示差吸光光度法用什么样的分光光度计?可以直接用现有的普通分光光度计吗?还是需要对普通分光光度计进行改造?市场上有专门的示差分光光度计卖吗?
这次计量扩项,专家老师提出有部分原始记录分光光度的吸光度超过0.700,说是不是最佳响应范围。我想问下这个0.700以内的吸光度是分光光度计的最佳响应范围缘自何处?大家一起来讨论一下
请问,只有有色物质才能用分光光度计测吸光度吗?
我的722E分光光度计为什么大部分波长下吸光度不能调零,只有480-560的波长下,吸光度才可以调零。是什么原因呢,求助!
双光束分光光度计的吸光度怎么算
分光光度计吸光度与什么有关
一:吸光光度法基于物质对不同波长的光波具有选择性吸收的能力而建立起来的分析方法。(一) 光线:光线的波长: 200nm-400nm 紫外线*400-750nm可见光*750nm 红外线光具有波粒二相性,波长不同,其能量不同。(二) 物质的吸收光谱及颜色:1. 物质的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]和原子发射光谱:原子的最外层电子可以选择性吸收特征波长的电磁波成为激发态而产生的光谱称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]。激发态原子恢复到基态,则释放出特征波长的光子,形成原子发射光谱。不同的溶液其光谱不同,即不同溶液对不同波长的光其吸收能力不同,对某一特定波长的光存在吸收峰。2. 可见光由赤橙黄绿青兰紫等能量不同的光线组成,当可见光穿过某一溶液时,由于特定波长的光被吸收而使溶液呈现相应的颜色。(如CuSO4由于吸收了可见光中的黄光(600nm)而成蓝色)不同颜色的溶液对不同波长的光其吸收能力不同。(三) 光吸收的基本定律(Lambert-Beer 定律):一束平行单色光(Io)通过有色的透明溶液时,一部分的光可以透过溶液(It),另一部分被溶液吸收(Ia),还有一部分被器皿表面反射(Ir),则:Io=It+Ia+Ir 。那么,该溶液透光率为: T = It / Io 。1. Lambert 定律:设有一束平行单色光,通过液层厚度为b 的均匀透明溶液,则溶液对光的吸收能力:A=Ig(Io/It)=Ig(1/T)=k2bk2 为吸光系数,为常数。与入射光波长、溶液性质、浓度和温度有关;A 为吸光度(又称光密度O.D 或消光度E),当入射光波长、吸光溶液的浓度和温度一定时,A 与b 成正比。2. Beer 定律:设有一束平行单色光,通过浓度为c 的均匀透明溶液,则溶液对光的吸收能力:A=Ig(Io/It)=Ig(1/T)=k4ck2 为常数。由Beer 定律可知:当入射光波长、吸光溶液的厚度和温度一定时,A 与c 成正比。3. Lambert-Beer 定律:综合1.2.得: A=Kbc ,即:当入射光波长、吸光溶液的性质和温度一定时,A 与b、c 成正比。(四) 吸光光度法的基本原理:1、 不同物质,由于其分子结构和原子组成不同,故对光的吸收光谱不同(如:CuSO4),在测定不同颜色的物质浓度时要用最大吸收的波长的入射光,这样测量的灵敏度最高。2、 同一种物质,若浓度不同,则对同一波长的入射光的吸收能力(吸光度)也不同,且成正比关系。3、 应此,利用特定波长的单色光(通常用最大吸收波长的入射光)照射不同浓度的某一溶液时,所得的吸光度大小应与溶液浓度呈线性关系,故可利用该线性关系通过计算或查标准曲线来求得未知溶液的浓度。(五) 吸光光度法特点:1. 灵敏度高:mg%级、甚至ug%级。2. 准确度高:误差2-5%3. 操作简便、快速,仪器设备不复杂,价格低廉,故应用广泛。二 :分光光度计的使用:(一) 分光光度计的基本原理:利用吸光光度法的原理,采用棱镜或光栅等分光器获得纯度较高的单色光来测量未知溶液的浓度的方法。(二) 常用分光光度计:可见光、紫外、红外分光光度计,荧光分光光度计,火焰分光光度计等。(三) 722 型分光光度计的结构(略)(四) 722 型分光光度计的使用及注意事项1、 插上插头,接通电源,打开暗箱盖,预热20min。* 注意:分光光度计在接通电源而不用时,必须打开暗箱盖,以免光电管老化。2、 将准备好的试剂倒入比色杯中,用吸水纸擦去比色杯外侧水珠,并依次放入比色杯架中。* 注意:手拿比色杯毛面,试剂倒入杯中满2/3 即可,不得将比色杯放在仪器上。3、 调节所需波长,灵敏度调至“1”,选择旋钮至“T”。4、 调“0”:打开暗箱盖,用调“0”旋钮调节。5、 调“100%”:盖上暗箱盖,用调“100%”旋钮调节,让光线通过“空白管”。6、 重复调“0”和调“100%”数次。* 注意:若调不到“0”和“100%”,可将灵敏度调至“2”或更高,不得用力强行旋转旋钮,以免损坏。7、 将选择选扭由“T”调至“A”,此时读数应由“100”至“0”,若不为“0”,可用“消光零”旋钮调节。8、 拉动拉杆,分别读取“A 标”和“A 样”。9、 取出比色杯,弃去溶液,洗净晾干,备用。(五) 计算1.利用标准管计算测定物含量:A 样=K 样b 样c 样A 标=K 标b 标c 标因为入射光的波长,溶液性质和温度以及比色杯的厚度都一样,即:K 样=K 标 b 样=b 标所以:A 样/ A 标= c 样/ c 标得:c 样= c 标×A 样/ A 标2. 利用标准曲线进行计算:3. 偏离Lambert-Beer 定律的原因1) 由于非但色光引起的偏离。2) 由于溶液本身原因引起的偏离:① 由于介质不均匀引起的偏离② 由于溶液中化学反应引起的偏离三:实验:CuSO4 浓度的测定C 标= 比色波长=650nm比色结果: A 标= A 样=计算:C 样=C 标*A 样/A 标
使用紫外分光光度计检测含量和溶出度前,都需要扫个最大吸收波长再测定吸光度吗?外标法和吸收系数法都要扫吗?有没有相关文件规定?
两台分光光度计,一台为7230G,一台是尤尼科的UV2100,同一个样品,7230测得的吸光度为0.481,而UV2100为0.516,哪位大虾知道什么原因吗?谢谢指教!
分光光度计吸光度校正是用酸性重铬酸钾还是用碱性重铬酸钾?实验室好像都是用酸性的,但是环境监测人员基础知识技能培训教材习题中答案是用碱性的,两者有什么区别吗?[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006151615180161_8366_3889303_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006151615174767_1277_3889303_3.png[/img]
同一个样品,在不同的分光光度计上,按照正确的使用方法进行测量,吸光度一般不一致。除了测量重复性的问题外,就仪器而言,影响吸光度不准确的有哪些因素呢? 波长的准确度不一致可能是一个原因,其他的还有什么?
大家觉得有时候分光光度计有很多不足之处吧,比方说有一些物质的吸光度是很相似的,可能在测定结果上存在不足啊。。。
做LAS曲线 用3cm比色皿在650nm处 曲线最高点配个100ug(10 20 30 50 100ug5个点)的 吸光度l点几 曲线线性大于0.999 那么请问这个点能要么(吸光度1点几有点怕) 还有就是可见分光光度计最高吸光度能测多少。
紫外可见分光光度计的吸光度范围是多少?在什么范围里最准确?
我利用紫外可见吸光光度计读水的吸光值读出负值。我是先开机调零后,再利用空白的石英比色皿做对照调零显示的是254nm 0.000A,接着将纯化水做样品去读数,结果显示的是负数:-0.031 请问我的操作是不是有问题?还是我的方法有问题? 有别的方法可以检测出纯水的吸光值吗?
紫外可见分光光度计的吸光度范围是多少?在什么范围里最准确?
GB/T 6682-2008规定,要达到一级水的要求,其中水的吸光度(254nm,1cm光程)要求小于等于0.001。现在我刚买了一台上海仪电分析的型号752N的紫外可见分光光度计,但它的读数最小只能是0.001,按我的想法,要满足要求,仪器应该可以直接读出譬如0.0009这样的值才是可以的吧!那我买的仪器应该是不能用于测一级水了吧!我的问题是:1、一般测出来的值,是多少?2、网上查了很多紫外可见分光光度计的吸光度测量范围,都是写-0.300A~3.999A,请问这种仪器能用于测量么? 是否有的紫外可见分光光度计的吸光度测量范围会是-0.3000A~3.9999A的呢?3、我想买一台仪器用于测量,什么仪器能满足要求?请知道的朋友介绍一下!拜托了!感激不尽!
所用仪器:普析TAS-990貌似遇到了与火焰吸收分光光度计相同的问题,进浓度不同的标准样品,吸光度几乎不发生变化,进样时那个亮点也很不明显(石墨管换新的也是),不知道是不是光路或者哪里出了问题,请高手为我这个小白解答疑惑,谢谢!
[img=,690,299]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307191011421682_4455_5273478_3.jpg!w690x299.jpg[/img][size=18px]如图,使用的普析TU1900分光光度计,设置空白样品后做样,为什么样品扣除空白的吸光度后,明明已经是负值了(0.024-0.026=-0.002),但浓度那里还有数值??空白(0.026)浓度为0,样品(-0.002)浓度却为1.538??是仪器设置问题吗?[/size]
在用紫外分光光度计时,经常碰到第一次开启仪器吸光度低,重启又正常的情况。是何原因(氘灯是新换的),哪位高手给予解答一下,谢谢!
原子吸收分光光度计检测器怎么计算出吸光度的
XINMAO的723C分光光度计吸光度无变化是什么原因?但是我用手挡住就会有吸光度出来?
原子吸收分光光度计怎么才能使空白吸光度一直为正值
我利用紫外可见吸光光度计读水的吸光值读出负值。我是先开机调零后,再利用空白的石英比色皿做对照调零,屏幕显示254nm 0.000A,接着将纯化水做样品去读数,结果显示的是负数:-0.031 请问我的操作是不是有问题?还是我的方法有问题? 有别的方法可以检测出纯水的吸光值吗?
我看到分光光度计的吸光度校正用碱性重铬酸钾溶液,请问为何用碱性的,酸性的不行吗?是基于什么考虑?分光光度计灵敏度检验,用0.001%重铬酸钾,蒸馏水为参比,与440nm处测A大于0.010.....,这些都是出于什么考虑?问题较弱智,请大家不吝赐教!
用紫外-可见分光光度计测定DNA水溶液的吸光度时,吸光度A值第二圈比第一圈小0.01,是什么原因阿,一般???要是说是因为紫外灯照过比色皿中DNA溶液时,导致水份挥发了,呐DNA的吸光度液应该变大才对阿???到底怎么回事阿请高人指教,谢谢^_^
对分光光度计来说,吸光度 A 在 0.3-0.7之间,读数较为准确。为什么呢?
在检测过程中,紫外分光光度计的吸光度范围是多少合适?有什么规定?
请问:用sp-1105型可见分光光度计测定吸光度,怎么始终是1?
校准证书上给出分光光度计透射比不确定度为1.0%,k=2,能否计算出吸光度的不确定度,如何计算?