当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

文立替丁

仪器信息网文立替丁专题为您提供2024年最新文立替丁价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括文立替丁参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的文立替丁您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合文立替丁相关的耗材配件、试剂标物,还有文立替丁相关的最新资讯、资料,以及文立替丁相关的解决方案。

文立替丁相关的论坛

  • 法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典

    法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典

    [align=center][b]法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典 [/b][/align][align=center] [/align]色谱条件色谱柱:Kromasil 100-5-C18, 4.6*250mm货号:M05CLA25流动相:醋酸盐缓冲溶液(取醋酸钠 13.6g,溶于900ML水中,用冰醋酸调节pH至6.0±0.1,加水至1000ML):乙腈=93:7流速:1.5ml/min柱温:35℃波长:270nm进样量:20[color=#333333]μL[/color][color=#333333][img=,596,251]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812271539396153_2091_2428063_3.jpg!w596x251.jpg[/img][/color]结论:1. 出峰顺序为杂质Ⅰ,法莫替丁,杂质Ⅱ2. 法莫替丁保留时间约为13.4min3. 杂质Ⅰ峰和杂质Ⅱ峰相对于法莫替丁的保留时间约为0.7和1.24. 理论塔板数按照法莫替丁计算不低于5000以上指标均符合中国药典。

  • 【讨论】ICP測試過程中發生的問題(強度不穩定)

    最近在測試過程中﹐當建立完標准曲線后﹐測試10個樣品后再測工作曲線中的一個樣品﹐但是強度發生很大的變化故濃度值隨之發生變化﹐原本1ppm的標准﹐在后面測試變成0.7多一點﹐再接著測試10個樣品后﹐強度又降低了﹐1ppm的標准只有0.65了。什么因素造成強度下降。(室溫有進行控制) 各位在測試樣品的時候有沒有遇到呢?我們的機子型號是PE2100DV[em11]目前已解決了﹐主要是霧化器的寶石噴嘴有點堵﹐造成霧化器的反饋壓力增大。所以在測試過程壓力不穩定﹐造成強度不穩定。具體做法﹕將寶石定期用5%的HNO3放于超聲波振蕩10分鐘﹐洗完后用清水沖洗﹐并檢查噴是否有堵塞。

  • 【求助】气相部分气体压力和流量不稳定?怎么回事?

    气相部分气体压力和流量不稳定,这是怎么回事我用的是 瓦里安的气质CP-3800300MS,最近气相部分气体压力和流量不稳定,怀疑过是EFC的问题,但是我换了另一个进样口,结果基本一致,还是不稳定.另一个进样口得EFC是正常的啊。我很是奇怪,不知道哪里出了问题。现在郁闷死了.请大家帮帮忙啊

  • 法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典

    法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典

    色谱条件色谱柱:Kromasil 100-5-C18, 4.6*250mm货号:M05CLA25流动相:醋酸盐缓冲溶液(取醋酸钠 13.6g,溶于900ML水中,用冰醋酸调节pH至6.0±0.1,加水至1000ML):乙腈=93:7流速:1.5ml/min柱温:35℃波长:270nm进样量:20μL[align=center][/align][align=center][img=,596,251]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812101529374292_9755_2785_3.png!w596x251.jpg[/img][/align]结论:1. 出峰顺序为杂质Ⅰ,法莫替丁,杂质Ⅱ2. 法莫替丁保留时间约为13.4min3. 杂质Ⅰ峰和杂质Ⅱ峰相对于法莫替丁的保留时间约为0.7和1.24. 理论塔板数按照法莫替丁计算不低于5000以上指标均符合中国药典。[hr/][align=center]Kromasil品牌[/align]Kromasil是Nouryon旗下高效化学品著名品牌,是全球领先的高性能硅胶基质填料和液相色谱柱生产商。Kromasil高性能多孔球形硅胶基质填料可广泛应用于胰岛素及其类似物、比伐卢定、利拉鲁肽、胸腺法新、达托霉素、EPO等蛋白、多肽及小分子药物等的分离纯化。30年来,Kromasil的经营理念始终是:为制药行业提供以硅胶为基质的、高性价比的、用于医药分离纯化的色谱填料和用于药物分析的液相色谱柱。Kromasil,一以贯之,创新向前。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/OeFA8HArUwdQyiaia3mAT7HllVGzL6MsslxRXMs2mHMtspgIicoVZic1d5iasgCuC61vnBQBiaC9v88vVZJlTMWwlDMg/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1&wx_co=1[/img] [/align][align=center] 更[color=#000000]多资料请访问[/color]:[b][color=#007aaa]http://www.kromasil.com/[/color][/b][/align]

  • 法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典

    法莫替丁颗粒系统适用性试验-2015中国药典

    色谱条件色谱柱:Kromasil 100-5-C18, 4.6*250mm货号:M05CLA25流动相:醋酸盐缓冲溶液(取醋酸钠 13.6g,溶于900ML水中,用冰醋酸调节pH至6.0±0.1,加水至1000ML):乙腈=93:7流速:1.5ml/min柱温:35℃波长:270nm进样量:20μL[align=center][img=,596,251]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812101526522191_3600_3232762_3.png!w596x251.jpg[/img][/align][align=left]结论:[/align]1. 出峰顺序为杂质Ⅰ,法莫替丁,杂质Ⅱ2. 法莫替丁保留时间约为13.4min3. 杂质Ⅰ峰和杂质Ⅱ峰相对于法莫替丁的保留时间约为0.7和1.24. 理论塔板数按照法莫替丁计算不低于5000以上指标均符合中国药典。[hr/][align=center]Kromasil品牌[/align]Kromasil是Nouryon旗下高效化学品著名品牌,是全球领先的高性能硅胶基质填料和液相色谱柱生产商。Kromasil高性能多孔球形硅胶基质填料可广泛应用于胰岛素及其类似物、比伐卢定、利拉鲁肽、胸腺法新、达托霉素、EPO等蛋白、多肽及小分子药物等的分离纯化。30年来,Kromasil的经营理念始终是:为制药行业提供以硅胶为基质的、高性价比的、用于医药分离纯化的色谱填料和用于药物分析的液相色谱柱。Kromasil,一以贯之,创新向前。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/OeFA8HArUwdQyiaia3mAT7HllVGzL6MsslxRXMs2mHMtspgIicoVZic1d5iasgCuC61vnBQBiaC9v88vVZJlTMWwlDMg/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1&wx_co=1[/img] [/align][align=center] 更[color=#000000]多资料请访问[/color]:[b][color=#007aaa]http://www.kromasil.com/[/color][/b][/align]

  • 【求助】大气稳定度

    请问大气稳定度用什么仪器监测啊?有没有大气稳定度仪?[color=red][font=宋体][size=3]想分析某个粒径的颗粒物的时[/size][/font][/color][color=red][font=宋体][size=3]间趋势,获得大气稳定度相[/size][/font][/color][color=red][font=宋体]关参数,用什么仪器测定啊?[/font][/color]

  • 替版友提问:请问下BSTFA衍生化后产物稳定吗?

    替版友提问,请大家帮忙解答:请问下BSTFA衍生化后产物稳定吗?原发件内容:我现在在用BSTFA衍生化血清测小分子代谢物,但由于样品量较大,不知道衍生化后产物稳定性好吗?在等待进样时应放在冰箱还是常温呢,求大佬解答一下,不胜感激!

  • 什么是稳定细胞株?稳定细胞株常见问题解析

    [font=宋体][font=宋体]稳定细胞,又被称为静止细胞,是那些在生理状态下增殖不明显,处于细胞增殖周期静止阶段的细胞([/font][font=Calibri]G0[/font][font=宋体]期)。然而,当它们受到组织损伤的刺激时,这些稳定细胞会迅速反应,进入[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期([/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期),展现出强大的再生能力。它们是维持组织和器官稳态的关键因素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]稳定表达细胞株,也被称为稳定转染细胞株,是一种特殊的细胞株。这些细胞能够持续、稳定地表达特定的基因或干扰特定基因的表达。在生物学和医学研究中,稳定表达细胞株被广泛应用于基因功能研究、药物筛选和疾病模型建立等领域。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]稳定细胞株平台的常见问题解答[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①若想做稳定细胞株,需提供哪些信息?[/font][font=宋体][font=宋体]客户仅需提供目标蛋白的序列信息和希望表达的目标蛋白的区段,义翘神州技术人员会根据客户要求进行表达风险评估和制定表达纯化策略。常见蛋白序列信息来源包括[/font][font=Calibri]UniProt[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]NCBI[/font][font=宋体]等数据库。客户也可直接提供编码目标蛋白的核苷酸序列。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②稳定株细胞如何交付?[/font][font=宋体]采用干冰运输,尽可能减少温度波动对细胞造成的影响。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③单克隆和[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]怎么选择?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]成药蛋白需要单克隆,以便溯源。如只需拿到蛋白[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]抗体的话,[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]即可满足。需要提醒的是,通常情况下,[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]产量较单克隆低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④稳定细胞株做重组蛋白,能否根据蛋白活性进行克隆筛选?[/font][font=宋体][font=宋体]是可以的,只要客户有完整的活性检测方法,我们可以提供[/font][font=Calibri]minipool[/font][font=宋体]供客户进行活性检测(或由义翘进行活性检测)。符合客户对活性的要求后再进行后续的实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤为什么要构建稳定细胞株?[/font][font=宋体]稳定株一个很大的优势是减小重组表达蛋白的批间差异,并且表达量通常比瞬转高。对于成药性抗体来说,构建稳定细胞株是十分必要的。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥为什么稳定细胞株构建周期较长?[/font][font=宋体]稳定株的构建周期长,很大程度是由于要筛选出阳性克隆,并需要对细胞株的稳定性进行检测。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑦制备稳定株表达蛋白的周期大致如何?[/font][font=宋体][font=宋体]如只需要[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]即可,从基因合成到得到纯化后的蛋白,周期一般在[/font][font=Calibri]7[/font][font=宋体]周左右。如需引入多步纯化方案,标签切除,以及额外检测服务则周期会根据具体项目情况有所延长。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]稳定细胞系构建服务[/b][/url],同时提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/stable-cell-line-development][b]稳定细胞株构建平台[/b][/url],详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/stable-cell-line-development[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 关于稳定的等离子体火焰

    电感耦合高频等离子(ICP)光源  等离子体是一种由自由电子、离子、中性原子与分子所组成的在总体上呈中性的气体,利用电感耦合高频等离子体(ICP)作为原子发射光谱的激发光源始于本世纪60年代。 ICP装置由高频发生器和感应圈、炬管和供气系统、试样引入系统三部分组成。高频发生器的作用是产生高频磁场以供给等离子体能量。应用最广泛的是利用石英晶体压电效应产生高频振荡的他激式高频发生器,其频率和功率输出稳定性高。频率多为27-50 MHz,最大输出功率通常是2-4kW。  感应线圈一般以圆铜管或方铜管绕成的2-5匝水冷线圈。  等离子炬管由三层同心石英管组成。外管通冷却气Ar的目的是使等离子体离开外层石英管内壁,以避免它烧毁石英管。采用切向进气,其目的是利用离心作用在炬管中心产生低气压通道,以利于进样。中层石英管出口做成喇叭形,通入Ar气维持等离子体的作用,有时也可以不通Ar气。内层石英管内径约为1-2mm,载气载带试样气溶胶由内管注入等离子体内。试样气溶胶由气动雾化器或超声雾化器产生。用Ar做工作气的优点是,Ar为单原子惰性气体,不与试样组分形成难解离的稳定化合物,也不会象分子那样因解离而消耗能量,有良好的激发性能,本身的光谱简单。  当有高频电流通过线圈时,产生轴向磁场,这时若用高频点火装置产生火花,形成的载流子(离子与电子)在电磁场作用下,与原子碰撞并使之电离,形成更多的载流子,当载流子多到足以使气体有足够的导电率时,在垂直于磁场方向的截面上就会感生出流经闭合圆形路径的涡流,强大的电流产生高热又将气体加热,瞬间使气体形成最高温度可达10000K的稳定的等离子炬。感应线圈将能量耦合给等离子体,并维持等离子炬。当载气载带试样气溶胶通过等离子体时,被后者加热至6000-7000K,并被原子化和激发产生发射光谱。

  • 如何判定机关粒度仪的准确性和稳定性?

    我在欧美克还有马尔文的激光粒度仪器上对粉体的粒度进行测试,但是结果相差比较大,虽然有些粉体厂家已经告诉一些粉体的粒度,但是这个数值也不一定准确~另外我问过一些技术人员,听他们说从SEM图像上观察到的颗粒尺寸并不能作为激光粒度的参考,所以想问到底怎么来判定哪个的测试结果更准确些呢?另外不同的激光粒度测试仪所测出的粒度不同,那么对于这么大的不确定性,是不是说激光粒度仪测试的粒度只能进行对比测试,比如说测试不同条件下制备不同粉体颗粒尺寸的相对大小,而不能定量的确定每种条件下粒度的实际值?另外不知道激光粒度仪是否存在稳定性的问题呢?会不会用过一段时间精确度和准确性会受到?之前将这个帖子发到热分析的版面上,现在本版面上再贴出来,希望更多大侠帮忙~~

  • 【资料】小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素的测定与分析

    [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=155679]小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素的测定与分析[/url]………………………………………………………………………………[color=#00008B]【目的】利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-燃烧-同位素比值质谱仪(gas chromatography-combustion-isotope ratio masss pectrometry,GC-C-IRMS)测定小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素组成。【方法】以小麦临汾50744为材料,水解得到其籽粒蛋白质氨基酸,将氨基酸标准样品以及小麦籽粒氨基酸衍生化为N-新戊酰基,O-异丙醇(N-pivaloyl-isopropyl,NPP)氨基酸酯,利用GC-C-IRMS测定其碳氮稳定同位素组成。【结果】氨基酸标准样品的碳氮同位素组成分析表明,NPP氨基酸酯的平均重现性δ^13C为0.47‰,δ^15N为0.28‰,并没有产生大的同位素分馏,因此δ^13C和δ^15N都能得到满意的测定结果。运用GC-C-IRMS测定了小麦临汾50744籽粒蛋白质氨基酸的稳定碳氮同位素的自然丰度,其中δ^13C的变化范围在-28.7‰到-34.7‰,δ^15N的变化范围为-6.2‰到9.5‰。采用系统聚类分析进行分类,根据δ^13C可以将氨基酸分为两类 根据δ^15N可以将氨基酸分为三类。【结论】运用GC-C-IRMS结合NPP氨基酸酯衍生物可以测定小麦籽粒氨基酸的稳定碳氮同位素,这对于揭示氨基酸代谢途径的差异以及逆境胁迫下氨基酸的合成差异具有重要的意义。[/color]

  • 分流衬管中玻璃毛对信号稳定的影响

    用安捷伦7890测定二硫化碳的异丙醇,因为同事在测定其他样品时候将衬管中玻璃毛取出,结果测定的峰面积忽高忽低,同样一分析管进样2次,峰面积竟然相差2倍,但是待测物质和二硫化碳的峰面积比值非常接近,开始以为是隔垫漏气,换了隔垫依然如此,后来我想是自动进样器是否进样品不稳定,改为手动进样品,结果也不理想。然后排查衬管和分流平板是否污染,才发现玻璃毛没有 了, 重新装上后, 峰面积一下就稳定了, 但是峰型就不是很尖锐了,也没有无玻璃毛出的峰漂亮。也许信号稳定和峰型之间只能求其一了。

  • 低流速梯度洗脱保留时间不稳定

    HPLC方法: 乙腈-水系统; 2.1mm*100mm的小直径的柱子; 流速=0.2mL/min; 梯度: 0-5min: 10%-20% 乙腈; 5-10min: 20%-90%乙腈结果发现化合物保留时间变化很大,而且系统压力不稳定. 工程师来校准后,高流速(1mL/min) 压力稳定,但是低流速压力和保留时间还是很差.难道是5-10min梯度变化太大,低流速时泵的梯度精度不够?!请有经验的朋友给解释一下啊!

  • 使用叔丁基锂是一种怎样体验?

    使用叔丁基锂是一种怎样体验?

    体验1: 我本科进组第一个实验就上了叔丁基锂。 搬了6年砖了,用过的最危险的物品还是叔丁基锂。 平时一般都不穿实验服,但是用叔丁基锂的时候一定会穿,带两层手套,叫个人在旁边看着以防万一。 用之前,所有仪器用热抢吹过,烧瓶塞好冲氮气,冷到-78C度。 取的时候扎氮气气球或者恒压氮气,用注射器洗够量后针头抬出液面,吸一段氮气,然后再缓慢推出,吸入,推出,把针头口的液体确保排掉,这样再把针头抽出来的时候不会因为针头口滴出来而起火。(如果针头不是那种带螺口的,应该用一只手hold住,绝大多数事故都是针头脱落导致的) 保持针头向下,注射器向上,针头和注射器上部充满氮气。平移至烧瓶口,然后扎进去,慢慢加,观察干冰浴鼓泡情况,太快的话就缓缓。 用完之后,我一般是取出针头,迅速扎入事先准备好的一小瓶THF里,推拉注射器清洗针管,再用水洗,直接水洗会“兹”的一声,针管较细的时候容易堵塞。(可用稀盐酸/饱和氯化铵清洗堵塞的针管) 最后,用于锂卤交换的叔丁基里都是至少加两个当量的,因为锂卤交换生产的叔丁基卤会消耗另一当量生产异丁烯,拔氢只需一当量。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512181353_578608_2984502_3.jpg体验2:几点补充:1.实验服千万不能穿传统的白大褂,一定要穿防火的那种。白大褂基本不防火,一旦着火就会贴紧,很难脱掉。。。2.清掉通风橱里的大量溶剂。叔丁基锂那一点溶剂烧烧就完了,问题不大(我导师有次拿注射器抽叔丁基锂打到空气里看火焰,纯属娱乐,不要模仿)。但是附近有大量易燃物就。。。这是UCLA那位女生挂掉的最主要原因3.注射器密封要好,确保注射器与针头的连接紧密。拔的时间手捏住针头中段往外慢慢拔,注射器不容易脱落。4.关于氮气那段,确实最后要保证长针头里面全是氮气(不只是针头口),这样才不会喷液。至于什么加料准不准,叔丁基锂本身浓度误差就很大,加上不稳定,所以多加个10%到20%基本上不会有什么问题,有时候还要过量100%补偿体系中残存的水汽损耗。另外叔丁基锂在有些溶剂里半衰期很短(THF不到1个小时),加料准不准意义不大。如果发现因为确实是加料不准造成反应失败(很少见),那就只能加大反应量减少加料误差。 至于正丁基锂LDA神马的,只要不是固体,量也不大(不是什么几十上百毫升),随便整。。。。体验3: 首先科普一个案例,UCLA(加利福尼亚大学洛杉矶分校)发生的事故。 Sangji是于2008年10月13日加入Patrick Harran组,直至发生事故时,她算是一个研究助理(research assistant)。 真人照片如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512181353_578610_2984502_3.jpg(AV画质见谅,手机码字。。。) 这个组是一个还算比较有名的有机合成组,她在进组后开始做反应,她发生事故时做的反应很简单,下反应手稿是在Sangji的笔记本中找到的:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512181354_578613_2984502_3.jpg 其实这个全合成中的小步骤看起来很简单,但是注意!step1中烯基锂试剂是用叔丁基锂和卤代烃交换得到的。 小插曲:市售叔丁基锂是什么样的呢?http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512181354_578615_2984502_3.jpg就是这样。。。市售的试剂都是标定好浓度的溶液。取用方法相信楼上写的已经很全面了,还有灵魂画师。。。我这里再补充一张http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512181355_578617_2984502_3.jpg好了,接着说事故。首先说结果,这个女生被自燃的叔丁基锂烧伤,抢救无效死亡。原因呢,个人总结如下,1. 做实验,实验室里只有一个人。同事在别的房间。但是规定做实验时,实验室必须有两个以上的人。这是背景。。。2. 操作失误。调查表明,事故似乎是由于充氮气时,瓶内氮气压强大(或者是其他什么细节原因),导致针头和注射器脱离,叔丁基锂喷溅出,但是在接受治疗的时候,她说是她拔出注射器太快,导致针头注射器分离。然而根据经验,取叔丁基锂时最好用针头用螺丝旋紧的注射器,而不是用普通的捅进去固定的注射器。这是事故最主要的原因。3. 保护措施缺失。没有穿防护服实验服,导致叔丁基锂溅在衣服上将衣服引燃。调查中,没有证据表明当事人当时佩戴有护目镜。这是导致事故后受伤严重的原因。4. 处理不当。发生事故后,当事人和隔壁的同事都慌了神,实验室的淋浴措施没有使用,当事人手忙脚乱又将己烷泼向自己(估计是慌了吧。。。当成水了),然后就FFF了。。。增加他人救援难度。这一系列主观客观原因导致了当事人死亡,学校也赔了几万美元,教授好像也受到了严厉的惩罚。。。 说了这么多,似乎与主题无关。但是我想从这个例子表明的是,用叔丁基锂的体验就是,小心小心在小心,谨慎谨慎在谨慎。即使你用过很多次,即使好像看起来很安全,但是一定要有如履薄冰的态度不然的话事故就会在你疏忽的一瞬间发生!为了你爱的人和爱你的人,一定要上心!但是不要对它过分畏惧,不要大意即可。(转自知乎)附:实验中不可忽略的【个人防护】清华大学实验室发生爆炸,现场应如何急救?

  • 瞬时转染与稳定转染:差异与特点

    [font=宋体]哺乳动物细胞表达系统具有促使蛋白正确折叠和实现复杂修饰的功能,表达的蛋白更近天然状态,能够运用于制药等活性要求高的领域。利用哺乳动物细胞表达系统生产蛋白通常有两种方式:瞬时转染与稳定转染(构建稳定细胞系),这两种方式在原理、操作流程、应用场景上均有所区别,本文主要就瞬时转染与稳定转染之间的区别做一介绍。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]瞬时转染与稳定转染实验原理的异同:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]瞬时转染与稳定转染都是将目的基因转染至特定哺乳动物细胞内,进而表达得到目的蛋白。不同的是瞬时转染的方式外源基因并没有转染到细胞的染色体上而是存在于游离的载体上,这样可以在短时间内获得基因的表达产物,但是随着细胞的不断分裂增殖外源基因最终会丢失,无法继续进行重组蛋白的生产;而利用细胞稳定转染则会将外源基因转染至细胞染色体上,目的基因不会随着细胞传代而消失,稳定转染的细胞株能够长期稳定的生产目的蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]实验操作的差别:[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]瞬时转染与稳定转染所用的质粒是不同的,瞬转的质粒不需要带有抗性,而用于稳定转染的质粒一定要带有特定的抗性以便于后续的克隆株筛选。另外,两者所用的培养基及实验试剂也有所区别。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]瞬时转染的操作比构建稳定细胞系的操作简单,构建好质粒后,经过细胞复苏、转染、细胞培养、蛋白纯化等步骤即可得到目的蛋白;而构建稳定细胞系需要先将构建好的质粒线性化,再导入培养好的哺乳动物细胞内,通过一定的转染方式实现质粒与细胞的融合,接着经过细胞池筛选、单克隆筛选、细胞传代培养等步骤才能得到稳定转染的细胞系。对稳定细胞系进行培养能够长期稳定的生产目的蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]瞬时转染与稳定转染优缺点对比[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]瞬时转染:[/font][font=宋体]优点:[/font][font=宋体]①能够快速生产得到微量至中量的重组蛋白[/font][font=宋体]②实验成本低[/font][font=宋体]③一个宿主可以带有多个拷贝,表达效率高[/font][font=宋体]缺点:无法长期生产得到重组蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]稳定细胞系构建:[/font][font=宋体]优点:能够长期稳定生产目的蛋白[/font][font=宋体]得到稳转株之后后续生产蛋白的成本大大降低[/font][font=宋体]能够对基因进行基因插入、基因敲除等编辑操作[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]稳定细胞系构建服务[/b][/url],包含过表达细胞系构建服务和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]稳定细胞株开发服务,详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service[/font][/font]

  • 稳定细胞系助力重组蛋白高效生产

    [b][font=宋体]前言[/font][/b][font=宋体]在蛋白质研究领域,稳定细胞系的应用已成为生产高质量结构生物学蛋白质的关键手段。随着技术的不断进步,稳定细胞系的生成与筛选方法得到了显著改进,从而推动了蛋白质生产的高效化与精准化。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]细胞系的建立和应用[/font][font=宋体][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞系[/font][/font][/b][font=宋体]因其稳定的蛋白表达和适当的翻译后修饰而被广泛用于结构生物学研究。这些细胞系能有效地生产具有复杂糖基化模式的蛋白质,这对于确保蛋白质的功能和稳定性至关重要。糖基化缺陷细胞系通过特定的基因改造,能够分泌脱糖基化糖蛋白,为蛋白质生产提供了更加纯净的原料。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]稳定细胞系的生成[/font][/b][font=宋体][font=宋体]传统的稳定细胞系生成技术如瞬时转染,虽然方法简便,但存在整合频率低、转基因沉默等问题。为了克服这些困难,研究者们开发出了一系列新技术,如细胞分选技术、位点特异性重组(如[/font][font=Calibri]FLP/FRT[/font][font=宋体]系统)、转座子系统(如[/font][font=Calibri]piggyBac[/font][font=宋体])、慢病毒系统以及噬菌体整合酶等,提高了稳定细胞系的生成效率和稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]序列特异性基因组工程也为稳定细胞系的生成提供了新的思路。通过敲除或修饰特定的基因,研究者们能够实现对细胞功能的精准调控,从而优化蛋白质生产的效率和纯度。例如,一种同时缺乏[/font][font=Calibri]GnTI[/font][font=宋体]和谷氨酰胺合成酶([/font][font=Calibri]GS[/font][font=宋体])活性的[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞系被成功开发出来,为高效筛选具有[/font][font=Calibri]GS[/font][font=宋体]标记的稳定细胞系提供了有力工具。[/font][/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]稳定细胞系与瞬时转染的比较[/font][/b][font=宋体]稳定细胞系相较于瞬时转染具有多个优点,包括能够进行大规模生产和保持高水平的蛋白表达稳定性。尽管瞬时转染在某些情况下能快速产生大量蛋白,但其表达水平和重复性通常不如稳定细胞系。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]展望[/font][/b][font=宋体]近年来,利用稳定细胞系高效生产结构生物学蛋白质已成为研究的热点和趋势。通过引入新技术、优化筛选方法和改进整合系统,不仅能够提高蛋白质生产的效率和纯度,还能够为结构生物学研究提供更加精准、可靠的实验工具。随着基因编辑和细胞工程技术的进步,预计在未来,通过精确的基因操作能够更有效地创建和利用稳定细胞系。这些技术的进步将促进结构生物学和药物开发中蛋白质的高效和可持续生产。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]本文由义翘神州进行整理,同时提供[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][u][font=宋体][color=#0000ff]稳定细胞系构建服务[/color][/font][/u][/url][font=宋体],详情可点击了解![/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]参考文献:[/font][font=Calibri]Büssow K. Stable mammalian producer cell lines for structural biology. [/font][i][font=Calibri]Curr Opin Struct Biol[/font][/i][font=Calibri]. 2015 32:81-90. doi:10.1016/j.sbi.2015.03.002[/font]

  • 有關Na離子測量問題

    請問以IC測量納離子,是否不能用玻璃量瓶,如果用PP量瓶其精確度夠準確嗎?有何替代方法?[em06]

  • 【讨论】公告: 請有樣品處理問題的同志進來交流

    各位:為了感謝大家一直以來對本板塊的支持,現在在本板塊開樣品處理疑問解答,如您在食品,礦石,土壤等樣品的重金屬檢測時,遇到有相應的樣品處理問題如怎樣消解,加什麼試劑等等,請跟帖交流,這樣在幫你處理問題也可給其他人提供參考.我會盡量幫大家解決這些問題,謝謝!

  • 食品稳定剂的添加量及特性的简要汇总

    [align=center][font=宋体]食品稳定剂的添加量及特性的简要汇总[/font][/align][align=left][font=宋体][/font][/align][align=left][font=宋体][/font][/align][align=left][font=宋体]稳定剂又称为安定剂,具有亲水性,能提高材料液体的粘度和乳品冷饮的膨胀率,防止大冰结晶的产生,减少粗旷的感觉,对乳品冷饮产品融化作用的抵抗力强,使制品不易融化和重结晶,在生产中能起到改善组织状态的作用。[/font][/align][align=left][font=宋体][/font][/align][align=left][font=宋体][/font][/align][align=left][font=宋体]特性和使用量参考的表格:[/font][/align][table][tr][td=5,1] [align=left][font=宋体]稳定剂的添加量及特性[/font][/align] [/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]名称[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]类别[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]来源[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]特性[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]参考用量/[/font]%[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]明胶[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]蛋白质[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]牛猪骨、皮[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]热可逆性凝胶、[/font][/align] [align=left][font=宋体]可在低温时融化[/font][/align][/td][td][align=left]0.5[/align][/td][/tr][tr][td][align=left]CMC[/align][/td][td][align=left][font=宋体]改性纤维素[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]植物纤维[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]增稠、稳定作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.2[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]海藻酸钠[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]有机聚合物[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]海带、海藻[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]热可逆性凝胶[/font][/align] [align=left][font=宋体]增稠、稳定作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.25[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]卡拉胶[/font] [/align][/td][td][align=left][font=宋体]多糖[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]红色海藻[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]热可逆性胶[/font][/align] [align=left][font=宋体]稳定作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.08[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]角豆胶[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]多糖[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]角豆树[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]增稠[/font][/align] [align=left][font=宋体]和乳蛋白相互作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.25[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]瓜尔豆胶[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]多糖[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]瓜尔豆树[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]增稠作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.25[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]果胶[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]聚合有机酸[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]柑橘类果皮[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]胶凝、稳定[/font][/align] [align=left][font=宋体]在[/font]ph[font=宋体]较低时稳定[/font][/align][/td][td][align=left]0.15[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]微晶纤维[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]纤维素[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]植物纤维[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]增稠、稳定作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.5[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]魔芋胶[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]多糖[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]魔芋块茎[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]增稠、稳定作用[/font][/align][/td][td][align=left]0.3[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]黄原胶[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]多糖[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]淀粉发酵[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]增稠、稳定作用[/font][/align] [align=left]ph[font=宋体]变化适应性强[/font][/align][/td][td][align=left]0.2[/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font=宋体]淀粉[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]多糖[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]玉米制粉[/font][/align][/td][td][align=left][font=宋体]提高粘度[/font][/align][/td][td][align=left]3[/align][/td][/tr][/table]

  • CNW液相色谱柱使用体验征文活动之《范文欣赏》

    参加安谱CNW液相色谱柱使用体验征文活动,赢IPAD大奖,具体参赛规则点击这里:《活动规则》在这里挑选了部分投稿文章大家共享《CNW液相色谱柱使用征文大赛之一》:CNW液相色谱柱对大闸蟹色素的提取研究《CNW液相色谱柱使用征文大赛之二》:CNW Athena C18液相色谱柱检测食品包装材料聚苯乙烯中的9种荧光增白剂《CNW液相色谱柱使用征文大赛之三》:CNW Athena C18-WP液相色谱柱测定淀粉及淀粉制品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐的含量《CNW液相色谱柱使用征文大赛之四》:CNW Athena C18液相色谱柱检测婴幼儿乳粉中5种核苷酸《CNW液相色谱柱使用征文大赛之五》:CNW Athena C18液相色谱柱检测丝状真菌产生的次生代谢产物《CNW液相色谱柱使用征文大赛之六》:CNW Athena C18-WP色谱柱测定镇江香醋中有机酸含量及色谱柱性能测试《CNW液相色谱柱使用征文大赛之七》:CNW Athena C18-WP色谱柱分离D、L-抗坏血酸《CNW液相色谱柱使用征文大赛之八》:CNW Athena C18检测肉制品中苯甲酸、山梨酸的含量

  • 中药药理-温里药

    凡能温里散寒,治疗里寒证的药物称为温里药。温里药具有温里散寒、止痛等作用,其中部分药物还有温阳、回阳作用。里寒证常见以下二个方面的病证:一是寒邪入里,脾胃阳气受抑;因脾主腐化水谷,脾阳受侵,则水谷不消,见心腹胀满、脘腹疼痛、呕吐、泄泻等,宜温中散寒。二是心肾阳气虚弱,寒从内生,见腰膝酸痛、四肢浮肿、小便不利等;尤其心肾阳衰,而见汗出不止、四肢厥冷、呼吸微弱、脉微欲绝等的“亡阳证”必须温肾回阳。根据温里药的近代研究结果,将其药理作用归纳如下。   (1)对心血管系统的作用:温里药具有“回阳救逆”和“温心阳”的功效,用于“心阳衰微”及“亡阳证”。心阳衰微与心力衰竭及缓慢型心律失常等有关,亡阳与休克的症状相似。“回阳救逆”的代表药有附子等,代表方有四逆汤、参附汤、芪附汤等。它们用于心脏病及各种休克和低血压、缓慢型心律失常等均有一定疗效。实验证明附子、乌头、干姜、肉桂、细辛等对心血管系统均有明显作用,现分为强心、抗心律失常和抗休克二方面加以叙述。  ①强心反抗心律失常。附子及乌头煎剂对各种动物的离体心脏和在位心脏均有强心作用。可使收缩力加强,心率加速,冠脉血流量和心肌耗氧量增加。亦能增加培养的心肌细胞搏动频率及振幅,提高家兔实验性窦房结病的心率,使动物恢复窦性心律,使大部分动物的ST一T波的改变恢复正常。并能对抗小鼠实验性缓慢型心律失常。临床用于缓慢型心律失常及各型休克均有较好疗效,这与附子的“温阳”功效是一致的。细辛亦能增加心肌收缩力,明显改善左室泵功能。姜的酒精提取液对心脏有直接兴奋作用。  ②抗休克。熟附片制剂可引起麻醉猫或犬的血压下降,同时引起下肢血管扩张,冠脉流量增加。附子及芪附、参附注射液能显著提高小鼠对缺氧的耐受力,对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血和心律失常。并能缩小和减轻麻醉犬急性心肌缺血性损伤的范围和程度。人参四逆汤对失血性低血量休克能延长其存活时间和存活百分率;对纯缺氧性休克、血管栓塞性休克及心源性休克等能提高平均动脉压,加强呼吸运动,稳定中心静脉压和延缓因缺氧而引起的异常,心电图波形的出现,延长休克动物的存活时间,并能提高常压下小鼠耐缺氧的作用。以上说明附子用于“亡阳”及“四肢厥逆”,具有“回阳救逆”的功能密切相关。  姜的挥发油和辛辣成分(姜酚及姜烯酚)能使血管扩张,血行旺盛,促进循环。姜的酒精提取液对猫的血管运动中枢和呼吸中枢有兴奋作用。这些有利于休克状态的机体恢复。  肉桂水煎剂及桂皮油、桂皮醛、桂皮酸有血管扩张作用,促进血液循环,使身体表面和末稍的毛细血管血流畅通,对体内脏器也能增加血流量,起到温热的作用。肉桂能使离休豚鼠心脏的冠脉流量增加。麻醉犬静脉注射后1~2分钟,冠脉和脑血流量明显增加,血管阻力下降,对垂体后叶素所致家兔实验性急性心肌缺血有一定的保护作用。试管内浓度0.2g/ml和静脉6.0g/kg均能显著抑制ADP诱导的大鼠血小板聚集,体外有抗凝作用。以上作用可初步说明肉桂的“通血脉”功效。  胡椒、肉桂、干姜等能引起皮肤血管扩张,故服药后可出现全身温热感。吴茱萸醇提取液对正常家兔有升温作用。温里药的以上作用,可能与“助阳气”的功效有关。  (2)健胃及驱风作用:温中散寒的中药,大多有健胃、驱风作用。干姜、胡椒、吴茱萸等,其味均甚辛辣,故为辛辣性健胃药。例:姜的芳香和辛辣成分能直接刺激胃粘膜引起局部血液循环改善,胃液分泌增加,胃蠕动增加,有助于提高食欲和促进消化吸收作用,增强人体唾液淀粉酶的作用;姜煎剂灌注分离小胃的狗,使小胃胃液分泌增加,并刺激游离盐酸分泌,增强脂肪酶的作用。丁香、高良姜、草豆蔻对胃液分泌亦有影响,当犬主胃灌注丁香浸出液后,小胃的胃酸排出量和胃蛋白酶活力均显著提高;高良姜浸出液能提高胃酸排出量;草豆蔻能明显提高胃蛋白酶的活力。家兔经消化道给予姜油酮可使肠道松弛,蠕动减弱。姜、肉桂、吴茱萸、丁香、胡椒等对胃肠道有缓和刺激作用,能增强胃肠张力和蠕动,有利于胃肠积气的排出。由于这类药物有健胃、驱风和兴奋消化功能,能排除胃肠积气,在排气后有时出现较长时间的肠道松弛。从而可以说明本类药物治里寒证水谷不化,心腹胀满及泄泻脘腹疼痛等的部分机理。  (3)镇吐作用:姜有止吐降逆作用,其浸膏能抑制狗由于硫酸铜引起的呕吐。丁香亦有镇吐作用。  (4)镇痛作用:附子、姜、肉桂、吴茱萸、细辛等均有不同程度的镇痛作用。乌头碱类生物碱及乌头煎剂均具有镇痛作用,能提高小鼠热板法及电刺激法的痛阈。姜酚及姜烯酚口服或静脉注射。在RandaII SelittO法(大鼠)及醋酸扭体法(小鼠)均有镇痛作甩。肉桂中的桂皮醛对小鼠的压尾刺激或醋酸扭体法试验,表现有明显镇痛作用,还有镇静、解热作用。吴茱萸、吴茱萸碱、异吴茱萸碱及细辛挥发油经兔齿髓电刺激法证明有镇痛作用。

  • 【原创】实验室信息化管理(LIMS)系统中,“综合成分稳定度”指标的意义

    近来很多读者朋友问及我们的“光谱分析网络统计分析管理系统”(LIMS)中的“综合成分稳定度”的概念、意义、用途等方面的问题,现就其作简要说明。注:此帖已在“直读光谱仪”专栏中的“好马如何配好鞍”的回复帖,由于与LIMS系统有关,具有一定的共性,所以也在此与本栏目的朋友们大家共享。1,概念:“综合稳定度”的概念是统计学概率论中的一个纯理论性的概念,是对批量数据对其真值的置信度(可信程度)及其离散性的一个相对量化判断指标。2,意义:“综合稳定度”指标的数值越小,说明置信度越高、离散性越小。反之亦反。但是当该指标小到一定程度(如:等于“0”或接近“0”时,)就会出现实验数据太真实而虚假了。间接的反映了可能是实验设备出现故障,而不能对实验作出真实的检测与分析。针对“直读光谱仪”就可能出现如下故障;氩气问题、真空问题、光路问题、激发台污染等,说明该立即进行设备的检修与保养。3,用途:(对实验室其他“分析仪”系统具有相同用途)---A,对分析试验设备的性能作出判断; 如采用同一标样、相同实验次数(如每台设备作10次)、同一操作者,对不同的设备作试验检测,就可得出设备试验的重复性、置信度、设备完好性等的具体量化判断。---B,对标样的均匀程度作出判断;在同一完好设备下,对一个标样的不同部位(如取十个点位)作十次分析实验,得出的“综合成分稳定度”指标,就可得出该标样均匀程度的---C,对企业产品的质量作出判断;在设备完好的前提下、在某一时段内(如一天、一周、一月等)对企业产品的分析试验批量数据,作“综合成分稳定度”评估,就可间接反映企业生产工艺(炼钢配料、铸造熔炼等工艺)的具体量化判断。---D,对操作者的熟练程度作评价;可以间接反映操作人员的熟练程度、责任心,设备保养周期等实际情况。---E,在试验室信息化管理(LIMS)系统中具有重要的理论与实际意义。

  • 体系文件修订履历

    针对文件的修订,文件管理程序有规定针对修改的地方进行标识(如加粗/斜体/下划线等形式)。以下情形在实际作业中有些困扰,大家是如何解决的?1.有时候修订时删除了部分内容或者在格式排版上有做调整,有些修订的地方可能没法体现; 当发生以上情形或修订的内容较多,修订履历上只写“全面修订”, 那如何界定什么情况下做全面修订而无需在修订履历上写清具体的修订内容(如:A章节的BBBB修订为CCC)?2.针对文件版本的变更,怎么规定会合理?有时候一份文件可能仅仅修订了其参考的一份参考文件的版本,其它内容并未更新,做版本更新似乎没有必要。目前只有针对质量手册有规定修订5次进行换版。但全面展开似乎过于繁琐。

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制