最近碰到个小麻烦，制备金属样品的圆片打孔器，冲了片总是卡进凹模里。看了半天也不知道怎么能把金属片取出来。哪位有高招请指教。我们用的是Gatan的Disc Punch
有谁知道干血斑的打孔器是什么样的或是在哪里可以购到？请多指教！谢谢帮忙！有没有专卖的呀？
DSC如何选择坩埚？打孔、密封、材质的选择？什么类型的样品、测试目的？选择密封，密闭、微孔，如何选择？谢谢！
听说国际上有规定用于玩具的塑料包装袋尺寸规格到一定的范围，必须要打孔。防止小孩玩耍时套入头中不透气而窒息.那么用于非玩具的塑料包装袋是否也要遵守这一规定呢?如果有,具体规定是什么呢?
激光粒度仪的激光探头如何设计 以及打孔，怎样打孔才能使激光探头在测量的时候保持稳定，还有激光探头的厚度是多大才是最合适！那位高手知道？小弟在此请教了！
各位大侠们： DSC在检测时铝坩埚闭盖，开盖和盖子打孔对检测结果有什么样的影响呢？或者说如何分析这种影响。本人在检测产品时这三种方式得到的结果相差很大，可又不懂得如何解释，感谢各位大侠不吝赐教，谢谢！
，121．3℃灭菌15分钟。 （3）接入菌种将菌种用10％的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液，装入已灭菌的安瓿管；霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器，从平板内切取菌落圆块，放入含有保护剂的安瓿管内，然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。 （4）冻结再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速冻结至-30℃。若细胞急剧冷冻，则在细胞内会形成冰的结晶，因而降低存活率。 [/s
化学分析时，经常要用到自动加液器，既方便快捷，又操作简单。但久而久之，加液器的瓶塞会出现腐蚀现象，造成瓶塞的橡胶分解掉入瓶中，不仅给溶液带来污染，而且也会堵塞加液管的管路。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162132_397145_1622447_3.jpg 自动加液瓶http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162132_397149_1622447_3.jpg 腐蚀 后的加液瓶瓶塞为此瓶塞要经常更换，一般都用打孔器对橡胶塞进行打孔，但打孔器用起来比较费力，于是我们采用电钻来进行打孔。钻头根据加液管尾部的玻璃管直径大小来选取，我们用的是10ml的加液管，和8mm的钻头相匹配，所以选用直径8mm的钻头。将其瓶塞的小头朝上来钻孔，可以减少孔的偏移，如果你选择瓶塞的大头对准钻头来钻的话，可能会造成瓶塞底面孔的偏移。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162150_397171_1622447_3.jpg电钻送电前应用手钳夹住瓶塞，钻削时，下钻不能过快和过猛，以免使瓶塞松脱与电钻一起旋转。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162155_397173_1622447_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162156_397174_1622447_3.jpg瓶塞孔钻通后，将其大小头调换，我们可以看到大头的孔不是很完整，于是在用手钳夹住重新用电钻扩下孔，是其表面光滑。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162201_397176_1622447_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162201_397177_1622447_3.jpg瓶塞孔钻好后，就可以安装了，安装时玻璃管洒些水润滑，很方便http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162206_397178_1622447_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162206_397179_1622447_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162206_397180_1622447_3.jpg瓶塞很快就换好了，装瓶试试，很好，取液时没有液体渗漏的现象，密封效果很好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162210_397181_1622447_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210162210_397182_1622447_3.jpg本法换取瓶塞方便快捷，5分钟即可完成注意要点就是选取钻头一定要合适，钻头大了分液器的玻璃管好装，但易出现漏气现象，取液时溶液易外渗，钻头小了玻璃管装入困难，易伤手。有兴趣的版友可以试试看吧http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09503.gif
，121．3℃灭菌15分钟。 （3）接入菌种将菌种用10％的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液，装入已灭菌的安瓿管；霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器，从平板内切取菌落圆块，放入含有保护剂的安瓿管内，然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。 （4）冻结再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速冻结至-30℃。若细胞急剧冷冻，则在细胞内会形成冰的结晶，因而降低存活率。 （5）保藏经冻结至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器（图Ⅶ-14）的小圆筒内，然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃[/fon
火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为：在电场作用下，抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动，二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线，而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系，因此本法可以测定样品中抗原的含量。一、材料1. 诊断血清（抗体）：抗人IgG或IgA免疫血清。2. 待检血清（抗原）：人血清。3. 参考血清。4. pH8.6，离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配制（见对流免疫电泳实验）。5. 其它：琼脂粉，微量进样器，打孔器，玻璃板，电泳仪。二、方法1. 抗体琼脂板的制备同单向扩散法，但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05 M 的巴比妥缓冲液。2. 打孔见下图。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084635_small.jpg3. 将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原（人血清）分别加入各孔中，每孔10或20 μl，要求加量准确而不外溢。4. 把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳，电压4~6 V/cm，电泳时间1~5 h，直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线，关闭电源。5. 取下琼脂板，以抗原孔中心为起点，量出各火箭状沉淀线的高度。同单向琼脂扩散法绘制标准曲线，查出待检血清中Ig含量。
请问－－那个厂家有琼脂打空器
微流控芯片实验室主要是由下列各项所组成：1. 实验室主体结构装修：包括墙体隔断工程、吊顶工程、地面工程等，安全、环保、灵活性强、重组利用率高；2. 通风-净化系统：包括送风系统和排风系统，满足各级洁净室通风净化需求，提供安全、舒适、绿色环保的工作环境；3. 供气系统：包括氧气、氮气、氢气、二氧化碳等，满足实验室各种用气需求的同时保证了安全性和操作管理便捷性；4. 照明-动力系统：提供暗室、黄光灯、紫外灯、日光灯等照明系统设计安装和两相、三相电气系统布线安调等；5. 安全-配套系统：包括紧急冲淋装置、洗眼器、安全防爆柜、原子吸收罩、万向抽气罩等，为实验室安全防护提供多重保障；6. 实验室家具：包括实验台、通风柜、超净工作台、试剂柜、生物安全柜、更衣柜、鞋柜等各种实验室家具。http://www.whchip.com/upload/201611/1480057478108853.jpg微流控芯片实验室配套仪器设备苏州汶颢根据客户具体应用领域，为不同实验室配置相关仪器设备。表1：各加工实验室常用仪器设备列表光刻实验室软注塑实验室机加工实验室封合实验室检测实验室光刻机真空脱泡机数控机床真空热压机光学显微镜匀胶机恒温鼓风干燥箱激光切割机等离子清洗机台阶仪烘胶台批量注塑机超声波打孔机真空气氛电炉膜厚仪摇床台式打孔器精密高速钻床超净工作台接触角测量仪通风橱台式切割机 精密抛光机注射泵、恒压泵 表2：生物、化学和材料三大应用实验室常用仪器设备列表生物实验室化学实验室材料实验室倒置荧光显微镜紫外分光光度计精密抛光机高速离心机原子吸收分光光度计超声波测厚仪生化培养箱超声波清洗机千分尺超低温冰箱微量移液器耐压测试仪生物安全柜分析天平体视显微镜基因扩增（PCR）仪旋转蒸发仪卧式显微镜凝胶电泳仪水浴锅工业CCD
琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时，便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时，便依各自扩散速度的差异，在适当部位形成独立的沉淀线，因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳实验。一、单向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清（抗体：抗人IgG或IgA免疫血清）（2）待检血清（抗原）：人血清http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084631_small.jpg （3）参考血清：全国统一人血清免疫球蛋白参考血清（批号不同，免疫球蛋白含量不同）。（4）其它：生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。2. 方法（1）将适当稀释（事先滴定）的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。（2）在免疫琼脂板上按一定距离（1.2~1.5 cm）打孔，见图1。（3）向孔内滴加1：2，1：4，1：8，1：16，1：32稀释的参考血清及1：10稀释的待检血清，每孔10 μl，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。（4）已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。（5）测定各孔形成的沉淀环直径（mm），用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。二、双向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清：兔抗人血清（2）待测血清：人血清（3）阴性对照血清（4）其它：生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。2. 方法（1）取一清洁载玻片，倾注3.5~4.0 ml 加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。（2）凝固后，用直径3 mm 打孔器，孔间距为5 mm。孔的排列方式如图2所示。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084537_small.jpg（3）用微量进样器于中央孔加抗体，于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡，以免影响扩散结果。（4）加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24~48小时。（5）结果观察：若凝胶中抗原抗体是特异性的，则形成抗原—抗体复合物，在两孔之间出现一清晰致密白色的沉淀线，为阳性反应。若在72小时仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与被检样品的沉淀线发生融合，才能确定待检样品为真正阳性。（6）结果分析：琼脂扩散结果受许多因素影响。①抗原特异性与沉淀线形状的关系：在相邻两完全相同的抗原与抗体反应时，则可出现两单沉淀线的融合。反之，如相邻抗原完全不同时，则出现沉淀线之交叉；两种抗原部分相同时，则出现沉淀线的部分融合。见图3。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084538_small.jpg②抗原浓度与沉淀先导形状的关系：两相邻抗原浓度相同，形成对称相融合的沉淀线；如果两抗原浓度不同，则沉淀线不对称，移向低浓度的一边。见图4。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084539_small.jpg③温度对沉淀线的影响：在一定范围内，温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时，为了减少沉淀线变形并保持其清晰度，可在37℃下形成沉淀线，然后置于室温或冰箱（4℃）中为佳。④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响：一般来说，琼脂浓度越大，沉淀线出现越慢。⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响：抗原、抗体相距越远，沉淀线形成的越慢，所以在微量玻片法时，孔间距离以0.25~0.5 cm 为好，距离远影响反应速度。当然孔距过远，沉淀线的密度过大，容易发生融合，有碍对沉淀线数目的确定。⑥时间对沉淀线的影响：沉淀线形成一般在1~3天出现，14~21天出现的数目最多。玻片法可在1~2小时出现，一般观察72小时，放量过久可出现沉淀线重合消失。
琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时，便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时，便依各自扩散速度的差异，在适当部位形成独立的沉淀线，因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳实验。一、单向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清（抗体：抗人IgG或IgA免疫血清）（2）待检血清（抗原）：人血清http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084631_small.jpg （3）参考血清：全国统一人血清免疫球蛋白参考血清（批号不同，免疫球蛋白含量不同）。（4）其它：生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。2. 方法（1）将适当稀释（事先滴定）的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。（2）在免疫琼脂板上按一定距离（1.2~1.5 cm）打孔，见图1。（3）向孔内滴加1：2，1：4，1：8，1：16，1：32稀释的参考血清及1：10稀释的待检血清，每孔10 μl，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。（4）已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。（5）测定各孔形成的沉淀环直径（mm），用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。二、双向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清：兔抗人血清（2）待测血清：人血清（3）阴性对照血清（4）其它：生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。2. 方法（1）取一清洁载玻片，倾注3.5~4.0 ml 加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。（2）凝固后，用直径3 mm 打孔器，孔间距为5 mm。孔的排列方式如图2所示。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084537_small.jpg（3）用微量进样器于中央孔加抗体，于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡，以免影响扩散结果。（4）加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24~48小时。（5）结果观察：若凝胶中抗原抗体是特异性的，则形成抗原—抗体复合物，在两孔之间出现一清晰致密白色的沉淀线，为阳性反应。若在72小时仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与被检样品的沉淀线发生融合，才能确定待检样品为真正阳性。（6）结果分析：琼脂扩散结果受许多因素影响。①抗原特异性与沉淀线形状的关系：在相邻两完全相同的抗原与抗体反应时，则可出现两单沉淀线的融合。反之，如相邻抗原完全不同时，则出现沉淀线之交叉；两种抗原部分相同时，则出现沉淀线的部分融合。见图3。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084538_small.jpg②抗原浓度与沉淀先导形状的关系：两相邻抗原浓度相同，形成对称相融合的沉淀线；如果两抗原浓度不同，则沉淀线不对称，移向低浓度的一边。见图4。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084539_small.jpg③温度对沉淀线的影响：在一定范围内，温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时，为了减少沉淀线变形并保持其清晰度，可在37℃下形成沉淀线，然后置于室温或冰箱（4℃）中为佳。④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响：一般来说，琼脂浓度越大，沉淀线出现越慢。⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响：抗原、抗体相距越远，沉淀线形成的越慢，所以在微量玻片法时，孔间距离以0.25~0.5 cm 为好，距离远影响反应速度。当然孔距过远，沉淀线的密度过大，容易发生融合，有碍对沉淀线数目的确定。⑥时间对沉淀线的影响：沉淀线形成一般在1~3天出现，14~21天出现的数目最多。玻片法可在1~2小时出现，一般观察72小时，放量过久可出现沉淀线重合消失。
[align=center]实验室小窍门[/align][align=center]鹤壁市农产品检测中心 张斌[/align] 我们在实验室工作时，经常会有废液废气的排出，虽然现在实验室建设都比较到位，但我们还是会碰到一些小问题导致废液废气不能及时收集或排放掉，造成室内污染。比如在我们的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上，废气排放用一根废气管通到万向罩内用胶带固定。但是有时移动进样塔时碰到废气管或时间一长，管子就会经常脱落。有没有什么即简单又容易的方法把管子固定在万向罩内不掉呢？ 经过与室主任zyl研究，我们利用废弃气路铜管在距废气管出口10厘米处钻两个孔，将细金属线穿过管子，然后绕过万向罩上第一节弯头内的金属杆，根据废气管的长度在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上留够余量，再把万向罩内穿过废气管的金属线固定系好，这样废气管就不会掉下来了。[align=center][img=,360,356]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010906138874_7284_3403502_3.png!w360x356.jpg[/img][/align] 还有就是废液的收集。我们实验室把废弃的试剂瓶废物利用做成废液瓶，实际应用效果很好。首先根据废液管的直径，选择合适的打孔器，把试剂瓶盖翻过来，放置在一片木板上，把打孔器照瓶盖中间位置冲出一个孔，再把瓶盖拧在废液瓶上，将废液管插入瓶内，一个废液瓶就做好了。[align=center][img=,356,356]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010907107070_2731_3403502_3.png!w356x356.jpg[/img][/align] 废液废气对人体损害比较大，如果处理不好，废液废气排放在室内污染环境，损害人体健康。通过上述两项改造，废液排放在瓶中，废气通过万向罩抽走，实际应用效果很好，特奉上与各位同仁分享，不足之处欢迎大家一起交流。
免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离，然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散，在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物，故可用抗原成分分析；且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。一、材料1. 待检标本（抗原）：正常人血清。2. 抗体：正常人血清的家兔免疫血清。3. 1.5%离子琼脂（系用巴比妥缓冲液配制的）。4. 电泳仪。5. pH8.6、离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配方：巴比妥1.84 g，巴比妥钠10.3 g，加蒸馏水1000 ml，调pH至8.6。6. 其它：载物玻片，直径3毫米打孔器，20 mm×2 mm 玻璃铸型，微量进样器。二、方法1. 取载物玻片（7.5×2.5 cm）加上3.5 ml 1.5%琼脂凝胶，制成2毫米厚的琼脂板。2. 按图位置，在琼脂板未凝固时，放入抗血清槽铸型，注意勿使铸型全部浸入琼脂中，待凝固时再打孔。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084544_small.jpg3. 加待检标本：用微量进样器往孔中加1~5 μl。4. 电泳：电压9~7 V/cm，泳动15~20小时。5. 电泳后取出抗血清槽铸型，加入抗血清，进行双扩散，一般在24小时内沉淀弧出全。6. 观察结果：或描绘、拍照或进行染色，染色后的标本便于结果分析及保存。
前言仪器使用久了，难免会出故障，有些元部件也会因为老化或其他原因而寿终正寝，本文以Varian735 ES ICP-OES在实际使用中遇到的故障和维护为例，说说如何花小钱办大事。案例1：应急开关这还得从一次仪器的点火说起，由于点火出现异常，不得不按下应急保护开关，仪器是熄火了，矩管也没烧掉，但是再次点火点不着了，应急开关不回弹了。难道是坏了，拆开仪器前盖，很容易就看到了应急开关，（就是我们通常说的按钮开关中的一种----带灯按钮：按钮内装有信号灯，除用于发布操作命令外，兼作信号指示，多用于控制柜、控制台的面板上。）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411232204_524143_1657564_3.jpg把这里短接了仪器可以点火，说明是开关失灵了。打电话给安捷伦工程师，报价回来是800块，没签维修合同的话，还要加上1000快的维修服务费。没办法，为了省钱，只好去开关市场淘一个规格型号一样的，以防万一买回来2个，合计30元，装上去试试效果，千万别搞错了，不然会短路烧掉的。将旧的用电烙铁焊掉，新的焊上，点火正常了。这不，用了都快2年了，一点问题都没有。看看原厂开关http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411221405_524022_1657564_3.jpg更换后的开关http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411221406_524023_1657564_3.jpg案例2：蠕动泵垫圈蠕动泵用久了，里面的垫圈会老化，时间久了就碎了，这样进样就不均匀了，要是没发现，甚至可能烧毁蠕动泵电机。看看是不是有点像老鼠咬得http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411232216_524146_1657564_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411232219_524147_1657564_3.png这个报价就更离谱了，坏了一个垫圈要整套蠕动泵换掉，报价要4万5，不单独提供垫圈配件。其实这个，自己DIY一个没有太多的问题，买来材质差不多的塑料，按照规格大小用打孔器或者电钻打孔就是了，打孔的时候不能太大，不然就卡不住，也就带不动蠕动泵了。这里给大家展示一个我们自己做的垫圈吧。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411221404_524021_1657564_3.jpg也许很多人担心不是原厂的部件，怕出问题，其实大可不必。毕竟不是仪器的核心部件，如果是CCD、主板、RF发生器等比较重要的部件，可以直接找仪器配件供应商，这样也比直接找仪器维修的价格少一大截。小结；仪器现在正常运转快2年了，2个小配件花费不到几十块，解决了问题，何乐然不为呢？本文旨在抛砖引玉，希望给大家起到一个启示作用。
样品处理称取生鲜牛初乳大约10.0g（牛初乳粉称取大约1.0g），用少量0.01mol/L PH 6.8磷酸盐缓冲溶液溶解后，移至100ml容量瓶定容，然后将稀释后的样品溶液于5000-10000rpm 离心 5-10min，脱除脂肪、酪蛋白，取上清液用0.01mol/L PH6.8 （渗透压PH值）磷酸盐缓冲溶液进行一定倍数的稀释（参考范围2-30倍），配制成IgG含量大约为200μg/mL的溶液，再进行测定。琼脂平板的制备将琼脂培养基加热熔化，冷却至52-55℃,在保温状态下加入抗血清（抗血清效价为1：32）,每15ml琼脂中加入0.15-0.2ml抗血清。轻轻摇动混匀（防止产生气泡），铺板，冷凝后用打孔器打孔，每两空间的间距控制在1.5-2.0cm左右，每孔与平皿壁相距1.0cm左右。每个平皿可以打13个孔，打完后用酒精灯微加热封底（使培养基与玻璃板牢固结合）后待用。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/01/201401022109_486451_2227357_3.jpg3 点样与培养准确称取1.0mg 标准IgG，加入0.01mol/LPH 6.8磷酸缓冲溶液1.0ml，充分溶解、摇匀后配成浓度为1.0mg/mlIgG标准液，然后再用磷酸缓冲溶液梯度稀释，分别配成100、50、25、12.5、6.25mg/100ml浓度的系列标准液（各0.5ml），用于标准曲线的绘制。取不同浓度的（100、50、25、12.5、6.25mg/100ml）IgG标准溶液10.0μL和不同稀释倍数的样品稀释液各10.0μL分别加入平皿中的各孔内，同样做三个平行式样，置于湿盒中37℃扩散24小时后，用游标卡尺准确测量沉淀环的直径。样品沉淀环以较大稀释倍数且直径落在标准曲线内为准。(周围孔中加稀释后的初乳)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/01/201401022111_486452_2227357_3.jpg4 .结果以标准样品IgG浓度（mg/100mg）的lg对数为纵坐标（对数坐标），对扩散环直径d2（mm,横坐标）作图，绘制半对数标准曲线（拟合成直线）。根据样品沉淀环直径，从标准曲线上读取样品浓度值C（mg/100mL），再用下式计算：样品IgG的百分含量（%）=×0.1版友们都是怎么做的呢？ 结果如何呢？ 可以讨论讨论
原理由土壤中分出的放线菌需进一步鉴别是否为需要的抗生菌。首先应根据筛选目的确定试验模型，然后利用培养基平板进行拮抗性测定。常用的方法有琼脂块法和滤纸片法。其主要依据是扩散原理，即观察在抗生菌周围是否会出现明显的抑菌圈。抑菌圈的大小和透明度则表明了该菌株抗菌活性的强弱。本实验选用了这两种方法。仪器与材料1、培养基：500ml三角瓶中分装300ml黄豆饼粉琼脂，18×180mm试管分装4ml黄豆饼粉浸汁，300ml三角瓶分装150ml细菌培养基，150ml三角瓶分装50ml马铃薯培养基。2、试验菌：（1）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）（2）大肠杆菌（Escherichia coli）（3）金黄色葡萄球菌（Staphlococcus aureus）（4）深红酵母（Ruodotorula rubra）3、待测菌株：（1）琼脂培养物：将融化的黄豆饼粉琼脂倒入无菌培养皿，制成平板。用记号笔在平皿背面画一直线，将平皿一分为二，分别注明待测菌株的编号。并按照编号将待测菌株密集划线接入平板。同法接入华美链霉菌（Streptomyces splendens）和金霉素链霉菌（Streptomyces aureofaciens）作为对照菌，28℃下培养7天。（2）发酵液：将待测菌株和对照菌分别接入黄豆饼粉培养液，作好标记，28℃下振荡培养7天。4、灭菌物品：培养皿，打孔器，镊子，圆滤纸片，15×150mm试管分装5ml无菌水，1ml吸管，无菌漏斗。5、其它：接种用具，游标卡尺，记号笔，摇床。方法一、琼脂块法1、分别取枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌各1支，加入5ml无菌水制成菌悬液，备用。2、取9套无菌培养皿，向每套培养皿中分别加入1ml试验菌悬液，然后加入约12ml冷却至45℃左右的细菌培养基，迅速在实验台上摇匀，制成指示菌平板。每1种指示菌3个重复， 并注明指示菌及测定菌株的位置。3、用无菌打孔器将待测菌株和对照菌的黄豆饼粉琼脂培养物切块，每种培养物9块。4、用无菌接种针，将待测菌株和对照菌琼脂块分别移入各指示菌平板的相应位置上，菌面朝上，间隔均匀摆放。5、静置20min后，放入恒温箱，37℃下培养18～24h。6、用游标卡尺测量抑菌圈直径，并观察抑菌圈的透明程度和边缘整齐程度。二、滤纸片法1、向深红酵母菌斜面中加入5ml无菌水，制成菌悬液。2、向已冷却至45℃左右的马铃薯培养基中加入0.5ml深红酵母菌悬液，摇匀后，倒3个指示菌平板，并在平皿背面标明测定菌株的位置，备用。3、过滤各测定菌株的发酵液。4、用无菌镊子取无菌的圆滤纸片，蘸取各测定菌株的发酵滤液，放入指示菌平板的相应位置上，每1测定菌株3个重复。5、静置20min后，28℃下培养2天。6、用游标卡尺测量抑菌圈直径，并观察抑菌圈的透明程度和边缘整齐程度。结果将实验所得结果填入下表，抑菌圈直径以mm来表示
如何制备完美的TEM薄膜样品随着科技的发展，透射电子显微镜在科学研究中的使用越来越频繁。尤其是在材料领域和生物领域，几乎所有的高水平文章都离不开透射电子显微镜的使用，特别是球差校正的透射电子显微镜的研制成功，更是成为了材料、生物等领域中Science和Nature及其子刊必备利器。其70pm的分辨率可以清楚的可看清原子分布情况，将很多原来不清楚、无法解释的地方看的非常明白。图2中原子级别EELS谱可以清楚的看清SrTiO3元素分布情况。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070930_553876_2689957_3.png图1. FEI公司Titan第三代G2球差校正电镜 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070931_553877_2689957_3.png图2. 原子级分辨率的 EELS 波谱那么现在有如此先进的透射电镜的情况下，如何制备优秀的，甚至是完美的TEM样品则是重中之重。要想得到好的TEM结果，首先要制备出好的薄膜试样，TEM试样制备在电子显微学研究中起着非常重要的作用。科研过程中一半以上的时间是用于制备样品的。制备好的薄膜试样，实验就成功了一半。本文以最常见的金属样品为例，给大家讲解下如何制备TEM样品。透射电镜样品的制备是一项较复杂的技术，因此在制备样品过程中，一定要细心认真，切不可毛躁。1. 先从大块金属样品上取片状块体样品。参考尺寸10*10*1mm，可以采用线切割或者慢速锯取样http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070931_553878_2689957_3.jpg图3. 慢速锯照片 2. 机械减薄。也就是我们常说的磨样品，采用砂纸将样品磨到100μm以下即可。这一步对于制备样品来说是非常重要的一步，磨“好”样品的标准是“样品平整无划痕”。要磨好样品，本人有一些小技巧，在这里与大家分享一下。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070932_553879_2689957_3.jpg图4.样品托 将样品用石蜡黏在图4左侧样品托上，并将图4右侧的样品托套环套在外侧，这样可以保证磨样品时是平整的。此外，如对平整度要求更高，则可以在样品托芯上黏上玻璃片，再在玻璃片上黏上样品。研磨的砂纸采用800#—1000#—2000#的顺序磨，并且在磨之前要先将砂纸用水冲洗，保证砂纸表面没有凸起的脏颗粒，防止划痕的出现。磨的时候要按照“8”字型磨，或者垂直划痕方向磨。只要保证以上几点，就可以保证磨出的样品平整且无划痕。3. 采用打孔器将样品冲成直径为3mm的小圆片。并将冲下来的小圆片采用丙酮及酒精进行清洗，确保样品表面干净。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070932_553880_2689957_3.jpg图5.样品打孔器 4. 采用电解双喷仪将样品进行终减薄，并采用离子减薄仪将样品表面脏东西及氧化层清洗。这一步也是制备样品时非常重要的一步。双喷时要选用正确的双喷液，并且选用合适的电压及电流，不同样品有不同的参数，如果参数不合适，则薄区范围非常小，有的甚至是没有薄区。 对于一些轻金属，如Al、Mg及其合金，双喷完的样品很容易表面会有氧化层，对于样品的高分辨图像拍摄时非常不利的。故须采用离子减薄仪将样品表面进行扫描，选用较小的角度（5-6°）较短的时间（30min左右）即可。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070932_553881_2689957_3.jpg图6. 电解双喷仪、离子减薄仪及其工作示意图 5. 参照上述方法制备样品即可得到非常好的TEM样品，一张合格的高分辨照片，下面几幅图就是我在平时拍下的Mg和Al的高分辨照片，所使用的电镜为JEOL 2010F场发射透射电子显微镜。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507070932_553882_2689957_3.jpg
GCMS打空针有值，每次都是那个物质峰，数值都接近，是怎么回事？
[url=http://www.f-lab.cn/cell-analyzers/punch-needle.html]细胞钻孔针[/url],punch needle是为细胞转移和细胞分离应用而设计的细胞打孔针,用于细胞打孔和细胞钻孔应用。细胞钻孔针作为细胞转移分离系统的重要配件，方便用户把细胞从微孔芯片转移到各种微管中。细胞钻孔针经过精密设计,它可以精密在微孔板上钻孔而不接触到细胞，经过酒精消毒后可重复使用。[img=细胞钻孔针]http://www.f-lab.cn/Upload/punch-needle.JPG[/img]细胞钻孔针：[url]http://www.f-lab.cn/cell-analyzers/punch-needle.html[/url]
搞气相色谱，绝大多数人都会用到FID，那么N2、Air、H2三种气体肯定要用到，而且更多的是用气瓶，所以减压表肯定需要。前面2种，用一般的氧气表就行，因为表头和气瓶嘴都是铜的，一公一母，只要没碰伤，用大扳手拧紧一般都不会漏气。H2则不同，首先减压表就必须用H2减压表，它的丝口方向与氧气表、氮气表相反，你想用其它减压表来代替也不行。另外，它的密封处在气瓶嘴横切面，靠一塑料垫圈起作用，而与前面说的铜与铜压紧不同，这应该与H2易燃易爆有关吧。 化验室原来有瓦里安450GC(配FID、ECD、PFPD)和安捷伦7890A（只配5975C一种检测器）各一台，只需四个气瓶即可。今年初又添了一台DPS600型气相，配FID和PID，属于缩小版的台式GC，既可放在实验室，也可弄上监测车。由于放的房间不同，又得重新买气瓶和布气路。主任买了几个减压表，其中2个H2表都是上海减压器厂生产的，和瓦里安450GC用的表厂家和型号相同，但不是一批货，包装有些不同。安装的时候问题来了，套上塑料垫圈拧紧螺帽后，摇晃左边压力表，表头处竟然是松的，2个表都是如此，我还为此打电话去厂家咨询，人家就说是按国标生产的，可能是气瓶嘴短了，也就不了了之。后来又找来顶空瓶垫，用打孔器打出一个橡胶环加上去，漏气的情况稍好点，但无法杜绝，因为工作忙，那台新仪器也就暂时放着。最近领导要求尽快投用，又强调安全，老是盯着我的H2瓶问这问那，我都烦透了。 以前那表为啥能拧紧不漏呢？是不是我们买到假冒产品了？上天猫，找到上减的官方店，先买一支试试吧。
刚接触DSC不久，虽然DSC上样没什么技术含量，但想到刚开始上样的各种纠结到现在终于可以轻松上好各种样品了，这个文就算是抛砖引玉好了，大家都来说说自己的上样工具！首先是复合材料样，例如布基树脂，纸基涂层等，这种样品的特点是基材上的涂料撕裂时容易掉落，粉碎时样品不均匀，因此上样工具就是一个多用皮带打孔器，如图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308142211_457745_2614953_3.jpg这个工具的另一个好处就是还可以间接测试定量，因为基材大小一样时，复合材料层如果不均匀，称量时质量会差较多，在测试前就可以判定取样是否均匀了。如果是粉末状固体或者密度很低的泡沫状固体，就采用一次性吸管，吸管大头处剪一个漏斗状，吸管嘴剪样品盘大小，对准样品盘用手碾碎了样品，在轻轻弹到样品盘里：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308142221_457747_2614953_3.jpg一些很硬的固体，工具更简单了，一个锤子，保鲜膜包着，使劲砸，挑合适的碎片用镊子夹到样品盘里：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308142225_457749_2614953_3.jpg如果是不同粘度的液体样，粘度低的，接近水的，直接用一次性吸管移进去，粘度稍大的，一次性吸管一滴就过量了，采用针筒吸了，针头上推出半滴，轻轻靠到样品盘中央，粘度太大实在针筒吸不上来的，直接用针头挑一小滴即可：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308142220_457746_2614953_3.jpg液体样品粘度大且容易拉丝会沾到样品盘边缘的，我一般是在样品盘里套一小段合适的一次性吸管，然后通过小铁丝把样品移到样品盘中央去。
小修卡玛全自动点样仪http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604182358_590682_2487595_3.jpg 点样过程中发现薄层板上未见样品点，检测发现点样针弯曲了，拆下来后发现点样针已经折断。对大家来说小意思了，换个新的点样针就OK了，我也是抱着这样的打算操作的，结果把配件翻了个遍，没有蓝色的点样针，只有红色的，不知能否通用。咨询工程师，可以用但如果点带状的话最好用使用蓝色的，红色的是接触式点样的。既然可以就换上试试。见下图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604190005_590683_2487595_3.jpg问题又来了：换完针后执行清洗syringe，发现清洗液流动不畅，不能充满针筒和管路，吸进针筒里的一部分液体还会下降。考虑：针头堵了或漏气，拆下来手动吸样OK，说明点样针未赌。接下来考虑是不是压力不够，之前出现过类似的问题，咨询工程师压力调节自己不能操作。不甘心啊，继续尝试，找原因未必是压力调节器的问题，可能是哪个地方漏气造成的。考虑到注射器，用新的试试。测试ok。原因：旧的注射器的柱塞杆太松，吸样过程中压力泄露，导致吸液不正常。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif接下来就用呗！因为红的针头是接触式点样，配置改为contact模式，软件设置也选择contact，测试可以使用。换了不同的针spray功能是否受影响（之前没比较过两者的差异）？大胆尝试一次，改为spray模式测试，竟然没问题，那就用呗。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif问题又来了，点样过程中发现打孔器是弯曲的，点样针下移不顺畅。终于找到真凶了！！！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604190033_590685_2487595_3.jpg果断换打孔针，翻箱倒柜找工具，哈哈哈。最终解决问题，http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604190034_590686_2487595_3.jpg菜鸟一枚，请各位赐教！！！
液体池要用到的，两个KBr窗片必须组合使用吗？目的是让液体样品均匀涂抹吗？有定量的液体池和不定量的，两者使用窗片都一样？用完后用无水酒精清洗吗？还是丙酮？期待各位高手的解答，谢谢
对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果，故可用于快速诊断，敏感性比双向扩散技术高10-15倍。血清蛋白在pH8.6条件下带负电荷，所以在电场作用下都向E极移动。但由于抗体分子在这样的PH条件下只带微弱的负电荷，而且它的分子量又较大（为r球蛋白）。所以游动慢。更重要的是抗体分子受电渗作用影响较大，也就是说点渗作用大于它本身的迁移率。所谓电渗作用是指在电场中溶液对于一个固定固体的相对移动。琼脂是一种酸性物质，在碱性缓冲液中进行电泳，它带有负电荷，而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷，这样的液体便向负极移动。抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的。而一般的蛋白质（如血清抗原）也受电渗作用的影响，使泳动速度减慢，但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原体就达到了定向对流，在两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线。一、材料1. 诊断血清：免抗人免疫血清2. 待检血清：人血清3. 阴性对照血清4. pH8.6、离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配方：巴比妥1.84 g，巴比妥钠10.3 g，加蒸馏水1000 ml，调pH至8.6。5. 缓冲琼脂板：将纯化的琼脂用pH8.6离子强度0.025的巴比妥缓冲液（用0.05 M 的巴比妥缓冲液稀释一倍即可）配成1.5%的琼脂，加入0.01~0.02%流柳汞防腐，保存冰箱内备用。6. 电泳仪7. 其他：生理盐水、打孔器、微量进样器二、方法1. 琼脂板的制备根据需要可选用大玻板（6 cm×9 cm）和（小玻片）两种。大玻板约需琼脂10 ml，小玻片约需3.5 ml，凝固后按图打孔，方法同琼脂扩散实验。2. 加样：左侧孔内加患者血清（原血清及10倍稀释血清各占一孔），右侧内加抗血清，每片应有阳性对照。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084632_small.jpg3. 电泳用国产普通电泳仪。其内加0.05 m pH8.6的巴比妥缓冲液，加至电泳槽高度的三分之二处，注意两槽内液面尽量水平。将加好样品的玻板置于电泳槽上，抗原端接负极，抗体端接正极，用2~4层滤纸浸湿作盐桥，滤纸与琼脂板联接处为0.5 cm。以板宽度计算电流，以板的长度计算电压。要求电流量为2~3 mA/cm，即大板为20 mA，小板为10 mA。电压为4~6 V/cm。通电45分钟—2小时后观察结果。4. 结果观察在黑色背景上方，用散射光多个角度观察，在对孔之间有白色沉淀线即为阳性对照应出现明显的白色沉淀线。如果抗原，两极微沉淀条纹不清晰，于37℃保温数小时可增强沉淀条纹的清晰度。5. 影响结果的因素（1）抗原抗体的比例：抗原抗体比例适应时容易出现沉淀带，反之不易发生。当抗体浓度恒定时，被检血清含甲胎蛋白浓度高时，作10倍、20倍或更高倍数稀释可以提高阳性率。随稀释度的增加，抗原抗体的比例发生变化，沉淀线由靠近抗血清孔向逐步移向两孔中间，并可出现不典型的沉淀线如弧形、八字须形、斜线形，这些也是阳性，应予注意。（2）组电泳缓冲液其电泳结果以巴比妥钠—盐酸缓冲液灵敏度最高。巴比妥—巴比妥钠次之，Tris缓冲液更差。（3）电压与电流时电泳时间需要长些：电压电流增大时，电泳时间可更短。但电压过高则孔径变形，电流过大抗原抗体蛋白易变性，干扰实验结果。一般选择5 ml/cm，电泳时间改为1.5小时。
中心环形探测器一定要打孔吗？不打的话衍射噪声影响很大吗？
对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果，故可用于快速诊断，敏感性比双向扩散技术高10-15倍。血清蛋白在pH8.6条件下带负电荷，所以在电场作用下都向E极移动。但由于抗体分子在这样的PH条件下只带微弱的负电荷，而且它的分子量又较大（为r球蛋白）。所以游动慢。更重要的是抗体分子受电渗作用影响较大，也就是说点渗作用大于它本身的迁移率。所谓电渗作用是指在电场中溶液对于一个固定固体的相对移动。琼脂是一种酸性物质，在碱性缓冲液中进行电泳，它带有负电荷，而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷，这样的液体便向负极移动。抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的。而一般的蛋白质（如血清抗原）也受电渗作用的影响，使泳动速度减慢，但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原体就达到了定向对流，在两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线。一、材料1. 诊断血清：免抗人免疫血清2. 待检血清：人血清3. 阴性对照血清4. pH8.6、离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配方：巴比妥1.84 g，巴比妥钠10.3 g，加蒸馏水1000 ml，调pH至8.6。5. 缓冲琼脂板：将纯化的琼脂用pH8.6离子强度0.025的巴比妥缓冲液（用0.05 M 的巴比妥缓冲液稀释一倍即可）配成1.5%的琼脂，加入0.01~0.02%流柳汞防腐，保存冰箱内备用。6. 电泳仪7. 其他：生理盐水、打孔器、微量进样器二、方法1. 琼脂板的制备根据需要可选用大玻板（6 cm×9 cm）和（小玻片）两种。大玻板约需琼脂10 ml，小玻片约需3.5 ml，凝固后按图打孔，方法同琼脂扩散实验。2. 加样：左侧孔内加患者血清（原血清及10倍稀释血清各占一孔），右侧内加抗血清，每片应有阳性对照。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084632_small.jpg3. 电泳用国产普通电泳仪。其内加0.05 m pH8.6的巴比妥缓冲液，加至电泳槽高度的三分之二处，注意两槽内液面尽量水平。将加好样品的玻板置于电泳槽上，抗原端接负极，抗体端接正极，用2~4层滤纸浸湿作盐桥，滤纸与琼脂板联接处为0.5 cm。以板宽度计算电流，以板的长度计算电压。要求电流量为2~3 mA/cm，即大板为20 mA，小板为10 mA。电压为4~6 V/cm。通电45分钟—2小时后观察结果。4. 结果观察在黑色背景上方，用散射光多个角度观察，在对孔之间有白色沉淀线即为阳性对照应出现明显的白色沉淀线。如果抗原，两极微沉淀条纹不清晰，于37℃保温数小时可增强沉淀条纹的清晰度。5. 影响结果的因素（1）抗原抗体的比例：抗原抗体比例适应时容易出现沉淀带，反之不易发生。当抗体浓度恒定时，被检血清含甲胎蛋白浓度高时，作10倍、20倍或更高倍数稀释可以提高阳性率。随稀释度的增加，抗原抗体的比例发生变化，沉淀线由靠近抗血清孔向逐步移向两孔中间，并可出现不典型的沉淀线如弧形、八字须形、斜线形，这些也是阳性，应予注意。（2）组电泳缓冲液其电泳结果以巴比妥钠—盐酸缓冲液灵敏度最高。巴比妥—巴比妥钠次之，Tris缓冲液更差。（3）电压与电流时电泳时间需要长些：电压电流增大时，电泳时间可更短。但电压过高则孔径变形，电流过大抗原抗体蛋白易变性，干扰实验结果。一般选择5 ml/cm，电泳时间改为1.5小时。
饮用水中三氯甲烷检测，第一次做，按照标准要求，在做样中出现了这么个问题，空白值倒是没出现杂峰。岛津2014C的机子，配了一个国产的顶空装置，带着大概20ml左右的进样瓶，打封口那种瓶子，就是第一针进样后出峰面积为17万多，第二针再进样还是同一个进样瓶，出峰面积变为11万多，第三针出峰面积变为5万多，同一个样品进多次，打孔以后能差这么多么，然后又贮备个瓶子样品第一针和第一次进样差不多，然后后面的第二针，第三针依次减小，这正常么？进依次后就减小
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