当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

定量秤

仪器信息网定量秤专题为您提供2024年最新定量秤价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括定量秤参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的定量秤您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合定量秤相关的耗材配件、试剂标物,还有定量秤相关的最新资讯、资料,以及定量秤相关的解决方案。

定量秤相关的资讯

  • 德国耶拿诚邀您来体验-高速定量PCR!
    德国耶拿公司全球用户体验会——中国北京中科院站、农大站、天津南开站 Real-Time rapidPCR and Liquid handling qTOWER——高速实时荧光定量PCR仪 高速定量PCR仪,最快可在20min内完成40个循环的定量PCR检测 独特的光学系统确保极高的检测灵敏度 “德国制造”高品质—150年精密光学产品研发和制造经验,光学元件十年质保FasTrans——PCR反应体系构建的好帮手 小型液体处理工作站,是高度一致、可靠的结果的保障 伺服马达驱动实现快速安静的液体处理 多种可更换的移液头: 1, 3, 4 或6 道 9个板位的紧凑设计,功能灵活又节省空间想了解这些产品能为您带来何种高速和便捷吗?不要犹豫,快来参加我们的用户体验会吧!活动预告:时间 2011年3月22日 下午 14:00-17:00地点 中国农业大学(西校区) 北京市海淀区圆明园西路2号 新生命综合科学楼会议室时间 2011年3月23日 下午 14:00-17:00 地点 中国科学院遗传与发育生物学研究所 北京市朝阳区北辰西路1号院2号 S1号楼210室德国耶拿分析仪器股份公司 北京010-65543849,上海021-54261977 会务联系人:德国耶拿公司: 王先生 18710030227,吴小姐 13764007224 时间 2011年3月25日 下午 14:00-17:00 地点 南开大学生命科学学院 天津市卫津路94号 生命科学学院 多功能厅
  • 我司承担中国医学科学院《定量质谱成像分析系统》开发
    近日,受中国医学科学院/北京协和医学院药物研究所国家药物及代谢产物分析研究中心(简称研究中心)委托,科迈恩(北京)科技有限公司(简称科迈恩)承担了《定量质谱成像分析系统》软件的研制开发任务。在此之前,双方已合作完成了《质谱成像及代谢组学数据处理软件系统》研发工作,建立的先进质谱成像系统工作站广受好评。  质谱成像技术是质谱领域的前沿技术,因其巨大的应用潜力,受到了众多仪器生产商和科研院所的关注。作为我国质谱成像及代谢组学研究领域的领军人物,再帕尔阿不力孜教授及其课题组从2006年起深入开展了质谱成像相关技术的研究和开发,并取得如成像原位代谢组学、定量质谱成像技术与方法、创新药物研发和肿瘤分子病理诊断应用等引领国际的原创性成果。  此次双方旨在前期合作基础之上,开发一套定量质谱成像分析系统,以实现对生物组织中的药物或生物标志物的定量可视化功能。该系统拟采用创新性的校正方法,以使定量质谱成像分析操作过程更简单,定量结果更准确,在新药研发、重大疾病早期诊断和精准医学等领域具有很好的应用前景。  合作协议签订期间,科迈恩(北京)科技有限公司技术团队前往研究中心进行了业务交流。质谱成像技术负责人贺玖明副研究员向科迈恩一行介绍了软件开发具体内容和技术要求,并就开发关键点进行了深入交流与讨论,科迈恩技术负责人表示将不负重托,尽快推出高质量的软件产品。
  • 心系疫情,众志成城,领航基因推出新冠病毒精准定量检测试剂盒
    p style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strongspan style="text-indent: 2em "【疫情情况】/span/strong/spanbr//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "近期,湖北省武汉市爆发的新型冠状病毒(2019-nCoV)感染肺炎疫情牵动着每一个中国人的心。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "根据权威数据统计,截至2月3日8时,确诊17238例;疑似21558例;死亡361例;治愈475例。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 500px height: 593px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/1fdf54e9-a033-4744-9bf2-e34608b770af.jpg" title="疫情状况.png" alt="疫情状况.png" width="500" height="593" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong【检测难点】/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "当前检测过程中尚存在三难问题:/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong1. 疑似确诊难/strong:对于有接触史的早期疑似患者,由于病毒载量较低(可能低于常规qPCR的检测下限),加上样本采集、核酸提取、检测试剂等多方面的原因,导致qPCR检测CT值大于37或直接无扩增信号,被判定为疑似样本或阴性。据《人民日报》1月30日报道,天津一位疑似患者6天内连续进行了4次qPCR检测,最后一次才被确诊。/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "strong2. 疗效评估难/strong:临床急需一种直接、有效的疗效评估指标,比如病毒载量的动态变化来指导临床方案的实施br/strong/strong/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "strong3. 治愈判定难/strong:患者体内病毒转阴的复核确定要慎之又慎。需要比普通qPCR更高灵敏度和更好精确性的检测方法给出客观定量结果进行转阴的判定。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "【领航产品】/span/strong/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "作为专注于数字PCR及微流控设备研发的领航基因一直密切关注疫情进展,在疫情发生后第一时间组织紧急攻坚小组,克服重重困难,成功开发出新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(数字PCR法),搭配领航基因自主研发的生物芯片阅读仪(浙械注准20192220007)及配套数字PCR芯片耗材等为新型冠状病毒检测提供完整的定量解决方案,重点解决低丰度检出、疗效评估与治愈判定等几大难题。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strongPart1:领航检测试剂盒/strong/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 310px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/f920292a-f5e8-4f71-9878-401189d61c8d.jpg" title="领航检测试剂盒.png" alt="领航检测试剂盒.png" width="600" height="310" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "“新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(数字PCR法)”针对新型冠状病毒的ORF1ab、M、N三个基因区域,分别设计高特异性的引物和探针,增加检测特异性的同时通过多个位点检测减少RNA变异导致假阴性的可能,确保检测结果准确可靠。试剂盒采用一步法RT-dPCR技术,基于数字PCR单分子扩增的超高灵敏度和直接绝对定量的技术优势,可辅助新型冠状病毒核酸的高灵敏度定量检测。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strongPart2:领航基因检测平台/strong/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 242px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/da7f1f35-b7cb-48fc-b1b3-56d50b6c5b97.jpg" title="数字PCR.png" alt="数字PCR.png" width="600" height="242" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C319981.htm" target="_self"strong微滴式数字PCR系统/strong/a/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strongPart3:领航基因解决方案span style="text-indent: 2em " /span/strong/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 121px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/7c0522f7-ef5d-4b76-94be-a2e62028b681.jpg" title="领航基因解决方案.png" alt="领航基因解决方案.png" width="600" height="121" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "适用样本:咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血浆等br//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong1. Part4:平台优势/strong/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "1.已获证:数字PCR系统核心仪器——生物芯片阅读仪已取得医疗器械注册证,增加了新型冠状病毒检测的有效性及安全性。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "2.高灵敏度:数字PCR可以做到单分子扩增,灵敏度比qPCR高出一个数量级以上,对于病毒载量较低(qPCR检测Ct值较高)的样本,可以准确判断阴阳性,减少假阴性的概率。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "3.高通量:高通量检测分析,支持单次32张液滴芯片。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "4.多通道检测:拥有5色荧光通道,大幅超越国际常规的2~3色荧光通道,荧光通道无串扰、信号采集快、信噪比高。不仅有力地拓展了基因多重检测的应用空间,还可以节约珍贵样本、检测时间和试剂成本。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "5.动态监控:数字PCR可以不依赖标准品和标准曲线等,直接对检测体系中的核酸进行绝对定量,充分利用这一特性可以实时监测不同治疗阶段患者体内的病毒载量的变化,进而指导临床方案的实施。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "6.安全有效:PCT专利的油相制备技术和独特的微流道设计确保在芯片中快速生成均匀、稳定的单层平铺液滴,检测过程全程封闭,避免交叉污染,避免导致假阳性结果,符合临床对检测安全性的要求。span style="text-indent: 2em " /span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong【企业介绍】/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "领航基因科技(杭州)有限公司专注于数字PCR技术相关的设备、耗材与试剂的研发,拥有国内外高水准的多学科交叉技术研发团队,荣获国家高新技术企业和杭州市企业高新技术研发中心认定,并顺利通过ISO13485认证。公司申请数字PCR产品相关专利50余项,并已授权20余项,在国产数字PCR行业中处于领先地位。公司致力于开发高通量、低成本、全自动的数字PCR检测平台,应用于肿瘤、遗传和病原微生物检测等领域,为临床提供整套完整的分子诊断解决方案。随着公司在技术创新与产品报批方面的快速发展,未来领航基因将推出更多系列优质产品,推动中国数字PCR市场蓬勃发展。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong【领航愿景】/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "在此次新型冠状病毒疫情防控中,领航基因会与奋战在疫情前线的医护英雄们一起,携手共渡难关!非常欢迎同行一起合作,为疫情防控提供优秀解决方案。如有合作意向,请致电:0571-87635306/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "a href="https://www.instrument.com.cn/zc/133.html?IMShowBigMode=&IMCityID=&AgentSortId=&SampleId=&IMShowBCharacter=&sidstr=" target="_self"span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong点击就进入PCR仪专场/strong/span/a/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/xxgzbd" target="_self"span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong点击进入仪器信息网特别专题“抗击新冠疫情 仪器人在行动”/strong/span/a/p
  • 如何处理实时荧光定量PCR数据
    实时荧光定量PCR数据中的基本概念:在整个扩增过程中会出现基线期,指数期,线性期和平台期。其中在基线期和指数增长期,扩增产物都是以指数级增长,但是在基线期我们没办法检测;而到了线性期和平台期之后,由于不同基因,或者不同条件下其扩增效率差别很大,因此没有办法计算模板的含量。因此,在指数增长期的CT值就成了计算模板含量的关键值。▲ 图一:线性图谱▲ 图二:对数图谱为什么知道CT值就能够得到最初的目标基因含量呢?如图三,表示一个基因单次扩增曲线。N为扩增产物的分子数,模板的分子数乘以1+扩增效率的n次方,n代表循环次数。也就是说,如果扩增效率为100%,产物的分子数就等于模板数乘以2的n次方。但是在线性增长期和平台期,扩增效率不可能是100%,因此PCR理论方程只在指数期成立,也就是图三绿色框的部分。▲ 图三数据处理:以下三张图分别表示我们在做荧光定量PCR时提到的三个名称:扩增曲线、标准曲线、溶解曲线。1、绝对定量:使用一系列稀释的已知浓度的标准品与未知样本同时进行测定,根据系列浓度标准品的CT值与起始模板量之间的线性比例关系。注意事项:☑ 标准品必须来源可靠,浓度已知。☑ 标准品要和待测样品同时在仪器中扩增。☑ 只能根据标准品覆盖的浓度范围进行待测样本浓度的推测。2、相对定量:是用来确定经过不同处理的样品之间的表达差异或目标在不同时相差的表达差异,也就是倍数差异。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自美国Azure Biosystems公司,以创新服务于生命科学为愿景。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统融合了高品质Peltier温度模块和基于光纤传输的光学检测系统,为您的科学研究提供高精准、高灵敏的可靠结果。Azure Cielo 3/6检测通道,可根据实验需求灵活配置。同时配有10.3触控系统,主机本身可独立运行、连接、远程交互,让您随时随地知悉实验进程和及时获得实验结果。
  • 一文读懂阿胶定量“新标准”
    导语古语云“阿胶一碗,芝麻一盏,白米红馅蜜饯。粉腮似羞,杏花春雨带笑看。润了青春,保了天年,有了本钱”。阿胶能补血滋阴、润燥止血,自古为滋补上品。阿胶系驴皮经煎煮浓缩成的固体胶。近年来,随着驴皮货源紧缺,市面上存在不法商贩弄虚作假,以次充好,以牛皮、马皮等下脚料冒充驴皮制作假冒伪劣阿胶的行径,严重扰乱了阿胶市场。其他兽畜皮熬胶,也有补血止血的功能,但阿胶伪品的蛋白质成分及其含量和阿胶真品存在明显不同,与驴皮胶使用效果相差甚远。因此,掌握阿胶的真伪鉴别方法至关重要。 为了进一步规范阿胶产业发展,提升阿胶品质保障能力,国家药典委在2019年发布关于“关于阿胶、海龙、海马等国家药品标准修订草案的公示”和“关于阿胶国家药品标准修订草案的公示(第二次)”两项公示稿,分别对阿胶【含量测定】和阿胶【鉴别】项下内容进行了修订。其中阿胶【含量测定】项修订幅度最大,新增了“特征多肽”含量要求: 驴源多肽A1特征离子对:m/z469.25712.30和m/z z469.25783.40,驴源多肽A2特征离子对:m/z618.35 779.40和m/z618.35 850.40,按干燥品计算,“含特征多肽以驴源多肽A1(C41H68N12O13)和驴源多肽A2(C51H82N18O18)的总量计应不得少于0.17%”。 此外,在2012年药典委颁布了《阿胶中牛皮源质量的补充检验方法》。2015版《中国药典》中,明确规定使用液相色谱-串联质谱法用于阿胶、龟甲胶、鹿角胶的鉴别。最近,国家药监局还颁布了《阿胶中猪皮源的补充检验方法》,在阿胶产品中应不得检出猪皮源(新阿胶)成分。 岛津参考以上标准和文献报道,使用胰蛋白酶对阿胶、牛皮胶和猪皮胶等不同来源的明胶类物质进行酶切处理,通过岛津LCMS-8045液相色谱质谱联用仪(图1)对特征多肽进行测定,从而实现阿胶与杂皮胶的鉴别与阿胶的定量。 图 1 岛津 LCMS-8045液相色谱质谱联用仪 主要方法参数 色谱柱:Shim-pack GIST (2.1 mm I.D.×100 mm L., 2.0 μm)MRM参数:见表1 表1 MRM优化参数对照药材分析 采用超高效液相色谱-质谱联用的方法,一次进样,同时分析8种特征多肽,实现阿胶药材的鉴别与定量。分析结果表明,阿胶、驴源多肽A1、驴源多肽A2、黄明胶、鹿角胶、龟甲胶、新阿胶、马皮源多肽信噪比均大于10:1,完全满足检测要求。如下图2(左右滑动查看全部内容)图2 阿胶等8种特征肽定性色谱图 样品测定 对阿胶样品进行测定,黄明胶、鹿角胶、龟甲胶、新阿胶、马皮源通道均未检出;阿胶、驴源多肽A1、驴源多肽A2分离良好,峰形对称,且信噪比均大于10:1。如下图3(左右滑动查看全部内容)图3 阿胶定性定量肽段测量 总结 阿胶作为滋补佳品,消费者平时关注更多的是阿胶的功效。其实,无数“实验猿”为了保证阿胶的真实与有效,默默地完成了大量阿胶药材真伪鉴别与含量测定的工作。有了本文的方法,“实验猿”可以一针进样鉴别多种肽段,节省时间。除此之外,本方法加入了定量肽段,可以实现定性定量同时分析。 “暗服阿胶不肯道,却说生来为君容”。更多关于阿胶的文章,参阅岛津推出《胶类药材定性鉴别解决方案》。
  • 用AFM统计定量研究纳米析出相
    对新型电子和功能材料的重视,以及对更轻重量和更可持续结构材料的需求,大大推动了聚合物、2D材料和陶瓷等材料的研究。然而,从飞机发动机到家用电器的众多工程应用仍然依赖于金属的高强度和耐用性。因此,金属材料的研究一直持续进行中,而且新材料及其新工艺的开发仍是当下材料界的研究热点,包括高品质高强钢、不锈钢、耐热钢及高温合金等材料[1-4]。大多数金属材料工程应用中必须考虑其强度和韧性。纳米级的第二相弥散强化既能够提高材料强度,又能改善材料韧性的方法之一,因此它对开发新的高性能材料非常有帮助,引起研究者的兴趣。目前,已经有文献报道纳米析出相Nanoprecipitates(NPs)可以大大提高材料的力学性能、耐蚀性、高温性能等。金属材料的性能强化机理与第二相的特征参数及分布有着密切的关系,很多材料强度计算模型也是基于第二相尺寸及百分含量进行计算的。如Friedel和Orowan模型,Friedel切过机制模型:其中r为粒子半径,f为析出相体积分数Orowan绕过机制模型:其中d为粒子半径上述模型说明材料的屈服强度与其内部第二相粒子的平均直径密切相关。此外,纳米析出物类型、尺寸和数量等对疲劳、蠕变等力学性能也有较大影响。因此 NPs的定量表征工作尤为重要。特别是基于当前众多材料均是利用NPs改善材料的力学性能、耐蚀性能、耐热性能、韧性等,析出相定量工作具有较为广泛的实际应用意义,简便、高效定量测试方法的开发工作尤为必要。金属材料的表面形貌与材料的服役过程中表面摩擦行为、腐蚀行为等密不可分,因此对表面形貌的定量分析显得极为有意义。同时金属材料里面的纳米析出相的力学性能一直是材料力学表征的难点,主要受限于尺寸问题,使得众多力学测量设备无能为力。而标准AFM的探针曲率半径为10nm左右,牛津AFM的AMFM技术可以完美解决金属纳米析出物的定量力学问题。表面形貌的定量统计目前, 传统的金属材料NPs的研究主要使用XRD,SEM和TEM。其中,XRD可以表征NPs平均尺寸,但仅能给出粒度范围,尺寸定量精度有限,无法同时获得NPs在材料内的分布。SEM可以表征NPs,但统计结果容易受到表面起伏的影响。由于材料表面腐蚀原因造成某些部位凸起也有可能被统计成析出物颗粒。而TEM可以观察NPs,但在定量统计NPs含量存在问题,主要是纳米析出相在金属材料晶粒和晶界上随机分布导致部分NPs以及边界不明显,从而导致后面的统计出现较大偏差。如图1所示,通过SEM和TEM检测贝氏体钢析出相的尺寸存在明显差异。因此本文推荐使用原子力显微镜检测的方法对金属领域中NPs的定量进行快速且精确的表征。图1 贝氏体钢微观形貌(a)SEM结果(b)TEM结果原子力显微镜(AFM)是一种高精度、快速的表征样品表面特征的技术,可以用来定量表征金属中的NPs。它不仅可以测量颗粒的大小,还可以定量测量其力学和电学性能。技术的进步使得Oxford AFM成像比上一代原子力显微镜的速度更快,操作更容易,数据更可靠。此外,AFM的样品制备要求与其它技术相比更方便,实际使用极具有优势。AFM可以通过形貌、相位图以及材料的力学性质图直接分析NPs。图2给出了高温合金经过抛光之后的析出相的AFM形貌图和相位图,图中可以清楚观察到NPs呈弥散分布,类圆形,尺寸主要分布在10-50nm,该结果与TEM观察结果一致,也说明了AFM表征粒子尺寸信息的准确性。图2 高温合金AFM形貌图,相位图和TEM图
  • 山羊绒和绵羊毛的DNA定量分析国标已然实施,LUMEX微芯片实时荧光定量PCR悄然助力!
    GB/T 36433-2018《纺织品 山羊绒和绵羊毛的混合物DNA定量分析 荧光PCR法》已于2019年1月1日正式开始实施,本标准规定了采用荧光定量PCR测定纺织品中山羊绒、绵羊毛DNA的定量检测方法。本标准适用于纺织品混合物中山羊绒、绵羊毛两组分含量的检测。LUMEX的微芯片实时荧光定量PCR可以为山羊绒和绵羊毛中羊毛含量的检测提供简便、快捷和准确解决方案。相对传统荧光定量PCR,试剂和样品用量更少,仅需要1.2 μL的样品;升降温速度最高可达12? C/s,用时更短;空芯片能够较好得兼容各类常规测剂,也可将试剂冻干在芯片上制成常温保存的冻干芯片,样品仅需分离后加入1.2μL即可。微芯片式荧光定量PCR为用户提供更简便省时的操作,更友好的操作体验,极大得节省了时间成本,消除了人为因素引起的误差。LUMEX微芯片实时荧光定量PCR优势特点:l 便携式荧光定量PCR,可适于现场使用l 高灵敏度实时荧光定性、定量分析l 专利微芯片平台,防止交叉污染l 独特芯片式平台设计,超快加热、冷却速度l 实现快速分析(DNA25分钟,RNA50分钟)l 开放芯片平台,兼容通用试剂耗材l 冻干芯片操作更简便,消除人为误差l 广泛应用于动植物病原体检测、食品转基因鉴别、遗传疾病检测、癌症筛查等羊绒,也被称为山羊绒,是一种从山羊身上提取的豪华纤维,由山羊和其他山羊中提取。虽然羊绒和羊毛是由两种不同的蛋白质组成,却具有相似的天然纤维,但羊绒要比羊毛贵的多。因此在实际的销售链中,为了获取更多的物质利益,羊绒和羊毛经常被混在一起销售。用传统的分析方法对羊绒混纺羊毛进行定量分析仍有一定困难。而微芯片实时荧光定量PCR技术可以有效的解决山羊绒的鉴别和定量问题,该技术已广泛应用于多种领域。LUMEX的技术专家对此方法进行了广泛研究并发表了相关论文,以下内容为Maxim Slyadnev发表论文《 Identification and Quantitation of Cashmere (Pashmina) Fiber and Wool Using Novel Microchip Based Real-Time PCR Technology》的内容节选。来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊中羊绒纤维PCR检测情况一览表来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊中羊毛PCR检测情况一览表来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊中羊绒纤维目标基因的扩增曲线来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊羊毛中目标基因的扩增曲线羊毛羊绒的定量标准曲线对模型样品中羊绒含量的测定微芯片定性定量检测天然纤维中的羊毛羊绒成分结论:基于微芯片的实时荧光定量PCR技术可用于羊毛掺假等纤维混纺织物中羊绒和羊毛含量的定量检测。从不同地区和不同年龄的山羊和绵羊采集的羊绒样品的数据分析证实了该检测技术的有效性和可靠性。该试验在微芯片反应体系中的体积仅为1.2μl,具有成本低、高特异性、高灵敏度、人为误差小、假阴性或假阳性率低等优点。这种方法基于从羊绒和羊毛中提取的线粒体DNA的检测,可以用于大规模的羊毛和羊绒制品的检测,现成的冻干芯片检测可以极大的降低对检测人员的操作要求,这对于在检测行业大范围推广微芯片实时荧光定量PCR是极为有利的。 来源:LUMEX分析仪器
  • 【分享】银鲳鱼的种属鉴定与定量研究
    银鲳鱼的种属鉴定与定量研究Species identification and quantfication of silver pomfret using the droplet digital PCR assay期刊:Food Chemistry 影响因子:5.399通讯作者单位:Institute of Food Safety and Nutrition, Jinan University, Guangzhou 510632, Guangdong, China.College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510641, Guangdong, China【背景】银鲳鱼(Pampus argenteus)是一种经济价值高的物种,中国有巨大的市场需求。近年来,由于高强度的捕捞,银鲳鱼的数量有所下降,为了维持利润,一些制造商已经采取了用更便宜的鱼代替银鲳鱼,进行食品的造假、掺假。【目的】开发一种准确的方法来识别银鲳鱼食品,减少食品造假、掺假的非法行为。【实验材料】银鲳鱼和金鲳鱼, 两种鱼按照比例分别为0.1%、0.5%、1%、10% 和50% 进行混合, 即混合物中含有0.1g银鲳鱼/99.9g金鲳鱼、0.5g银鲳鱼/99.5g金鲳鱼、1g银鲳鱼/99g金鲳鱼、10g银鲳鱼/90g金鲳鱼,还有50克银鲳鱼/50克金鲳鱼。【实验设计】①筛选ddPCR引物和探针;②特异性测试;③引物和探针之间浓度比筛选;④熔融温度筛选;⑤PCR循环数筛选;⑥qPCR对比测试。 1.筛选ddPCR引物和探针CY-1 细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(COI) CY-2 细胞色素B(cytb)CY-3 16srrna对三组引探进行测试,CY-2、CY-3无扩增产物,故本实验采用CY-1组引探。2.特异性测试银鲳鱼液滴数字PCR检测的特异性检验。{ 样品说明如下: PC, 阳性对照( 银鲳鱼);NC, 阴性对照( 无菌蒸馏水);1.卵状细鳞鲷;2.无节圆鳃鲷;3.点状圆鳃鲷;4.圆头鲷;5.中国对虾;6.灰鲷。3.引物和探针之间浓度比筛选不同的引物与探针浓度进行实验对比,最终选取了300:200、300:300、400:200三种浓度比进行下一步测试。4.熔融温度筛选对实验③的三种不同浓度的探针进行TM筛选,最终选定56℃、57℃、58.2℃三个温度来进行下一步测试。5.PCR循环数筛选对实验④的三个温度进行循环数筛选。九种组合的银鲳鱼液滴数字PCR反应结果的正交设计,最终确认每个引物400nmol/l,水解探针200nmol/l,PCR扩增程序:95°C10 分 钟 ;然后50次循环94°C 30s ,50 ℃1min,98℃10min。6. qPCR对比测试结果qPCR的检出限约为313copies,而ddPCR其中一些LOD数值范围为1至5copies。【总结】①用ddPCR和qPCR系统检测了银柚和金柚的不同肌肉混合物和DNA混合物,并对结果进行了比较,发现两种方法检测结果是高度一致的。在不需要制定标准曲线的情况下,ddPCR的检测结果能精确定量。②由于缺乏标准物质,qPCR 难以对食品掺假进行定量,所以进行绝对定量的ddPCR是在这方面具有一定的优势。③ddPCR的精准度比qPCR高。【结论】ddPCR与qPCR各有优劣,在效率方面,qPCR的效率比ddPCR高,但在精确性方面,ddPCR系统具有优异的灵敏性,对样本能进行准确的定量,适合执法机构对食品进行精确检测。目前还没有准确和有效的方法来识别鱼类,使用ddPCR去进行检测食品是可行的,该方法可以成为执法机构和渔业相关机构的宝贵工具,并解决食品掺假问题。关于我们广州永诺生物科技有限公司成立于2010年,总部位于广州国际生物岛,是一家专注于医学科学技术开发与服务、分子诊断产品研发与生产的高新技术企业。公司目前占地面积近6000㎡,其中硕、博士以上学历员工占比近40%。公司依托先进的技术力量以及优秀的人才储备,在科研服务、医学检测和数字PCR产品三大业务上保持领先的竞争优势。公司成立至今申请国家专利40多项,授权21项,计算机软件著作权8项,广东省高新技术产品证书8项,省、市等科技计划项目10多项,2018年入围了大湾区生物科技创新企业50强,获得国家高新技术企业,广州市科技创新小巨人企业、广东省高新技术企业培育库入库企业、广州市企业研发机构等荣誉称号。永诺医疗是永诺生物的全资子公司,以“中国智造”为己任,专注于数字PCR仪器与应用试剂的研发,并于2017年成功研发了国内首款拥有完全自主知识产权的MicroDrop系列微滴式数字PCR系统并投入生产。
  • 荧光定量PCR实验,荧光标记怎么选?
    荧光定量PCR技术是将常规的PCR和荧光检测技术相结合,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,以此实现对初始模板的定量分析。荧光定量PCR技术作为当今生物学研究的重要手段之一,在基础科学、生物技术、医学研究、法医学、诊断学等多方面具有广泛的应用前景。说到荧光定量PCR技术,我们经常会问类似于“你的实验是染料法还是探针法”,“你用的探针是什么类型”等之类的问题,这其实是对荧光标记的选择。根据荧光标记的不同,可以将荧光定量PCR实验分为探针法和染料法两大类。染料法染料法利用能与DNA双链结合的染料来实现,如SYBR Green I。该染料在游离状态下呈现微弱的荧光,一旦与双链DNA的双螺旋小沟结合,其绿色荧光增强约1000倍。因此其总的荧光强度与双链DNA含量成正比,利用这一关系可以反映生成的PCR产物的量(图 1)。SYBR Green I的最大吸收约在497 nm,发射波长最大约在520 nm,与FAM荧光分子的光谱性质类似,因此在所有的荧光定量PCR设备中都是第一通道检测,即“FAM/SYBR Green I”通道。▲ 图1 染料法原理图理论上,所有能与双链DNA结合的染料都可以用于qPCR检测,如溴化乙锭EtBr,碘化丙啶PI,吖啶橙、Cy3等。而选择用于qPCR反应的染料通常会从信号强度、生物安全性、检测简便性和经济适用性这几个因素考虑。例如EtBr可能存在潜在的致癌性。综合考虑下来,SYBR Green I成了比较理想的选择。目前,使用Evagreen的实验者也越来越多,Evagreen作为一种新型的染料,其光谱性质与SYBR Green I类似,其优势在于:▶ 对PCR反应的抑制程度小。高浓度SYBR Green I会强烈抑制PCR反应,因此要控制其使用浓度,一定程度上降低了DNA检测的灵敏度。▶ 与DNA结合密度高。单位长度的DNA双链上Evagreen的密度更高,为饱和型染料,消除了SYBR Green I存在的“染料重分布”的缺陷,提高检测灵敏度的同时也可用于高分辨率溶解曲线HRM。▶ 化学性质更稳定,适合长期保存。TaqMan 探针TaqMan 探针基本可以满足60%以上的qPCR实验,如常规的基因表达和拷贝数变异CNV实验。TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5' 末端,而淬灭剂则在3' 末端(图2)。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收 PCR扩增时, Tag酶的5' -3' 外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX。▲ 图2 Taqman探针MGB探针对于要分辨单碱基差异的SNP实验,采用对碱基错配容忍度更低的MGB探针,在淬灭基团后加入了DPI3基团(图3),从而提高了与靶标结合的亲和力;而且可以对靶点碱基进行化学修饰,如PeptideNucleic Acid和Locked Nucleic Acid。▲ 图3 MGB探针双杂交探针Taqman探针对探针的长度有比较严格的要求,双杂交探针则消除了这一“缺陷”。双杂交探针是由两条寡核苷酸单链组成,一条的3’端带有供体荧光分子,另一条的5’端带有受体荧光分子(图4)。游离状态下荧光供体会发出荧光,但当两条单链都匹配到模板链上时,就会发生荧光共振能量转移FRET,受体荧光分子就可以发出荧光,其荧光强度与生成的产物的量成正比。双杂交探针的优势有两点:摆脱了探针长度的限制,较长的探针可以提高与模板匹配的成功率;只有上下游两条探针都正确匹配后才能检测到受体荧光分子发出的荧光,特异性有所提高。▲ 图4 双杂交探针分子信标探针游离状态下,分子信标探针是一种茎环结构,其环状部分的15-30个碱基可以与靶标区域相结合匹配,下端的配对区域(左右一般各5-6个碱基)则由重复的GC组成,从而将5’的荧光分子和3’的淬灭基团紧紧聚在一起,荧光发生淬灭;当退火时,分子信标探针解开环并与模板靶标杂交,这样荧光分子和淬灭基团的物理距离就变大了,荧光淬灭的前提就打破了(图5)。除了MGB探针,分子信标探针也非常适合用于SNP检测。▲ 图5 分子信标探针除了上述几种类型的探针之外,还有尝试将引物和探针功能相结合的技术,如Amplifluor、LUX等,在设计难度上有所提高,但使用时更简便。各有其应用的侧重点和设计上的利弊,在此不多赘述。那么在荧光定量PCR实验中,我们应该如何进行选择呢?在这里,给大家总结了一些两种方法的区别,供大家参考。表1 染料法和探针法的区别
  • 定量包装商品计量监督管理办法|2023年修订版
    (2023年3月16日国家市场监督管理总局令第70号公布 自2023年6月1日起施行)第一条 为了保护消费者和生产者、销售者的合法权益,规范定量包装商品的计量监督管理,根据《中华人民共和国计量法》并参照国际通行规则,制定本办法。第二条 在中华人民共和国境内,生产、销售定量包装商品,以及对定量包装商品实施计量监督管理,应当遵守本办法。本办法所称定量包装商品是指以销售为目的,在一定量限范围内具有统一的质量、体积、长度、面积、计数标注等标识内容的预包装商品。药品、危险化学品除外。第三条 国家市场监督管理总局对全国定量包装商品的计量工作实施统一监督管理。县级以上地方市场监督管理部门对本行政区域内定量包装商品的计量工作实施监督管理。第四条 定量包装商品的生产者、销售者应当加强计量管理,配备与其生产定量包装商品相适应的计量检测设备,保证生产、销售的定量包装商品符合本办法的规定。第五条 定量包装商品的生产者、销售者应当在其商品包装的显着位置正确、清晰地标注定量包装商品的净含量。净含量的标注由“净含量”(中文)、数字和法定计量单位(或者用中文表示的计数单位)三个部分组成。法定计量单位的选择应当符合本办法附件1的规定。以长度、面积、计数单位标注净含量的定量包装商品,可以免于标注“净含量”三个中文字,只标注数字和法定计量单位(或者用中文表示的计数单位)。第六条 定量包装商品净含量标注字符的最小高度应当符合本办法附件2的规定。第七条 同一包装内含有多件同种定量包装商品的,应当标注单件定量包装商品的净含量和总件数,或者标注总净含量。同一包装内含有多件不同种定量包装商品的,应当标注各种不同种定量包装商品的单件净含量和各种不同种定量包装商品的件数,或者分别标注各种不同种定量包装商品的总净含量。第八条 单件定量包装商品的实际含量应当准确反映其标注净含量,标注净含量与实际含量之差不得大于本办法附件3规定的允许短缺量。第九条 批量定量包装商品的平均实际含量应当大于或者等于其标注净含量。用抽样的方法评定一个检验批的定量包装商品,应当符合定量包装商品净含量计量检验规则等系列计量技术规范。第十条 强制性国家标准中对定量包装商品的净含量标注、允许短缺量以及法定计量单位的选择已有规定的,从其规定;没有规定的按照本办法执行。第十一条 对因水分变化等因素引起净含量变化较大的定量包装商品,生产者应当采取措施保证在规定条件下商品净含量的准确。第十二条 县级以上市场监督管理部门应当对生产、销售的定量包装商品进行计量监督检查。市场监督管理部门进行计量监督检查时,应当充分考虑环境及水分变化等因素对定量包装商品净含量产生的影响。第十三条 对定量包装商品实施计量监督检查进行的检验,应当由被授权的计量检定机构按照定量包装商品净含量计量检验规则等系列计量技术规范进行。检验定量包装商品,应当考虑储存和运输等环境条件可能引起的商品净含量的合理变化。第十四条 国家鼓励定量包装商品生产者自愿开展计量保证能力评价工作,保证计量诚信。鼓励社会团体、行业组织建立行业规范、加强行业自律,促进计量诚信。自愿开展计量保证能力评价的定量包装商品生产者,应当按照定量包装商品生产企业计量保证能力要求,进行自我评价。自我评价符合要求的,通过省级市场监督管理部门指定的网站进行声明后,可以在定量包装商品上使用全国统一的计量保证能力合格标志。定量包装商品生产者自我声明后,企业主体资格、生产的定量包装商品品种或者规格等信息发生重大变化的,应当自发生变化一个月内再次进行声明。第十五条 违反本办法规定,《中华人民共和国消费者权益保护法》《中华人民共和国产品质量法》等法律法规对法律责任已有规定的,从其规定。第十六条 定量包装商品生产者按要求进行自我声明,使用计量保证能力合格标志,达不到定量包装商品生产企业计量保证能力要求的,由县级以上地方市场监督管理部门责令改正,处三万元以下罚款。定量包装商品生产者未按要求进行自我声明,使用计量保证能力合格标志的,由县级以上地方市场监督管理部门责令改正,处五万元以下罚款。第十七条 生产、销售定量包装商品违反本办法第五条、第六条、第七条规定,未正确、清晰地标注净含量的,由县级以上地方市场监督管理部门责令改正;未标注净含量的,限期改正,处三万元以下罚款。第十八条 生产、销售的定量包装商品,经检验违反本办法第八条、第九条规定的,由县级以上地方市场监督管理部门责令改正,处三万元以下罚款。第十九条 从事定量包装商品计量监督检验的机构伪造检验数据的,由县级以上地方市场监督管理部门处十万元以下罚款;有下列行为之一的,由县级以上市场监督管理部门责令改正,予以警告、通报批评:(一)违反定量包装商品净含量计量检验规则等系列计量技术规范进行计量检验的;(二)使用未经检定、检定不合格或者超过检定周期的计量器具开展计量检验的;(三)擅自将检验结果及有关材料对外泄露的;(四)利用检验结果参与有偿活动的。第二十条 本办法下列用语的含义是:(一)预包装商品是指销售前预先用包装材料或者包装容器将商品包装好,并有预先确定的量值(或者数量)的商品。(二)净含量是指除去包装容器和其他包装材料后内装商品的量。(三)实际含量是指市场监督管理部门授权的计量检定机构按照定量包装商品净含量计量检验规则等系列计量技术规范,通过计量检验确定的商品实际所包含的商品内容物的量。(四)标注净含量是指由生产者或者销售者在定量包装商品的包装上明示的商品的净含量。(五)允许短缺量是指单件定量包装商品的标注净含量与其实际含量之差的最大允许量值(或者数量)。(六)检验批是指接受计量检验的,由同一生产者在相同生产条件下生产的一定数量的同种定量包装商品或者在销售者抽样地点现场存在的同种定量包装商品。(七)同种定量包装商品是指由同一生产者生产,品种、标注净含量、包装规格及包装材料均相同的定量包装商品。(八)计量保证能力合格标志(也称C标志)是指由国家市场监督管理总局统一规定式样,定量包装商品生产者明示其计量保证能力达到规定要求的标志。第二十一条 本办法自2023年6月1日起施行。2005年5月30日原国家质量监督检验检疫总局令第75号公布的《定量包装商品计量监督管理办法》同时废止。附件: 1.法定计量单位的选择.docx 2.标注字符高度.docx 3.允许短缺量.docx
  • 第二届近红外纤维定量分析比对试验结果公布
    纺织品纤维含量分析是决定纺织产品标识准确度的重要因素,多国制定相关技术法规,要求纺织服装产品上贴有永久性的标签,并在标签上按照规定的方法注明产品的纤维成分及含量。传统纺织品成分定量方法采用的化学溶解法存在着使用化学试剂、对环境污染、检测周期长、破坏样品等缺点。近红外光谱分析技术作为一种新兴检测技术已经开始迅速被应用于纺织品成分定性和定量检测,具有快速、无损、环保、便捷等优点。该技术主要利用在近红外光的照射下,不同的纤维成分呈现不同吸收峰,其成分含量不同则体现出不同大小、缓陡的吸收峰,利用相应的化学计量学方法和纤维成分数据库,即可获得准确的纤维成分及含量。但在纺织品纤维定量方面,由于近红外模型受仪器类型、实验室环境、织物结构、颜色、染料、纤维含量、检测条件等因素影响,校正模型建立好坏程度直接影响其预测效果,且目前仍存在定量模型无法统一或互通的问题。中国海关科学技术研究中心工业与消费品安全研究所联合深圳市菲雀兰博科技研究中心有限公司,在中国仪器仪表学会近红外光谱分会的大力支持下,于2021年成功举办了第二届(2021)近红外纤维定量分析比对试验,以期推动近红外光谱分析技术的发展和应用。本次比对试验,共涉及棉/氨纶、聚酯纤维/氨纶、棉/聚酯纤维、锦纶/氨纶、棉/聚酯纤维/氨纶 5 大类别,4 类二组分,1 类三组分。分别是棉/氨纶(1-3#)、聚酯纤维/氨纶(4-6#)、棉/聚酯纤维(7-9#)、锦纶/氨纶(10-12#)、棉/聚酯纤维/氨纶(13-15#),五组面料均由中国海关科学技术研究中心工业与消费品安全研究所提供。本次比对试验共有16个机构报名参加,包括中纺标检验认证股份有限公司、北京市毛麻丝织品质量监督检验站、天纺标检验认证股份有限公司、青岛市产品质量监督检验研究院、江苏省纺织产品质量监督检验研究院、南通市纤维检验所、上海英柏检测技术有限公司、上海冉紫实业有限公司、上海纺织集团检测标准有限公司、国家纺织服装产品质量监督检验中心(浙江桐乡)、浙江中纺标检验有限公司、福建省纤维检验中心晋江检验部、中山海关技术中心、广州亚诺检测技术有限公司、中纺标(深圳)检测有限公司、深圳市英柏检测技术有限公司等。在规定期限内有15家实验室反馈了测试结果,1家实验室取消了比对。在15个实验室中,Lab 1、2、3、7、11参加了全部模型比对;Lab 6、8、9、10、12参加了4个模型的比对;Lab 4、5、14、15参加了3个模型比对;Lab16参加1个模型比对。执行标准FZ/T 01144-2018。结果Z比分数图:从参试实验室比对结果可以看出,棉/氨纶、聚酯纤维/氨纶两类样品,各参试实验室所建模型预测结果较为理想,锦纶/氨纶、棉/聚酯纤维、棉/聚酯纤维/氨纶样品,存在少数参试实验室所建模型预测结果不理想的情况。由于纺织纤维种类众多,且复合织物的种类和比例各不相同,使得近红外光谱校正模型的建立难度较大,需要大量的样本数据,校正数据的准确性及合理的计量学方法都对测试结果有影响。针对此次近红外纤维定量分析比对计划,对于相关模型的建立,给出以下建议:1)样品筛选:某些较厚双层针织结构的织物,其谱图看不到明显的吸收峰,或与其他的谱图偏差较大,在建模过程中,此类样品对模型的建立会造成很大影响,不适宜做校正样品,应该去除。2)样品采集: 样品采集过程中,建议将样品折叠适宜厚度,一般4层,水平放置测试窗口上,并在样品上施加一固定压力。采集中对于吸收峰不明显、谱图偏移或漂移严重、光谱形态异常的应提前剔除。3)光谱数据预处理:仪器采集的原始光谱中除包含与样品组成有关的信息外,同时也包含来自各方面因素所产生的噪音信号。这些噪音信号会对谱图信息产生干扰,从而影响校正模型的建立和对未知样品组成或性质的预测。光谱数据预处理主要解决光谱噪音的滤除、数据的筛选、光谱范围的优化及消除其他因素对数据信息的影响,为下步校正模型的建立和未知样品的准确预测打下基础。常用的数据预处理方法有导数、滤噪(平滑)、多点基线校正、归一化处理等。在近红外分析中,对于样品不同组分之间的相互干扰导致吸收光谱谱线重叠的现象,可采用求导的方法进行处理。其中常用的是一阶导数和二阶导数。4)定量校正算法: 近红外光谱分析常用的计量方法有主成分分析(PCR),偏最小二乘法(PLS)和人工神经网络法(ANN)等,其有着各自的优点和局限。选择适合的校正算法,对模型的适用性,有效性有着显著帮助。比如:TQ Analyst提供了定量校正算法,包括了比尔定律、最小二乘法(CLS)、偏最小二乘法(PLS)和主成分回归法(PCR)等。其中在纺织纤维定量检测模型中,偏最小二乘法(PLS)较为经典和常用。5)光谱波长范围的选择:光谱范围的选择在NIR定量分析模型的建立中是最难的一步。至今为止,化学计量学领域仍无完美算法来选择最佳的光谱范围。目前,已有一些配套软件可实现自动化选择光谱范围。例如:TQ Analyst软件中自带Suggest向导进行自动选择光谱范围。光谱波长范围的选择会直接影响模型的精度,即相关系数与均方差。6)建模及模型优化:近红外光谱存在谱带宽、重叠较严重、吸收信号弱、信息解析复杂等问题,它依赖于化学计量学方法,在样品待测属性值与近红外光谱数据之间建立一个校正模型,再通过模型对未知样品的近红外光谱进行预测来得到各性质成分的预测值。目前,近红外建模方法大都以“光谱数据预处理,波长筛选进行特征降维和突出,再通过PLS、SVM算法进行建模”的方法为主。建模的优化常见于如何使用预处理算法对光谱进行预处理,来消除仪器变异所引起的偏差;如何使用波长选择算法,提取光谱中的有效特征;如何利用化学计量方法建立稳定可靠的模型。除此之外,随着人工智能技术的发展,深度学习可以利用现有的大规模已标记数据集训练出一个预测能力强、鲁棒性好的多层网络结构模型。此外深度学习方法建模,其对预处理、波长选择等依赖性很低,该法也将为近红外光谱检测带来新的机遇。
  • 你想知道的荧光定量Western上样量解答来啦
    荧光定量Western Blot,绝对不是上样量越多越好。可靠的Western Blot印迹数据通过加载适当量的样品才能获得。加载过多的蛋白会导致信号饱和或用于检测的荧光基团的自猝灭。那么,您如何知道要加载多少裂解液呢?首先使用BCA或Bradford等蛋白测定方法测量裂解液样品的浓度。一旦知道样品的浓度,便可以确保每种样品的加载量相同。于此同时,您仍然需要一种方法来校准凝胶加载量和转印效率的问题。蛋白印迹定量的最佳方法和新共识是将蛋白进行归一化。许多期刊都接受了总蛋白质归一化(TPN),有些期刊(例如《JBC》)甚至要求作者在Western印迹的定量数据时使用TPN或使用验证过的看家蛋白进行归一化。在下面的实验中,加载了0.2-50µg的HeLa裂解物,以检测靶标蛋白STAT3与内参对照GAPDH和总蛋白膜染色的性能。尽管Total-PVDF膜染色线性最高至50μg裂解物,但这显然不是靶标蛋白STAT3加载的理想上样量,因为信号在12.5μg以上不再线性。上样控制GAPDH的归一化提出了一个严重的问题,因为它在裂解物的浓度低于1µg时呈线性,因此其定量用途非常有限。一般而言,我们建议不要加入超过20µg的裂解物,因为这通常会导致蛋白定量方面的问题。为了获得最佳的荧光定量Western印迹,不要忘记应用适当的归一化策略并加载适量的蛋白。Azure Imager多功能分子成像系统☑ 双激光近红外成像:激发强度大、信噪比高、光泄漏少。☑ RGB可见荧光多功能检测:可进行小鼠成像、转基因植物筛选、模式生物斑马鱼成像、培养皿成像等。☑ 同时4通道荧光成像,检测更高效。☑ 高灵敏化学发光和彩色Marker成像。☑ 彩色蛋白胶和核酸胶成像。参考文献:1. Collecting and presenting data. The Journal of Biological Chemistry.website.:http://jbcresources.asbmb.org/collecting-and-presenting-data#blot. Accessed February 4, 2019.2. Fosang AJ and Colbran RJ. Transparency Is the Key to Quality. J Biol Chem. Dec. 11 2015. 290(50). 29692–29694. PMCID: PMC4705984.
  • 一文揽尽:荧光定量PCR扩增曲线哪个阶段最重要
    qPCR扩增曲线一般分成四个阶段:基线期、指数期、线性期和平台期。那么每个阶段PCR产物量的变化都有什么区别呢?哪个阶段最重要呢?小编这就一一道来。基线期PCR起始时,刚开始前几个循环的荧光信号还没有发生变化,接近一条直线,将其称之为基线,一般是3-15个循环。在基线期内,扩增的荧光信号被背景荧光信号所掩盖,无法判断PCR产物量的变化。指数期扩增的荧光信号高于背景荧光信号,扩增曲线起峰,开始进入指数期。在指数期内,每个循环积聚的产物准确加倍(假定100%反应效率)。该阶段的PCR反应具有高度特异性和精确度。因为所有试剂均充足,反应的动力学推动反应有利于扩增子加倍,所以产物出现指数级扩增。只有在这个阶段,Cq值与初始模板量的对数之间存在线性关系,所以在此阶段进行定量分析最合适。线性期(高变异性)随着PCR反应体系各成分的消耗,其中的一种或者多种成分限制反应,导致反应开始减缓,并且每个循环的PCR产物不再加倍,该阶段不再是指数级扩增。平台期反应停止,不再产生更多产物,并且如果放置时间够长,PCR产物将开始降解。因为每个样品具有不同的反应动力学,所以每支试管或每个反应将在不同的时间点进入平台期,最终的产物含量也各不相同。由于线性期和平台期的扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的产物量与初始模板量之间没有线性关系,所以也不能通过这两个阶段的PCR产物量计算出初始模板量。想要知道初始模板量的多少,还要依赖指数期的Cq值进行计算。▲ 图1. qPCR 反应的重要阶段如图所示,标准的扩增曲线是呈现S型的。曲线是否符合标准,不仅跟样本起始量、qPCR体系配制、反应程序等相关,更依赖于一套高品质的实时荧光定量PCR系统。对于实时荧光定量PCR系统来说,高度检测灵敏度、高度重复性和高度稳定性,是每一台qPCR仪的追求。高性能的Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统完全符合以上要求,该系统来自美国Azure Biosystems公司,融合了高品质的帕尔特温度模块和基于光纤传输的光学检测系统,为您的科学研究提供高精准、高灵敏可靠结果。提供Azure Cielo-3通道和Azure Cielo-6通道,可根据实验需求灵活配置。同时配有10.3”触控系统,主机本身可独立运行、连接、远程交互,让您随时随地知悉实验进程和及时获得实验结果。▲ 图2. Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统高度的灵敏度使用探针法,同时在Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统和其他品牌产品上检测GAPDH基因,结果表明:A)Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统对单拷贝基因的检出率更高。B)Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的Cq平均值要低于2个Cq。▲ 图3. 单拷贝基因检测对比(n=96)高度的重复性源于优异的孔间均一性。105拷贝数GAPDH模板,GAPDH引物扩增,96孔重复结果。Cq平均值=19.1,变异系数(Cv)=0.002。▲ 图4. 96孔重复扩增曲线 A)线性图 B)对数图 高度的稳定性稳定可靠的温度模块和光学系统,确保仪器连续运行1000轮qPCR实验,数据依然稳定可靠,重复性高度一致。对GAPDH进行检测并连续计算Cq值得出平均值和Cq值的标准偏差。Cq值=22.4+0.01。▲ 图5. 长时间连续工作数据稳定
  • 微生物代谢的原位拉曼可视化定量分析成功实现
    记者21日从中科院海洋研究所获悉,该所研究员张鑫课题组和孙超岷课题组共同合作,基于共聚焦显微拉曼技术,通过三维定量成像实现了长期、近实时、非破坏性的微生物监测,对微生物生长和代谢情况进行可视化及定量分析,为未来分析微生物原位生物过程提供了新思路。研究成果近日发表于《微生物学谱》上。固体培养基培养的菌落的三维定量成像示意图 课题组供图记者了解到,张鑫课题组在之前的工作中,观测到我国南海冷泉环境中单质硫含量丰富。随后,孙超岷课题组发现了冷泉细菌Erythrobacter flavus 21-3可以高效氧化硫代硫酸钠生成单质硫,张鑫课题组通过拉曼光谱鉴定后发现单质硫结构为环状S8,研究成果发表在生物学领域权威期刊《国际微生物生态学会杂志》。后续两个课题组合作将E. flavus 21-3及其突变株布放到深海冷泉喷口附近进行原位培养,证实该菌株在深海原位环境中也能形成硫单质,相关成果发表在国际生物学期刊《微生物学》,为解释我国南海冷泉喷口广泛分布硫单质的成因提供了重要理论依据。E. flavus 21-3在高氧条件下的三维拉曼成像分析 课题组供图由此可见,微生物是深海硫形成和循环的重要贡献者,其介导的硫代谢的研究对于了解深海硫循环至关重要。然而,由于深海环境极端复杂,采样困难、微生物难于分离培养等因素,以及缺少对硫元素的形成的近实时无损的监测方法,深海微生物的原位探测面临巨大挑战。目前,主要通过经典的生物和化学方法研究硫元素的生成过程,例如X射线吸收近边结构、高效液相色谱、透射电子显微镜、离子色谱法或化学计量法等。但是,这些方法主要通过取样来获知特定时间点的微生物代谢情况,不能在不破坏样品的前提下连续监测其在时间尺度上的代谢过程;并且,其中一些方法样品制备复杂,会破坏细胞的原位真实性;也可能会出现取样不均匀及污染的情况,导致难以实现连续的原位观察。因此,亟需新的方法突破此瓶颈。低氧条件下E. flavus 21-3的三维拉曼成像分析 课题组供图共聚焦显微拉曼三维成像技术拥有低成本、快速、无标签和无破坏性的优势,具有将定性、定量和可视化完美结合的潜力,为我们解决相关问题提供了新的思路。因此,为证明此技术的潜力,研究团队构建了一套固态基底上微生物群落拉曼三维定量原位分析方法,将光学可视化与拉曼定量分析相结合,可在时间和空间两个维度上无损定量表征微生物群落代谢过程。该技术已成功应用到深海冷泉细菌E. flavus 21-3硫代谢过程的原位监测。据介绍,基于拉曼三维成像进行体积计算和比率分析,课题组对不同环境下的菌落生长和代谢进行了量化,发现了生长和代谢方面不为人知的细节,为厘清深海冷泉生物群落中广泛分布的硫单质成因提供了重要技术支持。“据我们所知,这是首次尝试长期监测菌落在固体培养基中生长的原位无损技术。我们能够快速确定代谢产物,推断反应发生的途径,并快速筛选产硫细菌。由于这一成功的应用,不仅证明了该方法在未来对微生物原位过程的可视化及定量分析的潜力,也为研究深海中附着在岩石沉积物等固体表面上的微生物提供了新的思路。”张鑫对《中国科学报》表示。该研究得到了国家自然科学基金、中国科学院A类战略性先导专项、中国科学院海洋大科学研究中心重点部署项目、泰山青年学者计划等项目联合资助。
  • 定量PCR和数字PCR的瑜亮之争
    p style="text-indent: 2em "span style="color: rgb(192, 0, 0) "strong定量PCR还是数字PCR?/strong/span/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/1439dbfb-374f-41af-be2c-22288fe9e5c0.jpg" title="1.jpg" alt="1.jpg"//pp style="text-indent: 2em "随着数字PCR技术应用的展开,越来越多实验室被其绝对定量的方式、结果的高灵敏度、高重复性等特质所吸引。2012年年底,由Frost & Sullivan公司在北美市场进行的调研显示,约三分之一的被访者表示会考虑购买数字PCR设备。br//pp  那么,是否意味着目前在研究、临床和工业领域内,广泛采用的荧光定量PCR技术将被淘汰?数字PCR很快就要将其彻底取代?越来越多实验室类似问题。结合多年推广定量PCR与近几年投身数字PCR领域的经验心得,谈谈自己的体会,供大家参考。/pp  总体的观点是:strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "虽然绝大多数定量PCR的应用都可以使用数字PCR完成,但在可预期的将来,两者将长期共存/span/strong。到底使用定量PCR还是数字PCR,取决于具体应用和对数据的要求。两者不是either/or的关系,而是both/and的关系。两种技术平台各自的特点与现状大致可从下面8个方面说明。/pp  1. 在20多年的使用和发展中,定量PCR作为一种技术平台,已经产出海量的数据,在工业界和分子检测的某些应用上,定量PCR已经成为“金标准”。基础研究方面,则形成了被称为MIQE的“定量PCR标准实验指南”。/pp  2. 在定量PCR的各种应用中,基因表达分析(gene expression analysis)的应用比重约占七成,综合各种因素来看,眼下定量PCR还是进行基因表达研究的理想手段。/pp  3. 上述的“各种因素”具体展开,主要包括:通量、自动化程度、各种检测探针与染料、检测通道、成本和可参考文献与protocol的数目等等。/pp  4. 就目前市场上已有的数字PCR设备来看,定量PCR在检测的线性范围上具有优势,意味着同一个run内可对各种表达丰度的样品进行分析。/pp  5. 目前定量PCR已经能实现高通量样品条件下的自动化操作。/pp  6. 数字PCR在单分子层面上的绝对定量,可以彻底摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数,提高了实验结果在批内和批间的稳定性,甚至能用来对标准品进行定标。/pp  7. 基于绝对定量的方式,数字PCR结果的高重复性和高精度可实现微小差异的基因表达分析,如等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、microRNA表达分析等等。所谓“微小差异”的标准一般而言是指表达水平的差异在2倍以内。/pp  8. 同等条件下,数字PCR在灵敏度方面拥有优势,使得该技术已成为肿瘤的液态活检、病原微生物检测、转基因成分测定、宿主残留DNA分析等的热门技术。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/6dc031e4-d27b-48ff-a2c2-98004abe037f.jpg" title="11.jpg" alt="11.jpg"//pp  最后,我们来听听MIQE的作者之一:比利时Ghent University的Jo Vandesompele教授如何评价定量PCR和数字PCR之间的关系:/pp  iTo those who say dPCR will replace the “very reliable” qPCR, he responds: “of course not.” Digital PCR, however, might be right for some applications such as detection of rare mutations or copy-number variants./i/ppi  He believes that qPCR is the “technology of choice” for gene expression-based experiments, particularly measuring gene expression changes of more than twofold, which probably make up the majority of experiments. In those instances, “qPCR can do the job” and at a lower price point that dPCR, he says. But spotting gene expression differences among similar molecules such as splice variants or microRNAs might work better with dPCR./i/p
  • 凝胶成像分析系统助力DNA密度定量研究
    那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于凝胶成像分析系统助力DNA密度定量研究:在生物领域当中,对于DNA的研究一直以来都是在不停的耗费人力物力,就希望能够把它研究得更加的透彻。对于很多产品的生产,包括人类的身体健康,都能够给予有效的帮助。但是我们在对DNA研究时,不仅仅要靠科学家的努力,有很多的设备也需要跟上时代的步伐,否则在研究时可能就没有办法可以突破。现在凝胶成像分析系统对于DNA密度定量的研究,能够给予更有效的帮助。因为它可以让读取的数值更加的准确,这样就可以通过现有的研究方式,了解DNA里面的含量标准来进行专门的方向研究。可以让我们对于DNA胶片的研究,呈现完全不一样的准确性。正因为有了这样的一种方式,就可以让我们对于DNA的研究完全跨上一个大步,所以现在在很多专业进行DNA研究领域当中,就会对凝胶成像分析系统来进行使用,对于他自己的研发可以起到有效的帮助。以前我们国家在需要相关设备时,都是通过国际上的一些知名公司来进行采购。不仅采购的成本相对较高,而且产品运输的费用也非常的高,还要涉及到关税等等一些问题,购买企业会觉得自己的经济压力相对较大。但是现在我们国内在凝胶成像分析系统相当中的研究已经不输于国际上比较知名的行业。在这方面的研究,也投入了大量的人力物力。所以现在有几个品牌的产品在经过研发时,取得了很好的成就。在使用的时候,不仅在清晰度上能够给予保障,而且在使用时,它的准确性也能够给予很好的保障。正是因为对于凝胶成像分析系统的整体研究达到了比较先进的水平,所以现在国内有很多的企业在对这一套系统购买时,不需要像以前一样,通过国际上的一些厂家来对产品采购。只需要通过国内的生产企业,就可以对凝胶成像分析系统直接购买。 以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于凝胶成像分析系统助力DNA密度定量研究 。 我们上海嘉鹏科技有限公司是专业生产超微量核酸蛋白测定仪、化学发光成像系统、凝胶成像分析系统、紫外分析仪、核酸蛋白检测仪、紫外检测仪、蛋白质分离纯化系统、光化学反应仪、旋涡混合器、恒流泵、自动部分收集器等十几个系列产品的厂家,欢迎大家前来订购
  • 技术干货 | 实时荧光定量(qPCR)知多少
    实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。qPCR 原理将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。那在我们了解了qPCR的原理之后,我们接下来就要了解一下这几个我们在做实时荧光定量PCR的实验时,一定要清楚的知道的几个概念:CT值、扩增曲线、基线、荧光阈值和阈值循环数01Ct 值的定义在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念 —— Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。02扩增曲线(amplification curve)是在实时荧光定量PCR中监测到的荧光信号随着循环数变化而绘制的一条曲线。在进行PCR反应过程中,通过检测系统对PCR管内的样品进行实时检测,最后将荧光信号值通过成像技术显现在计算机上。正常的扩增曲线包括四个阶段:基线期、指数增长期、线性增长期、平台期。03基线(baseline)是背景曲线的一段,在扩增反应的最初数个循环里荧光信号变化不大,接近一条直线。04荧光阈值(threshold)是在荧光扩增曲线指数增长期设定的一个荧光强度标准(即PCR扩增产物量的标准)。荧光阈值可以设定在PCR扩增的指数期。05阈值循环数表示每个PCR反应管内荧光信号达到设定的荧光阈值所经历的循环数,研究表明,各模板的CT值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,即起始拷贝数越多,CT值越小 起始拷贝数越少,CT值越大。我们利用已知起始拷贝数的标准品可做出以起始拷贝数的对数为横坐标,CT值为纵坐标的一条标准曲线。只要获得未知模板的CT值,即从标准曲线上计算出该模板的起始拷贝数。06荧光化学目前,实时荧光定量PCR技术主要通过两种方式——荧光染料或者荧光标记的探针对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,并结合相应的软件对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。现将其原理简述如下:1)TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。2)SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。那我们要如何选择qPCR的检测方法呢?下面我就列出他们各自的优缺点,大家可以参考一下! qPCR和常规PCR的区别实时检测(在对数扩增时期)而不是终点检测敏感性高需要样品少特异性高精确定量qPCR常见问题分析1.无Ct值出现检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。模板降解: 避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。2. Ct值出现过晚(Ct38)扩增效率低: 反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。PCR产物太长: 一般采用80-150bp的产物长度。3. 标准曲线线性关系不佳加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。模板中存在抑制物,或模板浓度过高4. 负对照有信号引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。5. 扩增效率低反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。6. 溶解曲线不止一个主峰引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的 mix 试剂盒。模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。7. 同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断?判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性如果扩增效率在90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。8. 扩增曲线的异常?比如“S”型曲线?参比染料设定不正确(MasterMix不加参比染料时,选NONE)模板的浓度太高或者降解荧光染料的降解
  • 又一实时荧光定量PCR分析仪获批上市!
    7月5日,济南高新公布,公司控股子公司近日艾克韦生物收到国家药监局颁发的《医疗器械注册证》。产品名称:实时荧光定量PCR仪;注册证编号:国械注准20223220773;适用范围:与配套的核酸检测试剂共同使用,在临床上可对来源于人体全血、血清/血浆、口咽拭子、痰液、粪便样本中的靶核酸(DNA/RNA)进行定量、定性检测,包括病原体和人类基因突变、分型项目;注册证有效期:2022年6月27日-2027年6月26日。艾克韦生物自主研发的实时荧光定量PCR分析仪,可与配套的核酸检测试剂共同使用,能够进行快速、准确的定量、定性检测,应用范围较为广泛。该次医疗器械注册证的取得,丰富了艾克韦生物产品线,有利于增强艾克韦生物的综合竞争力和市场拓展能力,提升公司实业运营板块核心竞争力,符合公司发展战略。公司简介:济南高新:济高控股集团成立于2005年,是济南高新区国有独资开发建设运营主体,主要承担园区开发、实业运营、资产管理、产业金融投资等任务。集团注册资本40亿元,截止目前总资产超过900亿元,净资产超过300亿元,全资、参控股及托管企业100余家,已形成“园区开发运营+产业金融+实业运营”一体两翼业务新格局。荣获“2019年政府园区平台转型标杆企业” 、“2019、2020、2021年中国产业园区运营商30强”、“2020中国产业园区运营商影响力10强”、2021中国值得尊敬的地产品牌企业,连续多年荣获“山东省房地产十大品牌企业”、“山东社会责任企业”、“济南市五一劳动奖状”、“省级精神文明单位”称号。艾克韦生物:山东艾克韦生物技术有限公司(简称艾克韦生物)成立于2007年3月,是致力于临床生物医学、分子诊断、基因检测技术产品和高通量检测平台的开发、产业化与技术服务的创新型生物技术企业。2018年2月,被上市公司西陇科学(证券代码:002584)吸收合并。 艾克韦生物未来的发展方向是将利用所掌握的核心技术和地位,持续创新适用于临床诊断、流行性疾病防控、重大疾病、食品安全风险检测、个性化医疗等领域的分子诊断、基因检测技术和产业化,努力实现“为全民族提供高质量的医学诊断服务”的企业愿景。
  • “深度覆盖的蛋白质组精准鉴定与定量新技术”项目正式启动
    p  10月27至28日,由中国科学院大连化学物理研究所作为主持单位承担的国家重点研发计划“深度覆盖的蛋白质组精准鉴定与定量新技术”项目启动会在生物楼学术报告厅举行。项目负责人张丽华研究员,项目组专家大化所张玉奎院士、中科院高能物理所柴之芳院士,复旦大学杨芃原教授,北京大学刘虎威教授,国家纳米科学中心赵宇亮研究员,国家蛋白质科学中心秦钧研究员,项目指导专家中科院武汉数学物理研究所刘买利研究员,中国人民解放军军事医学科学院甄蓓研究员,科技部高技术研究发展中心主管聂启昌,中科院前沿科学与教育局生命科学处主管路浩,我所职能部门相关人员以及各子课题承担单位的专家和代表70余人参加了会议。/pp  项目启动会由张玉奎主持,大化所科技处副处长张宇首先代表所里致辞。随后,张玉奎为专家颁发聘书,聂启昌介绍了项目管理规定。张丽华向项目专家组汇报了项目的整体情况,各课题负责人分别汇报了各课题的任务目标、研究内容、实施方案以及研究计划等情况。专家组对本项目实施方案进行了审议讨论,对本项目给予了充分的肯定,同时对项目实施提出了合理中肯的建议,对本项目今后的开展具有积极的推动作用。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201710/insimg/ecfb9c48-126a-4791-a0e4-7e9de81626a1.jpg" title="W020171030526310365904_副本.jpg"//pp  国家重点研发计划“深度覆盖的蛋白质组精准鉴定与定量新技术究”项目设置四个课题。课题一、可变剪切和新生肽链组的高灵敏鉴定技术 课题二、基于高效标记和特征肽段的蛋白质组精准定量技术 课题三、基于高效分离的蛋白质组深度覆盖定量技术 课题四、纯化蛋白质的全序列高准确测定技术。通过本项目的实施,将在蛋白质组精准鉴定与定量领域取得一批具有自主知识产权的突破性和创新性研究成果。为推动我国蛋白质科学跨越式发展,并达到国际领先水平提供重要技术支撑。/pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201710/insimg/8f950f66-961a-4770-914d-bd2ebf603e80.jpg" title="W020171030526310378848_副本.jpg"//p
  • 我国构建全新全球大宗作物遥感定量监测体系
    由中国科学院遥感与数字地球研究所承担的地球观测与导航技术领域&ldquo 星机地综合定量遥感系统与应用示范&rdquo 重大项目&ldquo 全球大宗作物遥感定量监测关键技术&rdquo 课题已完成95%的专用信息产品反演方法及产品生产,构建了全新的全球大宗作物遥感定量监测体系,并首次面向全球发布中英文双语《全球农情遥感速报》,为国际社会提供了粮食生产形势信息获取途径。该课题2013年12月25日顺利通过科技部国家遥感中心组织的中期检查。  据介绍,在充分利用国产气象卫星(FY-2/3)与环境卫星(HJ-1)遥感数据的基础上,该课题组自主研发了一系列作物遥感监测指标与评估方法,其中部分指标首次用于全球农情评估,构建了全新的多层次、多指标的全球大宗作物遥感监测技术体系,相关成果已纳入科技部推动的全球生态环境遥感监测年度报告体系,并于2013年11月20日面向全球发布了中英文版本的《全球农情遥感速报》。英文版《全球农情遥感速报》是中国首次面向全球发布的全球农情监测信息。  该课题是863计划重大项目&ldquo 星机地综合定量遥感系统与应用示范&rdquo 课题之一,在项目整体攻克星地协同观测与卫星组网、多尺度时空遥感数据快速定量流程化处理以及综合定量遥感产品生成等关键技术的基础上,开展大宗作物遥感定量监测专用信息产品研发和面向全球尺度的作物种植面积、产量遥感监测技术研究,形成独立、快速的全球大宗作物(小麦、玉米、水稻、大豆)种植面积和产量定量遥感监测技术体系,满足面向粮食等战略资源的全球监测和粮食安全战略需求。
  • 【瑞士步琦】您最关心的近红外定量分析小知识我都有!
    红外定量分析小知识近红外分析作为一种二次分析方法,需要借助模型来对采集的近红外光谱进行计算,从而得到用户关注的指标的结果,可以简单地将这个模型理解成类似与指纹图谱的数据库,只要这个数据库足够全面,就能快速准确地提供分析结果。通常来说,初次接触近红外以及想要独立建立近红外定量分析模型的用户最为关心的问题就是:我需要多少个准备多少个样品才能建立起一个“能用”的模型呢?在回答这个问题之前,需要先了解近红外分析的工作流程。近红外分析的工作流程收集建模样品获取样品参考值采集建模样品的近红外光谱建立模型验证模型用于未知样品的分析日常分析与监测通过上述分析流程可以看出,之前提到的问题是对近红外这项分析技术基础但很核心的疑问。其实问题的答案也很简单,一句话概括就是足量的具有代表性的样品。虽然这个回答很简略,但其中包含的要点却不少。展开来说分为两方面:一个是足量的样品,另一方面是代表性的样品。这两点在GB/T 29858 《分子光谱多元校正分析通则》中有详细的描述:对于校正集至少需要 6 倍于建模潜变量(建模时的一个重要参数)大小的样品,当潜变量小于 4 时,样品数量不应少于 24 个。样品应包含所分析的成分。收集的样品成分含量变化范围应适当超过日常分析的范围(10 %-15 %)。收集的样品成分含量分布需服从均匀分布。对于验证集至少需要 4 倍于建模潜变量大小(与校正集潜变量相同)的样品,当潜变量小于 5 时,样品数量不应少于 20 个。收集的样品成分含量的跨度和标准偏差应是校正集的 95% 到 100% 之间。从国标中不难看出,建立一个分析模型至少需要接近 50 个具有代表性的样品,当然这只是最低的要求,如果想要获得一个更加稳健的模型,得到更为准确的分析结果,增加更多具有代表性的样品到模型中则是必不可少的。下期的近红外定量分析知识将为大家分享如何系统地评价模型的性能,欢迎关注步琦实验室服务号,及时获取最新信息。如果您在近红外仪器使用过程中还有其他问题,也可通过下方的联系方式告诉我们,会有专业的技术人员竭诚为您答疑解惑。
  • 小身材,更有才——Gentier mini便携式荧光定量PCR仪
    无论是临床诊断,还是动物疫病检测,小巧便携的检测设备都能为您的工作带来便利。天隆智造基于多年技术积累,结合用户现场及快速检测需求,推出Gentier mini便携式荧光定量PCR仪。该款产品小巧便携,操控灵活,荧光检测高效,温控卓越,让PCR荧光定量检测走出实验室,在更多场所发挥作用,为您的工作带来无限便利!贴心设计3.2KG小巧身材,单手轻松拎起;7英寸高清LCD电容屏,带来流畅顺滑操作体验;专利设计,搬动后无需荧光校准;瞬时断电保护,重启继续运行无惧突发状况。 检测高效1秒16孔位双色荧光扫描,为结果争分夺秒;独立温控模块,支持降落PCR、长片段PCR;定性定量、熔解曲线、SNP位点分析,软件功能依然强大。 操控灵活特有快捷模式,预设程序让检测更便捷;网口、USB、WiFi多种方式互联;单机/电脑/平板电脑操控模式,满足多场景应用。 快捷模式——仅需5步点击即可启动实验随着动物疫病的精准检测需求日益增加,动物疾病预防和诊疗相关国家标准逐步颁布与细化,在犬细小病毒病诊断、犬瘟热诊断、非洲猪瘟诊断等国家标准中都提出应用PCR检测技术。PCR检测技术凭借其高灵敏性,高特异性等优点,正在逐步成为动物疫病检测的推荐方法。继承天隆荧光定量PCR仪优良性能的Gentier mini应运而生,专为移动实验室、小型实验室或现场检测而设计,不仅可以解决小型养殖场或宠物医院检测场地受限,样本零散等问题,同时能够为结果的快速出具及分析提供保障,助力动物疫病的精准、快速检测。谁说荧光定量检测仪“提不动”?天隆智造家族新成员Gentier mini,让荧光定量PCR检测随心而动,您值得拥有!
  • 酷搏科技推出q900系列384孔高通量荧光定量PCR系统
    96孔荧光定量PCR仪已成为分子生物学实验室的必备工具,但对于基因表达分析、基因分型研究(SNP/CNV)、病原体检测、核酸药物开发、测序文库定量、作物育种等细分领域,依然存在更高通量的荧光定量检测需求。为此,酷搏科技于2023年夏天推出全新产品——Quantagene q900系列384孔荧光定量PCR系统,以更全面的功能、更快速的检测、更准确的定量结果助力用户更高效的实验室研究。产品特点一台优秀的荧光定量PCR仪,需要在运行快速、操作简便的基础上最大程度实现每个反应孔温度、光学性能的一致,从而得到准确的检测结果。为了实现这一目标,q900的热循环系统设计了3组独立输出的Peltier模块,分别对加热模块的 3个区域独立控制,确保不同区域间的温度均一性。反应体积5µ l,全部384孔使用完全一致的反应溶液时Tm值的分布。图中Tm最大与最小值之差为0.18°C,Tm平均值为80.52°C。另一方面,q900 采用独特的双重反射静态光学模组阵列技术。每个光学通道配置独立的长寿命 LED光源、滤光片组和CMOS相机,双重反射的设计在小体积的机身中延长光路,降低孔板中心和边缘的荧光信号差异。左:在q900MX上使用四种探针(蓝色:FAM,绿色:HEX,黄色:ROX,红色:Cy5)分别进行7个浓度10个梯度稀释(n=6)的一步法四重RT-qPCR实验。右:双重反射静态光学模组阵列结构示意图。性能展示优秀的384孔整板Ct一致性得益于均一的热循环系统和稳定的光学系统,q900可以轻松实现整板Ct标准差小于0.05,有效消除边缘效应,在任何孔位进行实验都可以获得相同的准确结果。实验一实验二实验三仪器编号123Ct平均值17.77517.78317.580Ct 标准差0.0220.0200.031Ct CV0.12%0.11%0.18%使用q900进行整板实验的全384孔归一化扩增曲线图及Ct值附近局部放大图大范围浓度精准定量q900可以在100-1010拷贝/反应范围内进行定量检测,稳定均一的温控系统确保全浓度范围高效扩增,为文库定量、基因表达定量等应用提供更准确的数据结果。仪器型号q225q900扩增效率100.1%100.1%R20.99960.9996使用q225及q900进行连续2倍梯度稀释实验,反应体积5μl,每一浓度三个平行反应。在Ct值为4-30的区间范围内,q900均可以进行准确定量,且结果与q225实验结果高度一致。1-25μl反应体积均可适配考虑到操作方便性,q900推荐反应体积为5-10μl。而对于样本或试剂较为珍贵的情况,在q900上使用低至1μl的反应体系,依然可以获得相同准确性的测试结果,配合拟合算法计算Ct值,使得相同反应体系在不同反应体积下可以获得完全一致的Ct结果。反应体积Ct平均值Ct标准差20μl17.9180.05010μl17.9150.0075μl17.9330.0092μl17.9390.0271μl17.9540.026新品试用活动已开启,诚邀您来体验q900系列384孔荧光定量PCR仪的高效、准确与便捷。详询北京酷搏科技有限公司或各地销售伙伴。
  • 获证!鲲鹏基因医用荧光定量PCR仪获证|军用荧光定量PCR系统发布
    半导体&液体循环制冷|Archimed Mini 16 医用荧光定量PCR仪获证2023年2月7日,鲲鹏基因自主研发的Archimed Mini 16 医用荧光定量PCR仪获得国家药品监督管理局批准的第三类医疗器械注册证,注册证编号:国械注准20233220149。快速获取检测结果是现场即时检测的重要应用需求,为满足这类实际需求,Archimed Mini 16特采用创新型Peltier半导体结合液体循环散热技术,在保证均一且精确控温性能的同时,实现超快速变温,最大样本变温速率大于5.4℃/秒。在同等试剂及运行条件下,相比市场通用性(96孔)定量PCR,实验耗时至少缩减30%。这是继Archimed X系列医用荧光定量PCR仪获证后,鲲鹏基因再次在分子诊断设备领域获得的临床诊断相关资质。自此,鲲鹏基因荧光PCR产品线涵盖了从高通量96孔通用型定量PCR(Archimed X4/X6)到快速便携式定量PCR(Archimed Mini 16)的多用途、多场景方案构成。将满足包括三甲医院、区县级医院、基层卫生服务机构、各级CDC以及检验科、门/急诊、临床科室等各类医疗卫生机构的全场景需求。Archimed Mini J 军用荧光定量PCR系统新品发布为了满足复杂多变的战场环境,实现即时检测的需求,鲲鹏基因推出一款符合军规标准的超快速便携式军用荧光定量PCR仪Archimed Mini J,系统采用鲲鹏基因创新型第二代控温技术、搭配操作简易的软件、轻巧便携的军绿色一体式机身及超强的环境适应能力,从容应对各类野外环境,快速准确地完成定量PCR相关应用。技术亮点:快速获取检测结果且具有较强的环境适应力是野外现场即时检测的重要应用需求,为满足这类实际需求,Archimed Mini J 特采用独特的Peltier控温方式,结合创新性VC均热技术及防水风冷设计,在保证均一且精准控温性能的同时,实现超快速变温控制,最大速率达8℃/秒。配备铝制外壳和防水导电胶条封边,提高电磁兼容性的同时实现防振动、防冲击、防淋雨、防霉菌、防盐雾,快速精准完成定量 PCR 相关应用。
  • 岛津推出《食品中维生素ADE定量解决方案》
    维生素 A(维生素 A 乙酸酯)、维生素 D3和维生素 E(维生素 E 乙酸酯)对于人类的健康至关重要。其中维生素 D3(胆钙化醇)是哺乳动物重要的营养成分,具有促进哺乳动物钙磷代谢和成骨的作用。因此,维生素 A、维生素E 和维生素 D3 是婴幼儿奶粉和米粉的营养成分主要营养成分,也是各种保健食品的重要组成部分。维生素 A 和维生素 E 紫外吸收较强并且在食品中的含量较高,一维色谱即可实现这两种化合物的准确定量。维生素 D3含量较低、紫外吸收不强、易受基质干扰,难以通过一维色谱实现其与基质的分离和准确定量。因此,同时定量食品中维生素 A、维生素 D3 和维生素 E 难以实现。 AOAC 采用 LC-MS/MS 技术定量奶粉中维生素 D3,该方法效果较好,但测试成本较高。欧盟和中国采用两套方法定量维生素 A、维生素 D3 和维生素 E,即反相色谱(一维色谱)定量维生素 A 和维生素 E,离线二维法(正相色谱制备+反相色谱分析)定量维生素 D3。制备液相加分析液相的方法主要解决两方面的问题:1. 维生素 D 馏分的两次净化(维生素 D 与基质的分离);2. 二维正交性分离,维生素 D3 与维生素 D2 的分离、维生素 D3 与基质的分离。该方法具有比LC-MS/MS 方法成本更低的优点,但工作量较大且不利于大量样品的分析(自动化程度较低)。岛津采用中心切割方法,第一维色谱柱定量维生素 A 和维生素 E,同时净化维生素 D。定量环收集维生素 D 组分,并由二维液相泵引入第二维色谱柱,利用一维和二维色谱柱不同的分离选择性实现维生素 D3 与基质的分离,以及维生素D3 和维生素 D2 的分离,最终实现维生素 D3 的定量。综上所述,本方法只需一次进样,即可实现维生素 A、维生素 D3 和维生素 E 同时定量,节约了大量样品制备时间、避免正相溶剂对分析人员的伤害,同时具有稳定性好、准确度高的特点,可用于米粉、婴幼儿奶粉、多维片和钙片中维生素 A(维生素 A 乙酸酯)、维生素 D3 和维生素 E(维生素 E 乙酸酯)的含量检测。关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
  • 体视荧光模块实现定量实验的要求
    体视荧光模块采用双色三通道设计,最多可实现3色荧光的观察需求,可选配V/B/G/Y/R在内的相关波段,配套数显屏显设计,实现定量实验的要求,对于亮度调节变得更加可控。另外扩大了通光视野范围,相比之前,与显微镜兼容匹配性更高。还可匹配各品牌伽利略光学系统体视显微镜,使普通显微镜实现荧光功能,且不改变显微镜原有光路,轻松为普通显微镜实现荧光观察功能。体视荧光模块实现定量实验的要求,使用改性沥青提升路面的耐磨耗能力和延长道路的使用寿命,已经成为我国基建的新常态。成品的改性沥青对比普通沥青优势明显,但其品质无法用肉眼观察分析,这导致很多客户在因达不到效果而与上游产生质量问题纠纷。对沥青掺杂橡胶、树脂、高分子聚合物、磨细的橡胶粉或其他填料等外掺剂,或利用轻度氧化加工等措施,使沥青或沥青混合料的性能得以改善制成的沥青结合料,就是改性沥青。性能优势:1、双色三通道结构设计,标配两个大视野荧光通道与一个明场通道;2、可根据用户需求,自由选择荧光波段、数量,波段切换稳定顺畅;3、采用LED冷光源,驱动电源、LED激发光源及荧光滤光组一体化;4、侧置通道、亮度数字化显示直观便捷;5、体视荧光模块基本可以将沥青放大到100X,对沥青的观察也十分简便。同时,它采用优异的无限远平行光路系统,LED荧光双光路照明设计。体视荧光模块应用领域:生物活体成像;线虫;果蝇;斑马鱼;胚胎;司法刑侦。体视荧光模块产品详情页:体视荧光模块 BGU-LED-ZMH
  • 生物技术公司角逐荧光定量PCR产品
    荧光定量PCR(qPCR)是以荧光为基础的定量分析技术,应用非常广泛,可以用于定量RNA丰度(RT-qPCR),验证芯片或测序的数据,确定病原体的载量,进行基因分型等等。   荧光定量PCR仪负责监控反应体系中荧光强度的变化,记录检测荧光达到阈值时的循环数(被称为Ct或Cq值)。从理论上说,每一个qPCR循环会使目标序列翻倍,因此人们可以在Ct值的基础上对样本进行定量。  在进行荧光定量PCR时,我们往往会面临众多选择,每一步选择都影响着实验的最终结果。好在市面上的qPCR产品也种类繁多,可以满足我们的各种需求。  染料法VS探针法  荧光定量PCR主要分为染料法和探针法两种。染料法一般采用DNA染料SYP Green(或Promega的PYT Green等),这种方法不仅使用简单,成本也最低。不过染料法检测的是体系中的所有双链DNA,不具有序列特异性。为此,一些厂商提供ROX作为内部荧光参考标准,用来校正背景。  染料法  成本低是染料法qPCR的一个主要优势,DNA染料相对比较便宜,而且适用于任何序列。不过染料法无法在同一个样本中检测多个指标,也难以鉴定扩增得到的序列,会受到脱靶效应(如引物二聚体)的影响。在这种情况下,就需要进行熔解曲线分析,判断扩增所得产物是否只有一种。  据安捷伦的Surekha Karudapuram介绍,熔解曲线分析能够帮助研究者确定扩增的特异性。她还指出,理论上利用熔解曲线也可以进行多染料的反应,甚至可以粗略定量那些峰值。  市面上可供选择的染料法master mix非常多,例如:安捷伦的Pilliant III Ultra-Fast SYP Green QPCR & QRT-PCR master mixes,Bio-Rad的SsoAdvanced™ SYP Green Supermix,Life Technologies的SYP Select Master Mix,Promega的GoTaq qPCR Master Mix,Qiagen的Type-it CNV SYP Green PCR Kits,罗氏的FastStart SYP Green Master,Sigma-Aldrich的KiCqStart SYP Green qPCR ReadyMix™ ,以及Thermo的Luminaris Color HiGreen High ROX qPCR Master Mix等等。  TaqMan探针  探针法qPCR使用具有序列特异性的荧光寡核苷酸探针。目前最常用的是Life Technologies公司的TaqMan探针,该探针5’端连有荧光基团,3’端连有淬灭基团。在反应进行时,探针与正反向引物之间的模板结合,当聚合酶到达探针处时,酶的5’-3’外切活性将荧光基团切下,使其脱离淬灭基团,发出荧光。  探针法与染料法的最大区别在于,理论上探针法中的荧光信号只来源于目标序列。此外,人们还可以利用不同探针,在一个体系中同时检测多种指标。  市面上的探针法master mixes也是琳琅满目,包括:安捷伦的Pilliant III Ultra-Fast QPCR & QRT-PCR Master Mixes,Bio-Rad的SsoFast Probes Supermix,Life Technologies的TaqMan Fast Advanced Master Mix,Promega的GoTaq Probe qPCR Master Mix,Qiagen的Type-it CNV Probe PCR +qC Kit,罗氏的FastStart TaqMan Probe Master,以及Thermo的DyNAmo ColorFlash Probe qPCR Kit等等。  据估计,SYP Green或TaqMan的使用者占qPCR用户总数的80-90%,其他用户采用的也基本上是上述两种方法的变种,例如分子信标和Scorpion探针。  其他探针  分子信标是一个发夹结构的DNA探针,两头分别带有荧光基团和淬灭基团。与TaqMan一样,分子信标的序列也与扩增引物之间的模板互补。在退火阶段,这种探针的发夹结构展开与模板结合,这时荧光基团与淬灭基团分开,发出与模板丰度相对应的荧光信号。Scorpion探针将分子信标与PCR引物结合起来,在扩增阶段引物延伸形成PCR产物,产物中的序列能够与探针互补结合,使探针发夹结构打开,发出荧光。  此外,Promega还开发了一种新型的Plexor qPCR系统。在Plexor系统中,引物含有经修饰的核苷酸(iso-dC)和荧光基团。随着扩增的进行,DNA聚合酶会向DNA链中引入荧光淬灭基团,使体系中的荧光逐渐减弱。其他qPCR方法记录荧光的增强,而Plexor记录的是荧光的衰减,Promega的市场经理Gapiela Saldanha解释道。  据Saldanha介绍,Plexor将探针法的序列特异性,与染料法的熔解曲线分析结合起来。“你可以验证目标扩增的特异性,”她说。此外,Plexor检测不同靶序列只需要两种引物,使多重分析的设计更为容易。  基因表达分析  从SNP分型、拷贝数分析到病原菌检测,qPCR应用范围非常广,不过最常见的是用qPCR进行基因表达分析。基因表达分析往往需要定量样本中的特定RNA,例如mRNA、microRNA、或长非编码转录本。进行这样的分析,首先要将RNA转变为可以扩增的DNA,进行cDNA合成。  RT-qPCR试剂盒主要分为一步法和两步法。一步法试剂盒将cDNA合成与qPCR合并为一步,速度更快,也更适用于自动化流程。两步法虽然需要进行两次反应,但反应的效率更高,而且可以允许用户保留cDNA样本,能够在一个RNA样本中检测多个转录本。  “两步法(qPCR)更有优势,其cDNA合成和qPCR反应的效率更高,”Saldanha说。安捷伦,Bio-Rad,Life Technologies,Promega,罗氏和Qiagen都提供有相应的RT-qPCR试剂盒。  样本的挑战  荧光定量PCR结果的好坏往往取决于核酸制备的质量。处理环境样本(如土壤)和植物样本比较困难,因为其中往往含有抑制PCR反应的物质。此外,FFPE样本也较难处理,其中不仅有PCR抑制剂,样本中的核酸可能也遭到了降解。  “这种情况对于灵敏度要求较高,因为模板量非常少。”Karudapuram说,“需要提取更纯的核酸,并且使用能扩增少量初始模板的master mix。”我们可以选用进行了相应优化的核酸提取试剂盒,例如Promega的ReliaPrep™ FFPE RNA Miniprep System或者Life Technologies的Plant RNA Reagent等等。  选择理想的qPCR扩增引物,也是一个不容忽视的问题。专家认为,对于相同基因的检测,最好采用已经标准化了的引物。目前,不少供应商都为研究者们准备了预先设计好的qPCR文库,例如Sigma-Aldrich公司就制备了人类、小鼠、大鼠和斑马鱼的文库。此外,Qiagen,Life Technologies,和Thermo等公司也提供有类似的工具。  qPCR仪与数字PCR  从本质上来讲,荧光定量PCR仪就是PCR仪与荧光检测仪的结合,用于记录qPCR反应时产生的数据。市面上的qPCR仪主要有以下几种:安捷伦的Mx3000P qPCR System,Bio-Rad的CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System,Illumina的Eco Real-Time PCR System,Life Technologies的QuantStudio™ 12K Flex System,Qiagen的Rotor-Gene Q,罗氏的LightCycler systems,以及Thermo的PikoReal Real-Time PCR System等。  荧光定量PCR已经是一个相当成熟的技术了,不过当样本间的绝对差异较小时,qPCR检测的效果并不那么理想。例如,qPCR很难区分一个基因两拷贝和三拷贝之间的差异。好在,能够进行绝对定量的数字PCR技术诞生了。  数字PCR将样本分为许多份,使每一份包含零或一个拷贝的模板。然后在每一份样本中运行qPCR反应,对呈阳性的孔进行计数,以此确定样本中模板分子的绝对数量。这一技术的精确性非常高,可以区分很小的拷贝数差异。Bio-Rad、Fluidigm、Life Technologies和RainDance是目前几家主要的数字PCR厂商。
  • 核酸定量检测设备国家重大仪器开发专项启动
    4月28日,国家重大科学仪器设备开发专项“核酸自动化定量检测与高分辨分析设备研制及应用”项目启动会在西安交通大学召开,科技部、教育部、陕西省科技厅相关领导和专家以及项目承担单位的相关人员参加了会议。  该项目的目标是开发具有自主知识产权的核酸自动化定量检测与高分辨分析仪器,项目团队在既往国家科技计划的支持下,已研制出具有核酸检测相关功能的仪器装置,并在科学研究、肝炎及流感检测等疾病检测诊断领域起到了作用,在此基础上,本项目将开发更高性能集样品预处理、核酸提取、扩增、定量检测和高分辨分析于一体的多功能自动化仪器,项目的实施将为我国生命科学研究、疾病防控、食品安全和现代农业等领域提供重要的检测分析仪器装备,满足市场急需,并能替代进口。  国家科技部、财政部从2011年开始组织实施国家重大科学仪器设备开发专项,旨在推动科学仪器设备开发和应用,支撑科技创新,服务科学研究和经济社会发展,强化企业技术创新主体地位,强调面向市场、面向应用、面向产业化,重点支持具有市场推广前景的重大科学仪器设备开发。近年来,陕西省积极开展科学仪器自主创新工作,并取得了显著成效。今年,科技部、财政部已将陕西省纳入重大科学仪器设备开发专项试点省,为陕西省开展科学仪器设备研发及产业化应用提供了强有力地支撑。
  • 清华大学热能系研制成功LIBS定量化技术
    科技成果鉴定会——清华大学激光诱导击穿光谱(LIBS)定量化技术鉴定会召开  受清华大学热能工程系的委托,由中国仪器仪表学会组织,就其“激光诱导击穿光谱(LIBS)定量化技术”举办的科技成果鉴定会,于2017年1月14日在北京举办。鉴定会现场  鉴定会专家组由金国藩院士、张玉奎院士、尤政院士、顾大钊院士及3位专家组成,鉴定会由学会科仪委主任燕泽程主持,学会常务副理事长吴幼华出席会议并至欢迎辞。中国仪器仪表学会常务副理事长吴幼华至欢迎辞  (LIBS)由于其快速多元素同时测量、无需样品准备、无损、可远程测量等独特优点,可以为生产过程提供原位、在线、或快速的关键元素浓度信息,被称为是“未来的化学分析巨星”。但由于受不可控的激光-物质(无法通过样品准备进行精确控制)相互作用的影响,加上其后的激光-等离子体(由激光烧蚀产生)、等离子体-环境气体、等离子体-激波(由等离子体快速碰撞产生)之间相互作用过程中受多种不确定因素的影响,导致LIBS系统信号测量不确定度较高,可重复性精度较差 受基体效应的影响,测量误差也相对较大。这两个瓶颈导致目前还未实现LIBS大规模商业化。  清华大学热能系正是针对LIBS存在的瓶颈,通过研究激光诱导击穿光谱技术,如激光-样品、激光-等离子体、等离子体-环境气体等相互作用及对LIBS光谱影响机制,提出了一整套实现LIBS精确定量化的方法与技术,在煤质在线检测、金属分析、水泥生料等领域得到应用验证。  鉴定委员会听取了项目单位汇报、审查了相关资料并做了现场测试,认为该技术突破了LIBS测量不确定度和准确性差的瓶颈制约,形成一套LIBS精确定量化技术,具有广阔应用前景,整体处于国际领先水平。  鉴定会专家及项目单位对学会工作给与高度的评价,项目单位还将继续加强和学会的深入合作,学会也将在科研成果产业化、标准制定、项目申报、人才推荐等方面给与更多的关注和支持。
  • 首个!国标《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》12月正式实施
    2023年5月23日发布的GB/T 42753-2023《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》将于12月1日正式实施。近年来随着我国科研仪器制造水平的不断提升,国产化实时荧光定量PCR仪已逐步占领国内外市场。特别是新冠疫情以来,国产PCR仪市场总体呈现爆发式增长,但相应标准的缺失制约了行业的发展。本次标准的发布将有助于不同领域核酸检测工作的开展以及生物分析行业的健康发展,对提升我国产品的整体质量和核心竞争力具有重要的推动作用。《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》由中国检验检疫科学研究院、北京市科学技术研究院分析测试研究所(北京市理化分析测试中心)、苏州百源基因技术有限公司、中国计量科学研究院、上海市计量测试技术研究院、西安天隆科技有限公司、苏州雅睿生物技术股份有限公司、上海宏石医疗科技有限公司、杭州博日科技股份有限公司、鲲鹏基因(北京)科技有限责任公司、杭州晶格科学仪器有限公司、圣湘生物科技股份有限公司、安图实验仪器(郑州)有限公司、深圳华大智造科技股份有限公司、上海科源电子科技有限公司、安徽皖仪科技股份有限公司、黑龙江省计量检定测试研究院、麦成长(北京)生物技术有限公司、中国疾病预防控制中心营养与健康所、谱尼测试集团股份有限公司、甘肃国研检验检测有限公司共同起草。文件规定了实时荧光定量PCR仪的要求、评价方法和评价报告。在升温速率(≥1.5℃/s)、降温速率(≥1.5℃/s)、温度波动性(≤±0.2℃)、温度示值误差(≤±0.5℃)、温度均匀度(≤1℃)以及温度持续时间误差(≤±5℃)方面进行了温度控制性能的要求;在荧光强度重复性(相对标准偏差≤2%)、荧光强度均匀性(相对标准偏差≤5%)、荧光强度线性(r≥0.990)方面对荧光检测性能提出了要求。在评价方法中对整机性能进行评价时需要具备DNA标准物质和荧光定量PCR检测试剂,其中,DNA标准物质是国家有证标准物质,包括线性标物和样本标物,且线性标物应为10倍浓度梯度的DNA标准物质系列溶液;荧光定量PCR检测试剂中的Taq DNA聚合酶需要符合GB/T 35542的要求,引物探针需要符合GB/T 34797的要求。
Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制