GB/T 22942-2008 蜂蜜中头孢唑啉、头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
有关头孢唑肟杂质的作用,以下是要注意的一些可能性:1.负面作用:过多的杂质可能导致药物效力下降,并可能引发不良反应或副作用。例如,有些杂质可能导致过敏反应。2.毒性:某些杂质可能具有毒性。例如,某些杂质可能具有致癌性。3.影响药效:杂质可能会影响药物的生物利用度,即药物进入体内后能达到预期药效的能力。CATO标准品药品生产中的质量控制步骤非常重要,目的就是要尽可能减少杂质的存在。任何药品都必须经过严格的质量检测,确保其安全有效。[img=,607,531]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402041449269442_4660_6381668_3.png!w607x531.jpg[/img]
奥美拉唑的测定和头孢噻肟钠的测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911021837_180180_1896702_3.jpg
我在注射用头孢唑肟中N-甲基匹咯烷含量测定中发现,N-甲基匹咯烷峰前面有一未知峰干扰,降低柱温和流速不能增加分离度,相反增加流速、提高柱温对分离度有一定的帮助,但改善不明显,十分令我头疼。
求头孢西丁钠、头孢泊肟钠红外图谱
求头孢西丁钠、头孢泊肟钠红外图谱
Venusil XBP C18(L)分析头孢噻肟钠的分析报告摘要:本实验按照头孢噻肟钠2010版中国药典方法进行测定,以含量测定和有关物质检测方法共同进行色谱柱的筛选。在选定的色谱柱上,进一步考察了该色谱柱用于头孢噻肟钠系统适用性、含量、有关物质等项测试的结果,并初步考察了色谱柱的使用寿命,结果表明VenusilXBP C18(L)适用于头孢噻肟钠的分析:(1)系统适用性溶液中共检出7个杂质,分离度均符合标准要求;(2)对照品平行进样6针RSD为0.13%,保留时间17.039分钟,柱效5068,拖尾因子1.116,均符合标准要求;(3)含量测定中,头孢噻肟钠保留时间16.936分钟,柱效4779,拖尾因子1.118,符合标准要求;(4)有关物质测定中共检出6个杂质,分离度均符合标准要求;(5)用于头孢噻肟钠含量测试时,连续进样300针,保留时间、柱效和拖尾因子均无显著变化,表明VenusilXBP C18(L)对该样品和流动相有较好耐受性。关键词:头孢噻肟钠;VenusilXBP C18(L);2010版药典;液相色谱法前言头孢噻肟钠为中国药典2010版二部收录品种,本实验按照该标准进行测试,通过测试得出VenusilXBP C18(L)适用于头孢噻肟钠分析,其测试结果令人满意。实验部分试剂材料超纯水、甲醇、无水磷酸氢二钠、磷酸高效液相色谱柱:Venusil XBP C18(L);5 μm,150 Å,4.6 × 150mm样品制备系统适用性溶液制备:取头孢噻肟对照品适量,加流动相溶解并稀释制成每1 ml约含1 mg的溶液,作为系统适用性试验溶液。实验结果系统适用性测定结果表1. Venusil XBP C18(L)用于头孢噻肟钠系统适用性溶液测定结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015082410220596_01_2864683_3.png表2.Venusil XBP C18(L)用于头孢噻肟钠对照品溶液测定结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015082410251562_01_2864683_3.png含量测定结果表3. Venusil XBP C18(L)用于头孢噻肟钠含量测定结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015082410281917_01_2864683_3.png有关物质测定结果表4.Venusil XBP C18(L)用于头孢噻肟钠有关物质测定结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015082410305808_01_2864683_3.png色谱柱批次验证结果表5. Venusil XBP C18(L)批次验证结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015082410355084_01_2864683_3.png色谱柱寿命测试结果表6.Venusil XBP C18(L)用于头孢噻肟钠寿命测试结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508241038_562414_2864683_3.png
我用岛津10A测头孢哌酮他唑巴坦钠有关物质,为什么用相同的流动相测定,两个主峰的出峰时间(9和21左右)跟文献报道(2和8左右)差很大?而且他唑巴坦还分离不好,分离不完全,大家有谁做过相关的内容么,希望指导一下。
有谁做过头孢噻肟钠 俄罗斯标准的,溶解度和化学鉴别中的试药是什么?
头孢泊肟酯的有关物质的分析,请问各路高人做过没有,色谱条件是什么,提前感谢了
最近在做头孢检测,方法回收率一直不好,以下几个标准有做过的吗?怎么样?讨论下吧GB-T 21314-2007 动物源性食品中头孢匹林、头孢噻呋残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法GBT 22942-2008 蜂蜜中头孢唑啉 头孢匹林 头孢氨苄 头孢洛宁 头孢喹肟残留量的测定 液相色谱-串联质谱法SNT 1988-2007 进出口动物源食品中头孢氨苄、头孢匹林和头孢唑啉残留量检测方法
抗生素头孢喹肟的动物体内药动学分析 头孢喹肟是目前唯一一个动物专用第四代头孢类抗生素,具有抗菌谱广,抗菌活性强的特点,适用于非肠道用药;源于基本头孢菌素结构的化学修饰提供了头孢喹肟的两性离子性质。头孢喹肟的这一特性可以促进其迅速跨生物膜渗透作用(包括细菌细胞壁的孔蛋白),从而增强生物利用度,较第二代和第三代头孢菌素抗菌谱更广。它对临床重要细菌的染色体和质粒编码的β-内酰胺酶高度稳定。被用于治疗动物呼吸道的疾病,牛的急性乳腺炎和腐蹄病,小牛败血症,猪子宫炎,乳房炎,无乳综合征,马驹败血病,其也是治疗羊的各类疾病的药物。 材料和方法: 头孢喹肟,、色谱乙腈、色谱甲醇、三氟乙酸(TFA)、去离子水。 岛津高效液相色谱仪、SPD-10AVP UV-VIS检测器268纳米处进行检测、柱温箱40°C、Phenomenex Gemini C18色谱柱 (250 mm ×4.6 mm; 5u m)。 流动相为乙腈和0.1%三氟乙酸水溶液,以0.9 ml/min的流速进行洗脱。 标准溶液配制: 头孢喹肟的储备溶液通过直接称量干燥后的标准物质溶解于水中,浓度1mg/ ml,并将该溶液保存于-70℃。头孢喹肟标准溶液通过加入空白血浆配制成溶度为0, 0.02, 0.04, 0.10, 0.40, 1, 2, 4, 10,和 12 ug/ml的溶液。 样品制备:200ul血浆中加入1.5毫升微量离心管中,加入等体积的甲醇使蛋白质沉淀,离心(4000转/min)10分钟后,300ul的上清离心液移入新鲜小瓶中,加入150ul去离子水混合,再吸取50ul上清液进样分析。 液相方法的验证: 选择性-选择性通过分析空白血浆、加入头孢喹肟的血浆、从羊服用头孢喹肟药代动力学研究中获得的血浆样品进行评价,无内源性化合物对目标化合物的干扰。 线性标准曲线-本方法的线性通过在0.02-12ug/ml的范围内的校正曲线评价。 灵敏度-通过进样 0.01ug/ml-0.1 ug/ml评价其信噪比。 精密度和准确度-头孢喹肟样品分低中高浓度分别进样分析,每个浓度分别进样六次日间、日内测定。 回收率-为了计算头孢喹肟的绝对回收率分别加入 0.4ug/ml, 2ug/ml, 和10ug/ml浓度样品,每个浓度分别重复6次进行加入和提取。 稳定性-标准
[color=#444444]有人做过液相色谱法测定头孢塞肟钠吗,液相条件是怎么样的,我看中国药典上的方法流动相偏碱性,对柱子不太好,而且流动相配起来很麻烦,有没有简单一点的方法[/color]
[align=left][color=black]头孢克肟(Cefixime)是β-内酰胺类抗生素,为口服用的第三代头孢菌素类抗生素,适用于治疗敏感菌所致的呼吸、泌尿和胆道等部位的感染。[/color][/align][img=,619,248]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903271729327584_7997_2222981_3.jpg!w619x248.jpg[/img][color=black] [/color][color=black]ADME(adamantane)[/color][color=black]是笼状结构的金刚烷基团,通过“新型官能团”和特有的包被型填料表面“控制技术”,使该款色谱柱兼具疏水性和高极性的特点;由于金刚烷特有的笼状结构所带来的立体选择性,还赋予了ADME分离结构类似化合物的能力。头孢克肟极性较强,故选用键合金刚烷基团的高表面极性色谱柱CAPCELL PAK ADME进行分析。[/color][align=left][img=,400,222]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903271729553114_5586_2222981_3.jpg!w744x413.jpg[/img][/align][align=left][color=black]金刚烷基ADME填料表面示意图[/color][/align][color=black]使用CAPCELL PAK ADME色谱柱在0.1%甲酸水/乙腈体系下对混合对照品和血浆样品进行分析,头孢克肟峰形良好,保留时间为1.66 min。在混合对照品中,阿莫西林在该检测离子下显示为两个峰,头孢他美保留时间1.71,峰形正常,可考虑选做内标物。血浆样品能够正常检测目标物质峰。[/color][align=left][img=,500,310]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903271730190277_4380_2222981_3.jpg!w877x545.jpg[/img][/align][align=left][color=black]图1 混合对照品[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]分析图[/color][/align][align=left][img=,500,311]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903271730350327_5592_2222981_3.jpg!w879x547.jpg[/img][/align][align=left][color=black]图2 血浆样品[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]分析图[/color][/align][align=left][img=,500,261]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903271730528955_449_2222981_3.jpg!w818x427.jpg[/img][/align][color=black]综上所述,使用CAPCELL PAK ADME S3 2.1 mm i.d. × 100 mm色谱柱对头孢克肟混合对照品和血浆样品进行分析,可得到良好的分析结果。[/color]
头孢唑林钠和吉西他滨的测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911021830_180176_1896702_3.jpg
进口兽药质量标准硫酸头孢喹肟注射液Liusuan Toubaokuiwo ZhusheyeCefquinome sulfate Injection本品为硫酸头孢喹肟与油酸乙酯等配制而成的混悬注射液。含头孢喹肟(C23H24N6O5S2)应为标示量的90.0%~105.0%。【性状】 本品为类白色至浅褐色混悬液体;久置分层。【鉴别】(1)含量测定项下记录的色谱图中,供试品主峰的保留时间应与对照品峰的保留时间一致。(2)取摇匀后的供试品2 ml,加水5 ml,稀盐酸1 ml,混匀,置超声浴中超声10分钟,弃去有机层,溶液显硫酸盐的鉴别反应(附录15页)。【检查】有关物质 照含量测定项下的方法。取摇匀后的供试品1.0 ml,加入流动相25.0 ml,置超声浴中超声5分钟,弃去有机层,取水层滤过,取续滤液10µ l,注入液相色谱仪,记录色谱图,2,3-环己基吡啶与头孢喹肟相对保留时间为0.20。按峰面积归一化法计算,2,3-环己基吡啶应不得过3.0%,其他单一杂质应不得过0.50%,杂质总量应不得过4.0%。水分 取本品,照水分测定法(附录58页,第一法)检查,含水分不得过0.2%。细菌内毒素 取摇匀后的供试品2 ml与细菌内毒素检查用水3 ml混匀,分成2等份,振摇30秒,离心15分钟(2000g),吸取水层1 ml,加1 mol/L氢氧化钠溶液0.06 ml调节pH值至6.5~7.5。用细菌内毒素检查用水按1:10稀释后,照细菌内毒素检查法(附录73页)检查,每1 mg头孢喹肟中含细菌内毒素的量应小于0.1 EU。无菌 取供试品8瓶,混合均匀,加入含6%吐温-80的蛋白胨缓冲液(1g/L)400ml,混匀,加入800×106单位青霉素酶(每1ml供试品溶液,加2×106单位青霉素酶),充分振摇,将供试品倒置,在37℃放置4小时;取供试品溶液,依法检查(附录79页,直接接种法),应符合规定。分散性 取本品1瓶,振摇30秒,将供试品转移置玻璃容器中,不得观察到结块或沉淀物。沉降 取本品1瓶,振摇30秒,取供试品10 ml置刻度试管中(内径1.0~1.5 cm),10分钟内不得沉淀。粒度 取摇匀后的供试品,置显微镜下检查,颗粒直径在5µ m以下应不得少于80%,10µ m以下不得少于90%,20µ m以下不得少于95%,50µ m以下不得少于100%。装量 按最低装量检查法(附录67页)检查,应符合规定。【含量测定】 照高效液相色谱法(附录24页)测定。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;取一水合高氯酸钠3.45g溶于1000 ml水中,加磷酸12 ml和乙腈90 ml,用三乙胺调节pH至3.6为流动相;检测波长为270 nm。取头孢噻肟约25 mg,溶于100.0 ml流动相中,另取头孢喹肟约25 mg,置25 ml量瓶中,精密加入上述头孢噻肟溶液1 ml,用流动相稀释至刻度。精密量取10µ l注入液相色谱仪,记录色谱图;计算头孢喹肟与头孢噻肟的分离度,应大于1.0。
用Sephadex G-10做头孢他啶,个别能分离,大多数不能分离,之所以这样,头孢他啶里有头孢他腚聚合物,但是我一直不没搞清楚这聚合物含量是多少呢,它分子结构是什么样呢?还有,我用的是G-10,10mmX300mm的柱子?望各位大虾多指教和发表言论![em09]
[align=left][b][size=32px][color=#ff0000]本篇文章暂不授权任何公众号发布[/color][/size][/b][/align][align=center][b]高脂肪饮食对头孢克肟片的药动学影响 [/b][/align][align=left][b]摘要:[/b]目的:研究比较空腹和高脂餐后单剂量口服用头孢克肟的药代动力学和生物利用度。方法:采用双交叉给药实验设计,12名健康男性受试者空腹及餐后单剂量口服1mg头孢克肟片,以头孢他美为内标,HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法测定血药浓度,DAS 2.0软件处理药动学参数。结果:头孢克肟空腹和餐后单剂量给药的主要药动学参数为:Cmax分别为([color=black]3.805 ±0.710[/color])μg/ml和([color=black]1.604 ±0.483[/color]) μg/ml,Tmax 分别为([color=black]4.792±0.582[/color]) h和([color=black]4.000±1.225[/color]) h,AUC[sub]0-t [/sub]分别为([color=black]32.923±7.804[/color]) μghmL[sup]-1[/sup]和([color=black]12.785±4.688[/color]) μghmL[sup]-1[/sup],AUC[sub]0-[/sub][sub][color=#231f20]∞[/color][/sub]([color=black]33.955±8.484[/color]) μghmL[sup]-1[/sup]和([color=black]13.082±4.932[/color]) μghmL[sup]-1[/sup]。两种给药方案的Cmax和AUC取自然对数后经方差分析,Tmax经非参数检验,发现Cmax,AUC和Tmax的差异有统计学意义(P<0. 05)。结论;与空腹组给药相比,餐后组吸收速率减慢,消除半衰期延长,生物利用度降低。[/align][align=left][b]关键词:[/b]头孢克肟;药动学;空腹餐后;生物利用度;[/align][align=left]头孢克肟(Cefixime)是一种重要的头孢菌素类抗生素,属于可口服的第三代头孢菌素类抗生素,临床上应用于敏感菌引起的肺炎、支气管炎、泌尿道感染、淋病、胆囊炎、胆管炎、猩红热、中耳炎、副鼻窦炎等。本研究参考有关人血浆中头孢克肟的定量方法,志愿者在空腹和餐后两种情况下服用进口头孢克肟片后取血,采用灵敏的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析技术评价饮食对头孢克肟在人体内的药动学影响,为临床用药提供指导。[/align][align=left][b]材料与方法[/b][/align][align=left][b]1 仪器与试药[/b][/align][align=left]API4000型三重四级杆串联离子肼质谱仪,美国Applied Biosystem Sciex公司;Aglient 1260型液相色谱系统,包括G1312B二元泵,G1322A在线脱气机,G1316A柱温箱,Aglient Technology公司; NASCA F5100型自动进样器,日本SHISEIDO公司;资生堂CAPCELL PAC ADME柱(2.1*100mm,3mm,日本SHISEIDO公司);保护柱:Phenomenex C18(4*3.0mm,5mm,Torrance,CA,USA);梅特勒-托利多AG135电子天平,梅特勒-托利多仪器上海有限公司;Heraeus Multifuge XIR型离心机,美国Thermo Fisher公司;IKA VIBRAX VXR型振荡器;KQ5200DE型数控超声清洗机,昆山市超声仪器有限公司;Eppendorf可调式及自动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]电动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url],德国Eppendorf公司。[/align][align=left]头孢克肟标准品(批号:130503-201716,纯度:89.2%,中国食品药品检定研究院);头孢他美(批号:130564-201601,纯度>99.8%,中国食品药品检定研究院);甲醇:美国Fisher公司,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url] 级,批号:LOT180821;甲酸:美国MREDA公司,色谱纯,批号:LOT095224;乙腈:美国Fisher公司,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url] 级,批号:LOT180821;超纯水:屈臣氏重蒸水,批号:20180815.[/align][align=left][b]2 试验方法[/b][/align][align=left][b]2.1 试验方案[/b][/align][align=left][b]2.1.1 受试对象[/b][/align][align=left]12名健康男性受试者,年龄在18-45岁,体重指数在19-24范围内,健康,无心血管、肝脏、肾脏、消化道、精神神经等疾病史,无药物过敏史。试验前详细询问既往病史,作全面的体格检查及实验室检查,心电图、血压、肝肾功能及血尿常规检查均正常,试验前两周未用任何药物。所有受试者均签署知情同意书,试验方案经本院伦理委员会审批同意。[/align][align=left][b]2.1.2 给药方案与样品采集[/b][/align][align=left] 试验采用双交叉设计。12名受试者随机分成两组,每组6人。1组为空腹组,另1组为餐后组。受试者在试验前1 d的17:00进人I期临床试验病房,晚上统一清淡饮食,并禁食10h,但不禁水。次日晨1组空腹口服药物,用250mL水送服。另1组则统一进食高脂标准餐,进餐时程为30 min,后即用250 ml温开水送服试验药物。0, 0.5,1,1. 5,2,2.5,3,3.5,4,4.5,5,6.5,7,8,10,12,15和24小时,抽取静脉血4 ml,置肝素化抗凝试管中,分离血浆于-80℃贮存,待测。[/align][align=left][b]2.2 色谱及质谱条件[/b][/align][align=left]色谱条件:流动相:乙腈(0.5%甲酸):水(0.5%甲酸)=40:60等度洗脱;柱温:40℃;流速:0.2 mL/min;进样量:5 mL;运行时间:4min。洗针程序:50%甲醇洗针5s,超声洗针5s(纯水),再次用50%甲醇洗针5s。[/align][align=left]质谱条件:离子源:电喷雾(ESI);扫描方式:多反应监测(MRM);离子化方式:正离子;检测离子对:TBKW m/z454.2/285.1;内标:389.2/241.1.离子源电压:4800V;离子源温度:400℃;气帘气:15psi;碰撞气:4psi 雾化气:60psi;辅助气:55psi;解簇电压:70V;碰撞诱导解离电压:TBKW:28V,TBTM :21V。[/align][align=left][b]2.3 溶液配制及样品处理[/b][/align][align=left][b]2.3.1溶液配制[/b][/align][align=left]对照品溶液:精密量取头孢克肟对照品11.21 mg,置于15 mL EP管中,用自动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]精密加入10 mL甲醇溶解,得到1 mg/mL的对照品储备液,置于-20℃备用。用50%甲醇-水配制成系列头孢克肟标准工作液,浓度分别0.5,1,5,10,20,50,100,160 mg/mL。4℃冰箱避光保存。[/align][align=left]质控工作液:精密量取头孢克肟对照品11.15 mg,置于15 mL EP管中,用自动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]精密加入10 mL甲醇溶解,得到1 mg/mL的对照品储备液,置于-20℃备用。用50%甲醇-水配制成系列头孢克肟标准工作液,浓度分别1,5, 20,130mg/mL。4℃冰箱避光保存。[/align][align=left]内标工作液:精密量取头孢他美对照品10.02 mg,置于15 mL EP管中,用自动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]精密加入10 mL甲醇溶解,得到1 mg/mL的内标储备液,置于-20℃备用。用纯甲醇稀释至500 ng/mL,4℃冰箱避光保存。[/align][align=left][b]2.3.2生物样本处理方法[/b][/align][align=left]a.血浆标准品及质控样品处理方法:取药前血浆190 uL,加10 uL适当浓度的标准溶液,混匀,加400 uL甲醇(含内标500 ng/mL),涡旋2min,离心(4℃,14000r/min)15min, 取100 uL上清液,加流动相A相200uL混匀,取5μL进样。[/align][align=left]血浆标准曲线范围: 0.025,0.05,0.25,0.5,1,2.5,5,8 u g/ml。[/align][align=left]质控样品浓度为: 0.075,1,6.5μg/ml 最低定量限: 0.075 ng/mL。[/align][align=left]b.血浆样品处理方法:取给药血浆200 uL,加400 uL甲醇(含内标500ng/mL),涡旋2min,离心(4℃, 14000 r/min) 15min, 取100 μL上清液,加流动相A相200μL混匀,取5μL进样。[/align][align=left][b]2.3.3数据统计处理方法[/b][/align][align=left]使用AB Secix公司Analyst 1.5.2软件采集处理数据。[/align][align=left][b]3方法学确证[/b][/align][align=left]对建立的方法进行方法验证, 参照中国药典2015版《生物样品定量分析方法指导原则》(草案),从方法的选择性、标准曲线和定量下限、精密度和准确度、稳定性、回收率、基质效应、残留效应和同位素效应等各方面进行方法验证。[/align][align=left][b]3.1选择性 [/b]分别取6份不同来源的人空白血浆样品以及相应人空白血浆配制的LLOQ 样品进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析测定,考察空白血浆中的内源性物质是否干扰待测物及其内标的测定。接受标准为:空白血浆中待测物保留时间处色谱峰面积不高于LLOQ色谱峰面积的20%;空白血浆中内标保留时间处色谱峰面积不高于内标色谱峰面积的5%。[/align][align=left][b]3.2 标准曲线[/b] 标准曲线设计8个浓度点, 头孢克肟血浆浓度分别为0.025, 0.05,0.25,0.5,1,2.5,5,8 u gmL-1, 按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作, 以每个待测物浓度为横坐标, 待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标, 用加权 ([i]W [/i]= 1/[i]x[/i]2) 最小二乘法进行回归运算, 求得的直线回归方程即为标准曲线。接受标准为:校正标样回算的浓度一般应该在标示值的±15%以内,定量下限处应该在±20%内;至少75%校正标样,含最少6个有效浓度,应满足上述标准标准;曲线的相关系数的值r≥0.990。[/align][align=left][b]3.3 残留考察 [/b]在标准曲线最高浓度点后连续进样2个空白样品, 考察样品与内标的残留效应。接受标准为:空白血浆中待测物保留时间处色谱峰面积不高于LLOQ色谱峰面积的20%;空白血浆中内标保留时间处色谱峰面积不高于内标色谱峰面积的5%。[/align][align=left][b]3.4 定量下限 [/b]根据血浆标准品处理方法,配制头孢克肟定量下限浓度的血浆样品6份(2.50ng/mL) ,考察其准确度和精密度。[/align][align=left][b]3.5 精密度与准确度[/b] 按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作,配制最低定量限、低、中、高4个浓度的血浆样品,每浓度进行6个样本分析,分别在3日内测试,根据当日标准曲线计算质控样品的测得浓度,根据结果计算本法的日内、日间精密度与准确度。接受标准:批内精密度:低、中、高浓度批内变异系数≤15%,定量下限的变异系数≤20%。批间精密度:低、中、高浓度批间变异系数≤15%,定量下限的变异系数≤20%。准确度:所有质控样品准确度均值一般应在标示值的±15%之内,定量下限准确度应在标示值的±20%之内。[/align][align=left][b]3.6 回收率和基质效应 [/b]取6份不同来源的空白人血浆,加入人脂肪,制备不同来源的含20%的高脂肪血浆,另取同样6份不同来源的空白人血浆,加入人全血,制备不同来源的含4%的溶血血浆,按比例加入内标溶液和沉淀蛋白溶剂,混匀,离心,取上清,将基质提取出来,分别加入低,中,高浓度质控溶液,经流动相稀释进样分析,测定血浆,高脂血浆,溶血血浆三种处理后的基质下的低、中、高浓度质控样品TBKW及其内标的峰面积。 [/align][align=left]取6份不同来源的空白人血浆及6份水,按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作,测定空白血浆,标准溶液状态下的低、中、高浓度质控样品TBKW及其内标的峰面积。 [/align][align=left]基质因子(效应)=处理后的空白血浆归一化后的峰面积/标准溶液归一化的峰面积*100% [/align][align=left]提取回收率=未处理空白血浆归一化后的峰面积/处理后的空白血浆归一化后的峰面积*100%。[/align][align=left]接受标准:提取回收率不一定需要满足接近100%,但是必需是稳定而可重现的。基质因子不一定需要接近100%,但是在不同个体的基质中应是稳定而可重现的。不同来源的内标归一化基质因子精密度应≤15%。[/align][align=left][b]3.7 溶液稳定性 [/b]按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作,新鲜配制头孢克肟储备液并用50%甲醇稀释到低,高质控溶度,每个浓度各3个;取-20℃存放7天,30天的储备液稀释到高质控浓度3个以及4℃对应存放7天,30天储存的低,高浓度质控工作液各3个,进样分析,分别评价储备液和工作液溶液7天,30天的稳定性。接受标准:各储备条件下和对照(新鲜配制)的溶液的归一化峰面积的比值偏差在±15%之间。[/align][align=left][b]3.8 血浆样品稳定性 [/b]室温放置:取多份空白血浆适量,分别加入相应浓度的TBKW标准溶液,配制低、中、高三个浓度血浆样品室温放置5h、处理后的样本室温放置6h、冰箱4°C放置20h,按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作,进样分析,考察血浆质控样品室温放置稳定性。另取精密度试验第二批三个浓度血浆样品,测定后于自动进样器(10°C)中放置16h后再进样分析,考察血浆质控样品于自动进样器(10℃)中放置16h后稳定性。[/align][align=left]冻融:取多份空白血浆适量,分别加入定量的TBKW标准溶液,配制低、中、高三个浓度血浆样品放置-30°C至少12h,分别经1次冻融、2次冻融、3次冻融冷冻解冻循环,每次溶解时流动自来水溶解不超过15min,放置室温15 min后冷冻,按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作,处理后进样分析,观察各次循环后稳定性。[/align][align=left] 长期冷冻:取多份空白血浆适量,分别加入定量的TBKW标准溶液,配制低、中、高三个浓度血浆样品,于-30°C放置3天、8天和27天,按“血浆标准品及质控样品处理方法”项下操作,处理后进样分析,观察-30°C条件下冷冻保存稳定性。接受标准:各储备条件下每一浓度水平测定值的精密度≤15%,准确度应在±15%之内。[/align][align=left][b]3.9 批分析 [/b]将精密度实验组样本中最低定量限、低、中和高四个浓度的样品进行了8轮进样,在实验样品开始前证实生物分析方法的效能。[/align][align=left][b]4实验结果[/b][/align][align=left][b]4.1 质谱结果 [/b]由于 TBKW 的结构中既含有碱性氮原子, 也含有羧基, 所以本实验比较了正、负两种离子检测。结果发现, TBKW 的甲醇-水 (50∶50) 溶液 (在正离子模式下响应约为负离子的10倍, 故优先选择ESI 源下正离子检测方式。在正离子检测模式下,TBKW 及内标 TBTM 分别主要生成 m/z454.2 和m/z389.2 的 [sup]+[/sup]峰, 选择性对 [sup]+[/sup]峰进行产物离子扫描分析, TBKW 生成的主要碎片离子分别为[i]m/z [/i]285.1 ,[i]m/z[/i]126.1和[i]m/z[/i]210.1,TBTM生成的主要碎片离子有[i]m/z [/i]241.1。但实验过程中发现,[i] m/z[/i]126.1和[i]m/z[/i]210.1 的碎片离子响应弱, 且噪音高, 故最终选择[i]m/z [/i]285.1 和[i]m/z [/i]241.1 分别作为TBKW 及内标 TBTM 定量分析时的产物离子。待测物及内标的[sup]+[/sup]产物离子全扫描质谱图及相应出峰时间见图1-4。[/align][align=center] [img=,562,319]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241116590213_28_3255306_3.png!w562x319.jpg[/img] [/align][align=center]图1 TBKW二级特征碎片质谱图[/align][align=center][img=,555,315]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241117114646_9141_3255306_3.png!w555x315.jpg[/img] [/align][align=center]图2 TBTM二级特征碎片质谱图[/align][align=center][img=,559,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241117239993_3223_3255306_3.png!w559x296.jpg[/img] [/align][align=center]图3 TBKW色谱质谱图[/align][align=center][img=,567,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241117339148_8729_3255306_3.png!w567x326.jpg[/img] [/align][align=center]图4 TBTM色谱质谱图[/align][align=left][b]4.2 方法学验证结果[/b][/align][align=left][b]4.2.1 选择性 [/b]结果表明, 空白人血浆中的内源性物质不干扰头孢克肟和内标头孢他美的测定, 且同位素内标头孢他美不干扰头孢克肟的测定。[/align][align=left][b]4.2.2 标准曲线[/b] 用加权 ([i]W [/i]= 1/[i]x[/i][sup]2[/sup])最小二乘法进行回归运算, 求得的标准曲线的相关系数 ([i]r[/i][sup]2[/sup]) 均大于0.99。根据标准曲线,头孢克肟的线性范围为0.025~8 ug/ml。典型标准曲线如下所示: [i]y [/i]= 0.828 [i]x [/i]+4.35e[sup]-3[/sup]([i]r[/i][sup]2[/sup]= 0.9994)。[/align][align=left][b]4.2.3 残留考察 [/b]结果显示,样品与内标保留时间处均未出现干扰杂质峰, 在本实验选择的色谱和质谱条件下, 待测物及内标无残留。[/align][align=left][b]4.2.4 定量下限[/b] 其准确度和精密度见“精密度与准确度”项下。[/align][align=left][b]4.2.5 精密度与准确度[/b] 头孢克肟每一浓度水平的QC样品的日内、日间平均准确度均在15%之内,相对标准偏差均<15%,日内、日间精密度与准确度结果符合生物样本测定要求。相关数据见表1。[/align][align=center]Table 1 Precision and accuracy of TBKW (n=18).[/align][align=center] [img=,610,133]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241121176922_9541_3255306_3.png!w610x133.jpg[/img][/align][align=left][b]4.2.6 回收率和基质效应 [/b]待测物TBKW基质效应的平均值为27.7-42.9% 内标TBTM基质效应的平均值为2.1-52.1%,经内标归一化计算后得出TBKW内标归一化基质效应平均为59.1-62.8%,RSD符合要求。待测物TBKW高脂血浆基质效应的平均值为25.3-28.4% 内标TBTM的高脂血浆基质效应平均为41.9-47.6%,经内标归一化计算后得出TBKW内标归-化高血脂基质效应平均值为59.0-60.4%,RSD均符合要求。待测物TBKW溶血血浆基质效应的平均值为22.0-25.5%,内标TBTM的高血脂基质效应平均为38.6-43.9%,经内标归一化计算后得出TBKW内标归一化高血脂基质效应平均值为55.9-62.6%,RSD均符合要求。表明在试验选择的样品处理、色谱与质谱条件下,待测物和内标均表现出较强的基质效应,均表现出较强的离子抑制作用,特别是TBKW,但该机制效应对待测物和内标作用方向致、稳定,经内标校正后,虽然还存在基质效应,但对分析结果不会产生明显影响。TBKW及其内标TBTM的提取回收率结果,分别见表7-3。待测物TBKW在低、中、高三个QC浓度水平上提取回收率的平均值在138.2%-148.2%之间,内标的提取回收率的平均值在124.0%-130.4%之间,内标校正后提取回收率的平均值在110.4-114.1%之间,RSD符合要求。待测物和内标物在不同浓度水平的提取回收率结果是精密和可重现的,相关数据见表2。[/align][align=center]Table 2 Extraction recoveryand matrix effect of TBKW (n = 6).[img=,631,234]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241121399474_1836_3255306_3.png!w631x234.jpg[/img][/align][align=left][b]4.2.7 溶液稳定性[/b] 用甲醇配制的TBKW储备液1mg/mL-20℃冻存7、22天后的含量均值为新鲜配制的TBKW的106.5%和106.0%,未见降解;TBKW工作液储备液75、6500ng/mL 4℃冷藏7、30天后的含量均值分别为新鲜配制的TBKW的94.5%,113.4% 和89.8%,109.2%,不存在明显降解。[/align][align=left][b]4.2.8 血浆样品稳定性 [/b]TBKW血浆样品在室温放置5h、处理好的血浆样本室温放置6h、自动进样器放置16h,冻融3次、长期冷冻(27天,高于待测样本保存时间)试验条件下,各浓度质控样本的准确度均值在85-115%之间,RSD%均小于15%,表明TBKW血浆样品在上述所考察的情况下稳定。血浆样品稳定性测试结果满足人体血浆样本检测需求。[/align][align=left][b]4.2.9 批分析 [/b]对8轮试验数据进行了比较。结果表明在同一进样批中,每浓度含 48个样本,共计192个样本,其中LLOQ中有6个点准确度20%,少于总样品数的20% (12.5%),且LLOQ准确度和精密度平均值均15%,QC-L、 QC-M 和QC-H的准确度和精密度平均值均15%,总进样时间约18小时。即除血浆标准曲线外和质控点,同批次测定 180个样本能够满足生物样本分析要求.[/align][align=left][b]4.3 药时曲线[/b] 12名志愿者单剂量空腹及餐后口服300 mg头孢克肟胶囊后,平均药-时曲线见图5[/align][align=center][img=,507,279]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241122298854_2799_3255306_3.png!w507x279.jpg[/img] [/align][align=center]图5 12名健康受试者在空腹和餐后口服单剂量头孢克肟后平均药-时曲线 [/align][align=left][b]4.4药代动力学参数及统计结果 [/b]见表3。[/align][align=center]Table 3 Mainpharmacokinetic parameters of cefixime capsules taken on an empty stomach andafter meals[/align][align=center] [img=,546,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241122478527_4468_3255306_3.png!w546x175.jpg[/img][/align][align=left][b]5 讨论[/b][/align][align=left]比较空腹和高脂餐后口服头孢克肟的血药浓度的达峰时间[color=black]Tmax,[/color]达峰浓度[color=black]Cmax[/color][color=black]及曲线下面积[/color]AUC的数值,发现餐后口服头孢克肟的达峰时间推迟约0.792 h,达峰浓度约为空腹时的42.2%,餐后相对于空腹给药的相对生物利用度为39%,证明食物对头孢克肟的吸收速率、消除半衰期及吸收总量等药动学参数有显著的影响,故推荐头孢克肟片剂饭前空腹服用。[/align][align=left]饮食因素对口服药物的影响常为病人所忽视,为了避免药物对胃肠道的刺激常喜饭后服药,但餐后服药易受食物等因素的影响。本文结果提示:头孢克肟片不宜餐后服药,较合理的给药方案应是在空腹或饭前2h服用。[/align][align=left]食物降低头孢克肟的吸收速率及吸收程度的原因可能有以下几点: ①食物的存在降低了胃排空速率,使药物在胃中停留时间延长,使胃中的药物浓度降低,药物的吸收减慢,从而导致达峰时间延长 ②头孢克肟为弱酸性药物,主要在小肠吸收,食物会使肠液的 pH 减小,降低了头孢克肟的溶解性和溶出度,从而导致头孢克肟的吸收量降低。这些研究结果为头孢克肟片在临床安全合理用药提供重要的参考依据。[/align][align=left][b]参考文献[/b][/align][align=left]张羽长,李明铭,隋欣蕙,赵春杰.头孢克肟胶囊人体药动学研究及生物等效性评价.药学服务与研究,2008,8(06):429-431.[/align][align=left] Meng, Fang, et al."Sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometry method for thedetermination of cefixime in human plasma: Application to a pharmacokineticstudy." Journal of Chromatography B 819.2 (2005): 277-282.[/align][align=left]KREMER JM,WESTHOVENSR ,LEON M ,et al .Treatment of rheumatoid arthritis by selective inhibition ofT-cell activation with fusion protein CTLA4lg. N Engl J Med ,2003,349(20):1907 - 1915.生物样品定量分析方法指导原则(草案),中国药典,2015。[/align]
我想做一下头孢拉定的核磁共振,但是找不到合适的溶剂溶解,我看资料上用的都是D2O,老师说应该是用酸性的,希望有经验的人能告诉我,PH多少比较合适。非常感谢!
那位仁兄做过注射用头孢噻肟钠,选用的是什么色谱柱,及相应的流动相 本人采用2010药典方法,使用创新通恒的色谱柱,主峰及杂质峰的拖尾都非常严重。再不改变流动相的情况下,用哪种色谱柱的比较好 2010药典的色谱条件: 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(取无水磷酸氢二钠至量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,用磷酸调节值至)-甲醇(:)为流动相;检测波长为"FONT-SIZE: 10.5pt; FONT-FAMILY: 'Times New=" New? Roman?;
那位仁兄做过注射用头孢噻肟钠,选用的是什么色谱柱,及相应的流动相 本人采用2010药典方法,使用创新通恒的色谱柱,主峰及杂质峰的拖尾都非常严重。再不改变流动相的情况下,用哪种色谱柱的比较好2010药典的色谱条件: 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(取7.1g无水磷酸氢二钠至1000mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,用磷酸调节pH值至6.25)-甲醇(85:15)为流动相;检测波长为235nm。
在GMP法规中,对一些药物的生产厂房设施做出了特殊的规定,跟小伙伴儿们分享一下,青霉素类和头孢类两者之间有没有本质的区别。抗生素是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)产生、能抑制或杀灭其他微生物的物质。抗生素分为天然品和人工合成品,前者由微生物产生,后者是对天然抗生素进行结构改造获得的部分合成产品,头孢是属于抗生素类。这两者都属于β-内酰胺类抗生素。头孢菌素类(Cephalosporins)是由冠头孢菌培养液中分离的头孢菌素C,经改造侧链而得到的一系列半合成抗生素。其抗菌谱广,对厌氧菌有高效;引起的过敏反应较青霉素类低;对酸及对各种细菌产生的β-内酰胺酶较稳定;作用机理同青霉素,也是抑制细菌细胞壁的生成而达到杀菌的目的.属繁殖期杀菌药。(头孢菌素是青霉素近源的头孢菌属的真菌发酵液离而来。)青霉素一般是静脉滴注的,药效强,但抗菌谱窄,且半衰期短。1.笫一代头孢菌素第一代头孢菌素是60年代初开始上市的。从抗菌性能来说,对第一代头孢菌素敏感的菌主要有β-溶血性链球菌和其他链球菌、包括肺炎链球菌(但肠球菌耐药),葡萄球菌(包括产酶菌株)、流感嗜血杆菌、大肠杆菌、克雷伯杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌、志贺菌等。不同品种的头孢菌素可以有各自的抗菌特点,如头孢噻吩对革兰阳性菌的抗菌作用较优,而头孢唑林则对某些革兰阴性菌有一定作用。但是,第一代头孢菌素对革兰阴性菌的β-内酰胺酶的抵抗力较弱,因此,革兰阴性菌对本代抗生素较易耐药。第一代头孢菌素对吲哚阳性变形杆菌、枸橼酸杆菌、产气杆菌、假单胞菌、沙雷杆菌、拟杆菌、粪链球菌(头孢硫脒除外)等微生物无效。本代抗生素中常用品种有头孢唑林、头孢氨苄、头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢克罗等。其中除头孢唑林只能供注射外,其他的均可用于口服,也称口服头孢。头孢噻吩、头孢噻啶、头孢来星、头孢乙腈、头孢匹林等均已少用或不用。 2.笫二代头孢菌素第二代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能与第一代相近或较低,而对革兰阴性菌的作用较为优异,表现在:(l)抗酶性能强一些革兰阴性菌(如大肠杆菌、奇异变形杆菌等)易对第一代头孢菌素耐药。第二代头孢菌素对这些耐药菌株常可有效。(2)抗菌谱广第二代头孢菌素的抗菌谱较第一代有所扩大,对奈瑟菌、部分吲哚阳性变形杆菌、部分枸橼酸杆菌、部分肠秆菌属均有抗菌作用。第二代头孢菌素对假单胞属(铜绿假单胞菌)、不动杆菌、沙雷杆菌、粪链球菌等无效。临床应用的第二代头孢菌素主要品种有头孢孟多、头孢西汀(美福仙),头孢呋新(西力欣),头孢克罗等。3.笫三代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能普遍低于第一代(个别品种相近),对革兰阴性菌的作用较第二代头孢菌素更为优越。(1)抗菌谱扩大第三代头孢菌素的抗菌谱比第二代又有所扩大,对铜绿假单胞菌、沙雷杆菌、不动杆菌、消化球菌、以及部分脆弱拟杆菌有效(不同品种药物的抗菌效能不尽相同)。对于粪链球菌、难辨梭状芽胞杆菌等无效。(2)耐酶性能强对第一代或第二代头孢菌素耐药的一些革兰阴性菌株,第三代头孢菌素常可有效。常用有:头孢哌酮(先锋必素)、头孢三嗪(罗塞秦、菌必治)、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等。 4.笫四代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的作用弱,不能用于控制金黄色葡萄球菌感染。近年来发现一些新品种如头孢匹罗(Cefpirome)等,不仅具有第三代头孢菌素的抗菌性能,还对葡萄球菌有抗菌作用,称为第四代头孢菌素。关于第一至第四代的划分不仅适用于头孢菌素,其他的一些β-内酰胺抗生素也可按此分代。常用有拉他头孢、头孢匹罗、氨曲南等。1.青霉素和头孢菌素都属于β-内酰胺类抗生素。2.青霉素是青霉菌培养液中提取精致获得的,是一种窄普抗生素,其基本结构是母核6--氨基青霉烷酸(6-APA),其中β--内酰胺环对抗菌活性起重要作用。3.头孢菌素是一类来自头孢菌的广谱抗生素。4.头孢菌素和青霉素类都具有相同的β-内酰胺环,所不同的是头孢菌素系7--氨基头孢烷酸(7--ACA)的衍生物,青霉素由6--氨基青霉烷酸(6-APA),两者的区别只是青霉素母核中五元噻唑环换成头孢菌素的六元双氢噻嗪环。
[color=#444444]请教大神,走头孢喹肟血浆样品紫外高效液相色谱,标准品样能走出来,用血浆经前处理后的样就走不出来了,血浆前处理过程主要是用乙腈重复提两次,取上清液,然后氮吹干,进样,请问走不出峰是什么原因呢?急求,多谢![/color]
求购头孢地尼E-异构体对照品头孢地尼做分析方法验证,其中有关物质头孢地尼E-异构体标准品买不到。很多销售公司都有但是资质不全我不能买他们的。请教各位大侠们,帮个忙吧。急用!!谢谢!!!!
为什么可以利用红外光谱分析法来区分不同的氨噻肟类头孢菌素药物
我需要食品中利巴韦林、安乃近、新霉素、头孢噻唑、头孢曲松钠测定方法!请大家帮忙谢谢!
请问头孢噻肟钠残留溶剂中各溶剂的出峰顺序及大概时间,柱子是KB-1,条件参照药典
药典规定头孢曲松钠的流动相是0.05%正辛胺溶液,但我们在做样的过程中发现柱损伤太快。一根新柱子可能做一个月就拖尾严重,柱压升高很快。但用拖尾的柱子做其他品种又没问题。这是什么原因?请问做过这个品种的老师们,用哪个厂家的柱子比较好。一根柱子就竟能用多长时间。现在最让我头痛的就是这个问题。柱子又比较贵,经常买会挨批的。最近还遇到了一个新问题,在做样的过程中,峰面积会不断增加。仪器是岛津2010。做其他品种对照品的RSD都很好,就是做这个品种的时候峰面积不断增加,RSD甚至超过了2%。这是什么原因造成的?请各位老师指点迷津!先此谢过!
老师:今天我做了一个头孢中间体,分别用DMSO、D2O做溶剂,两张谱图相差很大,是溶剂效应吗?谱图是扫描的,效果不太好。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=49432]谱图及结构式[/url]
各位大侠,我现在正在做毕业论文,检测头孢噻夫在大鼠体内的药物浓度,他要与血浆结合成二硫键,我在处理时也切开了二硫键,但是还是检测不出来,请大家给我出出主义,谢谢……讨论下!