棕鳞矢车菊黄酮素

[align=center]胶囊中总黄酮的测定方法验证[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]食品事业部：肖颖[/align]一、目的：对《保健食品检验与评价技术规范》（2003版)中总黄酮测定方法进行方法适用性验证。二、验证内容：方法适用性验证包括检出限、线性范围、重复性、回收率、耐用性。三、验证方法：1 范围 本标准适用于胶囊中总黄酮的含量测定。2 原理 试样中黄酮经乙醇提取，聚酰胺粉吸附，以苯除去杂质，用甲醇洗脱黄酮后，在360nm有最大吸收，其吸收值与黄酮量在一定范围内成正比，与标准系列比较定量。3 试剂和材料3.1 试剂实验室用水为双蒸馏水，所用试剂为分析纯级。3.1.1 无水乙醇：分析纯。（来源：天津奥普升化工有限公司 批号：20161019)3.1.2 芦丁标准溶液：（来源：上海金穗生物科技有限公司 批号：20161027)称取5.0芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL。3.1.3 甲醇（来源：天津市天力化学试剂有限公司 批号：20150408 ）3.1.4 聚酰胺粉（来源：浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂 批号：201600409 ）3.1.5 苯（来源：天津市科密欧化学试剂有限公司 批号：20140510 ）以上试剂符合检测要求4 仪器和设备4.1超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司 型号：KQ5200B4.2电子天平：沈阳龙腾电子有限公司 型号：JM-B10002 精度：0.0001g4.3分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司 型号：TU-1901或同等程度仪器 以上仪器符合检测要求5 波长选择专属性实验取芦丁标准溶液（3.1.2）1.0mL加乙醇（3.1.1）定容至25mL，摇匀后，超声20min，吸取上清液1.0mL于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉（3.1.4）吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯（3.1.5）洗，苯液弃去，然后用甲醇（3.1.3）洗脱，定容至25mL，以甲醇（3.1.3）为参比，进行紫外可见光谱扫描，同时对样品空白进行扫描。6 试样处理样品提取：称取1.0g左右试样，加乙醇（3.1.1）溶解并定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，吸取上清液1.0mL于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉（3.1.4）吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯（3.1.5）洗，苯液弃去，然后用甲醇（3.1.3）洗脱黄酮，定容至25mL，为待测液。7 测定：标准曲线绘制：分别移取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL芦丁标准溶液于10mL比色管中,加甲醇（3.1.3）至刻度,摇匀。用1cm石英比色皿在360nm处比色,测其吸光度。以吸光度为横坐标,总黄酮含量为纵坐标绘制校正曲线。同时取待测液在360nm测定吸光度，计算试样中总黄酮含量。8 公式试样总黄酮含量按下式进行计算。[img=,153,45]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091803387785_8072_2904018_3.png!w153x45.jpg[/img]式中：X—样品中总黄酮的含量，mg/100g； A—样品测定液中黄酮的含量，μg；m—样品质量，g；V[sub]1[/sub]-测定用样品液体积，mL；V[sub]2[/sub]-试样定容体积，mL。计算结果保留二位有效数字。四、验证数据1.波长选择经过全波长扫描，芦丁标准溶液在360nm处有最大吸收峰，且试剂空白和样品空白在此波长处无干扰，故选择360nm为最佳测定波长。[img=,690,546]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091803507036_5107_2904018_3.png!w690x546.jpg[/img]2.线性范围以总黄酮含量（C）为横坐标，吸光度值（A）为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程：A=0.0029C-0.0069 R[sup]2[/sup]为0.999。[table][tr][td][align=center]总黄酮含量(μg)[/align][/td][td]0[/td][td]52[/td][td]104[/td][td]156[/td][td]208[/td][td]260[/td][/tr][tr][td][align=center]A[/align][/td][td]0[/td][td]0.133[/td][td]0.284[/td][td]0.445[/td][td]0.598[/td][td]0.730[/td][/tr][/table][align=center][img=,482,290]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091803598216_9725_2904018_3.png!w482x290.jpg[/img] [/align]以上结果表明总黄酮在0-260μg范围内，吸光值与总黄酮含量线性良好，符合要求。3. 检出限以甲醇（3.1.3）为参比，同时在360nm处对标准曲线0管进行20次测定，计算标准偏差，以3倍标准偏差值与斜率的比值为最低检出含量，利用公式计算出检出限。经测定，标准偏差为0.000366，最低检出含量为0.379μg，检出限为1.0mg/100g，满足胶囊中对检出浓度的要求。4.重复性称取6份试样按照上述处理方法进行试样处理，分别吸取适量样液进行比色，求得样液中总黄酮含量。[table][tr][td][align=center]测定编号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]6[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]样品含量mg/100g[/align][/td][td]323.1[/td][td]318.9[/td][td]320.2[/td][td]326.1[/td][td]324.6[/td][td]322.7[/td][/tr][tr][td][align=center]平均值mg/100g[/align][/td][td=6,1][align=center]322.6[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]相对标准偏差%[/align][/td][td=6,1][align=center]0.831[/align][/td][/tr][/table]由上表可知，试样中总黄酮测定的重复性均值为322.6，RSD值为0.831%，符合规定。5.回收率在进行重复性试验基础上，同时进行加标试验，加标量分别为1.2倍，1.0倍，0.8倍，结果见下表：[table][tr][td][align=center]测定编号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]6[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]样品含量mg/100g[/align][/td][td]323.1[/td][td]318.9[/td][td]320.2[/td][td]326.1[/td][td]324.6[/td][td]322.7[/td][/tr][tr][td][align=center]加标量mg/100g[/align][/td][td][align=center]347.30[/align][/td][td][align=center]354.98[/align][/td][td][align=center]304.81[/align][/td][td][align=center]309.28[/align][/td][td][align=center]251.82[/align][/td][td][align=center]258.99[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标样品含量mg/100g[/align][/td][td]651.22[/td][td]659.02[/td][td]630.58[/td][td]649.8[/td][td]549.98[/td][td]567.79[/td][/tr][tr][td][align=center]加标回收率%[/align][/td][td]94.48 [/td][td]95.81 [/td][td]101.83 [/td][td]104.66 [/td][td]89.50 [/td][td]94.63 [/td][/tr][/table]由上表可以看出胶囊中总黄酮测定的加标回收范围在80%-120%，符合规定。6.耐用性同时进行人员比对和仪器比对检测胶囊中总黄酮，结果见下表。[table][tr][td]编号[/td][td]人员1[/td][td]人员2[/td][td]仪器1[/td][td]仪器2[/td][/tr][tr][td]样品含量mg/100g[/td][td]322.8[/td][td]325.7[/td][td]322.1[/td][td]323.7[/td][/tr][tr][td]相对误差%[/td][td=2,1][align=center]0.89[/align][/td][td=2,1][align=center]0.50[/align][/td][/tr][/table]由上表可知，胶囊中总黄酮测定耐用性符合要求综上所述：从波长选择、检出限、线性范围、重复性、回收率、耐用性测试结果可知，均符合方法要求，本实验方法符合胶囊中总黄酮测定。

红花苜蓿总黄酮对亚硝酸的清除盐作用研究 亚硝酸盐具有一定的毒性，是食品添加剂中急性毒性最强的物质之一。一方面是大剂量的亚硝酸盐进人人体内会造成中毒，另一方面，部分亚硝酸盐在一定条件下会转化为亚硝胺，而亚硝胺是一种致癌物质。亚硝酸盐进人血液后与人体中的血红蛋白结合，使正常的血红蛋白变形，失去携氧能力，导致人体组织缺氧，还会对血管产生扩张作用。一般地，口服亚硝酸盐10min至3h后，可出现头晕、头痛、乏力、胸闷、气短、心悸、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状;严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭，甚至死亡。另外亚硝酸盐能够透过胎盘进人胎儿体内，6个月以内的婴儿对亚硝酸盐特别敏感，对胎儿有致畸的作用。 红花苜蓿是一种在在欧洲和亚洲的草地中常见的多年生野生植物，现在已经被移植到北美来种植。在分枝的茎末端生长的红花被认为是其医疗价值的来源，通常会被晒干用作医疗使用。红花苜蓿是很多有价值的营养素的来源，包括钙、铬、镁、烟碱酸、磷、钾、硫胺素和维生素C。红花苜蓿还被认为是异黄酮（一种作用类似雌激素的水溶性化学成分，存在于很多植物中）的最丰富来源之一。 近年来,随着对自由基研究的深入,人体中的活性氧和自由基被认为是引发衰老、癌变和细胞损伤的重要原因。筛选新的能够清除自由基的抗氧化天然药物成为研究热点,因此,对异黄酮抗氧化作用的研究逐渐引起广大学者的重视。 本试验旨在探讨红花苜蓿总黄酮对亚硝酸的清除盐作用，,为防癌抗癌及充分利用这一天然资源提供有益的实验依据。材料与方法主要仪器：电热恒温水浴锅微量紫外分光光度循环水真空泵万分之一分析天平主要试剂： 葡萄糖，对氨基苯磺酸，亚硝酸钠，α-萘胺，pH=3.0的柠檬酸钠-盐酸缓冲液，苯酚，浓硫酸，冰醋酸，以上均为分析纯。红花苜蓿蒸馏水2实验方法主要试剂的配制; 葡萄糖贮备液：精密称取葡萄糖对照品100.0mg，用蒸馏水溶解并定容至100mL。 0.4%对氨基苯磺酸：精密称取对氨基苯磺酸400.0mg溶于100mL 30%醋酸溶液中。 0.1%α-萘胺：精密称取250.1mgα-萘胺溶解于250mL30%醋酸溶液中。100mg/kg亚硝酸钠溶液：精密称取50.2mg亚硝酸钠溶于500mL水中。 pH=3.0的柠檬酸钠-盐酸缓冲液：用适量的柠檬酸钠、盐酸、蒸馏水并用酸度计测pH值配溶液500mL。5%苯酚试剂:精密称取10.0000g,加蒸馏水190g溶解，置棕色瓶中密闭保存。红花苜蓿总黄酮的提取称取干燥的红花苜蓿用石油醚浸泡24h,以除去色素和脂溶性杂质，倾出石油醚，药渣中75%乙醇浸泡30分钟,超声提取30分钟，过滤，收集提取液，浓缩干燥得总黄酮。 2.3[font=

中药复方口服溶液中总黄酮含量的测定 将传统中药复方加工制成口服溶液，不但可以保留传统中药的临床药效，还极大的方便了患者的携带及服用，并且可以通过改善口感提高患者的顺应性。口服液始于上世纪60年代，当时有人将竹沥灌装于安瓶中制成口服安瓶剂，这是口服液的初步尝试，中国药典77年版首次收载了口服液安瓶剂（即口服液），到了八九十年代，随着中药制药工业的发展，口服液已被广为推崇。 本研究将传统中药汤剂经工艺设计制成口服液作为保健食品，现进行质量研究中，经文献调研该方中其主要功效作用的成分为总黄酮，现将制得的成品进行总黄酮含量测定。 黄酮类化合物广泛存在于药用植物、水果和蔬菜等中，是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物，它们是一类以2-苯基色原酮为母核的多酚化合物，现代医学研究表明，黄酮类化合物具有降低心肌耗氧量，使冠脉、脑血管流量增加，抗心律，软化血管，降血糖、血脂等作用，同时它还是一种天然的抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基，抗衰老，增加机体免疫力的生理活性作用，对总黄酮测定方法的研究报道较多，但基本都是对单一植物中总黄酮的测定，而我国大多中药制剂均为复方制剂，基于中草药复方制剂中总黄酮含量测定的研究还较少，本实验以复方中药为研究对象，来测定总黄酮的含量。试验仪器及试剂：电子天平紫外可见分光光度计100conc(瓦里安)数控超声波清洗器KQ-500DE(昆山市超声仪器有限公司)SHH.W21.420型三用电热恒温水箱芦丁对照品内径1.5cm试管试剂均为分析纯试验样品的制备：首先将口服液取出与小烧杯中，移取3ml于25ml容量瓶中，乙醇定容，摇匀后，超声提取20Min,放置，移取1ml于蒸发皿中，加入1g的聚酰胺（80-100目），搅拌使均匀吸附，（如图）：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312221536_483960_2217446_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312221536_483959_2217446_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312221536_483961_2217446_3.jpg置于水浴上（50℃）挥去乙醇（如图）：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312221536_483963_2217446_3.jpg将挥好的聚酰胺转移入层析柱中，先用20ml苯液洗脱，弃去苯液，（如图：）然后用甲醇进行洗脱，并将洗脱液接入25ml的容量瓶中，甲醇定容。摇匀后，以0.45微米滤膜过滤与刻度管中。（如图：）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312221536_483964_2217446_3.jpg标准曲线的制作：称取5mg芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL容量瓶中，即得50微克每毫升的标准溶液。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312221536_483958_2217446_3.jpg吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0[size=12

[font='宋体'][size=24px]柑橘黄[/size][/font][font='宋体'][size=24px]在食品中的添加及检测方法[/size][/font][font='宋体'][size=24px]吴明书[/size][/font][font='宋体'][size=24px]2021年7月[/size][/font]1、 [font='宋体'][size=18px]人造色素[/size][/font][font='宋体'][size=18px]的简介[/size][/font][font='宋体']食品的色彩是食品感观品质的一个重要因素。人们在制作食品时常使用一种食品添加剂——食用色素。使用的食用色素有天然食用色素和合成食用色素两大类。在[/font][font='宋体']1850年英国人发明第一种合成食用色素苯胺紫之前，人们都是用天然色素来着色。早在公元10世纪以前，古人就开始利用植物性天然色素给食品着色，最早使用色素的是大不列颠的阿利克撒人，当时他们用茜草植物色素做成玫瑰紫色糖果。以后，美洲的托尔铁克人与阿芒特克族人相继从雌性胭脂虫中提取胭脂虫红，用于食品着色。我国自古就有将红曲米酿酒、酱肉、制红肠等习惯。西南一带用黄饭花、江南一带[/font][font='宋体']用乌饭树叶捣汁染糯米饭食用。食品着色和改善食品色泽的食品添加剂。有天然和合成之分。天然食用色素是直接从动植物组织中提取的色素，对人体一般来说是无害，如红曲、叶绿素、姜黄素、胡萝卜素、苋菜和糖色等，就是其中的一部分。人工合成食用色素，是用煤焦油中分离出来的苯胺染料为原料制成的，故又称煤焦油色素或苯胺色素，如合成苋菜红、胭脂红及柠檬黄等等。这些人工合成的色素因易诱发中毒、泻泄甚至癌症，对人体有害，故不能多用或尽量不用。[/font][font='宋体']食用天然着色剂主要是指由动、植物组织中提取的色素，多为植物色素，包括微生物色素、动物色素及无机色素。绝大部分来自植物组织，特别是水果和蔬菜。安全性高，有的还兼具营养作用（如β－胡萝卜素）。[/font][font='宋体']天然色素特点：能更好地模仿天然物的颜色，色调较自然；成本较高；保质期短。着色[/font][font='宋体']易受金属离子、水质、[/font][font='宋体']pH值、氧化、光照、温度的影响，一般较难分散，染着性、着色剂间的相溶性较差。[/font][font='宋体']按来源可分为植物色素（如叶绿素等）、动物色素（如紫胶红等）、微生物色素（如红曲色素等）。此外，它还可包括某些无机色素。按结构尚可分为叶啉类（如叶绿素）、异戊二烯类（如β－胡萝卜素）、多酚类（如花色素苷）、酮类（如姜黄素）、醌类（如紫胶红）和甜菜红、焦糖色等。[/font][font='宋体']截止[/font][font='宋体']1998年底，国家批准允许使用的食用天然色素共有48种：[/font][font='宋体']包括天然β胡萝卜素、甜菜红、姜黄、红花黄、紫胶红、越橘红、辣椒红、辣椒橙、焦糖色（不加氨生产）、焦糖色生产焦糖色（加氨生产）、红米红、菊花黄浸膏、黑豆红、高梁红、玉米黄、萝卜红；可可壳色、红曲米、红曲红、落葵红、黑加伦红、桅子黄、桅子兰，沙棘黄、玫瑰茄红、橡子壳棕，[/font][font='宋体']NP红、多惠柯棕，桑椹红、天然芥菜红、金樱子棕；姜黄素、花生农红、葡萄皮红；兰锭果红；藻兰、植物炭黑，密蒙黄，紫草红；茶黄色素：茶绿色素、柑橘黄、姻脂树橙（红木素/降红木素）胭脂虫红、氧化铁（黑）等。常用的天然着色剂有辣椒红、甜菜红、红曲红、胭脂[/font][font='宋体']虫红、高粱红、叶绿素铜钠、姜黄、栀子黄、胡萝卜素、藻蓝素、可可色素、焦糖色素等等。[/font][font='宋体']截止[/font][font='宋体']1998年底，国家批准允许使用的合成色素有：苋菜红、苋菜红铝色淀、胭脂红、胭脂红铝色淀、赤藓红、赤藓红铝色淀、新红，新红铝色淀。柠檬黄、柠檬黄铝色淀、日落黄、日落黄铝色淀、亮兰；亮兰铝色淀、靛兰、靛兰铝色淀，叶绿素铜钠盐、B-胡萝B卜素、二氧化钛、诱惑红；酸性红等，共21种。国内使用的较多的合成色素有9种，包括苋菜红、胭脂红、新红、柠檬黄、日落黄、靛蓝、亮蓝、赤红、诱惑红等。[/font][font='宋体']人工色素的特点：色泽鲜艳；色调多；性能稳定；着色力强；坚牢度大；调色易；使用方便；成本低廉；应用广泛；但它有一个大缺点，即具有毒性[/font][font='宋体'](包括毒性、致泻性和致癌性)。[/font][font='宋体']这些毒性源于合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐，它们对人体均可造成不同程度的危害。特别是偶氮化合物类合成色素的致癌作用更明显。偶氮化合物在体内分解，可形成两种芳香胺化合物，芳香胺在体内经过代谢活动后与靶细胞作用可能会引起癌变。时下国家出台的相关规定，促使食用色素生产商更加严格规范化，但用量和使用范围还是受到严格限制。[/font][font='宋体']对于少年儿童，正处于生长发育期，体内器官功能比较脆弱，神经系统发育尚不健全，对化学物质敏感。同时，由于孩子的肝脏解毒功能和肾脏排泄功能都不够健全，致使大量消耗体内解毒物质，干扰体内正常代谢功能，严重影响少年儿童的生长发育。[/font][font='宋体'][size=18px]二、[/size][/font][font='宋体'][size=18px]食用[/size][/font][font='宋体'][size=18px]色素的发展与前景[/size][/font][align=left][font='arial'][color=#333333]发展历史人类为食品着色的发展历程大致可概括为：天然色素[/color][/font][font='arial'][color=#333333]--[/color][/font][font='arial'][color=#333333]人工合成食用色素[/color][/font][font='arial'][color=#333333]--[/color][/font][font='arial'][color=#333333]天然色素与人工合成食用色素并用[/color][/font][font='arial'][color=#333333]--[/color][/font][font='arial'][color=#333333]更加安全、稳定的天然使用色素。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]自[/color][/font][font='arial'][color=#333333]1856[/color][/font][font='arial'][color=#333333]年英国人[/color][/font][font='arial'][color=#333333]W.H.Perkins[/color][/font][font='arial'][color=#333333]合成第一个人工染料苯胺紫后，人工合成染料借其特有的色艳、稳定性强、易于复配、价廉等优点很快替代了天然色素。随着化学合成色素及其生产技术在我国的传入，食品行业中也开始用合成色素取代天然色素进行相应的产品生产。[/color][/font][font='arial'][color=#333333]20[/color][/font][font='arial'][color=#333333]世纪初，毒理学和生物学研究的不断深入，发现原先曾允许使用的人工合成食用色素中，大多数种类对人体都有不同程度的伤害，尤其有致癌、致畸、致突变的后果，这一点引起人们的高度重视，大部分具有一定毒性的合成色素被淘汰使用。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]据有关资料显示，我国在食用天然色素资源的开发、生产技术、工艺、装备水平等方面都有很大的提高，使得天然食用色素的品种、产量、质量也都取得了很大的进步。我国的科研工作者还在积极研究和开发茶色素、美人蕉花色素、茄子皮色素、红苷蓝色素、番茄红素、[/color][/font][font='arial'][color=#333333]枸杞子红色素、板栗壳棕色素、牵牛花色素、花生衣色素、山楂红色素、血红素、鸡冠花红色素、灰白毛莓红色素等。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]天然食用色素的功能性越来越多地被人们认识，如类胡萝卜素类的天然色素可在人体内转化为维生素[/color][/font][font='arial'][color=#333333]A[/color][/font][font='arial'][color=#333333]，并具有保持上皮细胞健全、维持正常视觉、提高免疫力的多种生理功能；红曲米粉作为天然着色剂，其中含有降血压的[/color][/font][font='arial'][color=#333333]Lovastatin.[/color][/font][font='arial'][color=#333333]黄酮类天然色素具有软化血管、增强血管弹性的功能，红曲降血脂产品已经打入国内外市场。用超临界萃取法精制辣椒红、叶绿素和天然[/color][/font][font='arial'][color=#333333]β[/color][/font][font='arial'][color=#333333]－胡萝卜素的微胶囊化工作正在深入。如人们正在研究开发的种类有：五味子红色素、紫苏色素、火棘色素、萝卜色素、山楂色素、落葵红色素、黑加仑色素、茶色素、柿皮色素、龙葵色素等，其中不少种类显现出良好势头，如浙江的乌饭树叶蓝黑色素含量最高达[/color][/font][font='arial'][color=#333333]18.7%[/color][/font][font='arial'][color=#333333]，且易溶于水，耐光耐热性能好；云南西双版纳的花色素为水溶性红色素，染着性极强；槠树果壳中棕色素含量很高，在[/color][/font][font='arial'][color=#333333]pH8[/color][/font][font='arial'][color=#333333]～[/color][/font][font='arial'][color=#333333]11[/color][/font][font='arial'][color=#333333]之间棕色无明显变化，着色力强而稳定；海南岛的仙人掌果实含有大量紫红色素，属甜菜类化合物，极具开发利用价值。灰白毛莓（俗称乌泡）浆果中红色素含量最高者（鲜果中花青苷含量为[/color][/font][font='arial'][color=#333333]0.525%[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）；商陆浆果中甜菜苷含量比甜菜还高[/color][/font][font='arial'][color=#333333]75%[/color][/font][font='arial'][color=#333333]，并且这种植物块根是传统的中药。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]天然食用色素的研究与开发，还存在两大难题：一是缺乏具有商业利用价值的色素资源；其二就是天然食用色素本身的稳定性问题。这样就导致了天然食用色素价格昂贵，在很大程度上也限制其在应用上的普及。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]天然食用色素的最大特点是安全性高，市场巨大，国内从事研究、开发的单位也日益增多。有关天然食用色素的新资源、新品种及生产新技术的报道和专利每年都有几十篇。特别是在寻找色素新资源方面，已经取得了一些成果，发现了一些好的苗头，如从海洋生物中提取天然色素。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]在解决天然食用色素稳定性差方面，人们也进行了各种各样的探索，取得了一些进展，例如将甜菜红与茶色素结合使其稳定性大大提高；类胡萝卜素为油溶性色素，耐热性强而耐光性差，当与[/color][/font][font='arial'][color=#333333]VC[/color][/font][font='arial'][color=#333333]、[/color][/font][font='arial'][color=#333333]VE[/color][/font][font='arial'][color=#333333]或天然抗氧化剂合用时，能较大程度地增强其耐光性；用明矾、酒石酸钠、磷酸等作稳定剂，与蒽醌类天然色素并用，可防止颜色变化；叶绿素通过用铜取代镁，再制成钠或钾盐，则变成了非常稳定的绿色素；采用微胶囊化技术提高天然色素稳定性，另外还可利用生物技术，改变天然食用色素的色调，扩大其应用范围，如栀子系列色素的研究与开发，栀子黄色素为水溶性的亮黄色，由于其成分中含有臭蚁醛配糖体，它与伯氨基物质反应，生成色素中间体，当改变[/color][/font][font='arial'][color=#333333]pH[/color][/font][font='arial'][color=#333333]、温度和氧气条件时，可获得青、蓝、红等色调，从而获得栀子蓝、栀子青、栀子红等新色素，由此还可以调配成其他色调，这样就扩大了天然食用色素的应用范围，从而为天然食用色素的应用开辟了更加广阔的前景。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]发展展望在人们[/color][/font][font='arial'][color=#333333]“[/color][/font][font='arial'][color=#333333]回归自然[/color][/font][font='arial'][color=#333333]”[/color][/font][font='arial'][color=#333333]的呼声中及随着对天然食用色素的某些生理活性作用的逐步发现，天然食用色素将会越来越受到重视和喜爱，特别是功能性天然色素，由于其来源天然、安全、并兼有某种生理功能，更成为天然食用色素的发展大趋势。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]在发展功能性天然色素的同时，还要加强对天然色素实用化研究。多数生产出来的天然色素都是原料型的，不适合直接加到食品中着色，且天然食用色素在应用方面要注意如下几个方面：[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]（[/color][/font][font='arial'][color=#333333]1[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）需要着色的食品系统的性质；[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]（[/color][/font][font='arial'][color=#333333]2[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）若食品系统为两相或多相系统（如水油两相），就需要弄清楚哪一相需要着色；[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]（[/color][/font][font='arial'][color=#333333]3[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）生产食品时所应用的加工方法；[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]（[/color][/font][font='arial'][color=#333333]4[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）所用的食品包装；[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]（[/color][/font][font='arial'][color=#333333]5[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）包装好的食品的储存条件；[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]（[/color][/font][font='arial'][color=#333333]6[/color][/font][font='arial'][color=#333333]）天然色素的性质。[/color][/font][/align][align=left][font='arial'][color=#333333]这需要研究生产复配型天然色素，通过复配使新的复配产品在颜色、剂型、稳定性、[/color][/font][font='arial'][color=#333333]pH[/color][/font][font='arial'][color=#333333]、某种食品应用的适用性上达到一种新的高度，最终完全满足某种食品的使用需要，从而使天然色素的应用更加方便、广泛。[/color][/font][/align][font='宋体'][size=18px]三、柑橘黄的介绍与理化性质[/size][/font][font='宋体']柑橘黄是以甜橙[/font][font='宋体']的果实为原料，利用现代的生物技术提取而成的天然色素。[/font][font='宋体']英文名称：OrangeYellow[/font][font='宋体'](Aa023)[/font][font='宋体']柑橘黄素分子式：C[/font][font='宋体'][size=13px]40[/size][/font][font='宋体']H[/font][font='宋体'][size=13px]56[/size][/font][font='宋体']O[/font][font='宋体']柑橘黄素结构式：[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108061810275874_4524_1608728_3.png[/img] [font='宋体']柑橘黄性质：黄色粉末，其乙醇水溶液可加入水中，呈亮黄色。相对密度为[/font][font='宋体']0[/font][font='宋体'].91~0.92.柑橘黄极易溶于乙醚、[/font][font='宋体']己烷、笨、甲苯、石油醚、油脂等。可溶于乙醇、丙酮，水。不同pH值对其呈色无变化，但耐光、耐热性差。[/font][font='宋体'][size=18px]四、柑橘黄的提取[/size][/font][font='宋体'][size=18px]制备[/size][/font][font='宋体']选用柑桔皮可提取柑桔皮色素，原料来源方便，价廉。[/font][font='宋体']1.试剂[/font][font='宋体']选用工业乙醇。[/font][font='宋体']2.工艺流程[/font][font='宋体']柑桔皮→（预处理）→柑桔皮浆状物→（提取）→滤液→（浓缩）→浓缩色素[/font][font='宋体']3.操作步骤[/font][font='宋体']（[/font][font='宋体']1）预处理：柑桔皮色素在柑桔果皮细胞中结合牢固，因此，必须先将果皮冰冻后粉碎，破坏其细胞壁，制成糊状物，倒入陶瓷缸中。[/font][font='宋体']（[/font][font='宋体']2）提取：在陶瓷缸中加入同体积的乙醇，搅拌均匀后，浸泡48小时，过滤除去滤渣，收集滤液。[/font][font='宋体']（[/font][font='宋体']3）浓缩：将以上滤液在减压条件下浓缩，即得到天然浓缩色素。[/font][font='宋体']桔皮浓缩色素可作各种食品如果酱、果汁着色剂。也可作化妆品或营养添加剂的着色剂。[/font][font='宋体'][size=18px]五、食品添加剂 柑橘黄的检测[/size][/font] [font='宋体']对于柑橘黄的检测，国家已出台了相关标准，新版国标将在2[/font][font='宋体']021-08-22[/font][font='宋体']正式实施。[/font][align=left][font='宋体']标准号：GB[/font][font='宋体']1886.346-2021[/font][/align][font='宋体'][size=14px]1[/size][/font][font='宋体'][size=14px] 技术要求[/size][/font][font='宋体'][size=14px]1.1 感官要求[/size][/font] [font='宋体']感官要求应符合表[/font][font='宋体']1的规定[/font][align=center][/align][align=center][font='宋体']表1 感官要求[/font][/align][table][tr][td][align=center][font='宋体']项目[/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体']要求[/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体']检验方法[/font][/align][/td][/tr][tr][td][font='宋体']色泽[/font][/td][td][font='宋体']橘黄色至深红色[/font][/td][td=1,3][font='宋体']取适量样品置于清洁、干燥的烧杯中，在自然光线下观察其色泽、状态；在无异味环境中，嗅其气味[/font][/td][/tr][tr][td][font='宋体']状态[/font][/td][td][font='宋体']粘稠状液体或膏状[/font][/td][/tr][tr][td][font='宋体']气味[/font][/td][td][font='宋体']具有柑橘皮特征性气味[/font][/td][/tr][/table][font='宋体'][size=14px]1[/size][/font][font='宋体'][size=14px].2 理化指标[/size][/font][font='宋体']理化指标应符合表[/font][font='宋体']2的规定。[/font][align=center][font='宋体']表2 理化指标[/font][/align][table][tr][td][align=center][font='宋体']项目[/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体']指标[/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体']检验方法[/font][/align][/td][/tr][tr][td][font='宋体']色价E[/font][font='宋体'][size=13px]1%[/size][/font][font='宋体'][size=13px]1 cm[/size][/font][font='宋体']（[/font][font='宋体']4[/font][font='宋体']20nm~455nm）[/font][/td][td][align=center][font='宋体']符合声称[/font][/align][/td][td][font='宋体']附录A中A[/font][font='宋体'].3[/font][/td][/tr][tr][td][font='宋体']溶剂残留[/font][font='宋体'][size=13px]a[/size][/font][font='宋体']/（mg/kg）[/font][font='宋体']≤[/font][/td][td][align=center][font='宋体']4[/font][font='宋体']0[/font][/align][/td][td][font='宋体']GB[/font][font='宋体'] 5009.262[/font][/td][/tr][tr][td][font='宋体']铅（Pb）/（mg[/font][font='宋体']/kg）≤[/font][/td][td][align=center][font='宋体']3.0[/font][/align][/td][td][font='宋体']GB[/font][font='宋体'] 5009.75或GB 5009.12[/font][/td][/tr][tr][td][font='宋体']总砷（以As计）/（mg[/font][font='宋体']/kg）≤[/font][/td][td][align=center][font='宋体']1[/font][font='宋体'].0[/font][/align][/td][td][font='宋体']GB[/font][font='宋体'] 5009.76或GB 5009.11[/font][/td][/tr][tr][td=3,1][font='宋体']注[/font][font='宋体']：商品化的柑橘黄产品应以符合本标准的柑橘黄为原料，可添加使用糊精、食用植物油、食用酒精或符合食品添加剂质量规格要求的抗氧化剂、乳化剂等，其色价指标应符合声称。[/font][/td][/tr][tr][td=3,1][font='宋体']溶剂残留提取溶剂为植物油抽提溶剂（六号溶剂），采用植物油检测方法。[/font][/td][/tr][/table][align=center][font='宋体']附 录 A[/font][/align][align=center][font='宋体']检验方法[/font][/align][align=left][font='宋体']警示[/font][font='宋体']:本标准的检验方法中使用的部分试剂具有毒性或者腐蚀性,操作时应采取适当的安全和防护[/font][/align][font='宋体']A[/font][font='宋体'].1 [/font][font='宋体']一般规定[/font][font='宋体']本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时[/font][font='宋体'],均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验[/font][font='宋体']中所用标准溶液、制剂和制品[/font][font='宋体'],在没有注明其他要求时均按GB/T 601.GB/T 602、GB/T 603的规定制[/font][font='宋体']备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时[/font][font='宋体'],均指水溶液。[/font][font='宋体']A.2鉴别试验[/font][font='宋体']A.2.1 试剂和材料[/font][font='宋体']A.2.1.1乙醚。[/font][font='宋体']A.2.1.2正已烷。[/font][font='宋体']A.2.1.3[/font][font='宋体']甲苯。[/font][font='宋体']A.2.1.4石油醚,沸程 30[/font][font='宋体']℃[/font][font='宋体']~60[/font][font='宋体']℃[/font][font='宋体']。[/font][font='宋体']A.2.1.5[/font][font='宋体']乙醇。[/font][font='宋体']A.2.1.6[/font][font='宋体']丙酮。[/font][font='宋体']A.2.1.7亚硝酸钠溶液:称取5 g亚硝酸钠，加水溶解并定容至100 mL。[/font][font='宋体']A.2.1.8[/font][font='宋体']硫酸溶液[/font][font='宋体']:吸取1.5 mL浓硫酸,缓缓注入80 mL水中,并加水定容至100 mL。[/font][font='宋体']A.2.1.9[/font][font='宋体']展开剂[/font][font='宋体']:正己烷:丙酮=7:3。[/font][font='宋体']A.2.2 仪器和设备[/font][font='宋体']A.2.2.1电子天平,精度为0.01 g。[/font][font='宋体']A.2.2.2分光光度计。 .[/font][font='宋体']A.2.3 鉴别方法[/font][font='宋体']A.2.3.1 颜色反应[/font][font='宋体']称取[/font][font='宋体']0.1 g试样,精确至0.01 g,溶于100 mL正己烷中,溶液应呈黄色。[/font][font='宋体']A.2.3.2最大吸收峰[/font][font='宋体']称取[/font][font='宋体']0.1 g试样,精确至0.01 g,用正己烷溶解并稀释至100 mL,以正己烷为空白,试液在420 nm~455nm范围内应有最大吸收峰。[/font][font='宋体']A.2.3.3溶解性[/font][font='宋体']易溶于乙醚[/font][font='宋体']、[/font][font='宋体']正已烷、甲苯、石油醚等。可溶于乙醇,不溶于水。[/font][font='宋体']A.2.3.4 [/font][font='宋体']薄层色谱[/font][font='宋体']称取质量相当于[/font][font='宋体']0.8 g,色价为30的试样,加入10 mL正己烷溶解,混匀,在约3 000 r/min 条件下[/font][font='宋体']离心约[/font][font='宋体']10 min,取上清液5 μL,点样于硅胶薄层色谱板(预先在[/font][font='宋体']110[/font][font='宋体']℃[/font][font='宋体']干燥1 h),置于展开剂中展开。[/font][font='宋体']当溶剂前沿。上升至距原点约[/font][font='宋体']10 cm时,取出薄板,在空气中干燥。薄板上至少有2个黄色斑点,R[/font][font='宋体'][size=13px]f[/size][/font][font='宋体']值为[/font][font='宋体']0[/font][font='宋体'].7[/font][font='宋体']~[/font][font='宋体']0.8[/font][font='宋体']。干燥后在呈现的斑点使用亚硝酸钠溶液和硫酸溶液喷雾，斑点应消失。[/font][font='宋体']A.3色价的测定，[/font][font='宋体']A.3.1试剂和材料[/font][font='宋体']正已烷。[/font][font='宋体']A.3.2仪器设备[/font][font='宋体']A.3.2.1电子天平,精度为0.000 1 g。[/font][font='宋体']A.3.2.2分光光度计。[/font][font='宋体']A.3.3分析步骤[/font][font='宋体']称取试样[/font][font='宋体']1 g,精确至0.000 2 g,加人正己烷溶解并定容至100 mL,摇匀后过滤。移取滤液2 mL,[/font][font='宋体']用正已烷定容至[/font][font='宋体']100 mL,摇匀。取此试液置于1 cm比色皿中,以正已烷为空白,在420 nm~455 nm[/font][font='宋体']范围内的最大吸收波长处测定吸光度[/font][font='宋体'](吸光度值应控制在0.3~0.7,否则应调整试液浓度,再重新测定[/font][font='宋体']吸光度[/font][font='宋体'])。[/font][font='宋体']A[/font][font='宋体'].3.4 [/font][font='宋体']结果计算[/font] [font='宋体']色价E[/font][font='宋体'][size=13px]1[/size][/font][font='宋体'][size=13px]%[/size][/font][font='宋体'][size=13px]1 [/size][/font][font='宋体'][size=13px]cm[/size][/font][font='宋体']（4[/font][font='宋体']20[/font][font='宋体']nm~[/font][font='宋体']455[/font][font='宋体']nm），按式（A[/font][font='宋体'].1[/font][font='宋体']）计算。[/font][align=right][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108061810277212_4575_1608728_3.png[/img][/align][font='宋体']式中[/font][font='宋体']:[/font][font='宋体']A[/font] [font='宋体']——[/font][font='宋体']稀释后试液的吸光度[/font][font='宋体']；[/font][font='宋体']n[/font] [font='宋体']——[/font][font='宋体']稀释倍数[/font][font='宋体']；[/font][font='宋体']m[/font] [font='宋体']——[/font][font='宋体']试样的质量[/font][font='宋体'],单位为克[/font][font='宋体'](g)[/font][font='宋体']；[/font][font='宋体']100[/font] [font='宋体']——[/font][font='宋体']浓度换算系数。[/font][font='宋体']试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与算术平均值的比值不大于[/font][font='宋体']2.5%。[/font][font='times new roman']参考文献[/font][font='times new roman'][1][/font][font='times new roman']食用色素[/font][font='times new roman']. [/font][font='times new roman']百度百科[/font][font='times new roman']:[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E9%A3%9F%E7%94%A8%E8%89%B2%E7%B4%A0/1194593?fr=aladdin]食用色素_百度百科 (baidu.com)[/url][font='times new roman'][2[/font][font='times new roman']][/font][font='times new roman']国家标准[/font][font='times new roman']:GB[/font][font='times new roman']1886.346-2021[/font]

保健食品中总黄酮的测定Determination of total flavonoid in health food1试剂1.1 聚酰胺粉1.2 芦丁标准溶液：称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50mg/mL。1.3 乙醇:分析纯。1.4 甲醇:分析纯。2 分析步骤2.1 试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。此液于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮含量。2.2 芦丁标准曲线：吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求回归方程，计算试样中总黄酮含量。3 计算和结果表示： A ×V2X = _____________________________*100 V1× M× 1000式中：X ___ 试样中总黄酮的含量, mg/100g ；A ___ 由标准曲线算得被测液中黄酮量,ug ；M ___ 试样质量 , g；V1____ 测定用试样体积, mL；V2 ___ 试样定容总体积, mL 。计算结果保留二位有效数字。 新手求帮助，根据上面的公式计算做出来的结果，数据看图片，因为是新手希望大师们给出详细的过程！！！谢谢了！！算得不对啊！！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602251646_585141_2724902_3.jpg

黄酮类化合物在自然界分布非常广泛，是一类非常重要的天然有机化合物。传统意义上黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮类化合物，现在泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。根据黄酮类化合物结构特点，可分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷醇、查耳酮、异黄酮、双黄酮、花色素等种类。黄酮类化合物具有多方面的生物活性，如葛根总黄酮及葛根素(puerarin)、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作用，临床用于治疗冠心病；水飞蓟素(silymarin)、异水飞蓟素( silydianin)及次水飞蓟素(slychristin)等有肝脏保护作用，临床上用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤等；木犀草素(luteolin)、黄芩苷( baicalin)、黄芩素(baicalein)以及槲皮素等具有抗菌、抗病毒作用；牡荆素( vitexin)、桑色素、儿茶素等具有抗肿瘤作用等。游离黄酮类化合物一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等有机溶剂及稀碱水溶液中。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中。花色苷及其苷元以离子形式存在具有盐的通性，亲水性较强，水溶度较大。黄酮化合物单体的分离主要依靠各种色谱方法来实现，除经典的柱色谱法和薄层色谱法、HPLC外，近年来HSCCC已经得到广泛的应用。对于多数极性较弱的黄酮苷元，在进行HSCCC分离实验时，通常可以选用氯仿-甲醇-水的溶剂系统，而氯仿-甲醇-水(4:3:2或5:3:2)则是最常用的溶剂系统。根据被分离样品的具体情况，在上述溶剂系统的基础上，对组成诸元的比例进行适当的调整，就能获得良好的分离效果。还有些苷元也可采用正己烷（石油醚）-乙酸乙酯-甲醇-水的溶剂系统，通过调整溶剂的组成比例来实现有效分离。对于极性较强的黄酮糖苷类成分的HSCCC分离，通常使用的是乙酸乙酯–水为基本结构的溶剂系统，可以通过添加正丁醇、甲醇、乙醇、乙酸来调节溶剂系统的极性。分离这类化合物的典型性溶剂系统有：氯仿-[color