木聚糖酶

http://file1.foodmate.net/file/upload/201202/17/16-21-31-65-410687.jpg关于对《木聚糖酶》行业标准征集意见的通知 附件： http://www.foodmate.net/member/fckeditor/editor/images/ext/zip.gif 木聚糖酶征求意见稿.zip

1.如题。GB/T23874-2009是检测饲料添加剂木聚糖酶活力的方法，现在我要检测猪饲料成品中的木聚糖酶活力，该采用什么方法？2.一般情况下猪饲料中木聚糖酶活力有多少？

在做饲用木聚糖酶酶活测定时，采用国标法结果很不稳定，同一样品隔几天测结果相差很大；标准曲线做了三次K值均呈下降趋势，相关系数倒是蛮好的。我怀疑是DNS试剂的问题，在整个配制过程中唯一不同的地方就是用滤纸过滤代替烧结玻璃过滤器过滤，请问影响大不？请各位帮忙分析下，谢谢！

求助QB/T 4483-2013 木聚糖酶制剂QB/T 4481-2013 β-葡聚糖酶制剂

[align=left][font=宋体, SimSun][size=16px][b][font=宋体, SimSun]加工助剂在加工过程中发挥改善产品品质的功能，却在最终产品中没有残留，因为它们在加工过程中经常被销毁或移除。依据法规要求，这种物质不需要列在产品标签上，因此，使用加工助剂来代替化学添加剂为食品清洁标签提供了一种新途径。[/font][font=宋体, SimSun]酶制剂是一类最常用的加工助剂，在烘焙过程中，发挥改善功能的烘焙酶被高温烘烤所破坏，所以不必在标签上声明。因此，烘焙酶为烘焙食品带来了实现清洁标签的机会。[/font]木聚糖酶[i][/i]增加烘焙食品中的纤维含量[/b][/size][/font][/align][font=宋体, SimSun][size=16px]纤维有益于人体健康，所以很多面包师都试图增加烘焙产品中的纤维含量。然而，像麸皮这样的纤维，吸收了大量的水分，且吸收速度比面团中的其他成分较慢。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=16px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=16px]当纤维吸收水分后，面团变紧，导致操作不便。面团无法扩张，限制了酵母的作用，进而会导致面包质劣，且不能很好地成型。针对上述问题，木聚糖酶可切断大纤维链间的糖苷键[i][/i]，以释放低分子量的糖和水。这有助于慢慢地软化面团，重新分配水分，增强气室延展性和稳定性，提高面团可操作性。[/size][/font][size=16px][/size][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#48494d][/color][/size][/font]

谁有甘露聚糖酶的检测标准？

甘露聚糖酶如何检测？

GB/T23874-2009饲料添加剂木聚糖酶活力测定中4.6木聚糖溶液浓度为100mg/ml，有错误吗？因为其描述为：4.6木聚糖溶液浓度为100mg/ml：称取木聚糖(sigmaX0627)1.00g，加入0.32g氢氧化钠，再加入90ml水，磁力搅拌，同时缓慢加热，直至木聚糖完全溶解。然后停止加热，继续搅拌30min，加入0.5 ml冰乙酸。继续磁力搅拌，测定器pH，若PH为5.50，用乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100ml。大家帮忙计算一下，国标上这样写的浓度是不是应该为10mg/ml啊？是不是国标出错了。另外sigmaX0627国内无现货，可以用别的代码的sigma药品啊？可以推荐下吗？急急急急急急

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=67262]准确测定和表征β-葡聚糖酶活的方法与比较[/url]

糖酶的新近发展摘要：简要介绍了糖酶中淀粉酶、乳糖酶、纤维素酶作用机理和应用前景；详细介绍了α-葡萄糖苷酶的理化性质、作用机理、研究现状以及展望了其应用前景。关键词：糖酶；α-葡萄糖苷酶；研究现状；应用前景酶制剂作为一类绿色食品添加剂，用于改善食品品质和食品制造工艺，其应用已越来越普遍，品种也不断增多。其中，糖酶（carbohydrases）是一种应用相当广泛的酶类。它通过裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成较小的分子；也能催化糖单位结构重排，形成新的糖类化合物，这类反应被称为转糖苷作用；此外，一些酯酶能作用于酯化的糖类，这类反应在改变果胶物质的功能性质上是很重要的。 本文大致介绍了糖酶中淀粉酶（amylase）、乳糖酶(lactase)、纤维素酶(cellulose)。主要介绍了α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)，一种新型的糖苷酶。1.淀粉酶淀粉是由葡萄糖通过α-1 ,4糖苷键和α-1,6糖苷键连接而成的高分子化合物，而糖酶广泛分布于自然界，能裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成为较小的分子，两者具体作用方式如下图所示。 淀粉工业中常用的糖酶有以下四类:（1）α-淀粉酶(液化酶，α-Amylase，α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶，EC3.2.1.1)，主要来自芽胞杆菌和曲霉，它是一种内切型淀粉酶，作用于淀粉是从淀粉分子的内部任意切开α-1,4-糖苷键，使淀粉分子迅速降解，失去粘性和碘的呈色反应，同时使降解物的还原力增强。(2)β-淀粉酶(β-Amylase，α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶，EC3.2.1.2)，在工业上应用的酶制剂主要来自植物(如大麦)和微生物(芽孢杆菌)。作为外切型淀粉酶，它作用于淀粉时从还原端以麦芽糖为单位切断α-1,4-糖苷键，但产物不是α型的麦芽糖，而是[font

用试剂盒方法(酶法)测定食品中葡聚糖含量摘要:描述了用试剂盒(酶法)测定食品中葡聚糖含量的方法前言: β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒细胞壁中的多糖，是籽粒细胞壁的主要成分，化学名称为(1，3)(1，4) -β-D-葡聚糖，其含量以大麦和燕麦中较高其主要功能有：降低胆固醇，降血脂，调节血糖，提高免疫力，抗肿瘤和预防心血管疾病等。还有研究发现，它可以缓解和减轻肥胖症状。 β-葡聚糖测定方法包括酶测定法、荧光法、高效液相色谱法等，其中酶测定法因其反应专一性，测定准确可靠，而被采用为国际测定方法。酶法的方法过程如下：样品经水合和糊化，用地衣酶(β一葡聚糖酶)将样品中的β一葡聚糖酶解成β-葡基-寡聚糖。经调整体积和过滤分离后，用β一葡萄糖苷酶将这些可溶的B-葡基-寡聚糖水解成葡萄糖。葡萄糖用葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，后者用过氧化酶分解，以便在苯酚存在下，生色基4一氨基非那宗存在下形成适于比色分析的光吸收络合物，在紫外分光光度计下测定。 本文采用爱尔兰的Megazyme公司提供的测定(1，3)(1，4) -β-D-葡聚糖试剂盒，借鉴了EBC法3.11.1、AOAC法995.16，AACC法32-23方法，建立了测定相关制品中β-葡聚糖的测定方法。

[color=#444444]我用这种方法测定桦木木聚糖糖组分：采用4%硫酸在121 °C下酸解木聚糖4 h，滤液稀释一定倍数后利用高效离子液相色谱（HPAEC，戴安ICS-3000，美国）测定单糖含量。采用ED50电化学检测器，CarbopacTM PA1色谱柱。[/color][color=#444444]标样保留时间：阿拉伯糖5.68、半乳糖6.98、葡萄糖8.10、木糖9.60、甘露糖10.32。[/color][color=#444444]桦木木聚糖出峰时间和相对峰面积：5.217 min 3.84%，7.15 min 0.8%，8.033 min 67.89%，9.5 min 0.2%， 11.45 min 20.54%，25.5min 6.36。[/color][color=#444444]这数据和标样对得上的只有葡萄糖、半乳糖和木糖，这样算出来葡萄糖含量有97.88%，但是我的样品是可溶的桦木木聚糖，最多的应该是木糖才对。[/color][color=#444444]这是因为桦木木聚糖是可溶的，与那些水解后的单糖混在一起，影响了色谱柱的分析造成的吗？有没有其他便捷的分析我这种木聚糖糖组分的方法？[/color]

β-葡聚糖的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数通过β-1,3结合，这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，全面刺激机体的免疫系统。那么，机体就有更多的准备去抵抗微生物引起的疾病。β-葡聚糖能使受伤机体的淋巴细胞产生细胞因子（IL-1）的能力迅速恢复正常，有效调节机体免疫机能。大量实验表明，β-葡聚糖可促进体内IgM抗体的产生，以提高体液的免疫能力。这种葡聚糖活化的细胞会激发宿主非专一性防御机制，故应用在肿瘤、感染病和治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素的β-1,3-葡聚糖在美国FDA已认定是一种安全的物质，可添加在一般食品，许多报导显示老鼠口服酵母β-1,3-葡聚糖，可增加强腹膜细胞抗菌之吞噬作用。酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种具有增强免疫力活性的多糖——β-葡聚糖。β-葡聚糖广泛存在于各种真菌和植物，如香菇、灵芝、燕麦中，是它们发挥保健作用的主要功效物质。而酵母葡聚糖的免疫增强活性更强，并具有改善血脂、抗辐射、改善肠道功能的作用。

【序号】：1【作者】： 陈江燕邬国铭【题名】：纤维素酶对壳聚糖降解作用的研究【期刊】：广东医学院学报【年、卷、期、起止页码】：2003年02期 【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2003&filename=GDYY200302005&v=MDk1MDV4WVM3RGgxVDNxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeTNtVmIzQklpblNkN0c0SHRMTXJZOUZZWVI4ZVgxTHU=【序号】：2【作者】： 刘天富戚秋鹏【题名】：不同取代度的羟丙基壳聚糖生物降解性研究【期刊】：中国海洋药物【年、卷、期、起止页码】：2004年01期 【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2004&filename=HYYW200401008&v=MDg4MTQzbVc3ckxMVFRTZWJHNEh0WE1ybzlGYklSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnk=【序号】：3【作者】： 新型【题名】：天津工业生物所壳聚糖酶酶解机制研究取得新进展【期刊】：化工新型材料【年、卷、期、起止页码】：2016年08期 【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFDLAST2016&filename=HGXC201608100&v=MTcwNTVGWklSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnkzblVMdk5MU3JUYmJHNEg5Zk1wNDU=【序号】：4【作者】： 杨贵杰高星爱【题名】：壳聚糖降解酶及伽马辐射降解壳聚糖的研究概述【期刊】：安徽农学通报【年、卷、期、起止页码】：2014年22期 【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFDLAST2015&filename=AHNB201422016&v=MjE4NzRxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeTNuVzd2T0pDWEZiTEc0SDlYT3JZOUVZb1I4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDM=

根据文献等比例缩小体积，全部的反应均在96孔板上反应，先加入10μL底物（2%蔗糖溶液），后加入各浓度梯度的样品溶液20μL，反应5min后，加入蔗糖酶溶液10μL，反应20min后，加入无水乙醇20μL灭酶，灭酶后加入20μLDNS，最后用pbs稀释测定吸光度。（1）蔗糖酶用的是来自酵母菌的，我看文献用的都是鼠小肠里的（2）蔗糖酶一开始用的20U/mL，DNS测定后吸光度太大，且各个样品几乎没有抑制率，今天换2U/mL，样品和阿卡波糖均几乎没有抑制率。（3）究竟DNS测定这个是否存在问题，求老师指导。

的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数通过β-1,3结合，这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，全面刺激机体的免疫系统。那么，机体就有更多的准备去抵抗微生物引起的疾病。β-葡聚糖能使受伤机体的淋巴细胞产生细胞因子（IL-1）的能力迅速恢复正常，有效调节机体免疫机能。大量实验表明，β-葡聚糖可促进体内IgM抗体的产生，以提高体液的免疫能力。这种葡聚糖活化的细胞会激发宿主非专一性防御机制，故应用在肿瘤、感染病和治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素的β-1,3-葡聚糖在美国FDA已认定是一种安全的物质，可添加在一般食品，许多报导显示老鼠口服酵母β-1,3-葡聚糖，可增加强腹膜细胞抗菌之吞噬作用。 酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种具有增强免疫力活性的多糖——β-葡聚糖。β-葡聚糖广泛存在于各种真菌和植物，如香菇、灵芝、燕麦中，是它们发挥保健作用的主要功效物质。而酵母葡聚糖的免疫增强活性更强，并具有改善血脂、抗辐射、改善肠道功能的作用。

自1993年燕麦葡聚糖被美国FDA鉴定为降低血糖、抗氧化和减小心脏病发病的特效保健品和药物以来，燕麦葡聚糖在精细化工和高级保健品方面得到广泛的应用。其中1%的燕麦葡聚糖水溶液更是作为高端化妆品的一种重要成分得到广泛的应用。燕麦葡聚糖用于化妆品能赋予皮肤光滑和丝绸般的触感，可以高效保持皮肤水分，同时其抗氧化功能可以防止黑色素和细纹的形成，从而减缓皮肤的衰老。此外，燕麦葡聚糖对高温、紫外线非常稳定，所以适用于需要高温处理和高温搅拌的工艺。对于高端化妆品来说，对这种天然添加剂的要求很高，要求燕麦葡聚糖必须完全溶于水，不得含有不溶性杂质，并且不含脂质，蛋白质和其它纤维，这些杂质的存在不仅影响产品的稳定性，更重要的是会阻碍有效成分的吸收。目前国内生产的燕麦葡聚糖达不到这样的要求，所以用在高端化妆品添加剂的燕麦葡聚糖主要来自欧美和日本，我们应用的工艺中，采用先进的化学与酶结和法不仅除去来源于燕麦葡聚糖的蛋白和脂质，还可以彻底除去传统工艺中难以除去的微量淀粉和阿拉伯木聚糖（这两种多糖也是造成燕麦葡聚糖水溶性不佳的重要原因）。燕麦葡聚糖用于食品和医药方面的科学研究一直是被热烈讨论和深入研究的课题。食品方面，燕麦葡聚糖具有显著的降血脂，降血糖及维持肠道微生物生态环境的功能；在医药方面，燕麦葡聚糖用作免疫调节剂，免疫促进剂,抗癌抗肿瘤辅助药物备受关注。但是，燕麦葡聚糖产生这些生物活性的机理目前没有得到很好的阐述，所以世界范围内很多大型食品公司和医药公司的研发机构，综合类大专院校、医学院和研究所的实验室正致力于研究燕麦葡聚糖的活性机理，从而制备商业化的更有效的功能性食品和医用试剂。这些机构目前使用最具权威的生产商，瑞典Megazyme公司的燕麦葡聚糖作为研究用的样品材料。Megazyme生产高和中分子量的两种燕麦葡聚糖，经鉴定我们使用的方法生产的燕麦葡聚糖纯度相当于Megazyme产品的级别，分子量分布范围更窄仅为1.0－1.005。百特纯大分子科技公司生产高、中、低三种分子量的燕麦葡聚糖，比Megazyme公司增加了低分子量的燕麦葡聚糖，这将更具竞争实力。因为目前最权威的研究显示低分子量的葡聚糖显示更高的活性。1%燕麦葡聚糖的水溶液特性及优势阐述. 1%燕麦葡聚糖的水溶液对纯度要求较高，但是对分子量要求很低，也就是说，无论分子量高低，只要水溶性好的燕麦葡聚糖均可制备成1%水溶液用于高级化妆品的添加剂。我们制备的高纯度未经分级处理的燕麦葡聚糖很好的满足了这一要求，其1%水溶液为无色无味透明黏稠的液体。

在看到Q B/T4572-2013中的酵母葡聚糖的含量检测中，用到的杜氏瓶是什么样子的，有图片的能发一张图吗？

【序号】：1【作者】： 钟建业【题名】：壳聚糖酶法降解研究【期刊】：福建农林大学【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD2009&filename=2009170357.nh&v=MDQ4NjM3RjdLL0h0TEpxSkViUElSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnlya1Y3dlBWMTI=【序号】：2【作者】： 邓倩莹李立华【题名】：溶菌酶、过氧化氢对壳聚糖降解性能的影响【期刊】：化学世界【年、卷、期、起止页码】：2005年06期 【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2005&filename=HXSS200506006&v=MDcwNTRxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeXJsVXIvTUxUWFlmYkc0SHRUTXFZOUZZb1I4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDM=【序号】：3【作者】： 谌凯【题名】：壳聚糖三维材料的降解及其降解速率的调控【期刊】：浙江大学【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CDFD&dbname=CDFD1214&filename=1011239096.nh&v=MDYyOTBSb0Z5cmdWTDNMVkYyNkg3RzdGOUhGcVpFYlBJUjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDJmWmU=【序号】：4【作者】： 赵超越【题名】：壳聚糖电化学降解及其动力学研究【期刊】：广西工学院【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD2011&filename=1011285989.nh&v=MTg0MzRFYlBJUjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDJmWmVSb0Z5cmhVTHpOVkYyNkg3R3dHOWpFcHA=【序号】：5【作者】： 蔡泉源【题名】：壳聚糖及透明质酸的电化学降解研究【期刊】：南京理工大学【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CDFD&dbname=CDFD1214&filename=1012320974.nh&v=MzA0NDBlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDJmWmVSb0Z5cmhWcjdCVkYyNkhMQzZIdGpMcTVFYlBJUjg=

请问：蔗糖酶滴定法的计算公式具体是怎样的？还有单位是什么？尽量精确一点，谢谢！！

之前，小编采用几丁质作为载体固定化PPL，但是固定化后的PPL没有活性，这次换了一种类似的载体，而这次奇迹粗线了，终于测出了酶活，特此在这里跟大家一起分享。1.实验部分壳聚糖可溶于稀的盐酸，稀的醋酸等，实验选用稀的醋酸来溶解壳聚糖。壳聚糖小球的制备称取不同质量的壳聚糖粉末，加入到一定体积的含1.5%（V/V)醋酸溶液中，在40℃下搅拌2小时，使壳聚糖粉末完全溶解，得到澄清透明的像胶水一样的粘稠液体。配制1mol/L的NaOH溶液，其中含30%的甲醇。待壳聚糖溶液冷却至室温时，用注射器吸取壳聚糖溶液，逐滴加入氢氧化钠-甲醇溶液中，同时轻轻搅拌，使壳聚糖小球析出，形成白色半透明的壳聚糖小球。滴完后，倒掉碱液，将壳聚糖小球用大量纯水冲洗，直至洗液呈中性。再将壳聚糖小球浸泡在纯水中，于冰箱上层保存。壳聚糖小球的活化称取1g壳聚糖小球（湿重），用4ml含不同质量浓度的戊二醛，0.02mol/L的pH=8.0的磷酸钾缓冲溶液，在25℃下，于恒温摇床中以200rpm的转速活化4h。将活化好的壳聚糖小球用大量的纯水进行冲洗，直至没有戊二醛残留。洗好后，将小球浸泡在纯水中，置于冰箱上层保存。PPL的固定化 称取1g活化的壳聚糖小球（湿重）于10ml的烧瓶中，加入2ml通过双水相纯化过的PEG层的PPL，于摇床中4℃,200rpm进行固定化。将PPL固定化一定时间后，取出小球，用适量pH=7.0的0.1mol/L磷酸钠缓冲溶液洗去其表面残留的蛋白质，测试洗液的蛋白含量，以及固定化PPL的酶活。2.结果与讨论2.1 壳聚糖浓度的选择通过大量查阅文献以后，决定用1.5%的醋酸溶解壳聚糖。实验考察了不同壳聚糖浓度，对壳聚糖小球成球的影响，以及制作出的小球经过不同戊二醛浓度活化以后固定PPL的能力。壳聚糖含量NaOH-CH3OH成球情况1.0%1M是1.5%1M是2.0%[font='Ti

新人报道，想问一下有没有关于β-葡聚糖这一方面的检测方法，最近在尝试用啤酒酵母做β-葡聚糖

[align=center]2024年第3号[/align]根据《中华人民共和国食品安全法》规定，审评机构组织专家对阿拉伯木聚糖等3种物质申请作为新食品原料，羟基酪醇等4种物质申请作为食品添加剂新品种，“2,2-二甲基-1,3-丙二醇与对苯二甲酸、乙二醇、间苯二甲酸、1,2-丙二醇、氢化二聚（C[sub]18[/sub]）不饱和脂肪酸、1,6-己二醇和三羟甲基丙烷的聚合物”申请作为食品相关产品新品种的安全性评估材料进行审查并通过。特此公告。附件：1.[img=,center]http://www.nhc.gov.cn/default/images/icon16/pdf.gif[/img][url=http://www.nhc.gov.cn/sps/s7890/202408/baba39e0caa9478396d6ce0eafc6a9f8/files/230def7d3be04729ac3abedc8064b2b6.pdf]阿拉伯木聚糖等３种新食品原料[/url]2.[img=,center]http://www.nhc.gov.cn/default/images/icon16/pdf.gif[/img][url=http://www.nhc.gov.cn/sps/s7890/202408/baba39e0caa9478396d6ce0eafc6a9f8/files/46e79cdcee5b4ad69ac8d95888264a53.pdf]羟基酪醇等４种食品添加剂新品种[/url]3.[img=,center]http://www.nhc.gov.cn/default/images/icon16/pdf.gif[/img][url=http://www.nhc.gov.cn/sps/s7890/202408/baba39e0caa9478396d6ce0eafc6a9f8/files/fa53f503ed194f3b959112fe873a1027.pdf]1种食品相关产品新品种[/url][align=right]国家卫生健康委[/align][align=right]2024年7月25日来源:[font=微软雅黑][size=12px][color=#979797]食品安全标准与监测评估司[/color][/size][/font][/align]

酶制剂的酶活测定方法及影响因素随着我国畜牧业的发展和生物工程技术的不断进步，酶制剂在饲料工业中的应用越来越普遍。由于酶制剂能够消除饲料中的某些抗营养因子的负面作用，提高饲料消化率，改善动物生产性能，降低生产成本，因此日益受到饲料界的重视。但是，由于酶制剂来源比较复杂、分子结构不明确，分离提纯困难等多种原因，使这类产品有国家标准的不多，即使有国标也存在一些问题。给广大养殖用户和生产企业带来很大不便。本文简要介绍一下常用的酶活测定方法及测定过程的影响因素，仅供广大饲料工作者提供参考。1 酶制剂的定义及分类所谓的酶制剂就是通过产酶微生物发酵工程或含酶的动、植物组织提取技术生产加工而成，具有一种或多种底物清楚的酶催化活性，有助于改善动物对饲料营养成分的消化、吸收等，并有功效的生物学评定依据，符合安全性要求，作饲料添加剂用的酶制剂产品（NY/T 722-2003）。工业上应用的酶制剂大多为水解酶，按作用底物的不同，可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。按动物体内是否分泌，分为消化酶和非消化酶两大类。消化酶指动物自身能够分泌的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等，在幼龄动物或特殊生理阶段时，动物也存在消化酶分泌不足需要外源供给的情况。非消化酶是指动物自身不能够分泌或很少分泌，必须由外源供给的酶，这类酶能消化动物自身不能消化的物质或降解一些抗营养因子，主要有植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。2 常见的酶活测定方法通常酶制剂活性的检测是采用实验室分析手段来进行评价，它可以用来筛选优质酶制剂、确定复合酶制剂的最佳组方及确定产品的最佳添加量等，酶制剂实验室评价技术是目前饲料厂家应用最为广泛的一种方法。其操作相对简单，检测所用时间短，便于生产实践应用。酶活测定结果虽不能完全反映酶的使用效果，但通过检测至少可以避免使用劣质的酶制剂。我国饲料工业标准中已经确立了饲用植酸酶（GB/T 18634）、纤维素酶（NY/T912）、β-葡聚糖酶（NY/T 911）的测定方法。另外，许多企事业单位为了生产研究的需要也制定了很多用于各种酶制剂活力的测定方法。目前测定酶制剂活性的方法主要有：2.1 比色法比色法是以反应生成有色化合物的显色反应为基础，通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法，根据原理不同可分为还原糖法和色原底物法。2.1.1 还原糖法 这种方法是通过酶作用于化学合成或从自然界提取出来的底物来进行测定的。非淀粉多糖酶与底物在特定的条件（温度、pH值和底物浓度）下反应，反应产物为还原糖，在与显色剂反应后，通过比色确定还原糖的生成量，同时制作标准曲线。酶的活性表示为单位时间产生一定浓度的产物所需要的酶量（mg 或mL）。该法可适用于大部分酶活力的测定，如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶等的测定。根据显色剂的不同又可分为DNS 法、钒钼酸铵法和地衣酚法。其中DNS 法由于操作简单、显色稳定，是目前众多实验室和饲料企业在测定非淀粉多糖酶时应用最多的测定方法。2.1.2 色原底物法 原理是利用人工合成的含色原基团的底物在酶的作用下释放出有色物质，利用分光光度计比色测定有色物质的含量计算酶活。如木聚糖酶活力的测定。该法操作简单、重现性好，但酶作用于合成底物与天然底物的效果有一定区别，用合成底物测定的酶活并不能代表酶制剂在应用于天然饲料时所能发挥的酶活大小。2.2 黏度法这种方法是根据酶能够降低一定浓度的标准底物（控制pH值、温度等条件）的黏度的能力来确定酶的活性。利用的底物主要有化学合成的底物（如CMC 用于纤维素酶的测定） 和自然提取的底物（如小麦阿拉伯木聚糖用于木聚糖酶的测定）。测定的酶的活性值是通过与同时测定的标准酶活性的比较，来确定酶的活性。该法可用于木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活测定。这种方法的特点是通过降低底物的粘度来反映酶的活性，这也正是酶在体内起作用的重要特征。该法虽然灵敏度较高，但重现性差，操作复杂费时，应用难于普及。2.3 免疫学法用于酶活性分析的免疫学法包括ELISA 法和免疫凝胶扩散法。这两种方法是根据酶与抗体之间发生反应，然后ELISA 法通过第二步反应，凝胶扩散法则通过印染过程来确定酶的活性。这些方法非常灵敏，能够检测到极低水平的酶蛋白。但它们的缺点是对于每个产品的酶需要特殊的抗体，另外抗体能够与非酶蛋白质发生反应。由于抗体本身所用的蛋白质是特定的，因此，由不同生产者生产的同种类型的酶之间是没有交叉性的。另外，采用实验动物的敏感性也值得探讨。2.4 凝胶扩散法这种方法是将酶作用的底物与某种凝胶混合后倒入培养皿中，凝固之后，在凝胶上切开一条凿，倒入标准酶液和测试酶液。培养一定时间后，在切开的凝胶周围能够看到水解区域，区域的大小与酶的含量成正比。在某些情况下，还可以再加入其他试剂来显示水解的区域。如木聚糖酶活力的测定。这种方法虽然简单，但培养时间长。因为这种方法是根据区域的大小来确定酶的活性，所以其准确性要低于其他非扩散的方法。2.5 比浊法以酵母或酵母细胞壁在缓冲溶液中的浊度或吸光度的降低来表示酶活力，如β-葡聚糖酶活力的测定。2.6 体外模拟消化技术酶活测定毕竟不能反映外源酶在机体内真实的作用效果，因此，对于体外法评定饲料营养价值的研究不断增加。体外法评定饲料营养价值是通过模拟消化道内温度、pH、消化酶分泌、胃肠运动和养分吸收等参数，在体外建立一套与畜禽消化道内环境接近的操作程序，对饲料及酶制剂进行营养价值预测和评定。常用的体外模拟消化技术包括：①胃蛋白酶—胰酶法；②胃蛋白酶—小肠液法；③胃蛋白酶—胰酶—瘤胃液法；④胃蛋白酶—胰酶—碳水化合物酶法。由于不同的饲料用酶是不同的微生物通过发酵过程产生的，酶产品的酶学性质差别较大。并且各种微生物所分泌的酶的最佳pH 值、温度和对底物的亲和性都不相同。而目前，饲用酶除植酸酶、纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶有正式颁布的国标或行标酶活测定方法外，其他饲用酶制剂目前都还没有一个统一的定义及检测标准。因此，饲料厂家在比较不同厂家的酶制剂时，在没有统一的测定方法情况下，应首先确定自己认可的检测方法，然后在完全相同的测定条件进行检测，这样得出的结论才具有可比性。3 酶制剂活性测定影响因素的分析饲用酶制剂活性测定的主要影响因素有温度、pH、作用时间、底物等4大要素以及一些非定义要素，如酶液稀释度、标准曲线、显色剂、缓冲液等，下面就这几方面进行归纳分析一下：3.1 影响饲用酶制剂活性测定的四大要素所谓的酶活性就是指在特定的系统和条件下测到的反应速度。为了确保酶制剂测定结果的一致性，饲用酶制剂活性单位定义中对影响酶活大小的主要条件进行了规定，其中包括温度、pH 值、时间和底物，这些都是酶活力测定系统中最重要的因素，对酶促反应速度影响很大。3.1.1 温度对酶活测定的影响 酶制剂对温度非常敏感，在检测过程中对温度的控制则显得非常重要。温度对酶活性影响主要表现在两个方面：一方面，是当温度升高时，酶与底物的反应速率加快；另一方面，由于随着温度的升高将使酶的稳定性下降，部分酶蛋白分子逐渐变性而失去活性，引起酶反应速率下降。温度的这两种影响的综合作用而产生酶反应的“最适温度”。对于不同的酶制剂在不同的情况下最适温度是有一定的差别。研究木聚糖酶时发现，在30℃～40℃条件下酶活较稳定，50℃后随着温度的升高，酶活力开始下降，90℃时基本失活。研究纤维素酶最适酶解条件时发现，在36℃～58℃之间纤维素酶相对酶活随着温度升高而升高，当温度在58℃～62℃之间时，相对酶活性没有明显变化，曲线近似呈水平状态，在40℃、45℃、50℃条件下，其相对酶活分别为56%、70%、80%，而当温度大于58℃以上时相对酶活不再升高。同时，酶在不同条件下适宜温度也可能要受到酶的纯度、底物、激活剂、抑制剂以及酶促反应时间等因素的影响。3.1.2 pH 对酶活测定的影响 pH 值在酶活测定时对测定结果影响很大，各种酶制剂在一定条件下都有其特定的最适酶解pH，酶的最适pH 会随着底物种类和浓度、缓冲液种类和浓度的不同而改变，因此最适pH 也只有在一定条件下才有意义。pH 影响酶活力的原因可能有以下几个方面：① 过酸或过碱可以使酶的空间结构破坏，引起酶构象的改变，也影响酶活性部位催化基团和结合基团的解离状态，酶活性丧失；② 当pH 改变不是很剧烈时，酶虽未变性，但酶活受到了影响。pH 影响了底物的解离状态，或者使底物不能和酶结合，或者结合后不能生成产物。pH 影响酶分子活性部位上有关基团的解离，从而影响与底物的结合或催化，使酶活性降低可能影响到中间络合的解离状态，不利于酶解生成产物；③ pH 影响维持酶分子空间结构的有关基团解离，从而影响了酶活性部位的构象，进而影响酶的活性；④ pH 影响底物的带电状态。这些都直接影响酶和底物的亲和力，影响酶解反应速度。有文献报道，很多酶最适酶解pH 都在3.0～6.0。研究不同pH 值对嗜热毛壳菌木聚糖酶活性的影响发现，在pH 值3.6 以下，随着pH 值的增大，木聚糖酶的活性逐渐升高；pH 值为3.6 时，木聚糖酶的活性最高，且在3.

[color=#444444]请教一下，请问有谁知道食品中酵母[/color][color=#444444]β[/color][color=#444444]葡聚糖的检测方法？[/color]

测定土样蔗糖酶时要在三角瓶中放置24小时，然后要6000rpm离心，这样就必须从三角瓶中移到离心管里，不用水冲洗的前提下有没有办法将三角瓶里的反应溶液倒干净，有没有必要倒干净，如果没法倒干净，直接将土样和测定的反应液放置在离心管里放置24小时，然后直接离心可以吗？

谁能给我来点低聚糖的资料，我的论文是 低聚糖的研究进展