去垢剂

[size=4][b] 二恶烷，有机化合物，别名二氧六环、1，4-二氧己环，无色液体，稍有香味。属微毒类，对皮肤、眼部和呼吸系统有刺激性，并且可能对肝、肾和神经系统造成损害，急性中毒时可能导致死亡。主要用作溶剂、乳化剂、去垢剂等。[/b]别 名 二氧六环；1，4-二氧己环 [/size][b]　　分子式 C4H8O2； [/b][b]　　外观与性状 ,无色液体。稍有香味 [/b][b]　　分子量 88.11 蒸汽压 5.33kPa/25.2℃ 闪点：12℃ [/b][b]　　熔 点 11.8℃ 沸点：101.3℃ 溶解性 与水混溶，可混溶于多数有机溶剂 [/b][b]　　密 度 相对密度(水=1)1.04；相对密度(空气=1)3.03 稳定性 稳定 [/b][b]　　危险标记 7(中闪点易燃液体) 主要用途 和作溶剂、乳化剂、去垢剂[/b]

牙膏的历史牙膏问世前，人们用牙粉刷牙。牙粉是碳酸钙和肥皂粉的混合物，其功能只是保持牙齿清洁，除却污渍。牙粉pH值高，会引起口腔组织发炎。二战以后，有治疗作用的牙膏才纷纷上市。尤以合成去垢剂月桂酰肌氨酸钠代替肥皂的牙膏深受大众青睐。这种清洗剂不仅能明显减少口腔炎症，还使牙膏气味清香，更有抑制引起蛀牙的菌斑酸的作用。

实验中所使用的玻璃仪器及塑料器皿清洁与否，直接影响实验结果，往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。因此，实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作，是做好实验的前提及实验成败的关键之一。 1．洗涤液的种类及配制 （1）0.5%去垢剂溶液（常用洗涤液）。 （2）铬酸洗液[又称重铬酸钾（或钠）——浓硫酸洗涤液，简称洗液]广泛用于玻璃仪器的洗涤。其配制方法如下： ①称取5g重铬酸钾(或钠)粉末放入250ml烧杯中，加5ml水，尽量使其溶解。然后边搅拌，边缓缓注入浓H2SO4l00ml，待洗液温度冷却至40℃以下，将其转移到具玻塞的细颈干燥的试剂瓶内贮存备用。 ②称取10g重铬酸钾粉末置于500ml烧杯中，加水20ml，尽量使其溶解。然后慢慢注入浓H2SO4180ml，随加随搅拌。冷却后贮于具玻塞的细颈试剂瓶中备用。 ③量取100ml工业硫酸置于250ml烧杯中，小心加热，慢慢加5g重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后，冷却并贮于具玻塞的试剂瓶中备用。 （3）浓HCl（工业用）常用于洗去水垢或某些无机盐沉淀。 （4）浓HNO3（常用于洗涤除去金属离子）。 （5）1molL-1KOH溶液。 （6）8molL-1尿素洗涤液（PH1.0）适用于洗涤盛蛋白质溶液及血样的器皿。 （7）10-3molL-1EDTA溶液用于除去塑料容器内壁污染的金属离子。 （8）5%—10%磷酸三钠（Na3PO412H2O）溶液（用于洗涤油污物）。 （9）氢氧化钾（KOH）的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠（NaOH）溶液，适用于清除容器内壁污垢，但这两种强碱性洗涤液对玻璃仪器的侵蚀性很强，故洗涤时间不宜过长，使用时应小心慎重。 （10）有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗脱油漆类污垢。 2．玻璃仪器的清洗 （1）初用玻璃仪器的洗涤 新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用去垢剂（0.5%水溶液）或肥皂水洗刷，再用自来水洗净。然后浸泡1%—2%HCl溶液中过液，次日取出用自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水漂洗数次，置烘箱内烘干或倒置晾干备用。 （2）使用过的玻璃仪器的洗涤 ①一般玻璃仪器洗涤 许多污染物（包括有机物及金属离子等）易粘附于玻璃容器的内壁上，故每次使用均须及时清洗。通常情况下先用自来水冲洗 至无污物，再用去垢剂洗涤或浸泡于0.5%去垢剂水溶液中，将器皿内外（特别是内壁）仔细刷洗后，用自来水充分洗净，最后用蒸馏水漂洗数次，置烘箱（或微波炉）烘干或倒置在清洁处晾干备用。凡洗净的玻璃器皿，其壁上不沾有水珠，否则表示尚未洗净，应按上述方法重新洗涤。量具玻璃仪器不能烘烤，只能晾干或风干。 对于进行高灵敏度的分析及检测实验所用的器皿，除用上述方法清洗外，还需采用其他特殊洗涤方法彻底清除污染物，使器皿洗得十分洁净是非常必要的。一般是把玻璃器皿浸泡于铬酸洗液中4—6h或过夜，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，烘干或晾干备用。通过洗液处理的玻璃器皿，在其器壁上的有机污物会被完全清除。如有必要还可用浓HNO3洗涤及处理玻璃器皿，最后用双蒸馏水充分漂洗，这样将使器壁上污染的金属离子得以清除。 具有传染性样品的容器，如病毒、传染病患者的血清等沾污的容器，应先进行消毒处理后再进行清洗。盛过毒物的容器，特别是剧毒药品和放射性同位素物质的容器，必须经过专门处理，确知没有残余毒物或放射性存在方可进行清洗。 ②移液管（吸量管）的洗涤 移液管每次使用后须及时用流水冲洗或浸泡于冷水中，特别是吸取粘滞性较大的液体（全血、血浆、血清等）后应立即用流水充分冲洗，以免物质干涸和堵塞移液管。通常使用过的移液管经自来水冲洗后，可浸泡于0.5%去垢剂溶液中或铬酸洗液中过夜（不少于4h），然后分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干备用。 ③玻璃比色皿和石英比色皿的清洗 比色皿使用后应立即用蒸馏水充分冲洗，倒置在清洁处晾干备用。所有比色皿均可用0.5%去垢剂溶液洗涤，必须用脱脂棉小心地清洗，然后用大量蒸馏水充分漂洗干净，倒置晾干。但不能用氢氧化钾的乙醇溶液及其他强碱洗涤液清洗比色皿，因这样导致比色皿的严重腐蚀。 3．塑料器皿的洗涤 聚乙烯塑料制品容器在生物化学实验室中的应用与日俱增，因此塑料器皿的清洗也是非常重要的。新购买的塑料器皿一般先用自来水清洗后，应以8molL-1尿素溶液（PH1.0）洗涤，再用蒸馏水漂洗。随后用1molL-1KOH溶液洗涤，再用蒸馏水漂洗。然后用10-3molL-1EDTA溶液洗涤，以除去污染的金属离子，最后用双蒸馏水充分漂洗，倒置晾干备用。经过上述洗涤步骤处的器皿，每次使用后可以0.5%去垢剂溶液洗涤，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干后即可使用。如果必要也可按碱→尿素→EDTA洗涤顺序处理，以除去器皿上的污染物。 多数塑料器皿可在烘箱中干燥，但温度不宜过高，硝酸纤维制品离心管不能置烘箱中干燥，因硝酸纤维是一种易爆物。

科学家发现了一种神秘的物理力 　　据西班牙Autonoma De Barcelona大学报道，该大学的物理系与英国伦敦帝国理工学院化学系的科学家通过长期深入的研究，他们发现了一种神秘力的源泉。 　　自上世纪70年代以来，科学家一直试图了解二个带有不同静电荷的分子，例如DNA或其它生物大分子，当它们在溶液介质中非常靠近时产生排斥力的原因。Autonoma De Barcelona大学的Jordi Faraudo 和伦敦帝国理工学院的Fernando Bresme通过研究发现，这种排斥力就是水合力。 　　在精微水平上，水分子通常受到电场指示方向上的轻微吸引。然而，当水分子接触到产生这种微约电场的表面，譬如在许多去垢剂中存在的化合物时，科学家发现事态就发生了全然的变化：水分子立即显示出强有力的能力，将自己组织成一种复杂结构，其排列可消除这种电场效应，并同时将其逆转。 　　最近，科学家发现这种非正常的特性即是当水被某些带电分子，例如DNA或其它生物化合物围绕时，以及去垢剂中生成薄膜时发生水合作用的根源。这一发现发表在今天出版的一期“物理评论通报”（Physical Review Letters）上。 　　水是绝大多数物理，化学和生物过程赖以发生的溶剂。因此，为了能了解这些过程，掌握溶于水的分子相互间的作用实质是至关重要的。其中两种最重要的过程便是物质吸附到细胞膜上和蛋白质的隐退。这两种过程都是生物医学研究的基础，因为设计新药时相当一部份过程均是基于对物质如何穿过细胞膜而进入细胞的了解。这些新药通常都是设计出的蛋白质，用来预防或增强其它物质的作用。在这种情况下，精确地掌握蛋白质的折叠是极为重要的，因为当蛋白质折叠时它们呈现出何种形态将影响到它们如何有效地发挥作用。 　　物质溶于水时相互粘附在一起，充分了解存在于它们之间的力量的特性对化学工业也是十分有用的，特别是涉及需要使用稳定胶状悬浮液的机制，例如用来生产油漆，化妆品，和诸如生产酸奶，蛋黄酱等食品时，掌握这种力的特性就成为生产过程的关键。

[font=宋体][font=宋体]跨膜蛋白具有多种生理功能，包括蛋白连接、识别、转运、锚定和转导等，其功能的异常与诸多疾病相关。膜蛋白是重要的药物靶点，据统计，约[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体]药物的靶向分子为膜蛋白。然而，由于表达量低、体外不溶、纯化不稳定、难保持天然构象等问题的存在，限制了跨膜蛋白在药物开发方面的应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州聚焦于多次跨膜蛋白产品的开发，成功搭建了三大技术平台，为药物早期研发提供重要的原材料。目前产品包括四次跨膜蛋白[/font][font=Calibri]Claudin-6[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Claudin-9[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Claudin-18.1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Claudin-18.2[/font][font=宋体]，七次跨膜蛋白[/font][font=Calibri]GPRC5D[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CXCR4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SSTR2[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三大跨膜蛋白研发技术平台一览：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台：[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台能够将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面，产生非常适合免疫和抗体筛选的全长跨膜蛋白。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]去垢剂技术平台：去垢剂技术平台利用传统的膜蛋白提取方法[/font][font=宋体]——去垢剂制备较纯的膜蛋白产品，满足药物早期筛选的需求。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台：[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性，制备出稳定的产品，用于免疫和抗体筛选等场景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]下面是关于跨膜蛋白开发常见问题解答（[/font][font=Calibri]FAQs[/font][font=宋体]）：[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①如何选择膜蛋白开发平台？[/font][font=宋体]不同膜蛋白平台具有不同的优势和劣势，应根据下游应用、成本、周期等因素进行考量。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]分析是否可以表征[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]形式膜蛋白的纯度？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]方法可用于检测产品溶液中[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]颗粒的大小和均一程度，而[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台产生的蛋白除目标蛋白外还包括其他内源性的蛋白，故无法表征目标蛋白的纯度；由于[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]产品为混合物，目前对[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]产品的检测主要以活性检测为主，纯度仅作为一项参考指标。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③我想购买膜蛋白产品做免疫和抗体筛选，应该怎么挑选？[/font][font=宋体][font=宋体]目前，我们的[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个平台的产品各有特点，客户可以按照实际情况进行选择。[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台产品是一个混合物，与细胞免疫相比靶标蛋白的丰度有所提高，在没有其他平台的产品时可以用于免疫和抗体筛选。由于[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]平台的产品存在去垢剂，因此，需要考虑去垢剂对于免疫动物的毒害和免疫过程中蛋白变性的风险。比较而言，[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台的产品既拥有较高的靶蛋白丰度，又能维持好的天然构象，特别推荐用于动物免疫和抗体筛选实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/multi-pass-transmembrane-protein]跨膜蛋白[/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/multi-pass-transmembrane-protein[/font][/font]

双向电泳篇 1. 重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？ 一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电泳。 2. 为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后会减少，暴露出了胶条的背面？ 这是因为 BioRad 的电泳槽有个盖子。为了固定电泳槽中的胶条，这个盖子上设计了对应的突起，以便压住胶条。由于虹吸作用，这个突起会导引矿物油到相邻的空电泳槽，从而降低有胶条的电泳槽中的矿物油液面。如果由此把胶条暴露在空气中，那对等电聚焦的影响将是毁灭性的。为了防止这个现象的发生，可以在相邻的空电泳槽里，也加入适量（ 80 ％满）的矿物油。 3. 跑第一向时，为什么要设定一个电流的最大值电压(50 μ A/ 胶)？ 电流的平方和功率成正比。电流增大，功率增大，放出的热量也随之增大，就会导致胶条的温度增加。当温度超过 30 摄氏度时，缓冲液里的尿素就容易解离，产生一些极性分子，从而对等电聚焦产生影响。 4. 跑第一向时，为什么刚开始的电压比较低，而后逐渐增高？ 刚开始时，体系内的带电小分子比较多（比如无机盐和双极性分子）。所以在这个阶段，电流主要是由这些小分子的移动所产生的。由于这些分子质量小，移动他们不需要很高的电压。当这些小分子移动到他们的目的地时（无机盐移动到极性相反的电极；两性分子移动到对应的 pH 条带），体系内的蛋白质才开始肩负起运载电流的任务，逐渐向所对应的 pH 区域移动。 5. 跑第一向时，为什么会产生一条蓝色的条带，并逐渐向酸性端移动？ 蓝色条带是缓冲液中痕量的溴酚蓝被聚焦所产生的。溴酚蓝也是 pH 指示剂，当它移动到酸性区时（ pH4 ），颜色会变成黄色。溴酚蓝的这个移动过程大体上发生在极性小分子的聚焦之后，蛋白质大分子聚焦之前。 6. 跑第一向时，为什么电压总达不到预定值？ 当上样量比较大时或体系内盐分比较多时，聚焦的电压有可能达不到所设定的数值。 7. 跑第一向时，在电压达到预定值后，电流为什么会降低？ 当上样量比较少时，所有蛋白在较短的时间内就移动到所对应的 pH 值区域值，从而变成中性分子。这样，体系的电阻越来越大，在恒定的电压下，电流就会越来越小。 8. 跑第一向时，为什么在两个电极丝附近有气泡产生？ 等电聚焦完成后，所有的蛋白质都移动到了相应的 pI 值区域，而成为中心分子。这是加在体系上的电压就开始电解水分子，在阳极产生氧气，在阴极产生氢气。 9. 重泡胀缓冲液(rehydration buffer)中的硫脲的作用是什么，双极性分子的作用是什么？ 硫脲的作用是增加蛋白质的溶解性，特别是碱性蛋白的溶解性。双极性分子的作用也是增加蛋白质的溶解性。当蛋白移动到相应的 pH 值后，就变成了中性分子。而不带电荷的蛋白质分子容易聚集，从而降低其在随后的二向胶时的迁移效率，可能会造成竖的脱尾。而硫脲和双极性小分子则会鉴定中性蛋白质之间的相互作用，防止它们的聚集。 10. 怎样估计 2D 胶上蛋白质点的分子量和 pI 值？ 可以用 BioRad 生产的 2D 胶标准蛋白来校准。也可以用体系内已知蛋白来做比对。 11. 为什么 2D 胶上的蛋白点有横的和竖的脱尾？ 横的脱尾可能是： 1 ）一向等电聚焦不完全； 2 ）某些蛋白质本身的原因（糖蛋白）； 3 ）蛋白的丰度太高。竖的脱尾是因为跑二向时，蛋白的溶解度不好。 12. 什么成分会影响 2D 胶的效果？ 核酸，盐，去垢剂等等。 13. 2D 胶的上样量应该在什么范围？ 上样量和样品有关。样品内蛋白种类多的上样量要大些，这样每个点才有足够的量被检测到。一般的全细胞裂解体系，上样量大概在 100 微克（银染）到 500 微克（考染）之间。 14. 我的蛋白质浓度很低，应该用什么方法来浓缩？ 蛋白质的浓缩有很多方法。大致有超滤法，沉淀法和透析法。超滤比较温和，对蛋白质不会有修饰和改变，蛋白的种类一般不会有丢失。它的缺点是总样品的量可能会减少（被膜所吸附）。另外超滤对样品的要求比较高。甘油，去垢剂都会堵塞滤膜，影响超滤的效果。沉淀法比较快速，容易操作，对盐，甘油，去垢剂的耐受性好。缺点是可能会有部分种类的蛋白没有被沉淀下来（丢失）。沉淀法中，又以 TCA 法最为普遍使用。使用 TCA 法时，一定要用冷的纯丙酮清洗蛋白沉淀两次，去处残留的 TCA 和其他沉淀下来的杂质。透析法只使用于量比较大的样品，量小时，操作困难。 透析法可以和超滤法联用。先把样品透析到一个比较干净的环境（ 不含盐，甘油，去垢剂或其它杂质，比如碳酸氢氨溶液），然后再进行超滤。

[b][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白定义：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白是两类重要的蛋白质，它们在细胞分子水平上起着重要的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]整合蛋白，也称为内在蛋白或跨膜蛋白，部分或全部镶嵌在细胞膜中或内外两侧，以非极性氨基酸与脂双分子层的非极性疏水区相互作用而结合在质膜上。它们是生物膜的基本结构成分，许多具重要生理功能的膜蛋白均属整合蛋白，如膜结合的酶类、载体蛋白、通道蛋白、膜受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]跨膜蛋白，是可以跨越细胞膜的蛋白，它在细胞的信号传递系统中担当着重要的角色。跨膜蛋白在结构上可以分为单次跨膜、多次跨膜、多亚基跨膜等，它们具有能够跨越细胞膜的能力。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白在位置、结构和功能上存在显著的差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①位置：整合蛋白主要存在于细胞质内，细胞核或其他非细胞膜结构中，它们容易在细胞中自由移动。而跨膜蛋白则嵌入细胞膜中，一部分位于细胞膜的胞外侧，另一部分位于细胞膜的胞内侧，形成了一个穿过细胞膜的通道。[/font][font=宋体][font=宋体]②结构：整合蛋白的结构通常由两个独立的部分组成，一个是靠近细胞膜的膜结合区域（[/font][font=Calibri]TM[/font][font=宋体]），另一个是靠近细胞骨架的非膜结合区域（[/font][font=Calibri]N-TM[/font][font=宋体]）。当接受到外界的信号时，整合蛋白的[/font][font=Calibri]TM[/font][font=宋体]区域会被激活，把来自外界的信号转化为细胞内可以识别的信号，直接参与细胞信号传导系统中。[/font][/font][font=宋体]③功能：整合蛋白主要是用来从外界传达信号到细胞内，充当细胞与外界信号的桥梁。而跨膜蛋白则在细胞的信号传递系统中担当着重要的角色。[/font][font=宋体]总的来说，整合蛋白和跨膜蛋白在位置、结构和功能上存在显著的差异，这些差异使得它们在生物体中扮演着不同的角色。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白表达与制备服务[/b][/url]，制备流程图：基因合成[/font][font=宋体]→载体构建→细胞转化[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]转染→蛋白表达→细胞收集→细胞破碎→膜脂提取→膜脂增溶→蛋白纯化→质量检测，同时义翘拥有[/font][/font][b][font=宋体]三大跨膜蛋白制备平台[/font][/b][font=宋体]，可以为客户提供全面的多次跨膜蛋白产品和服务。同时，为基础研究和药物研发提供更加优质的原材料。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达，类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜，形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒（直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米），不含病毒核酸，不能进行自主复制，生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台，它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面，这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构，同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域，跨膜蛋白与膜的结合非常紧密，需要用去垢剂（[/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体]）才能从膜上洗涤下来，[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子，疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域，亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础，当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体]，临界胶束浓度）时会形成微团，增溶后，去垢剂将蛋白周围的磷脂置换，从而实现收集目标膜蛋白的目的，后续再进行蛋白纯化，最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台，利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定，与天然的生物膜非常相似，使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式，一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物（[/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]）组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台，如下图（左）所示，它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白，使其变为可溶性蛋白，组装完成的蛋白样品很稳定，更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白（[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]）的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台（下图右），它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来，然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例，可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台，利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性，制备出稳定的产品，满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]跨膜蛋白按功能可以分为多种类型，其中包括[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]蛋白偶联受体（[/font][font=Calibri]G[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]）、离子通道、转运蛋白以及其他类型受体等。这些蛋白在细胞内发挥着不同的作用，例如在信号传递、物质转运和细胞通讯等方面。[/font][font=Calibri]G[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]是一类广泛存在于生物体中的跨膜蛋白，它们可以识别并与外界分子相互作用，从而引发各种细胞内信号，因此它们被用作药物筛选的靶标。离子通道则可以调节细胞内外的离子浓度，如钠离子、钾离子、钙离子等，这对于细胞的正常运作至关重要。转运蛋白则可以协助物质的跨膜运输，对生物体代谢进行调控。这些跨膜蛋白虽然功能不同，但是在生物体中发挥着各自独特和不可或缺的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一型跨膜蛋白和二型跨膜蛋白是两种常见的膜蛋白类型，它们在结构和功能上存在差异。下面是它们的简要对比图解：[/font][font=宋体]一型跨膜蛋白：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]膜外 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]区域 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]跨膜 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]螺旋 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]膜内 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]区域 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体][font=宋体]一型跨膜蛋白具有一个跨越细胞膜的[/font] [font=宋体]α 螺旋结构。它包括一个在细胞外区域的 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端、一个跨膜螺旋结构和一个在细胞内区域的 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端。这种结构使得一型跨膜蛋白在跨越细胞膜时保持稳定，并具有信号传递和细胞识别等重要功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二型跨膜蛋白：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]膜外 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]区域 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]跨膜 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]区域 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]膜内 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]区域 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]胞质 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]| [/font][font=宋体]尾部 [/font][font=Calibri]|[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]———————[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]二型跨膜蛋白同样具有跨越细胞膜的结构，但它包括一个在细胞内区域的[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端和一个在胞质尾部的结构。二型跨膜蛋白通常通过细胞内区域与一些信号转导途径进行相互作用，并发挥重要的调节和调控功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一型跨膜蛋白通过单一的跨膜螺旋结构连接细胞内外区域，而二型跨膜蛋白则包含额外的胞质尾部。这些结构差异导致两种跨膜蛋白在细胞中的功能和相互作用方式上存在差异。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白表达和制备平台[/b][/url]，包含[/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台：它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面，这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构，同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②去垢剂技术平台：由于存在疏水结构域，跨膜蛋白与膜的结合非常紧密，需要用去垢剂（[/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体]）才能从膜上洗涤下来，[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子，疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域，亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础，当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体]，临界胶束浓度）时会形成微团，增溶后，去垢剂将蛋白周围的磷脂置换，从而实现收集目标膜蛋白的目的，后续再进行蛋白纯化，最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台，利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台：义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台，利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性，制备出稳定的产品，满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font]

[font=宋体]跨膜蛋白是生物体内广泛存在的一类蛋白质，它们在细胞膜上以不同的方式与其相互作用，从而发挥各种生物学功能。根据不同的结构和功能，[/font][b][font=宋体]跨膜蛋白可以分为三种类型：通道型跨膜蛋白、受体型跨膜蛋白和泵型跨膜蛋白。[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通道型跨膜蛋白是跨膜蛋白中最为简单的类型，它们主要的功能是在细胞膜上形成一些具有选择性通透性的孔道，使得离子和小分子物质能够通过。通道型跨膜蛋白具有多个跨膜域，通常由[/font] [font=宋体]α 螺旋和 β 折叠两种二级结构组成。α 螺旋通道如 [/font][font=Calibri]K+ [/font][font=宋体]通道能够容纳阳离子，β 折叠如离子泵[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase [/font][font=宋体]能够承载各种离子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]受体型跨膜蛋白是一类比较复杂的蛋白质，它们能够接受信号分子的结合，从而调节细胞内的生物学路径。受体型跨膜蛋白通常由单个跨膜域和两个不同构的端基组成，其中一个端基是细胞外的受体结构域，能够特异性地与信号分子结合；另外一个端基是细胞内的调节结构域，能够将受体活性传递到细胞内部。受体型跨膜蛋白具有多种作用方式，如酪氨酸激酶受体，转录因子受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]泵型跨膜蛋白是一类能够通过能量输入来驱动物质运输的蛋白质。它们能够将离子或者小分子物质从低浓度区域转运到高浓度区域，从而维持细胞内的化学平衡和稳态。泵型跨膜蛋白一般由多个跨膜域组成，并能借助外源性能量如[/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]进行运输。常见的泵型跨膜蛋白有[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase, H+/K+-ATPase[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供跨膜蛋白制备平台，包括：[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][font=Calibri]/Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达，类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜，形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒（直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米），不含病毒核酸，不能进行自主复制，生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台，它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面，这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构，同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]利用[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台制备跨膜蛋白具有以下优势：[/font][/font][font=宋体]? 全长跨膜蛋白，保持完整的天然构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测、抗体筛选等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州搭建了基于[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]表达系统的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]virus-like particle[/font][font=宋体]）技术平台，能够将目的膜蛋白完整展示在[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]表面，使其能够像普通蛋白一样进行检测，义翘神州目前可以为客户提供膜蛋白定制服务，助力药物研发进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域，跨膜蛋白与膜的结合非常紧密，需要用去垢剂（[/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体]）才能从膜上洗涤下来，[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子，疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域，亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础，当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体]，临界胶束浓度）时会形成微团，增溶后，去垢剂将蛋白周围的磷脂置换，从而实现收集目标膜蛋白的目的，后续再进行蛋白纯化，最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台，利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体]去垢剂技术平台的优势：[/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体]? 胶束为膜蛋白疏水基团提供保护并稳定构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测等[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定，与天然的生物膜非常相似，使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式，一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物（[/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]）组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台，如下图（左）所示，它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白，使其变为可溶性蛋白，组装完成的蛋白样品很稳定，更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白（[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]）的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台（下图右），它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来，然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例，可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台，利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性，制备出稳定的产品，满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台的优势：[/font][/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]共聚物包裹的膜蛋白稳定性更好，有助于更好地研究膜蛋白的结构和功能[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测及细胞实验等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体][font=宋体]跨膜蛋白按功能可以分为多种类型，其中包括[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]蛋白偶联受体（[/font][font=Calibri]G[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]）、离子通道、转运蛋白以及其他类型受体等。这些蛋白在细胞内发挥着不同的作用，例如在信号传递、物质转运和细胞通讯等方面。[/font][font=Calibri]G[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]是一类广泛存在于生物体中的跨膜蛋白，它们可以识别并与外界分子相互作用，从而引发各种细胞内信号，因此它们被用作药物筛选的靶标。离子通道则可以调节细胞内外的离子浓度，如钠离子、钾离子、钙离子等，这对于细胞的正常运作至关重要。转运蛋白则可以协助物质的跨膜运输，对生物体代谢进行调控。这些跨膜蛋白虽然功能不同，但是在生物体中发挥着各自独特和不可或缺的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]跨膜蛋白表达与制备[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多次跨膜蛋白由于其复杂的结构、具有多个疏水跨膜区以及在宿主细胞中表达水平极低等特点，使得其制备具有一定难度。需要采用合适的表达载体、宿主细胞、培养条件和纯化工艺等方法，来优化表达和纯化过程，如添加辅助蛋白，利用[/font][font=Calibri]Flag[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]Strep[/font][font=宋体]等填料进行纯化等方法，最大程度地减少水解和构象异常等问题的发生，从而获得高效、高纯度、正确构象的跨膜蛋白产物。[/font][/font][font=宋体][b]跨膜蛋白制备流程：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]基因合成[/font][font=宋体]→载体构建→细胞转化[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]转染→蛋白表达→细胞收集→细胞破碎→膜纸提取→膜纸增溶→蛋白纯化→质量检测[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着现代药物研究的发展，对于跨膜蛋白的需求越来越高，传统的跨膜蛋白制备方法已不能满足现代药物研发的需求。义翘神州致力于跨膜蛋白的产品开发，成功实现了多次跨膜蛋白的高效表达、纯化。与此同时，配备完备的技术流程和专业的技术人员，搭建了三大技术平台，可以为客户提供全面的多次跨膜蛋白产品和服务。同时，为基础研究和药物研发提供更加优质的原材料。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]①[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达，类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜，形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒（直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米），不含病毒核酸，不能进行自主复制，生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台，它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面，这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构，同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]利用[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台制备跨膜蛋白具有以下优势：[/font][/font][font=宋体]? 全长跨膜蛋白，保持完整的天然构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测、抗体筛选等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]义翘神州提供：[url=https://cn.sinobiological.com/services/membrane-protein-expression-service][b]VLP[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/membrane-protein-expression-service][b]形式的膜蛋白表达服务[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州搭建了基于[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]表达系统的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]virus-like particle[/font][font=宋体]）技术平台，能够将目的膜蛋白完整展示在[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]表面，使其能够像普通蛋白一样进行检测，义翘神州目前可以为客户提供膜蛋白定制服务，助力药物研发进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]二、去垢剂技术平台[/b][/font][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域，跨膜蛋白与膜的结合非常紧密，需要用去垢剂（[/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体]）才能从膜上洗涤下来，[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子，疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域，亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础，当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体]，临界胶束浓度）时会形成微团，增溶后，去垢剂将蛋白周围的磷脂置换，从而实现收集目标膜蛋白的目的，后续再进行蛋白纯化，最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台，利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]去垢剂技术平台的优势：[/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体]? 胶束为膜蛋白疏水基团提供保护并稳定构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]三、[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定，与天然的生物膜非常相似，使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式，一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物（[/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]）组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台，如下图（左）所示，它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白，使其变为可溶性蛋白，组装完成的蛋白样品很稳定，更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白（[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]）的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台（下图右），它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来，然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例，可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台，利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性，制备出稳定的产品，满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台的优势：[/font][/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]共聚物包裹的膜蛋白稳定性更好，有助于更好地研究膜蛋白的结构和功能[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测及细胞实验等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url]详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font]

从 植物 叶片提取的植物总蛋白不但是家养类动物生长发育的重要营养物质，而且是具有潜力的新一代营养保健食品，因而掌握植物叶蛋白的提取方法至关重要，让我们一起了解这整个实验原理和过程吧。一、实验目的熟悉植物叶蛋白的几种提取原理和方法，了解其意义及其应用价值。二、实验原理植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物(leaf protein concentration，简称LPC)，是从新鲜植物叶片中提取的高质量浓缩蛋白质，不仅是畜禽生长发育和生产畜产品的主要营养物质，而且目前也正成为人类的保健营养理想食品之一。天然蛋白存在于为数甚多的植物体内，对其分离应依据人们的利用目的及提取蛋白含量和品质加以考虑。天然蛋白质一般在溶液中呈稳定的亲水胶体状态，故LPC 亦称叶蛋白胶。其特点是：(1)水化作用 即蛋白质分子表面附有能有效防止蛋白质分子沉淀析出的水化膜;(2)电荷排斥作用 水化膜外还有电荷层(具阴、阳离子)能有效地防止蛋白质分子的凝集。故溶液蛋白质颗粒(溶质)呈溶解状态;(3)欲提取植物组织中的蛋白质必须利用溶解度的差异进行分离纯化(如盐析、有机溶剂分级沉淀法、疏水层析、结晶、加热、离心分离等法)，利用分子大小和形状差异进行分离纯化(分子筛层析法);还可利用电荷性质的差异分离纯化(离子交换法)。只要创造上述影响因素，即可使蛋白质从植物叶片中分离并沉淀出来。植物叶蛋白提取一般遵循如下基本原则：尽可能提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失;减少对蛋白质的人为修饰;破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态。根据该原则，植物叶蛋白制备过程中一般需要有四种试剂①离液剂：尿素和硫脲等;②表面活性剂：又称去垢剂，早期常用NP-40、Tritonx-100等非离子型去垢剂，离子型去垢剂有SDS、胆酸钠、LiDS 等，还有象CHAPS(含它的蛋白溶液可以冻存)与Zwittergent 等双性离子去垢剂;③还原剂：DTT、DTE、TBP、Tris-base 等;④蛋白酶抑制剂及核酸酶：EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktails)等，如为了去除缓冲液中存在的痕量重金属离子，可在其中加入0.1～5 mmol/LEDTA，同时使金属蛋白酶失活。三、仪器和试剂仪器离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱。试剂1. 20 mL 样品提取缓冲液：2.5 mL 0.5 mol/LTris-HClhttp://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1381399946_small.jpg3. -20 ℃下预冷丙酮(含0.07% β-巯基乙醇)4. -20 ℃预冷的80%丙酮(含0.07% β-巯基乙醇)5. 饱和硫酸铵溶液 称取(NH4)2SO4 80 g，加蒸馏水100 mL，加热50～60 ℃，搅拌溶解，室温过夜，用浓氨水调pH 至7.06. 0.05 molpH7.0的磷酸缓冲液10%NaCl 0.1mol 醋酸95%乙醇7. 植物叶片(草本植物、木本植物叶片等都可)四、实验步骤植物叶蛋白的提取主要有盐析法、有机溶剂沉淀法、加热法(含逐步和快速加热)、 离心分离法、结晶和重结晶法等。依据今后的开发方向(以饲料为基础，以食品、饮品为开发方向)及简便易行和使用的原则，主要采用盐析法、加热法和有机溶剂法分离提取叶蛋白(冷提和热提)。不同的提取方法，对样品的处理方式、程度和要求不同，结果也有差异。1. (NH4)2SO4 沉淀法提取叶蛋白取0.3 g 植物叶蛋白，用液氮充分研磨转入离心管中，加入3 mL 提取缓冲液，摇匀并放在4 ℃条件下提取1 h，充分溶解蛋白后，4 ℃10000 r/min 离心20 min，弃沉淀，上清液中加入(NH4)2SO4，混匀1 h，按1：2(v/v)加入-20 ℃预冷的80%丙酮，混匀后4 ℃12000 r/min 离心10 min，沉淀在-20 ℃冰箱中放置20 min，使丙酮完全挥发后加适量上样缓冲液，待沉淀充分溶解后，4 ℃12000 r/min 离心5 min，取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。2. 改良丙酮沉淀法提取叶蛋白取0.3 g 左右的植物叶片，用液氮研磨，色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP，并将充分研磨过的样品转入离心管中，加入4 mL 的提取缓冲液，摇匀并放在4 ℃条件下提取1 h，充分溶解蛋白。放置后的样品充分摇匀，4 ℃10000 r/min 离心30min，弃沉淀，上清液中加入2.5～3倍体积的村-20 ℃条件下过夜，让蛋白充分沉淀。之后，4 ℃10000 r/min 离心30min，其上清，沉淀置于-20 ℃下，使丙酮完全挥发，如有必要加入上样缓冲液溶解沉淀。缓冲液用量300 ul，沉淀充分溶解后，转移至1.5 mL 离心管中，4 ℃12000 r/min 离心15min ，取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。该方法提取的蛋白质，提取效率高，杂质干扰少，电泳结果蛋白条带清晰，数量多。 3. 植物叶片总蛋白的提取—三氯醋酸—丙酮沉淀法①在液氮中研磨适量的叶片;②悬浮于含10%的三氯醋酸和含0.07% β-巯基乙醇(可用DTT 代替)的丙酮溶液在-20 ℃条件下冰浴;③让蛋白质沉淀过夜后离心(4 ℃ 10000 r/min 离心30~60min)，弃上清;④重悬沉淀浮于含0.07% β-巯基乙醇的预冷丙酮溶液中;⑤离心(同上)后真空干燥沉淀;⑥用上样缓冲液溶解沉淀，离心;⑦Brandford 法定量蛋白，然后分装至Eppendof 管中保存在-78 ℃备用。4. 分步提取可溶性叶蛋白(1)蛋白质浸出①水溶性蛋白质浸出：用0.05 molpH7.0的磷酸缓冲液(或蒸馏水)将样品制成匀浆液，然后离心15min(4000 r/min)，收集上清液即蛋白质浸出液，再将沉淀物按上述操作重复两次。②盐溶性蛋白质浸出用10%NaCl 将前者剩余沉淀物分离提取两次，收集蛋白质浸出液。(2)蛋白质沉淀用0.1mol 醋酸将蛋白质浸出液pH 值调至蛋白质等电点(pH4.5左右)，即8体积蛋白质浸出液加入1体积0.1 mol 醋酸，混匀，离心15min(3000 r/min)，弃去上清液，沉淀物即为可溶性叶蛋白。(3)蛋白质收集于沉淀物中加入95%乙醇，混匀，用定量滤纸过滤或抽滤，待风干后收集。植物总蛋白的提取方法以有机盐沉淀法为主，本文中介绍到的(NH4)2SO4沉淀法、丙酮沉淀法、三氯乙酸—丙酮沉淀法和分步提取法，各个方法各有特点和适用范围，各位如有更好的植物总蛋白提取方法，欢迎补充。

8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。 28、溴酚蓝：pH指示剂，pH=3.0时呈黄色，pH=4.6时呈蓝紫色。酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。29、台盼兰：台盼蓝（Trypan Blue）或称台盼兰，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。30、二甲苯青FF：用于琼脂糖聚丙烯酰胺凝胶电泳的示踪染料， 易溶于水和醇，可与溴芬蓝按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙：是一种荧光色素，与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光，与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞.它还可以用作移码突变的诱变剂，能镶嵌于两个相邻的碱基对之间，这样在DNA复制过程中，会使DNA链增加或缺失一个碱基，造成移码突变。吖啶橙染液有毒，操作时要戴手套，需避光。32、EDTA和EGTA：EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合剂的代表性物质。能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性络合物。此外EDTA也可用来使有害放射性金属从人体中迅速排泄起到解毒作用。也是水的处理剂。EGTA--乙二醇双（2-氨基乙基）四乙酸在Mg2+存在下测定Ca2+时，可用EGTA直接滴定,滴定误差小于0.3% ，比用EDTA滴定提高了选择性。此外它与金属离子形成的配合物的稳定性普遍比相应的EDTA配合物差。33、TRICINE：N-甘氨酸， 常见的电泳系统是Tris－甘氨酸系统；Tris－Tricine电泳则用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的电泳，能够获得较好的分离效果。可以用前者代替。34、PVP40：PVP40 中的CO - N = 有很强的结合酚类化合物的能力，与其形成稳定的复合物，常用于提取RNA时除去酚类。35、脱氧胆酸钠：离子型去垢剂，作用有：1、裂解细胞；2、溶解蛋白，尤其是可以溶解一些难溶于水的蛋白，如膜蛋白等；3、很适合做WB，但在Co-IP中使用，需要谨慎。36、6-BA：细胞培养中用到，细胞分裂素。37、碘代乙酰胺：也叫作碘乙酰胺，2-碘乙酰胺。用于有机合成，在蛋白组学中组氨酸和半胱氨酸的烷基化试剂，用于多肽测序以及酶抑制剂等，蛋白组学级试剂。38、萘乙酸：NAA，为广谱性植物生长调节剂。可促进细胞分裂，诱导形成不定根，改变雌雄花比例，增加坐果率等39。番红O与藏红T：氧化还原指示剂、生物染色、酸碱指示剂，滴定分析亚硝酸盐。40。TTC：2，3，5-三苯基氯化四氮唑（红四氮唑），多用于药物分析和琼脂糖添加剂，在计数琼脂中加入适量的TTC（0.5% TTC 1ML加到100ML琼脂中），细菌菌落长成红颜色，对去除食品本底颗粒物干扰非常有意义。

细菌DNA的提取2006-10-24 17:19这里提供的是由Marmur于1961年建立，经Dale等人简化和发展，此方法略加修改后可用于其他细菌种类。主要原理是：采用去垢剂破碎细菌细胞，酚－氯仿萃取蛋白，使用核糖核酸酶和蛋白酶K进行进一步的纯化，所提取的DNA无RNA和蛋白质污染，可用于限制性内切酶消化，分子克隆。⑴材料①20倍SSC缓冲液：3mol/l NaCl; 0.3mol/l 醋酸钠；pH 7.0(高压灭菌后，4摄氏度保存可长期使用)②酚/氯仿（1：1）：一般市售的酚需要重蒸处理，市售的酚常含有杂质而呈粉色和淡黄色，需要重蒸二次，收集沸点160℃部分，小瓶分装，瓶内空腔充氮气，－20℃密封保存，以免氧化，用前从冰箱中取出，68℃蒸馏水饱和，加入8—羟基喹啉（100g酚加0.1g），酚变为黄色。8—羟基喹啉是抗氧化剂，并能部分抑制核糖核酸酶，含8—羟基喹啉的酚用等体积1.0mol/L pH 8.0Tris 缓冲液抽提，再用0.1mol/L pH 8.0含0.2％β－巯基乙醇的Tris缓冲液抽提数次，酚溶液的pH应大于7.6。此酚溶液在平衡缓冲液覆盖下4℃可保存一个月，纯化和制备酚溶液都要带手套，以免损伤皮肤。③核糖核酸酶：无DNA酶污染，将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/LTris－Cl(pH 7.5)15mmol/L Nacl 溶液中，浓度为10mg/ml.于100℃加热15分钟，缓慢冷却至室温，分装后于－20℃保存。④蛋白酶K ⑤TES缓冲液：10mmol/L Tris-HCl, pH 8.0; 10mmol/L NaCl;1mmol/l EDTA⑵方法①取单菌落接种于5mlLB培养液中，37℃振荡培养过夜。（使用试管）②将上述菌液接种于200mlLB培养液中，37℃振荡培养过夜。（使用500ml或1000ml三角瓶）③离心，收集沉淀（5000r/m,10分钟）④将沉淀悬浮于20ml 20倍SSC缓冲液中，混匀。⑤加入200mg SDS，室温下振荡过夜，使细菌细胞充分裂解，裂解液呈粘稠状⑥加入等体积的酚/氯仿溶液，温和地混匀，细心地回收上层水相（注意不要触及二相之界面），重复萃取三次⑦加入2倍体积无水乙醇，此时可见到絮状DNA沉淀或用玻璃棒绕取收集⑧将DNA溶于15ml 2倍SSC溶液中，加入核糖核酸酶（最终浓度50ug/ml），37℃保温1小时⑨加入蛋白酶K（50ug/ml）,继续保温1小时⑩加入等体积苯酚萃取一次，在回收的水相中加入2.5倍体积的无水乙醇，－20℃静止过夜25000g，4℃，离心15分钟，收集沉淀，用－20℃无水乙醇洗涤一次；将DNA在真空干燥器中抽干，溶于10mlTES缓冲液中，4℃保存备用。⑶说明①本方法可用于其他种类细菌，但是溶菌条件需略加修改，对革兰氏阳性菌（如葡萄球菌），在SDS处理前需要使用溶菌酶裂解细胞壁，对于另外一些细菌（如分枝杆菌），在加入SDS后，将溶液加温至65℃是可取的。②一些种类的细菌含大量核酸酶，去垢剂不能完全抑制其活性，用TES缓冲液代替SSC缓冲液可通过EDTA的作用抑制核酸酶活性，必须注意的是，TES缓冲液离子强度较低，在加入乙醇之前需用醋酸钠调节DNA溶液的离子强度（醋酸钠的最终浓度为0.3mol/L）③DNA溶液中残留少量酚和氯仿，可在乙醇沉淀之前用水饱和乙醚萃取去除④比较纯净的DNA溶液的Ａ260/A280及A260/A235大于1.7

到客户处讲座的时候发现大家对于实验室器皿的清洗方法都很有兴趣，所以回来后就找了些资料，现在也发上来跟大家分享下，如有不妥的地方也希望大家指出哦，呵呵~玻璃与塑料实验室器皿在使用后应立即清洗 — 可使用弱碱性去垢剂，在低温，简单浸泡进行清洗。通常的擦拭与刷洗方法是使用一块在清洗剂中充分浸泡的布或者海绵继进行清洗的方法，一定不能使用具有研磨效果的洗涤剂以免损伤表面。在室温下泡入清洗溶液约20至30分钟，然后使用流水冲洗，最后使用蒸馏水清洗。只有当有顽固残留的时候才需要升高浸泡的温度与延长浸泡时间。玻璃与塑料器具都可以在超声波洗涤仪上清洗。当然，必须避免直接接触超声发生膜。对于玻璃器具，应该避免在超过70 °C时在碱性洗涤剂中的长时间浸泡。这样可能会导致因为玻璃侵蚀而导致的体积变化，并且有可能侵蚀刻度，尤其是对体积计量产品更应注意。塑料器具通常具有光滑，疏水表面，可以使用弱碱条件轻松地进行清洗。PS或者PC器具，如离心管，只能使用中性去污剂手动洗涤。即便在弱碱去污剂中延长洗涤时间也会损坏它们的强度。不同情况需要确认这些塑料的化学耐性。痕量分析中的清洗为了最小化金属残留，实验器具可以在室温下放置在1N HCl或者1N HNO3中不超过6小时。(玻璃器具经常在1N HNO3中煮沸1小时) 。然后使用去离子水清洗。为了最小化有机污染，实验器具可以先用碱，或者溶剂比如乙醇清洗。

牙膏的历史牙膏问世前，人们用牙粉刷牙。牙粉是碳酸钙和肥皂粉的混合物，其功能只是保持牙齿清洁，除却污渍。牙粉pH值高，会引起口腔组织发炎。二战以后，有治疗作用的牙膏才纷纷上市。尤以合成去垢剂月桂酰肌氨酸钠代替肥皂的牙膏深受大众青睐。这种清洗剂不仅能明显减少口腔炎症，还使牙膏气味清香，更有抑制引起蛀牙的菌斑酸的作用。 防治龋齿的氟化物 50年代初，一些流行病学研究指出，氟化物具有阻止龋齿的作用。于是，1955年出现了添加氟化亚锡（SnF2）的牙膏。后来，一氟磷酸钠(MFP)代替了氟化亚锡，成为世界上研究最广泛的氟化物。如今被添入牙膏预防龋齿的氟化物还有氟化钠和氟化胺类（amine fluorides）。专家们普遍地认为，当提供的氟离子的浓度相等时，所有这些氟化物防治龋齿的作用是相同的。龋齿是由于发生在牙釉质上，也可能是局部地发生在牙釉下面的牙本质里的去矿化作用引起的。去矿化作用就是有机酸穿透牙釉质表面使牙齿的矿物质-羟（基）磷灰石溶解。这些酸是由口腔细菌在糖代谢或可酵解的碳水化合物代谢过程中释放出来的。由于细菌在牙齿表面形成一层粘附着的膜-齿斑（或称菌斑），细菌制造的酸能够长时间地跟牙齿表面密切接触，因此，羟磷灰石被酸溶解，生成磷酸氢根离子和钙离子向齿外扩散，被唾液冲走：Ca10(PO4)6(OH)2+8H+?10Ca2++6HPO42-+2H2O不过，既使去矿化作用的酸存在于牙齿表面的齿斑里，却有证据表明，龋齿是在牙齿的釉表质下面开始的。饮水、食物和牙膏里的氟离子会跟羟磷灰石反应生成氟磷灰石：Ca10(PO4)6(OH)2+2F-? Ca10(PO4)6F2+OH-

化妆品生产工艺基础(七) 4．冷冻过滤 过滤一般用板框式压滤机，以碳酸镁作助滤剂，其最大压力一般不得超过(1.5-2)xlO0000Pa。根据滤板的多少和受压面积大小，规定适量的碳酸镁用量。先用适量的碳酸镁混合一定量的香水或花露水，均匀混合后吸人压滤机，待滤出液达到清晰度要求后进行压滤。 香水压滤出来时温度不超过5℃，花露水、古龙水压滤出来时的温度不得超过10℃，这样才能保证香水水质清晰度5℃的指标和花露水、古龙水水质清晰度10℃的指标。 使用冷冻机时必须遵守冷冻机的安全操作要求，不得违反。 5．灌水 装灌前必须对水质清晰度进行检查，对瓶子清洁度进行检查。按品种产品的灌水标准(指高度)进行严格控制，不得灌得过高或过低。 对特种规格产品和香水按照特定的要求装灌的，灌水前必须检查水质清晰度和瓶子内外清洁度。 二、化妆水类化妆品的生产 生产前的准备工作与香水相同。化妆水生产时，先在精制水中溶解甘油、丙二醇、聚乙二醇(400)为代表性的保湿剂及其他水溶性成分。另在乙醇中溶解防腐剂、香料、作为增溶剂的表面活性剂以及其他醇溶性成分，将醇体系与水体系混合，增溶溶解，然后加染料着色，再过滤。(瓷器滤、滤纸滤、滤筒滤任取一种方法)除去灰尘、不溶物质，即得澄清化妆水。对香料、油分等被增溶物较多的化妆水，用不影响成分的助滤剂，可完全除去不溶物质，较常用的化妆水有润肤化妆水、收敛性美容水、柔软性化妆水等。 1．润肤化妆水 兼有去垢作用和柔软作用，去垢剂的主要成分是非离子表面活性剂、两性表面活性剂，也添加甘油、丙二醇、低分子聚乙二醇等保湿剂，以帮助去垢并吸收空气中的水分使皮肤柔软。 2．收敛性化妆水 收敛性化妆水是用于减少皮肤的过量油分，使毛孔收缩，防止皮肤粗糙而使用的化妆水。适用于多油型皮肤，也可用于非油性皮肤化妆前的修饰。通常是在晚上就寝前，早上化妆前和剃须后使用，起绷紧皮肤、收缩毛孔和调节皮肤的新陈代谢作用，用后有清凉舒适感。 收敛性化妆水分为化学收敛作用型和物理收敛作用型的两类。前者是收敛剂作用于蛋白质，使之凝固，起收敛功效的；后者的收敛功效是由物理作用引起的，如皮肤遇冷或液体而收敛的现象即为物理收敛作用。目前市售收敛性化妆水都为化学收敛作用型的。化学收敛剂又分为阳离子型和阴离子型的两类。 阳离子型收敛剂有明矾；硫酸铝、氯化铝、硫酸锌等，其中以铝盐的收敛作用最强。阴离子收敛剂有丹宁酸、柠檬酸、硼酸、乳酸等，一，般常用的为柠檬酸。为避免收敛剂对皮肤过分刺激，在生产中常添加非离子表面活性剂，使制品质地温和，并可提高使用效果。 3．柔软性化妆水 这是给予皮肤适度的水分和油分，使皮肤柔软，保持光滑湿润的透明化妆水。添加成分甚多，用作保湿剂的有甘油、一缩二甘油、丙二醇、缩水二丙二醇、丁二醇、聚乙二醇类(200，400，1000，1500等)等多元醇及山梨糖醇、木糖醇等；使用的胶质有天然的植物性胶质如黄蓍胶、纤维素及其衍生物，合成的胶质有聚丙烯酸酯类、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇等。与天然胶质相比，合成胶质应用广泛，这是最近化妆品发展的特征。天然胶质在触觉方面尚有长处，但使用起采有时以合成物为好。胶质溶液一般易受微生物污染，配方中必须有适当的防腐剂。因金属离子会使胶质溶液的粘度起很大变化，配制胶质必须用去离子水，应绝对避免从容器、搅拌器等混入金属离子。 最近利用的保湿剂中，氨基酸衍生的2-吡咯烷酮5-羧酸钠、钾、三乙醇胺盐用的较多。作柔软剂的油分用易溶解的高级醇或酯类。

1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸，在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷，因此可以在电场中移动；当蛋白质迁移至其等电点位置时，其静电荷数为零，在电场中不再移动，据此将蛋白质分离。 等电聚焦中，只有在凝胶两端给以高电压时，才能获得较好的蛋白质条带分辨率，这就需要非常有效的凝胶冷却系统（否则会导致烧胶），即凝胶同期周围液体之间的热传递效率要高。由于平板胶热传递能力高，并可方便的同时比较多种蛋白质样品，所以平板胶用在等电聚焦上的居多。由于等电聚焦对蛋白质的电荷差异非常敏感，若要好的重复性，制备蛋白样品时一定要小心，要避免任何对蛋白质化学组成和结构的修饰。另外，蛋白质－脂类、蛋白质－蛋白质相互作用可引起电荷改变，进而导致等电点迁移或纹理现象。除非特殊需要研究蛋白质－蛋白质相互作用或者必须保持蛋白质的生物学功能，等电聚焦通常在含有尿素的变性凝胶系统中进行。使用非离子去垢剂也可以提高分辨率。 2.主要仪器、试剂仪器：微型电泳系统、电源、注射器、固定和染色用容器 试剂：丙稀酰胺、双－丙稀酰胺、载体两性电解质、尿素、过硫酸胺、TEMED、TritonX－100、2－巯基乙醇、溴酚蓝、磷酸、氢氧化钠、氯化钾、三氯乙酸、考马斯亮蓝、甲醇、乙酸。 储存液：1）30%（w/v）丙稀酰胺，1%（w/v）双－丙稀酰胺；2）20%Triton X100；3）10%三氯乙酸；4）1%三氯乙酸；5）1%溴酚蓝；6）考马斯亮蓝染色液；7）考马斯亮蓝脱色液；

平时柱子是反相色谱法检测色素，C18（ODS）柱子，刚做了一次色谱柱再生，耗时约3个小时，感觉没什么变化不知道是不是再生时间不够，是做如下处理：甲醇↔异丙醇↔四氢呋喃 1ml/min网上还有一些说法再生包括活化和和净化两个步骤：对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→左)和净化(左→右)两种。硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按下列顺序冲洗:三甲基戊烷或三氯乙烷丙酮←→乙醇←→水。键合相硅胶柱:蒸馏水甲醇(冲洗过程中可加入少量二甲基甲酰胺)。离子交换树脂]柱:高浓度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分树脂再生,油脂等少数与树脂紧密结合的物质可用低浓度碱溶液(如0.1molL的NaOH溶液)冲洗,酸性有机物吸附在固定相的用低pH缓冲液冲洗,碱性有机物用高pH缓冲液冲洗,然后再用蒸馏水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸馏水冲洗。凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶]处理可分解凝胶中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸馏水←→甲醇←→蒸馏水冲洗。[font=KaiTi_GB2312]不知道大家柱子再生是怎么处理，效果怎么样的，色谱柱再生需要柱子反向吗？大家都来谈谈吧！！！！！[/font]

生化试剂的概念　　生化试剂（Biochemical reagent）是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物，以及临床诊断、医学研究用的试剂。生化试剂的介绍　　由于生命科学面广、发展快，因此该类试剂品种繁多、性质复杂。生化试剂的种类　　主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、染色剂、抗氧化剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等等。生化试剂的种类与等级说明　　（1）免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。（2）基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。（3）诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。（4）临床诊断试剂主要供医疗系统中的临床病理诊断、生化诊断、液晶诊断、同位素诊断与一般化学诊断等诊断检查中所用的一大类化学试剂。（5）工业用化学品包括试制开发的工业用化学品，有四千种以上，还在不断增加。　　从生物体中提取的或由化学合成的生物体的基本成分，用于生物成分的分析鉴定及生物制品的制造。随着生命科学的发展，生化试剂已发展成为化学试剂的一大类,有商品10000多种。中国销售的生化试剂品种有2500种。生化试剂受热、受潮、受光后易丧失活力，保存期短，因此贮运条件比较苛刻。例如，绝大多数酶试剂怕热，需在0～5℃下保存，有些作为遗传工程用的酶试剂则需在－20℃下保存。生化试剂按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、激素等；按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。 生化试剂根据用途不同对其纯度及技术均有一定的要求。例如酶试剂，有粗制酶、结晶酶、多次结晶酶以及不含某些杂酶的酶制剂等多种。生化试剂有三种生产方法：①从生物体中分离、提纯；②化学合成；③发酵。对生化试剂产品的技术要求有：含量、熔点、冰点、旋光度、含水量、光谱特征、折光、密度和生物活性等。

以适当的浓度和形式存在于介质中，可以防止或减缓金属腐蚀的一种化学物质或复合物质。也称腐蚀抑制剂或阻蚀剂。它的用量很小(0.1％～1％)，但效果显著。这种保护金属的方法称缓蚀剂保护。缓蚀剂用于中性介质（锅炉用水、循环冷却水）、酸性介质（除锅垢的盐酸，电镀前镀件除锈用的酸浸溶液）和气体介质（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]缓蚀剂）。缓蚀效率愈大，抑制腐蚀的效果愈好。有时较低剂量的几种不同类缓蚀剂配合使用可获得较好的缓蚀效果,这种作用称为协同效应；相反地,若不同类型缓蚀剂共同使用时反而降低各自的缓蚀效率，则称为拮抗效应。缓蚀剂可按作用机理或保护被膜特性进行分类。 　　按缓蚀剂的作用机理分类 　可将缓蚀剂分为三类： 　　阳极型缓蚀剂 　例如中性介质中用的铬酸盐、亚硝酸盐、苯甲酸盐等。它们能增加阳极极化，从而使腐蚀电势正移。通常，阳极型缓蚀剂的阴离子移向金属表面使其钝化，但是如果缓蚀剂用量不足，反而加剧部分金属的孔蚀，因此阳极型缓蚀剂又有“危险性缓蚀剂”之称。非氧化型缓蚀剂（如苯甲酸钠等），只有在溶解氧存在的条件下才有缓蚀作用，它的用量不足时，会引起一般的腐蚀。 　　阴极型缓蚀剂 　例如酸式碳酸钙、聚磷盐、硫酸锌、砷离子、锑离子等，它们能增加阴极极化，使腐蚀电势负移。通常，阴极型缓蚀剂的阳离子移向金属表面，通过电化学或化学反应在金属表面形成沉淀保护膜，抑制阴极过程速率（例如使氢的超电势大大增加），从而起缓蚀作用。这类缓蚀剂在用量不足时不会加速腐蚀，故又有“安全缓蚀剂”之称。 　　混合型缓蚀剂 　例如含氮、含硫和既含氮又含硫的有机化合物、生物碱等，它们对阴极过程和阳极过程同时起抑制作用。这时腐蚀电势变化不大，但腐蚀电流却减少很多。 　　按缓蚀剂保护被膜特性分类 　可将缓蚀剂分成三类。 　　氧化膜型缓蚀剂 　这类缓蚀剂能使金属表面形成致密、附着力强的氧化膜，当氧化膜达一定厚度以后（如50～100埃），氧化反应的速率减慢，金属钝化,腐蚀速率大大降低。此类缓蚀剂是阳极型的，用量不足将会加速局部腐蚀速率，使用时应特别注意。 　　沉淀膜型缓蚀剂 　这类缓蚀剂（如硫酸锌、碳酸氢钙、聚磷酸钠）能与介质中的有关离子反应并在金属表面形成防腐蚀的沉淀膜。沉淀膜厚度一般都比钝化膜厚（约为几百至一千埃），膜的致密性和附着力均不如钝化膜，防腐效果也差。此类缓蚀剂通常和去垢剂合并使用于中性水介质，以防止金属表面结垢。 　　吸附膜型缓蚀剂 这类缓蚀剂能吸附在金属表面,改变金属表面性质,从而抑止腐蚀。它们一般是混合型有机化合物缓蚀剂，如胺类、硫醇、硫脲、吡啶衍生物、苯胺衍生物、环状亚胺等。为了能形成良好的吸附膜，金属必须有洁净的表面，所以在酸性介质中往往比在中性介质中更多地采用这类缓蚀剂。 　　缓蚀剂的选择 　缓蚀剂的缓蚀效果与它的使用浓度以及介质的pH值、温度、流速等密切相关，因此应根据被保护的对象、环境条件严格选择。缓蚀剂可能带来的环境污染问题已引起关注，对缓蚀剂选择的注意力已转移到不含重金属的类型。根据情况有时可选用特殊的缓蚀剂，例如[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]缓蚀剂是第二次世界大战时期发展起来的，在金属器械装运、贮存时使用的缓蚀剂。它们是有一定的挥发性，可以存在于金属表面的湿膜中，并具有强烈吸附性的物质，如亚硝酸二环己烷基铵，一般制成片剂或浸渍在包装纸上。

[font=宋体]膜蛋白表达是生物学和医学领域中一个重要的研究课题，但很多人对此并不十分了解。本文将为大家解答关于膜蛋白表达的常见问题，帮助大家更好地理解这一领域的基本概念、研究方法和应用前景。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q1:[/font][font=宋体]义翘神州膜蛋白[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台是利用什么系统表达的？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A1:VLP[/font][font=宋体]平台我们采用的是[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]细胞表达的，获得的蛋白更接近天然构象，更有利于客户进行后续的研究和应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q2:[/font][font=宋体]膜蛋白[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]产品可以做体内生物素标记吗？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A2:[/font][font=宋体]可以的，可以选择在蛋白上加[/font][font=Calibri]AVI[/font][font=宋体]标签或者选择对[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]本身生物素化，体内定点生物素标记，具体根据您的需求选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q3:[/font][font=宋体]抗体与抗原结合在胞外，全长的多次跨膜蛋白意义大吗？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A3:[/font][font=宋体]多次跨膜蛋白在细胞膜上多次跨越，在胞外形成多个胞外区，比如[/font][font=Calibri]Claudin18.2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD20[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD133[/font][font=宋体]都有两个[/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]extracellular loops[/font][font=宋体]），每个[/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体]都有特定功能甚至会相互影响。全长可以保证蛋白构象天然完整，而且[/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体]展现完全，帮助筛选靶向多次跨膜蛋白抗原的理想抗体。给大家看下面两张图，全长的意义就显而易见了，结构完整，功能上也有保证。这么看，全长也不是我们[/font][font=Calibri]ACRO[/font][font=宋体]一直在强调全长，而是客户需要全长的多次跨膜蛋白，满足客户需要的产品是[/font][font=Calibri]ACRO[/font][font=宋体]的初衷。我们也比较过，单独的胞外[/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体]区蛋白活性确实比全长蛋白差。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q4:[/font][font=宋体]相比其他非[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]产品，[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]有什么好处吗？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A4:Nanodisc-[/font][font=宋体]膜蛋白与去垢剂[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]膜蛋白相比，的确有不同。首先，原理上，[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]膜蛋白是将膜蛋白除去去垢剂之后组装在类细胞膜的[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]上。其次，应用上，我们都知道，去垢剂会溶膜从而对细胞产生损伤，[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]版本的膜蛋白因不含去垢剂，可以进一步扩展到用于细胞试验、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测，应用范围是更广的。另外，我们[/font][font=Calibri]ACRO[/font][font=宋体]使用的[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术已经获得专利持有方的授权，在研发过程中是可以放心使用的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q5:VLP[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台下的多次跨膜蛋白怎么去除非特异抗体？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A5:[/font][font=宋体]非特异抗体的影响不容忽视，使用[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台下的膜蛋白的确可能产生非特异抗体，我们这两个平台均有对应的用于反筛去除非特异抗体的空白对照：[/font][font=Calibri]VLP-[/font][font=宋体]膜蛋白有同型对照产品空白[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]；[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]有两款[/font][font=Calibri]MSP1D1[/font][font=宋体]空白产品，其中一款[/font][font=Calibri]MSP1D1[/font][font=宋体]作为[/font][font=Calibri]tag free [/font][font=宋体]膜蛋白的同型对照，如果使用生物素化的[/font][font=Calibri]Nanodisc-[/font][font=宋体]膜蛋白，另一款[/font][font=Calibri]MSP1D1[/font][font=宋体]可以作为同型对照。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q6:VLP[/font][font=宋体]相关蛋白能适合冻干保存吗？[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]的用于免疫有什么注意事项？比如能否乳化，对佐剂类型有没有要求？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A6:[/font][font=宋体]包膜[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]产品我们目前都是液体[/font][font=Calibri]-70[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]保存，干冰发货；非包膜[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]我们是冻干保存的。[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]免疫主要是需要注意佐剂量的选择，因为[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]本身是可以增强免疫原性的，跟常规蛋白不同。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q7:VLP[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]产品稳定性如何。冷冻长时间保存可以吗？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A7:VLP[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]本身的稳定性是很好的，是可以在[/font][font=Calibri]-70[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]长期保存的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q8:[/font][font=宋体]如何确认[/font][font=Calibri]VLP-Claudin18.2[/font][font=宋体]表达的是该目标蛋白，纯度如何评估？产品上的电镜图片，怎么确认颗粒上有该蛋白[/font][font=Calibri]?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A8:Claudin18.2-VLP [/font][font=宋体]我们会通过[/font][font=Calibri]anti-Claudin18.2[/font][font=宋体]特异性的抗体进行检测验证。纯度我们通过电泳[/font][font=Calibri]/HPLC/DLS[/font][font=宋体]电镜进行评估。常规负染电镜因分辨率低是没办法看到[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]上是否有[/font][font=Calibri]Claudin18.2[/font][font=宋体]的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州搭建了基于[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]表达系统的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]virus-like particle[/font][font=宋体]）技术平台，能够将目的膜蛋白完整展示在[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]表面，使其能够像普通蛋白一样进行检测，已上线的[/font][font=Calibri]Claudin 18.2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GPRC5D[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Claudin 6[/font][font=宋体]等产品均展示出良好活性。义翘神州目前可以为客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/membrane-protein-expression-service][b]膜蛋白定制服务[/b][/url]，助力药物研发进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多次跨膜蛋白开发技术平台：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/multi-pass-transmembrane-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]形式的膜蛋白表达服务：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/membrane-protein-expression-service[/font][/font]

化学试剂作为检验各种化学物质的质量标准，是一种重要的实际应用的化学物质。通常是把它们分为无机化学试剂、有机化学试剂和生化试剂三大类。1.无机化学试剂通常有两种不同分类标准。其一是按用途分类。苏联化学家库兹涅佐夫在其所著的《化学试剂与制剂手册》中，从分析的角度出发，把无机试剂分为4 大类：（1 ）用作溶剂的试剂，包括各种酸类、碱类及各种不同的“熔合物质”，如焦硫酸盐、碱金属的碳酸盐、氟化物等；（2 ）分离试剂，有沉淀试剂、提取溶剂等，如硫化物、碳酸盐、氢氧化物……；（3 ）用于检验的试剂，如氧化剂、还原剂、基准物质、用于分析中的各种试剂等；（4 ）辅助试剂，如络合物的形成剂、用作缓冲溶液的试剂、指示剂等。随着科学技术的发展，无机试剂的用途越来越广，又出现了诸如电子工业试剂、仪器分析试剂、生化试剂等。其二是按无机试剂的性质分类。把试剂分为金属、非金属、化合物。又把化合物分为氧化物、酸、碱、盐等。苏联H.Г。克留乞尼科夫所著《无机合成手册》中把无机试剂分为9 类：（1 ）金属，如锌、铜等；（2 ）非金属，如硼、硅等；（3 ）氧化物，如氧化铁、二氧化钼等；（4 ）氢化物，如氢化锂、氢化钙等；（5 ）卤化物，如三氯化铁、四氯化硅等；（6 ）含氧酸，如高氯酸、钨酸等；（7 ）含氧酸盐，如硝酸钡、硫酸钠等；（8 ）硫化物、氮化物、碳化物及与它们类似的二元化合物，如碳化钙、氮化镁、硫化汞、碘化铝等；（9 ）络合物，如氯铂酸钾、三氟合锌酸钾等。2.有机试剂由于种类繁多、结构复杂、用途广泛，目前尚无统一的分类标准。常用的是按用途和反应机构两种分类法。按用途分类时有机试剂可分为2 类：（1 ）分析试剂，是直接用于无机离子或化合物分析测定的试剂，即通常的有机试剂，诸如有机沉淀剂、共沉淀剂、萃取剂、显色剂、金属指示剂、络合剂、基准物质和在容量分析中配制操作溶液的有机试剂等；（2 ）辅助试剂，包括用于溶解和萃取的有机溶剂、用于调节溶液pH值的缓冲剂，另外还有掩蔽剂、氧化- 还原剂、凝聚剂、保护胶体和层析剂等。按反应机构分类时，依据有机试剂与无机离子或化合物的反应类型不同，可以分为4 类：（1 ）形成正盐的试剂，包括有机酸、酸性化合物和有机碱，都能与无机离子形成电价结合的盐，其中羧酸、胂酸、膦酸、酸性硝基化合物（如2 ，4 ，6-三硝基苯酚）常用作阳离子沉淀剂。有机碱则用作阴离子沉淀剂；（2 ）中性络合剂，在反应过程中能与金属离子或化合物形成络合物，通常都是含氮杂环化合物和有机胺。此外还有中性磷酸酯，如磷酸三丁酯（TBP ）；（3 ）形成螯合盐的试剂，如8-羟基喹啉；（4 ）其它类型有机试剂。3.生化试剂主要有4 类分类方法。（1 ）按生物体组织中所含有的或代谢过程中所产生的物质来分类。包括蛋白质、多肽、氨基酸及其衍生物、核酸、核苷酸及其衍生物、酶、辅酶、糖类、脂类及其衍生物、甾类和激素、生物碱、维生素、胆酸盐、植物生长调节物质和卟啉类及其衍生物等。（2 ）按在生物学研究中的用途和新技术的发展来分类。可分为电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、分子重组试剂、诱变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸的沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、抗氧化剂、染色剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂和分离材料等。（3 ）按生物体的物质特性作为研究生物体的工具来分类。如外源凝集素、血液分级部分、抗菌素、代谢和酶抑制剂、环磷酸化合物、免疫试剂和组织培养试剂等。（4 ）根据生物学中比较活跃领域中的一些新颖技术方法使用的试剂而分类，如亲和层析材料、发色基团酶底物、培养基、固定化酶、组蛋白等

化学试剂的分类化学试剂作为检验各种化学物质的质量标准，是一种重要的实际应用的化学物质。通常是把它们分为无机化学试剂、有机化学试剂和生化试剂三大类。1.无机化学试剂通常有两种不同分类标准。其一是按用途分类。苏联化学家库兹涅佐夫在其所著的《化学试剂与制剂手册》中，从分析的角度出发，把无机试剂分为4 大类：（1 ）用作溶剂的试剂，包括各种酸类、碱类及各种不同的“熔合物质”，如焦硫酸盐、碱金属的碳酸盐、氟化物等；（2 ）分离试剂，有沉淀试剂、提取溶剂等，如硫化物、碳酸盐、氢氧化物……；（3 ）用于检验的试剂，如氧化剂、还原剂、基准物质、用于分析中的各种试剂等；（4 ）辅助试剂，如络合物的形成剂、用作缓冲溶液的试剂、指示剂等。随着科学技术的发展，无机试剂的用途越来越广，又出现了诸如电子工业试剂、仪器分析试剂、生化试剂等。其二是按无机试剂的性质分类。把试剂分为金属、非金属、化合物。又把化合物分为氧化物、酸、碱、盐等。苏联H.Г。克留乞尼科夫所著《无机合成手册》中把无机试剂分为9 类：（1 ）金属，如锌、铜等；（2 ）非金属，如硼、硅等；（3 ）氧化物，如氧化铁、二氧化钼等；（4 ）氢化物，如氢化锂、氢化钙等；（5 ）卤化物，如三氯化铁、四氯化硅等；（6 ）含氧酸，如高氯酸、钨酸等；（7 ）含氧酸盐，如硝酸钡、硫酸钠等；（8 ）硫化物、氮化物、碳化物及与它们类似的二元化合物，如碳化钙、氮化镁、硫化汞、碘化铝等；（9 ）络合物，如氯铂酸钾、三氟合锌酸钾等。2.有机试剂由于种类繁多、结构复杂、用途广泛，目前尚无统一的分类标准。常用的是按用途和反应机构两种分类法。按用途分类时有机试剂可分为2 类：（1 ）分析试剂，是直接用于无机离子或化合物分析测定的试剂，即通常的有机试剂，诸如有机沉淀剂、共沉淀剂、萃取剂、显色剂、金属指示剂、络合剂、基准物质和在容量分析中配制操作溶液的有机试剂等；（2 ）辅助试剂，包括用于溶解和萃取的有机溶剂、用于调节溶液pH值的缓冲剂，另外还有掩蔽剂、氧化- 还原剂、凝聚剂、保护胶体和层析剂等。按反应机构分类时，依据有机试剂与无机离子或化合物的反应类型不同，可以分为4 类：（1 ）形成正盐的试剂，包括有机酸、酸性化合物和有机碱，都能与无机离子形成电价结合的盐，其中羧酸、胂酸、膦酸、酸性硝基化合物（如2 ，4 ，6-三硝基苯酚）常用作阳离子沉淀剂。有机碱则用作阴离子沉淀剂；（2 ）中性络合剂，在反应过程中能与金属离子或化合物形成络合物，通常都是含氮杂环化合物和有机胺。此外还有中性磷酸酯，如磷酸三丁酯（TBP ）；（3 ）形成螯合盐的试剂，如8-羟基喹啉；（4 ）其它类型有机试剂。3.生化试剂主要有4 类分类方法。（1 ）按生物体组织中所含有的或代谢过程中所产生的物质来分类。包括蛋白质、多肽、氨基酸及其衍生物、核酸、核苷酸及其衍生物、酶、辅酶、糖类、脂类及其衍生物、甾类和激素、生物碱、维生素、胆酸盐、植物生长调节物质和卟啉类及其衍生物等。（2 ）按在生物学研究中的用途和新技术的发展来分类。可分为电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、分子重组试剂、诱变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸的沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、抗氧化剂、染色剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂和分离材料等。（3 ）按生物体的物质特性作为研究生物体的工具来分类。如外源凝集素、血液分级部分、抗菌素、代谢和酶抑制剂、环磷酸化合物、免疫试剂和组织培养试剂等。（4 ）根据生物学中比较活跃领域中的一些新颖技术方法使用的试剂而分类，如亲和层析材料、发色基团酶底物、培养基、固定化酶、组蛋白等

生物试剂定义　　生物试剂（Biochemical reagent）是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物，以及临床诊断、医学研究用的试剂。由于生命科学面广、发展快，因此该类试剂品种繁多、性质复杂。主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、染色剂、抗氧化剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等等。生物试剂分类　　生物试剂（BR：Biological reagent）涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度（杂质含量的多少）划分，共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 （1）优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。 （2）分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。 （3）化学纯（CP），又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）标签。 （4）实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。 除了上述四个级别外，目前市场上尚有：基准试剂（PT：Primary Reagent）：专门作为基准物用，可直接配制标准溶液。光谱纯试剂（SP：Spectrum pure）：表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出，所以有时主成分达不到99.9%以上，使用时必须注意，特别是作基准物时，必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂（≥ 99.99%）。试剂的包装　　固体试剂一般装在带胶木塞的广口瓶中，液体试剂则盛在细口瓶中（或滴瓶中），见光易分解的试剂（如硝酸银）应装在棕色瓶中，每一种试剂都贴有标签以表明试剂的名称、浓度、纯度。（实验室分装时，固体只标明试剂名称，液体还须注名明浓度）。编辑本段试剂的取用规则　　固体粉末试剂可用洁净的牛角勺取用。要取一定量的固体时，可把固体放在纸上或表面皿上在台秤上称量。要准确称量时，则用称量瓶在天平上进行称量。液体试剂常用量筒量取，量筒的容量为：5mL、10mL、50mL、500mL等数种，使用时要把量取的液体注入量筒中，使视线与量筒内液体凹面的最低处保持水平，然后读出量筒上的刻度，即得液体的体积。 　　如需少量液体试剂则可用滴管取用，取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。 　　为了达到准确的实验结果，取用试剂时应遵守以下规则，以保证试剂不受污染和不变质： (1)试剂不能与手接触。(2)要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，绝对不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，方可取用另一种试剂。(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将瓶放回原处。(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。 　　 另外取用试剂时应本着节约精神，尽可能少用，这样既便于操作和仔细观察现象，又能得到较好的实验结果。

[table][tr][td][size=3]霸王的洗发水中出现的二恶烷有毒物质，什么是二恶烷？它又会对人体产生什么样的危害？ 二恶烷，有机化合物，别名二氧六环、1，4-二氧己环，无色液体，稍有香味属微毒类，对皮肤、眼部和呼吸系统有刺激性，并且可能对肝、肾和神经系统造成损害，急性中毒时可能导致死亡。主要用作溶剂、乳化剂、去垢剂等。 二恶烷在中国化妆品标准中用量又是怎么规定的？根据2007年卫生部颁发的《化妆品卫生规范》要求， 1、4-二氧杂环己烷属于化妆品中禁止使用物质。具体见2007年卫生部颁发的《化妆品卫生规范》中表2(1)化妆品禁用组分441条(第20页) 。对原料带入1、4-二氧杂环己烷量未见相关规定。国家食品药品监管局就此指出，2007年2月，卫生部曾就现行化妆品法规中禁用物质的概念专门作出了解释，我国[/size][url=http://www.csres.com/detail/69640.html][color=deepskyblue][size=3]《化妆品卫生标准》[/size][/color][/url][size=3]（标准详情：[/size][url=http://www.csres.com/detail/69640.html][color=deepskyblue][size=3]http://www.csres.com/detail/69640.html[/size][/color][/url][size=3]）和《化妆品卫生规范》规定的禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品的物质，如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，则化妆品必须符合[/size][url=http://www.csres.com/detail/69640.html][color=#800080][size=3]《化妆品卫生标准》[/size][/color][/url][size=3]和《化妆品卫生规范》对化妆品的要求，在正常、合理、可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害。 到底霸王的洗发水是人为添加二恶烷还是原料上面无法消除而带进去的呢？这个问题大家一起探讨探讨![/size][/td][/tr][/table]

苯（一）理化性状和用途无色液体，具有香味。沸点：80.2℃，闪点：-11℃，自然点：574℃，蒸汽密度：2.7，爆炸极限1~8%，微溶于水。用于制造染料、塑料、纺织品、去垢剂、涂料、和其他化学物质。还用作涂料和粘合剂在汽车中少量存在，工业用途正在减少。（二）毒性属中等毒性。急性：损害神经系统，慢性：主要损害造血系统。最高容许浓度：40㎎/m3(三)短期过量暴露的影响吸入：在50~150ppm内暴露五小时能致头痛和乏力，在200~500ppm内暴露一小时能致恶心、头晕、精神混乱；在300~ppm时暴露30~60分钟能刺激鼻和喉，在7500ppm时暴露30分钟能致死亡。眼睛接触：高浓度蒸汽能产生轻度刺激和水疱.液体会产生轻度的灼伤感。皮肤接触：流体能溶解皮脂而干燥。口服：产生类似吸入的症状,液体流进肺部能造成严重伤害。(四)长期暴露的影响苯对造血系统会造成危害，可致贫血、感染、皮下出血。长期低浓度暴露会伤害听觉等，引起头痛、头昏、乏力、苍白、视力减退和平衡失调等。在长期、严重暴露后不会有遗传影响。(五)火灾和爆炸高度易燃性，有严重火灾危险品。用干粉、泡沫灭火剂、二氧化碳灭火。蒸汽能沿地平面流动到火源处并回火，属于甲类火灾危险物品。(六)化学反应性正常稳定。接触强氧化剂(如硝酸)，会增加火灾危险。(七)人身防护吸入：蒸汽或烟雾浓度不明或存在可检测出的浓度时应戴有褐色色标滤毒罐的防毒面具。皮肤：如需要应使用手套、工作服、工作鞋。工作场所应备有安全沐浴和眼睛冲洗器具。眼睛：戴用化学防溅镜或面罩。(八)急救吸入：脱离苯产生源或搬移患者至新鲜空气处，如患者停止呼吸应进行人工呼吸。眼睛接触：使眼睑张开，用生理盐水或微温的缓慢的流水冲洗患上眼至少20分钟。勿让污水浸入未受伤的眼睛。皮肤接触：脱去受污染的衣服，立即缓和地抹去和擦去残余物质，缓和、充分地用水和无摩擦性肥皂洗涤。口服：用水充分漱口，不可催吐，给患者饮水约250毫升。如呕吐发生应使患者身体前倾并重复给水。一切患者都应请医生治疗。(九)储藏和运输遵守储藏和运输易燃物质的规则，储藏于蜜封的置于地面上的容器内，放置在有通风设备的阴凉地方，避免阳光直晒，远离禁忌物与热源，采用无火花的通风系统和电气设备。包装号2（甲）6。(十)安全和处理只受过训练的人员才能从事清理工作，保证提供良好的通风设备。使用良好的防护服装和呼吸器。如可能应杜绝和减少泄漏，用黄砂及其它惰性物质来吸除少量溢出物，放置于有盖的容器内。用水冲洗工作场所，遵守环境保护法规。

在免疫测定及其他生物医学研究中，加样器的使用离不开一次性的塑料吸头，尽管一次性塑料吸头的使用增加了实验费用，但降低了实验技术人员接触传染性病原体及有害实验材料如放射性核素的可能性，并且避免了吸头多次重复使用所必需的清洁过程和腐蚀性去垢剂的使用。此外，在有些应用上，如PCR测定中，吸头必须是一次性的，以避免潜在污染发生的可能性。加样器根据使用的要求，也在不断发展。如可整体高压灭菌加样器的出现。使用UV线稳定的塑料制作加样器对于加样器在许多方面的应用非常重要，使得在实际工作中，在超净台或抽风柜的紫外线照射杀菌中，不必担心置放其中的加样器会因紫外线的作用而损坏其制作材料，进而影响加样功能。加样器根据其加样的物理学原理和结构的不同，其应用特点也有所不同。活塞正移动加样器无需任何校正，即可用于具不同化学组成和特性(密度和黏度)的液体的吸取加样；相反，空气垫加样器的使用则较受局限。具有高蒸汽压的液体如氯仿使用空气垫加样器吸取加样通常不能得到跟吸取加样蒸馏水相同的准确度和精密度。由于在液体吸取过程中有部分蒸发，因而加样的体积就会有所减少。可通过预先用液体湿润吸头数次，使得蒸汽相被液体饱和，可以改善加样的准确度。除此以外，为防止由高蒸汽压引起液体从吸头中漏出，可使用在底部有瓣的吸头，此瓣只在其与管壁接触的时候打开。使用空气垫加样器加样，位于液体之上的空气体积的膨胀依所加液体密度的不同而不同。当吸取密度高于水的液体时，吸人吸头的体积太低。例如，对于一个密度为1．1的较高浓缩的液体，误差的量将达到o．2％。而吸取较稀的水溶液的这种误差则可以忽略不计。因此，在吸取密度高的液体时，须对加样器吸取体积的设定作相应的校正，才能保证取到正确的体积。然而，在实验室实际工作中，加样器使用者很少碰到要准确吸取密度很高的液体的情况，故由于液体的密度所致加样器使用受限的情况通常难以遇到。

牙膏的泡沫不是越多越好，去垢成分可能有害口腔卫生健康。由第四军医大学口腔医学院完成的一项实验研究显示，牙膏中常用的去垢成分十二烷基酸钠(SDS)对人体健康存在潜在危害。而中国牙膏生产的相关技术标准尚未对这一指标进行规范。参与研究的专家建议，应当对牙膏尤其是儿童牙膏制定并强制推行相应安全标准。　　这项由著名口腔内科学专家、第四军医大学史俊南教授等人进行的研究发现，长期使用含SDS牙膏可能对口腔黏膜及牙周组织造成损伤，但其毒性作用如何还有待于通过动物实验进一步证实。　　这一实验发现，牙周膜细胞在SDS浓度达到0.01%后，细胞活性与正常组比较明显降低；在浓度大于0.01%时膜细胞全部死亡；在小于0.0025%时对膜细胞生长有明显影响，可见SDS低浓度时对牙周膜细胞有明显的细胞毒作用。牙周膜细胞是牙周组织的重要组成部分，在牙周组织的发育、功能以及再生中发挥重要作用，具有趋化、黏附、增殖、生物合成、形成骨或牙骨质等矿化组织的能力。其损伤势必影响整个牙齿系统的健康。　　上海交通大学医学院副教授陈红也曾做过类似细胞毒性对照试验，同样证实了上述结论。“儿童使用牙膏时，容易漱口不净或误吞，因此对儿童牙膏的安全性有着较高的要求，应与普通牙膏有所区别。”陈红说。