甲磺酸阿米三嗪

【作者】 管清香； 林天慕； 王恩思；【机构】 吉林大学药学院； 吉林大学生命科学学院；【摘要】 目的:建立测定甲磺酸地拉韦啶薄膜衣分散片含量的方法。方法:采用Diamonsil(TM) C18(150mm×4.6mm,5μm),乙腈-50mmol·L-1pH4.6磷酸二氢钠(55∶45)为流动相,检测波长为300nm。结果:甲磺酸地拉韦啶在12.54～62.70mg·L-1范围内呈良好线性关系(r=0.9999)。低、中、高3种浓度的平均回收率分别为99.5%,99.9%和101.5%(n=3)。结论:本方法简便、快速、专属性强,可用来测定甲磺酸地拉韦啶分散片的含量。 【谱图】

米格列奈钙片测定和甲磺酸二氢麦角碱注射液的测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911021813_180160_1896702_3.jpg

[align=center][b]甲磺酸伊马替尼片的中试质量研究[/b][/align][align=center]王淑华，臧恒昌[/align]（山东大学药学院）[b]摘要：[/b]甲磺酸伊马替尼片是一种小分子靶向抑制剂，用于治疗费城染色体阳性的慢性髓性白血病的慢性期、加速期或急变期和不能切除和/或发生转移的恶性胃肠道间质瘤的成人患者。甲磺酸伊马替尼由瑞士诺华公司2001年在美国首研上市，作为肿瘤的首个靶向治疗药物面世开创了肿瘤分子靶向治疗的新时代，目前已经在全球90多个国家获得批准，美国、欧盟和其它国家还批准甲磺酸伊马替尼片用于胃肠基质瘤患者的治疗。2005年进口到中国，中文商品名是格列卫。本文按照现行药品注册法规的要求对甲磺酸伊马替尼片的制备工艺进行研究，在小试工艺处方的基础上进行中试放大，对粉碎、混合、制粒、总混、压片、包衣的工艺参数进行研究确定，并确定中试设备，用中试产品与格列卫进行全面的质量对比试验，并进行影响因素试验考察10天的研究。开发出与原研药具有相同质量的甲磺酸伊马替尼片，实现甲磺酸伊马替尼片的可工业化生产。[b]关键词：[/b]甲磺酸伊马替尼片；开发；制备工艺；[b]1 实验材料和仪器[/b]1.1实验材料[align=center][img=,572,220]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251640111718_2529_3389662_3.png!w572x220.jpg[/img][/align]1.2实验仪器[align=center][img=,573,287]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251642146696_8860_3389662_3.png!w573x287.jpg[/img][/align][b]2方法与结果 [/b] 研究内容包括中试放大3批，批量为5000片，筛选各项工艺参数、进行影响因素考察、与原研药进行全面的质量对比，最终确定了中试规模的处方、工艺、工艺参数、设备及场所。[b]2.1 中试3批样品的制备[/b]为了充分验证处方及制备工艺的可行性，优化各项工艺参数，中试制备了三批甲磺酸伊马替尼片（批号20111205、20111228、20120104），每批5000片，三批产品处方见表3[align=center][img=,555,295]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251643270416_551_3389662_3.png!w555x295.jpg[/img][/align]制备工艺：取甲磺酸伊马替尼，用万能粉碎机粉碎，筛网目数为100目，粉碎后称取处方量，备用。粉碎过筛后的甲磺酸伊马替尼、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、交联聚维酮、二氧化硅和硬脂酸镁分别称取处方量备用；将甲磺酸伊马替尼、微晶纤维素（Ⅰ）、羟丙甲纤维素同置湿法混合制粒机中，混合9min，搅拌转速20Hz，剪切转速30Hz；在HLSG-10型混合制粒机中边搅拌边加入纯化水制软材，搅拌转速15HZ，剪切转速15HZ，时间5min，取出后摇摆制粒机20目筛制粒；湿颗粒置60℃热风循环干燥箱中干燥，至水分为2.5%以下时停止；干燥完的颗粒取出，用摇摆制粒机24目筛整粒；整粒后的颗粒，加入交联聚维酮、微晶纤维素（Ⅱ）和二氧化硅，置SH-20三维混合机中混合，转速为9rpm，时间为20min，然后加入硬脂酸镁，继续混合10min，出料。取样检测中间体含量，计算理论片重；将上述总混粉用ZPW-21B型旋转压片机压片，Ф9mm圆形双凸冲模，控制平均片重为理论片重±3%，硬度50-70N；LDCS型高效包衣机，出风温度：38℃；锅体转速：5-10 rpm；喷液泵转速：5-10 rpm；雾化压力：1100mbar；直喷压力：750mbar；包衣增重2%-4%；用铝塑包装机进行泡罩包装，每板10片。泡罩板外套复合膜袋。[b]2.2 工艺参数的研究2.2.1 原料药的粉碎 [/b]甲磺酸伊马替尼为水中易溶的药物，粉碎的粒度对药物溶出的影响不大，因此，确定使用湿法制粒的常规工艺参数：即万能粉碎机粉碎，筛网为100目，备用。[b]2.2.2 混合[/b]混合采用高效湿法混合制粒机，甲磺酸伊马替尼、微晶纤维素（Ⅰ）、羟丙甲纤维素同置湿法混合制粒机中混合，搅拌转速20Hz，剪切转速30Hz，分别于3min、6min、9min和12min在不同位置取样测定甲磺酸伊马替尼的含量，计算RSD值，结果见表4，中试三批的混合参数见表5。[align=center][img=,583,304]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251644390288_1847_3389662_3.png!w583x304.jpg[/img][/align]结果显示中试样品在6min时，各个位置的含量测定结果已经没有显著差异（RSD＜5%），表明这时已经混合均匀，9min和12min时，物料更加均匀（RSD＜2%）。为保证工艺操作的可靠性，将中试的混合时间确定为9min。[b]2.2.3 制粒 [/b]20111205批中试样品的制粒过程：在混合制粒机中边搅拌边加入纯化水制软材，搅拌转速15Hz，根据处方筛选的结果，加入的纯化水量应为75ml，制备时先加入50ml，然后开启制粒（剪切），转速15Hz，2min后停机观察，发现软材略干，润湿不够，又加入少许，最终纯化水加入量为65 ml，制粒3min后停机观察，发现软材能够握紧成团，轻压即散，符合要求。出料后，置20目筛摇摆制粒机中制粒，湿颗粒置60℃干燥箱中干燥，至水分为2.5%以下时停止。24目筛摇摆制粒机整粒。20111228，20120104两批样品的制备均按照上述参数执行。最终确定中试的制粒参数为：搅拌转速15HZ，剪切转速15HZ，时间5min。取出后摇摆制粒机20目筛制粒。60℃干燥。水分控制小于2.5%。24目筛整粒。[b]2.2.4 总混 [/b] 由于本品制粒后需要加入较多的粉末，包括交联聚维酮、微晶纤维素、二氧化硅和硬脂酸镁，约占片芯总重的22%，所以保证粉末和颗粒的充分混合就比较关键。结合20111205批中试样品的制备，对总混时间进行了取样验证。将整粒后的颗粒与交联聚维酮、微晶纤维素（Ⅱ）和二氧化硅同置三维混合机中混合20min，转速为9rpm，然后加入硬脂酸镁，继续混合10min。分别于15min、20min、25min和30min在混合机中物料的不同部位取样6份，测定其中甲磺酸伊马替尼的含量，计算RSD值，结果见表6，三批中试批混合参数见表7。[align=center][img=,613,321]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251656004349_7538_3389662_3.png!w613x321.jpg[/img][/align]最终确定的中试混合工艺参数为：将整粒后的颗粒与交联聚维酮、微晶纤维素（Ⅱ）、二氧化硅同置三维混合机中混合20min，转速为9rpm，然后加入硬脂酸镁，继续混合10min。[b]2.2.5 中间体含量测定[/b]总混粉取样，测定其中伊马替尼的含量，按100mg/片计算理论片重，见表8。[align=center][img=,574,92]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251656591680_4007_3389662_3.png!w574x92.jpg[/img][/align][b]2.2.6 压片 [/b]参照原研药，采用Ф9mm浅圆冲压片。单独制备了一批3000片用量的总混粉，分别压制不同硬度范围的甲磺酸伊马替尼片各约800片，以确定合适的硬度,结果见表9～11及图1。[align=center][img=,555,545]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251657410320_9022_3389662_3.png!w555x545.jpg[/img][img=,512,293]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251657512292_1250_3389662_3.png!w512x293.jpg[/img][/align]试验结果显示GYYJ01批的溶出5min明显快于格列卫，10min和15min略快于格列卫，其脆碎度为0.5%，且有裂片和断片出现，脆碎度不合格；GYYJ02批溶出曲线与格列卫基本一致，脆碎度合格；GYYJ03批溶出曲线明显慢于格列卫，脆碎度合格。因此，确定压片硬度应控制在50-70N的范围之内。三批中试样品压片参数见表12。[align=center][img=,573,160]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251658297289_6842_3389662_3.png!w573x160.jpg[/img][/align][b]2.2.7 包衣[/b]取GYYJ02批的素片，进行包衣增重的研究。分别于不同时间取出部分片剂，使得它们具有不同的包衣增重。包衣条件为：取包衣粉，用纯化水配制成固含量为13%的液体，搅拌40分钟，备用；出风温度38℃，锅体转速5-10rpm，喷液泵速度5-10rpm，侧喷压力1100mbar，直喷压力750mbar。结果见表13～14及图2[align=center][img=,596,329]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251659214722_6185_3389662_3.png!w596x329.jpg[/img][img=,532,316]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251659216782_8146_3389662_3.png!w532x316.jpg[/img][/align]试验结果显示3种不同的包衣增重对溶出曲线基本无影响，因此，确定包衣增重的范围为2%~4%。中试3批包衣结果见表15[align=center][img=,593,227]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251700491390_8973_3389662_3.png!w593x227.jpg[/img][/align][b]2.2.8 包装 [/b]包衣片用铝塑包装机包装，成形温度118℃，热封温度120℃。2.2.9 中试研究工艺参数汇总[align=center][img=,533,471]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251701345335_8652_3389662_3.png!w533x471.jpg[/img][/align][b]2.3 三批中试产品数据及与原研药的对比研究[/b]结果见表17～18及图3。[align=center][img=,651,279]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251703255806_9275_3389662_3.png!w651x279.jpg[/img][img=,605,691]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251703354406_5321_3389662_3.png!w605x691.jpg[/img][/align][align=center][img=,554,639]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251705217673_2956_3389662_3.png!w554x639.jpg[/img][img=,537,641]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251705282186_7479_3389662_3.png!w537x641.jpg[/img][/align]试验结果显示20111205、 20111228两批自研产品与原研产品格列卫，在0.1M盐酸、pH6.8磷酸盐缓冲液和pH4.5醋酸盐缓冲液和水等4种溶出介质中15分钟溶出度均超过85%，判定为体外溶出行为一致。三批中试产品的各项质量指标与格列卫一致。[b]2.4 影响因素试验[/b]取20111205批中试样品，置强光照射（照度4500Lx）、高温（60℃）、高湿（RH92.5%和RH75%）条件下各放置10天，分别于0、5、10天检测吸湿增重、性状、溶出度、有关物质、含量等各项指标。同时取对照药（格列卫，100mg），置上述条件下，于0天和10天检查相应的项目，作为对比研究。影响因素试验结果表19。[align=center][img=,565,439]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251706500796_5767_3389662_3.png!w565x439.jpg[/img][/align][align=center][/align]试验结果显示自研产品和进口原研产品在高湿RH75%±5%条件下考察10天，吸湿增重均超过5%，提示产品应注意防潮。自研产品和进口原研产品在其它3个条件下各项指标均保持稳定，无显著变化。[b]2.5 中试研究试验结果[/b]2.5.1 处方（按5000片计），见表20[align=center][img=,567,322]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807251708221656_8624_3389662_3.png!w567x322.jpg[/img][/align][b]2.5.2 制备工艺 [/b]（1）原辅料的处理取甲磺酸伊马替尼，用万能粉碎机粉碎，筛网目数为100目，粉碎后称取处方量，备用。粉碎过筛后的甲磺酸伊马替尼、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、交联聚维酮、二氧化硅和硬脂酸镁分别称取处方量备用。（2）混合将甲磺酸伊马替尼、微晶纤维素（Ⅰ）、羟丙甲纤维素同置湿法混合制粒机中，混合9 min，搅拌转速20Hz，剪切转速30Hz。（3）制粒在HLSG-10型混合制粒机中边搅拌边加入纯化水制软材，搅拌转速15HZ，剪切转速15HZ，时间5min，取出后摇摆制粒机20目筛制粒。（4）干燥湿颗粒置60℃热风循环干燥箱中干燥，至水分为2.5%以下时停止。（5）整粒干燥完的颗粒取出，用摇摆制粒机24目筛整粒。（6）总混整粒后的颗粒，加入交联聚维酮、微晶纤维素（Ⅱ）和二氧化硅，置SH-20三维混合机中混合，转速为9rpm，时间为20min，然后加入硬脂酸镁，继续混合10min，出料。取样检测中间体含量，计算理论片重。（7）压片将上述总混粉用ZPW-21B型旋转压片机压片，Ф9mm圆形双凸冲模，控制平均片重为理论片重±3%，硬度50-70N。（8）包衣 LDCS型高效包衣机，出风温度：38℃；锅体转速：5-10 rpm；喷液泵转速：5-10 rpm；雾化压力：1100mbar；直喷压力：750 mbar；包衣增重2%-4%。（9）包装用铝塑包装机进行泡罩包装，每板10片。泡罩板外套复合膜袋。[b]2.5.3 中试研究场地[/b]固体制剂中试车间[b]2.5.4 中试设备[/b]见表2。[b]2.5.5 质量评价[/b]与原研药格列卫对比研究结果显示，中试产品的各项质量指标与格列卫相当，高温、光照、高湿三种剧烈条件下考察10天后，中试产品的各项质量指标仍与列卫相当，说明自研中试产品与原研产品质量一致。[b]3 结论[/b]因为本品原料是水溶性原料，粒度对溶出度影响不大，所以对原料前处理采用了常规机械粉碎法，过100目筛。物料混合6-12分钟都可以混匀，选择了中间点9分钟作为混合时间。根据实际情况，粘合剂水的用量由小试的2.5g/200片降到了65g/5000片。多批样品颗粒水分都小于2.5%，说明控制2.5%以下的颗粒水分适合本工艺。三批中试结果显示总混30分钟可以保证物料混合均匀。通过溶出曲线和脆碎度两个指标，考察了30-50N、50-70N、70-100N三个硬度范围，结果显示压片硬度范围在50-70N更为合理。包衣环节，考察了包衣增重2.1%、3.2%、4.2%三个梯度，对溶出曲线均无影响，最后确定包衣增重范围是2-4%。本文对甲磺酸伊马替尼片的制备工艺进行研究，用中试产品与格列卫进行全面的质量对比试验，并进行了影响因素试验考察研究，拟开发出与原研药具有相同质量的甲磺酸伊马替尼片，实现甲磺酸伊马替尼片的可工业化生产。

遗传毒性杂质，现在是药学研究的焦点之一。甲磺酸、苯甲磺酸等磺酸盐类物质与微量的低级醇在合成反应中生成烷基磺酸酯类，这些物质可与DNA发生烷基化反应，从而可能成为引发癌症的诱因。欧洲医药评价署、美国食品和药品管理局及国际药品注册协调会议等先后对基因毒性杂质做出限度规定。具体到我们的甲磺酸加贝酯产品，需要对其中的甲磺酸乙酯的限度进行控制。溶液制备：对照品溶液 取甲磺酸乙酯适量，精密称定，用乙腈制成每毫升含1.5μg/ml的溶液，精密移取2ml加入顶空瓶中，加入3ml水，6g碘化钠后，扎盖密封。供试品溶液 取甲磺酸加贝酯适量，精密称定，按供试品100mg与乙腈1ml的比例配制供试品溶液，溶液经超声、波膜过滤处理后，精密移取2ml加入顶空瓶中，加入3ml水，3g碘化钠后，扎盖密封。色谱条件：Agilent 7890色谱仪，顶空进样器，FID检测器；色谱柱，月旭WEL-PEG20M，30m*0.32mm*0.25μm（Cat. NO：01918-32001；Ser. NO：GC20131102）；进样口温度为110℃，检测器温度为260℃，氢气流速为30ml/min，空气流速为350ml/min，进样量为1mL，分流比为0.1:1。升温程序，起始温度为40℃，维持10min，然后以20℃/min的升温速率，升温至160℃，维持1min。顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30min。结果：对照液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/07/201407021418_503868_1609327_3.jpg其中，时间为1.982min的保留峰为甲磺酸乙酯的衍生物。供试液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/07/201407021538_503896_1609327_3.jpg由色谱图中可以看出，样品中未检出甲磺酸乙酯。讨论：出峰时间非常的快，但是理论塔板数、分离度、对称因子等却非常给力！既得到了良好的分离效果，又尽可能的节约了分析时间。

10，抽取5个版友）；中奖名单：yifan1117（注册ID：yifan1117）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）20071940xu（注册ID：20071940xu）dyd3183621（注册ID：dyd3183621）zengzhengce163(注册ID：zengzhengce163)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702061500_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702061500_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================HPLC法测定甲磺酸多拉司琼的含量方法：HPLC基质：动物提取物应用编号：102760化合物：甲磺酸多拉司琼固定相：Diamonsil C18色谱柱/前处理小柱：Diamonsil C18, 250 x 4.6mm色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99903) 流动相: 乙腈- 水- 1mo l # L - 1 甲酸铵( 450:440:110), 用三乙胺调pH 至8.0 流速: 1.0 mL/min 柱温: 室温 进样量: 20μL 检测器: UV 285nm文章出处：中国药房 2007,18(22):1731-1732关键字：甲磺酸多拉司琼, Diamonsil C18, 钻石一代, 高效液相色谱法, HPLC, 含量测定谱图：摘要：目的:建立以高效液相色谱法测定甲磺酸多拉司琼含量的方法。方法:色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-水-1mol.L-1甲酸铵(450∶440∶110),用三乙胺调pH至8.0,流速为1.0mL.min-1,检测波长为285nm,进样量为20μL。结果:甲磺酸多拉司琼检测浓度的线性范围为24～56μg.mL-1(r=0.9996);平均加样回收率为99.67%(RSD=0.74%)。结论:本方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可用于甲磺酸多拉司琼的质量控制。http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/93-6.JPG

[align=left][font='simsun'][size=14px]药物中基因毒性杂质甲磺酸烷基酯类物质的检测[/size][/font][/align][align=center][size=21px]—[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url][/size][font='calibri'][size=21px]-[/size][/font][size=21px]质谱串联法[/size][/align][align=left][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]简介[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]近年来药物中基因毒性杂质的检测成为人们关注的焦点，基因毒性杂质是指直接或者间接损[/size][/font][font='simsun'][size=14px]伤细胞 [/size][/font][font='simsun'][size=14px]DNA[/size][/font][font='simsun'][size=14px]，产生致突变和致癌作用的物质，常见的基因毒性杂质有甲磺酸烷基酯等。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]拉米夫定[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]可以抑制 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]HIV[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333] [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]和乙型肝炎病毒。在拉米夫定合成过程中磺酸类化合物作为反应试[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]剂[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]([/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]如甲磺酸[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333])[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]，醇类化合物作为溶剂（如甲醇，乙醇和异丙醇[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]）[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]，因此药物中存在杂质甲磺[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]酸甲酯[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]（[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]M[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]M[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]S[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]）[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]，甲磺酸乙酯[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]（[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]E[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]M[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]S[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]）[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]，甲磺酸异丙酯[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]([/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]I[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]P[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]M[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]S)[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333] [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][font='simsun'][size=14px] [/size][/font][font='simsun'][size=14px]基于药物的每日最大剂量 [/size][/font][font='simsun'][size=14px]300mg[/size][/font][font='simsun'][size=14px]，杂质含量要求低于 [/size][/font][font='simsun'][size=14px]5ug/ml[/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]本文用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]柱[/size][/font][font='simsun'][size=14px]GSBP-INOWAX 30m-0.25mm-0.25um [/size][/font][font='simsun'][size=14px]建立了液体直接进样法分析药物中甲磺酸烷基酯的 [/size][/font][font='simsun'][size=14px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS [/size][/font][font='simsun'][size=14px]方法，该方法快速，稳定并且灵敏度满足了对微量分析的要求。[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]样品制备[/size][/font][/align][size=14px]分别取[/size][font='calibri'][size=13px]1[/size][/font][font='calibri'][size=13px]0[/size][/font][font='calibri'][size=13px]m[/size][/font][font='calibri'][size=13px]g[/size][/font][font='calibri'][size=13px] [/size][/font][font='calibri'][size=13px]MM[/size][/font][font='calibri'][size=13px]S[/size][/font][size=13px]，[/size][size=13px] [/size][font='calibri'][size=13px]E[/size][/font][font='calibri'][size=13px]M[/size][/font][font='calibri'][size=13px]S[/size][/font][size=14px]和[/size][font='calibri'][size=13px]I[/size][/font][font='calibri'][size=13px]P[/size][/font][font='calibri'][size=13px]M[/size][/font][font='calibri'][size=13px]S[/size][/font][size=14px]溶于[/size][font='calibri'][size=13px]1[/size][/font][font='calibri'][size=13px]0[/size][/font][font='calibri'][size=13px]m[/size][/font][font='calibri'][size=13px]l[/size][/font][font='calibri'][size=13px] [/size][/font][font='calibri'][size=13px]N[/size][/font][size=13px]，[/size][font='calibri'][size=13px]N[/size][/font][size=14px]-二甲基甲酰胺溶剂中为标准品储备液。[/size][size=14px]用溶剂稀释储备液制成 [/size][font='calibri'][size=13px]1000ug/mL [/size][/font][size=13px]的[/size][size=14px]混标加入 [/size][font='calibri'][size=13px]200mg/ml [/size][/font][size=14px]的拉米夫定中制成样品加标的溶液待用。[/size][align=left][font='simsun'][size=14px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url] [/size][/font][font='simsun'][size=14px]条件[/size][/font][/align][align=left][size=14px]色谱仪： [/size][font='calibri'][size=13px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]MS-QP2010[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]色谱柱：[/size][/font][font='simsun'][size=14px] [/size][/font][font='simsun'][size=14px]GSBP-INOWAX[/size][/font][font='simsun'][size=14px]30m-0.25mm-0.25um[/size][/font][font='simsun'][size=14px]（[/size][/font][font='simsun'][size=14px]PN[/size][/font][font='simsun'][size=14px]：[/size][/font][font='simsun'][size=14px]2025-3002[/size][/font][font='simsun'][size=14px]）[/size][/font][/align][align=left][size=14px]进样体积：[/size][font='calibri'][size=13px]1.5uL[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]进样模式：分流进[/size][/font][font='simsun'][size=14px]样[/size][/font][font='simsun'][size=14px]分流比：[/size][/font][font='simsun'][size=14px]5[/size][/font][font='simsun'][size=14px]：[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1[/size][/font][/align][align=left][size=14px]衬管： 分流衬管进样口温度：[/size][font='calibri'][size=13px]200 °C [/size][/font][size=14px]柱温：[/size][/align][align=left][size=14px]在[/size][font='calibri'][size=13px]100 °C [/size][/font][size=14px]下保持[/size][font='calibri'][size=13px]3[/size][/font][size=14px]分钟[/size][/align][align=left][size=14px]以[/size][font='calibri'][size=13px]15°C/min [/size][/font][size=14px]升至[/size][font='calibri'][size=13px]220 °C[/size][/font][size=14px]，保持[/size][font='calibri'][size=13px]16[/size][/font][size=14px]分钟柱流速： [/size][font='calibri'][size=13px]1.46 mL/min [/size][/font][size=14px]恒流[/size][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]载气：氦气[/size][/font][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=18px]MS [/size][/font][size=18px]条件[/size][size=14px]传输线温度：[/size][font='calibri'][size=13px]240°C [/size][/font][size=14px]离子源温度：[/size][font='calibri'][size=13px]240°C [/size][/font][size=14px]电离能：[/size][font='calibri'][size=13px]70 eV[/size][/font][align=left][size=14px]增益：[/size][font='calibri'][size=13px]1.5 kV[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]结果[/size][/font][font='simsun'][size=14px]:[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px][color=#333333]由于甲磺酸酯类化合物极性强[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]，[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]在非极性或者弱极性的色谱柱上不能基线分离[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]MMS[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]和[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]IPMS[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。该方法实现了[/size][/font][font='simsun'][size=14px]3[/size][/font][font='simsun'][size=14px]种化合物的基线分离，[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]见图[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]1[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px][color=#333333]根据国际药品注册协调会议（[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]ICH[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]）的规定进行方法验证[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]，[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]具体数据见表格 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]1[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px][color=#333333]检出限和定量限分别是 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]3 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]倍信噪比[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333](S/N)[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]和 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]10 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]倍信噪比[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333](S/N)[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]的数值[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]方法的精密度是同一[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]浓度[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]1.5ug/ml [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]样品连续六次进样[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333](n=6)[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]得到[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]方法中间精密度是在同一实验室在不同的六天[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]， [/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]测得同一浓度 [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]1.5ug/ml [/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]样品得到[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011101046041590_3824_3276347_3.png[/img][font='simsun'][size=14px][color=#333333]结果表明该方法具有很好的重现性和稳定性[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]，[/size][/font][font='simsun'][size=14px][color=#333333]成功的应用于拉米夫定中甲磺酸烷基酯类化合物的检测[/color][/size][/font][font='simsun'][size=14px]。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]表格 [/size][/font][font='simsun'][size=14px]1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS [/size][/font][font='simsun'][size=14px]法分析 [/size][/font][font='simsun'][size=14px]MMS, EMS [/size][/font][font='simsun'][size=14px]和 [/size][/font][font='simsun'][size=14px]IPMS [/size][/font][font='simsun'][size=14px]数据验证[/size][/font][/align][table][tr][td][align=left][font='simsun'][size=14px]参数[/size][/font][font='simsun'][size=14px]MMS(m/z 110)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]EMS (m/z 124)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]IPMS(m/z[/size][/font][font='simsun'][size=14px] [/size][/font][font='simsun'][size=14px]137)[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='simsun'][size=14px]检测[/size][/font][font='simsun'][size=14px]限[/size][/font][font='simsun'][size=14px](ug/mL)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]0.5[/size][/font][font='simsun'][size=14px]0.5[/size][/font][font='simsun'][size=14px]0.5[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]定量限[/size][/font][font='simsun'][size=14px] [/size][/font][font='simsun'][size=14px](ug/mL)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.5[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.5[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.5[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]方法[/size][/font][font='simsun'][size=14px]精[/size][/font][font='simsun'][size=14px]密度[/size][/font][font='simsun'][size=14px] [/size][/font][font='simsun'][size=14px](RSD,[/size][/font][font='simsun'][size=14px] %)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.99[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.36[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.55[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]方法[/size][/font][font='simsun'][size=14px]中[/size][/font][font='simsun'][size=14px]间[/size][/font][font='simsun'][size=14px]精[/size][/font][font='simsun'][size=14px]密[/size][/font][font='simsun'][size=14px]度[/size][/font][font='simsun'][size=14px](RSD,[/size][/font][font='simsun'][size=14px] [/size][/font][font='simsun'][size=14px]%)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]2.08[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.58[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.86[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]线性[/size][/font][font='simsun'][size=14px]范[/size][/font][font='simsun'][size=14px]围[/size][/font][font='simsun'][size=14px](ug/mL)[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.5–6.0[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.5–6.0[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1.5–6.0[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]线性[/size][/font][font='simsun'][size=14px]相[/size][/font][font='simsun'][size=14px]关[/size][/font][font='simsun'][size=14px]系[/size][/font][font='simsun'][size=14px]数[/size][/font][font='simsun'][size=14px]0.999[/size][/font][font='simsun'][size=14px]0.999[/size][/font][font='simsun'][size=14px]0.999[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]斜率[/size][/font][font='simsun'][size=14px]60332[/size][/font][font='simsun'][size=14px]97982[/size][/font][font='simsun'][size=14px]73058[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]截距[/size][/font][font='simsun'][size=14px]1524[/size][/font][font='simsun'][size=14px]28001[/size][/font][font='simsun'][size=14px]13134[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]1.5ug/ml [/size][/font][font='simsun'][size=14px]样品回收率[/size][/font][font='simsun'][size=14px](%)[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]1[/size][/font][font='simsun'][size=14px]102.0[/size][/font][font='simsun'][size=14px]102.4[/size][/font][font='simsun'][size=14px]95.0[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]2[/size][/font][font='simsun'][size=14px]104.0[/size][/font][font='simsun'][size=14px]104.8[/size][/font][font='simsun'][size=14px]95.0[/size][/font][/align][align=left][font='simsun'][size=14px]3[/size][/font][font='simsun'][size=14px]105.3[/size][/font][font='simsun'][size=14px]106.4[/size][/font][font='simsun'][size=14px]107.1[/size][/font][/align][/td][/tr][/table]

高效液相色谱法快速测定血清中的庆大霉素和阿米卡星庆大霉素和阿米卡星是用于严重革兰氏阴性细菌感染治疗的氨基糖苷类抗生素。像其他氨基糖苷类抗生素一样，庆大霉素和阿米卡星的有效治疗范围狭窄容易导致肾脏毒性和耳毒性。因此，监测庆大霉素和阿米卡星血清中的水平对于安全和有效的临床应用十分重要。最近，高压液相色谱法已被报道用于氨基糖苷类抗生素的测定。多数测定需要柱前或柱后衍生荧光检测。这些方法涉及耗时的预处理，如血清中氨基糖苷类抗生素的柱萃取以及溶剂。本实验开发了一种较为简单的预处理方法来测定血清中的庆大霉素和阿米卡星，并与荧光偏振免疫测定法进行了比较。材料和方法：庆大霉素和阿米卡星购自药店，邻苯二甲醛（瑞尔丰化工），2-巯基乙醇、庚烷磺酸钠、1,2-乙烷二磺酸二钠、色谱乙腈、蒸馏水。蛋白质沉淀剂（10mM辛烷磺酸钠溶解于3.5％高氯酸中）。庆大霉素的流动相为含有22 mM的1,2 - 乙烷二磺酸二钠和5mM辛烷磺酸钠的水 - 乙腈混合物（80：20，体积/体积），用乙酸调节pH至约3.5。阿米卡星的流动相为含有37 mM的1,2 - 乙烷二磺酸二钠和5mM辛烷磺酸钠的水 - 乙腈混合物（80:20，体积/体积），用乙酸调节pH至约3.5。仪器和色谱条件：安捷伦高效液相色谱仪1200，UV检测器，色谱柱：安捷伦Agilent液相色谱柱4.6﹡150﹡5u，流动相的流速保持在1毫升/分钟。邻苯二甲醛试剂用泵以0.6毫升/分钟的流速。实验部分：将50ul血浆加入到50ul蛋白质沉淀剂，涡旋混合数秒后，使用KM-15200离心机离心2分钟（15000rpm）,离心后上清液进样。正常血清，分别加入已知量的庆大霉素和阿米卡星，进行分析，根据加入量和峰面积绘制标准曲线。荧光偏振免疫通过市售的试剂盒进行。结果：图1为庆大霉素的标准色谱图，庆大霉素加入对照血清的色谱图以及对照血清的色谱图。（其中交标庆大霉素的含量为15ug/ml）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409300949_516466_2188679_3.jpg图2为阿米卡星的标准色谱图，阿米卡星加入对照血清的色谱图以及对照血清的色谱图，经过蛋白质沉淀剂处理后的血清和未处理的色谱图基本形同，皆未见到影响抗生素检测的干扰杂质峰。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409300949_516467_2188679_3.jpg以峰面积作为纵坐标，血清中的药物浓度为横坐标得到庆大霉素的线性标准曲线（3-50ug/ml）为y =0.979x - 0.006，阿米卡星的线性标准曲线（0.5-10ug/ml）为y= 0.998x - 0.04根据庆大霉素和阿米卡星在血清中不同浓度的重复测定，得到庆大霉素和阿米卡星的批内变异系数分别为0.8 -2.9％和1.6-3.1％，批间变异系数为2.0-5.0％及1.9-5.6％。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409300949_516468_2188679_3.jpg回收率试验：分别将15ug/ml的庆大霉素水溶液加入含有15ug/ml阿米卡星的血清中和将4ug/ml的阿米卡星水溶液加入4ug/ml的血清中。将它们的峰面积进行比较。基于三个样品的平均值，庆大霉素和阿米卡星的分别为99.0%和98.5%.通过该方法获得的结果与用荧光偏振免疫测定法进行了比较,回归方程和相关系数分别为庆大霉素：y=1.027x - 1.090，n =44和r=0.996。阿米卡星y=0.998x - 0.206， n =42和r=0.957。讨论：本实验采用了蛋白质沉淀剂，排除干扰物，再将样品进行分析，优化的分析方法与荧光偏振免疫测定法进行了比较种，该方法方法的优点是速度快，操作简便，重复性好。因此，该方法可用于该药物的分析。