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二没食子酸酯茶黄素

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  • CNS_04.023_茶黄素

    CNS_04.023_茶黄素

    [align=center]茶黄素[/align][align=center] 邱雪[/align][align=left]摘要：[font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]茶黄素是一种金黄色色素，是茶叶发酵的产物[/back][/color][/font][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]。其在人体的身体健康保健中有不可忽视的作用。[/back][/color][/font][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]这篇文章将从多个方面向大家介绍茶黄素。并且介绍一些检测方法[/back][/color][/font][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]检测其在[/back][/color][/font][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]含量。[/back][/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]关键词：理化性质；应用；限量；检测；标准[/back][/color][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]1.[/back][/color][/font][font='arial'][color=#333333][back=#ffffff]前言[/back][/color][/font][/align]茶黄色素又称茶黄素，是存在于红茶中的一种金黄色色素，是茶叶[url=https://baike.baidu.com/item/%E5%8F%91%E9%85%B5/661835][color=#000000]发酵[/color][/url]的产物。在生物化学上，茶黄色素是一类多酚羟基具苯骈酚酮结构的物质，是第一个从茶叶中找到具有确切药理作用的化合物。茶黄色素占干茶重量的0.5%到2%，且取决于红茶加工的方法。茶黄色素在茶汤中鲜亮的颜色和浓烈的口感方面，起到了一定的作用，是红茶的一个重要的质量指标。茶黄色素以多酚类物质、[url=https://baike.baidu.com/item/%E5%84%BF%E8%8C%B6%E7%B4%A0][color=#000000]儿茶素[/color][/url]为主要成分，还含有[url=https://baike.baidu.com/item/%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8][color=#000000]氨基酸[/color][/url]、维生索C、[url=https://baike.baidu.com/item/%E7%BB%B4%E7%94%9F%E7%B4%A0E][color=#000000]维生素[/color][/url][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%BB%B4%E7%94%9F%E7%B4%A0E][color=#000000]E[/color][/url]、[url=https://baike.baidu.com/item/%E7%BB%B4%E7%94%9F%E7%B4%A0A%E5%8E%9F][color=#000000]维生素[/color][/url][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%BB%B4%E7%94%9F%E7%B4%A0A%E5%8E%9F][color=#000000]A[/color][/url][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%BB%B4%E7%94%9F%E7%B4%A0A%E5%8E%9F][color=#000000]原[/color][/url]、[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BB%84%E9%85%AE][color=#000000]黄酮[/color][/url]及[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BB%84%E9%85%AE%E9%86%87][color=#000000]黄酮醇[/color][/url]等。茶黄素是茶色素的主要成分，共有12种组分，其中茶黄素、[url=https://baike.baidu.com/item/%E8%8C%B6%E9%BB%84%E7%B4%A0-3-%E6%B2%A1%E9%A3%9F%E5%AD%90%E9%85%B8%E9%85%AF/9600430][color=#000000]茶黄素[/color][/url][url=https://baike.baidu.com/item/%E8%8C%B6%E9%BB%84%E7%B4%A0-3-%E6%B2%A1%E9%A3%9F%E5%AD%90%E9%85%B8%E9%85%AF/9600430][color=#000000]-3-[/color][/url][url=https://baike.baidu.com/item/%E8%8C%B6%E9%BB%84%E7%B4%A0-3-%E6%B2%A1%E9%A3%9F%E5%AD%90%E9%85%B8%E9%85%AF/9600430][color=#000000]没食子酸酯[/color][/url]、茶黄素-3,3’-双没食子酸酯和茶黄素-3’-没食子酸酯是4种最主要的茶黄素。在茶叶加工中主要由简单儿茶素和[url=https://baike.baidu.com/item/%E6%B2%A1%E9%A3%9F%E5%AD%90%E5%84%BF%E8%8C%B6%E7%B4%A0/9802086][color=#000000]没食子儿茶素[/color][/url]配对氧化缩合而成。茶黄素类的发现与红茶发酵过程的研究密切相关。[font='calibri'][size=13px][1][/size][/font]2.[font='b5+华光楷体_cnki'][size=18px] [/size][/font]分子结构和理化性质[font='calibri'][size=13px][1][/size][/font]茶黄素是一类具有苯并卓酚酮结构化合物的总称[font='calibri']?[/font]其中茶黄素（theaflavin[font='calibri']?[/font]TF1）、茶黄素-3-没食子酸酯（theaflavin-3-gallate[font='calibri']?[/font]TF2A）、茶黄素-3′-没食子酸酯（theaflavin-3′-gallate[font='calibri']?[/font]TF2B）和茶黄素双没食子酸酯（theaflavin-3[font='calibri']?[/font]3[font='calibri']′[/font]-digallate[font='calibri']?[/font]TF3）是4种主要的茶黄素[font='calibri']?[/font]其化学结构如图1。茶黄素的红外光谱表明[font='calibri']?[/font]所有茶黄素的最大吸收都出现在380nm和460nm。茶黄素纯物呈橙黄色针状结晶[font='calibri']?[/font]熔点237～240[font='宋体']℃[/font][font='calibri']?[/font]易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇和乙酸乙酯难溶于乙醚不溶于三氯甲烷和苯。茶黄素溶液呈鲜明的橙黄色水溶液呈弱酸性pH 约5．7[font='calibri']?[/font]颜色不受茶提取液 pH 影响[font='calibri']?[/font]但在碱性溶液中有自动氧化的倾向且随pH的增加而加强。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161930268731_216_1608728_3.png[/img]图13. 茶黄素的药理功效[font='calibri'][size=13px][2][/size][/font]3.1 抗氧化自由基学说认为，正常人体内的自由基与抗氧化物质处于平衡状态。 当人体器官和组织的细胞膜在自由基过量时便可能遭受其进攻，引起脂质过氧化、蛋白质变性、DNA 链断裂、细胞解体、机体衰老，并可能诱发肿瘤等恶性疾病。 体内过量的超氧阴离子及双氧水等，是产生毒副作用的重要因素。 细胞中的主要抗氧化酶超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）能够将 超 氧 阴 离 子 催 化 分 解 为 双 氧 水 （Hydrogen Oxygen，H2O2），H2O2 在过氧化氢酶（Catalase，CAT）或硒谷胱甘肽过氧化物酶 （Selenium-glutathione Peroxidase，Se-GSH-Px）催化作用下迅速转化为无毒的 O2 和 H2O。 TFs 具有良好的抗氧化性，如 TFs可以清除自由基，防止脂质过氧化，提高 SOD、谷光 甘 肽 硫 转 移 酶 （Glutathione S -Transferase，GST）、醌还原酶（Quinone Reductase，QR）的活性，增强人体免疫力。在低密度脂蛋白 （Low Density Lipid，LDL）模型中，TFs 能够抑制二价铜离子介导的脂质过氧化。 研究表明，巨噬细胞中 LDL 氧化程度与金属离子浓度有关，金属离子浓度升高，LDL 氧化程度也升高，而 TFs 能抑制 LDL 的氧化，这与它能螯合金属离子有关。 YOSHIDA 等和 HAN 等用 TFs 类化合物分别处理鼠巨噬细胞和人内表皮细胞，以考察细胞 LDL 氧化能力，结果显示 TFs能与脂质氧合酶的活性中心铁结合，从而降低脂质氧合酶的活性，并抑制细胞 LDL 氧化。另外，TFs对外源性因子引起的生物膜脂质过氧化反应有较好的效果。如持续高强度的有氧运动会使肌肉酸痛肿胀，每天给予高强度有氧运动的男大学生1760 mg 富含茶黄素的红茶提取物，持续 9 天，发现其能够缓解酸痛肿胀，即茶黄素能够提高肌肉损伤恢复能力并降低氧化应激程度。茶黄素作为天然植物多酚类成分，可形成氢自由基，淬灭体内产生的自由基，从而保护组织，起到延缓衰老、抗突变、抗癌、杀菌消炎、防治心血管疾病和动脉粥样硬化等功能， 故在医药领域得到人们广泛关注。因此，加强茶黄素类成分抗氧化机理研究与临床用药的应用显得尤为迫切。3.2 抗心脑血管疾病 心血管疾病是心脏和血管疾患的总称，包括高血压、冠心病、脑血管疾病（中风）、周围血管疾病、血栓性疾病、动脉粥样硬化、心力衰竭、心脏病等。经济转型、城市化、工业化及全球化带来生活方式的改变，包括吸烟、缺乏活动、不健康饮食是导致心血管疾病增加的重要因素。每年死于心血管疾病的人数多于其它任何病因，成为全球头号死因。 MARON 等设计了一种含有75 mg TFs、150 mg儿茶素和150 mg其他多酚的胶囊， 给予240 名 18 岁以上高胆固醇成年人群低脂饮食 12周，且每日服用该胶囊。结果表明试验组能够使总胆固醇及低密度脂蛋白分别降低 11.3%和 16.4%，高密度脂蛋白与甘油三酯增长2%左右，降脂效果优于不含 TFs 的绿茶多酚胶囊。茶黄素不仅通过抑制脂肪酸合成、 激活脂肪酸的氧化消耗来降低脂肪积累，也通过肝激酶 B（Liver Kinase B1，LKB1）与活性氧途径激活 5'—磷酸腺苷 （Adenosine 5'-Monophosphate，AMP）依赖的蛋白激酶（Activated Protein Kinase，AMPK）达到抑制乙酰辅酶 A 羧化酶，降低肝脏脂质累积的作用。在试验组与对照组在粪便量上没有显著差异的情况下，茶黄素能够抑制高脂饮食肥胖鼠体重增加及内脏脂肪累积。茶黄素可以明显抑制由胶原、ADP、前列腺素 H2（PGH2）/血栓素 A2（TxA2）（TP）受体激动剂 U46619 等多种刺激剂引起的人体血小板聚集，且呈现出剂量依赖效应。茶 黄 素 还是血小板非受体酪氨酸激酶（NonReceptor Cytoplasmic Tyrosine Kinases，SYK）胶原引起的血小板活性的一个重要的靶点抑制剂，茶黄素组和对照组相比，小鼠肠系膜动脉血管形成血栓性堵塞的时间明显延长，充分证明了茶黄素对血小板功能的抑制，且优于目前临床使用的抗血小板药物，如存在着出血、引起胃肠道不适等副作用的药物阿司匹林。3.3 抗炎症作用炎症（Inflammation）是机体对于刺激的一种防御反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍，包括感染引感染性炎症及非感染性炎症。任何能够引起组织损伤的因素，如致炎因子 （Inflammatory Agent）都可成为炎症的原因。每日口服 5 mg/kg 剂量的TF-3，3’-G 能够显 著改善三硝基苯磺酸（Trinitro Benzene Sulfonic Acid，TNBS）诱导的结肠炎，降低结肠上皮粘膜肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor，TNF -α）、 白细胞介素 -12（Interleukin 12，IL-12）、人干扰素-g（Interferon-g， IFN-g） 及诱导型一氧化氮合酶 （Inducible Nitric Oxide Synthase，iNOS）基因与蛋白表达水平。同时茶黄素能抑制佛波酯促使的 TNF-α、白细胞介素 1β（Interleukin -1 beta，IL-1β）及白细胞介素6（Interleukin 6，IL-6）的活性。 TFs 能够有效阻止脂多糖 （Lipopolysaccharide，LPS） 诱导的巨噬细胞促炎反应，包括抑制IL-6、单核细胞趋化蛋白（Monocyte Chemoattractant Protein-1，MCP-1）、细胞间粘附分子-1（Intercellular Adhesion Molecule-1，ICAM-1）的表达，并有效阻止 LPS 诱导的核因子抑制蛋白（Inhibitor of Nuclear Factor kappa B alpha，IκBα）与核易位蛋白（Nuclear Translocation of REL-Associated Protein，RelA），胞外信号调控激酶（Extracellular Signal Regulated Kinase，ERK1/2）、c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun-N-Terminal Kinase，JNK）及 p38 丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-Activated Protein Kinase，p38 MAPK）的表达[14]；在急性肺损伤小鼠模型中，TF-3，3’-G 通过减少促炎因子降低急性肺损伤（Acute Lung Injury，ALI），抑制 LPS 诱导的NK及 p38 MAPK 丝裂原活化蛋白激酶的表达。风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）或骨关节炎（Osteoarthritis，OA）最明显的特征是关节软骨的损伤。引起关节损伤和疼痛的 IL-1β 和IL-18 在 RA 和 OA 中促炎症因子发挥重要作用。在 IL-1β 诱导建立的 OA 细胞模型中，TF-3，3’-G 能够明显改善 OA 软骨细胞形态，上调软骨细胞分子标志物 II 型胶原（Type II Collagen，Col II）mRNA 的表达， 还可以下调炎症因子 IL-1β 与IL-6 mRNA 的表达，降低炎症诱导酶环氧化酶（Cyclooxygenase-2，COX-2）蛋白表达量；并可增强软骨细胞合成因子活性、 减弱分解因子活性并抑制细胞炎症反应， 有效延缓大鼠软骨细胞炎性退变进程。 同时，茶黄素还可显著下调由血管紧张素 II（Angiotensin II，AngII） 诱导的促炎因子 IL -6mRNA 的表达，降低由 AngII 刺激产生的大鼠血管平滑肌细胞（Vascular Smooth Muscle Cell，VSMC）中ROS水平，达到抵抗 AngII 引起的大鼠VSMC 细胞炎症作用。慢性阻塞性肺疾病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease，COPD）的突出特征是慢性炎症致气道阻塞，引起不完全可逆的气流受限，从而引发一系列临床症状。以往的研究表明，气道黏液高分泌是导致气流受限的危险因素。在刺激气道的各种炎性因子中，中性粒细胞弹力蛋白酶（Neutrophil Elastase，NE）被认为是肺炎性级联反应的终效应分子，以及炎症气道微生态平衡的重要恶化性推动因素，茶黄素被证明能够起到抑制气道黏液高分泌的作用。此外以高频雾化的方式使大鼠吸入茶黄素乳酸-羟基乙酸共聚物（Poly Lactic Co Glycolic Acid，PLGA）纳米粒，能够抑制香烟引起的炎性气道黏蛋白（Mucoprotein 5AC，MUC5AC）高分泌作用。3.4 抗病毒与抗菌作用严重急性呼吸系统综合症（Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS）由 SARS 冠状病毒引起，该病毒属于包膜病毒，包含正极性单链 RNA，其所含有的一个开放的阅读框用于编辑两个重叠的多聚蛋白，PP1a（Polyprotein-1a，450 kDa）与PP1ab（Poplyprotein-1ab，750 kDa）负责病毒的复制。同时冠状病毒都编辑生成 Papline 类似蛋白及胰凝乳蛋白酶（Chymotrypsin，3CLPro）类似蛋白，用于病毒成熟过程中蛋白水解加工。 Papline 类似蛋白水解酶在 PP1a 蛋白上只含不超过 2 个的剪切位点，而 3CLPro 蛋白酶在PP1a 与 PP1ab 内在区域含有至少 11 个剪切位点。在720个筛选的天然化合物中仅发现 TF-3，3’-G 能够有效抑制3CLPro。并且 SARS 冠状病毒在胃肠道中的复制非常活跃， 红茶中的茶黄素类化合物具有预防该病毒对人体的侵染的应用潜力。1%的乳酸（pH4.0）能显著抑制对于单纯性 1型与 2 型疱疹病毒所引起的生殖器溃疡，但当pH4.5 时，则失去抑制活性状态。 茶黄素特别是TF-3，3’-G 能够在 5.7pH4.5 区间独立发挥作用，并在非洲绿猴肾细胞及人非小细胞肺癌细胞 A549 中得到验证。同时茶黄素还能够抗流感病毒，通过与血凝素 HA2 亚基结合，抑制病毒的神经氨酸酶活性从而抵抗高致病性禽流感（H5N1）病毒的感染。并且，TFs 可作为第二代杀微生物剂用于预防人类免疫缺陷毒（HumanImmunodeficiency Virus，HIV）的性传播，在高浓度时，还能抑制逆转录酶的活性。 白念珠菌（C.Albicans）是一种腐物寄生菌，作为机会性条件致病菌，平时生存于人体的皮肤、粘膜、 消化道及其他脏器中。当机体抵抗力降低时，白色念珠菌就会繁殖，达到一定量时，人体就会发病，通过微感染而引起的粘膜念珠菌病，对癌症、HIV 及重症病人还会造成致命性打击。茶黄素对白念珠菌 NCTC 3255 和 NCTC 3179 能够起到很强的抑制作用，其最低抑制浓度为1024 μg/mL，联合儿茶素时其最低抑菌浓度降为128 μg/mL。3.5 抗肿瘤在肝癌细胞体外处理中， 茶黄素类化合物能够通过抑制 STAT3 信号转导与转录激活因子磷酸化，并进一步阻止其下游抗凋亡蛋白 BCL-2 与生存素（Survivin）及入侵相关蛋白 MMP-2、MMP-9 来达到显著抑制肝癌细胞的迁移、入侵的作用，诱使其凋亡。此外，茶黄素类化合物对人类白血病细胞系 HL-60 与 K-562 呈剂量依赖性抑制，阻止细胞G1 期，活化 Caspase 3 和 Caspase 8，下调 BCL-2，同时上调 BAX 蛋白。4.检测[font='calibri'][size=13px][1][/size][/font]4.1 Roberts 法Roberts 法是根据茶黄素和一部分茶红素（TRsⅠ型）溶解于乙酸乙酯或4-甲基-戊酮（IBMK）这部分可利用其能溶于碳酸氢钠溶液而分离茶红素（TRsⅡ型）留在水层。该方法存在重复性差、测定含量值偏低的缺点[font='calibri']?[/font]但其方法简单、试剂价格便宜且同时测定茶红素的含量[font='calibri']?[/font]因此被广泛采用。4.2 a-氨基乙基二苯酸酯（Flavognost）试剂分析法Hiton 提出的一种快速测定方法。根据茶黄素分子中的苯并卓酚酮核可以与 Flavognost 试剂产生特异性反应产生绿色络合物测定其吸光值换算成茶黄素含量。与 Roberts 法相比[font='calibri']?[/font]该方法具有较好的重现性已被Ellis推荐为国际红茶最低质量标准的检测方法。但该法受到提取液、提取温度、水的pH值等因素的影响[font='calibri']?[/font]Flavognost 试剂仅与茶黄素顺式上的两个羟基结合[font='calibri']?[/font]使测定结果偏低[font='calibri']。[/font]同时Flavognost试剂不易购得。4.3 氯化铝比色法Likoleche-Nkhoma J W 等用 AlCl3 代 替Flavognost 试剂[font='calibri']?[/font]铝盐与茶黄素复合产生红色[font='calibri']?[/font]于波长525nm 具有最大吸收根据吸光值折算成茶黄素含量。该方法的测定值与 Flavognost 方法测定结构没有显著差异且铝盐的价格较便宜[font='calibri']?[/font]但样品中加入过量的铝盐会产生浑浊。4.4 Sephadex LH-20柱层析（Column Chromatography[font='calibri']?[/font]CC）法此方法是竹尾忠一提出的。该方法能有效地分离茶黄素而且对茶黄素的主要组分能定量[font='calibri']?[/font]但操作复杂。4.5 Whitehead 法Whitehead D L 等利用色素极性大小差异[font='calibri']?[/font]提出的一种快速测定茶黄素总量的方法[font='calibri']?[/font]该方法适于实验室和工厂的常规检测[font='calibri']?[/font]但测量值偏高。4．6 高效液相色谱法（High performance LiquidChromatography[font='calibri']?[/font]HPLC）Bailey R G 等使用光电二级管列检测器的反相 HPLC 研究红茶溶出物的性质[font='calibri']?[/font]4种茶黄素能够得到分离纯化[font='calibri']?[/font]提出了 HPLC 法测定茶黄素主要组分及其它物质的方法。HPLC 法更精确[font='calibri']?[/font]并能使各茶黄素单体得到较理想的分离。但该法需要高纯度的茶黄素标样。4.7 毛细管电泳法（Capillary Electrophoresis[font='calibri']?[/font]CE） Bee B L 等首次采用毛细管电泳测定儿茶素类化合物和茶黄素类化合物。Wright L P 等用非水相毛细管电泳测定红茶中的4种主要茶黄素[font='calibri']?[/font]并对有机溶剂的组成和电解质浓度对分离效果的影响进行了研究[font='calibri']?[/font]确定了最佳的分离溶剂组成为 V（乙腈）[font='宋体']∶[/font]V （甲醇）[font='宋体']∶[/font]V （乙酸）＝71[font='宋体']∶[/font]25[font='宋体']∶[/font]4和90mmol／L 的醋酸铵[font='calibri']?[/font]10min 内实现了茶黄素的基线分离[font='calibri']?[/font]与常规毛细管电泳相比具有显著的优势。4．8 高速逆流色谱法（High Speed CountercurrentChromatography[font='calibri']?[/font]HSCCC） 高速逆流色谱法可避免样品与固体载体的化学反应和死吸附等缺点[font='calibri']?[/font]每次分离样品结束后[font='calibri']?[/font]管道中的残留溶剂均可以冲出[font='calibri']?[/font]不会对后续分离产生任何影响[font='calibri']?[/font]因此高速逆流色谱法分离样品具有高的回收率。 总之茶黄素的分析测定方法各有利弊[font='calibri']?[/font]可以根据具体情况选择一种切实可行的分析方法。5.结语 茶黄素总的来说是对人身体有益，但是要适量食用，身体保健从平时做起。参考文献：[1][font='b5+华光楷体_cnki'][size=18px][color=#000000] [/color][/size][/font]王洪新 孙军涛 [J]食品与生物技术学报 茶黄素的制备、分析、分离及功能活性研究进展[2] 涂云飞 茶黄素药理功效及分离纯化研究进展 [j] 健康与文化[3] MARON D J， LU G P， CAI N S， et al. Cholesterol-loweringeffect of a theaflavin-enriched green tea extract [J]. Archives of Internal Medicine， 2003， 163(12)： 1448-1453[4] KUNDU T， DEY S， ROY M， et al. Induction of apoptosis in human leukemia cells by black tea and its polyphenol the aflavin [J]. Cancer Letter， 2005， 230(1)： 111-121

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    美国乔治梅森大学研究人员最近发现，最为流行的香料姜黄不只是充满气味，而且它还有望抵抗破坏性的病毒。相关研究论文发表在《生物化学杂志》上。论文第一作者、乔治梅森大学国家生物防御与传染病中心研究助理教授阿瑟·纳拉亚南说，在姜黄中发现的姜黄素阻止潜在致命性的裂谷热病毒（Rift Valley Fever virus, RVFV）在被它感染的细胞中增殖。蚊子传播的裂谷热病毒(RVFV)是一种急性的导致发热的病毒，能够影响诸如牛、绵羊和山羊之类家畜和人。究其本质而言，姜黄素是一种广谱的阻止一系列病毒感染健康细胞的抑制剂。但是在这篇论文中，研究人员证实姜黄素可能干扰RVFV操纵人细胞从而阻止细胞对感染作出反应。他们发现姜黄素不仅在体外细胞培养物中显著性地抑制RVFV复制，而且也在小鼠模式动物中证实它能够有效地对抗RVFV感染。纳拉亚南正在将这种知识运用到对抗布尼亚病毒、委内瑞拉马脑炎病毒和包括HIV在内的逆转录病毒中。

  • 当茶黄素邂逅咖啡因

    般而言，人们都希望饮料澄清透明。比如茶，清亮的总比浑浊的更有吸引力一些。所以，人们发现有的红茶茶汤在放凉之后出现浅褐色或橙色乳状的浑浊之后，在相当长的时间里并不待见它。直到后来有农艺师指出这其实是优质红茶的标志，这种被称为“冷后浑”的现象才受到人们的欢迎。冷后浑是如何产生的？为什么它又被认为是好茶的标志呢？茶叶中有许多种成分，其中有一类在化学结构上有共同之处，统称为茶多酚，现在已经识别出了有几十种。在未经加工的茶叶中，茶多酚大多数以儿茶素的形态存在。红茶制作中要进行充分的氧化，许多儿茶素会转化成茶黄素，还有的会进一步转化成茶红素。茶黄素和茶红素，就是为红茶带来红亮颜色的功臣。茶黄素的溶解度受温度影响比较大。在高温下，它还能好好地呆在茶汤中。当温度降低，它们就开始扎堆。温度越低，扎的堆就越大。大到一定程度——大致相当于牛奶中的乳滴大小，看起来就是茶汤变浑浊了。再进一步扎堆，就会形成乳酪那样的东西，与茶汤分层。茶中还有一种成分是咖啡因。其实它跟茶黄素一样，随着温度的降低也会喜欢扎堆，溶解度也会降低。不过在茶汤中的咖啡因含量低于它的溶解度，所以它们自己并不足以导致茶汤浑浊。但咖啡因非常喜欢茶黄素——相对于自己扎堆，它们更喜欢跟茶黄素混在一起。一个茶黄素分子上有两个位置能够结合咖啡因，当第一个咖啡因分子傍上茶黄素之后，就会使茶黄素露出第二个结合位点，再容纳另一个咖啡因分子。咖啡因到了人的嘴里，会与舌头上的苦味受体结合，让我们尝到苦味。而多酚类物质到了嘴里，则可能与舌头上的蛋白质结合，生成不溶于唾液的沉淀物，然后我们就感觉到了涩。相对来说，绿茶中的儿茶素和咖啡因比较多，所以绿茶比较容易出现苦涩。在红茶里，儿茶素经过氧化和聚合变成茶黄素，能与蛋白质结合的位点变少了，涩味也就降低了。茶黄素与咖啡因的结合在茶黄素自己扎堆之前就会进行。这种结合不仅进一步消耗了茶黄素的结合位点，同时也限制了咖啡因与舌头上苦味受体的结合。于是，与同样固体含量的绿茶茶汤相比，红茶茶汤的苦涩味就往往要低。茶黄素与咖啡因的络合产物溶解度更低，更容易扎堆变大，从而导致冷后浑的出现。因此，许多人认为冷后浑是茶黄素和咖啡因发生反应的结果。在实际的红茶中，咖啡因和茶黄素都存在，所以这样的解释也说得过去。“无事生非”的科学家，会把红茶中的咖啡因去掉，非要看看茶黄素自己能否出现冷后浑——结果是能，只是需要的茶黄素浓度会高一些。冷后浑还有一个名字叫做“茶乳酪”。跟牛奶形成奶酪一样，茶中的茶黄素等成分含量越高，就越容易出现冷后浑。茶黄素是红茶最关键的标志成分——冷后浑意味着它的含量高，“冷后浑是好茶的标志”之说，也就主要是这个原因。在红茶饮料生产中，冷后浑的出现导致产品不均一、外观不合格，风味口感也受到影响。在生产过程中，有一些阶段是以红茶提取物浓缩液的状态存在。因为固体含量高，“茶乳酪”就更容易出现——这会导致有效成分的损失，也为下一步的生产流程带来困难。因此，这个产业需要避免冷后浑的出现——这种需要，也就导致了许多关于冷后浑的研究。科学家们发现，除了咖啡因，茶汤中的钙离子对冷后浑的出现也有显著的作用。他们把茶乳酪拿去分析，发现其中的钙占固体总量的比例，大大高于茶汤中的钙占其固体含量的比例。这是因为，茶汤中的茶黄素带着负电，而钙离子带着正电——类似于卤水点豆腐，钙离子会把本来不想扎堆的茶黄素们拉到一起，让它们沉淀析出。茶中本来就具有不少钙，要避免它导致冷后浑，就需要压制住它的活动。在食品饮料工业中，这可以通过加入“螯合剂”来实现——螯合剂是一些结构特殊的分子，对于钙离子有超级强大的吸引力。只要螯合剂一出现，钙离子们就纷纷投奔而去，茶黄素也就“无钙问津”，不会被它们拉到一起扎堆了。科学家们还发现，如果把糖分子通过“糖苷化”加到茶黄素上，可以增加茶黄素的溶解度、避免冷后浑的出现。红茶制作中的氧化那一步加入一些糖，它们就会在后续的加工过程中结合到茶黄素上去。最后得到的红茶，就不容易出现冷后浑。“冷后浑是优质红茶的标志”是对的，但只是针对正常的红茶。当科学研究让我们对冷后浑有了更深入的认识，就会发现：如果我们不喜欢它，可以通过技术手段避免它的出现；如果我们喜欢它，也可以“捣鬼”促使它的出现。转自：科学松鼠会

  • 日本开发出红茶原料高纯度“茶黄素”可抑制流感、蛀牙

    据日本“共同社”消息，日本校企合作联合开发出红茶原料-高纯度多酚“茶黄素”，可抑制流感和蛀牙。　　绿茶等中含有的多酚“儿茶素”，以抗菌效果和抗氧化效果闻名。　　据称，红茶中的茶黄素抑制流感病毒的效果是儿茶素的约15倍；阻止变形链球菌繁殖的效果是儿茶素的约2倍，对维持口腔环境的必要细菌没有影响。动物实验还发现茶黄素可以改善血液循环。　　据介绍，茶黄素是使红茶呈现红色的成分，儿茶素在绿茶发酵为红茶的过程中发生变化形成茶黄素。据称，此次开发的粉末原料纯度达40%，将是首次在市场上推出高浓度粉末原料。　　由于茶黄素拥有与儿茶素相同的降低中性脂肪值的功能，有望被销往食品制造商，用于功能性饮料以及漱口水等卫生用品中。

  • 二氢姜黄素样品，液相检测时无峰，呈基线状态，可能是何原因？

    最近领导拿来新样品，方法也是新的，让试一下。样品是二氢姜黄素。领导提供的方法是二氢姜黄素检查色谱条件：C18柱；柱温25℃；检测波长：385nm流动相A: 0.1%三氟乙酸TFA；流动相B:乙腈ACN洗脱：梯度洗脱，0-25min ?流动相B:5-95% 流速 1.5ml/min一一按照方法设定来，但是走了五六针，跟走基线一样。很平，无波动，但是我查看了确实是打进样品了，且走其余产品没有问题。查了一下波长，网上给的资料是220nm，领导给的385，我都试了，都没峰，我用紫外扫描了一下，确认最大吸收波长是220和385左右，波长设定没有问题。我现在唯一能想到的是，是不是这里的C18柱是短柱？？有没有这可能？？备注一下，二氢姜黄素还有个同类产品四氢姜黄素，四氢姜黄素用的是长柱。

  • 异戊二烯衍生物色素——类胡萝卜色素(叶黄素、胡萝卜素)

    类胡萝卜素是一类广泛存在于自然界中的脂溶性色素，它为许多食品提供红色或黄色色泽。存在于植物的叶、茎、花、根或果实中，自然界中的类胡萝卜素以岩藻黄素(存在于藻类)最多，其次是存在于绿叶中的叶黄素、紫黄素和新黄素，其他的类胡萝卜素如β一胡萝卜素广泛存在于胡萝卜、南瓜、辣椒等蔬菜中：水果、蛋黄、奶油中的含量也较丰富。类胡萝卜素按其组成可以分为两大类，即胡萝卜素类和叶黄素类。1．番茄红素从结构上来看番茄红素是直链开环结构，无维生素A的功能，具有防癌抗癌作用，主要存在于番茄中。(1)“α-胡萝卜素“α-胡萝卜素分子断裂后可形成一分子维生素A，主要存在于胡萝卜中，其次是番茄。(2)β-胡萝卜素β-胡萝卜素则形成2分子维生素A，并且自然界中三种胡萝卜素以它占多，分布最广。1μg的β-胡萝卜素相当于1.6IU的维生素A。主要存在于胡萝卜中，其次是番茄中。(3)r-胡萝卜素 r-胡萝卜素分子断裂后可形成一分子维生素。2．叶黄素类(Xanthophylls)叶黄素类是共轭多烯烃的加氧衍生物，即在分子中含有羟基、甲氧基、羧基、酮基或环氧基，多呈浅黄、橙、黄等色泽；在绿叶中它们的含量一般比叶绿素多一倍，常见的叶黄素类色素有以下的十几种，它们可以简单地被认为是胡萝卜素类的衍生物。性质：①低浓度呈橙黄色至黄色，高浓度为橙红色；②不溶于水、甘油、丙酮、酸、碱，微溶乙醇和食用油，易溶苯、石油醚；③酸性不稳定，弱碱较稳定，不受还原物影响；④光、热、空气使其色泽变淡；⑤重金属(铁)使其褪色。

  • 【分享】食品添加剂——姜黄素

    姜黄素是从姜科、天南星科中的一些植物的根茎中提取的一种化学成分，其中，姜黄约含3%～6%，是植物界很稀少的具有二酮的色素，为二酮类化合物。姜黄素为橙黄色结晶粉末，味稍苦。不溶于水。在食品生产中主要用于肠类制品、罐头、酱卤制品等产品的着色。医学研究表明，姜黄素具有降血脂、抗肿瘤、抗炎、利胆、抗氧化等作用。　　 姜黄素　　 Curcumin　　 Turmeric yellow, Diferuloylmethane　　 1,6-Heptadiene-3,5-dione,1,7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-　　 C21H20O6;　　 368.37　　 橙黄色结晶性粉末, 熔点183°。不溶于水及乙醚, 溶于乙醇及冰醋酸。　　 有机酸及酚类。

  • 17.4 HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

    17.4 HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

    HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量张红霞，金艺，许海燕，赵怀清(沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016)摘要：目的建立胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用HPLC法，色谱柱：Diamonsil c18(4．6 mm×200 mm，5弘m)，以甲醇一体积分数为0．1％的磷酸水溶液(体积比为82：18)为流动相，流速：1．0 mL·min～，柱温：35℃，检测波长：254 nm。结果大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在1．42～12．79、2．02～18．14、1．28～11．52、0．76～8．36 mg·Lo内呈良好的线性关系，相关系数分别为O．999 1、O．999 4、O．999 0和0．999 6，平均回收率分别为102。7％(RSD=l。0％，魁=9)、10l。2％(RSD=2．7％，露=9)、99．4％(RSD=1。6％，n=9)和97．9％(RSD=2．8％，咒=9)。结论本方法可作为胃力片质量控制方法之一。关键词：胃力片；大黄酸；大黄素；大黄酚；大黄素甲醚；高效液相色谱法http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241901_379466_2355529_3.jpg

  • 有关用紫外测叶黄素酯含量的问题

    [color=#444444]需要做叶黄素酯压片糖果的含量测定。于是找到了Q/YRB0003S-2012这个标准。[/color][color=#444444][/color][color=#444444]想请教大家，附图里面的f稀释系数怎么算，能否举个具体例子？谢谢！[/color]

  • 【金秋计划】大黄素防治动脉粥样硬化作用机制的研究进展

    心脑血管疾病是全球发病率、死亡率最高的疾病，近年来以动脉粥样硬化为代表的心脑血管疾病的发病率持续升高，严重威胁人们的身体健康，给家庭和社会带来沉重的负担，已成为一个重要的公共卫生问题[1]。心血管疾病已成为威胁人类健康的最主要疾病，其中动脉粥样硬化是心血管疾病的主要原因和病理基础。动脉粥样硬化常累及大动脉、中动脉，临床主要特征为慢性管腔狭窄，是冠心病、脑梗死、外周血管疾病等心脑血管疾病的主要病理基础，可影响心脏、大脑、肾脏、眼睛、外周血管的动脉系统[2]。大黄素从大黄、虎杖的根和树皮中获得的蒽醌衍生物，是橙色长针状晶体，易溶于醇和碱性溶液，几乎不溶于水[3]。大黄素具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制、镇痛、器官保护等多种药理作用，临床可用于痢疾、肺炎、脑炎、中耳炎、小儿麻痹、肝炎、肿瘤、心脑血管疾病等多种疾病的治疗[4]。大黄素可通过降低炎症反应、降低氧化应激反应、调节脂质代谢、阻止血管平滑肌增殖、保护血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块等多种途径对动脉粥样硬化发挥防治作用。本文综述了大黄素防治动脉粥样硬化的作用机制研究进展，为大黄素防治动脉粥样硬化的临床应用提供参考。 1 降低炎症反应 1.1 阻止核因子-κB（NF-κB）激活 NF-κB是动脉粥样硬化的重要信号通路，可介导主动脉平滑肌细胞中促炎细胞因子和生长/迁移因子表达，促进主动脉平滑肌细胞的增殖和迁移，促进动脉粥样硬化的形成[5]。Meng等[6]使用大黄素干预大鼠主动脉平滑肌细胞，结果0.1～10 μmol/L大黄素可呈浓度相关性抑制肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对主动脉平滑肌细胞的促增殖作用，阻止主动脉平滑肌细胞迁移和基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达，降低白细胞介素（IL）-6、IL-1β、血管细胞黏附分子-1、细胞间黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）等炎症因子的表达，抑制TNF-α引起的主动脉平滑肌细胞中NF-κB的活化，结果证实大黄素可通过阻止NF-κB激活以发挥抗炎作用，降低动脉粥样硬化的病情。赵剑锋等[7]使用高脂饲料饲养大鼠建立动脉粥样硬化模型，结果600、900、1 200 mg/kg大黄素能呈浓度相关性抑制大鼠体质量增加，继而降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）的水平，显著降低超敏C反应蛋白（hs-CRP）、纤维蛋白原（FIB）的水平，表明大黄素可通过抗炎发挥抗动脉粥样硬化的作用。吴迪等[8]使用大黄素干预大鼠血管平滑肌细胞，结果50 μmol/L大黄素能抑制血管平滑肌细胞重叠和变性，抑制CRP、一氧化氮合酶（iNOS）、TNF-α基因和蛋白的表达，表明大黄素能通过抑制多种炎症因子的表达发挥抗动脉粥样硬化的作用。 1.2 调节γ-干扰素（IFN-γ）、MCP-1的分泌 IFN-γ属于II型干扰素，能抑制LDL-C的表达，阻止泡沫细胞的形成，在动脉粥样硬化进程中发挥双向调节作用[9]。MCP-1能促使单核细胞聚集，促进泡沫细胞形成，加速动脉粥样硬化的形成，介导多种促炎因子的分泌和血管内皮的增殖[10]。夏丽等[11]使用大黄素干预高脂饲料诱导的载脂蛋白E缺陷动脉粥样硬化小鼠，结果显示，10、20、40 mg/kg大黄素能降低小鼠LDL-C、TC、三酰甘油（TG）的水平，提高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的水平，上调IFN-γ基因的表达，下调MCP-1基因的表达，降低血清IFN-γ、MCP-1水平，表明大黄素可通过调节IFN-γ、MCP-1的分泌减轻炎症反应，发挥抗动脉粥样硬化的作用。 1.3 抑制同型半胱氨酸（Hcy）的表达 血浆Hcy水平升高是动脉粥样硬化的独立危险因素，能够通过活性氧（ROS）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路刺激血管平滑肌细胞中CRP的表达，加剧血管壁的炎症过程，从而促进动脉粥样硬化进程[12]。Pang等[13]使用大黄素干预大鼠血管平滑肌细胞，发现0.1、1、10、100 μmol/L大黄素能呈浓度相关性降低血管平滑肌细胞的活力，有效降低Hcy引起血管平滑肌细胞的CRP的表达，抑制细胞外信号调节激酶（ERK）1/2和p38磷酸化进程，以浓度相关性方式拮抗Hcy对过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的抑制作用，还有助于降低大鼠血清Hcy和CRP水平，表明大黄素通过抑制Hcy表达以阻止ERK1/2/p38信号通路激活和促进PPARγ表达，发挥抗动脉粥样硬化作用。 2 降低氧化应激反应 缺氧、氧化应激可通过磷脂酰肌醇3-激酶途径激活磷脂酶C，导致神经酰胺的形成，神经酰胺可调节细胞凋亡和炎症，有助于动脉粥样硬化或血栓性疾病的发展[14]。Hei等[15]使用1%胆固醇和5%脂肪的饮食喂食家兔建立动脉粥样硬化模型，结果10 mg/kg大黄素能显著降低兔血清丙二醛（MDA）、氧化低密度脂蛋白（OX-LOL）的水平，提高血清超氧化物歧化酶（SOD）的水平，显著减轻家兔动脉粥样硬化程度，降低主动脉的神经酰胺浓度、鞘磷脂酶活性和凋亡泡沫细胞指数，结果证实大黄素可通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。张翔等[16]使用大黄素治疗高脂饲料喂养的动脉粥样硬化大鼠，结果发现20、40、80 mg/kg大黄素有助于提高大鼠的体质量，呈剂量相关性降低MDA的水平，升高SOD、总抗氧化能力（T-AOC）的水平，减轻平滑肌细胞增生和向内膜迁移，提示大黄素通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。张翔等[17]使用大黄素治疗高脂饲料建立的动脉粥样硬化大鼠，结果20、40、80 mg/kg大黄素能浓度相关性降低LDL、TG、TC的水平，提高HDL的水平，上调SOD、T-AOC的水平，降低MDA的水平，减轻平滑肌增生、内膜迁移、内膜水肿等动脉粥样硬化改变，提示大黄素可通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。 3 调节脂质代谢 3.1 消耗胆固醇以破坏脂筏 脂筏位于细胞膜和内膜中，是含有高浓度胆固醇和鞘糖脂的微结构域，参与多种信号通路的活化，可加剧炎症反应，促进动脉粥样硬化的发展，GM1-神经节苷脂是脂筏的标志物，脂质筏的破坏将导致GM1-神经节苷脂从脂筏重新分布到细胞膜非脂质筏结构域[18]。胆固醇是脂筏中主要成分，胆固醇富集使脂筏比细胞膜周围富含磷脂的非筏相更紧密，消耗脂筏中的胆固醇可破坏脂筏[19]。Meng等[20]使用大黄素干预原代人脐静脉内皮细胞，结果1～50 μmol/L大黄素能显著降低脂多糖引起的IL-1β、IL-6、IL-8、趋化因子配体2、MCP-1等多种炎症因子的分泌，阻断核因子κB抑制因子α（IκBα）的降解和NF-κB活化，大黄素将脂筏中的GM1-神经节苷脂分散到膜或内膜的非脂质筏结构域，证实大黄素通过消耗胆固醇来破坏脂筏，阻止脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞中NF-κB活化，发挥抗炎作用，以减轻动脉粥样硬化进程。 3.2 激活PPARγ信号通路 PPARγ在巨噬细胞中大量表达，尤其是动脉粥样硬化内的脂质泡沫细胞，PPARγ通过转录诱导ox-LDL参与动脉粥样硬化进程，还能促进ATP结合盒转运体（ABC）A1、ABCG1的表达，通过肝X受体α（LXRα）介导巨噬细胞中胆固醇的外排，在动脉粥样硬化的炎症反应、胆固醇稳态中发挥关键作用[21]。Fu等[22]使用大黄素干预THP-1单核巨噬细胞，结果1、5、10 μmol/L大黄素能促进细胞中PPAR-γ蛋白和基因的表达，以浓度相关性促进载脂蛋白A1诱导的巨噬细胞内胆固醇外排，还能促进THP-1细胞中LXR-α（PPARγ靶点）的蛋白和基因的表达，促进ABCA1、ABCG1的表达，证实大黄素可通过激活PPARγ信号通路以促进胆固醇排除，发挥抗动脉粥样硬化的作用。Zhou等[23]使用脂肪喂养载脂蛋白E建立小鼠动脉粥样硬化斑块模型，结果发现10 mg/kg大黄素能显著减轻斑块中脂质核心面积和胶原蛋白数量，抑制斑块MMP-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-GSF）的表达，促进PPARγ的表达，提示大黄素可通过激活PPARγ信号通路以促使动脉粥样硬化斑块稳定有关。 4 阻止血管平滑肌增殖 动脉内膜血管平滑肌细胞的增殖是动脉粥样硬化斑块形成的关键步骤，诱导动脉内膜血管平滑肌细胞凋亡或细胞周期停滞，还会损害血管内皮细胞生理机能，导致内膜增生[24]。Xu等[25]使用大黄素干预动脉内膜血管平滑肌细胞，发现0.05～5 μmol/L大黄素可呈浓度相关性抑制动脉内膜血管平滑肌细胞的增殖，显著降低了细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）、Ki67、E2F-1基因表达，显著降低线粒体活性，还能显著减轻大鼠损伤动脉的内皮化进程，证实大黄素可通过阻止血管平滑肌增殖以抗动脉粥样硬化。 活化的半胱天冬酶（Caspase）能促使Bid断裂，诱导细胞色素C从线粒体释放，激活线粒体途径，继而激活下游Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9，导致多种DNA链断裂，导致细胞凋亡，以阻止血管平滑肌增殖[26]。Heo等[27]使用大黄素干预大鼠主动脉平滑肌细胞，发现0.1、1、10 mmol/L大黄素能浓度相关性抑制血小板源生长因子诱导的主动脉平滑肌细胞增殖，抑制IκBα的磷酸化，促进主动脉平滑肌细胞凋亡，促进Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达，还能调节B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的表达，促使MMP紊乱，证实大黄素通过Caspase途径促进线粒体依赖性细胞凋亡，进而阻止血管平滑肌细胞增殖，降低动脉粥样硬化发生。 5 保护血管内皮功能 内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/一氧化氮（NO）系统与动脉粥样硬化密切相关，前者活性降低可促进内皮细胞增生，抑制NO的合成，后者能强效促使血管舒张，阻止血管平滑肌增殖和血栓形成[28]。吴健虹等[29]使用大黄素治疗膳食诱导的高脂血症大鼠，10 mg/kg大黄素能显著降低LDL-C、TG、TC的水平，降低肝脏脂肪变性程度，显著提高胸主动脉的总NO的水平和eNOS基因和蛋白的水平，证实大黄素能上调eNOS/NO系统以保护血管内皮细胞，减轻动脉粥样硬化的风险。 6 稳定动脉粥样硬化斑块 MMP能特异性降解细胞外基质中多种胶原蛋白的表达，破坏动脉粥样硬化斑块纤维帽结构，导致血栓形成和斑块破裂[30]。白文武等[31]使用大黄素治疗高脂饮食建立的载脂蛋白E缺陷小鼠模型，结果60 mg/kg大黄素能显著抑制血管内膜增厚和平滑肌增生，抑制粥样斑块的形成，下调MMP-2、MMP-9的表达，提高组织抑制剂1（TIMP-1）的表达，证实大黄素可通过调节MMP的分泌以稳定动脉粥样硬化斑块，发挥抗动脉粥样硬化的作用。 7 结语 大黄素可通过降低炎症反应、降低氧化应激反应、调节脂质代谢、阻止血管平滑肌增殖、保护血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块等多种途径对动脉粥样硬化发挥防治作用。由于大黄素用于人体的机制尚不明确，目前大黄素多用于动物研究，尚未用于临床试验，因此，需要进一步的研究和更多的试验来验证大黄素对人动脉粥样硬化的益处。大黄素的肝毒性、肾毒性和口服生物利用度差的问题应该在未来的研究中得到解决。总之，大黄素防治动脉粥样硬化具有良好的应用前景，可能在未来用于临床实践。

  • 【原创】亚甲胺-H酸与姜黄素指示剂

    测硼有两种显色剂，一种是亚甲胺-H酸；一种是姜黄素显色剂，这两种显色剂都有本底色：黄色，不过最终与硼显色后前者显黄色的络合物，波长为415nm有最大吸收峰，后者与硼显色后的络合物为紫红色，但我觉得这两种显色剂应该都可以测硼用，可是肥料中的硼标准却要求要用亚甲胺-H酸，亚甲胺-H酸的价格可贵的啊，500元/2g

  • 紫外分光光度法测定盐酸麻黄素注射液含量

    紫外分光光度法测定盐酸麻黄素注射液含量关键词: 麻黄素；可见和紫外分光光度法［摘要］ 目的：探讨盐酸麻黄素注射液含量测定的新方法，以求更快速、准确地适应临床用药需要。方法：用不同厂家不同批号的盐酸麻黄素注射液做供试品，用标准麻黄素做对照品，用紫外分光光度计测出标准品的最大吸收度，求出浓度与吸收度关系，得其回归方程，测其回收率。求出含量与药典法进行比较。结果：在256±1 nm处有最大吸收，以256 nm为测定波长，盐酸麻黄素浓度与吸收度呈标准曲线线性范围0.2～1.2 mg/ml(r=0.999 9)，平均回收率为(100.31±1.02)%，两种方法测定结果差异无显著性(P＞0.05)。结论：紫外分光光度法，可以做为盐酸麻黄素注射液含量测定的新方法。［中国图书资料分类法分类号］ R 974.3；O 657.32　　　［文献标识码］ A［文章编号］ 1000-2200(2000)05-0380-02　　盐酸麻黄素是拟肾上腺素药，目前对该病及其制剂的含量测定方法有非水滴定法［1］、银量法［1］及中和法［2］。本文采用紫外分光光度法［1］，测定盐酸麻黄素注射液的含量［3］，并与1995年版药典的非水滴定法进行比较，兹作报道。1　材料与方法1.1　仪器　Du-640型紫外分光光度计(美国贝克曼公司)。1.2　试药　盐酸麻黄素对照品，盐酸麻黄素注射液(上海信谊制药厂，批号951201-1，951201-2；无锡市第七制药厂，批号960117-1，960117-2，960610；规格均为1 ml∶50 mg)。1.3　测定方法　(1)盐酸麻黄素紫外吸收光谱：取盐酸麻黄素对照品适量，用蒸馏水溶解并配制成0.6 mg/ml的溶液，以蒸馏水为空白，在230～300 nm波长之间扫描，在256±1 nm波长处有最大吸收，故采用256 nm为测定波长。(2)标准曲线的绘制：精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸麻黄素对照品50 mg，置25 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取该药液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml分别置10 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，以水为空白，在256 nm处分别测定吸收度。结果表明，在0.2～1.2 mg/ml浓度范围内，浓度与吸收度呈良好的线性关系。得其回归方程为：A=0.8256 C+0.012 0(r=0.999 9,n=6)。(3)稳定性实验：取(2)项下的各溶液于配制后0、1、2、3、4、8、16、24 h分别测吸收度，结果几无变化。(4)回收率试验：精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸麻黄素对照品约25 mg，置50 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，以水为空白，在256 nm波长处依法测定吸收度，求出回收率。(5)样品测定：取不同批号的盐酸麻黄素注射液，精密量取1 ml，分别置于100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，以水为空白，在256 nm处测吸收度，计算其含量，并将本法测定的结果与中国药典1995年版收载的非水滴定法测定的结果进行比较。1.4　统计学方法　采用配对t检验。2　结果　　紫外分光光度法回收率试验结果见表1；与药典法测定样品中盐酸麻黄素注射液的含量结果比较见表2。表1　回收率试验结果(n=5) 编号 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) ±s(%) 1 26.40 26.42 100.08 2 24.80 25.20 101.61 　 3 25.20 25.08 　99.52 100.31±1.02 4 24.30 24.57 101.11 5 25.00 24.81 　99.24 表2　两种方法测定结果比较(ni=15；±s) 测定方法 标示量(%) ±sd td P 紫外分光光度法药典法 100.17±1.07100.18±0.48 0.01±0.80 0.02 ＞0.05 3　讨论　　盐酸麻黄素注射液是卫生部规定的控制药品。为保证患者用药的准确有效，防止在生产这类药品过程中盐酸麻黄素原料的流失，对其含有盐酸麻黄素的药品进行快速、简便、准确的含量测定显得尤为重要。传统的本品测定方法，不但操作过程繁琐，消耗试药量大，且非水滴定法中的醋酸汞试剂对人体有害，污染环境。　　麻黄素属β肾上腺素受体激动剂，可直接或间接激动肾上腺素受体。对心血管系统、支气管平滑肌、中枢神经系统都有较强的作用。在临床上应用较为广泛且剂量要求十分准确，所以对其含量的准确、快速测定更为重要。特别是临床上经常使用“盐酸麻黄素滴鼻剂”是医院自配药品，效期短，配制频繁，在其准确的基础上，快速测定及时保证药品的临床供应，并指导临床用药有一定的意义。　　两种方法测定结果差异无显著性(P＞0.05)，表明紫外分光光度法可以做为盐酸麻黄素注射液的含量测定新方法。且本法操作简便、快速、准确，重复性好。作者简介：郗　颖(1967-)，女，安徽灵璧县人，药剂师.［参考文献］［1］中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典二部［M］.广州：广东科学技术出版社，1995.18，693～694.［2］中华人民共和国卫生部药政局.中国医药制剂规范*西药制剂［M］.北京：中国医药科学技术出版社，1996.166～167.［3］熊凤英，简　洁，周淑群.紫外分光光度法测定米非司酮血药浓度［J］.中国医院药学杂志，1998，18(6)∶262.

  • 【我们不一YOUNG】叶黄素多的食物

    叶黄素属于类胡萝卜素的一种，是视网膜黄斑的主要色素，但叶黄素在人体内不能自行合成，主要是通过进食蔬菜或水果维持体内叶黄素的需求，叶黄素含量较高的食物主要有菠菜、西兰花、芥菜、芹菜叶、胡萝卜、香菜、西红柿等蔬菜，以及柑桔、猕猴桃、鲜枣、芒果等水果。含叶黄素高的食物：1、蔬菜类。蔬菜类中含有叶黄素的食物较多，如南瓜、胡萝卜、西红柿、菠菜、甘蓝菜、绿花椰菜、韭菜、小白菜、芹菜叶、香菜等，这些绿叶蔬菜及黄橙色蔬菜中都含有较多的叶黄素，通常是人们补充叶黄素的重要蔬菜来源。2、水果类。水果类含有叶黄素较多的食物,有芒果、猕猴桃、葡萄、黄桃、橙子、橘子等。3、谷物类。谷物类中含叶黄素多的食物有玉米、小米等，同样这些谷物制品中也含有叶黄素，如玉米面、小米糕等。4、其他食物。除了上述这些食物之外，还有鸡蛋的蛋黄、红薯等中也含有大量的叶黄素，同时一些花卉中也含有较多叶黄素，如万寿菊、金盏花，这些花卉本身不可以食用，但可作为提取叶黄素的原材料，将提取的叶黄素应用到乳制品、脂肪制品、糖果、烘烤类食品等的制作中。叶黄素的作用：1、保护视力。太阳光中含有强烈的紫外线和蓝光，可以伤害视网膜和黄斑，其中蓝光对人眼的伤害甚至比紫外线还大，叶黄素能够吸收蓝光和紫外线，并协助黄斑过滤蓝光，协助视网膜抵挡紫外线，从而避免蓝光和紫外线损害视力，此外太阳光具有强氧化性，很容易损伤黄斑，眼睛若长期受到强光直射会生成大量的氧自由基，使黄斑区和视网膜退化，视力严重减退，甚至失明，叶黄素是还原剂，有强抗氧化的作用，可以抑制氧自由基生成，所以补充叶黄素，有助于保护眼睛，尤其是保护视网膜和黄斑。可以保护视力，延缓视力进展，减少视力损害。2、抗氧化作用。氧自由基可加速人体各种器官的老化，对眼睛和皮肤损害尤其严重，再加上太阳光中紫外线的照射，更会加速皮肤的老化，叶黄素具强抗氧化能力，能够抑制氧自由基生成，不仅能保护眼睛，还能保护皮肤，在一定程度上能够延缓皮肤的老化。3、其他。叶黄素对于减缓早期动脉硬化的发展也有一定作用，还可以辅助加强胰岛素降血糖的功能，减少患糖尿病的风险。

  • Ultimate XB-C18 检测角黄素

    1实验部分1．1仪器与试剂Acctuity超高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器(PDA，美国Waters公司)；Acquity超高效液相色谱一Quattro Premier串联四极杆质谱联用仪，配电喷雾离子源(美国Waters公司)。角黄素标准品：纯度95．8％(德国Dr．Ehren—stoffer公司)；标准储备溶液(1．0 mg／mL)：称取标准品0．100 g，用乙腈溶解定容于100mL容量瓶，-18℃冷冻保存，保质期30天；乙腈，正己烷，色谱纯；甲酸，优级纯；无水硫酸钠，焦性没食子酸为分析纯，水为超纯水；

  • 【金秋计划】芦荟大黄素改善结肠炎的直接靶点及相关机制

    [size=14px] [/size] [size=14px]黏膜愈合是炎症性肠病（IBD）患者长期缓解和降低手术风险的重要预后指标，未愈合的黏膜会诱发持续性炎症。肠上皮细胞群的适当分化在损伤后黏膜再生中起着重要作用。表达SOX9的标记保留细胞（LRC）已被确定为通过补充LGR5肠道干细胞（ISC）促进上皮修复。另一方面，LRC也被认为是肠内分泌细胞（EEC）的前体细胞，可加剧IBD中的黏膜损伤。因此，干预 LRC-EEC分化轴理论上有利于IBD的黏膜愈合。[/size] [size=14px]大黄是多年生草本植物，自公元前三千年以来在中国一直被用作泻药。大黄的主要化学成分包括蒽醌、蒽酮、蒽烯等。前期作者使用硫酸葡聚糖钠盐（DSS）诱导的IBD模型筛选大黄中的主要成分，发现芦荟大黄素显著缓解结肠炎。芦荟大黄素（1,8-二羟基-3-羟甲基蒽醌）是天然蒽醌衍生物之一，据报道具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗菌和保肝药理作用，但其在缓解结肠炎上的具体作用机制与直接靶点尚不清楚。[/size] [size=14px]2024年5月31日，复旦大学药学院沈晓燕、陈道峰团队在ASPB（IF=14.4）发表题为“Aloe emodin promotes mucosal healing by modifying the differentiation fate of enteroendocrine cells via regulating cellular free fatty acid sensitivity”的文章，发现芦荟大黄素可直接拮抗游离脂肪酸受体1（FFAR1）的激活，并阻断AKT介导的FOXO1磷酸化和FOXO1的核输出。然后，FOXO1的核输入相对增加导致SOX9高表达，从而抑制LRC向EEC的过度分化，并保留了更多的SOX9 LRCs，促进结肠炎的黏膜愈合和上皮重建。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、筛选大黄中的活性化合物治疗小鼠结肠炎[/size] [size=14px]根据大黄中检测到的成分含量，作者选择五种游离蒽醌类（emodin、aloe emodin、chrysophanol、rhein和physcione）、四种二苯乙烯类化合物（piceatannol、rhapontigenin、desoxyrhapontigenin、rhaponticin），以及sennoside A（大黄中最有效的泻药），采用DSS诱导的结肠炎开展基于药效的筛选，发现芦荟大黄素等部分化合物可有效抑制结肠炎小鼠体重减轻，缓解结肠缩短，抑制促炎细胞因子表达，特别是在芦荟大黄素组中观察到炎症细胞因子最显著的减少。作者结合体重、结肠长度和炎性细胞因子表达，选择了芦荟大黄素进行进一步研究。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、芦荟大黄素改善小鼠结肠炎模型的炎症反应[/size] [size=14px]多剂量组口服芦荟大黄素的药效学实验表明，在小鼠模型中DSS诱导的结肠炎发作后，芦荟大黄素治疗促进体重恢复，缓解结肠缩短，改善肠道屏障完整性，缓解炎症细胞浸润和隐窝结构丧失。此外，芦荟大黄素改善血清和组织中促炎细胞因子水平的升高。这些结果表明芦荟大黄素对DSS模型具有剂量依赖性治疗效果，且芦荟大黄素优于5-氨基水杨酸（5-ASA）。此外，作者还评估了芦荟大黄素在TNBS诱导的结肠炎模型中的药效学，同样发现芦荟大黄素在TNSB模型中也表现剂量依赖性缓解。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、芦荟大黄素干扰前体细胞向早期EEC的分化[/size] [size=14px]作者取芦荟大黄素处理组和对照组的肠道组织开展RNA-seq检测，GSEA分析显示与芦荟大黄素组相比，对照组的胰腺分泌、内分泌和其他因子调节的钙重吸收和胰岛素分泌基因集富集，表明芦荟大黄素在体内下调肠道分泌细胞相关功能。对选定损伤区域的免疫荧光染色发现芦荟大黄素对EECs（CHGA）数量有显著抑制，而对吸收细胞（CAII）、杯状细胞（MUC2）和簇（COX1）细胞数量没有影响，支持GSEA分析的发现。通过检测EEC转录调节因子在不同阶段的表达，发现芦荟大黄素可能从早期就抑制EEC成熟。此外，CHGA染色和结肠类器官的5-HT水平表明芦荟大黄素抑制了上皮细胞谱系向肠内分泌细胞的分化。此外，芦荟大黄素在所有时期都抑制了EECs标记物的表达。这些数据表明，芦荟大黄素会干扰前体细胞向早期EEC的分化。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、SOX9介导的LRC分化阻滞是芦荟大黄素促进黏膜修复所必需的[/size] [size=14px]为了明确芦荟大黄素如何影响上皮细胞分化，作者通过免疫磁珠分选获得小鼠纯化的结肠上皮细胞，测定ISCs分化出的不同上皮细胞的标记基因表达，发现Sox9表达在结肠炎中显著降低，并通过芦荟大黄素治疗得以挽救，而且芦荟大黄素还上调了分选上皮细胞中的SOX9蛋白水平，下调了CHGA蛋白水平。免疫荧光染色显示芦荟大黄素上调损伤区域SOX9细胞的数量，且SOX9细胞数量与CHGA细胞数量均呈显著负相关。高SOX9表达是LRC的特征之一，隐窝纵切片的SOX9染色表明，芦荟大黄素增加了SOX9细胞群。使用激光捕获显微切割分离富含SOX9细胞的区域表明，与SOX9-区域相比，SOX9+区域的转录谱接近 LRC。这些数据表明由芦荟大黄素引起的增加的SOX9细胞是LRC。来自培养的小鼠结肠类器官的数据也表明，芦荟大黄素上调了SOX9 LRC的数量和Sox9的表达。作者还分析了活动性克罗恩病患者的转录组谱发现与非发炎区域相比，发炎区域活检样本中的SOX9 表达显著降低， NEUROG3表达显著增加，临床样本染色还显示，随着炎症的增加，克罗恩病患者结肠隐窝中的SOX9 LRCs显著减少，而NEUROG3 EECs显著增加。先前的单细胞测序数据结果显示，发炎区域的EEC数量高于健康对照组和非发炎区域，而发炎区域的LRC数量低于非发炎区域。此外，SOX9在非发炎区域的EEC中的表达显著高于发炎区域。这些数据表明炎症中SOX9表达水平下调可能会导致LRC向EEC过度分化的趋势。作者采用TNF-α处理类器官以模拟结肠炎症并观察类器官的凋亡，发现芦荟大黄素显著抑制TNF-α诱导的类器官凋亡。此外，芦荟大黄素部分逆转了TNF-α诱导的Sox9表达降低和Neurog3表达增加，而所有芦荟大黄素诱导的作用都被SOX9-CRISPR敲除和JQ-1（作为表观遗传抑制剂可下调SOX9转录）阻断。这些数据证实SOX9介导的LRC分化阻滞是芦荟大黄素促进黏膜修复所必需的。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、FOXO1 是芦荟大黄素上调 SOX9 表达的关键转录因子[/size] [size=14px]作者进一步检测了芦荟大黄素诱导的SOX9表达上调的可能信号通路。使用RcisTarget包鉴定了芦荟大黄素和载体处理的小鼠结肠之间DEGs中富集的转录因子（TF）结合基序，结合JASPAR TFBS和ReMap ChIP-seq数据库进一步鉴定了可能与 SOX9 基因启动子上游 2000 bp序列结合的TF，结合三种分析的预测，芦荟大黄素可能调节21个TF，最终上调 SOX9 表达，进一步发现，在CD环境中，有6个TFs与SOX9表达显著相关，结合备选的TF可能导致SOX9的上调和NEUROG3的下调，确定FOXO1 是最有可能通过芦荟大黄素调节导致SOX9上调的 TF。FOXO1抑制剂（AS1842856）阻断芦荟大黄素对SOX9和NEUROG3表达的调节证明了这一点。使用Jaspar数据库预测表明FOXO1可以与SOX9上游的多个序列结合，DNA pulldown和CHIP-q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]实验均表明FOXO1能够与FOXO1上游的预测序列结合，并可以通过芦荟大黄素增强。总的来说，FOXO1确定为芦荟大黄素上调 SOX9 表达的关键转录因子。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、芦荟大黄素抑制 FOXO1 磷酸化促进其核易位[/size] [size=14px]FOXO1活性与其表达丰度、翻译后修饰（主要包括磷酸化和乙酰化）、核细胞质穿梭和亚细胞定位有关。作者通过蛋白质印迹和免疫荧光染色显示芦荟大黄素上调了FOXO1的核易位，然而，芦荟大黄素不影响FOXO1的蛋白质和mRNA丰度。进一步的结果表明，蛋白磷酸酶抑制剂而不是组蛋白脱乙酰酶抑制剂或sirtuin抑制剂阻断了芦荟大黄素对SOX9表达的上调，这表明芦荟大黄素通过影响磷酸化修饰而不是乙酰化来上调SOX9表达。AKT、ERK1/2和CK1α诱导 FOXO1 的磷酸化和核输出。作者发现芦荟大黄素通过影响AKT活性上调SOX9表达。AKT 在三个不同的位点（Thr24、Ser256、Ser319）上直接磷酸化 FOXO1，导致其通过核输出进行转录失活，作者发现芦荟大黄素剂量依赖性地降低AKT诱导的FOXO1磷酸化（Ser256）。AKT 磷酸化的FOXO1与14-3-3伴侣蛋白结合，阻断FOXO1的核易位信号，免疫荧光图像和免疫共沉淀显示芦荟大黄素削弱了FOXO1和14-3-3σ的相互作用。此外，FOXO1-CRISPR ko Caco-2细胞上FOXO1标志的过表达挽救了芦荟大黄素诱导的SOX9高表达。总之，数据表明芦荟大黄素降低了AKT诱导的FOXO1磷酸化，并促进了FOXO1进入细胞核以上调SOX9转录。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、芦荟大黄素靶向FFAR1抑制Gβγ/AKT/p-FOXO1通路[/size] [size=14px]根据SuperPred网站结果，结合SYBYL-X软件对接评分（5.0），作者获得了5个高可能性的芦荟大黄素靶点。相关性分析表明只有游离脂肪酸受体1（FFAR1）与SOX9/NEUROG3平衡显著相关。分子对接显示芦荟大黄素被包埋在二聚体之间的残基VAL1094、ASP1092、ARG1095和THR1155周围的口袋中。DARTS和CETSA结果一致地表明芦荟大黄素与FFAR1的结合。亚油酸是FFAR的内源性配体，这可以解释为什么芦荟大黄素会导致KEGG富集的亚油酸途径改变。作者使用了亚油酸和TAK-875（FFAR1的选择性激动剂）确认芦荟大黄素对FFAR1的影响，RT-q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和Western blot数据显示亚油酸和TAK-875对SOX9/NEUROG3表达水平和磷酸化（Ser256）以及FOXO1的核易位具有与芦荟大黄素相反的作用。体内实验同样表明，TAK-875消除了芦荟大黄素对结肠炎的缓解作用，并逆转了芦荟大黄素对上皮细胞进行分选时Sox9/Neurog3的调节。此外，TAK875阻断芦荟大黄素诱导的p-AKT（Thr308）下调，表明FFAR1通过p-AKT（Thr308）转导信号至FOXO1。据报道，Gα偶联受体激活后释放的Gβγ亚基直接与PI3K相互作用以激活 PI3Kγ/p-AKT（Thr308）信号通路，作者发现FFAR1驱动的SOX9/NEUROG3轴主要由Gβγ调控。总之，FFAR1是芦荟大黄素的靶标，并且激活的FFAR1通过Gβ2γ3/AKT/p-FOXO1信号通路下调SOX9表达，该通路可被芦荟大黄素阻断。[/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px]该研究发现来自传统药用植物大黄的活性成分—芦荟大黄素可直接拮抗游离脂肪酸受体1（FFAR1）的激活，并阻断AKT介导的FOXO1磷酸化和FOXO1的核输出，导致SOX9高表达，从而抑制LRC向EEC的过度分化，并保留了更多的SOX9 LRCs，从而促进黏膜愈合，促进上皮重建。[/size]

  • 液质联用测大黄素

    [color=#444444]用安捷伦[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]测大黄素，标曲0.3-300 ng/ml，发现残留严重，比较了洗针液，发现加碱，加酸，加乙酸铵缓冲液效果都不好，最后选择了水-甲醇-异丙醇（1:2:1），因为还要兼顾其他几个极性比较大的化合物，洗针时间提高到10秒，走样前冲洗了柱子，超声清洗了针座，连续冲洗进样针3次，每次一分钟。开始走样时在标曲之前先走了十针纯甲醇，结果还是有很高的响应，16000左右，到了标曲最低点，响应又降到1000以下，但响应完全没有线性，相同浓度质控的响应也差很多。请问这个可能是什么情况？按理说我在走样之前已经清洗了柱子，针和针座，为什么还是有这么高的残留？如何选择洗针液？希望有经验的老师同学指点迷津，非常感谢。[/color][color=#444444][img]http://muchongimg.xmcimg.com/oss2/img/2018/0621/bw256h2437383_1529557070_831.png[/img][/color]

  • 姜黄素法测定土壤中的有效硼

    线性总上不去仨9，而且空白做了两次吸光度值都大于0.15搞不明白。。。，而且方法中姜黄素配置没加盐酸（水样方法中有加），盐酸有什么影响么，草酸是起什么作用的，求教~

  • 26.9 不同炮制方法对大黄中没食子酸含量的影响

    26.9 不同炮制方法对大黄中没食子酸含量的影响

    【作者】：雷 鹏，李新中，朱诗塔，刘 韶，李乾霖【摘要】：目的建立大黄及其炮制品中没食子酸含量的测定方法,考察大黄在不同方法炮制过程中没食子酸含量的变化情况。方法采用HPLC法测定大黄及其炮制品中没食子酸的含量,色谱柱:DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.01%磷酸(10∶90);流速:1mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:273nm。结果大黄不同炮制品中没食子酸含量与生品比较有较大差异,酒大黄(酒炙)中没食子酸含量下降,熟大黄(酒蒸、酒炖)、大黄炭中没食子酸含量增加。结论不同的炮制工艺对大黄中没食子酸的含量有一定影响。【作者单位】： 中南大学湘雅医院药剂科【关键词】：大黄；炮制；高效液相色谱法；没食子酸；含量测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207311354_380875_1838299_3.jpg

  • 没食子酸丙酯的测定

    没食子酸丙酯是化妆品的主要抗氧化剂，抗氧化剂在化妆品中保护还原组分不被氧化。在100g化妆品中的最大添加量为0.01g。与BHA和BHT并用有良好的增效作用。 依据进出口行标—SNT 1785-2006，迪马科技推出了相应的色谱消耗品解决方案。样品制备制备方法：取没食子酸丙酯适量，用溶剂溶解，配成浓度为0.01 mg/mL的标准溶液。分析条件色谱柱：Diamonsil C18(2)，250×4.6 mm，5 μm (Cat#：99603)流动相：甲醇：0.5%乙酸水溶液=65:35流速：1.0 mL/min柱温：30 ℃检测器：UV 280 nm进样量：10 μL

  • 姜黄素的测定

    精密称取姜黄素样品约0.0015 g置50 ml容量瓶中，加流动相超声溶解，冷却至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密移取1 ml置50 ml容量瓶中。加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。流动相：乙腈：5%冰醋酸=45:55流速：0.9 mL/min柱温：40 ℃检测器：UV 340 nm进样量：20 μLSpursil C18，250×4.6 mm，5 μm http://dikma.com.cn/Public/Uploads/images/898(9).JPGDiamonsil C18，250×4.6 mm，5 μmhttp://dikma.com.cn/Public/Uploads/images/898(8).JPGDiamonsil C18(2)，250×4.6 mm，5 μmhttp://dikma.com.cn/Public/Uploads/images/898(10).JPG图例：1,2-杂质3-姜黄素

  • CNS_08.141_茶黄色素

    CNS_08.141_茶黄色素

    [align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][font='times new roman'][size=24px]茶黄色素[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]魏林涛[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]20[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]21.7.21[/size][/font][align=center][font='times new roman'][size=20px]对于茶黄色素的研究[/size][/font][/align][font='宋体']摘 要：[/font][font='宋体']茶黄色素是一类由多酚类及其衍生物氧化缩合而来的多酚类物质，具有抗菌、抗病毒、抗脑血管疾病、抗氧化、抗肿瘤等作用和功能，因而受到国内外的广泛关注，称为茶叶品质化学与功能成分的研究热点，被列为国家科委“九五”重中之重“1[/font][font='宋体']035[/font][font='宋体']”工程项目。本文从茶黄色素的理化性质、药理作用及检测方法进行了综述。[/font][font='宋体']关键词：[/font][font='宋体']茶黄色素，理化性质，药理作用，检测[/font][font='等线'][size=13px]1、 [/size][/font][font='等线'][size=13px]引言[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素又称茶黄素，是存在于红茶中的一种金黄色色素，是茶叶发酵的产物。在生物化学上，茶黄色素是一类多酚羟基具苯骈酚酮结构的物质，是第一个从茶叶中找到具有确切药理作用的化合物。[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素在茶汤中鲜亮的颜色和浓烈的口感方面，起到了一定的作用，是红茶的一个重要的质量指标。[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素最早由[/size][/font][font='等线'][size=13px]Roberts发现，指红茶中溶于乙酸乙酯呈橙黄色的物质，由多酚类及其衍生物氧化缩合而来，红茶中茶黄素类的含量一般为0.3%～1.5%，对红茶的色香味及品质起着决定性的作用。[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素以多酚类物质、儿茶素为主要成分，还含有氨基酸、维生索[/size][/font][font='等线'][size=13px]C、维生素E、维生素A原、黄酮及黄酮醇等。茶黄素是茶色素的主要成分，共有12种组分，其中茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3，3’-双没食子酸酯和茶黄素-3’-没食子酸酯是4种最主要的茶黄素。[/size][/font][font='等线'][size=13px]2、 [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素的理化性质[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素单体呈橙黄色针状晶体，熔点在2[/size][/font][font='等线'][size=13px]37-240[/size][/font][font='等线'][size=13px]℃，[/size][/font][font='等线'][size=13px]易溶于水并且也易溶解在部分有机溶剂中[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]难溶于乙醛[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]不溶于氯仿和苯。茶黄素的水溶液呈鲜亮的橙黄色[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]呈弱酸性[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]pH约为5.7[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]在酸性条件下相对稳定[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]味苦涩[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]在波长280、380和460 n[/size][/font][font='等线'][size=13px]m[/size][/font][font='等线'][size=13px]处有吸收，其中在280 nm处有最大吸收峰[/size][/font][font='等线'][size=13px]。[/size][/font][font='等线'][size=13px]1. [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素的化学结构[/size][/font][font='等线'][size=13px]儿茶素类化合物（C、EC、GC、ECG、ECC和 EGCG等）在多酣氧化酶的催化下，通过与空气中氧气进行氧化缩合形成茶黄素。在前期的研究中，已报道28种茶黄素的化学结构[/size][/font][font='等线'][size=13px]，如下图1所示。[/size][/font][font='等线'][size=13px]2. [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素的稳定性[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素类物质因其具有苯骈卓酚酮结构和含有多个酚羟基，性质活泼，易被氧化，热稳定性较差，随着水温、pH的升高，茶黄素的稳定性均会降低。S[/size][/font][font='等线'][size=13px]u[/size][/font][font='等线'][size=13px]等对儿茶素和茶黄[/size][/font][font='等线'][size=13px]素[/size][/font][font='等线'][size=13px]混合物稳定性的研究表明，水溶液温度为24℃，茶黄素总量在3h内几乎没有变化 水温为[/size][/font][font='等线'][size=13px]7[/size][/font][font='等线'][size=13px]0[/size][/font][font='等线'][size=13px]℃时，3h后茶黄素总量保留4[/size][/font][font='等线'][size=13px]4%[/size][/font][font='等线'][size=13px]；水温为1[/size][/font][font='等线'][size=13px]00[/size][/font][font='等线'][size=13px]℃时，3h后茶黄素几乎全部氧化降解。[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素在pH 为6.5时非常稳定，当pH为7.0时发生缓慢降解，当pH为9.0时降解迅速。光照可以降低茶黄素的稳定性，在避光条件下，茶黄素比较稳定[/size][/font][font='等线'][size=13px]；[/size][/font][font='等线'][size=13px]在光照条件下，6 h后茶黄素降解20%左右，说明茶黄素应避光保存。[/size][/font][font='等线'][size=13px]3. [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素的形成机理[/size][/font][font='等线'][size=13px]儿茶素在多酚氧化酶的催化作用下，被空气中的氧气氧化成邻醌[/size][/font][font='等线'][size=13px]，邻[/size][/font][font='等线'][size=13px]醌[/size][/font][font='等线'][size=13px]极易产生聚合反应，形成中间产物联苯酚[/size][/font][font='等线'][size=13px]醌[/size][/font][font='等线'][size=13px]类，具有不稳定性的联苯酚[/size][/font][font='等线'][size=13px]醌[/size][/font][font='等线'][size=13px]，极易进行自身歧化作用，一部分还原形成黄[/size][/font][font='等线'][size=13px]烷[/size][/font][font='等线'][size=13px]醇，另一部分氧化缩合形成茶黄素。目前研究茶黄素类的形成途径大概可分为以下5种[/size][/font][font='等线'][size=13px]：[/size][/font][font='等线'][size=13px]儿茶素[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]B环上[/size][/font][font='等线'][size=13px]3、[/size][/font][font='等线'][size=13px]4位存在2个酚羟基[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]B环上的3，4-二羟基与没食子儿茶素[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]B环上3、4、5位存在3个酚羟基[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]在多份氧化酶[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]PPO[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]的催化作用下，各自被氧化成邻[/size][/font][font='等线'][size=13px]醌[/size][/font][font='等线'][size=13px]，生成的邻[/size][/font][font='等线'][size=13px]醌[/size][/font][font='等线'][size=13px]间配对，进行聚合反应形成茶黄[/size][/font][font='等线'][size=13px]素[/size][/font][font='等线'][size=13px]及其没食子酸酯[/size][/font][font='等线'][size=13px]。[/size][/font][font='等线'][size=13px]②儿茶素或没食子儿茶素都可以与邻苯二[/size][/font][font='等线'][size=13px]酚[/size][/font][font='等线'][size=13px]、邻[/size][/font][font='等线'][size=13px]苯三酚、没食子酸等物质氧化发生邻醌反应[/size][/font][font='等线'][size=13px]，从而生成茶黄棓灵或茶黄酸。③儿茶素B环上的3，4[/size][/font][font='等线'][size=13px]-[/size][/font][font='等线'][size=13px]二羟基与儿茶素D环上的没食子酰基氧化形成具有苯骈卓酚酮结构的茶典烷酸酯类物质。④茶黄素没食子酸酯可继续与表儿茶素进行苯骈环化反应而生成具有2个和3个苯骈卓酚酮环的茶黄素类物质。⑤茶黄素自身可继续发生聚合反应生成具有2个苯骈卓酚酮环的双茶黄素。[/size][/font][font='等线'][size=13px][[/size][/font][font='等线'][size=13px]1][/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262018137730_739_1608728_3.png[/img][align=center][font='等线'][size=13px]图[/size][/font][font='等线'][size=13px]1 [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素的化学结构[/size][/font][/align][font='等线'][size=13px]3、 [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素的药理作用[/size][/font][font='等线'][size=13px]1. [/size][/font][font='等线'][size=13px]抗菌作用[/size][/font][font='等线'][size=13px]原征彦等研究发现[/size][/font][font='等线'][size=13px]TFs及单体对肉毒芽孢杆菌[/size][/font][font='等线'][size=13px]、[/size][/font][font='等线'][size=13px]肠类杆菌、金黄色葡萄球菌、荚膜杆菌、蜡样芽孢杆菌和志贺氏细菌，均有明显的抗菌抑制作用。茶黄素各单体之间具有协同抑菌作用。Toed M.等也证实了TFs对黄色葡萄球菌的抑制作用。TF - 3，3’- DG在0.5 mg[/size][/font][font='等线'][size=13px][/size][/font][font='等线'][size=13px]mL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]的浓度下可抑制须发癣菌和红色发癣菌的生长。绿茶、乌龙茶提取液在5 mg[/size][/font][font='等线'][size=13px][/size][/font][font='等线'][size=13px]mL [/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]浓度时可完全抑制白癣菌的发育，红茶提取液抑制白癣菌发育的浓度更低。红茶提取液对百日咳菌有很强的灭杀作用[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素没食子酸酯l mg[/size][/font][font='等线'][size=13px][/size][/font][font='等线'][size=13px]mL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]浓度24小时内完全杀灭百日咳菌。还可使霍乱弧菌Vibrio cholera凝聚而无活性，与细菌接触1h[/size][/font][font='等线'][size=13px]可[/size][/font][font='等线'][size=13px]使弧菌致死。0.3 [/size][/font][font='等线'][size=13px]μ[/size][/font][font='等线'][size=13px]L[/size][/font][font='等线'][size=13px][/size][/font][font='等线'][size=13px]mL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]红茶提取液可使霍乱弧菌溶血活性抑制71%[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]同时可抑制其毒素对仓鼠卵巢细胞的毒性。红茶的TF能杀灭病原性大肠杆菌0157，使细菌细胞膜破坏。[/size][/font][font='等线'][size=13px]Massao H.等研究发现TF[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px]、TF - 3 - G 、TF - 3’- G和TF -3，3’- DG在l×10[/size][/font][font='等线'][size=13px]-3[/size][/font][font='等线'][size=13px] ~ 10× 10[/size][/font][font='等线'][size=13px]-3[/size][/font][font='等线'][size=13px] mol[/size][/font][font='等线'][size=13px][/size][/font][font='等线'][size=13px]mL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]浓度时对导致龋齿的细菌GTF[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]葡萄糖基转移酶[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]有强烈抑制活性，其抑制作用强度TF -3，3’- DG TF - 3 - G TF - 3’- [/size][/font][font='等线'][size=13px]G[/size][/font][font='等线'][size=13px] TF[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px] CC [/size][/font][font='等线'][size=13px]G[/size][/font][font='等线'][size=13px]CC ECG ECCG。Yoshno K．[/size][/font][font='等线'][size=13px]等[/size][/font][font='等线'][size=13px]10×10[/size][/font][font='等线'][size=13px]-3[/size][/font][font='等线'][size=13px]mol[/size][/font][font='等线'][size=13px][/size][/font][font='等线'][size=13px]mL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]浓度的TF[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px]、TF -3 - G、TF- 3'- [/size][/font][font='等线'][size=13px]G[/size][/font][font='等线'][size=13px]和TF -3，3’- DG抑制葡聚糖形成，其抑[/size][/font][font='等线'][size=13px]制率分别为[/size][/font][font='等线'][size=13px]98% 、97% 、97%和98%。Tanaka N[/size][/font][font='等线'][size=13px].[/size][/font][font='等线'][size=13px]等研究与龋齿有关的α-淀粉酶发现，红茶提取液能专一地降低淀粉酶的活性[/size][/font][font='等线'][size=13px]；[/size][/font][font='等线'][size=13px]作用强弱依次为TF -3，3’- DG TF -3 - G TF -3’- G TF，并认为茶黄素结构中两个C环上C[/size][/font][font='等线'][size=13px]3[/size][/font][font='等线'][size=13px]和C[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px]3[/size][/font][font='等线'][size=13px]有没食子酰基基团呈现强抑制作[/size][/font][font='等线'][size=13px]用，效应可增强1[/size][/font][font='等线'][size=13px]0[/size][/font][font='等线'][size=13px]倍。[/size][/font][font='等线'][size=13px]2. [/size][/font][font='等线'][size=13px]抗病毒作用[/size][/font][font='等线'][size=13px]Nakayamu M.等研究发现TF – 3[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]3’- DG对流感病毒的侵染有一定的抑制作用，其机理是抑制病毒吸附在细胞上，而不是抑制病毒在细胞中的复制。Mukoyama A[/size][/font][font='等线'][size=13px].[/size][/font][font='等线'][size=13px]等还发现TF - 3、3’- DC具有抑制猕猴肾MA104细胞系对轮状病毒和肠病毒的感染作用。红茶提取液中TFs可使牛状病毒和冠状病毒的侵染失效。80 mgmL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]红茶提取液可完全抑制人轮状病毒。最引注目的是红[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶[/size][/font][font='等线'][size=13px]提取液及TFs具有抑制艾滋病病毒。Nakane H.等研究发现TFs对艾滋病毒I[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]HIV–I[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]的逆[/size][/font][font='等线'][size=13px]转录酶以及各种细胞的[/size][/font][font='等线'][size=13px] DNA 和 RNA聚合酶活性具有抑制作用，TF[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px]、TF -3 - G、TF - 3’- G、TF - 3，3’- DG对 HIV -Ⅰ逆转录酶的抑制常数[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]Ki[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]分别为0.49[/size][/font][font='等线'][size=13px]、[/size][/font][font='等线'][size=13px]0.032[/size][/font][font='等线'][size=13px]、[/size][/font][font='等线'][size=13px]0.023[/size][/font][font='等线'][size=13px]、[/size][/font][font='等线'][size=13px]0.023， TFs中没食子酰基基团的存在可提高TFs抑制的效应。[/size][/font][font='等线'][size=13px]3. [/size][/font][font='等线'][size=13px]抗心脑血管疾病作用[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶色素具有抗心脑血管疾病是近几年研究的热点之一。楼福庆[/size][/font][font='等线'][size=13px]发现茶色素具有显著的抗凝，促进纤溶，防止血小板粘附附聚，抑制动脉平滑肌细胞增生的作用，能有效地预防动脉粥样硬化症。彭兰等对茶色素改善血液流变性的研究表明[/size][/font][font='等线'][size=13px]：[/size][/font][font='等线'][size=13px]10项血液流变学指标，除红细胞压积[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]HCt[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]下降不明显外，全血比粘度[/size][/font][font='等线'][size=13px]（η[/size][/font][font='等线'][size=13px]b[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]、血浆比粘度[/size][/font][font='等线'][size=13px]（η[/size][/font][font='等线'][size=13px]p[/size][/font][font='等线'][size=13px]）、[/size][/font][font='等线'][size=13px]纤维蛋白原[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]Fb[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]、全血还原粘度[/size][/font][font='等线'][size=13px]（η[/size][/font][font='等线'][size=13px]r[/size][/font][font='等线'][size=13px]）、[/size][/font][font='等线'][size=13px]红细胞电泳时间[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]EPT[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]、血小板粘附率[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]Pad[/size][/font][font='等线'][size=13px]）、[/size][/font][font='等线'][size=13px]血栓长度[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]EL[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]、血栓湿重[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]EMW[/size][/font][font='等线'][size=13px]）[/size][/font][font='等线'][size=13px]及血栓于重[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]EDW）治疗后均有明显的降低[/size][/font][font='等线'][size=13px]（[/size][/font][font='等线'][size=13px]P TF[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px] EGCG EGC GA（Gallic acid没食子酸）；TF[/size][/font][font='等线'][size=13px] [/size][/font][font='等线'][size=13px]- 3，3’[/size][/font][font='等线'][size=13px]-[/size][/font][font='等线'][size=13px] DG抑制巨噬细胞低密度脂蛋白氧化的机理是降低了巨噬细胞过氧化物的产生，并显著的络合铁离子的缘固。[/size][/font][font='等线'][size=13px]5. [/size][/font][font='等线'][size=13px]抗癌作用[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶叶具有防癌、抗癌作用，给人类健康带来了福音。研究已发现茶叶不仅茶多酚具有防癌抗癌作用，茶黄素也具有很强的抗癌作用。[/size][/font][font='等线'][size=13px]1984年日本学者奥田拓男等较系统的研究了茶单宁、药材单宁、绿茶、红茶和乌龙茶、乙酸乙酯浸出物及红茶正丁醇和水浸出物的抗诱变作用，结果显示：三种茶的8种浸出物都对TrP-I（动物蛋白化焦后的诱变成分）显示出抗诱变作用，且随浓度增加抗诱变功效增加；对N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（MNNG），除绿茶乙酸乙酯浸出物和红茶水浸出物外，其它浸出物均显抗诱变作用。Morse M．A．等研究TFs和EGCG对N-硝基化甲基苯甲胺（NMBA）诱导鼠食道癌的影响，发现TFs和EGCG浓度在360—1200 mgL[/size][/font][font='等线'][size=13px]-1[/size][/font][font='等线'][size=13px]可明显减少其食道癌的形成。Yang—GuangYus圳发现T 可抑制NNK[4-（methyl nitrosamino）-1-（3-pyridy）-1-butanone[/size][/font][font='等线'][size=13px]][/size][/font][font='等线'][size=13px]诱导的A／J鼠的肺癌。王岳飞等I利用荧光溴化乙啶研究茶与DNA的相互作用，结果表明：各种茶类的茶液对EB-DNA荧光强度均有压低作用，不同茶类影响状况不同，压低作用同这些茶类所含的茶多酚量密切相关，但红茶的作用强于绿茶。Chung J．Y．等 用纯化的绿茶和红茶多酚组分比较抑制H-ras-transformed细胞的Ras信号路径的能力，结果发现除EC外，所有茶多酚组分（绿茶的EGCG、EGC、ECG及异构体，红茶的TF[/size][/font][font='等线'][size=13px]1[/size][/font][font='等线'][size=13px]、TF - 3- G、TF - 3’- G、TF - 3，3’- DG） 均对30.7bRas12细胞生长和AP-1（Activator Portein1）具有强烈的抑制。添加过氧化氢酶于EGCG或TF - 3，3’- DG培养的细胞不能阻止对AP - 1的抑制效果；EGCG和TF - 3，3’- DG抑制P44[/size][/font][font='等线'][size=13px]／[/size][/font][font='等线'][size=13px]22（胞外的Signal—regulated kinase 1和2）和没有影响Phosphorylat-ed-c-jun-NH[/size][/font][font='等线'][size=13px]2[/size][/font][font='等线'][size=13px]-terminal kinase的c-jun磷酸化作用。TF - 3，3’- DG抑制P38的磷酸化作用，而ECG不能，EGCE降低[/size][/font][font='等线'][size=13px]c[/size][/font][font='等线'][size=13px]-jun的水平、TF - 3，3’- DG则降低Fra-1的水平。[/size][/font][font='等线'][size=13px]从已有的研究可以看出，茶色素茶黄素抗癌作用主要是通过：[/size][/font][font='等线'][size=13px]1）抑制致癌物诱发癌的形成；2）抑制癌细胞信号传输和增殖；3）抗肿瘤转移；4）诱导肿瘤细胞凋亡等。而产生药理作用的。[/size][/font][font='等线'][size=13px][[/size][/font][font='等线'][size=13px]2][/size][/font][font='等线'][size=13px]4、 [/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄色素的检测方法[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶黄素是一类具有苯并卓酚酮结构的化合物的总称，因其分子式、相对分子质量各不相同，因此很难测定茶黄素的各个组分，同时，茶黄素又很难与茶红素及其它物质完全分离。以下对茶黄素测定方法进行了概述。[/size][/font][font='等线'][size=13px]1. [/size][/font][font='等线'][size=13px]Roberts法[/size][/font][font='等线'][size=13px]Roberts法是根据茶黄素和一部分茶红素（TRs I型）溶解于乙酸乙酯或4-甲基-戊酮（IB-MK），这部分可利用其能溶于碳酸氢钠溶液而分离，茶红素（TRs II型）留在水层。[/size][/font][font='等线'][size=13px]该方法存在重复性差、测定含量值偏低的缺点，但其方法简单、试剂价格便宜且同时测定茶红素的含量，因此被广泛采用。[/size][/font][font='等线'][size=13px]2. [/size][/font][font='等线'][size=13px]a-氨基乙基二苯酸酯（Favognost）试剂分析法[/size][/font][font='等线'][size=13px]Hiton提出的一种快速测定方法。根据茶黄素分子中的苯并卓酚酮核可以与Flavognost试剂产生特异性反应，产生绿色络合物，测定其吸光值换算成茶黄素含量。[/size][/font][font='等线'][size=13px]与[/size][/font][font='等线'][size=13px]Roberts法相比，该方法具有较好的重现性，已被Ellis推荐为国际红茶最低质量标准的检测方法。但该法受到提取液、提取温度、水的pH值等因素的影响，Flavognost试剂仅与茶黄素顺式上的两个羟基结合，使测定结果偏低，同时Flavognost试剂不易购得。[/size][/font][font='等线'][size=13px]3. [/size][/font][font='等线'][size=13px]氯化铝比色法[/size][/font][font='等线'][size=13px]Likoleche-Nkhoma J W 等用AlCl[/size][/font][font='等线'][size=13px]3[/size][/font][font='等线'][size=13px]代替Flavognost试剂，铝盐与茶黄素复合产生红色，于波长525nm具有最大吸收，根据吸光值折算成茶黄素含量。[/size][/font][font='等线'][size=13px]该方法的测定值与[/size][/font][font='等线'][size=13px]Flavognost方法测定结构没有显著差异，且铝盐的价格较便宜，但样品中加入过量的铝盐会产生浑浊。[/size][/font][font='等线'][size=13px]4. [/size][/font][font='等线'][size=13px]SephadexLH-20柱层析（Colu[/size][/font][font='等线'][size=13px]mn[/size][/font][font='等线'][size=13px] Chromatog-raphy，CC）法[/size][/font][font='等线'][size=13px]此方法是竹尾忠一提出的。该方法能有双地分离茶黄素，而且对茶黄素的主要组分能定量，但操作复杂。[/size][/font][font='等线'][size=13px]5. [/size][/font][font='等线'][size=13px]Whitehead法[/size][/font][font='等线'][size=13px]Whitehead D L 等利用色素极性大小差异，提出的一种快速测定[/size][/font][font='等线'][size=13px]茶[/size][/font][font='等线'][size=13px]黄素总量的方法，该方法适于实验室和工厂的常规检测，但测量值偏高。[/size][/font][font='等线'][size=13px]6. [/size][/font][font='等线'][size=13px]高效液相色谱法（[/size][/font][font='等线'][size=13px]High performance Liquid Chromatography，HPLC）[/size][/font][font='等线'][size=13px]Bailey R G等使用光电二级管列检测器的反相HPLC研究红茶溶出物的性质，4种茶黄素能够得到分离纯化，提出了HPLC法测定茶黄素主要组分及其它物质的方法。HPLC法更精确，并能使各茶黄素单体得到较理想的分离。但该法需要高纯度的茶黄素标样。[/size][/font][font='等线'][size=13px]7. [/size][/font][font='等线'][size=13px]毛细管电泳法（C[/size][/font][font='等线'][size=13px]apillary Electrophoresis，CE）[/size][/font][font='等线'][size=13px]Bee B L 等首次采用毛细管电泳测定儿茶素类化合物和茶黄素类化合物。Wright L P 等用非水相毛细管电泳测定红茶中的4种主要茶黄素，并对有机溶剂的组成和电解质浓度对分离效果的影响进行了研究，确定了最佳的分离溶剂组版为V（乙腈）：V（甲醇）：V（乙酸）=71：25：4和90[/size][/font][font='等线'][size=13px] [/size][/font][font='等线'][size=13px]mmol/L的醋酸铵，10min内实现了茶黄素的基线分离，与常规毛细管电泳相比具有显著的优势。[/size][/font][font='等线'][size=13px]8. [/size][/font][font='等线'][size=13px]高速逆流色谱法（[/size][/font][font='等线'][size=13px]High Speed Countercurrent Chromatography，HSCCC）[/size][/font][font='等线'][size=13px]高速逆流色谱法可避免样品与固体载体的化学反应和死吸附等缺点，每次分离样品结束后，管道中的残留溶剂均可以冲出，不会对后续分离产生任何影响，因此高速逆流色谱法分离样品具有高的回收率。[[/size][/font][font='等线'][size=13px]3][/size][/font][font='等线'][size=13px]总之，茶黄素的分析测定方法各有利弊，可以根据具体情况选择一种切实可行的分析方法。[/size][/font][font='等线'][size=13px]5、 [/size][/font][font='等线'][size=13px]结语[/size][/font][font='等线'][size=13px]近年来，随着对茶叶中茶黄素的研究不断深入，人们对其功能性质和生理活性有了更多的了解，茶黄素在药品、食品和化妆品等领域的应用越来越广泛，具有很好的市场前景。茶黄素作为茶叶中的一种重要成分，[/size][/font][font='等线'][size=13px]如何在低成本上提高茶黄素的产率和纯度仍是茶黄素研究中的主要问题。随着多酚氧化酶酶催化反应的研究[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]酶催化合成茶黄素将是未来研究的热点。在茶黄素药理学活性研究的基础上[/size][/font][font='等线'][size=13px]，[/size][/font][font='等线'][size=13px]用茶黄素或其衍生物生产天然高效的药品也将是今后研究的重点。[/size][/font][font='宋体'][color=#000000]参考文献：[/color][/font][font='宋体'][color=#000000][1] [/color][/font][font='宋体'][color=#000000]丁其欢,等[/color][/font][font='宋体'][color=#000000].[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]茶黄素的理化性质提取分离及生物活性研究进展[J[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]].[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]安徽农业科学,[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]2017,45(11):85-87,113.[/color][/font][font='宋体'][color=#000000][[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]2] [/color][/font][font='宋体'][color=#000000]李立祥,萧伟祥.茶色素及茶黄素药理作用研究进展[[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]J][/color][/font][font='宋体'][color=#000000].福建茶叶.[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]2002[/color][/font][font='宋体'][color=#000000],[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]4,35-38.[/color][/font][font='宋体'][color=#000000][3][/color][/font] [font='宋体'][color=#000000]王洪新,等.茶黄素的制备、分析、分离及功能活性研究进展[[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]J][/color][/font][font='宋体'][color=#000000].食品与生物技术学报.[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]2011,30(1):12-19.[/color][/font]

  • 【“仪”起享奥运】姜黄素的体内代谢与局限性

    [font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]姜黄素为姜黄中的有效成分，具有抗炎[/color][/size][/font][font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]、抗氧化[/color][/size][/font][font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]、调节脂质代谢[/color][/size][/font][font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]、抗肿瘤[/color][/size][/font][font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]、抗纤维化[/color][/size][/font][sup][color=black]][/color][/sup][font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]、器官保护[/color][/size][/font][font=宋体][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.901961)]等功效。虽然姜黄素的药效得到了国内外的普遍认可，但是其溶解性低、稳定性低和生物利用率低等缺点，限制了姜黄素的临床应用。[/color][/size][/font] [font=宋体]一般而言，姜黄素类化合物是姜黄素、[color=var(--weui-LINK)]去甲氧基姜黄素[i][/i][/color]和双去甲氧基姜黄素的混合物，这些物质具有相同的庚烷长链和双苯环结构，区别在于苯环上的甲氧基[/font][b][color=#ffffff][back=#7b0c00][/back][/color][/b][font=宋体]数目不同。在姜黄提取物中，姜黄素占[/font]61.69%[font=宋体]，去甲氧基姜黄素占[/font]16.06%[font=宋体]，双去甲氧基姜黄素占[/font]12.32%[font=宋体]。姜黄素分子中含有[/font]α,β-[font=宋体]不饱和二酮基，且在[/font]2[font=宋体]个苯环上分别含有酚羟基和甲氧基[/font][font=宋体]，酮[/font]-[font=宋体]烯醇部分可与金属螯合，能够清除由金属离子产生的活性自由基，使姜黄素可以成为氢离子的供体或受体，这是姜黄素抗氧化、抗炎症、抗凋亡能力的来源[/font][font=宋体]。[/font] [font=宋体]姜黄素在水中的溶解度小于[/font]50 μmol/L[font=宋体]，但极易溶于有机溶剂[/font][font=宋体]，其溶解度和稳定性与溶剂的种类和[/font]pH[font=宋体]值相关。在高相对[color=var(--weui-LINK)]介电常数[i][/i][/color]或极性的溶液中以[/font]β-[font=宋体]二羰基形式存在，在低相对介电常数的溶液如环己烷和四氯化碳中以烯醇形式存在。在姜黄素的[/font]β-[font=宋体]二酮链上存在分子内氢原子转移，导致其在溶剂中存在酮和烯醇互变异构的构象：在酸性和中性溶液中稳定存在，呈亮黄色；而在碱性条件下姜黄素无法保持稳定，分解反应的产物中四氢二阿魏酰甲烷会迅速形成缩合产物，呈现棕红色或棕褐色[/font][font=宋体]。姜黄素还是一种光敏性物质，将姜黄素溶于乙醇，在[/font]24 h[font=宋体]强光照射后会被完全降解，溶液由黄色转变为无色[/font][font=宋体]。[/font] [font=黑体][/font][font=宋体]生物制药分类系统按照水溶性和肠道渗透性将药品归为[/font]4[font=宋体]类，而姜黄素因其水溶性差、通过胃肠上皮的渗透性可忽略不计的特点被归于第[/font]4[font=宋体]类药物。虽然各种动物模型和临床试验都证实了姜黄素的安全性[/font][font=宋体]，但过去[/font]30[font=宋体]年来，与姜黄素吸收、分布、代谢和排泄相关的研究表明，血药浓度低、组织分布局限、转化速度快和代谢周期短等因素限制了其应用[/font][font=宋体]。姜黄素的最高口服耐受剂量可达[/font]12 g/d[font=宋体]，有报道指出，即使摄入姜黄素[/font]10[font=宋体][color=black]～[/color][/font]12 g[font=宋体]，人体内姜黄素最高血浆浓度仍然低于[/font]160 nmol/L[font=宋体]。[/font][font=宋体]目前临床姜黄素剂型主要为注射液及原料药，给药途径主要为[/font][i]po[/i][font=宋体]、[/font]iv[font=宋体]及[/font]ip[font=宋体]。姜黄素在体内的吸收代谢及分布情况一直以来被广泛研究，研究对象包括小鼠、大鼠及人体[/font][font=宋体]。绝大部分姜黄素未经小肠消化直接进入结肠部位，只有少量姜黄素可以被上皮细胞吸收，并在肝脏和血浆中分布。汪小珍[/font][font=宋体]对比了姜黄素不同给药方式在大鼠体内生物利用度的变化，结果显示[/font]ip[font=宋体]姜黄素的生物利用度（[/font]35.07%[font=宋体]）比[/font]ig[font=宋体]（[/font]4.13%[font=宋体]）更高，表明姜黄素在肠道内的吸收效率较低。[/font] [font=宋体] [/font]

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