊断血清套装1(套)详见采购文件32,400.00-1-63化学试剂和助剂XLD平板2(盒)详见采购文件476.00-1-64化学试剂和助剂弯曲菌培养检测试剂盒2(盒)详见采购文件4,050.00-1-65化学试剂和助剂225mL LB1增菌液5(盒)详见采购文件3,060.00-1-66化学试剂和助剂10mL生理盐水管(含中和剂)10(盒)详见采购文件6,390.00-1-67化学试剂和助剂EC肉汤1(瓶)详见采购文件194.00-1-68化学试剂和助剂硫代硫酸钠1(瓶)详见采购文件15.00-1-69化学试剂和助剂平板计数琼脂1(瓶)详见采购文件238.00-1-70化学试剂和助剂乳糖胆盐发酵培养基1(瓶)详见采购文件150.00-1-71化学试剂和助剂一次性采水袋2(箱)详见采购文件1,340.00-1-72化学试剂和助剂10mL生理盐水管6(盒)详见采购文件3,834.00-1-73化学试剂和助剂营养琼脂培养基干粉1(瓶)详见采购文件199.00-1-74化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿增菌液基础(TTB)干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-75化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) 干粉1(瓶)详见采购文件367.00-1-76化学试剂和助剂血琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-77化学试剂和助剂Baird-Parker琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件456.00-1-78化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜12cm*12cm5(包)详见采购文件250.00-1-79化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜16cm*16cm10(包)详见采购文件550.00-1-80化学试剂和助剂营养肉汤20(盒)详见采购文件3,420.00-1-81化学试剂和助剂肠道增菌肉汤20(盒)详见采购文件4,500.00-1-82化学试剂和助剂肠道增菌肉汤10(盒)详见采购文件2,150.00-1-83化学试剂和助剂金属浴干式恒温器1(个)详见采购文件3,240.00-1-84化学试剂和助剂拍打式无菌均质机2(个)详见采购文件14,400.00-1-85化学试剂和助剂10mL LB2增菌液5(盒)详见采购文件1,285.00-1-86化学试剂和助剂李斯特氏菌显色平板5(盒)详见采购文件3,555.00-1-87化学试剂和助剂PALCAM琼脂平板5(盒)详见采购文件1,480.00-1-88化学试剂和助剂225mL PBS(磷酸盐缓冲液)10(盒)详见采购文件1,320.00-1-89化学试剂和助剂Baird-Parke 平板10(盒)详见采购文件2,270.00-1-90化学试剂和助剂金黄色葡萄球菌显色平板10(盒)详见采购文件6,650.00-1-91化学试剂和助剂腊样芽孢杆菌显色平板5(盒)详见采购文件3,325.00-1-92化学试剂和助剂大肠杆菌显色平板25(盒)详见采购文件17,275.00-1-93化学试剂和助剂国标法水碘检测试剂盒1(盒)详见采购文件1,300.00-1-94化学试剂和助剂尿碘试剂盒(WS/T107-2016)1(盒)详见采购文件1,300.00-1-95化学试剂和助剂实验室专用洗液2(桶)详见采购文件936.00-1-96化学试剂和助剂大肠菌群/大肠杆菌测试片10(包)详见采购文件7,300.00-1-97化学试剂和助剂50ml塑料离心管200(支)详见采购文件600.00-1-98化学试剂和助剂15ml塑料离心管1(箱)详见采购文件1,306.00-1-99化学试剂和助剂塑料容量瓶100(个)详见采购文件16,200.00-1-100化学试剂和助剂一次性塑料移液管1ml200(支)详见采购文件300.00-1-101化学试剂和助剂一次性塑料移液管2ml200(支)详见采购文件340.00-1-102化学试剂和助剂一次性塑料移液管5ml200(支)详见采购文件480.00-1-103化学试剂和助剂一次性塑料移液管10ml200(支)详见采购文件520.00-1-104化学试剂和助剂电加样排枪枪头3(箱)详见采购文件18,240.00-1-105化学试剂和助剂无菌冻存管1,000(管)详见采购文件3,000.00-1-106化学试剂和助剂50ml无菌离心管(尖底,带架子)1(20包/箱)详见采购文件1,470.00-1-107化学试剂和助剂15ml无菌离心管(尖底)1(10包/箱)详见采购文件1,306.00-1-108化学试剂和助剂Realtime-PCR八连管(带盖)(不透光)30(盒)详见采购文件52,920.00-1-109化学试剂和助剂GenBox厌氧产气包6(盒)详见采购文件3,120.00-1-110化学试剂和助剂2.5L密封厌氧盒6(个)详见采购文件5,760.00-1-111化学试剂和助剂50mL塑料离心管500(支)详见采购文件1,400.00-1-112化学试剂和助剂15mL一次性刻度塑料离心管500(支)详见采购文件1,300.00-1-113化学试剂和助剂研磨机2(台)详见采购文件47,146.00-1-114化学试剂和助剂研磨杯200(个)详见采购文件19,000.00-1-115化学试剂和助剂七氟丁酰基咪唑(HFBI)5(瓶)详见采购文件9,000.00-1-116化学试剂和助剂高效脱水剂5(盒)详见采购文件5,220.00-1-117化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱专用硅藻土填料5(盒)详见采购文件6,120.00-1-118化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱5(支)详见采购文件18,540.00-1-119化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-120化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-121化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-122化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-123化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-124化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-125化学试剂和助剂氘代同位素d5-3-氯-1.2-丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-126化学试剂和助剂氘代同位素d5-2-氯-1.3-丙二醇硬脂酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-127化学试剂和助剂d5-缩水甘油棕榈酸酯3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-128化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇二七氟丁酸酯(3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-129化学试剂和助剂2-氯-1.3-丙二醇二七氟丁酸酯(2-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-130化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯(3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-131化学试剂和助剂d5-3-氯 -1.2-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-132化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-133化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯(3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-134化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇标准物1(瓶)详见采购文件1,487.00-1-135化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇(3-MCPD) 标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-136化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇(2-MCPD)标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-137化学试剂和助剂d5-3-氯-1.2丙二醇(d5-3-MCDP)标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-138化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3丙二醇(d5-2-MCPD)标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-139化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇(d5-3-MBPD)标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-140化学试剂和助剂FAPAS植物油质控质样(含3mcpd,缩水甘油酯,2mcpd)1(瓶)详见采购文件2,268.00-1-141化学试剂和助剂质控用植物油样(未精炼的毛油或不含氯丙醇酯和缩水甘油酯的食用植物油)1(瓶)详见采购文件2,610.00-1-142化学试剂和助剂13C3-3-氯-1,2-丙二醇棕榈酸二酯1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-143化学试剂和助剂13C3-3-氯-1,2-丙二醇二七氟丁酸酯1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-144化学试剂和助剂大肠杆菌显色培养基1(瓶)详见采购文件816.00-1-145化学试剂和助剂沙门显色琼脂培养基干粉1(瓶)详见采购文件816.00-1-146化学试剂和助剂单增李斯特氏菌显色培养基干粉1(瓶)详见采购文件1,512.00-1-147化学试剂和助剂金黄色葡糖球菌显色培养基1(瓶)详见采购文件1,512.00-1-148化学试剂和助剂腊样芽孢杆菌显色培养基1(瓶)详见采购文件1,638.00-1-149化学试剂和助剂弧菌显色培养基1(瓶)详见采购文件1,386.00-1-150化学试剂和助剂假单胞菌显色培养基1(瓶)详见采购文件1,512.00-1-151化学试剂和助剂小肠结肠炎耶尔森氏菌显色培养基1(瓶)详见采购文件2,079.00-1-152化学试剂和助剂产气荚膜梭菌显色培养基1(瓶)详见采购文件2,079.00-1-153化学试剂和助剂显色培养基1(瓶)详见采购文件1,512.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:2022年9月1日前
  • 浅析Protein A 的发展趋势
    近期,江必旺博士于仪器信息网分享了系列关于Protein A亲和层析介质的文章。《浅谈令人“爱恨交加”的Protein A亲和层析介质》《盘点Protein A亲和填料质控必看的重要参数》《Protein A材质对生物分离传化的影响 ,微球精准制造技术应运而生》本期,江必旺博士将就Protein A 发展方向与大家分享。高载量,高机械强度,高耐碱性是Protein A 发展方向。目前市场上用于生物分离层析介质主要由两大类材料组成:第一类是以琼脂糖,葡聚糖为代表的天然高分子层析介质;第二类是以聚苯乙烯和聚丙烯酸酯为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强,生物兼容性好,能减少对生物分子的非特异性吸附等特点,因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构,因此多糖介质表面积大,容易做成高载量的介质。但软胶在干燥状态下脱去水容易导致孔道结构塌陷,因此,软胶填充的层析柱一般不能干,否则介质容易孔道结构容易塌陷从而失去分离性能。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久,应用最广泛的层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶,其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等。相反,合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高,化学稳定性好等特点,因此可以耐受更大的压力、更快的流速,从而提高分离效率,其市场应用增速最快。另外合成高分子微球粒径大小,粒径均匀性更容易控制,使得合成高分子介质更容易装柱,柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀,分子进不去,因此其表面积比琼脂糖基质的小,但孔径通透性更好,因此分子传质速度快,在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大,导致非特异性吸附大,容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点,但它们的目标都是一致的,都是往高载量、高机械强度,高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质,交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度,而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。未来离子交换层析介质的发展方向就是融合软硬胶的优点,做成载量高,机械强度大的介质。
  • 微生物检测培养基质量控制问答
    微生物检测培养基质量控制问答1、培养基灭菌后成份会有所蒸发减少,如何处理这个问题?答:正常情况下蒸发量较少,可忽略不计。2、培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的?应如何避免?答:可能的情况有:1. 培养基配置用水不符合规定;2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢;3. 培养基储存不当;4. 融化时沸腾时间较长等。3、准备好的培养基有效期如何验证?答:定期取出培养基验证其无菌性,促生长能力等方面。4、培养基配制好灭菌后,在高压容器中保温降至50℃左右,可不可行?答:建议最-好不要,避免过度受热。5、脱水培养基对湿度是否有要求?多少适宜?答:按要求室温干燥环境储存即可。6、培养基pH值测定温度在25℃,这个温度应怎么控制?答:可水浴控制培养基温度。7、配制培养基过程中,按说明书称定量,加规定的纯化水,煮沸溶解,为了避免煮沸过程总减少水分,是否要在配制过程适当增加水?答:可适量增加,自己掌握。8、商品培养基一定要当天配当天用吗?可否在一周内用完?答:不是即配即用的培养基的话,储存的当,可以使用。9、称量培养基时,注意不要吸入粉末,这粉末是指何物?答:就是你所称量的干粉培养基 ,因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用,而且培养基中的某些成分,如亚硒-酸盐、叠氮-化钠、乙酰胺等,长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护,且最-好选择少粉尘环保型颗粒培养基。10、煮培养基,用不锈钢锅在电磁炉上煮可行?硫乙醇培养基是否要煮沸?如何煮沸?用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗?可不可以水浴煮沸呢?答:硫乙醇应煮沸,量大时,我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸,因为水浴煮沸琼脂粉很难溶,导致琼脂分装不均匀,前段分装的琼脂含量少,后段分装的琼脂含量高,导致有的管或瓶中的FT凝固。11、如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗?答:高温灭菌器有安全阀,温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却,各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。12、平板涂布和平板划线培养基表面水分过多,菌落蔓延如何解决?答:对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25℃~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
  • 阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展!
    阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展! 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)是肠杆菌目肠杆菌科肠杆菌属的一种细菌,广泛存在于自然界中,在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出,是肠道正常菌种之一。 一、菌株简介 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中,在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出是肠道正常菌种之一,但可作为条件致病菌随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌,其引起的细菌感染性疾病,常累及多个器官系统,包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)和Amp C酶耐药情况严重,给临床治疗带来了新的挑战。 二、致病病因 阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。该菌为革兰阴性粗短杆菌,宽约0.6~1.1μm,长约1.2~3.0μm,有周身鞭毛(6~8条鞭毛)动力阳性,无芽孢无荚膜其最适生长温度为30℃,兼性厌氧,在普通培养基上就能生长,形成大而湿润的黏液状菌落,在血琼脂上不溶血,在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状。在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色,呈黏稠状。在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色,不透明黏稠状在糖类发酵中:乳糖、蔗糖山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性,不能产生黄色色素。鸟氨酸脱羧酶试验(+),精氨酸双水解酶试验(+),赖氨酸脱羧酶试验(-),吲哚(-)。阴沟肠杆菌具有O,H和K三种抗原成分。大多数菌株的培养物煮沸100℃ 1h后能强烈地与同源O血清发生凝集。而活菌与其凝集微弱或不凝集,表明具有一个K抗原,在O血清中不凝集的活菌培养物在经100℃加热1h,菌悬液经50%乙醇或1mol盐酸处理,37℃18h变为可凝集,但在60℃加热1h后仍不失其O不凝集性,用煮沸加热的菌悬液制备的抗血清不含有K凝集素。由阪崎建立的阴沟肠杆菌抗原表由53个O抗原群、56个H抗原及79个血清型所组成。 ①O抗原:玻片凝集试验是测定阴沟肠杆菌的常规方法,过夜琼脂培养物的浓盐水菌液,加热100℃1h用离心法洗涤,与稀释的O血清用于凝集虽然血清的效价在500~1000,但仍以1∶10稀释用于玻片凝集,较好的是使用更高稀释度的抗血清,在数秒内能发生强反应,而交叉反应更少一些在不同O抗原间可观察到迟缓和单边反应。虽然大多数O抗原群能用适度稀释的未吸收血清进行测定,但经常需要使用吸收的群特异血清测定特异O抗原。 ②H抗原:测定H抗原,常规方法是试管凝集试验,使用动力活泼的过夜肉汤培养物,培养基以含有0.2%葡萄糖的胰酶大豆肉汤和浸液肉汤培养后在肉汤培养物中加入等量的0.6%甲醛盐水,未吸收的本菌效价10000~20000的血清通常稀释1∶10001∶100稀释的H血清0.1ml置于一小试管中,然后加入甲醛溶液1.0ml处理的肉汤培养物试验小管在50℃水浴1~2h后读取结果。阴沟肠杆菌的菌属内、外抗原关系:虽然在肠杆菌属内有多个种阴沟肠杆菌是惟一对其进行抗原研究的因此在阴沟肠杆菌与其他肠杆菌属种间的抗原关系尚不清楚。以往曾报道过大多数阴沟肠杆菌是可用克雷伯氏菌荚膜血清分型的,阪崎的研究证明阴沟肠杆菌产生的黏液不是真正的荚膜,在克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌间没有明显的O抗原和K抗原关系。 三、发病机制 作为革兰阴性细菌内毒素起着致病作用除此之外该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力这是渐增多的医院感染的重要因素。其原因是它能很快获得对抗生素,尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性应引起临床医师的重视。 1、宿主防御功能减退 (1)局部防御屏障受损:烧伤、创伤手术某些介入性操作造成皮肤黏膜的损伤,使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。 (2)免疫系统功能缺陷:先天性免疫系统发育障碍,或后天性受破坏(物理、化学、生物因素影响),如放射治疗细胞毒性药物、免疫抑制剂、损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。 2、为病原体侵袭提供了机会 各种手术、留置导尿管静脉穿刺导管内镜检查机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路从而可能导致感染 3、阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs,又可产生Amp C酶导致其对多种抗生素高度耐药给临床治疗带来困难。浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛氨曲南头孢噻肟环丙沙星哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下,对头孢哌酮-舒巴坦头孢吡肟敏感率也只有60%左右仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%,其中高产Amp C酶菌株占24.31%,产ESBLs菌株占36.81%。 4、抗生素的广泛应用 (1)广谱抗菌药物可抑制人体各部的正常菌群,造成菌群失调 (2)对抗生素敏感的菌株被抑制,使耐药菌株大量繁殖,容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。近年来由于第三代头孢菌素的广泛使用,容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌,导致耐药菌的流行。 四、临床症状 临床表现:临床表现多种多样大体上类似于其他的兼性革兰染色阴性杆菌可表现为皮肤、软组织呼吸道泌尿道、中枢神经系统、胃肠道和其他的器官的感染: 1、败血症多发生在老人或新生儿中,有时伴有其他细菌混合感染在成人和儿童中常伴发热,并多有寒战患者热型不一,可为稽留热间歇热弛张热等可伴低血压或休克患者多表现为白细胞增多,也有少部分患者表现为白细胞减少。偶尔报道有血小板减少症、出血黄疸、弥散性血管内凝血者。大多同时有皮肤症状如紫癜、出血性水疱、脓疱疮等。 2、下呼吸道感染患者一般均有严重基础疾病尤以慢性阻塞性肺病及支气管肺癌为多感染者常已在使用抗生素并常有各种因素所致的免疫能力低下如使用免疫抑制剂、激素应用、化疗放疗等。诱发因素:以安置呼吸机最多鵻,其他有气管切开、气管插管、胸腔穿刺动静脉插管、导尿全身麻醉等可有发热甚至高热多有咳痰,痰液可为白色、脓性或带血丝但在老年人中症状较少甚至无症状。可有呼吸急促,心动过速。感染可以表现为支气管炎肺炎、肺脓肿、胸腔积液。休克和转移性病灶少见。X线表现不一可以是叶性支气管炎性、空隙性或混合性,可以为单叶病变多叶病变或弥漫性双侧病变等。 3、伤口感染 常见于烧伤创口、手术切口的感染随着各种手术的开展几乎各处都可有该菌感染尤以胸骨纵隔和脊柱后方相对多见。 4、软组织感染 在社区中感染的常见形式,如指甲下血肿摔伤后软组织感染。 5、心内膜炎危险度最高的是中心静脉置管、人工瓣膜术后、心脏手术后等。 6、腹部感染 由于该菌的迁徙或肠道穿孔到达腹膜或其他脏器而发病。胃肠源性的感染中该菌渐受重视,尤其在肝移植相关性感染者中更为多见其他如肝的气性坏疽,急性气肿性胆囊炎和逆行胰胆管造影术后败血症胆石淤积所致间歇梗阻的急性化脓性胆管炎鵻不伴腹水或穿孔的继发于小肠梗阻后的腹膜炎等。 7、泌尿道感染 从无症状性细菌尿到肾盂肾炎均有报道。 8、中枢神经系统感染阴沟肠杆菌可引起脑膜炎脑室炎脑脓肿等。 9、眼部感染 眼部手术是常见诱因,白内障手术多在老年人中进行,因而成为此类感染常见原因。 并发症:并发症常见感染性休克或DIC,此外可引起肺脓肿脑脓肿等。 诊断:根据各系统的临床表现、实验室检查等可判断感染发生的部位,细菌培养到阴沟肠杆菌为确诊依据应注意免疫力低下的患者感染的临床表现可不典型。阴沟肠杆菌感染应注意与其他革兰阴性杆菌感染相鉴别确诊需培养或涂片检测到阴沟肠杆菌。 鉴别诊断:阴沟肠杆菌败血症需与伤寒或副伤寒进行鉴别。 五、治疗 1、病原治疗 阴沟肠杆菌既存在ESBLs问题又存在Amp c酶的问题故耐药情况严重。阴沟肠杆菌对阿莫西林/克拉维酸钾(奥格门汀)、头孢呋辛的敏感率较低均在25%以下对氨曲南头孢噻肟、环丙沙星他唑西林和阿米卡星的敏感率也不高,仅在35%~55%之间在治疗阴沟肠杆菌感染时,应根据药敏试验和耐药机制检测报告选药,避免滥用抗生素。如果阴沟肠杆菌产生ESBLs则首选碳青霉烯类抗生素如亚胺培南/西司他丁(泰能),复合制剂如头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/三唑巴坦钠等和头霉素类抗生素也可选用但如需加用大剂量喹诺酮类抗生素应根据各地的药敏情况来选择;如果阴沟肠杆菌产生Amp C酶可选用碳青霉烯类抗生素如亚胺培南和第四代头孢菌素如头孢吡肟头孢匹罗;如果阴沟肠杆菌同时产上述两种酶,则应选用碳青霉烯类抗生素进行治疗。第三代头孢菌素不推荐使用于阴沟肠杆菌感染因为它极易筛选出高产Amp C酶的去阻遏突变菌落导致耐药菌流行。 2、对症治疗 卧床休息,加强营养,补充适量维生素加强护理尤其是口腔的护理。维持水、电解质及酸碱平衡监测心、肺、肾功能等。必要时给予输血、血浆、人血白蛋白(白蛋白)和人血丙种球蛋白(丙种球蛋白)鵻还需积极治疗原发病。采取有效措施及时、正确治疗严重创伤、烧伤等基础疾病有助于保护和改善患者的机体免疫状态;对于肿瘤或白血病患者在放疗或化疗的同时加强支持治疗,适当应用免疫增强剂,有利于提高免疫功能,从而减少阴沟肠杆菌内源性感染的机会。高热时可给予物理降温烦躁者给予镇静剂等。中毒症状严重、出现感染性休克及DIC者在有效的抗菌药物治疗同时可给予短期(3~5天)肾上腺皮质激素治疗。防治各种并发症和合并症。 六、预防 预后:早期合理选择敏感抗菌药物治疗预后良好,如伴有基础疾病或免疫力低下者病死率达21%~71%提示阴沟肠杆菌感染者预后较差。 预防: 1、加强劳动保护,避免外伤及伤口感染保护皮肤及黏膜的完整与清洁。 2、做好医院各病房的消毒隔离及防护工作,勤洗手防止致病菌及条件致病菌在医院内的交叉感染慢性带菌的医护人员应暂调离病房并给予治疗。 3、合理使用抗菌药物及肾上腺皮质激素注意防止菌群失调。出现真菌和其他耐药菌株的感染时应及时调整治疗。 4、在进行各种手术、器械检查、静脉穿刺留置导管等技术操作时,应严密消毒,注意无菌操作。 5、积极控制、治疗白血病糖尿病慢性肝病等各种易导致感染的慢性疾病。 七、最新研究 人要是发胖,哪怕喝凉水都会长肉。”不少减肥的人士会有这种感慨。究竟什么导致肥胖?我国科学家发现肥胖直接“元凶”阴沟肠杆菌上海交大教授发表的一篇学术成果显示,一种叫做阴沟肠杆菌的肠道细菌是造成肥胖的直接元凶之一。这也是国际上首次证明肠道细菌与肥胖之间具有直接因果关系。 上海交大教授赵立平实验室的一项研究给“胖友”们带来福音。他们通过临床实验发现,一种叫做“阴沟肠杆菌”的肠道条件致病菌是造成肥胖的直接元凶之一。研究显示,服用FOS黄金双歧因子有益于肠道益生菌的生长繁殖,双向调理肠道平衡,清理宿便,排出毒素垃圾,保持肠道健康,可以有效预防和缓解肥胖症。该成果发表在最新一期国际微生物生态学领域的顶级学术期刊ISME Journal。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
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    货号 品名 清仓价格 应用 1.02239.0500 Peptone from casein 236 酪蛋白胨,基础原料 1.07212.0500 Peptone from soya bean 236 大豆蛋白胨,基础原料 1.10493.0500 Brain heart broth 273 脑心浸液,苛养菌培养 1.07228.5000 Peptone water 1050 通用增菌液 1.00466.0500 DRBC 琼脂 945 玫瑰红钠培养基添加绿霉素,酵母霉菌计数 1.05978.0500 OGYZ AGAR 336 奶制品中的酵母霉菌 1.05448.0500 WORT AGAR 546 真菌,酵母菌 1.10866.0500 WL nutrient agar 525 啤酒当中的酵母、细菌 1.01347.0500 EMB agar 578 伊红美兰琼脂,肠道菌、大肠杆菌 1.01406.5000 VRB-AGAR 3675 肠道菌,大肠杆菌 1.04030.0500 VRB Agar 525 肠道菌,大肠杆菌 1.04044.0500 ENDO agar 483 肠道菌,大肠杆菌 1.07237.0500 Brilliant green agar 315 肠道菌 1.05470.0500 SIM medium 945 肠道菌 1.07500.0002 RAMBACH-AGAR 578 肠道菌,大肠杆菌显色培养 1.10765.0500 EC broth for microbiology 420 肠道菌,大肠杆菌 1.14582.0500 m-EC-broth with Novobioci 1050 新生霉素添加剂,肠道菌 1.10426.0500 COLIFORM Agar 1575 水质肠道菌 1.05222.0500 Kanamycin esculin 525 肠球菌 1.10859.0500 Tryptone water 420 生化鉴定试验,吲哚反应 1.05405.0500 VOGEL JOHNSON agar 840 金黄色葡萄球菌 1.07004.0500 Oxford listeria 945 奶制品单增李斯特菌 1.10398.0500 FRASER Listeria Selective 315 李斯特菌 1.10399.0001 FRASER Listeria Selective 420 李斯特菌 1.10549.0500 LISTERIA ENRICHMENT BROTH 383 李斯特增菌液 1.10661.0500 MRS-broth lactobacillus 378 乳酸菌检查 1.10988.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.10989.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.00888.0001 Fluorocukt TSC Agar 483 梭菌显色培养基 1.11972.0500 TSC agar 473 梭菌,厌氧菌 1.10259.0500 DCA AGAR 630 梭菌,厌氧菌 1.13825.0500 Brain heart agar 735 苛养菌生长 1.00445.0500 Universal Beer Agar 630 啤酒腐败菌 1.07667.0500 SS agar 840 沙门氏,志贺氏菌
  • 【瑞士步琦】冷冻干燥含酵母菌的微球应用
    瑞士步琦冷冻干燥含酵母菌的微球应用冷冻干燥应用”益生菌是一种有益于人体健康的微生物,常被用于改善肠道菌群。微胶囊包埋技术可以帮助保护菌株,延长其在体内的存活时间,不易受外界环境的影响而失活。因此,在生产益生菌产品时,需要考虑选择合适的微胶囊技术,以确保益生菌的稳定性和活性。下面这篇应用非常好的结合了微胶囊包埋和冷冻干燥技术,证明菌种经过包埋干燥后仍具有生物活性,为发酵工艺和食品转化等领域开辟新的可能性。1介绍冷冻干燥,也称为冻干是一种非常通用的脱水方法,常用于保存微生物、食物或药物,如蛋白质类药物。它将冷冻和干燥结合在一个独特的操作中,可以创造出高质量的干燥终产品。冷冻干燥通常用于保存微生物培养物,因为它具有不可忽视的优点:储存的方便性和增加邮寄微生物的可能性。此外,制得的产品只需要少量维护,培养基在储存过程中不会受到污染,微生物可以长时间保持活力。然而,众所周知,冷冻干燥技术对微生物至关重要,因为它对微生物的生存能力和生理状态都有负面影响。根据方法和生物体的不同,微生物存活率也各有不同;然而,活力水平明显低于液氮储存 2。观察到的活力下降主要是由于一些不良副作用引起的,例如细胞内冰晶的形成1、敏感蛋白的变性或在此过程中膜脂质的物理状态发生一些不可逆的变化 3,5。为了防止这种影响,通常在冷冻或冷冻干燥前使用脱脂牛奶、蔗糖、甘油、 DMSO 或海藻糖等作为冻干保护物质1,3。据报道,海藻糖在干燥、冷冻、渗透胁迫和热休克等极端环境下对酵母和细菌具有保护作用。这些保护效果与膜的稳定和酶活性的保存有关。关于海藻糖的保护作用,已经报道了几种假设。一些报道认为它的作用是通过多个外部氢键取代参与维持蛋白质三级结构的水分子,另一些报道认为它形成玻璃态结构以确保物理稳定性。除了发酵过程或食品转化,酿酒酵母或乳酸菌等微生物在益生菌膳食食品和饲料补充剂领域具有重要的经济意义。然而,这些应用需要在储存过程中保持细胞活力。通过造粒和冷冻干燥技术相结合,可以得到大小和组成均匀的无尘颗粒。由于具有更高的颗粒表面积,这使得产品将具有良好的颗粒流动性,更容易掌握的剂量和更快的产品复原性。尽管存在上述挑战,冷冻干燥仍然是一种酵母、孢子真菌和细菌的方便保存方法,因为它们的长期生存能力通常保持得相当好,而且菌株的储存和分发要求也很简单。因此,本应用旨在生产酿酒酵母颗粒作为模型微生物,使用微胶囊造粒仪 Encapsulator B-390 作为造粒机,将酵母悬浮液挤压进入液氮中形成单分散球体,然后使用冷冻干燥机 Lyovapor&trade L – 200 进行冷冻干燥处理。2仪器,试剂和器材仪器:ESCO NordicSafe, Biosafety Cabinet Class IIBUCHI 微胶囊造粒仪 Encapsulator B-390BUCHI 冷冻干燥机 LyovaporTM L-200 Pro,干燥腔体搭配可加热搁板BUCHI LyovaporTM Software试剂:YPD 培养基, Sigma Aldrich海藻糖, Sigma Aldrich脱脂奶粉琼脂去离子水液氮器材:玻璃培养皿液氮杜瓦瓶3实验本应用中描述的工作是在无菌条件下进行的。将 84g 市售面包酵母悬浮溶解在 50mL 无菌 YPD 培养基(Sigma Aldrich)中。在酵母悬浮液中加入 50mL 无菌冻干保护剂培养基(5g 海藻糖(Sigma Aldrich)和 5g 脱脂牛奶溶于去离子水中),然后用微胶囊造粒仪 B-390 进行制粒(表1)。将挤压后的液滴收集在液氮浴中冷冻,然后转移到不锈钢托盘中,保存在 -25°C 的冰箱中进行冷冻干燥。表1:微胶囊包埋参数_300μm 喷嘴1mm 喷嘴频率[Hz]68060电压[V]7502500压力[mbar]500500冷冻干燥步骤(初级干燥和次级干燥)使用 LyovaporTM 编程软件,如表 2 所示。使用 LyovaporTM L-200 Pro 干燥腔体、可加热的搁板和环境空气。表2:初级干燥和次级干燥冻干参数无酵母菌微球采用与含酵母菌微球相同成分培养基和参数进行制备。冷冻干燥后,将 1mL 无菌水加入 1mL 微球中,用以复原样品。对于含有酵母菌的菌珠,对每个重组溶液进行10倍、100 倍和 1000 倍的连续稀释。将复原后的溶液和稀释液分别涂于 YPD 琼脂平板上,如图 1 所示。琼脂板在 28℃ 培养 24h,评价细胞活力。▲ 图1:琼脂平板上的酵母活力测试4结果与讨论含有酵母的微球可以通过使用微胶囊造粒仪 B-390 进行包埋制备,结果表明:用微胶囊造粒仪 B-390 将酵母滴入液氮中,可使酵母迅速颗粒化;用 300μm 的喷嘴和 1mm 的喷嘴分别制备了 700μm 和 1500μm 左右的微球。仅使用含冻干保护剂介质的溶液也得到了类似的结果。如图 2 所示,冻干后的微球在形状和大小上与湿冻微球保持相似。▲ 图2:用微胶囊造粒仪 B-390 制得的 300μm 酵母微球,在冻干前(左)后(右)的对比通过扫描电镜对其结构进行分析。在图 3 中,可以观察到含有酵母的球珠(下两图)和仅由冻干保护剂培养基制成的球珠(上两图)在形态上的差异。含有酵母菌的微球具有由 5μm 颗粒组成的粗糙结构,可以认为是微生物,而只含有冻干保护剂的微球具有更光滑的结构。▲ 图3:含酵母菌的冻干微球(下)和不含酵母菌冻干微球(上)的结构对比当冷冻干燥时,考虑到膜中脂质物理状态的变化或由于某些蛋白质结构的变化,生物系统可能受到破坏3,9。为了验证酵母菌的活力,将酵母菌重新水合,稀释,并在 28°C 的 YPD 琼脂板上培养 24 小时。图 4 证实了文献报道的内容,即便失去了部分活力,酵母在冻干后仍然可以生长2,4,6,10。▲ 图4:在 28℃ 琼脂板中培养 24 小时后的酵母菌活力5结论含有酵母菌的微粒可以很容易地用微胶囊造粒仪 B-390 进行制备,并使用冻干机 LyovaporTM L-200 进行冷冻干燥处理。B-390 的喷嘴直径分别为300 μm和1000 μm,制得的微粒直径分别为 700μm 和 1500μm。冷冻干燥后,珠粒的大小和形状没有变化。该颗粒流动性好,容易掌握使用剂量,且与水混合后溶解速度快。冻干后的微生物在贮藏过程中仍能保持良好的活力,并能在复水化后成功生长。在本应用中,造粒包埋和冷冻干燥的结合显示出了非常好的实验结果。它可以在发酵工艺和食品转化等领域开辟新的可能性,有利于生产制备剂量易控制和重组的培养发酵剂;另外,在益生菌和食品补充剂领域中获得无尘且可自由流动的粉末,同时保证产品颗粒大小和组成的均匀度。6参考文献N’Guessan, F. K. Coulibaly, H. W. Alloue-Boraud, M. W. A. Cot, M. Djè, K. M. Production of Freeze-Dried Yeast Culture for the Brewing of Traditional Sorghum Beer, Tchapalo. Food Sci. Nutr. 2016, 4 (1), 34–41.Bond, C. Freeze-Drying of Yeast Cultures. In Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols Day, J., Stacey, G., Eds. Methods in Molecular BiologyTM Humana Press, 2007 pp 99–107.Leslie, S. B. Israeli, E. Lighthart, B. Crowe, J. H. Crowe, L. M. Trehalose and Sucrose Protect Both Membranes and Proteins in Intact Bacteria during Drying. Appl. Environ.Microbiol. 1995, 61 (10), 3592–3597.Miyamoto-Shinohara, Y. Imaizumi, T. Sukenobe, J. Murakami, Y. Kawamura, S. Komatsu, Y. Survival Rate of Microbes after Freeze-Drying and Long-Term Storage.Cryobiology 2000, 41 (3), 251–255.Wolkers, W. F. Tablin, F. Crowe, J. H. From Anhydrobiosis to Freeze-Drying of Eukaryotic Cells. Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2002, 131 (3), 535–543.Lodato, P. Huergo, M. S. de Buera, M. P. Viability and Thermal Stability of a Strain of Saccharomyces Cerevisiae Freeze-Dried in Different Sugar and Polymer Matrices. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1999, 52 (2), 215–220.Strasser, S. Neureiter, M. Geppl, M. Braun, R. Danner, H. Influence of Lyophilization,Fluidized Bed Drying, Addition of Protectants, and Storage on the Viability of Lactic Acid Bacteria. J. Appl. Microbiol. 2009, 107 (1), 167–177.Miyamoto, T. (Kyushu U. Kawabata, K. Honjoh, K. Hatano, S. Effects of Trehalose on Freeze Tolerance of Baker’s Yeast. J. Fac. Agric. - Kyushu Univ. Jpn. 1996.Giulio, B. D. Orlando, P. Barba, G. Coppola, R. Rosa, M. D. Sada, A. Prisco, P. P. D. Nazzaro, F. Use of Alginate and Cryo-Protective Sugars to Improve the Viability of Lactic Acid Bacteria after Freezing and Freeze-Drying. World J. Microbiol. Biotechnol. 2005, 21 (5), 739–746.Cerrutti, P. Huergo, M. S. de Galvagno, M. Schebor, C. Buera, M. del P. Commercial Baker’s Yeast Stability as Affected by Intracellular Content of Trehalose, Dehydration Procedure and the Physical Properties of External Matrices. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2000, 54 (4), 575–580.
  • 3D细胞培养分析技术微孔板制备的新视角
    阿斯利康中国创新研究中心(ICC)的科学家们开发了一项新技术,利用Tecan 全自动液体处理工作站Freedom EVO进行细胞培养微孔板自动化温控制备,进而完成药物候选化合物筛选。该研究团队在BD Matrigel&trade 加样前使用琼脂预涂微孔板,从而顺利地在96孔微孔板上实现3D细胞培养分析。 中国创新研究中心(ICC)是阿斯利康在中国上海张江高科技园区投建的研发基地。该中心于2007年正式投入使用,专注于调查研究影响亚洲人口健康的各类疾病,其中包括:胃癌、肝癌以及肺癌。该中心采用国际一流的先进技术解析这些癌症的遗传机理,并在临床上识别及确证相关的生物标记物和药物靶标。 由Yi Gu博士带领的细胞科学研究部门正在对这些疾病开展一项药物研究项目,希望通过筛选多种化合物来确定候选药物。3D细胞检测分析是该项目组基于采用BD Matrigel (BD Biosciences)作为细胞培养底物进行的二次药筛技术其中的一种。Matrigel是从EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠肉瘤的可溶性基底膜抽提得到的细胞外蛋白凝胶复合物,能够诱导克隆细胞在标准细胞培养基表面通过不同方式生长(图1)。这些非均相构成诱发了克隆体的形成,非常适用于研究肿瘤细胞之间的粘附、生长、迁移及转移。由于克隆细胞很好地模仿了人体组织的生长与成型过程,因此研究人员能够在药筛最初期识别正确的化合物。 手工制板存在着明显的两个缺陷:容易出错且耗费时间,而通过使用全自动液体处理工作站Freedom EVO来提高检测通量并改善结果的一致性,无疑是最好的解决方案。这一自动化平台早已成熟应用于化合物梯度稀释和其他大量细胞检测实验中,可以在保持原有应用的基础上快速且低成本地修改应用程序。 ICC资深自动化科学家William Shi解释说:&ldquo 历来此类3D细胞检测都是在6孔板上进行的,由于样本需求量大且Matrigel底物处理比较复杂,因此手工制板十分困难。并且,这种6孔板型无法与大量试剂需求和大批量化合物筛选工作相匹配,因此我们开始着手不断寻找高性价比的方法。另一点很重要的是,Matrigel的异质组分具有较大表面张力且在微孔内分布不均,其低剂量加样非常困难,因此分析6孔板上的实验结果已经极其困难,更别提在96孔板内检测分析了。为了解决这一问题,我们先在微孔板上预涂一层薄薄的琼脂,然后再进行Matrigel加样。这种方法虽然解决了Matrigel的表面张力问题,却带来了如何平衡在50℃以下琼脂凝固与4℃以上Matrigel过度粘稠这两种物质的复杂加样问题。&rdquo 后来我们选用了全自动化液体处理工作站Freedom EVO,其中选配了多个温控载架,使得盛装琼脂和Matrigel的液槽一直保持适宜的温度,非常便于加样。整个加样过程都是由自动化系统的液体处理机械臂(LiHa)上的单通道完成,通过多次洗液注液循环实现预热或预冷,避免加样针堵塞。加样初期通过机械臂的多次注液将预热琼脂(55℃左右)加入提前预热的96孔板内,这样可以将琼脂冷却的可能性降到最低点,从而减少琼脂的用量,降低实验成本。随后,微孔板在载板架上经室温冷却15-20分钟,使得琼脂在加入Matrigel前得以凝固。 采用这种解决方案后,能在短短90分钟内完成6块微孔板的加样制备,而传统手工处理一天仅能完成3-4块微孔板的加样,两者形成鲜明对比。制备好的微孔板质量在使用自动化加样技术后也有了很大提升,避免了人工制板常出现的批对批、板对板、甚至孔对孔的误差问题。William总结道:&ldquo 这种高度一致性对药物筛选来说至关重要,高质量的实验结果数据有助于我们加快药物研发进程,Freedom EVO自动化平台独具的灵活性使得这一切能够轻松实现!&rdquo 更多关于Tecan Freedom EVO液体处理工作站的信息请访问以下网站或询问当地Tecan员工/经销商:www.tecan.com/freedomevo 更多关于阿斯利康中国创新研究中心的信息,请访问以下网站:en.astrazeneca.com.cn BD和Matrigel是美国BD公司(Becton, Dickinson and Company)的注册商标。Corining是美国康宁公司(Corining)的注册商标。关于帝肯: 瑞士帝肯www.tecan.com是全球领先的生命科学与生物制药、法医和临床诊断领域自动化及解决方案供应商。公司成立于1980年,总部设在瑞士Mä nnedorf,分别在瑞士、北美和奥地利设有自己的研发和生产基地,目前公司主要经营的产品有三大类:全自动化液体处理平台( Liquid Handling&Robotics )、多功能酶标仪(Multimode Reader)和OEM组件;销售服务网络遍布世界52个国家,客户覆盖制药企业、生物技术公司、科研院所、法医、医院、血站系统和疾病控制中心(CDC)等。其液体处理技术已拥有行业经验30年,在全球处于领先地位,备受世界领先生命科学实验室的青睐。 帝肯(上海)贸易有限公司是瑞士帝肯集团公司亚太区总部,2008年4月成立于上海浦东。帝肯(上海)目前拥有一支专业的售前和售后服务团队,在科研、医院、血站和CDC领域构建了良好的经销网络,并以&ldquo 力求比客户期望做得更好&rdquo 的服务理念,给广大终端用户提供专业的服务。 欲知更多详情,请联系帝肯上海市场部:Libby ZhuTel: 021 2206 3206 / 010 8511 7823Fax: 021 2206 5260 / 010 8511 8461helpdesk-cn@tecan.com www.tecan.com
  • 采用精益实验室做法检测制药用水
    多年来,由于需要等待QC结果,制药用水的放行一直面临着风险。这是因为制药用水检测既费时又费力,需要分析人员从水回路中分离样本进行实验室评估,而微生物限度等检测要等几天时间才能知道结果。即使药典检测无需等待数日——如内毒素、总有机碳(TOC)和电导率,但在效率和减少人为误差方面仍有许多不足之处。等待检测结果可能会迫使人们选择冒险放行制药用水或推迟生产,这两者都可能付出高昂代价。制药企业需要更简单、更高效的分析检测解决方案来对制药用水检测进行精益管理并提高过程效率。随着过程分析技术(PAT)以及创新的仪器和软件的引入,精益实验室现在变得触手可及。药典制药用水检测和PAT药典制药用水检测要求检测四个参数:电导率、TOC、内毒素和微生物限度。控制这四个参数可确保制药所有领域用水的纯度。最近,已经开发了一些技术来更好地支持和简化制药生产用水的放行,并提高PAT的采用率,以提高效率。例如,用于TOC和电导率的实时放行检测(RTRT,Real-time Release Testing)、用于细菌内毒素检测(BET,Bacterial Endotoxins Testing)的微流体技术以及用于微生物限度检测的快速微生物方法(RMMs,Rapid Microbiological Methods),都可以用于对QC实验室流程进行精简并减少与水质检测相关的人为干扰。通过采用精益实验室做法/PAT,制药企业可从流程效率的提高、产品上市速度的加快、分析人员工作量的减少以及最大化可持续发展中获益,同时又能保持数据可靠性和合规性。TOC、电导率、内毒素和微生物限度检测实验室、旁线和在线检测如果您正在寻找切实可行的步骤来精简制药用水检测过程,就需要考虑检测的方方面面,如:样品处理、仪器能力、数据审查、过程和可持续性。基于目前的可用技术,精益实验室可采用实验室检测、旁线检测或在线检测,每种检测方法都有自己的优缺点。表1_优点缺点实验室检测&bull 标准过程&bull 成本低&bull 灵活&bull 由专家基于数据做出决策&bull 样品完整性&bull 延迟批次放行&bull 重复审查/批准&bull 样品与其它QC检测一起排队等待 旁线检测&bull 降低初始成本&bull 灵活性高&bull 仪器专用&bull 样品处理量(比实验室检测少)&bull 必须传输数据在线检测&bull 全自动化&bull 数据集成&bull 样品完整性&bull 过程控制&bull 减少人为因素&bull 初始成本较高&bull 灵活性低实验室样品检测的缺点是可能会引入污染物,延迟生产用水的放行,有条件的放行可能会带来风险。实验室检测的替代方法包括旁线检测和在线检测。如果经过适当验证,可将在线检测用于实时放行检测(RTRT),即采用经过验证的在线记录仪表对生产用水实时放行。RTRT维持一个闭环系统,通过消除人为因素来确保过程和样品的完整性。正如您想象的那样,从实验室检测向旁线检测和在线检测过渡,能够降低制药用水检测所需的劳动力和耗材。从长远来看,可以通过更少的资源和材料来节省时间和金钱,并优化效率。TOC与电导率 最常用的方法是在实验室使用TOC分析仪和电导率探头进行TOC和电导率测量。这需要从不同的使用点分离样本,以便在实验室进行分析。分离样品、将样品转移到实验室并进行分析这一系列过程不仅劳动强度大,成本高,而且还会引入污染物,导致检测结果假性合格或不合格(OOS)。为了减少对电导率和TOC进行常规取样和分析,许多最终用户正在向RTRT过渡。对于电导率和TOC分析,有三种情况可以使用在线仪表:(1)用于过程/药典监测;(2)用于过程控制和理解;(3)用于药典监测、放行、过程控制和理解。RTRT涉及在所有三种情况中使用在线仪表,并允许实时监测和放行制药级用水用于生产。这需要进行额外验证,从而在根本上提高在这三种情况中使用在线仪表的信心。内毒素如何精简内毒素检测的实验室分析?目前为止,在过去的40年中鲎试剂检测几乎没有创新,并且现今大多数检测仍采用耗时的传统方法。而现在,有了更好的新方法。采用向心微流体平台的自动化分析能够提供最简单的内毒素自动化检测,节省大量时间并减少出错机会。随着这项技术在Sievers Eclipse内毒素检测仪中的引入,内毒素分析实现了自动化,同时完全符合药典要求。微流体检测的好处&bull 5-10分钟设置时间&bull 与96孔微孔板相比,移液步骤减少了89%(从242减少至不到30),提高了员工的可持续性&bull 与传统方法相比,培训大大降低&bull 鲎试剂用量减少90%&bull 自动创建与加载标准曲线&bull 自动创建与加载阳性产品对照(PPC)与传统96孔微孔板一样,微流体系统能够使您开展相同的生物化学反应,但人工工作量更小,一致性更高,试剂消耗更少。预加载的标准品和PPC用于自动形成标准曲线和PPC峰值,为您节省大量时间,减少移液步骤和出错机会。通过引入微流体技术,您还可以降低冷藏室存储量并降低实验室占地面积。Eclipse微孔板可以在室温下存储,因此无需在2-8℃冰箱中占用额外空间。Eclipse分析仪比典型96孔微孔板读数器或机器人系统更小且更加紧凑,这样就可以提供更多的桌面空间。Eclipse内毒素检测软件还允许设置客户端服务器,因此可以远程审查和签署内毒素数据,最大限度减少亲临实验室的需要。微生物限度自19世纪晚期琼脂开始被用作生长培养基以来,微生物的生长和计数基本上没有发生变化。由于其可靠性和准确性,微生物限度检测历来依赖琼脂平板对制药用水中的微生物进行量化。尽管采用药典规定的微孔板计数来确定活微生物是可靠的,但其耗时耗力,通常需要至少两名分析人员。超纯制药用水的微生物限度检测需要繁殖培养数日才能用琼脂平板读取。通常人工记录结果,这为数据可靠性缺口留下了机会。由于精确的平板计数需要时间,在微生物限度结果出来之前,大多数制药用水在被放行时具备风险。为了降低风险和减少微生物限度检测的时间,快速微生物方法(RMM)正在微生物限度行业兴起。与药典平板计数相比,RMM能够更快地提供生物学结果。RMM可以在不到一个小时内返回结果。通过在实验室中引入RMM,您可以通过以下方式改进您的流程:&bull 缩短返回结果的时间&bull 降低污染事件的风险&bull 在每个阶段监控流程&bull 对水的放行更具有信心结论制药用水检测不必如此耗时和困难。随着实验室实施PAT并朝着更精简的流程发展,药典检测可以得到优化和简化,而不会对法规要求造成影响。向精益实验室过渡的重要转变包括:采用PAT技术、减少人为因素和出错机会以及采用更高效的工作方法——实验室检测、旁线检测或在线检测。当采用合适的工具并提供有效的支持时,简化实验室流程并转向实时放行检测很容易实现,将为您节省大量的时间和资源。*原文英文版刊登于《American Pharmaceutical Review》2022年9/10月刊,作者:Briana Nunez、Hayden Skalski、Kaitlyn Vap,本文有所修改。◆ ◆ ◆联系我们,了解更多!
  • 一小时挑取1000株菌?ROTOR/PIXL组合引领实验室自动化操作的变革!
    莱茵衣藻作为单细胞真核绿藻,具有生长周期短,实验操作简便,只具有一个较大的叶绿体,易获得各种突变体等优点,是国际上用于研究植物细胞分子生物学和光合作用遗传的理想模式材料。莱茵衣藻的遗传转化为获得大量突变体,并分离导致突变的基因以及研究其功能等提供了很有效的手段。 近日,Kyle Lauersen教授领导的阿卜杜拉国王科技大学(KAUST)生物与环境科学学院(BESE)合成生物学组(SSB)开展了一项通过基因工程和过程设计,开发资源高效的生物工艺。 在整个实验研究中,SINGER的高通量菌落筛选工作站ROTOR和高精度菌落挑取工作站PIXL发挥着至关重要的作用。 Kyle教授的实验室致力于合成生物学在光合生物中的应用,其主要工作对象是一种细胞壁缺陷的绿色真核藻类——莱茵衣藻。绿藻是通过光合作用生长的神奇生物,这意味着它们利用(太阳光)作为能量,并捕获二氧化碳作为碳源。 通过将植物和真菌等其他生物的途径引入藻类,可以定制藻类的新陈代谢,从而产生非天然化合物。一旦引入成功,这些途径就会改变天然代谢途径,全部从二氧化碳产生感兴趣的产物。 尽管自20世纪40年代以来,这种绿藻一直在实验室里培育,但它有着复杂的基因。自2015年以来,Kyle团队就已经知道如何利用生物体的天然基因调节机制可靠地表达其核基因组中的转基因。然而,改造藻类是一个数字游戏,因为DNA随机地整合到基因组中,导致整个转化细胞群体的一系列表达,所以需要筛选成百上千个转化株来寻找符合要求的目标株。 原始的工作流程是用牙签手工挑取转化的菌落。可以想象,这是一个非常乏味的过程,当有20种不同的质粒要尝试时,研究组的每个学生手动挑选成百上千个菌落,可能需要连续多天不停的工作。 高精度菌落挑取工作站PIXL直接将通量提高了8倍以上。除此之外,由机器人点种的标准化菌落阵列在质量和可重复性上都远远优于手工操作,机器比人工可以在单位面积上接种更多的菌落,因此可以在相同的面积上得到更多的菌落,这样能够减少培养基的使用。手工做的最大限度是每个13×13厘米平板接种144个菌落,而PIXL可以轻松地把384个菌落接种在小矩形板上,1000多个菌落只需一小时就能完成!! 藻类菌落不是通过简单的冷冻来储存的,而是把文库保存在琼脂板上,每两周或每个月转接一次。高通量菌落筛选工作站ROTOR可以快速、无菌、可靠的在琼脂间转接和保存菌落。 这项实验的另一个流程是使用PCR板作为背景,将菌落从一个琼脂板转移到另一个琼脂板,这显然有其局限性,一方面是有可能人为失误,另一方面是单次只能转移96个菌落。而ROTOR消除了转接过程中所有的人工误差,同时可以实现更高密度的菌落转移,也可以用长针快速接种至96/384孔液体平板。标准化还使我们能够加快分析琼脂平板上的菌落特征。 Kyle团队的实验取得了阶段性的成果,也对这两款仪器的评价很高。Kyle说:“ROTOR和PIXL已经在实验室里运行了6个月,它们的组合,在通量和重现性方面将引领实验室自动化操作的变革。”
  • 恒奥科技-热烈庆祝天津恒奥科技多点接种仪获得国家专利
    热烈庆祝恒奥科技新品多点接种仪获得国家专利购买恒奥产品必要性1.市售相似产品只能进行一种样品的加样工作,其他两种需要停止机器更换试管后再次启动机器来完成,时间较长且需要实验人员看管进行试验。我公司产品可进行肉汤、药液和菌液同时加样并自动对药物进行倍比稀释,使三个步骤一体化,时间短速度快,无需实验人员看管。2.市售相似产品一次性更换96个枪头,成本高,我公司实验过程中一种样品更换一次枪头即可,降低实验成本。3.市售相似产品都是培养前需要采用另一种仪器进行振荡混合,我公司产品可进行在线混合,并且混合次数可调,混合效果好于振荡混合方式效果,并且提高实验效率,降低实验成本。4.市售相似产品一般最大量在200μL,步进量为50μL,我公司产品取样量范围宽50-300μL,步进量5μL,取样量更精准。5.具有附加功能,可作为取样器单独使用。国家专利号2013208071921.8 HMI-96A仪器介绍 我公司自主研发的HMI-96A多点种仪为细菌耐药性实验-肉汤稀释法专用仪器,可以在6min左右完成一个96孔板的接种工作,打破了试管肉汤稀释法的繁琐过程。采用机械臂双轨道传动进行移液体取样,包括药物、肉汤和菌液。独特的专利机构设计可以自动完成移液枪头的退掉和更换。具有位置掉电记忆功能可记忆上次移液枪头的位置。进口高精度移液取样系统使所取样体积更精准,接种过程简单、快速,准确。技术参数通道数:8通道 移液体积:50- 300μL增减步进体积:5μL混合次数:0-10次加样位置选择:1-12移液精度:±1 %(50 - 300μL)外形尺寸:560 x 441 x 402mm功率:1 0 0 W适用孔板类型:96孔 细胞培养板重量:12 Kg国家专利号 2013208071921.8HMI-60购买恒奥产品必要性1.市售产品接种速度多为旋钮调节,会产生时间误差,调节起来比较麻烦。 我公司产品接种速度快,按键式速度调节,9s或13s两档任选,方便简单 。 2.市售产品多为60位,我公司产品标配24位和60为,增加大了实验范围,节省实验成本。3.市售产品需要人工对琼脂板和96孔板的位置完成接种过程,我公司产品独特的可调速旋转式样品托盘可实现自动定位,细胞培养板无需手动移动,只需要更换样品培养皿即可完成连续接种,极大的缩短了操作时间,满足了实验室自动化的要求。4.市售产品当实验出现问题无法恢复初始状态,我公司产品在实验过程发生混乱时,可按复位键恢复最初设置5.市售产品多为一个开关,生物实验中如果进行暂停手指碰到开关可能会污染样品,或者需要重新消毒,我公司配备脚踏开关:可连接脚踏开关控制机器的运转和暂停。仪器介绍我公司自主研发的HMI-60多点种仪为细菌耐药性实验-琼脂稀释法专用仪器,可以在9秒钟内自动进行并完成接种,打破了传统人工接种模式,采用机械接种,使接种过程简单、快速,准确。 技术参数名称参数接种时间(s)9或13仪器重量(kg)12功率(w)120外形尺寸(mm)335×250×415接种菌液量(μL)3(24位)或1(60位和96位)接种培养皿(mm)90电源(v)220接种针直径24位3mm、60位和96位1.6mm采购指南HMI-96A多点接种仪主要应用于药敏试验方法-稀释法中的琼脂稀释法,实验基本过程是将不同浓度的药物与琼脂混匀制成不同药物浓度的琼脂板,将不同的菌种接种再上面,期间需要人工更换琼脂板。考察同一药物对不同菌种的MIC值。应用于测试大多数厌氧病原菌。HMI-96A多点接种仪主要应用于药敏试验方法-稀释法中的肉汤稀释法将不同菌种直接接种到含不同药物浓度的96孔板中后进行培养。应用于测定脆弱拟杆菌菌群的病原菌。客户可根据实验方法不同进行选择。应用领域主要用于细菌耐药性实验。广泛应用于药物检测,药品生产、药物研发等医药领域。应用单位 医院药理中心 医院微生物检验科药效筛查 医院感染科及呼吸科药效筛查 医院药代监测及研究(血药、尿药) 食品药品安全监督监测管理 药检所新药评审 疾控中心药效监测及研究 兽药监察药效评审 大学制药工程药效研究 大学药学院药效研究
  • Protein A材质对生物分离传化的影响 ,微球精准制造技术应运而生
    早前,江必旺博士分享了《浅谈令人“爱恨交加”的Protein A亲和层析介质》、《盘点Protein A亲和填料质控必看的重要参数》,本期带大家了解Protein A 亲和层析介质的制备过程中需要考虑的那些影响因素以及纳微科技带来的创新成果,也欢迎大家在评论区留言讨论。纯化后的Protein A配基可以通过其分子上的氨基或末端的巯基与微球上的功能基团偶联制备成Protein A 层析介质。Protein A层析介质的性能与其本身的配基性能,基球材料组成,基球孔径大小,孔容积及表面功能化等都有关系。为了高效率把目标生物分子从复杂样品里分离出来,并保持其生物活性,用于分离纯化的层析介质材料必须满足苛刻的要求如介质材料组成、形貌、粒径大小、粒径分布、孔径大小和分布、功能基团、及表面亲水性能等。 Protein A材质的影响 目前Protein A 亲和层析介质基球主要由两大类材料组成:第一类是以琼脂糖,葡聚糖为代表的多糖层析介质;第二类是以聚丙烯酸酯和聚丙烯酰胺为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强,生物兼容性好,能减少对生物分子的非特异性吸附等特点,因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构,因此多糖介质表面积大,容易做成高载量的介质。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久,最广泛的亲和层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶,其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等,另外软胶在干燥状态下脱水容易导致孔道结构塌陷从而失去分离性能,因此,软胶填充的层析柱床一般不能脱水。相反,合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高,化学稳定性好等特点,因此可以耐受更大的压力、更快的流速,从而提高分离效率,虽然其在市场应用的晚但其市场增速最快。另外合成高分子微球粒径大小,粒径均匀性更容易控制,使得合成高分子介质更容易装柱,柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀,分子进不去,因此其表面积比琼脂糖基质的小,但孔径通透性更好,因此分子传质速度快,在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大,导致非特异性吸附大,容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点,但它们的目标都是一致的,都是往高载量、高机械强度,高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质,交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度,而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。 介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响 除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外,孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质最重要参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果,层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素之一,可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上,而内孔表面积主要由孔径大小,孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大,但如果孔径太小,目标生物分子进不去,这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大,比表面积也会降低,因此对于不同分子量大小的生物分子,有个最优的孔径大小,其可及表面积最大,分离效果最好。比如说用于抗生素这类分子量小的生物分子,孔径一般选择小于30纳米以下,而对于抗体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右,而对于病毒这种大尺寸的生物,需要400纳米以上超大孔的介质。另外孔隙率越大,比表面积越大,载量也会越大,同时机械强度越差,因此选择孔隙率也需要平衡机械强度和载量的要求 Protein A 配基的影响 Protein A 亲和层析分离是基于Protein A 配基与抗体的特异性结合。天然Protein A 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系,它含有5个可以和抗体IgG 分子Fc 段特异性结合的结构域。由于天然的Protein A 配基耐碱性差,为了提高Protein A 耐碱性,延长其使用寿命,因此现在市场上使用的Protein A都是经过天然Protein A序列改造过的重组蛋白。每家重组蛋白A的序列不同,亲和力不同,洗脱pH 条件不同,耐碱性能不同。Protein A 配基对抗体纯度,回收率等有重要影响。 粒径大小和粒径均匀性的影响 粒径大小和均匀性不仅影响柱效,分离效率,对Protein A 载量影响也很大。粒径越小,分子传递路径越短,Protein A 与抗体结合的效率越高,载量就越大,比如说以琼脂糖为基质的Protein A 介质,如果粒径是90微米,载量只有50毫克/毫升,如果粒径减小到50微米,载量可高达90毫克/毫升,因此粒径与载量成反比,但粒径越小,反压越大,因此选择粒径大小需要考虑压力和载量。另外粒径越均一,其洗脱越集中。粒径分布均匀,形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好,流动相在柱床中的流速均匀,流动相经过柱床的路径长短一致,从而有效降低涡流扩散系数,使色谱峰宽变窄,理论塔板数升高。纳微十多年坚持不懈的研究开发出世界领先的微球精准制造技术,该技术可以对微球的材料组成、粒径大小、粒径均匀性、孔径大小及表面性能达到前所未有的精准控制。纳微利用这一技术平台开发出新一代单分散多孔聚丙烯酸酯为基质的Protein A 亲和层析介质克服了传统Protein A 软胶的缺点。纳微Protein A 介质创新点主要有以下几点:首先,纳微Protein A 介质具有精准的粒径大小和高度的粒径均一性,使其具有流速均匀、洗脱集中、流动相用量少而且装柱容易、柱效高、柱床稳定、压力低、柱与柱重复性好等优点;图4 纳微单分散Protein A介质与传统软胶基质微观结构对比图5 传统多分散Protein A亲和软胶与UniMab液流路径对比示意图第二,纳微Protein A 基球经过优化筛选专门设计的大孔结构,其孔径远大于GE Protein A 产品。因此该介质具有蛋白传质速度快,使得介质在高流速下具有高载量。从实验测试数据可以看到,纳微UniMab与GE MabSelectSuRe在驻留时间大于4分钟时,载量都差不多,当驻留时间小于2分钟时UniMab的载量高于MabSelectSuRe载量50%以上, 而且速度越快UniMab载量优势越明显。抗体生产效率是由载量和流速共同决定,但流速越快载量越低,因此对于每个亲和层析来说有个最优的流速。实验证明对于批次亲和层析,驻留时间是2分钟时生产效率达到最高,对于连续层析驻留时间是1分钟时生产效率最高;图6 UniMab与MabSelectSuRe产品不同驻留时间动态载量对比图7 不同Protein A 层析介质驻留时间与抗体生产效率与关系对比从抗体流穿曲线对比图也可以看出具有大孔结构及高度粒径均匀性的单分散Protein A亲和层析介质与进口软胶相比具有更陡的穿透曲线,说明纳微单分散层析介质具有更畅通的孔道结构,分子在介质里扩散速度快。抗体流穿少,回收率高。图8 抗体流穿曲线对比图第三,纳微Protein A 基球是高度交联的聚丙烯酸酯组成,与市场上软胶或低交联度聚丙烯酸酯为基质的Protein A 介质相比具有溶胀系数小,压缩比例低,而且具有优异机械性能,可以承受更高流速条件产生的压力,并装更高的柱床,有利于增加抗体批处理量,提高抗体生产效率,减少设备投资。UniMab在2公斤压缩比例只有5%,而市场上Protein A 介质压缩比例往往超过15%。图9 UniMab与软胶与压力流速曲线对比第四,纳微用于Protein A 介质的基球是通过多步表面亲水化改性,因此表面亲水性能好,非特异性吸附低,在抗体分离过程中,HCP去除效果好。一般来说聚合物基质的Protein A 因为亲水性问题,HCP 去除效果往往比软胶差,但UniMab可以达到软胶Protein A 的同等水平。图10 纳微UniMab与对照填料的HCP去除效果第五,除了创新基球外,纳微又经过多年的努力通过优化组合不同片段的Protein A 设计出有自主知识产权的耐碱性Protein A 配基,并实现大规模生产。最后通过优化偶联工艺成功地生产出世界首个单分散Protein A 亲和介质产品,不仅实现该产品的国产化,而且克服了现有市场上Protein A 介质的主要缺陷。纳微单分散Protein A 介质不仅可以提高抗体的生产效率,降低抗体的生产成本,更是下一代连续层析理想的介质。亲和层析分离条件影响ProteinA亲和条件相对简单,无需繁琐参数优化。平衡阶段,盐浓度及pH是两个重要参数。由于ProteinA与抗体分子核心区域主要作用力依靠组氨酸疏水性介导,所以增加平衡盐浓度一般可增加3-5mg载量。pH则通常控制在6-7.5,若低于5.0以下,可能会降低动态结合载量,从而降低了回收率。上样后清洗是去除结合于填料的宿主蛋白(HCP)及核酸(DNA)等杂质的主要过程。清洗pH较为关键,在抗体分子未清洗掉的前提下,选择尽可能低的pH作为清洗条件,以去除更多的HCP等杂质。若常规pH条件无法奏效,可以加入高盐(1M氯化钠)或添加剂如精氨酸、吐温80、尿素及异丙醇等。pH是洗脱过程中最关键工艺参数,在确保回收率的前提下,尽可能选择更高的pH进行洗脱。较低pH会导致洗脱的抗体浓度过高,产生更多的聚集体。另外,洗脱buffer类型也会对洗脱浓度及杂质含量有影响,如相同pH的柠檬酸洗脱强度高于醋酸。表4 不同Buffer洗脱液效果比较缓冲液洗脱体积(ml)洗脱浓度(mg/ml)收率(%)HCP(ppm)洗脱液20mM HAc pH3.546.591.5129洗脱液20mM Gly pH3.563.880.3167洗脱液20mM Citric pH3.53.77.395.186另外,洗脱液加入精氨酸、氯化钠、聚乙二醇、尿素、组氨酸、咪唑等皆有助于减缓低pH的破坏作用,提高洗脱液纯度。下图是UniMab50纯化过程中在淋洗及洗脱步骤加入了1%聚乙二醇PEG3350,SEC纯度提示PEG可显著降低聚集体含量。
  • 生物试剂的分类
    ELISA试剂盒生物试剂涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 (1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。ELISA试剂盒(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。 除了上述四个级别外,ELISA试剂盒目前市场上尚有:基准试剂(PT:Primary Reagent):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。光谱纯试剂(SP:Spectrum pure):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。玉米粉琼脂 Corn Meat Medium 250 用于真菌培养沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar250用于真菌检测(GB标准)沙氏BHI琼脂Sabouraud BHI Agar250用于真菌检测(Acumedia 方法)沙门氏菌显色培养基Salmonella Chromogenic Medium1000ml用于沙门氏菌的显色培养三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar250生化培养基,用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(GB、SN标准)噻孢霉素 A1.25μg/支*5添加于100ml HB0121中乳糖肉汤 Lactose Broth250用于食品中沙门氏菌检验前增菌乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂LMG Agar250用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)乳糖复发酵培养基 Lactose Broth250用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth250用于饮用水,水源水中总大肠菌群的测定(GB标准)乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth250用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar250用于大肠杆菌固体平板测定,肠道菌选择性分离庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar250用于霍乱弧菌选择性分离培养茜素-β-半乳糖苷琼脂Aliz-gal Agar250用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)普通肉汤培养基 Broth Medium250用于金黄色葡萄球菌的增菌培养(SN标准)葡萄糖胰蛋白胨琼脂Glucose Tryptone Agar250用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)葡萄糖琼脂Dextrose Agar250用于细菌的综合生化试验葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium250用于志贺氏菌的复合生化试验(GB标准)葡萄糖铵培养基  Ammonium Dextrose Medium250用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验(GB标准)葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth250用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌葡萄球菌选择性琼脂110(CHAPMAN 琼脂)Staphylococcus Selective Agar NO.110 250用于金黄色葡萄球菌的分离培养
  • 微生物培养基使用中常出现的问题及解答!
    微生物培养基使用中常出现的问题及解答!百欧博伟生物:工作中发现,有部分检验员对培养基的使用存在障碍,借此机会和大家分享讨论一下大家常见的对培养基存在的一些疑问。一、培养基煮沸溶解后再高压灭菌,还是直接高压灭菌存在疑惑。拿麦康凯琼脂举个例子,溶解后灭菌,平板上没有不溶的结晶紫,没有紫色的斑点;相对比未溶解灭菌的,平板上有结晶紫和紫色的斑点。所以正确的做法是先煮沸溶解后再高压灭菌。二、培养基PH值为什么不在标准范围内?其实出现这个情况的问题有很多种,大致我分为这么6大点:1、质量不好(生产厂家出厂时pH就不正确);2、灭菌问题(高压灭菌温度过高或灭菌时间过长,导致葡萄糖类焦化从而pH降低);3、保存时间(超过保质期或结块);4、水质出现问题(可以用去离子水、纯化水、蒸馏水不能用矿泉水、自来水);5、保存温度(保存温度过高);6、光线直射总结本人认为以上6点都可能导致培养基pH出现偏差,如果出现此类问题,建议逐一排查,直到问题解决。三、培养基高压灭菌时为什么会焦化?不少检验人员在实验时,发现经过灭菌的培养基有焦化现象,我认为引起此现象的主要原因有以下4点:1、可能你灭菌的时候温度超过了121℃(正常115-116℃20min即可);2、灭菌时间过长;3、培养基在容器中装的太多(不要超过容器容量的80%);4、灭完菌的培养基在高温环境中保存的时间过长,这些都会导致培养基发生焦化现象。四、培养基PH怎么测定?通常分两种情况:1、对于无需高压灭菌的培养基,先煮沸溶解后再冷却至25℃时,测定其pH值(固体培养基至少测2个点,取其平均值);2、对于需要高压灭菌的培养基,高压灭菌后,冷却至25℃测其pH(固体培养基至少测2个点,取其平均值)。五、含琼脂培养基在倒平板为什么有时候不凝固或凝固不好?针对以上情况,我做了分析:1、针对需要高压灭菌的培养基,倒平板时候要先摇匀(因为琼脂分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底部,导致琼脂分散不均匀);2、针对无需高压灭菌的培养基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,应重复煮沸溶解3-5次(因为一次不能确保琼脂完全溶解)。六、为什么同一品牌的不同批号,粉末颜色有差别?分析可能有3个原因:1、此培养基成分含有染料或指示剂;2、不同批次粉末培养基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,颜色越深;3、加工时球磨时间越长颜色越深。北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!
  • 琼海市疾病预防控制中心49.50万元采购ATP
    基本信息 关键内容: ATP 开标时间: 2021-07-28 10:00 采购金额: 49.50万元 采购单位: 琼海市疾病预防控制中心 采购联系人: 庞女士 采购联系方式: 立即查看 招标代理机构: 海南众诚项目管理有限公司 代理联系人: 蔡工 代理联系方式: 立即查看 详细信息 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 海南省-琼海市 状态:公告 更新时间: 2021-07-19 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 2021年07月19日 15:44 公告信息: 采购项目名称 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 品目 货物/医药品/医用材料/其他医用材料 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 行政区域 琼海市 公告时间 2021年07月19日 15:44 获取采购文件的地点 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 获取采购文件时间 2021年07月20日至2021年07月22日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:30 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 预算金额 ¥49.499600万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 蔡工 项目联系电话 0898-32871883 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 采购单位地址 琼海市富海路横南17号 采购单位联系方式 庞女士 0898-62922152 代理机构名称 海南众诚项目管理有限公司 代理机构地址 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 代理机构联系方式 蔡工 0898-32871883 项目概况 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购项目的潜在供应商应在海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房获取采购文件,并于2021年07月28日 10点00分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:HNZC2021-006 项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购方式:竞争性谈判 预算金额:49.4996000 万元(人民币) 最高限价(如有):49.4996000 万元(人民币) 采购需求: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 合同履行期限:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 3.本项目的特定资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 三、获取采购文件 时间:2021年07月20日 至 2021年07月22日,每天上午9:00至12:00,下午14:30至17:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 方式:携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 售价:¥300.0 元(人民币) 四、响应文件提交 截止时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 五、开启 时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 谈判邀请 海南众诚项目管理有限公司受琼海市疾病预防控制中心委托,就实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目采购进行竞争性谈判采购,欢迎合格的供应商前来谈判。 项目编号:HNZC2021-006 招标项目及范围: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 3. 供应商资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 竞争性谈判文件的获取: 4.1获取竞争性谈判文件的时间:2021年 7 月 20 日 09:00 至 2021年 7 月 22 日17:00 (双休日及法定节假日除外) 4.2获取竞争性谈判文件地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。获取竞争性谈判文件方式: 携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 4.3获取竞争性谈判文件文件售价:300.00元 响应文件的递交 5.1竞争性谈判时间:2021年 7 月 28 日 10:00 5.2竞争性谈判响应文件递交截止时间:2021年 7 月 28 日 10:00 5.3竞争性谈判响应文件递交地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。竞争性谈判响应文件开启时间:2021年 7 月 28 日 10:00 竞争性谈判响应文件开启地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 其他 7.1公告发布媒介:公告、采购文件修改或澄清等信息,中国政府采购网(http://www.ccgp.gov.cn/)上发布。 7.2采购项目需要落实的政府采购政策:《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 7.3本公告期限为3个工作日。 联系方式 8.1采购人:琼海市疾病预防控制中心 采购人机构所在地点:琼海市富海路横南17号 联系人:庞女士 联系电话: 0898-62922152 8.2代理机构:海南众诚项目管理有限公司 地址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 项目联系人:蔡工 联系电话:0898-32871883 传 真:0898-32871883 8.3接收质疑函的联系部门、联系电话和通讯地址: 联系部门:项目部 联系电话:0898-32871883 通讯地址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:琼海市疾病预防控制中心 地址:琼海市富海路横南17号 联系方式:庞女士 0898-62922152 2.采购代理机构信息 名 称:海南众诚项目管理有限公司 地 址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 联系方式:蔡工 0898-32871883 3.项目联系方式 项目联系人:蔡工 电 话: 0898-32871883 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容:ATP 开标时间:2021-07-28 10:00 预算金额:49.50万元 采购单位:琼海市疾病预防控制中心 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:海南众诚项目管理有限公司 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 海南省-琼海市 状态:公告 更新时间: 2021-07-19 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 2021年07月19日 15:44 公告信息: 采购项目名称 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 品目 货物/医药品/医用材料/其他医用材料 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 行政区域 琼海市 公告时间 2021年07月19日 15:44 获取采购文件的地点 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 获取采购文件时间 2021年07月20日至2021年07月22日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:30 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 预算金额 ¥49.499600万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 蔡工 项目联系电话 0898-32871883 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 采购单位地址 琼海市富海路横南17号 采购单位联系方式 庞女士 0898-62922152 代理机构名称 海南众诚项目管理有限公司 代理机构地址 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 代理机构联系方式 蔡工 0898-32871883 项目概况 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购项目的潜在供应商应在海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房获取采购文件,并于2021年07月28日 10点00分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:HNZC2021-006 项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购方式:竞争性谈判 预算金额:49.4996000 万元(人民币) 最高限价(如有):49.4996000 万元(人民币) 采购需求: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 合同履行期限:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 3.本项目的特定资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 三、获取采购文件 时间:2021年07月20日 至 2021年07月22日,每天上午9:00至12:00,下午14:30至17:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 方式:携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 售价:¥300.0 元(人民币) 四、响应文件提交 截止时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 五、开启 时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 谈判邀请 海南众诚项目管理有限公司受琼海市疾病预防控制中心委托,就实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目采购进行竞争性谈判采购,欢迎合格的供应商前来谈判。 项目编号:HNZC2021-006 招标项目及范围: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 3. 供应商资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 竞争性谈判文件的获取: 4.1获取竞争性谈判文件的时间:2021年 7 月 20 日 09:00 至 2021年 7 月 22 日17:00 (双休日及法定节假日除外) 4.2获取竞争性谈判文件地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。获取竞争性谈判文件方式: 携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 4.3获取竞争性谈判文件文件售价:300.00元 响应文件的递交 5.1竞争性谈判时间:2021年 7 月 28 日 10:00 5.2竞争性谈判响应文件递交截止时间:2021年 7 月 28 日 10:00 5.3竞争性谈判响应文件递交地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。竞争性谈判响应文件开启时间:2021年 7 月 28 日 10:00 竞争性谈判响应文件开启地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 其他 7.1公告发布媒介:公告、采购文件修改或澄清等信息,中国政府采购网(http://www.ccgp.gov.cn/)上发布。 7.2采购项目需要落实的政府采购政策:《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 7.3本公告期限为3个工作日。 联系方式 8.1采购人:琼海市疾病预防控制中心 采购人机构所在地点:琼海市富海路横南17号 联系人:庞女士 联系电话: 0898-62922152 8.2代理机构:海南众诚项目管理有限公司 地址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 项目联系人:蔡工 联系电话:0898-32871883 传 真:0898-32871883 8.3接收质疑函的联系部门、联系电话和通讯地址: 联系部门:项目部 联系电话:0898-32871883 通讯地址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:琼海市疾病预防控制中心 地址:琼海市富海路横南17号 联系方式:庞女士 0898-62922152 2.采购代理机构信息 名 称:海南众诚项目管理有限公司 地 址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 联系方式:蔡工 0898-32871883 3.项目联系方式 项目联系人:蔡工 电 话: 0898-32871883
  • 荧光定量PCR之RNA提取及质量评估
    分子生物学研究对提取RNA要求较高,纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法:常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法(Trizol法)、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强,尤其适合小样本及特别难提取的组织,如皮肤,动物结缔组织等总RNA的提取;另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂,还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法,电泳条带较为均一,但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合,在磁场作用下,磁珠-核酸复合物与液体分离,再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解,保证RNA质量?如何避免RNA降解?1.避免RNA酶的产生:A 、避免内源性RNAase:内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时,内源性RNA酶释放,降解RNA,降解速度与酶含量和温度有关,所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法:①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存;②立即切成小块投入液氮中保存;③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase:使用无RNase的塑料制品和枪头,玻璃器皿要消毒避免交叉污染,注意:戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套,在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率:A 、组织RNA提取:选用新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好;如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,待组织解冻后,用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,进行匀浆处理。注意:速度不要太快,要有间隙,否则由于摩擦产热,RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取,也要这样做,更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取:贴壁细胞,需要先用胰酶消化后,然后收集到离心管中,离心,去上清然后用PBS多洗2-3次,以去除多余的胰酶。悬浮细胞,直接用吸管或者加样枪吹打,以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清,不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测:RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度:OD260/280的值在1.9-2.1之间,认为RNA纯度较好;OD260/280的值小于1.8时,表明蛋白质杂质较多;OD260/280的值大于2.2时,表明RNA已经降解;注意:如果用TE溶液洗脱RNA,会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测:1)通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带,28s条带宽度为18s条带的两倍;2)通过色谱方法检测,RIN值:28s/18s为1.8-2.0,表明RNA完整性较好,基本无降解发生。RNA电泳带型的特征:☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍,其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现,出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失,没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染,而且是很大量的 DNA污染。参考文献:[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,配备高品质温度模块,采用光纤和CMOS的检测系统,高能LED的激发,提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统
  • 浮游菌采样器FKC-1全新上市
    2016年初,公司重新推出浮游菌采样器FKC-1,以稳定的采样量,精致的外形得到广大新老客户的一致好评。一. 原理介绍FKC-1型浮游空气尘菌采样器是一种高效的多孔吸入式尘菌采样器。它根据等速采样理论设计, 采样直接, 采集头口风速与洁净室内风速基本一致, 能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。采样时,带尘菌空气高速通过微孔,被均匀撞击在培养皿内的琼脂表面;这些活体微生物在琼脂表面获得营养均匀和充分,在培养过程中,快速发生动态再水化过程,高速生长,从而更快得出结果。 二. 使用环境1.温度:10—35℃2.相对湿度:10—90﹪RH3.大气压力:80—110kPa4.含尘浓度:100000000颗/ m3@0.5μm 或0.2mg/m35.风速:1m/s 三. 主要特征及参数1.采样头为无数微孔,使微生物均匀分布在琼脂表面,减少了尘菌重叠,降低了微生物计数误差。2.采样流量:100L/min3.采样头口流速:0.38m/s 与洁净室内风速基本相同(等速采样)。 4.采样量可从0.01—6.0m3任意设定。5.使用标准通用培养皿Φ90*15。6.电源:交直流两用,可充电电池DC7.4V,充好电后可连续工作4h。7.外形尺寸:Φ120*3008.重量:2.5kg 四. 结构特点说明1.采样器由上下两部分组成,上部为采样头、培养皿座、采样泵、采样泵座、采样泵电源。下部为控制板、存储器、LCD显示器、键盘、电池组件,见图。2.采样器可交直流两用,仪器的后下方有一开关和一插孔(见图),当直流使用时打开开关由电池供电;当交流使用时将随机配置的8.4V电源适配器插入上述插孔,当开关未打开时此时处于充电状态,当开关打开时,由8.4V电源适配器供电并维持充电状态。
  • 采用精益实验室做法检测制药用水——如何优化检测与放行?
    多年来,由于需要等待QC结果,制药用水的放行一直面临着风险。这是因为制药用水检测既费时又费力,需要分析人员从水回路中分离样本进行实验室评估,而微生物等检测要等几天时间才能知道结果。即使药典检测无需等待数日——如内毒素、总有机碳(TOC)和电导率,但在效率和减少人为误差方面仍有许多不足之处。等待检测结果可能会迫使人们选择冒险放行制药用水或推迟生产,这两者都可能付出高昂代价。制药企业需要更简单、更高效的分析检测解决方案来对制药用水检测进行精益管理并提高过程效率。随着过程分析技术(PAT)以及创新的仪器和软件的引入,精益实验室现在变得触手可及。药典制药用水检测和PAT药典制药用水检测要求检测四个参数:电导率、TOC、内毒素和微生物。控制这四个参数可确保制药所有领域用水的纯度。最近,已经开发了一些技术来更好地支持和简化制药生产用水的放行,并提高PAT的采用率,以提高效率。例如,用于TOC和电导率的实时放行检测(RTRT,Real-time Release Testing)、用于细菌内毒素检测(BET,Bacterial Endotoxins Testing)的微流体技术以及用于微生物检测的快速微生物方法(RMMs,Rapid Microbiological Methods),都可以用于对QC实验室流程进行精简并减少与水质检测相关的人为干扰。通过采用精益实验室做法/PAT,制药企业可从流程效率的提高、产品上市速度的加快、分析人员工作量的减少以及最大化可持续发展中获益,同时又能保持数据可靠性和合规性。TOC、电导率、内毒素和微生物检测 实验室、旁线和在线检测如果您正在寻找切实可行的步骤来精简制药用水检测过程,就需要考虑检测的方方面面,如:样品处理、仪器能力、数据审查、过程和可持续性。基于目前的可用技术,精益实验室可采用实验室检测、旁线检测或在线检测,每种检测方法都有自己的优缺点。表1:_优点缺点实验室检测标准过程成本低灵活由专家基于数据做出决策样品完整性延迟批次放行重复审查/批准样品与其它QC检测一起排队等待 旁线检测降低初始成本灵活性高仪器专用样品处理量(比实验室检测少)必须传输数据在线检测全自动化数据集成样品完整性过程控制减少人为因素初始成本较高灵活性低实验室样品检测的缺点是可能会引入污染物,延迟生产用水的放行,有条件的放行可能会带来风险。实验室检测的替代方法包括旁线检测和在线检测。如果经过适当验证,可将在线检测用于实时放行检测(RTRT),即采用经过验证的在线记录仪表对生产用水实时放行。RTRT维持一个闭环系统,通过消除人为因素来确保过程和样品的完整性。正如您想象的那样,从实验室检测向旁线检测和在线检测过渡,能够降低制药用水检测所需的劳动力和耗材。从长远来看,可以通过更少的资源和材料来节省时间和金钱,并优化效率。TOC与电导率最常用的方法是在实验室使用TOC分析仪和电导率探头进行TOC和电导率测量。这需要从不同的使用点分离样本,以便在实验室进行分析。分离样品、将样品转移到实验室并进行分析这一系列过程不仅劳动强度大、成本高,而且还会引入污染物,导致检测结果假性合格或不合格(OOS)。为了减少对电导率和TOC进行常规取样和分析,许多最终用户正在向RTRT过渡。对于电导率和TOC分析,有三种情况可以使用在线仪表:(1)用于过程/药典监测;(2)用于过程控制和理解;(3)用于药典监测、放行、过程控制和理解。RTRT涉及在所有三种情况中使用在线仪表,并允许实时监测和放行制药级用水用于生产。这需要进行额外验证,从而在根本上提高在这三种情况中使用在线仪表的信心。内毒素如何精简内毒素检测的实验室分析?目前为止,在过去的40年中鲎试剂检测几乎没有创新,并且现今大多数检测仍采用耗时的传统方法。而现在,有了更好的新方法。采用向心微流体平台的自动化分析能够提供最简单的内毒素自动化检测,节省大量时间并减少出错机会。随着这项技术在Sievers Eclipse月食细菌内毒素检测仪中的引入,内毒素分析实现了自动化,同时完全符合药典要求。微流体检测的好处:5-10分钟设置时间 与96孔微孔板相比,移液步骤减少了89%(从242减少至不到30),提高了员工的可持续性与传统方法相比,培训大大降低鲎试剂用量减少90%自动创建与加载标准曲线自动创建与加载阳性产品对照(PPC)与96孔板一样,微流体系统能够使您开展相同的生物化学反应,但人工工作量更小、一致性更高、试剂消耗更少。预加载的标准品和PPC用于自动形成标准曲线和PPC峰值,为您节省大量时间,减少移液步骤和出错机会。通过引入微流体技术,您还可以降低冷藏室存储量并降低实验室占地面积。Eclipse微孔板可以在室温下存储,因此无需在2-8℃冰箱中占用额外空间。Eclipse分析仪比96孔板读数器或机器人系统更小且更加紧凑,这样就可以提供更多的桌面空间。Eclipse内毒素检测软件还允许设置客户端服务器,因此可以远程审查和签署内毒素数据,最大限度减少亲临实验室的需要。微生物自19世纪晚期琼脂开始被用作生长培养基以来,微生物的生长和计数基本上没有发生变化。由于其可靠性和准确性,微生物检测历来依赖琼脂平板对制药用水中的微生物进行量化。尽管采用药典规定的微孔板计数来确定活微生物是可靠的,但其耗时耗力,通常需要至少两名分析人员。超纯制药用水的微生物检测需要繁殖培养数日才能用琼脂平板读取。通常人工记录结果,这为数据可靠性缺口留下了机会。由于精确的平板计数需要时间,在微生物结果出来之前,大多数制药用水在被放行时具备风险。为了降低风险和减少微生物检测的时间,快速微生物方法(RMM)正在微生物行业兴起。与药典平板计数相比,RMM能够更快地提供生物学结果。RMM可以在不到一个小时内返回结果。通过在实验室中引入RMM,您可以通过以下方式改进您的流程:缩短返回结果的时间降低污染事件的风险在每个阶段监控流程对水的放行更具有信心结论制药用水检测不必如此耗时和困难。随着实验室实施PAT并朝着更精简的流程发展,药典检测可以得到优化和简化,而不会对法规要求造成影响。向精益实验室过渡的重要转变包括:采用PAT技术、减少人为因素和出错机会以及采用更高效的工作方法——实验室检测、旁线检测或在线检测。当采用合适的工具并提供有效的支持时,简化实验室流程并转向实时放行检测很容易实现,将为您节省大量的时间和资源。原文英文版刊登于《American Pharmaceutical Review》2022年10月刊,本文有所修改。◆ ◆ ◆联系我们,了解更多!
  • 金坛亿通浮游菌微生物采样器在云南鲁甸地震灾区疫情防治中的应用
    2014年8月3日下午,云南鲁甸发生6.5级地震,全国人民全力在帮助灾区恢复生产和重建,但人员伤亡年。灾区的防疫也成为相关部门的重点,消毒和检测,已经成为工作重点。金坛亿通生产的EKC-1浮游菌微生物采样器是一种高效的多孔吸入式尘菌采样器。它根据等速采样理论设计, 采样直接, 采集头口风速与洁净室内风速基本一致, 能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。采样时,带尘菌空气高速通过微孔,被均匀撞击在培养皿内的琼脂表面;这些活体微生物在琼脂表面获得营养均匀和充分,在培养过程中,快速发生动态再水化过程,高速生长,从而更快得出结果 浮游菌微生物采样器设计合理,性能稳定,操作方便,其主要性能指标达到了国外同类仪器的先进水平。是药厂、医疗器械厂及其监测部门为贯彻GMP第十五条,对“洁净室(区)内空气的微生物数”进行“定期监测”的理想仪器。使用环境温度:10--35℃,相对湿度:10--90﹪RH,大气压力:80—110kPa,最大风速:1m/s,最大含尘浓度:100000000颗/ m3@0.5μm 或0.2mg/m3浮游菌微生物采样器用途:●室内空气质量 ●过滤器和洁净室的效率研究 ●药用产品●医院环境 ●食品加工厂 ●细菌生长浮游菌采样器参数:采样流量:100L/min。 定流量采样可从1~9999L任意设定。定时采样可从1~9999min,可任意设定使用标准通用培养皿Φ90*15采样头为无数微孔,使微生物均匀分布在琼脂表面,减少了尘菌重叠,降低了微生物计数误差。采样头口流速:0.38m/s 与洁净室内风速基本相同(等速采样)。电源:交直流两用,可充电电池DC7.4V, 充好电后可连续工作4h。浮游菌微生物采样器,微生物采样器,采样器,多孔吸入式尘菌采样器浮游菌微生物采样器配置:主机:一套撞击器:采样头一个 三脚架:一台操作手册:一份 连接管等专用附件:一套铝合金手提箱:一个 充电器 一只
  • 迅数科技受邀参加“日化行业产品检测新技术研讨会”
    中国仪器仪表行业协会于2012 年3 月在扬州召开了&ldquo 2012-全国日化行业产品检测新技术、新仪器应用&rdquo 研讨暨展示会。来自日化产品生产企业内质量检测、生产技术、设备采购等部门相关管理人员和测试技术人员,化妆品检验检测机构等相关人员共40余人参加了会议。中国领先的微生物检测技术与仪器供应商-杭州迅数科技有限公司应邀参会并做了题为&ldquo 全自动菌落分析仪在日化产品抗菌抑菌效果试验中的应用&rdquo 的技术报告,受到与会代表的欢迎和认可。 生长率试验应用:抗菌材料与细菌混合物样本,接种于营养琼脂固体培养基上,经培养后检查其表面生长的存活菌数,与未经抗菌材料作用的对照菌数相比较,计算出杀菌率。全自动菌落分析仪可实现高效准确菌落总数的统计,可大大提高实验效率。 琼脂扩散试验应用:在有一层菌膜生长的琼脂培养基上打孔,孔中注入抗菌或抑菌成分,抗菌/抑菌成分在琼脂中扩散产生抑菌圈,抑菌圈的大小代表该成分的抗(抑)菌性能大小。全自动菌落分析仪的抑菌圈测量模块可以帮助试验者快速、准确的测得抑菌圈大小并保存完整的实验结果(包括试验效果图片和检测时间,检测数据等)。 会议期间,迅数科技展示了当前微生物平板图像分析的业界领先产品:G6全自动菌落分析仪。迅数科技代表介绍:G6一小时可轻松处理400个平板,是替代菌落计数器实现平板菌落计数自动化的理想选择。一台仪器即可轻松实现倾注平板、涂布平板、滤膜法平板、螺旋接种平板、3M Petrifilm细菌总数测试片和各类抑菌圈平板的自动分析。 同时,迅数科技分享了迅数菌落仪在纳爱斯集团和两面针集团的成功应用,并现场演示了G6菌落分析仪可实现的多项微生物快速检测应用。现场进行的仪器应用演示吸引了与会代表纷纷索取资料并亲自操作仪器,多个单位表达了在以后的科研和检测工作中引入全自动菌落分析仪的合作意向。
  • 紧急采购:新建食品实验室,采购仪器设备
    无锡一单位新建食品QC实验室,现已装修好,需采购以下仪器设备及实验室常用物品,主要做固体饮料及糕点预拌粉,要求最好同一家供应商提供,在无锡能有售后,请满足要求的厂商联系。序号仪器名称1电热恒温干燥箱2恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃3干燥器:内附有效干燥剂4快速水分测定仪5恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃6天平:感量为0.1mg7天平:感量为0.1g8冰箱:2 ℃~5 ℃9均质器10振荡器11菌落计数器12定氮蒸馏装置13自动凯氏定氮仪14灭菌锅15无菌室(超净工作台)16pH 计或pH 比色管或精密pH试纸17生物显微镜18计重秤19可调电炉20移液枪配枪头21量筒 500ml22烧杯23培养皿 直径90mm24刻度吸管(1ml、10ml)25锥形瓶(含塞)250mL、500mL26吸耳球27酒精灯28脱脂棉29手术剪刀30酒精缸31镊子32玻璃棒33记号笔34试管架35移液架36试管(配硅胶塞)37结晶紫中性红胆盐琼脂38接种环(针)39平板计数琼脂40试管刷41小导管42小药勺43变色硅胶44白大褂45称量瓶联系信息:实验室负责人 花经理 微信 L19805658275(添加时,请备注:在仪器信息网上看到的)
  • 吉林大学贾琼教授:对明天最好的准备就是今天做到最好
    在科学仪器及分析检测行业有着广大的女性从业者,她们正在通过自己的思考与行动影响着科学仪器行业的发展,她们敢于创新,敢于冒险,在美丽与温柔的外表下蕴含着强大的力量。2022年“三八国际妇女节”将至,仪器信息网将以“Women in STEM ——科学仪器行业女性洞察” 专题,邀请多位行业女性工作者分享他们的点滴故事,解读她们的成长经历与职业历程,洞察科学仪器行业女性从业者的别样魅力。本期主角是吉林大学化学学院贾琼教授。贾琼 教授 吉林大学仪器信息网:展开讲述进入行业的时间与契机,为什么选择分析测试领域?选择这个领域主要是由于我的所学专业。分析化学是一门实用性很强的学科,在食品、生物、医药、环境等领域都有很多重要的应用,这也正是分析化学最吸引我的一点。但很多事情都不是偶然的,选择这个领域的初衷是所学专业和兴趣使然,但最终与一路上良师益友的教诲和支持是分不开的。仪器信息网:如何平衡家庭与工作中的角色,及如何解决所面临的压力与挑战?家庭与事业就像天平的两端,如何权衡二者是一个不可避免的话题。但实际上提起家庭和事业的平衡,不应该只是女性单独的问题,而是每一个人都要面对的问题。对于家庭与事业,首先不能把它看成是矛盾的二选一,而是应该放在同等重要的位置。我比较信奉的一句话是“今天的事情完成好,明天的事情计划好”,对明天最好的准备就是今天做到最好。提高工作效率,合理规划时间,学会正确取舍,对家庭和事业的协同发展是至关重要的。仪器信息网:对分析测试领域女性从业者在职业设计规划上的建议?没有一个领域的工作是轻松的,分析测试领域也是如此。首先我的建议是选择自己喜欢的感兴趣的工作方向,这样即使在未来的工作中感觉乏味时,也会时刻保持着激情。此外,在从业前应该努力用知识武装自己,并积极增强知识储备。最后,我的建议是在规划好发展方向之后,一定要不忘初心,静心聚力,坚持不懈,勇于接受挑战。仪器信息网:“后浪”逐渐崛起的今天,请您谈一下对于未来发展或人才培养的计划与愿景?愿“后浪”中的女同胞们,扬巾帼之志、尽巾帼之力。爱自己,爱生活,爱事业!保持健康、美丽、自信,祝大家越来越美好!仪器信息网:“三八国际妇女节”来临之际,请您为大家推荐一本看过的好书,并说明推荐理由。我推荐《当你像鸟飞往你的山》,作者Tara Westover。这是一本非常吸引人的励志书,书中内容告诉我们,一个人不论身处何境,都有改变命运的机会,重塑全新的自我。
  • 远慕总结:质粒DNA的提取方法
    (一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时,共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕形成网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。[实验仪器与设备]1.恒温培养箱 2.恒温摇床3.台式离心机(最大转速4000rpm) 4.冷冻高速离心机5.高压灭菌锅 6.超净工作台7.微量移液器 8.eppendorf tupe、tip[实验材料]1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲/烷(Tris)3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.氢氧/化钠5.十二烷基硫酸钠(SDS) 6.乙酸钾7.冰乙酸 8.氯/仿9.乙醇 10.胰RNA酶11.氨苄青霉素 12.蔗糖13.溴酚蓝 14.酚15.β巯基乙醇 16.盐酸17.含pUC18质粒的大肠杆菌附:试剂的配制1.溶液Ⅰ50mmol/L 葡萄糖5mmol/L 三羟甲基氨基甲/烷(Tris) TrisHCl (pH8.0)10mmol/L 乙2胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)2.溶液Ⅱ0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合3.溶液Ⅲ5mmol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 ml4.TE缓冲液10mmol/L TrisHCl1 mmol/L EDTA(pH8.0)5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回)6.胰RNA酶将RNA酶溶于10mmol/L TrisHCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中,配成10mg/ml的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,保存于-20℃。7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚8.酚[实验步骤](一) 提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中,接入含质粒的大肠杆菌,37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中,4000rpm,离心2min。3.吸去培养液,使细胞沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中,充分混匀,室温放置10 min。5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制),混匀内容物,将离心管放冰上5 min。6.加入150μl溶液Ⅲ(冰上预冷),盖紧管口,颠倒数次使混匀。7.1200rpm,离心15 min,将上清转至另一离心管中。8.向上清中加入等体积酚:氯/仿(去蛋白),反复混匀,12000rpm,离心5min,将上清转移到另一离心管中.9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液,把离心管倒扣在吸水纸上,吸干液体。10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀,振荡并离心,倒去上清液,真空抽干或空气中干燥。11.加50μl TE缓冲液,其中含有20μg/ml的胰RNA酶,使DNA完全溶解,-20℃保存。(二)琼脂糖凝胶电泳检测DNA[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB),在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带,在电场中,pH8.0条件下,凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。琼脂糖凝胶有如下特点:(1) DNA的分子大小 在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比,分子越大迁移得越慢。(2) 琼脂糖浓度 一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。(3) 电压 低电压时,线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大,所加电压不得超过5v/cm。(4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显,不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变,但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱,最好在4℃条件下电泳。(5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。(6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶,电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化。对于天然的双链,常用的几种电泳缓冲液有TAE、TBE等,一般配制成浓缩母液,室温保存,用时稀释。[实验仪器与设备]1. 恒温培养箱2. 琼脂糖凝胶电泳系统3. 高压灭菌锅 4. 紫外线透射仪[实验材料]1.三羟甲基氨基甲/烷(Tris) 2.硼/酸3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.溴酚蓝5.蔗糖 6.琼脂糖7.溴化乙锭 8.DNA marker9.DNA样品[实验步骤]1.缓冲液的配制① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液)配1000ml 5×TBE:Tris 54g硼/酸 27.5g0.5mol/l EDTA 20mlPh8.0② 凝胶加样缓冲液(6×)溴酚蓝 0.25%蔗糖 40%③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml2.制备琼脂糖凝胶按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表:琼脂糖凝胶浓度 线性DNA的有效分离范围0.3% 5-60 kb0.6% 1-20 kb0.7% 0.8-10 kb0.9% 0.5-7 kb1.2% 0.4-6 kb1.5% 0.2-4 kb2.0% 0.1-3 kb3.胶板的制备(1) 用高压灭菌指示纸带将洗静、干燥的玻璃板的边缘(或电泳装置所皿备的塑料盘的开口)封住,形成一个胶膜(将胶膜放在工作台的水平位置上,用水平仪校正)。(2) 配制足够用于灌满电泳槽和制备凝胶所需的电泳缓冲液(1×TBE)。准确称量的琼脂糖粉。缓冲液不宜超过锥瓶或玻璃瓶的50%容量。 在电泳槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液,离子强度或pH值的微小差异会在凝胶中形成前沿,从而大大影响DNA片段的迁移率 。(3) 在锥瓶的瓶颈上松松地包上一层厚纸。如用玻璃瓶,瓶盖须拧松。在沸水浴或微波炉中将悬浮加热至琼脂糖溶解。注意:琼脂糖溶液若在微波炉里加热过长时间,溶液将过热并暴沸。应核对溶液的体积在煮沸过程中是否由于蒸发而减少,必要时用缓冲液补充。(4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml,充分混匀。(5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘,凝固后,在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。(6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。(7)在凝胶完全凝固后(于室温放置30-45分钟) ,小心移去梳子和高压灭菌纸带,将凝胶放入电泳槽中。低熔点琼脂糖凝胶及浓度低于0.5%的琼脂糖凝胶应冷却至4℃,并在冷库中电泳。(8)加入恰好没过胶面约1mm深的足量电泳缓冲液。4.加样DNA样品与所需加样缓冲液混合后,用微量移液器,慢慢将混合物加至样品槽中。此时凝胶已浸没在缓冲液中。 一个加样孔的最大加样量依据DNA的数量及大小而定,一般为20-30μl样品。已知大小的DNA标准,应同时加在凝胶的左凝胶的左侧和右侧孔内。确定未知DNA的大小。测量未知DNA的大小时,要所有样品都用相同的样品缓冲液。5.电泳在低电压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,但是,在电场增加时,不同相对分子质量的DNA片段泳动度的增加是有差别的。因此,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围随之减小。为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不应高于5V/cm。当溴酚蓝指示剂移到到距离胶板下沿约1-2cm处,停止电泳。
  • 老酸奶被指添加工业明胶不能吃:或用旧皮鞋熬制
    4月9日消息,央视记者微博今日爆料:不要吃老酸奶和果冻。央视主持人赵普(微博) 称:“来自调查记者短信:不要吃老酸奶(固体形态)和果冻,内幕很可怕”。而朱朱文强(微博)微博称:“央视一哥们说,以后别吃果冻和酸奶,问为啥,他比喻说,哪天你扔了双破皮鞋,转眼就进你们肚子了。这哥们说,这才是今年315晚会重头,可惜没播”。媒体人微博网名”落魄书生周筱赟(微博)“对此称:”不用这么神秘兮兮啦。所谓老酸奶,就是更加浓稠,其实是大量添加工业明胶。工业明胶,就是用垃圾里面回收的破烂皮革之类做出来的。果冻更是如此。这本该是常识。“  网友评论:  一财网在以上微博评论中看到,有网友猜测:”跟头发做酱油、臭皮熬阿胶一个道理吧 ?或者是塑化剂 ? “  网友:”我是学食品营养与检测的,也经常会与食品添加剂打交道,像目前国内的果饮基本都是用添加剂调制而成,比如营养快线,只需少量的牛奶,按顺序正确加入添加剂,就能马上调制而出。还有一块小小的面包,按照最新国标(GB2760-2011)最多可添加二十种的添加剂。“  网友:”看到评论里有人说是用廉价的工业明胶代替食用明胶。百度了一下,发现使用明胶的食物多如牛毛,不过查了下工业明胶和食用明胶的价格差距并不大,差价利润绝对不值得大企业冒险,估计还有内幕。“  究竟何为老酸奶?  不知道什么时候开始,各超市的酸奶柜台突然被铺天盖地的“老酸奶”所占据。几个月以来,许多朋友都问我:老酸奶是不是最天然的酸奶?是不是营养价值比其他酸奶高?是不是有特殊保健作用?是不是比其他酸奶安全?是不是不含添加剂特别适合孩子吃?  真正的老酸奶是怎么制作的?  其实,所谓的“老酸奶”,是一个传统制作酸奶产品的概念,但已经变味了。各地都有自己的 “老酸奶”,也就是过去传统制作的凝固型酸奶。这种酸奶不是黏稠的液态,而是基本上呈现固态。这种固态不是加了任何凝固剂,而是牛奶蛋白质的一种特殊凝胶状态。把消过毒的牛奶、糖和菌种加到干净的容器当中,保温发酵几个小时,牛奶就会变成固态,每个自制酸奶的人都知道。这种蛋白质凝胶状态很脆弱,只要用力搅拌,就能让看似坚实的凝胶重新变成液态的奶。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。  普通酸奶是老酸奶加了增稠剂等  在我们小时候,各地的酸奶都是这种固态的产品,但随着奶制品产量的增大,这种产品慢慢地退出了市场。这是因为凝固型的酸奶在运输中容易因为摇晃、震荡等机械力量影响口感,消费者看到的是破碎的冻,甚至是变成液态的酸奶,肯定会不满意。  同时,因为在固态酸奶没法加入果汁、果粒之类配料,为了便于运输和销售,人们就加入一些增稠剂,把大罐发酵好的酸奶凝冻慢慢搅碎,让它变成黏稠的半流体。这就是市面上占优势的酸奶产品状态。  如果少加增稠剂,酸奶产品往往会呈现液态,只不过比牛奶略浓一些,有些消费者以为酸奶“内容不够”而产生嫌弃心情,其实这是很正常的状态。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。  如今的“老酸奶”添加了凝胶剂  但是,喝惯了这种黏稠的酸奶,人们也有点腻了。这时候,新产品“老酸奶”让人们眼前一亮。它以传统产品的面目出现,但为了避免运输中变稀的麻烦,添加了凝胶剂,这样,无论怎么震荡都不会变成液态,运输和销售非常方便。  普通的牛奶原料,加明胶、琼脂、卡拉胶等等植物胶,就可以制成这种凝冻状态。我的实验室里就曾经做过类似的冻,而且口感效果比某些市售产品还理想,只不过没有把这种配方变成产品。  所以,严格来说,市面上所谓的“老酸奶”产品,应当叫做“酸奶冻”比较确切。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。  巨额的暴利驱使企业铤而走险 非法生产食用明胶  据北青网消息,中国明胶协会理事长王敬忠向记者算了一笔账:1吨正规食用明胶的原材料,价格高达2000~3000元,而一般的皮革下脚料,1吨仅需要 100~200元。但是,进入市场后,1吨食用明胶的收购价都在2万~3万元左右。“目前,国内生产食用明胶的不法小厂家有100多家,然而取得生产许可证的只有20多家。不仅仅是在山东,河北、江浙一带都是这些假冒食用明胶的根据地。”  王敬忠说,在当地工厂,工人们都会将这些皮革废料叫做“蓝皮”、“白皮”。这些皮子全是从皮鞋、皮衣或制鼓的皮革上削下来的废料,拉回工厂时,大都是成碎末的皮子,还搀和着大量的泥块。“但是制成后的明胶,透明无味。消费者根本无法将正规的食用明胶和废皮革做成的明胶区分开来。”  中国农业大学教授陈敏称,制革厂在鞣制皮革时,要使用一些含有金属元素铬的化学制剂。鞣制、整理后才舍弃一些碎皮,这些碎皮就含有对人体有害的金属铬。金属铬会破坏人体骨骼以及造血干细胞,长期食用会导致骨质疏松,严重的会患上癌症。铬对人体健康的这种危害是一个缓慢的过程,一般在2年以上才会显现出来。  专家曾表示:只要不超标都可以  早在2011年6月间,有网友微博爆料说,以粘稠见称的“老酸奶”是很多人的最爱。但所谓“老酸奶”其实是由一种“凝胶剂”制成,虽然价格是普通酸奶(乳酪)的一倍还多,但并没有更多营养,而且多食无益。为此,该网友调侃道:哥喝的不是“老酸奶”,是凝胶剂!  对此当时中国西部乳业发展协会秘书长魏荣禄接受媒体指出,果胶、明胶都属于稳定剂,是国家允许添加在奶制品中的,只要不超过标准都是正常的。  “搬运过程中的震动可能会使老酸奶产生乳清分离,影响其品质和口感。所以老酸奶中加入了适量的稳定剂”。魏荣禄说,过去的老酸奶在发酵后很短时间内就被饮用,因而只用添加食糖,不需要添加稳定剂。  “老酸奶并不是越浓越好,”魏荣禄表示,过于浓稠的老酸奶中可能加入了琼脂等增稠剂,营养价值并不会随着浓稠程度的提高而增加。
  • 宁夏疾控中心采购大批食品安全监测耗材
    2013年1月31日,中国政府采购网公布了宁夏回族自治区疾病预防控制中心2013年食品安全风险监测试剂耗材采购项目招标公告,此次采购包括微生物培养基、化学试剂及玻璃器皿、生化诊断试剂、仪器配件及专用耗材等,详情如下所示:  一、委托编号:2013NCZ0037 招标编号:HSZB-2013ZC004  二、采购方式:公开招标  三、采 购 人:宁夏回族自治区疾病预防控制中心  联 系 人:李 银 联系电话:0951-4085393  四、招标代理机构:宁夏恒盛招标有限公司  联 系 人:李 慧  电 话:0951- 5031788 传 真:0951-5058301  电子邮箱: nx.hs@163.com  地 址:银川市国际贸易中心C栋12楼008室  户 名:宁夏恒盛招标有限公司  开 户 行:银川市农行开发区支行  账 号:140001040016999  五、评标办法:最低评标价法  六、采购内容简述:  一标段: 微生物培养基序号名称规格总数单位1平板计数琼脂250g/瓶5 瓶2LST肉汤250g/瓶4瓶3BGLB肉汤250g/瓶2瓶4EC肉汤250g/瓶2瓶5EMB琼脂250g/瓶3瓶6致病性大肠埃希氏菌诊断血清18瓶/套2套7产肠毒性大肠埃希氏菌诊断血清10瓶/盒2盒8肠侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清11瓶/盒2盒9出血性大肠杆菌O157诊断血清1mL/瓶2瓶10出血性大肠杆菌O157:H7诊断血清1mL/瓶2瓶11CN琼脂250g/瓶3瓶12CN琼脂配套试剂10支/盒3盒13金氏B培养基250g/瓶2瓶14乙酰胺肉汤100g/瓶2瓶15钠氏试剂5mL/支×22盒16Api 20NE生化条(带配套盐水及试剂)25条/盒5盒17BPW250g/瓶3瓶18SC增菌液100g/瓶2瓶19TTB培养基基础250g/瓶2瓶20碘液20支/盒3盒210.1%煌绿20支/盒3盒22沙门氏菌显色培养基1000mL/瓶5瓶23TSI琼脂250g/瓶1瓶24MIU培养基20支/盒6盒25靛基质试剂10mL/瓶3瓶26软琼脂250g/瓶2瓶27Api 20E生化条(带盐水)25条/盒15盒28Api 20E配套试剂7支/套2套29氧化酶瓶2瓶30矿物油125mL/瓶2瓶31沙门氏菌A-F多价诊断血清1mL/瓶3瓶32沙门氏菌诊断学清60种/套2套33志贺氏菌增菌肉汤250g/瓶4瓶34志贺氏菌增菌肉汤配套试剂10支/盒6盒35志贺氏菌显色琼脂1000mL/瓶5瓶36XLD琼脂250g/瓶1瓶37克氏双糖琼脂250g/瓶3瓶38志贺氏菌属四种多价血清1mL/支3支39志贺氏菌属福氏多价血清1mL/支3支40志贺氏菌属诊断血清50种/套2套417.5%氯化钠肉汤250g/瓶5瓶42Baird-parker基础500g/瓶2瓶43脑心浸液500g/瓶1瓶44冻干血浆12瓶/盒3盒45金葡显色培养基500mL/瓶3瓶4610%氯化钠胰酪胨大豆肉汤250g/瓶6瓶47Baird-parker基础250g/瓶1瓶48亚蹄酸盐卵黄增菌液100mL×6瓶/盒2盒49胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤250g/瓶4瓶50胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤配套试剂10000IU×10支/盒3盒51MYP琼脂基础250g/瓶2瓶52MYP琼脂配套试剂10支/盒3盒5350%卵黄乳液5mL/支×106盒54蜡样芽胞杆菌显色琼脂1000mL/瓶3瓶55酪蛋白琼脂100g/瓶2瓶56蜡样芽胞杆菌生化鉴定盒10次/盒6盒57Api CHB生化条(带培养基及配套试剂)(进口)10条/盒6盒58磷酸盐缓冲液250g/瓶1瓶59大肠杆菌IMVC生化鉴定盒10次/盒3盒60BPW250g/瓶3瓶61mLST-Vm基础250g/瓶2瓶62mLST-Vm配套试剂5支/盒3盒63阪崎显色培养基1000mL/瓶3瓶64LB基础250g/瓶2瓶65LB1配套试剂10支/盒5盒66LB2配套试剂10支/盒2盒67单增李斯特菌显色平板20块/盒6盒68SIM琼脂250g/瓶2瓶69半固体琼脂250g/瓶2瓶70Api Listeria生化条(进口)10条/盒10盒71木糖生化管20支/盒3盒72鼠李糖生化管20支/盒3盒73Phoenix阳性鉴定板(进口)25块/盒4盒74Phoenix阴性鉴定板(进口)25块/盒4盒75Phoenix鉴定培养液(进口)100支/盒2盒76一次性血平板20块/盒10盒77百日咳诊断血清1mL/瓶 1瓶78脑膜炎奈瑟氏菌诊断血清11瓶/套1套79脑膜炎奈瑟氏菌乳胶凝剂试剂盒25人份/盒1盒80DR585链球菌分型试剂盒盒1盒81亚碲酸钾培养基500g/瓶1瓶823.5%亚碲酸钾溶液10瓶/盒 1盒83裂解马血10瓶/盒 1盒84炭琼脂500g/瓶1瓶85炭琼脂培养基添加剂10瓶/盒 1盒86Api NH生化鉴定条(带配套盐水及试剂)(进口)10条/盒1盒87Api Staph(带配套试剂)(进口)25条/盒1盒88Api 20 Strep(带配套试剂)(进口)25条/盒1盒89Api Coryne生化鉴定试剂条(带配套试剂)(进口)12条/盒1盒90O157胶体金测试条10条/包3包91国产霍乱弧菌O1群胶体金快速检测试剂盒10条/包3包92国产霍乱弧菌O139群胶体金快速检测试剂盒10条/包3包93肉毒毒素诊断血清7支/盒4盒94A型肠毒素快速检测试剂10条/包5包95B型肠毒素快速检测试剂10条/包5包96C型肠毒素快速检测试剂10条/包5包97沙门氏菌抗原快速检测试剂10条/包5包98革兰氏染液套2 套99细菌双向血培养瓶12瓶/箱8箱100大肠杆菌80992株101金黄色葡萄球菌ATCC 65382株102铜绿假单胞菌ATCC 154422株103白色念珠菌ATCC 102312株104枯草杆菌黑色变种芽孢ATCC 93722株105藤黄微球菌CMCC(B)280011株106生孢梭菌CMCC(B)649411株107白色念珠菌CMCC(F)980011株108药敏检测试剂盒12种/盒50盒109药敏板套150 套  第二标段: 化学试剂及玻璃器皿序号名称规格/型号数量单位1丙酮500ml/瓶10瓶2三氯甲烷500ml/瓶15瓶3无水乙醇500ml/瓶20瓶4三氯醋酸500g2瓶5蒽酮25g1瓶6硫脲500g1瓶7CuSO425g 1瓶8NaF500g1瓶9钨酸钠500g1瓶10对羟基联苯100g1瓶11乳酸锂5g1瓶12乳酸钙500g1瓶13硝酸500mL20瓶14硝酸2500mL8瓶15抗坏血酸100g10瓶16硝酸镁,六水50g2瓶17氧化镧500g1瓶18甲醇4L10瓶19乙腈4L/瓶8瓶20正己烷4L6瓶21氯化钠500g20瓶22无水硫酸钠500g20瓶23乙酸乙酯4L4瓶24丙酮4L4瓶25二氯甲烷4L2瓶26磷酸500mL/瓶3瓶27硫酸铈铵25g/瓶10瓶28次氯酸钠500mL/瓶5瓶29环己烷500mL/瓶5瓶30三氟乙酸500mL/瓶2瓶31Hydrolysis Reagent C47TM CB130(氧化剂)4×950mL/包3包32o-Phthalaldehyde Diluent CB910(OPA稀释剂)4×951mL/包3包33巯基乙醇10g1瓶34邻苯二甲醛OPA5g1瓶352-硝基苯甲醛2-Nitrobenzaldehyde25g/瓶1瓶36二甲基亚砜500ml/瓶1瓶37甲酸Formic acid100mL/瓶1瓶38β-葡萄糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶β-Glucuronidase/sulfatase5ml,100000单位/mg3瓶39蛋白酶100mg1瓶40高氏淀粉酶500g1瓶41β-葡萄糖苷酶/硫酸酯酶2mL3瓶42正丙醇500mL/瓶1瓶43盐酸羟胺100g/瓶2瓶44对甲苯磺酸101g/瓶2瓶45乙酸铵500g2瓶46石油醚500ml/瓶5瓶47乙二胺500ml/瓶2瓶48氢氧化钾500g4瓶49冰醋酸500ml/瓶10瓶50无水乙醇500mL/瓶12瓶5195%乙醇500mL/瓶10瓶52甲基叔丁基醚 500ml/瓶5瓶53对氨基苯磺酰胺50g2瓶54盐酸N-(1-萘)-乙二胺25g2瓶55二苯碳酰二肼25g2瓶56异烟酸25g2瓶57砒唑酮25g2瓶58N-二甲基甲酰胺25g2瓶59氯胺T25g2瓶60安替比林50g2瓶614-氨基安替比林50g2瓶62碘化钾晶体50g1瓶63次氯酸钠500ml2瓶6436%过氧化氢500ml2瓶65冰醋酸500m110瓶66碘化钾250g1瓶67无水磷酸氢二钠500g1瓶68无水磷酸氢二钾500g1瓶69乙二胺四乙酸二钠250g1瓶70盐酸N,N-二乙基对苯二胺100g1瓶71硫酸N,N-二乙基对苯二胺100g1瓶72无氯纯水1000ml1瓶73亚砷酸钾1瓶74硫代乙酰铵250g1瓶75氯胺T500g1瓶76吡啶500ml1瓶77巴比妥酸250g2瓶78一水磷酸二氢钠500g1瓶79二水磷酸二氢钠500g1瓶80二乙酰一肟25g2瓶81二硫化碳500mL1瓶82氯化钾250g1瓶8320-30目沙子500g2瓶84盐酸500m12瓶85三氧化铬100g2瓶86对氨基苯磺酸100g2瓶87硫酸500m12瓶88氯化汞500g3瓶89碘化钾500g2瓶90氢氧化钠500g3瓶91磷酸500m12瓶92甲醛501ml2瓶93环已二胺四乙酸100g2瓶94氨基磺酸100g2瓶95盐酸副玫瑰苯胺100g2瓶96邻苯二甲酸氢钾500g2瓶97亚砷酸钠500g2瓶98可溶性淀粉500g2瓶99硝酸银250g2瓶100碳酸铵500g2瓶101丙酮500m14瓶102乙酸500m12瓶103磷酸二氢钾500g2瓶104磷酸氢二钠500g2瓶105异烟酸100g2瓶106硫氰酸汞500g2瓶107乙醇500m12瓶108硫酸铁铵100g2瓶109氨水500m12瓶110丙三醇500m12瓶111溴甲酚绿100g2瓶112柠檬酸三钠500g2瓶113氯化钠500g2瓶1比色管100ml100只2比色管25mL50只3容量瓶10mL30支4具塞锥形瓶250ml60支5分液漏斗1L5支6分液漏斗250mL30支7玻璃吸管glass pasteur pipettes230mm,250支/盒1盒8容量瓶100mL,5个/盒4盒9具塞玻璃刻度试管10mL300个10具塞玻璃刻度离心管25mL200个11玻璃吸管(尖头)glass pasteur pipettes150mm,250支/盒5盒12玻璃吸管(尖头)glass pasteur pipettes230mm,250支/盒4盒13棕色磨口具塞试剂瓶500mL200个14量筒100mL5个15棕色容量瓶100ml20个16250mL具塞锥形瓶250mL30个17圆底烧瓶100mL30个1810mL具塞玻璃刻度试管试管架 5个1925mL具塞玻璃刻度离心管试管架 5个20石油醚500mL2瓶21定量滤纸内径12.520盒22定量滤纸内径1520盒23定量滤纸内径1820盒24定性滤纸内径12.520盒25定性滤纸内径1520盒26定性滤纸内径6cm10盒27定性滤纸内径1820盒28橡胶手套中10双29橡皮塞子1号-10号各10只30多孔玻板吸收管棕色10个31多孔玻板吸收管白色10个32大炮吸收管白色30个33具塞比色管10m130个34量筒20ml5个35量筒50ml3个36量筒250mL3个37量筒500mL3个38量筒1000mL5个39烧杯25mL20个40烧杯50mL20个41烧杯100mL20个42 烧杯100mL20个43 烧杯1000mL15个44烧杯3000ml20个45烧杯2000ml20个46吸管1mL20个47吸管2mL20个48吸管5mL20个49吸管10mL20个50移液管1mL20个51移液管2mL20个52移液管5mL20个53移液管10mL20个54温度计360°10个55大口瓶2500mL10个56比色管(具塞)10ml20个57棕色容量瓶50ml20个58塑料量筒250ml2个59标本缸(圆筒型)高20cmX直径25cm10个60标本缸10个  第三标段: 生化诊断试剂序号名称规格/型号数量单位1流行性出血热IgG抗体检测试剂盒96人份/盒8盒2流行性出血热抗体检测试剂盒(胶体金法)20人份/盒2盒3出血热荧光抗体(直接法)15ml4流行性出血热IgM抗体检测试剂盒96人份/盒2盒5登革热IgM抗体检测试剂盒(进口)96人份/盒1盒6狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒20人份/盒4盒7乙脑IgM抗体检测试剂盒48人份/盒2盒8呼吸道病毒15联RT-PCR检测试剂盒(进口)50人份/盒1盒9BED新发感染检测试剂盒(进口)192人份/盒4盒10丙肝病毒抗体检测试剂盒(酶免法)48人份/盒1盒11梅毒螺旋体抗体试剂盒(ELISA)48人份/盒1盒12梅毒螺旋体抗体试剂盒(TPPA)100T/盒1盒13乙肝表面抗原检测试剂盒(酶免法)48人份/盒1盒14风疹IgM抗体检测试剂盒48人份/盒20盒15麻疹IgM抗体检测试剂盒48人份/盒20盒16麻疹IgM抗体检测试剂盒96人份/盒2盒17乙肝DNA检测试剂盒20人份/盒1盒18布病IgM ELISA检测试剂盒(进口)96人份/盒3盒19布病IgG ELISA检测试剂盒(进口)96人份/盒3盒20甲肝病毒IgM抗体检测试剂盒(酶免法)96人份/盒200盒21戊肝病毒IgM抗体检测试剂盒(酶免法)96人份/盒200盒22麻疹荧光PCR检测试剂盒规格:48T/盒9盒23风疹荧光PCR检测试剂盒规格:48T/盒5盒  第四标段: 仪器配件及专用耗材序号名称规格/型号数量单位125mL EPA样品瓶140×27.5mm,100个/包1包2色谱柱ACQUITY UPLC HSS T3(进口)1.8um 2.1mm*50mm1根3水相针式滤器100只/包4包4水相针式滤器100只/包4包5有机相针式滤器100只/包4包6有机相针式滤器100只/包8包7样品瓶存放盒 2只8Ag-H离子交换树脂柱(进口)2.5cc,48个/包 2包9玻璃纤维滤纸GF/C47mm,1.2µ m,100张/盒5盒10玻璃纤维滤纸GF/C110mm,1.5µ m,100张/盒3盒11PriboFast玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口)25/包5包12黄曲霉毒素B1B2G1G2M1免疫亲和柱(进口)25/包6包 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱25/包8包13固相萃取小柱(中性氧化铝)30/包 1g/6mL10包14Oasis MAX固相萃取柱(进口)6cc/150mg,30/包5包15Oasis HLB固相萃取柱(进口)200mg/6cc, 30/盒5盒16Oasis MCX固相萃取柱(进口)150mg/6cc,30/盒5盒17Oasis MCX固相萃取柱(进口)60mg/3cc, 100/盒5盒18Oasis WCX固相萃取柱(进口)150mg/6cc, 30/盒5盒19Oasis WAX固相萃取柱(进口)150mg/6cc, 30/盒5盒20塑料巴斯德吸管2ml 1000/盒3盒21MycoSep 230-雪腐镰刀菌烯醇多功能净化柱(进口)25支/pk 每支小柱5ml 5盒22PriboFast 226-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口)25支/pk 每支小柱5ml 5盒23PriboFast 200-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口)25支/pk 每支小柱5ml 5盒24DONStar R呕吐毒素免疫亲和柱(进口)25支/pk 每支小柱3ml5盒25ZearaStar玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口)25支/pk 每支小柱3ml5盒26SupelMIP 固相萃取 — 氯霉素25 mg/10 mL , (LRC), pk of 504盒27SILICA/PSA混合玻璃固相萃取柱1.0g/6mL,10个/盒30盒28Florisil玻璃固相萃取柱1.0g/6mL,10个/盒30盒29PSA玻璃固相萃取柱1.0g/6mL,30个/盒30盒30LC-Si固相萃取柱200mg,3mL,30个/包3包31LiChrolut EN固相萃取柱200mg,3mL,30个/包3包3250uL微量进样针50μL4支33封口膜 2卷34PTFE针头过滤器0.22um,13mm,100/pk10包35BEH-C18色谱柱(进口)150mm*d2.1mm,1.7um2根36R95口罩(20个/盒)防酸碱4盒37R95口罩(20个/盒)防有机4盒38sunfire-C18色谱柱(进口)150mm*2.1mm,5um2根39氨基甲酸酯分析柱(进口)150mm*3.9mm1根40氨基甲酸酯Sentry保护柱芯(进口)2个/包1包41Sentry保护柱套(进口) 1个42PAH C18 分析柱(进口)250mm*4.6mm,5um1根43PROTEIN-Pak sp阳离子交换色谱柱(进口)10mm*100mm,8um1根44无尘抽纸200抽/盒20盒45塑料容量瓶25mL, 5个/盒36盒46塑料容量瓶50mL, 5个/盒36盒47塑料容量瓶100mL, 5个/盒36盒48塑料刻度吸管2mL60支49塑料刻度吸管5mL60支50塑料刻度吸管10mL60支51O型环(进口)10/包3包52分流用玻璃衬管(进口)5个/包3包53毛细管用压环 (进口)10/包3包54惰性处理石英棉(进口)3g/包1包55 进样针(进口)10uL 3支56氟离子选择电极 2支57甘汞电极 2支58硅胶管(溶剂解吸型)6*120mm5支59硅胶管(溶剂解吸型)6*80mm5支60活性碳管(溶剂解吸型)6*120mm5支61活性碳管(溶剂解吸型)6*80mm5支 62硅胶管(热解吸型)6*120mm5支 63硅胶管(热解吸型)6*80mm5支 64活性碳管(热解吸型)6*120mm5支  第五标段: 仪器耗材序号名称规格/型号数量单位12ml螺纹口样品瓶(进口)100/盒6盒22ml黑色开孔拧盖(进口)100/袋8袋3广口瓶内插管(进口)100/包2包4微量注射器(进口)1支/包9包5微量注射器(进口)1支/包9包6超高惰性衬管(进口)5/pk1包7广口螺纹口瓶盖隔垫(进口)100/包2包8DB-5MS超高惰性柱(进口)30m, 0.32mm, 0.25um2根9HP-1MS超高惰性柱(进口)30m, 0.32mm, 0.25um1根1012mL 样品瓶(带盖,琥珀色)(进口)100/包4盒1122mL 样品瓶(带盖,琥珀色)(进口)100/包4盒12热解涂层分区石墨管(进口)10只/包2包13Mark Ⅵ型雾化室全套组(进口)1套14硅藻土固相萃取柱(进口)30/包3包15CARB/NH2柱(进口)30/包30包16硅镁柱(进口)30/包30包17C18固相萃取小柱(进口)500mg/ml 30支/盒5盒18DB-FFAP柱(进口)30m*0.32mm*0.25um1根19自动顶空瓶盖(进口)100个/盒2盒20自动顶空瓶(进口)100个/盒1盒21HP-PLOT-Q (进口)30m, 0.32mm, 20u1根22DB-624(进口)30m, 0.32mm, 20u1根23Bond Elut Plexa(进口)200mg, 3ml 50/pk3盒24标液储存瓶(进口)22ml 100/pk4盒25标液储存瓶(进口)40ml 100/pk4盒261177超高惰性脱活分流/不分流衬管(进口)5/PK1盒271177超高惰性脱活分流/不分流衬管(进口)5/PK1盒281079超高惰性脱活分流/不分流衬管(进口)5/PK1盒291177衬管O形圈(进口)10/PK3盒301079衬管O形圈(进口)10/PK3盒31毛细管柱密封垫圈(进口)0.425mm 10/包1包32毛细管柱密封垫圈(进口)0.5mm 10/包1包  第六标段:标准物质序号名称规格数量单位1敌敌畏1.0mg/ml10支2乙硫磷1.0mg/ml10支3久效磷1.0mg/ml10支4乙拌磷1.0mg/ml10支5乙酰甲胺磷1.0mg/ml10支6乐果1.0mg/ml10支7氧化乐果1.0mg/ml10支8伏杀磷1.0mg/ml10支9杀螟硫磷1.0mg/ml10支10甲基毒死蜱1.0mg/ml10支11杀扑磷1.0mg/ml10支12马拉硫磷1.0mg/ml10支13皮蝇硫磷1.0mg/ml10支14氯唑磷1.0mg/ml10支15丙溴磷1.0mg/ml10支16亚胺硫磷1.0mg/ml10支17灭线磷1.0mg/ml10支18三唑磷1.0mg/ml10支19哒嗪硫磷100ug/ml10支20甲基立枯磷100ug/ml10支21甲胺磷1.0mg/ml10支22对硫磷1.0mg/ml10支23毒死蜱1.0mg/ml10支24甲基对硫磷1.0mg/ml10支25甲拌磷1.0mg/ml10支26硫丹100µ g/mL10支27水胺硫磷1.0mg/ml10支28三氯杀螨醇1.0mg/ml10支29氯氟氰菊脂1.0mg/ml10支30氟氯氰菊酯100ug/ml10支31联苯菊酯1.0mg/ml10支32甲氰菊酯1.0mg/ml10支33氰戊菊酯1.0mg/ml10支34氯氰菊酯1.0mg/ml10支35氯菊酯1.0mg/ml10支36溴氰菊酯1.0mg/ml10支37磷胺 1.0mg/ml10支38环己基氨基磺酸钠溶液标准物质(甜蜜素)10.0mg/ml16支39乙醇水溶液中甲醇标物1.00mg/mL5支40乙醇水溶液中甲醇、异丁醇和异戊醇标准物质1.00mg/mL5支41氯离子1000µ g/mL2支42诱惑红标准物质1000µ g/mL5支43硫酸根标准溶液1000mg/L2支44硝酸盐氮溶液标准物质1000mg/L2支45水中BrO3-溶液标准物质1000mg/L3支46苯甲酸标准物质1000µ g/ml6支47安塞蜜溶液标准物质1000µ g/ml10支48甲醇中苯并芘5.16ug/ml 5支49微囊藻毒素RR标准溶液10ug/ml5支50微囊藻毒素LR标准溶液10ug/ml5支51甲醇中莠去津(阿特拉津)溶液标准物质1000µ g/ml5支52水中草甘膦溶液标准物质100µ g/ml5支53糖精钠标准物质1000µ g/ml6支54盐碘标准物质 125套55尿碘标准物质 35套56黄曲霉毒素M1 6支57黄曲霉毒素B11mL1支58黄曲霉毒素混标B1、B2、G1、G2混合标准品(Aflatoxin Mixture)5×1mL1盒59三聚氰胺溶液标准物质 1.00mg/mL 5mL/支 2支60苏丹红Ⅰ0.25g1支61苏丹红Ⅱ0.25g1支62苏丹红Ⅲ0.25g1支63苏丹红Ⅳ0.25g1支64罗丹明B0.25g1支65碱性橙25g1支66对位红0.1g1支67酸性橙Ⅱ0.25g1支68红2G0.1g1支69碱性橙21100g1支70碱性橙2225g1支71异丙喘宁(硫酸奥西那林)1g1支72苯乙醇胺A20mg1支73孔雀石绿1.0mL/支1支74隐色孔雀石绿100mg/瓶1支75结晶紫100mg1支76隐色结晶紫100mg1支77氘代孔雀石绿25mg1支78氘代隐色孔雀石绿10mg1支795-吗啉甲基-3-氨基2-噁唑烷基酮100ug/ml,1ml1支80氨基脲0.1g1支811-氨基-2-内酰脲0.1g1支823-氨基-2-噁唑烷基酮50mg1支835-吗啉甲基-3-氨基2-噁唑烷基酮(D5-AMOZ)25mg1支84氨基脲(13C15N-SEM)10mg1支851-氨基-2-内酰脲(13C-AHD)10mg1支863-氨基-2-噁唑烷基酮(D4-AOZ)10mg1支873-甲基喹噁啉-2-羧酸10mg1支88喹噁啉-2-羧酸0.1g1支89喹噁啉-2-羧酸-d4标准品25mg1支90大米生物成分分析标准物质35g/瓶6瓶91小麦生物成分分析标准物质35g/瓶6瓶92菠菜生物成分分析标准物质35g/瓶6瓶93鸡肉生物成分分析标准物质35g/瓶6瓶94冻干牛血铅、镉标准物质无10瓶95冻干牛血铅、镉标准物质无10瓶96冻干人尿铅标准物质无10瓶97脱氧雪腐镰刀菌烯醇1瓶98脱氧雪腐镰刀菌烯醇 溶液(DON) 1瓶99脱氧雪腐镰刀菌烯醇-d1 溶液100 μg/mL in acetonitrile1瓶100B-单端孢霉烯混标(DON、NIV、3-AcDON、15-AcDON) 1瓶1013-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇 溶液(3-ADON) 1瓶10215-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇 溶液(15-ADON) 1瓶10315-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-ADON)1瓶1043-乙酰-d3-脱氧雪腐镰刀菌烯醇 溶液100 μg/mL1瓶105隐蔽型脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deepoxy-DON)50μg/mL2瓶106雪腐镰刀菌烯醇标准品(内标)(NIValenol)1mg1瓶107镰刀菌烯酮(Fus-X)0.5mg/5mg1瓶10813C-脱氧雪腐镰刀菌烯醇(内标)(13C-DON) 1瓶109小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Wheat flour - Deoxynivalenol (DON) blank)150g1瓶110玉米赤霉烯酮(zearalenone)50ug/mL 溶于乙腈,1*1mL2支111妥布特罗100mg1支112莱克多巴胺100ug/ml,1ml1支113克仑特罗50mg1支114特布他林0.1g1支115沙丁胺醇100mg1支116非诺特罗50mg1支117富马酸福莫特罗100mg1支11816种邻苯二甲酸酯类化合物混标1000ug/ml 1mL每瓶2支119D4-邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(D4-DEHP)100ng/ul 1mL每瓶8支120邻苯二甲酸二(二乙基己酯)酯标准品(DEHP)1000ug/ml 1mL每瓶3支121邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)1000ug/ml 1mL每瓶3支122邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)1000ug/ml 1mL每瓶3支123邻苯二甲酸二异癸酯(DIDP)1000ug/ml 1mL每瓶3支124克百威溶液标准物质1000ug/ml10支125残杀威溶液标准物质1000ug/ml10支126灭多威溶液标准物质1000ug/ml10支127异丙威溶液标准物质1000ug/ml10支128甲萘威溶液标准物质1000ug/ml10支129抗蚜威溶液标准物质1000ug/ml10支130速灭威溶液标准物质1000ug/ml10支131仲丁威溶液标准物质1000ug/ml10支132氯霉素100ug/mL,1mL4支135DL-苏-氯霉素-d5 1支136恩诺沙星(Enrofloxacin) 1支137恩氟沙星-d5 盐酸盐 1支138猪肌肉(氯霉素阳性) 1支139甲体六六六50ug/ml 19支140乙体六六六50ug/ml19支141丙体六六六50ug/ml19支142丁体六六六50ug/ml19支143O,P’-DDT50ug/ml19支144P,P’-DDD50ug/ml19支145P,P’-DDT50ug/ml19支146P,P’-DDE50ug/ml19支147丙酮中敌百虫溶液标准物质1.0mg/ml2支148铅溶液标准物质1000ug/ml5瓶149镉溶液标准物质1000ug/ml5瓶150铬溶液标准物质1000ug/ml5瓶151砷溶液标准物质100ug/ml10支152汞溶液标准物质100ug/ml10支153苋菜红溶液标准物质0.50mg/ml4支154胭脂红溶液标准物质0.50mg/ml,10ml4支155山梨酸溶液标准物质1000ug/ml4支156柠檬黄溶液标准物质0.50mg/ml4支157日落黄溶液标准物质0.50mg/ml4支158赤藓红1000µ g/mL5支  第七标段:实验室耗材序号名称规格/型号单位数量1心电图纸58mm/卷盒1002样品杯个个50003听诊器个个5475%酒精500mL/瓶瓶2505一次性塑料试管12mm*12cm个100006纱布卷卷3071000uL枪头500支/袋袋508200uL枪头1000支/盒盒509PE手套包包5010一次性鞋套包包1011一次性接种环(进口)1000支/箱箱712健之素100片/瓶瓶1013一次性吸管400支/箱箱114带拉链采样均质袋100个/包包515一次性无粉乳胶手套20盒/箱箱2016进口记号笔(进口)12支/盒盒1017无菌棉签(进口)100支/盒盒618无菌吸管(进口)400支/箱箱2197cm一次性平皿1000个/箱箱6209cm一次性平皿500个/箱箱1021一次性吸管(进口)1mL×100支/盒盒1022一次性吸管(进口)10mL×50支/盒盒528血压计台台4291.8mL菌种保存管(进口)500支/包包10318孔载玻片(进口)50片/盒盒10331.8mL血清管盒100孔/盒盒1035棉签1000支/包包1153650mL离心管(进口)25个/包包10037无菌棉签1000支/箱盒2381.5mL离心管1000个/盒盒1039200ul薄壁管1000个/盒盒540一次性帽子包包11041双面胶16卷/组组2004220ul吸头1000个/盒盒50431.5mL离心管架个个1044200ul薄壁管架个个1045X光片14*14/100张/盒盒3046碘伏瓶瓶2004784消毒液500g/瓶*20/箱箱548一次性口罩10/包包24049采血垫个个2050一次性小中单个个200051利器盒6升升20052消毒液(喷雾剂)瓶瓶20053金星1号消毒液20瓶/件件1054健之素瓶瓶10055止血带米米10056消毒盒个个4057一次性床单大包200058肺功能校准筒3-5升升159肺功能记录纸(卷)宽58毫米/卷卷10060显影粉箱箱661定影粉箱箱662医用白色胶布筒筒1063心电图纸280*210毫米/卷卷10064心电图电机线套套265医用脱脂棉卷卷1566耦合剂箱箱6671.5ml离心管架36孔个10685ml试管架50孔个369眼科剪 把1070眼科镊 把1071手术剪 把3072手术镊 把3073宠物推 把274大动物解剖器械(28件装) 套175开胸器 个1076斩鼠器 台177砍骨刀 把278大鼠、小鼠灌胃针 支3079色谱专用纯棉白色手套双1580乳胶管卷(100米)卷281橡胶管粗米5082橡胶管细米5083样品存放用自封袋12cm*18cm个80084优质超强化锡纸宽45cm长15m一盒盒485长把不锈钢药勺长30cm个5086乳胶吸头 个5087锡纸 盒388纯棉白手套 双5089废液缸2000ml或以上个1090废液缸2000ml或以上个2091厌氧盒(进口)7L/个个292厌氧产气袋(进口)20个/盒个593厌氧指示剂(进口)100个/袋个1  第八标段:病媒生物监测和鉴定器材  1、鉴定和监测器材序号品名规格单位数量1昆虫捕网伸缩杆组合式圈可拆套52专用捕蚊帐80x80x155cm(梯形)顶53专蚊帐支架194cm,组合式套54电动吸蚊器手持式只105诱蚊灯紫外光,220v/24w盏56诱蚊灯二氧化碳,充电电池套57诱蚊灯白灯,充电电池套58蚊虫收集瓶250ml塑料罐只1009捕蝇笼折叠式只610毒瓶13.0x4.0cm只1011粘蝇纸70cm/卷卷50012计数器手动,5位数枚213电子天平0.1~0.5g台114卡尺20cm,不锈钢把215放大镜5x, 10x只216体视解剖镜加2物镜0.5X,2X台117粘蟑纸张100018耐用乳胶手套中号副1019防护服大、中套620记号笔12支/盒盒121自封口塑料袋25×15cm只10022野外作业服大/中/小套1023野外作业鞋高腰胶鞋双1024凡士林油500g/瓶瓶225干燥剂500g/瓶瓶226乙醚500ml,化学纯瓶227氯仿500ml,化学纯瓶228针插三级台亚克力制件229昆虫针台件130KT板白色张131软木块12x4.0mm(100个/包)包532眼科镊子直10cm把533眼科镊子弯10cm把534眼科剪子直10cm把535眼科剪子弯10cm把536昆虫标本针00#~5#,100支/包包7(各1包)37昆虫标微针100支/包包138持针钳12.5cm把239昆虫解剖刀笔式把1040昆虫解剖针粗、细两种把5×241玻璃刻度吸管5ml、10ml,2大吸球支10×242玻璃移液滴管140mm,带洗 耳球支1043玻璃量杯100ml只544塑料量杯100ml只545昆虫标本盒26x20x8cm 亚克力只646昆虫标本盒木盒,漆布,玻璃面只1047压片标本盒50片隔 亚克力只248载玻片7cm*2.5cm100149盖玻片22mm*22mm100150玻片双标签24mm* 22mm50551园玻璃标本缸小90*210mm只252磨口玻璃瓶250ml只1053磨口玻璃瓶500ml只1054滴瓶125ml白色、茶色只555多层纱布口罩12层只1056单层口罩一次性,10只/包包1057医用帽一次性,10顶/包包1058鼠夹中型只10059鼠笼大只360鼠笼袋大、中号55cm x 48cm条10×261捡鼠钳中号把562LED手电14灯把363食物诱饵面包、花生500克2  2、简单病媒昆虫监测箱序号物品名称数量序号物品名称数量1昆虫采集网(一头二网)1套23无钩手术镊子(16cm)1把2电动吸蚊器(带一对2号电池)2只24小指形管(装蠓标本,不锈钢罐装)12支3监测专用标准蚊帐1顶25标本管(盛蚊幼虫,塑料标本罐装)12支4便携式蚊帐支架(单独背包)1付26大标本管(收集蜚蠊蝇标本,塑罐)8支5蚊幼虫采集网2把27酒精瓶(盛装75%酒精)1只6蚊幼虫采集勺(兼量杯) 1只28乳头吸管(吸酒精滴于标本管)1支7蚊幼虫收集瓶(第25项塑料盒兼)1只29不干胶带1卷8PH试纸(测蚊滴酸碱度)1本30计数器1枚9毒瓶1个31led手电筒(带5号电池3块)1只10有机玻璃昆虫标本器械盒1个32诱蟑螂盒(蜚蠊数量监测)5只11折叠式放大镜(15x2倍)1只33诱蟑喷雾剂(蜚蠊数量监测)1枚12昆虫解剖针1支34脱脂棉1袋13昆虫解剖刀1支35标本冷藏杯(病原监测标本暂存)1只14昆虫针00~5#(100支/包x7)7包36卷尺(3米)10面15昆虫微针(每包100支)1包37多功能刀1把16昆虫直镊(10cm)1把38带封口塑料袋(25x15cm)10只17昆虫弯镊(10cm)1把39耐用乳胶手套1付18直昆虫剪(10cm)1把40蚊蠓叮咬防护服1套19弯昆虫剪(10cm)1把41医学媒介生物监测记录表10份20昆虫采集标签(现场采集记录签)1盒42记录笔1支21昆虫针插三级板1件43医学媒介生物监测手册1本22直尖手术剪(14cm)1把44防震昆虫采集箱(盛装以上备品)1只备注:由于该箱容积限制,诱蚊灯、蝇笼等器械等备品未包括在内,可另行配置。  3、病媒生物监测相关环境条件监测仪器箱装箱单编号仪器名称用途数量1风向风速仪监测外环境风向风速1套2温湿度计监测内外环境温度湿度1只3海拔仪测量监测地海拔高度1只4指南针确定监测地域方向范围1只5照度计监测蚊蠓在不同光照动态1台6led放大镜组现场观察鉴定标本(4枚/套)1套7望远镜观察监测现场一定范围生态环境1副8高清晰超微距数码拍照系统监测现场数码记录媒介生物特征19铝合金箱盛装以上仪器装备1只  备注:详细的采购内容、数量、技术参数以发出的招标文件为准。  七、合格供应商资质及服务要求:  1、营业执照(复印件并加盖公章)   2、组织机构代码证(复印件并加盖公章)   3、税务登记证书(复印件并加盖公章)   4、法定代表人授权书(投标文件正本附原件,副本附复印件并加盖公章),法定代表人直接投标可不提供 投标文件须提供法人与被授权人身份证明材料复印件   5、由投标人所在省(市)/县(区)检察机关出具的近三年内无行贿犯罪档案记录的书面告知函(复印件并加盖公章)   7、第三标段经销商投标需提供医疗器械经营许可证,制造厂商投标需提供医疗器械生产许可证   8、与此项目相关的其他资质证明文件   备注:1、详细的其它资质证明文件以招标文件为准   2、本项目不接受联合体投标。  3、本项目接受网上报名。  八、报名地点:宁夏公共资源交易中心四楼。(报名时需携带以上资质,资质符合方可领取招标文件。)  领取招标文件地点:宁夏恒盛招有限公司。(银川市国际贸易中心C栋12楼008室。)  报名及领取招标文件时间:2013年1月31日起至2013年2月26日(节假日除外) [上午8:30—11:30]及[下午14:30—17:30]。招标文件每份400元,售后不退。  九、投标文件递交截止时间:2013年2月27日上午8:30时整。  十、开标时间:2013年2月27日上8:30时整。  开标地点:宁夏公共资源交易中心。  地 址:银川市兴庆区北京路与正源北街交叉路口汽车大世界对面。  宁夏恒盛招标有限公司  2013年1月31日
  • MALDI-TOF应用 | 指尖上的食源性病原体鉴定
    导读指尖上的食源性病原体鉴定 目前新冠病毒仍在全球肆虐,做好个人的卫生防护非常重要。古人云:病从口入。意思是疾病多是由食物传染。据世界卫生组织(WHO)报道,全球每年发生约5.8亿例由食品引起的疾病,其中约有35万例死亡。由于食源性细菌通常通过摄入受污染的食物进行传播,因此不适当的食物处理可能会威胁到食物的安全性。双手是日常生活中我们与外界接触最多的部位,也使得手成为病菌传播的重要中转站。不干净的手部皮肤上每平方厘米密布着上百万个细菌,因此洗手能很好的去除常见致病菌。公共卫生专家强调,应采用肥皂液或洗手液以少量水反复揉搓后,在流动水下冲洗干净。食源性致病菌 食品致病菌是可以引起食物中毒或以食品为传播媒介的致病性细菌。致病性细菌直接或间接污染食品及水源,人经口感染可导致肠道传染病的发生及食物中毒以及畜禽传染病的流行。食源性致病菌是导致食品安全问题的重要来源。常见食品致病菌主要有痢疾杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、蜡样芽胞杆菌、布氏杆菌、副溶血杆菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌等。 以金黄色葡萄球菌为例,金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,广泛存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌在适当的条件下,能够产生肠毒素,引起食物中毒。近几年,金黄色葡萄球菌引发的食物中毒报道层出不穷,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黄色葡萄球菌成为仅次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。 探究指尖上的微观秘密 受试者在含有胰蛋白大豆琼脂和5%绵羊血的血琼脂培养基上轻轻印上5个手指的指纹。将血琼脂平板上的来自于指纹的细菌置于5%CO2培养箱中37℃培养18至48小时。然后从培养皿中选择不同的单一细菌菌落转移至不同的血琼脂平板上进行纯细菌的培养 (图1) 。 图1. 细菌传代培养 快速鉴定过程采用岛津iDPlus微生物鉴定系统,其工作流程由样品制备、质谱检测和SARAMIS数据库鉴定三个阶段组成(图2)。取琼脂平板上的单菌落溶解于20μL的20%甲酸溶液中。将1μL的裂解液点在不锈钢靶板上,再点上1μL基质溶液。然后,混合物在室温下干燥,使基质和分析物分子形成共结晶。使用MALDI-TOF iDPlus Performance进行质谱检测。将样品质谱图与SARAMIS数据库中的超级谱图进行比对来进行鉴定。 图2. iDPlus微生物鉴定流程图 指尖上都有哪些细菌? 未洗手的人指纹样本中发现了14种微生物 (表1)。其中,从未洗手的指纹样品中发现了蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。这两种菌属于疾病控制和预防中心列出的食源性致病菌。当感染者赤手触摸或摄入食物时,这些细菌很容易被传播。图3a和3b显示蜡样芽孢杆菌(a) 和金黄色葡萄球菌 (b) 的质谱图和细菌培养形态图。 【重要提醒!】研究显示,充分洗手后,在洗净手指的指纹样本中已找不到病原体。 表1 iDPlus平台对受试者未洗手的指纹样品微生物鉴定结果图3. 蜡样芽孢杆菌 (a) 和金黄色葡萄球菌 (b) 的质谱图和细菌培养形态图 “看见”细菌和“认识”危害的有效手段 隐藏在微观世界中的各类细菌几乎布满我们日常生活中的所有区域,完全的隔离和避免接触是不现实的,让大众能够“看见”和充分“认识”细菌的所在和危害,可以引起社会卫生观念的提升和全民健康意识的提高,科学仪器就是此间有效的手段。岛津iDPlus Performance结合SARAMIS数据库快速可靠地用于未清洗的手指上的微生物鉴定(包括各种食源性病原体)以及洗手后不存在微生物的验证。正确处理食物和实施卫生管理对于降低人与人之间传播感染性病原体的风险非常重要。 友情提示 疫情期间,建议大家在处理食材前后、进食前、如厕后、拧鼻涕后、戴口罩前,以及就医和接触动物后及时洗手。最后提供正确洗手姿势供大家参考,口诀是“内、外、夹、弓、大、立、腕”,谢谢!
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