分选仪

2022 年 6 月 3 日 医疗技术公司 BD（Becton, Dickinson and Company）（纽约证券交易所代码：BDX）宣布发布新品BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪。据介绍，该款仪器旨在使研究人员能够以前所未有的速度查看和分类细胞，这为改变病毒学和肿瘤学等一系列领域的研究和基于细胞的治疗开发创造了潜力，如以及许多疾病状态。全新 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪新的 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪采用了突破性的 BD CellView™ 图像技术，该技术于今年早些时候登上了《科学》杂志的封面。它是第一款将先进的光谱流式细胞术与能够进行分选的图像分析相结合的细胞分选仪，这可能使研究人员能够产生更准确的数据并对以前无法识别的细胞进行分选。“细胞分选的这一进步填补了生物医学研究中长期存在的空白，使科学家能够进行高参数实验，同时快速查看和分选具有特定、可视化感兴趣特征的细胞，”Westmead 科学运营总监 Xin Maggie Wang 博士说医学研究所。“对于从事光谱流式细胞术的研究人员来说，实际看到与您相互作用的细胞会让您对结果更有信心，并使您能够以前所未有的方式观察细胞，并回答以前可能无法想象的问题。”通过光谱流式细胞仪进行细胞分选是一项尖端技术，它捕获样品制备发出的全光谱信号，而不是像传统流式细胞术那样捕获特定波段，让科学家使用更多参数对细胞进行分类，以更好地了解人类健康、疾病和治疗。BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪将先进的光谱流式细胞术与新颖的 BD CellView™ 图像技术相结合，该技术可捕获流经系统的单个细胞的图像，并根据每个细胞的详细显微图像分析以高速分选对它们进行分选。这种组合使科学家能够更准确地了解可以实时视觉确认的细胞群和特征，并在简化的实验工作流程中对以前无法识别的细胞进行询问和分类。BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪是第一款采用 BD CellView™ 图像技术的 BD 仪器。 BD Biosciences 全球总裁Puneet Sarin说：“通过将高参数光谱流式细胞仪的功能与前所未有的细胞图像及其内部运作相结合，我们正在定义细胞分选的新标准，并将细胞的功能掌握在研究人员手中。采用 BD CellView™ 图像技术的 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪代表了 BD 流式细胞仪创新和领先地位的新篇章，再加上我们新的光谱优化的 BD Horizon RealYellow™ 和 RealBlue™ 试剂等补充工具，我们正在很高兴看到科学界将如何利用它在更短的时间内以更大的信心实现突破性发现，并发现有助于塑造健康未来的新应用。”有关 BD FACSDiscover™ S8 细胞分选仪的更多信息，请持续关注仪器信息网更多报道。

FREMONT, Calif., 2021年6月7日– Cytek Biosciences, Inc.，细胞分析领域技术领先的生命科技公司，宣布推出全新的台式高维细胞分选仪- Cytek Aurora CS。采用Cytek独特的全光谱分析技术（Full Spectrum Profiling, FSP™ ），Aurora CS可在单细胞水平提供超高分辨率的数据结果，帮助科学家和研究人员将复杂实验简单化，轻松解决最具挑战性的细胞分析，如高自发荧光的细胞分析、或关键生物标志物表达水平低的细胞分析等。使用Aurora CS，研究人员可以从微孔板或试管中轻松分选活细胞或其他颗粒，用于下游分析实验，如单细胞RNA测序、蛋白质组学和细胞生物学研究等。Cytek于2017年首次推出了其旗舰级产品-Aurora流式细胞分析系统，Aurora系统利用突破性的Cytek FSP™ 技术，采集来自多个激光器激发的荧光素全光谱信号，轻松分辩单细胞上的多种荧光标记，显著提高了高参数细胞分析的灵敏度，极好的解决了流式检测受技术局限的问题。Aurora CS基于同样的FSP™ 技术，保持了与Aurora一致的优秀特性和强大功能。独特的光学设计和解析方法能让使用者体会到更高的灵活性， 不仅可广泛选择大量新的荧光染料，且无需为每个应用重新设置仪器。先进的光学系统和低噪音电子系统，带来超强灵敏度和卓越分辨率的细胞分析体验，包括分析那些高自发荧光或关键生物标志物表达水平低的细胞。在Cytek，我们致力于最大程度地提高用户的使用体验，使从生物学问题到答案的过程变得更容易。”Cytek Biosciences首席执行官蒋文斌博士表示：“在Aurora细胞分析仪上优化的方案，可在Aurora CS上很好的重现并进行细胞分选，使科学家们能够进一步开展下游相关应用与研究，获得更深入的见解，加快科学探索与发现的步伐。Aurora CS的主要特性与优势：最高可配备5个激光器、3个散射光通道和64个荧光检测通道可从高度复杂方案（如40色深度免疫分型方案）中精确分选出目标细胞群高度灵活性广泛的荧光素选择，无需为不同荧光素更换滤光片可使用任意能被机载激光器激发的荧光染料5 ml 和 15 ml 上样管上样预设的和可自定义的喷嘴和分选模式设置多种样本收集方式 96孔板索引分选 1.5ml 和 5ml 样本管可实现6路分选温控模式SpectroFlo CS 软件提供直观的工作流程内置防止气溶胶污染的HEPA过滤器轻松流畅的分选体验自动液滴延迟和分选监控，提供可靠的分选结果完整的分选报告自动记录每个分选实验所使用的设置可移植来自Cytek Aurora系统或传统流式细胞仪的实验Cytek Aurora分析系统和Aurora CS分选系统，利用Cytek独有的FSP™ 技术，可以检测标记在每个细胞上的多种荧光探针的全光谱信号，在单管样本中，即可完成高度复杂方案（40色方案）的分析和分选，使科学家们能够更深入更完整的了解生物系统。结合FSP™ 技术和高端分选特性，Aurora CS为研究人员提供了一个可应用于多种生物学场景和分选条件的解决方案。搭配SpectroFlo CS软件，在更短的设置时间下，即可轻松实现6路分选、自定义分选、自动液滴延迟和分选液流监控等操作，满足各种科学研究与应用的需求。更多Cytek Aurora CS的详细信息，欢迎访问 https://cytekbio.com/pages/aurora-cs 或 www.cytekbio.com.

随着生物医学研究的不断深入，科学家希望解决长久以来的一个经典挑战，即如何简单、有效且高质量地分选细胞。NanoCellect WOLF系列微流控细胞分选仪正由此而来，致力于帮助每一位科学家实现更轻松高效、细胞状态健康的细胞分选。NanoCellect新款WOLF G2微流控细胞分选仪大大扩展了传统细胞分选的能力，兼具性能灵活和简单易用的产品特性，是现代生物医学研究领域的理想之选。WOLF G2微流控细胞分选仪的优势基于微流控芯片的流体技术WOLF G2利用专有的微流控分选芯片进行批量分选和单细胞置板，比传统的高压力细胞分选仪更温和，通过实现小于2psi的分选压力，使分选后的细胞保持活力和RNA的完整性。此外，无气溶胶的一次性微流控芯片便于无菌分选，是目前市场上生物安全性最佳的分选工具之一。高配置的光学系统WOLF G2使用基于激光的流式细胞仪技术，同时配备典型的前向（FSC）和后向（BSC）散射探测器，以及3种不同的激光配置来扩大应用性能。简单直观的WOLFViewer软件WOLF G2通过WOLFViewer软件，让工作流程简单直观且兼具齐全的功能。此外，WOLF G2的关机和清理时间仅需不到一分钟，更大程度地为使用者节约时间。灵活高效的性能WOLF G2的功能规格保证了产品应用最大的灵活性，不仅能够分辨淋巴细胞、单核细胞、粒细胞，以及小至1微米的微生物细胞和大至60微米的细胞，还能实现最高200个细胞/秒的分选速度。精致小巧的体积WOLF G2台式微流控细胞分选仪的体积仅为2立方英尺，占用空间小，可以轻松实现实验室之间的灵活移动。WOLF G2微流控细胞分选仪立足细胞分选前沿科技最新的WOLF G2台式微流控细胞分选仪通过使用两个激光和多达九种颜色，显著扩展了这种温和的台式微流控细胞分选仪的分选能力，同时还保持着简单的批量分选或单细胞置板工作流程。将WOLF G2与N1单细胞分配器结合使用时，即可在96孔或384孔板中完成单细胞分选。WOLF G2台式微流控细胞分选仪更可广泛应用于多个生物医学研究领域，帮助科研人员在基因组学、抗体发现、细胞系开发、基因编辑等方向实现更易于使用、经济灵活的细胞分选。

近日，中科院青岛生物能源与过程研究所功能基因组团队与北京惟馨雨生物科技公司联合承担的科技部创新方法工作专项&mdash &mdash &ldquo 拉曼光钳筛选新方法在活体单细胞高通量分离中的应用&rdquo 通过了评审验收，这标志着全球首台活体单细胞拉曼分选仪在中国研制成功。　　该研究是在青岛能源所研究员徐健和兼职研究员、英国谢菲尔德大学黄巍主持下，通过所企联合攻关完成的。项目组此次研发的是目前已公开文献报道的首台基于细胞拉曼指纹图谱的细胞手动和自动分选仪器。该分选仪可实现单细胞拉曼图谱快速采集，并首次将单细胞的拉曼信号采集时间缩短到1~100毫秒 还可完成基于拉曼图谱的细胞种类及生长状态快速鉴别等多项任务。　　该仪器的核心优势在于，对细胞生化信息及其变化敏感，无须预知生物标识物，无须标记细胞，可进行原位和非侵害性的活体检测等。此项技术将对单细胞生物技术和单细胞基因组的研究产生积极的贡献。　　项目组利用该仪器，已经在光合产油微藻生理状态识别、多环芳烃降解微生物分离等研究中取得初步成果，并建立起应用示范技术参照方法和数据分析流程。　　据了解，目前该仪器已服务于国内外多个科研团队，在海洋资源挖掘、生物燃料和生物材料、生物能源种质筛选、食品微生物检测、药物研究、肿瘤监测与分选、环境微生物监控、农业生态研究等领域发挥重要作用。青岛能源所首台&ldquo 活体单细胞拉曼分选仪&rdquo 样机通过验收　　背景新闻：　　日前，受科技部条财司委托，中国21世纪议程管理中心在北京组织专家对中国科学院青岛生物能源与过程研究所功能基因组团队与北京惟馨雨生物科技公司联合承担的科技部创新方法工作专项&ldquo 拉曼光钳筛选新方法在活体单细胞高通量分离中的应用&rdquo 项目进行验收，标志着研究所基于自主技术开发的首台&ldquo 活体单细胞拉曼分选仪&rdquo 通过科技部验收。　　验收专家听取了项目组的工作总结汇报、审查了验收材料，认为项目组基于自主开发的&ldquo 活体单细胞拉曼分选仪&rdquo 开展的各项工作完全符合任务书下达的全部考核指标，一致同意项目通过验收。　　在项目实施过程中，项目组成功研制开发了&ldquo 活体单细胞拉曼分选仪&rdquo (&ldquo Raman-Activated Cell Sorter&rdquo ，简称RACS)，并在中科院青岛能源所成功搭建了首台样机。该样机(编号RACS-1)由激光器、拉曼光谱仪、落射荧光显微镜、细胞分选系统以及自动控制系统组成，是目前已公开文献报道的首台基于细胞拉曼指纹图谱的细胞手动和自动分选仪器。目前，RACS-1已可实现的功能包括：单细胞拉曼图谱快速采集，并首次将单细胞的拉曼信号采集时间缩短到1-100ms 基于拉曼图谱的细胞种类及生长状态快速鉴别 拉曼-落射荧光不可培养功能微生物鉴定 拉曼光钳单细胞操纵 基于拉曼信号的单细胞计数 单细胞拉曼数据库系统 拉曼激活单细胞分选等。　　与现有的基于细胞荧光信号的荧光流式细胞分选仪(&ldquo Fluorescence-Activated Cell Sorter&rdquo ，简称 FACS)原理和方法均不同，RACS是基于对单个细胞的拉曼化学指纹图谱(细胞生化信息)的获取并与参照细胞拉曼数据库比对，从而原位、不依赖于培养、高通量地分选具有特定(或指定)生化状态的单细胞。与FACS相比，RACS的核心优势在于：对细胞生化信息及其变化敏感、不需预知生物标识物、不需标记细胞、原位和非侵害性的活体检测等。因此，RACS可有效克服&ldquo 细胞功能异质性&rdquo 、&ldquo 尚不可培养微生物&rdquo 、&ldquo 探测未知的细胞表型&rdquo 等三个共性科学与技术瓶颈。　　此外，项目组利用RACS-1在光合产油微藻生理状态识别、多环芳烃降解微生物分离等方面研究取得了初步示范成果，并建立起应用示范技术参照方法和数据分析流程，为未来对细胞表型鉴定及功能微生物筛选奠定了基础。

性价比谁与争锋？大连华微新推单细胞分选仪仅售36.8万——“HW-cyclone旋风系列2023”单细胞液滴制备与分选系统，破茧而出！大连华微生命科技，推出“HW-cyclone旋风系列”单细胞液滴制备与分选系统（2023款），单激光（基础版）售价36.8万！此消息一出，业内哗然！单细胞分选设备平均百万的售价，被大连华微靠自研专利技术，砍掉三分之二！这——还没完！单细胞液滴制备与分选相应耗材：华微生命的微流控芯片，更是达到惊人的低价：RMB200-600元/片，仅为进口单价的1/10—1/5；一次性管线耗材，低至人民币10元+/次……单细胞领域，注定又是一场腥风血雨！西方人说：技术，不能让中国人掌握！似曾相识，像中国高铁一样，只要研发起步不落后于西方，中国民族企业就能靠自己的智慧，以“铁杵磨针”的韧性不辍耕作，就能捅破高科技那层“窗户纸”，而核心技术一旦被中国企业掌握，就能创造物美价廉的高性价比产品，让全球客户都买得起、用得上！而性价比——是中国制造在高科技领域：靓丽的标签！图1 大连华微生命科技推出的“HW-cyclone旋风系列”单细胞液滴制备与分选系统这么低的售价，能和国外百万以上的产品pk么？性能如何？功能是否拉跨？和流式技术对比，细胞活性怎么样？带着这些疑问，让我们走近这个被预言为“2023年性价比新高度”的“HW-cyclone旋风系列”单细胞液滴制备与分选系统。一、结构 （1）基于用户显微镜的开放式研发体系，包括：“HW-cyclone旋风系列”单细胞液滴制备与分选系统、显微镜、进样驱动装置（注射泵或压力泵）、微流控芯片等部分组成，不仅大幅降低采购成本，更方便改造、升级甚至用户自行设计（变更）各流程环节，个性化科研，才能让灵感迅速转化为科技成果。此外，系统的1+N积木式结构，以及客户常用的注射泵、压力泵等传统进样方式，与客户科研习惯具有良好的兼容性。从源头（细胞进样悬液），至最终分选成果收集，全流程低成本管线通路（含微流控芯片），可一次性或多轮使用，“一次抛”方式杜绝了污染与交叉影响；“多次抛”常见于相同试剂重复实验或高效教学环节，并可大幅降低成本。图2 大连华微生命科技推出的“蓝晶系列”单细胞液滴包裹与分选类微流控芯片二、功能针对单个细胞、细菌、病毒、线虫、细胞团等1-100um粒径范围的生物颗粒，进行液滴包裹、检测、按阈值分选等操作。 （1）单细胞微滴包裹（微滴批量制备）（2）细胞检测： 荧光标记 无标记技术（高级版）（3）细胞分选（以下方式任选其一）： 电场力分选 磁场力分选 流体驱动柔性分选（4）特色技术（均高端机型/版） 单细胞液滴包裹时空滴删除功能 液滴切分功能 液滴再注液功能 连环分选（分选后再分选） 一分三路分选 分选后捕获（培养、扩增） 多种类单核1+1分选（5）升级扩展 升级至多激光/多通道， 扩展至影像传感、拉曼检测等检测方式； 增配单细胞自动植板系统（96/384孔板，单孔入单滴）； 升级至疾风、暴风、飓风、龙卷风等大连华微高端系列； 根据客户想法，升级为其它个性化微流控方式三、价格（直销）（1）单激光分选系统（单通道基础版）：36.8万元RMB；（2）微流控芯片（通用款或批量型）：200-800元RMB；（3）管线通路耗材：10-30元/实验；（4）生物显微镜、泵、试剂、PC电脑等均可客户自备。 （提醒用户：长期实验使用，请重点考量耗材成本）四、系统原理（1）单细胞液滴包裹原理 针对细胞、细菌等1-100um粒径的生物颗粒，基于两相不相溶液体，在“十”、“T”、“Y”等形式液路中的通道交叉口，利用剪切力，生成均一的液滴，实现微观下细胞个体之间的分离。 （2）分选原理有别于流式分选技术对细胞极大伤害性的高压鞘液，本产品采用低液压驱动，肿瘤细胞等敏感生物颗粒几乎不会收到液压方面的伤害。基于电磁场、介电力、流体驱动等方式，针对单个细胞在分叉通道处，根据实时检测参数，施力向不同的分支驱动液滴，实现分选，其中电场力、介电力驱动效率高达：1000个细胞/分钟；五、功能及参数 （1）单细胞液滴包裹：1,000—50,000 drop/min （2）电场力/磁场力/介电力分选：1,000 drop/min （3）无标记分选：100 drop/min上述分选通量，无法与流式细胞仪（每秒数万个）相提并论，原因之一：降低的速度，极弱的液压推动，就是为了——细胞活性！如果流式分选针对某种细胞分选的活率为30%，华微采用的弱压驱动分选原理，使细胞分选活率达到流式的2至3倍（60%-90%），其分选成果符合单细胞基因测序的活率要求。尤其针对肿瘤细胞等脆弱样本，细胞保活的优势明显。原因之二：匹配单细胞植板流程。从另一个角度，如果下一环节是单细胞孔板滴注，那么，针对秒级的板孔间喷嘴移动，超过5Hz的分选速度，对整个系统的单细胞植板效率影响不大。六、活性因采用柔性低压力驱动方案（1-30PSI可调，压强可低至流式1/70），以及从头至尾的液滴全流程包裹策略，且细胞无需沾染电荷，故活性远优于流式分选技术，分选后细胞活率60-99%表1 常见流式分选设备喷嘴与压力配置表七、耗材微 流控芯片（液滴制备、液滴分选、特定功能定制芯片）；管 线耗材（管路、夹具、连接件等），价格低廉，成本可忽略。大连华微生命科技，产品源于元器件级别的自主研发，客户众多，质量经过中科院、中国农科院、三甲医院、中国海洋大学、华东理工大学、江南大学等985/211高校,及其它众多客户应用及检验，性能稳定，价格低廉，拥有更亲民的性价比。公司创始研发团队包括：五位北京大学校友、两位原中科院资深工程师、多位国内985/211高校毕业生，并与中科院大连化物所、大连理工大学、大连交通大学、大连医科大学等合作单位的多位教授、博士或其它科研人员，进行长期合作。大连华微生命科技，是中国单细胞液滴分选领域的“清晨耕耘者”，（国内未发现比华微更早的商业化产品研发&制造商），用“十年磨一剑”描述毫不为过——在2013年，创始人就申请了多项发明专利，攻克多项西方对我国的“卡脖子”技术，并历经无数次改进优化，并实现了国产化。2021年，大连华微生命科技携手大连医大附属医院（三甲）、大连交通大学，以源于企业创始人专利技术的“单细胞柔性分选技术”，入选“2021年大连市重点科技计划项目”，并喜报频传，两年来不断获取新成果（预计2024年实现商业化，敬请期待）。大连华微的每一次技术革新，或能提高性能，或大幅降低成本，都承载着华微人潜心研发、敢于挑战未来科技的创业精神，我们将一如既往，不辍耕作，在单细胞细分领域不断探索，致力于全球业内的前沿科技研发，为中国民族工业添砖加瓦。企业简介：大连华微生命科技有限公司（Dalian Life Huawei Technology Co., Ltd.）（以下简称大连华微），科技型企业，是一家拥有自主知识产权，集研发、生产、销售及服务为一体的微流控系统一站式解决方案供应商，依靠自有专利技术，立足独立研发民族品牌，致力于微流体控制科技产品的研发与生产，历经十年的探索磨砺，为中国乃至世界的业内客户带来全新的选择。未来公司将一如既往地重视创新科研，与广大华微客户一起携手进步，共同推动着中国生命科学的发展，做世界细分领域有话语权的中国高科技民族企业。

单细胞分析已成为生命科学的有力工具，原位样品在单个细胞精度的识别、分选、测序/鉴定对于深入解析微生物组的结构和功能具有重要作用。青岛能源所单细胞中心与青岛星赛生物合作，成功开发微生物单细胞自动分选系统EasySort AUTO，可将常规显微镜升级为微生物单细胞的智能化、自动化分选装置，并利用酵母和大肠杆菌细胞示范了单细胞分选—测序/培养的全流程，为微生物资源的探测和挖掘提供了有力手段，该研究成果近日发表于《微生物》mLife杂志。 EasySort AUTO的“慧眼”和“巧手”服务微生物组资源挖掘 　　微生物组(亦称菌群)在自然界及人体中无所不在，它们蕴含着精准健康、碳减排、环境保护、清洁能源等当今人类社会重大挑战的解决方案。然而，微生物细胞尺寸小，操控难度大，单个细胞的识别与分选极具挑战性；同时，菌群中的庞大的细胞数量让原位、单细胞层面的菌群研究对于自动化、高通量的需求尤为迫切。 　　针对上述问题，单细胞中心刁志钿博士、阚凌雁工程师、赵怡龙工程师带领的研究小组，基于青岛星赛生物的单细胞微液滴分选系统EasySort Lego，开发了新一代人工智能辅助的微生物单细胞自动化分选系统EasySort AUTO。经测试，系统搭载的AI辅助图像识别算法可以智能化、自动化地识别目标细胞，准确率达80%；系统嵌入的光镊技术可以捕捉并精准操控目标细胞；最后，基于界面接触的微量液体分离专利技术，目标细胞能够以单管单细胞(One-Cell-One-Tube)的形式自动收集于PCR管中，通量为~120细胞/小时，单细胞率高于93%。该系统分选的目标单细胞可以直接开展单细胞测序、培养等工作，单细胞测序成功率高于84.2%，酵母细胞和大肠杆菌单细胞培养的成功率分别为~85%和~80%。 　　此外，EasySort AUTO的设计还具备三个显著特点：1)广谱适用性，由于光镊可以操控不同尺寸的细胞，该系统广泛适用于各类单细胞的分离、分选、培养及测序实验；2)灵活性，该系统采用模块化的设计，可通过安装“巧手”—光镊模块和自动收集模块，将生物实验室常见的正置显微镜升级为单细胞分选装置；3)高活性保持，分选后的目标细胞具备较高的活性和DNA/RNA质量。 　　单细胞中心长期致力于微生物单细胞技术开发、装备研制和产业化，前期和青岛星赛生物合作已陆续推出高通量流式拉曼分选仪(FlowRACS)、临床单细胞拉曼药敏快检仪(CAST-R)、单细胞拉曼光镊分选仪(RACS-Seq)、单细胞微液滴分选系统(EasySort)等产品，并已进入市场。作为EasySort仪器系列的新成员，EasySort AUTO的设计聚焦在为显微镜的“慧眼”提供一双自动的“巧手”，使得显微镜可以智能化发现目标单细胞，并自动化分离获取。基于上述创新，EasySort AUTO系统将以便捷的操作、灵活的组装、自动化的细胞收集、目标细胞的高活性保持等优势为微生物单细胞的分选工作提供特色解决方案。 　　该工作由单细胞中心马波研究员和李远东工程师主持，与青岛星赛生物合作完成，得到了国家重点研发计划的资助。

马波*，籍月彤，刘阳，徐健*　　摘要：　　单个细胞是地球上生命活动的基本单元，单细胞精度的科学研究能够揭示生命科学的本质问题，已经成为国际研究热点。拉曼激活细胞分选(Raman-activated Cell Sorting，RACS)能够利用“单细胞拉曼图谱”这一细胞内在、免外源标记的“生化指纹”进行功能分选，突破“细胞功能异质性原理”、“大多微生物尚难培养”等共性科学问题与重大技术屏障。本文介绍了拉曼光谱在单细胞功能识别方面的研究进展，详述了基于拉曼光谱的单细胞分选技术和核心器件研制的产业化过程。同时，介绍了近期推出的第一代商品化的RACS仪器，并且讨论了这些国产仪器装备为医药、海洋、土壤/环境、工业生物技术领域提供的原创解决方案。这些拥有自主知识产权的国产高端仪器装备将广泛服务于工业过程在线实时监控、细胞工厂筛选、工业/土壤/海洋种质资源挖掘、临床精准用药及新能源开发等。　　关键词：拉曼组，单细胞表型组，拉曼激活细胞分选，国产仪器装备，单细胞分选技术与核心器件　　单个细胞是地球上生命活动的基本单元，因此单个细胞精度的生命系统研究能够揭示“细胞功能异质性机制”这一生命科学的本质问题1。传统的、基于细胞群体水平性状测量的信息并不能真实反映细胞内部的生物过程及机制2,3，这是因为，在细胞种群中，即使是基因组信息完全一致的不同单个细胞之间，其表型也具有极为显著的差异，而这些差异往往具有重要的生物学意义4,5。因此，单个细胞的研究能够带来生物技术在能源、环境、健康、农业、海洋等广泛应用领域的突破。2018年，利用单细胞测序技术完成的胚胎发育初期单细胞命运追踪被Science杂志评为2018年最重要的十大科学进展之首。近两年来，世界顶级学术期刊《科学》《自然》分别有43篇和38篇文章聚焦于单细胞分析。　　(一)拉曼组技术是单细胞功能识别的创新工具和有力武器。　　自上个世纪以来，研究人员主要通过荧光标记与流式细胞术的结合实现单细胞功能分选，即荧光激活细胞分选(Fluorescence-activated Cell Sorting，FACS)6。然而，FACS一般需要针对特定的生物标识物对细胞外加荧光标记，因此在单细胞分选方面存在如下瓶颈：(1)细胞适用性有限。不论在干细胞发育的机理研究、肿瘤细胞的诊断，还是微生物群落中功能组分的识别中，关键的细胞表型经常仅有粗放认识或完全未知(即“未知”的细胞表型)，也没有其生物标记。因此，FACS通常难以分选那些生物标识物通常未知或难以外加活体荧光标记的细胞体系(如微生物群落等)。(2)难以开展“原位”研究。进入细胞的荧光标记经常会改变细胞的原位状态，有时甚至影响细胞活性，因此该方法通常仅限于能够进行外加荧光标记的细胞，而且难以进行真正意义上的“原位”研究。(3)难以获取全方位的代谢表型。FACS在单位时间只能获得与区分很有限的细胞信息数据，如形态、折光率、反射率或荧光强度等有限指标，难以表征单细胞全方位的“代谢表型组”，因此通常不易获得尚难培养微生物与其生态功能之间的原位联系。　　拉曼光谱是一种非标记的散射光谱，每个单细胞拉曼光谱由分别对应于一类化学键的超过1500个拉曼谱峰组成，反映了特定细胞内化学物质的成分及含量的多维信息。因此，特定时空状态下一个细胞群体的单细胞拉曼光谱的集合称为“拉曼组”7。由于细胞内化合物的组成对于细胞生理状态和微环境的变化等因素敏感，因此单细胞拉曼图谱或拉曼组不仅潜在能区分不同物种的细胞，还可以静态或动态地表征该细胞的生理状态及所处微环境8。　　业界研究表明，利用拉曼组可实现较为广泛的细胞类型及功能的表征8。例如，Forrester和Deng等分别利用拉曼光谱成功地对多株芽孢杆菌属细菌的生化特性进行了鉴定，发现根据拉曼光谱信息可实现菌株水平的鉴定，并分析了各菌株之间可能的遗传进化关系9,10。在细胞功能识别方面，Samek和Singh等分别通过检测拉曼图谱分析了不同微藻的油脂产量，并建立了通过分析特定峰位比值来估测脂类不饱和度的方法11,12。Heraud等通过检测细胞拉曼图谱，对微藻细胞所处的营养状态(缺氮与否)进行判别和预测13。在临床方面，2011年Dochow等通过微流控芯片结合拉曼光镊技术，成功对人体白细胞、红细胞、急性髓性白血病细胞以及两种乳腺癌细胞进行了鉴别14。利用癌细胞的生化表型与正常细胞的区别，Barman15, Surmacki16和Haka17分别独立地证实了单细胞拉曼可用于乳腺癌早期诊断。此外，中国科学院青岛生物能源与过程研究所单细胞中心等也证明，单细胞拉曼光谱可以区分或定量表征细菌细胞的种系发生18、药物应激反应与耐药性19,20、分解代谢(综合细胞代谢活性21、分解特定底物的活性22)、合成代谢(甘油三酯含量及油脂饱和度23,24、淀粉含量25)、不同物种之间的代谢互作26等。　　(二)基于拉曼光谱的单细胞分选技术和核心器件是单细胞组学研究获得突破性进展的关键。　　拉曼激活细胞分选(Raman-activated Cell Sorting，RACS)能够利用“单细胞拉曼图谱”这一细胞内在、免外源标记的“生化指纹”进行功能分选，建立单细胞功能表征和单细胞组学分析之间的桥梁，突破“细胞功能异质性原理”、“大多微生物尚难培养”等共性科学问题与重大技术瓶颈27,28。随着微流控技术的进步，一系列基于拉曼光谱的单细胞分选技术和核心器件先后面世，其中包括在静止或者相对静止系统中进行的拉曼光镊分选21,29,30、单细胞拉曼弹射分选(RACE)18,31和拉曼激活光镊重力驱动微液滴分选技术(RAGE)32，以及在液相流动态细胞中进行的拉曼激活微流分选(RAMS)33、拉曼激活单细胞微液滴流式分选(RADS)34、介电迟滞拉曼激活单细胞微液滴流式分选(pDEP-RADS)。　　RACE适用于静置或贴壁细胞的单细胞分选。该技术在风干的芯片上对细胞逐一测量拉曼信号后，用脉冲激光弹射出具有目标拉曼信号的细胞18。通过改进弹射基片材料，RACE可以在背向直接采集拉曼信号，降低了操作的繁琐性并大幅提升了全流程的速度和通量35 同时，“All-In-One”RACE芯片的面世，让测量、弹射、细胞裂解与核酸扩增都在同一与空气隔绝的封闭体系内进行，从而降低了环境DNA对目标单细胞核酸扩增的污染35。近期油相震荡乳化单细胞MDA方法的开发，使RACE分离的纯培养E. coli（每个MDA体系含5个细胞）基因组覆盖度由通常的20%提高到50%以上31。　　RACE在干片上、利用高强度脉冲激光弹射细胞，不仅细胞活性无法保持，而且激光对细胞的损伤造成分选后单细胞鸟枪测序覆盖率极低(通常低于10%)35。最新发表的RAGE通过耦合拉曼光镊和液滴单细胞包裹，克服了单一光镊力难以实现目标细胞脱离焦平面导出的问题，并通过耦合液滴微流控技术，完成了目标单细胞的精准分选和快速导出32。同时，拉曼检测于水相中进行，能最大限度地保持细胞生理活性，并能够精确匹配每个细胞与之相对应的拉曼光谱表型，实现“所测即所得”32。此外，分选后的单细胞已经包裹在油包水微液滴中，因此可直接耦合后续单细胞培养和组学分析。RAGE大幅提高了一个E. coli细胞的全基因组测序覆盖率，可达99.5%以上32。　　RACE和RAGE均主要针对相对静止状态的细胞进行分选，因此通量均在数个细胞/每分钟这一较低水平，难以继续大幅提高27。因此，为了提高拉曼分选的通量(同时保持细胞活性)，科研人员在液相中对流动态细胞进行拉曼测量与分选。例如，RAMS芯片集成了基于介电的单细胞捕获释放单元，能够克服单细胞拉曼信号较弱这一先天性缺点，可实现高速“裸奔”状态下单细胞的捕获，从而完成高质量拉曼信号的获取33。　　在此基础上，通过液相拉曼测量后的细胞实时微液滴包裹及分选，RADS34的分选通量与系统性均比RAMS有了明显的提高。由于采用介电液滴分选技术，RADS系统是目前已报道工作中全谱分选通量最高的RACS系统，通量达数百个细胞每分钟。除了流式拉曼分选通量的提高之外，RADS的特色是，液滴包裹不仅可以保护细胞免受分选过程中的损伤(针对雨生红球藻中虾青素含量的分选准确率达到95%以上，分选后细胞存活率达93%)，还能够与分选后细胞的培养、DNA、RNA、蛋白等的提取与分析等无缝衔接34。单细胞中心最新还研发了pDEP-RADS技术，它在高速液流中基于介电迟滞来精确捕获细胞和采集单细胞拉曼信号，在保持通量的前提下大幅提高了拉曼检测的灵敏度，从而实现了非共振拉曼峰(信号比共振拉曼峰弱1~3个数量级)的高通量流式分选。　　(三)基于拉曼组原理以及微流控技术研发的单细胞拉曼分选仪器将助力单细胞分析的革命。　　青岛星赛生物科技有限公司依托于中国科学院青岛生物能源与过程研究所单细胞中心的原创技术与知识产权，自主研发了一系列基于拉曼组原理的原创单细胞拉曼分选仪器装备。　　单细胞拉曼分选-测序耦合系统(Raman-Activated single-Cell Sorting RACS-Seq)克服了单个细胞拉曼分离可靠性低、核酸扩增容易污染、全基因组测序覆盖度不均等关键技术难点，具备样品预处理、显微拉曼成像、RAGE/RADS拉曼分选、单细胞微液滴细胞裂解和核酸扩增、拉曼组分析软件等功能，实现了单细胞功能检测、分选、测序与培养之完整流程的仪器化。RACS-Seq带有配套的RAGE、RADS、pDEP-RADS等芯片和相应试剂盒(环境样品中微生物单细胞提取与制备、稳定同位素饲喂细胞、单细胞核酸裂解与扩增等)，能够满足不同实验目的所需的单细胞识别、分选和测序文库构建，并且适用于任何大于0.5 μm的细菌、古菌和真菌细胞(也适用于微藻、植物、动物及人体细胞)。　　临床单细胞拉曼药敏快检仪(Clinical Antimicrobial Susceptibility Test Ramanometry CAST-R)是临床样品之病原鉴定、药敏性表型测量及耐药基因解析的一体化装备。它基于重水饲喂单细胞拉曼光谱技术，不需分离培养而直接鉴定病原种类，并测量基于代谢活性抑制的药敏性表型(及其在细胞之间的异质性)，全流程可在3小时内完成，将目前检测时长缩短至1/10 20。进而通过单细胞微液滴光镊拉曼分选与核酸扩增技术，完成低偏好性、高覆盖度、与耐药表型关联的单细胞基因组测序。最新论文证明，该系统能从临床菌群中直接、精准地获取一个细菌细胞的药敏表型及其完整基因组(以往未有先例) 32。CAST-R在单个细菌细胞精度同时追踪“药敏表型-完整基因组”的独特能力，预期将为临床感染诊断和用药、耐药性传播监控、微生态监控等提供新一代解决方案。　　单细胞拉曼表型监测系统(Raman-Activated Phenotyping System RAPS)是基于拉曼复合表型对细胞工厂进行单细胞水平高通量、低成本、非入侵式的快速表型监测装备。现有发酵过程的监控方案存在三大问题：1)时间精度，目前只能通过离线方式对各表型分别进行测定，由于样品处理和测量时间带来的滞后性，使得微生物发酵过程的控制比一般的工业生产难度更大 2)表型精度，由于缺乏综合表型表征手段，只能通过胞外产物尽量刻画细胞状态 3)测量精度，现有表型的测量均基于群体水平大量细胞的平均性状，在高压、高浓、高密度、且营养物质不均一的发酵过程中，细胞之间的差异被累积并级联放大，而群体水平的平均性状掩盖了这种差异的发生/发展和变化规律，无法反映细胞的真实状态。RAPS克服了现有方法的滞后性、可检测表型有限，以及无法反映细胞异质性等局限，为细胞工厂研究提供了一个高效、全景式的表型鉴定和过程监测方案。　　模块式单细胞微液滴分离系统(EasySort)是一款拥有自主知识产权的小型台式仪器。它小巧灵活，操作简便，能够自由地与各种型号的显微镜搭配组装，轻松将明场/荧光/拉曼显微镜升级为“所见即所分”、保持原位状态与活性的细菌单细胞精准功能分选装置。在显微镜的视野下，具特定表型的直径大于0.5 μm的单细胞均能够被迅速包裹成单液滴，并通过独有的重力驱动专利技术迅速移动到孔板或者EP管中，对接下游实验。因其兼具超高的性价比、便携的外形、灵活的适配度、简易的用户界面以及优秀的细胞活性保持等众多优势，EasySort将广泛应用于各类单细胞的分离、分选、培养及测序实验。　　高通量流式拉曼分选仪(High-throughput RACS：FlowRACS)搭载了具自主知识产权的pDEP-RADS技术，通过在高速液流中基于介电迟滞来精确捕获和采集单细胞拉曼信号，克服了单细胞拉曼分选的通量限制，以及微液滴对于拉曼表型鉴定的影响，巧妙地集成了单细胞拉曼信号采集与单细胞微液滴发生。同时它利用全光谱实时判别算法，实现了活体单细胞超高通量拉曼分选的高度自动化。　　(四)原创国产单细胞拉曼分选装备将服务于医药、土壤/环境、海洋和工业生物技术等广阔领域。　　上述介绍的这些拥有自主知识产权的原创仪器装备已经支撑着临床精准用药、生物资源挖掘、环境微生态机制、细胞工厂筛选、工业过程监控等广阔领域。　　在医药领域，细菌耐药性蔓延是临床感染面临的严重危机。当前基于培养原理的病原鉴定和药敏仪器检测一般需要花费2-3天。而CAST-R不再需要培养，而是基于重水标记单细胞拉曼光谱，在3小时之内即可完成针对代谢活性抑制的药敏性实测，而且将具有耐药表型的目标耐药菌单细胞分离出来，直接耦合细菌单细胞基因组测序，实现了在单个细菌/真菌细胞的精度，挖掘耐药基因及突变、追踪病原传播和考察耐药微进化机制。利用CAST-R针对临床尿液样品的初步分析显示，基于单细胞拉曼的菌株鉴定准确率达到93%，药敏测试与培养法的一致性达到90%。同时，从临床尿液样本中直接识别和分选出耐受特定抗生素的临床E. coli，并进行了精确到一个细菌细胞的全基因组测序，覆盖度可达99.5%32，保证了基因组上所有耐药基因突变均得以全面、精确地揭示。　　在海洋和土壤/环境领域，“99%的微生物难培养”、“异质性普遍存在”、“原位功能难以测量”等因素均对环境功能基因研究、种质资源挖掘、生态环境监测等提出了严峻的挑战。借助RACE技术，研究人员以中国黄海近海真光层的新鲜海水为模式，用13C-NaHCO3饲喂其微生物组，然后通过测量海水拉曼组中各个单细胞拉曼图谱上13C峰的动态特征，分辨出在海水中活跃固定与代谢无机碳的单细胞群。同时，分选这些原位固碳单细胞群(30个细胞混合)并测定其DNA序列，可重构出基因组草图35。后续研究表明，利用搭载RAGE-Seq芯片的RACS-Seq系统，可以分选获取海水中单个原位固定CO2的目标细菌细胞，并且对1个细胞的基因组即可获得超过95%的基因组覆盖度。对于土壤样品，则可以基于重水孵育、针对代谢活性进行菌群中功能细胞的识别、分选和测序，单个细胞的基因组覆盖度可达90%。　　在工业生物技术领域，新兴的合成生物学需要对细胞工厂进行人工设计并构建具新功能的生物系统，从而建立药物、材料或能源替代品等的生物制造途径36。其中细胞表型的测试筛选工作是合成生物技术发展的“限速步骤”之一。代谢物是细胞中基因表达的最终产物，因此对细胞代谢物组或代谢状态的检测是细胞功能检测最直接有效的手段之一。利用RACS-Seq，可以快速、非侵入性、不须标记地以单个活体细胞中淀粉含量这一特定表型对莱茵衣藻和小球藻进行快速表型鉴定，为富含淀粉的种质资源选育提供了一种崭新手段25。在莱茵衣藻和微拟球藻中，利用RACS-Seq可针对单个细胞中淀粉、蛋白质、甘油三酯含量和脂质不饱和度等表型对目标细胞进行快速筛选24。利用RACS-Seq，还能够针对CO2利用速率这一特定表型对海水中难培养微生物进行分选和测序，从而完成功能基因及种质资源挖掘35。　　此外，在酶活筛选方面，将未知功能的酶基因库转化入酵母底盘中，利用FlowRACS基于拉曼光谱、不需酵母培养和纯化而直接识别和定量其单细胞精度的目标代谢物，进而高通量流式拉曼分选目标单细胞，并利用下游测序快速识别其中表达的目标化合物合成酶。因此，FlowRACS大大节约了时间、耗材和人力的成本，可将酶的筛选效率提高100到1000倍。　　总之，拉曼组和单细胞拉曼分选基于细胞本征性的生化指纹图谱来识别与分选特定“代谢表型组”的目标细胞，具有不需预知生物标识物、不需标记、非侵入性、可全景式识别细胞代谢表型等核心优势8。因此，包括RACS-Seq，CAST-R，RAPS，EasySort以及FlowRACS等在内的单细胞分析仪器系列(青岛星赛生物科技有限公司)，将在精准医疗、大健康、生物资源挖掘、生态监测、生物安全、工业生物技术等领域得以广泛应用，同时为单细胞研究提供全新的科学思路、技术路线和仪器装备。　　参考文献：　　1 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Single-cell analysis: The deepest differences. Nature 480, 133-137, doi:10.1038/480133a (2011).　　2 Eldar, A. & Elowitz, M. B. Functional roles for noise in genetic circuits. Nature 467, 167-173, doi:10.1038/nature09326 (2010).　　3 Spiller, D. G., Wood, C. D., Rand, D. A. & White, M. R. Measurement of single-cell dynamics. Nature 465, 736-745, doi:10.1038/nature09232 (2010).　　4 Elowitz, M. B., Levine, A. J., Siggia, E. D. & Swain, P. S. Stochastic gene expression in a single cell. Science 297, 1183-1186, doi:10.1126/science.1070919 (2002).　　5 Yoon, H. S. et al. Single-cell genomics reveals organismal interactions in uncultivated marine protists. Science 332, 714-717, doi:10.1126/science.1203163 (2011).　　6 Bonner, W. A., Hulett, H. R., Sweet, R. G. & Herzenberg, L. A. Fluorescence activated cell sorting. Rev Sci Instrum 43, 404-409, doi:10.1063/1.1685647 (1972).　　7 Xu, J. et al. Emerging trends for microbiome analysis: from single-cell functional imaging to microbiome big data. 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Towards high-throughput microfluidic Raman-activated cell sorting. Analyst 140, 6163-6174, doi:10.1039/c5an01074h (2015).　　28 Song, Y., Yin, H. & Huang, W. E. Raman activated cell sorting. Curr Opin Chem Biol 33, 1-8, doi:10.1016/j.cbpa.2016.04.002 (2016).　　29 Chan, J. W. Recent advances in laser tweezers Raman spectroscopy (LTRS) for label-free analysis of single cells. J Biophotonics 6, 36-48, doi:10.1002/jbio.201200143 (2013).　　30 Dochow, S. et al. Quartz microfluidic chip for tumour cell identification by Raman spectroscopy in combination with optical traps. Anal Bioanal Chem 405, 2743-2746, doi:10.1007/s00216-013-6726-3 (2013).　　31 Su, X. et al. Rational Optimization of Raman-activated Cell Ejection and Sequencing for Bacteria. Anal Chem 92, 8081-8089, doi:10.1021/acs.analchem.9b05345 (2020).　　32 Xu, T. et al. Phenome-Genome Profiling of Single Bacterial Cell by Raman-Activated Gravity-Driven Encapsulation and Sequencing. Small, e2001172, doi:10.1002/smll.202001172 (2020).　　33 Zhang, P. et al. Raman-activated cell sorting based on dielectrophoretic single-cell trap and release. Anal Chem 87, 2282-2289, doi:10.1021/ac503974e (2015).　　34 Wang, X. et al. Raman-activated droplet sorting (RADS) for label-free high-throughput screening of microalgal single-cells. Anal Chem 89, 12569-12577, doi:10.1021/acs.analchem.7b03884 (2017).　　35 Jing, X. et al. Raman-activated cell sorting and metagenomic sequencing revealing carbon-fixing bacteria in the ocean. Environ Microbiol 20, 2241-2255, doi:10.1111/1462-2920.14268 (2018).　　36 Check, E. Synthetic biology: designs on life. Nature 438, 417-418, doi:10.1038/438417a (2005).　　作者简介：　　徐健 中国科学院青岛生物能源与过程所研究员、单细胞中心主任 山东省能源生物遗传资源重点实验室主任。2003年华盛顿大学计算机科学硕士和生物化学博士，2003-2004年华盛顿大学基因组科学和系统生物学中心博士后。2004-08年于华盛顿大学基因组研究院任基因组拼装和分析团队负责人。2008年入选中科院“百人计划”并全职加入中科院青岛生物能源与过程所。研究方向为单细胞分析仪器和大数据，及其在微生物组、合成生物学和生物安全等领域的应用。论文发表于Science, Cell Host Microbe, Sci Adv., Nature Commu.等130余篇，被引用10000余次(H-index 43)。获青年拔尖、创新领军人才、国家杰青基金、中国青年科技奖等支持。　　马波 中国科学院青岛生物能源与过程所研究员、单细胞中心副主任 微流控系统团队负责人。 2008 年获中科院大连化物所分析化学专业博士学位。2008.6-2012.7先后在美国加州大学洛杉矶分校Crump 分子成像研究所和莱斯大学等研究机构从事博士后研究。2012年8月加入中科院青岛生物能源与过程研究所。目前研究方向聚焦在基于微流控的单细胞分析技术、仪器及应用研究。论文发表于Sci Adv., Nature Commu. Small, Anal Chem., Lab on a Chip等30余篇，申请单细胞技术相关发明专利二十余项，已授权8项。单细胞中心合影　　中国科学院青岛生物能源与过程研究所单细胞中心(徐健、马波、籍月彤、刘阳 所在单位)简介：中国科学院青岛生物能源与过程研究所是由中国科学院、山东省人民政府、青岛市人民政府于2006年7月启动筹建，2009年11月30日通过共建三方验收并纳入中国科学院“知识创新工程”管理序列的国立科研机构。单细胞中心的核心使命是以基因组工程、工具酶开发、先进成像、微流控器件、大数据等为主要方法学支撑，围绕细胞工厂构建、微生物组快检及机制等领域的关键科学和技术瓶颈，开发单细胞分析、分选、测序与培养技术，研制与产业化单细胞分析仪器系列，从国产装备的角度支撑单细胞大数据网络和微生物组天网等原创大数据系统，服务于工业生物技术、大健康、海洋资源挖掘、环境保护与修复、生物安全等应用领域。　　青岛星赛生物科技有限公司(籍月彤所在单位)：青岛星赛生物科技是一家专注于单细胞分析科研设备及临床诊断仪器研发与产业化的创新型高新科技企业。竭诚为科学研究人员、工业生物技术人员、以及临床工作者提供高效、可靠、一体化全方位的单细胞水平解决方案，着力打造国产高端生命科学仪器品牌。产品应用于工业过程监控、工业及海洋种质资源挖掘、临床精准用药、微生物组研究、生物安全及新能源开发等领域。

项目编号：1639-224122240333/02项目名称：复旦大学流式细胞分选仪预算金额：186.6700000 万元（人民币）最高限价（如有）：182.9300000 万元（人民币）采购需求：序号/ No.货物名称/Name of the goods数量/Quantity简要技术规格/Main Technical Data* 交货期/ Delivery schedule1流式细胞分选仪预算金额：人民币186.67万元最高限价：人民币182.93万元 1套最大液滴振荡频率：不低于52kHz；合同签订后3个月货到复旦大学。（空运）/ DPU Fudan University within three months after signing the contact .合同履行期限：合同签订后3个月货到复旦大学。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：1639-224122240333/02项目名称：复旦大学流式细胞分选仪预算金额：182.9300000 万元（人民币）最高限价（如有）：182.9300000 万元（人民币）采购需求：序号/ No.货物名称/Name of the goods数量/Quantity简要技术规格/Main Technical Data* 交货期/ Delivery schedule1流式细胞分选仪预算金额：人民币186.67万元最高限价：人民币182.93万元 1套最大液滴振荡频率：不低于52kHz；合同签订后3个月货到复旦大学。（空运）/ DPU Fudan University within three months after signing the contact .合同履行期限：合同签订后3个月货到复旦大学。本项目( 不接受 )联合体投标。

随着单细胞测序技术的快速发展，科研工作者们可对每个独一无二的单细胞进行分析，认识到细胞间的异质性，深入了解如胚胎发育早期的分化特征、肿瘤微环境中的非均质性、罕见循环肿瘤细胞的转录组等等以往传统高通量测序方法难以攻克的领域。单细胞分析的应用已进入百花齐放的时代，涵括神经生物学、癌症、免疫学、微生物学、胚胎发育、临床诊断等多个领域。单细胞测序分析的第一步，即是单细胞样品的制备，同时确保其生物完整性不被破坏。高质量的样品制备影响着后续单细胞分析成功与否。高活性、无细胞碎片且均一的单细胞悬液可使测序结果在完整性、真实性、数据可重复性得到提升。最常见细胞分离的方法可用MACS磁珠或流式细胞仪进行目的细胞分选与富集。单细胞测序流程利用流式细胞分选法富集目的细胞群体缩小研究范围，对单细胞群体可进一步精细化解读。尤其在研究罕见细胞族群，单细胞测序前先以流式细胞分选富集稀有细胞，可大大增加实验数据真实性与可靠性。现今已有愈来愈多单细胞测序研究结合流式细胞分选，筛选目的细胞、过滤死细胞减少样本中無效细胞的比例，提高单细胞文库构建的成功率以及后续的数据质量，让单细胞测序更有深度与广度分析实验数据，推动进一步研究范畴。传统高压液滴分选仪分选单细胞传统液滴式流式细胞分选(Droplet cell sorter)，将目的细胞利用适宜的荧光标记。经荧光染色或标记的单细胞悬液，被高压压入流动室内，在鞘液的包裹和推动下，细胞被排成单列，以一定速度从流动室喷口喷出。通过相应荧光检测及充电，获得目的细胞，实现单细胞分离。然而操作过程中，分选的细胞相继受到高压、充电带有电荷、减压的刺激，常导致分选的目的细胞在分类过程中的损伤和溶解，活细胞回收率不高；即使回收的活细胞也因分选过程受刺激影响细胞基因转录图谱表现，无法维持其生物完整性。传统高压液滴分选仪进行单细胞分选Adapted from Technologies for Single-Cell IsolationInt. J. Mol. Sci. 2015, 16美天旎MACSQuant Tyto 革命性的细胞分选仪专利的微芯片技术，精准地控制阀门开合以进行细胞分选，该仪器的特性在于整个分选过程在一次性使用的全封闭样本舱(cartridge) 中进行，且无需鞘液、避免了样本污染和残留风险。上样简单、自动进行分选设置，无需操作人员进行高强度与长时间的培训就能轻松操作。由于实际分选过程都在样本舱进行，不会损失珍贵的样本材料；阳性和阴性分选组份均可在无菌洁净操作台内轻松回收。细胞不会受到高压、电荷及减压刺激，不同于传统的液滴分选仪，这种温和的分选方法可最大保持细胞活性和功能，即使经过多次分选，细胞活性也不会受影响，充分表明这种阀门介导的分选机制具有温和性质。美天旎MACSQuant Tyto细胞分选仪与样本舱功能示意图。A. 美天旎MACSQuant Tyto细胞分选仪；B. 样本舱；C.独特微芯片技术的分选示意图。单细胞测序前，使用美天旎MACSQuant Tyto细胞分选仪（MQ Tyto）进行目的细胞分选富集。分选过程不受到高压、电荷、减压与剪切力刺激，作用温和不影响细胞生物功能完整性，维持细胞基因转录图谱表现，提高细胞存活率与回收率。位于美国加州大学(University of California, Irvine- UCI)的Dr. Kai kessenbrock研究团队致力于研究机体正常组织内环境稳态和乳腺癌中的细胞通讯。他们在单细胞水平上系统性分析研究乳腺干细胞微环境(stem cell niche)中细胞通讯的机制和乳腺上皮組織内的异质性，进一步加深对早期肿瘤发生过程中系统性变化的理解；最终目的是开发用于早期检测的生物标记物以及改善乳腺癌的治疗策略。Dr. Kai kessenbrock团队在FVB小鼠取出小鼠乳腺组织，分别以美天旎MACSQuant Tyto细胞分选仪(MQ Tyto)与传统液滴式流式细胞分选(Droplet cell sorter)分离乳腺上皮细胞(CD49f+/EpCAM+)后，标记建库并进行单细胞测序；比较两种不同的流式细胞方法分选后，所获得的测序数据真实性与可靠性，也进行分选后的细胞培养，观察细胞存活与功能。小鼠乳腺上皮细胞分离与单细胞建库 (Data kindly provided by Quy Nguyen, UCI)1. MQ Tyto可有效分选出不同乳腺上皮细胞亞型（Luminal 1, Luminal 2, Basal-like subtypes），基因转录图谱完整呈现。聚类分析与差异基因热图展示2. 经由MQ Tyto分选，每个单细胞可捕获更多的mRNA数量(UMI)，获得更多可分析的基因数(Genes)；显示MQ Tyto保留了细胞的完整性。质控图3. 传统液滴式流式(Droplet cell sorter)细胞分选后细胞应激基因表现明显上调。这主要是来自于细胞分选操作过程中所受到的外力刺激，而非原始组织环境细胞的真实表现。应激基因表现量展示4. 细胞分选后，持续培养七天乳腺上皮细胞并形成乳腺球(mammosphere formation)进行计数。结果显示MQ Tyto组形成更多的乳腺球，表示其MQ Tyto分选后的上皮细胞维持其功能性与高存活率。综上，利用MQ Tyto对目的细胞进行分离与富集，作用温和不影响细胞生物功能完整性，维持细胞基因转录图谱表现，提高细胞存活率与回收率，开启单细胞测序成功的第一步。

p style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "2019年4月29日，在吉林长春国家光电国际创新园，一个小型会议正在召开，对媒体公布了一个好消息：2019年2月，中科院长春光机所李备团队研发的单细胞精准分选仪研制成功，这台分选仪也是目前世界上公开发布的第一款基于激光精准分选技术的商业化单细胞分离产品。该设备可实现对复杂生物样本中单细胞的精准分离，可实现高效、自动化单细胞分选，突破了我国单细胞研究与产业化应用瓶颈。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "与传统的流式细胞分选技术相比，该技术不对细胞进行任何“修饰”，即可实现精准分选，可最大程度保持细胞本来的状态；同时，对不同类型、尺寸的细胞具有良好的普适性，可应对各种性状的复杂生物样本，特别适用于微生物单细胞分选。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "strong自主研发，突破瓶颈，一跃进入世界先进行列 /strong/pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "单细胞精准分选仪是目前世界上公开发布的第一款基于激光精准分选技术的商业化单细胞分离产品。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "该设备可实现对复杂生物样本中单细胞的精准分离，具有无标记、非接触、准确率高、广泛适用等特点。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "其原理为：这项技术的原理为激光与特殊介质的相互作用，这个过程就好比让细胞安置在飞机的弹射座椅上，当锁定目标细胞后，就操作弹射座椅，将此细胞从群体中分离出来。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "利用这台仪器，与单细胞图像智能识别软件、自动化分选与收集装置相结合，可实现高效、自动化单细胞分选，突破了我国单细胞研究与产业化应用瓶颈。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "strong百步穿杨、隔空取物，看单细胞精准分选仪有何神功 /strong/pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "与当前应用最为广泛的流式细胞分选技术相比，单细胞精准分选技术有两项独门绝技：百步穿杨和隔空取物。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "百步穿杨：对于由成千上万个细胞组成的生物样本，流式细胞分选更擅长将其中尺寸较大（10微米以上）、类型相同的细胞分选出来，但对于尺寸几微米甚至更小的微生物细胞、或某个特定的目标细胞分选，流式细胞仪就显得有些力不从心了。而单细胞精准分选仪通过与显微成像系统配合，可对复杂生物样本中任一目标细胞进行分选，真正实现“精准分选”。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "隔空取物：流式细胞分选分选过程中，高流速容易对细胞造成损伤；而单细胞激光弹射技术在分选时，激光只作用于分选芯片的特殊材料上，目标细胞随材料一起被弹出，这种隔空取物的方式几乎对细胞没有损伤。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "凭着这两项绝技，单细胞精准分选仪可以实现对复杂环境样品中具有特殊功能的细胞进行分选、研究和培养，可能促进医疗、健康、制药、环境等领域产生重大突破。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "不仅如此，单细胞精准分选仪在成本价格上较流式细胞分选仪也有明显优势，更为重要的是它打破了国外厂商在细胞分选技术上的垄断，将使单细胞分选技术真正成为生命、医疗、环境等各领域科学家手中的利器。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "strong从3人到30余人 2年时间实现“第一”/strong /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "中科院长春光机所于2017年4月引进牛津大学李备博士，开始单细胞精准分选仪产业化研究，并于2018年初投资成立了长春长光辰英生物科学仪器有限公司。到现在，团队由最初3人到现在30余人，申请核心技术专利2项，成功研发出三代单细胞精准分选仪，为我国在成熟的单细胞分选技术以及商品化单细胞分选设备方面开创了新途径，为单细胞研究打下良好基础。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "随着单细胞研究已成国际科研热点，单细胞的产业化应用必将是未来精准医疗、生物制药、全民健康、环境资源等众多行业的发展方向。长春长光辰英生物科学仪器有限公司单细胞精准分选仪的研制成功，突破了我国单细胞研究与产业化应用最大瓶颈，为探索单细胞生命科学提供一个有效方法，为解密生命密码提供一个有力工具。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "strong“单细胞精准分选仪”会带来什么改变？/strong /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "这台单细胞精准分选仪也是目前全球首款公开发布的、基于激光精准分选技术的商业化单细胞分离产品，它具有适用性广、智能化高、分选精准、应用性强等特点，可广泛用于医疗、健康、制药、生物科技，环境等领域，并助力这些研究领域产生新的重大突破。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "在微生物技术领域，利用此项技术，可以在复杂的微生物样本中，解析、筛选具有特殊生物功能的微生物细胞，从而在农业固氮，海洋固碳，分解污染物等方向有望产生重大突破。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "在医疗领域，单细胞精准分选仪可快速定位并分离临床样本中的病原微生物，从而及时指导用药，为重症感染患者争取黄金治疗期，防止抗生素滥用。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "在生物制药领域，通过对具有特殊生理功能或代谢产物的微生物的快速、定向分选，大幅缩短制药菌制备周期、加速新药研发进程。 /pp style="text-indent: 2em text-align: justify margin-top: 10px "未来，单细胞激光精准分选技术将为微生物资源利用、疾病诊断、制药工程、健康管理等领域提供可靠的单细胞分选解决方案，推动单细胞研究领域快速发展，为生命科学打开一个全新世界。 /p

项目编号：BMCC-ZC22-0258项目名称：北京大学分选型流式细胞仪采购项目预算金额：210.0000000 万元（人民币）采购需求：包号名称数量预算金额是否接受进口产品01分选型流式细胞仪1套210万元是注：1.交货时间：自合同签订之日起90日内交货并安装调试完毕。2.交货地点：北京大学化学与分子工程学院。3.简要技术需求及用途：北京大学拟采购分选型流式细胞仪，用于对细胞样本进行精细分类分析，并分选出其中具备某一特征的目的细胞，进行培养和下游分析。广泛用于各个细胞研究领域。 合同履行期限：按招标文件要求。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：BIECC-22ZB1176/清设招第20221396号项目名称：清华大学多参数流式细胞分选仪购置项目预算金额：980.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：980.0000000 万元（人民币）采购需求：用于免疫学、干细胞，遗传学等研究。对细胞表面、内部分子包括抗原、核酸等进行检测与分析，并能够高速、高纯度分选混合样品中的指定细胞亚型，支持如96孔等多孔板分选。具体要求详见第四章。包号名 称数量01多参数流式细胞分选仪1套合同履行期限：合同签订后90日内交货。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：1639-224126090474/01项目名称：复旦大学分选型流式细胞仪预算金额：420.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：411.6000000 万元（人民币）采购需求：序号/ No.货物名称/Name of the goods数量/Quantity简要技术规格/Main Technical Data交货期/ Delivery schedule1分选型流式细胞仪预算金额:人民币420万元最高限价:人民币411.60万元1流式细胞分选仪主要用于复杂细胞样本中快速纯化出一种或几种目标细胞，在干细胞、免疫细胞、血液细胞、肿瘤细胞和其它所有低含量稀有细胞的高端研究中必不可少。合同签订后12个月内货到复旦大学。/ DPU Fudan University 12 months from official order合同履行期限：合同签订后12个月内货到复旦大学本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：JXTC2022041338-01项目名称：南昌大学第一附属医院采购可分选流式仪器项目采购方式：竞争性磋商预算金额：3000000.00 元最高限价：2800000.00采购需求：采购条目编号采购条目名称数量单位采购预算（人民币）技术需求或服务要求赣购2022B000776014可分选流式仪器1台3000000.00元详见公告附件合同履行期限：合同签订后3个月内本项目不接受联合体投标。

一、项目基本情况项目编号：HZ20220206-0136项目名称：中南大学高等研究中心分选型流式细胞仪采购项目预算金额：600.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：600.0000000 万元（人民币）采购需求：一、项目基本情况1、项目编号：HZ20220206-01362、采购代理编号：TJGJCS2022-2123、项目名称：中南大学高等研究中心分选型流式细胞仪采购项目（第二次）4、预算金额：600万元包号包名称是否核心产品分项项目名称（标的名称）技术要求 是否接受进口产品数量单位交货要求代理服务费收费标准时间地点1中南大学高等研究中心医学高端大型仪器设备公共平台分选型流式细胞仪（2台）采购是高端分选型流式细胞仪分选型流式细胞仪主机详见招标文件是1台合同生效后，从合同签订之日起 4个月以内，或延迟到甲方指定时间。中南大学湘雅医院教学科研楼甲方指定地点具体收费标准详见本项目“投标须知前附表”否数据处理系统及工作站是1套否彩色打印机否1台否主分析软件是1套否DNA分析软件是1套否数据采集软件（含液滴延迟校准系统及质控程序）是1套否喷嘴（包括70微米、85微米、100微米，130微米）是1套否随机耗材进样管是1000支否装机/培训试剂（含鞘液、清洗液、关机液、质控微球等）是1套否稳压电源（3kV，3小时以上）否1台是中端（智能型）分选型流式细胞仪分选型流式细胞仪主机是1台否数据处理系统及工作站是1套否激光打印机否1台否多功能主软件是1套否DNA分析软件是1套否随机耗材流式管是1000支否装机/培训试剂（含鞘液、清洗液、关机液、质控微球等）是1套否稳压电源（3kV，3小时以上）否1台5、采购需求：具体详见第五章采购需求6、采购项目需要落实的政府采购政策：①强制采购：采购需求中23英寸液晶显示器、34英寸液晶显示器、激光打印机属于《财政部 发展改革委关于印发节能产品政府采购品目清单的通知》（财库〔2019〕19号）中标注★的节能产品，实行强制采购。投标人应在投标文件中提供投标产品取得国家确定的认证机构出具的、处于有效期之内的节能产品认证证书复印件，否则其投标无效。②优先采购：采购需求中属于《财政部 发展改革委关于印发节能产品政府采购品目清单的通知》（财库〔2019〕19号）中未标注★的节能产品，以及《财政部生态环境部关于印发环境标志产品政府采购品目清单的通知》（财库〔2019〕18号）中的环境标志产品，实行优先采购。③价格评审优惠：政府采购促进中小企业发展（包括政府采购支持监狱企业发展、政府采购促进残疾人就业）。7、本采购项目接受进口产品投标。8、采购方式：公开招标。9、合同履行期限：具体内容详见招标文件第五章“采购需求”。二、投标人的资格要求1、投标人的基本资格条件：投标人必须是在中华人民共和国境内注册登记的法人、其他组织或者自然人，且应当符合《政府采购法》第二十二条第一款的规定，即：（1）具有独立承担民事责任的能力；（2）具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；（3）具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；（4）有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；（5）参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；（6）法律、行政法规规定的其他条件。2、单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人，不得参加同一合同项下的政府采购活动。3、为本采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的，不得再参加此项目的其他招标采购活动。4、列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单，列入政府采购严重违法失信行为记录名单的，拒绝其参与政府采购活动。5、联合体投标。本次招标不接受联合体投标。6、本项目的特定资格要求：无。三、获取招标文件的时间、期限、地点、方式及招标文件售价1、时间：2022年9月15日至2022年9月22日，每天上午8:30至12:00，下午14:00至17:00（北京时间，双休及法定节假日除外）。2、地点：天鉴国际工程管理有限公司（地址：长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦4楼401室）。3、方式：持法定代表人身份证明原件或授权委托书原件（附法定代表人身份证明原件）、个人身份证原件、投标人营业执照副本复印件购买招标文件。4、售价：招标文件每份人民币400元，售后不退。四、投标截止时间、开标时间及地点1、提交投标文件的截止时间：2022年10月9日09时30分（北京时间）2、投标地点：天鉴国际工程管理有限公司开标室（长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦6楼606室）。3、开标时间：2022年10月9日09时30分（北京时间）4、开标地点：天鉴国际工程管理有限公司开标室（长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦6楼606室）。5、其他要求：逾期送达的或者未送达指定地点的投标文件将拒绝接收。届时请投标人的法定代表人或其委托代理人出席开标仪式，未购买招标文件的单位不得参加投标。五、公告期限1、本次招标公告同时在中国政府采购网（http://www.ccgp.gov.cn/）、中南大学校园网（http://tz.its.csu.edu.cn/）、中南大学采购与招标管理中心网（http://czzx.csu.edu.cn/）发布。公告期限从本招标公告发布之日起5个工作日。2、在其他媒体发布的招标公告，公告内容以本招标公告指定媒体发布的公告为准；公告期限自本招标公告指定媒体最先发布公告之日起算。六、疑问及质疑1、投标人对政府采购活动事项如有疑问的，可以向采购人、采购代理机构提出询问。采购人、采购代理机构将在3个工作日内作出答复。2、潜在投标人认为招标文件或招标公告使自己的合法权益受到损害的，可以在收到招标文件之日或招标公告期限届满之日起7个工作日内，按《湖南省财政厅关于印发＜政府采购质疑答复和投诉处理操作规程＞的通知》(湘财购〔2019〕20号)规定，以书面形式一次性向采购人、采购代理机构提出质疑。七、其他补充事宜1、采购代理机构银行财务信息（1）投标保证金：人民币壹拾贰万元整（￥120000.00元）帐户名称：天鉴国际工程管理有限公司政府采购保证金专户账 号：66130 1551 0000 0207开户银行：浦发银行长沙雨花支行缴纳时间：投标截止时间前一个工作日的16:00整前转入投标保证金的托管账户管理，以到账为准。未按时足额缴纳保证金的，其投标文件将被拒绝。备注：须在进账单“款项来源”栏注明项目名称或简称。（2）购招标文件款、招标代理服务费开户名称：天鉴国际工程管理有限公司开户行：招商银行长沙韶山路支行银行账号：731903134510866财务部联系人、电话财务部联系人：/财务电话：/2、疫情注意事项：项目报名及开评标期间，为做好新型冠状病毒感染肺炎疫情防控工作，防止交叉感染，本次开评标将采取全部人员防护上岗措施，并在开评标场所入口处进行体温检测和人员信息登记。温馨提示：（1）为避免交叉感染，本项目各供应商委派授权委托人最多1人携身份证原件及其他资料参加报名和开标会议。参加开标的投标人代表应确保开标当日居民健康码为绿色,方可参加投标活动。（2）请各供应商人员必须佩戴口罩，尽量提前到达开标现场，并积极配合工作人员进行现场体温检测并进行健康信息登记。（3）进入开标活动现场的人员应无感冒、发烧、咳嗽等症状，并按疫情防护要求做好有效防护措施。（4）近一个月内有与新冠肺炎病人有接触史的，必须向代理服务机构特别申报。如不申报，将负法律责任。八、对本次招标提出询问，请按以下方式联系1、采购人信息名 称：中南大学地 址：湖南省长沙市麓山南路932号，中南大学采购与招标管理中心联系人：张老师联系方式：0731-888369372、招标代理机构信息名 称：天鉴国际工程管理有限公司地 址：长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦联系人：刘展、李瑜、朱楠卿联系方式：0731-85713091-8423、139756800673、项目联系方式项目申购单位：中南大学高等研究中心项目联系人：周老师联系方式：18890386893合同履行期限：具体内容详见招标文件第五章“采购需求”。本项目( 不接受 )联合体投标。二、申请人的资格要求：1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：/3.本项目的特定资格要求：/三、获取招标文件时间：2022年09月15日 至 2022年09月22日，每天上午9:00至12:00，下午14:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：天鉴国际工程管理有限公司（地址：长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦4楼401室）方式：持法定代表人身份证明原件或授权委托书原件（附法定代表人身份证明原件）、个人身份证原件、投标人营业执照副本复印件购买招标文件。售价：￥400.0 元，本公告包含的招标文件售价总和四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间：2022年10月09日 09点30分（北京时间）开标时间：2022年10月09日 09点30分（北京时间）地点：天鉴国际工程管理有限公司开标室（长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦6楼606室）五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名 称：中南大学     地址：湖南省长沙市麓山南路932号，中南大学采购与招标管理中心        联系方式：张老师 0731-88836937      2.采购代理机构信息名 称：天鉴国际工程管理有限公司            地 址：长沙市雨花区金海路128号天鉴大厦            联系方式：刘展、李瑜、朱楠卿 0731-85713091-8423、139756800673.项目联系方式项目联系人：周老师电 话：  18890386893

项目编号：SZDL2022001936（0868-2242ZD784H）项目名称：分选流式细胞仪预算金额：280.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：280.0000000 万元（人民币）采购需求：分选流式细胞仪 1项。合同履行期限：：合同签订后 90 个日历日内交货，产品的附件、备品备件及专用工具、技术文件和资料等应随产品一同交付。本项目( 不接受 )联合体投标。

10月23日，赛默飞在一年一度的免疫学大会上发布了一款全光谱流式细胞分选仪——Bigfoot，这是全球第一台全光谱、超高速、高性能的细胞分选仪，是免疫学研究和生物医药开发领域的强有力工具。Bigfoot的强大优势体现在以下几方面：● 配置高达9激光60参数，可进行超多色流式方案的光谱分析和分选。● 采用专利的FPGA光谱拆分元件，可进行实时光谱分析和分选，每秒钟可对50万细胞进行全光谱实时拆分且电子丢失率为零；并且全光谱拆分和传统补偿调节2种模式可供选择。● 高速度、纯度、活性的光谱分选：分析速度高达100,000个事件/秒，分选速度高达70,000 个事件/秒。空气激发分选模式，避免液流剪切力；独有的“电荷中和式”分选方式，分选过程中反转电极及电荷，防止分选收集管中电荷累积，最大程度保证分选细胞的活性及纯度。● 强大的分选性能及灵活的分选模式。虚拟18路分选，分选收集管可以是1.5ml、5ml、15ml和50ml离心管，96孔、384孔或1536孔板，玻片或10×基因芯片。分选一块96孔板只需8秒；分选一块384孔板只需不到11秒。 ● 整合式II级生物安全柜和气溶胶管理系统，既能保证样本的安全性、细胞的分选效率，还能保证实验人员的安全防护。● 智能型全自动仪器校准及质控，操作极其简单和人性化。一键式或定时开机后自动进行质控、液流聚焦和液滴延迟计算。

课程主题：【小贝开讲】人人都是流式高手-分选应用课程时间：2021-4-7 14:00课程简介：流式细胞分选技术具有多参数、高精度、高速高通量的特点，并且可在分析的同时把具有指定特征的细胞进行高纯度、高活性的分选，因此在生命科学及临床医学等多个领域有着广泛的应用。然而，传统分选系统难以同时兼顾智能化操作和高活性分选的需求，在一定程度上制约了流式分选的应用。本次Webinar主要向大家介绍流式分选技术在各个领域的应用，并为大家带来全新的CytoFLEX SRT智能流式分选系统，在实现智能化操作的同时确保了高活性分选，真正实现：流式分选，从未如此简单，进而促进流式分选的应用发展。张毅 贝克曼库尔特生命科学理学博士，毕业于中山大学生命科学学院，有十余年流式细胞仪操作及支持经验，熟悉肿瘤免疫、细胞生物学相关前沿进展，擅长流式分析及分选、多色方案设计。

p　　我国水果种植面积稳居世界前列，水果分选市场广阔，根据2018年国家统计年鉴的相关信息，以苹果、柑桔、梨和柚子四种水果为例，水果分选机的装备需求已达8000多台，市场规模可达60多亿元。/pp　　长期以来，国内水果分选处理水平不足，人工分选工作效率低，劳动强度大 传统机械式分选，水果外部品质易受损，内部品质无法监测分类，生产效率不高，难以实现精准和无损化。而且这类机械分选设备功能单一，只能按水果的大小或重量进行分选，缺乏水果内部品质分选技术。高品质水果分选设备多数依赖进口，价格高昂，并且分选模型也不完全适宜我国本土水果。/pp　　相较于国内，国外在水果分选仪器及应用方面已经走在了前端，特别是在日本、新西兰、澳大利亚等国家已经拥有了很多成功案例。其中，1989年，日本三井金属矿业株式会社EI推进事业部在冈山县一宫农协推出了世界上第一台桃果实糖度在线漫反射无损检测分选设备。之后，多家单位相继研制出类似设备，继而在日本大面积推广 2015年以来，NIRS在新西兰的猕猴桃包装线上进行了商业应用。新西兰猕猴桃出口商以最低DM作为口感标准(MTS)，并应用NIRS分选设备挑选超过MTS标准的猕猴桃用于出口。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 300px height: 225px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/c9febbd7-d5b5-47d8-8ea1-8e37943359d1.jpg" title="新西兰.jpg" alt="新西兰.jpg" width="300" height="225" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center "strong新西兰猕猴桃NIRS在线分选/strong/pp　　随着我国对水果品质要求的提升，传统的水果分选设备以及人工分选方式已经不能适合社会发展的需要，亟待发展高通量检测、快速无损的水果分选设备。鉴于此，华东交通大学光机电技术及应用研究所历经十年技术攻关，研制出了具有自主知识产权的水果动态在线分选装备，不但可实现水果的糖度、酸度、重量、内部缺陷等指标同时检测，还能够实现自动上下料、自动包装、分选级别可调节等功能，设备分选精度高达90%以上，其中糖度检测误差小于0.5° Brix，酸度误差低于0.15%，整体技术水平已达到国际先进水平。据团队首席专家刘燕德教授介绍，该团队已拥有四代水果动态在线分选装备及三代便携式水果检测技术，其中第四代分选装备新增了机械手臂，在提高上料速度的同时还能降低损果率，并通过在上料的果杯中安装质量传感器，提高分选效率和检测精度。/pp　　近红外光谱技术(NIRS)具有快速、无损检测等优点，是最佳的实用性水果品质检测技术。经近30年发展，NIRS逐步由实验室走向采后分选、现场抽检等应用，并逐步发展成水果采后提质的主流技术手段。从2002年开始，刘燕德教授课题组围绕水果的内部品质快速无损在线检测和水果的成熟度便携式仪器开展了一系列的研发工作：采用近红外漫透射在线检测技术，解决了业界困扰多年的水果内部成分分布不均匀、检测精度低等问题，可检测厚皮金柚，打破了国内水果分选只能依赖国外进口设备的僵局 针对水果大小、重量、糖酸度、内部缺陷的检测，该团队所建立的多指标同步检测通用模型已有百万级数据，可根据水果形状大小、果皮厚度、有无果核随时调整模型，调节光源透射性，可以对苹果、梨、脐橙、桃子、柚子等10余种水果进行科学检测分级 运用动态高速分选协同控制和动态校准技术，可实现水果在高速运动的同时进行检测，将光源稳定性误差控制在0.5%以内，水果分选速度达到5-8个/秒。/pp　　特别值得一提的是，该团队拥有完全自主知识产权的“水果内部品质快速无损检测与分选装备”现已在江西赣南脐橙、上饶马家柚、山东苹果、河北鸭梨、重庆柑桔、广东梅州金柚等水果主产区推广应用，示范面积达4万亩，培训技术人员100余人，培训果农1200余人，举办现场演示会5次，累计示范智能农机与光电分选装备20余套，拥有江西定南、吉安、万安等地建立果园智能化管理与装备示范基地，显著增强了区域特色农产品的产业化水平和市场竞争力。/pp　　strong部分使用场景如下(图片会直接链接视频)：/strong/ppstrong　　1.赣南脐橙分选设备/strong/pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=61316FECF7F5A3C69C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=350&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptp　　脐橙新装备：针对脐橙果皮厚、透光性低等问题，研发了基于漫透射原理的脐橙糖度分选机 (10吨/小时)。速度5-8个/秒，检测精度90%，检测指标：糖度。/pp　　应用地点：江西赣州市定南县/ppstrong　　2.河北鸭梨分选装备/strong/pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=A16B0494495585129C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=350&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptp　　鸭梨分选装备：针对梨等易损失、黑心等问题，研发了基于漫透射原理的鸭梨糖度、内部缺陷分选机(10吨/小时)。速度5-8个/秒，检测精度90%，检测指标：糖度、重量、黑心。从重量达标的优质果中选择糖度12度以上的高档果。/pp　　应用地点：河北泊头/ppstrong　　3.井冈蜜柚分选装备/strong/pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=6C999C8A14670B929C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=350&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptp　　速度3个/秒，检测精度90%以上(16吨/小时)，检测精度± 1° Brix。/pp　　应用地点：井冈山国家科技园/ppstrong　　4. 苹果分选装备/strong/pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=20FE0571EDFB06B49C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=350&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptp　　针对苹果各向异性、阴阳面糖度差异大等问题，研发了基于漫透射原理的苹果糖度分选机(10吨/小时)。速度5-8个/秒，检测精度90%以上。/pp　　应用地点：山东盛全、绿景果业公司/pp　strong　5.上饶马家柚分选装备/strong/pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=7AEAF94AB8646A549C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=350&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptp　　速度3个/秒，检测精度90%以上(16吨/小时)，检测精度± 1° Brix。/pp　　应用地点：江西省东篱柚业科技有限公司/p

项目编号：0701-224106030367项目名称：北京大学第一医院手术室资源调度与协同优化建设项目分选式流式细胞仪预算金额：250.0000000 万元（人民币）采购需求：包号品目号品目名称数量（台/套）是否接受进口产品预算金额（人民币万元）备注11-1分选式流式细胞仪1是250单一产品采购包备注：本项目采购标的对应的《中小企业划型标准规定》所属行业为：工业合同履行期限：详见各包第三章技术需求。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：TXD22603项目名称：重大疾病及药物研发平台建设—分选型流式细胞仪（进口）（贴息贷款）预算金额：400.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：400.0000000 万元（人民币）采购需求：采购分选型流式细胞仪合同履行期限：合同签订后【如中标产品为进口产品，须收到100%信用证（L/C）】90个工作日内本项目( 不接受 )联合体投标。

会议日程&点击报名：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/icfcm2023/仪器信息网讯 10月9日，专注于全光谱分析技术和全自动分选技术的Sony生命科学全球重磅发布新一代旗舰级超高参数的全光谱智能化流式细胞分选仪Sony FP7000，完美融合了全光谱多色优势和智能化分选设置，实现强大的分析分选性能。这是继2020年发布ID7000超高参数全光谱流式细胞分析仪之后Sony生命科学的又一力作！不断为生命科学、医学等领域提供更高层次、更广泛的技术支撑，进一步扩展流式技术所能达到的边界，助力深入、前沿的科学探索。分析能力：搭配最多6根激光器、182个荧光检测通道，轻松实现44色以上超高参数应用，专利的光谱解析算法，无需复杂补偿调节。VSSC信号将小颗粒检测能力提升至100nm。兼容多种类型样本，染料全覆盖，多色实现更容易。分选设置和能力：专利的CoreFinder™算法自动化光路、液路校准和各参数设置，结果更客观、准确。1-6路管式分选和6-384孔板/PCR板分选，支持单克隆分选和Index sorting功能。让复杂实验变得更高效、更轻松。分选功能：70/100/130um3种不同尺寸的喷嘴类型，满足不同细胞类型和高活性分选需求。可解析多个自发荧光，减低干扰，提高弱信号分辨率，分选目标识别更准确。高达100kHz振荡频率，进样仓和分选仓内置温控，保障长时间高活性细胞分选效果。高质量完成高纯度、高得率和高活性分选任务。其他特色功能：极其灵活的上样和收集方式：支持0.5-15ml样本管上样；1.5-50ml不同类型样本管，6-384孔板和PCR板各种类型孔板作为分选收集装置。极高的荧光灵敏度：PE≤6 MESF、APC≤10 MESF。实验设置和模板与Sony ID7000超高参数全光谱流式细胞分析仪无缝衔接，用户可在ID7000分析仪和FP7000分选仪上灵活共用实验方案。全光谱分析技术和全自动分选技术在Sony FP7000上的完美融合，提供前所未有的使用体验，极大地拓展了流式应用领域，单管44C以上的同时检测，多种自发荧光的解析，可以对样本更深入更精准地分析。智能化的分选设置，灵活高速的分选功能，能够对靶细胞进行高效高精度筛选。Sony FP7000实现了简单操作（无需补偿，自动校准）和超高性能（44C以上分析能力，6路和各种规格孔板分选）的完美结合。*参数配置并非最终产品形态，敬请关注索尼生命科学官网和公众号后续内容。*RUO产品，不用于临床诊断或治疗等目的。

为了满足考察自然界中细胞“原位功能”这一共性科学需求，“现场”、“实时”的单细胞分选与测序已成为生命科学装备研制领域的一个重要发展趋势。尽管第三代测序技术已实现仪器微型化，但与测序对接的单细胞精准分选装备却仍然相当笨重和昂贵，难以支撑各种科学考察中针对微生物组功能的现场分析。最近，中国科学院青岛生物能源与过程研究所单细胞研究中心研究员马波带领的微流控系统团队，通过设计简易高效的单细胞分选与测序对接装置，实现了每个试管有且只有一个细胞(One-Cell-One-Tube)，有望服务于“现场”、“实时”乃至“便携式”的单细胞分选与测序。　　与人体和高等动植物细胞相比，微生物细胞通常更小(0.1-10 微米)，更加难于精准操纵，因此分离获取目标单细胞、并且实现测序反应要求的“One-Cell-One-Tube”是一个关键难点。目前的自动单细胞分离方法大多依赖于昂贵且体积庞大的荧光流式细胞分选仪(FACS)，而现有的手动单细胞分离和测序方案在依赖于操作人员熟练程度的同时，同样需要显微单细胞移液平台、激光光镊等同样难以随身携带的大中型仪器。此外，单细胞分选及核酸制备过程极易受到环境中飘浮微生物及其DNA的污染，而且这种污染通常难以在测序数据处理环节完全去除。因此，尽管目前MinION等第三代测序仪已经实现了便携化，微生物单细胞分选和测序仍然操作繁琐、污染干扰严重，难以满足要求。　　针对上述挑战，青岛能源所单细胞中心张强和王婷婷等发明了一种名为“FOCOT”(Facile One-Cell-One-Tube的缩写)的方法，能够精确、高速、低成本地分离、获取与分装单个微生物细胞，从而与单细胞测序直接对接。该方法具体为：首先，通过微流控技术，将细胞分散包裹在数十微米直径的油包水微液滴中 其次，基于液滴显微光学成像识别技术，分选出单细胞包裹液滴 第三，将单细胞包裹液滴顺序分布于系列试管中，从而快速实现单个细胞的分离，以及每个试管有且只有一个细胞，以实现与单细胞全基因组扩增与测序的直接对接。　　FOCOT平台主要有三个特色。第一，在简易方便方面，FOCOT平台除自行设计的芯片之外，仅需要电磁阀、平板电脑和普通光学显微镜，不需外接任何高成本商品化仪器平台，具有易获取、易替换、低成本等优势。同时，模块化、小型化、操作简便的设计使得该装置适合在自然环境实地采样条件下的携带、装配和使用，也几乎不需要额外的人员培训和技术维护，因此尤其适用于面向各种极端自然环境的科学考察，也有利于在普通实验室的推广应用。第二，在分选高效方面，FOCOT平台通过显微镜下对包裹有单个细胞的液滴的准确识别和分选，能有效避免假阳性 而且其20秒/个的分选速度，与显微单细胞移液、激光光镊等现有的商品化分选装备相比具有明显优势。同时，单细胞获取率高于90%，培养成功比例至少80%，证明该方法能有效避免芯片表面吸附所导致的输运过程中细胞流失，而且对细胞活性没有或较小损伤。第三，在污染控制方面，FOCOT平台涉及部件少，体积小型化，相对封闭，因此在实验过程中能够方便地实现超洁净环境空间控制、芯片消毒等操作，严格控制环境DNA的污染。对分离获取的单个酵母细胞进行全基因组扩增与测序后结果显示，99%的有效序列可以与参考基因组匹配，表明该方法能有效避免环境中微生物带来的DNA污染，平均基因组覆盖率达到43.3%，与在昂贵的超净空间设施中采用FACS等大型仪器系统分离获取单细胞所获得的测序结果相当。　　目前，通过耦合FOCOT与中心前期开发的单细胞拉曼成像、拉曼流式细胞分选等技术，单细胞中心正在构建一个服务于岸基、船基乃至手基等不同需求的非标记式单细胞分析装备体系，以服务于能源、环境、健康、海洋、土壤等诸多微生物组应用领域。　　相关研究论文发表在《科学报告》上。研究工作由单细胞中心马波和徐健共同主持完成，获得了国家基金委科学仪器基础研究专项、面上项目和中科院生物高通量分析技术服务网络(STS)等项目的支持。　　论文信息：Development of a facile droplet-based single-cell isolation platform for cultivation and genomic analysis in microorganisms. Sci Rep, 7:41192, DOI: 10.1038/srep41192。FOCOT方法示意图

p　　第十一届全国免疫学学术大会上，BD中国隆重宣布，最新款细胞分选仪BD FACSMelody?系统和BD科研试剂网上商城正式上市。这是国内第一个零基础入门的流式细胞分选仪和提供全面科研服务的科研试剂商城。两项突破性的举措，标志着BD中国引领生物科学进入了智能化的全新时代。/pp　　这也是BD根植中国，始终提供创新的技术与世界一流的高性能仪器，致力于推动中国流式细胞技术水平与国际接轨，引领世界健康的又一力证。br//pp style="text-align: center "　　strong突破性零基础操作 智能化让科研更简单/strong/pp　　第十一届全国免疫学学术大会上，BD中国隆重宣布，最新款细胞分选仪BD FACSMelody系统和BD科研试剂网上商城正式上市。这是国内第一个零基础入门的流式细胞分选仪和提供全面科研服务的科研试剂商城。“全智能化设计，零流式基础者也可在2小时内学会分选”是此次上市的BD FACSMelody最大亮点。彻底终结流式细胞分选仪操作高门槛的历史。而以往的细胞分选仪，操作人员的培训时间至少为5天。/pp　　“作为细胞分析行业的领先者，BD致力于通过为广大研究者提供优质、高性能的细胞分析和分选工具，促进科学研究的进展。自1994年进入中国市场以来，持续培训了无数专业流式细胞实验操作人员，助力中国生物科技事业的可持续发展。”BD大中华区生物科学业务总监吕雯先生说到。/pp　　虽然流式细胞分选技术已成为最先进的细胞定量分析技术，但此前上市的各个型号的流式细胞分选仪，却为科研人员设置了一个“高门槛”。/pp　　“在性能上有更大突破、在使用流程上更加简化的流式细胞仪，正是科研工作者所期望的。” 暨南大学生物医学转化研究院院长尹芝南教授认为，“这样的智能化设备将会在更多领域得到更广泛的应用。”/pp　　中科院巴斯德研究所张晓明研究员表示，过去需要花费大量时间对大型流式分选仪的操作人员进行培训，需要专人负责仪器操作，这一直是流式细胞分选应用的一个瓶颈。而智能化的BD FACSMelody流式细胞分选仪推出之后，这一问题将得到很大程度的改善。/pp　　“如果一台分选仪能免去复杂的仪器调试，科研人员就能把更多的时间用于实验和数据分析本身，而这样的智能化机器也就会有更广阔的应用前景。”清华大学祁海教授说到。/pp　　事实上，在流式细胞仪领域，BD中国一直致力于大力度的创新与优化，并在各地推广BD流式学院，助力培养中国流式细胞技术专业人员，通过持续提升研发创新能力，为科研工作者带来更高效、更便捷的使用体验，同时全方位提升用户感受。“我们期待FACSMelody?能像BD五年前发布的Accuri? C6个人流式细胞分析仪那样开创一个新时代，因其简便易操作等特性而走入中国每一个普通实验室。”BD中国生物科学市场经理张磊表示。/pp style="text-align: center "　　strong全方位服务平台 互联网让科研更灵活/strong/pp　　创新3.0时代，人们对于互联网的依赖度越来越高，“互联网+”理念所搭建的广阔平台，让互联网与传统行业进行深度融合，创造新的发展生态。/pp　　全新上线的BD科研试剂网上商城，便是“互联网+”时代的全面创新。作为一种全新的运营模式，BD科研试剂网上商城包含了丰富的产品信息、实验数据及应用，更有配色工具帮助用户便捷地确定实验方案。付款流程保持线下原有模式，先订购，后付款，最大程度配合及支持科研工作者的日常工作。与此同时，科研人员可以通过客户端查询所需商品的库存情况，了解商品到达的大致时间，随时调整实验进程。网上商城通过仓储直发的形式，将过往现货一周左右的送货周期，缩短到三天左右。通过这个网络平台，科研人员将获得最便捷、高效的一站式购买体验，这将为提高其工作效率带来极大帮助。/pp　　第二军医大学附属长征医院转化医学中心主任鲍嫣博士表示，对于一线科研工作者来说，在网上购买科研试剂是一种突破，随时随地可以查询实时库存，下单，且货期缩短 3 天以上，使科研工作者能更合理有效地管理实验进程从而大大提升实验效率。/pp　　“未来，BD科研试剂网上商城将力图打造成生物科学领域的全方位服务电子平台，其不只局限于商品购买，还能提供科研人员所需的任何文献数据和相关培训服务与支持，全方位为中国生命科学领域的客户提供服务，实现BD一直以来对中国的承诺。” BD大中华区生物科学业务总监吕雯先生表示。/p

仪器信息网讯 6月7日，Cytek Biosciences宣布推出全新的台式高维细胞分选仪- Cytek Aurora CS。全新台式流式细胞分选仪发布，实现超高分辨细胞分析Cytek Aurora CS流式细胞分选系统据了解，该流式细胞分选仪采用Cytek独特的全光谱分析技术（Full Spectrum Profiling, FSP™ ），Aurora CS可在单细胞水平提供超高分辨率的数据结果，帮助科学家和研究人员将复杂实验简单化，轻松解决最具挑战性的细胞分析，如高自发荧光的细胞分析、或关键生物标志物表达水平低的细胞分析等。使用Aurora CS，研究人员可以从微孔板或试管中轻松分选活细胞或其他颗粒，用于下游分析实验，如单细胞RNA测序、蛋白质组学和细胞生物学研究等。Cytek于2017年首次推出了其旗舰级产品-Aurora流式细胞分析系统，Aurora系统利用突破性的Cytek FSP™ 技术，采集来自多个激光器激发的荧光素全光谱信号，轻松分辩单细胞上的多种荧光标记，显著提高了高参数细胞分析的灵敏度，极好的解决了流式检测受技术局限的问题。Aurora CS基于同样的FSP™ 技术，保持了与Aurora一致的优秀特性和强大功能。独特的光学设计和解析方法能让使用者体会到更高的灵活性， 不仅可广泛选择大量新的荧光染料，且无需为每个应用重新设置仪器。先进的光学系统和低噪音电子系统，带来超强灵敏度和卓越分辨率的细胞分析体验，包括分析那些高自发荧光或关键生物标志物表达水平低的细胞。Cytek Aurora分析系统和Aurora CS分选系统，利用Cytek独有的FSP™ 技术，可以检测标记在每个细胞上的多种荧光探针的全光谱信号，在单管样本中，即可完成高度复杂方案（40色方案）的分析和分选，使科学家们能够更深入更完整的了解生物系统。结合FSP™ 技术和高端分选特性，Aurora CS为研究人员提供了一个可应用于多种生物学场景和分选条件的解决方案。搭配SpectroFlo CS软件，在更短的设置时间下，即可轻松实现6路分选、自定义分选、自动液滴延迟和分选液流监控等操作，满足各种科学研究与应用的需求。网络会议预告 点击报名参会

项目编号：B0708-CMC22N7625项目名称：北京大学第一医院科研平台建设项目流式细胞分选仪采购项目预算金额：428.0000000 万元（人民币）采购需求：设备名称数量简要技术要求合同履行期限备注流式细胞分选仪1套用于多种类型常见及稀有细胞分离，纯化或富集培养、单克隆细胞分选和细胞成分分选合同签订后90天内可采购进口产品注解：投标人必须对要求的所有货物和服务给予报价，不允许拆分投标。投标文件正、副本必须分开装订成册。用途：科研合同履行期限：详见采购需求本项目( 不接受 )联合体投标。

日前，青岛能源所单细胞中心在Science Advances上发表最新研究成果：发明了基于介电单细胞捕获/释放的拉曼激活液滴分选技术pDEP-RADS，并研制成功国内外首台高通量流式拉曼分选仪产品样机FlowRACS。利用FlowRACS，首次示范了基于分子光谱、非标记式、单细胞精度、高通量流式的酶活筛选，为酶资源的探测和挖掘开辟了一个全新的技术路线。　　单个细胞是生命活动的基本单元，也是生物进化的基本单位。因此单细胞技术正在推动生命起源、细胞功能异质性机制、生命暗物质挖掘与利用等领域的一系列重大突破。单细胞拉曼光谱(SCRS)能非标记、非侵入性、无损、全景式地揭示细胞代谢状态，因此基于拉曼光谱的单细胞分选(Raman-Activated Cell Sorting，RACS)，在单细胞技术体系中有着广阔的应用前景(Biotechnol Adv，2019)。但是，拉曼谱图采集时间长、分选通量低等问题，限制了RACS的广泛应用。本次发表的研究工作就针对这些问题给出了新的思路和方法。　　相关阅读：单细胞拉曼分选仪(RACS)：探索微观世界的利器开发首台高通量流式拉曼分选仪FlowRACS，服务高通量酶筛选　　一个微生物细胞的体积通常只有一个人体细胞的千分之一。在高速液流中，针对这么微小的细胞，如何精确捕获、采集高质量全谱拉曼并实现高通量分选，一直是业界的重点和难点。针对上述问题，青岛能源所单细胞中心王喜先、辛一、任立辉等带领的研究小组发明了“介电单细胞捕获/释放拉曼激活液滴分选技术”pDEP-RADS(Positive dielectrophoresis based Raman-activated droplet sorting 图1)。通过周期性施加介电场，确保高速流动的单细胞被精确捕获在拉曼激光位点，以允许高质量拉曼谱图的采集 进而单细胞经液滴包裹，借助介电实现目标单细胞微液滴的高通量分选。图1 单细胞中心研制的pDEP-RADS技术及仪器系统　　在此关键技术突破的基础上，研究人员研制成功首台高通量流式拉曼分选仪FlowRACS。研究人员采用低拉曼背景石英玻璃为微流控芯片基材，以提高表型检测的普适性 以氧化铟锡(而非金属)加工电极阵列，以避免光热损伤 采用先拉曼检测后液滴包裹、液滴产生和分选同步进行的策略，避免了液滴对拉曼信号采集的影响，从而提高检测准确率并简化系统操作 最后通过自主开发的QSpec软件，实现了平台的自动化运行。　　新陈代谢是一切生命活动的基础,而新陈代谢离不开酶的催化作用。因此，酶是最主要的生物资源之一，也是生物技术产业的重要载体。例如，甘油三酯(TAG)是人体、动物和植物中油脂的主要成分，它具有极高的能量存储密度，而且在几乎所有细胞中都存在，因此是自然界的“能量存储货币”。细胞中TAG生物合成的最后一步和限速步骤，是二酰基甘油酰基转移酶(DGATs)。自然界中DGATs的功能极其多样，其活性不仅调控TAG产物的合成效率，还控制着其饱和度、碳链长度等 这些理化性质决定了TAG的用途和经济价值，例如是适合做营养品还是生物燃油。因此，作为油脂分子设计的关键工具，DGATs 的挖掘和筛选具有重大的科学意义和应用价值。　　但是，传统的DGATs筛选方法通常包括候选酶基因在底盘细胞中的表达、细胞扩增培养以积累足够生物质、从生物质中提取并通过薄层层析法分离TAG产物、用气相和液相质谱来分析和定量TAG中组分等繁杂步骤。这一流程通常需要一周时间，既耗时耗力，而且难以分析生长缓慢或尚难培养的细胞。业界也尝试用尼罗红等荧光染料来标记细胞中油脂，然后通过流式细胞荧光分选仪(FACS)分选细胞，但是荧光染料特异性低、难以定量分析、细胞壁对染料的通透性低或不可控、油脂饱和度无法表征等瓶颈问题仍然没有解决。　　针对这些瓶颈问题，单细胞中心“另辟蹊径”，提出了利用以拉曼为代表的分子光谱来筛选酶促反应活性的新思路。利用FlowRACS，单细胞中心首次在单个微生物细胞精度，实现了二酰基甘油酰基转移酶(在人体、动物和植物中催化油脂的合成)体内活性的非标记式、高通量、高准确率、无损分选。针对来源于微拟球藻的候选DGAT基因库，仅通过为时仅10分钟的FlowRACS运行，就成功获得3个已报道的强效基因和2个从未报道过的弱效基因。而前期基于传统方法对这3个强功能基因的筛选和表征，历时长达数月时间。　　与基于生物质提取和质谱分析的胞内油脂分析方法相比，FlowRACS的筛选时间、试剂耗材和人工成本仅为其百分之一，大大提高了酶的筛选效率。与FACS相比，FlowRACS不再需要针对酶的底物或产物进行荧光标记，可同时定量表征油脂含量和饱和度等多种关键的酶活指标，而且具有更高的检测灵敏度和更宽的动态范围。此外，能够荧光标记的底盘细胞很有限，而FlowRACS适用于任何细胞，这一特色对于从菌群等尚难培养微生物中直接挖掘酶和细胞工厂等生物资源来说，具有特别重要的意义。突破国产科学仪器产业化瓶颈，推动原创高端生命科学仪器产业发展　　近年来，在科研人员的努力与国家政策的支持下，我国高端科学仪器研制取得了积极的进展，但是仅仅是“追赶”和“并行”的发展方式并不能够从根本上扭转高端仪器依赖进口的现状。放眼中国各大科研院所、高校和企业研发中心的实验室，进口仪器、尤其是高端进口仪器仍然占据着数量与经费的绝对优势。一旦遭遇国外的技术封锁，我国的科学研究将遭遇无源之水、无米之炊的窘境，科技发展将面临前所未有的困局。　　然而，科学仪器产业却是我国科技链条的最短板之一。全球科学仪器公司20强中，国产仪器公司无一上榜。2019年美国仪器行业巨头赛默飞、丹纳赫、安捷伦的全年收入分别达到255.4亿美元、179.1亿美元和51.6亿美元，而排名最靠前的国产仪器厂商同期营业收入仅仅为7.34亿美元。与此同时，2020年全球单细胞分析市场规模估计为26.8亿美元，预计在2019至2026年以16.9%的年复合增长率增长，国内市场规模预计35亿人民币。强大的市场需求以及市场占有率狭小的局面，对国产单细胞分析仪器的研制和产业化提出了巨大的挑战，同时也带来了前所未有的机遇。　　基于pDEP-RADS技术，单细胞中心推出了国内外首台全谱分选通量达到600个细胞/分钟的高通量流式拉曼分选仪产品样机FlowRACS。FlowRACS具有完全自主的知识产权，已于今年6月份完成了现场技术验收。单细胞中心长期致力于微生物单细胞技术和装备的研制和产业化，前期已经陆续研制成功并产业化临床单细胞拉曼药敏快检仪(CAST-R)、单细胞拉曼分选-测序耦合系统(RACS-Seq)、积木式单细胞微液滴快速显微分选系统(EasySort)等单细胞分析仪器系列产品。做为该仪器系列的最新成员，FlowRACS的研制成功和应用拓展，将为单细胞科学与产业提供一个全新的研究工具，并推动我国细胞科学高端仪器产业的自主创新。　　上述工作由单细胞中心马波研究员和徐健研究员主持完成，并得到了国家合成生物学重点研发计划、国家重大科学仪器研制项目、山东能源研究院、青岛星赛生物科技有限公司等的支持。　　附录：　　Xixian Wang?, Yi Xin?, Lihui Ren?, Zheng Sun, Pengfei Zhu, Yuetong Ji, Chunyu Li, Jian Xu*, and Bo Ma*, Positive dielectrophoresis based Raman-activated droplet sorting for culture-free and label-free screening of enzyme function in vivo, Sci. Adv, 2020, DOI: 10.1126/sciadv.abb3521　　Yuehui He?, Xixian Wang?, Bo Ma*, Jian Xu*, Ramanome Technology Platform for Label-free Screening and Sorting of Microbial Cell Factories at Single-cell Resolution. Biotechnol. Adv, 2019, DOI: 10.1016/j.biotechadv.2019.04.010(青岛生物能源与过程研究所)

项目编号：0705-224002028030项目名称：复旦大学光谱流式细胞分选仪采购国际招标预算金额：744.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：744.0000000 万元（人民币）采购需求：1、招标条件项目概况：光谱流式细胞分选仪采购资金到位或资金来源落实情况：本次招标所需的资金来源已经落实项目已具备招标条件的说明：已具备招标条件2、招标内容：招标项目编号：0705-224002028030招标项目名称：光谱流式细胞分选仪采购项目实施地点：中国上海市招标产品列表(主要设备)：序号产品名称数量简要技术规格备注1光谱流式细胞分选仪1套散射光检测通道至少配置：1个前向角检测通道，带488nm带通滤光片的高性能半导体检测器；2个侧向角检测通道，带405nm和488nm带通滤光片的两个高性能半导体检测器预算金额：人民币744万元 合同履行期限：4个月合同履行期限：4个月本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：0705-224002028030项目名称：复旦大学光谱流式细胞分选仪采购国际招标预算金额：744.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：744.0000000 万元（人民币）采购需求：1、招标条件项目概况：光谱流式细胞分选仪采购资金到位或资金来源落实情况：本次招标所需的资金来源已经落实项目已具备招标条件的说明：已具备招标条件2、招标内容：招标项目编号：0705-224002028030招标项目名称：光谱流式细胞分选仪采购项目实施地点：中国上海市招标产品列表(主要设备)：序号产品名称数量简要技术规格备注1光谱流式细胞分选仪1套散射光检测通道至少配置：1个前向角检测通道，带488nm带通滤光片的高性能半导体检测器；2个侧向角检测通道，带405nm和488nm带通滤光片的两个高性能半导体检测器预算金额：人民币744万元 合同履行期限：4个月合同履行期限：4个月本项目( 不接受 )联合体投标。