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酰基辅酶氧化酶

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酰基辅酶氧化酶相关的论坛

  • 各位大侠!救命!辅酶Q10与过氧化值。

    各位大侠!救命!我的软胶囊中有辅酶Q10,检测结果过氧化值超标,检测方法是BG/T5009.37-2003,结果1.01g/100g(标准是不高于0.25g/100g)。请问辅酶Q与过氧化值有什么关系啊?救救我吧

  • 【讨论】请教:黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase)

    黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD),可选择性催化氧化黄嘌呤和次黄嘌呤生成尿酸。有没有做过该酶传感器和对该酶性质了解的朋友?这种酶传感器似乎比较难做?因为:1. XOD活力小,0.67U/mg。2.检测对象次黄嘌呤在水中溶解度小,一般只能配到10^(-4)M级。所以电流响应始终做不出来。相同的方法换成葡萄糖氧化酶效果要好的多。大家多给意见。

  • 土壤多酚氧化酶测定

    关松荫的土壤多酚氧化酶测定方法中需要[font=宋体][font=Calibri]pH4.5的[/font][font=宋体]柠檬酸[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]磷酸缓冲液,但是没有具体的配置方法?重铬酸钾的标准也应该取多少量呢,要怎么制定?求大神解答!!![/font][/font]

  • 【求助】葡萄糖氧化酶传感器在血液中测试响应下降问题``

    我通过几种方法制备了葡萄糖氧化酶电极,利用恒压(0.3-0.5V)这PBS溶液中测试葡萄糖响应良好,100mg/dl的糖响应在2uA左右,但将电极放入血液中测试时,响应下降明显,而且有时出现尖峰,同时背景电流就带来很大的干扰,不知道各位达人有没遇到同样的情况。 我在葡萄糖氧化酶电极制备完成后,再固定扩散限制层和生物相容层,效果还是不明显,不知道各位有没试过对葡萄糖氧化酶电极再修饰。

  • 【求助】我测多酚氧化酶和蔗糖酶遇到了问题

    在做标准曲线的时候,我用不加样品的空白调零后,再测定这个空白,为什么吸光值不是0,而是负数? 还有啊, 多酚氧化酶的测定,需使催化成的没食子素溶于乙醚进行测定,标准溶液也要用乙醚萃取吗?还是直接比色就行, 我两种都有试过,但加了乙醚萃取的测出的值极不相关,不太确定 请教下高手啊-----------

  • 碘量法分析土壤多酚氧化酶活性

    碘量法分析土壤多酚氧化酶活性

    有没有人用碘量法分析过土壤多酚氧化酶活性?请问方法的原理!!!1. 食品化学实验指导(来自网络)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210142257_396555_1607572_3.jpg2. 关松荫的《土壤酶及其研究法》中的原理介绍:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210142257_396556_1607572_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210142301_396560_1607572_3.jpg请教专家,不知道哪一个原理正确!!!

  • 【转帖】使用葡萄糖氧化酶GOD来探索酶传感器须知!

    [quote]原文由 [B]leotron[/B] 发表:使用葡萄糖氧化酶GOD来探索酶传感器实现方法的研究做的是最多的了。大家有没有进一步做血液或血清样品中葡萄糖浓度的检测?有几个问题请教。如下:1. 样品前处理一般如何操作?2. 具体采取哪种电化学方法更为合适?循环伏安法,时间-电流法,计时电流法?还是其它?不同的方法获得的传感器参数(检测极限,线性范围,灵敏度等)不一样,操作起来的方便程度也不一样。3. 如何让修饰的电极真正成为传感器,即具有可知的且较稳定性能指标的检测装置?有哪些方面需要考虑?欢迎讨论。[/quote]

  • 【求助】关于酶的稀释和保存

    由于要测一些酶的活性实验室订购了一下一些酶(试剂):辣根过氧化物酶葡萄糖氧化酶磷酸葡萄糖变位酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶Ⅱ,NADP+)尿嘧啶核苷-5'-二磷酸葡萄糖(UDPG)D-果糖-6-磷酸二钠盐(6-磷酸果糖)D-葡萄糖-1-磷酸二钠盐(1-磷酸葡萄糖)现在要稀释这些酶(试剂)1.用蒸馏水稀释可以吗?如果不可以,用什么缓冲剂比较好?2.稀释后的溶液可以长时间保存吗?如不能,最长的时间是多久?小弟初入此道,望各位大侠细心解答,不胜感激!!

  • 【求购】辅酶Q10标准物质

    按GB/T 22252-2008 保健食品中辅酶Q10的测定其中辅酶Q10标准物质 目前好像没有有证标准物质,中检所能购到就是对照品,还是含量测定用(100%),没证书,没不确定度

  • 【求助】求辅酶Q10 有证标准物质

    按GB/T 22252-2008 保健食品中辅酶Q10的测定其中辅酶Q10标准物质 目前好像没有有证标准物质,中检所能购到就是对照品,还是含量测定用(100%),没证书,没不确定度有谁知道哪儿有的买啊?

  • 乙酰辅酶A能不能被ESI离子源的液质检测?

    乙酰辅酶A能不能被ESI离子源的液质检测?

    Acetyl-CoA,809.125793 Da,结构式:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/01/201301122320_420108_2238723_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/01/201301182325_421368_2238723_3.jpg上面这张质谱图是metlin上的。我做的是细胞中代谢成分分析,其它代谢物,如脂肪酸、氨基酸都有离子峰,但没有检测到乙酰辅酶A的M+H、M+K,M+Na,M+NH4离子,阴离子也没有M-H离子,相关的碎片离子也没有,为什么啊?

  • 【资料】大球盖菇过氧化物酶及超氧化物歧化酶的研究

    大球盖菇过氧化物酶及超氧化物歧化酶的研究 张琪林1,王红2(1运城学院生命科学系,山西运城044000 2运城学院生化实验中心,山西运城044000) 摘 要:采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法测定大球盖菇过氧化物酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶活 性,结果表明大球盖菇过氧化物酶有4种同工酶,比移分别是:0.13、0.18、0.25、0.32,其活性大小接近. SOD三种都有,比移分别为0.20、0.21、0.25,以CuZn-SOD活性最大,Mn-SOD活性较小.CuZn-SOD 及Mn-SOD辅因子易于丢失,应用时应予以注意.关键词:大球盖菇 过氧化物酶 超氧化物歧化酶 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳中图分类号:Q935 文献标识码:A大球盖菇(Strophariarugoso-annulate)栽培广 泛,食药两用,深受菇农与消费者青睐,栽培研究颇 多,生理研究也日渐深入.已有液体培养氮碳营养 源[1]、与pH关系[2]、胞外酶特性[3]等研究报道,而 胞内酶研究报道尚未见到.过氧化物酶、超氧化物 歧化酶是机体清除H2O2、超氧离子(O-2)等活性氧 的氧化还原酶.[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903260925_140607_1614854_3.gif[/img]对生物抗氧化、防辐射、抗衰老等方面都有重要作 用,尤其是SOD.本文采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电 用方法鉴定大球盖菇上述两种酶的活性及种类,以 期为大球盖菇的生理生化研究和大球盖菇的应用 提供理论依据.1 材料与方法1.1 材料供试菌株引自河南省清丰县食用菌技术推广 中心.所用化学试剂均为分析纯.1.2 方法1.2.1 菌丝培养 20%土豆浸汁1000mL,蔗糖 20g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁1.5g,pH值 自然.分装于300mL锥形瓶,每瓶50mL,高压灭菌.接种后25~28℃恒温摇床培养21天,振荡频 率为120r/min.1.2.2 酶液制备 菌丝冲洗干净后,于-4℃冷冻 12h.按菌丝∶0.1MpH7.4磷酸缓冲液(冷藏)∶石 英砂=1∶2∶0.2比例混合.冰浴磨成匀浆.在 10℃以下环境离心(4000r/min,15min).取上清液 5份与40%蔗糖(冷藏)、0.01%溴酚蓝各1份混 合,置冰箱备用.1.2.3 电泳 方法为聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳. 样品分离胶浓度为7%,pH8.9.浓缩胶浓度为2. 5%,pH6.7.电极缓冲液为Tris-甘氨酸缓冲液, pH8.3.点样量为30μL/管.以溴酚蓝为指示剂.电 流开始为10mA,电泳两分钟后加大至50mA.待溴 酚蓝移至凝胶柱下端附近时停止电泳.电泳环境温 度为10℃,时间1.2h.1.2.4 染色1.2.4.1 过氧化物酶染色 A液:0.4g联苯胺加 入3mL冰醋酸于80℃溶解,加入17mL蒸馏水,随 用随配.B液:4%氯化铵.C液:5%EDTA.D液:0. 3%H2O2.按等体积加8倍水混合,量以淹没胶柱 为度.剥胶后立即放入染液,等到有蓝色谱带出现 后,取出用水冲洗干净,再用7%醋酸脱色漂洗后 观察.1.2.4.2 SOD染色 (1)对照a、在2.45×10-2M 氯化硝基四氮唑蓝(NBT)液中黑暗下浸泡1h,温 度37℃.b、在2.8×10-2M四甲基乙二胺、2.8× 10-5M核黄素和在3.6×10-2MpH7.8磷酸缓冲 液中黑暗下浸泡1h,温度37℃.c、在1×10-4M EDTA,5×10-2MpH7.8磷酸缓冲液中,距40W日 光灯20cm光照20min.(2)添加辅基处理.在(1 中分别添加5mMNa2SO4 FeSO4 MnSO4 CuSO4+ ZnSO4 FeSO4+MnSO4+CuSO4+ZnSO4.(3)添加 抑制剂处理.在酶液中分别添加10mMKCN或 30%氯仿-乙醇,其他同上.2 结果与讨论2.1 过氧化物酶谱及分析[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903260926_140608_1614854_3.gif[/img]结果如图1.从图1可见,大球盖菇菌丝体过 氧化物酶有4条带.比移分别为0.13,0.18,0.25, 0.32.其活性大小接近.2.2 超氧化物歧化酶谱及分析(1)添加SOD辅因子试验结果见图2.从中可 见共有三条带.比移分别为A:0.20,B:0.21,C:0. 25.都有B带,但加铁处理(3、6)的较亮,说明B带 是Fe-SOD,铁离子对该SOD活性有明显的增强作 用.没有加铁的处理(1,2,4,5)SOD也有活性,说 明铁与酶蛋白的结合较牢固,不易丢失.1,2,3,5 无A带,4,6有,说明A带是Mn-SOD.同理,C带为 CuZn-SOD.未加锰、铜、锌盐的没有相应的带,说 明锰、铜、锌与酶蛋白的结合较为松散,易于丢失. 比较三种SOD,以Mn-SOD活力最小,CuZn-SOD 活性最大.(2)添加抑制剂试验结果为:加KCN后,显色 结果无C带 加氯仿-乙醇后,无A带.已知10mM KCN抑制CuZn-SOD,30%氯仿-乙醇抑制Mn- SOD[4].说明2.2.1结论是正确的.综上所述,大球盖菇菌丝体抗氧化酶比较丰 富,过氧化物同工酶有4种 超氧化物歧化酶有3 种,以CuZn-SOD活性较高,Mn-SOD、Fe-SOD活 性较低,但CuZn-SOD、Mn-SOD辅因子易于丢 失,应用时应予以注意.参考文献:[1]张琪林,王红.大球盖菇液体培养碳氮营养源研究[J].食用 菌.2002,24(1):6.[2]王红,张琪林.大球盖菇液体培养与pH值关系研究[J].山西 师范大学学报(自然科学版).2003,17(增1期):108~109. [3]王红,张琪林.大球盖菇液体培养胞外酶特性研究[J].食用 菌.2003,25(2):8~9.[4]李中振,田廷亮.灵芝超氧化物歧化酶同工酶研究[J].中国食 用菌.1997,16(4):32~34.

  • 对香豆酸辅酶a的最适吸收波长

    [color=#444444]最近在做4cl酶反应,底物用的是对香豆酸,用hplc检测,几天前做的实验全是只有底物峰,没有产物峰。昨天把缓冲液重新配了一次,用新配的试剂反应后,经hplc检测后发现,出现一个新的峰,而且底物峰面积相对于空白组大大减少,选取新的峰,色谱显示最适吸收波长为296nm,而产物对香豆酸辅酶a的最适吸收波长应该是333nm,因为产物的标准品买不到,而且没有质谱,现在很纠结实验结果对不对TAT,求大神解答[/color]

  • C30色谱填料分离高纯辅酶Q10的尝试

    [font=&][font=宋体]按照[/font]2020[font=宋体]版《中国药典》[/font][/font][font=&][font=宋体]和《美国药典》[/font]USP28-NF23[/font][font=&][font=宋体]等的要求,辅酶[/font]Q10[font=宋体]的总含量不低于[/font][font=Times New Roman]98%[/font][font=宋体];而辅酶[/font][font=Times New Roman]Q10[/font][font=宋体]分离一般采用提取、硅胶层析和结晶之后就可以满足要求,且目前年产量可以达到数百吨的水平。但随后的《欧洲药典》[/font][font=Times New Roman]8.8[/font][font=宋体]版及以后的版本除了规定主含量不低于[/font][font=Times New Roman]98.0%[/font][font=宋体]外,增加了单杂含量不低于[/font][font=Times New Roman]0.1%[/font][font=宋体]的水平[/font][/font][font=&][font=宋体]。本研究尝试传统的方式分离,发现其它杂质经两次硅胶层析和结晶后均可以符合要求,但其中一个杂质确很难降低至该水平;用[/font]2020[font=宋体]版《中国药典》方法分离,其相对保留时间约为[/font][font=Times New Roman]1.45[/font][font=宋体],文献报道称这个杂质为辅酶[/font][font=Times New Roman]Q11[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif[/img][/font][/font][font=&][font=宋体]。[/font][/font][font=&][font=宋体]结合药典的色谱分析方法,分离去除辅酶[/font]Q11[font=宋体]的工艺,目前最有可能的是反相色谱分离。专利《一种辅酶[/font][font=Times New Roman]Q10[/font][font=宋体]的纯化方法》(专利号:[/font][font=Times New Roman]201810233454 .1 [/font][font=宋体])报道采用十八烷基或辛烷基等键合硅胶为固定相,丙酮[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]甲醇或丙酮[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]乙醇体系为流动相,整个体系在加热的状态下分离,上样量可以达到[/font][font=Times New Roman]10%[/font][font=宋体]以上,回收率在[/font][font=Times New Roman]80%[/font][font=宋体]以上;该分离工艺分离效率高,但美中不足为整个系统分离须在[/font][font=Times New Roman]45℃[/font][font=宋体]的条件下分离,对于大工业生产来说消耗过多的能量,增加了设备的成本和系统的复杂程度,提高了有机溶剂的升压爆炸或者起火的风险。经分析,样品在丙酮下溶解性良好,但在[/font][font=Times New Roman]C18[/font][font=宋体]填料或[/font][font=Times New Roman]C8[/font][font=宋体]下保留性差,加入一定量的甲醇后,样品的溶解性显著降低,因此采用加热的方式来解决溶解的问题。本研究认为,如果增加碳链的长度,则样品在固定相的保留会相对增加,则流动相中甲醇的比例降低的情况下,也可能会有一定的保留,这样在常温或稍高于常温的情况实现辅酶[/font][font=Times New Roman]Q11[/font][font=宋体]的分离成为一种可能。详细内容,参见附件。欢迎大家跟帖讨论或私聊讨论[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif[/img][/font][/font][font=&][/font]

  • 【原创】【第三届原创大赛】光合细菌中辅酶Q10的含量测定

    【原创】【第三届原创大赛】光合细菌中辅酶Q10的含量测定

    维权声明:本文为19861005原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。光合细菌中辅酶Q10的含量测定【摘要】目的:建立了一种简单快速测定光合细菌中辅酶Q10(CoQ10)的方法;方法:运用高相液相色谱法测定;采取超声破碎细菌壁的方法(提取溶剂:丙酮)提取光合细菌中辅酶Q10;色谱柱为 ODS柱;以无水乙醇/甲醇(体积比70:30)作流动相;275 nm作检测波长。结果:在0.06—0.14 mg/L范围内,峰面积与质量浓度呈良好的线性关系(r= 0.9992)。结论:该方法简单、快速、精密度高(RSD5% ),适宜于光合细菌中辅酶Q10含量的测定。【关键词】 辅酶Q10;光合细菌 Determination of Coenzyme Q l0 in PSBStudent: Liu Zhao xi Supervisor: Yang guan e 【Abstract】Objective: A simple and rapid method for the determination of coenzyme Ql0 (CoQ10) in photosynthetic bacteria (PSB) was developed. Methods: high performance liquid chromatographic (HPLC) was developed; CoQ10 can be dissociated from PSB completely extracted into acetone with ultrasonic cel1-break method. Hypersil ODS was selected as the analytical column; absolute alcohol—methanol(1:9 by volume) as the mobile phase with flow-rate of 1.0m L/min; And UV 275 nm as the detection wavelength.Results: The 1inear range of the calibration curve of concentrations. peak height is 0.06—0.14 mg/mL with a correlation coefficient of 0.9992. Conclusion: This method is suitable for the determination of CoQl0 in PBS.Keywords: Coenzyme Q10;Pho

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