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四氮唑蓝

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四氮唑蓝相关的资讯

  • CISILE国际科学仪器展览会迎来十岁诞辰
    科学仪器是经济社会发展支柱性、战略性的产业,对促进国民经济、科学技术、公共安全、国防建设的发展都有巨大的推动作用。科学仪器的发展水平标志着国家创新能力和科学技术发展的水平。目前,世界各发达国家都把研发先进的大型科学仪器和实验设施,构建世界级先进实验基础设施平台,上升为创造世界一流科研成果,培育和吸引优秀人才的一项战略措施。随着全球经济和社会发展及各国政府的高度重视,世界科学仪器产业与技术的进展突飞猛进,新技术异彩纷呈,新产品不断涌现,科学仪器研究和应用进入一个前所未有的高速发展期。  “十二五”是我国全面建设小康社会的关键时期,是提高自主创新能力、建设创新型国家的攻坚阶段。《国家“十二五”科学和技术发展规划》明确提出,大力发展七大战略性新兴产业,其中高端装备制造,重点发展大型先进运输装备及系统、海洋工程装备、高端智能制造与基础制造装备等。实施高速列车、绿色制造、智能制造、服务机器人、高端海洋工程装备、科学仪器设备等科技产业化工程。  中国国际科学仪器及实验室装备展览会(CISILE)是响应建设创新型国家需要而打造的最高端展示和交流平台,十年来,CISILE见证了中国科学仪器市场由小到大,由大而强的发展历程,CISILE因市场的扩大而快速发展,成为同类型展会中增长最快的展会。经过了十年的倾力打造和悉心培育, CISILE的国际化、专业化、市场化、品牌化水平不断提高,被业内人士普遍公认为“中国科仪第一展”,是我国乃至整个亚洲规模最大、产品覆盖面最广、专业水平最高、成交额最高的科学仪器行业盛会。  CISILE是业内领军企业全面展示最新技术、产品和解决方案的最佳平台,在促进国际科技交流与合作、推动我国科学仪器产业发展方面发挥了积极的作用。这也是该展会能够吸引越来越多展商和观众的关键所在。  “第十届中国国际科学仪器及实验室装备展览会(简称CISILE 2012)”将于2012年5月15-17日在北京中国国际展览中心隆重召开。展会经国家商务部批准,在中国机械工业联合会、中国分析测试协会、中国教育装备行业协会的支持下,由中国仪器仪表行业协会主办,北京朗普展览有限公司承办。鉴于北京展览馆已容纳不下快速发展的CISILE,CISILE 2012决定将举办地迁移至中国国际展览中心,并于今年10月13日在北京金源大酒店举行了盛大的新闻发布会,向业界和新闻媒体通报了换馆后CISIL的展示规模、宣传方案、观众组织、招商筹备工作等。换馆后,CISILE 2012将从上届的700个展位  增长至1200个展位,增长率达到创纪录的71%。  2012年,CISILE将迎来她的十岁诞辰,为庆祝CISILE的十届大庆,展览会办公室推出了一系列的新举措,将在扩大展会规模的同时,进一步加大宣传推广和观众组织力度,重点培育2012中国实验室技术发展论坛,完善CISILE自主创新奖评选活动,确保CISILE2012在展示规模、参展效果和国际影响力方面都得到大幅度的提升。  目前,CISILE 2012的新举措取得实质性的效果,自招商工作开展以来,业界企业参展踊跃,截至11月底,原定国展的五个展馆的1200个展位,已经有2/3被订出,参展报名企业423家,还吸引了德国、韩国等十多个国家展团,预计招商工作将于2012年4月截止,届时将有超过700多家企业报名参展,无论在展商数量和展示面积上都将大大超过预期。随着招商工作的深入,展览会办公室随即启动了专业观众的组织工作,除了充分利用展览会办公室庞大的专业观众数据库进行组织与邀请外,还另辟蹊径,通过与国外类似知名展会及专业组织的协作,成功争取到德国、韩国、马来西亚、印度等国家的仪器行业机构组团参观CISILE 2012。与此同时,还与国内战略合作伙伴协作,将组织各地相关科研机构和大专院校组团前来参观、采购、洽谈。  让我们共同期待CISILE 2012的更多精彩!  更多详情,请登陆大会官网 www.cisile.com.cn或致电大会组委会:010-62928860 62928975
  • 百灵达将参加第四届荷兰阿姆斯特丹国际水处理展
    我们一直致力于创造更环保、更健康的高品质生活!尊敬的先生/女士:英国百灵达公司诚挚地邀请您莅临我公司第四届荷兰阿姆斯特丹国际水处理展(AQUATECH CHINA)展位并给予指导.展会名称:荷兰阿姆斯特丹国际水处理展中国展时间:2011年6月1日- 3日地址:上海展览中心百灵达展位号:3P32我们将敬候您的光临! 垂询详情请洽: 英国百灵达公司北京代表处 电话:(8610) 5126 1868 -809地址:北京市朝外大街乙12号 昆泰国际大厦1601网址:www.palintest.cn*欢迎提前与我公司联系咨询相关产品信息,我们将尽量为您准备样机。
  • 天美公司参加第四届蛋白质和多肽大会暨生命科学仪器展览会
    2010年3月23日-25日,由中国医药生物技术协会主办,大连百奥泰生物技术有限公司承办的&ldquo 第四届蛋白质和多肽大会暨生命科学仪器展览会&rdquo 在北京国家会议中心举行。大会以&ldquo 蛋白质与多肽领域的新领军者&rdquo 为主题,旨在为全球从事蛋白质和多肽研究的科学工作者、研究机构和企业搭建学术、技术和商务自由交流的平台。会议共吸引了世界40多个国家和地区的1000余人参加。 天美(中国)科学仪器公司参与了此次盛会,并展出德国IMPLEN Nanophotometer Pearl核酸蛋白分析仪及日立Hitachi CT15E微量超速离心机。市场部生化产品专家史晓春博士在大会中做了专题报告:Introduction of Implens Nanophotometer and Kurabos Nucleic Acid Extraction System。 展品介绍:【Implen】微量核酸蛋白分析仪Nanophotometer Pearl (珍珠版)1. 目前市场上样品使用量最少,仅需0.3微升,且新型的样品室设计使得对超微量样品的核酸、蛋白质和肽的浓度可进行精确检测。波长范围从190nm到1100nm。 2. 极宽的样品检测范围,从2ng/ul 到18750ng/ul(dsDNA)。使用不同光程的样品盖,样品可自动稀释为5倍、10倍、50倍、100倍、250倍,故无需担心稀释误差。 3. 开机无需等待,即开即用。操作时间最少,3.5秒即可完成 200nm-950nm波长的数据采集 4. 除了使用超微量比色池,也可选择使用常量比色皿(10mm光程) 5. 精度高且机器终身准确。具有密封的光路系统且无拆开部件,免去了昂贵的校正费用。使用了专利的样品压缩技术,避免样品的挥发及待测样品种类的受限。 6. 可选择不同的数据输出方式:通过内置打印机、SD-RAM卡、USB、或蓝牙输出。便于携带,可用于户外操作。详见链接:http://www.instrument.com.cn/netshow/SH100322/C116281.htm
  • 安眠药中艾司唑仑的岛津检测方案
    艾司唑仑(estazolam)又称舒乐安定,是一种苯二氮卓类抗焦虑药,作为精神药品它可能被用作毒品的来源之一。化学结构式如下, 由于艾司唑仑的中枢抑制作用,过量服用后会出现持续的精神紊乱、嗜睡、心动过缓、呼吸困难、严重肌无力等临床症状。艾司唑仑属于《中华人民共和国精神药品品种目录》中第二类管制精神药品,同时也是农业部禁止在饲料和动物饮用水中使用的精神药物之一。建立针对艾司唑仑的简单、便捷、灵敏的检测方法非常必要。 岛津超高效液相色谱(UHPLC)LC-30A采用填料粒径1.6 μm的色谱柱,全面提升了分离效率、峰容量和灵敏度,结合岛津LCMS-8030三重四极杆质谱仪,可以对目标化合物进行快速、灵敏的分析。为此,本实验方法采用了岛津超高效液相色谱仪LC-30A与三重四极杆质谱仪LCMS-8030联用系统。具体配置为LC-30AD×2(输液泵),DGU-20A5(在线脱气机),SIL-30AC(自动进样器),CTO-30AC(柱温箱),CBM-20A(系统控制器),LCMS-8030(三重四极杆质谱仪),LabSolutions Ver. 5.41(色谱工作站)。 本方案建立了使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8030联用测定安眠药中艾司唑仑含量的方法。艾司唑仑在0.5~1000 μg/L浓度范围内线性良好,标准曲线的相关系数为0.9999以上;精密度实验结果显示,连续6次进样保留时间和峰面积相对标准偏差分别在0.16%和2.05%以下,系统精密度良好。 欲知详情请点击超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定安眠药中的艾司唑仑. 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所为扩大中国事业的规模,于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司。 目前,岛津企业管理(中国)有限公司在中国全境拥有12个分公司,事业规模正在不断扩大。其下设有北京、上海、广州分析中心;覆盖全国30个省的销售代理商网络;60多个技术服务站,构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。 岛津作为全球化的生产基地,已构筑起了不仅面向中国客户,同时也面向全世界的产品生产、供应体系,并力图构建起一个符合中国市场要求的产品生产体制。 以“为了人类和地球的健康”为目标,岛津人将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn。
  • 剔除有害物作饲料添加剂 三聚氰胺奶粉可变废为宝
    昨日,三达集团在厦门称,利用膜分离纯化手段,可剔除分离三聚氰胺奶粉中的有害物质,变废为宝――变成动物饲料添加剂。蓝伟光甚至建议,不妨换一种思路处理三聚氰胺奶粉问题,批准建设一座有毒奶粉无害化处理的示范工厂。  三聚氰胺奶粉销毁遭遇技术难题,厦门市一公司建议剔除有害物质作饲料添加剂  毒奶粉、毒奶糖阴魂不散,都是三聚氰胺惹的祸。10万吨毒奶粉的销毁,竟然成为一道技术难题。昨日,三达集团在厦门称,利用膜分离纯化手段,可剔除分离三聚氰胺奶粉中的有害物质,变废为宝――变成动物饲料添加剂。  三鹿奶粉事件之后,中央部委三令五申三聚氰胺奶粉必须销毁。毒奶糖事件之后,人们才发现,各大企业封存的三聚氰胺奶粉总量超过10万吨,如何销毁处理已成为极为头痛的难题:用作燃料对锅炉损伤太大,作为水泥配料又发现生产的产品不符合质量标准,焚烧导致新的环境污染,批量填埋担心被别有用心的人挖出来……  销毁10万吨三聚氰胺奶粉,在厦门三达集团董事长蓝伟光看来,“不仅企业要承担很高的销毁成本,本身也是一种极大的浪费”。他呼吁,利用膜分离纯化手段,10万吨所谓毒奶粉可以不毒,甚至变废为宝。  他说,三聚氰胺本身是一种低毒的化工原料。如果人们能够通过现代膜分离纯化技术,把问题奶粉中的三聚氰胺含量降低到安全水平而不影响奶粉中的营养及其他有效成分,目前封存的10万吨奶粉将重新成为有用的经济社会资源。  据称,厦门三达集团早在2008年发生三聚氰胺事件的第一时间,就与乳品企业合作,经过三个月的努力,采用纳滤膜分离技术实现对三聚氰胺奶粉的无害化处理实验,将奶粉中的三聚氰胺的浓度降低到1PMM以下。  这种膜,就是一种纳滤膜。牛奶的有效成分主要为蛋白质、乳糖、维生素等大分子物质,可以被纳滤膜有效截留,而有害奶粉中的三聚氰胺相对分子量为126.15,能被纳滤膜有效脱除。  借此解决方案,即使问题奶粉中的三聚氰胺含量高达2000毫克/公斤奶粉以上,在其营养及其他成分得到有效保留的前提下,也能使三聚氰胺的含量降低至1毫克/公斤奶粉以下,符合国际上最为严格的质量控制要求。但考虑到人们的心理安全因素,蓝伟光建议作为动物饲料添加剂使用。  蓝伟光甚至建议,不妨换一种思路处理三聚氰胺奶粉问题,批准建设一座有毒奶粉无害化处理的示范工厂。
  • 大分子互作出类拔萃,小分子互作不咸不淡?用“实例”证明“实力”
    近年来,分子互作分析仪市场涌现出很多新品牌、新产品参与市场竞争,技术多元化,“百花齐放”。目前国内外分子互作分析仪厂商已涌现近20余家,为帮助广大科研工作者了解前沿分子互作分析技术、增强业界相关人员之间的信息交流,同时也为用户提供更丰富的分子互作分析产品与技术解决方案,仪器信息网特别策划了《“百舸争流”,谁将成为下一代金标准?——分子互作技术与应用进展》专题。本期,我们特别邀请到赛多利斯生物分析高级应用经理陈涛先生谈一谈赛多利斯的分子互作技术以及应用进展。赛多利斯生物分析高级应用经理 陈涛陈涛,赛多利斯生物分析高级应用经理,从事生物层干涉技术(BLI)类产品的技术支持12年,有着丰富的Octet®使用和troubleshooting经验,承担了国内华东地区现有客户的售后支持,并多次举办了在线培训和其他各种形式的培训班。在他的支持下,目前仅国内利用生物层干涉技术发表的SCI就有500余篇,是互作技术领域非常知名的“陈老师”生物层干涉(BLI)技术是一种非标记技术,可实时提供高通量的生物分子相互作用信息。此技术采用”浸入即读”的生物传感器对样品直接进行检测,无需对检测样品做任何荧光或同位素标记【1】,也不存在流路系统,从而实现更简便、更快速的分子互作定量分析。2020年,BLI技术被收录于美国药典1108章节,成为药物结合活性分析的标准方法之一。作为将BLI技术应用于分子互作检测的开创者和引领者,赛多利斯Octet®分子互作分析系统被广泛应用于包括蛋白、抗体、病毒颗粒、疫苗、多肽、小分子以及DNA/RNA等各类生物分子间相互作用分析。BLI技术的动力学分析可用于检测相互作用的亲和力以及可逆的非共价结合的结合常数(kon)、解离常数(koff)以及亲和力常数(KD)。典型的非共价结合由静电作用、氢键、范德华力和疏水作用组成。分子之间的特异性相互作用对生物学的许多过程以及药物研发至关重要【2】。凭借高通量、非标记、实时定量且无液路的特点,Octet®在大分子相互作用分析和生物药研发领域具有突出优势。越来越多的高分文献及应用实例证明了BLI技术在小分子、化合物片段、未知样品垂钓、竞争分析等应用中表现优异,传感器分析模式也更容易开发灵活和创意的检测方案。BLI技术在小分子互作分析的应用案例BLI技术用于片段化合物筛选基于生物传感器的片段化合物筛选是药物研发过程中一个非常具有价值的工具。这种方法优于许多其他的生化方法,因为苗头化合物可有效地通过具体的结合图谱以及响应值从非特异性或非理想的相互作用中区分开来,从而降低假阳性。BLI技术通过监测生物分子结合导致的光的干涉图谱的变化实现分子间的相互作用的实时检测。Charles A. Wartchow等【3】将重组表达纯化得到AVI-Tag生物素标记的蛋白或通过体外的方式标记生物素(biotin-LC-LC-NHS)固化至链酶亲和素传感器上。通过缓冲液建立基线噪音信号,以基线噪音信号的3倍标准差为阈值筛选苗头化合物(图1)。使用了包含6500种化合物的片段文库,以BCL-2、JNK1、eIF4E等蛋白为靶点进行了筛选,比较了这些靶点的苗头化合物的比率。图1 根据化合物的信号值筛选苗头化合物【3】Francesca E. Morreale等【4】同时使用差示扫描荧光(DSF)和BLI技术筛选E2泛素连接酶Ube2T的抑制剂。将Ube2T固化在链霉亲和素传感器上,对片段库的化合物进行筛选。利用DSF方法筛选出4种化合物,而采用BLI方法也筛选出4种化合物,其中有2种是同时用两种方法都筛选了出来。所有六种化合物用核磁共振(NMR)进行了验证并确认这些化合物在靶点蛋白上的结合位点。新冠病毒的RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)是理想的抗病毒靶点。中国医学科学院的研究人员【5】首先通过基于结构的虚拟筛选,选择结合最强的几十个hits,通过Octet高通量分析这些化合物与靶点SARS-CoV-2 RdRp的结合活性,发现Corilagin (RAI-S-37)作为SARS-CoV-2 RdRp的非核苷抑制剂,KD值达到0.54 μM。在细胞外和细胞活性检测中均能有效抑制聚合酶活性。Corilagin具有良好的安全性和药代动力学的数据,使其成为新冠肺炎潜在的治疗药物。化合物为分析物的亲和力检测 化合物药物与靶点的动力学参数是非常重要的表征参数,直接影响到了化合物在体内的半衰期以及所需的药物剂量。苗头化合物的亲和力通常比较低(10uM),而通过修饰改造后的小分子化合物的亲和力可以1 μM级别。多数情况,将蛋白靶点固化在传感器上和不同浓度梯度的化合物作为分析物。Chen P等【6】通过BLI技术进一步验证了化合物GSK2801与溴结构域(bromodomain)蛋白家族BAZ2B的结合,亲和力为60 nM。 BLI结果与ITC结果一致,且BLI技术可以实时监测分子间的相互作用的整个过程,GSK2801与BAZ2B的结合呈现快结合与快解离的结合模式(图2,ka 1/(Ms),1.57±0.02×105;kd 1/s,6.95±0.058×10-3)。图2 GSK2801与BAZ2B的结合解离原始图【6】Leah N. Makley等将突变的晶体蛋白cryAB固化在链霉亲和素传感器上,用BLI技术检测化合物与cryAB的相互作用,测得KD为29 μM。用差示扫描荧光(DSF)也观测到不同浓度的该化合物对cryAB熔点的改变。化合物为固化物的亲和力检测考虑到空间位阻与修饰后化合物的活性,一般在化合物的非活性基团上偶联一个生物素,再将化合物固化在链霉亲和素传感器上,并且生物素与小分子之间有10个碳的连接臂。Basudeb Maji等【7】利用BLI技术筛选cas9的小分子抑制剂,并且合成了生物素化的小分子,固化在链霉亲和素传感器上,然后和七个浓度的Cas9/gRNA复合物结合,测得亲和力为700 nM(图3)。 图3 化合物与不同浓度的Cas9/gRNA复合物的结合解离图,右边为生物素化小分子的结构【7】如果化合物有氨基,也可以用氨基偶联传感器对化合物进行固化。Terry F. McGrath等【8】将软骨藻酸(Domoic acid),固化在氨基偶联传感器上,用竞争法检测软骨藻酸的浓度,灵敏度可以达到2 ng/mL。另外,化合物也可以偶联在诸如牛血清白蛋白(BSA)等载体蛋白上,然后疏水固化在传感器上。Melanie Sanders等【9】将鸡卵白蛋白(OVA)偶联的呕吐毒素固化在疏水传感器上,与呕吐毒素的抗体反应,其亲和力在pM级别。化合物竞争实验如果已知某化合物与蛋白结合,需要观察另一个化合物是否阻断这种结合。可以参考前面“化合物为固化物的亲和力检测”部分将化合物进行固化,然后检测另一个化合物与蛋白的混合物。Kahina Hammam等【10】将生物素化的Masitinib固化在链霉亲和素传感器上,然后检测Imatinib与脱氧胞苷激酶(dCK)的混合物。如果Imatinib与Masitinib结合的是dCK的同一位点,那么dCK/Imatinib复合物就不会和Masitinib结合了。图4 竞争法实验示意图【10】通过竞争实验可见,Masitinib与Imatinib几乎完全竞争,这证明了他们的结合位点一致。但是与核苷类化疗药物(吉西他滨、阿糖胞苷和地西他滨)竞争关系不明显。BLI技术还可以检测化合物是否可以阻断受体配体的结合,并计算IC50。Zhu J 等【11】用BLI技术检测化合物NUCC-555对激活素(activin)和其配体结合的影响。将激活素配体ALK4-ECD-Fc固化至ProA传感器上,检测激活素与不同浓度NUCC-555的混合物。随着NUCC-555的浓度提高,由于NUCC-555与ALK4-ECD-Fc竞争结合激活素导致激活素与ALK4-ECD-Fc结合信号降低,IC50大概为1.6 μM。由此证明NUCC-555是选择性的竞争抑制激活素和其配体的结合。总结BLI技术不仅可以用来检测化合物与蛋白、细胞的相互作用【12】,也可以检测化合物与DNA/RNA【13,14】等其他物质的相互作用。应用BLI技术可以灵活的设计相互作用实验,比如将小分子固化或者蛋白质固化。固化方式可以根据蛋白所带的标签决定:组氨酸融合标签可以用NTA传感器或者已经固化了组氨酸标签抗体的传感器;如果蛋白带有生物素标签,可以用链霉亲和素传感器。一般来说,为了克服空间位阻和获得比较高的固化密度,建议选择链霉亲和素传感器固化蛋白。一般分析物需要知道明确的分子量和摩尔浓度才能获得结合常数(ka)和亲和力常数(KD)。分析物的分子量检测下限约为150 Da, Chenyun Guo等【15】用BLI技术成功检测了分子量142 Da的化合物并且获得了可观的信号(0.1 nm)。总之,BLI技术可以实现对相互作用更加定量化地测定,非常适合亲和力比较低的化合物检测。化合物解离比较快,传统方法有洗涤等步骤,可能造成结合的小分子被洗掉后产生假阴性结果。另外传统方法多数需要标记,可能改变靶点分子的构象,产生假阳性结果。BLI技术的非标记和实时检测能够克服传统方法的弊端,因此,小分子相互作用检测结果更加真实可靠。参考文献:1.A, Sultana. et al. Measuring protein‐protein and protein‐nucleic acid interactions by biolayer interferometry. Current protocols in protein science. 2015,79:19.25.1-262.Concepcion, Joy. et al. Label-free detection of biomolecular interactions using Biolayer interferometry for kinetic characterization. Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening.2009,12(8):791-8003.Wartchow, C. A. et al. Biosensor-based small molecule fragment screening with biolayer interferometry. J. Comput. Aided Mol. Des.2011, 25 :669-6764.Francesca E. Morreale. et al. Allosteric Targeting of the Fanconi Anemia Ubiquitin-Conjugating Enzyme Ube2T by Fragment Screening. J. Med. Chem.2017, 60:4093-40985.Li Q, et al. Corilagin inhibits SARS-CoV-2 replication bytargeting viral RNA-dependent RNA polymerase, Acta Pharmaceutica Sinica B, 2021.6.Chen P. et al. Discovery and Characterization of GSK2801, a Selective Chemical Probe for the Bromodomains BAZ2A and BAZ2B. Journal of medicinal chemistry,2016,59(4) :1410-14247.Basudeb Maji. et al. A High-Throughput Platform to Identify Small-Molecule Inhibitors of CRISPR-Cas9. Cell,2019,177:1067-10798.Terry F. McGrath. et al. An evaluation of the capability of a biolayer interferometry biosensor to detect low-molecular-weight food contaminants. Anal Bioanal Chem.,2013,405:2535-25449.Melanie Sanders. et al. Comparison of Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, Surface Plasmon Resonance and Biolayer Interferometry for Screening of Deoxynivalenol in Wheat and Wheat Dust. Toxins,2016, 8, 10310.Kahina Hammam. et al. Dual protein kinase and nucleoside kinase modulators for rationally designed polypharmacology. Nature Communications,2017,8:1420.11.Zhu J. el al. Virtual high-throughput screening to identify novel activin antagonists. J. Med. Chem.,2015,58:5637–564812.Verzijl, D. et al. A novel label-free cell-based assay technology using biolayer interferometry. Biosensors & Bioelectronics,2017,87:388-39513.Ting-Yuan Tseng. et al. Binding of Small Molecules to G-quadruplex DNA in Cells Revealed by Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy of o-BMVC Foci. Molecules.,2019,24(1), 3514.Ezequiel-Alejandro Madrigal-Carrillo. et al. A screening platform to monitor RNA processing and protein-RNA interactions in ribonuclease P uncovers a small molecule inhibitor. Nucleic Acids Research,2019,47(12): 6425–643815.Chenyun G. et al. Anti-leprosy drug Clofazimine binds to human Raf1 kinase inhibitory protein and enhances ERK Phosphorylation. Acta Biochem Biophys Sin. ,2018,1-6
  • 农业部今日将对鸡蛋三聚氰胺事件作说明
    近日有媒体报道称,继乳品之后,农业部即将出台三聚氰胺在饲料中的临时管理限量值。农业部畜牧业司司长王智才昨日对本报表示,农业部今日将对鸡蛋检出三聚氰胺的事件公布情况说明,是否出台限量值标准也将在今天揭晓。 近日有不少媒体报道,农业部将会同其他部门进一步修订饲料中三聚氰胺含量的标准。“这种说法不正确。”昨日,王智才接受本报记者采访时表示,三聚氰胺是违禁品,不允许往饲料里添加,农业部去年还对此进行了检查。  据悉,2007年3月份中国出口美国的宠物饲料被检测出三聚氰胺超标后,农业部在当年6月份就发布了饲料三聚氰胺检测方法。正规饲料企业从去年起就开始增加了对饲料中三聚氰胺的检测。  今年7月22日,农业部办公厅发布“关于2008年上半年全国饲料质量安全监测结果的通报”,其中一项是饲料中违禁药物专项监测。其中,在全国288批次的蛋白饲料中检出三聚氰胺17批次,检出率5.90%。  王智才表示,农业部今天将对鸡蛋检出三聚氰胺的事件公布情况说明,是否出台三聚氰胺在饲料中的临时管理限量值,也将在今天揭晓。  ■ 相关反应  输港鲜蛋或须  公示“无三胺”  本报讯 (记者徐春柳)香港食物及卫生局局长周一岳昨天对媒体表示,目前正与国家质检总局讨论,考虑输港鸡蛋应写明“无三聚氰胺”的卫生证明书。  周一岳说,希望内地跟进香港发现的问题蛋。他们正与质检总局讨论,“不过这要等内地考虑和安排才可以。”  ■ 调查蛋白精身世  “三胺蛋白精并非出自中科院”  中科院被质疑“发明”三胺添加剂  本报讯 (记者鲍颖 甘浩)自鸡蛋也查出三聚氰胺后,人们开始怀疑鸡饲料环节出了问题。饲料中添加蛋白精的技术,被网友认为可能与三聚氰胺有关。中科院1999年一则“DH合成高蛋白饲料添加剂”技术转让的信息被网友翻出来晒在网上,因而遭受了“发明三聚氰胺”的质疑。  昨日,中科院新闻发言人蒋协助昨日出面否认,称已经成立调查小组,分析后足可证明中科院与“三聚氰胺饲料添加剂”无任何关系。项目中提到的“DH合成高蛋白饲料添加剂”的技术根本就生产不出三聚氰胺。  被指“推广发明三聚氰胺冒充蛋白质”的中科院专家高银相介绍说,那只是十年前的一个项目方案,并没有找到企业合作、投产,该技术也没申请专利。  这件事情已经给高银相的生活造成了一定困扰。他称,事发后他被停职接受调查,专家的鉴定结果出来后才刚恢复。  蛋白精 以三聚氰胺废料、羟甲基羧基氮等为原料,未经农业部审定批准,是非法饲料添加剂。对此,中国工程院院士、中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研究员陈君石称,“蛋白精是我国‘发明’的商业名词,其主要成分就是三聚氰胺,主要用于蛋白质虚高造假。”  本报记者 林文龙   ■ 调查政府公告  大连“问题鸡蛋”推迟公布月余?  韩伟集团称9月22日自检就发现问题,相关饲料厂本月1日已关停  本报讯 (记者孙旭阳)前日,大连市政府发布了有关“问题鸡蛋”的公告,但昨日未向媒体透露最新进展。大连韩伟集团董事长韩伟向记者介绍的事发经过却与政府公告存在矛盾之处。  这纸公告称,早在9月底就已获知韩伟集团出现问题蛋,输港问题蛋可能与饲养场使用的个别批次原料受到三聚氰胺污染有关。尽管已经过去一个月,但“有关部门正在对污染原因进行深入调查”。  究竟是韩伟集团自检发现问题,还是官方例检发现问题,双方各执一词。韩伟告诉本报,9月22日该集团蛋场在自检中就发现部分玉米酒糟中含有三聚氰胺,并对产品进行了召回。而大连市政府称,9月27日在接到辽宁省出入境检验检疫局的例行检查报告后,责令韩伟集团召回,暂停其出口。  昨日,媒体对沈阳新民明兴饲料厂现场的采访证实,该厂于10月初被关停,法人代表也在当时被刑拘。这一时间,与辽宁省出入境检验检疫局发现问题鸡蛋的时间相吻合,但当地政府有关部门和媒体并未公开此事。  直到10月26日,香港食物安全中心曝光“佳之选”鸡蛋三聚氰胺含量超标,韩伟集团和大连市政府才公开承认此事。对信息延迟一个月的原因,韩伟表示公司做好回收工作,已尽本分。大连市政府和辽宁省出入境检验检疫局则都拒绝回应疑问。
  • 做面包、蛋糕、酱料的中小型食品厂,都在用它们做配料生产!
    任何一款大受欢迎的面包和蛋糕,都要经过数道工序、层层把关和检查才能从生产车间抵达消费者的手中。做食品,就是做安全和质量。因为食品的重要性,食药监局对食品安全的监管越来越严格,生产数据要可追溯、产品安全检测得过关。对中小型食品企业来说,产品种类多一点,配方配料复杂一点,就会带来高昂的人工成本、生产管理成本,以及不可避免的人为失误,这些都是中小型食品企业难以言说的痛;但若引入多条全自动配方配料系统、成本高昂、还得培训专人进行维护管理。那么,在纯粹倚靠人工做配方配料和全自动生产之间,可有为中小型食品厂留下一条路呢? 有!用奥豪斯T81智能手工配料系统呀! 奥豪斯T81智能手工配料系统,就非常适合食品企业多个配方配料的生产操作及生产管理。别看这个仪表个头不大,但是功能可不容小觑! 只需要把它接到生产系统或电脑上,就可以通过电脑直接给生产线下发当天生产任务,生产员只需根据仪表的提示进行操作即可。这台仪表可以连接2-3台秤,一个扫描枪、一个打印机和一台电脑。称重零误差仪表会自动显示所需称重的物料及重量,投放过程中可以看到称重进度条,是否达到称重设定值、是否在称重误差范围内……一目了然。只有称重在误差范围内,仪表才会进入下一个物料的称重环节;否则就会报错。这样既可以防止物料错投,又可以避免浪费,还可以保证配方的精准。扫描枪识别物料,避免工人放错物料;打印机可按照您设定的打印格式进行打印;数据可追溯不仅如此,仪表还会自动储存每一次的生产操作记录,可存储100000条数据。不管是企业内部抽检、还是食品监管部门检查,都能让您做到有据可循。管理更清晰除了以上功能,奥豪斯T81智能手工配料还有三级权限管理功能,方便您内部的企业管理。分别为:只有配料软件管理员才可以看到配方内容并下达生产任务;生产操作员按仪表提示进行操作即可,工序减少、流程清晰、效率自然就提高了。仪表管理员可以进行仪表参数设置与校正等工作,方便您对仪表进行维护。「好厨子要配好刀」,好产品的生产,也离不开一台可靠、耐用、性能优异的称量设备。作为工业衡器设备厂家的佼佼者奥豪斯,致力于为每一家对产品品质有要求、有想法的企业,提供可靠耐用的衡器设备! 往期文章肉松行业的水分测定应用奥豪斯T81助力食品企业迎接“飞行检查”手工配料管理系统,让工业4.0不再是梦!称,以知轻重也——奥豪斯工业衡器的应用奥豪斯pH 计在食品行业的应用奥豪斯MB系列水分测定仪的精彩应用检测那些事儿 | 听说你的实验仪器又罢工了?低调高手从不显山露水 | 奥豪斯产品Party 如果心动的话,赶快联系我们,留下您的信息,我们的专业工程师将竭诚为您服务!喜欢这篇文章请点 在看 哟! ▼
  • 天美公司诚邀您参与第四届蛋白质和多肽大会
    第四届蛋白质和多肽大会暨生命科学仪器展览会将于2011年3月23日-25日在北京国家会议中心举行。本次大会是一次国际性的专业会议,将邀请国际著名专家,世界各国蛋白质和多肽协会领导,国际著名生物医药企业高管,大学课题组负责人及研究所负责人等2000多人参加会议。大会同时设置了生命科学仪器展览会,展览面积、专业群体、观众人数都将比上届大大增加。蛋白质和多肽大会(PepCon)是国际性的蛋白质和多肽领域的专业会议,致力于为全球的科学工作者、研究机构和相关企业搭建一个自由交流的平台,促进国际学术交流及商务合作。 第四届蛋白质和多肽大会将与第三届抗体大会、第三届疫苗大会和第三届生软大会在北京国家会议中心同时召开,四会联动! 天美(中国)科学仪器有限公司受邀参与此次盛会,并在会议中作专题演讲,现场还会展出仪器。诚挚邀请各方嘉宾莅临参观指导! 展览地址:北京国家会议中心 北京市朝阳区天辰东路7号展览时间:2011年3月23日-25日 09:00-17:00天美公司展位:12号
  • Monolith互作荣登Cell:清华/南方医大团队发现降低胆固醇新激素
    01研究背景在生命科学领域,肠道吸收胆固醇和肝脏合成新胆固醇之间的相互平衡对维持胆固醇的平衡至关重要,然而人们对这些过程的调节机制仍然知之甚少。本期案例研究首次发现并命名了一种肠道激素——Cholesin(肠抑脂素),并揭示了Cholesin在调控机体胆固醇稳态方面的作用和调控机制。Cholesin-GPR146信号轴介导了肠道胆固醇吸收和对肝脏胆固醇合成的抑制作用,这种新发现的激素胆固醇素有望成为防治高胆固醇血症和动脉粥样硬化的有效药物。下面,让我们一起探究这篇近期发表在Cell的优质文章吧!https://doi.org/10.1016/j.cell.2024.02.024IF: 64.5 Q102研究内容近日,清华大学生命科学学院王一国副教授和南方医科大学南方医学院张惠杰教授在国际知名期刊Cell上发表了 “A gut-derived hormone regulates cholesterol metabolism” 的论文。在此项研究中,作者选用NanoTemper公司的Monolith分子互作仪进行其中肠抑脂素受体的验证工作,MST的技术优势不负众望并发挥了重要作用。为了研究GPR146是否是Cholesin的受体,研究团队使用Monolith分子互作仪检测了Gpr146—/—在小鼠组织中Cholesin的结合情况。在Gpr146—/—小鼠的组织和原代肝细胞中,Cholesin的结合完全消失。进一步的实验证实Cholesin与GPR146的结合具有很高的亲和力。根据GPR146的保守性和预测结构,研究团队通过将6个氨基酸与丙氨酸重置生成了GPR146的突变体。与WTGPR146相比,突变体GPR146对Cholesin的亲和力明显降低,并且无法恢复GPR146—/—原代肝细胞与Cholesin的结合。所有这些体外和体内结合实验都证明GPR146是Cholesin的受体。在此验证工作的基础上,科研团队继续开展后续的实验。图1. 微量热泳动技术(MST)定量测定肠抑脂素-His与GPR146 (野生型或突变体)的结合亲和力。蓝色曲线代表的是野生型GPR146与肠抑脂素-His的结合,平衡解离常数是21.34±0.98 nM 红色曲线代表的是突变型GPR146与肠抑脂素-His的结合。平衡解离常数是971.0±91.5 nM。03技术优势在这篇科研工作中,通过微量热泳动(MST)技术检测到野生型和突变型肠抑脂素-His对GPR146结合的验证。该技术对于分子互作亲和力的检测,Monolith系列仪器不依赖于分子量的改变,蛋白用量少,可以在溶液中表征肠抑脂素-His与GPR146的亲和力,十分有利于蛋白的结构平衡。Monolith分子互作检测仪(点击图片 查看更多)
  • 量旋科技携“双子座”量子计算机,走进兰州交通大学
    量旋快讯NEWS2021年7月15日SpinQ7月15日,炎炎夏日中,深圳量旋科技有限公司(以下简称“量旋科技”)携最新一代桌面型核磁共振量子计算机“双子座”,走进兰州交通大学的课堂,为兰交大的师生们带来一场别开生面的量子计算主题报告。客户经理代表方坤做主题汇报据了解,活动现场,来自量旋科技的客户经理代表方坤,以“遇事不决,量子力学”为题,与兰交大的师生们进行了一场生动精彩的量子科技头脑风暴,并绘声地讲解和介绍了”双子座“桌面型量子计算机。双子座是一款真是的量子计算机,配备了易用的图形界面,内置量子模拟器模块及多种核心量子算法模块,同时还具有布洛赫球演示、用户自定义量子线路等多项功能,为量子计算教学提供了一套整体解决方案。“双子座”桌面型量子计算机热闹的汇报现场,吸引了来自兰州交通大学国家级计算机实验教学示范中心的老师们以及其他众多对量子世界感兴趣的师生们。师生们纷纷表示,量子计算作为推动新一轮科技发展的变革型力量,对学校培养创新性人才具有重要引领作用,同时,兰交大的同学们也纷纷呼吁,希望以“双子座”为核心的量子计算教学中心能尽快落地兰交大,以便大家真实的走进量子科技的场景中,切实感受量子计算的魅力。这次汇报在兰交大师生们连绵不断的掌声中落幕,这次难得的汇报分享,也给量旋科技带来了对未来的寄希,量旋科技将加快建设量子计算教育教学平台,发挥自身成熟产业模式与科研资源优势,不断推动和完善国内量子计算教育生态的体系建设,为进一步培养国内高校量子科技人才做贡献。
  • 2018国内首秀—Quanterix 单分子蛋白检测技术-simoa
    2018国内首秀—Quanterix 单分子蛋白检测技术-simoa 2018年3月9—10日,由生物谷举办的以“创新变革与机遇”为主题的2018年先进体外诊断高峰论坛暨三大平行会议“第三方检验实验室(LDTs),液体活检论坛、Biomarker研讨会”在上海盛大召开。其中“Biomarker—新型生物标志物发现与应用研讨会”平行会聚焦了体外诊断领域的新技术产业:微流控芯片,高通量技术,单细胞测序,CTC循环肿瘤细胞,纳米医学,ddPCR技术,单分子免疫阵列技术(Simoa),ctDNA,质谱检测,大数据,人工智能等等最新技术成果与应用案例纷纷亮相。 大会现场 美国Quanterix公司携手杭州纽蓝科技有限公司做为金牌赞助商参加本次会议,并于“Biomarker——新型生物标志物发现与应用研讨会”上做了“Monitoring health and disease progression with ultrasensitive biomarker analysis on the Simoa Platform”的主题演讲。分享了目前最灵敏的蛋白分子检测技术-simoa,可以检测到单个蛋白分子,达到飞克级别。同时赵明炜博士也介绍了simoa技术在肿瘤、神经、感染、心血管、免疫炎症等领域的应用。各科研、医疗、生物参会代表对此产生了浓厚的兴趣,纷纷前来展台咨询。Quanterix与杭州纽蓝尽心解答,得到了大家的广泛认可与支持。 展台现场 随着各类新型生物标志物相继被发现和利用,使得很多疾病有了更快速、更准确的诊断,因此生物标志物成了当下研究的热点。Quanterix核心技术是 SIMOA (SIngle MOlecular Array),单分子蛋白阵列检测技术。通过此次会议,Quanterix希望从应用、从实际出发,真正意义上地让标志物助力精准诊断,推动精准医疗发展。Quanterix首席科学家 赵明炜博士精彩演讲 Quanterix致力于数字化的蛋白标志物研究,携手纽蓝科技把世界最新的数字化单分子免疫技术带给中国的客户。 左三:纽蓝CEO / 右三:Quanterix Vice President
  • FIDA分子互作仪:带你复现Nature青睐蛋白质与核酸互作50分顶级发文思路,还不快学起来!
    研究背景Nature:清北团队合作发现CRISPR免疫增效子,建立Cas9核酸酶生长进化模型CRISPR-Cas系统是一种强大的基因编辑工具,但Cas9核酸酶活性仍需提高。现有的方法存在着种种局限性,例如优化序列可能破坏结构、改变表达方式可能导致副作用、使用辅助蛋白会增加复杂性等。因此,开发新的方法来增强Cas9核酸酶的活性仍是CRISPR-Cas系统研究中的一个重要课题。2024年5月29日,来自清华大学和北京大学的研究团队在Nature上合作发表了题为:Pro-CRISPR PcrIIC1-associated Cas9 system for enhanced bacterial immunity的研究论文研究团队通过生物信息学分析、结构生长轨迹分析、生化实验、冷冻电镜解析和大肠杆菌抗噬菌体实验等手段,发现了一类新型CRISPR免疫增效子PcrIIC1,可以显著增强Cas9核酸酶的活性。研究团队还建立了Cas9核酸酶生长进化模型,揭示了Cas9蛋白结构和功能的演变规律,并阐明了PcrIIC1增强Cas9活性的分子机制。这项研究为我们进一步理解CRISPR系统的进化历程,以及开发基于CRISPR免疫增效子的高效基因编辑工具奠定了基础。研究思路通过生物信息学分析,研究团队观察到一类新型关联基因(Novel-associated genes, NAGs),显著富集存在于较大蛋白体积的II-C型Cas9的基因簇中,并推测这些NAGs可能参与到Cas9介导的细菌免疫过程。图1. 结构生长轨迹分析方法(左)和II-C型Cas9的生长轨迹图(右)通过生化实验和冷冻电镜解析复合体结构表明,来自金黄色细菌属(Chryseobacterium sp.)的CbCas9生长出了一个全新的增强Cas9活性的β-REC2结构域,以及一个全新的能够与其关联基因PcrIIC1互作的CTH结构域。通过蛋白间相互作用,2个CbCas9蛋白和2个PcrIIC1蛋白能够形成异源四聚体复合物。图2. 冷冻电镜分析CbCas9和PcrIIC1结合的三个阶段蛋白质与核酸的分子互作实验表明,与单独的CbCas9相比,CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合进而体现出切割活性,对原间隔区相邻基序序列的兼容性更广,对错配的耐受性更强,抗噬菌体免疫性增强。研究利用溶液中标记的分子互作方式获得亲和力,得出与单独的CbCas9相比,CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合(图3a)进而体现出切割活性,对原间隔区相邻基序序列的兼容性更广,对错配的耐受性更强,抗噬菌体免疫性增强。图3. PcrIIC1增强CbCas9的DNA结合(a)、切割(b)、PAM兼容性(c)、DNA解旋 (d) 和错配容忍 (e) 能力最后,为了检验CRISPR免疫增效子PcrIIC1对CbCas9抗噬菌体免疫能力的影响,研究人员在大肠杆菌中进行了抗噬菌体实验。以上结果说明CbCas9-PcrIIC1复合体的形成对整个CRISPR-Cas系统的免疫增强至关重要。图4. PcrIIC1显著增强了CbCas9系统的细菌免疫活性FIDA如何更好复现Nature蛋白与核酸互作发文思路流体动力分散技术(FIDA)通过第一性物理原理直接获取分子的绝对流体动力学半径(Rh),通过追踪分子微妙的变化来表征生物分子的行为、特征以及功能。Fida Neo分子互作仪涵盖亲和力表征、亲和动力学表征、分子质量表征三大功能,一次实验即可获得互作与分子质控的数据,让互作的数据有“法”可依。FIDA技术无需固定、无需加热,甚至无需标记,可兼容所有缓冲液,是对现有分子互作技术是一次不一样的升级。FIDA技术可用于CbCas9-PcrIIC1复合物冷冻电镜前样品质控,CbCas9-PcrIC1复合物与DNA的亲和力实验以及动力学实验,以及CRISPR- cas以及核酸复合物的大小和定量表征等方面,具体如下:FIDA多维蛋白复合体表征,快速无稀释优化冷冻电镜样品,丰富您的蛋白质表征数据。FIDA所获得的Rh为绝对的粒径大小,可以直接与后期的电镜数据做比较。此外FIDA内置的 PDB 关联程序,可以将实际获得的 Rh 与数据库中的结构信息进行比较,有助于结构的精细解析。FIDA技术单次运行只需要40 nL 蛋白质在 4 分钟内获得的完整蛋白质 QC 图,包括冷冻电镜样品QC的关键参数表征,例如多分散性指数(PDI),聚集(Agg),粘度(Viscosity),粘附性(Stickiness),完整性(Rh)等指标,FIDA是一种非常有效的支持所有生物物理学和结构生物学的基本工具。图5. FIDA单次测试的得到8个蛋白表征数据冷冻电镜应用:FIDA:4分钟给您无稀释的冷冻电镜样品优化解决方案FIDA和本篇研究中应用的分子互作技术都是一种在溶液状态下通过荧光分子标记表征分子互作的技术。对于蛋白可能需要形成多聚体,在溶液环境下,更能有效的体现蛋白与蛋白或蛋白与核酸互作的真实情况。FIDA 可以使用含盐和洗涤剂的缓冲液条件,具有不同环境中(类体内环境)进行测试的灵活性。这使得研究者能够分析不受缓冲液成分限制的核苷酸,以确保其数据的准确性和可靠性。FIDA 这种在溶液内检测分子互作技术,是理想的结合能力检测,因为它不依赖于潜在的阻碍性表面固定,不受结合域空间方向影响的表征。图6. FIDA实验原理示意图FIDA不仅可以表征互作亲和力,也同时无标记检测CRISPR核酸酶与gDNA相互作用的热力学、亲和力、和结合动力学,全面表征蛋白与核酸互作。FIDA不仅可以完成本研究中得到的CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合亲和力,还可在无标记下表征蛋白与核酸的热力学参数与结合动力学,甚至表征结合时蛋白构象变化与获得有关基因编辑过程的分子细节的定量表征。FIDA技术可以处理带负电荷分析物和带正电荷配体,使利用FIDA能够深入了解CRISPR- cas组分之间的结合相互作用,并以更高的准确性和效率表征和优化CRISPR系统。FIDA是一种序列无关的技术-不需要事先了解序列。FIDA的序列独立性质可对未知或未表征的基因组区域进行研究,同时简化工作流程。图7.(A) FIDA实验示意图。ReporterRNA用于识别RNP的大小和饱和点(上),用其报告RNP结构作为竞争分析的起点(下) (B)正向结合(上)和反向滴定(下)期间获得的原始FIDA数据 本研究在分子层面直观的揭示了免疫增效子PcrIIC1的作用。首次发现了一类新型的CRISPR免疫增效子可以通过二聚化Cas9效应器提升Cas9活性,这些结果不仅有助于我们进一步理解CRISPR系统的进化历程,还为未来基于CRISPR免疫增效子的高效基因编辑工具的开发奠定了基础。FIDA对于蛋白质复合体的多维表征和对蛋白与核酸互作亲和力与动力学的的检测,不依赖于分子量变化,样本用量少(仅需40nL),是一种在溶液状态下且不受缓冲液成分影响的多维表征技术。对于在本研究中相似的蛋白可能需要形成多聚体,在溶液环境下,更能有效的体现互作的真实情况。
  • 化学蛋白质组学揭示高铁血红素-蛋白互作谱
    大家好,本周为大家分享一篇最近发表在Journal of The American Chemical Society上的文章,A Chemical Proteomic Map of Heme−Protein Interactions1。该文章的通讯作者是美国斯克利普斯研究所的Christopher G. Parker研究员。高铁血红素(heme)是人体中许多蛋白质的辅助因子,也是血液中氧气的主要转运体。最近的研究也证实了高铁血红素可以作为一种信号分子,通过与伴侣蛋白质结合而不是通过其金属中心反应来发挥其作用。然而,目前关于血红素结合蛋白的注释还不够完整。因此,本文采用化学蛋白质组学的方法去揭示人体中与高铁血红素发生互作的蛋白质谱。化学蛋白质组学是揭示蛋白质功能和发现药物靶标的重要工具。其中,最常用的是基于活性的蛋白质分析(Activity-based protein profiling,ABPP),通过结合活性分子探针标记及串联质谱分析,实现对靶标蛋白的鉴定。如图1b,本文设计了一个“全功能”活性分子探针(HPAP),共包含3个部分:1. Hemin母核,用于与靶蛋白非共价结合;2.光活化基团-双吖丙啶,可在UV光照下生成卡宾,促使分子探针与蛋白发生共价交联;3. 炔基,可在铜催化下与含有叠氮的试剂(荧光标签,生物素)发生点击化学反应,后两者组成FF-control。具体实验流程如下图1a所示,用HPAP处理不同细胞(In Situ)或不同细胞来源的蛋白质组(In vitro),HPAP中的hemin母核可与靶蛋白发生非共价结合,经UV光照,HPAP-蛋白间形成共价交联,再利用点击化学可将HPAP-蛋白与荧光素(TAMRA)或者生物素标签相连,用于后续的荧光成像(In-gel fluorescence)或者链霉亲和素纯化、LC-MS鉴别定量(MS-based I.D. and quantitation)。 图1. (a)使用基于高铁血红素的光亲和探针(HPAP)识别血红素结合蛋白的流程示意图。(b) HPAP、hemin和FF-control的结构;(c) HEK293T裂解物中与HPAP结合的蛋白的荧光成像;(d) hemin加入对HPAP与蛋白结合的影响。作者首先使用了SDS-PAGE去评估了HPAP标记蛋白的能力。如图1c所示,随着HPAP浓度的提高,胶图上条带颜色也逐渐加深,说明HEK293T细胞裂解液中与HPAP结合的蛋白在逐渐增加。如图1d所示,在10 μM HPAP的条件下,逐渐加入hemin,可以看到胶图上条带颜色逐渐变浅,说明hemin与HPAP之间发生了竞争,HPAP模拟了hemin与蛋白的结合过程。随后,作者又使用已知的hemin结合蛋白来确认HPAP捕获目标蛋白的能力。如图2所示,这些已知蛋白被HPAP成功的标记上,但由于hemin的加入,条带的颜色在逐渐变浅(TAMRA)。Western blot的结果显示,蛋白的总量并无太大变化,但hemin的竞争结合,导致与HPAP结合的蛋白量在下降。以上实验均说明,HPAP具有较好的选择性标记能力,能够模拟hemin与靶蛋白的结合,并以共价交联的方式标记在蛋白上。 图2. 用已知的高铁血红素结合蛋白确认HPAP捕获目标蛋白的能力。验证了方法的可行性后,作者将HPAP与定量蛋白质组学结合用于绘制高铁血红素-蛋白质互作谱。考察了多种细胞系,包括:人胚胎肾细胞(HEK293T)、人慢性髓系白血病细胞(K562)以及人原代外周血单个核细胞(PBMCs)。每种细胞系设置了两种实验形式:1)特异性结合实验(Enrichment):通过将HPAP识别出蛋白与FF-Control识别出的蛋白进行对比,排除非特异结合的干扰(图1b),如果同一蛋白通过HPAP富集到的量是FF-control富集到的量4倍以上,则认为该蛋白是HPAP特异性结合蛋白。2)竞争性结合实验(Competition):观察HPAP富集的蛋白在hemin和HPAP同时存在时富集到的量的变化,变化大于3倍且具有显著性差异(p<0.05)的蛋白被认为是HPAP与hemin竞争性结合的蛋白。最终确定的高铁血红素结合蛋白应满足以上两种实验的筛选标准(图3a)。如图3b-d所示,总共鉴定出378个的高铁血红素结合蛋白,其中214个来自HEK293T, 182个来自K562, 107个来自PBMC。尽管三种细胞类型之间的结合蛋白有一些重叠,但大多数靶点蛋白只存在于一种或两种细胞类型中(图3b),这暗示血红素在不同细胞中可能发挥不同的功能。其中,19个靶点蛋白是在UniProt上已经注释为高铁血红素的结合蛋白,剩余都是未揭示的结合蛋白。这些结合蛋白按照功能可划分为:转运蛋白,转录因子,支架蛋白和酶(图3c),根据代谢通路又可进一步划分(图3d)。作者最后对几个新发现的结合蛋白进行了验证,并选择IRKA1进行进一步的作用机制研究。IRKA1在调节炎症信号通路中起着关键作用,IRAK1被IRAK4磷酸化,然后自磷酸化,产生NFkB介导的炎症反应。经实验确认(图4),hemin是IRKA1的一种变构活化配体,可增强其酶活性,促进IRAK1的自磷酸化。 图3. 基于蛋白质组学的HPAP-蛋白互作分析。 图4. Hemin对IRKA1的调节作用。总之,本文设计开发了一种基于高铁血红素的光亲和探针,它可以与化学蛋白质组工作流程结合,以识别不同蛋白质组中的高铁血红素结合蛋白。利用该方法也可拓展至其他分子配体靶标蛋白的识别。 撰稿:刘蕊洁编辑:李惠琳原文:A Chemical Proteomic Map of Heme-Protein Interactions参考文献1. Homan, R. A., Jadhav, A. M., Conway, L. P., & Parker, C. G. (2022). A Chemical Proteomic Map of Heme-Protein Interactions. Journal of the American Chemical Society, 144(33), 15013–15019.
  • Nature:美国布兰迪斯大学研究人员利用核磁技术确定蛋白动态系综中的高能结构
    大家好,这周推荐一篇Nature上近期发表的使用核磁共振波谱高精度确定蛋白质稀少构象的方法。通讯作者Dorothee Kern教授是HHMI研究员,来自美国布兰迪斯大学生物化学系,她的实验室对蛋白质激酶的激活、蛋白酶的势能面有深入的研究。蛋白质在发挥功能时往往需要进入高能级的状态,然而目前缺乏确定这种功能重要、但出现较少的构象的实验方法。本文作者开发了一种通过耦合核磁得到的PCSs(pseudocontact shifts)和CPMG(Carr–Purcell–Meiboom–Gill)弛豫色散的方法,确定高分辨的稀少态构象。同时,作者定义了高能漂移的相应动力学和热力学,从而描述了整个自由能面。 作者在Adk,calmodulin和Src激酶等蛋白上发现高能PCSs可以准确定义已知的高能结构,同时在Adk的激活过程中发现了一种新的底物结合高能构象,回答了一直以来关于这个酶激活决速步骤的争论。底物的结合与产物释放都经由一个构象选择过程随后诱导进入完全关闭的反应发生构象。 不同于其它高能构象解析方法,本方法可以确定较小蛋白的domain重排以及低至0.5%比例的构象,并且同时确定结构、热力学以及热力学信息。原文链接:https://www.nature.com/articles/s41586-022-04468-9文章引用:Doi:10.1038/s41586-022-04468-9
  • NMT历史上的今天丨Int J Mol Sci 氮营养、Physiol Plantarum 光合文章发表
    NMT历史上的今天2018年8月6日,北京林业大学尹伟伦、孟森利用NMT技术在International journal of molecular sciences 上发表了标题为Distinct Carbon and Nitrogen Metabolism of Two Contrasting Poplar Species in Response to Different N Supply Levels的文章。影响因子为3.687。2012年8月6日,中科院海洋所王广策、林阿朋利用NMT技术在Physiologia Plantarum上发表了标题为Simultaneous measurements of H+and O2 fluxes in Zostera marina and its physiological implications 的文章。影响因子为3.067.期刊:International journal of molecular sciences主题:两种杨树对不同氮素供应水平的碳氮代谢差异标题:Distinct Carbon and Nitrogen Metabolism of Two Contrasting Poplar Species in Response to Different N Supply Levels影响因子:3.687检测指标:NH4+、NO3-、H+流速流速检测部位:杨树根部NH4+、NO3-、H+流实验处理方法:杨树在低中高(0.01,1或10 mM的NH4NO3)的氮浓度下处理4周NH4+、NO3-、H+流实验测试液成份:0.01mM/1mM/10mM NH4NO3,0.1mM KCl,0.1mM CaCl 2,pH 5.5通讯作者:北京林业大学尹伟伦、孟森英文摘要Poplars have evolved various strategies to optimize acclimation responses to environmental conditions. However, how poplars balance growth and nitrogen deficiency remains to be elucidated.In the present study, changes in root development, carbon and nitrogen physiology, and the transcript abundance of associated genes were investigated in slow-growing Populus simonii (Ps) and fast-growing Populus euramericana (Pe) saplings treated with low, medium, and high nitrogen supply. The slow-growing Ps showed a flourishing system, higher δ15N, accelerated C export, lower N uptake and assimilation, and less sensitive transcriptional regulation in response to low N supply.The slow-growing Ps also had greater resistance to N deficiency due to the transport of photosynthate to the roots and the stimulation of root development, which allows survival. To support its rapid metabolism and growth, compared with the slow-growing Ps, the fast-growing Pe showed greater root development, C/N uptake and assimilation capacity, and more responsive transcriptional regulation with greater N supply. These data suggest that poplars can differentially manage C/N metabolism and photosynthate allocation under different N supply conditions.中文摘要(谷歌机翻)杨树已经发展出各种策略来优化对环境条件的适应性反应。然而,杨树如何平衡生长和氮缺乏仍有待阐明。在本研究中,在慢生长的小叶杨(Pops simonii)(Ps)和快速生长的欧洲杨(Populus euramericana(Pe)幼树)中研究了根系发育,碳和氮生理学以及相关基因的转录本丰度的变化。高氮供应。缓慢生长的Ps显示出繁殖系统,更高的δ15N,加速的C输出,更低的N吸收和同化,以及响应于低N供应的较不敏感的转录调节。由于光合产物向根部的转运和根系发育的刺激,缓慢生长的Ps对N缺乏具有更大的抗性,这允许存活。为了支持其快速代谢和生长,与生长缓慢的Ps相比,快速生长的Pe显示出更大的根发育,C / N吸收和同化能力,以及具有更大N供应的更具响应性的转录调节。这些数据表明,杨树可以在不同的氮供应条件下差异化地控制C / N代谢和光合产物分配。Figure 4. Net NH4+ (A), NO3? (B) and H+ (C) fluxes of P. simonii (Ps) and Populus euramericana (Pe) under 0.01, 1 and 10 mM NH4NO3. Bars labelled with different letters indicate significant difference between the treatments. p-Values of the ANOVAs of species, N treatment, and their interaction are indicated. ** p 0.01 *** p 0.001 ns, not significant.期刊:Physiologia Plantarum主题:同时测量H+和O2流速及其生理意义标题:Simultaneous measurements of H+ and O2 fluxes in Zostera marina and its physiological implications影响因子:3.067检测指标:H+、O2流速检测部位:大叶藻叶片H+、O2流实验处理方法:大叶藻叶片瞬时由暗至光(300μmolm-2s-1)处理H+、O2流实验测试液成份:天然海水(NSW)盐浓度30–32‰通讯作者:中科院海洋所王广策、林阿朋英文摘要Zostera marina (eelgrass) is an important ecological component of many shallow, temperate lagoons. Evidence suggests that Z. marina has a high bicarbonate utilization capability, which could be promoted by possible proton extrusion and the consequent formation of an ‘acid zone’ in the apoplastic space (unstirred layer) of its leaves.It has been found that 50?mM of the buffer Tris significantly inhibited the photosynthetic O2 evolution of Z. marina and it was proposed that this was because of Tris' s ability to bond with protons outside the cell wall. To investigate if H+ played an important role in the photosynthetic carbon utilization of Z. marina, it is very important to simultaneously monitor the photosynthesis status and possible H+ fluxes. However, probably because of the lack of suitable techniques, this has never been attempted.In this study, experiments were undertaken on Z. marina by monitoring H+ and O2 fluxes and the relative electron transport rates during light–dark transition. During stable photosynthesis, in addition to an obvious O2 outflow, there was a significant net H+ influx connected to Z. marina photosynthesis. The inhibitory effects of both Tris and respiration inhibitors on apparent O2 evolution of Z. marina were confirmed. However, evidence did not support the proposed Tris inhibition mechanism.中文摘要(谷歌机翻)Zostera marina(eelgrass)是许多浅水温带泻湖的重要生态组成部分。有证据表明,Z。marina具有较高的碳酸氢盐利用能力,可以通过可能的质子挤出促进,并因此在其叶片的非质外体空间(未搅拌层)中形成“酸性区域”。已经发现50mM的缓冲液Tris显着抑制了Z.marina的光合作用O2进化,并且提出这是因为Tris能够与细胞壁外的质子结合。为了研究H +是否在Z. marina的光合碳利用中起重要作用,同时监测光合作用状态和可能的H +通量是非常重要的。然而,可能由于缺乏合适的技术,这从未尝试过。在这项研究中,通过监测H +和O2通量以及在明暗过渡期间的相对电子传输速率对Z.marina进行了实验。在稳定的光合作用期间,除了明显的O2流出外,还有显着的净H +流入与Z. marina光合作用相关。证实了Tris和呼吸抑制剂对Z. marina的表观O2进化的抑制作用。然而,证据不支持所提出的Tris抑制机制。Fig. 1. Typical transient changes in H+ ?ux near Zostera marina leaf segments in response to bright white light. The result of a single measurement is used in this ?gure as multiple results in one graph would result in large ?uctuations and mask the transient responses. The sample was dark adapted for 1 h. After 25 min of measurement, leaf segments were exposed to bright white light (300 μmol m?2 s?1)for 15 min. Measurements were made at intervals of 6.4 s. Each point on the graph represents average data over an interval of three measurements.
  • 糖葫芦用烂水果制作 黑窝点被取缔
    “糖葫芦好看它竹签穿,象征幸福和团圆……,”老北京糖葫芦中外闻名,来北京旅游的人都要尝尝老北京的糖葫芦。然而卖相好看的糖葫芦竟然是烂水果制作,北京西城执法取缔一个非法生产糖葫芦的黑窝点。执法人员现场发现做糖葫芦的水果不少都是变质的,原材料也没有出处,串箱子旁边还挂着墩布。前天下午,西城城管大栅栏执法监察队在前门西河沿街取缔一个非法糖葫芦窝点。据城管队员介绍,9月11日队员在拆除简易结构塑钢棚时发现该糖葫芦窝点,经过执法队员几天的核查,确定此处为加工糖葫芦小作坊,无任何相关部门审批手续。同时,糖葫芦经过这里的加工后,分包给前门地区的一些无照经营人员进行销售。北京青年报记者到达现场时,这个小作坊里只有一个加工糖葫芦的工作人员,屋子不大,墙面已经发黑,桌子上摆放着熬好的糖浆、即将做好的糖葫芦以及锅碗瓢盆。记者看到,这些还没做好的糖葫芦上的山楂有很多明显是坏的。冰柜中冷冻着制作糖葫芦需要的各种水果,一个简易的白色塑料袋里放着已经腐烂的橘子。执法人员证实,该作坊没有卫生许可证和经营许可证,执法人员依法对现场制作糖葫芦的物品进行暂扣,进一步调查后将会依法处罚。
  • Analytica China 2010“四大亮点”预览
    仪器信息网讯 2010年8月5日,慕尼黑上海分析生化展(Analytica China)主办方德国慕尼黑博览集团在北京新世纪日航酒店举办了媒体见面会,慕尼黑展览(上海)有限公司董事总经理毛大奔先生着重向在场媒体介绍了分析生化产业的最新动态以及本届展会的规模、亮点等相关信息。会议由慕尼黑展览(上海)有限公司高级项目经理路王斌先生主持。仪器信息网作为特邀媒体参加了此次新闻发布会。慕尼黑展览(上海)有限公司董事总经理毛大奔先生  2010年9月15-17日,上海新国际博览中心在时隔2年后将又一次迎来亚太地区分析、生物技术、诊断和实验室技术领域的顶级盛会——第五届慕尼黑上海分析生化展(Analytica China)。届时将有来自22个国家和地区的近450家国内外顶尖企业,为约15000名到场观众展示最新科学仪器、尖端分析测试技术,提供全方位的实验室技术解决方案。  本届展会特别关注食品安全、环境分析、生物技术、教育科研、公共卫生这五大热点应用领域。如,本届参展企业中,有的为上海世博会的食品、环境安全保驾护航,有的为南非世界杯和即将召开的广州亚运会提供药检、食品安全、环境监测等方面的先进仪器,也有更多企业关注疫苗安全与流行病监测,以及矿业污染、食品添加剂风波、我国南方及长江流域水灾等民生话题。在本届展会上,所有与此相关的产品及解决方案都将一一亮相。新闻发布会现场  第五届慕尼黑上海分析生化展四大亮点剖析如下:  亮点之一:展会规模历史最高  截至7月底,已有430余家国内外厂家竞相加盟慕尼黑上海分析生化展,预计最终展商数将近450家,展会规模超20,000平米,展会面积同比增长了18%,再次刷新自2002年以来的最高纪录。同时,国际化程度也创新高,共有来自19个国家的180多家国际领先企业参展,其中,德国、日本、英国和澳大利亚组织了大型国家展团将集体亮相,国际展商比例高达近40%。  本届展会将集中展示分析仪器、测试测量、生命科学、生物技术、实验室建设、试剂耗材和通用实验室设备的最新产品及应用。参展商包括安捷伦、珀金埃尔默、Eppendorf、默克、伯乐、耶拿、依拉勃、日本分光、德国莱驰、岛津、西格玛奥德里奇、德祥、帝肯、北友、上海精科、上海科学仪器、美谱达、桑翌、北京吉天等。其中,通用电气医疗集团、戴安、掘场等公司首次参展即以大面积展台重装上阵,再次印证了慕尼黑上海分析生化展在国内乃至亚洲的领先地位。  亮点之二:高水平的同期学术论坛  慕尼黑上海分析生化展期间,慕尼黑国际博览集团联合中国化学会、中国生物化学与分子生物学会蛋白质组学专业委员会(CNHUPO)、“中德复杂样品分离分析”联合研究中心等众多杰出科学机构将举办七场高水平的学术会议。  “第五届上海国际分析化学研讨会”是由中国化学会分析化学学科委员会主任汪尔康院士、中国化学会色谱专业委员会张玉奎院士和慕尼黑科技大学Antonius Kettrup教授共同担任主席。届时将有45位国际知名的科学家就分析质量控制、环境分析、蛋白质组学和代谢组学、分离科学和质谱学、电分析/传感器和食品及中草药检测等论题作大会报告及主题发言,其中超过40%为国外专家。  继上届展会首次与中国生物化学与分子生物学会蛋白质组学专业委员会(CNHUPO)合作举办的研讨会大获成功后,本届展会期间CNHUPO将带来“蛋白质组学与疾病”专题研讨会,重点围绕蛋白质组学及其在疾病研究中的应用取得的新进展进行研讨。  由中德复杂样品的分离分析联合研究中心与德国慕尼黑国际博览集团联合主办的“色谱技术中德论坛:复杂样品的分离分析”将为色谱领域的优秀中德科学家们搭建良好的舞台,将有10余位中德科学家献上精彩的报告。  由安捷伦科技有限公司首席执行顾问 、Labcompliance 全球FDA 法规管理处主席Ludwig Huber博士担任演讲嘉宾的“FDA/EU认证:实验室质量控制”以及“样品前处理技术及其小分子化合物的液相色谱-质谱分析”、“代谢组学方法在生物技术和生命科学中的进展”这三场研习班和培训班将为现场观众提供独一无二的教育机会。  另外,展会同期还将举办“展商技术交流会”,安捷伦、珀金埃尔默、岛津、帝肯、IKA、普源精仪、AES、德祥等企业将围绕药品及生物制品安全、环境检测、食品安全和转基因食品检测等话题展开为期两天的研讨。  亮点之三:强强联手,与国际化工展同期举办  中国国际化工展览会(ICIF China 2010)是由中国石油和化学工业协会主办,中国贸促会化工行业分会和中国化工信息中心承办的综合化工展览会,集中展示包括化工装备、化工检测、控制设备、干燥设备等当今石油和化学工业的数万种产品和先进技术。  同期举办的这两场行业盛会定会使慕尼黑上海分析生化展的展商,尤其是为石化、石油、化工及相关领域的业内人士不断拓展市场、扩大人脉资源提供了绝佳的商贸良机。  亮点之四:牵手世博,回馈观众  本届展会举行期间,正值上海世博会召开之际,值此机会,也为了回馈自2002年来一直支持展会的行业观众,主办方携手珀金埃尔默和Eppendorf共同邀请400位预登记观众参观世博。此外,“All-in-one Trip参观Analytica China与上海世博游同行”活动也正在积极展开。另外,网上趣味游戏“闪闪的红星现场冲关体验”依然可以继续挑战,诱人好礼同样不断,包括纪念版T恤衫、数码相框、豪华野餐包等。更多信息,敬请访问www.a-c.cn。安捷伦科技有限公司化学分析市场经理何峻先生  此外,安捷伦科技有限公司化学分析市场经理何峻先生也借此机会展示了安捷伦近几年在生化分析领域的最新成就。何峻先生谈到:“安捷伦2009财年年收入高达45亿美元,其中,12亿美元来自于生命科学,9亿美元来自于化学分析。2010年,安捷伦斥资收购瓦里安后,拥有了针对全工作流程的完整产品系列,生物化学业务收入也由原来的38%升至公司总业务的57%,安捷伦在生物分析测量领域的领导地位将得到进一步巩固。”  “从全球性的环境污染、食品安全等事件到现代生活中必不可少的石化产品,安捷伦都能够提供以高灵敏度(Sensitivity)、高选择性(Selectivity)、快速分析(Speediness)、高准确度(Accuracy)、高智能化(Automatics),即“3S+2A”为标准的检测仪器以及完整的解决方案,如北京2008年奥运会、残奥会等的兴奋剂检测、应对国外技术性贸易壁垒的‘莫西菌素’检测、墨西哥原油泄漏事件的全面解决方案等。”Analytica China十年(2002-2012)发展曲线展板  会后,慕尼黑展览(上海)有限公司董事总经理毛大奔先生和高级项目经理路王斌先生回答了仪器信息网等媒体的记者提问。慕尼黑展览(上海)有限公司高级项目经理路王斌先生  Instrument:除了上面的四大亮点以外,请问第五届慕尼黑上海分析生化展还有哪些精彩活动值得期待?  路王斌先生:本届展会按照食品安全、环境分析、生物技术、教育科研、公共卫生这五大热点应用进行区域划分,为展会观众提供了“一站式”的观展服务。另外,组委会还将根据不同领域或者亮点汇编报告集与宣传册,如学术报告专集、厂商活动专集等。  尤值一提的是,展会第一天举办的新品发布专场将汇集岛津、安捷伦、珀金埃尔默、瑞士华嘉等6大企业共同发布最新产品,相信一定会让企业用户代表及媒体记者一饱眼福。此外,展会同期还将举办大学日活动和IKA100周年庆典活动,同样也值得关注。  Instrument:伴随着网络的快速普及,展会规模在不同程度上受到了一定的冲击。请问慕尼黑组委会将来会采取哪些举措来保持或者推动展会的良好发展?  毛大奔先生:作为专业的会展组织机构,我们也认识到网络的快速发展逐渐改变了人们的生活,但是却不能够代替展会的交流和宣传的平台功能。企业通过展会来发布新产品新技术,与新老客户面对面地交流,能够有效地提高企业在行业内的形象。  但是,我们也认识到了网络的重要性,也在积极充分的利用网络来和线下的展览会产生互动。如,我们在网上开辟了厂商与客户的互动社区,通过自助式服务,使厂商与客户对接。希望将来能够逐步发展到网上展览会的效应,以填补慕尼黑展会两年一届的中间空白期。  Analytica China简介  Analytica China 慕尼黑上海分析生化展已经成为亚洲重要的分析、实验室技术、诊断和实验室技术领域的专业博览会和网络平台,位于行业在亚洲最具成长性的市场之一——中国。展会每两年在上海浦东新国际博览中心举办一次。上海同时是中国的化工和制药产业集散地。观众来自化学、医疗、食品、环境和医药产业,以及工业和政府研究部门的用户和决策者。  Analytica China慕尼黑上海分析生化展是Analytica全球网络的一部分。该网络涵盖了Analytica 德国国际分析、生化技术、诊断和实验技术贸易博览会暨国际研讨会(Analytica 2012,2012年4月17-20日,慕尼黑)、Analytica China慕尼黑上海分析生化展、Analytica Anacon India印度国际分析、生化技术、实验室技术和服务博览会暨国际研讨会(Analytica Anacon India 2011,2011年10月12日-10月14日,印度孟买)和Analytica Vietnam越南国际分析、生化技术、实验室技术和服务博览会(Analytica Vietnam 2011, 2011年4月7-9日,越南胡志明市)。更多以上展会及同期活动信息,请访问:www.Analytica.de。  德国慕尼黑国际博览集团简介  慕尼黑国际博览集团是世界领先的展览公司之一,每年在全球范围内举办近40个博览会,涉及行业包括资本货物、消费品和高科技。每年有100多个国家的30,000多家企业来到慕尼黑参展,观众遍及全球200多个国家和地区,总人数超过200万。此外,集团还在亚洲、俄罗斯、南北美洲举办各类专业博览会。慕尼黑在全球89个国家拥有6家子公司和66个代表处,集团网络覆盖全球。更多信息,欢迎登陆网站:  慕尼黑国际博览集团:www.messe-muenchen.de  慕尼黑展览(上海)有限公司: www.mmi-shanghai.com
  • CISILE 2015专访:访亚速旺(上海)商贸有限公司佐藤道
    仪器信息网讯 2015年4月23日,由中国仪器仪表行业协会主办的&ldquo 第十三届中国国际科学仪器及实验室装备展览会(CISILE 2015)&rdquo 在中国国际展览中心开幕。  很多仪器厂商都参加了此次展会并展出了公司的新产品,部分企业负责人接受了仪器信息网编辑的采访,并介绍了新产品的创新点、应用领域等内容。  亚速旺(上海)商贸有限公司上海营业部营业主管佐藤道接受了仪器信息网编辑的采访。1933年,亚速旺公司在日本成立,至今已经拥有80年的历史。据佐藤道先生介绍,亚速旺公司来到中国已经有8年的时间,公司来中国发展的初衷是想为中国的科技发展提供高端的仪器产品。目前,在北京、大连、苏州、广东、天津等地都设有分公司,产品种类丰富,目前产品目录更新到第七册,产品数量达18000个。
  • 各种蛋白互作检测方法优缺点分析
    聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法研究蛋白-蛋白相互作用是理解生命活动的基础。蛋白质—蛋白质互作网络是生物信息调控的主要实现方式,是决定细胞命运的关键因素。检测蛋白质间相互作用的实验方法有哪些?这些检测方法各有什么优缺点?总结如下。1. 生化方法●共纯化、共沉淀,在不同基质上进行色谱层析(需要补充)●蛋白质亲和色谱 基本原理是将一种蛋白质固定于某种基质上(如Sepharose),当细胞抽提液经过改基质时,可与改固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附,而没有吸附的非目标蛋白则随洗脱液流出。被吸附的蛋白可以通过改变洗脱液或者洗脱条件而回收下来。GST pull down技术:为了更有效的利用蛋白质亲和色谱,可以将待纯话的蛋白以融合蛋白的形式表达,即将”诱饵“蛋白与一种易于纯化的配体蛋白融合。例如与GST融合的蛋白再经过GSH的色谱柱时,就可以通过GST和GSH的相互作用而被吸附。当载有细胞抽提物经过柱时,就可以得到能够与“诱饵”蛋白相互作用的目标蛋白了。Epitope-tag技术:表位附加标记技术 就是将附加的抗原 融合到目的蛋白以检测目的蛋白的表达,同时还可以通过亲和层析法来纯化目的蛋白。 缺点:表位附加标记可能会使融合蛋白不稳定,改变或使融合蛋白功能丧失。以上两种方法都要共同的缺点:假阳性。实验所检测到的相互作用可能时由蛋白质所带电荷引起的,并不是生理性的相互作用 蛋白的相互作用可能并不是直接的,可是由第三者作为中介的 有时会检测到两种在细胞中不可能相遇却有极强亲和力的蛋白。因此实验结果还应经其他方法验证。●免疫 共沉淀 免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。改法的优点是蛋白处于天然状态,蛋白的相互作用可以在天然状态下进行,可以避免认为影响 可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体。 缺点:免疫共沉淀同样不能保证沉淀的蛋白复合物时候为直接相互作用的两种蛋白。另外灵敏度不如亲和色谱高。●Far-Western 又叫做亲和印记。将PAGE胶上分离好的凡百样品转移到硝酸纤维膜上,然后检测哪种蛋白能与标记了同位素的诱饵蛋白发生作用,最后显影。 缺点是转膜前需要将蛋白复性。2. 等离子表面共振技术(Surface plasmon resonance)该技术是将诱饵蛋白结合于葡聚糖表面,葡聚糖层固定于几十纳米厚的技术膜表面。当有蛋白质混合物经过时,如果有蛋白质同“诱饵”蛋白发生相互作用,那么两者的结合将使金属膜表面的折射绿上升,从而导致共振角度的改变。而共振角度的改变与该处的蛋白质浓度成线性关系,由此可以检测蛋白质之间的相互作用。该技术不需要标记物和染料,安全灵敏快速,还可定量分析。缺点:需要专门的等离子表面共振检测仪器。3. 遗传学方法使某处发生缺损,检测对其他地方的影响。●基因外抑制子。基因外抑制子是通过一个基因的突变 来弥补原有基因的突变。比如相互作用的蛋白A和B,如果A发生了突变使两者不再相互作用,此时B如果再发生弥补性突变就可以使两者的相互作用恢复,那么B就是A的基因外抑制子。 缺点:需要知道基因,要有表型,筛选抑制子比较费时。●合成致死筛选 指两个基因同时发生突变会产生致死效应,而当每个基因单独发生突变时则无致死效应。用于分析两个具有相同重要蛋白之间的相互作用。4. 双杂交技术原理基于真核细胞转录因子的结构特殊性,这些转录因子通常需要两个或以上相互独立的结构域组成。分别使结合域和激活域同诱饵蛋白和猎物蛋白形成融合蛋白,在真核细胞中表达,如果两种蛋白可以发生相互作用,则可使结合域和激活域在空间上充分接近,从而激活报告基因。 缺点:自身有转录功能的蛋白会造成假阳性。融合蛋白会影响蛋白的真实结构和功能。不利于核外蛋白研究,会导致假隐性。5. 荧光共振能量转移技术指两个荧光法色基团在足够近(100埃)时,它们之间可发生能量转移的现象。荧光共振能量转移技术可以研究分子内部对某些刺激发生的构象变化,也能研究分子间的相互作用。它可以在活体中检测,非常灵敏,分辩率高,能够检测大分子的构象变化,能够定性定量的检测相互作用的强度。 缺点 此项技术要求发色基团的距离小于100埃。另外设备昂贵,还需要融合GFP给蛋白标记。此外还有交联技术(cross-linKing),蛋白质探针技术,噬菌体展示技术(Phage display)以及生物信息学的方法来检测蛋白质之间相互作用。
  • 做基因组学做不了的事 蛋白质组学可更精准打击癌症
    p style="text-indent: 2em "span style="text-align: justify text-indent: 2em "近日,国际人类蛋白质组组织公布了2020年度权威奖励获奖名单,中国科学院院士、军事科学院军事医学研究院研究员贺福初荣获蛋白质组学杰出成就奖。/span/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "贺福初院士率先提出人类蛋白质组计划的科学目标与技术路线,倡导并领衔了人类第一个关于组织、器官的蛋白质组计划,揭示了人体首个器官(肝脏)蛋白质组。2014年,贺福初院士领导启动“中国人蛋白质组计划”(CNHPP)。此次获奖是国际蛋白质组学领域对他率先提出并反复实践的“蛋白质组学驱动的精准医学”这一理念与范式的高度认可,标志着我国蛋白质组学研究再度领跑国际。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "那么,什么是蛋白质组学?蛋白质组学驱动的精准医学又是什么?我国当前研究进展如何?就这些问题,科技日报记者采访了贺福初院士。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong解密基因组需要系统认识蛋白质组/strong/span/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "蛋白质组,是指一个基因组、一个细胞或组织、一种生物体所表达的全部蛋白质。蛋白质组研究,是在整体水平上研究细胞、组织乃至整个生命体内蛋白质组成及其活动规律的科学,由此从蛋白质水平上获得关于疾病发生、细胞代谢等过程整体而全面的认识。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "贺福初表示:“说到蛋白质组,就不得不提到基因组。基因组和蛋白质组的关系,好比‘词典与文章’‘元素表与化工厂’的关系。随着人类等生物体全基因组序列的测序完成,科学家逐步意识到基因组只是书写了遗传密码的‘天书’,仅从基因序列的角度根本无法完整、系统地阐明生物体的功能。”/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“很多生命现象之谜,不能直接从基因序列中得到解答。蛋白质是生命活动的主要执行者,想要解密基因组,必须先系统认识蛋白质组。”贺福初介绍,正因如此,国际权威期刊《自然》《科学》在2001年2月公布人类基因组草图的同时,分别发表相关述评与展望,认为蛋白质组学将成为新世纪最大战略资源——人类基因研究争夺战的战略制高点之一。当月,人类蛋白质组组织(HUPO)即宣告成立。次年,“人类蛋白质组计划”(HPP)宣布启动。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“人类蛋白质组计划”是继人类基因组计划(HGP)之后最大规模的国际性科技工程,也是21世纪第一个重大国际合作计划。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“由于蛋白质组的研究对象远比基因组要复杂得多,需要从国家战略层面统筹规划,整合全国相关领域科研之力,配合专项资金和资源才能够推动。所以在提出之初,国际上仅有少数发达国家的几个尖端实验室开展相应的研究。”贺福初说。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "1998年初,国家自然科学基金委设立了“蛋白质组及其动态变化研究”重大项目。这是我国政府支持的第一个蛋白质组学研究项目,为后续实施系列蛋白质组学国家级项目并走向国际前列奠定了重要基础。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong打造人类蛋白质组计划的“中国模式”/strong/span/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "经过几年的探索与实践,我国率先提出“人类肝脏蛋白质组计划”(HLPP),并提出建立蛋白质组“两谱、两图、三库”的战略目标,即建立肝脏蛋白质组表达谱、修饰谱、连锁图、定位图、样本库、数据库和抗体库。2002年,国际学界启动“人类肝脏蛋白质组计划”,并于凡尔赛召开的第一届HUPO大会上正式讨论通过。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "2003年10月,由我国领衔、先后11个国家参与的“人类肝脏蛋白质组计划”全面启动实施。该计划是国际“人类蛋白质组计划”中第一个人体组织器官的蛋白质组计划,是中国科学家倡导和领衔的第一个国际大型合作计划。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“从HLPP的提出、论证再到研究工作的展开,历时十余年之久。这是‘大科学计划’的一次意义非凡的中国实践。”贺福初说。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "记者了解到,在实施HLPP过程中,中国科学家先后研究了中国人胚胎肝组织和中国成人肝脏组织的蛋白质组,鉴定蛋白质超过10000种,并利用这些数据对肝脏生理功能进行了系统解读。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "通过前期积累,我国在蛋白质组表达谱分析的技术能力上,达到国际先进水平。2007年,蛋白质组学国家重点实验室成立。在2009年的国际蛋白质组标准物质评估中,该重点实验室的技术能力位居全球前6。2018年11月,蛋白质科学研究(北京)国家重大科技基础设施顺利通过国家验收。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“有了这些积累,国家科技部首次整合973计划、863计划、国际合作计划,历经数年论证,由蛋白质组学国家重点实验室牵头,于2014年正式启动‘中国人蛋白质组计划’。”贺福初介绍,2018年项目结题时,已完成构建早期肝细胞癌及癌旁组织、弥漫型胃癌及癌旁组织、肠型胃癌及癌旁、肺腺癌及癌旁等疾病组织的深度覆盖蛋白质表达谱,数据量达到52.7TB(万亿字节),在高置信度水平上,定量鉴定人类表达蛋白质15553种,并获得疾病组织信号网络调控蛋白表达变化规律,实现潜在分子标志物和候选靶标的深入发掘。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“在此基础上,CNHPP构建了系列正常器官、组织、细胞的蛋白质组定量参考谱。它们相当于人体组织器官体液蛋白质的‘北斗全球定位系统’。”贺福初说。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong全面分析多种人体肿瘤蛋白质组/strong/span/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“‘精准’二字是医学界追求的目标,即通过病因的精准诊断,制定相应的精准治疗方案和预防策略。”贺福初指出。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "随着“人类基因组计划”的完成、基因组测序技术的不断提升以及生物信息学与大数据科学的快速发展,催生了基因组学驱动的精准医学,其中最具代表性的就是2006年由美国主导的“癌症基因组图谱计划”。但其仍有不少局限性。为此,美国在此基础上于2011年启动临床蛋白质组肿瘤分析项目,旨在用不同种类癌症蛋白质组注释其基因组全景图,创建了蛋白质组学依附于基因组学的蛋白质组—基因组学。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“但这种蛋白质组学研究始终未能摆脱基因组学的先天不足。”贺福初告诉记者,“而我们的CNHPP计划另辟蹊径,对多种人体肿瘤进行了全面深入的蛋白质组分析。2018年,我们发表了弥漫型胃癌的蛋白质组全景图,建立了首个与预后相关的蛋白质组分子分型;2019年,我们率先在《自然》公布了早期肝细胞癌的蛋白质组分子分型并发现新的治疗靶标,开启了蛋白质组驱动的精准医学新时代;2020年,我们又在《细胞》相继发表了非小细胞肺癌的蛋白质组分子分型研究,再次证明了蛋白质组学在精准医学中的独特性和至关重要性,为我国持续引领国际蛋白质组学研究创造了良好的条件。”/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "记者了解到,蛋白质组驱动的精准医学是由我国科学家首创的精准医疗新模式,是一项国际多中心、多学科协作的大科学项目,其实施的规模和复杂程度均远超HGP,对科技、经济、社会发展的推动作用也难以估量。/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "贺福初说:“如果说抗生素的发明引发了第一代医学治疗技术革命,影像学和分子医学的发展引发了第二代医学诊断技术革命,那么,由蛋白质组学驱动的精准医学,势必带来精确诊断与精准治疗统一的第三代医学革命。”/pp style="text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em "“下一步,‘中国人蛋白质组计划’团队将在国际范围部署建立蛋白质组驱动的精准医学技术体系和行业标准,进一步提升对重大、疑难疾病的‘精准定位’和‘精确打击’能力。”贺福初透露。/ppbr//p
  • 黄超兰团队首次在单碱基分辨率和单细胞层面精准鉴定RBP结合位点
    2021年6月10日,北京大学医学部精准医疗多组学研究中心黄超兰团队,与中国科学院生物物理研究所薛愿超团队、广东省第二人民医院孙青原团队,合作在Nature Cell Biology上发表了题为“Global profiling of RNA-binding protein targetsites by LACE-seq”的论文,该研究开发了可在微量细胞中鉴定RNA结合蛋白(RNA-binding protein, RBP)作用靶点的新技术LACE-seq(Linear amplificationof cDNA ends and sequencing)。通过线性扩增逆转录酶在RBP结合位点处的终止信号,首次实现了在单碱基分辨率和单细胞层面精准鉴定RBP的结合位点,为研究 RBP在胚胎发育和生殖疾病中的功能机制打开了大门。  在本研究中,黄超兰团队使用原创新颖的微量样品蛋白质组学技术对Ago2-/-卵母细胞和空白对照细胞进行蛋白质组学分析,共鉴定到2715个蛋白,其中与Ago2结合的蛋白数量为1155个。与对照组相比,在Ago2-/-卵母细胞中出现特异性上调和下调的蛋白数量分别为170和80个。根据endo-siRNA密度将蛋白分为两组后的分析结果显示,Ago2-/-卵母细胞中endo-siRNA密度与蛋白质水平变化呈正相关趋势。此外,黄超兰团队还根据LTR序列逆转录建立了新的数据库进行de novo分析,结果表明在Ago2-/-卵母细胞中可检测到的LTR衍生且上调的嵌合蛋白比例为17.6%。蛋白组学分析结果证实了嵌合蛋白的存在,并进一步说明Ago2-endo-siRNA介导的翻译调控广泛存在于小鼠卵母细胞中。  此前,黄超兰团队与浙江大学方群团队合作在单细胞蛋白组学分析研究领域取得突破性进展,成果于2018年发表在AnalyticalChemistry上[1]。目前基于质谱的“单细胞”和“极微量样品”蛋白质组学技术已上升到皮升级gOAD chip (3.0), 连续在2019和2020年的国际权威会议上被认可为单一体细胞中鉴定最高蛋白量的最灵敏方法。多组学中心在黄超兰教授的带领下,将继续深耕前沿技术方法开发,为推动基础生物学和临床领域的创新研究提供最有质量保证的蛋白质组和质谱技术手段。  北京大学医学部精准医疗多组学研究中心主任黄超兰教授,中国科学院生物物理研究所薛愿超研究员,广东省第二人民医院孙青原教授为本文的共同通讯作者 中科院生物物理所博士研究生苏瑞宝、生物物理所副研究员曹唱唱、动物所博士研究生樊立华为本文的共同一作。
  • 解码“风云四号”七玄机 四大探测仪为大气做“CT”
    2010年3月,我国风云四号科研试验卫星工程正式立项。中国航天科技(000901,股吧)集团公司八院风云四号卫星系统总师董瑶海说,早前也试图与欧洲合作,但一个小小的元器件,欧洲人却开出比整星还贵的天价——“5亿元人民币你要不要?”  航天高技术是买不来的。近七年的钻研,打造出这颗设计寿命七年的风云四号,最令董瑶海自豪的是,“所有的核心技术都是自主研发的”。  “六”面柱体构型运行更稳定  风云四号采用六面柱体构型,具有对地面大、质心低等优点,有利于安装体积更大、数量更多的有效载荷,能让卫星在太空中更稳定地运行。  “五”项任务体重超五吨  风云四号重达5.4吨有五大任务:获取地球表面和云的多光谱、高精度定量观测数据和图像,获得高频次的区域图像 实现大气温度和湿度参数的垂直结构观测 实现闪电成像观测 完成卫星图像、遥感数据及产品分发和灾害性天气警报信息发布 监测太阳活动和空间环境等。  “四”大有效载荷为大气做“CT”  中国航天科技集团公司八院风云四号卫星工程总师李卿介绍,风云四号观天象、测风云靠的是装载多通道扫描成像辐射计、干涉式大气垂直探测仪、闪电成像仪和空间环境监测仪器包等4个探测载荷,直接为大气做“CT”,达世界领先水平。  “三”轴稳定效率提高20倍  与卫星风云二号采用的自旋稳定控制不同,三轴稳定控制能让风云四号在X、Y、Z三个方向上均相对地球保持姿态不动,让卫星的有效载荷始终对准需要观测的目标,从而将观测效率与风云二号相比提高近20倍。  “二”代静止轨道气象卫星升级  我国气象卫星有极轨和静止轨道两个序列。目前,极轨气象卫星方面,新一代的风云三号卫星已全面取代风云一号卫星 静止轨道气象卫星中,风云二号首星发射距今已有19年,作为第二代静止轨道气象卫星的首发星,风云四号为我国静止轨道气象卫星的升级换代吹响号角。  “一”个太阳“翅膀”首次亮相  为了使卫星上的红外探测仪不受太阳帆板上产生红外辐射反射的影响,风云四号首次采用单太阳翼的设计,保证卫星在三万六千公里高空作业的定标精度和稳定。
  • 赛默飞发布针对左乙拉西坦中四丁基铵的检测方案
    2015年8月20日,北京——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)近日发布针对左乙拉西坦中四丁基铵的检测方案。左乙拉西坦是一种新型吡咯烷酮衍生物型抗癫痫药物。左乙拉西坦的结构和作用机制均与已上市的其他抗癫痫药物不同,具有较强的抗癫痫作用。四丁基溴化铵是在左乙拉西坦的合成过程中作为相转移催化剂使用,原料药的合成工艺准则要求必须要严格控制其残留量。赛默飞发布的测定左乙拉西坦原料药中四丁基胺的离子色谱方法,采用Thermo ScientificTM DionexTM ICS-900 基础型离子色谱系统,样品中基体不影响待测物质的准确分析。ICS-900配备SCS1柱容量较小的分析柱,采用MSA+35%乙腈作为淋洗液,采用抑制电导的方式检测,四丁基胺的检出限可以做到8 ug/L,待测物四丁基胺在SCS1上的峰形很对称,方法分析速度快,操作简便,灵敏度等均可完全能够满足左乙拉西坦中残留的四丁基胺根离子的检测要求。ICS-900基础型离子色谱系统检测方案下载地址:www.thermoscientific.cn/content/dam/tfs/Country%20Specific%20Assets/zh-ch/CMD/Chrom/pharma/documents/Suppressed-Conducitivity-Ion-Chromatography-Method-Determination-Tetrabutyl-Ammonium-Levetiracetam.pdf----------------------------------------------------关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元,在50个国家拥有约50,000名员工。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于首要品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific和Unity Lab Services,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉、昆明等地设立了分公司,员工人数约3700名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站:www.thermofisher.com
  • IF: 50.5! NanoTemper 解密 Nature 顶刊蛋白质与核酸互作发文思路
    01研究背景CRISPR系统是在原核生物中发现的一种适应性免疫系统,可保护宿主细胞免受外来DNA的入侵。作为噬菌体和细菌免疫系统之间持续斗争的一部分,CRISPR系统已经进化成各种类型,每种类型都具有不同的功能。Cas9蛋白通过向导RNA(sgRNA)切割外源DNA的免疫特性被广泛研究和应用到基因编辑领域。II型Cas9是这些系统中研究最广泛的,具有多种亚型。目前尚不确定该家族成员是否能进化出额外的机制来对抗病毒入侵。 本期文献,研究者们通过前期鉴定大量基因及蛋白预测工作,揭示了II-C型Cas9的三个结构生长轨迹,进而发现了Chrysobacterium物种的CbCas9会与CRISPR–Cas系统促进(pro-CRISPR)蛋白(PcrIIC1)形成异源四聚体复合物。验证PcrIIC1能够作为一种CRISPR免疫增效子。作者借助MST技术直接在分子层面直观揭示了PcrIIC1免疫增效子的增强效果,降低实验设计难度,节省大量成本和时间。https://doi.org/10.1038/s41586-024-07486-xIF: 64.8 Q102研究内容2024年5月29日,清华大学生命学院刘俊杰 (Jun-Jie Gogo Liu) 课题组联合北京大学生命学院白洋课题组和清华大学生命学院陈春来课题组在 Nature 杂志在线发表了题为“Pro-CRISPR PcrIIC1-associated Cas9 system for enhanced bacterial immunity” 的研究论文。 研究者鉴定了2062个完整的Cas9基因座,预测出相关蛋白结构,并揭示了II-C型Cas9的三个结构生长轨迹。研究者发现新的相关基因(NAG)往往存在于较大的II-C Cas9的基因座中。通过生化实验和冷冻电镜解析复合体结构表明,来自金黄色细菌属(Chryseobacterium sp.)的CbCas9生长出了一个全新的增强Cas9活性的β-REC2结构域,以及一个全新的能够与其关联基因PcrIIC1互作的CTH结构域。通过蛋白间相互作用,2个CbCas9蛋白和2个PcrIIC1蛋白能够形成异源四聚体复合物。这意味着PcrIIC1可以在整个CRISPR防御过程中与CbCas9结合。为什么PcrIIC1要和Cas9结合呢?研究者通过MST实验直观地揭晓了答案。MST实验显示PcrIIC1和apo-CbCas9之间具有中等的结合亲和力(Kd=2.56±0.28μM)(图1a)。值得注意的是,PcrIIC1和CbCas9–sgRNA之间的结合亲和力增加到334±120 nM的Kd值,PcrIIC1和Cb Cas9–sgRNA–dsDNA之间的结合亲和性增加到275±86 nM(28 bp)(图1b,c),表明sgRNA表达可能作为天然宿主中异源四聚体组装的检查点。(CRISPR免疫防御系统是通过Cas9蛋白与sgRNA结合来切割外源DNA来实现的,这个特性也被广泛研究和应用到基因编辑领域。) 图1. MST和冷冻电镜分析CbCas9和PcrIIC1结合的三个阶段 CbCas9与PcrIIC1结合后复合物有什么作用,为什么说PcrIIC1是免疫增效子呢?MST实验也给出了直观的答案。与单独的CbCas9相比,CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合(图2a)进而体现出切割活性,对原间隔区相邻基序序列的兼容性更广,对错配的耐受性更强,抗噬菌体免疫性增强。图2. PcrIIC1增强CbCas9的DNA结合(a)、切割(b)、PAM兼容性(c)、DNA解旋 (d) 和错配容忍 (e) 能力*图片来源https://life.tsinghua.edu.cn/info/1131/5848.htm 最后,为了检验CRISPR免疫增效子PcrIIC1对CbCas9抗噬菌体免疫能力的影响,研究人员在大肠杆菌中进行了抗噬菌体实验。实验结果表明PcrIIC1显著提升CbCas9系统对噬菌体的抵抗,且如果破坏CbCas9与PcrIIC1的相互作用,会导致增强的免疫力丧失。以上结果说明CbCas9-PcrIIC1复合体的形成对整个CRISPR-Cas系统的免疫增强至关重要。03技术优势本研究利用MST技术在分子层面直观的揭示了免疫增效子PcrIIC1的作用。对于分子互作亲和力的检测,Monolith系列仪器不依赖于分子量变化,蛋白用量少,是一种在溶液状态下表征分子互作的技术。对于蛋白可能需要形成多聚体,在溶液环境下,更能有效的体现蛋白与蛋白互作的真实情况。当蛋白质形成复合物后,进一步的功能探究,如蛋白复合物与核酸的相互作用,通过Monolith系列仪器进行的实验设计更为简便,能够直观地展示相互作用的结果,从而凸显您研究的分子功能。Monolith分子互作检测仪
  • 倩碧、兰蔻、迪奥、雅诗兰黛四大品牌化妆品查出违禁物质
    继广东省和上海市两地查出SK-Ⅱ化妆品含有铬和钕之后,倩碧、兰蔻、迪奥、雅诗兰黛四大知名品牌化妆品也被卷入风波,其六种粉饼含有的铬、钕等违禁物质被香港标准及鉴定中心查出。  四大品牌均含违禁物质  香港有线电视22日有报道称,倩碧、兰蔻、迪奥、雅诗兰黛四个品牌的化妆品被香港标准及鉴定中心查出含有铬、钕等违禁物质。其中,倩碧与雅诗兰黛都是隶属于美国雅诗兰黛集团,而兰蔻则属于欧莱雅集团,后者为全球最大的化妆品集团。  报道中称,在四大品牌的六款粉饼中,香港标准及鉴定中心的测试显示,其中一款迪奥和雅诗兰黛的粉饼铬含量分别达到4.5毫克/千克和3.9毫克/千克,都高于之前内地对部分SK-Ⅱ产品的测试数据。同时,一款美国产的倩碧品牌粉饼和日本产的雅诗兰黛粉饼钕的含量分别是1.8毫克/千克和1.6毫克/千克。另外,其他品牌粉饼也都含有铬、钕等物质。  对于这一突发事件,欧莱雅(中国)与雅诗兰黛(中国)昨日均没有表态。记者了解到,由于这两个集团中被卷入违禁物质事件的品牌均属于进口化妆品,所以其执行的都是欧盟或美国的有关标准。  记者通过香港化妆品同业协会了解到:铬和钕这两种金属元素并未在欧盟、日本以及美国作为化妆品列管项目,而欧盟的“COUNCIL DIRECTIVE 76/768/EEC”《欧洲化妆品产品法例》有规定“铬酸和其盐”及“钕酸和其盐”不得作为化妆品的原料,但若在生产时已采用优良生产程序而不可避免地残留微量,并在一般合理情况下不会使消费者受影响,则该微量在这法例下是可以接受的。  根据香港化妆品同业协会的说法,铬绿(CI77288、CI77289)是被欧盟、日本、美国列为许可的化妆品色素。“这两种元素存在于化妆品原料中的可能性不大。”一位供职于某大型跨国公司研发中心的资深研发人士对本报记者分析称,“铬和钕这两种微量元素极有可能是系统性添加进配方中。如果并非如此,那么涉及到两种元素的化妆品公司都应该对外提供出相关的证据,以说明微量元素的来源,例如,是来源于原料中的水,还是其他物质。这才能真正解除消费者的疑虑。”  SK-Ⅱ暂停在中国销售  9月22日,SK-Ⅱ已对外发表声明,决定暂停其在内地的产品销售。同时表示,其相信产品是安全的,但是仍然做出此项决定,直至确认符合内地在售化妆品中所含微量铬和钕的相关规定。  声明称,SK-Ⅱ在内地的退货服务中心从2006年9月22日起暂时停止运作。在2006年9月21日以前受理的有效退款要求将按照已达成的协议向消费者支付。从即日起,改由24小时服务热线处理消费者的退款要求。此前,对消费者的退款是基于善意的原则进行的,公司正在努力通过最有效的退款程序,来确保消费者和公司员工的安全。  同时,记者从宝洁公司内部人士处了解到,宝洁公司正在积极准备,有望近期对外公开发布事件进展。同时公司已经制定了下一步战略,即全面、彻底地与媒体进行沟通。宝洁公司最高领导人在一次内部会议中强调,中国销售的SK-Ⅱ和日本销售的产品,都是在同一家日本工厂生产的,执行的也是统一标准。  另外,上海市食品药品监督管理局表示,SK-Ⅱ的12种产品在沪分别验出铬、钕,其中3种产品在国家质检总局此前公布的名单之外,包括SK-Ⅱ护肤洁面霜、SK-Ⅱ活肤抗皱修护膜、SK-Ⅱ重点净白精华液。  相关链接  SK-Ⅱ是否有害健康依然没有定  上周,香港海关在市面上抽取SK-Ⅱ品牌的九种化妆品样本。海关先将样本送交政府化验所作安全测试,再向卫生署征询涉及健康的专业意见。  海关认为,现在并无证据显示被发现含有微量铬或钕的化妆品不符合《消费品安全条例》内的一般安全规定。  政府化验所的测试样本结果显示,上述九款化妆品样本中,八个样本所含铬成分为每千克0.02毫克至0.40毫克,而其中一个样本含钕成分为0.01毫克/千克。另外一款的“净白修护粉饼”所含铬及钕成分分别为5.20毫克/千克及4.20毫克/千克。  海关发言人说:海关引用的是《中华人民共和国国家标准化妆品卫生标准》(GB7916-87)及欧盟议会指令《Cosmetic Directive of E u ro p e a n C o m m is s io n》(7 6 /7 6 8 /EEC)作执法用途,根据这两个标准,铬及钕均不能作为化妆品的成分之一,但是欧盟议会指令允许残留微量的铬及钕在正规生产过程中存在。含有该微量铬及钕的化妆品在正常使用情况下对人体还不能构成伤害。  香港卫生署表示,目前,铬及钕在化妆品可接受的含量,并没有一个确定可接受的水平,也没有一个关于钕可接受的每天吸取分量水平。鉴于九款化妆品样本化验结果所含的铬分量轻微,正常使用含有该分量铬的化妆品对人体构成的健康风险较低。  9月22日香港海关相关负责人告诉某香港媒体,卫生署表示,上述九种样本所含的铬属微量,在正常使用含有该分量铬的化妆品对人体构成的健康风险应属低。在考虑到其中一个测试样本“净白修护粉饼”含有微量钕成分,而每天正常使用该产品的分量属少量,海关相信该样本若在正常使用下,属于安全范畴。  新加坡卫生科学局日前也发表声明,称初步检测显示,在新加坡市场销售的SK-Ⅱ重点净白素肌粉饼、清透防晒乳液、多元修护精华霜、护肤洁面油、护肤精华露和护肤面膜产品中,含有微量的重金属成分铬和钕,但不会构成安全威胁。
  • 掺氮直拉单晶硅(Nitrogen-doped CZ Silicon, NCZ-Si)中氮的低温远红外测量
    在半导体材料领域,硅基半导体材料目前产量最大、应用最广,90%以上的半导体产品仍用单晶硅作为衬底材料制作。目前大尺寸硅片已成为硅片市场最主流的产品。硅片生产中在拉晶过程中,需要解决氧含量及径向均匀性、杂质的控制、缺陷控制、氧沉淀控制、电阻值定量、掺杂及径向均匀性等众多问题,同时对检测表征等保障技术也提出了更高的要求。直拉晶体硅中掺氮可用来调控原生氧沉淀和空洞型缺陷,从而提高硅晶体的质量,已经在产业界广泛应用,除了间隙氧、代位碳、III-V族元素检测以外,氮的测量也是硅材料界的一个热点课题。众所周知,直拉单晶硅中含有较高浓度(浓度范围1017-1018cm-3)的间隙氧(Oi),当氮掺入直拉硅单晶中时,除了以氮-氮对(N-N)形式存在以外,氮还会和氧作用形成氮氧复合体(N-Ocomplexes)。研究显示氮氧复合体会引起红外的局域模振动吸收和电子跃迁吸收,可以被红外吸收光谱技术探测到。在低温(10K左右)条件下,氮氧复合体在远红外波段有一系列由于电子跃迁产生的吸收峰,目前已经报导了7种氮氧复合体[1,2,3]。针对直拉单晶硅中杂质元素以及氮氧复合体的测量,布鲁克CryoSAS全自动、高灵敏度工业低温硅质量控制分析系统,通过测试位于中/远红外波段间隙氧(1136.3cm-1,1205.6cm-1)[7],代位碳(607.5cm-1)[6,7],III-V族元素[4,5]以及氮氧复合体吸收谱带(249.8,240.4cm-1[1,2]),通过直接或间接计算获得相应元素含量值。布鲁克CryoSAS系统主要特点:波段范围1250-230cm-1,覆盖了间隙氧(Oi)、代位碳(Cs)、III-V族浅能级杂质元素(硼B,磷P,砷As,铝Al,镓Ga,锑Sb,符合SEMI/ASTMMF1630-0704标准)以及N-N对,氮氧复合体[N-O-(1-6)]吸收谱带[4,5,6,7]闭循环低温冷却系统,T<15K,无需昂贵的液体制冷剂[4]不锈钢、真空样品室设计坚固、精确的步进电机,带有9位样品架简单易用(文献[1])(文献[3])如果您对此方法感兴趣,欢迎您来电垂询,交流、沟通。参考文献:[1]H.Ch.Altetal.AnalysisofelectricallyactiveN-Ocomplexesinnitrogen-dopedCZsiliconcrystalsbyFTIRspectroscopy,MaterialsScienceinSemiconductorProcessing9(2006)114-116.[2]H.Ch.Altetal.Far-infraredabsorptionduetoelectronictransitionsofN-OcomplexesinCzochralski-grownsiliconcrystals:influenceofnitrogenandoxygenconcentration,Appl.Phys.Lett.87,151909(2005).[3]《半导体材料测试与分析》,杨德仁等著[4]https://www.bruker.com/zh/products-and-solutions/infrared-and-raman/silicon-analyzer/cryo-sas-cryogenic-silicon-analyzer.html[5]SEMIMF1630-0704TestMethodforLowTemperatureFT-IRAnalysisofSingleCrystalSiliconforIII-VImpurities[6]SEMIMF1391-1107TestMethodforSubstitutionalAtomicCarbonContentofSiliconbyInfraredAbsorption[7]GB/T35306-2017硅单晶中碳、氧含量的测定低温傅立叶变换红外光谱法
  • 公司新闻:北京佰司特中标中标浙江大学的超快速高分辨大分子互作显微镜项目
    北京佰司特贸易有限责任公司中标浙江大学的超快速高分辨大分子互作显微镜项目 公司新闻:北京佰司特贸易有限责任公司成功中标浙江大学的超快速高分辨大分子互作显微镜项目。项目编号:QSZB-Z(H)-A22417(GK)项目名称:超快速高分辨大分子互作显微镜 超快速高分辨大分子互作显微镜用来在溶液下对生物大分子(蛋白、DNA、RNA、病毒等)、细胞等进行高速高分辨三维成像,测量分子与分子之间的相互作用力,特异性生物大分子的构象识别。1. 工作条件:1.1 适于在电源 220V(10%)/50Hz、气温摄氏+15℃~+30℃和相对湿度小于 70% 的 环境条件下运行能够连续正常工作。1.2 配备基础防尘条件,避免光学元件受到污染2. 技术规格:2.1 超快速高分辨大分子互作显微镜2.1.1 生物大分子或者待检测物质无需特殊标记,即可在液体或大气环境下实时进行成像观测。成像分辨率不低于2nm。▲2.1.2 检测模式: 扫描管移动扫描的轻敲模式,多种成像模式共同探测。2.1.3 探测所需探针需适合生物大分子,尤其是蛋白质或者DNA。探针弹性系数不大于0.1 N/m;曲率半径不大于10nm;共振频率400-600kHz(液体环境下)。▲2.1.4 用于生物大分子的标准扫描管扫描模式:最高扫描成像速度能达到 20 帧/秒,线扫速度不小于1500line/秒;扫描尺度不小于500nm×500nm(XY方向),300纳米(Z方向)。(需要有相关数据支撑。未提供或不符合要求的视为本项负偏离)2.1.5 配备细菌对光反射所需的紫外光学系统。2.1.6 用于活细胞成像超大尺度扫描模式:高扫描成像速度不小于 0.1帧/秒,扫描尺寸不小于 30微米×30微米(XY 方向),1.2微米(Z方向)。2.1.7 样品台扫描,XYZ三轴扫描台独立控制,满足高速扫描需求。▲2.2 具备动态PID反馈,实时调整增益。2.2.1 悬臂探针自动漂移校准,适用于长时间样品观测。2.2.2 频谱放大器:差分频谱放大器,傅里叶变换分析系统确保信号准确2.2.3 具备主动扫描驱动漂移校正系统2.2.4 具备PID控制模块,可驱动压电位移台实时反馈。2.3 专用微流控模块:可快速替换样品池中的组分,以改变其成分及 pH值;2.4 加热模块:室温至50℃连续可调;2.5 紫外光学系统:可以将紫外光整合导入到原子力显微镜的扫描探针部位。2.6 减震系统:宽带阻尼结构工作桌面,可消除表面共振;尺寸≥0.7m*0.7m,负载≥100 kg; 固有频率:垂直:1.0~2.0Hz 水平:1.0~2.0Hz;振幅:1(um); 2.7 仪器采集软件系统:可实时观测采集数据2.8 操作台主机:主机配置不低于Intel Core# i5处理器;一个256GB SSD硬盘;一个2TB的HHD硬盘;16GB内存;27寸显示器,分辨率2560*16002.9 数据分析软件系统2.9.1 2D/3D 数据分析▲2.9.2 可导出原始数据和分析得到的视频数据。3.产品配置要求: 3.1 超快速高分辨大分子互作显微镜 1套3.2 标准成像模块 1套3.3 超大尺度扫描模块 1套3.4 防震台 1套3.5 成像用探针 20根3.6 配套工作站及软件 1套 2022 年 12 月 16 日 北京佰司特贸易有限责任公司 (https://www.best-sciences.com):类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC;单分子质量光度计-TwoMP;灌流式细胞组织类器官代谢分析仪-IMOLA;光片显微镜-LSM-200;超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM;蛋白质稳定性分析仪-PSA-16;全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT;农药残留定量检测仪(台式)—BST-100;农药残留定量检测仪(手持式)—BST-10A;蓝光/绿光LED凝胶成像;台式原子力显微镜-ACST-AFM;微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000;
  • 坐镇主场!连华科技重磅亮相CISILE2021北京科仪展!
    2021年5月10日,第十九届中国国际科学仪器及实验室装备展览会(CISILE2021)在北京国家会议中心隆重开幕,连华科技应邀参与本次盛会,将以“主场”视角为您展示近40年来连华科技取得的发展与成就,让我们拭目以待。 高端专业展会 聚焦科仪领域 CISILE2021经由中华人民共和国商务部批准,获得中国机械工业联合会、中国出入境检验检疫协会支持,中国仪器仪表行业协会和世信国际会展集团主办,北京朗普展览有限公司承办,展会为期3天。展会期间,还将同期举办第二届中国实验室发展大会、第二届中国危化品管理与实验室安全高峰论坛、生物实验室设计建设与安全管理论坛等活动,为广大科研人员及行业人士便捷地获取行业热点资讯、分享前沿技术和研究成果、交流研讨产业政策搭建的平台。捍卫“主场”优势 全面展示风采 连华科技自2012年总部迁入北京,至今已有9个年头,经过连华人的不断奋斗,形成以北京为中心,北京、兰州、银川三大标准化生产基地,16个分公司及办事处遍布国内,构架出成熟的研发、生产、销售、服务体系。本次参加CISILE2021北京科仪展,凭借“主场”参展优势,现场展出了十余款人气热销、原研新品仪器,吸引了大量参展嘉宾驻足观看,连华的业务代表们铆足了十二分精神,为嘉宾们答疑解惑,现场热闹非凡。前台咨询,人气火爆技术介绍,认真详细深入交流,商务洽谈40年匠心发展 品质值得信赖 作为深耕水质检测行业近40年的国产老牌企业,连华科技拥有成熟的水质监测仪器研发、生产、销售体系,积累了大量的技术优势与行业经验。目前已研发出多参数、COD、氨氮、BOD、总磷、总氮、重金属等水质分析仪二十余系列及丰富的专业配件、试剂,可测定百余项水质指标,累计为超百万名客户提供服务与支持。连华科技多年来始终坚持“实事求是、尊重用户、坚守诚信”的服务理念,推出“5G”心服务,用实际行动为客户权益保驾护航,在产品上和服务商奠定了强大的口碑优势。相约T64展位 精彩不负此行团队合影,共创佳绩 CISILE2021北京科仪展将持续3天,至5月12日下午15:00闭幕,诚挚邀请您莅临连科科技T64展位现场参观考察,我们将为您展示水质检测前沿技术,量身定制产品采购、水质监测方案,深入探讨交流与合作。现场更有幸运大转盘福利活动,参与即可赢取我们精心准备的小礼品一份,心动赶紧行动吧!
  • 我国科学家首次解析病毒RNA与宿主蛋白质互作网络
    以流感为代表的由RNA病毒引发的疾病严重威胁人类健康,甚至影响社会经济发展。RNA作为RNA病毒的遗传物质,在致病过程中发挥着关键作用,但很少有研究报道病毒RNA与宿主蛋白间的相互作用。近期,我国科学家首次解析了多种病毒RNA与宿主蛋白质互作的关系网络,研究成果发表在《Cell Research》,标题为“Comparison of viral RNA–host protein interactomes across pathogenic RNA viruses informs rapid antiviral drug discovery for SARS-CoV-2”。  研究人员采用RNA结合蛋白综合鉴定(Comprehensive identification of RNA-binding proteins by mass spectrometry)技术,全面解析了新冠病毒(SARS-CoV-2)、寨卡病毒(ZIKV)和埃博拉病毒(EBOV)这3种RNA病毒在侵染状态下病毒基因组RNA与宿主蛋白的互作网络。基于病毒基因组RNA-宿主蛋白互作网络,研究人员鉴定出一系列参与不同病毒感染的宿主蛋白质复合物,并深入解析多种宿主因子在病毒感染过程中的功能。在此基础上,研究人员建立了靶向宿主蛋白质的抗病毒药物筛选方法,并筛选出多个具有广谱抗病毒活性的药物。  该研究不仅绘制了不同病毒RNA-宿主蛋白质的互作网络,为病毒学和抗病毒研究提供了重要的研究资源,还为抗病毒药物的研发提供了新的视角。   论文链接:  https://www.nature.com/articles/s41422-021-00581-y  注:此研究成果摘自《Cell Research》期刊原文章,文章内容不代表本网站观点和立场,仅供参考。
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