欲分离小分子的多肽，缓冲溶液应该用什么呢？
分析化学和生物学科之间的交叉越来越多，大家在用电泳分离蛋白质、多肽的时候都用的什么缓冲溶液？您分离的是那类的蛋白质、多肽？
多肽合成是一个固相合成顺序顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点，从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种：固相合成和液相多肽合成。【详情请咨询合肥国肽生物】多肽合成技术 Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(SPPS)以来，此技术的优势受大众青睐，所以目前大众比较长使用的多肽合成技术手段就是固相合成技术。固相合成肽技术是液相合成肽技术的升华。液相合成技术，也可进行多肽的合成，通常此方法会导致消旋的副反应，或在强碱存在时形成5(4H)-oxaylones和N-acylurea而受到影响。庆幸地是，这些副反应能最小化，但是还不能完全消除。固相多肽合成原理 1963年，Merrifield提出了固相多肽合成方法，由于其合成方便，迅速，成为多肽合成的首选方法，而且带来了多肽有机合成上的一次**，并成为了一支独立的学科——固相有机合成，固相合成的发明同时促进了肽合成的自动化。 例如，国肽生物多肽合成主要是采用Fmoc合成法。Fmoc合成法采用Fmoc为α-氨基的保护基，侧链保护采用苄醇类。合成时将一个Fmoc－氨基酸衍生物共价交联到树脂上，用碱脱除Fmoc，用三乙胺中和游离的氨基末端，然后通过DCC活化、偶联下一个氨基酸，脱保护多采用HF法或TFMSA（三氟甲磺酸）法。多肽合成服务种类 多肽合成服务通常有线性肽合成服务、多种难肽合成服务、修饰肽合成服务、以及部分多肽合成公司还会提供多肽定制服务，定制出有针对性的合成肽。 目前有多肽合成公司提供的线性肽合成可达100个氨基酸，在修饰肽合成上，能提供常见修饰，磷酸化（Ser/Thr/Tyr），环化（酰胺环/二硫键环），荧光标记（5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等），生物素标记（Biotin，Lys(Biotin)）/复合抗原（MAP）/含D型氨基酸,及各种氨基酸衍生物均可合成。多肽产物纯度选择 常见的质谱级多肽纯度，一般要求95% 用于抗体筛选纯度，一般85%即可 NMR和结晶试验中，纯度一般98% 粗品肽，一般50%即可用于多肽筛选[img=,690,120]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051044484496_5504_3531468_3.jpg!w690x120.jpg[/img]国肽生物主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com
国肽生物 提供 多肽合成、多肽修饰、cGMP多肽、目录肽、药物肽/化妆品肽、多肽文库构建、中间体定制及合成、抗体服务、氨基酸、糖肽、订书肽、多肽核酸等.详情请咨询合肥国肽生物多肽合成服务种类多肽合成服务通常有线性肽合成服务、多种难肽合成服务、修饰肽合成服务、以及部分多肽合成公司还会提供多肽定制服务，定制出有针对性的合成肽。目前有多肽合成公司提供的线性肽合成可达150个氨基酸，在修饰肽合成上，能提供常见修饰，磷酸化（Ser/Thr/Tyr），环化（酰胺环/二硫键环），荧光标记（5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等），生物素标记（Biotin，Lys(Biotin)）/复合抗原（MAP）/含D型氨基酸,及各种氨基酸衍生物均可合成。多肽产物纯度选择常见的质谱级多肽纯度，一般要求95%用于抗体筛选纯度，一般85%即可NMR和结晶试验中，纯度一般98%粗品肽，一般50%即可用于多肽筛选国肽生物 提供 多肽合成、多肽修饰、cGMP多肽、目录肽、药物肽/化妆品肽、多肽文库构建、中间体定制及合成、抗体服务、氨基酸、糖肽、订书肽、多肽核酸等优越的领先技术合成方法（固相合成/液相合成）修饰性多肽（常见的N端修饰，C端修饰及其他特殊修饰）偶联技术（KLH，BSA，OVA偶联）首位环化技术，3个磷酸化，3对二硫键胰岛素工艺提供技术转让服务优质的产品服务合成质量：毫克至克级甚至kg合成纯度：Crude,脱盐，70%, 75%, 80%,85%, 90%, 95%，98%，99%定制长度：2-150个氨基酸免费提供：合格的HPLC和MS，COA文件，质量控制包含合格的纯度，合成的质量，分子量，溶解度等（（如有特殊需要，可提供核磁，红外，紫外，元素分析，水分含量测定以及氨基酸分析服务））交货期限：1-30个长度最快1-2周交货合成数量：月通量可达8000-10000条药用肽，大批量肽。协助客户建立科研肽库。抗原多肽及其与蛋白的交联：KLH,BSA, OVA服务流程确定合成序列，我们将在12小时内容提供准确报价。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：0551-62626599[img=,690,522]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907181006059901_2592_3531468_3.jpg!w690x522.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907181006182915_5959_3531468_3.jpg!w690x517.jpg[/img]
1.多肽合成的基本原理?多肽固相合成法是多肽合成化學的一個重大的突破。它的最大特點是不必純化中間產物，合成過程可以連續進行，進而為多肽合成的自動化奠定了基礎。目前全自動多肽的合成，基本都是固相合成。其基本過程如下：基於Fmoc化學合成，先將所要合成的目標多肽的C-端氨基酸的羧基以共價鍵形式與一個不溶性的高分子樹脂相連，然後以這一氨基酸的氨基作為多肽合成的起點，同其他的氨基酸已經活化的羧基作用形成肽鍵，不斷重複這一過程，即可得到多肽。根據多肽的氨基酸組成不同，多肽後處理方式不同，純化方式也有差異。2.做免疫用的多肽多長為合適?答：一般約10-15個氨基酸，當然長一些免疫效果好一些，不過合成費用也會增加。MAP多肽則希望長度在15aa以上，效果較好。另外，10aa以下的多肽免疫效果比較差。3.免疫用多肽的純度需要很高嗎?答：一般而言， 免疫用Peptide，70-85%即可。4.我們合成的多肽溶解性不好，多肽就有問題對嗎?答：很難準確預測一個多肽的溶解性及合適的溶劑是什麼。如果多肽難以溶解就認為多肽合成有問題這個觀念並不正確。5.多肽狀態是如何?如何保存儲存?答：我們提供的多肽是粉末狀，一般為灰白色，組成不同，多肽粉末的顏色有差異，多肽一般長期保存需要避光保存，並應保存在-20度，短期可以保存在4度。可以短時間的話是以室溫運輸。6.如何溶解多肽?答：溶解多肽是非常複雜的事情，一般很難一下子確定合適的溶劑。通常是先取一點試驗，在沒有確定合適的溶劑前千萬不要合部溶解。下列方法有助於您選擇合適的溶劑：(1)判定多肽的電荷特定，設定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1；鹼性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1,其他氨基酸的電荷為0。計算出將電荷數。(2)如果淨電荷數 0，多肽為鹼性，用水溶解：如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸(10%以上)；如果多肽還不能溶解，加入少量TFA(25ul)溶解，然後加入500ul水稀釋。(3)如果淨電荷數0，多肽為酸性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然後加入500ul水稀釋。(4)如果淨電荷數=0，多肽為中性，一般需要用有機溶劑如乙腈，甲醇或異丙醇，DMSO等溶解。還有人建議需要尿素來溶解疏水性很大的多肽。7.非HPLC純化的多肽中有哪些雜質?答：粗品和脫鹽級別的多肽中多肽和非多肽類雜質：如非全長多肽和多肽後處理的一些原料如DTT、TFA等8.HPLC純化的多肽有哪些雜質?答：經過HPLC純化的多肽，仍會有一些一些雜質存在，其中的雜質主要是短肽和微量TFA。9.多長的多肽為合適?答：多肽合成需要考慮多肽的長度，電荷，親疏水性等因素。長度越長，合成粗品的純度和產率都隨著降低，純化的難度和無法合成的幾率就會大些。當然多肽功能區的序列是無法改變的，但是為了多肽的順利合成，有時不得不在功能取的上下游增加一些輔助氨基酸，以改善多肽的溶解性和親疏水性。如果多肽太短，合成也可能有問題，主要問題是合成的多肽在後處理過程中有一定的難度，5肽以下的多肽，一般要有疏水的氨基酸，否則後處理難度加大。15個氨基酸殘基以下的多肽一般都可以得到滿意的產率和得率。10.如何從多肽序列中判定多肽的溶解性?(1)多肽中如果含有高比例的疏水性很強的氨基酸如和Leu,Val,IIe,Met,Phe和Trp，多肽很難溶解與水性溶液中或根本不可能溶解。這些氨基酸無論是純化或合成，都有可能有問題。(2)一般情況下疏水性氨基酸的比例50%，不能連續5個連續aa為疏水性，帶電荷的氨基酸的(正電荷K,R,H,N-terminus,負電荷D,E,C- terminus)的比例達到20%，在多肽的N或C短如果能增加極性氨基酸，也可以改善溶解性。11.為什麼含有Cys,Met,或Trp的多肽難合成?答：含有Cys, Met,或Trp的多肽難以合成，同時難以獲得高純度的產品。主要因為這些基團不穩定，易氧化。這些多肽的使用和儲存都需要特別注意，避免反復開啟蓋子。12.為什麼有些多肽的合成產率或純度會比較低?答：多肽合成與引子合成有比較大的區別，不能合成的引子很少，但是不能合成的多肽經常有。如Val,Ile,Tyr,Phe,Trp,Leu,Gln,和Thr這些氨基酸比鄰或重複時，多肽鏈在合成過程中不能完全舒展溶解，合成效率下降。以下幾種情形，合成效率和產物的純度都比較低，如：重複Pro,Ser-Ser，重複Asp，4個連續Gly等.13.多肽是如何純化的?答：多肽純化一般使用反相柱(如C8，C18等)，214nm。緩衝體系通常為含TFA的溶劑，pH 2.0 。Buffer A為含0.1%TFA in ddH2O，Buffer B為1%TFA/ACN/ pH 2.0。純化前用Buffer A溶解；如果溶解不好，用Buffer B溶解後，然後用Buffer A稀釋；對疏水性強的多肽，有時還需要加入少量的Formic Acid或醋酸。HPLC分析多肽粗產物，如果多肽不長(15aa以下)，一般會有主峰，主峰通常為全長產物；對於20aa以上的長肽，如果沒有主峰，HPLC需搭配Mass來判定分子量，進而確定哪個峰是所要合成的多肽。
请教多肽高手，D、L型多肽药物的液相分析方法，目前正在做一个多肽药物，其中多肽药物的编号最后一个氨基酸的L型的是我们需要的东西，它的D型是杂质（其他的氨基酸都一样），编号最后一个氨基酸是His，在液相分析有关物质时，这两个物质的分离度一直都不是很好，用过一些柱子，也用过三氟乙酸体系和缓冲盐体系，都不是很理想，不知道有没那位高手做过类似的分离，请不吝赐教。
多肽合成又叫肽链合成，是一个固相合成顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。请移步百度搜“合肥国肽生物”即可多肽合成的原理多肽合成就是如何把各种氨基酸单位按照天然物的氨基酸排列顺序和连接方式连接起来。由于氨基酸在中性条件下是以分子内的两性离子形式(H3+NCH(R)COO-)存在，因此，氨基酸之间直接缩合形成酰胺键的反应在一般条件下是难于进行的。氨基酸酯的反应活性较高。在100℃下加热或者室温下长时间放置都能聚合生成肽酯，但反应并没有定向性，两种氨基酸a1和a2的酯在聚合时将生成a1a2…、a1a1…、a2a1…等各种任意顺序的混合物。为了得到具有特定顺序的合成多肽，采用任意聚合的方法是行不通的，而只能采用逐步缩合的定向多肽合成方法。一般是如下式所示，即先将不需要反应的氨基或羧基用适当的基团暂时保护起来，然后再进行连接反应，以保证多肽合成的定向进行。式中的X和Q分别为氨基和羧基的保护基，它不仅可以防止乱接副反应的发生，还具有能消除氨基酸的两性离子形式，并使之易溶于有机溶剂的作用。Q在有的情况下也可以不是共价连接的基团，而是由有机强碱(如三乙胺)同氨基酸的羧基氢离子组成的有机阳离子。Y为一强的吸电子基团，它能使羧基活化，而有利于另一氨基酸的自由氨基，对其活化羧基的羧基碳原子进行亲核进攻生成酰胺键。由此所得的连接产物是N端和C端都带有保护基的保护肽，要脱去保护基后才能得到自由的肽。如果肽链不是到此为止，而是还需要从N端或C端延长肽链的话，则可以先选择性地脱去X或Q，然后再同新的N保护氨基酸(或肽)或C保护的氨基酸(或肽)进行第二次连接，并依次不断重复下去，直到所需要的肽链长度为止。对于长肽的多肽合成来说，一般有逐步增长和片段缩合两种伸长肽链的方式，前者是由起始的氨基酸(或肽)开始。每连接一次，接长一个氨基酸，后者则是用N保护肽同C保护肽缩合来得到两者长度相加的新的长肽链。对于多肽合成中含有谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、半胱氨酸等等带侧链功能团的氨基酸的肽来说，为了避免由于侧链功能团所带来的副反应，一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。多肽合成方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时，由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体，多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来，方可进行成肽反应，这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速，可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年，多肽液相片段合成法发展迅速，在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中，根据多肽片段的化学特定性或化学选择性，多肽片段能够自发进行连接，得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少，所以纯度较高，且易于纯化。多肽的生物合成方法主要包括发酵法、酶解法，随着生物工程技术的发展，以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。多肽的固相合成多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，分离纯化，获得目标多肽。1、Boc多肽合成法Boc方法是经典的多肽固相合成法，以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基，苄醇类作为侧链保护基，Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上，TFA切除Boc保护基，N端用弱碱中和。肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行，最终采用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中，为了便于下一步的多肽合成，反复用酸进行脱保护，一些副反应被带入实验中，例如多肽容易从树脂上切除下来，氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。2、Fmoc多肽合成法Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的，不受TFA等试剂的影响，应用温和的碱处理可脱保护，所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成，避免了采用强酸。同时，与Boc法相比，Fmoc法反应条件温和，副反应少，产率高，并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收，易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。多肽液相分段合成随着多肽合成的发展，多肽液相分段合成(即多肽片段在溶液中依据其化学专一性或化学选择性，自发连接成长肽的合成方法)在多肽合成领域中的作用越来越突出。其特点在于可以用于长肽的合成，并且纯度高，易于纯化。多肽液相分段合成主要分为天然化学连接和施陶丁格连接。天然化学连接是多肽分段合成的基础方法，局限在于所合成的多肽必须含半光氨酸(Cys)残基，因而限定了天然化学连接方法的应用范围。天然化学连接方法的延伸包括化学区域选择连接、可除去辅助基连接、光敏感辅助基连接。施陶丁格连接方法是另一种基础的片段连接方法，其为多肽片段连接途径开拓了更广阔的思路。正交化学连接方法是施陶丁格连接方法的延伸，通过简化膦硫酯辅助基来提高片段间的缩合率。其他多肽合成方法1、氨基酸的羧内酸酐法(NCA)氨基酸的羧内酸酐的氨基保护基也可活化羧基。NCA的原理:在碱性条件下，氨基酸阴离子与NCA形成一个更稳定的氨基甲酸酯类离子，在酸化时该离子失去二氧化碳，生成二肽。生成的二肽又与其他的NCA结合，反复进行。NCA适用于短链肽片段的多肽合成，其周期短、操作简单、成本低、得到产物分子量高，在目前多肽合成中所占比例较大，技术也较为通用。2、组合化学法20世纪80年代，以固相多肽合成为基础提出了组合化学法，即氨基酸的构建单元通过组合的方式进行连接，合成出含有大量化合物的化学库，并从中筛选出具有某种理化性质或药理活性化合物的一套多肽合成策略和筛选方案。组合化学法的多肽合成策略主要包括:混合-均分法、迭代法、光控定位组合库法、茶叶袋法等。组合化学法的最大优点在于可同时合成多种化合物，并且能最大限度地筛选各种新化合物及其异构体。3、酶解法酶解法是用生物酶降解植物蛋白质和动物蛋白质，获得小分子多肽。酶解法因其多肽产量低、投资大、周期长、污染严重，未能实现工业化生产。酶解法获得的多肽能够保留蛋白质原有的营养价值，并且可以获得比原蛋白质更多的功能，更加绿色，更加健康。4、基因工程法基因工程法主要以DNA重组技术为基础，通过合适的DNA模板来控制多肽的序列合成。有研究者通过基因工程法获得了准弹性蛋白-聚缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-缬氨酸-甘氨酸肽(VPGVG)。利用基因工程技术生产的活性多肽还有肽类抗生素、干扰素类、白介素类、生长因子类、肿瘤坏死因子、人生长激素，血液中凝血因子、促红细胞生成素，组织非蛋白纤溶酶原等。基因工程法合成多肽具有表达定向性强，安全卫生，原料来源广泛和成本低等优点，但因存在高效表达，不易分离，产率低的问题，难以实现规模化生产。5、发酵法发酵法是从微生物代谢产物中获得多肽的方法。虽然发酵法的成本低，但其应用范围较窄，因为现在微生物能够独立合成的聚氨基酸只有ε-聚赖氨酸(ε-PL)、γ-聚谷氨酸(γ-PGA)和蓝细菌肽。[align=center][img=,770,348]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903151633244062_8177_3531468_3.jpg!w770x348.jpg[/img][/align]请移步百度搜“合肥国肽生物”即可我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。
[font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]国肽生物是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。国肽生物专长于荧光标记肽、同位素标记肽、人工胰岛素、药物肽、化妆品肽、长肽困难肽等产品的合成与研发，致力于学术水平的科研提升，搭建学术交流平台，促进前沿、专业的学术知识推广，推动多肽在生物医学材料等领域的研究与应用[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质，它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间，是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称，常常被应用于功能分析、抗体研究、尤其是药物研发等领域。多肽合成技术的出现，让这些多肽的应用领域变得更宽。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]多肽的固相合成[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，分离纯化，获得目标多肽。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]1、Boc多肽合成法[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]Boc方法是经典的多肽固相合成法，以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基，苄醇类作为侧链保护基，Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上，TFA切除Boc保护基，N端用弱碱中和。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行，最终采用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中，为了便于下一步的多肽合成，反复用酸进行脱保护，一些副反应被带入实验中，例如多肽容易从树脂上切除下来，氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]2、Fmoc多肽合成法[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的，不受TFA等试剂的影响，应用温和的碱处理可脱保护，所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成，避免了采用强酸。同时，与Boc法相比，Fmoc法反应条件温和，副反应少，产率高，并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收，易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]肽是指由两个或两个以上的氨基酸脱水缩合而成的化合物。最简单的肽由两个氨基酸组成，称二肽。含多个氨基酸的肽称多肽。含50个氨基酸以上的多肽，通常称为蛋白质。肽广泛存在于动物、植物和微生物中，有重要的生理作用，对生物的生长发育、细胞分化、大脑活动、肿瘤病变、免疫防御、生殖控制以及抗衰老等方面都有特殊的功能。如谷胱甘肽是某些酶的辅酶，对体内的氧化还原过程起重要作用。许多激素属于多肽，如催产素、加压素、胰高血糖素以及促肾上腺皮质激素等，能调节机体代谢。由下丘脑分泌的激素调节因子也是多肽，它们控制着其他内分泌腺释放激素的活动。近年来在高等动物脑中发现的脑啡肽(五肽)有镇痛作用。微生物产生的许多抗生素如多粘菌素、短杆菌肽等都是肽类，有很强的抗菌作用。多肽指许多氨基酸单位用肽键互相连接构成的长链。肽和蛋白质没有严格的界限，一般把只含有数十个或更少个氨基酸单位的多肽叫做肽，把氨基酸单位比较多的多肽叫蛋白质。常把多肽中的氨基酸单位叫做氨基酸残基，因为这些单位在互相连接时已失去分子的一部分，而不是完整的氨基酸了。只有肽链两端的氨基酸残基才含有自由的α-氨基或自由的α-羧基。有自由α-氨基的末端残基叫做氨基末端(或N端)残基，有自由α-羧基的末端残基叫做羧基末端(或C端)残基。给多肽命名时按照从N端到C端残基的顺序，书写时也按这个顺序。如SerGlyTryAlaLeu这个五肽含有5个氨基酸残基和4个肽键，叫做丝氨酰甘氨酰酪氨酰丙氨酰亮氨酸。肽广泛存在于动植物组织中，其中有许多肽在生物体内有特殊的功能，统称生物活性肽。近年来发现：几乎所有生命科学的重大理论，如免疫防御、生殖控制、肿瘤病变、抗衰防老等都涉及有关的活性肽。这些理论问题无不与临床医学实践密切相关，所以生物活性肽在实际应用上也具有重要意义。生物活性肽的种类很多。如可刺激肾上腺皮质发育的促肾上腺皮质激素是39肽，可使子宫收缩的催产素为九肽，具有吗啡活性的两种重要的脑啡肽均为五肽。许多抗菌素也是肽类物质。又如生长因子受控于基因，在细胞发育过程中起调节和控制作用。这类重要物质为多肽。表皮生长因子含有50个氨基酸残基，神经生长因子由118个氨基酸残基组成。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333][img=,486,246]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006161554536697_4085_3531468_3.jpg!w486x246.jpg[/img][/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]国肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。[/color][/size][/font][font=Helvetica][size=10.5pt][color=#333333]详情请咨询国肽生物[/color][/size][/font]
多肽合成过程中的换盐操作需要对纯化的馏分加纯化水进行稀释，再进行固相萃取上样。1. 遇到强极性多肽序列的时候稀释过程中会遇到什么问题，要怎么解决2. 具有二级结构的多肽序列稀释的时候出来加TFA促溶之外还能加什么
一、保存大多肽在-20℃很稳定，特别是冷冻干燥并保存在干燥器中，在将它们暴露于空气之前，冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少，当无法冷冻干燥时，最好的方法是以小的工作样量存放。对于含Cys， Met orTrP的多肽，脱氧缓冲剂对其溶解必不可少，因为这种多肽可易空气氧化，在封瓶前，慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解，所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比，生命期有限。二、溶解性大多肽的道选溶剂是超纯抽气水。稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。这些方法不溶的多肽，需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle来溶解，这些溶剂可能某些实验有副作用。所以我们建议设计多肽时要加注意。残基Ala， Cys ， Ile， Leu， Met， Phe和Val将全增加多肽的溶解难度。您需要特殊的多肽或任何技术帮助，请随时与我们联系。我们包你完全满意，对于我们不能适当合成的顺序，我们不收费。三、多肽的保存和操作包装1mg或更少的多肽按净重包装，声明的小瓶重不含相关抗离子和水。例如，氨基酸分析决定的肽含量是80%，在1mg样品中，那么瓶中毛重是1.25mg。大量的多肽以毛重算。标出的重量含相关抗离子和水，例如，25mg样品中肽百分比为90%，那么，实际肽量为25mg×90%=22.5mg不要把肽含量和纯度搞混了。肽的纯度可能是100%， 而肽含量相关带电基团（如Arg， Lys ）的抗离子量和肽新水性决定。这是合成肽的本身特性。四、冻干肽的保存所有产品应存于冰箱，最好为-20℃。多数肽以此方法可以存放几年不变。五、肽溶液的保存溶液肽远比冻干形式不稳定，溶液应为中性pH（pH5-7），-20℃保存的，为避免样品的反复冻融，最好分成小样存放。一份样品融冻后未用完，应扔掉，细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦，为克服此，肽应溶于无菌水，或肽溶液用0.2μ M滤膜过滤。六、多肽的重建和操作多数肽溶于无菌蒸溜水。初次溶解时，要注意使初始浓度比要求浓度大，如果多肽仅有限溶解性，这便允许加入其它溶解剂或缓冲盐。如果多肽在水中的溶解性有限，有几种选择可帮助溶解：1、对碱性肽用稀乙酸（含Arg，Lys，His）2、酸性肽用稀氨水（含Asp，Glu）3、对极疏水的肽用10%有机修饰物（Acetonitnile，Methanol）4、极不溶的肽用DM50或DMF5、guanicline hydrochloride或脲的浓溶液也很有用，与上述方法合用，声处理也是溶解多肽的有效手段。
多肽合成方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时，由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体，多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来，方可进行成肽反应，这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。【合肥国肽生物】多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速，可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年，多肽液相片段合成法发展迅速，在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中，根据多肽片段的化学特定性或化学选择性，多肽片段能够自发进行连接，得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少，所以纯度较高，且易于纯化。多肽的生物合成方法主要包括发酵法、酶解法，随着生物工程技术的发展，以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。多肽的固相合成多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，分离纯化，获得目标多肽。1、Boc多肽合成法Boc方法是经典的多肽固相合成法，以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基，苄醇类作为侧链保护基，Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上，TFA切除Boc保护基，N端用弱碱中和。肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行，最终采用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中，为了便于下一步的多肽合成，反复用酸进行脱保护，一些副反应被带入实验中，例如多肽容易从树脂上切除下来，氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。2、Fmoc多肽合成法Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的，不受TFA等试剂的影响，应用温和的碱处理可脱保护，所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成，避免了采用强酸。同时，与Boc法相比，Fmoc法反应条件温和，副反应少，产率高，并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收，易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。多肽液相分段合成随着多肽合成的发展，多肽液相分段合成(即多肽片段在溶液中依据其化学专一性或化学选择性，自发连接成长肽的合成方法)在多肽合成领域中的作用越来越突出。其特点在于可以用于长肽的合成，并且纯度高，易于纯化。多肽液相分段合成主要分为天然化学连接和施陶丁格连接。天然化学连接是多肽分段合成的基础方法，局限在于所合成的多肽必须含半光氨酸(Cys)残基，因而限定了天然化学连接方法的应用范围。天然化学连接方法的延伸包括化学区域选择连接、可除去辅助基连接、光敏感辅助基连接。施陶丁格连接方法是另一种基础的片段连接方法，其为多肽片段连接途径开拓了更广阔的思路。正交化学连接方法是施陶丁格连接方法的延伸，通过简化膦硫酯辅助基来提高片段间的缩合率。其他多肽合成方法1、氨基酸的羧内酸酐法(NCA)氨基酸的羧内酸酐的氨基保护基也可活化羧基。NCA的原理:在碱性条件下，氨基酸阴离子与NCA形成一个更稳定的氨基甲酸酯类离子，在酸化时该离子失去二氧化碳，生成二肽。生成的二肽又与其他的NCA结合，反复进行。NCA适用于短链肽片段的多肽合成，其周期短、操作简单、成本低、得到产物分子量高，在目前多肽合成中所占比例较大，技术也较为通用。2、组合化学法20世纪80年代，以固相多肽合成为基础提出了组合化学法，即氨基酸的构建单元通过组合的方式进行连接，合成出含有大量化合物的化学库，并从中筛选出具有某种理化性质或药理活性化合物的一套多肽合成策略和筛选方案。组合化学法的多肽合成策略主要包括:混合-均分法、迭代法、光控定位组合库法、茶叶袋法等。组合化学法的最大优点在于可同时合成多种化合物，并且能最大限度地筛选各种新化合物及其异构体。3、酶解法酶解法是用生物酶降解植物蛋白质和动物蛋白质，获得小分子多肽。酶解法因其多肽产量低、投资大、周期长、污染严重，未能实现工业化生产。酶解法获得的多肽能够保留蛋白质原有的营养价值，并且可以获得比原蛋白质更多的功能，更加绿色，更加健康。4、基因工程法基因工程法主要以DNA重组技术为基础，通过合适的DNA模板来控制多肽的序列合成。有研究者通过基因工程法获得了准弹性蛋白-聚缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-缬氨酸-甘氨酸肽(VPGVG)。利用基因工程技术生产的活性多肽还有肽类抗生素、干扰素类、白介素类、生长因子类、肿瘤坏死因子、人生长激素，血液中凝血因子、促红细胞生成素，组织非蛋白纤溶酶原等。基因工程法合成多肽具有表达定向性强，安全卫生，原料来源广泛和成本低等优点，但因存在高效表达，不易分离，产率低的问题，难以实现规模化生产。5、发酵法发酵法是从微生物代谢产物中获得多肽的方法。虽然发酵法的成本低，但其应用范围较窄，因为现在微生物能够独立合成的聚氨基酸只有ε-聚赖氨酸(ε-PL)、γ-聚谷氨酸(γ-PGA)和蓝细菌肽。[img=,457,333]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221507346400_2482_3531468_3.jpg!w457x333.jpg[/img]我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：17718122172；17718122684；17730030476；17718122397
[em04] 摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。 多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液中产生或获得的，生命活动中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病变、免疫调节等均与活性多肽密切相关。随着现代科技的飞速发展，从天然产物中获得肽类物质的手段也不断得到提高。一些新方法、新思路的应用。不断有新的肽类物质被发现应用于防病治病之中。本文介绍了近几年肽类物质分离、分析的主要方法研究进展。 1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段，如层析、叫泳等。 1.1 高效液相色谱（HPLC） 1．1．1 反相高效液相色谱（RP-HPLC） 1.1.2 疏水作用色谱（Hydrophobic interaction chromatogrphy，HIC） 1.1.3 分子排阻色谱（Sizs-Exclusion chromatogrphy，SEC） SEC是利用多肽分子大小、形状差异来分离纯化多肽物质，特别对一些较大的聚集态的分子更为方便，如人重组生长激素（hgH）的分离，不同结构、构型的GH在SEC柱上分离行为完全不同，从而可分离不同构型或在氨基酸序列上有微小差异的变异体，利用SEC研究修饰化的PEG的分离方法，此PEC具有半衰期长、作用强的特点。一些分子量较大的肽或蛋白均可利用此法分离分析。 1．1．4离子交换色谱（Iron-Exchange chromatography,IEXC） IEXC可在中性条件下，利用多肽的带电性不同分离纯化具有生物活性的多肽。其可分为阳离子柱与阴离子柱两大类，还有一些新型树脂，如大孔型树脂、均孔型树脂、离子交换纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶树脂等。在多肽类物质的分离分析研究中，对多肽的性质、洗脱剂、洗脱条件的研究较多，不同的多肽分离条件有所不同，特别是洗脱剂的离子强度、盐浓度等对纯化影响较大。Wu等报道利用离子交换柱层析法，探讨分离牛碳酸酐异构体和牛血清白蛋白、鸡血清白蛋白酶的提取条件，获得了有价值的数据供今后此类物质分离研究。 1．1．5膜蛋白色谱（Chromatography of Membrane Protein,CMP） CMP+分离强蔬水性蛋白、多肽混合物的层析系统，一般有去垢剂（如SDS）溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白，并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团（P-端），又具有阳离子钙（C-端），与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的分离机制发现，样品与SDS结合后在离子交换柱上存在SDS分子、带电荷氨基酸与固定相中带电离子间的交换，从而达到分级分离的目的。 1．1．6高效置换色谱（High-Performance Displacement Chromatography,HPDC） HPDC是利用小分子高效置换剂来交换色谱柱上的样品，从而达到分离的目的。它具有分离组分含量较少成分的特性。利用HPDC鉴定分离了低于总量1%组分的活性人重组生长激素（rHG ）。在研究非毒性交换剂时Jayarama发现硫酸化葡萄糖（Detran Sulfate，DS）是对β乳球蛋白A和B的良好置换剂，一般DS的相对分子质量为1×104和4×104最宜。研究表明置换剂的相对分子质量越低，越易于与固定相结合，因此在分离相对分子质量小的多肽时，需要更小的置换剂才能将其置换纯化出来。 1.1.7 灌注层析（Perfusion Chromatography，PC） PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法，固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多，适合于不同分子量的多肽分离使用。 1.2 亲和层析（Affinity Chromatography，AC） AC是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲和性而分离物质的层析方法。自1968年Cuatrecasas提出亲和层析概念以来，在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合，如抗原-抗体、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸与其互补链等等。对多肽类物质分离目前主要应用其单抗或生物模拟配基与其亲和，这些配基由天然的，也有根据其结构人工合成的。Patel等人利用一系列亲和柱分离纯化到了组织血浆纤维蛋白酶原激活剂蛋白多肽。 1.3 毛细管电泳（Capillary electrophoresis，CE）--分离分析方法 CE是在传统的电泳技术基础上于本世纪60年代末由Hjerten发明的，其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽，使电泳效率提高了几十倍。此技术从80年代以来发展迅速，是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE根据应用原理不同可分为以下几种；毛细管区带电泳Capillary Zone electrophoresis，CZE）、毛细管等电聚焦电泳（Capillary Isoeletric Focusing，CIEF）毛细管凝胶电泳（CapillaryGelElectrophoresis，CGE）和胶束电动毛细管层析（Micellar Electokinetic Electrophoresis Chromatorgraphy,MECC）等。 1.3.1 毛细管区带电泳（Capillary Zone Electrophoresis，CZE） CZE分离多肽类物质主要是依据不同组分中的化合物所带电性决定，比传统凝胶电泳更准确。目前存在于CZE分离分析多肽物质的主要问题是天然蛋白或肽易与毛细管硅胶柱上的硅醇发生反应，影响峰形与电泳时间，针对这些问题不少学者做了大量实验进行改进，如调节电池泳液的PH值，使与硅醇反应的极性基团减少；改进毛细管柱材料的组成，针对多肽性质的不同采取不同的CZE方法研究分离5个含9个氨基酸残基的小肽，确定了小肽分析的基本条件，即在低PH条件下，缓冲液中含有一定浓度的金属离子如Zn2+等，此时分离速度快而且准确。 1．3．2细管等电聚电泳（Capillary Isleletric Focusing,CIEF） 由于不同的蛋白、多肽的等电点（PI）不同，因此在具有不同pH梯度的电泳槽中，其可在等电点pH条件下聚集沉淀下来，而与其他肽类分离开来。CIEF在分离、分析混合多肽物质中应用不多，主要应用与不同来源的多肽异构体之间的分离，如对rHG不同异构体分离。由于在CIEF柱表面覆盖物的不稳定性限制了此法的广泛应用。 1．3. 3毛细管凝胶电泳 (Capillary Gel Electrophoresis,CGE) CGE是基于分子筛原理，经十二烷基磺酸钠（SDS）处理的蛋白或多肽在电泳过程中主要靠分子形状、分子量不同而分离。目前，又有一种非交联欢、线性、疏水多聚凝胶柱被用于多肽物质的分离分析，此电泳法适于含疏水侧链较多的肽分离，这种凝胶易于灌注，使用寿命长，性质较为稳定。 1．3．4胶束电动毛细管层析（Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC） MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂，如SDS，使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽，阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之形成带有一定电荷的胶束，从而得到很好的分离效果。有文献报道在电解液中加入环糊精等物质，可使用权含疏水结构组分的多肽选择性与环糊精的环孔作用，从而利用疏水作用使多肽得到分离。 1．4多肽蛋白质分离工程的系统应用 以上提到的分离多肽的技术在实际应用过程中多相互结合，根据分离多肽性质的不同，采用不同的分离手段。特别是后基因组时代，对于蛋白质组深入的研究，人们对于分离多肽及蛋白质的手段不断改进，综合利用了蛋白质和多肽的各种性质，采用包括前面提到的常规蛋白多肽提取方法，同时利用了高效液相色谱，毛细管电泳，2-D电泳等手段分离得到细胞或组织中尽可能多的蛋白多肽。在蛋白质组学研究中系统应用蛋白和多肽分离鉴定的技术在此研究中即是分离手段也是分析方法之一。特别是以下提到的质谱技术的发展，大大的提高了蛋白多肽类物质的分析鉴定的效率。
国肽生物是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。国肽生物专长于荧光标记肽、同位素标记肽、人工胰岛素、药物肽、化妆品肽、长肽困难肽等产品的合成与研发，致力于学术水平的科研提升，搭建学术交流平台，促进前沿、专业的学术知识推广，推动多肽在生物医学材料等领域的研究与应用。[img=,690,300]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905091358562505_4016_3531468_3.jpg!w690x300.jpg[/img]我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：17718122172；17718122684；17730030476；17718122397
建立测定某多肽HPLC法 多肽是人体自身存在而且必需的活性物质，是人体的重要组成物质、营养物质，它广泛分布于人体各部位，特别是在大脑里，几乎对所有的细胞都有调节作用。人体缺失了多肽，免疫系统及各功能系统就可能发生紊乱，就会出现各种慢性病。多肽还具有抗菌、抗肿瘤、增强传统抗生素对耐药菌的活性、促进创伤愈合等多项生物学功能。这也就成为其在医药、食品防腐、保健品及化妆品等领域具有广阔的应用前景。 蛋白质的生理功能主要由肽来完成，有人甚至说肽是生命的统帅，对生命非常重要。所以肽及多肽的生产、合成也是非常重要的。当然测定工作也是很重要的。 某药物研究所通过药物机理成功的合成了某营养成分--某多肽，由于涉及到一些保密成分，暂时定义为“多肽X”。以下测定实验就是一是为了测定多肽，二是为了通过对某药品中多肽的测定，以便对该多肽成分制备提取提供可行性方法及理论数据。1 实验概述1.1 实验目的a.为了测定多肽。b.为了通过对某药品中多肽的测定，以便对该多肽成分制备提取提供可行性方法及理论数据。1.2 实验要求a. 梯度基线漂移不超过20mAu,分离度好。b. 定性定量分析结果准确可靠。c. 通过对某药品中多肽的测定，完善色谱条件(主要是流动相和检测波长的确定)，为该多肽X的制备提取做工作。1.3 实验原理以乙腈和水为流动相，加入阴离子对试剂三氟乙酸，与多肽的质子化氨基结合，以提高多肽样品的保留值。1.4 实验环境1.4.1仪器设备：高效液相色谱仪(梯度洗脱泵，紫外检测器)手动进样器1.4.2环境：温度：24℃湿度：45%2 实验方案2.1色谱条件（参考）：色谱柱：STC C18（250*4.6，5um）波长：210nm流动相A：0.1%三氟乙酸（TFA）的乙腈溶液流动相B：0.1%三氟乙酸（TFA）的水溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308311139_461282_2369266_3.png[font
【序号】：3【作者】：祁凤英1,2王蕾2李东东【题名】：可缓释富血小板血浆生长因子的新型自组装多肽水凝胶制备及性能表征【期刊】：中国组织工程研究. 【年、卷、期、起止页码】：2024,28(15)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=6xaVI2TORM1swCWGB30yfUSs7gagqZ8OuIiWkV2_s1SHFu-K1KszuTVN3jiF4Ab9hQrTPCOoiwTAoBUscEZgIGyLDzwVbBMulNObHUFG5Ayp20EWIPttGstjxBJ37fe743uLcw4DVrM=&uniplatform=NZKPT&language=CHS
供应各种修饰型多肽。1.磷酸化的Ser、Tyr和Thr修饰的多肽：我们提供单磷酸化和多磷酸化多肽服务，目前我们已经能够提供四个磷酸化位点修饰的多肽。2.5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽：荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术，我们的这项技术已经相当成熟。【详情请咨询国肽生物】3.生物素Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽：生物素是维生素B2的组成部分，Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽也是客户经常定制的多肽。我们提供生物素修饰的多肽已经有将近100%的成功率。4.含有一对或多对二硫键修饰的多肽：二硫键在蛋白质的结构稳定中起到重要作用，目前我们已经能够为客户提供四对二硫键修饰的多肽。5.含有同位素C13，N15修饰的多肽：同位素标记的多肽主要应用于医学和生物学领域，通常价格较高，为了满足客户需要，我们接受微克级的同位素多肽定制。6.含有特殊氨基酸修饰的多肽：例如，D型氨基酸，氨基酸衍生物，脂肪族羧酸等等，都在我们接受的定制范围内。
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。固相合成法，大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前必须活化。固相合成方法有两种，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多优势，现在大多采用Fmoc法合成。【详情请咨询合肥国肽生物】（1）具体合成由下列几个循环组成：1. 去保护：Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂（piperidine）去 除氨基的保护基团。2. 激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。循环：这两步反应反复循环直到合成完成。3. 洗脱和脱保护：多肽从柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂（TFA） 洗脱和脱保护。（2）树脂的选择及氨基酸的固定将固相合成与其他技术分开来的最主要的特征是固相载体，能用于多肽合成的固相载体必须满足如下要求：必须包含反应位点（或反应基团），以使肽链连在这些位点上，并在以后除去；必须对合成过程中的物理和化学条件稳定；载体必须允许在不断增长的肽链和试剂之间快速的、不受阻碍的接触；另外，载体必须允许提供足够的连接点，以使每单位体积的载体给出有用产量的肽，并且必须尽量减少被载体束缚的肽链之间的相互作用。用于固相法合成多肽的高分子载体主要有三类：聚苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇类树脂及衍生物，这些树脂只有导入反应基团，才能直接连上（第一个）氨基酸。根据所导入反应基团的不同，又把这些树脂及树脂衍生物分为氯甲基树脂、羧基树脂、氨基树脂或酰肼型树脂。BOC合成法通常选择氯甲基树脂，如Merrifield树脂；FMOC合成法通常选择羧基树脂如王氏树脂。氨基酸的固定主要是通过保护氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成的共价键来实现的，形成共价键的方法有多种：氯甲基树脂，通常先制得保护氨基酸的四甲铵盐或钠盐、钾盐、铯盐，然后在适当温度下，直接同树脂反应或在合适的有机溶剂如二氧六环、DMF或DMSO中反应；羧基树脂，则通常加入适当的缩合剂如DCC或羧基二咪唑，使被保护氨基酸与树脂形成共酯以完成氨基酸的固定；氨基树脂或酰肼型树脂，却是加入适当的缩合剂如DCC后，通过保护氨基酸与树脂之间形成的酰胺键来完成氨基酸的固定。（3）氨基、羧基、侧链的保护及脱除要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽，需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护，同时对氨基酸侧链上的活性基因也要保护，反应完成后再将保护基因除去。同液相合成一样，固相合成中多采用烷氧羰基类型作为α氨基的保护基，因为这样不易发生消旋。最早是用苄氧羰基，由于它需要较强的酸解条件才能脱除，所以后来改为叔丁氧羰基（BOC）保护，用TFA（三氟乙酸）脱保护，但不适用含有色氨酸等对酸不稳定的肽类的合成。chang Meienlofer和Atherton等人采用Carpino报道的Fmoc(9-芴甲氧羰基)作为α氨基保护基，Fmoc基对酸很稳定，但能用哌啶-CH2CL2或哌啶-DMF脱去，近年来，Fmoc合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法，可通过皂化除去或转变为肼以便用于片断组合；叔丁酯在酸性条件下除去；苄酯常用催化氢化除去。对于合成含有半胱氨酸、组氨酸、精氨酸等带侧链功能基的氨基酸的肽来说，为了避免由于侧链功能团所带来的副反应，一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。保护基的选择既要保证侧链基团不参与形成酰胺的反应，又要保证在肽合成过程中不受破坏，同时又要保证在最后肽链裂解时能被除去。如用三苯甲基保护半胱氨酸的S-，用酸或银盐、汞盐除去；组氨酸的咪唑环用2,2,2-三氟-1-苄氧羰基和2,2,2-三氟-1-叔丁氧羰基乙基保护，可通过催化氢化或冷的三氟乙酸脱去。精氨酸用金刚烷氧羰基（Adoc）保护，用冷的三氟乙酸脱去。我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：0551-62626599
[font=宋体][font=宋体]多肽合成是一个固相合成顺序一般从[/font]C[font=宋体]端[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]羧基端[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]向[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]氨基端[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从[/font][font=Calibri]1963[/font][font=宋体]年[/font][font=Calibri]Merrifield[/font][font=宋体]发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点，从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种：固相合成和液相多肽合成。【详情请咨询国肽生物】[/font][/font][font=宋体][font=宋体]多肽的固相合成[/font][font=宋体][font=宋体]多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从[/font]C[font=宋体]端向[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]氨基端[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，分离纯化，获得目标多肽。[/font][/font][font=宋体]1[font=宋体]、[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]多肽合成法[/font][/font][font=宋体]Boc[font=宋体]方法是经典的多肽固相合成法，以[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]作为氨基酸α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基的保护基，苄醇类作为侧链保护基，[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]的脱除通常采用三氟乙酸[/font][font=Calibri](TFA)[/font][font=宋体]进行。多肽合成时将已用[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]保护好的[/font][font=Calibri]N-[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基酸共价交联到树脂上，[/font][font=Calibri]TFA[/font][font=宋体]切除[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]保护基，[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端用弱碱中和。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]肽链的延长通过二环己基碳二亚胺[/font](DCC)[font=宋体]活化、偶联进行，最终采用强酸氢氟酸[/font][font=Calibri](HF)[/font][font=宋体]法或三氟甲磺酸[/font][font=Calibri](TFMSA)[/font][font=宋体]将合成的目标多肽从树脂上解离。在[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]多肽合成法中，为了便于下一步的多肽合成，反复用酸进行脱保护，一些副反应被带入实验中，例如多肽容易从树脂上切除下来，氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。[/font][/font][font=宋体]2[font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fmoc[/font][font=宋体]多肽合成法[/font][/font][font=宋体]Carpino[font=宋体]和[/font][font=Calibri]Han[/font][font=宋体]以[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——[/font][font=Calibri]Fmoc[/font][font=宋体]多肽合成法。[/font][/font][font=宋体]Fmoc[font=宋体]多肽合成法以[/font][font=Calibri]Fmoc[/font][font=宋体]作为氨基酸α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的，不受[/font][font=Calibri]TFA[/font][font=宋体]等试剂的影响，应用温和的碱处理可脱保护，所以侧链可用易于酸脱除的[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]保护基进行保护。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]肽段的最后切除可采用[/font]TFA/[font=宋体]二氯甲烷[/font][font=Calibri](DCM)[/font][font=宋体]从树脂上定量完成，避免了采用强酸。同时，与[/font][font=Calibri]Boc[/font][font=宋体]法相比，[/font][font=Calibri]Fmoc[/font][font=宋体]法反应条件温和，副反应少，产率高，并且[/font][font=Calibri]Fmoc[/font][font=宋体]基团本身具有特征性紫外吸收，易于监测控制反应的进行。[/font][font=Calibri]Fmoc[/font][font=宋体]法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。[/font][/font][font=宋体]多肽合成服务种类[/font][font=宋体]多肽合成服务通常有线性肽合成服务、多种难肽合成服务、修饰肽合成服务、以及部分多肽合成公司还会提供多肽定制服务，定制出有针对性的合成肽。[/font][font=宋体][font=宋体]目前有多肽合成公司提供的线性肽合成可达[/font]150[font=宋体]个氨基酸以内，在修饰肽合成上，能提供常见修饰，磷酸肽，[/font][font=Calibri]RGD[/font][font=宋体]环肽，荧光标记肽（[/font][font=Calibri]Cy3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Cy5[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fitc[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]AMC[/font][font=宋体]等），生物素标记肽[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]复合抗原（[/font][font=Calibri]MAP[/font][font=宋体]）[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]含[/font][font=Calibri]D[/font][font=宋体]型氨基酸[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]及各种氨基酸衍生物均可合成。[/font][/font][font=宋体]多肽产物纯度选择[/font][font=宋体][font=宋体]常见的质谱级多肽纯度，一般要求[/font]95%[/font][font=宋体][font=宋体]用于抗体筛选纯度，一般[/font]85%[font=宋体]即可[/font][/font][font=宋体]NMR[font=宋体]和结晶试验中，纯度一般[/font][font=Calibri]98%[/font][/font][font=宋体][font=宋体]粗品肽，一般[/font]50%[font=宋体]即可用于多肽筛选[/font][/font][font=宋体][font=宋体]国肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（[/font]Cy3[font=宋体]、[/font][font=Calibri]Cy5[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fitc[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]AMC[/font][font=宋体]等）、目录肽、偶联蛋白（[/font][font=Calibri]KLH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]BSA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]OVA[/font][font=宋体]等）、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、[/font][font=Calibri]RGD[/font][font=宋体]环肽等。详情请咨询国肽生物[/font][/font][/font][font=宋体][font=宋体][font=宋体][img=,690,143]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009091456152918_1632_3531468_3.jpg!w690x143.jpg[/img][/font][/font][/font]
[font=宋体][size=10.5000pt]多肽合成服务及修饰内容 [/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]国肽生物科技有限公司提供优质的多肽合成定制服务，可以根据客户要求合成不同纯度、不同长度的多肽。公司在多肽方面的技术国内领先，尤其在糖肽（[/font]Glycopeptide[font=宋体]）、环肽[/font][font=Calibri](Cyclicpeptide)[/font][font=宋体]、甲基化多肽[/font][font=Calibri](Methyl-peptide)[/font][font=宋体]、磺化多肽[/font][font=Calibri](Sulfication-peptide)[/font][font=宋体]、磷酸化多肽（[/font][font=Calibri]Phosphopeptides[/font][font=宋体]）、天然产物肽[/font][font=Calibri](Natural peptides)[/font][font=宋体]、各种荧光标记肽[/font][font=Calibri](Fluorescent Labeled Peptides)[/font][font=宋体]和修饰肽[/font][font=Calibri](modification Peptides)[/font][font=宋体]等方面有着领先的技术。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]多肽定制服务[/font] - small scale (typically C or Head to Tail[font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2[font=宋体]对二硫键，[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]对二硫键（[/font][font=Calibri]Disulfide (S-S bond formation) .Trisulfide formation[/font][font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]天然产物活性肽成环（[/font]Cyclic-natural peptides[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]甲基化修饰[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]侧链甲基化[/font]Lys(For),Lys(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]N[font=宋体]端甲基化（[/font][font=Calibri]N-Me-Arg,N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N- Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val[/font][font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]几种常见的特殊修饰[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]各种偶联（[/font]BSA, KLH conjugated peptides for antibody production [font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]磷酸化（[/font]Phosphoserine, Phosphothreonine, Phosphotyrosine[font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]磺化（[/font]Sulfated Tyrosine or Serine[font=宋体]） [/font][font=Calibri]MAPS (Multiple Antigenic Peptide)[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]糖肽（[/font]Glycopeptides[font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]PEG[font=宋体]修饰（[/font][font=Calibri]PEGylation[/font][font=宋体]）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]多肽服务范围：[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]纯度范围：粗肽＞脱盐＞[/font]70%[font=宋体]＞[/font][font=Calibri]75%[/font][font=宋体]＞[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]＞[/font][font=Calibri]85%[/font][font=宋体]＞[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]＞[/font][font=Calibri]95%[/font][font=宋体]＞[/font][font=Calibri]98%[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]二肽和三肽[/font]RGD[font=宋体]环肽普通线性肽（[/font][font=Calibri]60[/font][font=宋体]以内，[/font][font=Calibri]60+[/font][font=宋体]的详谈）蛋白偶联（[/font][font=Calibri]KLH,BSA,OVA)[/font][font=宋体]复杂肽修饰[/font][font=Calibri]:[/font][font=宋体]环肽（酰胺环、一对二硫键、两对二硫键），荧光标记肽（[/font][font=Calibri]FAM[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]、罗丹明），生物素标记肽（[/font][font=Calibri]Biotin[/font][font=宋体]）、磷酸肽（[/font][font=Calibri]Ser[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Thr[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Tyr[/font][font=宋体]）等含有特殊氨基酸的肽[/font][font=Calibri]:[/font][font=宋体]含有[/font][font=Calibri]D[/font][font=宋体]型氨基酸、赖氨酸侧链（一甲基、二甲基、三甲基）简单的修饰（[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端乙酰化，末端酰胺化）分支肽（二分支、四分支）[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体][img=,310,153]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006161610212064_120_3531468_3.jpg!w310x153.jpg[/img][/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]国肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。详情请咨询国肽生物[/font][/size][/font]
合肥国肽生物科技有限公司（简称：国肽生物TM）成立于2014年，是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的国家级高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内最大的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。 国肽生物专长于荧光标记肽、同位素标记肽、人工胰岛素、药物肽、化妆品肽、长肽困难肽等产品的合成与研发，致力于学术水平的科研提升，搭建学术交流平台，促进前沿、专业的学术知识推广，推动多肽在生物医学材料等领域的研究与应用。公司产品广泛应用于药物研发，抗体的制备（包括单抗与双抗），荧光分子探针的构建以及细胞透膜研究、活体成像、新型材料研发和质谱分析等研究领域；目前我们已经与军科院、天津药物研究所、中科院物理研究所等研究机构，清华、北大、复旦等高校，以及国外著名药企建立了长期友好的合作交流关系。 国肽生物以科技创新为动力，提升企业核心竞争力。公司拥有一支由行业内领军人才组成的研发创新团队，硕士研发人员占企业员工总数的15%以上，同时公司还邀请国内外顶级生物医学科学家担任科学顾问。公司成立首年，通过多肽生产设施的精细改良、多肽研发工艺的自主创新，突破了多肽产品快速化、规模化生产技术瓶颈，获得了7项实用新型专利和2项发明专利。 国肽生物公司配备了一流的多肽合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，从美国、日本等国引进了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]、超高压液相色谱、紫外分光光度计等专用设备，以多肽合成与研发为核心，搭建起全产业链产品分析检测平台，为广大客户提供专业可靠的多肽及相关产品理化性质分析，纯度分析，质谱分析，CHN元素含量分析，红外，紫外光谱分析等分析检测服务。 国肽生物的创立，源自于公司对多肽行业未来发展的认同，公司秉承“质量第一，服务至上”的经营理念，带着行业责任感与使命感，立志于在全球范围内树立一个民族品牌，重新引领肽行业的健康、快速发展。
多肽，多肽定制，多肽合成-合肥国肽生物是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。详情请咨询www.bankpeptide.com定制多肽种类一、特殊类别多肽:订书肽、同位素标记多肽、磷酸肽、环肽、二硫键多肽、糖肽、药物肽、化妆品肽等二、修饰肽：磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC、CMK、FMK等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、RGD环肽等三、特殊氨基酸多肽:可以将种类繁多的非天然氨基酸合成到多肽上。四、合成方法：多肽固相合成、多肽液相合成、点击化学、一锅法合成等服务内容标准肽：链长至 150个氨基酸，毫克至克级，纯度最高可达99%。不同纯度范围：粗肽、脱盐、75% 、 85% 、90%、95%、98%、99%。常规修饰肽：乙酰化，酰胺化，生物素标记肽，磷酸化肽，D型氨基酸修饰肽等。特殊修饰肽：磺酸化肽(Sulfated-tyrosine),环肽(二硫键环化，首尾环化),荧光标记肽(FITC,Dabcyl/Edans,Dansyl,FAM,Abz/Dnp,Rhodamine等),甲基化多肽(Lys(Me2),Lys(Me),Lys(Me3),Arg(Me),Arg(Me2) -Symetrical,Arg(Me2) -Asymetrical)，同位素标记肽(Heavy Isotope Labeled Peptides）、拟肽(peptoid)和点击化学用多肽(Peptides for Click Chemistry)。药用肽，大批量肽。协助客户建立科研肽库。抗原多肽及其与蛋白的交联：KLH,BSA, OVA服务流程确定合成序列，我们将在12小时内容提供准确报价。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：17718122172；17718122684；17730030476；17718122397
用于蛋白/多肽类反相HPLC柱的流动相清洗程序：1.无缓冲盐流动相；2. 10-90%B梯度，其中A = 0.1%三氟乙酸/水；B = 0.1%三氟乙酸/乙腈。
在重组药物领域，多肽类药物由于其毒性低，特异性高，分子量小等自身独特的优势，其成为患者的最佳选择。另外，随着制造工艺和给药系统的改进，多肽类药物从上世纪70 年代诺华的Lypressin（赖氨加压素）上市起，已经取得了迅猛发展。据全球肽治疗基金会的报告显示，在过去的几十年，进入临床开发的多肽类药物数量不断增加，上世纪90 年代年均为9.7 种，2000~2008 年间增加到16.8种。2000~2008 年间，进入临床研究的多肽最常见适应症是癌症和代谢性疾病（包括糖尿病和肥胖症），分别占18％和17％。而治疗过敏、免疫功能紊乱和心血管疾病的多肽类药物研究有所下降。而据生命科学产业的首席战略与管理咨询公司Bionest Partners 预计，全球多肽类药物市场将会从2003 年的53 亿美元增长到2013 年的115 亿美元，复合年均增长率（CAGR）为8.1%。在全球医药市场上，数种多肽类药物已经取得了商业上的成功，其销量已经达到或者接近“重磅炸弹”级药物的销售水平。新贵 1：醋酸格拉替雷以色列梯瓦制药公司的拳头产品 Copaxone（醋酸格拉替雷）是一种人工合成的肽类制剂，由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸四种氨基酸组成。Copaxone于1996 年获美国FDA 核准用于治疗多发性硬化症。在具有较多多发性硬化症患者的西方国家中，Copaxone 的疗效与耐受性皆获得十足的肯定。目前国内暂无企业申报格拉替雷或进口。2011 年Copaxone 全球销售额达到36 亿美元。据悉2012 年一季度，该药物创下了9.09 亿美元的销售额。6 月，梯瓦制药公司在发布的年度经济预测中表示，该药物2012 年或将为公司带来高达38 亿美元的收入。不过Copaxone 可观的收益也引来仿制药公司的挑战。近日，梯瓦制药公司宣布，此前公司同包括Momenta 生物制药公司、诺华制药公司山德士分公司、迈兰制药公司以及Natco 生物制药公司数家制药公司之间就Copaxone 的专利权展开了一场法律诉讼案件，日前美国纽约州法院表示梯瓦制药公司胜诉。梯瓦制药公司对于该药物的市场独家销售权有效期将会延至2014年。新贵 2：醋酸亮丙瑞林雅培的 Lupron（醋酸亮丙瑞林），是一种自然产生的促性腺激素释放激素GnRH 或促黄体生成释放激素（LH-RH）的合成九肽类似物。Lupron 适应症较广，包括子宫内膜异位症；伴有月经过多、下腹痛、腰痛及贫血等的子宫肌瘤；绝经前乳腺癌，且雌激素受体阳性患者；前列腺癌；中枢性性早熟症。2011 年，雅培的Lupron 在全球的销售额达到8.1 亿美元。在中国市场，武田药品工业株式会社2000 年起进口销售。2009 年，北京博恩特药业有限公司和上海丽珠制药有限公司上市国产醋酸亮丙瑞林。近两年，国内16 个重点城市样本医院醋酸亮丙瑞林用药快速增长，增长率保持在50%左右，2011 年就达到5730 万元。国内醋酸亮丙瑞林市场份额中，武田药品工业株式会社占据着86.73的市场份额。新贵 3：醋酸戈舍瑞林阿斯利康的诺雷得（醋酸戈舍瑞林）是一种注射用的促黄体生成素释放激素类似物。用于晚期前列腺癌的姑息治疗；以及绝经前及围绝经期晚期乳腺癌、子宫内膜异位和子宫纤维瘤的治疗。2011 年阿斯利康的诺雷得全球销售额达到11 亿美元。在中国市场，前英国捷利康公司从1999 年进行进口销售，阿斯特拉公司和捷利康公司合并为阿斯利康后，继续由阿斯利康进口销售。2007~2011 年，国内16 个重点城市样本医院醋酸戈舍瑞林用药保持着高速增长，虽然2010 年略有放缓，但增长率仍维持在30%以上，2011 年国内16 个重点城市样本医院醋酸戈舍瑞林用药更是达到1.9亿元人民币。
合肥国肽生物科技有限公司（简称：国肽生物TM）成立于2014年，是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。国肽生物专长于荧光标记肽、同位素标记肽、人工胰岛素、药物肽、化妆品肽、长肽困难肽等产品的合成与研发，致力于学术水平的科研提升，搭建学术交流平台，促进前沿、专业的学术知识推广，推动多肽在生物医学材料等领域的研究与应用。公司产品广泛应用于药物研发，抗体的制备（包括单抗与双抗），荧光分子探针的构建以及细胞透膜研究、活体成像、新型材料研发和质谱分析等研究领域国肽生物按照客户定制要求供应高品质普通多肽。我们拥有成熟的多肽合成纯化方法，利用SPPS方法和液相合成方法为客户提供高品质多肽。我们的服务特点是:1. 纯度：我们提供粗品肽和纯度纯度为70%，75%，80%,85%,90%,95%,98%,99%的纯品多肽。2.脱盐和转盐：根据客户要求，我们可以对多肽进行脱TFA盐处理，也可以转为醋酸盐。3.交货期限：30个氨基酸之内，一般2-3周，最快1-2周。4.质量控制：每条多肽都免费提供合格的HPLC，MS和COA文件。5.售后服务：1-2周内可以提出异议，我们免费复测，不合格免费退货，1-3个月内使用不合格可以免费提供复测，样品免费保存3个月。国肽生物根据客户要求，供应各种修饰型多肽。1.磷酸化的Ser、Tyr和Thr修饰的多肽：我们提供单磷酸化和多磷酸化多肽服务，目前我们已经能够提供四个磷酸化位点修饰的多肽。2.5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽：荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术，我们的这项技术已经相当成熟。3.生物素Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽：生物素是维生素B2的组成部分，Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽也是客户经常定制的多肽。我们提供生物素修饰的多肽已经有将近100%的成功率。4.含有一对或多对二硫键修饰的多肽：二硫键在蛋白质的结构稳定中起到重要作用，目前我们已经能够为客户提供四对二硫键修饰的多肽。5.含有同位素C13，N15修饰的多肽：同位素标记的多肽主要应用于医学和生物学领域，通常价格较高，为了满足客户需要，我们接受微克级的同位素多肽定制。6.含有特殊氨基酸修饰的多肽：例如，D型氨基酸，氨基酸衍生物，脂肪族羧酸等等，都在我们接受的定制范围内。国肽生物提供150个氨基酸以内的长肽合成服务。多肽合成过程中，肽链过长时，经常会出现缺残基，氨基酸缩合困难等情况，基于这些现象，我们开发了三种有效提高反应成功率的方案：1. 微波合成法：对于合成过程中出现的一些难以缩合的氨基酸，我们采用微波法进行合成，该方法效果显著，并且大大缩短了反应时间。2. 片段合成法：当某些多肽用常规合成方法合成困难，我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去，这种方法也能够解决许多合成中存在的问题。3.酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是将固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽的连接，该方法根据肽链中Cys的位置，将整条肽链分成多条序列分别合成，最终经过液相缩合反应得到目标肽，显著地提高了最终产物纯度，广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。国肽生物拥有成熟的长肽合成工艺，能够根据客户定制的多肽序列，快速有效地设计合成方案并迅速开始合成，更快更好的为客户提供所需的服务是我们不变的坚持。详情请咨询合肥国肽生物www.bankpeptide.com
国肽生物 提供 多肽合成、多肽修饰、蛋白多肽、cGMP多肽、多肽化学合成、目录肽、药物肽/化妆品肽、多肽文库构建、中间体定制及合成、抗体服务、氨基酸、糖肽、订书肽、多肽核酸等多肽及蛋白质的人工合成多肽及蛋白质的人工合成，指以氨基酸为原料，用化学方法合成多肽或蛋白质。以氨基酸为原料，用化学方法合成多肽或蛋白质。其目的是：①确证天然多肽或蛋白质的结构；②生产天然的、在生物体内含量极微但有医疗或其他生物效用的多肽；③改变部分结构，研究其结构与功能的关系，并设计更有效的药物。[img=,625,151]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906190944309669_566_3531468_3.jpg!w625x151.jpg[/img]我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。详情请咨询合肥国肽生物www.bankpeptide.com
国肽生物是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。国肽生物根据客户要求，供应各种修饰型多肽。1.磷酸化的Ser、Tyr和Thr修饰的多肽：我们提供单磷酸化和多磷酸化多肽服务，目前我们已经能够提供四个磷酸化位点修饰的多肽。2. 5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽：荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术，我们的这项技术已经相当成熟。3.生物素Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽：生物素是维生素B2的组成部分，Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽也是客户经常定制的多肽。我们提供生物素修饰的多肽已经有将近100%的成功率。4.含有一对或多对二硫键修饰的多肽：二硫键在蛋白质的结构稳定中起到重要作用，目前我们已经能够为客户提供四对二硫键修饰的多肽。5.含有同位素C13，N15修饰的多肽：同位素标记的多肽主要应用于医学和生物学领域，通常价格较高，为了满足客户需要，我们接受微克级的同位素多肽定制。6.含有特殊氨基酸修饰的多肽：例如，D型氨基酸，氨基酸衍生物，脂肪族羧酸等等，都在我们接受的定制范围内。国肽生物提供150个氨基酸以内的长肽合成服务。多肽合成过程中，肽链过长时，经常会出现缺残基，氨基酸缩合困难等情况，基于这些现象，我们开发了三种有效提高反应成功率的方案：1. 微波合成法：对于合成过程中出现的一些难以缩合的氨基酸，我们采用微波法进行合成，该方法效果显著，并且大大缩短了反应时间。2. 片段合成法：当某些多肽用常规合成方法合成困难，我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去，这种方法也能够解决许多合成中存在的问题。3.酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是将固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽的连接，该方法根据肽链中Cys的位置，将整条肽链分成多条序列分别合成，最终经过液相缩合反应得到目标肽，显著地提高了最终产物纯度，广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。国肽生物拥有成熟的长肽合成工艺，能够根据客户定制的多肽序列，快速有效地设计合成方案并迅速开始合成，更快更好的为客户提供所需的服务是我们不变的坚持。国肽生物按照客户定制要求供应高品质普通多肽。我们拥有成熟的多肽合成纯化方法，利用SPPS方法和液相合成方法为客户提供高品质多肽。我们的服务特点是:1. 纯度：我们提供粗品肽和纯度纯度为70%，75%，80%,85%,90%,95%,98%,99%的纯品多肽。2.脱盐和转盐：根据客户要求，我们可以对多肽进行脱TFA盐处理，也可以转为醋酸盐。3.交货期限：30个氨基酸之内，一般2-3周，最快1-2周。4.质量控制：每条多肽都免费提供合格的HPLC，MS和COA文件。5.售后服务：1-2周内可以提出异议，我们免费复测，不合格免费退货，1-3个月内使用不合格可以免费提供复测，样品免费保存3个月。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：0551-62626599[img=,690,311]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904111437129214_3530_3531468_3.jpg!w690x311.jpg[/img]
多肽合成技术主要采用多肽合成仪，以固相合成为反应原理，在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序（序列，一般从C端-羧基端 向 N端-氨基端）不断添加、反应、合成，操作最终得到多肽载体。固相合成法，大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前必须活化。固相合成方法有两种，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多优势，现在大多采用Fmoc法合成，但对于某些短肽，tBoc因其产率高的优势仍然被很多企业所采用。【请移步百度搜“[b]合肥国肽生物[/b]”即可】具体合成由下列几个循环组成：(1)去保护：Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂（piperidine）去 除氨基的保护基团。(2)激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。循环：这两步反应反复循环直到合成完成。(3)洗脱和脱保护：多肽从柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂（TFA） 洗脱和脱保护。多肽的分类多肽有生物活性多肽和人工合成多肽两种。1、生物活性肽生物活性肽(Bioactive Peptides ，BAP)是对生物机体的生命活动有益或是具有生理作用的肽类化合物，是一类相对分子质量小于6000Da ， 具有多种生物学功能的多肽。生物活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能，易消化吸收，有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用，是当前国际食品界最热门的研究课题和极具发展前景的功能因子。2、人工合成多肽固相多肽合成方法(SPPS)，由于其合成方便，迅速，成为多肽合成的首选方法，而且带来了多肽有机合成上的一次**，并成为了一支独立的学科——固相有机合成，固相合成的发明同时促进了肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的多肽合成仪出现在1980年代初期。基于将单个N-α保护氨基酸反复加到生长的氨基成份上，合成一步步地进行， 通常从合成链的C端氨基酸开始，接着的单个氨基酸的连接通过用DCC，混合炭酐， 或N-carboxy酐方法实现。Carbodiimide方法包括用DCC做连接剂连接N-和C-保护氨基酸。重要的是， 这种连接试剂促接N保护氨基酸自己炭基和C保护氨基酸自由氨基间的缩水，形成肽链， 同时产出N，N?/FONT-dyaylcohercylurea副产物。多肽合成方法1、酸酐法在多肽合成中，最初考虑应用酸酐要追溯到1881年Theodor Curtius对苯甲酰基氨基乙酸合成的早期研究。从氨基乙酸银与苯甲酰氯的反应中，除获得苯甲酰氨基乙酸外，还得到了BZ-Glyn-OH(n=2-6)。早期曾认为，当用苯甲酰氯处理时，N－苯甲酰基氨基酸或N－苯甲酰基肽与苯甲酸形成了活性中间体不对称酸酐。 大约在70年后，Theodor Wieland利用这些发现将混合酸酐法用于现代多肽合成。目前，除该方法外，对称酸酐以及由氨基酸的羧基和氨基甲酸在分子内形成的N－羧基内酸酐（NCA,Leuchs anhydrides）也用肽缩合。最后应该提到，不对称酸酐常常参与生化反应中的酰化反应。2、混合酸酐法有机羧酸和无机酸皆可用于混合酸酐的形成。然而，仅有几个得到了广泛的实际应用，多数情况下，采用氯甲酸烷基酯。过去频繁使用的氯甲酸乙酯，目前主要被氯甲酸异丁酯所替代。由羧基组分和氯甲酸酯起始形成的混合酸酐，其氨解反应的区域选择性依赖依赖于两个互相竞争的羰基的亲电性和（或）空间位阻。在由N保护的氨基酸羧酸盐（羧基组分）和氯甲酸烷基酯（活化组分，例如源于氯甲酸烷基酯）形成混合酸酐时，亲核试剂胺主要进攻氨基酸组分的羧基，形成预期的肽衍生物，并且释放出游离酸形式的活性成分。3、酰基叠氮物法酰基叠氮物法早在1902年就被引入到肽化学中，因此它是最古老的缩合方法之一。在碱性水溶液中，除了与酰基叠氨缩合的游离氨基酸和肽以外，氨基酸酯可用于有机溶剂中。与其他许多缩合方法不同的是，它不需要增加辅助碱或另一等当量的氨基组分来捕获腙酸。 长期以来，一直认为叠氮物法是唯一不发生消旋的缩合方法，随着可选择性裂解的氨基酸保护基引入，该方法经历了一次大规模的复兴。该方法的起始原料分别是晶体状的氨基酸酰肼或肽酰肼64,通过肼解相应的酯很容易得到。4、对称酸酐法Nα－酰基氨基酸的对称酸酐是用于肽键形成的高活性中间体。与混合酸酐法多肽合成相反，它与胺亲核试剂的反应没有模棱两可的区域选择性。但肽缩合产率最高，为50%（以羧基组分计）。虽然由对称酸酐氨解形成的游离Nα－酰基氨基酸可以和目标肽一起，通过饱和碳酸氢钠溶液萃取回收，但在最初，这种方法的实用价值极低。对称酸酐可以用Nα－保护氨基酸与光气，或方便的碳二亚胺反应制得。两当量的Nα－保护氨基酸与－当量的碳二亚胺反应有利于对称酸酐的形成，对称酸酐可以分离出来，也可不经纯化而直接用于后面的缩合反应。基于Nα－烷氧羰基氨基酸的对称酸酐对水解稳定，可采用类似上述纯化混合酸酐的方法进行纯化。[img=,690,300]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221451156040_1751_3531468_3.jpg!w690x300.jpg[/img]我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：17718122172；17718122684；17730030476；17718122397
国肽生物美容多肽相关产品乙酰基六肽-8三肽-1铜棕榈酰三肽-1棕榈酰四肽-7棕榈酰五肽-4棕榈酰六肽；脂肽乙酰基五肽-1乙酰基八肽-1棕榈酰三肽-3/5寡肽-1五肽-18乙酰基四肽-5详情请咨询合肥国肽生物http://www.bankpeptide.com/product.do?id=4b2b73e8-69b0-4b10-ab40-d6834d1afe1f国肽生物主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等
合成多肽是α-氨基酸以肽链连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。 由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。合成多肽方法分类 多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。 化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时，由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体，多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来，方可进行成肽反应，这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。 多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速，可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年，多肽液相片段合成法发展迅速，在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中，根据多肽片段的化学特定性或化学选择性，多肽片段能够自发进行连接，得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少，所以纯度较高，且易于纯化。 多肽的生物合成方法主要包括发酵法、酶解法，随着生物工程技术的发展，以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。合成多肽的原理 多肽合成就是如何把各种氨基酸单位按照天然物的氨基酸排列顺序和连接方式连接起来。由于氨基酸在中性条件下是以分子内的两性离子形式(H3+NCH(R)COO-)存在，因此，氨基酸之间直接缩合形成酰胺键的反应在一般条件下是难于进行的。氨基酸酯的反应活性较高。在100℃下加热或者室温下长时间放置都能聚合生成肽酯，但反应并没有定向性，两种氨基酸a1和a2的酯在聚合时将生成a1a2…、a1a1…、a2a1…等各种任意顺序的混合物。 为了得到具有特定顺序的合成多肽，采用任意聚合的方法是行不通的，而只能采用逐步缩合的定向多肽合成方法。一般是如下式所示，即先将不需要反应的氨基或羧基用适当的基团暂时保护起来，然后再进行连接反应，以保证多肽合成的定向进行。 式中的X和Q分别为氨基和羧基的保护基，它不仅可以防止乱接副反应的发生，还具有能消除氨基酸的两性离子形式，并使之易溶于有机溶剂的作用。 Q在有的情况下也可以不是共价连接的基团，而是由有机强碱(如三乙胺)同氨基酸的羧基氢离子组成的有机阳离子。Y为一强的吸电子基团，它能使羧基活化，而有利于另一氨基酸的自由氨基，对其活化羧基的羧基碳原子进行亲核进攻生成酰胺键。 由此所得的连接产物是N端和C端都带有保护基的保护肽，要脱去保护基后才能得到自由的肽。如果肽链不是到此为止，而是还需要从N端或C端延长肽链的话，则可以先选择性地脱去X或Q，然后再同新的N保护氨基酸(或肽)或C保护的氨基酸(或肽)进行第二次连接，并依次不断重复下去，直到所需要的肽链长度为止。 对于长肽的多肽合成来说，一般有逐步增长和片段缩合两种伸长肽链的方式，前者是由起始的氨基酸(或肽)开始。每连接一次，接长一个氨基酸，后者则是用N保护肽同C保护肽缩合来得到两者长度相加的新的长肽链。 对于多肽合成中含有谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、半胱氨酸等等带侧链功能团的氨基酸的肽来说，为了避免由于侧链功能团所带来的副反应，一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。[img=,690,163]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902191018209926_3198_3531468_3.jpg!w690x163.jpg[/img]我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。请移步百度搜“合肥国肽生物”即可
[font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]多肽固相合成法是多肽合成化学的一个重大的突破。它的最大特点是不必纯化中间产物，合成过程可以连续进行，进而为多肽合成的自动化奠定了基础。目前全自动多肽的合成，基本都是固相合成。其基本过程如下：[/font] [/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]基于[/font]Fmoc[font=宋体]化学合成，先将所要合成的目标多肽的[/font][font=Calibri]C-[/font][font=宋体]端氨基酸的羧基以共价键形式与一个不溶性的高分子树脂相连，然后以这一氨基酸的氨基作为多肽合成的起点，同其它的氨基酸已经活化的羧基作用形成肽键，不断重复这一过程，即可得到多肽。【详情请咨询国肽生物】根据多肽的氨基酸组成不同，多肽后处理方式不同，纯化方式也有差异。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]1.[font=宋体]做免疫用的多肽多长为合适[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]一般约[/font]10-15[font=宋体]个氨基酸，当然长一些免疫效果好一些，不过合成费用也会增加。[/font][font=Calibri]MAP[/font][font=宋体]多肽则希望长度在[/font][font=Calibri]15aa[/font][font=宋体]以上，效果较好。另外，[/font][font=Calibri]10aa[/font][font=宋体]以下的多肽免疫效果比较差。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2.[font=宋体]免疫用多肽的纯度需要很高吗[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]一般而言，免疫用[/font]Peptide[font=宋体]，[/font][font=Calibri]70-85%[/font][font=宋体]即可。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]3.[font=宋体]我们合成的多肽溶解性不好，多肽就有问题对吗[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]很难准确预测一个多肽的溶解性及合适的溶剂是什么。如果多肽难以溶解就认为多肽合成有问题这个观念并不正确。[/font] [/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]4.[font=宋体]多肽状态是如何[/font][font=Calibri]?[/font][font=宋体]如何保存储存[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]我们提供的多肽是粉末状，一般为灰白色，组成不同，多肽粉末的颜色有差异，多肽一般长期保存需要避光保存，并应保存在[/font]-20[font=宋体]度，短期可以保存在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]度。可以短时间的话是以室温运输。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]5.[font=宋体]如何溶解多肽[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]溶解多肽是非常复杂的事情，一般很难一下子确定合适的溶剂。通常是先取一点试验，在没有确定合适的溶剂前千万不要合部溶解。[/font] [font=宋体]下列方法有助于您选择合适的溶剂：[/font] [/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](1)[font=宋体]判定多肽的电荷特定，设定酸性氨基酸[/font][font=Calibri]Asp(D),Glu(E)[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端[/font][font=Calibri]COOH[/font][font=宋体]为[/font][font=Calibri]-1[/font][font=宋体]；碱性氨基酸[/font][font=Calibri]Lys(K),Arg(R),His(H)[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端[/font][font=Calibri]NH2[/font][font=宋体]为[/font][font=Calibri]+1,[/font][font=宋体]其它氨基酸的电荷为[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]。计算出将电荷数。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](2)[font=宋体]如果净电荷数[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]，多肽为碱性，用水溶解：如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸[/font][font=Calibri](10%[/font][font=宋体]以上[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]；如果多肽还不能溶解，加入少量[/font][font=Calibri]TFA(25ul)[/font][font=宋体]溶解，然后加入[/font][font=Calibri]500ul[/font][font=宋体]水稀释。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](3)[font=宋体]如果净电荷数[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]，多肽为酸性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水[/font][font=Calibri](25ul)[/font][font=宋体]溶解，然后加入[/font][font=Calibri]500ul[/font][font=宋体]水稀释。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](4)[font=宋体]如果净电荷数[/font][font=Calibri]=0[/font][font=宋体]，多肽为中性，一般需要用有机溶剂如乙腈，甲醇或异丙醇，[/font][font=Calibri]DMSO[/font][font=宋体]等溶解。还有人建议需要尿素来溶解疏水性很大的多肽。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]6.[font=宋体]非[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]纯化的多肽中有哪些杂质[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]粗品和脱盐级别的多肽中多肽和非多肽类杂质：如非全长多肽和多肽后处理的一些原料如[/font]DTT[font=宋体]、[/font][font=Calibri]TFA[/font][font=宋体]等。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]7.HPLC[font=宋体]纯化的多肽有哪些杂质[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]经过[/font]HPLC[font=宋体]纯化的多肽，仍会有一些一些杂质存在，其中的杂质主要是短肽和微量[/font][font=Calibri]TFA[/font][font=宋体]。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]8.[font=宋体]多长的多肽为合适[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]多肽合成需要考虑多肽的长度，电荷，亲疏水性等因素。长度越长，合成粗品的纯度和产率都随着降低，纯化的难度和无法合成的几率就会大些。当然多肽功能区的序列是无法改变的，但是为了多肽的顺利合成，有时不得不在功能取的上下游增加一些辅助氨基酸，以改善多肽的溶解性和亲疏水性。如果多肽太短，合成也可能有问题，主要问题是合成的多肽在后处理过程中有一定的难度，[/font]5[font=宋体]肽以下的多肽，一般要有疏水的氨基酸，否则后处理难度加大。[/font][font=Calibri]15[/font][font=宋体]个氨基酸残基以下的多肽一般都可以得到满意的产率和得率。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]9.[font=宋体]如何从多肽序列中判定多肽的溶解性[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](1)[font=宋体]多肽中如果含有高比例的疏水性很强的氨基酸如和[/font][font=Calibri]Leu,Val,IIe,Met,Phe[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Trp[/font][font=宋体]，多肽很难溶解与水性溶液中或根本不可能溶解。这些氨基酸无论是纯化或合成，都有可能有问题。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt](2)[font=宋体]一般情况下疏水性氨基酸的比例[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体]，不能连续[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]个连续[/font][font=Calibri]aa[/font][font=宋体]为疏水性，带电荷的氨基酸的[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]正电荷[/font][font=Calibri]K,R,H,N-terminus,[/font][font=宋体]负电荷[/font][font=Calibri]D,E,C- terminus)[/font][font=宋体]的比例达到[/font][font=Calibri]20%[/font][font=宋体]，在多肽的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]短如果能增加极性氨基酸，也可以改善溶解性。 [/font][font=Calibri]11.[/font][font=宋体]为什么含有[/font][font=Calibri]Cys,Met,[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]Trp[/font][font=宋体]的多肽难合成[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]含有[/font]Cys,Met[font=宋体]，或[/font][font=Calibri]Trp[/font][font=宋体]的多肽难以合成，同时难以获得高纯度的产品。主要因为这些基团不稳定，易氧化。这些多肽的使用和储存都需要特别注意，避免反复开启盖子。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]10.[font=宋体]为什么有些多肽的合成产率或纯度会比较低[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]多肽合成与引子合成有比较大的区别，不能合成的引子很少，但是不能合成的多肽经常有。如[/font]Val,Ile,Tyr,Phe,Trp,Leu,Gln,[font=宋体]和[/font][font=Calibri]Thr[/font][font=宋体]这些氨基酸比邻或重复时，多肽链在合成过程中不能完全舒展溶解，合成效率下降。以下几种情形，合成效率和产物的纯度都比较低，如：重复[/font][font=Calibri]Pro,Ser-Ser[/font][font=宋体]，重复[/font][font=Calibri]Asp[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]个连续[/font][font=Calibri]Gly[/font][font=宋体]等。 [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]11.[font=宋体]多肽是如何纯化的[/font][font=Calibri]? [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]多肽纯化一般使用反相柱[/font]([font=宋体]如[/font][font=Calibri]C8[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]C18[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]214nm[/font][font=宋体]。缓冲体系通常为含[/font][font=Calibri]TFA[/font][font=宋体]的溶剂，[/font][font=Calibri]pH2.0[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]Buffer A[/font][font=宋体]为含[/font][font=Calibri]0.1%TFA in ddH2O[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]Buffer B[/font][font=宋体]为[/font][font=Calibri]1%TFA/ACN/pH2.0[/font][font=宋体]。纯化前用[/font][font=Calibri]Buffer A[/font][font=宋体]溶解；如果溶解不好，用[/font][font=Calibri]Buffer B[/font][font=宋体]溶解后，然后用[/font][font=Calibri]Buffer A[/font][font=宋体]稀释；对疏水性强的多肽，有时还需要加入少量的[/font][font=Calibri]Formic Acid[/font][font=宋体]或醋酸。[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]分析多肽粗产物，如果多肽不长[/font][font=Calibri](15aa[/font][font=宋体]以下[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，一般会有主峰，主峰通常为全长产物；对于[/font][font=Calibri]20aa[/font][font=宋体]以上的长肽，如果没有主峰，[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]需搭配[/font][font=Calibri]Mass[/font][font=宋体]来判定分子量，进而确定哪个峰是所要合成的多肽。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体][img=,690,143]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/07/202007091611507608_3379_3531468_3.jpg!w690x143.jpg[/img][/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]国肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。详情请咨询国肽生物[/font][/size][/font]
我要推广仪器
下载APP
IE expo 2018第十九届中国环博会
IE expo 2019第二十届中国环博会
MALDI-TOF在临床微生物领域的技术应用进展
2023年全球上市仪器公司财报解读
2021世界环境日 人与自然 和谐共生
关注食品安全——仪器人在行动
2020世界环境日
降本增效 化学药物分析技术进展
从毒土地事件到新检测标准：土壤污染治理的探索与突破
仪咖说2023——汇聚仪器大咖，评说行业发展