某制剂品种的原料药中含有磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱为其降解产物。磷脂酰胆碱会引起溶血反应,因此要控制制剂中磷脂酰胆碱的限度。药品保质期为两年,根据国家局要求,为了更系统、全面的掌握药物的性质,对储存36个月的样品进行检验。色谱条件:Agilent 1200液相色谱仪;SEXDE 80蒸发光检测器;柱温为40℃;流动相为甲醇-冰醋酸(500:10),用三乙胺调pH值至6.0。色谱柱为TopsilTM(拓谱)Silica 4.6*250mm,5μm(Part Number:Tp5SI425; Serial Number: T11261504 )系统适用性溶液制备:取对照品适量制成含磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱分别约为0.48mg/ml,0.08mg/ml的混合溶液。精密量取20ml注入液相色谱仪,连续进样5次,记录色谱图,规定磷脂酰胆碱峰与溶血磷脂酰胆碱峰的分离度应大于1.5。溶血磷脂酰胆碱峰面积的相对标准偏差不得大于3.0%。对照液制备:取溶血磷脂酰胆碱对照品约20mg,精密称定,置25ml棕色量瓶中,加异丙醇溶解,并稀释至刻度,作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液3ml,置50ml量瓶中,加异丙醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。供试液制备:精密量取样品3ml,置50ml容量瓶中,加异丙醇溶解并定容至刻度,摇匀。即为供试液溶液。测定法:取供试品溶液和对照品溶液各20ml注入液相色谱仪,记录色谱图。标准规定,供试品中溶血磷脂酰胆碱的峰面积不得大于对照品溶液中溶血磷脂酰胆碱的峰面积。系统适用性溶液色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468834_1609327_3.jpg对照色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468835_1609327_3.jpg样品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468836_1609327_3.jpg结果:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301845_468837_1609327_3.jpg结论:36月后,溶血磷脂酰胆碱的含量已超标。
色谱法同时分析磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸 磷脂容易被氧化和水解从而降解(如下图),这就限制了有磷脂的药物制剂(脂质体、乳剂)的稳定性及保质期.http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281025_525018_2204138_3.jpg 溶血磷脂和脂肪酸的产生量是判断药物制剂适宜性的关键参数,如随着脂质水解程度变化脂质体分子组成由层状变为胶束就会伴随着药物释放速度的改变。有报道称大量LPC的形成会导致油滴变大导致磷脂与肠胃液稳定相的聚合和破裂,从而导致毒副作用。 美国FDA要求制药企业对于脂质体药物建立适当的储存条件,并在进行稳定性研究时对脂质体药物进行脂质成分分析。这就要求合适的方法对不同化合物的准确定性及定量分析。由于分子中缺乏足够的发色团,以至于紫外和荧光检测不适于对于脂质体的直接分析。蒸发光散射检测器(ELSD)并不需要衍生化,可作为磷脂检测的快速灵敏的手段。蒸发光散射通过测定溶剂蒸发后被检测物散发光的强度进行分析。该方法允许梯度洗脱并对流速不敏感,且相对于LC-MS更方便和便宜。 材料和方法:L-α磷脂酰胆碱、L-α溶血磷脂酰胆碱、亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、甲醇(色谱纯)、氯仿(色谱纯)、氢氧化铵(分析纯)、去离子水。旋转蒸发仪、超声仪、沃特斯2695配低温政法光检测器、Allsphere硅胶色谱柱(150mm×4.6×5um)、Millennium32色谱工作软件。 磷脂酰胆碱脂质体悬浮液通过蒸发-水化法制备,称取0.224g PC溶解于50ml氯仿中,转移至250ml圆底烧瓶中,使用氮气流蒸发氯仿而形成薄的脂质膜,最后通过旋转蒸发仪除去痕量的氯仿,脂质膜用50ml的0.9%NaCl溶液于40℃进行水合,将脂质体浓缩至4.48mg/ml,得到的多层囊泡悬浮液经超声30分钟以获得单层脂质体,脂质体用0.1 N NaOH 调节PH在9-10之间。121℃高压灭菌15分钟。室温保存备用。 标准和样品溶液的制备: 以氯仿:甲醇(50:50%,体积/体积)为溶剂分别制备PC,LPC和亚油酸含量为5mg / mL的储备液,冷冻避光保存备用。 标准曲线系列浓度配制范围PC为82–816 μg/mL,LPC为30–250 μg/mL,亚油酸为55-290μg/mL。 混合标准为同浓度的PC、LPC亚油酸酸,油酸,硬脂酸,和棕榈酸。 FFA的样品是由相等浓度的油酸,亚油酸、硬脂酸和棕榈酸制备。 样品溶液是通过将0.5毫升脂质体加入氯仿:水(50:50%,体积/体积)的溶剂体系。 液相分析:梯度洗脱情况如下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281026_525019_2204138_3.jpgA 氯仿B 氯仿:甲醇(70:30%,体积/体积)C 氯仿:甲醇:水:氢氧化铵(45:45:9.5:0.5%,体积/体积/体积/体积)流速:1.0ml/min 柱温 28度进样量20ul.ELSD条件包括:漂移管温度的40℃,增益6,雾化气体压力3.2bar. 结果与讨论: 标准的色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281027_525020_2204138_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281027_525021_2204138_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281027_525022_2204138_3.jpg 由标准色谱图得知混合游离脂肪酸的出峰时间在6.7min,PC出峰时间为12.2min,LPC出峰时间为14.7min. 脂质体HPLC-ELSD色谱图:[a
有谁做过溶血磷脂酰胆碱的 脂肪酸链是不饱和的 用高效液相色谱-蒸发光检测器进标准品 但是不出峰是什么原因呢 哪位大佬能帮忙解答一下 新手上路各位大佬帮帮帮忙
[align=center][img=,600,313]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051428323304_8193_932_3.jpg!w690x360.jpg[/img][/align]大豆磷脂中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺检测向来对硅胶柱的要求比较高,市面上的很多硅胶柱的分离度都达不到要求。今天为您带来月旭科技Topsil (拓谱)Silica色谱柱对大豆磷脂中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺的测定,我们一起来看一下,月旭科技的色谱柱能不能达到要求![align=center][b]色谱条件[/b][/align]色谱柱:Topsil (拓谱)Silica,5μm, 4.6×250mm。流动相:流动相A:甲醇-水-冰醋酸-三乙胺=85-15-0.45-0.05;流动相B:正己烷-异丙醇-流动相A=20-48-32;检测波长:ELSD检测器,漂移管温度72,气流速2.0L/min;柱温:40℃;流速:1.0ml/min;进样量:20μl。[b]样品溶液的配置混合对照溶液[/b]:精密称取磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇,溶血磷脂酰乙醇胺,磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱对照品各适量,加三氯甲烷-甲醇(2-1)溶解,制成每1ml中含上述对照品分别为50μg,100μg,100μg,200μg,200ug的混合溶液。样品溶液:精密称取样品15mg至50ml容量瓶,加三氯甲烷-甲醇(2-1)溶解稀释至刻度,摇匀,即得。[align=center][b][b][b]谱图和数据[/b][/b][/b][/align][align=center][b][b][b][/b][/b][/b][/align][align=center][b][b][b][b][color=#333333]1、空白溶液:[/color][/b][/b][/b][/b][/align][align=center][b][b][b][img=,600,192]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051430465702_5953_932_3.png!w690x221.jpg[/img][/b][/b][/b][/align][b][b][b][/b][/b][/b][align=center][b][b][color=#333333][color=#333333]2、混合对照溶液:[/color][/color][/b][/b][/align][align=center][b][b][color=#333333][color=#333333][img=,600,200]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051431457362_8213_932_3.png!w690x231.jpg[/img][/color][/color][/b][/b][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][img=,600,232]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051432144016_7862_932_3.png!w690x267.jpg[/img][/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333]3、供试品溶液:[/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][img=,600,186]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051432522704_3642_932_3.png!w690x215.jpg[/img][/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][img=,600,130]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051433090482_5351_932_3.png!w690x150.jpg[/img][/color][/color][/color][/align][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b][/b][/color][/color][/color][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b]结论[/b][/color][/color][/color][/align][color=#333333][color=#333333][b][b]色谱柱:[/b][color=#8e2828][b]Topsil (拓谱)Silica, 5μm, 4.6×250mm[/b][/color][b]磷脂酰乙醇胺与磷脂酰肌醇分离度(R≥1.50):[/b][color=#8e2828][b]4.07[/b][/color][b]磷脂酰肌醇与溶血磷脂酰乙醇胺分离度(R≥1.50):[/b][color=#8e2828][b]2.35[/b][/color][b]溶血磷脂酰乙醇胺与磷脂酰胆碱分离度(R≥1.50):[/b][color=#8e2828][b]29.34[/b][/color][b]溶血磷脂酰胆碱与磷脂酰胆碱分离度(R≥1.50):[/b][color=#8e2828][b]14.52[/b][/color][b]磷脂酰胆碱理论塔板数(N≥1500):[/b][color=#8e2828][b]12855[/b][/color][b]磷脂酰乙醇胺理论塔板数(N≥1500):[/b][color=#8e2828][b]10158[/b][/color][b]磷脂酰肌醇理论塔板数(N≥1500):[/b][color=#8e2828][b]7824[/b][/color][b]是否符合要求:[color=#8e2828]符合[/color]Topsil (拓谱)Silica, 5μm, 4.6×250mm色谱柱更适合检测该项目。[/b][/b][/color][/color][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b][b]中国药典检测方法[/b][/b][/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b][b][img=,600,542]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051433552326_8874_932_3.png!w409x370.jpg[/img][/b][/b][/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b][b][img=,600,674]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909051434131964_7694_932_3.png!w396x445.jpg[/img][/b][/b][/color][/color][/color][/align]
各位好:请问谁做过蛋黄卵磷脂含量测定?我需要含量图谱,(磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇,溶血磷脂酰乙醇胺,磷脂酰胆碱,鞘磷脂,溶血磷脂酰胆碱)共六种物质。谢谢!
有谁做过磷脂酰胆碱的啊?请问色谱条件是什么?用的是硅胶柱还是C18柱?我用硅胶柱做的时候标准品怎么会出现两个峰啊?
哪位知道卵磷脂或二棕榈酰磷脂酰胆碱的折射率,测定粒度,但Mastersizer2000上没有相关数据。急用,谢谢!
有没有人做过磷脂酰胆碱的测定啊?本人要检测大豆磷脂里面的磷脂酰胆碱按GB/T 21493-2008方法检测高效液相法,正相Si 60柱子,250mm*4.6mm,5μm流动相:正己烷:异丙醇:1%冰醋酸=8:8:1流速1ml/min,柱温30度,波长205但是走了两个小时对照都没有出峰因为之前很少做正相找不到问题的原因请各位前辈指点一下!万分感谢!
按照GB5009.272-2016,测磷脂酰胆碱和磷脂肌醇。waters的紫外检测;默克硅胶柱;(标准上用的硅胶柱Si60,不知道有没有影响)流动相是:正己烷+异丙醇+乙酸水溶液(8+8+1);检测波长205;流速:1ml/min;柱温:30°C;进样量:10ul。标准上是30分钟内出的峰,但是我跑了60分钟还是没出峰,不知道怎么回事,有大神懂的吗,指点一下,谢谢??[img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709251137_01_2953034_3.png[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709251137_02_2953034_3.png[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709251137_03_2953034_3.png[/img]
今天做磷脂酰胆碱,流动相是正己烷:异丙醇:1%冰醋酸=8:8:1,没见有峰出来,后面用高浓度的进样,保留时间在十几分钟,请问大家是怎么回事,要怎么解决,标准要用硅胶柱,同事建议用耐酸柱或者是加入扫尾剂,不知道有没有硅胶的耐酸柱,请大家指教.
本人要检测大豆磷脂里面的磷脂酰胆碱按GB/T 21493-2008方法检测高效液相法,正相Si 60柱子,250mm*4.6mm,5μm流动相:正己烷:异丙醇:1%冰醋酸=8:8:1流速1ml/min,柱温30度,波长205但是走了两个小时对照都没有出峰因为之前很少做正相找不到问题的原因请各位前辈指点一下!万分感谢!
请问各位大侠做过大豆卵磷脂中的磷脂酰胆碱吗?我们的批文用的是以下的方法,一定要用下面的方法做 我用的流动性为正己烷:异丙醇:磷酸:水=45:48:0.15:7.5 色谱柱为默克的SI60长柱标准品中检所的,标准的锋出现4个叠在一起的锋,不知道是什么原因? 柱子是新 是否跟流动相的PH值有关,还是我的标准品有问题?请各位大霞指教一下?
我做实验要测 肺表面活性物质(主要成分是磷脂酰胆碱)含量,我看文献用的有:YWG SIO2(4mm*300mm),Lichrospher5-SIO2 (4.6mm*250mm)。不知道有没有了解 磷脂酰胆碱(卵磷脂)检测过程的 老大, 抽时间给指教指教应该选 什么型号柱子和配套的滤过膜 ,非常感谢!!要毕业做实验刚接触高效液相色谱法,对设备和技术都不了解,别笑话我啊!
各位高手,我最近在做液相检测兔胎中DPPC(二棕榈酰磷脂酰胆碱)含量的检测,具体方法见文献,但是我发现这个方法行不通,试用了两个厂家的硅胶色谱柱,可是都得不出像样一点的峰型,进样浓度达到1mg/ml,进样20ul,可是除了有极高的溶剂峰以外没有见到样品峰,溶剂峰3min左右就出峰了,我的条件是:硅胶柱(250*4.6mm,5um),日立紫外检测器,温度32~37度,进样20ul,流速1.0~1.5ml/min,流动相:乙腈:甲醇:85%磷酸=100:6:0.8;检测波长205nm,标准品溶剂为氯仿:甲醇=2:1(v/v),可是我一直得不到自己要的结果,我想问一下各位高手是用什么方法做磷脂的,希望得到大家的帮助,因为比较急,我在线等,如果有国外的文献,也希望给我传一份,我的QQ是308482760,邮箱是lizn136@126.com,不胜感激.........
哪位老师做过《植物油脂-卵磷脂中磷脂含量的测定》,请介绍一下国内什么地方可以买到大豆磷脂标准物质,其中N-acyl-PE、PA、PE、PC、PI、LPC都有准确的含量的?(N-酰基-磷脂酰乙醇胺(N-acyl-PE)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酰胆碱(LPC))谢谢?
[align=center][img=,200,169]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241553490031_9213_932_3.png!w157x133.jpg[/img] [img=,200,158]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241553556447_8021_932_3.png!w162x128.jpg[/img] [img=,200,150]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241554573919_1110_932_3.png!w162x122.jpg[/img][/align]我们今天做的是磷脂酰类混合物的测定,本次的磷脂酰类混合物主要包括磷脂酰胆碱。磷脂酰胆碱是细胞膜和肺部表面活性物质的重要成分,在磷脂双分子层的外叶上更为常见。磷脂酰胆碱转移酶是将磷脂酰胆碱在膜与膜之间运输的载体。磷脂酰胆碱还在细胞的信号通路中扮演重要的角色。[b]色谱条件[/b]色谱柱:月旭UltimateSiO2(4.6×150mm,5μm);流动相:A相:正己烷(含0.04%三乙胺)/异丙醇/13%乙酸溶液=40/57/3;B相:正己烷(含0.04%三乙胺)/异丙醇/13%乙酸溶液=40/50/10; [table=216][tr][td=1,1,72]时间[/td][td=1,1,72]A相[/td][td=1,1,72]B相[/td][/tr][tr][td=1,1,72]0[/td][td=1,1,72]100[/td][td=1,1,72]0[/td][/tr][tr][td=1,1,72]10[/td][td=1,1,72]0[/td][td=1,1,72]100[/td][/tr][tr][td=1,1,72]18[/td][td=1,1,72]0[/td][td=1,1,72]100[/td][/tr][tr][td=1,1,72]18.1[/td][td=1,1,72]100[/td][td=1,1,72]0[/td][/tr][tr][td=1,1,72]25[/td][td=1,1,72]100[/td][td=1,1,72]0[/td][/tr][/table]检测器:漂移管线温度:110℃;载气压力:3.0L/min;柱温:35℃;流速:1.5mL/min;进样量:20μL;[b]谱图和数据[/b]1、混合对照溶液:[align=center][img=,600,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241557004352_3211_932_3.jpg!w690x207.jpg[/img][img=,600,165]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241557052047_1308_932_3.jpg!w690x190.jpg[/img][/align]2、溶血磷脂酰胆碱(LPC):[align=center][img=,600,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241557353787_1508_932_3.jpg!w690x208.jpg[/img][img=,600,83]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241557424334_9174_932_3.jpg!w690x96.jpg[/img][/align]3、磷脂酰胆碱(PC):[align=center][img=,600,182]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241558067938_7383_932_3.png!w690x210.jpg[/img][img=,600,65]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241558129164_2317_932_3.jpg!w690x75.jpg[/img][/align]4、磷脂酰丝氨酸(PS):[align=center][img=,600,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241558412593_3750_932_3.jpg!w690x207.jpg[/img][img=,600,61]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241558542836_3244_932_3.jpg!w690x71.jpg[/img][/align]5、 溶血磷脂酰乙醇胺(LPE):[align=center][img=,600,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241559251577_5909_932_3.png!w690x207.jpg[/img][img=,600,68]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241559299151_4402_932_3.jpg!w690x79.jpg[/img][/align]6、 磷脂酰肌醇(PI):[align=center][img=,600,181]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241559521594_4721_932_3.jpg!w690x209.jpg[/img][img=,600,67]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241559574909_3120_932_3.jpg!w690x78.jpg[/img][/align]7、磷脂酰乙醇胺(PE):[align=center][img=,600,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241600236465_2058_932_3.png!w690x207.jpg[/img][img=,600,64]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241600285700_5504_932_3.jpg!w690x74.jpg[/img][/align]8、鞘磷脂(SM):[align=center][img=,600,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241600512503_3567_932_3.jpg!w690x207.jpg[/img][img=,600,67]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909241600558827_1744_932_3.jpg!w690x78.jpg[/img][/align][b]结论[/b]月旭UltimateSiO2(4.6×150mm,5μm),在此条件下测定,可以达到测试要求。
[color=#ff0000][b]标准名称:GB 5009.272-2016 食品安全国家标准 食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定[/b][/color]1.[b]样品前处理产品[img=,668,880]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903040951414483_7588_708_3.png!w668x880.jpg[/img]答案:63306或63306A ProElut NH2 1000 mg / 6 mL 30/pk 氨基小柱[b][b][b][b][b]2.色谱分析产品[/b][/b][/b][/b][b][b][b][b][img=,672,361]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903040952183018_4058_708_3.png!w672x361.jpg[/img][/b][/b][/b][/b][/b][/b]答案:99509 Platisil 5μm Silica, 250 x 4.6 mm[align=center][b][color=#ff0000]第10周获奖的版友:WUYUWUQIU 、dahua1981、活到九十 学到一百每人获得5个钻石币;[/color][/b][/align][align=center][b][color=#ff0000][img=,900,535]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903111017199037_8837_708_3.jpg!w900x535.jpg[/img][/color][/b][/align][b][b][b][b][b][b] ------------------------------------------------------------------------------[/b][/b][/b][/b][/b][color=#ff0000]【活动奖励】[/color][/b][align=left][color=#ff0000]1、从回答正确者中抽取奖励钻石币。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]2、每周随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至每周五下午15:00)[/color][/align][align=left][color=#ff0000] 每人奖励5钻石币(抽奖人数≤10,抽取3个版友;抽奖人数>10,抽取5个版友)。[/color][/align][align=left][color=#ff0000][/color][/align]
最近要开发高效液相-蒸发光检测器法测定大豆磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱,即改性前后PC和LPC的含量。上网找了一篇是孙浩洋等老师主编的文献《HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量》,里面提到流动相的比例,可是这比例看不懂,也没提到梯度等指标,请问有哪位师傅能指点,或者做过这试验的????
各位朋友,有没有人知道专门卖同位素标记药品的公司,或者有没有卖13C标记的溶血磷脂胆碱(酰基18:1)和溶血磷脂酰乙醇胺(酰基18:1)的公司呀?谢谢朋友们的解答
目前要开发新的项目,文献报道有的要做血细胞破碎,先溶血。不知是什么原因,很多生物分析方法不是说要防止溶血的吗?
我要用大鼠血清测定某物质含量,可取血后,用3000r/min,10min离心后大多出现溶血,不出现血清淡黄色,而是红色。紧急求助各位取过血清的高仁,如何才能解决溶血问题?我的步骤为,用一次性5ml针筒取大鼠血大约5ml,用3000r/min,10min离心,取上清液。
各位朋友您好!我用液相来检测鸡蛋中的卵磷脂(磷脂酰胆碱PC和磷脂酰乙醇胺PE),但是标准品的峰分离不好!流动相:正己烷:异丙醇:水=1:4:1或正己烷:异丙醇=1:1检测器:紫外检测器。柱子:安捷伦zorbax rx-sil,4.6×250,0.5。谁有做这个东西的经验啊?传授一下吧!感激不尽!下图是磷脂酰胆碱标准品的峰,看文献得知16分钟左右会出峰。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/08/200908201603_166984_1821962_3.jpg[/img].下图是磷脂酰乙醇胺标准品的峰,应在6分钟左右出峰。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/08/200908201605_166985_1821962_3.jpg[/img]下图是混标的。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/08/200908201606_166986_1821962_3.jpg[/img]
用的BD的仪器,配套溶血素,以1:10稀释后与血样(大鼠)以1:10比例混合,溶血离心后发现沉淀中有红色,有时镜检还有结晶(结晶中有细胞).各位遇见过吗,有什么解决办法?
用流动相A:主要是正己烷和乙酸和乙胺,流动相B是异丙醇和乙酸和三乙胺,用蒸发光检测器做溶血磷脂类物质的标准品,为什么一直不出峰,流动相比例应该怎么配才适合正相柱呢,求各位前辈们帮帮忙,有没有什么办法,或是我哪里出问题了。
大家做含量时遇到过两个不同的色谱柱,检验出来的含量差很多的情况?我们做大豆磷脂的检验,用不同的色谱柱检验出来的结果差了4-5%,大家帮分析一下可能是什么原因引起的。(用的是同一个对照品和流动相。对照品也配了2遍了。)附:检验条件色谱条件与系统适应性试验 用硅胶为填充剂250mm×4.6mm×5μm,柱温为40℃;以甲醇:水:冰醋酸:三乙胺(85:15:0.45:0.05)为流动相A,以正己烷':异丙醇:流动相A(20:48:32)为流动相B;流速为每分钟1ml,按下表进行梯度洗脱;检测器为蒸发光散射检测器。标准曲线的制备 称取溶血磷脂酰胆碱对照品适量,精密称定,用三氯甲烷:甲醇(2:1)溶解,稀释制成每含磷脂酰胆碱20、60、100、200、300μg、精密量取上述对照溶液各20μl、注入液相色谱仪中,以浓度的对数值为横坐标,峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程。
请问有做胆碱和乙酰胆碱传感器的吗?有知道胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶的化学结构的吗?最好有分子结构,给出个图片来比较直观一些。还有就是这些蛋白的性质,它们的圆二色谱数据什么的。谢谢!
请问现在检测农药用的快速检测仪器需要用到乙酰胆碱脂酶和丁酰胆碱酯酶二者有什么区别吗,哪个效果更好些?国标上有没有规定必须用哪种酶呢?
溶血的影响?
根据食品安全国家标准规定,胆碱为婴幼儿奶粉的必需成分,然而市面上很多婴幼儿奶粉经常被发现胆碱含量不符合国家标准![align=center][img=,317,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071313225596_2182_960_3.png!w317x296.jpg[/img][/align][align=center]等等.....[/align][align=center]胆碱是什么东西?[/align][align=center][/align] [b]胆碱[/b]是一种有机碱,是卵磷脂的组成成分,也存在于神经鞘磷脂之中。胆碱被称为“记忆因子”,是合成乙酰胆碱的重要原料,能帮助中枢神经传递资讯,是大脑思维、记忆等智力活动的必需物质。因为婴幼儿处于发育期,合成胆碱的能力有限,因此国家规定胆碱为婴幼儿奶粉中的必需成分。[align=center][img=,400,164]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071314026095_9084_960_3.jpg!w900x370.jpg[/img][/align][align=center][b][img=,406,376]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071314354769_1725_960_3.png!w406x376.jpg[/img][/b][/align][align=center][b]胆碱检测知多少?[/b][/align][align=center][b][/b][/align]安谱实验参照食品安全国家标准GB5413.20-2013“婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定”开展应用实验,为您提供全套试剂、酶、标品及耗材等相关产品。[b]1.方法原理[img=,560,110]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071315051175_5759_960_3.png!w560x110.jpg[/img]2.样品前处理[/b][align=center][b][img=,433,697]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071315229915_5731_960_3.jpg!w433x697.jpg[/img][/b][/align][b]3.标曲的建立[/b][align=center][b][img=,433,480]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071315447965_8437_960_3.jpg!w433x480.jpg[/img][/b][/align][align=center][img=,556,257]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071316407065_6610_960_3.png!w556x257.jpg[/img][/align][align=center][b]标准曲线[/b][/align][align=center][b][img=,433,350]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071316112752_4406_960_3.jpg!w433x350.jpg[/img][/b][/align][align=center][img=,376,376]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071316579004_6437_960_3.png!w376x376.jpg[/img][/align][align=center][b]别走,下面还有![/b][/align][b]4.市售品牌婴幼儿奶粉中胆碱的含量检测[/b]取A、B、C三品牌婴幼儿奶粉样品前处理滤液,按照标曲建立步骤检测吸光度,并带入标准曲线计算胆碱含量。(注意:A为试样净吸光值,Atot为总吸光值,Aex为滤液吸光值,Abl为试剂吸光值)[align=center][img=,900,710]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071317224645_3917_960_3.png!w900x710.jpg[/img][/align][align=center][img=,529,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071318228735_1113_960_3.png!w529x296.jpg[/img][/align][align=center][b]产品信息[/b][/align][align=center][b][img=,688,771]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071317467768_9259_960_3.png!w688x771.jpg[/img][/b][/align]
大豆磷脂是一种混合磷脂,它是由磷脂酰胆碱(卵磷脂,简称PC,高等级为PPC)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂,简称PE)、磷脂酰肌醇(肌醇磷脂,简称PI)、磷脂酰丝胺酸(丝胺酸磷脂,简称PS)等成分组成,其中最典型的是前三种。磷脂是人体细胞(细胞膜、核膜、质体膜)的基本成分,并对神经、生殖、激素等功有重要关系,具有很高营养价值和医用价值。现代人生活节奏紧张,磷脂营养大量流失,因此补充完整磷脂(PC、PE、PI…)对现代人而言是绝对必要。鉴于大豆磷脂类保健品是一种功能性的健康食品,虽然不是立即见效,但有著全面、长远、稳定的效果,同时又没有药物的副作用,医学家们也开始重视卵磷脂在预防疾病发生方面的积极作用。背景介绍:对于我们的项目来讲,很多原料的检验是要用到GC的。GC到位后,很多以前自己无法解决的检验项目,现在都是自己做了。六月初到货了一批大豆磷脂,就需要检验其中乙醇的溶剂残留。大豆磷脂为中国药典2010年版已经收载的药用辅料,在正文第二部分的1183-1184页上。我们的检验,就是按照这个药典标准进行的。实验步骤:对照品溶液的制备:先向25ml的容量瓶中加入适量的水,然后用微量注射器精密量取15.8μL乙醇对照品(密度按0.79g/ml计,15.8μL的乙醇的质量为12.48mg),然后用水稀释并定容至刻度。精密量取5ml置顶空瓶中,密封。供试液制备:取供试品约0.5g,精密称定,置顶空瓶中,精密加入水5ml使其分散,密封。色谱条件:月旭WEl-PEG20M气相色谱柱,30m*0.32mm*0.25μm(Cat. NO:01918-32001;Ser. NO:GC201311