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细胞自动计

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  • ThawSTAR细胞复苏仪—无水自动化解冻细胞“黑科技”
    前言:深低温下细胞出于“休眠”状态得以长期保存,解冻后需要维持较好的活率才能达到应用效果 ,细胞解冻需要一个”舒适“的温度范围,如何实现过程控温?如何有效安全解冻细胞?如何维持工艺可重复?今天小编向各位介绍一款全系列产品,它就是美国百奥莱BioLife公司开发的ThawSTAR细胞程序复苏仪,一直被业内视为解锁细胞解冻工艺黑科技产品,ThawSTAR可以轻松实现细胞自动化解冻,标准工艺高度重复,解冻安全、操作方便、性能稳定!一、ThawSTARTM CFT系列细胞复苏仪(冻存管专用)2021年6月23日CFDA正式批准由复星凯特引进美国Kite的嵌合抗原受体CAR-T细胞治疗产品奕凯达(阿基仑赛注射液)上市,该药品为中国首个获批上市的细胞治疗产品,行业士气颇受鼓舞,9月3日,国内第 2 款CAR-T! 药明巨诺 “瑞基仑赛注射液”获批上市 。一时间,朋友圈瞬间被刷爆,翘首期盼,艰辛付出,终于硕果累累!近二十年,随着世界生物技术快速发展,国内生物制药行业生机盎然,新的制药工艺不断引进与改进,免疫细胞靶向治疗已然成为实体肿瘤、癌症等决定患者生与死的最后救命稻草。对于采用“活体”细胞静脉注射的方式备受关注!白血病女孩Emily通过CAR-T疗法实现痊愈的故事,让患者再次看到希望。实际上,细胞解冻复苏需要一个“舒适温度”范围才能维持较好的解冻后活率,美国百奥莱BioLife 公司自2015年推出首款ThawSTARTM CFT系列细胞程序复苏仪以来,一直被视为业内黑科技产品,在无水干式的条件下自动化轻松解冻冻存管内细胞,而且维持与水浴一致的解冻活率,该款仪器设计小巧,操作简单,通过STARTM低温传感技术监控细胞样本解冻过程温度变化,可以在BSC生物安全柜内洁净度较高的环境中直接使用,相比传统水浴操作,ThawSTAR 解冻更安全、更稳定、更方便!ThawSTARTM 操作简单,流程如下:1. 连接电源启动仪器,预热至起始温度2. 垂直插入冻存管3. 仪器自动启动解冻程序4. 程序达到解冻终点后,冻存管弹出5. 取出样本后,轻轻晃动,冰晶消失。ThawSTARTM CFT系列细胞复苏仪订购信息,如下:二、ThawSTARTM CB系列细胞复苏仪(冻存袋专用)当前,已上市的几款CAR-T细胞药主要采用冻存袋灌装解冻,复杂且昂贵的生产工艺决定了其在终端市场的售价,此前,复星凯特阿基仑赛注射液被流出的药品销售订单来看,国内首款CAR-T疗法阿基仑赛注射液零售价为120万元/袋(约68ml),复星凯特相关负责人回复记者称,“公司CAR-T细胞治疗产品定价将根据价值、疗效、成本等各项综合考量制定,目前定价方案尚未最终确定,正在进行多方沟通中,希望可以惠及风多中国患者。” 但毫无疑问的是CAR-T细胞疗法确实很贵!(来源:资料图)(来源:资料图)CAR-T细胞疗法的全称是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法,其中CAR指的是嵌合抗原受体,它的原理在于先激活免疫细胞,然后再去杀死癌细胞,即利用T细胞来杀死癌细胞。针对冻存袋细胞给患者静脉注射前最关键的一步解冻复苏工艺,美国百奥莱公司开发了ThawSTARTM CB细胞程序复苏仪!为实现冻存袋细胞标准化解冻方式提供了新途径!ThawSTARTM CB细胞程序复苏仪是一款针对细胞冻存袋细胞标准程序解冻的复苏仪,针对25~1000mL 容量6个标准规格冻存袋,提供了12个标准的解冻程序,通过STARTM低温穿透传感技术,直接检测细胞样品温度,实时传感系统自动判断解冻结束终点,给细胞解冻时控温提供了有效途径,人性化的操作界面一目了然,密码登录,解冻过程温度数据记录,方便追溯。对于不同细胞剂量美国百奥莱厂家还可以提供订制化解冻程序服务,仪器整体设计结构紧凑,桌面型触摸屏操作,操作简单、安全、稳定。 同样,ThawSTARTM CB优化了操作设计,流程如下:ThawSTARTM CB细胞复苏仪,程序可选、操作简单、解冻安全!ThawSTARTM CB系列细胞复苏仪订购信息,如下:三、ThawSTARTM AT系列细胞程序复苏仪(冻存瓶专用)传统的细胞药主要采用冻存袋存储细胞并在临床上注射使用,但是,受冻存袋包材本身柔软等材料本身特性限制,无法自动化批量分装,液体残留偏高。最近十年,由比利时Aseptic Technologies公司研发生产的AT-Closed Vials可谓是火遍了全球生物技术靶向治疗行业,解决了小剂量分装,深低温冻存、同时也实现了自动化放大分装工艺。尤其干细胞用户群体普遍采用6mL的AT-Closed Vial,那么针对6mL规格的AT-Closed Vial 如何实现有效干式精准解冻呢?美国百奥莱公司早在2018年便开发了ThawSTAR AT6细胞程序复苏仪,并被国外多家知名免疫细胞公司所采用,通过订制化标定解冻过程温度执行程序,可实现自动且精准的判断解冻结束终点,操作简单,工艺高度重复,避免了人为主观判断解冻终点造成的细胞药“失效”!ThawSTAR AT6 细胞复苏仪对于不同剂量下,液氮与干冰冻存过的样本解冻时间表现对比,如下:ThawSTARTMAT系列细胞复苏仪有多款型号,订购信息如下:如果您需要申请Demo机试用,请抓紧联系我们吧!中国区授权总经销:上海朗喜工业科技有限公司
  • 原能细胞发布原能细胞全自动细胞复苏仪CR-100新品
    原能细胞全自动细胞复苏仪CR-100自动加水 精准控温操作简单 语音提醒系统预设+自定义复苏 一、产品简介CR-100是一款针对实验室和医院细胞复苏专门开发的,具有手动设置复苏水位和温度、细胞复苏信息追溯,语音和文字提醒等功能,能够精准控制复苏温度和水位。其选择运动结构采用曲柄连杆机构,稳定可靠。 二、产品特色l 自动加水 通过传感器检测,精准设置不同水位,自动加水,复苏时可以设置不能浸泡水位l 自定义操作 后台参数可设定(复苏温度、时间、转速、水位),复苏过程可暂停或终止l 系统预设操作 系统可预存常用细胞复苏种类,操作时直接选择一键复苏,节省时间l 数据传导绑定 可通过USB导出样本复苏信息,复苏参数与样本信息可进行有效绑定l 精准控温 PID算法控制的水温加热程序,水温精准可控l 语音提示 细胞复苏开始和结束具有语音提醒功能l 操作方便 触摸屏操作,菜单化页面,简单易上手l 排水功能 细胞复苏完成后,可视情况手动排水 三、产品参数设备尺寸(W*D*H)350*430*690 mm设备重量≤40kg水温调节范围25~70℃温度控制精度±1℃转速调节范围10~300RPM水位调节0~50mm额定功率1200W加热额定功率1000W1米外噪音<45dB创新点:原能细胞全自动细胞复苏仪CR-100 将实验室传统的水浴锅工作模式进行了自动化、程序化控制的改变,将手工作业设备提升为产业化、规模化专用细胞复苏仪器。原能细胞全自动细胞复苏仪CR-100
  • 镁伽CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪,为细胞分析保驾护航
    01 两种通量选择CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪镁伽CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪,以高通量细胞分析技术为核心,兼容台盼蓝、荧光(AO/PI)两种染色方式,能自动化完成细胞计数、活率检测及生长情况分析,实现高效率、高质量、标准化的活细胞在线检测。机型提供24位转盘和96孔板两种选择,支持进行自动化整合,充分满足多领域的细胞分析实验需求。全自动24通量细胞计数分析仪全自动96通量细胞计数分析仪 滑动查看更多 CCEasy的软件系统通过高精度视觉检测系统结合智能主动学习Al算法,能在短时间内对多细胞样本进行高精度识别和计算,为细胞分析和质量控制提供更加可靠的自动化解决方案!02 全流程自动化无需人工介入,让细胞计数分析更智能标准高效全程标准化检测,无需人工介入,兼容24位转盘或96孔板不间断连续测样;无需设置细胞参数,即可准确识别细胞状态和数量。快速灵敏解放双手,预置试剂包,无需人工混合染料与样品;检测耗时短,1min内即可完成单个样品的制备及检测。智能管理多级用户、多级权限管理,支持电子签名、电子记录存档,符合FDA21 Part11要求。降本增效内置可长期持续使用的检测池,无需一次性细胞计数板,帮助客户节省耗材成本。 细胞计数分析仪运行流程 03 数据验证符合GMP规范,细胞质量控制更可靠标准颗粒梯度测试结果通过CCEasy细胞计数分析仪测试多种稀释倍数下标准颗粒的数量,测试数据呈现良好线性趋势,R2高达0.998,表明CCEasy细胞计数仪具有良好的准确性和一致性。以下分别为镁伽CCEasy24通道细胞计数仪测试数据和96通道细胞计数仪测试数据。多细胞样本直径测定通过CCEasy细胞计数仪对多细胞样本的直径进行测试,结果显示,通过24通道和96通道的细胞计数仪测量细胞直径,两台设备测量结果偏差非常小,具有良好的重复性。
  • 全自动3D细胞培养的新标准
    自动化3D细胞培养、简化BIO CELLXCELLINK最新推出的自动化3D细胞生物学流程可促进肿瘤研究与药物研发的进展。▍升级自动化高通量、全自动的生物分配解决方案利用BIOPOD(按需生物打印)技术和预先设定和预先验证的协议,将 3D 细胞生物学的力量带到您的工作台上。▍易于操作该平台利用 BIOPOD 技术,将最先进的仪器与预先验证的内置协议和材料混合盒相结合,提供比市场上任何其他系统更易于使用的解决方案:即插即用-play用户体验。▍无细胞沉淀只需按一下按钮,墨盒就可以自动将细胞与水凝胶混合均匀。这种新方法可确保高细胞活力并自动中和胶原蛋白。▍轻松挤出水凝胶三个墨盒站中的每一个都提供从 0°C 到 60°C 的精确温度控制,可以轻松打印 ECM 水凝胶和胶原蛋白、GelMA 和 GelXA 等生物墨水。▍精确且可重复无论分配的材料如何,高精度正位移挤出系统每次都能提供可重复的结果。▍预先验证的协议,易于使用由科学家,为科学家使用预先验证的协议可以让您轻松制作 3D 细胞模型。预加载的详细计划涵盖从构造几何形状到生物材料选择再到分配设置的所有内容。此外,每个协议都包含上游和下游分析的分步说明,因此在您过渡到 3D 细胞培养时,您的工作流程中没有瓶颈。从系统上预加载的协议或作为基于云的更新提供的不断增长的协议数据库中进行选择。
  • 快速检测!NanoEntek自动细胞计数仪开启免费试用!
    在细胞生物学研究中,“细胞计数”是一道常规却又尤其重要的操作,可是从事细胞生物学研究的你是否有以下困惑?手工计数枯燥乏味,计数让人头晕眼花计数结果重复性差,数据可靠性大打折扣仪器设备不靠谱,结果准确性差......所以,实验室拥有一台自动细胞计数分析系统太重要啦!今天小编为大家隆重介绍一款靠谱的细胞计数仪新品——ADAM MC2 自动细胞计数仪。ADAM MC2 自动细胞计数仪(就是他!)ADAM-MC2是CAR-T细胞、干细胞等细胞治疗过程中,监测细胞数量、存活率及整个质控的理想设备。此外,在细胞治疗过程中,ADAM-MC2可以监测全血细胞、外周血细胞等细胞类型。精准测定和操作简便是他最大的特色!精准测量:该计数仪延续了NanoEntek以往产品的优质性能,同时采用高灵敏度荧光染料染色技术,结合LED光学和CMOS技术,能够大大提高细胞分析的准确性和可靠性,是自动荧光细胞计数仪的新标准。操作简单:可测量总细胞数、存活细胞数、死细胞数,并可显示存活率结果。结合一次性计数板,目前其操作非常简单、方便而又经济有效。生产商专业:这款细胞计数仪是业内知名的韩国公司NanoEntek研发推出。NanoEntek专注于细胞分析仪器的研发和生产,并于2006年韩国KOSDAQ上市。旗下细胞分析产品受到全球用户的广泛推崇。独家总代靠谱:本次活动的主办方是VWR(艾万拓)。该公司成立于1852年,作为一家全球性的制造商和分销商,是全球的实验室仪器设备、试剂、耗材供应商的领军者。2019年,VWR(艾万拓)正式宣布成为NanoEnTek细胞计数仪产品及耗材中国区独家总代理。好物需要分享~想拥有这台全自动细胞计数仪却还在头疼经费的同学看过来~价值30万的ADAM MC2自动细胞计数仪免费试用!而且,试用结束后,用户还可以特价购买他!心动了吗?仅限20台噢~先到先得!扫码提交信息即可申请噢~活动说明如下:产品名称:Nano Entek自动细胞计数仪试用名额:20名申请时间:即日起-2021/2/10用户规则说明:- 每个最终用户仅能试用一次- 试用结束后提供试用反馈表- 试用期间或者结束时,用户可以以特价购买该机器本次活动最终解释权归艾万拓威达优尔国际贸易(上海)有限公司所有。
  • 诚招全国各省Countstar自动细胞计数仪代理商
    艾力特国际贸易有限公司是一家专业代理全球高端实验室仪器设备的公司,拥有众多国际著名仪器品牌的总代理权公司为了更好更便捷的服务于全国各地的客户,已先后在上海、北京、广州设立分公司,并建立起了完善的售前售后体系和专业的技术支持团队,致力于为生命科学、生物工程、制药、精细化工、食品等领域客户提供最佳的产品和技术服务,让您的产品研发,生产过程控制,产品质量控制始终与世界同步。 我公司作为 Countstar自动细胞计数仪 全国总代理,诚邀全国各地的代理商加盟我们的团队,我们将秉承精诚合作、互惠互利的原则为每一位合作伙伴提供完善的服务和技术指导,实现双赢。 Countstar自动细胞计数仪是一款基于经典台盼蓝染色法原理开发,采用最新的光学成像技术和智能图像识别技术,能快速准确进行细胞计数、细胞形态检测和细胞统计图分析的实验室通用仪器。Countstar自问世以来,以其卓越的性能受到用户的一致好评。产品特性:快速自动化检测:20ul样本,20s内完成单个样本检测,自动检测细胞浓度。宽广的适用范围:5-180um大小的各种哺育动物细胞、昆虫细胞、部分浮游动物都均可适用。准确清晰的结果:520万专业级彩色成像、大范围样本采集、固化焦距保证结果准确性。全面的参数分析:从浓度、活率、直径、圆度、团聚等指标全方位考察细胞变化,自动生成细胞生长曲线和统计图表。数据储存和输出灵活:数据结果自动储存,并可通过JPEG、PDF和EXCEL格式输出。耗材成本经济节约:一片5槽的设计,提供实验结果的平行性检测,最大化节省实验成本。 更多详细产品信息请登录艾力特国际贸易有限公司网站www.alit.com.cn地址:上海市闵行区紫秀路100号(虹桥总部1号)4号楼3D室联系电话:021-62299622/62297958/62290336全国客服专线:400-820-2912
  • 高效构建hiPSC系的全自动化神器,单细胞可视化分选培养系统,让单细胞培养不再复杂!
    人类诱导多能干细胞 (hiPSC) 是一类通过基因编辑技术(如 CRISPR-Cas9)对已经高度分化的人体细胞重新逆分化得到的多能性干细胞。hiPSC的出现为科学家构建复杂的疾病模型和推进药物发现提供了有利的工具。 然而,传统的hiPSC细胞系的构建与培养过程往往操作复杂且耗时耗力。特别是从异质编辑细胞池中构建的克隆hiPSC系的培养受到了传统细胞培养方法的桎梏,很难构建一个高效的hiPSC构建与培养工作流程。此外,现有的单细胞分离和培养方法通常对细胞的处理条件苛刻,操作步骤繁琐,不能充分保证单克隆性。 为应对hiPSC细胞系构建与培养过程中的诸多挑战,IotaSicences公司采用了以GRID技术为核心的高度自动化的单细胞可视化分选培养系统isoCell来构建 hiPSC系的分选与培养平台,并在不同培养基条件下对hiPSC进行了单细胞分选与培养研究。图1 单细胞可视化分选培养系统isoCell实物图 以isoCell为核心的hiPSC细胞分选与培养平台 isoCell是一款基于GRID技术的高度自动化细胞分选与培养平台。GRID是指在细胞培养基上采用FC40液体分隔出的网格小室,体积小,光学透明度高,可以容纳细胞在内生长,且各个小室之间物质不流通。isoCell系统配备了荧光和成像系统,用于在整个克隆工作流程中记录 GRID 小室的图像(见下图)。isoCell 可自动执行所有液体处理步骤,包括构建 GRID、将单细胞注射到GRID小室中以及交换培养基和收获单克隆集落。并且,isoCell可在整个工作流程中自动检测每一个 GRID 小室,并确保每一个单克隆hiPSC细胞系来源于单个细胞。 图2 GRID实物图 材料与方法 在分别铺了Laminin-521、Vitronectin-N和iMatrix 细胞培养基质的60毫米培养皿上制备的GRID网格以待使用。制备hiPSC的单细胞悬浮液,并使用 isoCell全自动地将细胞铺在GRID上(种植)。 使用isoCell自带的显微镜鉴定每个GRID室并标记每个包含单个细胞(第 0 天)的室,将该培养皿放入培养箱培养。在第3天,将标记的含有单个细胞的GRID小室加满600 nl培养基。从第5天开始,每天观察标记单细胞的GRID小室,并对选中的GRID小室补充培养基。最后,使用isoCell观察并标记构成了hiPSC单细胞群落的GRID小室,使用isoCell全自动收获标记的GRID小室中的hiPSC细胞(通常在 6-8 天之间)。 图3 以isoCell为核心的hiPSC细胞分选与培养平台工作流程图 高效的hiPSCS细胞分选与培养平台 按照上述的工作流程,利用三种不同的培养基质(包括 VTN-N、LMN-521 和 iMatrix)构建并培养了两个独立的hiPSC细胞系,并评估所得细胞的克隆效率。如图4所示,两个不同的hiPSC测试系在不同培养基质条件下,均在GRID室中显示出非常高的克隆效率,这表明采用GRID小室低容量培养方法和细胞的自动化温和处理可产生非常适合单细胞高效生长的培养环境。 图4 GRID中的单细胞 hiPSC 克隆效率(克隆效率表示培养第5天时单细胞长成细胞群落数占第0天单细胞数的百分比) 结论 以isoCell构建的hiPSC细胞分选与培养平台可以对hiPSC细胞进行全自动化且温和地单细胞分选与培养。通过isoCell特有的GRID小室网格技术与可视化分选相结合,可以确保每一个单克隆hiPSC细胞系均来自单个细胞,且isoCell的分选与培养条件温和,hiPSC单克隆细胞系成活率高。 单细胞可视化分选系统isoCell的优势:- 全自动化流程- 操作条件温和,对单细胞无损伤- 全培养、分析流程可追踪- 单细胞分离效率高达100%- 单克隆细胞系构建成活率高- 直接转移到PCR管或96孔板- 结构紧凑,体积小 单细胞可视化分选培养系统-isoCell已在Cell、Advanced Science、Small Methods、Nature Communications等知名期刊发表多篇文章,如下摘引了近年五篇具有代表性的文献和大家分享。 Soitu C, Stovall‐Kurtz N, Deroy C, et al. Jet‐Printing Microfluidic Devices on Demand[J]. Advanced Science, 2020, 7(23): 2001854.Gangoso E, Southgate B, Bradley L, et al. Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[J]. Cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.Deroy C, Nebuloni F, Cook P R, et al. Microfluidics on Standard Petri Dishes for Bioscientists[J]. Small Methods, 2021, 5(11): 2100724.Deroy C, Wheeler J H R, Rumianek A N, et al. Reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.Oliveira N M, Wheeler J H R, Deroy C, et al. Suicidal chemotaxis in bacteria[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7608. 样机体验 为更好地服务中国科研工作者,Quantum Design 中国也建立了样机演示实验室,将为大家提供为专业的售前、销售、售后技术支持,欢迎各位老师垂询! 用户名单 用户评价 路易莎埃姆斯,研究科学家:The Native Antigen Company(LGC 临床诊断集团旗下公司) “使用 isoCell 进行单细胞克隆工作从一开始就简单可靠,并且已无缝地融入我们的流程中。 该程序对细胞很温和,我们看到非常好的存活率,可以筛选大量克隆。 我们收到的客户服务是优质的。”
  • 荆杰博士团队研发“全自动免疫细胞体外扩增系统”,助力细胞类生物制品临床、科研应用
    第二届中国国际医学转化创新创业大赛总决赛已经落下帷幕,荆杰博士团队研发的“自动化无人细胞培养机器人系统”获得二等奖。据悉,荆杰博士团队拥有世界上首台全自动免疫细胞体外扩增系统的专利权,从而为免疫系统治疗的标准化及工业化奠定了基础。该系统可实现自动化的细胞培养和扩增,在培养细胞数量、所需时间、成本等方面大大优于传统的人工和半自动培养方法,具有规模化、标准化和低成本三大优势。与其他传统培养方式相比,扩增效果提高100-1000 倍,同时节省40-60%的培养液、生长因子和细胞因子,操作界面易操作,培养程序可优化。自动化细胞培养系统利用自主研发的,基于中空纤维管的灌注式生物反应器,细胞可以在模拟人体脉管结构的仿生环境中完成可控的生长代谢过程。赛尚推出的自动化台式ACCS-χ1 细胞培养系统能够为细胞、蛋白和病毒的规模化生产维持稳定、经济和可扩展的细胞培养。通过使用一次性耗材,ACCS-χ1 细胞培养系统显著减少了对空间和人工成本的需求,缩短细胞扩增的处理时间,并且大大降低了细胞污染或人为错误发生的可能性。据了解,浙江赛尚医药科技有限公司(以下简称“赛尚”)是由荆杰博士携自主知识产权在2011 年创立,公司主要生产全自动全封闭细胞培养系统设备及相关周边设备,提供自动化细胞体外培养系统(Automated Cell Culture System)的研发、生产、销售及相关细胞培养技术服务。主要解决细胞类生物制品在临床应用或实验研究中所面临的三个与规模化细胞培养密切相关的问题:劳动密集,耗时的重复细胞培养工作量;高成本的补充生长因子,长时间的细胞培养工作;细胞,病毒和抗体批次制备之间的差异。
  • CYTORECONT细胞自动计数分析仪即将上市!
    GEHC China 于11月底完成与日本ECI公司CYTORECONTM产品独家经销授权之签订。经销范围包含中国,香港台湾三地。由日本ECI 公司研发的细胞自动计数分析仪—CYTORECON,透过CCD影像撷取与软件分析,可自动计数细胞,其步骤简单,只需将少量 不 需稀释的细胞悬浮液注入Disk中,CYTORECONTM 即可完成计数,并计算细胞浓度 ,节省 自行 计算的麻烦。CYTORECONTM 使用抛弃式的样品盘 (Disk),可计数二十个检体,省去清洗血球计数盘的麻烦,又可避免生物性污染的发生。CYTORECONTM 的图像分析软件是利 用细胞之形状及颜色深浅判断是否为细胞,具有较客观的判读标准,不 因不 同人员操作而有差别,可大大降 低人为误差。CYTORECON特点:1) 软件辅助自动细胞计数分析及存活细胞判别,测量客观快速2) 测量体积仅需11uL 3) 采用特制样品盘,无须系统清洗步骤,完全排除样品污染4) 分析参数: 活细胞数目及浓度,死细胞数目及浓度,总细胞数目及浓度,细胞存活率。5) 体积小巧,易于操作维护 6) 可保存细胞图像做日后参考screen.width-300)this.width=screen.width-300"
  • 诱导多能干细胞克隆效率低?这台温和、自动化的单细胞分选系统帮您搞定,分离效率高达100%!
    人类诱导多能干细胞(hiPSCs)是一类可用于疾病建模、药物开发和组织工程领域的多能诱导干细胞。与CRISPR-Cas9等功能强大的基因编辑技术结合后,可根据不同患者的特性进行疾病相关遗传变异的研究和识别。 然而,培养hiPSCs的步骤较为繁琐,细胞对异常的处理和操作非常敏感,任何操作的问题都有可能导致细胞和遗传毒性应激的积累,进而导致不良分化和多能性丧失。基因编辑建立单细胞衍生的hiPSC克隆过程中常用的技术往往过于复杂或粗暴,导致单细胞克隆效率低下。此外,它们在确保衍生培养物单克隆性方面存在局限性。为此,英国iotaSciences公司推出了可实现100%单细胞分离的isoPick单细胞可视化分选系统,有效解决了培养hiPSCs单克隆过程中的困难。 如右上图所示,单细胞可视化分选系统isoPick采用纳升级的网格式单细胞腔室技术(GRID技术),可实现高通量、高自动化的单细胞可视化分选;确保分选所得的单细胞样品中只有一个单细胞,结果可验证、可追踪;分选过程非常温和,能够确保更高的单细胞存活率,达到更佳的克隆生长效果。单细胞可视化分选系统isoPick可全自动进行单细胞的分选、拾取并转移1.5 µ l至200 µ l的液体至PCR管或96孔板中。 使用isoPick从GRIDs内分选hiPSC单细胞置于Laminin-521,Vitronectin-N, Synthemax和iMatrix (Laminin-511)4种不同基质且含有培养基的96孔板中。以第7-10天内的时间计算得出的单细胞克隆效率可以发现,无论使用的包被基质或hiPSC细胞系,平均克隆效率均70%(上图),明显高于其他通常使用的方法(包括FACS),表明isoPick对敏感单细胞的温和处理,能够确保细胞的高存活率和更好的克隆生长效果。 isoPick使用户能够以快速、高效、自动化的方式从多样、异质的细胞群体中分离单个细胞。GRID腔室非常适合用于观察和记录单个细胞的分离过程。 用户可将单个细胞分离并直接置入96孔板用于细胞克隆。相比传统方法,这种方法用简单的线性工作流程,显著提高了细胞分离与克隆效率,操作流程高度自动化,可以将样品无缝衔接单细胞组学的后续操作。单细胞可视化分选系统的优势:全自动化流程操作非常简单 对细胞无损伤结果可追踪分离效率高达100%直接转移到PCR管或96孔板结构紧凑,体积小巧文献举例: 单细胞可视化分选系统相关文献发表于Cell、Advanced Science、Small Methods、Nature Communications 等期刊,如下摘引了近年三篇具有代表性的文献和大家分享。Soitu C, Stovall‐Kurtz N, Deroy C, et al. Jet‐Printing Microfluidic Devices on Demand[J]. Advanced Science, 2020, 7(23): 2001854.Gangoso E, Southgate B, Bradley L, et al. Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[J]. Cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.Deroy C, Nebuloni F, Cook P R, et al. Microfluidics on Standard Petri Dishes for Bioscientists[J]. Small Methods, 2021, 5(11): 2100724.Deroy C, Wheeler J H R, Rumianek A N, et al. Reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.Oliveira N M, Wheeler J H R, Deroy C, et al. Suicidal chemotaxis in bacteria[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7608.样机体验: 为更好地服务中国科研工作者,Quantum Design 中国引进了单细胞可视化分选系统-isoPick样机,将为大家提供为专业的售前、销售、售后技术支持,欢迎各位老师参观试用!
  • 青岛能源所开发智能化、自动化的微生物单细胞分选仪
    单细胞分析已成为生命科学的有力工具,原位样品在单个细胞精度的识别、分选、测序/鉴定对于深入解析微生物组的结构和功能具有重要作用。青岛能源所单细胞中心与青岛星赛生物合作,成功开发微生物单细胞自动分选系统EasySort AUTO,可将常规显微镜升级为微生物单细胞的智能化、自动化分选装置,并利用酵母和大肠杆菌细胞示范了单细胞分选—测序/培养的全流程,为微生物资源的探测和挖掘提供了有力手段,该研究成果近日发表于《微生物》mLife杂志。 EasySort AUTO的“慧眼”和“巧手”服务微生物组资源挖掘   微生物组(亦称菌群)在自然界及人体中无所不在,它们蕴含着精准健康、碳减排、环境保护、清洁能源等当今人类社会重大挑战的解决方案。然而,微生物细胞尺寸小,操控难度大,单个细胞的识别与分选极具挑战性;同时,菌群中的庞大的细胞数量让原位、单细胞层面的菌群研究对于自动化、高通量的需求尤为迫切。   针对上述问题,单细胞中心刁志钿博士、阚凌雁工程师、赵怡龙工程师带领的研究小组,基于青岛星赛生物的单细胞微液滴分选系统EasySort Lego,开发了新一代人工智能辅助的微生物单细胞自动化分选系统EasySort AUTO。经测试,系统搭载的AI辅助图像识别算法可以智能化、自动化地识别目标细胞,准确率达80%;系统嵌入的光镊技术可以捕捉并精准操控目标细胞;最后,基于界面接触的微量液体分离专利技术,目标细胞能够以单管单细胞(One-Cell-One-Tube)的形式自动收集于PCR管中,通量为~120细胞/小时,单细胞率高于93%。该系统分选的目标单细胞可以直接开展单细胞测序、培养等工作,单细胞测序成功率高于84.2%,酵母细胞和大肠杆菌单细胞培养的成功率分别为~85%和~80%。   此外,EasySort AUTO的设计还具备三个显著特点:1)广谱适用性,由于光镊可以操控不同尺寸的细胞,该系统广泛适用于各类单细胞的分离、分选、培养及测序实验;2)灵活性,该系统采用模块化的设计,可通过安装“巧手”—光镊模块和自动收集模块,将生物实验室常见的正置显微镜升级为单细胞分选装置;3)高活性保持,分选后的目标细胞具备较高的活性和DNA/RNA质量。   单细胞中心长期致力于微生物单细胞技术开发、装备研制和产业化,前期和青岛星赛生物合作已陆续推出高通量流式拉曼分选仪(FlowRACS)、临床单细胞拉曼药敏快检仪(CAST-R)、单细胞拉曼光镊分选仪(RACS-Seq)、单细胞微液滴分选系统(EasySort)等产品,并已进入市场。作为EasySort仪器系列的新成员,EasySort AUTO的设计聚焦在为显微镜的“慧眼”提供一双自动的“巧手”,使得显微镜可以智能化发现目标单细胞,并自动化分离获取。基于上述创新,EasySort AUTO系统将以便捷的操作、灵活的组装、自动化的细胞收集、目标细胞的高活性保持等优势为微生物单细胞的分选工作提供特色解决方案。   该工作由单细胞中心马波研究员和李远东工程师主持,与青岛星赛生物合作完成,得到了国家重点研发计划的资助。
  • Leica的宠儿——PAULA(细胞培养个人自动实验助手)
    可能很多人对Leica的产品PAULA(Personal AUtomated Lab Assistant)相对陌生,此产品的推出被Leica高层极度重视,被视为“掌上明珠”。PAULA是一款与客户共同设计开发的用于细胞培养实验室常规应用的数字细胞检测仪,是世界首台细胞培养个人自动实验助手。PAULA是可以放置在细胞培养箱中的小型倒置荧光显微镜,具有相差和红绿两色荧光的观察功能,在平板中直接下载APP进行连接观察和使用,可以实时进行实验的分析和检测为下游实验获取最佳细胞提供保障。细胞实验中无法进行样本的实时监测、对细胞计数的不准确和浪费时间、细胞状态不适用于下有实验、缺乏细胞的生长曲线以及转染蛋白的表达水平等问题会一直环绕在每一个实验操作者的身边。PAULA的出现这些烦恼将不再存在。PAULA部分功能简介使用用户管理模式进行使用:Administrator, Standard User, Guest (只能拍照)三种用户类型进行使用,有效地管理和使用彼此之间的实验数据,保护实验数据的安全。管理员身份可以对其他账号进行管理和查看,及时进行实验的指导和完善。数据自动命名:根据培养的细胞系种类和实验人员姓名来对细胞培养瓶进行命名,该命名会自动匹配到所拍摄的图片、视频、分析结果等等。并且配有条形码、二维码的扫描功能,准确的记录观察样本的信息。样本信息记录集成化数据库:所有数据都储存在电脑中具有备份功能、所有信息一目了然、具有过滤功能并且可以直接将结果导出到Excel中。集成化数据库Audit trail:操作记录可查,数据结果可被归为文档格式实验操作查询PAULA中含有分析模块,可以直接对样本进行分析和检测,抛弃只能人工目测检测的方法,使实验更佳严谨和专业:细胞融合度检查:没有PAULA之前只能靠目测进行估算,这种方式缺乏规范性、并且误差较大,很容易会对下游实验造成不良影响。PAULA可以进行自动快速检测,进行保存,并且可以绘制生长曲线、划痕实验检测,通过邮件提醒功能得知实验已经完成,不用担心样本的生长状态不适合而导致实验失败。细胞融合度检测和划痕实验检测转染效率检测:将外源基因导入样本细胞中对带有荧光细胞和总细胞数的检测,从而进行转染效率分析。转染实验和HELA细胞转染图北京德泉兴业商贸有限公司为徕卡授权代理商。徕卡显微系统是显微镜和科学仪器领域的全球先驱。十九世纪,公司从家族事业起步,如今成为全球知名企业,以无可匹敌的创新精神铸就辉煌历史。与科学界一贯的紧密合作是徕卡显微系统创新传统的关键,从而将用户的想法付诸实践并根据用户需要为其量身定制解决方案。徕卡显微系统的全球运作分为四个部门,它们均已成为其各自领域的领头羊:生命科学部门、工业部门、病理系统部门以及医疗显微镜部门。徕卡病理系统是一家自主运营的公司,为组织病理学实验室提供丰富多样的产品,适用于组织学中的每一步工作,并帮助提高整个实验室工作流程的生产率。公司在全球 100 多个国家设有代表处,在 7 个国家设有 12 家制造厂,在 19 个国家设立了销售和服务机构,并且具有全球性的代理商网络。公司总部设在德国的韦茨拉尔 (Wetzlar)。
  • 2022 AACC | 帝迈全自动血细胞分析仪新品登场
    7月26日,第74届美国临床化学年会暨临床实验医学博览会(2022 AACC)在美国芝加哥举行。帝迈首席运营官COO霍子凌女士带领国际营销团队如期赴约。作为AACC的老朋友,帝迈带来全新推出的全自动血细胞分析仪DH-615,邀请来自世界各地的现场观众先睹为快。当检验邂逅AI将会碰撞出哪些精彩火花?帝迈紧贴临床和用户需求,不断挖掘血细胞分析仪的应用价值,率先将AI技术应用于五分类血细胞分析领域。展会现场,全球新老客户纷纷来到帝迈展台,对DH-615的AI功能一探究竟。DH-615系列全自动血细胞分析仪,采用AI Cube 核酸荧光染色三维分析技术,并创新引入AI辅助分析技术,针对血常规繁多的检测信息进行综合分析,以图文的形式直观呈现血液疾病风险预警,并提供临床诊断分析依据,帮助临床医生快速准确解读报告,从而为恶性血液性疾病筛查判断助力。同时,DH-615实现微量血五分类+网织红细胞全自动检测,异常样本自动回退复检,无需人工干预。全自动末梢血智能检测,省心省力,支持模块化拓展,提供多形态解决方案,提高流程自动化,保证TAT时间。帝迈始终希冀通过自主研发的创新医疗技术和产品,为全球医疗贡献高效的“中国方案”,与国内行业同仁一道肩负中国品牌形象,彰显中国品牌硬核实力。本次展会,帝迈全新动物医疗系列产品也强势登陆AACC。DP-H10VET、DP-C30VET、DF56VET在现场接受新老客户检阅。新技术、新突破、新产品,2022 AACC仍在继续,帝迈展位841,期待您的莅临!迄今,帝迈已服务全球120多个国家和地区,通过日趋完备的联检产品解决方案,为医疗机构提供优质的产品与服务,以创新医疗呵护生命健康
  • 美国Etaluma全自动活细胞成像系统厂商来访参观交流
    2018年10月23日,美国Etaluma CEO Chris Shumate, PHD来访锘海生命科学。Etaluma公司的全自动活细胞成像系统Lumascope可广泛应用于各类活细胞,细胞球体,组织,切片,微流控,细菌,活体成像。Dr. Shumate 给大家进行了专业的显微成像原理,Etaluma对比传统显微镜的优势,以及应用方向等的培训。大家就建立市场合作、了解中国客户需求、在各地高校进行巡回演讲等进行了深入的探讨和学习交流。关于Etaluma全自动活细胞成像系统 Lumascope美国的etaluma公司的全自动活细胞成像系统Lumascope,还可以放入培养箱内进行长时间的活细胞成像观察,保证细胞稳定的生长环境。同时也适用于观察动物、植物组织以及活体。形态小巧可便携式携带,可放入超净台中,自由组合度高。它光路设计简单,灵敏度高,成像质量好,媲美传统共聚焦显微镜。同时该显微镜可以做三色荧光(红、绿、蓝),物镜选择范围1.25X-100X,支持Z轴成像。支持培养皿,培养瓶,载玻片以及微孔板,并且通可以做1536板。其配套显微成像分析软件Lumaquant操作简单,功能强大。Lumaquant可以帮您实现在荧光,在相差和明场成像中2D以及长时间2D图像的分析,可实现检测和跟踪物体(细胞,细胞核,颗粒等)。欢迎参加慕尼黑生化展,现场测样!案例分享BPAE细胞里的DNA,alpha微管蛋白,以及F-肌动蛋白使用LS620拍摄的BPAE细胞里的DNA(蓝),alpha微管蛋白(绿),以及F-肌动蛋白(红)。使用奥林巴斯40x镜头,LifeTech FluoCell slide #2。 小鼠肾脏组织切片细胞球体形成心肌细胞钙流信号检测相差成像关于锘海:锘海生物科学仪器(上海)股份有限公司(Nuohai Life Science)成立于2004年,总部设在上海,并陆续在北京,广州,成都等地设立了8个办事处。锘海致力于提供先进的实验/研究与生产仪器、相关试剂耗材, 并提供专业的应用和技术服务支持。不断促进生命科学领域新技术发展,及时引进国外最新的技术和产品。同时,锘海生命科学为科研及企业客户提供全方位的CRO/CMO 服务,满足产业中的研发和生产需求。
  • 技术线上论坛|5月25日《如何实现自动化、高通量单细胞力谱测量?单细胞显微操作技术一步搞定!》
    [报告简介]单细胞粘附力作为生物机械学分支的重要组成部分,是细胞与外周相互作用的直观体现,能够有效的反映出细胞与基质或细胞之间相互作用能力。细胞与基质之间的作用力十分微小,一般都在nN别,过去通常使用原子力显微镜才能够进行测量。但是原子力显微镜方案往往具有通量低,操作繁琐等问题,使得单细胞力谱的研究非常繁琐。基于此,Cytosurge推出的全新多功能单细胞显微操作FluidFM技术给细胞力谱测量带来了新的希望。该技术结合了的原子力显微镜探测技术与微流体控制系统,能够直接通过使用中空的原子力探针将细胞通过负压抓取在探针表面,并不需要激活细胞的任何通路信号,为粘附力的测量带来了大的优势。一方面,这种方法能够提供远比蛋白结合牢固的多的粘附力,能够将细胞牢固的固定在探针上并且无需包被探针。另一方面,由于没有生物化学处理,这种方法不会改变任何细胞表面的通路,从而能够得到接近细胞原生的数据。该系统具备高度自动化,能够快速,全自动的完成力学的测定,让单细胞力谱研究变得十分容易。本报告将介绍FluidFM单细胞显微操作技术的原理和发展,并结合多篇发表在期刊Nature、Cell、Bioactive Materials等上的近科研成果,深入阐述这种技术在单细胞力谱测量方面的新进展。[直播入口]请扫描下方二维码进入FluidFM单细胞显微操作技术群,届时会在微信群中实时更新直播入口,无需注册!扫码进群,即刻获取直播链接,无需注册![报告时间]05月25日 下午15:00-16:00 [主讲人介绍]Tamás Gerecsei 亚太区席应用科学家,高FluidFM解决方案工程师,Cytosurge AGTamás是一位生物物理学家,毕业于Etvs Loránd(ELTE罗兰大学)。 在与FluidFM在学术环境中合作多年后,他加入了Cytosurge公司,成为了一名训练有素的微纳米系统工程师。在Cytosurge AG,Tamás不断推动并拓展FluidFM技术的应用边界,并使FluidFM技术应用于各地研究人员的课题中。您可以经常发现他在各种专业的学术会议上传播关于Cytosurge和FluidFM技术的信息。 郭亚茹 北京大学口腔医院,口腔医学中心,获中国博士后科学基金,并入选北京大学医学部 2021年博雅博士后项目,在Advanced functional materials、Bioactive Materials、Journal of dental research等杂志上以作者或共同作者的身份发表5篇。 2021年,在Bioactive Materials发表了题为:Matrix stiffness modulates tip cell formation through the p-PXN-Rac1-YAP signaling axis的研究文章,报道了基质硬度通过p-PXN-Rac1-YAP信号轴调节细胞形成,这项工作不仅有助于在组织工程和再生医学中寻找佳材料,也为肿瘤治疗和病理性血管再生提供了新的治疗策略。在生物材料设计和治疗一些病理情况方面具有特殊意义。本实验研究人员采用了多功能单细胞显微操作系统——FluidFM技术,实现了单个细胞的分离,单个细胞粘附力的测量。 [原理&应用简介]FluidFM技术如何测定细胞粘附力?众所周知,细胞在基质上进行单层培养时,吸附在基质表面时主要会产生两种不同类型的力,一种是细胞与基质之间的粘附力,另一种是细胞与细胞之间的粘附力。因此对于细胞粘附力来说,单个细胞的粘附力就是细胞与基质之间的作用力。而单层细胞的细胞粘附力则是细胞之间相互作用力和细胞基质与细胞之间作用力之和。如下图所示:因此只要同时测定单个细胞粘附力即可得到细胞与基质之间的相互作用力,而细胞间的相互作用力则可以通过同时测量单层细胞的细胞粘附力和单个细胞的粘附力做差得到,如下公式所示:Force cell-cell ≌ Force Monolayer – Force Indiv.cellFluidFM测量力学步骤与一般的原子力显微镜十分类似,但是操作却远比原子力显微镜简单,这得益于FluidFM有的中空探针。这种探针无需像普通原子力探针一样对探针进行修饰或者将细胞提前粘连在探针上,可以直接在液体中原位抓取细胞,完成粘附力测定,并且在测量后探针仍然可以继续进行测试,并且无需对探针进行更换或再修饰。FluidFM技术测量单细胞力谱的基本流程。仅需操作鼠标系统即可自动完成对细胞的抓取和粘附力的测量。此外FluidFM系统会自动记录探针运动轨迹和力学曲线,如上图中所示当探针开始靠近细胞后,探针表面开始出现压力变化,当系统达到设定力学值后系统会自动停止下降并开始施加负压抓住细胞。随着探针开始上升,细胞给予探针的拉力随之增高,并逐渐达到临界,随后细胞脱离基质,探针受力趋近于零,而这一过程中探针受力的大值即为细胞粘附力。FluidFM技术测量HeLa细胞核CHO细胞的粘附力。能够高通量测量单细胞粘附力谱FluidFM测量粘附力十分智能化,仅需5分钟即可完成单个细胞的粘附力测定,一天可完成上百个细胞的测量,能够大幅度提升单细胞力谱测量的通量,让单细胞力谱研究变得简单、快速、高通量。 应用举例一:FluidFM技术测定衰老内皮细胞的力谱内皮细胞衰老导致细胞表型的改变与心血管疾病有着密切关系。随着细胞的衰老,细胞的粘附力等机械属性会有很大改变,因此对于细胞粘附力的研究将有助于理解细胞衰老的变化。Nafsika Chala等人利用FluidFM技术对血管内皮细胞与基底之间的粘附力进行研究发现,衰老的细胞与正常细胞存在着nN别粘附力差异。如下图所示:FluidFM技术用于衰老与正常细胞的单细胞粘附力测定。对比衰老小、大和正常细胞的细胞尺寸(a)、细胞粘附力(b)和细胞周长(c)及单细胞粘附力/面积(e)和单细胞粘附力/周长(f)的变化。研究者认为,衰老内皮细胞的粘附力增加是与细胞的粘着斑增加有关,表明衰老细胞能够加强与基质的相互作用从而防止内皮剥脱,但是受制于血流的影响这种能力受到了很大限制。 应用举例二:FluidFM揭示应力依赖性酵母交配中的分子相互作用性凝集素是芽殖酵母酿酒酵母介导细胞聚集交配的关键蛋白。交配细胞表达的互补凝集素类“a”型和“α”型的结合是促进细胞的凝集和融合的关键。Marion Mathelié-Guinlet等通过测量“a”型和“α”型结合的单个特定键的强度(~100 pN),发现延长细胞间的接触能够大地增加了交配细胞间的粘附力,而这种增强可能是由于凝集素的表达。FluidFM技术用于酵母属间交配过程单细胞力谱测量。MATa与MATα相互作用的示意图(a)和Fluid测量细胞间相互作用示意图(b)及测量结果(c);用DTT和DEPC药物刺激研究二硫键和His273对粘附的影响(d)、其示机制意图(e)和无粘附、DTT和DEPC粘附发生的概率(f);以及物理应力增强MATa和MATα细胞之间的粘合力(g)、发生频率(h)及破裂长度(i)。此外,研究组发现凝集素二硫键在粘附过程中起到了关键作用,而这一作用主要来自于α-凝集素的组氨酸残基His273。更为有趣的是,作者发现机械张力增强了相互作用的强度,这可能是由于激诱导凝集素构象从弱结合折叠状态转换成强绑定伸展状态导致。这项研究很好地展现了一种理解控制酵母性别的复杂机制的可能方法。 总结 细胞粘附力测定在细胞生命科学研究中起着至关重要的作用,然而传统手段中有着各种各样的局限性,主要原因是缺乏一种能够有效抓取细胞并进行力学测定的手段。现如今FluidFM技术在细胞粘附力测定中的使用,使得研究者们有了一种能够有效、低损的方式抓取细胞,配合原子力显微镜的测量的特性,真正意义上做到、无损、快速的测量单细胞粘附力,帮助研究者寻找细胞粘附力与细胞生命发展、肿瘤细胞转移之间的关系。
  • 高内涵——自动化智能化的上皮细胞管腔结构分析方案
    上皮细胞是常见的细胞组织类型之一。最简单的上皮组织结构是一个由单层细胞构成的腔隙,类似管状内腔,细胞朝向管腔的一侧为顶层,远离管腔的一侧为基底层,上皮细胞的这一现象称为细胞极化。尽管多种调控上皮细胞极性的因素已经被发现,但它们在上皮细胞极性建立、极化膜生物合成和组织形成过程中是如何相互协调和整合的尚不清楚,可以明确的是这一机制在生物体发育和疾病过程中扮演了重要角色。MDCK细胞在生长的过程中会发生细胞极化的过程,单层细胞放射状围绕中心腔隙排列,形成特定三维结构,一些极化机制也首先在MDCK细胞模型中得到了印证,因此它是一个很好的研究上皮细胞极化和管腔结构形成的简化系统,目前已广泛应用于相关领域的研究。图1:MDCK细胞管腔结构形成示意图然而由于生长方式的特殊性,同一个视野中的不同管腔结构有可能位于不同的层面上,因此在以往的实验中想要对这样的样本进行高通量成像是一个很大的挑战,往往需要手动对每一个管腔结构进行单独拍摄,并在后期做图像分析,而使用高内涵成像分析技术则将这一繁复的操作过程变得自动化和智能化。Step1.智能预扫使用高内涵的智能预扫功能,可以先在低倍(5×)下对整孔进行全局扫描,拍摄的同时软件根据算法确定视野中每个空腔结构的定位和范围,剔除不含目的结构视野。图2:Optically section in Z → Max. project medial planesStep2.精细层扫然后再自动转换至高倍(20×或63×),分别对含有空腔结构的视野进行高分辨率的精细层扫,以确保位于不同层面的空腔结构都能够获取到图像。图3:Detect polarity orientation → Calculate lumen numberStep3.统计分析最后使用高内涵的分析功能模块对细胞的极性变化和形成的管腔数量直接进行统计分析。图4:Phenotype binning总结图5:细胞极化和管腔数量分析示意图。MDCK细胞团培养24-72h后进行染色,对不同Z轴层面(共8层,每层间隔2μm)成像后采用最大投影模式进行显示和分析,应用机器自学习模块对细胞极化进行自动检测,并在此基础上计算形成的内腔数量。由此可以看出高内涵可以很好的解决上皮细胞3D培养中不规则分散样本的定位成像问题,简化了成像流程,为样本中特殊结构的自动化成像和分析提供了高效的解决方案。点击链接了解更多高内涵仪器相关资料:https://y6n.cn/uSQLG参考文献1. Roman-Fernandez, et al. Complex polarity: building multicellular tissues through apical membrane traffic. Traffic 17, 1244–1261(2016).2. O' Brien, et al. Opinion: building epithelial architecture: insights from three-dimensional culture models. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 3, 531–537 (2002).3. Rodriguez-Boulan, et al. Organization and execution of the epithelial polarity programme. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 15, 225–242(2014).4. álvaro Román-Fernández, et al. The phospholipid PI(3,4)P2 is an apical identity determinant. Nat Commun. 9: 5041(2018).关于珀金埃尔默:珀金埃尔默致力于为创建更健康的世界而持续创新。我们为诊断、生命科学、食品及应用市场推出独特的解决方案,助力科学家、研究人员和临床医生解决最棘手的科学和医疗难题。凭借深厚的市场了解和技术专长,我们助力客户更早地获得更准确的洞见。在全球,我们拥有12500名专业技术人员,服务于150多个国家,时刻专注于帮助客户打造更健康的家庭,改善人类生活质量。2018年,珀金埃尔默年营收达到约28亿美元,为标准普尔500指数中的一员,纽交所上市代号1-877-PKI-NYSE。了解更多有关珀金埃尔默的信息,请访问www.perkinelmer.com.cn
  • 北京干细胞与再生医学研究院310万元购买1台全自动流式细胞分选仪,允许进口
    8月23日,北京干细胞与再生医学研究院公开招标购买1台全自动流式细胞分选仪,预算310万元。  项目编号:2021ZB645-ZJHX  项目名称:全自动流式细胞分选仪采购项目  预算金额:310.0000000 万元(人民币)  最高限价(如有):310.0000000 万元(人民币)  采购需求:  (一)设备清单序号货物名称数量单位是否接受进口产品投标1全自动流式细胞分选仪1台是  (详细参数见招标文件第三章供货需求)  本项目是否接受进口产品投标:是  合同履行期限:90日历天  本项目( 不接受 )联合体投标。  开标时间:2021年09月13日 09点30分(北京时间)
  • 世界首台全自动化干细胞诱导培养设备通过验收
    p  strong干细胞,养起来更简单(解码· 发现)/strong/pp  5月15日,中科院广州生物医药与健康研究院(简称广州生物院)全自动干细胞诱导培养设备研制项目团队研制的全自动干细胞诱导培养设备顺利通过验收,这是世界上首台全自动、大规模、规范化诱导及扩增的干细胞诱导生产系统。该设备将实现全自动化、规模化、智能化的诱导干细胞制备,对再生医学及其相关的细胞治疗领域产生重大影响。/pp  strong人工操作难以实现规范化与标准化,已成干细胞发展瓶颈/strong/pp  干细胞是具有自我复制功能及多向分化潜能的细胞,在特定条件下能再生成人体的各种细胞、组织或器官,医学界称为“万能细胞”。干细胞在基础研究和转化医学应用中具有重要意义,在再生医学、疾病模型、药物筛选、精准医学等领域具有广阔的应用前景。但是,由于常规的干细胞存在量不足,干细胞研究兴起了诱导多能干细胞这一领域的发展,试图解决干细胞作为种子细胞的来源问题。/pp  “科学家发现如果将人的体细胞进行处理,可以获得一种新的干细胞,这种干细胞被称为诱导多能干细胞。它在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等都与胚胎干细胞极为相似,是胚胎干细胞的完美替代细胞。”广州生物院研究员潘光锦说,“目前,诱导多能干细胞已成为相关医学研究的核心工具,用于新药研发、神经损伤修复、心肌细胞修复、组织器官再生或移植等领域。”/pp  为了获得实验所需的大量诱导多能干细胞,科研人员需要制备并让其大量增殖,也就是养细胞。然而,当前干细胞诱导、培养及筛选过程均只能依靠人工操作完成,存在很多的不足。潘光锦说:“一方面,由于缺乏对细胞命运变化及诱导多能干细胞克隆筛选和扩增的实时及定量监控,难以实现干细胞诱导流程的规范化与标准化 另一方面,人工操作也存在效率低、成本高、通量低、安全性差等问题。”/pp  因此,如何实现干细胞自动化规模化的均质培养与扩增,避免这些问题,是诱导多能干细胞技术走向实际应用亟须突破的瓶颈。/pp  在此背景下,财政部支持的国家重大科研装备研制项目“全自动干细胞诱导培养设备研制”,于2013年立项,由广州生物院负责承担。项目团队以创新技术为核心,利用院内国际领先的诱导多能干细胞技术、干细胞诱导分化技术等研究成果,并结合自动化技术,历时4年,攻克8项关键技术,取得多项创新性成果,成功研制国际首台全自动干细胞诱导培养设备。/pp  广州生物院研究员张骁说:“有了这台设备后,从事诱导多能干细胞的科研人员不再靠人工操作养细胞,甚至不具备养细胞技术的人只要靠这台仪器就能获得诱导多能干细胞。”/pp  strong可实现全过程实时追踪监测,并提高干细胞的制备质量/strong/pp  全自动干细胞诱导培养设备占地25平方米,由自动化培养箱系统、自动化液体处理系统、显微在线观测系统、高精度克隆挑取系统、培养皿传送系统、设备控制系统六大模块组成。/pp  据科研人员介绍,干细胞的重编程是从一个个体化的矩阵培养箱开始,培养箱可并行培养24份个体化的诱导多能干细胞。然后,再由自动传送臂在b级环境下将 6孔细胞培养板从培养箱传送至操作舱中。随后,培养板就被置入成像区。接下来,拥有1.2微米分辨率的显微成像系统就会对其成像,整个过程不超过10分钟。/pp  “独立矩阵式培养箱主要是为细胞培养提供适当的温度、湿度和气体环境,保证细胞的培养处于合适的环境,同时也保障个体细胞间不会交叉污染。” 张骁说,“人养细胞,不会全程监测细胞状态。而这台设备能全天候坚守,可以通过手机APP端监测,并及时完成移液、换液等操作。细胞的培养时间也缩短了。它还能自动获取细胞成长信息,预测细胞成长趋势,自动挑选出符合要求的成熟诱导多能干细胞。”/pp  strong改善了我国高端生命科学仪器装备依靠进口的局面/strong/pp  全自动干细胞诱导培养设备从诱导多能干细胞重编程全过程研究出发,建立全程自动化细胞培养诱导技术体系,利用人工智能机器学习辅助无损无标记分析手段,建立细胞极性变化为基础的命运调控的Hiden Markov Model数学模型,从而指导细胞重编程理论在干细胞获取领域从理论模型到制备整机技术的全线突破,实现重编程多能细胞暨干细胞的制备。/pp  张骁说:“该自动化智能技术可实现每月24人次为周期的GMP级别的细胞制备通量,为我国的生物先进制造提供了上游细胞来源的智能保障。”/pp  全自动干细胞诱导培养设备第一次实现了以机器学习及人工智能算法为判定的细胞重编程命运的自动化诱导,整机技术及识别核心算法的应用已达国际领先水平。/pp  广州生物院研究员裴端卿表示,设备的成功研制,标志着我国在干细胞装备领域的自主研发取得新的突破,改善了我国高端生命科学仪器装备依靠欧美进口的局面,其成果填补了国内在该领域的多项空白。/pp  项目技术验收专家认为,该项目研究成果涵盖基础研究、应用研究和开发研究全过程的生物技术自主创新体系,这将为实现本领域整体“并跑”、部分“领跑”,初步建立系统的生物技术创新体系,突破一批核心关键技术难点作出贡献。/pp  中国科学院微电子所研究员夏洋说:“该设备的成功研制将促进诱导多能干细胞在再生医学研究领域的实际应用,推进我国在干细胞装备领域的自主研发进程,推动我国干细胞基础研究和临床应用的快速发展,为干细胞再生医学及精准医疗的研究奠定基础。”/pp  据了解,目前各医院细胞治疗临床应用迫切需要干细胞制备装置,全自动干细胞诱导培养设备已逐步在各研究单位或一级医院研究中心推广。该设备降低了人为干预,实现多人份、低成本、高品质、一体化的干细胞生产,社会效益巨大。(记者 吴月辉)/p
  • 原能细胞发布原能细胞全自动深低温生物样本存储系统BSN-600(-196℃)新品
    全自动深低温生物样本存储系统BSN-600(-196℃)存储量:59,000(2mL)12,000(1mL)前瞻性、面向未来、保障生物安全 一、设备简介 BSN-600系列全自动深低温生物样本存储系统,是一款专为保藏活体生物样本而设计的智能化、自动化、深冷存储设备。独创专利的蜂巢式结构,可提供长期安全、有效、大容量的-196℃气相液氮存储环境。兼容市面主流品牌管型,适用于药企、商业化存储机构、医院大型样本库、区域及国家级样本库。二、产品特色 高级别样本安全保护:l 样本全流程深低温保护(-196度低温存储),防止反复冻融l 独创蜂巢式铝管结构,实现防辐射、避光,无氧、温度均衡、不结霜冻l 独立存储单元,避免样本交叉干扰l 精准单支取样,保障无辜样本安全l 液位、温度报警及自动补给系统防护l 设备顶部样本保护转移 高效、智能化客户体验:l 样本信息全程记录可追溯,高效检索l GMP+科研双模式,中、英文菜单界面,灵活友好l 内置转运罐液氮补给功能,保障操作者安全l 最多可实现12个SBS板架同时入库,排队操作l 不限批次预约功能,暂存区域按序取样,高效轻松 设备安全可靠,低成本运维l 内仓盖自动旋转定位系统,取样精准,降低液氮消耗l 选配UPS电源,提供不间断供电保障l 工作舱内分区域降温,机械部分性能稳定,降低能耗l 高质量售后团队支持,及时运维响应l 视觉识别系统,实时监控设备运行环境及安全参数 一站式整体解决方案l 可实现多台联机管理,并可与实验室及其他系统打通l 细胞库全自动解决方案l 实验室解决方案l 冷冻、培养技术解决方案 创新点:BSN-600系列全自动深低温生物样本存储系统,是一款专为保藏活体生物样本而设计的智能化、自动化、深冷存储设备。全球独创专利的蜂巢式结构,可提供长期安全、有效、大容量的-196℃气相液氮存储环境。兼容市面主流品牌管型,适用于药企、商业化存储机构、医院大型样本库、区域及国家级样本库。原能细胞全自动深低温生物样本存储系统BSN-600(-196℃)
  • BCEIA 2019细胞自动化检测技术及应用论坛日程安排
    p  BCEIA 2019细胞自动化检测技术及应用论坛/pp  时间:2019.10.25 08:45-12:00/pp  地点:国家会议中心 展览会议区 E232A/pp  主办:陆军军医大学基础医学院生物医学分析测试中心/pp  会议简介:/pp  近年来,细胞生物学研究日益交叉化、工程化、组学化,需要海量的分析数据作为支撑,对细胞的表型检测提出了更高的通量要求。细胞自动化检测技术正是在这样的背景下应运而生。该技术领域以样本制备、样本检测、数据分析与表型判读的全流程自动化为努力方向,使大规模的表型鉴定及筛选成为可能,从而实现全基因组功能分析、药物/分子筛选等工程化研究 也能与临床诊断无缝融合,快速提供精准诊断结果,支撑精准医疗的发展。/pp  为促进细胞自动化检测技术的开发与应用,增进地区间技术合作交流,借第十八届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA2019)大会召开之机,陆军军医大学生物医学分析测试中心举办“细胞自动化检测技术及应用”专题论坛,届时将邀请屈晨雪、徐晓雪、万瑛等多名业内知名专家,重点围绕流式细胞技术、细胞自动化检测、多色流式检测等热点应用及前沿进展开展学术交流。我们期望本次论坛为增进细胞自动化检测技术领域研究者与应用者的互相了解提供机会,并为促进本领域及相关交叉学科的信息交流与科研合作搭建良好的平台。/pp  欢迎广大科研工作者届时莅临交流指导!/ptable border="0" cellspacing="0" cellpadding="0" width="605" style=""tbodytr style=" height:31px" class="firstRow"td width="89" nowrap="" colspan="2" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "日span /span期/span/p/tdtd width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "时span /span间/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "内span /span容/span/p/tdtd width="76" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "主持人/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="52" rowspan="9" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "10/spanspan style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "月span25/span日/span/p/tdtd width="37" rowspan="8" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "上午/span/p/tdtd width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "8:45 – 9:00/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "欢迎致辞/span/pp style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "万瑛(陆军军医大学生物医学分析测试中心)/span/p/tdtd width="76" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "万瑛/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="515" nowrap="" colspan="3" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "会议特邀报告/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "9:00 – 9:30/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "流式细胞术在临床检测中的应用/span/pp style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "屈晨雪(北京大学第一医院)/span/p/tdtd width="76" rowspan="2" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "万瑛/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "9:30 – 10:00/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "流式多色分析技术标准化初探/span/pp style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "徐晓雪(首都医科大学医学实验与测试中心)/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "10:00 – 10:30/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "自动化多色流式染色进展/span/pp style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "万瑛(陆军军医大学生物医学分析测试中心)/span/p/tdtd width="76" rowspan="4" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "徐晓雪/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="103" nowrap="" style="background: rgb(222, 234, 246) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "10:30 – 11:00/span/p/tdtd width="336" style="background: rgb(222, 234, 246) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "茶歇/span/p/td/trtr style=" height:31px"td width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "11:00 – 11:30/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="31"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "BD Single Cell Muti-omics/span/pp style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "高佳(spanBD/span公司)/span/p/td/trtr style=" height:41px"td width="103" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="41"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "11:30 – 12:00/span/p/tdtd width="336" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="41"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "多色流式细胞术助力科研之路/span/pp style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "徐荔(spanBD/span公司)/span/p/td/trtr style=" height:5px"td width="553" colspan="4" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="5"p style="line-height:17px"span style="font-size:11px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' "会议结束/span/p/td/tr/tbody/tablep style="text-align: center "img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 161px height: 161px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/0d86e228-39eb-4087-b700-af7c40a26b7e.jpg" title="bceia-仪器信息网报名渠道.png" alt="bceia-仪器信息网报名渠道.png" width="161" height="161"//pp style="text-align: center "扫码报名/p
  • 索尼发布全自动光谱细胞分析仪SA3800
    2015年6月17日,索尼公司(下称&ldquo 索尼&rdquo )今日发布SA3800全自动光谱细胞分析仪,一款配备了全新研发的3D驱动(X, Y, Z 轴)自动取样器的新型流式细胞分析仪。SA3800实现了完全自动化的便捷操作,其自动取样器将能实现高速的分析及处理功能。 ▲SA3800光谱细胞分析仪和全新研发的3D驱动自动取样器  流式细胞分析仪使用激光照射荧光试剂染色的细胞,并通过测量荧光和散射光分析细胞类型及特性。流式细胞分析仪广泛应用于免疫学、肿瘤学、再生医学以及药物开发等细胞学研究领域。尤其在药物开发和生物指标1开发等需要分析各类细胞的领域,非常需要快速、高效、精准地分析大量样本。  在传统的自动取样器中,孔板采取水平式移动,而试样探针2则是垂直移动来收集样本,这就导致样本需要来回移动较长的距离才能被采集到,这将有可能影响处理速度和样本残留率(样本间交叉感染的几率)。SA3800中的新款自动取样器使用了固定试样探针和可3轴(X,Y, Z 轴)移动的孔板,可以加速样本取样及分析过程。同时,该取样探针还自带自我清洁功能,可以进一步将样本残留率降低至0.1%或以下。这些独特性能将保证SA3800实现高速且稳定的样本收集,这在大量样本的分析工作中将是一个极受欢迎的产品特性。  此光学单元使用了索尼原有的探测荧光反应的光谱分析系统,该系统已用于此前发布的索尼SP6800Z系列3细胞分析仪,并在市场上取得了不错的成绩。该系统采用了高感应度的32通道光电倍增管(PMT),可检测并分辨出原先无法测量的细胞自体荧光因素4。它还能大大缩短荧光试剂修正的费时过程,确保结果的可靠性且减少人为因素。  今年6月26日,索尼将在英国格拉斯哥举办的第30届细胞学推进国际学会大会上中进行SA3800的展示。  1.一种物质,例如在血液中检测到的某种特殊蛋白质等,通过它的聚集显示出某种疾病的存在和发展  2.可萃取细胞样本的管子  3.请访问索尼网址获取SP6800Z系列产品相关信息  4.可由细胞自身反射的微弱荧光性SA3800的主要功能  1.新开发的3D 自动取样器SA3800的自动取样器使用3D驱动,快速和有效收集细胞样本。当和96孔孔板或384孔孔板结合使用时,可在保持较低样本残留的情况下,实现对大量样本的快速自动化分析。  3D自动取样器的主要性能 -  ●高速自动取样,在25分钟内完成96孔孔板的取样  ●低样本残留比例:0.1%以下  ●试样探针具备内置的自动清洗功能  ●可配合96孔孔板、384孔孔板及5毫升试管管架  ●通过摇晃对样本激活的功能;对样本进行冷却的功能  2.使用索尼自行开发的光谱分析技术实现高准确度的、可靠的分析  ①在不进行滤光的情况下,荧光波长将被索尼独家设计的棱镜所分解。在使用32通道的光电倍增管之后,可对荧光波形进行高度准确的分析。  ②索尼自行开发的分析算法。使用索尼开发的分析算法,根据波形将多种荧光物信号分解为不同的颜色信息。这些数据随后将依据密度等特征进行分析。这一分析算法可以分辨出具有非常相近波形的荧光物,以及位置非常接近的光波波峰,这在常规滤光技术下是很难实现的。▲传统细胞分析器的分析结果▲特殊细胞分析器的分析结果  ③自发荧光检测。因为个体样本拥有不同的自发荧光水平以及其它因素,对大量样本进行测量会因为不一致的荧光背景变得很复杂,这使通过数量去比较样本难以实现。索尼开发的光谱分析技术,通过将自发荧光识别为一种颜色,从而与其它信号区分开来,这就解决了上述问题并令分析更为可靠。  3.灵活的光学系统可以根据需求兼容四种激光。  除了常规的488nm以外,还有405nm、561nm、638nm。今后对SA3800加入更多激光也是有可能的。
  • 【应用干货】利用 Tempest 移液工作站让单细胞接种变得自动化
    介绍细胞系生成通常被认为是一个漫长而乏味的过程,需要大量的劳动力和材料投资。在细胞系开发中,尤其是在单克隆抗体和蛋白质治疗剂的生产中,需要具有高活性的单克隆性和稳健的克隆生长。自动细胞分配和细胞计数技术可提高通量,同时减少分配、识别和验证每孔单个细胞是否存在所需的时间和劳动力。本研究比较了使用自动Formulatrix Tempest液体分配器和Brooks Celigo成像细胞仪与电动手动移液和手动分析将CHO细胞分配和分析到384孔板的情况。 方法和材料I. 细胞培养为了制备单细胞接种和克隆生长的细胞, CHO-K1YFP细胞在T-25c㎡的烧瓶中用含有10% FBS和1%G418的F-12K培养基进行贴壁培养。细胞在37℃和98%的相对湿度下,置于5%的二氧化碳中培养。为了进行活性研究,将悬浮的CHO(CHOs)细胞培养在125mL的锥形瓶(Corning #430421)中,其中含有30mL CD CHO培养基(Gibco #10743),还添加了20mM GlutaMax(Gibco #35050-061)和1%HT(Gibco #11067)。细胞在37°C和98%相对湿度的8%CO2中置于轨道振动台(130 rpm)上培养。II. 使用Tempest或手动移液器进行单细胞接种用胰蛋白酶-EDTA (0.25%/0.5 mM) 收集表达黄色荧光蛋白 (YFP) 的 CHO-K1 细胞并重新悬浮在培养基中。细胞通过 40 µm 细胞过滤网 (BD Falcon #352340) 传代两次以获得没有聚集体的细胞悬浮液,然后使用血细胞计数器计数并稀释至200个细胞/mL。使用来自Formulatrix的 Tempest或手持式Matrix电子多通道移液器(Thermo Fisher #2231,12通道384均衡器移液器,2-125 µl)接种培养基和细胞。Formulatrix Tempest是一种非接触式的散装试剂分配器,可通过96个单独控制的喷嘴同时分配多达12种独立成分的任何体积。Tempest正在申请专利的微流控阀组利用正排量技术分配离散的液体体积,能够准确无误地分配到96孔、384孔和1536孔板。此外,使用标准移液器吸头作为源储液器可将死体积减少到100微升,是珍贵样品分配的最佳选择。在细胞接种之前,将25µL/孔的培养基分装到384孔板(Corning #3542)。随后以5微升/孔的细胞悬液(每种分配方法n=3)接种。将板离心以收集每个孔底部的细胞,然后孵化直到成像。III. 使用Brooks Celígo S进行单细胞接种成像使用Celígo成像细胞仪对孔板进行处理,以检测每孔单细胞和克隆生长。Brooks Celígo成像细胞仪是一种高速、易用、多通道亮场和荧光成像细胞仪,用于高通量、全孔细胞图像采集和多孔板处理。Celígo提供明 场成像和三通道荧光成像功能,用于可视化和量化烧瓶和6孔至1536孔微孔板中的细胞反应。该系统提供1µm/像素的全分辨率。整个Celígo是为明场和荧光成像而开发的,它结合了专有的光学器件和软件,可以在整个孔板一直到孔板边缘以一致的对比度对细胞进行成像和识别,这样能够识别细胞的位置和面积,而不需要额外的潜在细胞毒性荧光探针。在第0天使用双通道采集应用程序对孔板进行成像,使用荧光图像进行细胞检测,并使用明场图像对单细胞存在进行视觉验证。经过四天的培养期后,在双通道采集应用中再次对平板成像。明场成像用于确认克隆生长。IV. 活性和接种效率取决于Celígo在培养箱中过夜恢复后,比较了两种分配方法之间的活性测量。对于过夜恢复后的活性测定,将CHO细胞制备成细胞悬液,并使用Tempest 或电动移液器以每孔 500 个细胞的浓度移液到 384 孔板(Corning 3542)中。将板温育过夜。将浓度为 5µg/mL (8uM) 的 Hoechst 33342(Life Technologies,#H3570)和 2µg/mL(3uM)的碘化丙啶(PI)(Life Technologies,#P3566)加入孔中并孵育 30 分钟。使用Celígo对板进行成像和分析其活性。数据和结果I. 单细胞接种为了比较手持式电动移液器和Formulatrix Tempest之间细胞的正确分 配,对检测到单个细胞的孔数进行了量化。用电动移液器手动接种36%(3%CV)的单细胞孔板,Tempest接种32%(2%CV)的单细胞孔板(图1)。两种接种方法在单细胞接种中表现相同,无统计学差异(P0.01,n=3)。II. 克隆生长通过在第0天和第4天对单个细胞生长为一个菌落的孔进行视觉跟踪,可以很容易地用Celígo监测克隆生长的比较。图2显示了单个细胞生长成菌落的代表性图像。细胞和菌落都可以在Celígo的明场和荧光通道中看到。这允许对手持电动移液器和Formulatrix Tempest之间的克隆生长进行量化评估,其中91%(6%CV)和91%(4%CV)的单个细胞分别生长成一个菌落(图3)。这些结果表明,两种分配细胞的方法在克隆生长方面没有统计学差异(P0.01,n=3)。III. Celígo检测活性和接种效率对于两种接种方法,使用CHO-S细胞监测细胞活性。在一夜恢复期内,Tempest接种法的存活率测量值为97.4%(1.1%CV),电动移液器接种法的存活率测量值为98.9%(0.7%CV)(表1)。两种方法在接种后恢复得同样好。与平板上的细胞计数相比,Formulatrix Tempest的重复性更好,CV为10%,而电动手动移液器的CV为17%(表1)。IV. 手动与自动液体分配和孔板分析的对比与手动分配和孔板分析相比,自动化分配和孔板分析过程可大幅提高吞吐量。将细胞手动分配到384孔板大约需要3分钟,并且会受到更大的可变性和人为错误的影响。Tempest可以在大约40秒内将细胞有效地分配到384孔板上,节省了时间并提高了准确性。手动分析孔板以验证单个细胞的存在,这一劳动密集型过程每孔大约需要30秒,或384孔板需要192分钟,而Celigo S在大约7分钟内完成图像采集和分析过程。自动分配和分析384孔板大约需要8分钟,而手动分配和分析大约需要195分钟。因此,自动化过程将分配细胞和分析孔中是否存在单个细胞的产量提高了约25倍(图4)。总结本研究的目的是评估自动液体分配系统与基于孔板的细胞仪在单克隆细胞系开发中的使用。 要开发单克隆细胞系,必须首先分配实验孔板,然后验证每孔是否存在单个细胞。这些步骤可能既费时又费力,并且会大大增加实验费用。将 Formulatrix Tempest 液体分配器与 Brooks CeligoS 成像细胞仪相结合,创建了一个快速、高效和可靠的系统,用于分配和识别具有单细胞的孔。Formulatrix Tempest 在每块板不到 40 秒的时间内自动将细胞分配到 384 孔板,这比电动移液器分配快两分钟多。此外,使用Tempest消除了手动分配所需的材料槽和移液器吸头等材料的额外消耗成本。通过 Celígo S 自动评分对每孔细胞或菌落数量进行量化。结果分析表明,Formulatrix Tempest 将单个细胞分配到32% 的孔中,同时保持细胞活性。 与手动移液器分配和每孔单细胞分析相比,将两台机器一起使用可节省 95%以上的时间。
  • Dolomite Bio隆重推出Nadia单细胞测序自动包裹仪
    随着科学的发展,科学家们发觉许多群体细胞,完整个体水平的研究只是研究多种类细胞,多个细胞共同作用的“平均值”,淹没了细胞个体之间的差异。因此,针对单个细胞的研究技术,单细胞基因组学研究(Single Cell Genomics Study)成为生物学研究迫切的方向,并成为再生医学,发育生物学,肿瘤研究,免疫学研究必不可少的关键研究手段。 英国Dolomite Bio公司基于其已有的单细胞RNA测序系统和μEncapsulator细胞包裹系统取得良好的销售业绩及客户反馈。2017年11月,Dolomite Bio公司隆重推出Nadia单细胞自动制备仪,可平行运行1,2,4,8个样品, 每个样品18min内可生成6000个单细胞库;专为DropSeq方案设计;使用一次性试剂盒,防止污染;自动检测试剂盒状态,触摸屏控制,全自动运行。同时,添加Nadia创新平台,可以使用自己的试剂,开发新的方法,可调节液滴大小、频率、温度、搅拌和时间等参数,一旦条件摸索成功,可通过Nadia单细胞自动制备仪在相同条件下平行运行2,4,8个样品。 Nadia单细胞自动制备仪及其创新平台的问世,为单细胞研究者提供了更多、更灵活的研究手段,相信将在很大程度上推进肿瘤、免疫和发育生物学的研究在真正的单细胞水平取得更大的进展!
  • 亿元级B轮融资|深研生物专注于基因治疗及细胞治疗自动化实验平台研发
    近日,深圳市深研生物科技有限公司宣布完成了亿元级B轮融资。本轮融资由斯道资本领投,玖菲特投资、钜科投资跟投,老股东某国际知名产业集团持续跟投,星汉资本担任独家财务顾问。本轮所筹资金将用于公司细胞治疗智能化生产装备平台的研发及海内外市场拓展,同时将进一步加强对病毒载体大规模生产技术的研发。公司资料显示,深研生物成立于2014年,是一家专注于基因治疗及细胞治疗领域中的核心技术与核心工艺的研究与开发的科技型企业。公司致力于通过计算机科学、电子工程、纳米材料、化学工程等多学科与生命科学的交叉融合、技术创新,在生命科学领域发现革新途径,使生命科学技术向前快速演进,并逐步解决基因治疗、细胞治疗、生命科学与医药研发领域中所面临的一系列关键技术问题。在基因与细胞治疗核心技术领域,深研生物专注于开发核心技术。通过自身的技术优势和自主研发的自动化实验平台,公司开发了一系列生物技术平台,助力基因与细胞治疗领域的发展。针对传统瞬时转染方式生产慢病毒载体的缺点,深研生物创新地研发出基于稳转细胞系的慢病毒载体生产系统,EuLV️系统。这一技术突破了慢病毒载体规模化生产的技术瓶颈,大大提升了慢病毒载体的生产效率及产品一致性,并大幅降低了慢病毒载体的生产成本,为慢病毒载体的生产带来了革命性的改变。根据智慧芽数据显示,深研生物及其关联公司目前共有30余件专利申请,其中发明专利超过20件,公司专利布局主要聚焦于称重传感器、分离机等相关领域。
  • 【时事新闻】赛默飞新品上市:第二代全自动智能细胞显微成像平台
    引领细胞成像大数据时代2016年7月5日,上海——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)于近日在北京、上海和广州三地召开了“2016细胞定量成像高级应用研讨会暨EVOS FL Auto 2智能型显微成像系统发布会”,行业的领导者代表以及赛默飞专家齐聚一堂,见证了赛默飞最新产品EVOS FL Auto 2全自动智能细胞显微成像平台的发布。“EVOS FL Auto 2的成功推出为EVOS?细胞成像系统再添新成员。该新产品给用户带来更快、更精美的智能成像体验,这也代表了智能显微镜新发展趋势之一。”赛默飞生命科学事业部大中华区仪器销售经理刘育林表示,目前赛默飞是唯一能够提供从细胞培养、检测、成像和定量分析完整解决方案的供应商。它秉承EVOS家族无目镜设计,触摸屏操作,适合多通道荧光、明场和相差显微成像。新一代全自动智能细胞显微成像平台,提高了扫秒速度和自动聚焦功能,改善了通量和数据质量。同时,该产品配备了自动化电动X/Y扫描载物台,增强拍摄精度,并且单色高清相机或彩色双相机,为不同类型的应用而设计。另一大特点是,采集单平面或Z-层叠成像,适合厚样品成像,可与InvitrogenTM EVOSTM 载物台式培养箱兼容,以精确控制活细胞成像过程中的环境条件,自动化活细胞长期观察。同时,先进的Micro StudioTM图像分析软件能对细胞进行定量分析。随着大数据时代的来临,科学家不再仅仅满足于高质量的细胞成像,他们逐渐关注细胞定量化,从而最大化地读取显微成像反映的生物学信息,定量成像技术平台的小型化、个性化、智能化也已成为趋势。赛默飞细胞分析高级科学家 Nicholas Dolman博士在研讨会上介绍了赛默飞高内涵细胞成像定量分析领域的创新应用和最新成果,并讲解了如何从细胞显微成像中最大可能地获得数据、挖掘与此相关的生物信息。另外,来自全国众多知名科技研究机构和企业的约240位代表与赛默飞多位国内外细胞成像和定量分析专家热烈讨论。其中,中山大学、上海交通大学、中国科学院国家蛋白质科学中心、中国科学院基因组研究所、中国医学科学院药物所以及南方医科大学等科学家分享了他们对赛默飞细胞成像产品的认知和使用心得。# # #关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美 元,在50个国家拥有约50,000名员工。我们的 使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发 展、提高实验室生产力。借助于首要品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific和Unity Lab Services,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已超过35年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉、昆明等地设立了分公 司,员工人数约3800名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为 了满足中国市场的需求,现有7家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了4个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应 用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成 立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网 站:www.thermofisher.com
  • 赛默飞第二代全自动智能细胞显微成像平台上市
    赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)于近日在北京、上海和广州三地分别召开了“2016细胞定量成像高级应用研讨会暨EVOS FL Auto 2智能型显微成像系统发布会”,行业的领导者代表以及赛默飞专家齐聚一堂,见证了赛默飞最新产品EVOS FL Auto 2全自动智能细胞显微成像平台的发布。  “EVOS FL Auto 2的成功推出为EVOS® 细胞成像系统再添新成员。该新产品给用户带来更快、更精美的智能成像体验,这也代表了智能显微镜新发展趋势之一。”赛默飞生命科学事业部大中华区仪器销售经理刘育林表示,目前赛默飞是唯一能够提供从细胞培养、检测、成像和定量分析完整解决方案的供应商。  它秉承EVOS家族无目镜设计,触摸屏操作,适合多通道荧光、明场和相差显微成像。新一代全自动智能细胞显微成像平台,提高了扫秒速度和自动聚焦功能,改善了通量和数据质量。同时,该产品配备了自动化电动X/Y扫描载物台,增强拍摄精度,并且单色高清相机或彩色双相机,为不同类型的应用而设计。另一大特点是,采集单平面或Z-层叠成像,适合厚样品成像,可与InvitrogenTM EVOSTM 载物台式培养箱兼容,以精确控制活细胞成像过程中的环境条件,自动化活细胞长期观察。同时,先进的Micro StudioTM图像分析软件能对细胞进行定量分析。EVOS FL Auto 2智能型显微成像系统  随着大数据时代的来临,科学家不再仅仅满足于高质量的细胞成像,他们逐渐关注细胞定量化,从而最大化地读取显微成像反映的生物学信息,定量成像技术平台的小型化、个性化、智能化也已成为趋势。赛默飞细胞分析高级科学家 Nicholas Dolman博士在研讨会上介绍了赛默飞高内涵细胞成像定量分析领域的创新应用和最新成果,并讲解了如何从细胞显微成像中最大可能地获得数据、挖掘与此相关的生物信息。  另外,来自全国众多知名科技研究机构和企业的约240位代表与赛默飞多位国内外细胞成像和定量分析专家热烈讨论。其中,中山大学、上海交通大学、中国科学院国家蛋白质科学中心、中国科学院基因组研究所、中国医学科学院药物所以及南方医科大学等科学家分享了他们对赛默飞细胞成像产品的认知和使用心得。
  • Tecan与Reinnervate合作开发3D细胞培养自动化解决方案
    近期,瑞士Tecan与3D细胞培养领域领导品牌-美国Reinnervate签署了一项市场战略合作协议,该项目以Tecan公司Freedom EVO全自动化液体处理工作站和Reinnervate公司Alvetex 3D细胞培养技术为基础,致力于提供一系列细胞培养自动化解决方案。 Alvetex是由多孔聚苯乙烯支架组成的超薄、均一的细胞培养产品。该产品很好地模拟了体内组织生长和形成的环境,真正地实现了在实验室进行常规和可重复性的3D细胞培养。该3D培养技术突破了传统单层培养的限制,与Tecan灵活可靠的Freedom EVO自动化平台整合后,能够为客户提供更强有力的全自动3D细胞培养和模拟解决方案,有效帮助研究人员获得更可靠、更强大的细胞分析方法与结果。 瑞士Tecan应用及解决方案部门总监Kevin Moore指出,“我们很高兴能与Reinnervate合作,希望今后我们能进一步整合双方的专业技术优势,为细胞生物学领域的客户提供更多突破性解决方案。” 美国Reinnervate商务总监Richard Rowling说道,“我们很高兴Tecan决定将Alvetex作为全自动3D细胞培养解决方案研发计划的核心合作伙伴。对于广大需要保留真实细胞结构和功能的科学家们来说,Alvetex已成为改善其模拟体内生物细胞模型的行业标准。” 更多有关Tecan细胞生物解决方案的资讯,敬请访问以下网址:www.tecan.com/cellbiology 更多有关Alvetex产品的信息,敬请访问:www.reinnervate.comFreedom EVO全自动化液体处理工作站整合AlvetexScaffold进行细胞培养研究欲知更多详情,请联系帝肯(上海)贸易有限公司Tel: 021 2206 3206 / 010 8511 7823Fax: 021 2206 5260 / 010 8511 8461infotecancn@tecan.com www.tecan.com
  • 215万!大连理工大学计划采购全自动细胞分析仪
    一、项目基本情况项目编号:DUTASZ-2022734项目名称:大连理工大学多维度全自动细胞分析仪采购项目预算金额:215.0000000 万元(人民币)最高限价(如有):215.0000000 万元(人民币)采购需求:本项目拟采购多维度全自动细胞分析仪1套。主要应用于基础研究领域,结合实时长时间观察、自动分析的特点,在细胞生物学领域已建立了非常成熟的实验和应用方案,细胞毒性和药物筛选,在肿瘤学、免疫学和神经科学等具有广泛的应用。技术指标:标准培养箱中运行,无需附带控温设备;实时监控细胞使细胞不离开培养箱;拍摄中载物台不动,移动物镜转盘实现多个孔板的拍摄,避免样品挪动对细胞状态和对焦的影响;能够同时拍摄6块6-384孔微孔板。可同时进行多组对照实验的成像和分析;仪器能够同时运行6个以上拍摄程序,并设定不同的拍摄间隔,可自由设置实验类型、物镜倍数、容器类型、观察区域、不同的观察周期等参数,运行时互不影响;连续长时间成像可达数周或数月。自动对焦,采集活细胞随时间变化的图像,可以输出活细胞动态随时间变化的录像;同时有4倍、10倍和20倍三种高清物镜自动切换;有红色及绿色滤镜;具有全孔成像功能;多任务及多用户具兼容性;可自动生成伪彩与定量图表。具体要求详见招标文件。注:本项目已经财政部门审核,接受进口产品投标,本文件所称进口产品是指通过中国海关报关验放进入中国境内且产自关境外的产品。合同履行期限:签订合同之日起,180个日历日内货到安装调试验收合格本项目( 不接受 )联合体投标。二、申请人的资格要求:1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;2.落实政府采购政策需满足的资格要求:1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定。2.落实政府采购政策需满足的资格要求:1)非专门面向中小企业采购项目;2)中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位、节能、环保产品优先采购等;3)截至开标时间,经“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)、“中国政府采购网”网站(www.ccgp.gov.cn)查询,被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的不得参加本采购项目,查询结果以评审过程中现场网络截图为准;4)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。为本采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商,不得再参加本采购项目的采购活动。3.本项目的特定资格要求:代理商须提供制造商合法有效授权复印件加盖公章(进口设备需提供,国产设备无需提供授权)。三、获取招标文件时间:2022年11月20日 至 2022年11月25日,每天上午8:30至11:30,下午13:00至16:30。(北京时间,法定节假日除外)地点:大连市西岗区晨光街八号一楼(大连富越项目管理有限公司会议室)方式:现场报名或通过电子邮箱提交报名材料扫描件进行报名。 现场报名:在招标文件发售期内,报名时携带将营业执照(或事业单位法人证书)副本复印件、法定代表人身份证明(法定代表人报名提供)或法人授权委托书原件及被授权人身份证原件,上述证明材料须加盖公章,报名后,发售招标文件。 通过电子邮箱提交报名材料扫描件进行报名:在招标文件发售期内,申请报名和购买招标文件的投标人请将营业执照(或事业单位法人证书)副本复印件、法定代表人身份证明(法定代表人报名提供)或法定代表人授权委托书(授权委托人报名提供,应附法人代表和被授权人的身份证明复印件)招标文件费汇款凭证(招标文件费须以公司电汇方式至采购代理人公司银行账户,须备注项目名称及投标人名称)、上述材料加盖公章、扫描后发至电子邮箱dlfuyue2@126.com,经采购代理人确认报名后,发售招标文件,确认报名后需填写报名登记表,将所有报名材料邮寄给采购代理人。售价:¥300.0 元,本公告包含的招标文件售价总和四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间:2022年12月13日 13点30分(北京时间)开标时间:2022年12月13日 13点30分(北京时间)地点:大连市西岗区晨光街八号一楼(大连富越项目管理有限公司会议室)五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜无七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名 称:大连理工大学地址:辽宁省大连市高新园区凌工路2号大连理工大学科技园大厦C座411室联系方式:李老师/孙老师;0411-84709969/847062972.采购代理机构信息名 称:大连富越项目管理有限公司地 址:041186665011联系方式:孙元直 肖丽娜3.项目联系方式项目联系人:孙元直 肖丽娜电话:041186665011
  • Tecan与Miltenyi Biotec共同开发细胞生物学研究自动化解决方案
    Tecan公司于2010年8月17日宣布,Tecan与Miltenyi Biotec公司正在合作开发一系列细胞生物学研究自动化解决方案。该方案将结合Tecan Freedom EVO液体处理自动化工作站和Miltenyi Biotec公司功能强大的MACS微磁珠技术,为科研工作者提供全自动的处理平台,实现细胞及生物大分子从分离、孵育,到分析的全流程处理自动化。  Tecan将在其Freedom EVO自动化工作站上集成包括MultiMACS™ Separator在内的生物大分子及细胞分离设备。Tecan同时也将提供配套的自动化软件为包括autoMACS Pro Separator,gentleMACS™ Dissociator,以及MACSQuant Analyzer在内的Milteny Biotec公司的所有分离分析产品提供自动化支持。  Tecan的产品与市场部全球负责人,Christoph Kaufmann,对Tecan与Miltenyi Biotec的合作充满信心:“我们十分高兴与Miltenyi Biotec公司合作为我们的客户开发高效的自动化产品,以支援正在快速发展的细胞生物学研究。”  Miltenyi Biotec市场拓展部的Uwe Janssen高度评价与Tecan公司的合作,“Miltenyi Biotec在细胞生物学领域的专业知识,全面的产品构成,加上Tecan先进的自动化技术,势必为我们的客户带来难以比拟的细胞生物学研究平台,并极大地加速细胞及生物大分子的处理与分析研究工作。”    更多详细的信息,请访问:www.miltenyibiotec.com/automation,www.tecan.com/miltoney
  • 自动、快速、高重复性定量HIV-1 Gag p24 ——全自动微流控ELISA Ella用于细胞基因治疗领域
    HIV-1简介慢病毒(Lentivirus)载体是一种单链RNA病毒,是以人类免疫缺陷型病毒(HIV)为基础发展起来的细胞基因治疗载体,能够感染分裂和非分裂细胞。由于其可以将外源片段随机插入细胞基因组,因此可以在体内较长期表达目的基因,且免疫原性低、安全性高,是重要的基因操作工具。HIV基因全长约9.8kb,其中三个最大的阅读框编码了三个最主要的结构蛋白:gag、pol和env。gag基因编码了HIV的核心蛋白,包含有基质蛋白MA(p17)、衣壳蛋白CA(p24)、核衣壳蛋白NC以及p6。其中 p24蛋白是慢病毒外壳中含量最大的标志性蛋白1。通过基于双抗夹心法的酶联免疫吸附实验(ELISA)检测p24抗原的含量是测量及计算慢病毒滴度的常用方法。图1. HIV病毒结构(图片来自网络)随着从HIV-1衍生的慢病毒载体在细胞和基因治疗中使用的日益增加,在整个细胞基因治疗相关的制造过程中精确计算病毒滴度的需求至关重要。因此需要慢病毒载体定量的可靠方法,来支持细胞基因治疗过程的开发,并实现载体和细胞生产的质量控制。在自动化免疫分析系统Ella p24分析可以快速量化慢病毒载体在细胞和载体生产的不同阶段表达的p24水平。Ella p24分析的自动化、稳定性和可重复性可以最大程度的减少用户的操作误差,并使其在过程标准化、方法转移和可扩展性等方面经得起考验,满足GMP要求(图1)。图2. 应用Ella HIV-1 Gag p24检测助力您的研发与生产过程Ella HIV-1 Gag p24检测优势内置标准曲线内置校准曲线具有宽动态范围和低皮克/毫升灵敏度的优点。Ella HIV-1 Gag p24检测的动态范围在3.93-15,000 pg/mL,检测限为0.67 pg/mL。工厂生成的内置校准曲线是通过多次检测中每个校准品的5个重复平均值来编制的,无需用户进行标准品检测及标准曲线绘制。5PL曲线拟合显示标准品浓度与信号强度(相对荧光单位,RFU)的函数关系。图3. Ella HIV-1 Gag p24校准曲线极佳的定量精确性批内精密度:每个质控品在一次分析中测试16次,CV小于10%。批间精密度:每个质控品由至少三名技术人员使用两个不同批次试剂,在多次分析中进行测试,CV小于15%。图4. Ella HIV-1 Gag p24精确性良好的回收率和稀释线性回收率:对四种样品类型(细胞上清、血清、EDTA血浆、肝素钠血浆)各三种不同加标浓度下的回收率进行评估分析,回收率在99%~118%之间。图5. Ella HIV-1 Gag p24回收率稀释线性:对四种样品类型(细胞上清、血清、EDTA血浆、肝素钠血浆)分别使用样品稀释液连续稀释含有和/或加入高浓度HIV-1 Gag p24的样品(2倍、4倍、8倍和16倍稀释),产生并分析在定量范围内的样品。稀释线性结果在83%~111%之间。图6. Ella HIV-1 Gag p24稀释线性英国伦敦大学学院与GSK研发部合作利用Ella HIV-1 Gag p24 试剂盒对慢病毒滴度进行分析近日,由英国伦敦大学学院与葛兰素史克(GSK)研发部合作利用Ella HIV-1 Gag p24 试剂盒在自动化免疫分析系统Ella上对慢病毒载体的滴度进行了分析,相关结果以预印本进行了发表2。首先通过预估慢病毒载体样本中p24浓度确定了样本稀释倍数,以保证检测结果在定量线性范围之内;然后用含有Triton X 的Lysis buffer裂解载体样本(37℃, 1h),进而用试剂盒的SD30稀释液进一步稀释样本。仅仅5~10分钟的加样时间及1个多小时的运行时间,即可自动获得p24浓度结果,并计算慢病毒载体的物理滴度和感染效率。图7. 英国伦敦大学学院与GSK研发部合作利用Ella HIV-1 Gag p24 试剂盒对慢病毒滴度进行分析总结全自动微流控ELISA Ella只需数分钟加样及1小时仪器运行,即可自动输出3个平行的浓度数据及均值。Ella内置标准曲线使用户无需配制标准品绘制标准曲线即可进行蛋白定量,并且可进行单因子和多因子检测灵活配置,具有极佳的重复性、稳定性、精确性和高灵敏度、宽动态范围。Ella HIV-1 Gag p24检测可以作为慢病毒载体定量的快速可靠方法,来支持细胞基因治疗过程的开发,并实现载体和细胞生产的质量控制。参考文献:1. Alan Engelman, Peter Cherepanov. The structural biology of HIV-1: mechanistic and therapeutic insights. Nat Rev Microbiol 10, 279–290 (2012).2. Hamza Patel, Peter Archibald, Cindy Jung, et al. Developing an effective scale-down model for a suspension adapted HEK293T-derived lentiviral vector stable producer cell line. Authorea. July 28, 2021.
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