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糠醇相关的论坛

  • fid测四氢糠醇纯度99.5%测试

    fid测四氢糠醇纯度99.5%测试

    fid测%99.5四氢糠醇,分流,灵敏度,总流量怎么调,可以使糠醇不平顶,杂质也能测出来?求大神指导!??http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507202058_556314_2864181_3.jpg

  • 【转帖】美国对原产中国的四氢糠醇进行反倾销日落复审

    2009年10月6日,美国国际贸易委员会发布公告,决定于原产于中国的四氢糠醇实施的反倾销措施进行日落复审,以决定若取消反倾销措施,涉案产品在合理的、可预见的期限内是否会对美国国内产业造成实质性损害。 2003年7月18日,美国商务部对原产于中国的四氢糠醇进行反倾销调查,涉案产品海关编码为29321300。2004年6月18日,美国商务部对该案作出肯定性终裁,裁定中国涉案企业的倾销幅度为136.86%。2009年7月1日,美国商务部对该案进行反倾销日落复审立案调查。老美太霸道,对他们这种行径,表示强烈谴责.

  • 求助:纯水做阻抗

    研究金属在纯水中的腐蚀,但是交流阻抗谱很乱,基本上没法看,用铁电极做也是一样的乱。换了0.5M 的Na2SO4溶液,阻抗图立刻就圆滑了,半圆也出来了。但是还是想研究在纯水中的腐蚀,有没有人对纯水中做阻抗有经验的?阻抗谱乱是不是由于溶液电阻太大引起的?如果需要,是不是需要添加支持电解质?多谢!

  • 抗体纯化的方法及步骤

    [font=宋体][font=宋体]抗体纯化的原理是依据抗体的生物学特征,如抗体分子的电荷、大小、疏水性等,选用合适的方法将目标抗体分子从初始混合物中分离纯化出来。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体纯化方法包括[/font][/font][b][font=宋体][font=宋体]亲和层析法、离子交换层析法、凝胶过滤层析法和疏水作用层析法[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]等。选用何种纯化方法取决于抗体的来源、时间、成本以及抗体的最终用途等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]抗体纯化的方法及步骤[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体是一类免疫蛋白,可识别并结合特定抗原,在生物研究以及临床应用中,纯化得到高质量的抗体十分重要。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一、凝胶过滤层析法[/font][/font][font=宋体][font=宋体]凝胶过滤层析法的原理是基于抗体分子的不同大小,利用不同孔径的凝胶过滤介质将目标分子(抗体)与较大分子(如蛋白质等杂质)分离开来。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的凝胶柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,较大分子无法通过凝胶柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体分子大小适中,可通过凝胶柱并被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液将目标抗体从凝胶柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]二、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac][b]亲和层析法[/b][/url][/font][/font][font=宋体][font=宋体]亲和层析法的原理是利用抗体分子与抗原之间的特异性结合来实现目标抗体的纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先包含特异性结合配体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的亲和层析柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]目标抗体与配体之间发生特异性结合。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]使用洗脱缓冲液将非特异结合的组分洗脱掉。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液将目标抗体从亲和层析柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]三、离子交换层析法[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换层析法的原理是利用目标抗体分子与离子交换柱中固定的离子之间的相互作用来实现纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的离子交换柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,使与固定离子相同电荷的分子无法通过离子交换柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体由于表面电荷不同,能够通过离子交换柱被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液改变[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]或盐浓度等条件,将目标抗体从离子交换柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]四、逆向相色谱法[/font][/font][font=宋体][font=宋体]逆向相色谱法的原理是利用目标抗体分子与逆向相色谱柱中固定的疏水基团之间的相互作用来实现纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的逆向相色谱柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,使疏水性较低的分子无法通过逆向相色谱柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体由于表面疏水性不同,能够通过逆向相色谱柱被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液改变溶剂极性等条件,将目标抗体从逆向相色谱柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体纯化是一项关键技术,在[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production][b]抗体制备[/b][/url]过程中十分重要。每种方法都有其特点和适用性,义翘神州可根据您的具体需求选择合适的抗体纯化方法,保证交付高质量、高纯度的纯化抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-purification][b]抗体纯化[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-purification[/font][/font][font=宋体] [/font]

  • 抗生素效价和纯度的关系

    最近实验室要采购一批抗生素,采购的时候发现供应商抗一般提供抗生素的效价,没有纯度;但是我们想买优级纯的,用液相定量,哪位有知道效价和纯度之间怎么换算吗?

  • 抗体纯化和蛋白纯化有什么区别?从定义及原理上剖析:

    [font=宋体][b]什么是抗体纯化?抗体纯化原理:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗体纯化是指从抗血清([/font][font=Calibri]pAb[/font][font=宋体])、腹水或杂交瘤细胞系([/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体])细胞培养上清液中提取抗体的过程。纯化后的抗体适用于多种应用。该过程可以在提供抗体纯化服务的实验室中进行,如果有必需的设备和工具,也可以自行纯化。如研究人员担心原始研究的完整性受到破坏,可在实验室中进行纯化,确保研究快速进行。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体的主要来源之一是在动物体内生成的抗血清。在这种情况下,反复向动物体内注射抗原,直到抗体开发完成为止,其血液用于制备抗血清,经纯化后可获得多克隆抗体。抗体的另一个来源是克隆细胞,其作为相同细胞群的一部分生成抗体;这种方法用于大规模生产单克隆抗体。查看更多有关[/font][font=宋体]“单克隆抗体纯化”的信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]什么是蛋白纯化?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重组蛋白的纯化是生物学研究中的重要技术。为了研究蛋白的特定功能和结构,研究人员必须将重组蛋白从生物体中分离并纯化。蛋白纯化方法主要利用不同重组蛋白之间的相似性和差异性。可以根据蛋白之间的相似性去除非蛋白物质,然后根据蛋白之间的差异分离纯化目标重组蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白标签是一种可以提高重组蛋白的溶解度、简化蛋白纯化的简单有效的工具,并通过简单的方法跟踪蛋白表达和纯化过程。此外,蛋白标签是追踪活细胞中蛋白和进程的一种有效工具,可以通过显微镜直接跟踪或者通过[/font][font=Calibri]Western blot[/font][font=宋体]、免疫沉淀或免疫染色间接进行跟踪。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白纯化原理:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不同的重组蛋白具有不同的氨基酸序列和空间结构,导致其物理、化学和生物学特性存在差异。我们也可以根据目标蛋白与其他蛋白和裂解液的性质差异设计合理的蛋白纯化方案。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大多数的纯化方案需要不止一步才能达到理想的纯度水平。该过程中的每一步都会造成一定的产品损失,假设每一步的获得率为[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]。因此,建议尽可能减少纯化步骤。起始原料的选择是纯化过程设计的关键。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在背景信息、检测方法和样品规格都已到位的情况下,可以考虑采用三阶段纯化策略。纯化分为捕获、中度纯化和精细纯化三个阶段,每个阶段都有特定的目标。捕获阶段的目标是分离、浓缩和稳定目标产物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白表达纯化服务和[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体定制服务[/b][/url],更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font]

  • 为了降低坏胆固醇要注意健康饮食

    降低坏胆固醇要建议做到健康饮食,推荐限制饱和脂肪酸及反式脂肪酸的摄入,比如要少吃动物油脂、棕榈油等,减少油炸食品摄入;增加果蔬、谷薯类及鱼类摄入。

  • 多克隆抗体纯化的原理、流程和方法详解

    [font=宋体][font=宋体][b]多克隆抗体纯化原理[/b]是依据抗体的生物学特性,一般通过[/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]Protein G[/font][font=宋体]的方法从动物血清中纯化抗体。但某些使用场景对抗体的质量要求很高,需要利用抗原亲和层析从总[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体中进一步纯化和分离抗原特异性抗体,最终获得纯度高、非特异性背景低的多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。抗血清被收集后,可通过硫酸铵沉淀法对其进行初步纯化,移除许多粘性蛋白,尽可能减少这些杂质对后续亲和层析纯化的影响。不同的纯化方法经常联合使用,用于从血清中纯化高质量的多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]①[/font][font=Calibri]Protein A/G[/font][font=宋体]纯化[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Protein G[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Protein L[/font][font=宋体]是三种细菌蛋白,具有能与抗体高效结合的特性。这些蛋白经过基因工程技术重组表达,常用于不同物种关键抗体类型的亲和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Protein A/G[/font][font=宋体]纯化是一种快速高效的多克隆抗体纯化方法,其原理是能与不同物种的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]恒定区发生结合,从而除去血清蛋白和[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]抗体。应该注意的是,终产品包含总[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体和特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已生产了[/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Protein G[/font][font=宋体]琼脂糖纯化树脂,可用于纯化小鼠[/font][font=Calibri]IgG2a/2b/3[/font][font=宋体]、大鼠[/font][font=Calibri]IgG2c[/font][font=宋体]、人[/font][font=Calibri]IgG1/2/4[/font][font=宋体]和兔[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]等多种来源的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]②抗原亲和纯化[/b][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在[/font][font=Calibri]Protein A/G[/font][font=宋体]纯化步骤后,抗原亲和纯化可进一步用于制备具有特异性高和纯度高的多克隆抗体。这种高灵敏度和高特异性的多克隆抗体适合用于[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]等免疫学检测实验,即使在较低的稀释比下使用,也不会增加信号背景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗原亲和纯化,首先将抗原固定至树脂上,然后目的抗体与抗原发生特异性结合,最后洗脱得到目的抗体,以达到纯化多克隆抗体的目的。与[/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]法相比,此方法识别的是抗体的可变区,能高度识别和结合目的抗体,常用于多克隆抗体的纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]多克隆抗体的纯化主要包括以下几个步骤:[/b][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①收集细胞上清液或培养上清液:多克隆抗体是通过免疫动物(如小鼠、兔子等)产生的,因此首先需要收集包含抗体的细胞上清液或培养上清液。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②蛋白[/font][font=Calibri]A/G[/font][font=宋体]层析:将收集到的上清液通过蛋白[/font][font=Calibri]A/G[/font][font=宋体]层析柱进行纯化。蛋白[/font][font=Calibri]A/G[/font][font=宋体]是常用于捕获免疫球蛋白的亲和色谱基质,可以选择性地结合抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③洗脱:通过改变洗脱缓冲液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值或盐浓度等条件,将结合在蛋白[/font][font=Calibri]A/G[/font][font=宋体]柱上的抗体洗脱下来。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④纯化筛选:使用各种纯化筛选方法,如凝胶过滤、离子交换层析、尺寸排阻层析等,进一步去除杂质并提高抗体的纯度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑤浓缩和储存:对纯化后的抗体进行浓缩处理,通常使用离心浓缩或超滤浓缩等方法。最后,将抗体在适当的储存缓冲液中保存,确保其稳定性和活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-purification][b]多克隆抗体纯化[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-purification[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 糠甾醇中甲醇与异丙醇的检测

    本品0.2g,加二甲基甲酰胺5ml,照有机溶剂残留测定法。6%氰丙基本-94%甲聚硅氧烷毛细管柱,柱温80度,保持10分钟,60度每分钟升到240度,保持2分钟。我想问问定量方法,归一还是内、外标?顶空进气体还是,直接进液体?最后测定的是待测峰面积,怎么得到含量?要求的是甲醇小于0.1%,异丙醇0.3%,一定要用内标物吗,内标物怎么选择?如果有相关具体操作步骤更感谢!

  • 上海药物所等在雷公藤内酯醇及衍生物抗肿瘤研究中获进展

    雷公藤内酯醇是中药雷公藤的主要生物活性成分,具有包括抗肿瘤在内的多重生物学作用。中科院上海药物研究所缪泽鸿课题组、李援朝课题组、丁健课题组与意大利博洛尼亚大学Giovanni Capranico实验室合作,在雷公藤内酯醇及其衍生物的抗肿瘤作用和机制研究中取得阶段性进展。 在阐明C14β位羟基取代的雷公藤内酯醇衍生物具有选择性体内抗肿瘤作用 (J Med Chem. 2009; 52: 5115–5123) 的基础上,研究发现雷公藤内酯醇可升高细胞内低氧诱导因子1α(HIF-1α)水平却降低其转录活性,与其抗肿瘤作用相关 (Mol Cancer. 2010; 9:268)。已有研究显示,雷公藤内酯醇可以与通用转录因子TFIIH大亚基XPB直接结合,并引起RNA聚合酶II(RNAPII)大亚基Rpb1降解。 该合作研究深入揭示了雷公藤内酯醇作用于这一核心靶点的分子基础和意义。雷公藤内酯醇降低Rpb1水平与其细胞毒活性紧密相关,即阻滞RNAPII于基因的启动子处,减少基因启动子和外显子处染色质结合的RNAPII,增加Rpb1羧基末端结构域的磷酸化 (5位丝氨酸) 和泛素化。蛋白酶体抑制剂或CDK7抑制剂可减低雷公藤内酯醇降解Rpb1的能力。研究人员由此发现雷公藤内酯醇触发CDK7介导RNAPII降解的新模式,提出了雷公藤内酯醇结合XPB、降解RNAPII的通用机制。该机制可以很好地解释雷公藤内酯醇包括其强效抗肿瘤在内的多重治疗学特性 (Cancer Res.2012; doi:10.1158/0008-5472.CAN-12-1006)。 研究人员还受邀撰写雷公藤内酯醇专题综述,系统总结了雷公藤内酯醇的结构修饰、构效关系、作用与机制以及临床开发的研究进展 (Nat Prod Rep. 2012; 29: 457-475)。 相关论文: 1.Li Z, Zhou ZL, Miao ZH, Lin LP, Feng HJ, Tong LJ, Ding J, Li YC. Design and synthesis of novel C14-hydroxyl substituted triptolide derivatives as potential selective antitumor agents. J Med Chem. 2009; 52:5115-23. 2.Zhou ZL, Luo ZG, Yu B, Jiang Y, Chen Y, Feng JM, Dai M, Tong LJ, Li Z, Li YC, Ding J, Miao ZH. Increased accumulation of hypoxia-inducible factor-1a with reduced transcriptional activity mediates the antitumor effect of triptolide. Mol Cancer. 2010; 9:268. 3.Manzo SG, Zhou ZL, Wang YQ, Marinello J, He JX, Li YC, Ding J, Capranico J, Miao ZH. Natural product triptolide mediates cancer cell death by triggering CDK7-dependent degradation of RNA polymerase II. Cancer Res. 2012; doi:10.1158/0008-5472.CAN-12-1006. 4.Zhou ZL, Yang YX, Ding J, Li YC, Miao ZH. Triptolide: structural modifications, structure-activity relationships, bioactivities, clinical development and mechanisms. Nat Prod Rep. 2012; 29:457-75.http://www.cas.cn/ky/kyjz/201208/W020120829347054661848.jpghttp://www.cas.cn/ky/kyjz/201208/W020120829347054676369.jpg雷公藤内酯醇及其衍生物抗肿瘤研究取得阶段性进展

  • 做三氯乙醛中纯水加抗坏血酸相关问题

    实验室用的顶空做水合三氯乙醛,方法是加氢氧化钠和三氯乙醛生成三氯甲烷。我用的实验室超纯水进样都出现了三氯甲烷的峰,但是我加了抗坏血酸三氯甲烷的峰就很小几乎没有了,加抗坏血酸不是做自来水的时候加吗原因是除掉水中的余氯,我就想问的是实验室超纯水出现三氯甲烷的峰 有没有是这种情况 我在有机实验室,经常做卤代烃 ,三氯甲烷标样挥发到空气中 ,然后就吸附到顶空瓶 .然后我加了抗坏血酸怎么三氯甲烷就没有了 不是除去余氯的吗 我还做了只加三氯乙醛和纯水的还是会有三氯甲烷产生 如果除去三氯甲烷那我这做的实验都有影响 是不是别的什么物质 求大神解答

  • 【求助】怎样抗生素分离纯化上树脂

    大家好:我现在在做一个化学药物的合成,是抗生素的,酰化反应,反应完全后,有2个副产物,根据液相,用ph8的缓冲液:乙腈=95:5时,底物在5分钟出峰,产物在4分钟出峰,副产物在2.5分钟出峰,不懂怎么样分离纯化,这个物质可能是成了盐了,因为在这过程中我加入碳酸氢钠来做酰化反应的缚酸剂,产物和副产物易溶于水、乙醇、甲醇少量不溶解,真不懂该怎么办,我想上树脂,上了一下硅胶柱,氯仿:甲醇=5:5时,好像都出来了,真不懂该怎么办啊,如果上树脂的话,还有什么树脂可以选择的啊?请高手指点一下!!!不胜感激!

  • 抗体纯化方法详解:步骤、应用与注意事项

    [font=宋体]抗体纯化是生物医药领域的一项关键技术,它涉及到从复杂的混合物中提取出高纯度的抗体。纯化后的抗体具有更高的特异性和灵敏度,能够提高实验的准确性和重复性。本文将详细介绍抗体纯化的方法和步骤,包括亲和色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱等常用技术,并探讨纯化过程中的注意事项和应用实例。通过了解和掌握这些知识,研究人员可以更好地进行抗体相关的实验和研究。[/font][b][font=宋体]抗体纯化方法及步骤详解:[/font][/b][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、凝胶过滤层析法[/font][/b][font=宋体]凝胶过滤层析法的原理是基于抗体分子的不同大小,利用不同孔径的凝胶过滤介质将目标分子(抗体)与较大分子(如蛋白质等杂质)分离开来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的凝胶柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,较大分子无法通过凝胶柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体分子大小适中,可通过凝胶柱并被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液将目标抗体从凝胶柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]凝胶过滤层析法在医药研发外包服务中应用广泛,例如美迪西提供从小试到规模生产全程的蛋白分离纯化服务,并根据工艺的要求结合产品特点给客户定制适用的工艺和系统。此外,凝胶过滤层析法还被广泛应用于蛋白质等大分子物质非分离纯化、分子质量测定、脱盐等试验中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在使用凝胶过滤层析法时,需要注意以下几点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]正确选择凝胶类型和粒度:不同类型和粒度的凝胶具有不同的分离效果和分辨率,需要根据实验需求进行选择。[/font][font=宋体][font=宋体]优化层析条件:包括流速、缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度等,这些因素都会影响分离效果和分辨率。[/font][/font][font=宋体]防止柱床干涸:在分离过程中,要保持层析柱的湿润,避免柱床干涸,影响分离效果。[/font][font=宋体]注意样品性质:凝胶过滤层析法适用于相对分子质量较大的物质,对于小分子物质可能无法有效分离。同时,需要注意样品的溶解性、电荷等性质,以选择合适的凝胶和实验条件。[/font][font=宋体]检测和分析:在分离结束后,需要对分离得到的成分进行检测和分析,以确定分离效果和纯度。[/font][font=宋体]总之,凝胶过滤层析法是一种有效的分离和分析方法,需要注意实验条件的选择和操作方法的正确性,以保证实验结果的准确性和可靠性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]二、亲和层析法[/b][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac][b]亲和层析法[/b][/url]的原理是利用抗体分子与抗原之间的特异性结合来实现目标抗体的纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先包含特异性结合配体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的亲和层析柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]目标抗体与配体之间发生特异性结合。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]使用洗脱缓冲液将非特异结合的组分洗脱掉。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液将目标抗体从亲和层析柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]亲和层析法的应用范围广泛,例如在免疫分析中,可以利用抗体与抗原的特异性结合,通过亲和层析法分离和纯化抗体;在蛋白质组学研究中,可以利用蛋白质与配基之间的相互作用,分离和纯化特定的蛋白质;在药物筛选中,可以利用药物与靶点之间的相互作用,筛选出潜在的药物分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在使用亲和层析法时,需要注意以下几点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]正确选择配基:配基的选择对于亲和层析的效果至关重要,需要根据目标分子的特性和需要纯化的样品类型选择合适的配基。[/font][font=宋体][font=宋体]优化层析条件:包括流速、缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度等,这些因素都会影响分离效果和分辨率。[/font][/font][font=宋体]注意配基的结合力和选择性:亲和层析中配基与目标分子的结合力决定了分离效果和纯度,而选择性则决定了能否有效区分不同的目标分子。[/font][font=宋体]检测和分析:在分离结束后,需要对分离得到的成分进行检测和分析,以确定分离效果和纯度。[/font][font=宋体]注意层析过程中的稳定性:亲和层析过程中需要保持层析柱的稳定性,以避免层析柱的塌陷或堵塞等问题。[/font][font=宋体]总之,亲和层析法是一种非常有效的分离和分析方法,需要注意实验条件的选择和操作方法的正确性,以保证实验结果的准确性和可靠性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、离子交换层析法[/b][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-iec][b]离子交换层析法[/b][/url]的原理是利用目标抗体分子与离子交换柱中固定的离子之间的相互作用来实现纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的离子交换柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,使与固定离子相同电荷的分子无法通过离子交换柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体由于表面电荷不同,能够通过离子交换柱被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液改变[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]或盐浓度等条件,将目标抗体从离子交换柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]离子交换层析法的应用范围非常广泛,例如在蛋白质分离中,可以利用蛋白质所带电荷的不同,通过离子交换层析法将其分离;在核酸分离中,可以利用核酸所带电荷的不同,通过离子交换层析法将其分离;在多糖分离中,可以利用多糖所带电荷的不同,通过离子交换层析法将其分离。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在使用离子交换层析法时,需要注意以下几点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]正确选择离子交换剂:根据待分离的生物分子的电荷性质和所需分离的离子的性质,选择合适的离子交换剂。[/font][font=宋体][font=宋体]优化层析条件:包括流速、缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度等,这些因素都会影响分离效果和分辨率。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]注意控制洗脱液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度:洗脱液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度可以影响生物分子与离子交换剂的结合和解离,进而影响分离效果和纯度。[/font][/font][font=宋体]检测和分析:在分离结束后,需要对分离得到的成分进行检测和分析,以确定分离效果和纯度。[/font][font=宋体]注意层析过程中的稳定性:离子交换层析过程中需要保持层析柱的稳定性,以避免层析柱的塌陷或堵塞等问题。[/font][font=宋体]注意保护层析柱:离子交换层析过程中需要避免过度冲洗和压力过大等问题,以保护层析柱的结构和使用寿命。[/font][font=宋体]总之,离子交换层析法是一种非常有效的生物分子分离和纯化技术,需要注意实验条件的选择和操作方法的正确性,以保证实验结果的准确性和可靠性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]四、逆向相色谱法[/b][/font][font=宋体]逆向相色谱法的原理是利用目标抗体分子与逆向相色谱柱中固定的疏水基团之间的相互作用来实现纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的逆向相色谱柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,使疏水性较低的分子无法通过逆向相色谱柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体由于表面疏水性不同,能够通过逆向相色谱柱被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液改变溶剂极性等条件,将目标抗体从逆向相色谱柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]逆向色谱法的应用范围广泛,例如在蛋白质分离中,可以利用蛋白质在色谱柱上的吸附和洗脱过程,通过逆向色谱法将其分离;在多肽分离中,可以利用多肽在色谱柱上的吸附和洗脱过程,通过逆向色谱法将其分离;在核酸分离中,可以利用核酸在色谱柱上的吸附和洗脱过程,通过逆向色谱法将其分离。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在使用逆向色谱法时,需要注意以下几点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]正确选择色谱柱:根据待分离的生物分子的性质和所需分离的离子的性质,选择合适的色谱柱。[/font][font=宋体][font=宋体]优化层析条件:包括流速、缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度等,这些因素都会影响分离效果和分辨率。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]注意控制洗脱液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度:洗脱液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和离子强度可以影响生物分子与色谱柱的吸附和解离,进而影响分离效果和纯度。[/font][/font][font=宋体]检测和分析:在分离结束后,需要对分离得到的成分进行检测和分析,以确定分离效果和纯度。[/font][font=宋体]注意层析过程中的稳定性:逆向色谱过程中需要保持层析柱的稳定性,以避免层析柱的塌陷或堵塞等问题。[/font][font=宋体]注意保护色谱柱:逆向色谱过程中需要避免过度冲洗和压力过大等问题,以保护色谱柱的结构和使用寿命。[/font][font=宋体]注意样品性质:逆向色谱法适用于相对分子质量较大的物质,对于小分子物质可能无法有效分离。同时,需要注意样品的溶解性、电荷等性质,以选择合适的色谱柱和实验条件。[/font][font=宋体]总之,逆向色谱法是一种非常有效的生物分子分离和纯化技术,需要注意实验条件的选择和操作方法的正确性,以保证实验结果的准确性和可靠性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体纯化是一项关键技术,在抗体制备过程中十分重要。每种方法都有其特点和适用性,义翘神州可根据您的具体需求选择合适的抗体纯化方法,保证交付高质量、高纯度的纯化抗体。详情可以关注[/font][font=Calibri]:https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-purification[/font][/font]

  • Protein A/G纯化抗体的原理及常见问题解析

    [font=宋体][font=Calibri]ProteinA/G[/font][font=宋体]纯化技术是一种基于亲和层析的分离方法,它利用抗体与其百度文库定抗原之间的亲和力来实现纯化。 该技术的原理是将抗体固定在亲和树脂上,然后将混合物通过亲和树脂柱,使抗原与抗体结合,从而实现抗原的纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-purification]抗体纯化[/url]常见问题解析:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PROTEIN A [/font][font=宋体], [/font][font=Calibri]PROTEIN G [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]PROTEIN L [/font][font=宋体]对不同种属和抗体亚型的相对结合强度?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]首先根据不同的种属亚型参考[/font][font=宋体]“相对结合强度”表(如下图),[/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Protein G [/font][font=宋体]均结合抗体的重链部分,若存在 [/font][font=Calibri]Protein A [/font][font=宋体]及 [/font][font=Calibri]Protein G [/font][font=宋体]都有较强结合能力时, 更加推荐 [/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]。 [/font][font=Calibri]Protein A [/font][font=宋体]的洗脱条件([/font][font=Calibri]pH 3.5[/font][font=宋体]–[/font][font=Calibri]4.5[/font][font=宋体])较 [/font][font=Calibri]Protein G[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri] pH 3[/font][font=宋体])更加温和,利于对低 [/font][font=Calibri]pH [/font][font=宋体]敏感抗体的稳定性。 另外, [/font][font=Calibri]Protein A [/font][font=宋体]有耐碱清洗的 [/font][font=Calibri]PrismA[/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]SuRe [/font][font=宋体]配基可供选择,且载量更高。 尤其是纯化多个抗体,为了避免交叉污染,优先推荐耐碱清洗的填料,长久使用更经济。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Protein G Sepharose [/font][font=宋体]来源于链球菌, 为细胞表面的 [/font][font=Calibri]III [/font][font=宋体]型 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]受体。 可以广泛、更强地结合更多类型的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、 多克隆 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]及人 [/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]。同时, 重组表达的 [/font][font=Calibri]Protein G [/font][font=宋体]去除了 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端白蛋白结合结构域, 血清蛋白结合水平更低。 此外,[/font][font=Calibri]Protein G [/font][font=宋体]还可以和某些抗体的 [/font][font=Calibri]Fab [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]F (ab[/font][font=宋体]’[/font][font=Calibri])2 [/font][font=宋体]段结合。 但是,其工业化程度低于 [/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Protein L[/font][font=宋体]结合抗体的轻链可变区,适合抗体片段的纯化。同时[/font][font=Calibri]Protein L[/font][font=宋体]对于某些种属亚型有结合能力,可以作为[/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Protein G[/font][font=宋体]的有效的补充。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、不同类型的 [/font][font=Calibri]PROTEIN A [/font][font=宋体]配基,有什么差别,如何选择?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Nprotein A [/font][font=宋体]即为天然 [/font][font=Calibri](Native) Protein A[/font][font=宋体],来源于金黄色葡萄球菌。有[/font][font=Calibri]5 [/font][font=宋体]个结合结构域可以和 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]的 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]区有强的特异性结合。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Rprotein A Sepharose 4 FF[/font][font=宋体],为重组 [/font][font=Calibri]Protein A[/font][font=宋体],去除了天然蛋白中跟抗体结合不相关的细胞壁结合结构域,分子量从 [/font][font=Calibri]42 KD [/font][font=宋体]减少到 [/font][font=Calibri]34 KD[/font][font=宋体]。主要结合 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]区。经基因工程改造后,单点定向偶联于琼脂糖骨架上,降低空间位阻,增加了与 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]的结合能力,载量比 [/font][font=Calibri]nprotein A[/font][font=宋体]更高 ;同时重组的配基,在发酵和纯化过程中没有使用人源的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体],避免了人源 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]的污染风险。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]rmpProtein A[/font][font=宋体],多位点附着的技术,保证更低的重组[/font][font=Calibri]protein A[/font][font=宋体]配基的脱落。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]MabSelect [/font][font=宋体]为 [/font][font=Calibri]rProtein A [/font][font=宋体]配基,使用高流速琼脂糖凝胶基架 [/font][font=Calibri]( [/font][font=宋体]类似 [/font][font=Calibri]Capto[/font][font=宋体],但孔径更大[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]MabSelect Xtra(rProtein A [/font][font=宋体]配基[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],比 [/font][font=Calibri]MabSelect [/font][font=宋体]粒径小、载量更高,孔径更大。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]MabSelect SuRe [/font][font=宋体]偶联了耐碱的 [/font][font=Calibri]SuRe [/font][font=宋体]配基,耐受 [/font][font=Calibri]0.1~0.5 M NaOH[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]MabSelect SuRe LX [/font][font=宋体]相对于 [/font][font=Calibri]MabSelect SuRe[/font][font=宋体],增加了配基密度,载量提高[/font][font=Calibri]30%[/font][font=宋体]。 [/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、抗体片段的纯化填料,如何选择?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]不同配基结合特征如下[/font] [font=宋体]:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]rProtein A [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]PrismA [/font][font=宋体]配基可以结合抗体 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]区域以及重链可变区[/font][font=Calibri]VH3[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Protein G [/font][font=宋体]配基除了与 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]的 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]区域特异性结合,还可以和某些抗体的 [/font][font=Calibri]Fab [/font][font=宋体]段结合。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Protein L [/font][font=宋体]配基对于人 [/font][font=Calibri]kappa I, III [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]IV [/font][font=宋体]亚型以及小鼠的 [/font][font=Calibri]K1 [/font][font=宋体]轻链有很强的亲合力,结合位点在 [/font][font=Calibri]Kappa [/font][font=宋体]轻链的可变区。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]KappaSelect [/font][font=宋体]层析介质与人 [/font][font=Calibri]KappaFab ( [/font][font=宋体]恒定区 [/font][font=Calibri]) [/font][font=宋体]结合,以及[/font][font=Calibri]LambdaFabSelect [/font][font=宋体]层析介质与人 [/font][font=Calibri]LambdaFab( [/font][font=宋体]恒定区 [/font][font=Calibri]) [/font][font=宋体]结合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、纳米抗体 [/font][font=Calibri]VHH [/font][font=宋体]的纯化,选择什么填料?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]PrismA [/font][font=宋体]填料,配基是改造的耐碱配基 [/font][font=Calibri]PrismA[/font][font=宋体],保留了与[/font][font=Calibri]VH3 [/font][font=宋体]的结合能力,可以用于 [/font][font=Calibri]VHH [/font][font=宋体]的亲和捕获。耐 [/font][font=Calibri]1M NaOH [/font][font=宋体]和高载量,为首选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]rProtein A [/font][font=宋体]的配基填料,包括 [/font][font=Calibri]MabSelect[/font][font=宋体]、 [/font][font=Calibri]MabSelect Xtra [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]rProtein A[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]注意[/font] [font=宋体]:[/font] [font=Calibri]SuRe [/font][font=宋体]配基,如 [/font][font=Calibri]MabSelect SuRe [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]MabSelect SuRe LX [/font][font=宋体]不行。 [/font][font=Calibri]SuRe [/font][font=宋体]配基是一个同型四聚体配基,避免了不同配基结构域与抗体[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段亲和性的差异,也消除了对某些 [/font][font=Calibri]Fab [/font][font=宋体]段的亲和作用,不能用于 [/font][font=Calibri]Fab [/font][font=宋体]区样品结合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、普通的 [/font][font=Calibri]PROTEIN G [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]PROTEIN A SEPHAROSE [/font][font=宋体]填料如何清洗?可以重复使用吗?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]普通的[/font] [font=Calibri]Protein G [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]Protein A [/font][font=宋体]配基,不耐碱,清洗效果差,使用次数很有限。建议反向清洗:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于沉淀或变性的蛋白:用[/font] [font=Calibri]6M [/font][font=宋体]盐酸胍清洗 [/font][font=Calibri]2 [/font][font=宋体]个柱体积,立即用 [/font][font=Calibri]5 [/font][font=宋体]个柱体积的 [/font][font=Calibri]pH 7-8 [/font][font=宋体]结合缓冲液来清洗,反向冲洗,每次清洗时间不超过 [/font][font=Calibri]10min[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]对于去除疏水性的物质[/font] [font=Calibri]( [/font][font=宋体]如疏水性蛋白、脂蛋白、脂质 [/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]:使用非离子型去污剂,如 [/font][font=Calibri]0.1% Triton X-100[/font][font=宋体], [/font][font=Calibri]37 [/font][font=宋体]度孵育 [/font][font=Calibri]1 min[/font][font=宋体]。立即用至少 [/font][font=Calibri]5 [/font][font=宋体]个柱体积的无菌结合缓冲液清洗 ;或者 [/font][font=Calibri]70% [/font][font=宋体]乙醇浸泡[/font][font=Calibri]12 [/font][font=宋体]小时左右,然后立即用 [/font][font=Calibri]5 [/font][font=宋体]个柱体积的 [/font][font=Calibri]pH 7-8 [/font][font=宋体]结合缓冲液来清洗。注意 [/font][font=Calibri]70% [/font][font=宋体]乙醇处理时,粘稠故压力大,需要降低流速。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供瞬时转染[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞培养物的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview][b]重组抗体[/b][/url]、来自杂交瘤培养物的小鼠、大鼠和兔单克隆抗体以及来自动物血清的多克隆抗体。我们的抗体纯化服务涵盖人抗体、小鼠抗体、大鼠抗体、兔抗体、犬(狗)抗体和牛抗体的所有亚型和类别([/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体])。通常,我们的抗体纯化服务与抗体生产和细胞培养服务相结合。以下是我们的抗体纯化部分清单:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 具有单体纯度和内毒素控制的优质抗体纯化和精纯[/font][font=宋体][font=宋体]? 人、小鼠、大鼠、兔和犬[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体纯化服务[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 人和小鼠[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]抗体纯化服务[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 人和小鼠[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]抗体纯化服务[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 利用蛋白[/font][font=Calibri]A/G[/font][font=宋体]亲和树脂法的克隆抗体纯化[/font][/font][font=宋体]? 利用抗原亲和树脂的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-purification][b]多克隆抗体纯化[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-purification[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 中检所抗生素标准品不纯?

    大家有没有用过中检所的抗生素标准品的?如头孢氨苄、阿莫西林等,我正在用,结果用液质联用检测出两个色谱峰,质谱结果显示,这两个峰都是同一种物质,猜测标准品不纯,是同分异构体的混合物,大家有没有类似的遭遇?

  • 【分享】饮用水新标准 纯净水并非健康水

    长期以来,许多宁波市民都习惯了喝纯净水,不过7月1日将要实施的新修订的《生活饮用水卫生标准》,明确了纯净水并非健康水。宁波市卫生监督部门的专家告诉记者,按照新《标准》,在宁波许多街头、社区常见的所谓“活净水”也不符合直接饮用水的标准。作为生活用水的自来水,宁波自来水公司现有的设备能够达到新《标准》的各项指标要求。 “活净水”和自来水差不多 普通的自来水,经过一个过滤器后,就摇身变成了无需煮沸,可直接生饮,纯净、活氧的健康饮用水。这是宁波街头和一些社区内的“活净水”自动加水站的宣传。据厂方介绍,活净水比一般矿泉水要新鲜,氧气更充足,用户可以放心直接饮用。然而卫生监督部门的专家却给出了截然相反的观点。 宁波市卫生监督所副所长陈解华告诉记者,活净水绝对不是纯净水,按照饮用水卫生管理分类,活净水只能归到与自来水一样的生活饮用水一类。同时她表示,根据新《标准》,监管部门将不允许所谓的活净水上市供应。 活净水纯净水不是健康水 专家指出,目前,许多人都喜欢饮用桶装纯净水或人工矿物质水。新《标准》指出,健康好水应该没有污染,不含致病菌、重金属和有害化学物质;含有人体所需的天然矿物质和微量元素;生命活力没有退化,呈弱碱性,活性强等。目前,宁波市场上的纯净水太过“纯净”,所有的矿物质和微量元素都被滤去,反而对健康未必有利。而人工矿物质水,存在片面迎合了对少数几种矿物质的要求,没有考虑到矿物元素的均衡问题。 更重要的是,纯净水和人工矿物质水由于技术条件原因均呈酸性。新《标准》从根本上对水质提出要求,不仅确定了饮用水的水质“安全”标准,而且明确饮用水的酸碱度范围(pH值)在6.5-8.0间,是符合健康标准的。

  • 木糖醇对健康有何危害?

    什么是木糖醇  营养师宋新称:木糖醇是从白桦树和橡树等植物中提取出来的一种天然植物甜味剂,由于木糖醇不容易被微生物发酵产生酸性物质,所以能减少龋齿菌和齿垢的产生,对预防龋齿有一定的功效。木糖醇也会让人发胖  很多人从吃木糖醇口香糖开始,在心理上认为木糖醇热量低,所以在吃其他木糖醇食物的时候没有节制。但是实际上,木糖醇吃多了也会发胖。而且从理化性质来讲,木糖醇是偏凉的,它不被胃酶分解,直接进入肠道,吃多了对胃肠会有一定刺激,可能引起腹部不适、胀气、肠鸣。由于木糖醇在肠道内吸收率不到20%,容易在肠壁积累,易造成渗透性腹泻。  在欧美国家,含有木糖醇的食品,都会在标签上注明“过量摄取可能会导致腹泻”这样的消费提示。但在国内市场销售的食品,却鲜见这种标识。某知名口香糖生产商表示,其生产的木糖醇口香糖中“木糖醇含量较低,并不足以引起腹泻”,因此这类标识“没有必要”。尽管如此,营养师还是提醒说,以中国人的体质,一天摄入木糖醇的总量不能超过50克。光嚼嚼口香糖应该没什么问题,但如果吃大量的其他木糖醇食品,就需要注意用量了过量食用会使血脂升高  糖尿病患者由于体内的胰岛素分泌功能紊乱,不能食用过多的糖,就连少量的糖也可能引起不良后果。目前,我国有3000万左右的糖尿病患者,就是说,涉及3000万左右的家庭要慎重地选择饮食。这也使许多商家抓住了赚钱机会,大量生产无糖食品。于是,出现了越来越多的“适宜”糖尿病人服用的食品,比如超干啤酒、南瓜汁饮料、无糖奶粉、无糖饼干、无糖麦片、无糖口香糖、无糖糖果等等。  营养师说,糖尿病病人因不能食用精制的糖类,用木糖醇来做调味品是个不错的选择。但需要注意的是,木糖醇和葡萄糖一样,由碳、氢、氧三种物质组成,在人体内氧化后可释放出热能。木糖醇在代谢初期,可能不需要胰岛素参与,但在代谢后期,则需要胰岛素的促进。  进食木糖醇后,对正常人血糖升高的幅度和速度都低于葡萄糖和蔗糖,但糖尿病病人一旦摄入多了,会产生副作用,造成血中甘油三酯升高,引起冠状动脉粥样硬化,故糖尿病病人也不宜多食木糖醇。尤其对那些患有由胰岛素诱发的低血糖的人,木糖醇更是禁用的

  • 抗体纯化方法概览:四种策略及其优缺点详解

    [font=宋体]抗体是一类免疫蛋白,可识别并结合特定抗原,在生物研究以及临床应用中,纯化得到高质量的抗体十分重要。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]? 凝胶过滤层析法[/b][/font][font=宋体]凝胶过滤层析法的原理是基于抗体分子的不同大小,利用不同孔径的凝胶过滤介质将目标分子(抗体)与较大分子(如蛋白质等杂质)分离开来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的凝胶柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,较大分子无法通过凝胶柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体分子大小适中,可通过凝胶柱并被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液将目标抗体从凝胶柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]? 亲和层析法[/b][/font][font=宋体]亲和层析法的原理是利用抗体分子与抗原之间的特异性结合来实现目标抗体的纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先包含特异性结合配体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的亲和层析柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]目标抗体与配体之间发生特异性结合。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]使用洗脱缓冲液将非特异结合的组分洗脱掉。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液将目标抗体从亲和层析柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]? 离子交换层析法[/b][/font][font=宋体]离子交换层析法的原理是利用目标抗体分子与离子交换柱中固定的离子之间的相互作用来实现纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的离子交换柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,使与固定离子相同电荷的分子无法通过离子交换柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体由于表面电荷不同,能够通过离子交换柱被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液改变[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]或盐浓度等条件,将目标抗体从离子交换柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]? 逆向相色谱法[/b][/font][font=宋体]逆向相色谱法的原理是利用目标抗体分子与逆向相色谱柱中固定的疏水基团之间的相互作用来实现纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体操作步骤如下:[/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]将含有目标抗体的混合物加入到预先平衡好的逆向相色谱柱中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]使用缓冲液进行洗脱,使疏水性较低的分子无法通过逆向相色谱柱而流出。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]目标抗体由于表面疏水性不同,能够通过逆向相色谱柱被保留下来。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]最后使用洗脱缓冲液改变溶剂极性等条件,将目标抗体从逆向相色谱柱中洗脱出来,得到纯化的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体纯化方法的优缺点[/b][/font][font=宋体]凝胶过滤层析法:优点:[/font][font=宋体]简单易行,不需要特殊设备,适用于各种规模的实验室 缺点:[/font][font=宋体]分离效率低,只能实现较为粗略的纯化[/font][font=宋体]亲和层析法 优点:[/font][font=宋体]纯度高,效率高 缺点:[/font][font=宋体]需要特定的亲和试剂和配体,成本较高[/font][font=宋体]离子交换层析法 优点:[/font][font=宋体]选择性高,适用性强 缺点:[/font][font=宋体]需要根据不同抗体进行条件优化,操作较复杂[/font][font=宋体]逆向相色谱法 优点:[/font][font=宋体]选择性高,灵活性强 缺点:[/font][font=宋体]需要特定设备支持,操作条件较为复杂[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体纯化是一项关键技术,在抗体制备过程中十分重要。每种方法都有其特点和适用性,义翘神州可根据您的具体需求选择合适的抗体纯化方法,保证交付高质量、高纯度的纯化抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-purification[/font][/font]

  • 【资料】什么是白藜芦醇?白藜芦醇对人体有什么作用?

    什么是白藜芦醇?白黎芦醇,化学名称为芪三酚,分子式C14H12O3,分子量228.25,产生于葡萄叶表皮和浆果果皮中,是植株对真菌病害感染反应的结果。它以游离态(顺式-、反式-)和糖苷结合态(顺式-、反式-)两种形式存在,且均具有抗氧化效能,是葡萄中的一种重要的植物抗毒素。白黎芦醇能够阻止低密度脂蛋白的氧化,因而具有潜在的防心血管疾病、防癌、抗病毒及免疫调节作用。白藜芦醇对人体有什么作用?作为葡萄酒的一种功能性成分,白藜芦醇的作用主要表现为它的抗氧化特性。具体来说,白藜芦醇对人体具有以下重要作用:1.抗菌作用Jeandert 和Sbaghi.等的研究表明,葡萄受到葡萄霜霉菌侵染后,离坏死果实较近且没有受到侵染的部位,白藜芦醇的含量很高,能有效地抑制坏死区的扩展。2.抗癌、抗诱变作用1997年1月,美国芝加哥伊利诺斯大学药学院的 John Pezzuto教授领导的研究小组在著名的美国《科学》杂志上,发表了题为《葡萄的天然产物白藜芦醇的抗癌活性》的论文,引起医学科学界的轰动。论文证明白藜芦醇能有效抑制与癌症各过程相关的细胞活动,也就是说,在癌症发生的起始、增进和扩展三个主要阶段,白藜芦醇都有防癌活性,并对癌症发生的三个阶段全部抑制。上述的研究论文还指出,在桑葚、花生、葡萄等72种植物中,发现有白黎芦醇,其中尤以葡萄中含量高,特别是葡萄果皮和红葡萄酒中含量最多。据此,美国研究癌症的专家已经向人们提出防癌新建议:多吃葡萄;吃葡萄不吐葡萄皮。并且认为,通常的葡萄酒饮酒量一般已可达到白黎芦醇的有效量。此外,白藜芦醇还具有防治冠心病、高血脂症、抗氧化、扫除自由基、抗血栓、抗炎症和抗过敏等作用。

  • 牛奶中糠氨酸的检测

    牛奶中糠氨酸的检测

    牛奶中糠氨酸的检测1 适用范围适用于原料乳和液态奶制品中糠氨酸的检测。2 样品准备/提取称取2.0 g样品,精确到0.01 g,置于10 mL水解管*中;加入6 mL10.6 mol/L的HCl;110℃水解24 h;3SPE柱净化——ProElut C18 500 mg/6mL(Cat.#63105) (1)活 化: 依次加入6 mL甲醇、10 mL水,流出液弃去; (2)上 样: 将0.5 mL水解液加入柱中,流出液弃去; (4)洗 脱: 3 mL 3.0 mol/LHCl洗脱;收集流出液并定容至3 mL;过微孔滤膜,供HPLC分析。 4 分析条件 色谱柱: Diamonsil C18(2),250 mm×4.6 mm,5μm(Cat.#99603) 流 速: 1.0 mL/min 检测器:* UV 280 nm 柱 温: 40℃ 进样量: 20 μL 流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液 B:甲醇 梯度 T/时间 0 20 20.1 27 27.1 37 [

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