ICH Q3D中设定了24种可能存在毒性的元素的每日允许最大暴露量(PDE),需要使用合适的试验方法对含量进行监控。因此,“2.66 元素杂质”纳入日本药典,”元素杂质——限值“和”元素杂质——测定方法“纳入美国药典,“5.20 元素杂质”和“2.4.20 元素杂质的测定”纳入欧洲药典,同时规定电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)作为分析方法。
左卡尼汀和其2个中间体杂质均为带正电荷化合物,因此我们首先选择使用CAPCELL PAK SCX色谱柱对其进行保留,并使用PDA检测器检测。由左卡尼汀杂质结构式可知,两杂质紫外吸收非常弱,因此我们使用质谱对左卡尼汀及其两杂质进行检测,并使用CAPCELL PAK CR 1:4色谱柱对其进行了保留和分离。使用CAPCELL PAK CR 1:4柱进行LC-MS分析,左卡尼汀、杂质1、杂质2间得到了较好分离结果。 在进行LC-MS分析时,由于带正电荷化合物的静电吸引作用,我们发现左卡尼丁及杂质2均有一定程度的残留。因此建议客户在分析前对进样浓度进行考察,杂质浓度建议设置为定量限浓度,左卡尼汀浓度设置为杂质浓度100倍,以避免残留的发生。