蒸气灭菌器

除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底，直接关系到试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。 1．试验材料(1) 嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus) ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-l05 CFU/片。(2) 121℃压力蒸气灭菌化学指示卡。(3) 溴甲酚紫胨水培养基116℃高压灭菌20分钟后备用。(4) 0-150℃留点温度计。2．方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如灭菌器为二层，则需放10处。留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存1℃之间，则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色，则说明芽胞已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放入培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块，在高压蒸气灭菌时，由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内，与灭菌物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次，共做六次。5个点六次试验表明温度均在121℃，化学指示卡变黑；程度与对照色一致；培养基均未改变颜色，说明高压蒸气灭菌效果合格。高压灭菌器属于强检仪器，但强检只是对仪器物理参数的考核。所以做过强检的灭菌器还必须进行灭菌效果的验证。一些单位常常忽略了这个重要的问题。国内市售的手提灭菌器，往往仪器指针达到所需的温度，但灭菌物品的实际温度却未达到要求。导致灭菌物品不彻底，影响实验结果。培养基灭菌不彻底，影响培养基的使用及结果判断。因此高压蒸气灭菌器无菌效果的验证是一个必须引起重视的问题。

高压蒸汽灭菌器是一种最高工作压力大于或等于0.1MPa（表压），且压力与容积的乘积大于或者等于2.5MPa?L的气体、液化气体和最高工作温度高于或等于标准沸点的液体的固定式容器及移动式容器。　　高压蒸汽灭菌器使用操作不当，可能会发生危险，是一种特种设备。国家相关部门规定，特种设备的安全附件、安全保护装置、测量调控装置及有关附属仪器仪表需要获得有资质检测机构的合格证书，才能继续使用。那一般高压蒸汽灭菌器校准检测需要哪些参数？　　高压蒸汽灭菌器校准基本参数：　　①额定工作压力不大于0.25MPa。　　②灭菌工作温度：115~138℃。　　高压蒸汽灭菌器校准条件：　　为确保现场校准结果的可靠性，应遵循下列基本原则：　　1）环境条件：　　温度：（20±5）℃；　　相对湿度：不大于80%。　　2）计量标准器：　　选用的标准器其测量范围应大于或等于被校高压蒸汽灭菌器校准基本参数的测量范围，其示值最大允许误差绝对值应不大于被校高压蒸汽灭菌器校准基本参数最大允许误差绝对值的1/3（数字式）或1/4（模拟式）。

求助。。。。怎么做高压蒸汽灭菌器的验证啊，主要是运行和性能确认，我们的高压蒸汽灭菌器是用来微生物杀菌的~~