刀豆凝集素

实时定量性评价100nm～10&mu m的凝集体SVP(Sub-visible particle) 最适于生物医药品Sub-visible particle区域的凝集体粒径分布测定 生物医药品凝集性评价系统可在SVP区域定量性评价粒子量（作为浓度，单位：&mu g/mL）进行。生物医药品的凝集体可根据凝集粒子的大小分类为IVP（In-visible Particle）、SVP（Sub-visible Particle）以及VP（Visible Particle）。其中SVP（0.1～10&mu m）区域的粒子测定一般采用多种方法进行解析。生物医药品凝集性评价系统在SVP区域，除粒径分布之外，还可定量性评价粒子量。 ※本系统采用「激光衍射?散射法」粒径分布测定原理。使用PSL（聚苯乙烯乳胶）标准粒子进行校正，求出浓度（单位：&mu g/mL）。 1 定量评价SVP区域凝集体的浓度 可测定7nm～800&mu m宽泛粒径范围内的凝集体的粒径分布（粒子量合计表示为100％）。并且，在100nm～10&mu m的SVP（Sub-Visible Particle)区域可以进行定量性评价粒子量（作为浓度 单位：&mu g/mL）。 粒径分布测定范围：7nm～800&mu m 浓度表示范围：40nm～20&mu m 2 高灵敏度测定凝集体 Aggergates Sizer与本公司粒径分布测定装置SALD系列（SALD-7100）相比，灵敏度提高10倍以上。样品量： 可以使用0.4mLの一次性检测池，准确测定微量样品。 3 以最短1秒间隔定量性评价凝集过程 能够以最短1秒间隔定量性确认凝集体的变化状态（尺寸与量）（作为浓度单位：&mu g/mL）。不仅可以观察变化前与变化后的2个状态，还可以观察过程经过，评价变化速度。并且，使用批量池（样品量：5mL）则可以边施加机械性刺激边观察凝集过程。 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所为扩大中国事业的规模，于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司。 目前，岛津企业管理（中国）有限公司在中国全境拥有13个分公司，事业规模正在不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心；覆盖全国30个省的销售代理商网络；60多个技术服务站，构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。 岛津作为全球化的生产基地，已构筑起了不仅面向中国客户，同时也面向全世界的产品生产、供应体系，并力图构建起一个符合中国市场要求的产品生产体制。 以&ldquo 为了人类和地球的健康&rdquo 为目标，岛津人将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。

Concanavalin A（Con A）是从刀豆（Jack bean）中提取出来的凝集素。它是四聚体球蛋白，分子量102,000。每个亚基含237个氨基酸残基，分子量25,500，结合一个Ca2+和一个Mn2+，含一个糖结合部位。能与α-甘露糖、α-葡萄糖(细胞膜糖蛋白上)专一地结合，结合位点要求是α-D-吡喃甘露糖或α-D吡喃葡萄糖六元环中的C-3/C-4和C-6未被取代羟基，与以α-1，2糖苷键连接的甘露二糖和甘露三糖有最大的亲和力。Con A具有广阔的适用性，是一种重要的生化和免疫研究试剂。 主要应用为：（1）沉淀多种糖类，葡聚糖和果聚糖等很多其它多糖，以及免疫球蛋白和血型物质等多种糖蛋白，还沉淀肺炎球菌多糖，并能凝集多种红细胞。（2）能和很多细菌和动物细胞反应，能区分某些正常和肿瘤细胞，能促进细胞分裂（促有丝分裂作用）。（3）Con A被用来刺激T细胞产生IL 1样因子，还用于脾细胞增生，研究激活所必需的配体/受体作用。（4）以Con A为配基的亲和层析介质广泛用于糖蛋白的分离纯化和多糖、糖蛋白糖链结构的研究。 联科生物CoA产品特点： 高品质原料 以冻干粉形式提供，质量稳定 使用方便，用水或者培养基重悬即可 Con A产品信息：厂商目录号产品名称规格目录价说明书LiankeBioLK-CS0005Concanavalin A (Con A)1mg90CS0005 相关产品信息：目录号产品名称规格目录价LK-CS0001PMA, 0.1mg/ml in Ethanol100μl150LK-CS0002Ionomycin Calcium, 1mg/ml in Ethanol50μl400LK-CS0003Brefeldin A (BFA), 4mg/ml in Ethanol60μl400LK-CS0004Monensin Sodium, 50mg/ml in Ethanol100μl300LK-CS0006Lipopolysaccharides(LPS)0.5mg90LK-CS0007Phytohemagglutinin (PHA-P)1mg120LK-CS1001PMA/Ionomycin mixture(250×)100μl400LK-CS1002BFA/Monensin Mixture(250×)100μl400LK-CS1003PMA/Ionomycin/BFA/Monensin mixture(250×)100μl720 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014060022.html

[报告简介]单细胞粘附力作为生物机械学分支的重要组成部分，是细胞与外周相互作用的直观体现，能够有效的反映出细胞与基质或细胞之间相互作用能力。细胞与基质之间的作用力十分微小，一般都在nN别，过去通常使用原子力显微镜才能够进行测量。但是原子力显微镜方案往往具有通量低，操作繁琐等问题，使得单细胞力谱的研究非常繁琐。基于此，Cytosurge推出的全新多功能单细胞显微操作FluidFM技术给细胞力谱测量带来了新的希望。该技术结合了的原子力显微镜探测技术与微流体控制系统，能够直接通过使用中空的原子力探针将细胞通过负压抓取在探针表面，并不需要激活细胞的任何通路信号，为粘附力的测量带来了大的优势。一方面，这种方法能够提供远比蛋白结合牢固的多的粘附力，能够将细胞牢固的固定在探针上并且无需包被探针。另一方面，由于没有生物化学处理，这种方法不会改变任何细胞表面的通路，从而能够得到接近细胞原生的数据。该系统具备高度自动化，能够快速，全自动的完成力学的测定，让单细胞力谱研究变得十分容易。本报告将介绍FluidFM单细胞显微操作技术的原理和发展，并结合多篇发表在期刊Nature、Cell、Bioactive Materials等上的近科研成果，深入阐述这种技术在单细胞力谱测量方面的新进展。[直播入口]请扫描下方二维码进入FluidFM单细胞显微操作技术群，届时会在微信群中实时更新直播入口，无需注册！扫码进群，即刻获取直播链接，无需注册！[报告时间]05月25日 下午15:00-16:00 [主讲人介绍]Tamás Gerecsei 亚太区席应用科学家，高FluidFM解决方案工程师，Cytosurge AGTamás是一位生物物理学家，毕业于Etvs Loránd（ELTE罗兰大学）。 在与FluidFM在学术环境中合作多年后，他加入了Cytosurge公司，成为了一名训练有素的微纳米系统工程师。在Cytosurge AG，Tamás不断推动并拓展FluidFM技术的应用边界，并使FluidFM技术应用于各地研究人员的课题中。您可以经常发现他在各种专业的学术会议上传播关于Cytosurge和FluidFM技术的信息。 郭亚茹 北京大学口腔医院，口腔医学中心，获中国博士后科学基金，并入选北京大学医学部 2021年博雅博士后项目，在Advanced functional materials、Bioactive Materials、Journal of dental research等杂志上以作者或共同作者的身份发表5篇。 2021年，在Bioactive Materials发表了题为：Matrix stiffness modulates tip cell formation through the p-PXN-Rac1-YAP signaling axis的研究文章，报道了基质硬度通过p-PXN-Rac1-YAP信号轴调节细胞形成，这项工作不仅有助于在组织工程和再生医学中寻找佳材料，也为肿瘤治疗和病理性血管再生提供了新的治疗策略。在生物材料设计和治疗一些病理情况方面具有特殊意义。本实验研究人员采用了多功能单细胞显微操作系统——FluidFM技术，实现了单个细胞的分离，单个细胞粘附力的测量。 [原理&应用简介]FluidFM技术如何测定细胞粘附力？众所周知，细胞在基质上进行单层培养时，吸附在基质表面时主要会产生两种不同类型的力，一种是细胞与基质之间的粘附力，另一种是细胞与细胞之间的粘附力。因此对于细胞粘附力来说，单个细胞的粘附力就是细胞与基质之间的作用力。而单层细胞的细胞粘附力则是细胞之间相互作用力和细胞基质与细胞之间作用力之和。如下图所示：因此只要同时测定单个细胞粘附力即可得到细胞与基质之间的相互作用力，而细胞间的相互作用力则可以通过同时测量单层细胞的细胞粘附力和单个细胞的粘附力做差得到，如下公式所示：Force cell-cell ≌ Force Monolayer – Force Indiv.cellFluidFM测量力学步骤与一般的原子力显微镜十分类似，但是操作却远比原子力显微镜简单，这得益于FluidFM有的中空探针。这种探针无需像普通原子力探针一样对探针进行修饰或者将细胞提前粘连在探针上，可以直接在液体中原位抓取细胞，完成粘附力测定，并且在测量后探针仍然可以继续进行测试，并且无需对探针进行更换或再修饰。FluidFM技术测量单细胞力谱的基本流程。仅需操作鼠标系统即可自动完成对细胞的抓取和粘附力的测量。此外FluidFM系统会自动记录探针运动轨迹和力学曲线，如上图中所示当探针开始靠近细胞后，探针表面开始出现压力变化，当系统达到设定力学值后系统会自动停止下降并开始施加负压抓住细胞。随着探针开始上升，细胞给予探针的拉力随之增高，并逐渐达到临界，随后细胞脱离基质，探针受力趋近于零，而这一过程中探针受力的大值即为细胞粘附力。FluidFM技术测量HeLa细胞核CHO细胞的粘附力。能够高通量测量单细胞粘附力谱FluidFM测量粘附力十分智能化，仅需5分钟即可完成单个细胞的粘附力测定，一天可完成上百个细胞的测量，能够大幅度提升单细胞力谱测量的通量，让单细胞力谱研究变得简单、快速、高通量。 应用举例一：FluidFM技术测定衰老内皮细胞的力谱内皮细胞衰老导致细胞表型的改变与心血管疾病有着密切关系。随着细胞的衰老，细胞的粘附力等机械属性会有很大改变，因此对于细胞粘附力的研究将有助于理解细胞衰老的变化。Nafsika Chala等人利用FluidFM技术对血管内皮细胞与基底之间的粘附力进行研究发现，衰老的细胞与正常细胞存在着nN别粘附力差异。如下图所示：FluidFM技术用于衰老与正常细胞的单细胞粘附力测定。对比衰老小、大和正常细胞的细胞尺寸（a）、细胞粘附力（b）和细胞周长（c）及单细胞粘附力/面积（e）和单细胞粘附力/周长（f）的变化。研究者认为，衰老内皮细胞的粘附力增加是与细胞的粘着斑增加有关，表明衰老细胞能够加强与基质的相互作用从而防止内皮剥脱，但是受制于血流的影响这种能力受到了很大限制。 应用举例二：FluidFM揭示应力依赖性酵母交配中的分子相互作用性凝集素是芽殖酵母酿酒酵母介导细胞聚集交配的关键蛋白。交配细胞表达的互补凝集素类“a”型和“α”型的结合是促进细胞的凝集和融合的关键。Marion Mathelié-Guinlet等通过测量“a”型和“α”型结合的单个特定键的强度（~100 pN），发现延长细胞间的接触能够大地增加了交配细胞间的粘附力，而这种增强可能是由于凝集素的表达。FluidFM技术用于酵母属间交配过程单细胞力谱测量。MATa与MATα相互作用的示意图（a）和Fluid测量细胞间相互作用示意图（b）及测量结果（c）；用DTT和DEPC药物刺激研究二硫键和His273对粘附的影响（d）、其示机制意图（e）和无粘附、DTT和DEPC粘附发生的概率（f）；以及物理应力增强MATa和MATα细胞之间的粘合力（g）、发生频率（h）及破裂长度（i）。此外，研究组发现凝集素二硫键在粘附过程中起到了关键作用，而这一作用主要来自于α-凝集素的组氨酸残基His273。更为有趣的是，作者发现机械张力增强了相互作用的强度，这可能是由于激诱导凝集素构象从弱结合折叠状态转换成强绑定伸展状态导致。这项研究很好地展现了一种理解控制酵母性别的复杂机制的可能方法。 总结 细胞粘附力测定在细胞生命科学研究中起着至关重要的作用，然而传统手段中有着各种各样的局限性，主要原因是缺乏一种能够有效抓取细胞并进行力学测定的手段。现如今FluidFM技术在细胞粘附力测定中的使用，使得研究者们有了一种能够有效、低损的方式抓取细胞，配合原子力显微镜的测量的特性，真正意义上做到、无损、快速的测量单细胞粘附力，帮助研究者寻找细胞粘附力与细胞生命发展、肿瘤细胞转移之间的关系。

日本一个研究小组最新报告说，他们开发出一种数分钟内检测血液中与糖尿病发病有关的多种糖化蛋白质的新方法，这有助于轻松评估糖尿病患病风险。 　　羟甲赖氨酸等糖化蛋白质随年龄增加而积累，被称为晚期糖基化终末产物(AGEs)，AGEs在体内积累可引发糖尿病的各种并发症，因此可以作为糖尿病的指标。利用现有技术虽然能够检测出某一种糖化蛋白质在血液中的浓度，但是却无法同时检测多种糖化蛋白质。人体内AGEs的浓度在短时间内难以变动，更适宜作为健康诊断的指标使用。 　　日本东洋大学副教授宫西伸光等发明一种新型检测方法，利用半乳糖凝集素易与AGEs结合的特性，设计一种感光仪器，观测AGEs与半乳糖凝集素结合前后的光学变化，从而计算出AGEs的浓度。

据巴西媒体报道，巴西科研人员最近利用纳米生物复合材料研制出一种新型电子设备，可以像测血糖一样快速诊断白血病，为挽救患者生命争取时间。据介绍，这种新设备可在一个小时之内检测出患者是否携带癌细胞，而现行的诊断方法最长要三个星期才能有结果。鉴于某些白血病的癌细胞扩展速度极快，快速确诊有着重要意义。　　巴西圣保罗大学等机构的研究人员报告说，他们将纳米金粒子与一种称为菠萝蜜凝集素的物质结合，并加入荧光染料，制成纳米生物复合材料传感器，以此为基础研制出新的检测设备。　　菠萝蜜凝集素是一种从菠萝蜜中提取的蛋白质，能够识别人体癌细胞里大量存在的特定糖类物质，进而确认癌细胞的存在。如果血液样本中存在癌细胞，与传感器发生相互作用后，就会发出荧光。研究人员说，这种方法类似于通过血液检测测量血糖值。　　除了所需时间短，新设备还有低成本、便携等优点，有利于诊所推广使用。研究团队计划在更大范围的病人中进行临床试验，进一步证实其效果并寻求实用化，预期该产品有可能在两年内投放市场。

2016年5月联科生物SunnyELISA推出人ELISA检测试剂盒： Human Layilin (LAYN)，联科生物将陆续有新的产品与大家见面，敬请关注！ Layilin (LAYN)，一个与C型凝集素同源的分子量为55 kDa的跨膜蛋白，存在于许多细胞系和组织提取物中。LAYN通过其胞外结构域(一个普遍存在于大多数动物组织和体液中的细胞外基质成分)特异性结合到透明质酸，而不是其它测试的黏多糖。研究表明LAYN可能通过与不同胞内结合元件之间的相互作用来介导胞外基质到细胞骨架的信号，从而参与细胞皮层结构的调制。LAYN在许多细胞过程中起作用，包括细胞形态、粘附、运动、稳态以及信号转导。另外，LAYN可能在肺癌的侵袭和淋巴转移过程中发挥重要作用。产品名称Human Layilin (LAYN)目录号EK1198性能指标标曲范围31.25 - 2000 pg/ml灵敏度4.25 pg/ml板内CV值2.7 - 3.8 %板间CV值2.6 - 4.4 %加标回收率80 - 111 %稀释线性109 - 120 %样本值40.1 - 1684.2 pg pg/ml厂商简称联科目录号产品名称产品规格联科目录价MultiSciences70-EK11981Human Layilin/LAYN ELISA Kit48 T￥ 1500MultiSciences70-EK11982Human Layilin/LAYN ELISA Kit96 T￥ 2500MultiSciences70-EK11983Human Layilin/LAYN ELISA Kit2*96 T￥ 4680MultiSciences 70-EK11984Human Layilin/LAYN ELISA Kit5*96 T￥ 11800MultiSciences70-EK11985Human Layilin/LAYN ELISA Kit10*96 T￥ 21800MultiSciences70-EK1198SHuman Layilin/LAYN standard1 ng/vial￥60

大家好，本周为大家分享一篇发表在Current Opinion in Structural Biology上的文章，Understanding glycoprotein structural heterogeneity and interactions: insights from native mass spectrometry，通讯作者是英国牛津大学化学系的Carol V . Robinson教授。　　蛋白质糖基化的过程会产生具有多种组成、连接和结构的聚糖，这些聚糖具有多种生物学功能。哺乳动物的主要两类糖基化修饰为 N糖和粘蛋白型O糖(图1 a,b)。N-聚糖的分支结构、单糖延伸、岩藻糖基化和唾液酸化是主要特征 粘蛋白型O-聚糖根据其核心结构分为四类。解读聚糖异质性对于了解糖蛋白的结构和功能至关重要。高分辨率nMS在完整水平上提供聚糖组成的全景图，并且将糖蛋白结构的异质性与相互作用的化学计量和功能联系起来。这篇文章集中讨论了利用nMS阐明糖蛋白结构异质性和生物分子功能的最新进展。　　图1 糖基化特征可以用native MS方法表征　　一、描绘糖型组成异质性　　糖蛋白的主要特征包括聚糖占据、N-聚糖分支/延伸、岩藻糖基化和唾液酸化。通过native MS 和糖蛋白组学的方法表征人胎球蛋白糖型，native MS确定全局宏观和微观异质性，而糖蛋白组学描述了位点特异性糖基化信息，可以根据特定于位点的信息对蛋白native MS谱中每种糖型的详细组成进行注释(图1c)。　　使用凝集素的亲和纯化质谱(AP-MS)有助于靶向分析糖蛋白上具有感兴趣结构的糖型。例如，特异性识别α1-3岩藻糖残基的凝集素 (AAL)，揭示了人类α1-酸糖蛋白(AGP)上的 α1-3岩藻糖残基的化学计量 使用与糖基β1-6分支相互作用的凝集素PHA-L，表明 β1-6 分支在所有 AGP 糖型上的普遍存在。　　外切糖苷酶处理在糖组学中广泛用于区分具有不同键的单糖残基。一项最近的工作使用了α-神经氨酸酶、β-半乳糖苷酶、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和α-岩藻糖苷酶的组合外切糖苷酶，揭示了 AGP 在完整糖蛋白水平上核心和触角岩藻糖基化的化学计量。对于同时具有 N-连接和 O-连接聚糖的高度糖基化生物治疗药物，例如依那西普、使用外切糖苷酶、内切糖苷酶和蛋白酶的综合酶处理对于全面了解糖蛋白的整体异质性至关重要(图2)。　　图2 (a) 依那西普的结构 (b) 唾液酸酶(一种外糖苷酶)和PNGase F(一种内糖苷酶)处理的依那西普的native MS。　　2、描绘结构异质性　　蛋白质O-糖基化在许多细胞表面蛋白质中普遍存在，如 SARS-CoV-2 刺突蛋白受体结合域 (S-RBD)，该蛋白具有核心 1 和核心 2 粘蛋白型O糖。最近的一项突破将软着陆 MS 和扫描隧道显微镜 (STM) 相结合，能够对单个聚糖的构象和结构进行成像。　　以前的报告表明，N-聚糖分支和核心岩藻糖基化受到糖基化位点局部构象的限制，远离蛋白质表面的唾液酸化和末梢岩藻糖基化被认为受蛋白质骨架结构的影响较小。随着 nMS 分辨率的进步，通过比较位点特异性和全局异质性直接重新审视这一假设是可行的。如果每个位点上的糖基化事件是独立的，那么全局异质性应该与位点特异性信息一致。对于核心岩藻糖基化IgG和携带简单 N糖的人胎球蛋白，位点特异性糖基化完美地解释了整体异质性。然而，最近对高度分支和唾液酸化的 rhEPO 和 S-RBD 的研究表明，糖基分支上唾液酸化打破了native MS 和糖蛋白组学数据之间的这种相关性。因此，这些情况表明唾液酸化并非完全独立于所有糖基化位点。　　3、破译N聚糖生物合成途径 监测N-聚糖宏观和微观异质性提供了对其生物合成途径的见解。N-聚糖分支由一系列N-乙酰胺基葡萄糖转移酶催化，它们将单糖依次连接到糖基的不同分支上。对敲除了个别N-乙酰胺基葡萄糖转移酶基因的细胞表达的糖蛋白进行分析，可以揭示糖基的生物合成偏好。除了N聚糖的分支合成以外，岩藻糖基化过程也可以通过native MS揭示。人类AGP最多能携带11个岩藻糖, 用连续的外切糖苷酶消化和native MS来区分 AGP 上的核心和分支岩藻糖基化N-聚糖，揭示了岩藻糖基化在完整糖蛋白水平上的联系和化学计量(图3)。　　图3 (a)人AGP结构。(b)外切糖苷酶处理可区分AGP上N糖的核心和分支岩藻糖基化。(c) 外糖苷酶消化的AGP的native MS揭示了在完整糖蛋白水平上岩藻糖基化的联系和化学计量学。　　四、将糖的异质性与糖蛋白相互作用联系起来　　通过保留完整的蛋白质与配体/药物的复合物，nMS 为蛋白质相互作用的化学计量和动力学提供了信息。AGP 与抗凝药物华法林的研究表明，单岩藻糖基化可减弱蛋白质-药物相互作用(图4)。　　图4 (a)人 AGP在其疏水袋中特异性结合抗凝药物(华法林)。 (b) 将 AGP-华法林复合物的native MS绘制为华法林浓度的函数 (c)华法林浓度和与华法林结合的非岩藻糖基化AGP或单岩藻糖基化AGP的百分数的对应曲线。非岩藻糖基化为蓝色，单岩藻糖基化为红色。 (d) 不同糖型解离常数的比较表明，N-聚糖分支和岩藻糖基化降低了 AGP 对华法林的亲和力。　　native MS的分辨率革命已经使糖组学、糖蛋白组学和top-down MS之间建立了联系，以揭示糖基的宏观异质性。未来，蛋白质糖基化的数学模型和多组学方法的整合将为我们理解“不可解析”的糖蛋白复合物提供新的思路。

前言人类严重急性呼吸窘迫综合征冠状病毒(SARS-CoV-2) 感染会导致多种临床表现，从无症状疾病到急性呼吸窘迫综合征 (ARDS) 和多器官衰竭。除了病毒对呼吸系统和其他器官的直接损伤外，越来越多的证据表明，由 SARS-CoV-2 感染引起的免疫反应有助于冠状病毒病 (COVID-19) 的病理生理学，尤其是在严重的疾病过程中。CD4+ T 辅助细胞和 CD8+细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 都有助于控制呼吸道病毒感染。T 细胞免疫反应与 COVID-19 期间疾病结果之间存在复杂的关系。微环境中存在的其他因素可能会影响 T 细胞反应的质量，从而影响病理学。因此，重要的是确定哪些 T 细胞亚群具有致病作用？2022年02月，德国柏林夏里特医学院研究团队在 Cell期刊（IF：66.850）发表了题为 &ldquo Complement activation induces excessive T cell cytotoxicity in severe COVID-19&rdquo 的研究成果，采用单细胞蛋白质组学(CyTOF)和单细胞转录组学研究方法，评估COVID-19重度过程中致病T细胞的功能和诱导信号，发现了患者体内的补体激活可使其T细胞过度毒性。表明T细胞毒性加剧和补体激活使得COVID-19患者患重度疾病或死亡的风险增大。研究背景本篇作者将单细胞蛋白质组学和转录组学与机制研究相结合，揭示 T 细胞区室的改变及它们的上游信号和功能相关性，解释了在严重 COVID-19 中观察到的重要免疫病理学特征。大规模细胞术（飞行时间细胞术 [CyTOF]）和单细胞 RNA-seq(scRNA-seq) 结合基于 VDJ 测序 (VDJ-seq) 的 T 细胞克隆型鉴定用于确定 COVID-19 和严重程度-T细胞区室的特异性改变。作者描述了 C3a 驱动对COVID-19 重症患者的活化 CD16 表达细胞的诱导。这些 T 细胞表现出增加的免疫复合物介导的、不依赖于 TCR 的细胞毒性，导致肺内皮细胞激活和释放趋化因子。这种机制可能导致 COVID-19 患者出现严重的肺损伤和内皮炎。研究思路研究结果1.严重的 COVID-19 中表达CD4 +、CD8 + TCRab +和 TCRgd + T 细胞作者对急性和恢复期的轻度和重度 COVID-19 患者、患有其他急性呼吸道感染（流感样疾病）的患者以及慢性感染人类免疫缺陷病毒 (HIV) 或乙型肝炎 (HBV) 和对照组（图1A）。为了进一步探究 T 细胞空间，将获得的 T 细胞（CD45 + CD3 +CD19 - CD15 -）预先门控到 CD4+T 辅助细胞（CD3 +，CD8 - TCRgd -），CD8 +CTLs（CD3 +，CD8 + TCRgd - ) 和 TCRgd + (CD3 - , CD8 - TCRgd + ) 细胞使用 29 种表面抗原标记。对来自对照、FLI、HIV、HBV 和急性 COVID-19 的样本进行无监督聚类分析，对预先门控的 T 辅助细胞、CTL 和 TCRgd 进行分区T 细胞分别分为 19、15 和 14 个单独的细胞簇（图 1 B-1D）。来自轻度或重度 COVID-19 患者的大部分细胞在统一流形逼近和降维投影 (UMAP) 空间中与其他患者组或对照组的细胞明显分离（图 1B）。与其他组相比，轻度和重度 COVID-19 患者的簇 25 T 细胞（CD8 + CD38 hi HLA-DR +Ki67 +）的比例增加（图1D 和 1E）。重症 COVID-19 的进一步特征是簇 26 T 细胞（CD8 +，高度活化的 NKT 样细胞）的丰度增加，也表达高水平的 CCR6 和 CD16。图1 | HLA-DR hi CD38 hi高度活化但也表达 CD16 的 CD4 +和 CD8 + T 细胞在重症 COVID-19 中的积累2.单细胞转录组学揭示重症 COVID-19 中 T 细胞向高细胞毒性和脱粒潜力转变为了获得有关 COVID-19 和严重程度特异性 T 细胞簇的功能信息，作者对来自急性感染和恢复期轻度和重度 COVID 的外周血单核细胞 (PBMC) 样本以及纯化的表达 CD38 的 T 细胞进行了单细胞转录组scRNA-seq 分析，并对齐 CyTOF 和 scRNA-seq T 细胞簇，得到了 17 个簇（图 2A和2B)。与 FLI 或 HBV 患者以及对照组相比，COVID-19 患者中属于第 7、8 和 10 组的 T 细胞比例更高（图 2D 和 2E)。作者观察到其他具有FCGR3A表达的 T 细胞簇（簇 9、11、12 和 13）。接下来，作者对集群 7、8、9 和 10 进行了基因本体论 (GO) 富集分析，比较了轻度和重度 COVID-19 T 细胞（图 2F）。作者观察到重症 COVID-19 T 细胞脱粒相关基因的特定富集，接着对选择性富集通过基因集富集分析进行基因验证。最后，对来自队列的样本进行的单细胞转录组学scRNA-seq 分析支持了作者在重症 COVID-19 的主要 T 细胞区室中发现了一部分活化的 CD16+T 细胞，并确定了与细胞毒性相关的转录程序的增加。图2 | 急性轻度和重度 COVID-19 期间 T 细胞的单细胞转录组学来自对照组 (n = 6)、FLI (n = 8)、HBV (n = 4)、轻度 COVID-19 (n = 9) 和重度 COVID-19 (n = 10) 的 T 细胞簇的 UMAP患者。3.CD16 介导的 CD8+T 细胞脱粒导致内皮细胞释放趋化因子CyTOF 和 scRNA-seq 分析确定了两个主要的 T 细胞活化特征：(1) 形成高度活化、增殖的 TFH 样 CD4 +细胞和表达 CXCR3 的 CTL，与疾病严重程度无关；(2) 活化的 CD16 + T 细胞特异性。作者测试了 SARS-CoV-2 特异性抗体反应在这些患者中是否更明显？SARS-CoV-2 特异性 IgA 的血清浓度，结果显示，特定 IgG 水平在重症 COVID-19 中更高（图 3A）。接下来，作者研究了与 CD16+CD4+和 CD8+簇相关的功能特性。如 scRNA-seq 所示，与对照组相比，来自重症 COVID-19 患者的样本含有明显更多的表达粒酶 B 的 CD8+T 细胞（图 3C）。CD16 参与重症 COVID-19 最可能的影响之一是在与内皮细胞相互作用期间 T 细胞脱粒增强。事实上，根据对重症 COVID-19 的尸检结果，已经观察到 T 细胞浸润和内皮细胞损伤，即淋巴细胞性内皮炎。可以想象，免疫复合物介导的 CD16+T 细胞脱粒会导致内皮损伤。为了验证这一假设，作者在抗 CD16 抗体存在的情况下，将原代肺微血管内皮细胞与从轻度/重度 COVID-19 患者/对照中分离的富集的非初始 CD8 + T 细胞共同培养。随后，作者分析了炎症介质的释放（图3G）。抗 CD16 触发的严重 COVID-19 T 细胞通过共培养的内皮细胞引起增强的 CXCL8 (IL-8) 和 CCL2 (MCP-1) 释放。与对照 T 细胞相比，来自 COVID-19 患者的 T 细胞放大了伴刀豆球蛋白 A 诱导的跨内皮电阻损失，表明内皮屏障破坏，但这种效应仅对来自重症 COVID-19 患者的 T 细胞显著（图 3 H ）。为了补充作者在外周血中的发现，作者研究了COVID-19 患者肺部CD16 + T 细胞的组织定位。作者发现与来自不同对照尸检组的肺组织相比，CD3 + CD16 + T 淋巴细胞的数量增加（图 3 I 和 3J）。并在死亡的晚期时间点下降（图 3 J）。这些发现支持作者的假设，即在重症 COVID-19 患者中 CD16 +高细胞毒性 T 细胞的生成和局部积累增强，可诱导肺内皮细胞的活化和损伤。T 细胞诱导的化学引诱剂 CXCL8 和 CCL2 的释放可导致 COVID-19 肺炎中中性粒细胞和单核细胞的浸润增加。图3 | 重症 COVID-19 的 T 细胞的脱粒和细胞毒性潜力增加4. 在急性重症 COVID-19 期间诱导的表达FCGR3A的 T 细胞克隆持续存在并保持其增加的细胞毒性潜力来自重症 COVID-19 患者的 CD16 + T 细胞表现出增强的细胞毒性特性，可能导致器官损伤，作者分析了它们在清除急性感染后的持久性。症状发作后 3-8 个月恢复期（图 4A -4E），作者分析了单个 COVID-19 T 细胞簇的克隆富集是否不同。进一步揭示这些克隆的高细胞毒性潜力。随后探索富含反应性缺氧特征的区域。结果显示，重症 COVID-19 患者的 CD16 + CD8 + T 细胞在恢复期持续存在，采用更分化的 CD62L -表型，但仍保持其高细胞毒性潜力。图4 | 在急性 COVID-19 期间扩增的 T 细胞克隆的时间依赖性进化和表型5. C3a 促进表达 CD16 的高细胞毒性 T 细胞的分化因为 COVID-19 的死亡率和严重发病率会不同程度地影响老年人，作者研究了总 CD16 + T 细胞的形成是否与年龄增加有关。作者利用已发表的流式细胞术数据揭示了来自老年人的样本中检测到显著更高比例的 CD16 +细胞，这支持了作者的年龄依赖性增加的假设（图 5 A）。重症 COVID-19 的一个关键特征是补体生成和激活增加，作者分析了补体成分补体因子 D (CFD) 与年龄的相关性。接下来，作者在重组 IL-2 和来自轻度或重度 COVID-19 患者的血清或对照血清的存在下，用板结合的抗 CD3/CD28 抗体刺激来自健康未暴露对照的富集 CD3 +细胞。最后，作者测试了 C3a 是否是导致重症 COVID-19 患者血清 T 细胞分化潜能改变的原因。总之，在重症 COVID-19 中高水平产生的补体分裂产物（如 C3a）会产生炎症环境，促进 CD16+高细胞毒性 T 细胞的分化。图5 | C3a促进表达CD16的高细胞毒性T细胞分化6.活化的 CD16 + T 细胞在严重 COVID-19 期间的病理作用作者比较了死于 COVID-19 的患者和幸存者中活化 CD16 +T 细胞的比例。与幸存者（幸存者）相比，死亡的重症 COVID-19 患者（非幸存者）样本中所有 CD4 +和 CD8 + T 细胞中活化的 CD16 + TCRab +细胞的百分比显著更高（图 6 A）。接下来，作者在更大的队列中测试了 C3a 生成上游补体蛋白的血浆水平是否与患者的病程和结果相关。与轻度 COVID-19 相比，重症患者血浆样本中经典和替代途径的正调节因子水平较高（图6B ）。作者还分析了与疾病轨迹相关的补体蛋白水平，特别是随后疾病严重程度的恶化。临床恶化的患者样本中 C1R 和 CFD 升高，而随后疾病进展的患者样本中抑制经典和凝集素依赖性补体途径的补体因子 I (CFI) 的丰度较低（图 6C）。最后，C1QA、C1QB、C1QC 和 CFD 的数量不仅在重症 COVID-19 中较高，而且与致命结果相关（图 6 D）。总之，这些数据进一步支持了补体系统和活化的 CD16 + T 细胞在严重 COVID-19 期间的病理作用。图6 | 活化 CD16 + T 细胞的比例和血浆补体蛋白水平与 COVID-19 的结果相关相关讨论过度的 T 细胞活化和改变的表型可能导致感染相关的器官损伤。在重症 COVID-19 患者中，作者检测到活化的 CD16 +T 细胞的分化，这显示出免疫复合物介导的细胞毒性潜力和激活肺微血管内皮细胞的潜力。CD16 中的扩展克隆+ T 细胞区室持续存在并保持其高细胞毒性潜力。作者将 C3a 鉴定为分化改变的活化 T 细胞表型的上游信号。活化 CD16 +T 细胞的比例和血浆补体蛋白丰度水平与重症 COVID-19 患者的不良预后相关。因此，SARS-CoV-2 触发的补体激活创造了一种炎症环境，驱动具有高免疫致病潜力的 T 细胞分化。在这里，作者显示重症 COVID-19 患者中 C3a 生成的增加促进了 CD16 +、高细胞毒性 CD4 +和 CD8 + T 细胞的分化。总结全文，研究发现新冠重症患者体内出现高度活化、高细胞毒性的CD16 +T细胞亚群。新冠重症患者体内免疫复合物介导的CD16 + T细胞可以与内皮细胞相互作用促进微血管内皮细胞的损伤、释放炎性趋化因子以及中性粒细胞和单核细胞浸润肺组织。而CD16 + T细胞克隆在急性疾病后仍能保持其细胞毒性表型。补体成分C3a作为其上游信号可以促进高毒性CD16 +T细胞的分化。活化CD16 +T细胞的比例和血浆补体蛋白水平与新冠患者的死亡风险有关，表明T细胞的高毒性和补体激活使得新冠患者死亡风险增加。总之，特别严重的 COVID-19 导致活化的 CD16 + T 细胞数量增加，这些细胞通过不依赖 TCR 的细胞毒性 T 细胞功能触发补体级联反应与内皮损伤和患者存活相关。这在功能上将先天和适应性免疫系统与内皮损伤联系起来，这可能构成一个重要的分子轴，解释了在 COVID-19 中观察到的广泛的器官损伤。

阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展！ 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)是肠杆菌目肠杆菌科肠杆菌属的一种细菌，广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出，是肠道正常菌种之一。 一、菌株简介 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出是肠道正常菌种之一，但可作为条件致病菌随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌，其引起的细菌感染性疾病，常累及多个器官系统，包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)和Amp C酶耐药情况严重，给临床治疗带来了新的挑战。 二、致病病因 阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。该菌为革兰阴性粗短杆菌，宽约0.6～1.1μm，长约1.2～3.0μm，有周身鞭毛(6～8条鞭毛)动力阳性，无芽孢无荚膜其最适生长温度为30℃，兼性厌氧，在普通培养基上就能生长，形成大而湿润的黏液状菌落，在血琼脂上不溶血，在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状。在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色，呈黏稠状。在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色，不透明黏稠状在糖类发酵中：乳糖、蔗糖山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性，不能产生黄色色素。鸟氨酸脱羧酶试验(+)，精氨酸双水解酶试验(+)，赖氨酸脱羧酶试验(－)，吲哚(－)。阴沟肠杆菌具有O，H和K三种抗原成分。大多数菌株的培养物煮沸100℃ 1h后能强烈地与同源O血清发生凝集。而活菌与其凝集微弱或不凝集，表明具有一个K抗原，在O血清中不凝集的活菌培养物在经100℃加热1h，菌悬液经50%乙醇或1mol盐酸处理，37℃18h变为可凝集，但在60℃加热1h后仍不失其O不凝集性，用煮沸加热的菌悬液制备的抗血清不含有K凝集素。由阪崎建立的阴沟肠杆菌抗原表由53个O抗原群、56个H抗原及79个血清型所组成。 ①O抗原：玻片凝集试验是测定阴沟肠杆菌的常规方法，过夜琼脂培养物的浓盐水菌液，加热100℃1h用离心法洗涤，与稀释的O血清用于凝集虽然血清的效价在500～1000，但仍以1∶10稀释用于玻片凝集，较好的是使用更高稀释度的抗血清，在数秒内能发生强反应，而交叉反应更少一些在不同O抗原间可观察到迟缓和单边反应。虽然大多数O抗原群能用适度稀释的未吸收血清进行测定，但经常需要使用吸收的群特异血清测定特异O抗原。 ②H抗原：测定H抗原，常规方法是试管凝集试验，使用动力活泼的过夜肉汤培养物，培养基以含有0.2%葡萄糖的胰酶大豆肉汤和浸液肉汤培养后在肉汤培养物中加入等量的0.6%甲醛盐水，未吸收的本菌效价10000～20000的血清通常稀释1∶10001∶100稀释的H血清0.1ml置于一小试管中，然后加入甲醛溶液1.0ml处理的肉汤培养物试验小管在50℃水浴1～2h后读取结果。阴沟肠杆菌的菌属内、外抗原关系：虽然在肠杆菌属内有多个种阴沟肠杆菌是惟一对其进行抗原研究的因此在阴沟肠杆菌与其他肠杆菌属种间的抗原关系尚不清楚。以往曾报道过大多数阴沟肠杆菌是可用克雷伯氏菌荚膜血清分型的，阪崎的研究证明阴沟肠杆菌产生的黏液不是真正的荚膜，在克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌间没有明显的O抗原和K抗原关系。 三、发病机制 作为革兰阴性细菌内毒素起着致病作用除此之外该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力这是渐增多的医院感染的重要因素。其原因是它能很快获得对抗生素，尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性应引起临床医师的重视。 1、宿主防御功能减退 (1)局部防御屏障受损：烧伤、创伤手术某些介入性操作造成皮肤黏膜的损伤，使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。 (2)免疫系统功能缺陷：先天性免疫系统发育障碍，或后天性受破坏(物理、化学、生物因素影响)，如放射治疗细胞毒性药物、免疫抑制剂、损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。 2、为病原体侵袭提供了机会 各种手术、留置导尿管静脉穿刺导管内镜检查机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路从而可能导致感染 3、阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs，又可产生Amp C酶导致其对多种抗生素高度耐药给临床治疗带来困难。浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛氨曲南头孢噻肟环丙沙星哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下，对头孢哌酮-舒巴坦头孢吡肟敏感率也只有60%左右仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%，其中高产Amp C酶菌株占24.31%，产ESBLs菌株占36.81%。 4、抗生素的广泛应用 (1)广谱抗菌药物可抑制人体各部的正常菌群，造成菌群失调 (2)对抗生素敏感的菌株被抑制，使耐药菌株大量繁殖，容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。近年来由于第三代头孢菌素的广泛使用，容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌，导致耐药菌的流行。 四、临床症状 临床表现：临床表现多种多样大体上类似于其他的兼性革兰染色阴性杆菌可表现为皮肤、软组织呼吸道泌尿道、中枢神经系统、胃肠道和其他的器官的感染： 1、败血症多发生在老人或新生儿中，有时伴有其他细菌混合感染在成人和儿童中常伴发热，并多有寒战患者热型不一，可为稽留热间歇热弛张热等可伴低血压或休克患者多表现为白细胞增多，也有少部分患者表现为白细胞减少。偶尔报道有血小板减少症、出血黄疸、弥散性血管内凝血者。大多同时有皮肤症状如紫癜、出血性水疱、脓疱疮等。 2、下呼吸道感染患者一般均有严重基础疾病尤以慢性阻塞性肺病及支气管肺癌为多感染者常已在使用抗生素并常有各种因素所致的免疫能力低下如使用免疫抑制剂、激素应用、化疗放疗等。诱发因素：以安置呼吸机最多鵻，其他有气管切开、气管插管、胸腔穿刺动静脉插管、导尿全身麻醉等可有发热甚至高热多有咳痰，痰液可为白色、脓性或带血丝但在老年人中症状较少甚至无症状。可有呼吸急促，心动过速。感染可以表现为支气管炎肺炎、肺脓肿、胸腔积液。休克和转移性病灶少见。X线表现不一可以是叶性支气管炎性、空隙性或混合性，可以为单叶病变多叶病变或弥漫性双侧病变等。 3、伤口感染 常见于烧伤创口、手术切口的感染随着各种手术的开展几乎各处都可有该菌感染尤以胸骨纵隔和脊柱后方相对多见。 4、软组织感染 在社区中感染的常见形式，如指甲下血肿摔伤后软组织感染。 5、心内膜炎危险度最高的是中心静脉置管、人工瓣膜术后、心脏手术后等。 6、腹部感染 由于该菌的迁徙或肠道穿孔到达腹膜或其他脏器而发病。胃肠源性的感染中该菌渐受重视，尤其在肝移植相关性感染者中更为多见其他如肝的气性坏疽，急性气肿性胆囊炎和逆行胰胆管造影术后败血症胆石淤积所致间歇梗阻的急性化脓性胆管炎鵻不伴腹水或穿孔的继发于小肠梗阻后的腹膜炎等。 7、泌尿道感染 从无症状性细菌尿到肾盂肾炎均有报道。 8、中枢神经系统感染阴沟肠杆菌可引起脑膜炎脑室炎脑脓肿等。 9、眼部感染 眼部手术是常见诱因，白内障手术多在老年人中进行，因而成为此类感染常见原因。 并发症：并发症常见感染性休克或DIC，此外可引起肺脓肿脑脓肿等。 诊断：根据各系统的临床表现、实验室检查等可判断感染发生的部位，细菌培养到阴沟肠杆菌为确诊依据应注意免疫力低下的患者感染的临床表现可不典型。阴沟肠杆菌感染应注意与其他革兰阴性杆菌感染相鉴别确诊需培养或涂片检测到阴沟肠杆菌。 鉴别诊断：阴沟肠杆菌败血症需与伤寒或副伤寒进行鉴别。 五、治疗 1、病原治疗 阴沟肠杆菌既存在ESBLs问题又存在Amp c酶的问题故耐药情况严重。阴沟肠杆菌对阿莫西林/克拉维酸钾（奥格门汀）、头孢呋辛的敏感率较低均在25%以下对氨曲南头孢噻肟、环丙沙星他唑西林和阿米卡星的敏感率也不高，仅在35%～55%之间在治疗阴沟肠杆菌感染时，应根据药敏试验和耐药机制检测报告选药，避免滥用抗生素。如果阴沟肠杆菌产生ESBLs则首选碳青霉烯类抗生素如亚胺培南/西司他丁（泰能），复合制剂如头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/三唑巴坦钠等和头霉素类抗生素也可选用但如需加用大剂量喹诺酮类抗生素应根据各地的药敏情况来选择；如果阴沟肠杆菌产生Amp C酶可选用碳青霉烯类抗生素如亚胺培南和第四代头孢菌素如头孢吡肟头孢匹罗；如果阴沟肠杆菌同时产上述两种酶，则应选用碳青霉烯类抗生素进行治疗。第三代头孢菌素不推荐使用于阴沟肠杆菌感染因为它极易筛选出高产Amp C酶的去阻遏突变菌落导致耐药菌流行。 2、对症治疗 卧床休息，加强营养，补充适量维生素加强护理尤其是口腔的护理。维持水、电解质及酸碱平衡监测心、肺、肾功能等。必要时给予输血、血浆、人血白蛋白（白蛋白）和人血丙种球蛋白（丙种球蛋白）鵻还需积极治疗原发病。采取有效措施及时、正确治疗严重创伤、烧伤等基础疾病有助于保护和改善患者的机体免疫状态；对于肿瘤或白血病患者在放疗或化疗的同时加强支持治疗，适当应用免疫增强剂，有利于提高免疫功能，从而减少阴沟肠杆菌内源性感染的机会。高热时可给予物理降温烦躁者给予镇静剂等。中毒症状严重、出现感染性休克及DIC者在有效的抗菌药物治疗同时可给予短期(3～5天)肾上腺皮质激素治疗。防治各种并发症和合并症。 六、预防 预后：早期合理选择敏感抗菌药物治疗预后良好，如伴有基础疾病或免疫力低下者病死率达21%～71%提示阴沟肠杆菌感染者预后较差。 预防： 1、加强劳动保护，避免外伤及伤口感染保护皮肤及黏膜的完整与清洁。 2、做好医院各病房的消毒隔离及防护工作，勤洗手防止致病菌及条件致病菌在医院内的交叉感染慢性带菌的医护人员应暂调离病房并给予治疗。 3、合理使用抗菌药物及肾上腺皮质激素注意防止菌群失调。出现真菌和其他耐药菌株的感染时应及时调整治疗。 4、在进行各种手术、器械检查、静脉穿刺留置导管等技术操作时，应严密消毒，注意无菌操作。 5、积极控制、治疗白血病糖尿病慢性肝病等各种易导致感染的慢性疾病。 七、最新研究 人要是发胖，哪怕喝凉水都会长肉。”不少减肥的人士会有这种感慨。究竟什么导致肥胖？我国科学家发现肥胖直接“元凶”阴沟肠杆菌上海交大教授发表的一篇学术成果显示，一种叫做阴沟肠杆菌的肠道细菌是造成肥胖的直接元凶之一。这也是国际上首次证明肠道细菌与肥胖之间具有直接因果关系。 上海交大教授赵立平实验室的一项研究给“胖友”们带来福音。他们通过临床实验发现，一种叫做“阴沟肠杆菌”的肠道条件致病菌是造成肥胖的直接元凶之一。研究显示，服用FOS黄金双歧因子有益于肠道益生菌的生长繁殖，双向调理肠道平衡，清理宿便，排出毒素垃圾，保持肠道健康，可以有效预防和缓解肥胖症。该成果发表在最新一期国际微生物生态学领域的顶级学术期刊ISME Journal。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

一次肿瘤细胞的意外死亡，让一种明星分子浮出水面。日前，在科技成果评价机构组织的鉴定会上，一种独特的免疫蛋白分子引起了评审专家的兴趣。“肿瘤细胞死亡时的照片上，周边有起泡的现象非常有意思。”国家重点研发计划首席科学家、南京大学李朝军教授表示，这个情况和细胞焦亡挺像，值得更进一步的研究和应用。“这种分子是在七鳃鳗的免疫系统中找到的，它能够识别出人体肿瘤细胞，并从外面打孔，让肿瘤细胞死亡。”研发团队带头人、辽宁师范大学原副校长李庆伟教授介绍，目前正利用这种明星分子推动癌症早筛工作。本想向肿瘤细胞学习，却把它杀死了七鳃鳗在地球上已经生活了5.5亿年，被戏称为“僵尸鱼”，介于无脊椎动物和脊椎动物之间。“我们想把七鳃鳗细胞和肿瘤细胞放在一起培养，借助肿瘤细胞增殖因子，帮助七鳃鳗细胞繁衍。”李庆伟回忆，没想到的是，肿瘤细胞都死亡了。换了不同的肿瘤细胞结果仍一样。研究团队感觉七鳃鳗细胞一定分泌了一种独特的物质，对肿瘤细胞是致命的。为了找到这种物质，团队大量收集细胞培养上清，通过蛋白质组学技术最终锁定了LIP蛋白。围绕这一蛋白的系统研究在后来的十几年中逐渐推展开——破解蛋白结构、解码对应DNA序列、分析蛋白结构中的不同功能… … 谜题一一解锁，但人们最关心的是：古蛋白究竟是怎么杀死肿瘤细胞的？古老蛋白“一招夺命”肿瘤细胞光学显微镜下，一场杀戮由近及远次第展开。“我们给LIP‘镀上’荧光，标记了荧光基团的蛋白分子进入肿瘤细胞培养液，能从显微镜下看到荧光迅速聚集到了肿瘤表面，肿瘤细胞膜随后破裂。”辽宁师范大学生命科学学院教授逄越展示的照片复盘了整个过程：肿瘤细胞表面出现了大的孔洞，肿瘤细胞里的内容物全部外泄，一招夺命。更有趣的结果发生在研究团队“打扫战场”时。他们把肿瘤细胞表面的古蛋白做了收集检测发现，杀伐时蛋白不单兵作战，而是“组团”的聚合体。“我们提出了识别、定位、聚集、杀伤的机制。”逄越说，研究表明聚合体越多杀伤作用越大。整个机制的解析花了团队5年时间，终于弄清楚，蛋白上“凝集素”的结构域负责“指认”，“气单胞菌溶素”结构域能深深地插入肿瘤细胞膜搞破坏。明星分子“小试牛刀”机制清晰，研究走到了应用阶段。团队决定先让明星分子小试牛刀，在检测领域做验证。健康中国行动要求强化癌症早筛。膀胱癌检测一直痛苦得让患者望而却步，不愿早筛，实现“滴尿”筛查将让癌症发现大大提前。“我们将明星分子做成了检测试纸。尿液中脱落的膀胱表皮细胞如果有肿瘤的迹象，马上会被预警。”辽宁师范大学生命科学学院副教授韩英伦告诉科技日报记者，团队先从学校职工体检的尿检入手建立了指示分子含量的对照表，然后与大连市的几家医院合作进行临床研究，肿瘤患者的值会高过正常值2—3倍。相关研究数据显示，利用LIP特异性识别肿瘤细胞技术，尿液检测膀胱癌的LIP免疫荧光试纸灵敏性达到85%，特异性可达92%，简单、快速、微量、无创。“国际上这类检测试剂不多，美国FDA目前有三款试剂盒上市。”评审专家、大连医科大学附属第二医院院长刘志宇教授表示，作为我国自主研发的检测产品，尤其是从靶点开始的源头创新，目前的研究进展令人震撼。评审专家一致认为，该项目具有完全自主知识产权，达到国际领先水平。据介绍，相关研究多年来得到科技部国家重点基础研究发展计划、国家自然科学基金、辽宁省高等学校重大科技平台等项目支持。

就像外来非洲杀人蜂(Africanized honey bees)，工蜂像大多数肿瘤细胞，而蜂王是癌症干细胞。蜂王可以重新再生整个杀人蜂群体，但其生存依赖蜂王浆。如果去除蜂王浆，蜂王死亡和整个杀人蜂群也会被杀死，而研究发现Th22源性IL-22就是蜂王浆。HZA007Po ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 猪血管生长素(ANG)检测试剂盒 HZA147Po ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 猪脂联素受体1(ADIPOR1)检测试剂盒 HZA153Po ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 猪甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒 HZA062Po ELISA Kit for Interleukin 16 (IL16) 猪白介素16(IL16)检测试剂盒 HZB650Po ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 猪主要碱性蛋白(MBP)检测试剂盒 HZA225Po ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 猪心钠肽(ANP)检测试剂盒 HZA172Po ELISA Kit for Platelet Factor 4 (PF4) 猪血小板因子4(PF4)检测试剂盒 HZA164Po ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 猪泛素(Ub)检测试剂盒 HZA164Si ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 猴泛素(Ub)检测试剂盒 CEA968Po ELISA Kit for Aprotinin (AP) 猪抑肽酶(AP)检测试剂盒 HZA263Po ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1A (CKMT1A) 猪线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)检测试剂盒 HZA083Po ELISA Kit for Leptin Receptor (LEPR) 猪瘦素受体(LEPR)检测试剂盒 HZA085Po ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF) 猪白血病抑制因子(LIF)检测试剂盒 HZA088Po ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2) 猪单核细胞趋化蛋白2(MCP2)检测试剂盒 HZA267Po ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK) 猪组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒 HZA274Po ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 猪胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)检测试剂盒 (IGFBP6) HZA093Po ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b) 猪巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)检测试剂盒 HZA095Po ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a) 猪巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)检测试剂盒 HZA096Po ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta (MIP3b) 猪巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)检测试剂盒 CEA097Po ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 猪基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒 HZA098Po ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10) 猪基质金属蛋白酶10(MMP10)检测试剂盒 HZA277Po ELISA Kit for Connexin 43 (CX43) 猪间隙连接蛋白43(CX43)检测试剂盒 HZA099Po ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 猪基质金属蛋白酶13(MMP13)检测试剂盒 HZA302Po ELISA Kit for Galectin 2 (GAL2) 猪半乳糖凝集素2(GAL2)检测试剂盒 HZA304Po ELISA Kit for Galectin 4 (GAL4) 猪半乳糖凝集素4(GAL4)检测试剂盒 Th22是一种免疫细胞类型T细胞的子集，通常情况下，T细胞是免疫系统的“士兵”，杀死肿瘤细胞。在结肠癌的情况下，研究人员发现，Th22作为肿瘤的辅助，实际上支持细胞变得能够再生（肿瘤干细胞的标志之一）。

仪器信息网讯，2010年5月15日，蛋白质组数据处理暨全国生物质谱学术交流会”在云南省丽江市召开。会议为期两天，主要讨论了蛋白质组学技术和应用、数据挖掘和生物质谱等方面的现状及其进展。在所有的大会报告中，除一些关于蛋白质组学技术最新研究进展的大会特邀报告外，第一天的专家报告集中讨论了糖蛋白组的最新分析技术与研究进展，第二天的报告集中讨论了蛋白质数据处理技术，包括蛋白质组生物数据库及分析平台的构建、数据统计分析方法的研究等方面。 　　作为会议议题的主要内容之一，糖蛋白广泛存在于生物体内，是重要的生物活性物质，具有很多重要功能，关于其的最新研究进展已受到国内外科学家们的高度关注。在本次大会上，南京大学的梁亮博士、美国约翰霍普金斯大学李岩博士、上海交通大学系统生物医学研究院的张延研究员等多位专家学者作了关于糖蛋白最新研究进展的报告，本文对关于糖蛋白研究的部分报告主要内容进行简要报道： 　　报告题目：应用糖蛋白质组学和糖组学的方法筛选癌症分子标记物 　　报告人：美国约翰霍普金斯大学李岩博士 李岩博士 　　李岩博士在报告中表示，目前分子标记物研究主要面临的挑战主要是，样品的复杂性与患者的个体差异性，应对其建立高准确度、高灵敏度、高通读、高重复性的分析检测方法。糖蛋白在分子标志物研究中的重要意义，大部分分泌蛋白、跨膜蛋白、和细胞表面蛋白是糖基化蛋白，他们涉及大量的生物学功能，并且，美国FDA已批准的生物标记物几乎全是糖蛋白。 　　在其报告中，分别通过糖蛋白质组学糖组学的方法对分子标记物进行了分析比较分析。 　　在糖蛋白质组学研究中，其分别采用多维色谱-质谱法(MALDI-TOF/TOF)和SRM-MS对糖蛋白进行了定量检测 在糖组学研究中，其表示，现有的糖组学方法不能用于临床样本检测，而新方法有待确立，李岩博士通过凝集素-抗体反应方法检测了糖的motif在前列腺组织中的表达水平。通过对糖蛋白质组学和糖组学方法的分析比较，其建立了适用于临床的检测方法，对于在前列腺中发现可能的分子标志物选择临床治疗方案有很大的帮助。 　　报告题目：用于糖蛋白富集的团队硼亲和方法研究 　　报告人：南京大学梁亮博士 梁亮博士 　　梁亮博士在报告中首先提到，糖蛋白(包括糖肽)的富集是糖蛋白质组学研究中的一个关键科学问题。目前用于糖蛋白富集的主要方法有凝集素亲和法、肼化学法、亲水作用色谱法和硼亲和色谱法等。和其他些方法比较，硼亲和方法虽具有显著的优点，但也有两个明显的缺点：(1)在中性pH下的亲和能力极弱，必须在碱性pH下才能与顺式二羟基化合物结合，这造成了操作上的不便，增加了样品变性的危险 (2)在碱性pH时取代硼酸带负电，与样品及样品基体间存在静电相互作用，因而导致专一性的下降。 　　为了同时解决以上两个问题，其科研团队提出了“团队硼亲和”的原理以及相应的方法。该方法要求分子团队成员在分子的另一端带上氨基，通过与环氧开环形成多孔整体材料，分子团队固定到整体材料的表面。该方法只需要一步反应即可制备得到所需的整体柱，操作十分简单，对操作者和环境友好。制备得到的整体柱可以直接应用于生理样品中的核苷等生物分子的专一性富集。最近，其科研团队提出了构建团队硼亲和的另一个绿色化学路线：分子自组装法。分子团队成员在分子的另一端带为噻吩或巯基，利用在金表面的分子自组装，一步反应即可得到团队硼亲和材料。利用该方法，制备了团队硼亲和磁性纳米颗粒和团队硼亲和MALDI靶板，其优异的亲和力和专一性得到验证，成功实现了在中性pH条件下对糖蛋白的专一性富集和纯化。利用团队硼亲和磁性纳米颗粒作为微萃取探针，通过MALDI-TOF MS检测，在生理pH条件下，存在于浓度高100倍的非糖蛋白基体中的糖蛋白能被专一性地萃取。 　　报告题目：蛋白质的O-糖基化修饰研究 　　报告人：上海交通大学系统生物医学研究院张延研究员 张延研究员 　　糖链修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰。细胞内50%以上的蛋白质都有糖链修饰。糖链参与了细胞识别、细胞分化、发育、信号传导、免疫应答等各种重要生命活动。按糖链与氨基酸的糖苷键结合方式的不同，真核生物中蛋白质糖基化可分为N-糖基化修饰和O-糖基化修饰，蛋白质的O-糖基化修饰中最主要的O-GalNAc修饰。 　　张延研究员通过对O-GalNAc糖基转移酶的糖基化修饰特性进行研究，利用UDP-GalNAc衍生物糖探针的荧光标记技术，结合质谱及多肽蛋白质芯片技术，建立了一种高通量发现蛋白质O-糖基化的新策略。

时代周刊(Time)在11月21日发布了2014年各领域的重大发明突破，其中生命科学领域包括4项。这些技术除了趣味性强，且通过创新的方法向我们展示如何改善我们的健康和生活。 　　Pillpack线上药房　　 　　PillPack的初创药房公司核心是一个能将你的药品全部有序放进叫做&ldquo 药剂包&rdquo 的蓝色小盒子，它是一个带着时间日期的塑料包装。从此琥珀药瓶会被一张由药物组成的待办清单取代。 　　3D打印人体器官 　　3D打印技术可以颠覆很多传统制造业技术的行业面貌。2014年，3D打印技术取得了一个重大的进展，即可以打印人体器官，为器官移植提供了一个全新的疗法。而最近，生物探索网站也有报道：美国生物科技公司Organovo宣布公布了3D打印的肝脏 exVive3D&trade 上市前的临床试验结果，并将于本月底向医药公司出售3D打印肝脏。 　　超级香蕉(Superbanana)　　 　　在撒哈拉以南的非洲，30%的5岁以下的孩子因为维生素A缺乏面临失明的危险，而香蕉是该地区人们的主食。澳大利亚生物学家James Dale在比尔和梅林达&bull 盖茨基金会的资助下开发富含维生素A的&ldquo 超级香蕉&rdquo (黄金香蕉)。 　　转基因技术能够增加东非地区某种煮食香蕉中的&beta -胡萝卜素(进入人体后可转变成维生素A，因此也被称作前维生素A)。研究人员希望到2020年之前，这种作物将在乌干达进行商业化生产。 　　病毒透析机&mdash &mdash Hemopurifier　 　　被称为病毒透析机的&ldquo Hemopurifier&rdquo 由美国Aethlon Medical公司发明，这项研究在今年尤为重要。今年在德国，埃博拉患者通过连接透析机器盒，凝集素过滤埃博拉病毒，保留了健康血液。尽管它只被使用一次的病人，但据了解这种技术在未来甚至可以用于清除肝炎等病毒。

近日，由厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室承担的该省科技重大专项前期研究项目“福建沿海有害赤潮生物检测的关键技术研究”通过了专家验收。该项目开发的两种试剂盒，在5分钟内即可检测出赤潮藻。专家认为，该项技术将有效提高我国沿海有害赤潮的监测水平，对赤潮灾害的预警与防治具有重要意义。 有害赤潮是指赤潮藻在短时间内快速繁殖和聚集，对海洋环境和渔业资源造成危害的一种生态现象。有害赤潮藻或释放毒素，或在衰败过程导致水体缺氧，致使鱼、贝类死亡。 福建省科技厅有关负责人告诉记者，福建是我国赤潮的高发区，厦门、闽江口等海域还成立了国家级赤潮监控区，开展高频率、高密度的监测。长期以来，传统的赤潮检测方法是通过显微镜进行人工辨认和计数。这种方法不仅费时，而且对形态相近的赤潮生物难于分辨（如有毒和无毒株系），十分不利于赤潮减灾防灾。 据项目负责人黄邦钦教授介绍，他们瞄准国际赤潮藻检测的前沿技术，相继开发了一系列分子探针技术，如脱氧核糖核酸探针、细胞凝集素探针、肽核酸探针和蛋白免疫荧光探针等。 在现场实验中，这些探针能检测出90％以上的有害目标赤潮藻，甚至1毫升海水中含有1个有害目标赤潮藻也能被检出，指标已达到当今国际先进水平。在此基础上，他们还开发了两种试剂盒，操作简便，每个样品的最短检测时间仅需5分钟。目前该项目已申报专利3项，其中发明专利2项。

仪器信息网讯 2011年10月23日，由中国仪器仪表学会分析仪器分会化学传感器专业委员会主办，湖南大学、上海师范大学和江苏江分电分析仪器有限公司联合承办的2011年第十一届全国化学传感器学术会议在湖南长沙市芙蓉华天大酒店成功召开。此次会议盛况超前，学术报告及参会人员都超过预期。本次会议最后统计共包括了11个大会报告，42个分会邀请报告，58个口头报告，以及100多篇论文报展。 　　2011年10月23日下午，第二分会场，湘园厅。 会议现场 朱俊杰教授(南京大学) 报告题目：量子点功能化与电化学生物传感 　　朱俊杰教授在报告中介绍了课题组近期在量子点的组装、功能化和电化学生物传感等方面的研究工作。主要内容：构建了核壳型结构的CdSeTe/ZnS量子点，表现出很强的电致化学发光(ECL)行为；制备了石墨烯-CdSe复合材料并构建ECL生物传感器，主要应用于人免疫球蛋白的检测；发展了石墨烯-金点ECL生物传感器并将其用于过氧化氢的检测；构建了同时检测两种心脏标志物的电化学免疫传感器用于cTnI和CRP的测定；制备核壳结构的SiO2@ CdTe量子点纳米复合物，构建了新型的凝集素功能化的纳米探针等。 蒋兴宇教授(国家纳米科学中心) 报告题目：基于微纳尺度技术传感器的应用研究 　　蒋兴宇教授在报告中主要介绍了微纳尺度材料和技术的应用研究。将功能化的纳米材料与微流控技术相结合，可降低检出限，缩短反应时间。主要研究内容：基于金纳米颗粒表面修饰螺吡喃分子用于水相中铜离子的检测；正电荷修饰的金纳米颗粒高灵敏度的检测水相中的汞离子等。蒋教授在报告中还提到，希望将这类基于颜色变化的离子检测方法与芯片技术结合，实现芯片上的分析。 许丹科教授(南京大学) 报告题目：生物微阵列芯片检测新方法的研究 　　许丹科教授在报告中介绍了课题组在生物微阵列芯片检测新方法的特点，并介绍了课题组相关工作。许教授课题组建立了基于纳米银的电化学阵列芯片检测新方法，并开展了四种病毒DNA片段的同时电化学检测方法。在蛋白质微阵列检测方法的研究中，制备了金属荧光增强机制的新型生物探针，降低了检测限。此外该课题组还将纳米银生物检测探针成功应用于可视化蛋白芯片的检测方法中，建立了一种基于蛋白质微阵列的药物多靶点筛选方法。 由天艳研究员(中国科学院长春应用化学研究所) 报告题目：电纺碳纳米纤维及其复合材料在电分析化学中的应用 　　由天艳研究员在报告中主要介绍了采用静电纺丝技术与热处理方法制备的碳纳米纤维及其复合材料在电分析化学中的应用。主要介绍了以下三个方面的内容：电纺碳纳米纤维在电化学传感器中的应用；电纺Pd纳米粒子/碳纳米纤维复合材料在电分析中的应用；电纺Ni纳米粒子/碳纳米纤维复合材料在无酶传感器中的应用。 刘清君副教授(浙江大学) 报告题目：中华蜜蜂化学感受蛋白阻抗传感器的研究 　　刘清君副教授主要介绍了中华蜜蜂CSP3阻抗传感器的原理及特点。可以利用此传感器测量环境中的微量配体物质，并可用来检测不同昆虫的化学感受蛋白与不同物质间的反应，便于对化学感受蛋白进行更深入的研究。这对于阐明昆虫与环境化学信息联系规律及昆虫行为本质原因等具有重要的理论和实践意义。 　　此外，来自南京大学的夏兴华教授等也在本会场做了精彩的报告。

2011年12月8日&mdash 11日，由岛津公司主办的MALDI-TOF热点研究领域学术交流会在海南三亚市顺利召开，来自国内科研院所、高校、疾病预防控制中心、出入境检验检疫局等各地专家与会。会议以研讨的方式进行，为业内专家们提供了面对面交流机会，学术氛围浓郁，受到专家来宾们的欢迎和好评。 交流会主题围绕岛津特色质谱技术的两大热点研究领域展开： 主题一，离子阱（QIT）TOF在糖组学分析中的关键作用。核酸、蛋白质、糖类是生物体中能够通过由单体向多聚体的组合式构建，编码巨大容量生物信息的三大类生物分子。基因组、转录体组、蛋白质组、糖组分别代表了生命活动赖以实现的四大核心生物分子相互作用网络层次。二十一世纪以来，糖组学在国际学术界和新兴产业界均得到了高度关注。质谱用于糖结构的分析起源于上世纪六十年代，但时至今日，质谱方法用于糖蛋白组学的研究仍然面临巨大挑战，而岛津公司独有的离子阱（QIT）TOF可以为您在通往糖组学研究的成功道路上扮演关键角色。 主题二，现代微生物快速分类最新进展&mdash &mdash MALDI TOF法。目前常用的微生物鉴定方法都是基于微生物形态学、细胞生理生化特点，以及核酸基础建立的。操作过程复杂、费时，且分子生物学方法费用较高，不适于常规应用。近年来，基于蛋白质组学的质谱技术凭借其高灵敏度、高通量、快速的特点在微生物检验和鉴定方面得到了快速发展。质谱技术对未知微生物的分析主要通过与已知数据库进行匹配，匹配率最高的为未知微生物的鉴定结果，与岛津MALDI-TOF相结合的生物梅里埃SARAMIS数据库是目前最专业的微生物鉴定软件，数据库信息丰富。MALDI-TOF MS是临床微生物实验室可选择的快速、准确的鉴定方法，该方法的使用可以优化实验室检测流程、减少试剂、耗材及人力。使用该技术对临床标本直接进行微生物检测并进行研究及标准化，将对临床诊疗提供更大的帮助。岛津公司最新推出的AXIMA&ndash iDPlus 微生物鉴定系统将完美地为您解决该领域难题。 会议由岛津公司市场部胡晓慧女士主持，开场由岛津公司生命科学与临床医学事业推进部刘志牛部长发表致辞，他表示此次岛津非常荣幸地邀请到相关学术界专家们相聚在美丽的三亚，共同探讨离子阱（QIT）TOF在糖组学分析中的应用以及MALDI-TOF法现代微生物快速分类两大研究热点，并感谢了到场专家们一直以来对岛津高端质谱的支持及认可。此次交流会特邀报告5个，展示该两大热点最新研究成果，并进行热烈积极的学术讨论针对性解决相关研究领域问题。 会议现场 岛津日本总部ADC高级R&D工程师山崎雄三博士 会议报告开始，首先由岛津日本总部ADC高级R&D工程师山崎雄三博士发表离子阱（QIT）TOF在糖组学分析及临床疾病相关标志物研究中的应用报道&ldquo Applications for biological fields using AXIMA MALDI-TOFMS &ndash fundamental techniques-&rdquo ，介绍了岛津独有的离子阱（QIT）TOF AXIMA-RESONENCE 在脂质、多糖、磷酸肽、ncRNA相关方面的分析应用。该报告体现了岛津高端质谱应对糖组学研究最新局面的解决方案，受到在场专家们的一致肯定。 中科院生物物理研究所李岩研究员 随后是中科院生物物理研究所李岩研究员的&ldquo 糖蛋白质组学和糖组学技术在临床研究中的应用&rdquo 报告, 具体阐述了在临床样品处理和实际应用价值上岛津独特的MALDI离子阱（QIT）TOF优于其他质谱的原因。 复旦大学医学院任士芳博士 接着是复旦大学医学院任士芳博士报告&ldquo C型凝集素样受体CLEC-2的N-糖链结构和功能研究&rdquo ,展示了岛津离子阱（QIT）TOF为其所在课题组建立的糖蛋白平台贡献的重要数据，同时还赞扬了岛津团队对课题组的长期帮助支持，体现了岛津竭力为客户打造一体化优质服务的成果，得到在场各位专家的认可。 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所张建中所长 在微生物鉴定主题中，由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所张建中所长做 &ldquo 飞行质谱技术在微生物鉴定领域的应用与展望&rdquo 报告，介绍了MALDI-TOF在微生物鉴定方面的远大应用前景，风趣机智的谈吐紧紧抓住了在场每一位的注意力。张所长对各仪器厂家在微生物鉴定领域的水平了解颇深，他在肯定了岛津微生物鉴定系统的同时，还生动地将岛津微生物鉴定系统比作高清单反相机，岛津的优势形象地跃然纸上，同时他也列出众多权威的国际文献调研进一步印证岛津在该领域无可争议的优势。 岛津公司Kratos MALDI TOF应用专家Gina Eagle博士 最后由岛津公司Kratos MALDI TOF应用专家Gina Eagle博士报告，题目&ldquo AXIMA&ndash iDPlus A New Era in Microbial Research using MALDI Mass Spectrometry&rdquo ，介绍岛津微生物鉴定系统本身的同时，更加强调了选择岛津AXIMA-Confidence以上型号MALDI TOF的意义所在。Gina再次指出岛津与其他仪器厂家的微生物鉴定系统相比的优势，也谈到欧美微生物鉴定专家们已广泛接受VITEK MS（岛津与梅里埃合作）。参会专家们对微生物鉴定表现出极大兴趣。现场专家们积极提问 会议现场 会议结束后，岛津安排了大家留影纪念。参会专家们非常感谢岛津提供这样机会难得的学术交流平台，能够针对性地面对面进行热点研究领域问题交流，形成良好的互动效果。专家们亦纷纷表示此次确实是一次高水平学术交流会，收获颇丰，了解了相关学术界最新动态发展，同时对岛津的高端质谱有了更新更深入的认识。 参会人员合影留念 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所为扩大中国事业的规模，于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司。 目前，岛津企业管理（中国）有限公司在中国全境拥有12个分公司，事业规模正在不断扩大。其下设有北京、上海、广州分析中心；覆盖全国30个省的销售代理商网络；60多个技术服务站，构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。 岛津作为全球化的生产基地，已构筑起了不仅面向中国客户，同时也面向全世界的产品生产、供应体系，并力图构建起一个符合中国市场要求的产品生产体制。 以&ldquo 为了人类和地球的健康&rdquo 为目标，岛津人将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn。

植物案例MST技术植物在整个生命周期中会经受多种微生物病原的侵袭，包括真菌，细菌，病毒，线虫等，作物约30%的产量损失是由病原体造成的，病害是农业可持续发展面临的主要问题。在植物与病原数百万年的协同进化中，植物与病原的互作经历了很多阶段，为掌握植物与病原互作中的重要信号分子，深入了解植物免疫分子机制，不可避免的要进行分子间互作的检测，今天来看一下微量热泳动（MicroScale Thermophoresis, MST）分子互作技术在植物抗病方面的应用吧！1植物与真菌--蛋白和离子Gao, Mingjun, et al. "Ca2+ sensor-mediated ROS scavenging suppresses rice immunity and is exploited by a fungal effector." Cell 184.21 (2021): 5391-5404.植物如何平衡抗病和生长发育平衡，中国科学院分子植物科学卓越创新中心何祖华团队研究揭示了以ROD1为免疫抑制中枢，通过降解超氧活性因子ROS，抑制植物的免疫反应，平衡植物防御和生长之间的冲突。水稻中，ROD1编码一种Ca2+传感器蛋白，以Ca2+依赖的方式结合到磷酸肌醇脂质，靶向至特定膜区域。ROD1刺激过氧化氢酶CatB的活性，促进活性氧(ROS)清除，抑制免疫；当有稻瘟菌侵染时，植物通过降解ROD1减弱其功能，产生有效的防卫反应。作者使用MST技术检测ROD1可直接与Ca2+结合，并鉴定出活性结果位点。图注：MST技术分析ROD1与Ca2+的亲和力和活性结合位点另一方面，研究发现病原稻瘟菌中具有与ROD1结构类似的毒性蛋白AvrPiz-t，在植物体内盗用ROD1的免疫抑制途径，实现侵染的目的，进而与病原菌共同生存。通过MST检测到AvrPiz-t与Ca2+结合，进而盗用ROD1途径。图注：MST技术比较ROD1和AvrPiz-t的Ca2+结合活性2植物与细菌--蛋白和蛋白（Dimmer)Xu, Ning, et al. "A plant lectin receptor-like kinase phosphorylates the bacterial effector AvrPtoB to dampen its virulence in Arabidopsis." Molecular plant 13.10 (2020): 1499-1512.质膜定位受体样激酶(RLKs)感知植物中保守的病原相关分子模式(PAMP)，触发免疫(PTI)。拟南芥凝集素受体激酶LecRK-IX已被证明调节细菌鞭毛蛋白来源肽flg22诱导的PTI。而许多病原体分泌的效应蛋白可抑制植物免疫。植物中是否存在某种机制抑制或削弱病菌分泌的效应蛋白的功能？中科院微生物所刘俊研究组研究发现效应蛋白AvrPtoB是丁香假单胞菌的主要毒力效应子。AvrPtoB C端有一个功能的E3连接酶结构域，以植物中的鞭毛识别受体FLS2和几丁质识别受体CERK1为目标进行降解，导致PTI的抑制。本研究中，作者发现效应蛋白AvrPtoB与拟南芥凝集素受体激酶LecRK-IX.2相互作用并泛素化降解LecRK-IX.2，抑制其介导的免疫。AvrPtoB在体外和体内都能形成二聚体，这种二聚体形成对其E3连接酶与底物的结合和泛素化所必需的。然而, LecRK-IX.2能与AvrPtoB S335位点互作并使其磷酸化，S335的磷酸化破坏AvrPtoB二聚体状态，导致其抑制PTI反应的毒力下降。作者的研究表明，宿主RLKs可以修饰病原体效应器，以抑制其毒性，并削弱其抑制PTI的能力。图示：AvrPtoB对LecRK-IX.2的泛素化与其被磷酸化竞争模式图为了检测AvrPtoB与自身以及与LecRK-IX.2亲和力大小，作者进行MST实验。结果表明，AvrPtoB与LecRK-IX.2的亲和力（0.02μM）要远高于其自身形成二聚体的亲和力（18.7μM）,表明AvrPtoB更容易与LecRK-IX.2结合。图注：MST技术检测AvrPtoB自身以及与LecRK-IX.2CD3植物与病毒--蛋白与离子/核酸/蛋白Yao, Shengze, et al. "The key micronutrient copper orchestrates broad-spectrum virus resistance in rice." Science Advances 8.26 (2022): eabm0660.铜是植物生长发育的重要调节剂，然而铜对病毒入侵的反应机制尚不清楚。之前的研究表明，SPL9介导的miR528转录激活为已建立的AGO18- miR528 - L- AO抗病毒防御增加了一个调控层。北京大学李毅课题组研究发现，Cu2+通过抑制SPL9的蛋白水平来抑制miR528的转录激活，进而提高ROS水平，增强AO积累量及其酶活，从而加强抗病毒反应，阐明了铜稳态的分子机制、调控网络以及SPL9-miR528-AO抗病毒途径。为了检测SPL9和Cu2+之间的直接相互作用，作者纯化了SPL9 DNA结合区域（SPL9 SBP），使用Monolith分子互作仪检测其与Cu2+的互作。结果显示SPL9 SBP直接与Cu2+结合，但不与Ca2+结合。图注：Monolith检测SPL9与Cu2+亲和力此外，李毅课题组在2020年研究结果解析了植物体内抗病毒RNAi信号通路，同样用到了MST技术。Yang, Zhirui, et al. "Jasmonate signaling enhances RNA silencing and antiviral defense in rice." Cell Host & Microbe 28.1 (2020): 89-103. 水稻抗病毒RNAi信号通路的核心蛋白AGO18受病毒侵染诱导，进而增强水稻的抗病毒免疫；但是病毒侵染如何诱导水稻AGO18的了解很少。北京大学李毅课题组发现病毒外壳蛋白（CP）过表达能够诱导水稻茉莉酸（JA）的显著积累，JA信号通路的关键转录因子（JAMYB）能够结合并激活AGO18的启动子，从而诱导AGO18的表达，抑制病毒的侵染。为了分析AGO18启动子上的顺式作用元件，作者进行了MST实验。将顺式作用元件带上FAM荧光，作为荧光信号源，检测到JAMYB结合在AGO18启动子上的顺式作用元件R3，R3突变后AGO18和JAMYB丧失结合能力，进而确定了该位点对于AGO18转录调控的重要性。图3. MST检测的JAMYB和AGO18 R3区域的结合（蓝色曲线）此外，作者通过MST实验发现，水稻JAZ6蛋白能够通过与JAMYB相互作用来抑制其转录激活活性，表明JAZ6抑制水稻抗病毒RNA沉默并损害水稻抗病毒免疫反应。图2. MST检测的JAMYB和JAZ6的结合该研究揭示了植物JA信号通路与RNAi信号通路协同参与水稻抗病毒防御的分子机制。4植物与线虫--蛋白和多肽Zhang, Xin, et al. "Nematode-encoded RALF peptide mimics facilitate parasitism of plants through the FERONIA receptor kinase." Molecular plant 13.10 (2020): 1434-1454.植物寄生线虫是全球性的粮食作物病虫害之一，然而线虫与宿主植物相互作用的机理仍尚不清楚。植物细胞膜上的受体蛋白FERONIA及其配体RALFs参与调节植物免疫反应。湖南大学和中国农科院植物保护研究所联合解析研究发现FERONIA突变导致植物对RKN表现出低敏感性。另外，作者在6类根结线虫中鉴定了18种RALF-like基因，编码的小肽可以直接结合到FERONIA的胞外结构域，从而“挟持”植物FER信号途径，破坏植物免疫系统，促进寄生。研究时，为了检测了线虫RALF- like小肽 MiRALF1/3是否同拟南芥At-RALF1具有相似的FER结合模式,作者使用MST进行检测。结果显示MiRALF1/3与FERECD亲和力分别是25μM和64μM，而AtRALF1亲和力略高，Kd为1.7μM，证明了线虫RALF -like具有植物RALF的典型活性，且可以结合FER。图注：MST检测FERECD与AtRALF1、MiRALF1或MiRALF3之间的亲和力在病原物和植物的识别到特定的防卫反应过程中，二者通过互作进行信号的传导，通过MST技术检测明确二者互作过程中的识别，免疫激发，通路调控和协同进化的详细机制，更好的分析和比较分子间作用和通路的调控。无论是植物和各种病原物的组织来源，均可在MST上完成检测，助力植物病理科学家们更好的解析植物和病原物的互作和协同进化。

2021年全国糖科学与糖工程学术会议暨产业论坛会议通知（第二轮）为促进我国糖生物工程领域的合作交流，加快国内糖科学和糖工程的发展，由中国生物工程学会糖生物工程专业委员会、中国生物物理学会糖生物学分会和重庆医科大学联合主办，重庆医科大学药学院、中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室、南方科技大学和上海科技大学承办的“2021年全国糖科学与糖工程学术会议暨产业论坛”定于2021年7月9-12日在重庆市举行。本次会议将邀请国内外糖化学、糖生物学及糖工程等领域知名的专家、学者和业界人士等，围绕“糖科学与糖工程产业”，共同研讨糖链结构功能、制备技术、检测分析方法，以及糖类药物、营养食品、生物医用材料研究开发等相关领域的最新研究进展和成果，并就我国糖生物工程产业的现状及产业结构升级展开多视角、跨学科的交流。热忱欢迎国内外糖科学和糖工程领域的各位专家、学者、业界人士、研究生等踊跃投稿、到会交流！现将有关事项通知如下：一、会议时间和地点时间：2021年7月9-12日（7月9日报到；10-11日会议；12日离会）。地点：重庆市渝州宾馆（重庆市渝中区渝州路168号）。二、会议组织主办单位： 中国生物工程学会糖生物工程专业委员会 中国生物物理学会糖生物学分会 重庆医科大学承办单位： 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室 重庆医科大学药学院、南方科技大学、上海科技大学大会主席： 王鹏 杜昱光 执行主席： 于超 三、特邀嘉宾报告人高福院士、张玉奎院士、饶子和院士、朱蓓薇院士、邵峰院士四、分会场主题与召集人信息分会场一：糖链合成与分析新方法新技术主题内容：糖链合成新方法，糖组、糖芯片、糖链标记示踪新技术等召集人：叶新山（北京大学）、陆豪杰（复旦大学）分会场二：糖链/糖蛋白生物合成与表达体系主题内容：模式生物的糖链合成与功能，糖酶等召集人：肖敏（山东大学）、陶勇（中国科学院微生物研究所）分会场三：糖链与病原感染 主题内容：糖链在病原感染与机体免疫中的功能，糖疫苗、糖药物及诊断试剂等召集人：章晓联（武汉大学）、彭文杰（上海交通大学） 分会场四：蛋白质糖基化修饰 主题内容：糖基化对蛋白质及细胞功能调控等召集人：张延（上海交通大学）、高晓冬（江南大学）分会场五：糖链与疾病主题内容：疾病过程中糖链功能，糖链、糖复合物在疾病诊断、治疗中的作用等召集人：张嘉宁（大连理工大学）、关锋（西北大学）分会场六：多糖/寡糖结构功能与应用技术 主题内容：动植物、微生物来源多糖/寡糖的结构与功能，植物/微生物凝集素等召集人：周义发（东北师范大学）、尹恒（中国科学院大连化学物理研究所）分会场七：肠道微生物糖组与营养健康主题内容：糖链与人/动物营养健康，糖链与肠道微生物等召集人：丁侃（中国科学院上海药物研究所）、余冰（四川农业大学）五、会议日程DAY 1（7月9日）全天参会代表报到14:00-18:00专委会工作会议DAY 2（7月10日）08:00-09:45开幕式、张树政奖颁奖仪式、大会特邀报告09:45-10:00茶歇10:00-12:00大会特邀报告12:00-13:30午餐、休息13:30-15:30分会场报告15:30-15:45茶歇15:45-17:45分会场报告19:00-21:00晚宴DAY 3（7月11日）08:00-09:45分会场报告09:45-10:00茶歇10:00-12:15分会场报告12:15-13:30午餐、休息13:30-15:30大会特邀报告15:30-15:45茶歇15:45-17:15大会特邀报告17:15-17:45糖工程产业论坛17:45-18:05闭幕式、优秀论文颁奖仪式六、会议征文及墙报要求　　1、会议摘要征文要求　　会议摘要全部通过http://csbt.scimall.org.cn/meeting/TGC/ 网站投稿，截止日期为2021 年5 月10 日。会议摘要将全部收录于会议论文集；会议报告从投稿申请中选取。会议摘要使用Word文档，限A4 纸1 页以内：题目：宋体及Times New Roman字体，小四号，1.5倍行距，居中。作者：宋体及Times New Roman字体，五号，1.5倍行距，居中。单位和邮箱地址：宋体及Times New Roman字体，小五号，1.5倍行距，居中。正文宋体及Times New Roman字体，五号，1.5倍行距，限A4纸1页以内。2. 墙报交流：大会将设墙报区。墙报推荐按照0.9米*1.2米（竖型）设计，由参会代表自行制作。会议现场注册时交给会务人员。七、会议奖项1. 张树政糖科学奖：设立“杰出成就奖”和“优秀青年奖”两个奖项，其中杰出成就奖1名，优秀青年奖3名（其中糖生物工程1名、糖化学1名及糖生物学1名），具体参见“2021年张树政糖科学奖评选的通知”。2. 青年优秀论文/墙报奖：为奖励优秀青年学生学者，本次会议将设立青年优秀论文/墙报奖约10-15名，获奖者由会议组委会组织评定并授予奖状及奖金。八、会议注册、缴费及住宿预定： 1. 报名参会：通过http://csbt.scimall.org.cn/meeting/TGC/ 网站注册，注册费用可通过银行转账缴费或现场缴费完成，学生凭有效学生证注册；与会人员交通差旅费和食宿费自理。会议注册提前缴费（2021年5月31日前）（RMB） 后期缴费及现场缴费（2021年5月31日后）（RMB）正式代表 16002000学生代表 10001400企业代表 24002800缴费程序：扫描以下二维码，进入“缴会务费”，填写代表信息后微信缴费。“缴费记录”里可查询缴费信息。 2. 会议住宿（1） 重庆渝州宾馆（地址：重庆市渝中区渝州路168号）房 型景园/悦大床房景园/悦双床房会议价480元480元（2） 重庆万友康年大酒店（地址：重庆市渝中区长江二路77号）房 型标准大床房标准双床房会议价368元368元（3） 重庆冠君大酒店（地址：重庆市渝中区大坪正街160号万科锦程3栋）房 型豪华大床房豪华双床房会议价190元190元九、会议赞助及糖工程相关企业产品展示会议诚邀糖工程相关企业厂商赞助本次会议，大会提供协办、分会场冠名、青年优秀论文/墙报奖冠名、会议资料单品赞助、会刊广告、标准展位等形式的展示方式。详情请咨询：焦思明 18611058165十、会务联系方式王倬 tswgc@ipe.ac.cn 010-82545039 中国科学院过程工程研究所张兵 zhangbing@shanghaitech.edu.cn 15921318107 上海科技大学马丽梅 malimei@cqmu.edu.cn 15608225605 重庆医科大学中国生物工程学会糖生物工程专业委员会中国生物物理学会糖生物学分会重庆医科大学2020年4月

组织透明化和光片显微镜诞生的必要性生物组织的三维特性使得生命科学的研究都需基于3D空间信息而进行分析，如脑部神经投射、血管分布以及肿瘤微环境等。传统组织学检测包括对冰冻或者石蜡包埋的组织样本进行切片，从而产生微米级别的切片，研究者可以对该切片进行免疫组化染色从而获得细胞层面信息。生物学家早就认识到组织薄切片比厚组织观察起来更加容易，显微切片机将组织切割成微米厚度的二维切片，通过二维切片我们可以获得单细胞层面的信息(Richardson & Lichtman, 2015)。但是三维组织结构可以让人们全面理解器官在正常功能和病理状态下的关键信息，例如神经系统就迫切需要进行三维结构的成像，因为大多数单个神经元向许多方向延伸，它们的真实性质和功能无法通过二维切片来确定；此外，发育生物学需要在三维结构上才能更好的认识器官甚至整个动物的形态发生(Chung et al., 2013)。因此获取完整生物组织在单细胞分辨率尺度上的三维结构一直是生命科学领域的重要目标之一。怎样才能获得组织的三维层面信息？一种方法是通过将一系列连续的切片输入电脑进行三维结构重建，但是这种方法在技术上具有挑战性，因为组织在此过程会被撕裂、折叠、压缩或拉伸从而导致组织某个部分的损失或变形，由于剖面不完整，最终的体积重建可能无法还原最原始的三维结构(Oh et al., 2014)。还有一种方法是使用光学切片技术进行整体成像，比如激光共聚焦、双光子显微镜和转盘显微镜等成像显微镜的使用，这些成像显微镜可以对小组织进行三维结构成像，但是这些现代的显微技术没办法解决组织太厚带来的严重速度滞后问题，以及强激光造成的光漂白、光毒性等问题。光学成像与细胞荧光标记相结合，因其具有良好的空间分辨率和高信噪比，是收集器官或组织单细胞分辨率信息的实用方法之一。然而，组织不透明是全组织和全器官光学成像的主要障碍之一，因此要进行光学成像就要进行组织透明化。那么是什么原因导致组织不够透明？在组织中，生物物质如水、脂类、蛋白质和矿物质通常以不均匀的混合物存在，它们的不均匀分布导致光发生强烈的横向散射，此外，生物物质有时会在细胞内外形成不均匀的结构，包括脂质颗粒和细胞器（如线粒体）、大的蛋白质簇（如胶原纤维）、甚至全细胞体积（如红细胞），当光被分子、膜、细胞器和组织中的细胞反射时，本来应该以直线传播的光线会发生多次偏移，因此光不能直接穿过组织从而形成光的散射(Tuchin, 2015 Wen, Tuchin, Luo, & Zhu, 2009)。组织不透明的另一个原因是光的吸收，血红蛋白、肌红蛋白和黑色素是生物组织中吸收可见光的主要分子，血红蛋白存在于所有脊椎动物（除了鳄鱼、冰鱼）和许多无脊椎动物中，样品内的光吸收可以限制激发光进入组织和荧光发射返回到探测器(Richardson & Lichtman, 2015)。正是由于光的散射和光的吸收，导致光的分布加宽、光的强度衰减，特别是在组织的深层区域，最终导致组织不透明，无法进行全组织三维结构光学成像。因此，组织透明化的目的主要是减少光的散射和吸收，以获得更好的光学成像效果（图1）(Gracie Vargas, 2001)。图1 实现组织透明化的关键步骤 (Susaki & Ueda, 2016)当光穿过组织时，由于脂质、色素的存在，导致光发生散射和吸收，从而组织不透明；组织透明化最主要的目的是通过脱脂、脱色等步骤从而减少光的吸收和光的散射。三种组织透明化方法类型：有机溶剂型、水溶剂型、水凝胶型经科学家的不断研究和突破，多种组织透明化方法相继被提出和优化。组织透明步骤包括：①样本固定；②样本透化（依据组织特性选择脱脂、脱钙、脱色、脱水或水化）；③折射率匹配。有机溶剂型透明化方法还涉及到组织脱水过程，根据组织成像需要还要涉及到样本免疫标记(图2)(Almagro, Messal, Zaw Thin, van Rheenen, & Behrens, 2021)；为了避免组织发生形变以及检测目标丢失，在透明化之前必须进行样本固定，但是固定程度需要控制，如果固定太弱，组织会软榻，如果固定过头，会阻碍免疫标记；一般使用多聚甲醛（PFA）、戊二醛（GA）进行组织固定，PFA可以均匀的固定大于500微米直径的样品，GA比PFA固定效果好，但是速度慢（分子较大，扩散速度慢），SWITCH方法通过改变pH提高GA效率，GA一般适合固定脆弱以及蛋白表达较弱的组织；在组织切片中我们通过抗原修复减少醛固定时造成的抗原表位封闭（二硫键），在水性透明化方法SHIELD采用聚甘油-3-聚缩水甘油醚（P3PE）既能固定组织又能保存蛋白质；透化过程中用到的试剂主要有三种类型：①有机溶剂；②高水化试剂；③脱脂试剂；随后用高折射率的物质替换组织液体进行折射率匹配，实现组织透明。(Park et al., 2018)。图2 组织透明化基本流程(Almagro et al., 2021)(a) 不同来源样本获取。(b) 用不同方式（去垢剂、醇类化学试剂、电泳）增加组织通透性。(c) 组织标记（抗体、染料、凝集素）以及透明化（有机溶剂型透明化方法、水溶剂型透明化方法）。(d) 组织成像（三维数据、定量分析）。依据各透明化方法中使用的溶剂及其作用原理将现有的组织透明化方法主要分为三类：有机溶剂型、水溶剂型、水凝胶型（图3）(Matryba et al., 2020 Ueda et al., 2020b)。基于有机溶剂的组织透明化方法通过使用高折射率（RI）的有机溶剂将不同成分的RI均质，从而获得极好的组织透明度。BABB组织透明化方法可以完全透明胚胎和幼鼠大脑(Dodt et al., 2007)，但该方法中乙醇脱水作用会导致内源性GFP信号淬灭，无法透明有髓组织。通过引入四氢呋喃（THF）和二苄醚（DBE）, 3DISCO能够实现大多数成年啮齿动物器官的良好透明度，并将FPs保存几天，虽然DBE能有效保护内源荧光信号，但是DBE降解产物如过氧化氢、醛类物质会对荧光蛋白产生有害干扰(Erturk et al., 2012)。与3DISCO相比，uDISCO能够实现全身透明化和成像，并在数月内保持内源性FPs(Pan et al., 2016)。a-uDISCO是uDISCO的改良版本，通过调节pH条件提高荧光强度和稳定性(Li, Xu, Wan, Yu, & Zhu, 2018)。然而，uDISCO和a-uDISCO都不能有效的透明化高度着色的器官和硬组织。为了解决这些限制，赵瑚团队开发了聚乙二醇(PEG)相关溶剂系统(PEGASOS)，该系统可以透明所有类型的组织，同时保留内源性荧光(Jing et al., 2018)。朱丹教授团队通过温度和pH值调节开发了一种基于3DISCO，称为FDISCO，FDISCO有效的保存了FPs和化学荧光示踪剂，并允许在几个月内重复拍摄样品(Qi et al., 2019)。最近开发的sDISCO通过添加抗氧化剂稳定DBE，进一步保留了荧光信号。蛋白质也可以通过免疫标记来观察。由Renier等人开发的iDISCO可以对小鼠胚胎和成年器官进行全贴装免疫标记和体积成像(Renier et al., 2014)。vDISCO是一种基于纳米体的全身免疫标记技术。该技术将FPs的信号强度增强了100倍以上，并揭示了Thy1-GFP-M小鼠的全身神经元投射(Cai et al., 2019)。虽然有机溶剂方法表现出出色的透明性能，并实现了亚细胞分辨率的全身成像，但也存在一些不足，例如样品的大幅收缩、大多数有机溶剂的毒性和荧光蛋白的猝灭。由于油性透明化方法存在诸多缺点，水性透明化方法诞生，水性与油性透明化方法最大区别在于水性试剂具有强亲水性，更有利于荧光信号的保存，适用于自带荧光的组织样本进行透明化。水性透明化试剂主要包括：单纯浸泡透明化和高水化脱脂透明。ClearT是基于甲酰胺的浸泡型透明化方法，速度快，但是会导致组织膨胀且荧光信号会淬灭。PEG可以稳定蛋白质构象，继而发展了可保留荧光蛋白的ClearT2透明化技术，但该方法透明度比ClearT低。SeeDB技术以果糖和硫代甘油为主要成分，可以在几天内将组织透明化，但果糖粘度过高导致组织内渗透性低，在此基础上衍生出FRUIT透明化方法，尿素的使用降低了果糖粘度，提高试剂流动性和渗透性。浸泡型透明化方法不能去除脂质，因此样本透明度有限。SDS、Triton X-100可以有效去除脂质，水化法通过在透明化过程中去除脂质，利用水化作用降低样本折射率进而实现组织透明化。Scale技术利用尿素水化作用进行透明化，可保留荧光信号，但该方法操作时间较长，易导致组织破碎。CUBIC在Scale基础上添加了胺基醇，可以去除血红素使组织脱色,也可以保留荧光信号(Tian, Yang, & Li, 2021)。水凝胶解决了高浓度去垢剂导致样本形变的问题，水凝胶与样本中蛋白质和核酸分子形成共价连接便可以固定和保护细胞结构。水凝胶型组织透明化方法是一种基于水凝胶的组织透明化方法，利用丙烯酰胺凝胶将生物分子固定在它本来的位置，用水凝胶来替换组织中的脂类，让溶液中的单体进入组织，然后对其稍微加热，上述单体开始凝聚为长分子链，在组织中形成高分子网络，这一网络能够固定组织的所有结构，但不会结合脂类，随后快速将脂类抽出，便获得了完整透明的立体组织，如脑组织中的神经元、轴突、树突、突触、蛋白、核酸等都完好的维持在原位。这种独特的组织脱脂方法能够最小化结构破坏和生物分子损失。该方法的脱脂方式主要有两种：电泳和简单被动脱脂，均能有效去除脂质，从而大大提高了水凝胶组织的光学透明度和大分子通透性(Chung et al., 2013 Treweek et al., 2015)。CLARITY透明化方法利用凝胶包埋样本，并利用电场力去除脂质使样本快速透明；SHIELD通过环氧化物P3PE固定组织实现蛋白的保护，之后使用SDS进行被动或主动脱脂。水性透明化方法虽然可以部分解决荧光蛋白易淬灭的问题，但是也存在透明时间长，透明能力低的缺点，一般适用于小样本组织透明化。水凝胶透明化方法操作过程复杂，且需要一定的设备。图3 组织透明化方法的主要类型 (Ueda et al., 2020b)(A) 有机溶剂型透明化方法通过使用有机溶剂依次将组织进行脱水、脱脂、折射率匹配，在短时间内可使组织完全透明。然而，有机溶剂会快速漂白荧光蛋白的信号并且使组织皱缩。(B) 水溶剂型透明化方法以水溶性试剂对组织依次进行脱色、脱脂、折射率匹配，从而使组织完全透明。该方法具有更高的生物安全性和兼容性。(C) 水凝胶型透明化方法通过凝胶将生物分子固定在原来的位置，随后对组织进行脱色、脱脂、折射率匹配操作，从而使组织透明。基于水凝胶的方法可以保留足够的RNA用于分析，如荧光原位杂交；由于水凝胶网会固定组织，因此会使组织体积扩大几倍。组织透明化方法的选择（对于不同检测目标、不同组织、含有特定化学成分的组织选择的组织透明化方法以及试剂不同）组织透明化从2014年兴起以来，前期主要在神经科学领域广泛应用，随着透明化方法的不断改进，目前在发育生物学、免疫学、肿瘤学研究中也被广泛应用。检测目标不同，透明化方法中的试剂选择不同，水凝胶适用于不稳定分子如RNA的保存，CLARITY方法中用到的化学试剂单丙烯酰胺或双丙烯酰胺对细胞内部结构进行很好的固定，使得在后期脱脂等处理后组织内部结构依然保持；常用的样本固定试剂是甲醇，在使用过程中可以较好的固定蛋白质（表1）(Almagro et al., 2021)。表1 不同试剂适用于不同检测目标(Almagro et al., 2021)水性试剂蔗糖和尿素对内源性荧光试剂、脂类试剂比较友好；而有机溶剂苄醇-苯甲酸苄酯(BABB)会造成脂质洗脱和蛋白质荧光基团淬灭，所以不能用于脂肪组织的检测；聚乙二醇(PEG)是有机溶剂型透明化方法PEGASOS中用到的试剂，可以有效保护内源性荧光；此外在有机溶剂型透明化方法中可以通过调节pH、温度达到保护荧光的效果，如FDISCO在四氢呋喃(THF)中，维持碱性pH和低温下，EGFP荧光信号可以维持数月（表2）。此外，免疫标记中使用的小分子染料（如细胞核染料DAPI、碘化丙啶、RedDot和SYTO）、凝集素、抗体对目标进行标记，其中抗体被动扩散速度非常慢，免疫染色可以通过优化抗体浓度、温度、孵育时间等提高染色效率；我们也可以通过减小样品体积、用小分子荧光染料代替抗体增强染色效果。也可以通过改变荧光标记的亲和属性如SWITICH方法，让它们在组织中自由扩散再进行结合；通过电泳的方式也可以提高染色效率(Almagro et al., 2021)。 表2不同试剂对于荧光信号的保留(Almagro et al., 2021)此外，某些组织中含有较难去除的成分如色素、脂肪，其中血红素是组织中较难去除的色素，仅仅通过灌注PBS不足以去除肾脏、心脏、肌肉、肝脏中的血红素，可以选择含有漂白剂成分的试剂进行脱色如双氧水，并且能去除自发荧光，但是过氧化物处理会损伤目标荧光蛋白，所以荧光标记一般在漂白之后进行；前列腺和乳腺富含脂肪，会阻碍抗体进入、光线穿透，可以选择含有去垢剂成分的组合如TritonX-100、SDS、CHAPS等进行脱脂，去污剂可以破坏脂质双层使组织形成可以运输出组织的胶束，SHANEL方法中的CHAPS能生成较小的胶束，能更快的从组织中析出，具有有效的去脂效果。当组织较大时，被动去脂速度就比较慢，这时可以通过电泳的方式加快进程；电泳组织透明设备（ETC）和随机电子迁移（使用旋转电场或在单向电场内旋转样品）可以加速去脂。其它类型组织如硬组织骨骼，其中含有的钙化矿物质阻碍光的穿透，50%-70%的骨骼由遍布蛋白基质的钙化羟基磷灰石（HAP）晶体组成，这时可以选择含有钙螯合剂组合的方法如乙二胺四乙酸（EDTA）中性缓冲液，进行脱钙处理（表3）(Almagro et al., 2021)。表3不同试剂对于细胞组分去除(Almagro et al.,2021)组织透明化方法的应用范围不同组织在透明化方法的选择上都有所不同，根据组织成分、检测目标、组织类型选择不同的透明化方法，下表是不同透明化方法在不同健康以及肿瘤组织上的应用实例，对于组织在选择方法的时候可以借鉴这些实例，从而更好的避开长时间的摸索（表4）。表4 不同透明化方法应用到不同肿瘤组织举例(Almagro et al., 2021)此外，利用组织透明化方法可以实现人类器官三维成像（图4）(Ueda et al., 2020a)。图4 人类胚胎组织以及器官透明化三维结构图(Ueda et al., 2020a)(a) 胚胎周围神经三维图像。(b) 泌尿系统中的肾脏和Wolffian管。(c) 胚胎背部、手臂、头部肌肉。(d)手部脉管系统。(e)手部三种感觉神经。(f)肺上皮小管。参考文献Almagro, J., Messal, H. 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中国药典和欧盟药典在蛋白质药物成品检验中规定肽图需要与标准品一致，因为属于鉴别项目，不需要定量比较，所以很多人觉得可以“依葫芦画瓢”尽力就好。事实上，生物类似药的肽谱是需要与原研药完全一致的，另外很多实验员在做肽谱分析时重现性很差，需要实验操作者综合考虑蛋白质本身、实验目的以及预期结果，需要实验员具备优质的样品前处理技术、强大的技术分离能力和信息，才能够获取最佳的蛋白水解消化物分离，并进行肽段的可靠表征分析。所以，别怪我没告诉你，肽谱分析真的“肽”重要了，也是难度很高的一个检测项目。干货太多，今天先从蛋白质酶解的独立开发方案说起。关于蛋白质酶解的独立开发方案，把浓缩过的“精华”给你图为蛋白质酶解的 5 大步骤样品前处理要“量体裁衣”根据蛋白质的大小或结构，样品的前处理方法不尽相同。 在特定的条件下，可能需要进行样品富集，或从所添加的物质和稳定剂（用于产品剂型中）中分离蛋白质，尤其是在这些添加剂会干扰肽谱分析过程时。针对这些流程，现已开发出许多方法，每种蛋白质均具有一套对应的纯化措施或处理方法。但是，酶解前通常会使用一些更常用的方法进行样品纯化，包括去除/富集、透析和凝胶过滤脱盐。去除和富集策略去除和富集策略分别被开发用于去除样品中的高丰度蛋白质或分离目标蛋白质。更多的时候，去除用于蛋白质组学应用，用以降低生物样品（例如，血清）的复杂性，此类样品中含有高浓度的白蛋白和免疫球蛋白。去除策略可以利用免疫亲和技术（例如，免疫沉淀、免疫共沉淀及免疫亲和色谱法）。另一方面，富集技术会根据独特的生化活性、翻译后修饰 (PTM) 或胞内的空间定位分离细胞蛋白的亚类。翻译后修饰（例如磷酸化和糖基化）可使用亲和配体（例如，金属离子亲和色谱 (IMAC) 或固定化凝集素）分别进行富集。为引入独特的蛋白质化学，其他技术需使用代谢或酶促结合修饰后的氨基酸或 PTM。利用透析和脱盐优化样品处理不论是简单的样品还是复杂的样品，常需要通过透析或脱盐对样品进行优化处理，以确保它们酶解过程的兼容性。例如，由于质谱法 (MS) 将测定带电离子，因此必须在 ms 前进行除盐（特别是钠盐和磷酸盐），最大程度减少它们对检测的干扰。透析和脱盐产物可进行缓冲液交换、脱盐或小分子去除处理，以防止对后续过程的干扰。透析是降低样品盐浓度的常规流程。具体步骤是先将样品装入透析袋（袋膜具有特定的孔隙）中，袋口打结，然后将其置入水浴或缓冲液中，通过扩散使盐浓度达到平衡。大分子无法扩散出透析袋，会留在袋内。如果使用水浴，袋内小分子的浓度会缓慢降低直到透析袋内外浓度相同。达到平衡后，即可撕破透析袋，将其中的溶液倒入收集容器中。虽然透析体积可达几升，但对于大量样品却并不实际，因为会需要几天时间才能将盐完全去除。凝胶过滤 (GF) 是最实用的实验室流程凝胶过滤 (GF) 是最实用的实验室流程，可在酶解前对样品进行脱盐。该方法是一种非吸附的色谱技术，可根据分子大小进行分子分离。脱盐可被用于完全去除或降低样品中的盐浓度或其他小分子量成分，而缓冲液的更换则会使用一种新的缓冲液替换样品中的缓冲液。凝胶过滤法是最简单的色谱操作法之一，因为样品均在度洗脱条件下处理。在其分析形式中，凝胶过滤法（也称为体积排阻色谱）可分离分子量差异大于两倍的分子（例如，蛋白质）。在这些应用中，目标分离物质的体积差异非常大（即蛋白质与盐相比）。通过选择凝胶过滤填料，可完全排除较大的分子，同时允许较小的分子自由扩散至 所有的孔隙中。色谱柱使用缓冲液进行平衡，它与样品的缓冲液可能相同，也可能不同。将样品加载至色谱柱后，再添加更多的色谱柱缓冲液（洗脱缓冲液），携带样品分子自上而下地流过色谱柱。较大的分子（不能进入填料的孔隙中）首先从色谱柱中洗脱出来，然后是扩散入孔隙的较小分子，相对于较大的分子，小分子的洗脱时间更长。如果洗脱缓冲液与样品使用的缓冲液不同，则较大的分子会从原始盐中替换出来，并被这种新的缓冲液洗脱，从而从最初的样品缓冲液中完全分离出来。一张图告诉你，化学裂解和酶解怎么选？裂解肽键的方法有两种 ― 化学裂解和酶解，但是到底怎么选，这取决于需要分析的蛋白质和您所期待的结果。一张图告诉你，如何选择酶解试剂。为使蛋白水解酶有效地裂解肽链，需要利用各种试剂对样品进行变性、还原和烷基化。而在酶解的部分还需要对酶解的 PH、酶解时间及温度、还有裂解酶的浓度等因素充分考虑。访问安捷伦《安捷伦生物色谱住关键质量属性应用文集》，了解更多信息。扫描下方二维码，关注“安捷伦视界”公众号，获取更多资讯。

仪器信息网讯 2021年10月23日，由中国化学会色谱专业委员会主办、南方科技大学、中国科学院大连化学物理研究所承办的“中国化学会第23届全国色谱学术报告会及仪器展览会”在深圳维纳斯皇家酒店隆重召开。本次会议为期3天，吸引来自色谱分析领域的近700名专家学者、企业代表参加，就色谱相关的样品制备、高效分离、联用技术、组学应用等话题展开热烈的学术交流。会议现场本次会议共安排了12个大会报告，100个邀请报告，98个口头报告，以及30个经过专家遴选的青年论坛报告。在23号上午，中科院大连化学物理研究所张玉奎院士、深圳原力生命科学有限公司孙勇奎院士、湖南大学谭蔚泓院士、中科院生态环境研究中心江桂斌院士、天津大学元英进教授、南京大学刘震教授共6位学术大咖带来了精彩的大会报告。中科院大连化学物理研究所 中国科学院院士张玉奎报告题目《深度覆盖的蛋白质组样品制备和分离新技术》报告分享了课题组在蛋白质组学样品制备、分离分析等领域最新的研究成果。包括在蛋白组样品制备新方法方面，团队发展了N-磷酸化肽段高选择性富集新方法、单细胞蛋白质组分析新方法等；在蛋白质组分析新材料方面，课题组实现了基于胶体晶体的高峰容量分离和基于整体材料的蛋白质变体分离等基于新材料的蛋白质分离技术。深圳原力生命科学有限公司董事长 美国国家工程院院士孙勇奎报告题目：《中国创新药的历史使命》制药工业，不仅是拉动国民经济GDP的强大引擎，同样也为人类健康带来了重要保障，而创新无疑是制药工业不断发展的强劲动力。近年来，全球制药市场规模不断扩大，其中创新药贡献巨大。中国虽然已成为全球第二大经济体，拥有广阔的医药市场，但在创新药研发领域与发达国家还有很大差距。报告从世界宏观市场、创新药发展意义、中国创新药发展、政策资本动向等角度阐述了当下中国创新药发展的历史阶段和历史使命，同时也分享了对中国创新药发展瓶颈以及路线方法的思考。湖南大学 中国科学院院士谭蔚泓报告题目：《从“硅基运算”到“分子运算”：多靶标解析助力精准医疗》疾病多参数的分子分型是精准医疗的核心，获取多参数分子分型形成的特征图谱，是实现精准治疗的重要手段，也必定成为未来分子医学最重要的发展方向之一。而想要获得多靶标表征及解析多靶标参数来完成分子分型，需要开发多组学的分子识别工具和新型数据算法。报告主要介绍了谭蔚泓院士及其团队，利用核酸适体进行疾病分子分型和模式识别方面所做的研究工作。中科院生态环境研究中心 中国科学院院士江桂斌报告题目：《成组毒理学分析与风险评估》近年来，快速增加的化学品已经成为了环境污染的主要因素，在进入环境的化学品中，仅有极少部分经过了毒性评估，而大量可能会引起生态毒理效应和健康效应的新型环境污染物还未被发现，对于人类健康具有很大威胁，如何识别化学物质的分子结构并评估其毒性成为了环境研究的重要课题。面对数量庞大、体系复杂的新型污染物，单一的毒性评价与化学分析无法满足需求。报告介绍了，课题组在成组毒理学方面的研究成果以及在高通量多功能成组毒理学分析仪器设备研制上的最新进展及其应用成果。天津大学 元英进教授报告题目：《酵母基因组合成及应用》酵母细胞催化剂基础研究和应用广泛，作为一种模式生物，在酵素、辅酶、氧化酶等发现中做出了根本性贡献。而人工合成酿酒酵母基因组也是合成生物学中的旗舰项目。报告主要分享了天津大学元英进教授团队在人工合成酿酒酵母V号和X号染色体及后续相关应用上所做的系列工作，包括酵母基因合成、建立基因组重拍的精准可控方法以及将自主设计合成的酿酒酵母环状染色体进行基因组重排的相关研究成果，同时还探索利用人工合成染色体进行数据存储的应用前景。南京大学 刘震教授报告题目：《仿生分子识别新技术及其生物医学应用》报告主要介绍了课题组利用分子印迹材料这一仿生分子识别新技术，获得了超越于抗体和凝集素的识别性能，并在生物医学领域实现了一系列具有挑战性的重要应用，包括亲和富集、精准疾病诊断、基于单细胞的生物暗物质发现、靶向药物递送、癌症免疫治疗以及病毒抑制等。并提出，先进的仿生识别技术在生命与健康研究和实践中可能提供一系列独特的解决方案，包括肿瘤的靶向识别和诊疗、纳米分子印迹抗癌药物以及病毒防治等等。除大会报告之外，本届全国色谱会还设立了样品制备技术、高效色谱分离、微全分析及联用技术、生物大分子分析、活性小分子分析及青年论坛等5个分会场。在接下来的2天时间里，还将有更多地学术分享和交流活动，请大家持续关注本网报道。

仪器信息网讯 2010年8月20日，由国家自然科学基金委员会化学科学部主办，北京大学、清华大学和中国科学院化学研究所共同承办的“第三届全国生命分析化学学术报告与研讨会”在北京大学召开。研讨会同期召开了“食品分析、药物分析、仪器装置”等多场专题论坛，“药物分析”专题论坛共吸引了300余位业内人士的参加。 　　会议由南昌大学倪永年教授、陕西师范大学张成孝教授联合主持，中国科学院大连化学物理研究所梁鑫淼研究员、北京理工大学屈锋教授、中国科学院大连化学物理研究所秦建华研究员等专家为与会者作了精彩的报告。 倪永年教授 张成孝教授 　　报告人：中国科学院大连化学物理研究所梁鑫淼研究员 　　报告题目：中药复杂体系分离分析新策略与方法 　　梁鑫淼研究员表示，其课题组将高通量制备、高通量SPE浓缩和正交分离三种方法相结合，发展了一种新的分离策略。该策略的应用有利于制备效率的提高、微量化合物和高纯度化合物的制备，对于中药物质基础研究具有重要意义。 　　高通量制备技术能够在短时间内将复杂中药分为大量组成相对简单的小组分，使得后续分离较为容易，分离效率有了明显提高。该课题组以中等极性组分为例，发展了中药小组分的高效高通量制备方法。该方法利用HPLC的高效性，快速将复杂样品切割为组成相对简单的小组分，简化了进一步的纯化分离，有利于制备效率的提高 四通道平行制备色谱的采用，将制备通量提高四倍，在短时间内制备出大量馏分，实现了中药小组分的高通量制备。 　　高通量浓缩技术是高通量制备技术的重要组成部分。由于反相液相色谱流动相中水的比例较大，使得这些小组分浓缩十分困难，成为制约整个制备过程的瓶颈问题。该课题组针对大量中药小组分的浓缩问题，通过SPE填料的选择、高通量SPE浓缩仪的设计、回收率的考察发展了基于SPE的高通量浓缩方法。该方法浓缩效率高，可一次实现48个馏分的浓缩，实现了中药小组分的高通量浓缩。 　　通过高通量制备获得大量的中药小组分，其中一些较为简单的组分可以在不同类型的C18或C8柱上通过二次制备获得纯化合物，但对于较为复杂或含有难分离化合物的组分，这种简单的二次制备很难获得高纯度的化合物。因此，梁鑫淼课题组发展了中药小组分的正交分离方法，选择与C18正交性好的色谱模式或色谱柱，一方面能够对中药小组分进行深入分析，更好地揭示中药的复杂程度 另一方面有利于高纯度化合物的分离制备。 　　报告人：北京理工大学屈锋教授 　　报告题目：毛细管电泳在生物分析检测中的新应用 　　毛细管电泳作为高效、快速、简单、低成本的微量分子技术在生物体(细胞、微生物)和生物大分子(蛋白质、核酸)研究中具有着广泛的应用空间和潜力。 　　屈锋课题组近年来进行了以下研究： 1)针对动物细胞的活性分析，建立了单细胞连续流毛细管电泳双波长检测分析方法和基于特异性染料的毛细管区带电泳细胞活性分析法 2)利用毛细管区带电泳分析大肠杆菌基因突变菌株，探索毛细管电泳在基因突变菌株研究中的新应用 研究了大肠杆菌与核酸适配体库的相互作用，以及毛细管电泳测定微生物表面电荷特征的方法 3)蛋白质与核酸适配体文库的相互作用评价方法，以及多种蛋白质适配体的毛细管电泳筛选方法对比研究 4)离子液与天然核酸和合成核酸的相互作用的毛细管电泳表征研究。 　　报告人：中国科学院大连化学物理研究所秦建华研究员 　　报告题目：微流控芯片生物化学实验室 　　微流控芯片又称“芯片实验室”(Lab-on-a-Chip)，具有将化学、生物实验室的基本操作功能单元缩微到一个几平方厘米芯片上的能力，被认为是本世纪的重要科学技术之一，具有重大应用前景。 　　多年来，秦建华研究员所领导研究组围绕微流控芯片技术、方法以及在生物医学和化学领域中的应用等方面开展了一系列研究工作，建成了具有自主知识产权和核心竞争力的微流控芯片及其应用系统。 　　该研究组在已有的玻璃、石英、PDMS 和PMMA 等不同材料芯片制备方法的基础上，建立了富有特色的基于水凝胶的液塑PDMS 芯片制备技术，和以蜡疏水隔离及硝酸纤维素膜为特征的纸芯片制备技术，构建了一系列功能化微流控芯片平台。 　　据介绍，在发展平台技术的同时，该研究组开展了一系列基于分子、细胞甚至动物水平的生物医学应用研究，并逐渐形成系统和特色：1)构建了集成化芯片核酸分析系统 2)构建了规模集成化芯片免疫分析系统 3)构建了微流控芯片细胞学研究平台，包括细胞水平高内涵药物筛选平台，集成有肝微粒体生物反应器和电泳分离功能的药物代谢研究平台，以及肿瘤细胞与微环境相互作用研究平台(图1)。4)以经典模式生物线虫为对象，建立了基于液滴和微泵阀控制的芯片模式生物药物筛选平台，用于神经退行性变疾病(帕金森病)研究。 　　报告人：广西师范大学赵书林教授 　　报告题目：微流控芯片电泳在线衍生化学发光检测巯基类药物 　　赵书林教授在报告中介绍到，其课题组采用集成柱前和柱后反应器的微流控芯片，以N-(4-氨基丁基)-N-乙基-异鲁米诺(ABEI)和邻苯二甲醛(OPA)为衍生试剂，建立了微流控芯片电泳在线衍生化学发光测定巯基类药物的新方法。其详细考察了影响在线衍生反应、电泳分离和化学发光检测的各种因素。在优化的实验条件下，化学发光检测四种巯基类药物(硫普罗宁、卡托普利、硫鸟嘌呤、6-巯基嘌呤)的检测限为8.9~13.5 nmol/L。该方法用于人血浆中巯基类药物，相对标准偏差小于4.9%，回收率为93.4%~101.6%。 　　报告人：桂林理工大学李建平教授 　　报告题目：基于酶放大效应的分子印迹传感器检测超微量土霉素 　　目前，分子印迹传感器由于检测原理限制，灵敏度一直较低，李建平教授将酶放大效应引入其中，制备了一种基于酶放大效应的新型分子印迹传感器，大大提高了检测的灵敏度。 　　该实验以土霉素(OTC)作为目标模板分子。分子印迹膜修饰在电极的表面，把土霉素分子通过与孔穴中功能位点的作用连接在分子印迹膜上。由于葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶标记的土霉素(OTC-GOD 和OTC-HRP)存在空间位阻效应，部分孔穴只能识别OTC，而不能识别酶标记的OTC，因此李建平教授在检测之前引入了“掩蔽”这一步骤，以使所有的印迹孔穴全部被占据。然后将传感器在高浓度的酶标记的土霉素溶液中进行孵化，使得OTC-GOD(HRP)将OTC从置换出来。随着标记酶减少，分子印迹传感器在检测体系中的电化学信号将会明显降低。样品中土霉素的浓度与酶对溶液中底物催化反应导致浓度变化产生的电化学信号有直接关系，这就达到了利用酶放大效应提高分子印迹传感器灵敏度的目的。 　　报告人：兰州大学张海霞教授 　　报告题目：新型键合型聚赖氨酸固定相的制备与评价 　　张海霞教授通过表面键合的方式将NCA-赖氨酸单体聚合到氨丙基功能化的硅胶上,合成新型聚赖氨酸固定相，并对其进行元素分析，红外光谱等表征。通过与C18商业柱的色谱行为进行对比，评价了其在高效液相色谱中，对苯系物，酸性物质，碱性物质，以及强极性和亲水性小分子物质的色谱保留行为。并且该实验研究了流动相中水含量，缓冲溶液PH值，离子强度的不同对色谱保留行为的影响。结果表明聚赖氨酸固定相是反相和亲水混合作用色谱模式。具有很好的应用前景。 　　此外，来自大同大学的冯锋教授、西南大学的袁若教授分别为大家作了“荧光法研究哮喘病人淋巴细胞膜上钠钙交换的异常表现”、“基于合金功能化的硅纳米纤维和凝集素-糖蛋白为复合固载基质的拟双酶葡萄糖生物传感器的研究”的专题报告。

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，每年导致约180万人死亡，其中肺腺癌（LUAD）是主要的病理类型。肿瘤内微生物组是肿瘤微环境的重要组成部分，其与宿主的相互作用对癌症的发生、发展至关重要，因此肿瘤内微生物研究为癌症的诊断、筛查和治疗提供了崭新的视角。虽然“多形态微生物组”已经成为癌症的标志之一，但关于肿瘤内真菌群（mycobiome）作为活体微生物在癌症进展中的作用还知之甚少。2023年9月21日，上海交通大学医学院王慧/刘宁宁、同济大学张鹏以及中科院巴斯德所陈昌斌课题组共同通讯在国际顶尖肿瘤学期刊Cancer Cell（IF=50.3）上发表题为“The intratumor mycobiome promotes lung cancer progression via myeloid-derived suppressor cells”的文章。本文使用富含真菌的DNA提取和深度宏基因组测序，发现了肺腺癌（LUAD）患者中富集的肿瘤驻留的聚多曲霉A. sydowii。通过三种不同的同系肺癌小鼠模型，我们发现聚多曲霉通过IL-1b介导的骨髓抑制细胞（MDSCs）的扩增和激活，抑制细胞毒性T淋巴细胞的活性，并促进PD-1+ CD8+ T细胞的积累，从而形成免疫抑制的肿瘤微环境促进肺肿瘤的进展。这是通过b-葡聚糖/凝集素-1/CARD9途径介导的IL-1b分泌实现的。人体样本的分析证实，富集的A. sydowii与免疫抑制和患者预后不良相关。研究结果表明，肿瘤内的真菌生物群，尽管生物量较低，但会促进肺癌的进展，并且可以作为改善LUAD患者预后的潜在靶点。实验部分相比针对癌症的一般研究，本文作者关注于真菌菌群失调对癌症的影响及作用机制，并借助FISH染色技术对目标菌群进行了标记。根据研究的需要，迫切需要解决的问题，一是从宏观角度理解菌群与肿瘤之间的关系，二是从微观角度解析真菌与细胞的作用机制。为了对以上两个问题进行深度探索，作者采用了StrataQuest定量分析软件建立了精准量化的分析标准。由于技术原理导致FISH染色成像结果经常会呈现的高背景、低信号状态。StrataQuest定量分析软件作为Tissue Cytometry技术数据分析层面的强大工具，对于FISH染色标记的点状荧光信号也有其独到的分析策略：首先在识别精度上，可以精准识别到高背景下的每个信号点，对核酸片段进行计数分子；其次在识别并计数的基础上，结合细胞核的定位，以及某蛋白染色的细胞质轮廓定位，在微观水平实现了核酸表达的空间定位，并可同时获得真菌及其相关细胞的作用情况数据。这种方法也可以用于对某些特定基因复制、转录及翻译过程的一致性定位分析，对中心法则传递性的验证是极其具有价值的。在宏观层面，Tissue Cytometry技术也可以通过肿瘤识别，并在肿瘤周边对微环境空间位置进行自由定义，以此来分析肿瘤微环境内不同表型的单细胞的空间分布关系，通过简单的数据统计，即可获得以往需要生信分析算法才能获得的作用关系数据，例如菌群与肿瘤见的互相作用，或者肿瘤微环境中不同炎性细胞的相互作用情况等。Figure 1 A.sydowii的高丰度与免疫抑制和患者预后不良有关A）LUAD患者临床样本的多色免疫荧光显示瘤内的A.sydowii与A.sydowii特异的FISH图像。红色，A.Sydowii；蓝色，DAPI。(B）LUAD患者的临床样本的肿瘤内MDSCs的多色免疫荧光图像(CD11b+CD33+HLADR-)。粉色，CD11b；绿色，CD33；红色，HLADR；蓝色，DAPI。(C)LUAD患者临床样本中的肿瘤内Tregs(FOXP3+)的多色免疫荧光图像。绿色，FOXP3；蓝色，DAPI。(D)LUAD患者临床标本中肿瘤内PD-1+CD8+T细胞(PD-1+CD8+)的多色免疫荧光图像。绿色，CD8；红色，PD-1；蓝色，DAPI。(E-G)LUAD患者肿瘤组织样本中A.sydowii丰度与MDSCs(E)、Tregs(F)和PD-1+CD8+T细胞(G)的相关性。Figure 2 A.Sydowii没能够促M2巨噬细胞的免疫抑制活性。（C）通过在皮下LLC小鼠模型中用D223 28S rRNA探针对真菌进行FISH染色，比较感染A.111 sydowii、烟曲霉、白色念珠菌或载体的小鼠中肿瘤内真菌的丰度。红色真菌FISH探针；蓝色，DAPI。

在杀死癌细胞的同时，也杀死了正常细胞。”这个困惑着全世界医生和癌症病人的难题，终于可望破解。笔者13日从中山大学获悉，中山大学中山医学院教授颜光美课题组于7日在国际期刊《美国科学院院报》发表了天然甲病毒M1具有选择性抗肿瘤作用的最新研究，该研究表明，一种叫做M1的天然病毒能特异性杀死癌细胞而不伤害正常细胞，这种新型溶瘤病毒有望成为新一代抗癌利器全球癌症发病率呈现快速增长态势，现有的治疗手段远远未能满足临床需求。颜光美课题组历经多年研究，从海南岛分离得到一种M1的天然病毒。颜光美团队使用细胞培养方法发现，M1病毒能选择性地感染并杀死包括肝癌、结直肠癌、膀胱癌、黑色素瘤在内的多种癌细胞，而对正常细胞无毒副作用。整体动物模型证明，M1病毒“像长了眼睛一样准确找到肿瘤组织并将其杀灭”，正常细胞则不受影响。XY-EL-Ch1509c 鸡间隙连接蛋白26(CX26)ELISA试剂盒 Chicken CX26 (Connexin 26) ELISA Kit XY-EL-Ch1510c 鸡金属硫蛋白2 (MT2)ELISA试剂盒 Chicken MT2 (Metallothionein 2) ELISA Kit XY-EL-Ch1511c 鸡神经激肽A(NKA)ELISA试剂盒 Chicken NKA (Neurokinin A) ELISA KitXY-EL-Ch1512c 鸡细胞粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)ELISA试剂盒 Chicken CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA KitXY-EL-Ch1513c 鸡磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA试剂盒 Chicken PDE4D (Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA KitXY-EL-Ch1514c 鸡5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒 Chicken 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA KitXY-EL-Ch1515c 鸡γ1肌动蛋白(ACTG1)ELISA试剂盒 Chicken ACTg1 (Actin Gamma 1) ELISA KitXY-EL-Ch1516c 鸡细胞分裂周期蛋白23(CDC23)ELISA试剂盒 Chicken CDC23 (Cell Division Cycle Protein 23) ELISA KitXY-EL-Ch1517c 鸡谷胱甘肽S转移酶κ1(GSTκ1)ELISA试剂盒 Chicken GSTκ1 (Glutathione S Transferase Kappa 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1518c 鸡血管紧张素II受体1(ANG II R1)ELISA试剂盒 Chicken ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1520c 鸡染色质区解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)ELISA试剂盒 Chicken CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit XY-EL-Ch1521c 鸡脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 Chicken LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA KitXY-EL-Ch1523c 鸡唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素8(SIGLEC8)ELISA试剂盒 Chicken SIGLEC8 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8) ELISA KitXY-EL-Ch1524c 鸡肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 Chicken HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit XY-EL-Ch1525c 鸡脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 Chicken LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA KitXY-EL-Ch1526c 鸡胸腺五肽(TP5)ELISA试剂盒 Chicken TP5 (Thymopentin) ELISA KitXY-EL-Ch1527c 鸡可溶性CD14分子(sCD14)ELISA试剂盒Chicken sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA KitXY-EL-Ch1528c 鸡胰岛素(INS)ELISA试剂盒 Chicken INS (Insulin) ELISA KitXY-EL-Ch1530c 鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 Chicken T4 (Thyroxine) ELISA KitXY-EL-Ch1532c 鸡促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 Chicken EPO (Erythropoietin) ELISA Kit XY-EL-Ch1533c 鸡甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒 Chicken MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 ) ELISA KitXY-EL-Ch1535c 鸡胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)ELISA试剂盒 Chicken IGF2BP3 (Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit XY-EL-Ch1536c 鸡T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒 Chicken LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA KitXY-EL-Ch1538c 鸡激酶锚定蛋白1(AKAP1)ELISA试剂盒 Chicken AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1539c 鸡肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA试剂盒 Chicken TSGF (Tumor Specific Growth Facter/Tumor Supplied Group of Factor) ELISA KitXY-EL-Ch1540c 鸡胃动蛋白2(GKN2)ELISA试剂盒 Chicken GKN2 (Gastrokine 2) ELISA Kit XY-EL-Ch1542c 鸡丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒 Chicken PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA KitXY-EL-Ch1543c 鸡抗丙氨酰tRNA合成酶抗体(Anti-AlaRS/Anti-PL12)ELISA试剂盒 Chicken Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA KitXY-EL-Ch1544c 鸡脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 Chicken DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit XY-EL-Ch1545c 鸡胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒 Chicken FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA KitXY-EL-Ch1546c 鸡酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 Chicken TH (Tyrosine Hydroxylase) ELISA KitXY-EL-Ch1547c 鸡α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒 Chicken SPTAN1 (Alpha-Fodrin) ELISA Kit 除细胞水平及动物实验之外，课题组还使用临床标本离体活组织培养模型进一步证实了上述新型溶瘤病毒的有效性和特异性。据介绍，更为重要的是，研究工作还证明了M1病毒作用的分子遗传学机制，这个发现为精准的临床用药和实施个体化疗法提供了可靠的科学依据，也极大地增加未来临床试验取得成功的机会。据专家介绍，新型天然溶瘤病毒M1将会安全而有效地治疗癌症，有望成为攻克人类癌症的新一代利器

来自中国科学院生物物理研究所、牛津大学等单位的科学研究人员经过多年紧密合作于2014年10月19日在Nature杂志上在线发表题为Hepatitis A virus and the origins of picornaviruses的论文，详细阐述了甲型肝炎病毒的独有的结构特性、极强的稳定性、特殊的脱衣壳机制和进化关系。。HAV病毒属于小RNA病毒科肝炎病毒属，科学家对这一病毒的研究也已经持续了很长时间。此次，中国科学院生物物理研究所饶子和院士研究组与牛津大学 David Stuart 教授研究组、中国食品药品检定研究院王军志教授和胡忠玉教授以及北京科兴控股生物有限公司尹卫东和高强等专家共同合作，解析了HAV成熟病毒和空心病毒两种状态的全颗粒高分辨率的晶体结构，结果显示这两种病毒颗粒的结构具有很大的不同。在这一论文中，科学家第一次证明HAV成熟病毒具有衣壳蛋白vp4，而空心病毒颗粒含有的是未被剪切的衣壳蛋白vp0前体。与目前已经解析的小RNA病毒科成员三维结构比较，HAV病毒结构最大的不同在于其衣壳蛋白vp2的N端进行了180度偏移，转向了病毒二次轴处，增强了病毒五聚体与五聚体之间的相互作用力，部分解释HAV病毒具有的极强稳定性。HAV病毒这一独特的构象是在小RNA病毒科中第一次被发现，然而这一构象在昆虫病毒成员中却普遍存在。与昆虫病毒类似，HAV病毒也能够进行细胞之间的传递。这一系列相似的特性，不难想到HAV病毒与昆虫病毒之间的关系。基于全病毒衣壳蛋白三维结构开展的进化关系分析表明，HAV病毒不断进化时，逐渐脱离昆虫病毒方向，衍生出小RNA病毒的结构特征，在HAV病毒的基础上又逐渐进化出更多更高级的小RNA病毒成员。病毒入侵宿主细胞的第一步是与其功能性受体结合，而甲型肝炎病毒与其功能性受体TIM1的结合模式和脱衣壳机制与其它小RNA病毒成员不同。结构分析表明HAV病毒颗粒因较短的vp1 BC loop和vp2 EF loop，使其不具备肠道病毒典型的“峡谷”结构特征，也意味着HAV病毒的受体结合方式与之不同。同时，HAV病毒衣壳蛋白也没有典型的疏水口袋，自然也不含有口袋因子，这暗示着HAV病毒采用不同的脱衣壳机制。HAV病毒具有极强的稳定性，耐酸耐碱耐高温，能在绝大多数有机溶液中存活，在自然环境中可存活几个月之久。热稳定性实验结果表明HAV病毒能够在pH 1-10保持着极好的稳定性，在弱酸环境下，HAV病毒能够忍受的裂解温度可高达81摄氏度。该研究对于进一步解析HAV灭活病毒疫苗的免疫原性和保护机理具有重要意义，对于抗肝炎病毒药物的研发提供理论指导和新方向中文名称：人外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Ectonucleotide 中文名称：人卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 中文名称：人白介素19(IL19)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Interleukin 19 (IL19) 中文名称：人C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 3, Member B 中文名称：人神经元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Neuronal Pentraxin II (NPTX2) 中文名称：人骨成型蛋白10(BMP10)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 中文名称：人自身免疫调节因子(AIRE)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Autoimmune Regulator (AIRE) 中文名称：人5羟色胺转运蛋白(SERT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 中文名称：人补体成分9(C9)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Complement Component 9 (C9) 中文名称：人肾连蛋白(NPNT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Nephronectin (NPNT) 中文名称：人白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein 中文名称：人髓细胞触发受体2(TREM2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 2 中文名称：人泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 中文名称：人HtrA丝氨酸肽酶1(HTRA1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for HtrA Serine Peptidase 1 (HTRA1) 中文名称：人丝氨酸肽酶抑制因子Kazal型1(SPINK1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Serine Peptidase Inhibitor Kazal Type 1 中文名称：人脯氨酰4-羟化酶α多肽Ⅲ(P4Hα3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III 中文名称：人干扰素γ诱导蛋白30(IFI30)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Interferon Gamma Inducible Protein 30 (IFI30) 中文名称：人轻肽神经丝蛋白(NEFL)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Neurofilament, Light Polypeptide (NEFL) 中文名称：人视黄醇结合蛋白1(RBP1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Retinol Binding Protein 1, Cellular (RBP1) 中文名称：人转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Receptor II 中文名称：人死骨片1(SQSTM1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Sequestosome 1 (SQSTM1) 中文名称：人胃内因子(GIF)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Gastric Intrinsic Factor (GIF)

仪器信息网讯 2010年8月20-22日，由国家自然科学基金委员会化学科学部主办，北京大学、清华大学和中国科学院化学研究所共同承办的“第三届全国生命分析化学学术报告与研讨会”在北京大学召开。 　　大会同期举办了“生命分析基础理论”系列报告会，300余人参加了此会。会议由厦门大学江云宝教授、中国科学院长春应用化学研究所张柏林研究员、南京大学徐静娟教授和苏州大学屠一锋教授共同主持，16位来自科研院所和高校的专家学者做了精彩的报告，部分报告内容摘录如下。 　　湖南大学 杨荣华教授 　　几种提高核酸探针检测灵敏度的新方法 　　杨荣华教授课题组围绕核酸探针设计和传感机制做了一系列工作，发展了几种提高核酸探针检测灵敏度的新方法：(1)设计可控核酸二级结构，改变分子内信号报告基因之间距离，降低背景信号；(2)利用金纳米颗粒、碳纳米管等纳米材料的强荧光猝灭能力，基于纳米材料/单链DNA自组装原理设计单标记荧光传感平台，降低背景信号；(3)分离分子识别单元与信号转换单元，设计免标记核酸探针、利用滚环放大原理放大检测信号。 　　大连理工大学 袁景利教授 　　一种NO测定用新型铕配合物荧光探针的设计、合成与应用 　　以稀土配合物为荧光标记探针的高灵敏度时间分辨荧光生化分析技术已经在临床检测与生命科学领域得到了广泛的应用，但现有的生物标记用稀土配合物数量十分有限，极大的限制了时间分辨荧光生化分析技术的发展。袁景利教授在报告中介绍了他们课题组设计、合成的一种NO测定用新型铕配合物荧光探针，并探讨了其在生物标记及时间分辨荧光生物成像测定中的应用。 　　北京化工大学 杨屹教授 　　微波辅助合成在功能性毛细管制备中的应用 　　杨屹教授首先介绍了微波在化学中的作用，然后着重介绍了微波在开管毛细管柱制备和酶微反应器制备中的应用。她的课题组通过研究发现：微波辅助下，树枝状大分子的引入可扩大柱容量，并具有较好的生物相容性 微波辅助合成大大缩短了毛细管和毛细管酶微反应器的制备时间，有望应用于其他类型的毛细管内壁修饰或者整柱制备中。 　　湖南师范大学 谢青季教授 　　酶催化聚合法用于酶固定和生物传感的研究 　　谢青季教授介绍了他们课题组将酶催化聚合法用于酶固定和生物传感的研究：通过漆酶(Lac)催化聚合法，制备了儿茶酚胺类神经递质聚合物-酶-多壁碳纳米管复合酶膜，研制了安培酶生物传感器和生物燃料电池 采用紫外光谱、循环伏安法(CV)，石英晶体微天平等手段，考察了Lac对多巴胺(DA)、肾上腺素(EP)和去甲肾上腺素(NA)的催化氧化和聚合，发现中性水溶液中三者的聚合速率满足DANAEP。 　　同济大学 田阳教授 　　高选择性的细胞信号分子电化学分析 　　田阳教授的课题组围绕细胞的分子识别分析这一基础问题，进行了层层深入的探索和研究：首先，研究了蛋白质在纳米界面上电子传递的行为，通过纳米界面调控蛋白质电化学电位，提高了细胞信号分子电化学分析的选择性；其次，为了进一步提高其灵敏度，把等离子共振效应产生的电荷分离机理与蛋白质电化学和电化学分析相结合，在提高选择性的同时，提高了电化学分析的灵敏度；再者，为了提高传感器的稳定性和再现性，对仿生酶进行了功能化的设计、合成与表面组装；最后，在前述研究基础上，结合光电化学的微阵列技术，实现了细胞的阵列式培养、增殖与高选择性电化学分析的一体化。 　　中国科学院烟台海岸带研究所 秦伟研究员 　　聚合物膜离子选择性电极生物传感新方法 　　秦伟研究员课题组以酶、核酸适体、仿生分子印迹聚合物等作为分子识别材料，开展了电位型生物传感器的研究，主要内容如下：以可卡因、有机磷农药的靶标酶-胆碱酶为模型，基于电极膜相流向样品溶液相的离子通道，构建了丁酰胆碱聚合物离子选择电极；将聚合物膜离子选择性电极的电位信号传导和核酸适体的分子识别相结合，发展了一种免标记的电位型传感器；发展了一种通用的基于聚合物膜离子选择性电极技术检测电中性有机分子的新方法，拓宽了离子选择电极的应用范围。 　　中国科学院长春应用化学研究所 于聪研究员 　　核酸诱导的小分子探针的集聚及自组装 　　于聪研究员的课题组探索了核酸检测的新方法：利用核酸分子诱导的探针分子的聚集、自组装，和由此引发的探针分子的各种特性的改变，及相对应的分析手段的响应信号的改变，来检测核酸的存在；研究核酸分子间的相互作用，例如含多个鸟嘌呤核苷片段的单链DNA形成四连体结构；利用核酸适配体分子与被检测物之间的特异性相互作用检测蛋白质、小分子或金属离子等 并研究一些重要的生理过程，例如核酸酶活性的检测。 　　中南大学 王建秀教授 　　癌症抑制转录因子p53与DNA相互作用的研究 　　癌症抑制转录因子p53是一种隐性肿瘤抑制基因，p53蛋白质的突变水平与细胞的癌变程度有直接的关系，因此，检测p53蛋白质的突变水平对癌症的临床研究具有非常重要的意义。王建秀课题组采用电化学以及表面等离子体激元共振(SPR)技术研究了p53与DNA的相互作用过程，克服了传统的酶联免疫吸附分析操作步骤繁琐、且使用酶标抗体的缺陷。此外，采用荧光共振能量转移研究野生型p53蛋白质与一致性双链DNA的特异性相互作用，从而达到区分正常人细胞以及癌细胞的目的。 　　此外，在本次“生命分析理论基础”报告会上作报告的还有：(排名不分先后) 姓名 职称 单位 报告题目 欧阳津 教授 北京师范大学 基于量子点标记的蛋白质检测新方法 王雪梅 教授 东南大学 基于符合纳米界面的肿瘤细胞识别与检测 马宏伟 研究员 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 “零背景”免疫分析：基于抗蛋白质非特异性吸附的iPDMS的多指标蛋白质微阵列 曹成喜 教授 上海交通大学 基于移动反应界面的蛋白质组学研究关键聚焦分离技术的研究进展 罗红霞 副教授 中国人民大学 腺嘌呤/纳米金刚石修饰电极对NADH的传感作用 王振新 研究员 中国科学院长春应用化学研究所 基于凝集素修饰金纳米粒子的比色法研究抗生素与活细胞的相互作用 聂周 副教授 湖南大学 新型无标记功能酶分析方法 张鹏 博士 贝克曼库尔特公司市场部 无鞘液式毛细管电泳-质谱联用（HSPS CE-MS）技术

12月份有245个与仪器检测相关的国家标准将实施雪花飘飘，北风萧萧，2021年即将离我们而去。在2021年有大量的新标准发布实施，那么在最后一个月还有哪些标准将要实施呢？跟随小编来梳理一番吧。首先，科学仪器息息相关的标准就是“拉曼光谱仪通用规范 ”将正式实施了，这是拉曼光谱仪器首个国标。其次，多份质量管理体系相关的国标也是首次上线，这也为我们进一步提升检测服务质量夯实基础。最后，食品、医药卫生、环境、石油化工、机械、电力等诸多领域的大量标准也将实施。12月份即将实施的标准如下，需要的可以收藏。点击链接即可下载收藏↓科学仪器标准GB/T 40219-2021 拉曼光谱仪通用规范 GB/T 12807-2021 实验室玻璃仪器 分度吸量管 GB/T 40216-2021 智能仪器仪表的数据描述 属性数据库通用要求 GB/T 40333-2021 真空计 四极质谱仪的定义与规范 质量管理标准GB/T 19010-2021 质量管理 顾客满意 组织行为规范指南 GB/T 19011-2021 管理体系审核指南 GB/T 19013-2021 质量管理 顾客满意 组织外部争议解决指南GB/T 19015-2021 质量管理 质量计划指南 GB/T 19016-2021 质量管理 项目质量管理指南 GB/T 27021.2-2021 合格评定 管理体系审核认证机构要求 第2部分：环境管理体系审核与认证能力要求 GB/T 27021.3-2021 合格评定 管理体系审核认证机构要求 第3部分：质量管理体系审核与认证能力要求 GB/T 29790-2020 即时检验 质量和能力的要求 GB/T 40149-2021 检验检测机构从业人员信用档案建设规范 GB/T 40259-2021 综采工作面支护质量检测技术条件 GB/T 4930-2021 微束分析 电子探针显微分析 标准样品技术条件导则 食品农业标准GB/T 18916.53-2021 取水定额 第53部分：食糖 GB/T 20373-2021 变性淀粉中乙酰基含量的测定 滴定法 GB/T 40138-2021 南方菜豆花叶病毒检疫鉴定方法 GB/T 40135-2021 葡萄细菌性疫病菌检疫鉴定方法 GB/T 40140-2021 葡萄轴枯病菌检疫鉴定方法 GB/T 40141-2021 榆韧皮部坏死植原体检疫鉴定方法 GB/T 40150-2021 粮油储藏 储粮机械通风均匀性评价方法 GB/T 40152-2021 蜂蜜中蔗糖转化酶的测定 分光光度法 GB/T 40154-2021 饲料原料 棉籽蛋白 GB/T 40170-2021 质粒抽提及检测通则 GB/T 40173-2021 水溶性壳聚糖中还原性端基糖的测定 分光光度法 GB/T 40174-2021 工具酶纯度的检测方法 GB/T 40176-2021 植物源性产品中木二糖的测定 亲水保留色谱法 GB/T 40179-2021 植物中有机酸的测定 液相色谱-质谱/质谱法 GB/T 40184-2021 畜禽基因组选择育种技术规程 GB/T 40193-2021 长芒苋检疫鉴定方法 GB/T 40194-2021 大麦条纹花叶病毒检疫鉴定方法 GB/T 40195-2021 阿洛葵检疫鉴定方法 GB/T 40196-2021 X射线荧光能谱仪测定防腐木材和木材防腐剂中CCA和ACQ的方法 GB/T 40220-2021 植物代谢产物大豆凝集素测定 酶联免疫吸附法 GB/T 40223-2021 植物代谢产物游离棉酚测定 酶联免疫吸附法 GB/T 40266-2021 食品包装用氧化物阻隔透明塑料复合膜、袋质量通则 GB/T 40267-2021 植物源产品中左旋多巴的测定 高效液相色谱法 GB/T 40331.1-2021 植物保护机械 大田作物喷雾沉积量的测试 第1部分：在水平地面上的测试 GB/T 40331.2-2021 植物保护机械 大田作物喷雾沉积量的测试 第2部分：在作物上的测试 医疗卫生、化妆品标准GB 38456-2020 抗菌和抑菌洗剂卫生要求 GB/T 13163.2-2021 辐射防护仪器 氡及氡子体测量仪 第2部分：222Rn和220Rn测量仪的特殊要求 GB/T 13173-2021 表面活性剂 洗涤剂试验方法 GB/T 16137-2021 X射线诊断中受检者器官剂量的估算方法 GB/T 19703-2020 体外诊断医疗器械 生物源性样品中量的测量 有证参考物质及支持文件内容的要求 GB/T 22114-2021 牙膏用保湿剂 甘油和聚乙二醇 GB/T 39381.1-2020 心血管植入物 血管药械组合产品 第1部分：通用要求 GB/T 39552.2-2020 太阳镜和太阳镜片 第2部分：试验方法 GB/T 40113.1-2021 生物质热解炭气油多联产工程技术规范 第1部分：工艺设计 GB/T 40145-2021 化妆品中地索奈德等十一种糖皮质激素的测定 液相色谱/串联质谱法 GB/T 40171-2021 磁珠法DNA提取纯化试剂盒检测通则 GB/T 40172-2021 哺乳动物细胞交叉污染检测方法通用指南 GB/T 40177-2021 光学和光学仪器 眼科学 分度盘刻度GB/T 40181-2021 一次性卫生用非织造材料的可冲散性试验方法及评价 GB/T 40183-2021 DNA甲基化的测定 焦磷酸测序法 GB/T40185-2021 牙膏中5种氯铵类抗菌剂的检测方法 高效液相色谱法 GB/T 40186-2021 微生物诱变育种致遗传物质损伤强度测定 Umu法 GB/T 40187-2021 核酸适配体亲和性和特异性评价技术导则 GB/T 40188-2021 畜禽分子标记辅助育种技术规程 GB/T 40189-2021 牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定 高效液相色谱法 GB/T 40190-2021 牙膏中禁用漂白剂的测定 高效液相色谱法 GB/T 40191-2021 牙膏中限用防腐剂的测定 高效液相色谱法 GB/T 40192-2021 刺盘孢属实时荧光PCR检疫鉴定方法 GB/T 40225-2021 肌动蛋白抗体的检测 免疫印迹法 GB/T 40249-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 PCR检测法 GB/T 40251-2021 牡蛎单孢子虫病诊断规程 原位杂交法 GB/T 40252-2021 美澳型核果褐腐病菌活性检测方法 GB/T 40253-2021 牡蛎小胞虫病诊断规程 显微镜检查组织法 GB/T 40254-2021 轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法 GB/T 40255-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 PCR检测法 GB/T 40256-2021 牡蛎马尔太虫病诊断规程 显微镜检查组织法 GB/T 40257-2021 桃拉综合征诊断规程 RT-PCR检测法 GB/T 40265-2021 酶免疫检测抗体检测通则 GB/T 40268-2021 免疫磁性材料性能检测方法 GB/T 40269-2021 吸收性卫生用纸制品 生产过程质量安全状态监测与评价指南 GB/T 40357-2021 发制品 假发透气性的测定 环境标准GB/T 2423.18-2021 环境试验 第2部分：试验方法 试验Kb：盐雾，交变（氯化钠溶液） GB/T 2423.33-2021 环境试验 第2部分：试验方法 试验Kca：高浓度二氧化硫试验 GB/T 2423.38-2021 环境试验 第2部分：试验方法 试验R：水试验方法和导则 GB/T 2424.5-2021 环境试验 第3部分：支持文件及导则 温度试验箱性能确认 GB/T 2424.6-2021 环境试验 第3部分：支持文件及导则 温度/湿度试验箱性能确认 GB/T 40133-2021 餐厨废油资源回收和深加工技术要求 GB/T 40199-2021 城市园林废弃物资源回收和深加工技术要求 GB/T 40200-2021 工业有机废气净化装置性能测定方法 GB/T 40201-2021 农村生活污水处理设施运行效果评价技术要求 GB/T 40226-2021 环境微生物宏基因组检测 高通量测序法 GB/T 4798.2-2021 环境条件分类 环境参数组分类及其严酷程度分级 第2部分：运输和装卸地质冶金标准GB/T 12719-2021 矿区水文地质工程地质勘查规范 GB/T 14949.12-2021 锰矿石 化合水含量的测定 重量法 GB/T 14949.5-2021 锰矿石 钛含量的测定 二安替吡啉甲烷分光光度法 GB/T 18341-2021 地质矿产勘查测量规范 GB/T 20228-2021 砷化镓单晶 GB/T 40067-2021 碳化钨粉末微观组织及缺陷检测方法 GB/T 40112-2021 地质灾害危险性评估规范 GB/T 40114-2021 首饰 贵金属含量的测定 ICP差减法 GB/T 40130-2021 煤矿专门水文地质勘查规范 GB/T 9966.11-2021 天然石材试验方法 第11部分：激冷激热加速老化强度测定 GB/T 9966.13-2021 天然石材试验方法 第13部分：毛细吸水系数的测定 GB/T 9966.9-2021 天然石材试验方法 第9部分：通过测量共振基本频率测定动力弹性模数 机械标准GB/T 11270.1-2021 超硬磨料制品 金刚石圆锯片 第1部分：焊接锯片 GB/T 11270.2-2021 超硬磨料制品 金刚石圆锯片 第2部分：烧结锯片 GB/T 11344-2021 无损检测 超声测厚 GB/T 12265-2021 机械安全 防止人体部位挤压的最小间距 GB/T 12604.6-2021 无损检测 术语 涡流检测 GB/T 12604.7-2021 无损检测 术语 泄漏检测 GB/T 12773-2021 内燃机气阀用钢及合金棒材 GB/T 14229-2021 齿轮接触疲劳强度试验方法 GB/T 14230-2021 齿轮弯曲疲劳强度试验方法 GB/T 15242.3-2021 液压缸活塞和活塞杆动密封装置尺寸系列 第3部分：同轴密封件沟槽尺寸系列和公差 GB/T 15242.4-2021 液压缸活塞和活塞杆动密封装置尺寸系列 第4部分：支承环安装沟槽尺寸系列和公差 GB/T 16754-2021 机械安全 急停功能 设计原则 GB/T 17909.2-2021 起重机 起重机操作手册 第2部分：流动式起重机 GB/T 2351-2021 流体传动系统及元件 硬管外径和软管内径 GB/T 23537-2021 超硬磨料制品 金刚石或立方氮化硼砂轮和磨头 极限偏差和圆跳动公差 GB/T 23540-2021 涂附磨具 装有卡盘或未装卡盘的砂页轮 GB/T 23902-2021 无损检测 超声检测 超声衍射声时技术检测和评价方法 GB/T 24619-2021 同步带传动 G、H、R、S齿型曲线齿同步带与带轮 GB/T 24810.2-2021 起重机 限制器和指示器 第2部分：流动式起重机GB/T 29716.3-2021 机械振动与冲击 信号处理 第3部分：时频分析方法 GB/T 3480.5-2021 直齿轮和斜齿轮承载能力计算 第5部分：材料的强度和质量 GB/T 37162.3-2021 液压传动 液体颗粒污染度的监测第3部分：利用滤膜阻塞技术 GB/T 39974-2021 钢水测氧用镁稳定氧化锆陶瓷元件 GB/T 39975-2021 氮化铝陶瓷散热基片 GB/T 39985-2021 钛镍形状记忆合金板材 GB/T 39987-2021 钯锭 GB/T 39989-2021 超弹性钛镍形状记忆合金棒材和丝材 GB/T 40116-2021 箔片轴承 气体动压径向轴承性能 静态承载能力、摩擦因数和寿命测试 GB/T 40117-2021 无损检测 无损检测人员视力评价 GB/T 40118-2021 滑动轴承 流体动压和混合润滑条件台架试验 GB/T 40119-2021 射频卡灌溉智能控制系统通用技术条件 GB/T 40123-2021 高纯净细晶铝及铝合金圆铸锭 GB/T 40134-2021 航天系统电磁兼容性要求 GB/T 40307-2021 无损检测 材料织构的中子检测方法 GB/T 40324-2021 无损检测 大直径圆棒聚焦超声检测方法 GB/T 40330-2021 机床安全 固定式磨床 GB/T 40332-2021 无损检测 超声检测 超声测厚仪性能特征和测试方法 GB/T 40335-2021 无损检测 泄漏检测 示踪气体方法 GB/T 40336-2021 无损检测 泄漏检测 气体参考漏孔的校准 GB/T 40337-2021 气焊及相关工艺设备的气密性 GB/T 5900.1-2021 机床 主轴端部与卡盘连接尺寸 第1部分：圆锥连接 GB/T 6068-2021 汽车起重机和轮胎起重机试验规范 GB/T 6577-2021 液压缸活塞用带支承环密封沟槽型式、尺寸和公差 GB/T 7925-2021 数控往复走丝电火花线切割机床 参数 GB/T 8243.12-2021 内燃机全流式机油滤清器试验方法 第12部分：颗粒计数法滤清效率和容灰量 GB/T 8366-2021 电阻焊 电阻焊设备 机械和电气要求

ELISA试剂盒技术在60年代提出，因为具有灵敏度高、特异性强，酶免疫试剂的性质比较稳定，操作方法简便快速、无放射性污染以及应用范围广等很多优点，ELISA试剂盒迅速在医学基础理论研究，临床病毒学和生物化学检验等工作中获得了广泛的应用。这篇文章中Lequin博士追述了EIA和ELISA技术的发展历程。 当初我们在Oranon开展这个项目的初衷只是由于当时Oranon管理部门热衷于 多年前 免疫化学诊断妊娠的成功（以血清抑制凝集试验和乳胶凝集试验 为基础）。但是由于工程太大 ，需耗时较多而阻止了该项技术的的深入发展。Schuurs提出将酶附着于抗原或者抗体，通过化学反应的测定终产物颜色这一设想时，大家都表示了赞同。因为以 一种 简易的可以根据颜色变化而即插即读的试纸条作为基础，似乎可以取得进一步的成功。我们采用了分析妊娠HCG来作为我们研究的模型。尽管如此，Schuurs对于这项技术将来的应用仍然非常清楚。正象他在试验建议的最后一句话所说的那样：我认为，探索这项技术所取得的任何成功，都将开辟免疫学诊断的新领域。 早期的研究过程中我们至少在试验原理上还是取得了一定的进展，但是尽管我们尽最大努力去发展以ELISA试剂盒技术为基础的根据颜色变化而诊断妊娠的即插即读的技术时，还是失败了。将许多必需的试剂压缩到一个试纸条上，并且在模板上使反应过程标准化，在那个时间看起来还需要解决很多技术问题。实际上，在Oranon研究组发现了溶胶颗粒免疫测定（SPIA）技术发明后，依靠颜色变化诊断妊娠的问题也就变得可行了。总结以前的研究经验，我们改变了原来的研究方向。如内分泌领域（我们的目的是直接想同RIA竞争），感染病领域。最初是检测乙型肝炎检测，该领域在前些年澳抗被作为乙型肝炎病毒感染的标志物被发现后就进行了一些探索。 同时，我们也借鉴学习了Engvall和Perlmann以及随后的学者开展的关于ELISA和EIA的研究，而我们主要的研究领域是细菌、寄生虫和病毒，尤其是London的Voller、Bidwell以及荷兰国家公共卫生研究所的Ruitenberg所做的工作。当时领域内所使用的方法如免疫荧光，血清凝集实验，补体结合实验比较的笨拙，相比较而言ELISA和EIA法的简易性决定了它将来在广泛的微生物感染诊断中能够获得快速的发展。能够迅速为大家所接受，促进了众多的生物医学实验室和第三世界的国家建立了一种可靠的感染性疾病诊断方法。 当时，这种方法只被局限地应用于少数高度专业的实验室。Voller和Bidwell首先应用了96孔微板用于EIA/ELISA实验，也就是现在广泛应用的ELISA试剂盒的雏形，由此也引发了第一次免疫分析自动化的浪潮。我们在Oranon也使用了这种方法检测乙型肝炎和其他献血筛查项目。 RIA法及早进入内分泌学和肿瘤学方面的应用领域并且趋于成熟，它的精确性和灵敏度也超过了兴起不久的EIA和ELISA技术，而且很多实验室都已经配备了放射性核素的相关设备，并且习惯了与之开展工作，他们还不能意识到非同位素检测的优势。是自动化改变了这些，RIA的自动化牵涉到放射性同位素引起的容器和废物处理问题，而EIA和ELISA却使全自动随机存取的免疫分析系统成为可能，该系统正是80年代诊断仪器制造商努力开拓的方向。这就导致了许多低成本的、设备简单，可靠性强的免疫化学诊断方法从专业的放射性实验室进入了普通化学实验室。EIA和ELISA也因此找到了他在诊断感染性疾病以外的应用领域。 Oranon管理部门处理专利所采用的策略，也是EIA和ELISA试剂盒技术取得成功的决定性因素。70年代中期，众多公司汇集于Oranon，都希望得到当局的专利许可。管理层在经过长时间的讨论后，决定不垄断该技术，而是将该技术转让给任何达到了许可条件的公司，因为该技术在实验室诊断医学中已经广泛应用，并且不断扩展，后来总共一百多张许可证的数据来说明当时的情况是十分贴切的。我相信这项措施对实验室诊断医学是有所帮助的，有时候也会设想，当其他公司为最近一项重要的技术而采用了一种相同的许可政策时，在将来会获得怎样的进展，产生怎样的影响。

中国上海，2013年9月18日&mdash &mdash 科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技（以下简称:赛默飞）以最高铂金级赞助商身份参加了在重庆举办的第八届中国蛋白质组学大会（CNHUPO2013）。赛默飞携划时代的新产品Orbitrap Fusion质谱仪及多款新品出席本届大会，并开展了学术报告、午餐新品交流会、赛默飞之夜晚宴、媒体专访等一系列夺人眼球的精彩活动，全方位展示了赛默飞在蛋白质组学研究领域的完整解决方案和领先技术，展现出在分析测试领域的丰富经验和雄厚实力。 在此次CNHUPO大会上，赛默飞在主会场举行了新产品以及新技术推广会，共吸引了100多名参会代表。赛默飞副总裁兼总经理John Sos先生出席了新品推广会，并为大家介绍了赛默飞公司最新概况，最完整的蛋白组学解决方案及相关的产品。 期间，赛默飞隆重推出新型Orbitrap Fusion Tribrid 液相色谱质谱仪。根据赛默飞产品专家唐佳介绍，新型Orbitrap Fusion Tribrid 液相色谱质谱仪集成四极杆、Orbitrap和线性离子阱三种质量分析器于一身，采用动态扫描管理(Dynamic Scan Management，DSM)技术，能够同时实现三种质量分析器处于工作状态。该系统前所未有的分析性能不仅为复杂生物样品提供无可比拟的分析深度，更能够大大超过以往的定量准确度以获得更宽广的蛋白质组学覆盖范围。除此以外，Orbitrap Fusion Tribrid质谱提供超过450，000的分辨率，能够有效降低化学噪音。通过超高灵敏度的离子阱技术实现痕量物质的分析，可在任意MSn分析阶段选择不同裂解模式并以Orbitrap或线性离子阱分析器检测的能力使得一系列新型实验成为可能；同时动态扫描管理技术具有随实验自动调整扫描参数以获得最佳结果的能力，能够帮助分析人员解决在生物学、蛋白质组学、以及结构分析方面遇到的困难和挑战。 赛默飞副总裁兼总经理John Sos先生进行公司及产品介绍 赛默飞产品专家唐佳介绍质谱新品 赛默飞展位 赛默飞工程师向参会代表介绍Orbitrap Fusion质谱新品 早在CNHUPO大会开幕之前，为了加深对蛋白质组学的了解及对赛默飞新品的认识，赛默飞质谱应用工程师张晓夕就在会前技术培训上为参加培训人员上了关于定量蛋白质组学新技术的精彩一课，并介绍多重数据非依赖性采集（MSX-DIA）技术的方法及优势，为欲提升自身技术水平、开拓视野的培训人员来说提供了一次近距离接触赛默飞，了解公司前沿科技的良机。 CNHUPO大会还特地邀请到Orbitrap技术发明人Alexander A. Makarov先生。作为大会的特邀嘉宾，他为大家介绍了Orbitrap技术的研究进展，以及该创新技术为蛋白组学研究带来优势。Alexander A. Makarov先生指出该技术将在未来研究工作中发挥巨大优势及变革。在&ldquo 基于肼化学和凝集素的N-链接糖蛋白质组学富集方法比较&rdquo 和&ldquo 稳定同位素标记TMT结合同步母离子选择技术用于精确定量蛋白质组学&rdquo 的分会报告中，他也与广大与会者共同探讨，巅峰论道。 身为赛默飞生命科学质谱研发总监，Alexander A. Makarov博士在蛋白质组学领域拥有诸多卓越成就。他曾荣获国际人类蛋白质组研究组织（HUPO）颁发的首个HUPO科学技术奖。该奖项高度表彰了Makaro博士对OrbitrapTM质量分析器的发展所作出的巨大贡献。此外，Makarov博士从2000年就开始发表Orbitrap质量分析器的文章，迄今已发表40余篇文章，拥有超过40项专利。 Alexander A. Makarov博士介绍Orbitrap技术 Orbitrap技术发明人Alexander A. Makarov答媒体提问 赛默飞高层与采访媒体合影 借助此次CNHUPO大会，赛默飞加强了与行业内相关专家的交流。作为CNHUPO开幕式晚宴的主办人，赛默飞为CNHUPO大会画上点睛之笔。杨芃原、贺福初、饶子和等院士，携手赛默飞副总裁兼总经理John Sos、赛默飞商务运营副总裁Herb Kenny、Orbitrap技术发明人Alexander A. Makarov、赛默飞质谱商务运营总监裴立文先生以及赛默飞中国区高级市场总监谭斯其先生共同拉开晚宴序幕。晚宴期间，赛默飞通过精彩绝伦的表演向在座嘉宾娓娓道来在质谱技术领域发展的辉煌历程，新品液相色谱质谱仪以及&ldquo 使世界更健康，更清洁，更安全&rdquo 的美好愿景！ 赛默飞公司领导共同敬酒致辞 赛默飞沙画表演 更多关于赛默飞参加第八届中国蛋白质组学大会的信息，请点击http://www.thermo.com.cn/CNHUPO2013 关于赛默飞世尔科技 赛默飞世尔科技（纽约证交所代码： TMO）是科学服务领域的世界领导者。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。公司年销售额130亿美元，员工约39,000人。主要客户类型包括：医药和生物技术公司、医院和临床诊断实验室、大学、科研院所和政府机构，以及环境与过程控制行业。借助于Thermo Scientific、Fisher Scientific和Unity&trade Lab Services三个首要品牌，我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合，为客户、股东和员工创造价值。我们的产品和服务帮助客户解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战，促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。欲了解更多信息，请浏览公司网站：www.thermofisher.com 关于赛默飞世尔科技中国 赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年，在中国的总部设于上海，并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司，员工人数超过2400名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等，提供实验室综合解决方案，为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求，现有5家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在北京和上海共设立了5个应用开发中心，将世界级的前沿技术和产品带给国内客户，并提供应用开发与培训等多项服务；位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术，研发适合中国的技术和产品；我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队，在全国有超过400 名经过培训认证的、具有专业资格的工程师提供售后服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息，请登录网站：www.thermofisher.cn

p 　　昨天，新华社发布了一条新闻《中国三地发现非洲猪瘟疫情专家提示：不威胁人类健康》：从8月3日至15日，我国在辽宁沈阳、河南郑州、江苏连云港3个相隔很远的地区，接连发现3起非洲猪瘟疫情。今天，温州乐清再次出现疫情。非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(英文名African swine fever virus，简称ASFV)，这究竟是个什么东西?它能引起哪些免疫学反应?流式能够做些什么? /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 380" title=" 1.jpg" style=" width: 460px height: 250px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/68404ab4-72b3-4e1d-9cb6-9dd563791a71.jpg" / /p p style=" text-align: left " span style=" font-size: 18px " strong 非洲猪瘟病毒现形 /strong /span /p p 　　先来看个艺术照，其实在艺术照上，几乎每种病毒长的都差不多： /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 549" title=" 2.jpg" style=" width: 459px height: 287px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/d665eb38-c96f-447a-be70-82e2cc575f47.jpg" / /p p 　　用高科技的电镜，照出病毒原形，将它抽丝剥茧，可见虽然病毒体非常小，比细胞都要小很多倍，结构比其它病毒要完整一些，有外膜、衣壳、内膜、基质、类核等五大结构，主要致病的是外膜和衣壳、内膜等部位的蛋白质： /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 451" title=" 3.jpg" style=" width: 463px height: 272px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/bd040c10-2e4c-4a20-879c-de5155f573a3.jpg" / /p p span style=" font-size: 18px " strong 如何传染? /strong /span /p p 　　家猪明明在自家的猪圈里面好好地养着，为什么会染上病毒呢?难道病毒会飞不成?其实可能人还是关键。非洲和欧洲，前些年已经流行过较长时间的非洲猪瘟，所以在网上可以找到比较完善的一些宣传资料，就有爱沙尼亚做的一个动画，非常形象地说明了病毒是如何传到家猪身上的。 /p p 　　野外，感染病毒的野猪死亡后，尸体分解，其中的病毒在环境中还可以残留几个月： /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 267" title=" 4.jpg" style=" width: 464px height: 190px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/66359f96-9f4b-4ca3-abdc-e9132b0a62ff.jpg" / /p p 　　此时，如果人接触了病毒，这些病毒可通过裤子和鞋子带回来，猪接触后就会被感染： /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 354" title=" 5.jpg" style=" width: 468px height: 184px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/0620bb57-2ae6-4c53-a628-c22d1035bf52.jpg" / /p p 　　一旦有一只家猪感染后，无论是其本身和其它猪的接触，还是其呕吐物，都是传染源： /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 262" title=" 6.jpg" style=" width: 476px height: 196px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/6985055a-0437-4efa-931c-7780c58348de.jpg" / /p p 　　而在我们国内，原来在非洲和欧洲流行的猪瘟病毒如何进入国内，国家还在溯源，而国内这几个地方的接连流行，很可能是由于一些携带病毒但未发病的猪跨省运输。 /p p 　　除此之外，还有一种传染途径是，通过蜱这个中介宿主传播，这跟蚊子传播病毒一个道理。 strong 不过目前，这个病毒还没有感染人的能力。 /strong /p p strong span style=" font-size: 18px " 非洲猪瘟病毒引起了哪些免疫学改变 /span /strong /p p 　　按理说，猪跟人一样，也有着完善的免疫系统，能够应对外来感染，发动免疫系统应对攻击。然而，非洲猪瘟病毒非常狡猾，它假装好人，骗过免疫系统，并且可以抑制免疫反应： /p p 　　1、衣壳上的B238L，可广泛抑制宿主基因转录，尤其是干扰素和TLR3、TLR4这几个基因被抑制，猪的免疫系统就老老实实，不会识别病毒和攻击病毒了。 /p p 　　2、外膜的cD2V蛋白，使得病毒颗粒和被感染的细胞能够结合到红细胞，并损害淋巴细胞的增殖能力。看下面这张图，V就是病毒，让红细胞(RBC)紧紧地包住它们，隐藏起来，并且在适当的时候，可以感染巨噬细胞(Macrophage)： /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 481" title=" 7.jpg" style=" width: 471px height: 309px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/1212eded-dfcf-428b-a26f-6bd8cb75d9ff.jpg" / /p p 　　3、C型凝集素，能够抑制NK细胞这个体内特警战士，骗过他们的攻击。 /p p 　　4、通过IAP和Bcl2类似物，抑制凋亡。 /p p 　　传闻这种病毒是100%致死的，5～12天内基本死亡。但在前面这则新闻中，可发现发病430头，死亡340头，这说明有90头猪没有死亡，要么可能感染时间短，尚未致死，要么可能其免疫功能强大。 /p p 　　尽管病毒很强大，但免疫系统也不是完全吃素的，还是可以产生保护性免疫，这些保护性免疫的机制，就是疫苗研发的基础。利用减毒的非洲猪瘟病毒主要发现了以下免疫保护机制： /p p 　　1、CD8+T细胞是必需的，保护作用与非洲猪瘟病毒特异性产gamma干扰素记忆CD8+T细胞比例密切相关。 /p p 　　2、抗体。抗体就像导弹，即使病毒藏得再深，也能找出来结合上去，再召唤免疫细胞干掉它们。 /p p span style=" font-size: 18px " strong 流式在疫苗研发中能起到什么作用? /strong /span /p p 　　到目前为止，ASFV疫苗开发的主要进展集中在减毒活病毒上。这些病毒经过基因改造以防止完全感染，但仍可引发免疫反应，保护动物免受未来感染。虽然这是开发疫苗的常用且有效的方法，但可能存在安全性问题，因为疫苗菌株可能引起临床症状并持续存在于动物体内。2018年2月份Linda Dixon团队筛选了30%的ASFV基因组，并根据其生产能够产生免疫反应的蛋白质的能力排名找出了47个基因，准备从中筛出能够诱导最佳免疫反应的蛋白质，研发蛋白质疫苗。 /p p 　　无论是哪种类型的疫苗，均需要评估疫苗真实有效的效果，评价指标就上前述的非洲猪瘟病毒特异性产gamma干扰素记忆CD8+T细胞和病毒特异性抗体。抗体，可能大多会通过ELISA检测，流式在检测 strong 非洲猪瘟病毒特异性产gamma干扰素记忆CD8+T细胞 /strong ，非常重要，这类细胞就是专门捕获非洲猪瘟病毒的杀手，只有这些细胞多了，抗体也有了，病毒一进入猪体内就会被细胞和抗体击杀，那么非洲猪瘟也就会渐渐销声匿迹了。所以，流式可以使得疫苗的免疫学效果更直观，在控制流行病的疫苗研发中是一个非常关键的技术。 /p p /p