膜片钳

除膜片钳外，能够测定膜电位的仪器及方法有？

Narishige的[url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/ap-14a.html][b]膜片钳探头固持器适配器AP-14A[/b][/url]用于将Axon膜片放大器连接到强大的万向节。[b]Axon膜片钳探头固持器：适配器-AP-14A[/b]* 可连接的固态万向节：UST-1, UST-2, UST-3 etc.阅读  膜片钳探头固持器汇总表了解所有组合概况。[img=膜片钳探头固持器适配器]http://www.f-lab.cn/Upload/ap-14a_.jpg[/img][b]适配器-AP-14A规格[/b][table][tr][td=1,3]尺寸大小/重量[/td][td]AP-14A[/td][td]宽58 x 深36 x 高9mm, 12g[/td][/tr][tr][td]AP-14L[/td][td]宽65 x 深39 x 高9mm, 15g[/td][/tr][tr][td]AP-14N[/td][td]宽40 x 深21 x 高9mm, 6g[/td][/tr][/table]Line [b]膜片钳探头固持器：适配器-AP-14L[/b]NARISHIGE 的AP-14L适配器用于将Line膜片放大器连接到强大的万向接头。*可连接的固态万向节： UST-1, UST-2, UST-3 etc.阅读  膜片钳探头固持器汇总表了解所有组合概况。[b]适配器-AP-14L规格[/b][table=95%][tr][td=1,3]尺寸大小/重量[/td][td]AP-14A[/td][td]宽58 x 深36 x 高9mm, 12g[/td][/tr][tr][td]AP-14L[/td][td]宽65 x 深39 x 高9mm, 15g[/td][/tr][tr][td]AP-14N[/td][td]宽40 x 深21 x 高9mm, 6g[/td][/tr][/table][b]Nihon Koden [b]膜片钳探头固持器：适配器-AP-14N[/b]NARISHIGE 的AP-14N适配器用于将Nihon Koden膜片放大器连接到强大的万向接头。*可连接的固态万向节： UST-1, UST-2, UST-3 etc.阅读  膜片钳探头固持器汇总表了解所有组合概况。[b][b]适配器-AP-14N规格[/b][/b][/b][table=95%][tr][td=1,3]尺寸大小/重量[/td][td]AP-14A[/td][td]宽58 x 深36 x 高9mm, 12g[/td][/tr][tr][td]AP-14L[/td][td]宽65 x 深39 x 高9mm, 15g[/td][/tr][tr][td]AP-14N[/td][td]宽40 x 深21 x 高9mm, 6g[/td][/tr][/table][b]膜片钳探头固持器适配器[/b]：[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/ap-14a.html[/url][b][/b]

膜片钳实验系统配置 一个电生理配置有4个主要的需求：环境需求：保持标本的健康的手段。光学需求：显现标本以供观察的手段。机械结构需求：稳定定位微电极的手段。电子学需求：放大和测量信号的手段。我们将配置分成两种类型的“典型”配置：胞外记录和单通道膜片钳记录。胞外记录的配置 该配置主要用于记录脑片的场电位。一般目标是将一个相对粗糙的电极放置在组织的胞外空间，同时尽可能模仿体内的组织环境。因此，需要一个相当复杂的小空腔，用来对组织进行温暖、氧化、灌注。而另一方面，光学和机械结构需求则简单得多。一个显微镜，至少15cm的工作距离(配合近似垂直放置的微操纵器)，通常已经可以看到切片或大体的形态学特征。由于对定位时手的震动和电极的精确放置都没有苛刻要求，微操纵器可以选用相对粗糙的机械类型。但是，在记录过程中，微操纵器不允许有一点漂移和震动。 需要使用低噪声的电压放大器。由于信号的范围可能在10 uV 到10 mV 范围内，低噪声电压放大器的增益至少要达到1000。单通道膜片钳记录配置 标准的膜片钳配置在许多方面与胞外记录恰好颠倒过来了。由于对环境的控制非常少，实验通常在室温下、一个无灌注的培养皿中进行。 光学和机械需求则根据实际的细胞的大小(10或20 um)有特殊的规定。显微镜应该有放大300或400倍的能力，并需要某种对照增强能力(Nomarski, Phase or Hoffman)。Nomarski(微分干涉)对于电极的精确放置是最好的，因为它的影像依赖于视野一个很窄的深度上，这有助于精确定位(定位不好，影像是模糊的)。Phase(相差法)用于精确定位程度要求低一些的场合，但提供了更好的对比度。Hoffman方法提供了较便宜的，稍微退化点的Nomarski版本。最好使用倒置显微镜(如奥林巴斯的倒置研究级显微镜IX71/IX81)：(1) 这样能使电极顶端更容易被看到，因为物镜在chamber的下方，(2) 提供了更大更坚固的平台，用来固定微操纵器。 微操纵器应提供良好的，平滑的移动(最多每秒2um)。对震动和稳定性的需求决定于记录模式：是希望记录cell-attached- patch，还是cell-free (inside-out or outside-out) patch。 在cell-free- patch中，微操纵器只需要在形成封接过程中保持稳定，一旦离开了细胞，稳定就不是那么至关重要了。这通常不到一分钟。 单通道记录的放大器比胞外记录使用的要复杂得多。组织切片膜片钳记录配置 膜片钳技术的近来扩展，切片膜片钳技术，其配置需要是体外胞外记录和常规膜片钳配置的一个组合。例如，该技术可能需要一个chamber，需要连续对切片进行灌流和供氧。大部分的其他要求，与常规膜片钳类似。光学需求与切片的厚度有关(thick-slice or thin-slice)，对thick-slice，简单的解剖显微镜就够了(如奥林巴斯的解剖SZ和SZX系列显微镜)；而对thin-slice，显微镜则需要提供400倍的放大，良好的顶端聚焦和对照增强。设备放置 电生理实验人员倾向于在小房间的一角独自工作。小房间通常比较安静，震动和空气流动被削减了。 首先放置显微镜是比较明智的，然后是密切联系的附件，例如chamber，微操纵器和温度控制系统(如果安装了)。基本原则是第一要保证细胞恰当的处于静止状态，第二要确认从细胞记录信息的行为没有对细胞带来连续的致命伤害。第一原则可以通过良好的实验环境帮助实现，第二原则通过良好的光学和机械手段实现。 在显微镜周围工作，保持例如灌注阀门和微操纵器的控制要非常谨慎，避免震动。理想的情况是，它们放置在一个小架子上，该架子从防震台延伸出来，保证在通过显微镜观察细胞时，不会产生破坏的震动。 选择和放置电子仪器是个人偏好的事情。最低的要求是只有一个放大器和一台计算机，另外强调最好放置在一个仪器架上。一个示波器是重要的，因为，计算机通常不够灵活；而且，示波器常能展现在计算机屏幕上看不到的一些意外情况，例如计算机的采样率设置不合适时，就会丢失大量细节信息，而示波器则不会。 示波器应与眼睛水平，在示波器上面或下面直接放置微电极放大器，以便容易的调整和监视信号。 计算机应放置得尽可能远，但离显微镜还是应该保持在手臂来回够得着的地方。这有助于削减显示器的辐射噪声，也能确保在使用键盘匆忙记录时不至于肘部撞击显微镜。 膜片钎实验的平台---显微镜: 完成膜片钳实验最关键的前提是要有一台性能优异的显微镜为基础平台,只有在这个基础平台上才能完成膜片钳这一高技术含量的实验,例如奥林巴斯为膜片钳实验就提供了这个很好的平台,如BX51WI/BX61WI是专门为脑片膜片钳实验所提供的显微镜平台,而IX71/IX81则为单细胞膜片钎实验打下了坚实的实验基础.[em61] [em43]

有人用过美国Axopatch 200B膜片钳没啊？最近在文献中查到美国Axopatch 200B膜片钳，我是做nanopore检测的，想问一下这个价格大概多少~谢谢~

求购二手膜片钳Axon 200B，二手的能用就可以~~~有闲置的，打算卖的，可留言微信号，加微信详聊，谢谢~

[b]活体研究智能传感技术的演进（3）现状与未来作者：许越 [url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651820382&idx=2&sn=b59711014ab3bac4117cfe0f115a62da&chksm=844cc10eb33b48181a6e3cd18f734ae66f9059d781d54320e045b89677bd8bb7943c8bb0df6c&scene=21#wechat_redirect]点击查看作者自传[/url][b][color=#a5a5a5]许越，男，1967年生于北京。[/color][/b][/b][list][*][color=#a5a5a5][color=#888888]于[/color][color=#888888]1993[/color][color=#888888]年和[/color][color=#888888]2000[/color][color=#888888]年分别获得首都师范大学及美国麻省州立大学，植物生理学双硕士学位。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2001[/color][color=#888888]年在美国创建基于[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]技术的美国扬格公司，次年运用[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]服务于设立在美国北卡州立大学的美国航空航天局[/color]([color=#888888]NASA[/color])[color=#888888]空间植物学研究项目。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2005[/color][color=#888888]年成立旭月（北京）科技有限公司，在匡廷云院士、杨福愉院士和林克椿教授的帮助，以及各级政府的大力支持下，将非损伤微测技术引进中国大陆。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2014[/color][color=#888888]年带领旭月团队提出被誉为“第二个人类基因组计划”的“动态分离子组学（[/color][color=#888888]imOmics[/color][color=#888888]）”创新概念，同年成立旭月生物功能研究院。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2015[/color][color=#888888]年推出世界领先的“自动化非损伤微测系统”，并倡导建立中关村[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]产业联盟，开启以水安全、个体化精准医疗、粮食安全等民生应用为代表的[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]产业化进程。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888][color=#a5a5a5]截至2016年，已帮助国内400多个科研单位及实验室，利用NMT实现了科研水平的跨越式发展。[/color][/color][/color][/list]PC膜片钳与NMT非损伤微测技术虽然几乎诞生在同一历史时期，但是它们的发展和普及过程却大相径庭。[b]1） NMT的中国特色[/b]大家知道，各个国家对动物医学研究的投入通常要远远高于对其它研究领域的投入。下图是美国在医疗健康上面的投入是其它领域的5-10倍，在中国动物医学方面的投入大概是植物学研究的6倍左右（来自于个人通讯）。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2MvS7dCXdDYBfqrNMk6gpicChvuLDRS1569mM4NaA54xUEhEbZYcSY3w/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（来自于网络）[/align]因此，在绝大多数情况下，很多生命科学的新技术，新思路，新突破，都是来自于动物医学领域，然后传导到其它科研领域，正如在本文的第一部分[url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651820348&idx=1&sn=bd4fb10beab21b0499c233c9c6df16d5&chksm=844cc16cb33b487ae3226d4e2a4782738fe7a4203ab8a52d838ec30831ba79bf9f5d77cd0e81&scene=21#wechat_redirect]（1）愿望与挑战[/url]中所叙述的那样，膜片钳技术诞生于动物神经细胞单通道离子电流（烟碱乙酰胆碱受体）的研究，90年代进入中国后，也被首先应用于动物医学研究。然而，非损伤微测技术在生命研究领域的发展，却划出了一个自己较为独特的发展轨迹。首先，大家去问问用膜片钳搞植物研究的科研人员，他们有多么羡慕用膜片钳进行动物医学研究的同行们，因为植物有细胞壁，研究植物的人必须要先用各种消化酶去除细胞壁后，才可以形成膜片钳技术必须的玻璃电极与细胞膜之间的高阻封接。[align=left]那么，大家可以想象，不用去除细胞壁就可以研究植物与外界环境的离子/分子交换信息，这对于搞植物研究的人该有多么大的吸引力呀！姑且不说，细胞壁作为植物细胞完整结构的一部分，在功能上更是不可或缺的重要环节，将其人为去除后，其结果的理论价值必然大打折扣外，单就技术上给植物学家们带来的简单、便捷和快速，就让大家兴奋不已。[/align] [img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug27IT7uZGkSnBKveX2hqCR3kByLLiaCiciaGpamSXicEKMicmibyic9tTbVLPlg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（种康在《Cell》利用NMT发表水稻植物领域文章）[/align]因此，在国际上自从NMT诞生之日起，植物研究学者们对它的追求从来没有逊色于动物医学研究的同行们。而中国自身为农业国，在植物领域的研究底子好，投入又大。可能也加之旭月公司创始人自身的植物研究出身的背景，使得非损伤微测技术在中国的发展一路走来，在植物领域的发展要远远胜于在动物医学的发展，数据显示，在中国科学家至今发表的200多篇NMT应用已发表文献里，80%以上是来自植物领域的研究（数据来自“中关村NMT产业联盟”http：//nmtia.org）。[b]2） 科研应用现状[/b]膜片钳技术在这二十几年的发展使其已经深深地融入了全世界生命科研活动的各个方面。在中国也不例外，这些年我国科研人员利用该技术取得了丰硕的科研成果，尤其是植物研究领域，以武维华、种康、刘春明等为代表的科研人员利用膜片钳技术在植物生理生化方面取得了系列世界级的成果。我国的动物医学研究方面，以周专、徐涛、王世强、王立伟、陈丽新、祁金顺等科学家为代表在诸多领域也已处于世界科技前沿。但就我个人在国外多年的所见所闻来看，我国在动物医学方面没有比现在发展的更快更好一些的一个重要原因是中国这方面的人才流失比较严重。我在哈佛、耶鲁等大学见到很多国内培养的膜片钳高手。即：国内培养出来后，在就要出成果的时候，却来到国外为国外的课题所用了。想必周专老师他们对这点肯定有更深更多的感受吧。非损伤微测技术在中国的普及应用，相比膜片钳技术有两个先天不足。一是进入中国要晚近10年的时间；二是没有膜片钳那样一开始便伴随着诺贝尔奖的耀眼光环。但是，非损伤微测技术也有其自身的优势，其一是进入中国适逢国家对基础科研的投入要远远大于90年代膜片钳进入时期；二是有匡廷云、杨福愉、林克椿、叶鑫生、高荣孚、尹伟伦、赵微平、邱泽生等老一辈科学家的鼎力支持。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2wjQ6aFhplNcl23wiarAqicxyxVibbOMIfrP4Y6ftiaDAchOn8awoaOJ9Tg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（来源于网络）[/align]所以，尽管非损伤微测技术进入中国时间不长，但是发展十分迅速，不但以印丽萍、陈少良、沈应柏、许卫峰、罗志斌等中青年科学家，利用非损伤微测技术快速将自身科研提升至世界水平，刚才所列的武维华、王立伟等国内膜片钳技术专家也已利用NMT，并结合膜片钳技术做出了世界一流的科研成果。[b]3） 技术现状[/b]全自动膜片钳虽然已于近年面市，但是传统的膜片钳技术仍然在生理、相关基因功能验证等基础研究领域，发挥着不可替代的作用。而全自动膜片钳虽然提高了数据的单位产出量，但似乎更多地被应用于药物研发、药效评价等应用领域，其对科研基础理论的贡献和潜力还有待于观察。[align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2aSo6YYWVabuqzRV3dKticXGNNbib3A4WMZAkVqhMibPWm0tAFjWHPPJ3Q/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（来源于旭月公司网站：http://xuyue.net）[/align]智能自动化的NMT传感器制备装置，已经于2016年在中国市场有售，标志着非损伤微测技术开启了追赶膜片钳自动化的步伐。尽管数据的单位时间产出量，即：高通量并不是非损伤微测技术的优势，但是，鉴于该技术的长处之一就在于它的实时测量，即在正常生理时间尺度内，揭示生物的活体生理功能。相反，将非损伤微测技术与膜片钳技术相比，比较容易一叶障目的误区就是把非损伤微测技术的应用限制在了只是生物膜的层面。其所谓‘成也萧何，败也萧何！’，膜片钳的高阻封接成就了它的单通道测量，但同时也制约了它的测量材料的灵活性。而反观非损伤微测技术，因为不接触被测材料，所以在材料的选择上就有了极大的自由度。特别是近年的科学发现表明，如我在里所述，人类的各种疾病的答案，不在基因层面（半个多世纪寻找癌症基因努力的失败就是例证），甚至不在细胞层面，这就给组织层面的研究打开了广阔的新天地。当我们环顾实验室四周，能够帮助我们研究活体组织的技术凤毛麟角，而像非损伤微测技术这样完全近乎无损的技术更是难觅。加之进一步的研究表明，比如癌症的发生发展是和其组织微环境的改变密切相关，那么，还有什么技术比非损伤微测技术，这一能够在活体状况下检测微环境中各种离子分子活性的技术更合适的呢！山西医科大学的祁金顺教授，利用非损伤微测技术建立起的脑切片组织生理检测试验体系，就是这方面的一个很好的例证（具体描述请浏览： http://e.vhall.com/133934064或http://xbi.org/index.php?option=com_content&view=article&id=516&Itemid=907&lang=cn）。[b]4） 未来趋势[/b]每个技术都有它自己的特色，很难完全取代对方。因此，利用各自优势，膜片钳与非损伤微测技术配合使用将是一个趋势。这里已经有一些尝试，大家可以参考一下相关文献（http://xbi.org）。下面我就几个非损伤微测技术可以弥补膜片钳技术局限的地方跟大家分享一下，以便大家更好地结合两者使用。[align=center][img=,397,211]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2x4Tml1DWpOIDDI3WicJ2o6tvFQYUiaJqfCwnoGdkw1nT5D3wSFghk3Dg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center](来源于美国扬格公司网站：http://youngerusa.com/)[/align]（a）‘零’电流问题如上图所示，当有等电荷的两种离子进出同一片细胞膜的时候，膜片钳技术将检测不到电流。而此刻科研人员可以利用非损伤微测技术的多传感器同时测量优势进行研究。（b）其它离子运输载体和方式的研究我们知道除了离子通道，生物细胞还有其它多种离子转运方式，它们与离子通道一起，共同担负着维持细胞和乃至整个生物体活性的各种生理功能。正如在[url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651820382&idx=1&sn=156a5c79f5aba52283f147a9d4cb1e7f&chksm=844cc10eb33b48188af3c5762db8b3b21a30d311c3bbae3f85ad8fd71abbd91872704d321d35&scene=21#wechat_redirect]（2）时间与空间[/url]中所说，将PC与NMT这两个跨越不同时间和空间的技术相结合使用，对于我们更加全面的了解生物现象的本质，有着不可替代的作用。（c）分子转运的研究毫无疑问，NMT非损伤微测技术在O2，H2O2，葡萄糖，乙酰胆碱等与生命活动密切相关的小分子，大分子跨膜运输方面，将极大补充PC技术在这方面的不足。（d）物理机械损伤尽管‘高阻封接’成就了PC的单通道测量，但是其巨大的机械损伤，被证明不但是的确存在的，而且的确会产生错误的结果。那么，有另外一个相对独立的技术对PC进行验证，对科学研究的准确性无疑是个巨大利好。[align=left]广州暨南大学的王立伟，陈丽新教授，利用NMT与PC结合，发现并推翻了PC过去错误的结论的故事很好地诠释了这一点。（具体描述请浏览：http://e.vhall.com/133934064[/align][align=left]或 http://xbi.org/index.php?option=com_content&view=article&id=516&Itemid=907&lang=cn）[/align][b]5）结束语[/b] [img=,280,231]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug26453BRepj8GYQsp578CpkibGszw4qrzbIkhsyxAH8vJxhAIACpICQjg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（来源于网络）[/align]在一次社会名流的聚会上，当有人用略带轻蔑的口吻对发现美洲新大陆的哥伦布说到：“你发现美洲没有什么了不起的，只不过是你的运气比别人好些罢了！”。哥伦布没有马上说什么，而是让人拿来一个鸡蛋向在场的所有人发出挑战，看谁能够把这个鸡蛋立在桌子上。读者们中很多人知道这个故事的结局，就是在这些人费了九牛二虎之力失败之后，哥伦布将鸡蛋的一端击碎后立在了桌子上。Neher和Sakmann发明膜片钳“不过”是在前人电生理的基础上，略微地在玻璃电极与细胞膜接触时施加了一点点负压形成‘高阻封接’而已。同样NMT非损伤微测技术的诞生，Jaffe和Newman他们“也无非” 就是让离子/分子传感器动了起来，进行‘两点测量’而已！但就是这一看似细微的‘高阻封接’，这一看似平常的‘两点测量’，让科学家能够检测到pA（10[sup]-12[/sup]）级的微弱单离子通道电流，让科学家能够检测到单个细胞离子（比如Ca[sup]2+[/sup]）分子（比如O[sub]2[/sub]）的10[sup]-15[/sup]级进出流速。他们就是科学界的哥伦布，帮助科学家们发现了科学世界的新大陆！同学们，老师们，朋友们，现在非损伤微测技术已经来到了你的身边，中国人在一些领域已经实现了弯道超车，能否先于他人把这个‘蛋’矗立在你们各自的研究领域，即是摆在你们面前的挑战，大家准备好了吗？！[b]参考文献[/b][list][*]美国对不同研究领域的投入http://www.bu.edu/research/articles/funding-for-scientific-research/[/list][list][*]Verkhratsky, Alexei & Parpura, Vladimir. (2014). History of Electrophysiology and the Patch Clamp. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.). 1183. 1-19. 10.1007/978-1-4939-1096-0_1.[/list][list][*]Uncoupling of K+ and Cl- transport across the cell membrane in the process of regulatory volume decrease. Linjie Yang, Linyan Zhu, Yue Xu, Haifeng Zhang, Wencai Ye, Jianwen Mao, Lixin Chen, Liwei Wang. Biochemical pharmacology 84 (3), 292-302[/list][list][*]非损伤微测技术实时检测海马脑片跨膜钙离子流。《生理学报》2017年 第4期 | 李甜 原丽 张军 焦娟娟 祁金顺[*]文中相关文献可以到旭月研究院网站下载： http://xbi.org/index.php?option=com_rsfiles&view=rsfiles&Itemid=304&lang=cn[/list][align=center][img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDF6tmTJTMX4uic43l9icahVSUTxSOVWpIzWuU9op0axQeUZlOd197ib0J6kUyJDXf9MJrWibHg0hicvMCw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][/align][align=center][b]旭月版权所有,转载注明出处.[/b][/align][align=center][img=,,130]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDFvv5AgpUstNSuO10Yztkuqee9ozBmgmqkRl5Df8F3bvfhr0YroolbwMI0ScicdJDTJyTPYXIc1qvw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align]

[align=left][b]活体研究智能传感技术的演进（2）[b]时间与空间[/b][/b][/align][align=left]作者：许越 [url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651819860&idx=1&sn=0c4df0710b0519d9dc4a43b08c9cbd23&chksm=844cdf04b33b5612eb56793dba3143bbd3597a25facb5fe6be07588a611c9c2239f313cec201&scene=21#wechat_redirect]“点击查看作者自传”[/url][/align][b][b][b][color=#a5a5a5]许越，男，1967年生于北京。[/color][/b][/b][/b][list][*][color=#a5a5a5][color=#888888]于[/color][color=#888888]1993[/color][color=#888888]年和[/color][color=#888888]2000[/color][color=#888888]年分别获得首都师范大学及美国麻省州立大学，植物生理学双硕士学位。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2001[/color][color=#888888]年在美国创建基于[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]技术的美国扬格公司，次年运用[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]服务于设立在美国北卡州立大学的美国航空航天局[/color]([color=#888888]NASA[/color])[color=#888888]空间植物学研究项目。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2005[/color][color=#888888]年成立旭月（北京）科技有限公司，在匡廷云院士、杨福愉院士和林克椿教授的帮助，以及各级政府的大力支持下，将非损伤微测技术引进中国大陆。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2014[/color][color=#888888]年带领旭月团队提出被誉为“第二个人类基因组计划”的“动态分离子组学（[/color][color=#888888]imOmics[/color][color=#888888]）”创新概念，同年成立旭月生物功能研究院。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2015[/color][color=#888888]年推出世界领先的“自动化非损伤微测系统”，并倡导建立中关村[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]产业联盟，开启以水安全、个体化精准医疗、粮食安全等民生应用为代表的[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]产业化进程。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888][color=#a5a5a5] 截至2016年，已帮助国内400多个科研单位及实验室，利用NMT实现了科研水平的跨越式发展。[/color][/color][/color][/list]时间分辨率和空间分辨率，指的是一个检测技术能够在时间和空间上提供的最小分辨单位或数值。列文虎克(Anthony Von Leeuwenhoek)发明的能够看到活细胞的显微镜，就是在人类观察世界的空间分辨率上的一次大的提升。膜片钳技术之所以能够在90年代获得诺贝尔奖，一个很重要的原因就是它将人类对世界的感知能力，在时间分辨率上提升到毫秒级别，在空间分辨率上细小到微米级以下（请见下表），而且是对生物活体进行检测。[b][b] [img=,694,274]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2kotPNzq90MdWicyeLWDCA6AciawYPkflWchjSDjbjQHRqAb4dgq9kjibw/640?wx_fmt=png&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/b][/b][align=center](非损伤微测技术与膜片钳及荧光等化学技术在时间空间分辨率上的区别。来源于旭月研究院 http://xbi.org)[/align][b][b][/b][/b][align=center][/align][color=#ff0000]1）时间[/color][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2fQATMY9iagCFuceSqsLf75Y9sdE4M3jGIVucKibMiaxHJ4Bjler2JvQhg/640?wx_fmt=gif&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（膜片钳技术典型数据图。来源于网络）[/align]膜片钳技术可以轻而易举地捉捕到毫秒级（ms）的离子通道的开放和关闭。这点让依靠反应时间最快也需要秒级的NMT离子分子传感器的非损伤微测技术望尘莫及。即使有的NMT分子传感器，比如O2传感器反应速度可以达到0.8秒（800ms），但面对离子通道的开关研究也无能为力。[b][b] [img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug29icHHJJDnWFQCqa882XZvLda0XsvxbptGC2nVsWbfAaUDr1cnyLVbSQ/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/b][/b][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（非损伤微测技术典型数据图。来源于网络）[/align][align=center][/align]然而，如果我们的科研需要几十分钟，几小时，甚至几十小时地跟踪研究活体材料的离子/分子活动，非损伤微测技术的时间方面的优势就体现了出来。因为只要科研人员有办法保持样品的活性，由于NMT传感器不和被测材料进行接触，所以时间上对非损伤微测技术就不是一个制约因素。有时即使NMT流速传感器在实验过程中失效了，或不小心损坏了，没有关系，马上换上一个好的传感器就是了，只要你的样品还正常就没有问题。[b][b][color=#ff0000]２）空间[/color][/b][/b]膜片钳技术通过全细胞等多种灵活的记录方式（见下图），极大地丰富了膜片钳与被测材料之间的空间关系，但是由于该技术对玻璃电极与材料之间高阻封接的必须要求，使得膜片钳技术对于大于微米材料的操作显得力不从心。[b][b][/b][/b][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2TO5xCab6Y9ibT4BYkgUWvyxZBlkp6gRiboialWGSUCB2FcOSeiaWFPBKHw/640?wx_fmt=gif&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（膜片钳技术的多种测量构形。来源于网络）[/align]非损伤微测技术由于不需要接触被测材料，因此在被测材料的选择，特别是材料大小上面，相比膜片钳就有了非常大的自由度（见下图）。比如，最近面市的‘NMT活体生理检测仪’可以检测从微生物群体，一直到小型个体（如斑马鱼）的各种大小材料离子/分子的进出情况。[b][b][/b][/b][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2ef0ibeIqFdGZicpq4C1ONkWPjTS1gTCZ1krZPnbqYqSOsyQ2uXQcPibTA/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug284zhs9Mj1EIHaLMza2ZdqKc1ZYoDpMe00zm4GRnQyic0Czia471m22hQ/640?wx_fmt=png&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2PgibOksfsIs4g0yEKg3Auqktj24lT28aePO0icUdaBT9Ev8cXBUbbQvA/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2iaqt0YIY3kYSX2dMRpnso6GtKTWicI47ibx5hvP36UIM4rCgkoZYl4Jiag/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2OauXy22ibCp4ngxtUhxEwYhdhdYrfmeVSvboKw8npbGgXUiceoibma0Tw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2naZOUCNBiae6CyDnnbGqsWZ3LFYjM2QssLibjleWxicg6ptrp7BzxdbZA/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug20rJ8SDnjW63vh60Bd3kiaiaia60Xufia65HF2Tviaf6rruxYs4eKI9XEt3Q/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug21up5ZK2Sz8hPbubNosQh0ibic6CjicRt8sMJG6wwLD5evRa84CbHt9TAg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2l1RKX0xF7x1e7nRFwlPufwgKnXXL68sorpFCHiaiamqp775HRnyyqfUw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug29ibs6mxnicDhpfXFgZYPePFKj2V5iayNpvDsyntbnWjOFSML74rgEjYHA/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（非损伤微测技术可以测试的各种活体材料举例。来源于旭月研究院htt://xbi.org ）[/align]膜片钳与非损伤微测技术在时间和空间分辨率上面各有千秋，可以根据科研需要进行合理选择。有时也可以联合应用则能够更加说明问题，不但两者在时间和空间上可以相互印证，而且非损伤微测技术所测得的离子信号是除离子通道在内，还包含有离子载体和转运体等多种离子运输载体的共同贡献。同时还有多糖吸附，细胞或组织表面的电化学作用，以及各种离子分子相互影响的物理，生物和化学的综合作用的结果。因此也是更加贴近真实的生理状态的结果。还有就是我们可以人为设计这些样品的检测环境，使其更加接近它们真正的活体状态。别忘了，毕竟您手中握有的是非损伤微测技术！[b][b][color=#ff0000]3）引发其他联想[/color][/b][/b]这里有很多时候没有引起生命科学工作者足够重视的两个地方：1.生物体是多维的立体空间结构，生命活动和生理现象发生在不同的时间尺度2.每一项技术都有其在时间分辨率和空间分辨率上的特色或极限 具体而言：1.生物体是多维的立体空间结构，生命活动和生理现象发生在不同的时间尺度随着60年代DNA概念的提出，80年代生物化学的迅速崛起，90年代分子生物学的风靡全球，到近些年各种组学的盛行，科学界一部分人似乎认为只要搞定生命的各种组成成份，就可以解决人类的生老病死等等一切问题了。然而，半个世纪之后，人们终于承认人类寻找癌症等病魔的开关基因是不存在的。前一段时间，某些企业想通过基因序列为社会提供疾病/健康预测的服务尝试，也被以美国FDA为首的各国医药管理部门叫停，原因就是这些静态成份数据不足以支持建立基因组成与各种疾病之间的必然联系。也就是说，忽视生物体的在时间和空间上多维度的特点，所得到的结果也必然不能够反映生命活动的根本真实面目，其衍生的各类实际应用也必然是空中楼阁。2.每一项技术都有其在时间分辨率和空间分辨率上的特色或极限也正是由于相当一段时间以来，以生物化学，分子生物学和现在的各种组学为代表的，在生物体成份研究为主导的学科教育和科研大环境下，使得很多从事生命科学研究工作的朋友们，对于某一项技术的时间和空间分辨率定位不是很敏感。现实是，如图5所示，当NMT非损伤微测技术告诉你，它所涵盖的时间和空间分辨率既不同于膜片钳技术，也有别于其它荧光和放射性物质技术的时候，你的眼睛是否豁然一亮，因为在你面前出现了一个崭新的、宽阔无垠的科研蓝海！道理很简单，就是你将揭示前人从未涉足的生命现象领域，就像当年的列文虎克一样。参考文献1）旭月研究院网站 http://xbi.org2）美国扬格公司网站：http://youngerusa.com3）印莉萍, 上官宇, 许越. 非损伤性扫描离子选择电极技术及其在高等植物研究中的应用. 自然科学进展. 2006, 16(3):262-266.4）丁亚男,许越.非损伤微测技术及其在生物医学研究中的应用.物理. 2007, 36(7): 548-558.[align=center][img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDF6tmTJTMX4uic43l9icahVSUTxSOVWpIzWuU9op0axQeUZlOd197ib0J6kUyJDXf9MJrWibHg0hicvMCw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][b]旭月版权所有,转载注明出处.[b][/b][/b][/align][align=center][b][b][img=,,130]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDFvv5AgpUstNSuO10Yztkuqee9ozBmgmqkRl5Df8F3bvfhr0YroolbwMI0ScicdJDTJyTPYXIc1qvw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/b][/b][/align]

我自己做制备的有机物平板膜片，明天要做SEM测试，今天需要干燥以前就是在普通炉子中干燥，但是SEM图片总有裂痕请问大家，这类样品在SEM前应该怎样干燥？既能不破坏膜结构，还能有效达到干燥效果？

大家知道什么是默片前吗?

膜片SPE用来处理大体积水样，目前主要是C18、C8、活性炭和阴阳离子的类型，对于中等极性的、不带电荷的化合物貌似没有很好的保留。有没有HLB 亲油亲脂性的膜片呢？

Polystyrene samples mounted on a standard wheel must be replaced after five years from the date of issue.Because card-mounted standards are handled regularly and, therefore, exposed to potential contamination, damage and degradation, they must be replaced after two years from the date of issue.这段话是关于红外标准聚乙烯膜片的，提到了两种膜片，有谁见过第一种？拍个片片看看是什么东东？

[size=4]我现在做轻柴油的氧化安定性试验[/size]，其中要用到纤维素脂膜片。请教：1，什么是纤维素脂膜片？2，和一般的滤纸有什么不同？3，纤维素脂膜片会溶于水吗？或溶于什么试剂？4，氧化安定性可用一般滤纸代替吗，为什么？

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求助：研发化油器用膜片材质及振动频率检测技术化油器用膜片的材质及其工作时的振动频率，直接影响到化油器的工作性能，其检测及控制技术是行业的关键共性技术难题，研发一种膜片材质及其振动频率检测技术，使膜片处于最佳的工作状况，满足其可靠性、稳定性要求，求专家合作，方式灵活！有此专长和经验的技术人才或者团体，欢迎联系我，QQ2115562681，电话15003885078

我有一个厚度在0.76，或1.52mm的热塑性膜片要进行流变学测试，温度范围在100-200度，想用锥板式流变仪测试模量等变化。送到国内某一流大学高分子系，专门做流变的实验室没给做出来。原因是，设备有问题，我的样品在100-200度范围内热膨胀系数太大，造成其设备法向应力过大而跳开。而另外一台设备说是我的样品在低温区容易打滑，做不了。这样我就很奇怪了，我这个膜片在高温熔融后会发粘的尚且会打滑做不了，聚乙烯，聚丙烯类的材料是如何能够做流变学测试？是找借口不愿意做还是真的做不了，请各位流变学达人帮忙解答一下。

RT,想买一块红外标准膜片，要带确认证书的http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif或者这玩意儿能检定后接着用吗？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

有听说过非损伤微测技术的吗？最近可能要用，据说是和膜片钳类似的电化学仪器，希望交流

RT,买thermo is5的红外带着两块标准膜片，用快两年了，审计说两年要换，http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif我们只用一块，另一块还没用呢，这能检定后再用吗，http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif

生物实验室里会用到一些东西，不像离心机培养皿这些专属实验专业用品。而且这些东西本来的用途也完全不是拿来做实验的。但是这些东西确确实实就在实验台上，让第一次进实验室的人大吃一惊。指甲油：在做组织切片封片的时候，用于涂在盖玻片旁边，把盖玻片固定在载玻片上。实验室的女孩子经常把自己用腻了的指甲油放在架子上，供大家使用。透明丝袜：浪莎丝袜特别好用。是在脑片膜片钳或者视网膜膜片钳记录时用于固定组织的。用法是要把丝袜上的丝再细分，分出单股纤维，粘在铁环上，再固定组织切片。 还有很多东西，估计都是历史上一代代实验室里的女子们解决实验设备需求而带入实验室的。进入实验室的女性越来越多，于是实验室里慢慢地出现那些本应属于梳妆台或是厨房间的东西。一篇小文，献给实验室里工作的女性朋友，三八节快乐，实验快乐！（转自陆绮科学网博客） 你们实验室里面还有什么是女子们解决实验设备而带入实验室里面的呢？回帖带照片有奖励的哦

磨片鉴定，设计的偏反显微镜调研。仪器资料越详细越好。

铝合金铝基做光谱用什么磨片

细胞转染获得了解活体大脑神经元内部运作机制的途径可为我们提供大量有用的信息：它的电活动模式，甚至在某个指定时刻基因的开关图谱。然而达到这一目标却是一个极其艰苦的任务，它被认为是掌握一门艺术；由于非常难于学习当前世界上只有少数实验室能够对其进行实践操作。然而这一情况将很快会得到改变：来自麻省理工学院和佐治亚理工学院的研究人员开发出一种新方法实现了在活体大脑中自动化寻找和记录来自神经元的信息。研究人员利用单细胞检测计算机运算控制单个机器手臂，以相比人类试验操作人员更高的精确度和速度鉴别和记录下了活体小鼠大脑中的神经元。相关论文发布在5月6日的《自然方法》（Nature Methods）杂志上。新的自动化程序无需数月的培训，质粒构建提供了长期以来寻求的关于活细胞活动的信息。利用这一技术，科学家们能够鉴别出大脑中数千种不同的细胞类型，绘制出它们相互联系的图谱，并找出疾病细胞与正常细胞的差异。这一项目是由麻省理工学院生物工程学和大脑与认知科学副教授Ed Boyden与佐治亚理工学院机械工程学院助理教授Craig Forest协作完成。“我们的研究团队从开始就一直从事跨学科研究，这使得我们能够将精密机械设计的原理带到活体大脑研究中，”Forest说。他的研究生Suhasa Kodandaramaiah是文章的主要作者，作为访问学者已在麻省理工学院开展了两年的研究工作。这一技术尤其适用于研究诸如精神分裂症、帕金森氏症、自闭症和癫痫等大脑疾病。Boyden说：“在所有这些情况下，对单个细胞的电及回路特征进行分子描述……一直难以实现。如果我们真的能够描述活体大脑特异细胞中疾病改变分子的机制，就有可能发现更好的药物靶点。”Kodandaramaiah、Boyden 和 Forest着手于研究让一种已有30年历史的技术——全细胞膜片钳（whole-cell patch clamping）自动化。全细胞膜片钳技术是通过将一个微小的空心玻璃吸管与神经元细胞膜接触，然后打开细胞膜上一个小孔来记录细胞中电活动的方法。通常一个研究生或博士后需要数月的时间才能学习掌握这项技术。 Kodandaramaiah花了大约四个月的时间学习手动膜片钳技术，这让他认识到这一技术非常难以掌握。“当我相当出色地掌握了这一技术时，我感到虽然它是一种艺术形式，也可将其变为一套定型任务，并通过机器人执行决策。”为此，Kodandaramaiah通过动物实验，可以微米精确度将一个玻璃吸管置入麻醉小鼠大脑。随着移动，吸管监测了细胞的电阻抗性——测量电流出吸管的难度。如果周围没有细胞，电流动且阻抗低。一旦吸管尖头接触到细胞，电流将无法流动，阻抗会升高。

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