丙酮肟

丙酮出峰异常的小探讨前期概要网友发帖讲：用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-MS法测定某精油中的丙酮残留，极性柱上出现相邻的两个峰，且MS离子流几乎一模一样；但色谱纯丙酮仅一个峰。在非极性柱上，两峰合一。（参见：[url=http://bbs.instrument.com.cn/topic/6566665]http://bbs.instrument.com.cn/topic/6566665[/url]）现象描述（HP-INNOWAX柱）：[img=,690,419]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709131707_01_1967780_3.png[/img][align=center][color=#cc33cc][b]上图为SIM扫描叠加图，蓝色单峰为标准品丙酮峰，其他双峰为不同样品；以此观察，前面的峰应为丙酮；[/b][/color][/align][align=center][color=#cc33cc][b][img=,690,445]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709131709_01_1967780_3.png[/img][/b][/color][/align][align=center][color=#cc33cc][b]上图为单一样品SCAN扫描图，前锋为丙酮，后峰为干扰峰；[/b][/color][/align][align=center][color=#cc33cc][b][img=,690,625]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709131710_01_1967780_3.png[/img][img=,690,506]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709131710_02_1967780_3.png[/img][/b][/color][/align][align=center][color=#cc33cc][b]以上两图分别为前锋丙酮和后峰干扰峰的MS图，几乎完全一样。[/b][/color][/align][align=center][color=#cc33cc][b]改用DB-5MS柱测试，含量显著升高，应该是两峰合一了。[/b][/color][/align][align=center][color=#cc33cc][b][/b][/color][/align][align=left][b][color=#6600cc]疑问：按理讲，丙酮不应该出现两个峰，而且作为标准品的色谱纯丙酮中也仅有一个峰。但是后面的干扰峰MS几乎和丙酮完全一样。[/color][/b][color=#6600cc][/color][/align][color=#6600cc][/color][align=left][/align][align=left][color=#000000][/color][/align][b][color=#000000]请教各位专家，是否见过类似情况？是否知道这个[/color][color=#000000]MS[/color][color=#000000]图和丙酮完全一致的物质是什么？[/color][/b][align=left][color=#000000][/color][/align][color=#000000]山苍子油，[/color][color=#000000] 50 [/color][color=#000000]和[/color][color=#000000]60[/color][color=#000000]度恒温都试过。关键是两个物质[/color][color=#000000]MS[/color][color=#000000]图完全一样。想不出来有这样的化合物。[/color][align=left][color=#000000][/color][/align][color=#000000]（注：山苍子油，又名山胡椒油、木姜子油，用水蒸汽蒸馏法从山苍子果实提取的精油。主要成分柠檬醛[/color][color=#000000]([/color][color=#000000]橙花醛和香叶醛两个异构体总合约[/color][color=#000000]70%[/color][color=#000000]左右[/color][color=#000000])[/color][color=#000000]、甲基庚烯酮、香茅醛、[/color][color=#000000]α-[/color][color=#000000]蒎烯、莰烯、苎烯、[/color][color=#000000]α-[/color][color=#000000]蛇麻烯、对异丙基甲醇、香叶醇、樟脑等。是重要的香料原料。）[/color][align=left][color=#000000][/color][/align][color=#000000]我说：前面小的和后面大的峰都是丙酮，是因为色谱分离条件不够理想或样品体系的影响而造成的连峰，有些情况下可能是一大接着一小峰。[/color]我找到我们的样品（不是同样的精油），丙酮是单峰：[img=,690,406]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151445_01_1615838_3.jpg[/img]丙酮的峰型还可以。我的图不是网友的山苍子油，我查了一下许多样品都是一个峰，只是用丙酮稀释样品时候会出现峰型不好，有点前面大后面小拖尾的情况。网友的分离条件是：50/60恒温5min，后面就是20度升上去。 进样量1.0 分流比 50:1 进样口250度 乙醇稀释5倍。我感觉这个可能是基质引起的，但自己没做过，具体情况不知道，就决定试试看看到底是什么情况，探讨一下。[b]1试验部分[/b]1.1 仪器与装置美国安捷伦6890N/5975C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪。1.2 样品和标样、试剂上苍子油样品，市场样，来自国内某供应商。丙酮（色谱纯，办证特购），乙醇，特丁基甲醚，乙醚，正己烷，环己烷（色谱纯，安谱公司）1.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS条件1.3.1 色谱条件:色谱柱：安捷伦HP-Innowax(60m×0. 25 mm ( i.d.)×0.25μm)毛细管柱；升温程序： 40，60，80℃，以3 ℃/min升至100℃，以10℃/min升至 250℃，保持一定时间至所以峰流出；载气（He,纯度99.999%以上）流速1.9mL/min 进样口温度250℃，分流进样，分流比50:1，100:1 进样量：1μl。1.3.2质谱条件:电子轰击（EI）离子源；电子能量70eV；传输线温度280℃；离子源温度230℃；四级杆温度150℃。SCAN扫描范围：29-400。[b]1.4样品处理及分析方法[/b]山苍子油样品用乙醇，特丁基甲醚，乙醚，正己烷，环己烷稀释5倍，即20%（w/w）。[b]2 结果与讨论[/b]下面是基本按照网友的分析条件（进样口温度250度，分流进样，分流比50:1，进样量1ul，样品用乙醇稀释5倍，柱温60度，3度/min升温，柱流速：1.9ml/min）测定山苍子油的总[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图，样品大致含400ppm的丙酮：[align=left][color=#000000][/color][/align][img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201500_01_1615838_3.jpg[/img]最前面是丙酮和溶剂乙醇的峰。下面是不同浓度（第二张图的丙酮含量高一些）丙酮放大后的TIC：[img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201506_01_1615838_3.jpg[/img]从上面图来看，和网友的结果一样，丙酮峰型不好，一小一大。但没有网友一小一大两个峰分的开，是由于柱流速高的缘故。验证了此精油样品确实对丙酮测定有影响。1. 不同起始柱温的影响下面为20%乙醇稀释的精油在起始温度60度，80度和40度的总[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图[img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201508_01_1615838_3.jpg[/img]可以看出不管是40，60或80度丙酮的峰型都不好。有种说法是分流进样时候初始柱温尽可能高一些，乙醇的沸点是78度，这种说法好像不适应这种情况，提高柱的初始温度对改善丙酮峰型几乎无效。可能另有别的原因，可能和上苍子油含大量柠檬醛等物质的影响有关。也就是说改变柱子的初始温度这条路走不通，需要考虑其它分离条件来改善丙酮的峰型。2. 不同分流比的影响下面为不同分流比（50:1和100:1）对丙酮峰型分离的影响，初始柱温均为60度。[img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201510_01_1615838_3.jpg[/img]从上面看到，分流比大时候，丙酮峰型并未明显改善。只是峰小了一点，稍有改善。也就是说改变分流比这条路也走不通，需要考虑别的方法来改善丙酮的峰型。3. 不同溶剂对分离的影响下面是山苍子油样品用乙醇，特丁基甲醚，乙醚，正己烷，环己烷稀释5倍，即20%（w/w）后进样的总[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图。初始柱温均为60度。乙醇为溶剂的丙酮分离情况：[img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201514_01_1615838_3.jpg[/img]叔丁基甲醚为溶剂的丙酮分离情况：[b][img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201514_02_1615838_3.jpg[/img][/b]乙醚为溶剂的丙酮分离情况：[img=,690,475]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201515_01_1615838_3.jpg[/img]正己烷为溶剂的丙酮分离情况：[img=,690,412]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201515_02_1615838_3.jpg[/img]环己烷为溶剂的丙酮分离情况：[img=,690,412]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709201516_01_1615838_3.jpg[/img]几种溶剂的沸点如下：乙醇：78度，特丁基甲醚：55.3度，乙醚：34.6度，正己烷：68度，环己烷：80.7度，另外丙酮的沸点为56.5度。几种溶剂的极性顺序为：乙醇特丁基甲醚乙醚正己烷环己烷，其中乙醇为极性化合物，其它几种溶剂的极性很弱。从上面可以看出来，乙醇为溶剂的丙酮的峰型最不好，特丁基甲醚为溶剂时候丙酮的峰型要比乙醇为溶剂好许多，改善不少，而乙醚为溶剂的丙酮峰型很好。那是不是说明沸点越低的溶剂测定丙酮的峰型更好呢？是不是分流进样时候初始柱温尽可能高一些的说法相符合呢？和极性有无关系呢？随后用正己烷和环己烷作为溶剂进行实验，发现正己烷和环己烷测定丙酮的峰型也很好。是不是可以说是用弱极性溶剂更好呢？3 结论3.1山苍子油基质在一定色谱条件下会影响丙酮的峰型。3.2在用极性乙醇作为溶剂的情况下，改变柱子的初始温度，对丙酮的峰型改善作用不大。3.3 分流比影响对丙酮的峰型不是很大。3.4 改用非极性溶剂能够显著改善丙酮的峰型，其中乙醚作为溶剂的峰型很好，但乙醚沸点低，有气味，做标线的溶剂不是很理想。可以考虑正己烷做溶剂可能比较好。（另外注意：开始环己烷的稀释液有点浑浊，后变清。如果使用环己烷做溶剂，可以过滤一下后进样。）3.5 在非极性柱子上面丙酮是单峰峰型。但非极性柱子可能对其它组分分离不是很理想，例如小分子化合物出峰太快，容易和其它组分相重。[align=left][color=#000000][/color][/align]